Limfocitele http://anatomie.romedic.

ro/limfocitele

Limfocitele sunt celule care aparin familiei leucocitelor i au funcii de baz n cadrul sistemului imunitar, fiind implicate n rspunsul imun umoral i celular. Exist dou clase de limfocite, limfocitele T i limfocitele B.

Microscopic diferenele dintre cele dou tipuri de limfocite nu sunt observabile. Ele au un nucleu foarte voluminos care ocup aproape ntreaga celul, raportul nucleu/ citoplasm fiind supraunitar. Organitele celulare intracitoplasmatice nu sunt vizibile, citoplasma fiind bazofil. Detaliile structurale i organitele se pot vizualiza ns n microscopie electronic unde apar difereniat reticulul endoplasmatic, ribozomii i aparatul Golgi. Diferena ultrastructural dintre limfocitele T i B se observ la microscopul electronic dat fiind de faptul c limfocitele B prezint viloziti, iar limfocitele T au suprafa neted. n momentul n care sunt stimulate antigenic, apar numeroase modificri intracelulare, precum i creterea ratei de sintez proteic.

Proprietile generale ale limfocitelor Leucocitele reprezint un grup celular mprit n dou categorii: leucocite polimorfonucleare sau granulocite, care au nucleul lobat sau fragmentat fiind reprezentate de neutrofile, eozinofile i bazofile i leucocite mononucleare, cu un nucleu mare care ocup aproape toat celula fiind reprezentate de limfocite i monocite.

Limfocitele sunt diferite de celelalte celule sanguine. Ele se difereniaz de monocite (cu care seamn foarte mult din punct de vedere morfologic) prin faptul c prezint enzime din clasa esterazelor i a fosfatazei alcaline. Au densitatea mai mare dect a monocitelor i mai mic dect a polimorfonuclearelor. Limfocitele B, spre deosebire de limfocitele T ader pe suprafee de sticl sau plastic.

Limfocitele au proprieti care le difereniaz i de celelalte celule ale sistemului imunitar, proprieti reprezentate de faptul c: sunt celule mobile, nu au capacitate de fagocitoz ca macrofagele, ader foarte uor de alte celule, au receptori de membran i, sub influena anumitor substane mitogene se pot transforma blastic.

Au capacitatea de a se deplasa foarte uor printre esuturi datorit plasticitii lor, care le permite s-i modifice forma din celul rotund n celul alungit i s semene cu o rachet de tenis, care are nucleul n partea voluminoas. Aderena la alte celule se face printr-un contact intim de suprafa denumit

peripolez, contact n cadrul cruia au loc schimburi informaionale ntre limfocit i celula la care a aderat acesta.

Limfocitele au receptori specifici reprezentai de antigenele de suprafa, care le permit s diferenieze self-ul de nonself i de receptorii de membran care sunt receptori de comunicare intercelular.

Transformarea blastic a limfocitelor are loc sub aciunea fitohemaglutininei i concanavalinei A care sunt substane mitogene. Transformarea este dat de mrirea de 2-3 ori a dimensiunii limfocitului cu modificarea nucleului i apariia unui numr mare de organite citoplasmatice cu funcie secretorie. Astfel limfocitele sunt capabile s prolifereze la contactul cu anumite antigene specifice.

Localizarea limfocitelor Att limfocitele T, ct i limfocitele B sufer fenomenul de homing, care reprezint migrarea lor selectiv ctre ariile T-dependente sau B-dependente a organelor limfoide secundare. n organele limfoide secundare are loc recircularea continu a limfocitelor pe traseul snge-organ limfoid-snge, proces esenial n recunoaterea antigenului de ctre limfocite pe baza receptorilor de membran. Dac limfocitele nu ar fi recirculate, ele nu ar avea posibilitatea s intre n contact cu antigenele care ajung n circulaia organismului i s declaneze apoi rspunsul imun care va avea ca scop distrugerea i ndeprtarea substanelor strine din organism.

Limfocitele T Sunt o categorie foarte heterogen de limfocite, deoarece se mpart la rndul lor n 4 subcategorii de limfocite T: helper, citotoxice, supresoare i contrasupresoare. Limfocitele T ca grup, reprezint 60 -80% din totalitatea limfocitelor i au o durat de via foarte crescut (ani, chiar zeci de ani) spre deosebire de a neutrofilelor spre exemplu, care au o durat de via de la cteva ore pn la cteva zile.

