GENETICA MOLECULAR

-1869- chimistul german F.Miescher izoleaz din nucleii unor celule de

pete(somon) o substan :nuclein.
-1889- R.Altmann a identificat n nucleii de drojdie de bere acizii nucleici
-1910- s-au identificat 2 acizi nucleici: ARN i ADN
- 1928- experiene efectuate de ctre E.Griffith(numite i transformare
genetic), pe cobai ,cu tulpini diferite de pneumococi au evideniat rolul
genetic al acizilor nucleici.
-1955/1956- echipe diferite din SUA i Germania au evideniat rolul
genetic al ARN n cazul ribovirusurilor( ex:VMT).
STRUCTURA PRIMAR I SECUNDAR A ADN
STRUCTURA PRIMAR: este o structur monocatenar rezultat prin
polimerizarea nucleotidelor.
- Structura monocatenar este caracteristic pentru ARN i ADN de la unele
virusuri.
STRUCTURA SECUNDAR: a ADN a fost stabilit n 1953 de Watson , Crick
i Wilkins.
- Corespunde tipului B de ADN ntlnit n eucromatin, avnd structura de dublu
helix, 2 tipuri de legturi: fosfodiesterice( glucido-fosforic) i de hidrogen(A=T;
T=A; G C; C G.
Pasul elicei este de 34 Angstromi; un pas al elicei are 10 perechi de nucleotide,
deci distana dintre 2 perechi de nucleotide alturate este de 3,4 Angstromi.
TIPURI DE ADN: TIPUL B -forma clasic, n regiunile active metabolic.
TIPUL A- n caz de concentraii saline mari i deshidratare parial; in
vivo, n regiunile dublu- catenare a ARN i n duplexurile ADN-ARN.
TIPUL Z are rsucire spre stnga i o form n zigzag a catenei;
prezint o singur scobitur;
Se ntlnete la formele alterate de ADN; in vitro, n concentraii mari de sruri.
FENOMENUL DE DENATURARE-RENATURARE A ADN
HIBRIZII MOLECULARI
DENATURAREA- nclzirea unei soluii de ADN la 95 C determin
ruperea legturilor de hidrogen i formarea de ADN monocatenar(ADN
denaturat).
RENATURAREA catenele de ADN se refac( forma de dublu-helix) dac
soluia se rcete treptat( ADN renaturat).
HIBRIDIZAREA se reface dublul helix folosind catene de ADN de origine diferit
sau catene de ADN i ARN.
Poate fi : lichid
de filtru.
TIPURI DE ARN
ARN VIRAL- CONSTITUIE MATERIALUL GENETIC AL
RIBOVIRUSURILOR; forma este de regul liniar, mai rar circular(v.
encefalomielitei oarecilor).
ARN NUCLEAR MIC- observat n nucleii celulelor animale; are rol n
funcionarea nucleului: iniierea sintezei proteice i maturarea ARN-m.
ARN MESAGER- copie informaia genetic de pe o caten de ADN( catena 3-5)i apoi
o transport la nivelul ribozomilor pentru a fi decodificat.
ARN DE TRANSPORT- are rolul de a transporta aminoacizii la locul de sintez
a proteinelor( ribozomii) n procesul de translaie a informaiei genetice.
-are 75-90 de nucleotide i forma unei frunze de trifoi: bra acceptor de
aminoacid, bucla anticodon(recunoaterea ARNm), 2 bucle laterale D i T.
ARN RIBOZOMAL- este localizat n ribozomi,asociat cu proteinele, reprezentnd
85% din cantitatea de ARN celular; intervine n decodificarea informaiei genetice.
-Pentru aceasta ribozomul este dotat cu 3 locusuri:
- Locusul A- se ataeaz aminoacidul
-Locusul P- se formeaz o legtur dipeptidic ntre 2 aminoacizi.
Locusul exit- unde se desprinde catena polipeptidic de pe ribozom.
