1. GENETIC 1.

1 GENETIC MOLECULAR ACIZII NUCLEICI Acizii nucleici sunt substane macromaleculare care , conin informaia genetic necesar desfurrii ntregii activiti celulare. Exist dou tipuri de acizi nucleici: acidul dezoxiribonucleic (A N! i acidul ribonucleic (ARN!. Acizii nucleici sunt alctuii din uniti mai simple, numite nucleotide. O nucleotid este format dintr o baz" azo#a#", o $en#oz" !za"r# i un radical acid %o&%oric. 'azele azo#a#e din structura acizilor nucleici sunt de dou tipuri: purinice i pirimidinice. o $azele azotate purinice care intr n constituirea acizilor nucleici sunt adenina i (uanina, prezente at%t n A&' c%t i n A('. o $zele azotate pirimidinice sunt: ci#ozina care este prezent at%t n A&' c%t i n A(' uracilul prezent doar n A(' #i)ina prezent doar n A&'. )n molecula de acizi nucleici exist patru tipuri de nucleotide n ficncie de baza azotat pe care o conin. Astfel, molecula de A&' conine nucleotide cu adenin, timin, citozin i guanin iar molecula de A(' conine nucleotide cu adenin, uracil, citozin i guanin. *en#ozele *unt reprezentate de: o riboz, prezent n structura A('+ o dezoxiriboz, prezelit n structura A&' O pentoz rnpreun, cu o baz azotat, formeaz o nucleosid. )ntre pentoz i baza azotata se realizeaz o legtur covalent. &ac la nucleosid se ataeaz un radical fosforic, rezult o nucleotid. Radicalul %o&%oric ,n lan polinucleotidic se formeaz prin realizarea unor legturi ntre carbonul -. al unei pentoze i carbonul /0 al pentozei din nucleotida urmtoare, prin intermediul unui radical fosforic. Astfel, nucleotidele se leag ntre ele, form%nd lanuri polinucleotidice, ce reprezint &#ruc#ura $ri+ )ar" a acizilor nucleici. Acidulribonucleic !ARN# Este o substan macromolecular, alctuit dintr o singur caten polinucleotidic, care, n anumite regiuni, poate prezenta o structur bicatenar. Ti$uri de acid ribonucleic ARN )e&a(er !ARN)# o Este o molecul monocatenar, ce se afl n celulele tuturor organismelor procariote i eucariote, fiind implicat n copierea, informaiei genetice, dintr o caten de A&' !tran scripie# i n decodificarea informaiei !translaie#, n scopul sintezei proteinetor. &e aceea se mai numete i ARN informalional. o *inteza de A('m se realizeaz n nucleu, prin transcrierea genelor A&' corespunztoare. ARN ,iral (ARN,! o 1onstituie materialul genetic la ribovirusuri. ARN nuclear )ic (ARNn)! o Are rol important n funcionarea nucleului fiind implicat n iniierea sintezei proteice i n maturarea A(' ului mesager. ARN ribozo)al (ARNr!