Limfocitele T prezint pe suprafaa lor membranar 3 categorii de receptori, acetia fiind reprezentai de: a. Receptori pentru recunoaterea antigenic denumii i TCR (T- cell receptor) care cuprind subcategoriile CD3 (CD = Clas de Difereniere sau n englez Cluster of Differentiation) cu rol n recunoaterea antigenului prezentat limfocitului de ctre celula prezentatoare de antigen, CD 4 i CD8 care au rolul de coreceptori implicai n recunoaterea moleculelor sistemului major de histocompatibilitate (MHC = Major Histocompatibility System). b. Receptori cu rol accesor n activarea limfocitelor T reprezentai de CD 25, CD 28 i CD 45 c. Receptori implicai n adeziunea intercelular reprezentai de CD 2, CD 11, CD 18

Limfocitele T recunosc antigenul n funcie de structura primar a determinantului antigenic, mecanism diferit de cel al limfocitelor B i al imunoglobulinelor (anticorpi produi de plasmocite) care recunosc antigenul dup structura sa spaial. Limfocitele T recunosc numai antigenele expuse pe suprafaa celulelor prezentatoare de antigen (CPA). Din punct de vedere fenotipic limfocitele T se difereniaz n 4 categorii care cuprind limfocitele T supresoare, contrasupresoare, helper i citotoxice. Limfocitele T Helper Prezint receptori CD3+/CD4+/CD28+ i ocup 2/3 din totalul limfocitelor T. Ele secret molecule numite interleukine, care aparin clasei citokinelor, fiind molecule mesager n comunicrile dintre celulele sistemului imunitar. Aceste interleukine permit limfocitelor T helper s execute mai multe funcii: stimuleaz diferenierea limfocitelor B n plasmocite (celule secretatoare de anticorpi), stimuleaz funcia citotoxic a limfocitelor T citotoxice, stimuleaz funcia citotoxic a celulelor Natural Killer i activitatea macrofagelor. Datorit acestor funcii importante pe care le execut prin secreia de interleukine, limfocitele T helper sunt considerate celulele de baz ale sistemului imun. Sunt mprite n 2 categorii n funcie de tipul de interleukine pe care l secret: care

- Limfocite T helper 1 (LTH1) care secret interleukinele 3, 4 i 5 fiind stimulatorul principal al sintezei claselor de imunoglobuline A i E - Limfocite T helper 2 (LTH2) care secret interleukina 2 i interferon gamma avnd rol n declanarea reaciilor inflamatorii din strile de hipersensibilitate ntrziat.

O parte din limfocitele T helper care au avut contact cu antigenul se transform n limfocite T helper cu memorie, datorit faptului c posed funcia de memorie imunologic, funcie care le permite ca la al doilea contact cu acelai antigen s activeze rspunsul imun prompt i eficient. Ele rezist ani de zile n organism conferind imunitate dobndit n mod natural prin anticorpi care persist timp ndelungat. Limfocitele T citotoxice Prezint receptori CD 3+/CD8+/CD 28+. Determin moartea celulelor din organism contaminate microbian (infectate de ctre un virus, un parazit sau o bacterie). Pentru a avea efectul letal asupra celulei infectate cu antigen, limfocitele T citotoxice trebuie s fie n contact direct cu celula respectiv, contact care se desfoar de-a lungul a 4 faze:

1. Recunoaterea celulei int infectat antigenic i ataarea limfocitului de ea prin receptori membranari specifici 2. Activarea mecanismelor litice ale limfocitului T citotoxic 3. Trimiterea enzimelor letale reprezentate de perforine i enzime lizozomale ctre celula int

