Clasificati bacteriile

dupa forma si
dispunere
( exemple)
2.2. Forma i dimensiunile
bacteriilor
2.2.1. Forma
n funcie de form, bacteriile
se pot grupa n mai multe
categorii i pot avea:
a) form cocoidal, cu diametre
egale sau inegale (coci),
dispuse izolat sau grupat.
Majoritarea steptococilor i
stafilococii sunt sferici,
enterococii sunt ovalari,
pneumococii sunt lanceolai,
gonococii i meningococii
pot fi reniformi.
Modul de dispunere poate fi
considerat, cu anumite
rezerve, caracteristic pentru
unele genuri de bacterii, de
ex.:
- stafilococii sunt coci sferici
dispui n grmezi
(ciorchine);
- pneumococii sunt coci
lanceolai dispui doi cte
doi, eventual nconjurai de o
capsul comun (n diplo);
- streptococii sunt coci dispui
n lanuri etc.;
b) form de bastona (bacili,
rods), drepi cu capetele
uor rotunjite
(enterobacterii), drepi cu
capetele tiate drept
(Bacillus anthracis),
fuziformi, cu ambele capete
ascuite (Fusobacterium
nucleatum), dispui uneori
ntr-un mod caracteristic (de
exemplu n palisade, ca i
scndurile dintr-un gard bacilii pseudodifterici);

e) forma spiralat (bacili curbi V. cholerae, spirili i

spirochete - T. pallidum).
Unele bacterii, chiar i atunci
cnd rezult prin
multiplicarea unei singure
celule mam prezint un
pleomorfism deosebit de
accentuat (de exemplu
Proteus spp.).

2.Structura peretelui la
bacteriile gram-pozitive si
gram-negative
2.3.1.1. Peretele bacterian
Peretele bacterian nconjoar
membrana citoplasmatic. Lipsete
la bacteriile din genul Mycoplasma.
Are o grosime de circa 15-30 nm.
Bacteriile Gram-pozitive
conin aproximativ 80-90% murein.
Mureina este un heteropolimer al
crui schelet este format din lanuri
polizaharidice. Aceste lanuri sunt
formate prin polimerizarea,
alternant, a 2 structuri zaharidice:
- acidul N-acetil-muramic
(NAM) i
- N-acetil-glucozamina (NAG).
Fiecare molecul de NAM are
substituit un tetrapeptid.ntre
tetrapeptidele substituite, la lanurile
polizaharidice alturate, se stabilesc
legturi peptidice prin gruparea
terminal -COOH a unui tetrapeptid
i grupri terminale libere ale
tetrapeptidului vecin. Astfel se
formeaz structuri bidimensionale,
destul de complicate, sub forma unor
straturi care nconjoar ntreaga
celul bacterian.

c) aspect cocobacilar (exemplu

H. influenzae, B. pertussis,
B. abortus);

Bacteriile Gram-pozitive rein

violetul de metil (violet de genian
n coloraia clasic) i au culoare
violet pe frotiul colorat Gram.Dintre
bacteriile Gram-pozitive se pot
aminti stafilococul, streptococul,
enterococul, bacilul difteric, bacilul
listeriozei, actinomicetele, bacilul
antraxului, clostridiile etc.

d) actinomicete, care n culturi

tinere formeaz filamente
lungi, ramificate (asemntor
mucegaiurilor); aceste
filamente se fragmenteaz i
rezult aspecte bacilare (ex.
Actinomyces israelli);

n cazul bacteriilor Gramnegative se descrie un perete celular

n general mai subire dar mult mai
complex. Peretele este alctuit dintrun strat fin de peptidoglican (circa
10-20% din structura peretelui) care
este acoperit de o membran extern.

Spaiul dintre membrana

citoplasmatic i membrana extern
(include peptidoglicanul) reprezint
spaiul periplasmic. Din punct de
vedere chimic, membrana extern
este alctuit din fosfolipide,
proteine i cantiti variabile de
lipopolizaharide. Alte proteine
importante care se afl la acest nivel
sunt porinele. Lipopolizaharidul
(endotoxina) are n componen dou
structuri eseniale: lipidul A i
polizaharidul O. Bacteriile Gramnegative se decoloreaz cu alcoolaceton i se recoloreaz cu fucsin
diluat (au culoare roie la coloraia
Gram). Dintre bacteriile Gramnegative am putea aminti
meningococul, gonococul,
enterobacteriile, vibrionul holeric,
bacilul piocianic, cocobacilii Gramnegativi (ex. Haemophilus
influenzae, Bordetella pertussis,
Brucella abortus) etc.

