RISCURI DATORATE EXPUNERII LA AGENI BIOLOGICI

Organizaia Mondial a Sntii a recunoscut c riscurile biologice reprezint o problem importante pe plan internaional. La locurile de munc din unitile sanitare s-a constatat c principalul factor de risc este cel legat de expunerea la ageni biologici. Din punct de vedere al riscului biologic lucrtorii din unitile sanitare sunt cel mai frecvent expui la ageni biologici din grupele ! " i # care pot provoca $mbolnviri profesionale. %olile profesionale determinate de agenii biologici sunt boli transmise omului prin contactul cu surse de infecie sau infestaie $n timpul activitii profesionale. Lucrtorii din spitale sunt expui factorilor de risc biologic at&t prin contact nemi'locit cu pacientul c&t i risc de contaminare accidental i prin contact cu produsele biologice contaminate. (otrivit prevederilor )* nr. +,"-"++.! privind protecia lucrtorilor impotriva riscurilor legate de expunerea la ageni biologici $n munca! pentru orice activitate susceptibil sa prezinte un risc de expunere la ageni biologici! anga'atorul trebuie sa determine natura! nivelul i durata de expunere! pentru a se putea evalua orice risc pentru sntatea i securitatea lucrtorilor i pentru a se putea stabili msurile ce trebuie luate. /genii biologici sunt clasificati $n 0 grupe de risc! $n funcie de importanta riscului de infectie pe care $l prezint1 a2 grupa 1 (risc infecios individual sau comunitar sczut sau absent)- ageni biologici care nu sunt susceptibili sa provoace o boala la om3 microorganisme cu probabilitate minim de a provoca $mbolnvire la om sau animal. b2 grupa 2 (risc individual moderat, risc comunitar sczut) - ageni biologici care pot provoca o boala omului i constituie un pericol pentru lucrtori3 propagarea lor $n colectivitate este improbabila3 exista! $n general! o profilaxie sau un tratament eficace3 /geni patogeni care pot provoca $mbolnvire la om sau animal! dar este puin probabil s reprezinte un pericol sever pentru personalul de laborator! comunitate! faun sau mediu. 4xpunerile $n laborator pot cauza infecii severe dar pentru care exist tratament eficace i msuri profilactice! iar riscul de rsp&ndire al infeciei este limitat. c2 grupa 3(risc individual ridicat, risc comunitar sczut) - ageni biologici care pot provoca $mbolnviri grave la om i constituie un pericol serios pentru lucrtori3 ei pot prezenta un risc de propagare $n colectivitate! dar exista $n general o profilaxie sau un tratament eficace. /geni patogeni care $n mod obinuit provoac $mbolnvire sever la om sau animal! dar! de regul! nu se rsp&ndesc de la un individ infectat la altul. 4xist tratament eficace i msuri profilactice. d2 grupa 0 (risc individual i comunitar ridicat)- ageni biologici care pot provoca boli grave omului i constituie un pericol serios pentru lucrtori3 ei pot sa prezinte un risc ridicat de propagare $n colectivitate i nu exista $n general o profilaxie sau un tratament eficace. /geni patogeni care provoac! de regul! $mbolnvire sever la om sau animal i care se pot transmite spontan de la un individ la altul! direct sau indirect. 5u exist! $n general! tratament eficace i msuri profilactice. (otrivit *6idului naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale7 8traducerea i adaptarea $n limba rom&n a lucrrii 9Laborator: biosafet: manual7 ; ediia a <<<-a! Organizaia Mondial a Sntii! *eneva! "++0! completat cu 9=lasificarea agenilor biologici7 care reprezint traducerea /nexei <<< a Directivei"+++->0 a (arlamentului 4uropean i =onsiliului din data de ? Septembrie "+++! referitoare la prote'area lucrtorilor $mpotriva

riscurilor presupuse de expunerea la ageni biologici la locul de munc2 din punct de vedere al biosiguranei! laboratoarele se clasific astfel 1 - de baz - 5ivel de biosiguran - de baz - 5ivel de biosiguran " - securizat - 5ivel de biosiguran # - $nalt securizat - 5ivel de biosiguran 0 /ceast clasificare are la baz un complex de caracteristici ce se refer la proiectarea i construcia laboratorului! nivelul de securizare! dotarea cu ec6ipamente! practicile i procedurile operaionale pe care le implic manipularea microorganismelor din diferite grupuri de risc. @r a fi ex6austiv! tabelul de mai 'os prezint corespondena dintre grupul de risc $n care se $ncadreaz agentul biologic i nivelul de biosiguran al laboratorului $n care acesta se manipuleaz. Tabel 2. Relaia dintre grupurile de risc i nivelele de biosiguran Grup de risc 1 Nivel de biosiguran Tip de laborator Practici de laborator G$T Echipamente de protecie Nici un fel% suprafa de lucru deschis 'uprafa de lucru deschis plus *'+ pentru producerea eventual de aerosoli *'+ )i/sau alte dispozitive primare pentru toate activitile *'+ clasa a 222 a sau costum cu presiune pozitiv combinat cu *'+ clasa a 22 a# autoclav cu dou ci de acces 3transmural4# aer filtrat

De baz Nivel de !nvm"nt# biosiguran 1 cercetare De baz Nivel de 'ervicii de biosiguran & asisten primar% diagnostic# cercetare 'ecurizat Nivel de biosiguran , 'ervicii speciale de diagnostic# cercetare

&

G$T plus (mbrcminte de protecie )i semn de pericol biologic 'imilar cu nivelul & plus (mbrcminte special# acces controlat# flu. de aer direcionat 'imilar cu nivelul , plus intrare etan)# du) la ie)ire# eliminare special a de)eurilor

!nalt securizat Nivel de biosiguran 0

1niti pentru ageni patogeni periculo)i

*MA B *ood Microbiological Aec6niCues 8practici microbiologice corecte2 )S% B )ot de siguran biologic

&

OMS recomand elaborarea la nivel naional sau regional a unei clasificri a microorganismelor! pe baza grupurilor de risc! lu&nd $n considerare urmtoarele 1 . (atogenicitatea microorganismului. ". Modul de transmitere i tipul de gazd caracteristice microorganismului! elemente ce pot fi influenate de nivelul de imunitate al populaiei! densitatea i mobilitatea populaiei gazd! prezena vectorilor i de nivelul de igien a mediului. #. (osibilitile locale de aplicare a unor msuri preventive eficace. /cestea pot include 1 profilaxia prin imunizare activ 8vaccinare2 sau pasiv 8administrare de antiseruri imunoglobuline specifice23 aplicarea de msuri sanitare! ca de exemplu cele privind igiena alimentelor i a apei3 controlul rezervorului animal sau al vectorilor reprezentai de artropode. 0. (osibilitile de administrare a unor tratamente eficace. /cestea pot include1 imunizarea pasiv! vaccinrile postexpunere! folosirea de antibiotice! antivirale i ageni c6imioterapici! lu&nd $n considerare i posibilitatea emergenei de tulpini rezistente la acestea. Desemnarea nivelului de biosiguran pentru lucrul $n laborator trebuie s se bazeze pe evaluarea riscului. (entru stabilirea nivelului corect de biosiguran! evaluarea va lua $n considerare grupul de risc cruia $i aparine agentul biologic! dar i ali factori ce pot interveni. )* +,"-"++.! privind protecia lucrtorilor $mpotriva riscurilor legate de expunerea la ageni biologici $n munc pricizeaz la cap. D ; seciunea " msurile speciale aplicabile laboratoarelor unde sunt prezeni ageni biologici din grupele "! #! 0. (entru exemplificare! un agent biologic aparin&nd grupului de risc " necesit $n general localuri i utiliti! ec6ipamente! practici i proceduri pentru desfurarea $n siguran a activitilor caracteristice nivelului de biosiguran ". Dac totui anumite experimente sunt generatoare de aerosoli $n concentraii mari! nivelul de biosiguran # este mai indicat! asigur&nd un grad superior de limitare a aerosolilor la spaiul de lucru al laboratorului. /precierea nivelului de biosiguran necesar desfurrii unei anumite activiti este g6idat de 'udecata profesional bazat pe evaluarea riscului! i nu doar pe desemnarea mecanic a unui nivel de biosiguran a laboratorului dupa grupul de risc cruia $i aparine microorganismul patogen care urmeaz a fi manipulat En tabelul de mai 'os se prezint! conform *6idului naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale! principalele cerine pentru fiecare nivel de biosiguran. Rezumat al cerinelor nivelelor de biosiguran Nivel de biosiguran 2zolarea3a4 laboratorului !ncpere etan)abil pentru decontaminare 5entilaia6 flu. de aer direcionat spre interior sistem de ventilaie controlat evacuarea aerului prin filtre *EP7 2ntrare cu u) dubl 1 Nu Nu & Nu Nu , Da Da 0 Da Da

Nu Nu Nu Nu

De dorit De dorit Nu Nu
,

Da Da Da / Nu3b4 Da

Da Da Da Da

'as 3c4 'as cu du) 7nticamer 7nticamer cu du) Tratarea efluenilor 7utoclav6 !n institutie/cldire (n laborator cu acces dublu 3transmural4 *ote de siguran biologic 8apacitate de monitorizare a siguranei personalului 3e4 unde

Nu Nu Nu Nu Nu Da Nu Nu

Nu Nu Nu Nu Nu Da Nu Nu

Nu Nu Da Da / Nu3d4 Da / Nu3d4 Da De dorit De dorit

Da Da Da Nu Da Da Da Da

Nu Nu

De dorit Nu

Da De dorit

Da Da

3a4 2zolarea fizic )i funcional a laboratorului de circulaia general a personalului. 3b4 Depinde de locul de evacuare 3c4 Sas - Incint prevzut cu dou sau mai multe ui interpus ntre dou sau mai multe ncperi (de exemplu cu presiuni diferite) pentru a controla fluxul de aer ntre acestea. !n sas poate fi proiectat i utilizat fie pentru personal fie pentru materiale sau probe. 3d4 Depinde de agenii microbieni manipulai (n laborator. 3e4 De e.emplu# fereastr de vizualizare# sistem de supraveghere video# dou ci de comunicare !n consecin# stabilirea nivelului de biosiguran ia (n consideraie agentul biologic 3agentul patogen4 folosit# facilitile disponibile# echipamentele )i procedurile necesare desf)urrii activitii de laborator (n condiii de siguran. Evaluarea riscului biologic (entru orice activitate susceptibil sa prezinte un risc de expunere la ageni biologici! anga'atorul trebuie s determine natura! nivelul i durata de expunere! pentru a se putea evalua orice risc pentru sntatea i securitatea lucrtorilor i pentru a se putea stabili msurile ce trebuie luate. (entru toate activitile susceptibile de a prezenta un risc de expunere la ageni biologici aparin&nd mai multor grupe! riscurile sunt evaluate pe baza pericolelor reprezentate de ctre toi agenii biologici periculosi prezeni. /nga'atorul trebuie sa re$nnoiasc periodic evaluarea riscurilor i! $n orice caz! la orice modificare a condiiilor de lucru care pot sa determine expunerea lucrtorilor la ageni biologici! precum i atunci c&nd crete numrul bolilor profesionale pe care le-a $nregistrat. 4valuarea riscurilor profesionale se efectueaz pe baza tuturor informaiilor existente i! mai ales! pe baza1 a2 clasificarii agenilor biologici care constituie sau pot constitui un pericol pentru sntate3
0