4. Desprinderea de celula int care va intra ntr-un proces de descompunere i liz sub aciunea enzimelor litice

Procesul de adeziune la celula infectat antigenic i de distrugere a acesteia de ctre enzimele litice secretate de limfocitele T citotoxice este extrem de important n controlul infeciilor virale de ctre sistemul imun. Tot limfocitele T citotoxice au rol n respingerea grefei de esut sau organ prin liza celulelor grefate n afeciunea numit Graft versus Host Disease. Limfocitele T supresoare Au ca markeri de suprafa CD3+/CD8+/CD28-. Sunt celule care inhib limfocitele T helper, ducnd la supresia sau oprirea rspunsului imun. Determin stare de toleran fa de unele antigene exogene i de unele molecule self modificate. n momentul n care apar deficiene funcionale ale limfocielor T supresoare apar bolile autoimune, n care organismul reacioneaz mpotriva propriilor celule self. Persistena prelungit n organism a antigenului i dozele mici de antigen activeaz limfocitele T supresoare ducnd la ncetarea sau reducerea intensitii rspunsului imun. Limfocitele T contrasupresoare Ele contracareaz aciunea limfocitelor T supresoare i acioneaz sinergic cu limfocitele T helper. Fie au aciune direct asupra limfocitelor T supresoare inhibndu-le activitatea, fie deblocheaz funcional limfocitelel T helper. Receptorii de suprafa ai limfocitelor T Sunt markeri celulari i receptori de membran. Markerii celulari sunt molecule care confer specificitate i identitate unei anumite categorii de limfocite T. Cei mai importani sunt markerii antigenici care sunt glicoproteine de pe membrana limfocitelor T denumite antigene de membran. Ei reprezint elementele de identificare ale populaiilor i subpopulaiilor de limfocite T. Se numesc Clase de Difereniere (CD), iar pn acum au fost identificate aproximativ 150 de CD pe suprafaa limfocitelor T.

Limfocitele T recunosc un antigen doar dac este prezent pe suprafaa unei celule prezentatoare de antigen (CPA) din cadrul sistemului major de histocompatibilitate (MHC, care este mprit n dou clase: MHC I i MHC II).

CD4 - recunoate antigenul doar dac este asociat cu moleculele MHC clasa II. Markerul este reprezentat de un peptid cu structur monomeric, alctuit din 433 de aminoacizi nlnuii. Se gsete pe suprafaa limfocitelor T helper i T contrasupresoare. Este un coreceptor care particip la recunoaterea antigenic asociativ fiind receptorul de suprafa caracteristic limfocitelor T helper. Are un segment intracitoplasmatic, un segment transmembranar i un segment extracelular. Cu ajutorul segmentului extracelular se leag de MHC II. Segmentul intracitoplasmatic particip la activarea limfocitelor T cu

ajutorul unor enzime intracelulare. CD 4 este i receptorul de care se ataeaz virusul HIV, determinnd incapacitatea limfocitelor de a se activa, fapt care duce la imunosupresie sever n cazul bolii SIDA. CD8 - este un marker limfocitar care recunoate antigenul doar dac este asociat cu moleculele MHC clasa I. Ca structur este un heterodimer cu dou lanuri, alfa i beta, a cte 210 aminoacizi fiecare fiind prezent pe suprafaa limfocitelor T supresoare i T citotoxice. Este un marker definitoriu pentru limfocitele T citotoxice i are dou lanuri, alfa i beta. Fiecare lan are cte trei segmente: transmembranar, intracitoplasmatic i extracelular. CD3 - are o structur complex fiind aezat lng TCR. Face transducia semnalului activator dinspre TCR spre interiorul limfocitului. Este format din cinci lanuri scurte (gama, epsilon, delta, eta, zeta) iar toate cele 7 lanuri ale complexului TCR-CD3 (5 ale CD3, 2 ale TCR) se asociaz prin puni disulfurice sau prin legturi necovalente, formnd un complex unitar ce trimite stimulul activator ctre interiorul limfocitului.

