TIINA I INGINERIA ALIMENTELOR

Bulet inul AGIR nr. 3/2003 iulie - sept embrie

80
EVALUAREA CALITII MICROBIOLOGICE
A ALIMENTELOR PRIN UTILIZAREA PETRIFILMELOR
Conf. univ. dr. ing. Gabriela BAHRIM,
Universitatea Dunrea de Jos, Galai

Absolvent a Facultii de Tehnologia i Chimia Produselor Alimentare i Tehnic Piscicol,
Universitatea din Galai, promoia 1986. Confereniar la Facultatea de tiina i Ingineria Alimentelor,
Universitatea Dunrea de Jos, Galai. Doctor n ramura de tiin tehnic, specializarea biotehnologie.
Activitate tiinific: 65 de lucrri tiinifice publicate, 30 de contracte de cercetare tiinific; 2 brevete
de invenie; 9 cri i manuale.


REZUMAT
Metodele bazate pe utilizarea Petrifilmelor sunt tehnici performante, ca o alternativ la metodele culturale standard de
evaluare a calitii microbiologice a alimentelor. Metodologia de lucru cu Petrifilme este simpl, implicnd etape similare de
analiz pentru diferite categorii de produse alimentare. Dac se are n vedere eficiena economic, comparativ cu tehnicile
culturale clasice, utilizarea Petrifilmelor ofer avantajul analizei unui numr mare de probe, ceea ce conduce la eficientizarea
lucrului n laborator i reducerea costurilor analizelor. Aplicarea acestor sisteme moderne pentru evaluarea calitii
microbiologice a alimentelor permite luarea unor msuri corective pe parcursul procesrii i previne comercializarea
produsului nainte ca rezultatele controlului de calitate s fie cunoscute.

ABSTRACT
Petrifilm plate methods are advanced cultural techniques as an alternative to standard plate count methods for microbiological
food testing. The methodology for plating on Petrifilm plates is quite sample and the steps to be followed in each product are
identical. As far as economic aspect is concerned, and compared to the traditional plate count techniques, Petrifilm plate
methods can be considered to have an advantage as a greater number of samples can be processed, thus increasing the
work capacity of the laboratory and reducing labour costs per sample or test. Using these modern systems for assessing
microbiological quality of food ensure the application of suitable corrective measures in the manufacturing process and
prevents the food product from being marketed before the quality control results have been received.

Aplicarea principiilor moderne pent ru evaluarea calit-
ii microbiologice a aliment elor, n acord cu conceptele
metodei HACCP (Hazard Analysis. Control Critical Points),
i ut ilizarea criteriilor de apreciere recomandat e de Comi-
sia Int ernaional de Specificaii Microbiologice pent ru
Aliment e (ICMSF) presupun analiza unui numr mare
de probe, prin metode rapide, care s ofere rspunsuri
prompt e i uor de interpret at (Harrigan i Park,1991).
O deosebit import an prezint st andardizarea meto-
delor de analiz aplicabile, att pentru cont rolul calitii
produselor finit e ct i pent ru controlul realizat n diferit e
et ape ale procesrii sau n t impul pstrrii i comer-
cializrii aliment elor. n acest sens, Comisia Int ernaional
de Specificaii Microbiologice pentru Alimente recomand
ut ilizarea unor planuri de evaluare, stabilit e pe baze
st at ist ice, care reprezint ghiduri de ut ilizare la nivel
int ernaional, ce facilit eaz consumul fr risc, export ul i
import ul alimentelor. Un astfel de plan include: numrul
de probe ce trebuie examinate (n), numrul de microorga-
nisme prezent e ntr-un gram sau cm
3
aliment (S), nivelul
cont aminrii pent ru care nu exist riscuri (m) i gradul de
cont aminare maxim admis (M), depirea acest ui nivel
conducnd la respingerea lot ului, pe baza indicelui C (nu-
mrul maxim de probe analizate, cu valori ale contaminrii
cuprinse nt re m i M, care dict eaz acceptabilitat ea
lot ului)(Tofan i colab., 2002).
Orientrile act uale se ndreapt spre st andardizarea
int ernaional a metodelor de analiz microbiologic i, n
acest sens, a fost constit uit, la Bruxelles, Comitet ul European
pent ru St andardizare (CEN/TC) (Upman i Bonapart e
1999).
Uniformizarea crit eriilor de evaluare a calitii micro-
biologice a aliment elor a fost posibil prin elaborarea
standardelor int ernaionale i a specificaiilor microbio-
logice, general valabile, care includ o prezent are general
a microorganismelor i a toxinelor pe care acestea le-ar
put ea elabora, descrierea st rategiilor de eant ionare, a me-
todelor analit ice (pentru recolt area probelor, omogenizarea
i realizarea diluiilor), a mediilor de cult ur i a condii-
ilor de t ermostat are, precum i indicaii privind int erpretarea
rezult atelor. Aprecierea corect a parametrilor de calit at e, n
acord cu cerinele prevzut e de aceste standardate, se va

