Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Cursmembrane PDF
Cursmembrane PDF
O ester
C O CH2
C O CH
fosfat
H2C O P O
lanuri hidrocarburice
glicerol
Gruparea fosfat se poate lega n continuare la una din urmtoarele patru grupri polare: colina,
etanolamina, serina i inositol, rezultnd cele patru tipuri de fosfolipide: fosfatidilcolina (lecitina),
fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina i fosfatidilinositol.
Toate aceste modificri induc structura specific fosfolipidelor, care au un capt polar,
hidrofil i dou lanuri hidrocarburice nepolare, hidrofobe. Fosfolipidele sunt de aceea molecule
amfifile (prezint att caracter hidrofil ct i caracter hidrofob). Captul polar al fosfolipidelor are o
sarcin electric net negativ.
a)
b)
c)
d)
e)
f)
Odat format, bistratul lipidic este stabilizat prin aciunea unor fore de slab intensitate ce
determin formarea unor legturi necovalente. Fore de tip Van der Waals apar n urma apropierii
spaiale a lanurilor de acizi grai, determinat de mpachetarea compact a lipidelor din bistrat. De
asemenea, apar legturi de hidrogen i atracii electrostatice (legturi ionice) ntre gruprile hidrofile
ale fosfolipidelor i moleculele soluiei apoase. Spunem c repulsia hidrofob determin formarea
bistratului lipidic, iar celelalte fore slabe l stabilizeaz. Structura bistratului se schimb odat cu
modificarea temperaturii. La temperaturi sczute, lanurile hidrocarburice ale lipidelor sunt strns
mpachetate i membrana devine rigid (se solidific). Odat cu creterea temperaturii, lanurile
lipidice devin din ce n ce mai dezordonate, fluiditatea crete, iar membrana ncepe s se topeasc.
Capt
polar
Lanuri hidrocarburice
nepolare
Capt
polar
Mediu
apos
Mediu
apos
Membran solid
Membran fluid
3
Dac o lipid este plasat ntr-o soluie apoas, moleculele de ap din jurul lipidei nu vor
putea forma legturi de hidrogen cu aceasta. De aceea, pentru a minimiza energia liber a
sistemului, moleculele de ap vor tinde s formeze ct mai multe legturi ntre ele i vor avea mai
puin libertate de micare, ceea ce duce la ordonarea moleculelor de ap ntr-o structur de tip
cristalin, numit clatrat. Un clatrat are n general forma unui poliedru cu 12 sau 16 fee pentagonale,
n centrul cruia se afl molecula hidrofob. In schimb, n cazul n care lipidele sunt suficient de
numeroase pentru a se produce separarea celor dou faze (ap/lipide) prin formarea unor structuri
lipidice compacte (micele, bistraturi), realizarea clatrailor nu va mai fi posibil i moleculele de ap
vor deveni mai dezordonate.
Prin structura sa, bistratul lipidic reprezint deci o barier pentru moleculele hidrofile, cum
ar fi proteinele, zaharurile, acizii nucleici, diferii ioni sau molecule polare. In prezent este unanim
acceptat modelul mozaicului fluid proteolipidic al membranei, propus de Nicholson i Singer n
1972. Intr-adevr, diverse studii efectuate cu ajutorul microscopului electronic au artat c
membranele celulare sunt bistraturi lipidice n care sunt ncorporate integral sau parial proteine,
glicoproteine i lipoproteine.
Proteinele membranare pot fi:
a) proteine intrinseci (sau integrale);
b) proteine extrinseci (sau periferice).
Proteinele integrale sunt amfifile i reprezint o proporie de 70% din proteinele
membranare. Aceste proteine au un caracter predominant hidrofob, datorat reziduurilor nepolare ale
proteinei (ai aminoacizilor hidrofobi). De aceea, proteinele intrinseci sunt nglobate n bistratul
lipidic sau, de cele mai multe ori, strbat membrana de la o fa la alta. In multe cazuri, ele prezint
poriuni elicoidale (alfa-helixuri) multiple care traverseaz membrana de mai multe ori. Regiunile
hidrofile ale unei astfel de proteine rmn expuse la soluia apoas de pe o parte sau alta a
membranei. Proteinele intrinseci sunt puternic legate de membran, avnd un rol important n
meninerea stabilitii membranelor.
Proteinele periferice nu au regiuni hidrofobe, ele asociindu-se frecvent cu diverse proteine
integrale sau cu regiuni hidrofile de la suprafaa membranei. De aceea, proteinele extrinseci sunt
legate relativ slab de membran.
