Cuplarea lanului respirator cu fosforilarea oxidativ
1. Teoria chimic (a intermediarilor comuni)
- 1953 - E.C.S. Slater NADH + H + + FMN + X NAD + -X + FMNH 2 NAD + -X + P NAD + + X~P X~P + ADP ATP + X + H 2 O 2. Teoria conformaional - 1964 P.D. Boyer - modificarea conformaional a transportorilor de e -
3. Teoria chemiosmotic (a intermediarilor comuni) - 1961 Peter Mitchell - gradient de protoni transmembranar stare energizat H 2 O H + + HO - 54%
Controlul sintezei ATP
- ADP - blocarea ATP-sintazei F 1 - fluxul de protoni prin F 0 - stim. fosfataza activarea piruvat dehidrogenazei - modulator alosteric pozitiv izocitrat-dehidrogenaza Transportul ATP-ului din mitocondrie
- pH mitocondrial ATP 4-
- pH citoplasmatic ADP 3-
- ATP-translocaza ATP din mitoc. n citoplasm [ATP] + [ADP] = cst. Inhibitorii lanului respirator i ai fosforilrii oxidative
1. Inhibitorii lanului respirator - rotenona inh. C I - pericidina, amobarbital, compui organo-mercurici complex cu Fe-S inh. reducerea CoQ - malonat, oxalacetat inh. succinat-DH-aza - antimicina A (Streptomyces cereus) C III CoQH 2 cit. b T - CN - , azide C IV - Fe 3+ (cit. a 3 ) - CO cit. (Fe 2+ ) Lonchocarpus nicou 2. Inhibitorii fosforilrii oxidative - oligomicina A inh. ATP-sintaza (F 0 ) - dicilohexil-carbodiimida (DCCD) gr. COOH din ac. glutamic (F 0 ) - aurovertina subunit. (F 1 ) 3. Decuplani LR-FO - termogenina - florile plantelor - acizi gradient de pH - gramicidina A - gradient de pH - tiroxina (T 4 ) decuplant - 2,4-(NO 2 ) 2 -fenol fluxul de protoni Alte procese oxidative celulare - monooxigenaze (hidroxilaze) R-H + O 2 + 2 H + + 2 e - R-OH + H 2 O - surs de H NADH, NADPH - oxidaze cu funcii mixte microsomiale (OFMM) Citocrom P450 - membrana REN - structur - protein heminic citocrom P 450 substrat, O 2 - flavoprotein NADPH-CYP 450 -reductaza - fosfatidilcolina - 2007 7700 de citocromi - CYP 450 36 de izoenzime - CYP 2D6, CYP 2C19 - au afinitate diferit fa de substrat Fe 3+ R-H Fe 3+ R-H FADH 2 FAD NADPH + H + NADP + Fe 2+ R-H O 2 Fe 2+ R-H O 2 Fe 2+ R-H O 2 - e - e - R-OH H 2 O - metabolizarea compuilor endogeni, exogeni (medicamente 75%) - sinteza estrogenilor, testosteronului, colesterolului - metabolizarea vitaminei D
CYP 3A4 - metabolizarea medicamentelor - fetus CYP3A7 - intestin pro-drug Inhibitori macrolide, azoli antifungici, amiodarona, cimetidina, metronidazol, inhibitori de proteaz, fluoxetin, verapamil, - bergamotina (grape fruit), echinacea Inductori barbiturice, carbamazepin, fenitoin, rifampicin - hiperforin (suntoare) Substrat blocante ale canalelor de calciu, imunusupresoare, haloperoidol, sildefanil, contraceptive hormonale, codeina, paracetamol METABOLISMUL GLUCIDELOR - glucide compui polihidroxicarbonilici sau derivai ai acestora - surse vegetale (cereale, semine, cartofi), animale (glicogen) - rol n organism - energetic - 1 g 4,1 kcal - structural glicolipide, glicoproteine - funcional Ac, H - 40-65% aport zilnic - min 130 g carbohidrai Clasificare - monozaharide - oligozaharide - polizaharide MONOZAHARIDE - dup natura gr. carbonil aldoze (glu), cetoze (fru) - dup nr. at de C trioze, tetroze, pentoze, hexoze Stereochimia - izomerie optic - nr. izomerilor = 2 n - D(+), D(-) - racemic - +/- - dup nr. at de C asimetrici - enantiomeri - diastereoizomeri Structura ciclic - semiacetali (semicetal intern) - hidroxil semiacetalic (glicozidic) - anomeri , O CH 2 -OH HO OH OH OH -D-glucoza O HO HO-H 2 C CH 2 -OH OH OH -D-fructoza CHO H-C-OH CH 2 -OH glucoza H-C-OH H-C-OH HO-C-H CHO H-C-OH CH 2 -OH manoza H-C-OH H-C-OH HO-C-H HO-C-H CHO CH 2 -OH galactoza H-C-OH HO-C-H HO-C-H - epimeri Deoxiglucozidele - 2-deoxiriboza ADN - L-fucoza - glicoproteine O OH OH HO-H 2 C Aminoglucozidele - glucozamina CH 2 -OH HO OH OH O NH 2 Proprieti fizico-chimice - substane solide, cristaline - reactivitate chimic ridicat 1. Reducere D-glucoz D-sorbitol D-fructoz D-manitol 2. Oxidare D-glucoz acid gluconic D-glucoz acid glucuronic CHO H-C-OH CH 2 -OH glucoza H-C-OH H-C-OH HO-C-H COOH H-C-OH CH 2 -OH acid gluconic H-C-OH H-C-OH HO-C-H CHO H-C-OH COOH acid glucuronic H-C-OH H-C-OH HO-C-H 3. Condensare cu amine glucoz + proteine proteine glicozilate
4. Esterificare glucoz + ATP glucoz-6-fosfat + ADP
5. Sinteza glicozidelor - ozide glucozide, galactozide - O-glicozide, S-glicozide, N-glicozide OLIGOZAHARIDE - 2-10 monozaharide - nereductoare 2 gr. OH glicozidice - zaharoza - reductoare 1 gr. OH glicozidic, 1 gr. OH alcoolic maltoza, lactoza O OH CH 2 -OH OH OH OH HO CH 2 -OH HO O O OH OH OH HO CH 2 -OH OH OH CH 2 -OH O O O OH OH OH HO CH 2 -OH O OH zaharoza CH 2 -OH O O HO-H 2 C OLIGOZAHARIDE - 2-10 monozaharide - nereductoare 2 gr. OH glicozidice - zaharoza - reductoare 1 gr. OH glicozidic, 1 gr. OH alcoolic maltoza, lactoza POLIZAHARIDE (glicani) - elibereaz prin hidroliz monozaharide sau derivai ai acestora - dup structur - homoglicani amidon, glicogen, celuloz - heteroglicani - rol - structural celuloz, mucopolizaharide - rezerv energetic amidon, glicogen Glicogen - dispoziie ficat, muchi - structur - (14), (16) molecul ramificat - nucleu proteic - cu apa formeaz soluii coloidale DIGESTIA I ABSORBIA GLUCIDELOR Digestia glucidelor - alimente monozaharide, dizaharide, polizaharide - cavitatea bucal amilaza salivar hidroliza amidonului prelucrat termic oligozaharide - intestinul subire - amilaza pancreatic dizaharide, dextrine limit, oligozaharide - leg. 14 interne - dizaharidazele (marginea n perie) - -glucozidaza (maltaza) - sucraza-izomaltaza - lactaza - trehalaza - lipsa sau reducerea digestiei la nivelul marginii n perie IG bacterii intestinale degradare acizi, CO 2 , H 2 , CH 4 tulburri digestive - intolerana la lactoz, zaharoz
- celuloza nu este degradat n IS, cantiti mici n IG Absorbia glucidelor - sub form de monozaharide - viteza 120 g glu/h - glu - mecanism activ - simport Lumenul intestinal Celule epiteliale intestinale Lichid interstitial, snge - gal similar glu. sub form de monozaharide - fru proteine transportoare, mecanism de transport saturabil - IS vena port ficat depozitare glicogen (150 g glu)