EVALUAREA CALITII MICROBIOLOGICE A ALIMENTELOR
Bulet inul AGIR nr. 3/2003 iulie - sept embrie
81
put ea realiza numai respect nd condiiile analit ice impuse
de aceste normat ive, ceea ce const it uie garania realizrii
corecte a analizelor i int erpretrii ct mai fidele a re-
zultat elor.
Principiile moderne de evaluare a calitii microbiolo-
gice n indust ria aliment ar vizeaz n principal t rei
cat egorii de proceduri analit ice:
t ehnici de evaluare calit at iv, pent ru evidenierea
select iv a unor microorganisme indicat ori, prin t este care
s at este prezena sau absena acestora;
t ehnici de evaluare cant itat iv, pent ru determinarea
ncrct urii microbiene, care s reflecte microbiot a total
sau pe grupe specifice de microorganisme;
t ehnici de izolare i caract erizare a unor micro-
organisme din microbiota nespecific, n special pent ru
evidenierea potenialului patogen, toxicogen sau de alt e-
rare.
Lit erat ura de specialitat e prezint numeroase posibili-
t i de evaluare rapid a paramet rilor microbiologici
recomandai pent ru aprecierea calit ii mat eriilor prime,
pe faze de fabricaie, precum i a produselor finit e
(Raugel, 1993). n general, n alegerea celei mai adecvat e
metode de analiz t rebuie s se in seama de urmt oarele
crit erii (Bibek, 1996):
sensibilitat e nalt pentru concentraii reduse de celule;
acuratee i precizie;
rapidit at e;
s implice o metodologie de lucru simpl, ieft in,
nelaborioas, universal aplicabil;
s ofere un rspuns prompt , uor int erpret abil i
reproduct ibil.
Specialit ii consider c n prezent nu exist metode
general valabile care s ndeplinesc cerinele particulare
pent ru analiza specific a diverselor produse alimentare.
Singurele metode care asigur condiii pent ru evaluarea
simult an din punct de vedere cant it at iv, calit at iv i
caract erizare a microbiotei sunt cele bazat e pe examen
cult ural. Evalurile de acest t ip prevd stabilirea gradului
de cont aminare microbian, prin determinarea numrului
de unit i format oare de colonii (ufc), cnd examenul
cult ural est e corelat cu st udii calit at ive de izolare i
caract erizare a microorganismelor cont aminant e.
n prezent , t ehnicile cult urale de analiz microbiolo-
gic au fost mult perfecionat e, aspect ele vizate fiind:
rapidit at ea, simplificarea condiiilor de analiz i posibili-
t atea obinerii unui rspuns prompt , uor int erpretabil n
sensul creterii acurat eii i reproduct ibilitii rezult at elor.
Au fost mbuntit e de asemenea tehnicile dest inat e evi-
denierii microorganismelor patogene, prin perfecionarea
examenului cult ural i corelarea acest uia cu det erminri
imunologice, de biologie molecular .a. (Jordano i
Medina,1999).
Trebuie remarcat c rapidit at ea t ehnicilor cult urale
moderne nu survine n toat e cazurile ca urmare a reducerii
perioadei de termost at are, comparat iv cu metodele clasice,
ci est e efect ul simplificrii metodologiilor de lucru. Ast fel,
prin inoculare direct se elimin et apele de recolt are i
pregt ire a probelor pentru analiz, iar prin ut ilizarea de
medii de cult ur specifice, ct mai adecvate scopului pro-
pus, se asigur dezvolt area select iv a microorganismelor
st udiat e.
Metodele cult urale sunt n prezent mult simplificate prin
ut ilizarea unor sist eme comerciale, denumit e Pet rifilme
(n limba englez, Petrifilms), n care mediul de cult ur
specific (n general, un mediu select iv), deshidrat at est e
fixat pe un suport adeziv i acoperit cu o folie din plast ic.
Prin inocularea suspensiei de celule, lichidul hidrat eaz
mediul i prin t ermost at are est e posibil dezvolt area
microorganismelor.
Petrifilmele au fost conceput e n vederea sat isfacerii
conceptelor sist emului HACCP (analiza hazardului, con-
trolul punct elor critice), care prevd aplicarea unor msuri
corect ive, pe tot parcursul procesului de producie, fr ca