Mediu extracelular
Lan de
oligozaharide
Fosfolipid
Glicolipid
Bistrat
lipidic
Colesterol
Citoplasm
Proteine
integrale
Protein
periferic
4
Circa 10% din fosfolipidele i proteinele membranare leag chimic (prin legturi covalente)
lanuri de oligozaharide (carbohidrai formai din 3-6 monozaharide cum ar fi glucoza, galactoza sau
acidul sialic), formnd astfel glicolipide i respectiv glicoproteine. Faa exterioar a membranei
plasmatice este bogat n glicolipide, ale cror lanuri hidrofobe sunt ncorporate n regiunea
hidrofob a membranei, iar capetele hidrofile sunt expuse mediului extracelular. Acestea, mpreun
cu carbohidraii ataai la unele proteine integrale, particip la procesele de recunoatere celular
controlate de sistemul imunitar al organismului. Oligozaharidele sunt complet absente pe suprafaa
intern a membranei plasmatice, ceea ce arat c tranziiile rotaionale (de pe o fa pe alta a
membranei) ale glicoproteinelor i glicolipidelor nu sunt favorizate din punct de vedere energetic.
Carbohidraii pot contribui la aranjamentul spaial al glicoproteinelor i pot crete stabilitatea
acestora n interiorul membranei, contribuind la rezistena structural a membranei. In general,
glicoproteinele cresc vscozitatea membranar. In cazul glicolipidelor, oligozaharidele pot aciona
ca situsuri de recunoatere pentru anumite molecule din mediul extracelular, pot contribui la
stabilitatea membranei sau pot participa la conexiunile dintre celulele vecine ntr-un esut.
Colesterolul este o alt component important a membranelor celulare, avnd un caracter
puternic hidrofob. Este un sterol (acesta este o lipid ne-glicerid, o combinaie ntre un steroid i un
alcool) ce se gsete n componena membranelor celulare, n toate esuturile organismului.
Gruparea OH (care este polar) de la captul moleculei de colesterol interacioneaz cu gruparea
fosfat hidrofil a fosfolipidelor membranare, iar poriunea steroid i lanul hidrocarburic nepolar al
colesterolului se dispun n interiorul hidrofob al membranei. Colesterolul modific fluiditatea
membranei, stabiliznd-o pe intervale mai mari de temperatur; membrana rmne fluid la
temperaturi mai sczute dect n absena colesterolului. Deci, colesterolul scade temperatura de
topire a membranelor celulare. De asemenea, colesterolul reduce permeabilitatea membranei la ionii
de hidrogen (H+) i de sodiu (Na+).
Fluiditatea membranar este esenial pentru funcionarea corect a proteinelor integrale. Ea
este determinat n principal de compoziia lipidic a membranei i se modific n funcie de
proporia lipidelor ale cror lanuri de acizi grai sunt saturate sau nesaturate. In lanurile
hidrocarburice saturate, atomii de carboni sunt legai numai prin legturi simple C C. Un astfel de
lan este flexibil i tinde s fie liniar. In lanurile hidrocarburice nesaturate unii atomi de carbon pot
fi legai prin legturi duble C = C. Dac lipida este dehidrogenat, prin eliminarea atomilor H se
formeaz legturi de tipul C = C , care determin rsuciri ale moleculei n jurul acestor legturi.
De aceea, lanurile hidrocarburice nesaturate nu se pot mpacheta att de ordonat precum cele
saturate. Ca urmare, prezena unor legturi de tip C = C n lanurile lipidice de acizi grai poate
duce la coborrea substanial a temperaturii de topire a lipidelor respective (cu cteva zeci de grade
Celsius).
Membrana celular este o structur dinamic, similar unui fluid vscos, n care moleculele
pot executa micri de translaie i rotaie, cum ar fi:
- translaie n stratul n care se afl (difuzie lateral);
- rotaie n jurul propriei axe;
- flexie (ndoire);
- basculare dintr-un monostrat n cellalt (tranziii rotaionale).
Tranziiile rotaionale sunt foarte rare; proteinele integrale n special nu efectueaz astfel de
tranziii.
La temperatura normal a organismului, vscozitatea unei membrane celulare este de cca.
100 de ori mai mare dect cea a apei, astfel nct o fosfolipid se deplaseaz cu 1 m n interiorul
membranei n cca. 1 minut.
5
2. Mecanisme de transport membranar
Cel mai important rol al unei membrane celulare este de a menine o frontier permanent
ntre mediul intern i mediul exterior structurii celulare respective. In acest fel compoziia mediului
intern este strict controlat de permeabilitatea selectiv a membranei i de diverse procese de
transport prin membran. Ca un caz particular, prezena n snge a fosfolipazelor (enzime care
degradeaz fosfolipidele) poate induce hemoliza pierderea integritii structurale a membranei
plasmatice eritrocitare, ceea ce determin vrsarea coninutului hematiilor n snge.