o Este localizat n ribozomi, unde este asociat cu proteine. o A('r determin, n mare msur, structura ribozomilor i particip direct la realizarea sintezei proteinetor,intervenind n translaie. ARN de #ran&$or# (ARN#! o Este implicat n activarea aminoacizilor din citoplasm i n transportarea lor la ribozomi unde are loc sinteza proteinelor. o Acesta are rolul de a transporta aminoacizii la locul sintezei proteice, n procesul de translaie a informatiei genetice. o A('t prezint o structur secundar asemntoare unei frunze de trifoi. Astfel molecula de A('t, cuprinde patru brae !regiuni bicatenare#, trei dintre ele fiind terminate cu bucle !regiuni monocatenare#. (egiunile bicatenare sunt determinate de formarea unor puni de "idrogen de tip A2 , i 3 2 1. o 4olecula de A('t prezint un bra acceptor de aminoacid, care conine secvena de legare a aminoacidului implicat n translaie. o $ucla / a moleculei de A('t conine anticodonul, adic o triplet de nucleotide, care recunoate codonul complementar din A('m cu care formeaz puni de "idrogen n timpul fixrii A('t pe complexul A('m ribozom. Acidul dezoxiribonucleic (A N! 4olecula de A&' este bicatenar, fiind format din dou lanuri polinucleotidice !catene#, nfurate elicoidal n 5urul unui ax comun, form%nd astfel un dublu "elix. Aceast structur bicatenar, a moleculei de A&', constituie structura secundar a ADN. 1ele, dou catene ale A&' sunt antiparalele o caten fiind orientat n sensul -0 /0, iar cealalt caten n sensul /0 -0. 6egturile secundare din molecula de A&' sunt reprezentate de legturile de "idrogen dintre bazele azotate ale celor dou catene, legturi care se stabilesc pe baz de complementaritate astfel: ntotdeauna o baza azotat purinic se leag de una pirimidinic i anume adenina se leag de timin prin dou puni de "idrogen, iar guanina se leag de citozin prin trei puni de "idrogen. &eci, cele dou catene ale moleculei de A&' sunt complementare. )n molecula de A&' exist patru tipuri de legturi: adenina timin, timina adenin, guanina citozin i citozina guanin. 6egturile triple dintre guanin i citozin confer o stabilitate mai mare, regiunilarA&' bogate n aceste baze azotate, dec%t celor bogate n aderiin i timin. Acest model structural al acidului dezoxiribonucleic are dou pr5i: o o parte fix !sc"elet#, reprezentat de pentoz i fosfat, care sunt dispuse la exteriorul "elixului+ o parte varibil reprezentat de baze azotate "idrofobe, care sunt dispuse n interiorul structurii. ena#urarea -i rena#urarea A N+ului o const n ruperea legturilor de "idrogen dintre perec"ile de baze azotate complementare i separarea celor dou catene ale A&' ului. Astfel prin denaturare A&' ul devine monocatenar. 7oi agenii fizici sau c"imici care determin conversia A&' bicatenar n A&' monocatenar sunt considerai ageni denaturani. &enaturarea A&' ului se realizeaz prin nclzirea moleculelor de A&', p%n la temperaturi relativ ridicate !cca. 89: 1#. ;rin rcirea brusc a soluiei, A&' ul rm%ne monocatenar !A&' denaturat#, iar dac soluia este rcit treptat, legturile de A&' se refac !A&' renaturat#, caz n care fenomenul se numete renaturare. 4oleculele de A&' care conin mai multe perec"i de guanin citozin, deci mai rimulte puni triple de "idrogen, denatureaz mai greu dec%t cele care conin mai multe perec"i adenin timin. <olosindu se un amestec de A&' manocatenar provenit de la specii diferite se pot realiza hibrizi