Receptorii de membran au rol n transmiterea de semnale intercelulare i n recunoaterea intercelular. Receptorul pentru homing este plasat pe membrana limfocitelor cu scop de a le orienta ctre organele limfoide secundare spre ariile T dependente sau B dependente. Recunoaterea i plasarea limfocitelor n aria corespunztoare se bazeaz pe faptul c exist molecule cu receptori complementari limfocitelor, molecule care cptuesc vasele sangvine i limfatice ale organelor limfoide secundare. Receptorii pentru antigen sunt molecule de natur imunologic ce sunt ataate pe membrana limfocitului T fr a ptrunde n dublul strat lipidic al membranei. Au cte dou lanuri polipeptidice, fiecare lan avnd la rndul su 4 domenii diferite: domeniul variabil, domeniul constant, domeniul transmembranar i domeniul intracitoplasmatic. Domeniul variabil este implicat n specificitatea de legare a antigenului de limfocit. Receptorii pentru fragmentul cristalizabil fac contactul dintre limfocit i fragmentul cristalizabil al moleculelor imunoglobulinice, reprezentnd structurile cu ajutorul crora limfocitele T recunosc i leag poriunea terminal a imunoglobulinelor. Receptorii pentru citokine sunt de mai multe feluri: receptori pentru interleukine, receptori pentru hormoni, receptori pentru interferon i receptori pentru factorii de stimulare ai creterii celulare. Sunt capabili s lege citokinele solubile participante la mecanismele de cooperare dintre diferitele celule ale sistemului imunitar. Activarea limfocitelor T Este realizat numai de ctre antigenele Timodependente ntr-un proces care implic obligatoriu prezena celulelor prezentatoare de antigen. Celulele prezentatoare de antigen coopereaz cu limfocitele ntr-un mod bidirecional care determin activarea reciproc a ambelor celule. Activarea limfocitului T de ctre celula prezentatoare de antigen este anterograd i se deruleaz n sensul prezentrii antigenului de ctre CPA ctre limfocit, iar activarea celulei prezentatoare de antigen de ctre limfocit se realizeaz n sens retrograd.

Activarea limfocitelor T se realizeaz doar n organele limfoide secundare (ganglioni limfatici, splin) doar n cadrul unei cooperri celulare n care este absolut necesar prezena i activitatea celulelor prezentatoare de antigen, ntruct limfocitele T nu sunt capabile s fixeze antigenul timodependent n stare nativ i nu exprim pe suprafaa lor receptori de captare ai antigenului. De asemenea, limfocitele nu recunosc antigenele native n ntregime, ci recunosc mici fragmente ale antigenului numite epitopi care sunt ca structur determinani antigenici lineari, poziionai n interiorul antigenului nativ.

Spre deosebire de limfocitele T, celulele prezentatoare de antigen au pe suprafaa lor receptori de captare astfel nct sunt capabile s capteze antigenul, s-l internalizeze i s-l descompun n epitopi care apoi sunt expui pe suprafaa celulei prezentatoare de antigen n complex cu sistemul major de histocompatibilitate. Epitopul este recunoscut apoi de ctre limfocitul T care prezint TCR (T- cell receptors) sau receptori pentru recunoatere antigenic. Activarea anterograd a limfocitelor T Se face dinspre celula prezentatoare de antigen spre limfocitul T i se exercit n acelai sens cu prezentarea antigenului de ctre CPA. Rezultatul final l reprezint activarea limfocitelor T aflate n contact cu celulele prezentatoare de antigen.

Se face prin transmiterea ctre limfocit a dou categorii de semnale: 1. Pe calea primar TCR- CD3 care ajunge ctre profunzimea citoplasmei prin intermediul complexului CD3, semnalul lund natere datorit recunoaterii epitopului prezentat de CPA de ctre limfocit. Rolul semnalului este de activare metabolic a limfocitului T contribuind la stimularea diviziunilor mitotice ale acestuia cu creterea numrului de limfocite T per clon limfocitar activat. Toate limfocitele T care rezult n urma mitozelor date de activarea metabolic a clonei limfocitare de ctre celula prezentatoare de antigen sunt activate. Se realizeaz astfel selecia clonal i expansiunea clonal. 2. Calea secundar, accesorie a complexului CD 28 descarc semnalele activatoare n momentul n care face legtura cu CD80 care este contraligandul su aflat pe suprafaa tuturor celulelor prezentatoare de antigen (macrofage, celule dendritice etc.). Are rol n maturarea funcional a limfocitului T.

Dac limfocitele T activate anterograd sunt Limfocite T helper atunci va avea loc stimularea produciei de interleukine. Dac limfocitele T activate sunt limfocite T citotoxice, atunci se va stimula producia de enzime litice cu rol distructiv al antigenului.