Bistratul lipidic ofer o barier energetic foarte nalt pentru moleculele de dimensiuni
mari, ca i pentru moleculele mici, hidrofile. In schimb, bariera energetic este joas pentru
moleculele hidrofobe aflate n mediul apos i cu ct o molecul este mai hidrofob, cu att ea va
intra mai uor n membran. Totui, odat intrat n regiunea hidrofob a membranei, o molecul
nepolar va avea de trecut o barier energetic relativ nalt pentru a putea prsi membrana.
Capacitatea membranelor celulare de a permite unor molecule hidrofile s traverseze
membrana se datoreaz att existenei unor proteine membranare integrale (care fie pot forma pori
n interiorul membranei, fie transport ele nsele molecule hidrofile de pe o parte pe alta a
membranei), ct i permeabilitii intrinseci a membranei fa de anumite molecule. In general, un
bistrat lipidic intact este permeabil la molecule hidrofobe (inclusiv gaze: O2, CO2) i molecule
polare mici, neionizate (de exemplu H2O) i nu este permeabil fa de molecule polare de
dimensiuni mari (de exemplu zaharuri) i ioni (indiferent de mrimea lor).
Transportul diverselor molecule prin membrana celular se poate realiza fie cu consum de
energie celular metabolic (transport activ) fie fr consum de energie metabolic (transport pasiv).
TRANSPORTUL PASIV
In procesele de transport pasiv moleculele transportate se deplaseaz prin micri de agitaie
termic precum i prin micri determinate de forele de atracie sau respingere electrostatic ntre
moleculele respective i moleculele membranei sau ale mediilor apoase; ca urmare, moleculele
transportate se deplaseaz n sensul gradientului potenialului lor electrochimic (dac potenialul
electric este acelai pe ambele fee ale membranei, moleculele se vor deplasa n sensul gradientului
de concentraie).
Prin transport pasiv sistemul are tendina de a ajunge la echilibru termodinamic. Dac n
expresia diferenei de potenial electrochimic notm c1 = cin, c2 = cex, V1 = Vin, V2 = Vex obinem:
6
Prin agitaie termic, molecula transportat
poate depi barierele energetice impuse de
diversele regiuni hidrofile/hidrofobe ale
membranei. Deoarece ns ciocnirile
moleculare sunt aleatoare, traiectoria
moleculei prezint numeroase deflexii;
molecula poate fie s traverseze membrana,
fie s se ntoarc n mediul iniial.
Transportul unei singure molecule nu
depinde de sensul gradientului potenialului
electrochimic. Fluxul net de substan care
traverseaz membrana prin difuzie simpl
are ns sensul gradientului de potenial
electrochimic, deoarece moleculele care vor difuza dinspre mediul cu concentraie mai mare spre
mediul cu concentraie mai mic vor fi mai numeroase dect cele care traverseaz membrana n sens
invers. Schimbul gazos la nivelul alveolelor pulmonare este un exemplu de transport pasiv realizat
prin difuzia simpl a moleculelor de CO2 i O2 prin dizolvare n membran.
Difuzia simpl prin canale ionice sau moleculare permite un transport molecular extrem de
rapid prin membran. Canalele ionice joac de aceea un rol extrem de important n procesele de
semnalizare celular, n care viteza de transmitere a informaiei este un element critic. Un canal
membranar este o protein integral complex care formeaz o cale de trecere (un por) pentru
anumite molecule sau ioni insolubili n matricea lipidic a membranei.
Activitatea unui canal ionic sau molecular este discontinu: perioadele n care canalul este
deschis alterneaz cu perioade de inactivitate, n care canalul este nchis. Prin diverse moduri de
reglare a activitii canalelor membranare, celula controleaz fluxurile de substan prin membran.
In plus, canalele membranare prezint o mare specificitate pentru anumii ioni sau molecule,
nepermind altor tipuri de ioni sau molecule s le traverseze.