Rolul peretelui
bacterian
- prin rigiditate asigur forma
caracteristic bacteriei (coci,
bacili, etc);
- asigur rezistena bacteriei
(de exemplu la variaii ale
presiunii osmotice i la
presiuni interioare care pot
ajunge pn la 20 atm.);
- flexibilitatea peretelui celular
la unele bacterii (ex.
spirochete) poate fi explicat
att prin flexibilitatea
membranei ct i prin
grosimea redus a
peptidoglicanului;
- are rol antigenic
(carbohidratul C la
streptococ, antigenul O polizaharidic, n cazul
bacteriilor Gram-negative,
etc);
- prezint receptori, de exemplu
pentru bacteriofagi;
- are rol n diviziunea
bacterian participnd la
formarea septului
transversal;
- la nivelul lui pot aciona unele
antibiotice (exemplu betalactaminele, vancomicina, Dcicloserina);

 - la bacteriile Gram-negative
este asociat cu numeroase
enzime (situate n spaiul
periplasmic i la nivelul
membranei externe).
Protoplastul (form rotund
nconjurat de membrana
citoplasmatic) reprezint
bacteria Gram-pozitiv dup
ndeprtarea complet a
peretelui, de exemplu sub
aciunea lizozimului care
lizeaz mureina. n medii
hipotone protoplastul se
lizeaz. Este o structur care
nu se poate multiplica.
Sferoplastul reprezint bacteria
Gram-negativ dup
degradarea parial a
peretelui (conine o cantitate
mai mic de murein).
Lizozimul poate aciona
asupra peptidoglicanului
numai dup alterarea
membranei externe (ex. dup
tratare cu EDTA). n medii
hipotone sferoplastul se
lizeaz. Spre deosebire de
protoplast, se poate
multiplica.
4.Structura si rolul
membranei
citoplasmatice.
Membrana citoplasmatic
ntre perete i citoplasm
exist membrana citoplasmatic
avnd grosimea de 7-10 nm; poate
reprezenta circa o zecime din
greutatea uscat a peretelui
bacterian. Electronomicrografic
apare format din 2 straturi
ntunecoase separate de un strat mai
clar. Este considerat un mozaic
fluid, compus dintr-un film
fosfolipidic n care floteaz proteine
globulare cu extremitile polare
hidrofile expuse spre spaiul
intracelular, extracelular sau ambele.
Aproape 10% din proteinele celulei
bacteriene, peste 200 de feluri de
proteine, sunt localizate la nivelul
membranei citoplasmatice.
Fosfolipidele, dispuse n dublu strat,
au extremitile polare, hidrofile,
expuse contactului cu apa pe ambele
fee ale membranei i extremitile
nepolare, hidrofobe, orientate spre
stratul mijlociu al membranei. Nu
conine steroli (excepie
Mycoplasma spp.).

Rolurile membranei
citoplasmatice sunt de:
- filtru selectiv, datorit
permeazelor (rol n permeabilitate i
transport);
- barier osmotic;
- a conine enzime ale
metabolismului respirator (de
exemplu citocromi);
- a fi sediul majoritii
activitilor enzimatice ale celulei
bacteriene (de exemplu intervine
activ n procesele de biosintez);
- excreie a unor enzime
hidrolitice;
- a interveni activ n procese de
biosintez;
- a contribui la formarea
septului transversal (rol n diviziunea
celular);
- a participa la procesul de
chemotaxie prin receptorii de pe
suprafaa sa.

Ribozomii au rol esenial n

procesul de biosintez proteic. Au
tendina de a se grupa n polisomi
(poliribozomi) cu eficien sporit n
biosinteza proteic. n aceste
condiii, la un moment dat pe aceeai
molecul de ARNm se afl n scopul
traducerii mesajului genetic mai
muli ribozomi, care constituie un
ansamblu care poart numele de
polisom.
6. Mezozomii, incluziille si
vacuolele
Mezozomii
Mezozomii sunt structuri care
se formeaz prin invaginarea
membranei citoplasmatice de care
rmn legai. Sunt prezeni n special
la bacteriile Gram-pozitive. Au
structura chimic a membranei
citoplasmatice i aceleai funcii n
permeabilitate i respiraie. Cu un
capt se pot fixa de materialul
nuclear, favoriznd distribuirea n
mod egal a genomului ntre cele
dou celule fiice. Au rol i n
formarea septului transversal.
Incluziile

Asupra membranei pot aciona

anumite antibiotice (de exemplu
polimixinele).
5.Ribozomii: structura si
rol
Ribozomii au form
aproximativ sferic, pot fi vzui la
microscopul electronic.
Mrimea lor (circa 10-20 nm)
depinde de concentraia ionilor
Mg2+ i K+. Unii ribozomi sunt liberi
n citoplasm, n timp ce alii apar
legai de faa intern a membranei
citoplasmatice. Din punct de vedere
chimic conin circa 65% ARNr
(ribozomal). Au constanta de
sedimentare de 70 uniti Swedberg
dar sunt constituii din dou
subuniti de cte 30S i respectiv
50S.
n subunitatea mic intr o singur
molecul de ARNr, 16S i 21 de
tipuri de proteine ribozomale. n
subunitatea mare intr mai multe
tipuri de molecule de ARNr (ex.
ARNr 23S). ntre cele dou
subuniti se formeaz canalul prin
care trec moleculele de ARNm
(mesager) n cursul sintezei proteice.
Se apreciaz c ntr-o bacterie cu
dimensiuni medii, aflat n faza de
cretere activ, se sintetizeaz circa
500 ribozomi/minut, metabolismul
bacterian fiind foarte intens.