Prin cele dou tipuri de semnale, pe calea primar i pe calea secundar, vor rezulta trei efecte: activarea clonal, expansiunea clonal i maturarea clonal a limfocitelor T. Activarea anterograd a limfocitelor T are dou subetape: etapa antigen-dependent i etapa antigenintependent.

Etapa antigen-dependent Se stabilesc contacte extinse i intime ntre membranele CPA i limfocitelor T. Este reprezentat de prezentarea i recunoaterea antigenic. Toi receptorii de pe membrana limfocitar ncep s se ansambleze n jurul TCR, astfel nct la TCR se vor ataa CD3, CD45, CD4 dac limfocitele sunt T helper sau CD 8 dac limfocitele sunt T citotoxice. Se trimit dou semnale, primul este pe calea CD4/CD8 i angajeaz legturile dintre limfocitul T helper/T citotoxic i domeniul monomorf al MHC fiind un semnal inhibitor care determin inhibarea activrii excesive a limfocitelor T n situaia n care ele vin n contact cu celule prezentatoare de antigen ale cruor molecule MHC sunt goale. Dac moleculele MHC sunt ncrcate cu epitopi specifici apare al doilea semnal care se produce pe calea TCR-CD3 i este activator, transmindu-se din aproape n aproape prin membrana limfocitului T determinnd activarea clonei limfocitare.

Stimularea antigenic a limfocitelor T determin trecerea acestora din faza 0 a ciclului mitotic n faza G1, dup care vor trece n etapele S i G2. Toate limfocitele care se afl ntr-una din fazele G1/S/G2 se numesc limfoblati. Limfoblatii care ies din faza G2 trec n faza M sau de mitoz, transformndu-se n limfocite T efectorii care se implic rapid n derularea rspunsului imun deja declanat. O parte dintre limfocitele care au luat contact cu antigenul se vor transforma n limfocite de memorie. Etapa antigen-independent Se stabilesc legturi ntre limfocitele T i celulele prezentatoare de antigen prin intermediul receptorilor de adeziune intercelular. Astfel se creeaz mici legturi n fanta dintre cele dou celule cu efect de fermoar ntre membranele celor dou celule. Aceast etap este independent de prezena antigenului, avnd loc fr ntrerupere n organele limfoide secundare ntruct limfocitele i CPA tranziteaz permanent ganglionii i splina. Astfel se realizeaz supravegherea imunologic a limfocitelor T de cre celulele prezentatoare de antigen, prin prezentarea unui epitop de ctre moleculele MHC ctre limfocitele T, epitop care este recunoscut prin TCR.

Receptorii de adeziune intercelular ai limfocitelor T sunt reprezentai de LFA1, CD2 i VLA. LFA1 se mai numete i antigen asociat funciei limfocitare i face parte din familia integrinelor, care sunt receptori celulari ce permit adeziunea la endoteliu, la proteinele matricei extracelulare i la celulele prezentatoare de antigen. LFA1 se leag de receptorul ICAM de pe membrana CPA care este de dou feluri: ICAM 1 care se afl pe suprafaa tuturor celulelor din organism i ICAM 2 care se afl pe celulele endoteliale. VLA aparin tot familiei integrinelor i sunt receptori de adeziune la endoteliu. Dau posibilitatea limfocitelor s se deplaseze prin esuturi i s se concentreze intratisular n zonele bogate n antigene. Activarea retrograd a limfocitelor T Se produce dinspre limfocitele T deja activate pe calea anterograd ctre celulele prezentatoare de antigen. Se numete retrograd datorit faptului c se exercit n sens opus prezentrii antigenului, i anume dinspre limfocitul T ctre CPA. n final rezult activarea complet a CPA.

Are loc o stimulare reciproc ntre limfocitele T i celulele prezentatoare de antigen prin intermediul interleukinelor produse de limfocitele T. Interleukina 4 are efecte stimulatoare pentru CPA determinnd stimularea expresiei moleculelor sistemului major de histocompatibilitate pe membrana celulei prezentatoare de antigen. Datorit expresiei MHC pe suprafaa APC, rezult o cretere marcat a prezentabilitii epitopilor, ceea ce determin suprastimularea limfocitelor T.