Canal acvaporin
Membrana
celular
Canal ionic
+
+
ion
molecul
de ap
Celula
7
Aminoacizii hidrofobi ai unei proteine formatoare de pori se orienteaz spre regiunea
lipidic hidrofob a membranei, n timp ce aminoacizii hidrofili ai proteinei se orienteaz spre
interiorul porului, pentru a putea interaciona cu molecula hidrofil care traverseaz membrana prin
por. De exemplu, canalul acvaporin (AQP) permite numai trecerea moleculelor de ap, care se
orienteaz n cmpul electric produs de atomii aflai n peretele interior al canalului. In schimb, ionii
pozitivi (cum ar fi H+, H3O+, Na+) sunt respini de sarcinile pozitive aflate n regiunea central a
porului. Exist deci n structura canalului o anumit regiune, numit filtru, care determin
proprietile selective ale canalului. In general, canalele ionice (de exemplu canalele ionice de sodiu,
potasiu, calciu, clor) au selectivitate foarte mare pentru un anumit tip de ioni (Na+, K+, Ca2+ i
respectiv Cl- n exemplul anterior), dar pot permite n acelai timp trecerea altor tipuri de ioni, dei
n numr mult mai redus. Un caz particular este reprezentat de canalele de potasiu care permit
trecerea ionilor K+ dar nu i a ionilor Na+, dei ionii de sodiu sunt mai mici dect cei de potasiu i au
aceeai sarcin electric. Mecanismul de filtrare al acestui canal de K+ se bazeaz pe interacia dintre
ionul transportat i atomii de oxigen aflai n structura filtrului. In mediul apos din exteriorul
canalului, att ionii Na+ ct i ionii K+ sunt legai la cte 4 molecule de ap. La intrarea n filtru,
ionii se desprind de moleculele de ap i se leag la atomii de oxigen ai filtrului. Pentru atomul K+,
distana de interacie cu 4 molecule de oxigen ale filtrului este egal cu distana de legtur cu cele 4
molecule de ap din mediul apos, n timp ce pentru ionul Na+ aceast distan este mai mic. Pentru
a putea traversa regiunea corespunztoare filtrului, ionul trebuie s culiseze de-a lungul canalului
prin legri succesive la cte 4 atomi de oxigen simultan, ceea ce nu este posibil dect n cazul
ionului de potasiu. Descoperirea acestui mecanism de filtrare selectiv a ionilor pentru canalul de
potasiu a fost realizat prin cristalografie cu raze X, pentru care Roderick MacKinnon a primit
Premiul Nobel n anul 2003.
Canal ionic
A
Filtru
ionic
Vestibul
Membrana
celular
Membrana
celular
B
Poarta
In structura unui canal ionic se disting cteva domenii caracteristice: filtrul ionic, vestibulul,
poarta i senzorul. In vestibul ajung numai ionii selectai n filtru; filtrul nu permite trecerea
moleculelor mari, cum ar fi de exemplu glucoza. Poarta se nchide sau se deschide n funcie de
reacia senzorului la diferitele semnale recepionate. Senzorul poate fi o regiune extern a proteineicanal, aflat n contact cu mediul apos de pe una din feele membranei, sau o regiune intern a
proteinei. Semnalele la care este sensibil senzorul pot fi chimice (anumite molecule din mediul apos
care se leag la situsuri specifice ale proteinei-canal), electrice (diferena de potenial electric ntre
8
cele dou medii apoase pe care le separ membrana, denumit i potenial transmembranar sau
potenial de membran), mecanice (presiunea), termice (cldura) sau electromagnetice (lumina).
Difuzia facilitat este transportul de substan prin membran fie prin intermediul unor
proteine transportoare liposolubile, care pot s traverseze membrana prin dizolvare (transportori
difuzibili), fie prin intermediul unor proteine membranare integrale, care trec molecula hidrofil de
pe o parte pe alta a membranei printr-o modificare n propria conformaie sau prin formare de pori n
membran. Moleculele transportoare (care se mai numesc transportori sau ionofori) nu au
proprieti enzimatice; n procesul de difuzie facilitat nu se consum energie; deplasarea moleculei
transportate se face n sensul gradientului su electrochimic. Exist o multitudine de molecule
transportoare care asigur difuzia facilitat a multor tipuri de ioni sau molecule (de exemplu
glucoza, colina, ionii K+). Majoritatea moleculelor transportate n acest mod nu pot trece nici prin
canale ionice (datorit mrimii lor), nici prin matricea lipidic (deoarece nu sunt liposolubile). In
numeroase celule, mecanismul principal prin care glucoza din mediul extracelular intr n
citoplasm este difuzia facilitat. Deoarece exist un numr limitat de molecule care pot transporta
glucoza prin membrana plasmatic, influxul de glucoz nu poate depi o anumit limit nici chiar
atunci cnd concentraia extracelular de glucoz este foarte mare.
Un exemplu de ionofor este antibioticul valinomicin, care se insereaz n membranele
celulare, unde se comport ca o protein intrinsec. Atunci cnd este ncorporat n membran, o
molecul de valinomicin crete viteza de transport prin membran a ionilor K+ la 104 ioni/s.
