Laboratorul de

bacteriologie
P E T R I C Ă S A R A H

B I O L O G I A D E Z V O L T Ă R I I Ș I
I N F L U E N Ț A F A C T O R I L O R E X O G E N I
A S U P R A O R G A N I S M E L O R

A N I
 CUPRINS

1. Introducere

2. Gestionarea spațiului

3. Managementul probelor biologice

4. Analizele medicale aferente

5. Aparatura de laborator

6. Reactivi și consumabile

7. Responsabilitățile personalului

8. Asigurarea  calității

9. Gestionarea deșeurilor

10. Manevre care implică risc de contaminare

11. Bibliografie
 • Se ocupă cu studiul microorganismelor implicate în patologia umană
şi interacţiunile dintre om şi aceste microorganisme.

• Diagnosticul bacteorologic, participarea la monitorizarea evoluţiei

clinice a bolilor infecţioase şi la activităţile de supraveghere şi
control al infecţiilor constituie principalele domenii de activitate

Introducere ale bacteriologiei. 

• Cunoaşterea necesităţilor nutritive ale bacteriilor este foarte

importantă, deoarece stă la baza preparării mediilor de cultură
destinate izolării şi cultivării microorganismelor în laborator fie în
scop diagnostic, fie în scop productiv.
 încăpere pentru culturi de celule; 

încăpere pentru pregătirea materialelor, prepararea şi turnarea mediilor;

cameră obscură pentru microscopia cu fond întunecat, cu contrast de fază şi cu fluorescenţă;

Gestionarea spaţiu destinat sterilizării, care trebuie să conţină minimum o autoclavă.

spatiului spaţiu pentru depozitarea separată a materialelor sanitare, consumabilelor, reactivilor,

substanţelor toxice (se vor depozita separat materialele sterile de cele nesterile); 

spaţiu pentru depozitarea deşeurilor infecţioase până la neutralizarea şi/sau evacuarea lor; 

vestiar şi sală de repaus pentru personal.

 Managementul probelor biologice

• Probele preluate de laborator trebuie să fie insoțite de suficiente informații pentru a putea
identifica tipul probei, când și unde a fost colectat și ce testări se solicită. 

Etapele diagnosticului bacteorologic:

Ziua 1: Ziua 2: Ziua 3:

- recoltarea probelor - identificare - finalizare identificare

- examenul macroscopic • Caractere culturale
- examenul microscopic • Identificare gene
- însămânțarea pe mediile • Teste biochimice
de cultură • Teste de patogenitate
- incubare • Teste moleculare
- antibiograma
- incubare
- interpretare antibiograma 
- încadrare în fenotipuri de
rezistență
- editare și validare
rezultate
 Analize medicale 
Examenul microbiologic al secreției vaginale și uretrale / examen microscopic, însămânțare, identificare
bacteriană și fungică: Streptococcus spp., Staphylococcus aureus, Enterobacteriaceae, Pseudomonas
aeruginosa, Candida spp.

Examenul microbiologic al secreției purulente / examen microscopic, însămânțare, identificare

bacteriană și fungică: Straphylococcus aureus, Streptococcus spp., Enterobecteriaceae, Pseudomonas
aeruginosa, Candida spp.

Examenul microbiologic al secreției nazale / examen microscopic, însămânțare, identificare bacteriană

și fungică: Staphylococcus aureus, Streptococcus spp., Candida spp.

Examenul microbiologic al secreției faringiene / examen microscopic, însămânțare, identificare

bacteriană și fungică: Staphylococcus aureus, Streptococcus spp., Candida spp.
 Analize medicale 
Urocultura / examen microscopic, însămânțare, identificare bacteriană și fungică: Staphylococcus
spp., Enterococcus spp., Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Candida spp.

Coprocultura / examen microscopic, însămânțare, identificare bacteriană și fungică: Salmonella

spp., Shigella spp., Candida spp.

Antibiograma / difuzimetrie 

Antifungigrama / metoda microdiluțiilor
 Aparatura de laborator

sistem automat de
hote de biosiguranţă; distribuire medii de centrifuge; autoclave; etuve;
cultură solide;

sisteme automate de
sisteme automate de identificare bacteriană şi frigidere, congelatoare (- incubatoare (37ºC – sistem de producere apă
detecţie bacteriană; determinare a rezistenţei 20°C / -80°C); 42ºC); distilată;
la antibiotice;

microscop cu
micropipete automate (cu fluorescență, cu fond anse bacteorologice,
volum fix sau variabil) întunecat și cu contrast de pipete Pasteur
fază
 Reactivi si consumabile

Pentru examenul microscopic se

folosesc – alcool metilic, albastru de
metilen, soluție May-Grünwald-
Giemsa, colorant Ziehl-Neelsen,
colorant acridinic de tip violet, soluție
de lugol, fuxină, safranină.
Pentru însămânțare se folosesc
mediile – lactozate,
cromogene, bulion, geloză sânge,
geloză chocolat, Mueller-Kauffmann.
 Responsabilitatile personalului

• Prepararea şi sterilizarea mediilor de cultură si a • Operarea sistemelor electronice de gestionare a materialelor

materialelor pentru tehnici aseptice;  de  laborator;