Limfocitele B Sunt o populaie minoritar de limfocite, ele reprezentnd aproximativ 20 % din totalul limfocitelor periferice. Ele sunt celule cu durat de via scurt, de ordinul lunilor i sunt puin recirculate fiind distribuite cu predominen n ariile B-dependente din organele limfoide secundare, la nivelul corticalei ganglionilor limfatici sau n pulpa alb a splinei. Limfocitele B sunt dispuse n aglomerri care se numesc folicului limfoizi i staioneaz n aceast formul timp ndelungat n ateptarea antigenului specific.

Receptorii de suprafa ai limfocitelor B sunt de trei tipuri: 1. Receptori de recunoatere antigenic sau B- cell receptors 2. Receptori cu rol n activarea limfocitelor B: CD45, CD25 i CD21/CD19 3. Receptori de adeziune intercelular sau LFA1

Diferenierea limfocitelor B n cursul evoluiei de la stadiul primordial la stadiul de plasmocit este independent de prezena antigenului. Limfocitele B recunosc antigenele solubile dup structura lor spaial i nu necesit prezena Celulelor Prezentatoare de Antigen n declanarea rspunsului imun. Dup stimularea antigenic se comport similar limfocitelor T, parcurgnd toate etapele ciclului celular i devenind limfoblati B care au ca proprietate prezena unui numr mare de molecule MHC clasa II pe suprafaa membranei celulare, ceea ce le confer posibilitatea s acioneze i ca celule prezentatoare de antigen. Plasmocitele sunt celulele rezultate n urma diviziunilor celulare a limfocitelor B, fiind celule efectoare cu implicare direct n derularea i finalizarea rspunsului imun. O parte dintre ele vor deveni limfocite B cu memorie i se vor depozita n anumite sectoare din organele limfoide secudnare. Evoluia limfocitelor B Prima selecie a precursorilor limfocitelor B se face n mduva osoas, acestei selecii supravieuind doar un numr redus din precursorii implicai. n urma acestei selecii, pe suprafaa limfocitelor B se vor exprima receptori de tip imunoglobuluinic pentru antigen. Celulele selectate prsesc mduva osoas i se angajeaz n circulaia sistemic. Se numesc limfocite B naive (nu au memorie imunologic).

A doua selecie are loc n circulaia sistemic i const n ataarea de limfocitele B a receptorilor pentru homing-ul limfocitar. Limfocitele B ajung apoi n ariile B-dependente din splin i ganglioni limfatici unde supravieuiesc 6-8 sptmni n ateptarea antigenului. Dac nu ntlnesc acest antigen, ele mor i sunt nlocuite cu alte limfocite B care trec din nou prin ambele etape de selecie. Nici celulele care trec de a doua selecie nu au memorie imunologic, fiind tot limfocite B naive.

A treia selecie se produce numai n momentul n care limfocitele B recunosc antigenul i au loc mutaii care determin evoluia limfocitelor B selectate ctre plasmocite, sau ctre limfocite B cu memorie.

Plasmocitele sunt celule de 1-2 ori mai mari dect limfocitele B din care au provenit prin selecie. Ele i pierd receptorii de membran dar i dezvolt foarte mult organitele intracelulare de sintez proteic i enzime reprezentate de reticulul endoplasmatic rugos i aparatul Golgi. Astfel se declaneaz sinteza de imunoglobuline sau anticorpi. Un plasmocit poate sintetiza numai o singur clas de imunoglobuline (fie ele IgA, IgG, IgM sau IgE). Limfocitele B cu memorie au o via foarte lung, de la cteva luni la civa ani i sunt responsabile de prezena timp ndelungat n organsm a anumitor anticorpi specifici anti-ageni microbieni care asigur imunitatea dobndit natural post mbolnvire (de exemplu n bolile copilriei, care nu vor mai fi contactate a doua oar datorit existenei anticorpilor datorit limfocitelor cu memorie). Limfocitele B reglatoare sunt celule prezentatoare de antigen, avnd pe membrana lor molecule MHC clasa II. Ele intervin n procesele de cooperare intercelular. Receptorii de recunoatere antigenic ai limfocitelor B Recunoaterea antigenic n cazul limfocitelor B se produce diferit fad e limfocitele T. Spre deosebire de limfocitele T, limfocitele B recunosc antigenele aflate n stare nativ n faz fluid (n lichidul interstiial) i nu necesit prezena celulelor prezentatoare de antigen i nici prelucrarea sau procesarea antigenelor cu evidenierea epitopilor. Limfocitele B pot capta astfel direct antigenul declanator, fr a trece prin procesul de recunoatere antigenic i prin activarea CPA.

