Microbiologie general

1

STUDIUL MICROBIOLOGIC AL MUCEGAIURILOR

Mucegaiurile sunt microorganisme de tip eucariot, monocelulare
sau pluricelulare, difereniate din punct de vedere morfologic i care
se reproduc prin spori formai numai pe cale asexuat sau pe cale
mixt (asexuat i sexuat).


Mucor (88 specii) - se caracterizeaz
prin formarea de sporangiospori n
stilosporange, la maturitate prin ruperea
membranei i eliberarea sporilor rmne la
baza columelei, un collar. Sporangioforii pot fi
repartizai de-a lungul hifelor vegetative,
monopodial, simpodial sau dichotomic. In
funcie de specie, columela poate avea
dimensiuni i forme diferite. Dintre speciile mai
importante ale genului: M. mucedo - denumit i
mucegaiul alb al pinii, M. racemosus - agent
de putrezire a fructelor i legumelor.

Caractere coloniale
Pe mediul MMA formeaz colonii dense, psloase i o culoare ce variaz de la
cenuiu-argintiu pn la glbui.
Aspect microscopic
Sporangioforii pot fi lungi i neramificai, de obicei perpendiculari pe hifa
vegetativ; prezint sporangi sferici. Columela poate avea forma cilindric, piriform sau
oval; prin ruperea sau solubilizarea membranei sporangelui i eliberarea sporilor se
observ colarul. Sporangiosporii sunt oval-cilindrici, netezi i hialini. n culturi vechi poate
forma chlamidospori. Pe cale sexual formeaz zigospori verucoi, bruni.
Rspndire i rol
Mucor mucedo este agent de putrezire ntlnit pe resturi vegetale. i dejecii.
Poate produce mucegirea cerealelor, pinii, a produselor lactate acide, a crnii i
preparatelor de carne. Se poate dezvolta n domeniul temperaturilor de refrigerare.

Microbiologie general
2




Caractere coloniale
Colonia este extins, cu aspect pufos, dens, de culoare alb-glbui spre brun la
maturitate.
Aspect microscopic
Sporangioforii sunt iniial simpli, apoi se ramific. Sporangii au form globoas.
Membrana sporangelui are culoare cenuie i prezint incrustaii de oxalai. Columela
este sferic sau ovoidal i prezint collar. Sporangiosporii sunt elipsoidali, netezi, hialini.
Formeaz frecvent chlamidospori de-a lungul hifelor vegetative i reproductoare.
Rspndire i rol
Mucor racemosus este ntlnit pe reziduuri vegetale, dejecii animale, furaje
nsilozate, fructe, semine. n musturi dulci se dezvolt sub forma de celule cu muguri
ascuite drojdii de Mucor i poate produce o slab fermentaie alcoolic (1alcool).
Poate elabora toxine i substane cu efect bactericid.
Este agent de mucegire a fructelor, produselor de panificaie, etc. Pe pine,
reziduuri vegetale, lemn putred se poate ntlni i specia Mucor racemosus var.
sphaerosporus sin. Mucor globosus cu caractere morfologice similare, ns cu colonii de
culoare cenuiu deschis.












Microbiologie general
3



Genul Rhizopus (11 specii) se
caracterizeaz prin stilosporange de dimensiuni:
mari, cu columela semisferic, fr collar dup
ruperea membranei sporangelui, Sporangioforii se
dezvolt n mnunchi dintr-un punct n care se
dezvolt rizoizii - hife de susinere cu rol absorbant.
Extinderea coloniei are loc rapid ca urmare a
formrii unor lstari micelieni denumii stoloni.
Specia cea mai rspndit pe toate produsele
alimentare este Rh. stolonifer (sin. Rh. nigrificans)
- agent de mucegire a fructelor i legumelor.




Caractere coloniale
Formeaz colonii extinse, cu un miceliu dens, pslos i culoare cenuie, n care se
disting cu ochiul liber sporangiofori grupai cte 3-5, care se fixeaz de mediu cu ajutorul
rizoizilor ramificai. Prezint stoloni (hife de extindere).
Aspect microscopic
Prezint miceliu cenocitic. Stilosporangele este sferic, de culoare brun - neagr la
maturitate. Columela este semisferic, cu apofiza larg. Sporangiosporii eliberai prin
spargerea sporangelui sunt de form oval cu striaiunii longitudinale neordonate, brun -
nchis. La izolarea din medii naturale se pot observa zigospori sferici, cu suprafaa
rugoas, de culoare neagr.
Rspndire i rol
Larg rspndii n natur, n sol i pe produse vegetale, Rhizopus stolonifer este
agent de putrefacie a fructelor i legumelor n depozit. Produce mucegirea produselor
alimentare i poate elabora micotoxine. Este folosit la transformarea steroizilor i
obinerea de corticoizi, utilizai la prepararea medicamentelor.