acest a s st agneze, ceea ce impune analiza unui numr
mare de probe, cu obinerea unor rezultat e prompt e i n
scurt t imp, obiect ive ce nu pot fi realizat e prin aplicarea
metodelor clasice de control microbiologic.
Practica a demonstrat c Petrifilmele const it uie n pre-
zent sist eme eficient e de analiz microbiologic, aplicabile
mai ales pentru evaluarea calit ii materiilor prime i con-
trolul n punct ele critice pe parcursul procesrii acestora,
oferind numeroase avant aje, care se regsesc n reducerea
t impului de analiz, reducerea preului de cost al analizei
per prob, creterea numrului de probe analizat e, asigu-
rarea inocuit ii aliment elor i mbuntirea subst anial a
product ivit ii (Jordano i Medina, 1999).
Tehnica de ut ilizare a Pet rifilmelor n analiza micro-
biologic est e extrem de simpl i presupune parcurgerea
urmtoarelor etape (fig.1):
se dilueaz proba prin t ehnica diluiilor decimale
pn la o concent raie de celule de aproximat iv 10
4
celule
per ml;
se ridic filmul superior;
se inoculeaz 1 ml suspensie dintr-o diluie corespun-
ztoare n cent rul Petrifilmului aezat pe un suport special;
se elibereaz filmul superior, care se las s cad
liber;
cu ajutorul dispozit ivului de rspndire se preseaz
uor deasupra zonei inoculat e pentru dist ribuia uniform a
celulelor din suspensie pe t oat suprafaa circular a
mediului de cult ur;
se ndeprt eaz dispozit ivul de rspndire i se
ateapt un minut pentru solidificarea mediului;
se t ermost at eaz (pachet e de pn la 20 Pet rifilme)
n condiii opt ime, specifice pentru dezvolt area micro-
organismelor analizat e, n funcie de recomandrile din
inst ruciunile de ut ilizare a Pet rifilmului.
Eficiena aplicrii Pet rifilmelor a condus la ext inderea
ut ilizrii acestora pentru evaluarea calitii microbiologice
a numeroase aliment e, precum: lapte i produse lact at e
TIINA I INGINERIA ALIMENTELOR
Bulet inul AGIR nr. 3/2003 iulie - sept embrie
82
(brnzet uri, iaurt, ngheat); carne i preparat e din carne;
pet e i alte produse acvat ice; ou; legume i fructe (car-
t ofi, soia, mere, ciree, alune, nuci); cereale i produse
cerealiere (fin, cereale mic dejun, past e finoase); con-
diment e.
n t abelul 1 sunt prezent at e t ipurile de Pet rifilme
comerciale, exist ent e n prezent pe pia, i principalele
lor caract erist ici.
Garania ut ilizrii Petrifilmelor est e n prezent validat
oficial de numeroase asociaii de renume din ntreaga lume
(t abelul 2). Validarea s-a realizat pe trei criterii de baz:
reproduct ibilit ate, repetabilit ate i precizie.
n t abelul 3 se prezint o analiz comparat iv a
fidelit ii evalurilor cant it at ive, pent ru pat ru indicatori
microbiologici: drojdii i mucegaiuri, bact erii aerobe
mezofile, bact erii coliforme i Escherichia coli, realizat
prin analiza a ase t ipuri diferit e de produse alimentare
(lapt e past eurizat , ngheat , ou, carne tocat , cpune,
mazre congelat ), prin ut ilizarea Pet rifilmelor, n para-
lel cu t ehnicile cult urale clasice ce ut ilizeaz medii
select ive (OGYE agar - oxyt et racycline glucose yeast
agar; PCA plat e count agar; VRBA violet reed bile
agar; EMB levine eosin methylene blue) (Jordano i
colab., 1995).
n toat e cazurile, evalurile privind numrul t ot al de
drojdii i mucegaiuri au condus la rezult at e inferioare, n
variant ele analizelor realizate cu Pet rifilme, comparat iv
cu metodele convenionale. Explicaia const probabil n
existena unei suprafee insuficiente pentru cret erea extins
a coloniilor de mucegai, ceea ce conduce n multe cazuri la
suprapunerea coloniilor, genernd astfel erori n evaluarea
corect a unitilor formatoare de colonii (ufc). De remarcat
est e fapt ul c la Pet rifilmele dest inate evalurii drojdiilor i
mucegaiurilor, suprafaa mediului de cult ur est e de 30 cm
2
,
comparat iv cu 20 cm
2
, n cazul majorit ii Petrifilmelor
conceput e pentru st udiul bacteriilor.