moleculari de ADN bicatenar. ;rin realizarea acestor "ibnzi de tip A&' A&', se poate determina gradul de complementaritate a nucleotidelor i astfel, nrudirea filogenetic a speciilor de la care provine A&' ul. 1u c%t speciile sunt mai nrudite, cu at%t renaturarea se realizeaz mai repede i ntr o proporie mai mare. =ibridarea molecular A&' A(' permite localizarea n A&'+ a genelor care determin sinteza diverselor tipuri de A('. .unc/iile A N. *unt dou: funcia autocatalitic i funcia "eterocatalitic. 1. .unc/ia au#oca#ali#ic" &au re$licarea A N0 (eplicarea A&' const n multiplicarea moleculelor de A&' i reprezint funcia autocatalitic a A&' ului. ;entru explicarea procesului de replieare al A&' ului au fost imaginate mai multe modele cum ar fi: replicarea conservativ conform creia moleculele noi de A&' se formeaz de novo prin asamblarea unor nucleotide libere+ replicarea semiconservativ, singura care a fost demonstrat experimental conform acestui model, A&' ul dublu catenar se desface n cele dou catene componente, care, fiecare n parte, servete drept matri pentru sinteza unei noi catene de A&', pe baz de complementaritate. &eoarece, fiecare molecul de A&' nou format !fiic# conine o caten din molecula parental i una nou sintetizat, procesul de replicare a fost denumit semiconservativ. Acest model de replicare semiconservativ asigur o mare acuratee, moleculele fiice fiind identice cu moleculele parentale, astfel informaia genetic se transmite fidel, fr modificri. o )n procesul procesul de replicare intervin mai multe tipuri de enzime: A N 1 #o$oizo)eraza taie i apoi leag catene de A&', permi%nd desrsucirea celor dou catene. A N 1 2elicaza desface punile de "idrogen dintre cele dou catene. *ro#eine de #i$ 33' !single > strand binding > protein+ proteine de desrsucire# se leag de a lungul unei catene !dup ce "elixul a fost desfcut# mpiedic%nd refacerea punilor de "idrogen i astfel prote5%nd catena de rsuciri ulterioare. ARN 1 $ri)aza sub aciunea lui se sintetizeaz un ARN 1 $ri)er alctuit din c%teva nucleotide. A N 1 $oli)eraza (III4 I! asigur ataarea de noi nucleotide. A N 1 li(aza leag fragmente de A&' !fragmente O?aza?i# gruparea /.O= a unui fragment cu fosfatul din poziia -. a celuilant fragment Exonucleaza ndeprteaz un nucleotid, o secven de nucleotide sau unele enzime o !inteza a dou catene noi are loc diferit pe cele dou catene matri, originale, deoarece enzima A&' polimeraza, implicat n polimerizarea nucleotidelor, poate ataa un nou nucleotid numai la captul /. liber al moleculei de pentoz. 4odelul acceptat n prezent este )odelul re$lic"rii di&con#inue propus de O?aza?i. o Ca#ena ,ec2e /. -. servete ca matri pentru sinteza unei catene complementare noi, catena -. /. denumit ca#en" leadin( !catena directoare sau catena principal#. &eoarece noua caten prezint liber captul /. O=, la care pot fi adugate noi nucleotide, sinteza sa are loc n mod continuu, sub aciunea enzimei A&' polimeraza, pe baza ordinii dictate de catena matri. o Ca#ena ini/ial" -. /. servete ca matri pentru sinteza unei catene complementare noi, catena /. -. denumit ca#en" la((in( !caten discontinu, segmentar sau nt%rziat#. &eoarece catena nou nu are liber captul /. O=, sinteza este discontinu, av%nd loc dup un alt mecanism de la furca de replicare spre captul liber al catenei, duc%nd la formarea de fragmente O?aza?i 5. .unc/ia 2e#roca#ali#ic" &au &in#eza $ro#eic"

*ro#einele ndeplinesc n celule, roluri structurale, intr%nd n alctuirea unor componente celulare i roluri funclionale, enzimele fiind proteine care catalizeaz diferite reacii c"imice ce au loc n celule. *inteza proteic este un proces prin care, la nivel celular, se formeaz proteinele necesare meninerii structurilor celulare i funcionrii celulei. Dogma central a geneticii moleculare consider c, n procesul de sintez proteic, informaia genetic din A&' este copiat n A(' i apoi este tradus n proteine. A N A(' $ro#eine

@nformaia genetic necesar sintezei de proteine se afl n moleculele de A&' din nucleu, de aceea scoaterea nucleului unei celule face imposibil realiz%rea sintezei de proteine n acea celul. *tudii comparative ale unor proteine normale i mutante au artat c, ntre secvena nucleotidelor din A&' i secvena de aminoacizi din molecula proteic exist o str%ns corelaie, fenomen numit colinearitate. Codul (ene#ic (eprezint legtura dintre succesiunea nucleotidelor dea lungul acizilor nucleici, care conin informaia genetic i succesiunea aminoacizilor de a lungul proteinelor. 1odul genetic este alctuit din AB de uniti de codificare numite codoni. 1odonul este alctuit din trei nucleotide succesive din macromolecula acizilor nucleici. <iecare codon are capacitatea de a determina includerea unui anumit aminoacid n catena proteic ce se sintetizeaz.
transcriere