Microbiologie general
4


Genul Aspergillus (132 specii) cuprinde numeroase specii cu importan
biotehnologic. Se caracterizeaz prin formarea de conidiofori drepi, neramificai care
poart capul conidial alctuit dintr-un suport anatomic denumit vezicul pe care se
dezvolt celulele conidiogene respectiv fialide, generatoare de lanuri lungi de fialospori.
Speciile reprezentative ale genului sunt: Aspergillus niger, Aspergillus oryzae,
Aspergillus awamori, Aspergillus phoenicis, Aspegillus usamii, Aspergillus
cinnamommeus, Aspergillus flavus.

Caractere coloniale
Colonia se dezvolt rapid, cu un miceliu catifelat, de culoare alb sau alb-glbuie.
Odat cu formarea conidiosporilor, colonia capt un aspect granular i culoarea devine
brun nchis - negru; reversul coloniei poate fi incolor sau colorat n galben-pal; marginile
coloniilor rmn albe sau slab glbui.
Caractere microscopice
Conidioforii se dezvolta de obicei direct din substrat; la partea inferioar sunt de
obicei hialini, se coloreaz n galben sau brun spre apex i au suprafaa neted. n unele
cazuri sunt prezeni conidiofori atipici, cu forma columnar a capului i cu numr mic de
fialide. Vezicula este mare, sferic sau globoas, incolor sau colorat n glbui-brun;
dup desprinderea fialidelor suprafaa devine rugoas. Fialidele se dezvolta radial pe
ntreaga suprafaa lateral a veziculei i sunt dispuse n dou rnduri: fialidele primare
sunt mai lungi dect cele secundare i sunt colorate n brun; fialidele secundare sunt
mult mai scurte. Fialosporii se dezvolta basipetal, n lanuri lungi, din fialidele secundare;
au o form sferic sau globoas, sunt iniial netezi, dar la maturitate devin rugoi i
prezint striaiuni superficiale neregulate; sunt colorai n brun-nchis, brun rocat sau
negru; pe unele medii i n anumite condiii se pot forma i scleroi, cu dimensiuni de
pn la 1 mm diametru, de culoare brun-cenuie.
Rspndire i rol
Aspergillus niger este una dintre cele mai rspndite specii ale genului
ntlnindu-se n sol, materii vegetale n descompunere, microflora vegetal (tuberculi,
rdcini, semine, fructe, cereale) i produsele lor de prelucrare,depozite, pivnie, sli de
fabricaie. Tulpini selecionate se folosesc industrial pentru obinerea de acizi organici:
acid gluconic, galic, citric, fumaric, oxalic. Acest mucegai poate elibera enzime: amilaze,
glucoamilaz, glucozoxidaze, celulaze, pectinaze, proteaze.
Speciile grupului Aspergillus niger se caracterizeaz prin proprieti biochimice
deosebite, care le difereniaz mai evident dect caracterele morfologice.





Microbiologie general
5





Caractere coloniale
Colonia pe mediul Czapek se dezvolt radial, are culoarea glbuie spre galben-
orange, brun-oliv i revers incolor.
Caractere microscopice
Conidioforii sunt nali cu perei subiri i aspect rugos, sub vezicul.
Capul conidial este sferic, la maturitate se observ la stereomicroscop, gruparea
lanurilor de conidiospori n 2-3 mnunchiuri.
Vezicula este sferic i prezint pe 2/3 din suprafaa, fialide uniseriate. Uneori pot
fi prezente i fialide secundare.
Conidiosporii sunt elipsoidali, piriformi, sau globoi la maturitate, de culoare
galben-crem, cu suprafaa neteda sau rugoasa.
Rspndire i rol
Se poate izola din sol, de pe resturi vegetale, semine, n special de orez (lat.
oryzae - orez), mal fructe, produse alimentare. Aspergillus oryzae are activitate
enzimatica deosebita i poate elabora enzime amilolitice, proteolitice i pectolitice.
Este folosit n Orient pentru obinerea de preparate enzimatice tip koji, folosite la
zaharificarea plmezilor amidonoase din orez i obinerea de buturi fermentate (sake).