Un exemplu de ionofor formator de por este un alt antibiotic, gramicidina A. Moleculele de
gramicidin ptrund n interiorul bistratului lipidic, unde formeaz dimeri helicoidali care strbat
membrana, determinnd astfel apariia unor pori conductori cilindrici. Fiind o protein formatoare
de pori, gramicidina i expune gruprile hidrofobe spre zona lipidic a membranei, n timp ce
gruprile hidrofile sunt orientate spre interiorul porului. Acesta nu permite trecerea dect a ionilor
Na+; fluxul de difuzie pentru o molecul de antibiotic este de 107 ioni/s. Tot ionofori formatori de
pori sunt i alametacina i monazomicina.
molecule
transportate
molecul
transportoare
protein
canal
Bistrat
lipidic
gradient de
concentraie
En
e
difuzie
simpl
difuzie
prin
canal
rg
i
difuzie
facilitat
TRANSPORT PASIV
TRANSPORT ACTIV
Intre difuzia facilitat i difuzia prin canale exist cteva deosebiri importante:
- transportorii au o specificitate mai mare; acetia pot distinge ntre speciile levogire i dextrogire,
astfel nct n celul pot ptrunde prin difuzie facilitat numai glucoza dextrogir i aminoacizii
levogiri. Pot transporta mii de molecule/s.
9
- canalele au o vitez mult mai mare de transport al ionilor (milioane sau chiar sute de milioane de
ioni/s). Atunci cnd au loc procese care necesit modificri foarte rapide ale concentraiei sau
compoziiei ionice (de exemplu n producerea influxului nervos) canalele ionice sunt mai adecvate
pentru transportul speciilor implicate n aceste procese.
- transportorii se gsesc n numr mult mai mare dect canalele;
- transportorii pot participa la transportul activ secundar.
TRANSPORTUL ACTIV
Exist dou tipuri de transport activ: primar i secundar.
In procesele de transport activ primar sunt implicate proteine membranare integrale cu
proprieti enzimatice, care transport ioni sau molecule mpotriva gradientului lor de concentraie,
de potenial electric sau de presiune osmotic, adic n sens opus tendinei naturale de cretere a
entropiei care s duc la anularea acestor gradieni. Astfel de proteine se numesc pompe
membranare. Transportul activ primar este posibil numai prin cuplarea sa energetic cu reacii care
furnizeaz energie liber (reacii exergonice); este de aceea un proces endergonic (consumator de
energie). Reaciile exergonice care furnizeaz energia necesar funcionrii pompelor membranare
sunt n general reacii metabolice; exist ns i pompe care utilizeaz energia luminii.
In membranele celulare exist mai multe tipuri de pompe ionice. Majoritatea pompelor
funcioneaz pe principiul utilizrii energiei moleculei de ATP pentru a transporta anumii ioni
mpotriva gradientului electrochimic ntre cele dou fee ale membranei; molecula de ATP se leag
la molecula pompei ionice i este hidrolizat la ADP, proces n care este eliberat o parte din energia
chimic a ATP-ului. Proteina pompei absoarbe parial energia furnizat prin hidroliza ATP i i
schimb conformaia. Prin aceast modificare conformaional, pompa efectueaz trecerea
moleculei hidrofile de pe o parte pe alta a membranei. Energia absorbit de protein este n final
cedat prin relaxarea structurii pompei, care revine la conformaia iniial i ciclul poate fi reluat.
Energia care nu este absorbit de pomp este disipat prin nclzirea local a mediului apos n care
se produce hidroliza ATP. Pompele care folosesc energia ATP se numesc pompe ATP-azice sau
ATP-aze.
adenina
ATP
ADP
H2O
H3O+
Pi
zahar
3 grupri fosfat
Procesul de transport activ primar este mecanismul principal prin care sunt meninute
diferenele de concentraii ionice ntre diferitele compartimente celulare, precum i ntre citosol i
mediul extracelular. In cardiomiocite, cel mai important rol n meninerea potenialului de repaus la
valoare constant l au pompele de Na+-K+ ale plasmalemei, care extrag trei ioni de sodiu din celul
10
i introduc doi ioni de potasiu din mediul extracelular n celul pentru fiecare molecul de ATP
hidrolizat. Modul de funcionare este urmtorul. In conformaia de repaus, pompa prezint pe
partea intracelular o afinitate foarte mare pentru ionii Na+ i foarte mic pentru ionii K+. Ca urmare,
ionii Na+ ajuni prin difuzie din mediul intracelular la situsurile de legare ale pompei se leag la
acestea, stimulnd hidroliza moleculei de ATP care este legat de pomp. Ca urmare, pompa i
schimb conformaia. In noua conformaie, situsurile de legare ale sodiului sunt expuse mediului
extracelular, iar accesul ionilor Na+ dinspre regiunea intracelular este blocat. Tot n noua
conformaie, afinitatea pompei pentru Na+ este foarte mic, astfel nct ionii Na+ se desprind de
situsurile pompei i difuzeaz n mediul apos extracelular. In schimb, n aceast conformaie
afinitatea proteinei fa de ionii K+ este foarte mare, ceea ce favorizeaz legarea rapid a ionilor de
potasiu la situsurile pompei; aceast legare induce relaxarea proteinei la conformaia iniial. Ionii
K+ legai la protein sunt acum expui mediului intracelular. Deoarece afinitatea fa de K+ este din
nou redus, ionii K+ se desprind i difuzeaz n mediul intracelular; gruparea fosfat prsete
proteina, permind legarea unei alte molecule ATP n locul su.