Funcia autocatalitic a ADN
-Procesul de replicare a materialului genetic:
-1. modelul semiconservativ(Watson i Crick)
-2. modelul replicrii discontinue -replicare cu ajutorul catenelor leading i
lagging(fragmente Okazaki)
Functia heterocatalitic a ADN
-Procesul de sintez a proteinelor are loc n dou etape:
a. Transcripia: copierea unei secvene de nucleotide din ADN de ctre ARNm
b. Translaia: secvena de ARNm este tradus n secvena de aminoacizi a unei
catene proteice.
Codul genetic= corespondena ntre secvena de nucleotide din ADN/ARN i
secvena de aminoacizi din molecula proteic.
Caracteristicile codului genetic:
Codon= o triplet de baze azotate din ARN;codul genetic are 64 de codoni.
Codul genetic este nesuprapus i fr virgule.
Codul genetic este degenerat.
Codul genetic este universal i are origine foarte veche.
Codul genetic a evoluat n timp.
BIOSINTEZA PROTEIC
TRANSCRIPIA INFORMAIEI GENETICE:
- Copierea unei secvene din catena 3-5 a ADN
- Se realizeaz cu ajutorul enzimei ARN-polimeraza
-- codonul de iniiere este TAC rar CAC
-- codonul de terminare a mesajului este ACT, ATT sau ATC
-- unitatea de transcripie este secvena de ADN care conine informaia unei gene la
eucariote sau a mai multor gene la procariote; ea va determina sinteza unei molecule de
ARNm.
-- la eucariote se sintetizeaz iniial un ARNm precursor care va suferi un proces de
maturare prin eliminarea intronilor(secvene fr sens); procesul are loc cu ajutorul
endonucleazelor i a ligazelor.
-- la procariote se sintetizeaz un ARNm matur( conine doar exoni).
TRANSLAIA INFORMAIEI GENETICE:
- presupune transferul informaiei din ARNm n secvena de aminoacizi a moleculei
proteice.
- Au loc trei reacii principale:
a. iniierea sintezei proteice
b. formarea i elongarea catenei polipeptidice
c. sistarea sintezei proteice
- proteinele formate pot avea structur primar, secundar, teriar sau cuaternar.
ORGANIZAREA MATERIALULUI GENETIC
1.ORGANIZAREA MATERIALULUI GENETIC LA FORME ACELULARE DE VIA:
VIRUSURI: RIBOVIRUSURI-virusuri cu ARN( VMT,HIV,Gripei,Turbrii,Poliomelit)
DEZOXIVIRUSURI-virusuri cu ADN( Bacteriofagi, Herpesului, Variolei)
VIROIZII-ageni infecioi alctuii dintr-o molecul de ARN circular, monocatenar;
provoac boli ca: boala tuberculilor fusiformi la cartof, boala Kadang-Kadang a
palmierilor,etc.
PLASMIDELE- molecule de ADN bicatenar, circular sau liniar, cu replicare autonom,
independent de cromozomul celulei gazd.
2. ORGANIZAREA MATERIALULUI GENETIC LA FORMELE CELULARE DE VIA
A. PROCARIOTE- la bacterii, materialul genetic este reprezentat de ADN
cromozomial(nucleoidul bacterian- bicatenar,circular,cu 40-50 inele cu
superrsuciri) i ADN extracromozomial de tip plasmidic.
B. EUCARIOTE- genomul nuclear( reprezentat de cromozomi alctuii din ADN,
ARN,proteine histonice i non-histonice, lipide, ioni de Ca i Mg) i genomul
extranuclear: ADN mitocondrial i ADN cloroplastic.
Cromozomii nucleari sunt formai din nucleozomi( octamer histonic) legai ntre ei de
ADN linker i nfurai ntr-o molecul de ADN de 200 per.nucleotide.