b2 recomandrilor emise de inspectorii de munca i-sau de inspectorii autoritilor de sntate publica! ce indica necesitatea ca agentul biologic sa fie controlat $n scopul de a prote'a sntatea lucrtorilor care sunt sau pot fi expusi acestui agent biologic! $n cursul activitii lor3 c2 informaiilor asupra bolilor ce pot fi contractate datorit unei activiti profesionale a lucrtorilor3 d2 efectelor alergice i toxicogene ce pot sa rezulte ca urmare a activitii lucrtorilor3 e2 faptului ca un lucrator sufer de o boala legat direct de munca sa. Fnul din cele mai utile instrumente pentru evaluarea riscului biologic este listarea grupurilor de risc pentru agenii biologici! dar simpla referire la grupurile de risc este insuficient pentru evaluarea riscului. (entru realizarea unei evaluri a riscului biologic trebuie luai $n considerare urmtorii factori1 . (atogenitatea agentului infecios i doza infectant ". =onsecinele posibile ale expunerii #. =alea natural de infectare 0. /lte ci de transmitere! rezultate $n urma manipulrii $n laborator 8parenteral! aerian! ingerare2 >. Stabilitatea agentului infecios $n mediul extern .. =oncentraia agentului infecios i volumul de material concentrat ce se manipuleaz G. Disponibilitatea unei gazde adecvate-susceptibile 8umane sau animale2 ?. <nformaii disponibile din studii pe animale! raportri privind infecii dob&ndite $n laborator 8profesionale2 sau raportri de cazuri clinice ,. <ntenia de a utiliza anumite te6nici in laborator 8ultrasonarea! aerosolizarea! centrifugarea! etc2 +. Orice manipulare genetic a microorganismului care poate duce la extinderea gamei de gazde susceptibile sau poate modifica sensibilitatea acestuia la terapiile considerate eficace . /ccesul efectiv la msuri profilactice sau terapeutice eficace. (e baza informaiilor obinute prin evaluarea riscului! se stabilete nivelul de siguran biologic necesar desfurrii activitii planificate! se selecteaz ec6ipamentul corespunztor proteciei personalului i procedurile operaionale standard 8(OS2 ce vor include aspecte de siguran a muncii! cu scopul desfurrii activitii $n modul cel mai sigur posibil. Probe despre care e ist informaii limitate (rocedurile de evaluare a riscului descrise mai sus se aplic cu succes atunci c&nd dispunem de suficiente informaii. Sunt $ns situaii c&nd informaiile existente sunt insuficiente pentru a permite o evaluare corect a riscului! cum este cazul probelor clinice sau al celor epidemiologice colectate pe teren. En aceste situaii este prudent s se adopte o atitudine precaut $n manipularea probelor. . (recauiile standard trebuie respectate $ntotdeauna i se vor folosi barierele de protecie 8mnui! 6alate! protecie ocular2! ori de c&te ori probele provin de la pacieni. ". /plicarea practicilor i procedurilor pentru nivelul de biosiguran " trebuie s reprezinte cerina minim pentru manipularea probelor. #. Aransportul probelor trebuie s respecte regulile i reglementrile naionale i-sau internaionale. /numite informaii pot fi de mare a'utor pentru a uura determinarea riscului de manipulare a acestor probe 1 . Datele medicale privind pacientul ". Datele epidemiologice 8date de morbiditate i mortalitate! calea de transmitere suspectat! alte date privind investigarea focarului2 #. <nformaii privind originea geografic a probei.

3! "aboratoarele de baz # $ivelele de %iosiguran 1 i 2 *6idului naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale prezint cerinele minime pentru laboratoare clasificate pe toate nivelele de biosiguran! care manipuleaz microorganisme din *rupurile de risc -0. Dei unele precauii pentru anumii ageni biologici din *rupul de risc pot prea mai puin 'ustificate! se recomand aplicarea lor cu scopul $nsuirii i promovrii practicilor microbiologice corecte. Aoate laboratoarele medicale 8de sntate public sau de diagnostic clinic $n ambulatorii! spitale etc2 trebuie concepute conform unui 5ivel de biosiguran " sau peste. Deoarece nici un laborator nu are un control complet asupra probelor pe care le primete! personalul din laborator poate fi expus la microorganisme din grupuri de risc superioare celor anticipate. /ceast posibilitate trebuie luat $n considerare c&nd se elaboreaz planurile i politicile de biosiguran. De regul! precauiile standard trebuie adoptate i aplicate $ntotdeauna. (rezentm $n continuare regulile pentru laboratoarele de baz ; 5ivel de biosiguran i "! acestea fiind sunt cuprinztoare i fundamentale pentru toate laboratoarele! indiferent de nivelul de biosiguran. 1! &odul de practici /cest cod reprezint reguli i proceduri scrise pentru efectuarea $n siguran a operaiunilor $n laborator. @iecare laborator trebuie aib o list a celor mai importante practici i proceduri de laborator care stau la baza practicilor microbiologice corecte 8good microbiological tec6niCues B *MA2 s adopte un manual de siguran sau de operaiuni care s identifice pericolele cunoscute sau poteniale precum i procedurile i practicile specifice pentru eliminarea sau reducerea la minimum a acestor pericole. *MA sunt fundamentale pentru sigurana activitilor de laborator. 4c6ipamentul special de laborator este un element suplimentar! care nu va putea $ns niciodat s $nlocuiasc aplicarea procedurilor corecte. =ele mai importante concepte sunt enumerate mai 'os. 2. 'ccesul . Sigla internaional de avertizare i inscripia H(ericol biologicI 8@igura 2 trebuie s fie afiate pe uile $ncperilor unde sunt manipulate microorganisme aparin&nd grupului de risc " sau mai mare.

". 5umai persoanele autorizate vor fi lsate s intre $n zonele de lucru ale laboratorului. #. File laboratorului trebuie s stea $nc6ise. 0. =opiii nu trebuie autorizai sau lsai s intre $n zonele de lucru ale laboratorului. >. /ccesul $n biobaze trebuie s se fac numai pe baza unei autorizaii speciale. .. 5u se admite accesul altor animale $n afara celor folosite pentru activitile de laborator 3! Protecia individual a personalului . Salopetele de laborator! 6alatele sau uniformele trebuie purtate tot timpul c&t se lucreaz $n laborator.
:

". Mnui corespunztoare de protecie trebuie purtate $n timpul tuturor procedurilor care pot implica contactul direct sau accidental cu s&nge! cu alte umori sau fluide ale organismului! cu alte materiale potenial infecioase sau cu animale infectate. Dup utilizare! mnuile se scot aseptic i se spal m&inile. #. (ersonalul trebuie s se spele pe m&ini dup manipularea materialelor infecioase i a animalelor infectate i $nainte de prsirea zonei de lucru a laboratorului. 0. Oc6elarii de protecie! ecranele de protecie facial sau alte dispozitive de protecie trebuie purtate ori de c&te ori este necesar protecia oc6ilor i a feei de stropi! obiecte impactante i surse artificiale de radiaii ultraviolete. >. 4ste interzis purtarea $mbrcminii protectoare de laborator $n afara laboratorului! de exemplu $n cantine! camere de oficiu! biblioteci! toalete! etc. .. Enclmintea decupat $n partea din fa 8sandale2 este improprie purtrii $n laborator. G. =onsumul de alimente! buturi! mac6ia'ul i manipularea lentilelor de contact sunt interzise $n zonele de lucru ale laboratorului. ?. Depozitarea de alimente sau buturi oriunde $n zona de lucru a laboratorului este interzis. ,. Embrcmintea i $nclmintea de protecie ce a fost utilizat $n laborator nu trebuie s fie depozitat $n aceleai dulapuri cu $mbrcmintea i $nclmintea de strad. (! Procedurile . (ipetarea cu gura este strict interzis. ". 5ici un material nu trebuie dus la gur. 4tic6etele nu trebuie umectate cu limba $nainte de lipire. #. Aoate procedurile te6nice trebuie efectuate $ntr-un mod care s reduc la minimum formarea de aerosoli i picturi. 0. @olosirea acelor i seringilor 6ipodermice trebuie limitat. 4le nu trebuie folosite ca substituente ale dispozitivelor de pipetare sau pentru oricare alt manoper ce nu reprezint in'ecii parenterale sau aspirarea de fluide de la animalele de laborator. >. Aoate stropirile accidentale i expunerile evidente sau posibile cu material infecios trebuie raportate responsabilului laboratorului. Se va pstra o eviden scris a acestor accidente i incidente. .. Se va elabora i aplica o procedur scris pentru curarea-inactivarea substanelor vrsate. G. Lic6idele contaminate trebuie decontaminate 8c6imic sau fizic2 $naintea evacurii lor $n reeaua de canalizare. En funcie de riscul evaluat se poate dezvolta un sistem de tratare a acestor lic6ide. ?. Documentele ce urmeaz a fi scoase din laborator trebuie s fie prote'ate pe toat perioada c&t se afl $n laborator! pentru a nu fi contaminate. )! *onele de lucru ale laboratorului . En laborator trebuie pstrat curenia i ordinea! elimin&ndu-se toate materialele care nu sunt necesare pentru munca desfurat $n laborator. ". Suprafeele de lucru trebuie decontaminate dup fiecare vrsare de materiale potenial periculoase precum i la sf&ritul zilei de lucru. #. Aoate materialele contaminate! probele i culturile! trebuie decontaminate $nainte de a fi $ndeprtate sau curate pentru refolosire. 0. /mbalarea i transportul trebuie s respecte reglementrile naionale i-sau internaionale $n vigoare. >. @erestrele ce pot fi desc6ise trebuie prevzute cu plase-ecrane pentru insecte. +! &aracteristici de proiectare, . Arebuie asigurat un spaiu suficient pentru desfurarea $n siguran a muncii de laborator i pentru curenie i $ntreinere ". (ereii! tavanele i pavimentele trebuie s fie netede! uor de curat! impermeabile la lic6ide i rezistente la substanele c6imice i dezinfectantele folosite uzual $n laborator. (avimentele nu trebuie s fie alunecoase.
;

#. Suprafaa meselor de lucru trebuie s fie impermeabil la ap! rezistent la dezinfectante! acizi! baze! solveni organici i la cldur. 0. <luminatul trebuie s fie adecvat pentru desfurarea tuturor activitilor. Jeflexiile i strlucirile nedorite trebuie evitate. >. Mobilierul de laborator trebuie s fie rezistent. Spaiile desc6ise $ntre i sub mese! 6ote i ec6ipamente trebuie s fie accesibile pentru curenie. .. Arebuie prevzute spaii de depozitare adecvate pentru materialele de folosin imediat! prevenind astfel aglomerarea acestora pe mesele de lucru i $n spaiile libere dintre acestea. Arebuie! deasemenea! prevzute spaii suplimentare pentru depozitarea pe termen lung! localizate corespunztor $n afara zonelor de lucru. G. Arebuie asigurate spaii i faciliti adecvate pentru manipularea i depozitarea $n siguran asolvenilor! materialelor radioactive! a gazelor comprimate i lic6efiate. ?. (rocedurile care genereaz aerosoli se execut $n )ota de siguran biologic. File sunt meninute $nc6ise i marcate cu semne de pericol adecvate. Deeurile potenial contaminate sunt colectate separat de restul deeurilor. ?. Spaiile pentru pstrarea $mbrcminii i $nclmintei de strad i a obiectelor personale trebuie asigurate $n afara zonelor de lucru. ,. Spaiile pentru m&ncat! but i odi6n trebuie asigurate $n afara zonelor de lucru. +. =6iuvete cu ap curent pentru splarea m&inilor trebuie s existe $n fiecare $ncpere a laboratorului! preferabil l&ng ua de ieire. . File trebuie s aib geamuri sau vizoare! s fie conforme cu normele de protecie contra incendiilor i! de preferat! s se $nc6id singure. ". (entru 5ivelul de biosiguran " trebuie ca un autoclav sau alte mi'loace de decontaminare s fie accesibile $n imediata apropiere a laboratorului. #. Sistemele de securitate trebuie s cuprind protecia $mpotriva focului! urgenelor electrice! s prevad duuri de urgen i faciliti pentru splarea oc6ilor. 0. Arebuie s existe zone sau camere de prim a'utor ec6ipate adecvat i accesibile. >. La proiectarea de faciliti noi! trebuie luat $n considerare asigurarea de sisteme mecanice de ventilaie! care s asigure un flux de aer direcionat spre interior! fr recirculare. Dac nu exist ventilaie mecanic! ferestrele trebuie s se poat desc6ide i trebuie prevzute cu plase $mpotriva ptrunderii insectelor. G. Arebuie s existe o surs sigur i adecvat de curent electric i un sistem de iluminare pentru situaiile de urgen care s faciliteze ieirea din laborator. Fn generator de rezerv este de dorit pentru susinerea ec6ipamentelor eseniale 8incubatoare! 6ote de biosiguran! congelatoare! etc.2 i pentru ventilarea cutilor cu animale. ?. Arebuie s existe o surs sigur i adecvat de gaz. %una $ntreinere a instalaiei este obligatorie. -! .c/ipamentele de laborator Empreun cu procedurile i practicile corecte! utilizarea ec6ipamentelor contribuie la reducerea riscului. En continuare prezentm principiile de baz legate de ec6ipamentele utilizate $n laboratoare. 4c6ipamentul trebuie1 . S fie conceput astfel $nc&t s previn sau s limiteze contactul dintre operator i materialul infecios. ". S fie confecionat din materiale impermeabile la lic6ide! rezistente la coroziune i corespunztoare ca structur. #. S fie confecionat astfel $nc&t s nu aib asperiti! margini ascuite i pri mobile neprote'ate. 0. S fie proiectat! construit i instalat pentru a facilita operarea simpl i $ntreinerea! curarea! decontaminarea i testarea $n vederea certificrii3 ori de c&te ori este posibil! se va evita utilizarea sticlriei i a altor materiale casante. 0! .c/ipamente eseniale pentru asigurarea securitii i sntii lucrtorilor . Dispozitive de pipetare! pentru a evita pipetarea cu gura. Sunt disponibile diverse modele. ". )otele de biosiguran! ce trebuie folosite ori de c&te ori1
<