esuturi utilizare - celule susteme transportoare - GLUT 1 eritrocite, BHEN - GLUT 2 tb. ren, ficat, pancreas () - GLUT 3 neuroni, placenta - GLUT 4 . adipos, m. scheletici CILE DE UTILIZARE ALE GLUCOZEI - glucoza - surs de energie glicoliz CATC - sintez de compui - glicogen - pentoze nucleotide, acizi nucleici - acizi uronici proteoglicani, detoxifiere - glicerol, acetil-CoA neolipogenez - aa neeseniali, purine, pirimidine - NADPH reacii de reducere - utilizarea glu n esuturi depinde de: - starea metabolic - anabolic (postprandial) - glu piruvat CATC ATP - ficat TG, PL, colest . adipos - catabolic (interprandial) - glu energie n . glucodependente - tipul de esut - eritrocite glicoliz anaerob, pentoze - creier insulino-dep., glicoliz aerob, pentoze - . adipos - insulino-dep., acetil-CoA AG - ficat glicoliz, depozitare, ac. glucuronic - celule fosforilare glu-6-P ionizare lipofob - enzime hexokinaze - K M mic - glucokinaza - K M mare - inductibil glu, insulin - stim. fru-1-P - inh. fru-6-P glu + ATP glu-6-P + ADP hexokinaza (-) (-) AG GLICOLIZA - degradarea monozaharidelor la piruvat - proces exergonic - calea Embden-Meyerhof-Parnas - 10 reacii
C 6 H 12 O 6 + 2 NAD + + 2 ADP + 2P 2 CH 3 -CO-COOH + 2 (NADH+H + ) + 2ATP +2H 2 O 1 - hexokinaza K M
- glucokinaza inductibil, K M , hepatocite, celule -pancreatice
4 - r. endergonic 5 6 a. fixarea GA3P pe E prin gr. SH ox. b. NAD + NADH eliberarea de pe E c. fosforilarea tioesterului leg. macroergic 7 - [ATP] r. blocat eritrocite - 2,3-P 2 -glicerat fixarea O 2 pe Hb - deficit de hexokinaz fixarea O 2 pe Hb 8 - Mg 2+ - conformaional, catalitic 9 10 - E - inactivat prin fosforilare (glucagon, ADR) - activat prin defosforilare (insulina, este i inductor) - E 2 forme L i M - r. exergonic Glicoliza aerob piruvat acetil CoA CATC LR FO Glicoliza anaerob - lactat snge ficat piruvat gluconeogenez glucoz - lactat pH acid inh. PFK1 - desfurarea r. din glicoliz depinde de: - necesarul de ATP - glicemie hipoglicemie stim. gluconeogeneza, inh. Glicoliza - necesarul de intermediari pentru - gluconeogenez - metabolismul lipidic - calea pentozo-fosfailor - CATC Bilanul energetic al degradrii glucozei reacia Consum ATP Sintez ATP glu glu-6-P - 1 mol - fru-6-P fru-1,6-P 2 - 1 mol - 1,3-P 2 -glicerat 3-P-glicerat - + 2 moli P-enolpiruvat piruvat - + 2 moli TOTAL -2 moli + 4 moli 2 moli / mol glu anaerobioz aerobioz glicoliz Sintez FADH 2 Sintez NADH Consum ATP Sintez ATP glu glu-6-P - 1 mol fru-6-P fru-1,6-P 2 - 1 mol 1,3-P 2 -glicerat 3-P-glicerat + 2 moli P-enolpiruvat piruvat + 2 moli gliceraldehid-3-P 1,3-P 2 -glicerat + 2 moli ........ + 6 moli CATC piruvat acetil CoA + 2 moli ........ + 6 (4) moli iso-citrat -ceto-glutarat + 2 moli ........ + 6 moli -ceto-glutarat succinil CoA + 2 moli ........ + 6 moli succinil CoA succinat + 2 moli succinat fumarat + 2 moli .............. ........ + 4 moli L-malat oxal-acetat + 2 moli ........ + 6 moli TOTAL - 2 moli + 40 moli + 38 (36) moli Inhibitorii glicolizei 2-deoxiglucoza inh. r. catalizat de hexokinaz comp. cu Hg, ag. alchilani gr. SH GA3P-DH-aza fluoruri inh. enolaza arseniat r. cu GA3P CALEA HEXOZO-FOSFAILOR (untul pentozo-monofosfailor) - proces anaerob, particip i pentoze din alimente - rezult NADPH reacii de reducere, biosinteze (AG, steroizi, colesterol), reacii de hidroxilare (CYP450) - NADPH n reaciile de aprare antiinfecioas