Tabelul 1. Tipuri de Petrifilme comerciale

Tip Petrifilm
Grup de
microorganisme
analizate
Condiii de
termostatare
Particulariti
PYM
(Petrifilm yeast/mould)
Drodjii i
mucegaiuri
72-120 ore,
25C
determinarea numrului total de drojdii i mucegaiuri;
nu necesit adugarea de antibiotice sau acid tartric.
PAC
(Petrifilm aerobic count)

Bacterii aerobe
mezofile

48 2 ore,
30 1C
determinarea numrului total de bacterii aerobe;
analiza este eficient prin prezena unui indicator care coloreaz
coloniile n rou.
PCC
(Petrifilm coliforms count)



Bacterii coliforme 24 2 ore,
35 1C sau
37 1C
evidenierea coliformilor totali;
analiza este nlesnit de prezena unui indicator ce coloreaz
coloniile n rou;
filmul superior reine gazele rezultate prin fermentaia substratului
lactoz, cu apariia specific a bulelor de gaz n jurul coloniilor.
PHSCC
(Petrifilm high sensivity
coliforms count)

Bacterii coliforme 24 2 ore,
32...35C
evidenierea bacteriilor coliforme la diluii mari n probele de
analizat (1-2 celule g
-1
);
permite inocularea a 5 ml prob, sau diluii ale acesteia;
evaluare similar ca i n cazul utilizrii Petrifilmelor tip PCC.
P 2000 CC
(Petrifilm rapid coliforms
count)


Bacterii coliforme 24 2 ore,
35 1C
dezvoltarea rapid a bacteriilor coliforme;
indicator de pH foarte sensibil, cu evidenierea producerii de acid,
chiar de la nceputul formrii coloniilor;
reducerea timpului de analiz prin asigurarea unei creteri accelerate;
rezultate test prezumtiv n 6-14h, cu confirmare n 18-24h.
PEC

(Petrifilm E. coli)
Escherichia coli 48 2 ore,
35 1C
sau
24 2 ore,
42 1C
dou teste n unul singur: evaluarea cantitativ a coliformilor fecali
i a lui E. coli;
conine indicator -glucuronidaz pentru evidenierea selectiv a
tulpinilor de E. coli;
rezultate pozitive n 24-48 ore;
nalt selectivitate.
Petrifilm Kit HEC Escherichia coli
tip enterohemoragic
48 2 ore,
35 1C
sau
24 2 ore,
42 1C
evidenierea serotipurilor E. coli enteropatogene (O157: H7), care
produc glucuronaze;
se bazeaz pe utilizarea membranei active ELISA, care se menine
2 minute n contact cu Petrifilmul, iar dup 18 ore de termostatare
testul pozitiv se evideniaz prin apariia unor pete gri pe membran.
Petrifilm
Enterobacteriaceae

Enterobacterii 24 2 ore,
30 1C sau
37 1C
evidenierea bacteriilor din familia Enterobacteriaceae;
producerea de acid este pus n eviden cu ajutorul unui indicator
de pH, ce vireaz n galben n mediu acid;
evidenierea formrii de gaz prin fermentaia heterolactic a lactozei.
Petrifilm Staph Express
Count System
(Petrifilm Staph Express
Count Plate +
Petrifilm Staph Express Disk)
Staphylococcus
aureus
24 2 ore,
37 15C
evidenierea selectiv a tulpinilor de Staphylococcus aureus prin
formarea de colonii de culoare rou-violet;
confirmarea prezenei lui Staphylococcus aureus, cu ajutorul discului,
care conine albastru-toluidin-O, ce faciliteaz developarea unei zone
de culoare roz (reacie DN-az pozitiv), n jurul coloniilor specifice.