se manipuleaz materiale infecioase3 aceste materiale pot fi centrifugate $n spaiul desc6is al laboratorului dac se folosesc cupe de centrifug cu dispozitiv de securizare i dac sunt introduse i descrcate $ntr-o 6ot de biosiguran - exist risc crescut de infecii aerogene - se folosesc proceduri cu potenial ridicat de producere de aerosoli1 centrifugarea! mo'ararea! secionarea! agitarea sau mixarea viguroas! dezintegrarea sonic! desc6iderea containerelor cu material infecios cu presiune intern diferit de presiunea ambiant! inocularea intranazal a animalelor i recoltarea de esuturi infectate de la animale i ou! etc. #. /nse de transfer de unic folosin din plastic. /lternativ! $n scopul reducerii producerii de aerosoli! $n interiorul 6otei de biosiguran se pot folosi incineratoare electrice pentru anse de transfer. 0. Auburi i flacoane cu capace prevzute cu filet. >. /utoclave sau alte mi'loace folosite pentru decontaminarea materialului infecios. .. (ipete (asteur de unic folosin din plastic! ori de c&te ori este posibil! evit&nd utilizarea celor din sticl. G. 4c6ipamentele precum autoclavele i 6otele de biosiguran trebuie validate cu metode adecvate $nainte de a fi introduse $n uz. /cestea trebuie recertificate la intervale regulate de timp! $n acord cu instruciunile productorului. 1! 2upraveg/erea strii de sntate a personalului @iecare lucrator sa fie supraveg6eat medical corespunztor $nainte de expunere profesional i! $n continuare! periodic! fc&nd astfel posibila aplicarea directa a msurilor de medicina general i de medicina muncii. /nga'atorul este responsabil de asigurarea unei supraveg6eri adecvate a strii de sntate a personalului laboratorului. Obiectivul acestei supraveg6eri este monitorizarea strii de sntate $n relaie cu factorul ocupaional. /ctivitile ce trebuie desfurate pentru $ndeplinirea acestor obiective sunt1 . <munizarea activ i pasiv ori de c&te ori acest lucru este indicat 8vezi /nexa 0din )* +,"-"++.2. ". @acilitarea depistrii precoce a infeciilor dob&ndite $n laborator. #. 4xcluderea indivizilor cu susceptibilitate crescut! ca de exemplu femeile $nsrcinate sau persoanele imunodeprimate! din locurile sau activitile de laborator cu periculozitate crescut. 0. /sigurarea personalului cu ec6ipamente de protecie i proceduri eficace. 13! 4nformarea i instruirea lucrtorilor 4rorile umane i te6nica deficitar pot compromite i cele mai bune reguli i bariere de siguran menite a prote'a personalul laboratorului. (e de alt parte! un personal contient de exigenele impuse de regulile de protecie! bine informat pentru recunoaterea i stp&nirea pericolelor din laborator! este c6eia prevenirii producerii acestor infecii! a incidentelor i accidentelor. En acest scop! instruirea continu la locul de munc privind msurile de prevenire i protecie este esenial. Fn program eficace de siguran $ncepe cu conducerea laboratorului! care trebuie s se asigure c practicile i procedurile de protecie sunt integrate $n instruirea de baz a salariailor. <nstructa'ul $n ceea ce privete msurile de prevenire i protecie trebuie s fie parte integrant a instruirii noilor lucrtori din laborator. <nstruirea lucrtorilor ar trebui s cuprind $ntotdeauna informaii despre metodele sigure $n cazul procedurilor cu risc crescut! cu care $ntreg personalul laboratorului se $nt&lnete $n mod curent i care implic 1 . Jiscul de in6alare 8ex. producerea de aerosoli2 cu ocazia folosirii anselor! $nsm&nrii plcilor! pipetrii cu gura! etalrii frotiurilor! desc6iderii recipientelor ce conin culturi! recoltrii de probe de s&nge - ser! centrifugrii! etc. ". Jiscul de ingerare! cu ocazia manipulrii probelor! frotiurilor i culturilor. #. Jiscul de expunere percutan! prin folosirea seringilor i acelor.
=

0. Mucturi i zg&rieturi $n cazul manipulrii animalelor. >. Manipularea s&ngelui i a altor produse patologice potenial periculoase. .. Decontaminarea i eliminarea materialelor infecioase. 11! 5anipularea deeurilor Se consider deeuri toate materialele care se arunc. En laboratoare! $n desfurarea activitii cotidiene! decontaminarea deeurilor i eliminarea final a acestora sunt str&ns legate. Fn numr foarte mic de materiale contaminate necesit $ndeprtarea efectiv din laborator sau distrugerea. Ma'oritatea sticlriei! instrumentelor i articolelor de $mbrcminte sunt refolosite sau reciclate. (rincipiul general ce trebuie s funcioneze este c toate materialele infecioase vor fi decontaminate! autoclavate sau incinerate $n laborator. (rincipalele probleme care se pun! $nainte de eliminarea oricriu obiect sau material din laboratoarele ce lucreaz cu microorganisme potenial infecioase sau esuturi de la animale sunt1 . /u fost obiectele sau materialele respective eficient decontaminate sau dezinfectate printr-o procedur autorizatK ". Dac nu! au fost ele ambalate $ntr-un mod autorizat pentru incinerare imediat la faa locului sau pentru transfer $ntr-o alt locaie cu posibiliti de incinerareK #. /runcarea obiectelor sau materialelor decontaminate implic eventual alte pericole adiionale! biologice sau de alt tip! pentru cei care $ndeplinesc procedurile de eliminare sau care ar putea veni $n contact cu obiectele eliminate $n afara perimetrului respectivK 12! 6econtaminarea /utoclavarea cu abur este metoda de elecie pentru toate procesele de decontaminare. Materialele care urmeaz s fie decontaminate i eliminate vor fi puse $n containere adecvate 8ex. saci din plastic autoclavabil! cu coduri de culori care indic destinatia coninutului acestora pentru autoclavarei-sau incinerare2. (ot fi luate $n consideraie i metode alternative doar dac acestea $ndeprteaz i-sau omoar microorganismele. Procedurile de manipulare i eliminare a materialelor contaminate i a deeurilor Arebuie adoptat un sistem de identificare i de separare a materialelor infecioase i a containerelor respective. Dor fi obligatoriu respectate reglementrile naionale i internaionale $n domeniu. =ategoriile care se includ sunt urmtoarele1 . Deeurile necontaminate 8neinfecioase2 care pot fi refolosite! reciclate sau eliminate ca deeuri generale sau mena'ere ". Obiectele ascuite 8tietoare-$neptoare2 contaminate 8ex. ace 6ipodermice! bisturie! cuite i cioburi de sticl23 acestea vor fi $ntotdeauna colectate $n containere rezistente la $nepare-tiere! prevzute cu capace i vor fi tratate ca infecioase. #. Materialul contaminat destinat decontaminrii prin autoclavare urmat de splare i refolosire sau reciclare. 0. Materialul contaminat destinat autoclavrii i eliminrii. >. Materialul contaminat destinat incinerrii directe. Obiectele ascuite Dup utilizare! acele 6ipodermice nu trebuie reacoperite! tiate sau detaate din seringile de unic folosin. Entregul ansamblu trebuie plasat $n containerul pentru obiecte ascuite. Seringile de unic folosin! folosite separat sau cu ace! trebuie plasate $n containere i incinerate! cu autoclavare prealabil dac este necesar. =ontainerele pentru obiecte ascuite 8tietoare-$neptoare2 trebuie s fie rezistente la $nepare tiere i nu trebuie umplute la capacitatea maxim. =&nd sunt umplute pe L! aceste containere trebuie plasate $n containere pentru Hdeeuri infecioaseI i incinerate! cu autoclavare prealabil dac practica laboratorului o necesit. =ontainerele pentru obiecte tietoare-$neptoare nu trebuie aruncate $n mediul $ncon'urtor. Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate autoclavrii i refolosirii Se interzice curarea prealabil a oricrui material contaminat 8potenial infecios2 destinat autoclavrii i refolosirii. Orice curare sau reparaie trebuie fcut doar dup autoclavare sau dezinfecie.
1>

Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate eliminrii En afar de obiectele tietoare-$neptoare! care au fost tratate mai sus! toate materialele contaminate 8potenial infecioase2 trebuie autoclavate $n containere etane! de exemplu saci de plastic autoclavabil! colorai conform codurilor de culori! $nainte de a fi eliminate. Dup autoclavare! materialul poate fi plasat $n containere de transfer ctre incinerator. Dac este posibil! materialele rezultate din activitile de asisten medical nu trebuie eliminate $n mediul extern! la rampele de depozitare a deeurilor! nici dup decontaminare. Dac exist un incinerator disponibil la nivelul laboratorului! autoclavarea se poate omite1 deeurile contaminate trebuie plasate $n containere speciale 8de exemplu! saci cu culori corespunztoare unui cod2 i transportate direct la incinerator. =ontainerele de transfer refolosibile trebuie s nu prezinte scurgeri i s aib capace etane. Jecipiente de colectare! preferabil incasabile! trebuie plasate la fiecare punct de lucru. =&nd se folosete un dezinfectant! deeurile materiale trebuie s rm&n $n contact direct cu acesta 8ex. neprote'ate de bule de aer2 un interval de timp corespunztor! $n conformitate cu instruciunile de folosire a dezinfectantului utilizat. =ontainerele de colectare i transport vor fi decontaminate i splate $nainte de refolosire. <ncinerarea deeurilor contaminate trebuie s se fac $n conformitate cu prevederile autoritilor de sntate public i de protecie a mediului.