• Prepararea soluţiilor de agenţi de sanitizare, dezinfecţie şi a • Înregistrarea în sistem editat sau electronic

amestecului oxidant;  a probelor recepționate pentru o analiză curentă si stabilitate; 

• Realizarea activităților pregătitoare pentru efectuarea • Asigurarea curățeniei curente a aparaturii conform deciziei

analizelor, în limita competențelor sale (pregătirea hotelor șefului de laborator; 
cu flux de aer laminar pentru lucru, pregătirea conform
• Gestionarea deșeurilor din
instrucțiunilor în vigoare a materialelor pentru efectuarea
laborator și predarea acestora conform procedurilor în 
testelor: inscripționare, repartizare medii, cântăriri, etc); 
vigoare;
• Recepţionarea, înregistrarea, organizarea depozitării
• Pregăteşte şi predă materialele de arhivat din cadrul   
materialelor de laborator (sticlărie, medii de cultură,
  laboratorului.
reactivi, etc.) şi gestionarea acestora; 
 • Managementul calităţii se realizează prin implementarea
sistemului de asigurare a calităţii, care reprezintă un ansamblu
de funcţiuni prestabilite şi sistematice necesare pentru a
demonstra faptul că serviciile oferite (analize medicale) satisfac
exigenţele referitoare la calitate.

Asigurarea • Executarea controlului intern de calitate este responsabilitatea

coordonatorului medical şi se realizează în conformitate cu

calitatii dispoziţiile legale în vigoare, cu obligaţia corelativă a

reprezentantului legal al laboratorului de analize medicale de a
asigura baza materială necesară îndeplinirii acestuia.
 Gestionarea deseurilor

Probele biologice și culturile se vor arunca în recipiente etanșe și cu capac pentru a se preveni scurgerea. 

Pentru că sunt deşeurile infecțioase periculoase durata depozitării temporare nu trebuie să depăşească 72 de ore, din care 48 de ore în incinta
unităţii şi 24 de ore pentru transport şi eliminare finală.

Laboratorul de analize trebuie să fie racordat la reţeaua de canalizare a oraşului sau să deţină instalaţii proprii de colectare, tratare şi evacuare
a apelor uzate, fără a se produce poluarea solului, apei şi aerului, conform legislaţiei mediului în vigoare.

Laboratorul trebuie să dispună de recipiente corespunzătoare, cu capac, pentru depozitarea deşeurilor contaminate în vederea sterilizării şi
apoi, după caz, a incinerării; recipiente acoperite, rezistente, pentru depozitarea exterioară a deşeurilor menajere până la evacuare.
Manevre care implica risc de contaminare
1. Pipetarea cu pipete automate:

- se pot genera aerosoli când din vârf cade o picătură pe suprafața de lucru, când se amestecă în lichid prin
aspirare-dispersare, când se elimină ultimele picături din vârf - pentru evitarea formării aerosolilor se va pipeta
lent, nu se vor amesteca materialele infecțioase prin aspirare-dispersare. 

2. Transferul materialului infecțios:

- pentru a evita caderea materialului infecțios din ansă, se recomandă să se folosească anse cu bucla închisă, cu
diametrul între 2-3 mm. 

3. Centrifugarea:

- în eventualitatea spargerii unui tub, trebuie oprită – se deschide doar după 30 de minute de la oprire, cu
echipament de protecție inclusiv respiratorie și se dezinfectează interiorul centrifugii.
 Bibliografie
1. https://www.cnscbt.ro/index.php/info-medical/1608-recomandari-privind-biosiguranta-in-laboratorul-clinic-de-microbiologie/file

2. http://www.lexmed.ro/doc/lab_an_med_norme_de_funct.pdf

3. https://lege5.ro/gratuit/gu2timbw/organizarea-si-functionarea-laboratorului-care-efectueaza-analize-medicale-norma?dp=ge2demryhe3ds 

4. https://spitalbuhusi.ro/wp-content/uploads/2018/02/procedura-privind-recoltarea-probelor-biologice-si-patologice-si-trimiterea-acestora-catre-laborator.pdf 

5. http://envirotronic.ro/aparatura-laborator/laboratoare-microbiologie/ 

6. https://www.spitalulbabes.ro/laboratoare/laborator-microbiologie-clinica/ 

7. https://rezidentiat.ms.ro/curricule/2017/microbiologie_medicala_2017.pdf 

8. https://www.umft.ro/wp-content/uploads/2021/10/Microbiologie_generala_indreptar_de_lucrari_practice_ebook.pdf 

9. https://interservisan.ro/specializari/bacteriologie/ 

10. https://www.sigmaaldrich.com/RO/en/product/sial/a5306?gclid=CjwKCAjwrfCRBhAXEiwAnkmKmSb6jX73RfHsNepVWnMnootdSgwZE8Kt0sXcDeo3ZqNRi43u48pkzBoCRawQAvD_BwE 

11. http://www.ms.ro/wp-content/uploads/2016/12/Bacteriologie-1.pdf 
Va multumesc pentru atentie!