Incluziile sunt formaiuni care

apar n citoplasm la sfritul
perioadei de cretere activ.
Dimensiunea i forma incluziilor
citoplasmatice pot varia n funcie de
condiiile externe. Pot conine
polimeri anorganici (de exemplu,
corpusculii metacromatici ai genului
Corynebacterium), substane
anorganice simple, polimeri organici
(rezervor energetic mai ales la
germenii sporulai aerobi), lipide,
cristale, granulaii de sulf etc.
Vacuolele
Vacuolele sunt formaiuni
sferice care conin diferite substane
n soluie apoas. Au o membran
lipoproteic numit tonoplast. Au
fost descrise n mai ales la bacteriile
acvatice i ar putea avea un rol n
plutirea acestora.
7.Masa nucleara
bacteriana

Structura

Caracteristi
ci

Masa nuclear vine n contact

direct cu citoplasma. Este localizat
n partea central a celulei. Conine
ADN, nu are nucleoli. Are afinitate
pentru coloranii bazici, dar pe
preparatele colorate uzual este
mascat de bazofilia intens a
citoplasmei bogat n ARN.

Codonul.Din punct de vedere

funcional, 3 nucleotide consecutive
din structura moleculei de ADN
formeaz un codon. Codonii dein
informaia genetic pentru a plasa
ntr-o anumit secven un anumit
aminoacid, n lanul polipeptidic care
va fi sintetizat la nivelul ribozomilor.

Unicul cromozom bacterian

este alctuit dintr-o singur molecul
de ADN dublu catenar, cu aspectul
unui fir lung (1.000-2.000 m),
nchis ntr-un inel i replicat pe el
nsui, superspiralat. Mrimea
cromozomului poate s difere n
funcie de specia bacterian (i
respectiv numrul de perechi de
baze); cea mai mic celul bacterian
ar fi cea de Mycoplasma spp.,Avnd
n vedere c dimensiunea bacteriilor
este de circa 1-2 mm n cazul cocilor
i de cteva ori mai mare n cazul
bacililor, pentru ca materialul genetic
s poat fi coninut n acest spaiu
redus, acesta trebuie s fie compactat
ntr-un mod remarcabil i astfel,
rezult nucleoidul bacterian care
poate fi difereniat microscopic.
Nucleoidul este format din molecula
de ADN asociat cu proteine i o
cantitate variabil de ARN.

Cistronul.Cistronul reprezint
o subunitate funcional a genei,
capabil s determine independent
sinteza unui lan polipeptidic.

Relativ recent (1989) s-a

descoperit c exist i bacterii care
dein cromozomi lineari
(ex. Borrelia burgdorferi). Toate
speciile din genul Borrelia dein i
plasmide lineare.
Replicarea cromozomului
bacterian se face printr-un mecanism
semiconservativ. Aa cum am
menionat, cromozomul este unic,
ns n celula care se dezvolt rapid
exist posibilitatea ca nainte ca
prima replicare s se fi ncheiat s se
iniieze nc o replicare i n acest
caz celula bacterian va putea fi
meroploid (doar anumite regiuni
cromozomiale sunt copiate de mai
multe ori) sau chiar poliploid (tot
cromozomul a fost copiat de mai
multe ori).
Dac replicarea cromozomial nu
este succedat de diviunea celulei
(aa cum se ntmpl n mod
obinuit), putem remarca n celula
bacterian existena mai multor
cromozomi. Cromozomii
suplimentari (n total 2 sau 4) nu
aduc o informaie genetic diferit
pentru c ei sunt copii ale
cromozomului iniial (identici cu
acesta).
Nucleul deine informaia
genetic necesar proceselor vitale
de cretere i multiplicare.

Gena.Gena structural
reprezint o poriune a genomului,
respectiv o anumit secven de
nucleotide dispuse liniar. Genele
structurale reprezint circa 90% din
ansamblul informaiei genetice.
Poart nscris n structura sa
informaia genetic necesar pentru
sinteza unei proteine specifice,
structurale sau funcionale (enzime).
8.Capsula bacteriana

Structura

Rol

Localizare

Capsula: structur, rol, evideniere

Numeroase bacterii sintetizeaz
polimeri organici (de obicei
polizaharide) care formeaz n jurul
celulei o matrice fibroas, numit
glicocalix.
La unele bacterii glicocalixul ader
strns de celula bacterian i
reprezint capsula. Exist bacterii
care dein o capsul bine definit, cu
structur polizaharidic (S.
pneumoniae, K. pneumoniae, unele
tulpini de E. coli etc) sau cu structur
polipeptidic (Bacillus anthracis
etc).
La alte bacterii, glicocalixul
formeaz o reea lax de fibrile care
se pierde parial n mediu i poate fi
separat de corpul bacterian prin
centrifugare, capsula flexibil, care
nu este vizibil la microscopul optic.

- permite aderarea unor bacterii (rol

de adezin);
- barier protectoare fa de
bacteriofagi, protozoare;
- conine substane cu specificitate
antigenic (de specie sau de tip) antigenul K.
Spre exemplu, n cazul S.
pneumoniae exist peste 90 tipuri
antigenice capsulare n timp ce la E.
coli sau la Klebsiella pneumoniae
exist peste 80 tipuri antigenice
capsulare.