Mediu extracelular
aza
Mediu intracelular
11
In general, pompele membranare sunt reversibile. In cazul n care concentraiile de sodiu
extracelular i de potasiu intracelular sunt excesiv de mari, iar concentraiile de ADP i fosfat
intracelular (Pi) sunt suficient de mari, ciclul pompei de Na+-K+ poate funciona n sens invers, iar
aceasta ncepe s sintetizeze ATP. Un alt exemplu remarcabil este ATP-sintaza, care se afl n
membrana mitocondriilor, cloroplastelor sau ale bacteriilor aerobe sau fotosintetice. Aceast enzim
complex fie sintetizeaz ATP folosind gradientul existent de H+, fie funcioneaz ca H+-ATP-az,
producnd un gradient de protoni. In cele dou cazuri, deplasarea protonilor are loc n sensuri opuse.
In anumite situaii, celulele pot de asemenea s sintetizeze proteine care s formeze pompe
membranare, pentru a elimina anumite substane toxice sau medicamente. Prin acest mecanism, de
exemplu, n chimioterapia cancerului apare rezistena la medicamentele administrate.
In procesele de transport activ secundar sunt implicai transportori compleci, care cupleaz
doi gradieni electrochimici diferii, astfel nct energia eliberat prin micarea unor molecule de un
anumit tip n sensul gradientului lor electrochimic este folosit pentru a transporta molecule de alt
tip mpotriva gradientului lor electrochimic. Astfel de transportori se numesc cotransportori, iar
procesul se numete cotransport sau transport cuplat. Exit simport, n care ambele tipuri de
molecule sunt transportate n aceeai direcie, i antiport, prin care cele dou tipuri de molecule sunt
transportate n sensuri opuse. Datorit proceselor celulare de pompaj ionic, membrana plasmatic
prezint o sarcin net negativ pe faa interioar i o sarcin net pozitiv pe faa exterioar, ceea ce
determin o valoare negativ a diferenei de potenial membranar. In cotransport, deplasarea unor
sarcini electrice n sensul potenialului lor electrochimic reprezint un proces exergonic deoarece
sistemul tinde n acest fel la starea de echilibru n care diferena de potenial membranar s se
anuleze, deci tinde la o stare cu energie mai mic. Energia cedat n acest proces este preluat de
cotransportori pentru a transloca alte molecule sau ioni mpotriva gradientului electrochimic, de
aceea acest tip de transport este activ.
Lumen
Lumen
intestinal
glucoza
glucoza
glucoza
Epiteliu
intestinal
glucoza
difuzie
facilitat
glucoza
Interstiiu
Interstiiu
aza
12
este transferul transcelular de glucoz din spaiul luminal spre snge. Transportul glucozei din
lumen n interstiiu este blocat dac pompa ionic de Na+-K+ este inhibat (de exemplu cu
ouabain).
In celulele nodurilor sinusal i atrioventricular se produce de asemenea un transfer de
sarcin prin antiport electrogenic 3 ioni Na+/ 1 ion Ca2+ (influx de sarcin net +e pentru fiecare
molecul cotransportoare). Cotransportorul Na+/Ca2+ transloc deci un ion de calciu din interior n
mediul extracelular pe baza energiei eliberate la deplasarea a trei ioni Na+ n sensul gradientului
electrochimic, n timp ce Na+-K+-ATP-aza din plasmalem pompeaz ionii Na+ din interior spre
exterior.
Ionul
Concentraia
extracelular (mM)
Concentraia
intracelular (mM)
Na+
145
15
K+
150
Ca2+
10-4
Pompele de Ca2+ i Na+-K+ asigur gradieni mari ai ionilor Ca2+, Na+ i K+ ntre
sarcoplasm i mediul exterior n celula relaxat, precum i revenirea la valorile normale ale
acestora dup generarea potenialelor electrice (poteniale de aciune). De asemenea, antiportul
Na+/Ca2+ are un rol esenial n generarea periodic spontan a potenialelor de aciune de ctre
celulele nodurilor, deoarece particip la acumularea de sarcini pozitive pe faa interioar a
sarcolemei i deci la depolarizarea progresiv a celulelor.