n cazul limfocitelor B recunoaterea antigenic poate fi dubl, lucru care nu se ntpl la limfocitele T. Astfel au loc: - Recunoaterea specific, realizat prin receptorul BCR care recunoate determinanii antigenici conformaionali situai la suprafaa antigenelor native, indiferent dac sunt corpusculare sau solubile - Recunoaterea nespecific realizat prin heterodimerul CD21/CD19 care este un receptor opsoninic, el recunoate opsonina C3b care este o fracie a sistemului complement. Opsonina C3b este dispus pe suprafaa antigenelor corpusculate. Sistemul complement este compus dintr-un set de proteine i glicoproteine plasmatice care au rol esenial n aprarea organismului. B- cell receptor

Este receptorul de recunoatere antigenic al limfocitelor B i este reprezentat de o imunoglobulin sau anticorp transmembranar, cel mai frecvent IgM care este o form pentameric. Celelalte imunoglobuline, A, G sau E ndeplinesc mult mai rar funcia de BCR.

Structura acestui receptor este reprezentatd e asocierea a dou perechi de lanuri i anume: - 2 lanuri grele transmembranare (H- Heavy) situate cu capetele carboxil terminale n interiorul celulei i cu capetele amino- terminale n afara celulei - 2 lanuri uoare (L- Light) situate exclusiv transmembranar care se asociaz prin puni disulfurice la lanurile grele.

Lanurile heavy i light se asociaz ntre ele la capetele amino terminale i constituie dou caviti de dimensiuni mici care poart de numirea de situs combinativ pentru antigen cu proprietatea de a recunoate determinanii antigenici conformaionali situai la suprafaa antigenului nativ.

BCR are dou situsuri combinative pentru antigen care au aceeai structur i care pot recunoate doar un singur tip de determinant antigenic conformaional, deci un singur antigen, prin urmare BCR este unr eceptor monospecific. Funciile BCR sunt reprezentate de responsabilitatea recunoaterii antigenice i de declanarea unor semnale activatoare transmise din aproape n aproape strict prin lanurile heavy pe dou ci: 1. Calea scurt de la lanurile H ale BCR ctre o protein-tirozin-kinaz 2. Calea lung prin intermediul unor molecule asociate la BCR. Aceste molecule se sunt reprezentate de Ig alfa i Ig beta asociate de lanurile H ale BCR prin puni disulfurice. Ig alfa i Ig beta se leag la rndul lor de CD 45, tot prin puni disulfurice. Activarea limfocitelor B Se realizeaz numai dup recunoaterea antigenelor solubile sau corpusculate de ctre situsurile combinative pentru antigen ale BCR. Activarea se realizeaz diferit n funcie de natura antigenului. Activarea limfocitelor B se poate face att de ctre antigenele timodependente ct i de ctre antigenele timoindependente.

a. n cazul antigenelor solubile, recunoaterea determinanilor antigenici conformaionali de la suprafaa antigenului de ctre situsurile combinative pentru antigenale BCR determin declanarea de semnale activatorii care se transmit din aproape n aproape pe calea lanurilor heavy ctre Ig alfa i Ig beta care se vor fosforila i se vor modifica conformaional determinnd trimiterea unui semnal ctre CD 45 care este asociat prin puni disulfurice la Ig alfa i Ig beta. CD 45 funcioneaz ca o protein tirozin fosfataz care defosforileaz Ig alfa i beta i preia fosforul ncrcndu-se cu el. Fosforul de pe CD45 este preluat de ctre kinaza SYK care l transmite spre fosfolipaza C ataat la membrana limfocitului B. Fosfolipaza C se activeaz i declaneaz cascada fosfatidilinozitolilor, n urma unei succesiuni de reacii catalizate

enzimatic rezultnd inozitol trifosfat i diacilglicerol. Inozitoltrifosfatul activeaz factorii transcripionali din citoplasma limfocitului B care trec n nucleu i stimuleaz genele pentru interleukine, genele pentru imunoglobuline i genele pentru sistemul major de histocompatibilitate. n urma activrii acestor 3 tipuri de gene de ctre inozitoltrifosfat, limfocitele B ncep s funcioneze ca celule prezentatoare de antigen.