Flagelii bacteriene:

Structura

Rol

Localizare

Flagelii: structur, rol, localizare

Cilii sau flagelii confer mobilitate
bacteriilor. Mobilitatea poate fi
evideniat n preparatul proaspt
(ntre lam i lamel) sau pe anumite
medii speciale (ex. MIU).
Mobilitatea germenilor din
genul Proteus este observat pe orice
mediu de cultur solid pe care acest
microorganism foarte mobil se
dezvolt (fenomenul de invazie).
Flagelii sunt formaiuni fine,
alungite, flexibile, cu origine la
nivelul corpusculului bazal. Acesta
este alctuit (de ex. la majoritatea
bacteriilor Gram-negative) din patru
discuri aranjate ca dou perechi pe o
structur care trece prin mijlocul lor.
Corpusculul bazal este plasat n
perete i membrana citoplasmatic.
Din punct de vedere chimic flagelul
este de natur proteic (flagelina).
Roluri:

Roluri:

- n mobilitate (cu o vitez de circa

50 m / secund); cilul are o micare
de rotaie, asemntoare unei
nurubri n mediu i ca atare corpul
bacterian este mpins n direcia
opus; motorul rotaiei e
reprezentat de corpusculul bazal iar
energia este obinut din ATP;

- factor de virulen, mpiedicnd

fagocitarea bacteriei i favoriznd
invazivitatea;

- antigenic (datorit structurii

proteice - antigenul H, specific de
tip);

- rezisten fa de surfactani,
anticorpi;

- n clasificarea bacteriilor (prin

numr i distribuie), bacteriile
putnd fi

- monotriche (cu un flagel dispus la o

extremitate), de exemplu Vibrio
cholerae, Pseudomonas aeruginosa;
- lofotriche (cu un mnunchi de
flageli dispus la o extremitate);
- peritriche (cu mai muli flageli
dispui de-a lungul suprafeei
bacteriene), de exemplu
E. coli, Proteus mirabilis.
10. Fimbriile bacteriene:
Fimbriile (pilii)
Sunt formaiuni scurte, fine, nu
au rol n mobilitate. De obicei pilii
sunt mai subiri dect cilii. Pot fi
foarte numeroase pe suprafaa
majoritii bacteriilor; pot fi
observate numai la microscopul
electronic.
Exist pili comuni, cu
urmtoarele roluri:
- n aderena bacterian
(adezine);
- conin receptori specifici
pentru bacteriofagi;
- antigenic (la unele bacterii),
ex. N. Meningitidis i N.
gonorrhoeae.
Exist pili F (sexuali),
determinai genetic de factorul de
fertilitate F (episom). Acetia
ndeplinesc rolul canalului de
conjugare.
11. Sporii bacterieni:

Structura

Rol

Localizare

nconjurat de un strat protector

(membrana sporal, cortexul sporal,
nveliurile sporale). Smburele
sporal mpreun cu membrana
citoplasmatic formeaz protoplastul
sporal.
Roluri:
- form de rezisten i
conservare a speciei (n condiii
favorabile un spor se poate
transforma ntr-o bacterie/forma
vegetativ; procesul de formare a
sporului ar putea fi considerat una
dintre cele mai primitive forme de
difereniere, dar nu este un proces de
reproducere celular aa cum se
ntmpl la fungi sau parazii);

Dintre rolurile ndeplinite am

putea aminti faptul c apa reprezint
un mediu de dispersie, este reactiv n
reaciile metabolice, reprezint etapa
final a unor reacii oxidative etc.
Prin deshidratare (desicare)
este posibil prezervarea culturilor
bacteriene timp ndelungat. O
metod des utilizat datorit
eficienei sale este liofilizarea
(criodesicarea). Studiile tiinifice au
artat c, n general, germenii Gramnegativi rezist mai puin timp
liofilizrii dect cei Gram-pozitivi,
fenomen care a fost pus pe seama
stratului mai subire de
peptidoglican.
3.1.2. Substanele minerale

- rezist la cldur, uscciune,

la anumite substane chimice i
antibiotice, raze UV, etc.
Sporul poate fi localizat:
- central sau subterminal, mai
mic dect celula (ex. la Bacillus
anthracis);
- central sau subterminal, mai
mare dect celula (ex. la Clostridium
hystoliticum, etc.);
- terminal (ex. la Clostridium
tetani, cu aspectul de b de
chibrit).
Poate fi evideniat prin
coloraii speciale (de exemplu verde
malachit) sau prin coloraia Gram
(locul sporului rmne necolorat).
Este sensibil la formol,
propiolacton etc. Este distrus prin
autoclavare.
12. Apa, subtantele
minerale si pigmentii in
structura celulei
bacteriene

Substanele minerale reprezint

2-30% din greutatea uscat a
bacteriei i variaz n funcie de
specie, vrsta culturii, compoziia
chimic a mediului. Unele elemente
intr n compoziia diferitelor
structuri (exemplu sulful intr n
structura aminoacizilor, fosforul n
structura fosfolipidelor etc).
Dintre rolurile ndeplinite am
putea aminti urmtoarele:

favorizeaz schimburile
cu mediul,

particip la reglarea
presiunii osmotice,

pot stimula creterea i

funcia bacteriei (de
exemplu fierul n cazul
bacilului difteric, care
condiioneaz i
producerea de toxine),

activeaz unele sisteme

enzimatice, contribuie la
reglarea pH-ului i a
potenialului de oxidoreducere.
Aa cum am menionat
anterior, la nivel ribozomal se gsesc
Mg++ i K+.