- NADPH pentru refacerea GSH
- hexoze pentoze nucleotide, acizi nucleici, coenzime (NAD, FAD, CoA) - 2 etape - oxidativ (hexoze pentoze) - neoxidativ (conversia pentozelor) 1. Etapa oxidativ - necesar NADPH > necesar pentoze pentoze sunt transf. n hexoze 2. Etapa neoxidativ 6 glu-6-P + 12 NADP + + 6 H 2 O 4 fru-6-P + 2 GA-3-P + 6 CO 2 + 12 (NADPH + H + ) GA-3-P DHAP GA-3-P + DHAP fru-1,6-P 2 fru-6-P glu-6-P muchi 2fru-6-P + GA-3-P 2 xil-5-P + ribozo-5-P Reglarea cii hexozo-fosfailor - necesar de NADPH stim. etapei oxidative - GSSG / GSH crete stim. etapei oxidative - per. de cretere stim. cii - consum de carbohidrai stim. glu-6-P-DH-aza, 6-P-gluconat-DH-aza - lactaie - sinteza DH-azelor - post alimentar, diabet - sinteza DH-azelor n ficat Deficiene enzimatice - glucozo-6-P-DH-aza eritrocit deficit de GSH anemie hemolitic methemoglobinemie hemoliz - infecii, cetoacidoz - transcetolaza afinitate pt. TPP tulb. neurologice, comportamentale (sd. Wernicke-Korsakoff) CALEA ACIDULUI GLUCURONIC - UDP-glucuronil - sinteza de proteoglicani - conjugare metabolii detoxifiere - sintez de xiluloz GLUCONEOGENEZA - sinteza de glucoz din: piruvat (lactat), aminoacizi, lipide - condiii - inaniie - aport crescut de proteine, lipide i sczut de glucide - efort muscular prelungit - utilizarea lactatului din glicoliza anaerob - localizare ficat, rinichi, muchi
- importan - meninerea echilibrului H + -HO - - reconversia lactatului - utilizarea NH 3 din aa
- controlul conc. aa - intermediari pentru sint. glicolipide, glicoproteine, glucide - consum de alcool exces de NADH reducerea piruvatului la lactat reducerea OA la malat 1. Sinteza glucozei din piruvat i lactat 2 piruvat + 6 ATP + 2 (NADH + H + ) + 2 H 2 O glucoz + 6 ADP + 2 NAD + + 6 P 2. Sinteza glucozei din aminoacizi glicin, cistein serin, HO-prolin triptofan
aspartat
arginin, glutamin histidin, prolin
izoleucin, valin metionin, treonin piruvat OA OA -cetoglutarat OA CATC succinil CoA CATC OA 3. Sinteza glucozei din lipide - TG glicerol GNG AG - cu nr. par de at. de C acetil CoA - cu nr. impar de at. de C propionil CoA GNG Reglarea gluconeogenezei 1. Alosteric Glicoliza ~ 1 / GNG 2. Hormonal glucagon, corticosteroizi, catecolamine (+) lipoliza AG acetil CoA (+) piruvat carboxilaza (-) piruvat DH-aza CATC, LR, FO ATP (+) corticosteroizi (+) proteoliza aa GNG (-) insulina (+) aminotransferaze glucagon [AMPc] (+) kinaze (+) (+) FEP carboxikinaza fru-1,6-bifosfataza (-) PFK2 METABOLISMUL GLICOGENULUI - glicogenoliza - glicogenogeneza GLICOGENOLIZA - hidroliza legturilor 1-4, 1-6 glu-1-P glu-6-P glucomutaza ficat muchi glucoz energie glicoliz snge meninerea glicemiei esuturi glucodependente glicoliz energie Reglarea glicogenolizei - glicogen fosforilaza - alosteric AMP, glu-6-P, ATP - covalent fosforilare-defosforilare UDP-glucopirofosforilaza GLICOGENOGENEZA