Ca urmare, potenialul electric al membranei crete continuu, de la aproximativ -70 mV pn
la valoarea de prag, de aproximativ -50 mV (faza prepotenialului de aciune). Cnd potenialul
depete valoarea de prag, se produce activarea rapid a canalelor de sodiu i calciu din sarcolem,
ceea ce determin creterea influxului de cationi Na+ i Ca2+ n celul. Potenialul electric
membranar crete rapid la valori pozitive (faza de depolarizare rapid), care determin nchiderea
canalelor de calciu i sodiu. Urmeaz faza de repolarizare, n care excesul de cationi acumulai n
sarcoplasm este eliminat prin aciunea pompelor de sodiu i calciu. Concentraiile diferiilor ioni
revin lent la valoarea de repaus, ceea ce determin scderea potenialului membranar la valoarea de
repaus.
depolarizare
repolarizare
timp
prepotential
Potential
de repaus
Potential
de actiune
13
3. Mecanisme de macrotransport
In procesele de macrotransport substanele intr sau ies din celul sub forma unor
aglomerri multimoleculare. In procesele de transport membranar discutate mai sus moleculele sau
ionii erau transportai individual prin membran; de aceea transportul membranar se mai numete
microtransport. Dei n procesele de macrotransport diverse substane sunt introduse sau scoase din
celul, aceasta nu se realizeaz prin traversarea propriu-zis a membranei plasmatice, ci prin
formare de vezicule membranare care sunt nglobate sau eliminate din celul.
Exist trei tipuri de macrotransport: endocitoz, exocitoz i transcitoz.
In procesul de endocitoz materialul extracelular este introdus n interiorul celulei, fr a fi
ns dispersat n citoplasm (rmne n continuare ca material extra-citoplasmatic). Cele trei
modaliti de macrotransport prin endocitoz sunt: fagocitoza, pinocitoza i endocitoza mediat de
receptori.
FAGOCITOZA
particul solid
Mediu
extracelular
membran
Citoplasm
material
extracitoplasmatic
membran
14
transcitoza prin endoteliul capilar determin trecerea proteinelor plasmatice din snge n spaiul
extravascular.
Membranele celulare sunt n mod continuu degradate, reciclate i regenerate. Diverii
componeni membranari circul ntre diferite compartimente celulare i suprafaa celulei ntr-un flux
permanent, meninut prin procese de endocitoz i exocitoz. Componentele membranelor celulare
sunt sintetizate n reticulul endoplasmatic, transportate ca vezicule spre aparatul Golgi unde sunt
modificate, iar apoi sunt transportate spre suprafaa celular. Aici veziculele i elibereaz coninutul
n mediul extracelular (prin exocitoz), iar compuii membranari eliberai se insereaz sau se
ataeaz la membran. Degradarea componentelor membranare se produce n lizozomi, sub aciunea
unor enzime digestive. Dac una sau mai multe enzime lizozomice prezint activitate defectuoas,
apar unele afeciuni asociate cu stocarea excesiv de material membranar n lizozomi. De exemplu,
n boala Tay-Sachs (boala lizozomal), enzima hexozaminidaza A este defectuoas, iar glicolipidele
nu mai pot fi degradate. Acumularea de glicolipide n lizozomi induce dereglri neurologice grave i
moarte. Alte mutaii pot determina de asemenea stocarea proteinelor-receptor n reticulul
endoplasmatic. Incapacitatea de a forma receptori n membrana plasmatic duce, de exemplu, la
dezvoltarea a numeroase afeciuni ale cordului.
Lizozomi
Reticul endoplasmatic
Vezicule
de transport
Nucleu
Membrana
plasmatic
Enzime
digestive
Aparatul Golgi
Ribozomi
Citoplasm
Mediu
extracelular
15
- hidrofil, difuzeaz n citosol (ex. acidul adenozin monofosforic ciclic, c-AMP; acidul guanozin
monofosforic ciclic, c-GMP; ionii Ca2+);
- gazoas, cum ar fi oxidul azotic (NO) sau monoxidul de carbon (CO); poate att s difuzeze n
citosol ct i s traverseze membranele celulare.
Fiecare receptor recunoate un anumit tip de semnal, dar poate lega mai multe tipuri de
molecule la situsuri diferite. Aceste molecule, care reprezint liganzii receptorului respectiv, pot
afecta rata de producere a mesagerului secund.
Etapele semnalizrii intercelulare n organism
1. Sinteza moleculei semnal
2. Eliberarea moleculei semnal
3. Transportul moleculei semnal ctre int
4. Detecia semnalului
5. Rspunsul celular
6. Desprinderea moleculei semnal de receptor
Clasificarea semnalelor
- Semnale endocrine, reprezentate de hormonii produi n glandele endocrine, secretai n
snge i distribuii n organism;
Gland endocrin
Vas de snge
Semnal extracelular
Receptor
Eliberare de hormoni
n snge
Celule int
Celul secretoare
16
- Semnale autocrine (celulele secret molecule-semnal care se leag de receptorii proprii).