3.1.1. Apa: procent, rol

Sporii: structur, compoziie
chimic, rol, localizare
Fenomenul de sporogenez
este mai des ntlnit la Bacillaceae
(genurile Clostridium i Bacillus). Pe
sol, n condiii de uscciune, la
adpost de lumina solar direct,
endosporii persist zeci i poate sute
de ani.
Materialul genetic este
concentrat i, mpreun cu apa
legat, lipide, Ca++, Mg++, este

Apa reprezint peste 75-85%

din greutatea umed a bacteriei.
Exist ap liber (mediu de
dispersie) i ap legat fizico-chimic
cu diferite structuri. Sporii au puin
ap, n special ap legat. Bacteriile
sunt fiine acvatice prin excelen.
Vacuolele sunt formaiuni sferice
care conin diferite substane n
soluie apoas. Au o membran
lipoproteic numit tonoplast.
Au fost descrise n special la
bacteriile acvatice i ar putea avea un
rol n plutirea acestora.

3.1.6. Pigmenii
Pigmentogeneza este
caracteristic bacteriilor cromogene
i este dependent de condiiile de
cultivare.
Producerea de pigmeni poate
reprezenta un criteriu de identificare
(ex. n cazul tulpinilor de
Pseudomonas aeruginosa sau n

cazul unor specii din genul

Staphylococcus). Trebuie s reinem
nc de la nceput faptul c n cazul
stafilococilor, pigmentogeneza este
doar un caracter orientativ i nu vom
clasifica drept patogen o tulpin
de stafilococ n funcie de culoarea
coloniei. Stafilococii sunt
condiionat patogeni. Testul
orientativ privind patogenitatea este
testul coagulazei care ar trebui
efectuat n mod obligatoriu pentru
toate tulpinile izolate de la pacieni.
Dup localizarea pigmentului,
bacteriile pot fi:

cromofore (pigmentul
este legat n citoplasm);

paracromofore
(pigmentul este prezent
n perete sau n stratul
mucos, de exemplu la S.
aureus sau la
Staphylococcus
epidermidis);

cromopare (pigmentul
este difuzibil n mediu,
de exemplu la
Pseudomonas
aeruginosa).
n afar de faptul c datorit
producerii de pigmeni (albastru,
galben-verde, maro etc. n cazul Ps.
Aeruginosa sau auriu, citrin, alb n
cazul tulpinilor de Staphylococcus)
medicul de laborator se poate orienta
n alegerea testelor de identificare
ntr-un anumit context clinic i
microbiologic.
Putem aminti i faptul c
pigmenii pot avea o serie de roluri,
de ex.: rol de protecie fa de
radiaiile UV (pigmeni carotenoizi),
rol antibiotic (exemplu piocianina
elaborat de
P. aeruginosa fa de B. anthracis) i
rol enzimatic.
13. Glucidele, Proteinele
si Lipidele in structua
celulei bacteriene.
3.1.3. Glucidele
n structura bacterian se pot
gsi glucide simple cu rol n
metabolismul intermediar glucidic,
precum i glucide complexe, de
exemplu poliozide. Acestea din urm
au o serie de roluri, spre ex. particip
la realizarea structurii peretelui
celular, fac parte din capsula unor
bacterii etc.
Exist teste biochimice n care
se urmrete utilizarea sau

imposibilitatea utilizrii unui anumit

zahar de ctre o bacterie. Aceste teste
sunt utile pentru identificarea
bacteriei respective (n special n
cazul enterobacteriilor folosind
mediile TSI, MIU, sistemele API
etc). Testrile biochimice sunt de
mare utilitate i n studiul fungilor
(auxanogram, zimogram).
3.1.4. Proteinele
Exist proteine simple (cu rol
n metabolismul intermediar
protidic) i proteine complexe, cum
ar fi:

mucoproteinele (ex.
mucopolizaharidul de
grup al S. pneumoniae,
acidul hialuronic din
structuri de tip capsular),

cromoproteinele (ex.
catalaze, peroxidaze,
citocromi),

nucleoproteinele (ex. n
acizii nucleici).
Este de remarcat prezena n
structurile bacteriene a unui
aminoacid special, acidul
diaminopimelic, precum i a
aminoacizilor n forma D (ceea ce
reprezint o adaptare biochimic a
bacteriilor fa de aciunea nociv a
enzimelor proteolitice).
3.1.5. Lipidele
Reprezint mai puin de 10%
din greutatea uscat a bacteriilor i
variaz cantitativ n funcie de
specie, vrsta culturii (cresc n
celulele mbtrnite, reprezentnd
probabil un semn de degenerescen)
i compoziia mediului. La
mycobacterii, sunt n cantitate mai
mare (circa 20-40%), n special la
nivel parietal i determin o serie de
proprieti specifice, inclusiv
afinitatea tinctorial. Lipidele se pot
gsi libere n vacuole, combinate sau
fcnd parte din diferite structuri ale
celulei bacteriene (perete,
membran, mezozomi).
Dintre lipidele bacteriene
putem aminti:

acizii grai speciali (ex.