Laboratorul e ba!" # Nivel e Biosigura$%" &' C(estio$ar )e$tru evaluarea laboratorului Ele*e$t evaluat Laborator 'emnalizare adecvat pentru sursele de 15# laser# surse de radioactivitate#etc 2nscripionare/marcare corect a echipamentelor6 risc infecios# radioactivitate# to.icitate Proiectarea laboratorului 8onceput pentru a fi u)or de curat 8omutator alternativ cu lumina pentru sursele de 15 din (ncperi# accesibil )i din e.terior ?i.area solid a tuturor eta@erelor / rafturilor +laturile meselor sunt impermeabile pentru ap )i rezistente la acizi# baze# solveni organici )i temperaturi ridicate 2luminare adecvat E.istena unor spaii de depozitare adecvate )i corect utilizate Cili$ ri cu ga!e Toi cilindrii cu gaze sunt pstrai (n condiii de siguran
11

Da

Nu

Nu e Observa%ii ca!ul

8ilindrii de rezerv sunt pstrai cu capacele de siguran montate Gazele asfi.iante )i/sau periculoase sunt utilizate doar (n incinte cu ventilaie suplimentar Substa$%e c(i*ice 'ubstanele chimice inflamabile sunt depozitate (n (ncperi special destinate acestora 'ubstanele generatoare de pero.izi sunt inscripionate cu data intrrii )i data deschiderii 'ubstanele chimice sunt pstrate separat# pe categorii 'ubstanele chimice periculoase sunt depozitate la un nivel superior nivelului ochilor. E.istena de substane chimice depozitate pe pardoseal E.istena de containere cu substane chimice neacoperite Toate soluiile sunt etichetate corect A 'e folosesc termometre cu mercur A +rigi ere , co$gelatoare, ca*ere -rigori-ice 'unt prezente (n ele alimente pentru consum uman Prezena etichetelor e.terne de avertizare pe echipamentele care conin substane carcinogene# radioactive# to.ice# )i/sau elemente care implic pericol biologic. 8amerele frigorifice sunt prevzute cu dispozitive de siguran care s permit deschiderea u)ilor din interior Ec(i)a*e$t electric Prezena de cabluri prelungitoare (ntre echipament )i priz Prize )i aparate cu (mpm"ntare E.istena de conectri electrice (n apropierea chiuvetelor# sub du)uri# etc
1&

E.istena de echipamente cu cabluri electrice care prezint semne de deteriorare E.istena de prize sau conductori electrici suprasolicitai E.istena de cabluri electrice montate pe pardoseal E.istena de sigurane electrice adecvate (n circuite Prizele electrice plasate l"ng surse de ap respect reglementrile naionale E.istena de cabluri electrice cu (mpm"ntare E.istena de surse de (nclzire electrice mobile (n (ncperi Ec(i)a*e$t e )rotec%ie i$ ivi ual" )e$tru )erso$al Posibilitatea efecturii lava@ului ocular (n laborator E.istena du)urilor de siguran Echipament de protecie individual disponibil 6 mnu)i# halate# ochelari Purtarea corect a echipamentului de protecie 3halate# )oruri# bonet# etc4 Echipamentul de protecie individual nu este purtat (n afara laboratorului DE.EURI E.istena de indicii care probeaz depozitarea incorect a de)eurilor De)eurile sunt sortate )i depozitate (n containere separateA E.istena de containere cu de)euri chimice etichetate# marcate# datate )i pstrate (nchise 8ontainerele cu de)euri chimice sunt manipulate )i depozitate corect A 8ontainerele pentru obiecte (neptoare/ tietoare sunt utilizate )i (ndeprtate (n mod corect A Pardoseala nu prezint urme de de)euri Procedurile de (ndeprtare a de)eurilor sunt afi)ate (n laborator
1,

Securitate /i s"$"tate 0$ *u$c" ' a fcut informarea riscurilor la care sunt e.pu)i lucrtorii la locul de munc 7sigurarea proteciei cilor respiratorii 7sigurarea proteciei auzului $onitorizarea formaldehidei $onitorizarea etilen dio.idului $onitorizarea gazelor anestezic Co$troale te($ice ge$erale ?lu.ul de aer din laborator nu este orientat ctre celelalte sectoare de activitate# coridoare# oficiu# vestiar# birouri E.ist chiuvete )i sifoane de pardoseal ce permit refularea aerului din canalizare A 'unt disponibile chiuvete pentru splarea m"inilor oriunde trebuie A Practici /i )roce uri ge$erale 'e pstreaz alimente pentru consumul uman (n aria laboratorului A 8uptoarele cu microunde din laborator sunt (n mod clar etichetate6 BDoar pentru uz de laborator. Este interzis prepararea alimentelorCD 8onsumul de alimente )i buturi# fumatul# aplicarea de cosmetice (n incinta laboratorului Eecipientele de sticl aflate sub presiune sunt prote@ate Este interzis pipetarea cu gura E.ist )i sunt folosite dispozitive mecanice de pipetare !mbrcmintea de protecie pentru laborator este pstrat separat de (mbrcmintea de strad Gos)o "rirea ge$eral" a laboratorului E.istena unor recipiente de sticl pstrate
10

pe pardoseal 'e constat erori evidente potenial periculoase E.istena unor materiale absorbante curate disponibile la posturile de lucru 8ioburile de sticl sunt manipulate cu mi@loace mecanice6 perie# fra)# pens

Laboratorul e ba!" # Nivel e Biosigura$%" 1' C(estio$ar )e$tru evaluarea laboratorului Ele*e$t evaluat 2ota e Biosigura$%" 32SB4 Laboratorul 7cces limitat / restricionat. Permisiune de a intra doar pentru personalul laboratorului 7cces limitat doar pentru personalul avizat asupra tuturor pericolelor poteniale 'igla de Pericol biologic este afi)at (n mod corespunztor pe u)a laboratorului 'igla )i informaiile sunt lizibile )i nedeteriorate Toate u)ile sunt meninute (nchise Deco$ta*i$area Decontaminanii utilizai sunt activi asupra agenilor microbieni manipulai (n laborator Toate accidentele )i (mpr)tierile 3stropiri# deversri4 care implic material infecios sunt raportate )efului de laborator ?olosirea unor decontaminani adecvai pentru neutralizarea materialului infecios (mpr)tiat 'uprafeele de lucru sunt decontaminate (nainte )i dup fiecare procedur# zilnic )i dup fiecare (mpr)tiere accidental 5a$i)ularea e/eurilor co$ta*i$ate 8ontainerele pentru de)euri potenial
19

Da

Nu

Nu e Observa%ii ca!ul

infecioase sunt folosite corect 8ontainerele pentru de)euri potenial infecioase nu sunt umplute p"n la refuz 8ontainerele pentru de)euri potenial infecioase sunt corect etichetate )i (nchise 8ulturile )i de)eurile obi)nuite sunt decontaminate corect (nainte de evacuare $aterialele care se decontamineaz (n afara laboratorului sunt transportate (n containere etan)e#(nchise )i rezistente# (n concordan cu procedurile locale )i reglementrile legale De)eurile mi.te sunt decontaminate din punct de vedere biologic (nainte de a fi eliminate ca de)euri chimice )i/sau radiologice Protec%ia )erso$alului Personalul laboratorului este informat periodic asupra imunizrilor/testrilor corespunztoare agenilor biologici manipulai E.amene medicale periodice# supraveghere )i tratament pentru e.punerile profesionale prin servicii de medicina muncii $aterialele )i echipamentele contaminate biologic se manipuleaz cu mnu)i Protecia feei ori de c"te ori se lucreaz cu material contaminat biologic (n afara hotelor 'plarea m"inilor 6 dup (ndeprtarea mnu)ilor dup lucrul cu ageni infecio)i (nainte de a prsi laboratorul 'unt disponibili ageni antimicrobieni pentru un prim a@utor prompt Practici /i )roce uri ge$erale 'e pstreaz alimente pentru consumul uman (n aria laboratorului A 8uptoarele cu microunde din laborator sunt (n mod clar etichetate6 BDoar pentru uz de laborator. Este interzis prepararea alimentelorCD
1:

8onsumul de alimente )i buturi# fumatul# aplicarea de cosmetice (n incinta laboratorului Eecipientele de sticl aflate sub presiune sunt prote@ate Este interzis pipetarea cu gura E.ist )i sunt folosite dispozitive mecanice de pipetare !mbrcmintea de protecie pentru laborator este pstrat separat de (mbrcmintea de strad +rigi ere , co$gelatoare, ca*ere -rigori-ice 'unt prezente (n ele alimente pentru consum uman Prezena etichetelor e.terne de avertizare pe echipamentele care conin substane carcinogene# radioactive# to.ice# )i/sau elemente care implic pericol biologic. 8amerele frigorifice sunt prevzute cu dispozitive de siguran care s permit deschiderea u)ilor din interior Ec(i)a*e$t electric Prezena de cabluri prelungitoare (ntre echipament )i priz Prize )i aparate cu (mpm"ntare )i polaritate corecte E.istena de conectri electrice (n apropierea chiuvetelor# sub du)uri# etc E.istena de echipamente cu cabluri electrice care prezint semne de deteriorare E.istena de prize sau conductori electrici suprasolicitai E.istena de cabluri electrice montate pe pardoseal E.istena de sigurane electrice adecvate
1;

(n circuite Prizele electrice plasate l"ng surse de ap respect reglementrile naionale E.istena de cabluri electrice cu (mpm"ntare E.istena de surse de (nclzire electrice mobile (n (ncperi Ec(i)a*e$t e )rotec%ie i$ ivi ual" )e$tru )erso$al Posibilitatea efecturii lava@ului ocular (n laborator E.istena du)urilor de siguran Echipament de protecie individual disponibil 6 mnu)i# halate# ochelari Purtarea corect a echipamentului de protecie 3halate# )oruri# bonet# etc4 Echipamentul de protecie individual nu este purtat (n afara laboratorului 5a$age*e$tul e/eurilor E.istena de indicii care probeaz depozitarea incorect a de)eurilor De)eurile sunt sortate )i depozitate (n containere separateA E.istena de containere cu de)euri chimice etichetate# marcate# datate )i pstrate (nchise 8ontainerele cu de)euri chimice sunt manipulate )i depozitate corect A 8ontainerele pentru obiecte (neptoare/ tietoare sunt utilizate )i (ndeprtate (n mod corect A Pardoseala nu prezint urme de de)euri Procedurile de (ndeprtare a de)eurilor sunt afi)ate (n laborator

.c/ipamente de munc i ec/ipamente individuale de protecie la locul de munc! (otrivit art. # din )* 0.-"++. anga'atorul este obligat sa ia msurile necesare pentru ca ec6ipamentul de munca pus la dispoziia lucrtorilor sa corespund lucrului prestat ori sa fie adaptat acestui scop i sa poat fi utilizat de ctre lucrtori! fr a pune $n pericol securitatea sau sntatea lor. La alegerea ec6ipamentelor de munca pentru asigurarea securitii i sntii lucrtorilor! anga'atorul este obligat sa acorde o atentie deosebita tuturor condiiilor de munca! caracteristicilor specifice acestora! precum i riscurilor existente! $n special la locurile de
1<

munca din cadrul unitii! i-sau riscurilor care sunt susceptibile sa apara la utilizarea ec6ipamentelor de munca. Deoarece aerosolii reprezint o important surs de infecie, trebuie luate msuri pentru a reduce formarea i rspndirea acestora. Aerosoli periculoi pot aprea n cursul unor variate operaiuni de laborator, de ex: amestecare, triturare, agitare, ultrasonare, centrifugare de material infecios. abelul de mai !os conine o list a ec"ipamentelor destinate eliminrii sau reducerii unor pericole i definete succint caracteristicile lor de siguran.