glu glu-6-P glu-1-P glu-1-P + UTP glu-UDP + PP 2P Reglarea glicogenogenezei Afectarea enzimelor implicate n metabolismul glicogenului - glicogenoza hepato-renal (boala von Gierke) glucozo-6-fosfataza - hipoglicemie, lipoliz, gluconeogenez, hiperlactacidemie - tulburri digestive, convulsii, hepatomegalie, tulburri neurologice - glicogenoza generalizat (sindromul Pompe) 1,4-1,6-glucozidaza - depunere de glicogen n miocard, muchi, SNC - glicogenoza McArdle fosforilaza muscular - depuneri de glicogen anormal - crampe musculare, dureri, rabdomioliz, oboseal - gliocogenoza Herbs fosforilaza hepatic - depuneri de glicogen n ficat
- glicogenoza de tip 0 glicogensintaza - hipoglicemie, cetoz, ntrzierea creterii, osteopenie, tulburri neurologice METABOLISMUL GALACTOZEI - n structura glicolipidelor, glicoproteinelor, proteoglicani - transformare n glu - gal + glu lactoz - sinteza mielinei Tulburri ale metabolismului - deficit de galactokinaz galactozemie, galactozurie cataract - UDP-glu-gal-1-P-uridil-transferaza acumulare de gal-1-P afectare hepatic, tulburri neuro-psihice METABOLISMUL FRUCTOZEI - fructe struguri, pere, mere - capacitate de ndulcire - vezicule seminale fructoza glicoliz CATC ATP - cristalin calea poliolilor - diabet - acumulare sorbitol, deficit de NADPH cataract, retinopatie diabetic GLICOPROTEINE - oligozaharide fixate covalent pe proteine - 1-80% glucide - monozaharide gal, manoz, fucoz, acid sialic, glucozamin, arabinoz, xiloz, N-acetil-glucozamina, N-acetil-galactozamina, acid N-acetil neuraminic - legturi - O-glicozidic serina (treonina) - N-glicozidic - asparagina - O-glicozidic HO-lizina - partea proteic activitate biologic - partea glucidic modularea funciei, localizare, durata de activitate Clasificare - O-glicozide - N-glicozide simple N-acetil-glucozamin, manoz - complexe fucoz, acid N-acetil neuraminic, N-acetil-galactozamin Biosintez 1. Sinteza oligozaharidului precursor 2. Transferul oligozaharidului pe protein 3. Sinteza glicoproteinei mature 1. Sinteza oligozaharidului precursor - RE 2. Transferul oligozaharidului pe protein - RE 3. Sinteza glicoproteinei mature aparatul Golgi procesare, elongare - glicozidaze - glicozil transferaze
- clasificare dup structura dizaharidului - acid glucuronic + N-acetil glucozamin acid hialuronic, - acid glucuronic + N-acetil-galactozamin - condroitin-4-sulfat, condroitin-6-sulfat - acid glucuronic/acid iduronic + N-acetil-galactozamin - dermatan sulfat - acid glucuronic/acid iduronic + N-acetil-glucozamin - heparan sulfat, heparin - D-galactoz+N-acetil-glucozamin + glucide keratan sulfat - mucopolizaharidoze - acumulare de dermatan sulfat, heparan sulfat ntrziere mintal, opacifierea corneei, deformri scheletice, modificri somatice, surditate, Acid hialuronic - structur liniar - asociere cu proteoglicani - localizare cartilagii, lichid sinovial, corp vitros, derm, esut nervos, esut epitelial - cu apa formeaz soluii vscose lubrifiant, protecie mecanic - hidrolizat de hialuronidaz Condroitin sulfat - cartilagii, artere, cornee, esut nervos - mineralizarea