GENETICA UMAN
COMPLEMENTUL CROMOZOMIAL NORMAL LA OM este format din 46 de
cromozomi(23 de perechi) din care 22 de perechi sunt cromozomi autozomi i o
pereche sunt cromozomi heterozomi.
2n= 44+XX la i 2n= 44 +XY la
CARIOTIPUL: reprezint totalitatea cromozomilor metafazici colorai, fotografiai
i aranjai n grupuri descresctoare a mrimii lor. La om cariotipul este format din
7 grupe:
Grupa A: 3 cromozomi(1-3)
Grupa B: 2 cromozomi(4-5)
Grupa C: 7 cromozomi(6-12)are ataat cromozomul X
Grupa D: 3 cromozomi(13-15)
Grupa E: 3 cromozomi(16-18)
Grupa F: 2 cromozomi(19-20)
Grupa G: 2 cromozomi(21-22) are ataat cromozomul Y
CROMATINA SEXUAL reprezint unul din cei doi cromozomi X inactivai de la
sexul femeiesc.
ANOMALII GENETICE CROMOZOMIALE LA OM
POLIPLOIDII- o celul are suplimentar mai multe seturi de cromozomi.
ANEUPLOIDIA- autozomal sau heterozomal, const n adiia sau deleia unui
cromozom la o anumit pereche de cromozomi.
EXEMPLE DE TRISOMII: TRISOMIA 21(SINDROMUL DOWN), TRISOMIA
18(EDWARDS), TRISOMIA 13(PATAU), SINDROMUL TURNER(45,X0), SINDROMUL
KLINEFELTER(47,XXY), TRISOMIA X(47,XXX), SINDROMUL JACOBS(47,XYY).
MODIFICRI STRUCTURALE ALE CROMOZOMILOR: DELEII(CRI-DU-CHAT),
DUPLICAII, TRANSLOCAII.
CARTAREA GENOMULUI UMAN:
HRI CITOLOGICE: colorarea cromozomilor prin tehnici de bandare
HRI GENETICE: rezultate din frecvena recombinrilor n meioz a unor
markeri genetici
HRI FIZICE: localizeaz secvenele ADN din genom.
CARACTERE UMANE MONO I POLIGENICE
CARACTERE UMANE MONOGENICE:
Caractere i maladii autozomale dominante: maladia Huntington
Caractere autozomale recesive: anemia falciform, fenilcetonuria, maladia Tay-
Sachs, talasemia, fibroza cistic.
Caractere i maladii sex-linkate: hipertricofiia(dominant) daltonismul, hemofilia
A(recesive).
CARACTERE UMANE POLIGENICE:
Caractere continue: variaz de la o extremitate fenotipic la alta(nlime, greutate,
culoarea pielii)
Caractere meristice: se determin prin numrare(amprentele digitale)
Caractere prag: unii indivizi au caracterul iar alii nu l au(schizofrenie, diabet, obezitate,
alcoolism).
GENETICA I CANCERUL
CANCERUL- proliferarea anormal a celulelor care dau natere la tumori.
Tumorile pot fi: benigne-localizate i maligne-rspndite.
Genele care contribuie la rspndirea cancerului sunt: oncogenele, protooncogenele
i antioncogenele, care au suferit mutaii.
Mediul are rol n carcinogenez prin factorii carcinogeni:
Fizici: radiaii ionizante i neionizante
Chimici: azbest, nichel, oxizi de fier, petrol, colorani artificiali, medicamente
expirate, etc.
Biologici: virusurile i micoplasmele.
IMUNITATEA
DEFINIIE: REZISTENA ORGANISMULUI FA DE ACIUNEA AGENILOR
PATOGENI.
AGENII PATOGENI, CARE DETERMIN UN RSPUNS IMUN DIN PARTEA
ORGANISMULUI, SE NUMESC ANTIGENI.
ALERGENUL ESTE UN AGENT PATOGEN CARE DETERMIN O REACIE
ALERGIC.