Echipament #ot de securitate biologic

Pericole vizate Aerosoli i stropi

Caracteristici care confer siguran $lux minim de aer orientat spre interiorul "otei de la nivelul fantei de acces pentru lucru %vitez redus de acces frontal al aerului& $iltrare adecvat a aerului eliminat (ivel maxim de securizare

'zolator din folie flexibil cu presiune negativ )cran de protecie Dispozitive de pipetare

Aerosoli i stropi *tropi de substane c"imice +ipetarea cu gura, %ingestia de patogeni, in"alarea de aerosoli produi prin aspirarea cu pipeta, picurarea de lic"id, contaminarea captului de suciune al pipetei & *tropi din ansele de transfer

)cran ntre operator i aria de lucru ,or de folosit. -ontrolul contaminrii captului de suciune al pipetei, prote!nd utilizatorul, dispozitivul de pipetare i instalaia de vacuum. *e poate steriliza. )vit scurgerile din pipet. Arztorul cu gaz sau electric este introdus ntr/un tub de sticl sau ceramic, desc"is la gur Ansele de unic folosin nu impun tratament termic 0ecipient impermeabil nc"is cu capac 0obustee mecanic Autoclavabil

.icroarztoare pentru anse Anse de unic folosin

0ecipiente sigure pentru colectarea i transportul materialelor infecioase n vederea sterilizrii -ontainere pentru obiecte tietoare1

Aerosoli, mprtiere i scurgere

0ni prin nepare.

1=

Autoclavabil. 0obust, rezistent la nepare1tiere

neptoare -ontainere de transport ntre laboratoare sau instituii. -ontaminare accidental cu microorganisme 0obust. -ontainere primare i secundare impermeabile pentru lic"ide -onin materiale absorbante pentru reinerea lic"idelor vrsate. *terilizare eficace prin cldur

Autoclave manuale sau automate

.ateriale infecioase %decontaminare n vederea eliminrii sau reutilizrii& Aerosoli i scurgeri -ontaminarea cu aerosoli sau lic"ide a sistemului de vacuum al laboratorului

0ecipiente cu capac nurubat Dispozitiv de protecie a instalaiei de vid

*ecurizare eficace $iltre tip cartu pentru a mpiedica trecerea de aerosoli %mrimea particulelor cu dimensiunea de 2,34 m&. 0ecipiente cu dezinfectante adecvate, utilizate drept 5 capcane de vid 6. Dispozitiv de cauciuc %supap& pentru a nc"ide automat vacuumul cnd recipientul este plin. 7ntreg dispozitivul este autoclavabil

7otele de siguran biologic1 )otele de siguran biologic 8)S%2 sunt destinate a prote'a operatorul! mediul din laborator i materialele de lucru fa de expunerea la aerosoli i picturi care se pot produce $n cursul manipulrii materialelor conin&nd ageni infecioi! cum ar fi culturile primare! tulpinile de colecie i probele de diagnostic. /erosolii sunt produi de orice activitate care determin apariia de miniparticule sau stropi de material lic6id sau semilic6id! cum ar fi agitarea! turnarea! amestecarea sau picurarea unui lic6id pe o suprafa sau $ntr-un alt lic6id. /ctivitile de laborator precum $nsm&narea plcilor de agar prin efectuarea de striuri paralele! inocularea flacoanelor de culturi de celule cu o pipet! folosirea unei pipete monosau multicanal pentru a distribui suspensii de ageni infecioi $n plci de microcultur! efectuarea de diluii $n tuburi sau plci! omogenizarea i agitarea prin producerea de v&rte' a materialelor infecioase! centrifugarea lic6idelor contaminate sau manipularea animalelor! pot genera aerosoli infecioi. (articulele de aerosoli cu diametrul sub > Mm i picturile mici! cu diametrul de >- ++ Mm nu sunt vizibile cu oc6iul liber. Ae6nicianul de laborator nu este! $n general! avertizat asupra formrii acestor particule i asupra faptului c ele pot fi in6alate sau pot contamina suprafee i materiale. )S%! folosite corect! sunt foarte eficiente $n reducerea frecvenei infeciilor dob&ndite $n laborator! evit contaminarea $ncruciat a culturilor prin expunere la aerosoli i prote'eaz mediul. 6ispozitive de pipetare
&>

Dispozitivul de pipetare trebuie folosit $ntotdeauna atunci c&nd se pipeteaz. .ste strict interzis pipetarea cu gura! <mportana dispozitivelor de pipetare nu trebuie subapreciat. =ele mai frecvente pericole asociate cu pipetarea sunt rezultatul aspirrii cu gura. /spirarea i ingestia de materiale sunt cunoscute a fi cauza a numeroase infecii de laborator. *ermeni patogeni mai pot fi transferai i prin degete contaminate puse pe captul de suciune al pipetei. Fn risc mai puin cunoscut este in6alarea de aerosoli rezultai prin aspirare. Fn dop de vat nu constituie un filtru microbian eficace la presiune negativ sau pozitiv i anumite particule pot trece prin el. Fn dop de vat prea dens poate determina o pipetare violent! urmat de aspirarea dopului! a unor aerosoli i c6iar a lic6idului. <ngestia de patogeni este evitat prin folosirea dispozitivelor de pipetare. /erosoli se mai pot forma i prin picurarea unui lic6id din pipet pe suprafaa de lucru! prin aspirare i barbotare sau c&nd se sufl ultima pictur din pipet. <n6alarea aerosolilor a cror producere nu poate fi evitat $n cursul operaiunilor de pipetare poate fi $ns prevenit prin lucrul $ntr-o )S%. Dispozitivele pentru pipetare trebuie alese cu gri'. Aipul utilizat nu trebuie s genereze riscuri suplimentare i trebuie s fie uor de sterilizat i curat. =onuri de prelevare prevzute cu filtru trebuie folosite ori de c&te ori se manipuleaz microorganisme i culturi celulare. (ipetele cu capetele de suciune ciobite sau rupte nu trebuie folosite deoarece deterioreaz lcaul dispozitivelor de pipetare i prin aceasta genereaz pericole. 8mogenizatoare, agitatoare, mi ere i aparate de ultrasonare Se vor folosi doar cele special concepute pentru uzul $n laboratoare! care prin construcie reduc sau evit eliberarea de aerosoli. Omogenizatoarele $nc6ise de tip 9stomac6er7 disponibile $n prezent pentru prelucrarea de volume mici sau mari! pot genera i ele aerosoli. Omogenizatoarele folosite pentru microorganisme din *rupul de Jisc # vor fi $ncrcate i desc6ise numai $n )S%. /paratele de ultrasonare pot genera! de asemenea! aerosoli. 4le trebuie manipulate $n )S% sau acoperite-ecranate $n timpul folosirii. =apacele i exteriorul aparatelor de ultrasonare trebuie decontaminate dup folosire. 'nse de unic folosin /vanta'ul anselor de unic folosin este c nu trebuie sterilizate i pot fi folosite $n )S% unde becurile %unsen i microarztoarele perturb fluxul de aer. Dup folosire! ansele trebuie plasate $n dezinfectant i evacuate ca orice material contaminat 5icroarztoare Microarztoarele cu gaz sau electrice sunt prevzute cu ecrane de sticl borosilicat sau ceramice! ceea ce reduce formarea stropilor i dispersia materialului infecios $n momentul sterilizrii anselor. Microarztoarele modific totui circuitul aerului i de aceea trebuie plasate $n )S% c&t mai $n spate. 9mbrcminte i ec/ipament de protecie individual Embrcmintea i ec6ipamentul de protecie individual constituie o barier care reduce riscul de expunere la aerosoli! stropiri i inoculri accidentale i vor fi alese $n funcie de specificul activitii desfurate. Embrcmintea de protecie trebuie purtat ori de c&te ori se lucreaz $n laborator. La prsirea laboratorului! $mbrcmintea de protecie se $ndeprteaz i se spal m&inile. Aabelul de mai 'os prezint c&teva tipuri de ec6ipamente de protecie individual folosite $n laborator i protecia pe care o confer. Ec(i)a*e$t Pericole vi!ate Caracteristici care co$-er" sigura$%"
&1

*alate# costume )i salopete de laborator Foruri de plastic !nclminte Gchelari de protecie

8ontaminarea hainelor

!ncheiate la spate. ' acopere hainele de strad 2mpermeabile pentru lichide ?r decupare (n fa Hentile rezistente la impact 3pot fi optic corectoare sau aplicate peste ochelari4 7prtori laterale Hentile rezistente la impact# optic corectoare 7prtori laterale ' prote@eze (ntreaga fa ' fie u)or de (ndeprtat (n caz de accident $odele variate6 de unic folosin % purificatoare de aer ce acoper @umtate sau (ntreaga fa % masc sau glug cu purificator de aer asistat mecanic% aparat de respiraie asistat De unic folosin# avizate pentru uz microbiologic# confecionate din late.# vinil sau nitril Protecia m"inii Plas metalic

8ontaminarea hainelor 2mpact )i stropire 2mpact )i stropire

Gchelari de lucru

2mpact

Ecrane protectoare pentru fa Dispozitive de protecie respiratorie

2mpact )i stropire

2nhalare de aerosoli

$nu)i

8ontact direct cu microorganismele

T"iere

1. mbrcminte de laborator, halate, oruri )alatele de laborator ar trebui s se $nc6eie p&n sus. Modelele de 6alate cu m&nec lung!$nc6ise la spate i salopetele confer o protecie mai bun dec&t 6alatele i bluzele obinuite i sunt de preferat $n laboratoarele de microbiologie sau pentru lucrul la )S%. Norurile purtate peste 6alate ofer o protecie suplimentar fa de stropirea cu substane c6imice sau materiale biologice! cum ar fi s&nge sau culturi $n mediu lic6id. Arebuie prevzut o spltorie pentru ec6ipamentul de lucru! situat $n laborator sau $n vecintatea acestuia. 2. Ochelari de protecie, ochelari de lucru i ecrane protectoare pentru fa /legerea ec6ipamentului de prote'are a oc6ilor sau a feei depinde de activitatea desfurat. Oc6elarii de lucru cu sau fr dioptrii vor fi confecionai cu rame speciale $n care lentilele se monteaz numai dinspre partea anterioar3 lentilele sunt confecionate din material incasabil fiind curbate sau cu aprtori laterale. Oc6elarii de protecie ar trebui
&&