osoas, matricea cartilajului - ionizarea gr. sulfat - osteoartrit - suplimente nutritive Heparina - localizare ficat, piele, plmn - anticoagulant - antitrombina - clarificarea plasmei postprandial AMINOACIZI - 20 proteinogeni L, - neproteinogeni - -alanina, GABA - cod genetic - codon Ile Phe Pro His Trp Ser Thr Leu Val Ala Gly Lys Met Cys Tyr Gln Arg Asn Asp Glu Proprieti fizico-chimice - subst. solide - solubilitate variabil n ap, sol. n sol. H + , HO - - izomerie optic excepie glicina, L - propr. H + - HO - - pK NH2 , pK COOH
- punct izoelectric (pI)
- R influeneaz proprietile hidrofob nepolar, polar, ncrcat electric
- r. gr. NH 2 - condensare comp. carbonilici - alchilare - acilare - dezaminare - NH 2 OH - r. gr. COOH - amide - esteri - anhidride - nitrili - decarboxilare - r. gr. NH 2 + r. gr. COOH - metale Mg 2+ , Ca 2+ , Ni 2+ , Zn 2+ , Co 2+
- legtura peptidic
- r. pt. R - SH -S-S- - OH esteri Rol biologic - sinteza de proteine - structura coenzimelor SAM - sinteza de molecule active biologic hem, serotonin, histamin
- surs de energie intermediari CATC - sinteza de glucoz - transmiterea impulsului nervos - GABA
PEPTIDE - lanuri de aa - N-terminal, C-terminal - rol - aprare antioxidant glutation - reglarea tensiunii arteriale angiotensina II - hormoni - insulina PROTEINE - proteios (greac) - lanuri de aa 10 10 -10 12 proteine - proteom proteomic - sintez n ribozomi transcriere, translaie - specificitate de specie Structur - primar - secundar - teriar - cuaternar Structura primar - lan de aa structur unic - capete N-terminal, C-terminal - imprim aciunea biologic - nlocuirea aa modificarea proprietilor - evidenierea mutaiilor genetice - analiza proteinei - hidroliz chimic, enzimatic Structura secundar - leg. de H - >C=O ...... HN- - legtur dubl parial - trans -pliat -helix Structura teriar - leg. necovalente leg. de H, ionice, hidrofobe - leg covalente -S-S- - R ncrcat/R hidrofob 0,9-1,4 (alungit), 0,3-0,6 (globular) - organizarea n domenii Structura cuaternar - monomeri (protomeri, oligomeri) - legturi necovalente Proprieti - solubilitate - fibrilare, globulare - precipitare selectiv n soluii saline - 0-40 o crete solubilitatea n ap - proprieti electrochimice - amfolii - pI 7, < 7, >7 - sisteme tampon - hemoglobin/hemoglobinat - protein/proteinat - separare electroforetic - denaturarea proteinelor chimic, termic Clasificare - dup solubilitate - globulare globine, albumine, histone - fibrilare colagen, keratin, elastin - dup structur - simple - conjugate (heteroproteine) - fosfoproteine cazein, enzime fosforilate - glicoproteine - lipoproteine - cromoproteine Hb, mioglobina, flavoproteine - metaloproteine feritina, ceruloplasmina - nucleoproteine - dup funcie - enzimatice - de transport - contractile - hormonale Rol biologic - structural membran, matricea extracelular, oase, ligamente - enzime - transport i depozitare Hb, mioglobina, albumina, transferina - aprare imunitar Ig - hormoni - contracia muscular - procese fiziologice rodopsina - coagularea sngelui - transmiterea informaiei receptori - motilitate