EVALUAREA CALITII MICROBIOLOGICE A ALIMENTELOR
Bulet inul AGIR nr. 3/2003 iulie - sept embrie
83

















Fig. 1. Etape de utilizare a Petrifilmelor n analiza microbiologic:
1 inoculare; 2 rspndire (etalare); 3 termostatare; analiz
cantitativ i calitativ.

Tabelul 2. Validarea oficial a utilizrii Petrifilmelor pentru
evaluarea calitii microbiologice a alimentelor

Organizaia
internaional*
Produse pentru
care s-a realizat
validarea
Indicator microbiologic
AOAC
Majoritatea
alimentelor
Drojdii i mucegaiuri
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme i
Escherichia coli
Petrifilm seria 2000 (P 2000 CC)
pentru determinarea rapid a
bacteriilor coliforme
ANFOR
Majoritatea
alimentelor
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme i
Escherichia coli
Petrifilm seria 2000 (P 2000 CC)
pentru determinarea rapid a
bacteriilor coliforme
Enterobacterii
NMKL
Majoritatea
alimentelor
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme i
Escherichia coli
VDIA
Lapte i produse
lactate
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Lapte i produse
lactate
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
HPB
Alte alimente
Evaluarea
calitii mediului
Drojdii i mucegaiuri
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme i
Escherichia coli
Test Kit HEC

* AOAC Association of Official Analytical Chemists (SUA);
AFNOR French Standardization Association (Frana);
NMKL Nordic Committee of Food Analysis;
VDIA Victorian dairy Industry Authority (Australia);
HPB Health Protection Branch, Compendium of Analytical
Methods.
Tabelul 3. Rezultatele evalurilor cantitative, prin analiza
microbiologic cu Petrifilme, comparativ cu tehnicile culturale
clasice (Jordano i colab., 1995)

log
10
ufcg
1
(ml
1
)
a)
Produse
li t
Indicatori
i bi l i i
Petrifilme
Metode culturale
clasice
Lapte
pasteurizat
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Escherichia coli
Drojdii i mucegaiuri
2,69
1,30
absent
1,30
2,30
1,0
absent
1,60
ngheat Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Escherichia coli
Drojdii i mucegaiuri
5,17
absente
absent
absente
5,08
absente
absent
absente
Ou Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Escherichia coli
Drojdii i mucegaiuri
2,53
absente
absent
1,77
absente
absente
absent
2,30
Carne
tocat
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Escherichia coli
Drojdii i mucegaiuri
5,81
5,60
absent
5,47
5,69
5,58
absent
5,48
Cpune
proaspete
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Escherichia coli
Drojdii i mucegaiuri
2,71
2,35
absent
5,26
2,64
2,02
absent
5,29
Mazre
congelat
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Escherichia coli
Drojdii i mucegaiuri
5,34
2,31
1
2.82
5,49
1,55
Absent
3,86

a)
Valorii medii, pentru cinci probe n paralel (n = 5), stabilite prin
analiz statistic (P > 0,05).

Evalurile stat ist ice, realizat e pe baza coeficienilor de
corelaie i a pantei ecuaiilor de regresie liniar, ofer
cert it udini privind fidelitat ea rezult atelor pent ru principalii
indicatori microbiologici i recomand ut ilizarea Pet ri-
filmelor, ca o alt ernat iv la met odele microbiologice
convenionale, pentru cont rolul microbiologic, realizat att
pe faze de fabricaie ct i n cazul mat eriilor prime i al
produselor finit e (tabelul 4).
Datele obinut e, exprimate ca valori medii, stabilite prin
calcul stat istic (P > 0,05), pentru cinci probe n paralel
(n = 5), cert ific fidelitat ea i acurateea analizelor reali-
zate cu Pet rifilme, amplificarea preciziei realizndu-se prin
asigurarea condiiilor select ive de cult ivare i interpretare a
rezult atelor, ceea ce permit e evaluarea corect i dist inc-
t iv a speciilor analizat e (fig. 2).
n concluzie, implementarea ut ilizrii Petrifilmelor n
cont rolul calit ii microbiologice a aliment elor ofer
numeroase faciliti care se reflect n:
simplit ate n ut ilizare i int erpretarea cu acurat ee a
rezult atelor, prin crearea unor condiii select ive de cret ere
i de evaluare a microorganismelor t est at e. Evalurile
cant itat ive sunt facilit at e, chiar n cazul dezvoltrii unui
numr mare de colonii, prin caroiajul t iprit pe filmul
inferior, care delimiteaz suprafee de 1 cm
2
;