ANAFILAXIA ESTE UN RSPUNS IMUN LA ACIUNEA REPETAT A UNUI ANTIGEN;
POATE PRODUCE OC ANAFILACTIC I MOARTE.
TIPURI DE IMUNITATE:
NNSCUT, MOTENIT EREDITAR
DOBNDIT PE PARCURSUL VIEII: ACTIV PRIN VACCINARE
PASIV PRIN ADMINISTRARE DE SER
AUTOIMUNITATEA= RSPUNS IMUN FA DE ANTIGENII PROPRII.
BOLI AUTOIMUNE: ARTRITA REUMATOID
IMUNOLOGIA= TIIN CARE STUDIAZ FENOMENELE DE REZISTEN A
ORGANISMELOR FA DE ANTIGENI.
IMUNOGENETICA= TIIN CARE STUDIAZ MECANISMELE GENETICE
CE DETERMIN RSPUNSUL IMUN A ORGANISMELOR.
ANTICORPII= IMUNOGLOBULINE
SUNT PRODUI DE LIMFOCITELE B
TIPURI DE IMUNOGLOBULINE:
1. IG G : PREZENT N SNGE, LIMF, LICHID INTERSTIIAL, ATAC
VIRUSURILE I TOXINELE BACTERIENE
2. IG M : PREZENT N SNGE I LIMF, ESTE PRIMUL TIP DE ANTICORP
PRODUS N URMA INFECIEI SAU IMUNIZRII
3. IG A : PREZENT N SECREII, SALIV, LACRIMI, LAPTE MATERN, SER;
ATAC VIRUSURILE I BACTERIILE.
4. IG D : PREZENT N SER; ESTE RECEPTOR PENTRU ANTIGENI.
5. IG E : PREZENT N SNGE,ESUT CONJUNCTIV; INTERVINE N REACIILE
ALERGICE.
DOMENII DE APLICABILITATE I CONSIDERAII BIOETICE N
GENETICA UMAN
SFATURI GENETICE- evaluarea riscului unei persoane de a manifesta o
maladie sau a unui cuplu de a avea un copil cu handicap.
OBIECTIVE: DIAGNOSTIC
PRECIZAREA CARACTERULUI GENETIC AL BOLII
STABILIREA MODULUI DE TRANSMITERE A MALADIEI
COMUNICAREA RISCULUI DE RECUREN A MALADIEI
ETAPE N ELABORAREA SFATULUI GENETIC:
CERCETAREA FAMILIAL CU NTOCMIREA ARBORELUI GENEALOGIC
INVESTIGAII CITOGENETICE- STABILESC ANOMALIILE NUMERICE
INVESTIGAII MOLECULARE- STABILESC MUTAIILE GENICE
INVESTIGAII BIOCHIMICE- STABILESC BOLILE METABOLICE
CALCULAREA RISCULUI GENETIC: pentru gene dominante autozomale: 1:2,
pentru gene recesive autozomale este 1: 4, pentru gene X-linkate este 50% din
biei vor fi afectai i 50% din fete vor fi purttoare.
DIAGNOSTICUL PRENATAL- riscul de malformaie pentru orice sarcin este de 3%.
TEHNICILE DE DIAGNOZ:
1. ECOGRAFIA SAU ULTRASONOGRAFIA- identific anomalii structurale
2. AMNIOCENTEZA- identific anomalii structurale i numerice cromozomale
3. ANALIZA DOPPLER-identific viteza circulaiei sanguine fetale
4. ANALIZA SNGELUI FETAL
5. ANALIZA SNGELUI MATERN- identific sindromul DOWN.
FERTILIZAREA IN VITRO: const n unirea a doi gamei de sex opus, ducnd la
formarea unui zigot.
INFERTILITATEA: imposibilitatea unui cuplu de da natere la descendeni timp de un
an, avnd o via sexual normal. Poate fi de tip primar i de tip secundar.