purtai peste oc6elarii de vedere sau peste lentilele de contact! care nu confer protecie $mpotriva pericolelor biologice sau c6imice. 4cranele pentru fa 8vizoare2 sunt confecionate din material plastic incasabil! prote'eaz $ntreaga fa i se fixeaz pe cap cu o band sau bonet. 3. Dispoziti e de protecie respiratorie (rotecia respiratorie este necesar c&nd se execut proceduri cu mare periculozitate 8ex. curarea unei deversri de material infecios2. /legerea tipului de dispozitiv depinde de tipul de pericol. 4xist dispozitive la care se pot monta diferite tipuri de filtre 1 pentru protecie $mpotriva diferitelor gaze! vapori! particule sau microorganisme. 4ste absolut necesar ca filtrul s fie montat la dispozitivul de protecie respiratorie potrivit. (entru a obine o protecie maxim! dispozitivul ar trebui adaptat pentru faa fiecrei persoane i testat pentru eficacitate. /paratele de asisten respiratorie cu containere proprii! cu butelie de aer! ofer protecie total. Mtile de tip c6irurgical sunt utile numai pentru protecia pacientului! dar nu ofer protecie operatorului. (entru protecia $mpotriva agenilor biologici au fost concepute i dispozitive de unic folosin 8<SO #.#0+.#+2. Dispozitivele de protecie respiratorie nu trebuie purtate $n afara spaiului laboratorului. !. "nui M&inile pot fi contaminate $n timpul lucrului $n laborator. De asemenea pot fi tiate de obiecte ascuite. (entru munca obinuit de laborator precum i pentru manipularea de ageni infecioi! s&nge i fluide biologice! se folosesc mnui c6irurgicale de unic folosin! avizate pentru uz microbiologic! confecionate din latex! vinil sau nitril. (ot fi folosite i mnui reutilizabile! dar trebuie acordat atenie splrii! scoaterii! currii i dezinfeciei lor corecte. Mnuile se scot i m&inile se spal bine dup manipularea de material infecios! dup lucrul la o )S% sau $nainte de prsirea laboratorului. Mnuile de unic folosin utilizate se $ndeprteaz odat cu deeurile infecioase. /u fost semnalate reacii alergice de tip dermatit i de 6ipersensibilitate imediat la personalul din laborator i la ali lucrtori care au purtat mnui din latex! mai ales din cele cu pudr. De aceea ar trebui s fie disponibile i alte tipuri de mnui dec&t cele din latex cu pudr. Mnuile din plas de oel inoxidabil ar trebui folosite c&nd exist o expunere potenial la instrumente tioase! ex. examinri postmortem. /stfel de mnui prote'eaz $mpotriva tierii! dar nu i a $neprii. Mnuile nu trebuie purtate $n afara spaiului laboratorului. :e/nici de laborator 4roarea uman! te6nicile defectuoase de laborator i folosirea incorect a ec6ipamentelor sunt cauzele ma'oritii accidentelor de laborator i infeciilor aprute la locul de munc. /cest capitol ofer c&teva metode care sunt indicate pentru a evita sau minimaliza riscurile biologice. a! 5anipularea ;n siguran a probelor ;n laborator Jecoltarea! transportul i manipularea necorespunztoare a probelor $n laborator prezint risc de infecie pentru personalul implicat. Containerele pentru probe =ontainerele pentru probe pot fi din sticl sau preferabil din plastic. 4le trebuie s fie rezistente i nu trebuie s permit scurgerea materialului din ele c&nd capacul sau dopul este corect aplicat. 5imic din materialul recoltat nu trebuie s rm&n $n afara containerului. =ontainerele trebuie corect etic6etate pentru o identificare uoar. Documentele de $nsoire nu trebuie $nfurate $n 'urul containerului! ci plasate separat! preferabil $ntr-un $nveli impermeabil. Transportul probelor n laborator
&,

(entru evitarea scurgerilor accidentale sau a vrsrii probelor! trebuie utilizate containere secundare! cum sunt cutiile cu stative! astfel $nc&t recipientele cu probe s rm&n $n picioare atunci c&nd containerele sunt manipulate corect. =ontainerele secundare pot fi din metal sau plastic! trebuie s fie autoclavabile sau s fie rezistente la aciunea dezinfectanilor c6imici! iar capacul ar trebui s fie prevzut cu o garnitur. 4le trebuie decontaminate regulat. Primirea probelor Laboratorul care primete un mare numr de probe trebuie s aib o $ncpere separat sau un spaiu special pentru acest scop. Deschiderea pachetelor (ersonalul care primete i despac6eteaz probele trebuie s fie contient de potenialul pericol asupra strii de sntate i trebuie instruit s adopte precauiile standard $n special c&nd se confrunt cu spargerea sau vrsarea containerelor. =ontainerele primare cu probe ar trebui desc6ise $ntr-o )S%. Arebuie s existe dezinfectante la $ndem&n. b! <tilizarea pipetelor i a dispozitivelor de pipetare . Dispozitivul de pipetare trebuie utilizat $ntotdeauna. (ipetarea cu gura este interzis. ". Aoate pipetele trebuie s aib filtru de vat pentru a reduce contaminarea dispozitivului de pipetare. #. 5u trebuie suflat niciodat $ntr-un lic6id care conine ageni infecioi. 0. Materialul infecios nu trebuie niciodat amestecat prin aspirare i expulzare alternant! prin pipet >. Lic6idele nu trebuie niciodat expulzate forat din pipete. .. (ipetele gradate neterminal sunt preferabile altor tipuri de pipete deoarece nu necesit expulzarea ultimei picturi. G. (ipetele contaminate vor fi imersate complet $ntr-un dezinfectant adecvat! aflat $ntr-un container incasabil. 4le trebuie lsate $n dezinfectant at&ta timp c&t este necesar $nainte de a fi scoase din laborator. ?. =ontainerul pentru pipete folosite trebuie plasat $n interiorul )S%! nu $n afara ei. ,. Seringile cu ace 6ipodermice nu trebuie utilizate pentru pipetare. +. Arebuie utilizate dispozitive speciale pentru desc6iderea flacoanelor prevzute cu capsule cu septuri de cauciuc care s permit apoi utilizarea pipetelor! evit&ndu-se utilizarea $n acest scop a acelor 6ipodermice i a seringilor. . (entru a evita dispersia picturilor de material infecios din pipet! pe suprafaa de lucru va fi aezat un material absorbant 3 dup utilizare acesta va fi evacuat ca material infecios. c! .vitarea dispersiei materialului infecios . (entru evitarea pierderii premature a $ncrcturii sale! inelul ansei bacteriologice trebuie s aib un diametru de "-# mm i trebuie s fie complet $nc6is. @irul ansei nu trebuie s fie mai lung de . cm pentru a reduce vibraia. ". Jiscul stropirii cu material infecios cu ocazia sterilizrii ansei la flacra becului %unsen poate fi evitat prin utilizarea pentru sterilizare a unui microarztor electric. Sunt de preferat ansele de unic folosin! care nu au nevoie de sterilizare. #. Arebuie luate msuri de precauie atunci c&nd se usuc probele de sput pentru a evita formarea de aerosoli. 0. (robele i culturile a cror utilizare s-a $nc6eiat i care trebuie autoclavate i - sau evacuate! trebuie plasate $n containere impermeabile! ex. saci speciali pentru deeuri de laborator. (artea de sus a sacilor trebuie $nc6is etan 8ex. cu band adeziv martor de autoclavare2 $nainte de plasarea lor $n containerele pentru deeuri infecioase. >. Locul de munc trebuie decontaminat cu dezinfectante corespunztoare la sf&ritul fiecrei etape i zile de lucru. d! <tilizarea 7otelor de 2iguran %iologic . Modul de utilizare i limitele de siguran ale )S% trebuie aduse la cunotina tuturor utilizatorilor poteniali pe baza standardelor naionale i a literaturii de specialitate. (rotocoale scrise sau g6iduri de operare-de siguran trebuie puse la dispoziia personalului.
&0

Arebuie s fie clar! $n mod particular! c )S% nu prote'eaz pe cel ce lucreaz $n caz de spargere! vrsare sau te6nici greite de manipulare. ". )S% trebuie utilizat numai dac funcioneaz corect. #. (anoul frontal transparent de sticl nu trebuie desc6is $n timpul lucrului. 0. /paratele i volumele de materiale utilizate $n )S% trebuie s fie reduse la minimum. =irculaia aerului $n partea din spate a incintei )S% nu trebuie blocat. >. %ecurile %unsen nu trebuie utilizate $n 6ot. =ldura produs perturb fluxul de aer i poate avaria filtrele. Microarztoarele electrice sunt permise! dar ansele de unic $ntrebuinare utilizare sunt de preferat. .. Entreaga activitate din )S% trebuie s se desfoare $n centrul sau $n partea posterioar a ariei de lucru! bine vizibil prin panoul frontal de sticl. G. Araficul $n spatele operatorului trebuie s fie minim. ?. Operatorul nu trebuie s perturbe fluxul de aer prin micri repetate de du-te ; vino ale braelor. ,. *rilele frontale de admisie a aerului nu trebuie blocate cu foi! caiete! pipete sau alte materiale deoarece aceste $ntreruperi ale fluxului de aer pot determina contaminarea materialului i expunerea operatorului. +. Suprafaa )S% trebuie tears cu dezinfectante adecvate dup fiecare etap de lucru i la sf&ritul programului de lucru. . Dentilarea )S% trebuie pornit cu minimum > minute $nainte de $nceperea lucrului i oprit dup minimum acelai interval de la terminarea lucrului $n )S%. ". Documentele de lucru nu trebuie puse niciodat $n interiorul )S%. d! .vitarea ingestiei de material infecios i a contactului cu pielea i oc/ii . (articulele mari i picturile cu diametrul mai mare de > Om! aprute $n timpul manipulrii materialului microbiologic! trebuie $ndeprtate rapid de pe suprafaa de lucru i de pe m&inile operatorului. Arebuie purtate mnui de unic folosin. Lucrtorii din laborator trebuie s evite atingerea gurii! oc6ilor i a feei. ". 4ste interzis depozitarea i consumul de alimente i butur $n laborator. #. 4ste interzis introducerea $n gur a oricror obiecte 8creioane! pixuri! gum de mestecat2 0. 4ste interzis aplicarea cosmeticelor $n laborator3 >. @aa! oc6ii i gura trebuie prote'ate cu un ecran sau prin alte modaliti! $n timpul oricrei operaii care se poate solda cu $mprocarea de material infecios. e! .vitarea in=ectrii de material infecios . <nocularea accidental ca urmare a rnilor provocate de sticla spart sau ciobit! poate fi evitat prin creterea ateniei $n timpul procedurilor de lucru. Obiectele din sticl ar trebui $nlocuite cu cele din material plastic! ori de c&te ori este posibil. ". <n'ectarea se poate produce accidental prin $nepare cu ace de sering! pipete (asteur din sticl i cioburi de sticl. #. /ccidentele prin $nepare cu acul pot fi reduse prin1 a2 reducerea utilizrii seringilor i acelor 8exist dispozitive simple pentru desc6iderea flacoanelor $nc6ise cu capsul i dop de cauciuc! astfel $nc&t pot fi folosite pipete $n locul seringilor cu ac2 3 b2 utilizarea unor dispozitive de siguran $mpotriva $neprii atunci c&nd seringile i acele sunt absolut necesare. 0. /cele nu trebuie niciodat reacoperite cu capacul de protecie. 4le nu se desprind de sering ci se arunc $mpreun cu seringa $ntr-un container special! rezistent la $nepare! prevzut cu capac. >. (ipetele (asteur de plastic ar trebui s $nlocuiasc pipetele de sticl. f! 2epararea serului . /ceast operaiune trebuie efectuat numai de personal bine instruit - calificat. ". Arebuie folosite mnui i trebuie prote'ai oc6ii i mucoasele. #. /erosolii i stropirile pot fi evitate sau reduse la minim numai printr-o bun te6nic de laborator.
&9