Microbiologie general
6






Caractere coloniale
Colonia pe mediul Czapek este dens plat uneori brzdat i are culoare verde
glbui sau verde cenuie; reversul mediului poate fi slab colorat n nuane galben-verzui,
brun - rocat la margini.
Aspect microscopic
Conidioforii sunt netezi, incolori, cu diametrul care se lrgete treptat spre
vezicul, de form oval. Capul conidial este mare, sferic sau oval.
Fialidele se formeaz direct pe vezicul, la partea superioar. Adeseori pe
vezicul se pot forma noi conidiofori scuri.
Fialosporii au suprafaa rugoas, forma elipsoidal sau piriform. Capetele
conidiene au aspect neregulat datorit lungimii neuniforme a lanurilor de fialospori.
Rspndire i rol
Este rspndit n natura, fiind frecvent ntlnit n sol. Aspergillus glaucus var.
repens, este un mucegai xerofit i este agent de mucegire al produselor alimentare
conservate prin uscare (cereale, semine oleaginoase, fructe uscate) sau cu adaos de
zahr (sucuri, siropuri, fructe confiate).
A fost izolat de pe pine, lapte concentrat, unt.








Microbiologie general
7




Genul Penicillium (453 specii) se caracterizeaz prin formarea unui aparat
reproductor ramificat alctuit din ram, metule, fialide i fialospori cu diferenieri
morfologice n funcie de specie.
Speciile reprezentative ale genului sunt: Penicillium roqueforti, Penicillium
camemberti, Penicillium nalgiovense, Penicillium notatum, Penicillium chrysogenum,
Penicillium expansum, Penicillium islandicum, Penicillium citrinum.



Caractere coloniale
Formeaz pe mediu CYA (Czapek Yeast Extract Agar) colonii cu diametrul de 30-
40 mm de culoare verde-albstrui, cu aspect catifelat. n zona central i cea marginal,
colonia are aspect floconos. Formeaz n timp inele circadiene, n care zone cu miceliu
nalt alterneaz cu zone cu miceliu scund. Reversul este colorat n brun-nchis sau
portocaliu-brun.
Aspect microscopic
Conidioforii au perei netezi. Prezint fialide fie cu form de fiol, fie cu form
cilindric. Formeaz conidii elipsoidale, cu perei netezi.
Rspndire i rol
Penicillium expansum este un mucegai psihrofil (poate crete la -6C; crete
viguros la 0C). Se dezvolt optim la 28C. Temperatura maxim de dezvoltare este
de 35C. Necesit pentru germinare un a
w
de 0,82-0,83.
Nu necesit prezena unor cantiti mari de O
2
pentru a se dezvolta. Este
prezentat n mod frecvent pe mere i pere la care produce putrezirea brun. A fost izolat
i de pe cpuni i tomate. Apare pe cereale mai puin frecvent dect alte specii ale
genului. Foarte rspndit pe alimente cum sunt carnea i produsele din carne. Produce
micotoxine de tipul patulinei i citrininei.








Microbiologie general
8




Genul Botrytis formeaz colonii extinse, psloase, de culoare cenuie.
Conidioforii poart terminal un mnunchi de ramuri scurte purttoare de botrioblastospori
de form elipsoidal.


Caractere coloniale
Pe mediu CYA (Czapek Yeast Extract Agar) i MEA (Malt Extract Agar)
formeaz colonii extinse, floconoase. Miceliul este iniial alb, dar devine gri-gri nchis pe
msura formarii conidiilor. Reversul este de culoare gri.
Aspect microscopic
Conidioforii se formeaz din hifele aeriene, au diferite lungimi, fiecare purtnd
terminal un mnunchi de ramuri scurte, avnd capetele rotunjite. Conidiile formate pe
aceste ramuri scurte sunt elipsoidale, netede i lungi. Poate forma la nivelul septurilor
scleroi de forma lenticulara sau discoidala de culoare verzuie sau brun cenuie.
Rspndire i rol
Botrytis cinerea se dezvolta n domenii de temperaturi minime de -2 - .-5C,
maxime de 28-35C i optime la 22-25C, i ntr-un interval de pH de 2-8. Creste n medii
cu zaharoza la un aw de 0;9. Este un mucegai ntlnit n zonele temperate, pe legume
(roii) i fructe (struguri, mere, pere, cpuni ), ca agent fitopatogen sau de alterare.
Poate s produc putrezirea fructelor i legumelor i n condiii de refrigerare. n
toamnele nsorite produce "botritizarea nobila" cu obinerea de vinuri de calitate
superioara din boabele stafidite.