Celulele meninute n culturi celulare pot secreta factori de cretere care s le stimuleze propria
proliferare. In general, acest tip de semnalizare este caracteristic celulelor canceroase; acestea
produc excesiv factori de cretere care determin o proliferare proprie necontrolat i, n plus,
influeneaz celulele netumorale adiacente, putnd conduce la formarea unei mase tumorale.
Celul semnalizatoare
17
Receptorii ionotropi sunt proteine-receptor care formeaz canale ionice. Aceste proteine au
o zon receptoare la care se leag mesagerul prim i o zon efectoare prin care comunic senzorului
canalului comanda de deschidere sau nchidere a porii.
Ligand
Ca2+
Receptor
Canal nchis
Canal deschis
Receptorii asociai cu o protein G sunt receptori metabotropi care pot determina sinteza
mesagerilor secunzi prin intermediul unei proteine efectoare. Acest tip de receptori prezint 7
domenii (coloane) transmembranare conectate prin bucle intra- i extracelulare. Legarea
mesagerului prim la receptor induce o modificare conformaional a proteinei receptorului n urma
creia este activat proteina G legat la buclele citoplasmatice II i III ale receptorului. Ca urmare,
proteina G se disociaz n subunitile G i G. In forma liber (nelegat), G schimb GDP cu
GTP, difuzeaz i interacioneaz cu fosfolipaza C (PLC) de tip PLC1, care astfel devine activ
(capt activitate enzimatic). La rndul su, complexul G activeaz o alt form a fosfolipazei C,
PLC2. Cele dou izozime PLC catalizeaz disocierea moleculei de inositol 1,4,5-trifosfat (IP3) de
fosfolipida membranar fosfatidilinositol 4,5-difosfat (PIP2), care devine diacilglicerol (DAG);
DAG rmne ncorporat n membran. In continuare, IP3 difuzeaz n citosol, determinnd activarea
canalelor de Ca2+ ale reticulului endoplasmatic (care sunt receptori de IP3), iar DAG activeaz
proteinkinaza C (PKC). Calciul eliberat din reticulul endoplasmatic poate aciona i el ca mesager
secundar pentru alte procese celulare. Att PKC ct i Ca2+ sunt implicai n numeroase procese
celulare. De asemenea, forma activ a PLC1 poate funciona ca o protein de activare a GTP-azei,
avnd un rol important n proliferarea celular.
18
Mediu extracelular
membrana
1
6
3
DAG
PIP2
I
C
II
III
Pi
GDP
GTP
GTP
PLC2
GDP
PLC1
OH
GTP
P
IP3
Citoplasm
19
Intrebri:
1. Explicai procesul de solidificare a membranelor lipidice la temperaturi sczute.
2. In ap, lipidele pot forma micele sau bistraturi. Acestea sunt mai ordonate dect moleculele
individuale. De ce totui nu este contrazis principiul al doilea al termodinamicii?
3. Procesul de formare a unei micele necesit energie? De ce?
4. Explicai asemnrile i deosebirile dintre un canal ionic i un ionofor formator de pori.
5. Ce s-ar ntmpla dac nu ar exista transport membranar pasiv? Dar transport activ?
Alegei rspunsul corect:
1. In sngele unui turist care a fost mucat de un arpe au fost detectate trei enzime:
- fosfolipaza, care degradeaz fosfolipidele;
- neuraminidaza, care nltur carbohidraii de la suprafaa membranei plasmatice;
- proteaza, care degradeaz proteinele.
Care dintre aceste enzime credei c este responsabil pentru hemoliza eritrocitelor din sngele
turistului i de ce?
a. Neuraminidaza distruge glicocalixul bogat n carbohidrai, determinnd ruperea membranei
eritrocitare, deoarece acesta are rolul principal n a conferi rezisten structural membranei.
b. Proteaza degradeaz proteinele membranare, conducnd la pierderea integritii membranei prin
rupere.
c. Fosfolipaza degradeaz fosfolipidele, componenta membranar principal care stabilete bariera
fa de mediul extracelular.
2. Intr-un mediu apos, lipidele formeaz o structur ordonat (micel/bistrat). Ce anume duce la
apariia acestor structuri?
a. Fosfolipidele sunt foarte ordonate n ap, iar prin formarea de micele/bistraturi i cresc libertatea
de micare.
b. In prezena lipidelor, moleculele de ap tind s formeze ct mai multe legturi de hidrogen, ceea
ce se realizeaz prin minimizarea suprafeei de interacie dintre ap i regiunea hidrofob a lipidelor.
c. Fosfolipidele au o mare afinitate unele fa de altele, ceea ce determin autoasamblarea acestora
n bistraturi sau micele.
3. Capacitatea unei membrane celulare de a permite transportul unor molecule hidrofile prin
membran este determinat de:
a. proteine membranare periferice;
b. proteine membranare integrale;
c. carbohidrai membranari;
d. lipide membranare.