Fertilizarea in vitro const n fertilizarea unui ovul femel n afara organismului. Embrionul
rezultat va fi introdus n uterul femeii prin transplantare.
CLONAREA REPRODUCTIV : const n obinerea unor organisme identice cu
organismul mam. Este utilizat la plante. La animale prima clon obinut a fost
oaia Dolly. Astfel de animale clonate pot fi utilizate pentru producerea de proteine
terapeutice sau ca donori de esuturi i organe.
CLONAREA TERAPEUTIC: se urmrete obinerea unui organism identic cu cel
inial pentru a fi utilizat ca donor de esuturi, organe, celule.
Procesul de transfer a unui organ de la o specie la alt specie se numete
xenotransplant.
TERAPIA GENIC: const n nlocuirea unei gene cu disfuncie cu o gen normal n
vederea corectrii unei maladii sau a unei boli genetice. Transferul genei se poate
realiza cu ajutorul lipozomilor sau a virusurilor.
Pentru a se putea realiza terapia genic se parcurg urmtoarel etape:
Sinteza unei gene artificiale prin tehnologia ADN-recombinat
Repararea genelor mutante- valabil pentru genele care prezint o singur mutaie
Transferul genelor fie ex vivo fie in vivo.
TERAPIA GENIC CU CELULE STEM
Celulele stem sunt celule embrionare totipotente, pluripotente sau multipotente.
Terapia implic:
Introducerea genelor normale n celule stem
Introducerea celulelor stem modificate genetic n organul afectat.
Exemplu: transplant de mduv hematogen pentru a trata boli hematologice sau
imunologice.
ECOSISTEME ANTROPIZATE
Ecosistemul antropizat cuprinde: biocenoza(fitocenoz, zoocenoz i
antropocenoz) i biotop(produse create de activitatea omului, sol amenajat
pentru agricultur i mediu abiotic natural).
Particularitile ecosistemului antropizat sunt:
Gradul de antropizare diferit
Consumul energetic crescut
Stabilitatea redus
Cicluri biogeochimice modificate
Lanuri trofice modificate i simplificate
Tendina de simplificare a biocenozei.
Procese ecologice fundamentale n ecosistemele antropizate posed trei funcii:
Funcia de circulaie a materiei n sistem;
Funcia energetic;
Funcia de autoreglare a strilor ecosistemului.

URBANIZAREA I IMPACTUL ASUPRA MEDIULUI
ONU definete centru urban ca fiind: toat populaia aflat pe un teritoriu delimitat
care beneficiaz de locuine cu ap curent, sisteme de canalizare, electricitate,
strzi pavate, magazine, edificii socioculturale, servicii.
Modificrile climatice produse de creterea urbanizrii sunt:
Radiaii ultraviolete mai reduse iarna
Temperatura medie anual mai ridicat
Umiditatea relativ mai sczut iarna i vara iar precipitaiile sunt mai intense
Curenii de aer au o vitez anual medie mai redus iar perioada nsorit este mai
scurt.
Impactul aglomerrilor urbane asupra mediului se realizeaz prin:
1. Extinderea terenurilor necesare urbanizrii
2. Extracia i scderea resurselor naturale
3. Producerea de deeuri- inclusiv ape reziduale netratate.
DETERIORAREA ECOSISTEMELOR SUB IMPACT ANTROPIC
Cile de deteriorare a ecosistemelor naturale sunt:
Fragmentarea i distrugerea habitatelor naturale: agricultur neraional,
dezvoltare urban, defriri, minerit, poluare.
Supraexploatarea resurselor naturale:vntoare, pescuit, suprapunat, tierea
copacilor de esen rar)
Introducerea de noi specii: accidental(naval sau aerian) intenionat(capre,
iepuri)
Poluarea: cu substane chimice(pesticide,iei,gaze,metale),fizice(zgomote,
cldur,radiaii), biologice(microorganisme patogene), poluare
genetic(organisme modificate genetic).
Modificri climatice globale: efectul de ser.