Microbiologie general
9





Caractere coloniale
Caracterele morfologice ale mucegaiului sunt influenate mult de compoziia
mediului de cultura. Astfel, pe MEA (Malt Extract Agar) sunt sesizate cel mai bine
caracterele morfologice, n timp ce mediul Sabouraud atenueaz cel mai mult variaiile
morfologice ale mucegaiului.
Pe MEA (Malt Extract Agar) creste rapid, formnd n 10 zile colonii. Miceliul
are culoare alb-crem, nlimi reduse i textura asemntoare cu cea a drojdiilor. Pe
CYA (Czapek Yeast Extract Agar) coloniile au diametrul variabil i nlimi reduse.
Miceliul este alb i se desprinde greu de pe mediu. Reversul este necolorat. Unele
tulpini au miceliu cu aspect catifelat. Pe MMA coloniile sunt extinse, au culoare alba,
aspect pulverulent i revers necolorat
Aspect microscopic
Prezint hife vegetative, ramificate dichotomic, pe care se dezvolta
perpendicular hife reproductoare, care nu se difereniaz de hifele vegetative. Hifele
reproductoare se fragmenteaz la maturitate aproape n ntregime, formnd
arthrospori hialini, cilindrici sau elipsoidali, cu capete rotunjite i perei groi.
Arthrosporii au tendina de aranjare n zig-zag, iar la maturitate devin sferici.
Rspndire i rol
Se dezvolta numai n medii cu aw minim 0,9, la temperaturi optime de 25-30C
i maxime de 35-38C. Creste slab la temperaturi sub 10C.
Geotrichum candidum este agentul de contaminate al produselor lactate, al
zemii de murturi, al drojdiei comprimate. Produce putrezirea acra, n special a
fructelor citrice (lmi, grapefruit), n timpul depozitarii acestora. Produce rncezirea
untului i a altor grsimi alimentare.
Este contaminant frecvent al utilajelor din industria laptelui, motiv pentru care a
fost denumit "mucegaiul utilajelor".



Microbiologie general
10





Caractere coloniale
Formeaz pe CYA (Czapek Yeast Extract Agar) i MEA (Malt Extract Agar)
colonii avnd diametral de 50-70 mm.
Miceliul este pufos, are iniial culoare alb murdar-gri, iar apoi devine brun-
cenuie. Reversul coloniei are culoare brun pn la negru.
Aspect microscopic
Prezint hife subiri, septate.
Formeaz lanuri de conidii (cca, 10 conidii), ramificate neregulat, la captul
unor conidiofori foarte scuri care nu se pot distinge.
Conidiile, prezint pn la 6 septuri transversale i 2-3 septuri longitudinale,
sunt piriforme i dispuse cu partea ascuita elongata, spre conidiofor.
Rspndire i rol
Este un mucegai saprofit, specii ale genului Alternaria se ntlnesc n microflora
cerealelor, seminelor oleaginoase proaspt recoltate cnd prezena lor poate fi
considerata drept indice de prospeime ale acestora.










Microbiologie general
11




Caractere morfologice
Colonia dezvoltata pe mediu MEA (Malt Extract Agar) are un aspect pslos,
dens, i se extinde rapid n placa.
Culoarea este roz-cenuiu spre auriu-brun. Reversul este colorat n
portocaliu-brun cu nuane mai deschise spre margine.
Aspect microscopic
n preparat microscopic se pot observa:
macroconidii, care se formeaz pe conidiofori simpli sau ramificai,
de obicei n mnunchi, fusiformi, cu 5 septuri.
clamidospori, care-sunt mono sau pluricelulari, de obicei globoi,
formai intercalar, de-a lungul hifelor sau la nivelul macroconidiilor; sunt netezi sau
rugoi, hialini sau de culoare brun pal.
Rspndire i rol
Se dezvolta optim la 24-26C, la pH 6,7-7,2. Este rspndit n natura i este
fitopatogen al gramineelor (putrezirea n coroana la plante de gru, porumb).
Poate s paraziteze i alte plante (mazre, cartofi, banane). Poate elabora
micotoxine de tipul scirpene (zearalenone).









Microbiologie general
12



Caractere coloniale
Formeaz pe CYA (Czapek Yeast Extract Agar) i MEA (Malt Extract Agar)
colonii catifelate pn la uor floconoase, netede uor ridate, de culoare oliv, cu revers
de culoare brun oliv pn la negru-bleumarin (ca o pat de cerneal).

Aspect microscopic
Prezint hife subiri, septate. Conidioforii sunt ramificai neregulat, ceea ce le
confer un aspect dendritic.
Formeaz conidii elipsoidale pn la cilindrice, cu extremiti uneori neregulate
datorita cicatricilor mugurale.
Conidiile sunt de obicei neseptate dar cele mari pot prezenta 1-2 septuri
transversale. Sunt de culoare brun pal i au perei foarte rugoi.
Rspndire i rol
Se poate dezvolta pn la un a
w
de 0,88 i ntr-un domeniu de temperatura
cuprins ntre -1-0C i 32C.
Se poate dezvolta i produce spori ntr-o atmosfera coninnd 0,25% oxigen.
Frecvent contaminant al produselor alimentare, este ntlnit pe came i produse din
carne, oua, legume proaspete, alune, cereale.
Produce pete negre pe carnea pstrat, n condiii de refrigerare.