1
2
3
TIINA I INGINERIA ALIMENTELOR
Bulet inul AGIR nr. 3/2003 iulie - sept embrie
84

Tabelul 4. Evaluri statistice privind acurateea
analizelor microbiologice realizate cu Petrifilme,
comparativ cu metodele convenionale
(Jordano 1995, 1999)

Parametrul
statistic
Indicatorul
microbiologic
Petrifilme/
Metode culturale
clasice
a)
Coeficient de
corelaie
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Drojdii i mucegaiuri
0,897
0.861
0.981
Panta ecuaiei
de regresie
Bacterii aerobe mezofile
Bacterii coliforme
Drojdii i mucegaiuri
0,599
1.051
0,998
a)
Valori medii pentru 5 probe n paralel (n = 5), pentru ase tipuri
diferite de produse alimentare: lapte pasteurizat, ngheat, ou, carne
tocat, cpune proaspete, soia congelat.


1.
2.

3.
4.

Fig. 2. Dezvoltarea selectiv a microorganismelor,
n funcie de natura Petrifilmelor:
1 drojdii i mucegaiuri; 2 bacterii aerobe mezofile;
3 enterobacterii; 4 bacterii coliforme/ E. coli.

reducerea semnificat iv a cost ului manoperei per
analiz;
reducerea la jumt at e a t impului necesar pent ru
realizarea analizelor microbiologice, cu impact pozit iv
asupra: controlului eficient al punct elor crit ice, opt imizrii
st rat egiilor de cont rol, cret erii numrului de analize
efect uat e, eficientizrii procesrii, mbuntirii calit ii i
asigurrii inocuit ii produselor finite;
impact pozit iv asupra organizrii laboratorului de mi-
crobiologie, prin eliminarea operaiilor de pregt ire i steri-
lizare a mediilor de cult ur i a ustensilelor de laborator,
impuse de metodele convenionale de analiz microbiologic;
riscuri reduse pentru mediul nconjurtor dup ut ilizare;
economie de spaiu la t ransport , pstrare i t ermo-
st at are.
St udii efect uat e n 85 de companii product oare de
alimente, privind eficiena economic a t ehnicilor de evalu-
are a calit ii microbiologice, au demonstrat c manopera se
reflect n proproie de 70,7 % n cost ul tot al al analizelor,
iar prin ut ilizarea Petrifilmelor se pot economisi anual 99 -
400 ore, timp ce poat e fi valorificat pentru elaborarea de
programe eficiente pent ru evaluarea calitii i creterea
numrului de analize (Jordano, 1999).
BIBLIOGRAFIE
1. Harrigan, W.F., Park, R.W. Making safe food. A management guide
for microbiological quality. Academic Press, Londra, New York, 1991.
2. Bibek, R. Fundamental Food Microbiology. CRC Press, Boston,
Londra, New York, 1996.
3. Jordano, R. et al. Comparison of Petrifilmmethod to conventional
methods for enumerating aerobic bacteria, coliforms, Escherichia coli
and yeasts and molds in foods. J. Food Prot., 51, p. 658-662, 1995.
4. Jordano, R,Medina, L. Petrifilm An Enhanced cultural tech-
nique. In: Robinson, RK; Batt, CA; Patel, PD .eds. Encyclopedia of
Food Microbiology, vol.3, p.2095-2100, Academic Press, 1999.
5. Raugel, N. Nouveaux outils et nouvelles mthodes d'analyse rapide
en agro-alimentaire. Tech. Et Doc, Lavoisier, Paris, 2002.
6. Tofan, C., Bahrim, G., Nicolau, A., Zara, M. Microbiologia
produselor alimentare. Tehnici i analize de laborator. Editura
AGIR, Bucureti, 1993.
7. Upman, M., Bonaparte, C. Rapid methods for food hygiene ins-
pection. In: Robinson, RK; Batt, CA; Patel, PD .eds., Encyclopedia
of Food Microbiology, vol.3, p.1887-1895, Academic Press, 1999.