A('m A('r A('t

translaie

A&'

proteine

3in#eza $ro#eic" Este un proces complex, ce se realizeaz n dou etape: transcripia i translatia. 7ranscripia 1onst n copierea infiomaiei genetice dintr o caten de A&' ntr o molecul de A('m. )n transcripie intervine enzima ARN polimeraza. &e asemenea, prin transcripie se sintetizeaz i moleculele de A('t i A('r, care, sunt necesare n procesul de sintez de proteine, &eci, sinteza moleculelor de A(' se realizeaz prin trasnscrierea informaiei genetice corespunztoare din A&'. Acest proces are loc n nucleu. "a eucariote, prin transcriere, este copiat, ntr o molecul de A('m, infomaia genetic coninut ntr o singur gen. *tructura genei la, eucariote este discontinu, gena fiind format din exoni !secvene informaionale# i introni !secvene noninformaionale#. Astfel: ini#ial, are loc sinteza unui A(' mesager precursor !A('pm#, care copiaz, gena, integral, cu introni si exoni+ ulterior, are loc procesul de maturare, a A('pm, prin eliminarea, intronilor, i ansamblarea exonilor, obin%ndu se A('m. ;entru aceasta molecula de A('pm este tiat de enzime specifice, iar ulterior, cu a5utorul ligazelor, sunt asamblai numai exonii. Astfel, se formeaz A('m matur care trece din nucleu n citoplasm. ;rocesul de maturare a A(' ului este necesar pentru a reduce dimensiunile moleculei i pentru a se asigura fidelitatea traducerii. ;rezena intronilor ar detemina includerea unor aminoacizi suplimentari n catena proteic, deci sinteza unei proteine diferite de cea codificat n informaia genetic din A&'. "a procariote, prin transcriere, este, copiat infonnaia genetic a mai multor gene. *tructura genei la procariote este continu !conine numai secvene informaionale#, ca urmare se sintetizeaz direct

A('m matur. 7ranslaia 1onst n traducerea mesa5ului genetic din A('m ntr o caten proteic. &eci, prin translaie, o secven din A('m este transformat ntr o secven de aminoacizi din catena polipeptidic ce se sintetizeaz. 7ranslaia se realizeaz n trei etape: ini#ierea sintezei, elongarea catenei proteice, terminarea sintezei proteice. 1. $ni#ierea sintezei proteice, etap n care se realizeaz activarea aminoacizilor existeni n cito plasm i formarea complexului ARN t% aminoacil, astfel aminoacizii !AA# sunt activai n urma reaciei cu molecula de A7; !donatoare de energie#, sub influena enzimelor aminoacil sintetaze. 1a urmare, aminoacidul se leag de adenozinmonofosfat !A4;#. AA 6 AT* 7AA8AM* 6 *8* ,lterior, aminoacizii activai sunt transferai la A('t, sub influena aminoacil sintetazelor, i se formeaz complexul A('t aminoacil. AA8AM* 6 ARN# 7ARN# 8 a)inoacil 7ot n aceast etap, A('m se fixeaz la ribozomi. A('m prezint un codon ini#ial, numit codon *7A(7 i un codon final, numit codon *7O;. 5. Elongarea catenei proteice const n formarea legturilor peptidice ntre aminoacizii a dou complexe A('tCaminoacil prezente la ribozom. <ormarea legturilor peptidice ntre aminoacizi este catalizat de enzima peptid polimeraza. ARN#1 8 a)inoacil 6 ARN#5 8 a)inoacil 7 a)inoacil 8 a)inoacil 6 ARN#1 6 ARN#5 9. Terminarea sintezei proteice const n eliberarea catenei polipeptidice de la ultimul A('t i di socierea ribozornului de A('m. 1oncluzie, &ei n celule sunt doar D9 de aminoacizi proteinogeni, prin asamblarea lor n moduri diferite se realizeaz sinteza unui numr foarte mare de proteine. ORGANIZAREA MATERIALULUI GENIETIC 1. Or(aninizarea )a#erialului (ene#ic la ,iru&uri Eirusurile sunt entiti infecioase, alctuite din nveli proteic numit capsid &i dintr un genom viral reprezentat de un singur tip de acid nucleic. )n funcie de acidul nucleic coninut n genom, virusurile se clasific n: ribo,iru&uri4 ce conin A('. 4oleculele de A(' pot fi: monocatenare ca de exemplu la virusul gripal i la virusul mozaicului tutunului '()* +, bicatenare nt%lnite la reovirusuri. dezoxiribo,iru&urii ce conin A&'. 4oleculele de A&' pot fi: monocatenare, ca de exemplu la bacteriofagul phi - ./0, bicatenare, la virusul herpetic. 5. Or(anizarea )a#erialului (ene#ic la $rocario#e ;rocariotele sunt organisme unicelulare, care nu au nucleu prevzut cu membran nuclear. 'u conin mitocondrii i aparat 3olgi. 4aterialul lor genetic formeaz nucleoidul4 dispus n citoplasm. &in categoria organismelor procariote fac parte bacteriile &i algele albastre1verzi. 1elula bacterian prezint la exterior un perete celular i o membran celular, ce delimiteaz la interior citoplasma. @n centrul celulei este dispus nucleoidul.