acidul mycolic la
mycobacterii),
cerurile (acizi grai plus
alcooli monovaleni
superiori), care se gsesc
n cantitate mare la
bacteriile acid-alcoolorezistente (ex. n peretele
mycobacteriilor,
nocardiilor etc). Dintre

acestea, ceara D pare a fi

implicat n inducerea
hipersensibilitii
ntrziate (de tip IV).
- fosfolipidele, cum este lipoidul
ubiquitar (difosfatidil glicerol) din
Treponema pallidum (agentul
etiologic al sifilisului) sau lipidul A
din structura lipopolizaharidului
bacteriilor Gram-negative, cu
activitate toxic.
14. Substante cu actiune
antibiotica produse de
bacteria
3.1.8. Substane cu aciune
antibiotic:
- plasmidul Col codific
proprietatea unor bacterii de a
elabora bacteriocine, cu efect asupra
altor bacterii receptive nrudite (de
exemplu colicinele elaborate de E.
coli);
- unele bacterii din genul
Bacillus produc antibiotice
polipeptidice (de exemplu,
B. licheniformis produce bacitracina,
B. brevis sintetizeaz gramicidina,
iar
B. polymyxa sintetizeaz polimixina;
ultimele 2 specii fac parte, astzi, din
alte genuri).
15. Nutritia principalelor
bacterii studiate; Tipuri
de nutritie
Nutriia bacterian reprezint
suma proceselor metabolice care
conduc la producerea de materiale
convertibile n energie i n diferite
componente celulare. Nutrienii sunt
substane ale cror soluii pot
traversa membrana citoplasmatic
pentru a fi antrenai n reaciile
metabolice care asigur creterea i
multiplicarea celular.
n raport cu sursele folosite ca
material de sintez n ambele
diviziuni se difereniaz:

bacterii autotrofe,
capabile s-i sintetizeze
toi compuii organici din
materie anorganic i
bacterii heterotrofe,
dependente de prezena
unor compui organici.

Nutriia principalelor
bacterii studiate

Majoritatea bacteriilor
comensale, condiionat patogene sau
patogene importante pentru om, sunt
chimiosintetizante, heterotrofe. Se
difereniaz n funcie de tipul
respirator. Exist i bacteriile
paratrofe, a cror energie trebuie
oferit de gazd. Bacteriile paratrofe
sunt parazite strict intracelular (de
exemplu microorganismele din
genurile Rickettsia i Chlamydia,
care depind nutriional de o gazd
vie).
Creterea microbian necesit
polimerizarea unor substane mai
simple pentru a forma: proteine, acizi
nucleici, polizaharide i lipide.
Aceste substane se obin fie din
mediul de cultur, fie sunt sintetizate
de ctre celulele n cretere (sunt
necesare diferite coenzime i legturi
macroergice de tipul celor din ATP).
Substanele necesare i coenzimele
implicate se pot obine dintr-un
numr relativ redus de precursori
metabolici.
Dac o celul bacterian
primete substanele necesare, va
sintetiza diferite macromolecule, iar
secvena aranjrii componentelor n
aceste macromolecule este
determinat fie dup un model ADNADN (pentru acizii nucleici) sau
ADN-ARN (pentru proteine), fie cu
un determinism enzimatic pentru
carbohidrai i lipide.
Dup ce moleculele au fost
sintetizate, ele se autoansambleaz,
formnd structuri supramoleculare:
ribozomi, perete, flageli, pili etc.
Rata sintezei macromoleculelor i
activitatea cilor metabolice sunt
foarte bine reglate (exist o
permanent balan a biosintezei).
Clasificarea bacteriilor
in functie de tipul
respirator.
Tipul respirator
n raport cu utilizarea proceselor
pentru obinerea energiei i de relaia
cu oxigenul din mediu, bacteriile se
pot grupa n 4 tipuri respiratorii
principale:
- strict aerob, atunci cnd bacteriile
(spre exemplu Bordetella pertussis)
se dezvolt numai n prezena unei
presiuni crescute a O2, care este
folosit ca acceptor final unic.
Aceste bacterii posed catalaz,
peroxidaz, citocromi (de exemplu
catalaza desface H2O2 toxic pentru
celula bacterian) i utilizeaz numai