S&ngele i serul trebuie pipetate cu atenie. 4ste interzis pipetarea cu gura. 0. Dup utilizare! pipetele trebuie imersate complet $n dezinfectantul corespunztor i meninute c&t este necesar! $nainte de evacuare sau splare i sterilizare pentru reutilizare. >. Auburile 8vacutainerele2 care au coninut probele utilizate! conin&nd c6eaguri de s&nge! etc trebuie introduse 8cu dopul pus2 $ntr-un container impermeabil $n vederea autoclavrii i-sau incinerrii. .. Arebuie s existe la $ndem&n dezinfectante adecvate pentru curarea stropilor i lic6idelor vrsate g! <tilizarea centrifugii . (erformanele mecanice bune sunt o condiie primordial pentru utilizarea centrifugilor $n condiii de siguran microbiologic. ". =entrifuga trebuie utilizat cu respectarea instruciunilor productorului. #. =entrifuga trebuie plasat astfel $nc&t lucrtorii s poat vedea $n interiorul cuvei acesteia pentru a putea fixa corect suporturile pentru cupe i cupele cu probe. 0. Auburile de centrifug i containerele cu probe care urmeaz a fi centrifugate trebuie s fie confectionae din sticl groas sau preferabil din plastic i trebuie verificate pentru absena defectelor $nainte de utilizare. >. =upele de centrifug i containerele cu probe trebuie bine astupate-acoperite 8de preferat cu capace cu filet2. .. =upele trebuie $ncrcate! ec6ilibrate! $nc6ise i desc6ise $ntr-o )S%. G. Suporii pentru cupele de centrifug trebuie grupai c&te doi! dup greutate i ec6ilibrai corect cu cupele $n poziie. ?. Arebuie respectat 8conform instruciunilor din manualul de utilizare2 spaiul dintre nivelul lic6idului centrifugat i gura cupei. ,. /pa distilat sau alcoolul 8propanol G+P2 pot fi utilizate pentru ec6ilibrarea cupelor goale. Soluiile saline 8ser fiziologic2 sau de 6ipoclorit nu pot fi utilizate deoarece sunt corozive. +. 5umai tuburile de centrifug sau supori pentru cupe cu $nc6idere etan 8cupe de siguran2 trebuie utilizate c&nd se lucreaz cu microorganisme din grupele de risc # i 0. . La folosirea rotoarelor de centrifug angulare trebuie avut gri' ca tuburile s nu fie supra$ncrcate pentru a evita scurgerile. ". =uva centrifugii trebuie controlat zilnic! pentru a verifica eventuala apariie de urme de culoare sau murdrie la nivelul corespunz&nd rotorului. En caz de murdrie evident! trebuie reevaluate protocoalele de centrifugare. #. Jotorul centrifugii i suporii pentru cupe trebuie examinate zilnic pentru a depista eventualele corodri sau fisuri. 0. Jotorul! suporturile pentru cupe i cuva centrifugii trebuie decontaminate dup fiecare utilizare. >. Dup utilizarea centrifugii! suporii pentru cupe trebuie pstrai 8cu desc6iderea $n 'os2 pentru scurgerea lic6idului de ec6ilibrare. .. En timpul funcionrii unei centrifugi pot fi e'ectai din aceasta aerosoli infecioi. /ceste particule circul cu vitez prea mare pentru a putea fi reinute de fluxul de aer al )S% dac centrifuga este plasat $ntr-o 6ot tradiional cu desc6idere frontal de =lasa < sau de =lasa <<. <zolarea centrifugilor $n )S% de =lasa <<< previne dispersarea $n afara 6otei a aerosolilor produi. Aotui! o te6nic corect de centrifugare i folosirea cupelor sau suporilor cu capace etane asigur o protecie adecvat $mpotriva aerosolilor i particulelor infecioase dispersate. /! <tilizarea omogenizatoarelor, agitatoarelor, mi erelor>blenderelor i aparatelor de ultrasonare . Omogenizatoarele obinuite 8mixere de buctrie2 nu pot fi utilizate $n laborator deoarece pot genera scurgeri i aerosoli. %lenderele i dispozitivele de tiere special concepute pentru laborator sunt mai sigure. ". =upele si capacele sau sticlele trebuie pstrate $n bune condiii! fr defecte. =apacele trebuie s aib garnitura bun i s poat fi bine $nfiletate.
&:

#. (resiunea $n vas crete $n timpul operaiilor de omogenizare! amestecare i ultrasonare. /erosolii conin&nd material infecios se pot strecura $ntre capac i vas. Dasele din plastic! $n special cele din politetrafluoroetilen 8(A@42! sunt recomandate deoarece sticla se poate sparge! eliber&nd material infecios i poate rni operatorul. 0. En timpul funcionrii! omogenizatoarele! agitatoarele i aparatele de ultrasonare trebuie acoperite cu un ecran-clopot rezistent! din plastic transparent! ce se dezinfecteaz dup utilizare. /tunci c&nd este posibil! aceste aparate trebuie utilizate sub ecranele lor de plastic! $n )S%. >. La sf&ritul operaiilor! containerele trebuie desc6ise $ntr-o )S%. .. =ei ce lucreaz cu aparate de ultrasonare vor utiliza cti de protecie. i! <tilizarea mo=arelor i a omogenizatoarelor de esuturi . Dac se utilizeaz mo'are-omogenizatoare din porelan-sticl! m&na cu care se in trebuie prote'at cu mnu i un tampon de vat sau orice alt material absorbant. Mo'arele din plastic 8(A@42 sunt mai sigure. ". Mo'ararea i desc6iderea omogenizatoarelor trebuie efectuat $n )S%. =! <tilizarea i ;ntreinerea frigiderelor i congelatoarelor . @rigiderele! congelatoarele i lzile cu g6ea carbonic trebuie dezg6eate i curate periodic! iar fiolele! eprubetele etc. care s-au spart $n timpul stocrii trebuie $ndeprtate. En timpul currii se vor folosi mti de protecie i mnui groase de cauciuc. Dup curare! suprafeele interioare trebuie dezinfectate. ". Aoate containerele pstrate $n frigider trebuie inscripionate clar cu denumirea tiinific a materialului coninut! data stocrii i numele celui care a fcut stocarea. Materialele $nvec6ite i neinscripionate vor fi autoclavate i $ndeprtate. #. Arebuie inut un inventar al tuturor materialelor pstrate $n congelator. 0. Soluiile inflamabile nu trebuie stocate $n frigider! dac acesta nu este rezistent la explozie.. 5otie de avertizare $n acest sens trebuie afiate pe ua frigiderului. ?! 6esc/iderea fiolelor conin@nd material infecios liofilizat @iolele care conin material infecios liofilizat trebuie desc6ise cu precauie deoarece coninutul poate s fie la o presiune sczut i desc6iderea poate provoca o ptrundere brusc de aer $n interiorul fiolei! cu dispersia unei pri din coninut $n atmosfera $ncon'urtoare. @iolele trebuie desc6ise $ntotdeauna $ntr-o )S%. Sunt recomandate urmtoarele proceduri pentru desc6iderea fiolelor1 . Ent&i se decontamineaz suprafaa exterioar a fiolei. ". Se pilete g&tul fiolei la nivelul mi'locului dopului de bumbac sau celuloz dac fiola e prevzut cu un astfel de dop. #. @iola se ine $n vat $mbibat cu alcool pentru a prote'a m&na de rnire! $n momentul desc6iderii fiolei. 0. D&rful fiolei 8cu eventualul dop2 se $ndeprteaz cu atenie i se consider a fi material contaminat. >. Dac dopul rm&ne $n interior se $ndeprteaz cu o pens steril. .. Se adaug lic6idul de reconstituire $ncet pentru a $mpiedica formarea spumei $n fiol. Precauii standard privind s@ngele i alte lic/ide biologice, esuturi, secreii sau e creii! (recauiile standard 8care includ precauiile universale2 sunt destinate reducerii riscului transmiterii agenilor biologici din surse de infecie at&t cunoscute c&t i necunoscute #olectarea, etichetarea i transportul probelor . (recauiile universale trebuie respectate $ntotdeauna1 se va lucra de fiecare dat cu mnui de protecie. ". S&ngele trebuie recoltat de la pacieni i animale de ctre personal instruit. #. (entru flebotomie! acele clasice i sistemele cu sering trebuie $nlocuite cu dispozitive de unic folosin cu vid! care permit recoltarea direct a s&ngelui $n recipiente $nc6ise de transport sau de cultur i care fac imposibil reutilizarea acului. Auburile trebuie plasate $n containere speciale pentru transportul ctre laborator i $n cadrul laboratorului @ormularele de solicitare a prestaiilor de laborator trebuie plasate separat $n containerul de transport 8$n plicuri sau pungi impermeabile2.
&;

0. (ersonalul care face recepia probelor 5F trebuie s desc6id aceste plicuri . Deschiderea tuburilor cu probe i repartizarea coninutului . Auburile cu probe trebuie desc6ise $ntr-o )S% . ". 4ste obligatoriu s se foloseasc mnui. De asemenea! este recomandat protecia oc6ilor i a mucoaselor 8oc6elari de protecie sau ecrane de prote'are a feii2. #. Embrcmintea de protecie trebuie completat cu un or de plastic. 0. Dopul trebuie apucat printr-o bucat de 6&rtie sau tifon pentru a preveni $mprocarea 8stropirea2. $ticlria i %obiectele tietoare&'neptoare( )acele, serin*ile, acele hipodermice, pipetele Pasteur+ Ori de c&te ori este posibil! plasticul trebuie s $nlocuiasc sticla. Dor fi folosite numai obiectele din sticl special de laborator 8borosilicat2 i orice articol ciobit sau crpat trebuie $nlturat. 5u vor fi utilizate pentru pipetare acele de sering ,amele i frotiurile pentru microscopie @ixarea i colorarea frotiurilor de s&nge! sput! materii fecale pentru microscopie nu omoar obligatoriu toate organismele sau virusurile de pe frotiu. /ceste obiecte trebuie manipulate cu pensa! depozitate corespunztor i decontaminate i-sau autoclavate $naintea evacurii. -chipamentul automatizat )aparate de ultrasonare, mi.ere, orte./uri+ . 4c6ipamentul trebuie s fie de tip $nc6is! pentru a preveni dispersia picturilor mici i a aerosolilor. ". Jeziduurile trebuie colectate $n vase $nc6ise $n vederea autoclavrii i-sau evacurii. #. 4c6ipamentul trebuie dezinfectat dup fiecare utilizare! urm&nd instruciunile productorului. 0esuturile . @ormolul trebuie folosit ca fixator. ". Secionarea probelor congelate trebuie evitat. Dac este necesar! criostatul trebuie s fie ecranat! iar operatorul s poarte un ecran de protecie facial. (entru decontaminare! temperatura instrumentului trebuie s fie ridicat la cel puin "+Q =elsius.

.c/ipamente care pot genera pericole de contaminare biologic !n Tabelul de mai @os sunt cuprinse echipamentele )i operaiunile care pot genera pericole de contaminare microbiologic precum )i sugestii privind modul (n care pot fi eliminate sau reduse aceste riscuri.

&<

Ec(i)a*e$t 7ce de sering

Riscul 2noculare accidental# aerosoli# stropire

5"suri e eli*i$are sau re ucere a riscului Nu reacoperii acele )i nu retezai acele I ?olosii seringi cu sistem tip baionet de blocare a acului sau seringi de unic utilizare# la care acul este parte integrant a seringii pentru a preveni deta)area acului de sering I ?olosii tehnici corecte de laborator# e. 6 umplei seringa cu atenie pentru a reduce la minimum cantitatea de bule de aer sau formarea de spum (n inocul evitai folosirea seringilor pentru a amesteca lichide infecioase% dac totu)i le folosii# asigurai v c v"rful acului este imersat (n lichid )i evitai e.pulzarea din sering cu for e.cesiv (nf)urai acul )i amboul (ntr un tampon de vat imbibat (n dezinfectantul corespunztor (nainte de a e.trage acul din capacul/dopul de cauciuc al unui flacon eliminai e.cesul de lichid )i bulele de aer in"nd seringa vertical (ntr un tampon de vat imbibat (n dezinfectant sau (ntr un flacon I Efectuai toate operaiunile cu material infecios (ntr o *'+ I 2mobilizai animalele (n timpul inoculrii. ?olosii ace boante sau canule pentru inocularea intranazal sau oral. Hucrai (ntr o *'+. I 7utoclavai acele de sering dup utilizare )i asigurai v c evacuarea lor se face corect. Dac acul )i seringa nu formeaz un dispozitiv unitar# nu le dezasamblai (nainte de autoclavare ?olosii cupe cu capac sau rotoare cu capac etan). I Deschidei cupele sau rotoarele dup ce aerosolii s au depus 3,> min4 sau (n *'+ I 2nstalai un filtru *EP7 (ntre centrifug )i pompa de vid