b. n cazul antigenelor corpusculare are loc opsonizarea (pregtirea antigenului pentru a fi fagocitat) lor prin aciunea imunoglobulinelor. Antigenul va fi cunoscut de limfocitul B cu ajutorul BCR care recunoate determinanii antigenici conformaionali de la suprafaa antigenului corpuscular. Se declaneaz apoi stimuli activatori care se transmit prin lanurile Heavy cu activarea cascadei kinazelor. n final, antigenul va fi fagocitat. Limfocitele B sunt celule efectoare ale rspunsului imun mediat umoral, datorit diferenierii lor n plasmocite care secret anticorpi sau imunoglobuluine. Limfocitele T citotoxice sunt implicate n rspunsul imun celular care are ca rezultat liza celulei infectat cu antigen.

Cooperarea celular Un antigen este o structur non-self care, n momentul n care vine n contact cu sistemul imun declaneaz o succesiune de reacii care vor conduce la neutralizarea lui i ndeprtarea lui din organism. Celulele prezentatoare de antigen au rolul de recunoatere a antigenului strin, captare a lui i prezentare ctre alte celule ale sistemului imun. Ele fie fagociteaz antigenul i l scindeaz n epitopi care vor fi prezentai apoi limfocitelor T, fie rein antigenul nedescompus la nivelul membranei celulare i l prezint limfocitelor B care au situs combinativ pentru antigen. Limfocitul T helper este celula responsabil cooperarea celular prin intermediul citokinelor pe care le secret. Avnd n vedere cooperrile dintre celule, procesul de aprare imun poate fi mprit n urmtoarele etape:

1. Un microb care traverseaz i depete barierele mecanice i chimice ale organismului va fi atacat de ctre neutrofile care l distrug cu ajutorul radicalilor de oxigen i al enzimelor lizozomale 2. Macrofagele intr n aciune concomitent cu neutrofilele i fagociteaz parial antigenul conservnd poriuni din acesta numite epitopi, pe care le prezint limfocitelor T care se vor activa 3. Dac microbul supravieuiete primelor dou secvene de atac i ajunge n interiorul celulelor organismului gazd, va intra n aciune celula natural killer (NK) care ncearc s distrug microbul prin mecanisme citotoxice. Aceste trei reacii sunt reprezentate de prima linie de aprare nespecific i neselectiv, intrnd n aciune n momentul n care un antigen de orice tip ncearc s infecteze organismul.

A doua linie de aprare const n: 1. Limfocitele B sunt informate i activate n timp ce se produce prima linie de aprare, i astfel vor ncepe s sintetizeze anticorpi iniial n numr mic, deoarece nc este activ rspunsul imun celular prin celule natural killer 2. Dac nu funcioneaz aprarea dat de celulele NK, se produce creterea titrului de anticorpi apoi acionarea limfocitelor T citotoxice care n tot acest timp au avut timp s se activeze i s prolifereze clonal 3. Apare memoria imunologic.

Tipuri de rspuns imun Rspuns imun mediat umoral, care se declaneaz cnd antigenul s-a rspndit n organism i se desfoar departe de locul de ptrundere a antigenului, urmrindu-l n circulaia sistemic i n celulele unde s-a depozitat. Acest tip de rspuns imun este mediat de ctre anticorpii secretai de plasmocite, aceti anticorpi fiind capabili s neutralizeze toxinele, s opsonizeze bacteriile i s inactiveze virusurile. Rspunsul imun umoral este predominant n infeciile bacteriene i reinfeciile virale.

Rspunsul imun mediat celular este declanat cnd antigenul se afl nc la poarta de intrare i nu a reuit s invadeze organismul sau cnd este un antigen cu specificitate pentru anumite celule ale gazdei, cum sunt virusurile sau bacteriile care se inclaveaz intracelular. Este realizat numai la poarta de intrare, este mai lent i orientat numai pe celulele care sunt infectate. Are ca mecanisme principale de aciune fagocitoza realizat de macrofage i citoliza realizat de limfocitele T citotoxice.