procese de respiraie. Unele specii

aerobe (exemplu Pseudomonas
aeruginosa) se pot dezvolta n medii
lipsite de oxigen, dac n mediu sunt
prezeni nitratul sau nitritul;
- strict anaerob, atunci cnd
bacteriile (spre exemplu
Clostridium tetani, Clostridium
botulinum, Fusobacterium,
Veillonella, Peptostreptococcus
etc.) cresc numai n absena O2.
Nu pot supravieui n prezena
O2, care nefiind redus are o
aciune bactericid. Nu au
catalaz, peroxidaz (care
acioneaz asupra ionilor de O2
sau asupra H2O2). Aceste
bacterii folosesc pentru
obinerea energiei numai
procese de fermentaie. Pentru
cultivarea lor este necesar
utilizarea unui mediu cu
potenial redox foarte sczut.
- aerob facultativ anaerob, atunci
cnd bacteriile (E. coli, S. aureus, S.
pyogenes, etc.) se dezvolt mai bine
n mediile cu oxigen, prin procese de
respiraie, dar pot prezenta ambele
tipuri respiratorii, n funcie de
potenialul redox. Majoritatea au
catalaz sau citocromoxidaz, dar nu
au peroxidaze flavoproteice. n acest
tip se ncadreaz majoritatea
bacteriilor studiate.
- anaerob microaerofil, atunci cnd
bacteriile (de exemplu
Campylobacter) tolereaz mici
cantiti de O2.
17. Definiti factorii de
crestere bacteriana

Exemple

- mezofile, cu temperatura optim de

30-37C;
- psichrofile, cu temperatura optim
n jur de 20C (unele acceptnd
temperaturi apropiate de 0C;
Listeria spp. poate supravieui sau se
poate chiar i multiplica la
temperatura din frigider). Ele sunt
adaptate la acest mediu prin numrul
mare de acizi grai nesaturai
coninui de membrana plasmatic.
Gradul de nesaturare al unui acid
gras se coreleaz cu timpul de
solidificare sau stadiul de tranziie
termic (temperatura la care se
topete sau se solidific lipidul).
Acizii grai nesaturai rmn n faz
lichid la temperaturi joase, dar sunt
denaturai la temperaturi moderate.
Fie c acizii grai din membran se
afl n faz lichid sau solid, ei
afecteaz fluiditatea membranei, care
afecteaz n mod direct capacitatea
de a funciona.
- termofile, cu temperatura
optim de 50-60C (unele
putnd s se multiplice i la
temperaturi apropiate de 95C,
ca de ex. Thermus aquaticus).
Bacteriile termofile sunt
adaptate s reziste la
temperaturi de peste 60C
printr-o varietate de modaliti.
Acizii grai din membrana
bacteriilor termofile sunt acizi
grai saturai, permind
membranelor s rmn stabile
i funcionale la temperaturi
ridicate.
- extrem termofile sau
hipertermofile, cu temperatura
optim de 80C sau mai mare i o
temperatur de dezvoltare maxim
de 115C. Nu sunt patogene.

Populaia reprezint o multitudine

de indivizi ai unei specii care
convieuiesc ntr-un anumit biotop.

19. Structura si
sinteza
peptidoglicanului

Clona este populaia care rezult

dintr-o singur celul prin nmulire
vegetativ (diviziune binar).

Sinteza peptidoglicanului

Tulpina reprezint populaia

microbian alctuit din descendenii
unei singure izolri n cultur pur.
Clasificati bacteriile in
functie de
temperatura optima
de dezvoltare;
dezvoltare
n funcie de temperatura de
dezvoltare, bacteriile pot fi:

Sinteza peptidoglicanului se
desfoar pe parcursul mai multor
etape. ncepe prin sinteza n
citoplasm a UDP-acid N-acetil
muramic-pentapeptid (NAM).
Aceast structur se ataeaz de
bactoprenol (un lipid din membrana
celular), dup care urmeaz un lan
de reacii biochimice. Legarea
ncruciat final se realizeaz printro reacie de transpeptidare n care
terminaiile amino libere ale
pentaglicinei nlocuiesc reziduurile
terminale ale D-Ala de la peptidul
nvecinat. Reacia este catalizat de

transpeptidaze, un set de enzime

numite i PBPs (penicillin binding
proteins) care au att activitate de
transpeptidaze i carboxipeptidaze,
dar controleaz i gradul de legare a
peptidoglicanului (aspect foarte
important n diviziunea celular). La
nivelul lor se pot lega penicilinele i
alte medicamente beta-lactamice.
Aceast cale de biosintez are
o importan particular n medicin,
oferind i baza aciunii selective a
unor antibiotice (peniciline,
cefalosporine, bacitracin,
vancomicin, cicloserin, etc). Spre
deosebire de celulele gazdei,
microorganismele sunt izotone cu
fluidele organismului. n interiorul
lor presiunea osmotic este foarte
mare i viabilitatea lor depinde de
integritatea peretelui (peptidoglican)
pe tot parcursul ciclului celular.
Orice compus care inhib o etap n
biosinteza peptidoglicanului la o
bacterie n cretere va putea produce
liza bacterian (efect bactericid).
20. Definiti notiunea
de crestere si
multiplicare
bacteriana
Noiuni de cretere i
multiplicare bacterian
Creterea oricrui organism are
loc prin sinteza de noi molecule.
Deoarece creterea volumului celular
raportat la creterea suprafeei este
mai mare, n cursul creterii se
ajunge la un punct critic.
Multiplicarea celular este o
consecin a creterii. Se restabilete
raportul optim dintre volumul i
suprafaa celulei.
Multiplicarea majoritii
bacteriilor se face prin diviziune
simpl (binar). Sporii nu reprezint
forme de multiplicare (aa cum se
ntmpl n cazul fungilor sau
paraziilor).
21. Bazele dezvoltarii unei
culturi bacteriene.
Fazele dezvoltrii unei
culturi bacteriene