4aterialul genetic la procariote !bacterii# Este reprezentat de o molecul de ADN, dispus n citoplasm i care formeaz cromozomul unic bacterian, ce este fixat de membrana celular prin mezozom. 1romozomul bacterian are form circular, fiind reprezentat de o molecul de ADN dublucatenar, care este mpac"etat, prezent%nd cca -9 de bucle. $uclele sunt fixate prin FclemeG de A('. <iecare bucl prezint superrsuciri. 1romozomul bacterian conine cca D999 /999 de gene ce se transmit nlnuit, form%nd o singura grup de lin?age. 1elulele bacteriene pot avea i material genetic extranuclear !extracromozomul bacterian#, reprezentat de plasmide. *la&)idele sunt structuri extracromozomiale, separate fizic de cromnzomul bacterian i care se replic independent de acesta. ;lasmidele sunt molecule circulare de A&' bicatenar, care conin un numr redus de gene, cca A 8. Ele reprezint un minicromozom. )n celulele bacteriene pot fi prezente plasmide, cum ar fi: : %ac#orul . !factorul de sex#, conine gene care pot fi transferate unei alte celule bacteriene, av%nd rol n recombinarea genetic+ : %ac#orul R4 confer bacteriilor rezisten la antibiotice. &eci, plasmidele le confer bacteriilor caractere suplimentare, specifice, fapt ce mre&te heterogenitatea popula#iilor bacteriene &i au rol important n recombinarea genetic, determin%nd astfel creterea variabilitii genetice n cadrul speciei. =eterogenitatea populaiilor bacterine reprezint un avanta5 selectiv n adaptarea la mediu a acestora. &e asemenea, plasmidele sunt folosite ca vectori 2n ingineria genetic, n vederea realizrii unor molecule de A&' recombinat. 4aterialul genetic de la procariote este superior fa de cel de la virusuri prin existena materialului genetic suplimentar extracromozomial, reprezentat de plasmide i prin existena celor dou tipuri de acizi nucleici A&' i A(' , care dau posibilitatea realizrii proceselor de sintez proteic n celula bacterian. 9. Ma#erialul (ene#ic la eucario#e Eucariotele sunt organisme unicelulare sau pluricelulare, cu nucleu prevzut cu membran nuclear. &e asemenea conin mitocondrii i aparat 3olgi. 4aterialul genetic la eucariote estc reprezentat de: )a#erialul (ene#ic ex#ranuclear4 localizat n cloroplaste i mitocondrii. 4aterialul genetic extranuclear mitocondrial !A&'mit# i cel cloroplastic !A&'cp# sunt reprezentate de c%te o molecul de ADN, de form circular, )a#erialul (ene#ic nuclear4 situat n nucleu i reprezentat de acizi nucleici, ce formeaz cromatina nucleului. Cro)a#ina Este un lan flexibi, alctuit din nucleosomi, i reprezint forma interfazic a cromozomilor. 1romatina conine A&', A(', proteine "istonice i non"istonice, mici cantiti de lipide, ioni de calciu, de magneziu. 3roteinele histornice intr n structura nucleosomului, iar proteinele nonhistonice sunt activatori ai genelor. )n nucleul celulelor, cromatina prezint dou forme funcionale: "eterocromatina, forma inactiv, ce nu poate fi transcris n proteine, dar av%nd rol reglator al procesului de sintez proteic+ euero)a#ina4 forma activ, care este transcris n proteine. Eucromatina conine secvene unice. Ambele stri funcionale ale cromatinei sunt alternative i reversibile. 4odelul nucleosomal 1romatina are aspect de Firag de perleH n care, fiecare, FperlG reprezint un nucleosom. 'ucleosomul este elementul structural a. fibrei de cromatin. ,n nucleosom este fomat dintr un octamer histonic ce conine c%te dou molecule de: histona 45A, histona 456. 47 i 40. Acest