8entrifuga 1ltracentrifuga

7erosoli# stropire )i spargerea cupelor 7erosoli# stropire )i

spargerea cupelor

I !nregistrai orele de funcionare pentru fiecare rotor )i respectai un program preventiv de supraveghere a funcionrii 3service4 pentru a reduce riscul unor defeciuni mecanice. I 1mplei )i golii cupele (ntr o *'+ 7sigurai v de integritatea capsulei din s"rm din @urul catalizatorului Desicatoare 2mplozie# dispersarea fragmentelor de sticl )i materiale infecioase I 7)ezai le (ntr o cu)c rezistent din plas de s"rm Efectuai operaiunile )i deschidei echipamentul (n *'+ I ?olosii modele special concepute care previn scurgeri pe la garniturile pieselor rotative sau ale capacelor sau folosii aparate cu incinte etan)e I !nainte de a deschide omogenizatorul a)teptai ,> min# pentru a permite aerosolilor s se depun. Eefrigerarea condenseaz aerosolii I Dac folosii un omogenizator manual# (nf)urai tubul (ntrun material absorbant I Efectuai operaiunile )i deschidei echipamentul (n *'+ I 7sigurai izolarea (mpotriva ultrasunetelor I 1tilizai mnu)i pentru a v prote@a (mpotriva efectelor chimice ale detergenilor I Efectuai operaiunile (n *'+ sau (n ni)e speciale I 1tilizai pentru culturi recipiente solide# (nchise etan)# cu capac (n)urubat# prevzute cu filtre protectoare# dac este necesar# )i bine securizate. I 1tilizai filtre de aer pentru a prote@a dispozitivul de vid I 1tilizai o metod eficient de decontaminare# de e.. chimic
,>

E.icatoare pentru anaerobioz

E.plozie# rsp"ndire de materiale infecioase

Gmogenizatoare# aparate pentru fragmentarea esuturilor

7erosoli# scurgeri )i spargeri ale containerului

'onicatoare )i bi cu ultrasunete 7gitatoare pentru culturi# shaJere# mi.ere Hiofilizatoare

7erosoli# tulburri auditive# dermatite

7erosoli# stropire# vrsare

7erosoli )i contaminare prin

contact direct

I 7sigurai v de e.istena unor capcane pentru umezeal )i a unui condensator de vapori. I 2nspectai atent toate recipientele din sticl pentru vid pentru a observa eventuale zg"rieturi sau crpturi. 1tilizai numai sticlrie special conceput pentru vid

+i de ap

8re)terea I 7sigurai curarea )i dezinfecia periodic microorganismelor I Nu utilizai azida de sodiu pentru a preveni cre)terea ?ormarea de microorganismelor compu)i e.plozivi ai azidei de sodiu cu anumite metale

,1

,&

Lista e co$trol 0$ laboratoarele *e icale

6$c")erile 0$ care este i$stalat laboratorul 1. 8ile de acces sunt bine semnalizate )i accesibile A &. Hocalul este curat A ,. Pardoseala )i scrile sunt netede# uniforme )i nealunecoase A 0. 'paiul de lucru permite realizarea activitilor (n condiii de siguran A 9. $esele de lucru# mobilierul )i instalaiile sunt (n stare bun A :. 'uprafeele de lucru sunt rezistente la solveni )i substane corozive A ;. E.ista c"te o chiuvet pentru splarea m"inilor (n fiecare camer A <. Poate fi restricionat accesul (n laborator# acesta fiind permis numai persoanelor autorizate A =. 7 fost fcut o evaluare a riscului pentru a se asigura c echipamentul )i facilitile sunt adecvate pentru desf)urarea activitilor prevzute A +acilit"%ile /i co$ i%iile e e)o!itare 1. Hocurile de depozitare# rafturile# etc sunt astfel amena@ate (nc"t materialele depozitate s nu alunece sau s cad A &. 'e pstreaz curenia# se evit acumularea de gunoaie# de materiale )i obiecte de prisos ce pot reprezenta pericol de accidentare# incendiu sau e.plozie A ,. 8ongelatoarele )i spaiile de depozitare se pot (ncuia A I$stala%ii sa$itare /i e)e$ i$%e )e$tru )erso$al 1. !ncperile )i dotrile sunt meninute curate# (n ordine )i corespunztoare din punct de vedere sanitar A &. E.ist ap potabil A ,. K8 urile )i du)urile sunt adecvate# curate# (n bun stare A E.ist K8 uri )i du)uri separate pentru brbai )i femei A 0. E.ist ap rece# cald# spun )i prosoape A 9. 'unt vestiare pentru brbai )i femei A :. E.ist spaii 3de e..dulapuri4 individuale pentru hainele de strad A ;. E.ista o camer (n care se poate m"nca# bea cafea etc A 6$c"l!ire /i ve$tila%ie 1. Temperatura la locul de munc este (n limitele confortului termic A &. 5entilaia mecanic perturb flu.ul de aer laminar (n interiorul sau (n @urul hotelor de securitate biologic sau al hotelor de protecie chimic A Ilu*i$are 1. 2luminarea este adecvat 3e.. ,>> - 0>> l..4 A &. E.ist iluminare local la nivelul meselor de lucru A Preve$irea /i co*baterea i$ce$ iilor 1. E.ist un sistem de alarm (n caz de incendiu A &. 2e)irile de incendiu sunt accesibile A 9. 2e)irile sunt semnalizate luminos (n mod adecvat A :. Drumul ctre ie)ire este marcatA ;. Toate ie)irile sunt accesibile )i descuiate (n timpul programului A Ga!ele co*)ri*ate /i lic(e-iate 1.8ontainerele pentru gaz sunt corect etichetate )i marcate cu coduri de culoare adecvate A &. 8ilindrii cu gaz comprimat )i valvele acestora pentru presiune (nalt )i reductorii de presiune sunt inspectai periodic A ,.5alvele de reducie sunt (ntreinute corespunztor A 0. 2ndicatorul de presiune este conectat c"nd cilindrul se afl (n funciune A 9. 8apacul de protecie este pus (n timpul transportului sau c"nd cilindrul nu funcioneaz A :. 8ilindrii cu gaz comprimat sunt depozitai corespunztor# astfel (nc"t s nu cad (n cazul unor dezastre naturale A

;.8ilindrii 3buteliile4 cu gaz lichefiat )i rezervoarele de produse petroliere lichide sunt ferite de sursele de cldur A <. Personalul este corect instruit pentru a folosi )i transporta corect gazele comprimate )i lichefiate A Pericole e $atur" electric" &. 2nstalaia electric are (mpm"ntare A ,. 'unt prote@ate toate circuitele din laborator cu sigurane# sigurane de (mpm"ntare )i dispozitive de deconectare de la reea A 0. Dispozitivele electrice e.istente sunt avizate pentru a fi folosite (n laborator A 9. 8ordoanele electrice ale aparatelor au lungime adecvat 3sunt contraindicate cablurile prea lungi4# sunt (n bun stare )i lipsite de uzuri# crpturi )i tieturi A :. Este fiecare priz destinat unui singur aparat A 3nu se recomand folosirea de prize multiple4 Ec(i)a*e$tul e )rotec%ie )e$tru )erso$al 1. E.ist echipament de protecie specific pentru (ntreg personalul# e.. mnu)i# halate# )oruri# salopete A &. E.ist echipament special pentru lucrul cu substane chimice# radioactive )i cancerigene 3soruri de cauciuc# mnu)i pentru chimicale4% e.ist mnu)i rezistente la cldur pentru descrcarea autoclavelor )i pupinelelor A ,. E.ist ochelari de protecie# m)ti# scuturi 3vizoare4 tranparente pentru fa A 0. E.ist dispozitive pentru splarea ochilor A 9. E.ista du)uri pentru situaii de urgen A :. Protecia (mpotriva radiaiilor se realizeaz conform standardelor naionale )i internaionale# inclusiv e.istena dozimetrelor A ;. E.ist m)ti de gaze curate# dezinfectate )i controlate cu regularitate% sunt ele pstrate la (ndem"n )i (n condiii igienice A Protec%ia /i starea e s"$"tate a )erso$alului 1. E.ist un serviciu de medicina muncii pentru supravegherea strii de sntate a lucrtorilor A &. Trusele de prim a@utor sunt plasate (n locuri accesibile A ,. E.ist personal calificat pentru a acorda primul a@utor A 0. 7ce)tia sunt instruii pentru a face fa situaiilor de urgen specifice laboratorului 3contact cu substane corozive# ingestie accidental de substane to.ice sau infectante4 A 9. Personalul au.iliar 3de e.. personalul care face curenia )i cel administrativ4 a fost instruit asupra riscurilor poteniale pe care le prezint laboratorul )i materialele pe care le manipuleaz A :. 'unt afi)ate anunuri vizibile cuprinz"nd numele persoanelor care pot acorda primul a@utor )i telefoanele serviciilor de urgen A ;. ?emeile de v"rst fertil sunt informate despre riscurile )i consecinele posibile pe care le implic lucrul cu substane carcinogene# mutagene# teratogene )i cu bacterii A <. ?emeile de v"rst fertil care bnuiesc sau sunt sigure c sunt (nsrcinate )tiu c trebuie s )i informeze )efii (n scopul eventualei schimbri a locului de munc pe perioada sarcinii A =. E.ist un program de imunizri adaptat specificului laboratorului A 1>. 'e efectueaz teste cutanate )i radiologice pentru cei care lucreaz (n condiii de risc T+8 sau alte teste specifice pentru alte infecii A 11. E.ist o eviden a bolilor profesionale )i a accidentelor de munc A 1&. E.ist semnalizri# sigle )i afi)e de avertizare pentru prevenirea )i reducerea riscului de accidente A Ec(i)a*e$tul e laborator 1. !ntregul echipament a fost certificat ca sigur pentru folosire )i autorizat sub raportul folosirii (n condiii de securitate A &. E.ist proceduri scrise pentru decontaminarea echipamentului (nainte de a fi supus operaiunilor de (ntreinere A ,. *otele de siguran biologic )i hotele de protecie chimic sunt (ntreinute )i verificate periodic A 0. 7utoclavele )i alte aparate care funcioneaz sub presiune sunt verificate periodic A 9. Eotoarele )i port cuvele centrifugilor sunt verificate periodic A ;. 'e folosesc pipete (n locul acelor de sering A <. 'ticlria ciobit sau crpat este (ntotdeauna aruncat )i nu refolosit A =. E.ist containere speciale pentru sticlria spart A 1>. 'e folose)te de preferin material plastic (n locul sticlriei ori de c"te ori este posibil A
,0

11. 'e folosesc containere speciale pentru obiecte (neptoare/ tietoare folosite A 5ateriale i$-ec%ioase 1. Primirea probelor se face (n condiii de securitate A &. 'e pstreaz (nregistrri ale probelor recepionate A ,. Probele sunt despachetate (n hota de siguran biologic cu gri@a )i atenia cuvenite pentru a evita spargerea )i scurgerea/stropirea A 0. 'e folosesc mnu)i )i alte echipamente de protecie pentru despachetarea probelor A 9.Personalul este instruit (n ceea ce prive)te transportul produselor infecioase A :. Este meninut ordinea )i curenia pe mesele de lucru A ;. !ndeprtarea materialelor biologice se face cel puin o dat pe zi# iar tratarea )i evacuarea lor se face fr riscuri pentru personalA <. 7u fost instruii toi lucrtorii din laborator asupra procedurilor de urmat (n cazul (n care se produce spargerea )i (mpr)tierea de culturi microbiene )i materiale infecioase A =. Eficacitatea sterilizrii este controlat prin utilizarea de indicatori fizici# chimici )i biologici A 1>. E.ist o procedur scris pentru decontaminarea cu regularitate a centrifugilor A 11. 8upele sau suporii pentru cupe ai centrifugilor sunt prevzui cu capace etan)e A 1&. 'e folosesc curent )i corect dezinfectanii indicai A C(i*icale /i substa$%e ra ioactive 1. 8himicalele incompatibile (ntre ele sunt stocate )i manipulate separat A &. 'unt toate chimicalele etichetate corect cu menionarea denumirii corecte )i avertizare asupra pericolelor legate de manipulare A ,. 'unt e.puse la vedere afi)e de avertizare cu privire la riscul de accidentare legat de manipularea unor chimicale A

,9