octamer "istonic !miez "istonic# formeaz un cilindru turtit, care este ncon5urat la exterior de dou inele de A&', formate din aproximativ IB9 D99 de nucleotide. )n structura fibrei de cromatin, nucleosomii sunt prini unii de alii prin intermediul unui segment de A&', numit A&' lin?er, care este complexat cu "istona =I. A&' lin?er este fomat din c%teva zeci de nucleotide. ;rin condensarea cromatinei, n timpul diviziunii celulare, se individualizeaz cromozomii, care se observ cel mai bine la microscop, n inetafaz. Cro)ozo)ul la eucario#e 1onine A&', A(', proteine "istonice i non"istonice, mici cantiti de lipide, ioni de calciu, de magneziu. A&' ul din structura cromozomului de la eucariote prezint: J &ec,en/e unice de nucleotide, cu rol informa#ional, n care sunt incluse genele i care se numesc exoni, J &ec,en/e re$e#i#i,e4 n care anumite nucleotide se repet i care formeaz intronii. @ntronii au rol n regla8ul genetic. A(' ul mesager precursor copiaz at%t exonii c%t i intronii, iar n urma procesului de maturare intronii sunt eliminai, are loc asamblarea exonilor i astfel se formeaz A(' ul mesager matur care conine doar secvene informaionale. Cro)ozo)ul )e#a%azic este format din dou molecule de ADN, numite cromatide. <iecare caten din structura unei molecule de A&' se numete cromonem. 1romozomul metafazic prezint o constric#ie primar numit centromer dispus n diferite poziii i care delimiteaz c%te dou brae, egale sau inegale, pentru fiecare cromatid. ,nii cromozomi metafazici prezint o constric#ie secundar ce delimiteaz satelii. 1apetele cromozomilor se numesc telomere. )n funcie de poziia centromerului, cromozomii metafazici pot fi clasificai n: J metacentrici, cu centromerul dispus la mi5locul cromatidelor i care delimiteaz dou brae egale pentru fiecare cromatid+ J submetacentrici, cu centromerul dispus submedial i care delimiteaz dou brae inegale pentru fiecare cromatid+ J acrocenirici !subtelocentrici#, cu centromerul dispus aproape de unul din capetele cromatidelor i care delimiteaz dou brae inegale pentru fiecare cromatid unul scurt i altul lung. Acetia pot prezenta constricii secundare, ce delimiteaz satelii+ J telocentrici, cu centromerul dispus terminal, cromatidele prezent%nd un singur bra#, lipsesc la om. Cro)ozo)ul in#er%azic4 at%t la procariote c%t i la eucariote, este alctuit dintr1o singur molecul de ADN. 6a ambele tipuri de organisme cromozomii sunt reprezentai de A&' dublucatenar. 6a procariote, cromozomii interfazici sunt reprezentai de A&' circular, pe c%nd la eucariote acesta este liniar. <ibra de cromatin de la eucariote are o structur c"imic complex i prezint niveluri de condensare i mpac"etare superioare materialului genetic de la procariote, av%nd un grad mai mare de stabilitate. &e asemenea, prezena, la eucariote, a cromozomilor sub form de perec"i i gradul superior de mpac"etare a acestora, confer o stabilitate mai mare a materialului genetic la aciunea factorilor mutageni. Deci, materialul genelic de la eucariote prezint o organizare superioar, comparativ cu cel de la procariote.