lag; faza de multiplicare logaritmic;

faza staionar i faza de declin.
Faza de lag
Numrul bacteriilor
nsmnate rmne staionar sau
scade; germenii se adapteaz la
condiiile mediului. Bacteriile sunt
foarte active metabolic, i consum
pn la dispariie incluziile, cresc
mult n dimensiuni, sintetizeaz
enzime, proteine, acizi nucleici etc.,
dar nu se divid; sunt foarte sensibile
la antibiotice. Faza de lag dureaz
aproximativ 2 ore. Aceast faz este
aparent dependent de o varietate de
factori incluznd dimensiunea
inoculului, timpul necesar pentru a-i
reveni din ocul fizic datorat
transportului, timpul necesar pentru
sinteza coenzimelor eseniale sau a
factorilor de diviziune i timpul
necesar pentru sinteza a noi enzime
ce sunt necesare pentru a metaboliza
substratul prezent n mediu.
Faza de multiplicare
logaritmic (exponenial)
Celulele bacteriene prezint
caracteristicile tipice speciei
(dimensiunile sunt ns ceva mai
mari), citoplasma este intens bazofil
i omogen, lipsit de incluzii.
Bacteriile sunt foarte sensibile la
antibiotice. Aceast faz este
adecvat pentru studierea bacteriilor
sau pentru recoltarea lor n vederea
preparrii de vaccinuri. Faza de
multiplicare exponenial dureaz
aproximativ 2-3 ore.
Faza staionar
Multiplicarea este realizat n
progresie aritmetic, dar pentru c
numrul bacteriilor care sunt distruse
este aproximativ egal cu numrul
bacteriilor nou aprute rata de
cretere devine nul.
Germenii au morfologia
caracteristic speciei; n aceast faz
realizm identificarea germenilor.
Apar incluziile caracteristice. La
speciile sporogene ncepe formarea
sporilor. Faza staionar dureaz
aproximativ 2-3 zile.
Faza de declin

Teoretic, dinamica unei

populaii bacteriene ar trebui s
evolueze exponenial. Dinamica
real a populaiei bacteriene n
cultur discontinu are ns o
evoluie caracterizat printr-o curb
la care distingem patru faze: faza de

Substratul nutritiv srcete,

apar metabolii toxici, bacteriile sunt
distruse progresiv, se produc i
enzime autolitice, rezervele de hran
din incluzii (ex. acidul poli-hidroxibutiric sau glicogenul) se
consum, pentru un timp sursa de

energie rmne doar ARN-ul celular.

Unele bacterii pot persista 2-3 luni.
n acest scop se pot activa
mecanisme speciale de reglare i se
exprim o serie de gene care duc la
sinteza unor proteine speciale care
permit adaptarea pentru o durat
limitat de timp. La speciile
sporogene, fenomenul de
sporogenez devine foarte intens.
22. Definiti notiunile de
sterilizare si dezinfectie

Exmple de
dezinfectan
t

Aplicatii

Sterilizarea reprezint distrugerea

sau ndeprtarea tuturor
microorganismelor patogene sau
nepatogene, forme vegetative sau
spori, de pe o suprafa sau dintr-un
mediu (lichid sau solid). Toate
materialele utilizate n laboratorul de
microbiologie trebuie s fie sterile
nainte de utilizare
Dezinfecia reprezint
distrugerea formelor vegetative
microbiene (uneori i a sporilor) din
anumite medii (lichide, solide) sau
de pe suprafee. Se realizeaz cu
ajutorul unor ageni fizici sau cu
ajutorul substanelor dezinfectante
bactericide (cu efecte negative
asupra esuturilor gazdei). mpiedic
rspndirea bolilor infecioase.
Dezinfecia igienic a
minilor, prin splare, reprezint
utilizarea unui produs cu aciune
direct asupra florei tranzitorii,
pentru a preveni transmiterea
acesteia, fr a aciona asupra florei
rezidente.
Dezinfecia chirurgical a
minilor, prin splare, reprezint
utilizarea unui produs cu aciune
direct asupra florei tranzitorii,
pentru a preveni transmiterea
acesteia i cu aciune asupra florei
rezidente.
23. Definiti notiunile
de asepsie si
antisepsie.

Exemplem
de
antisepcie
b.Aplicatii

Asepsia reprezint ansamblul

de metode prin care evitm
contaminarea mediului ambiant cu
germeni microbieni sau prin care
putem menine sterilitatea
esuturilor, mediilor de cultur,
medicamentelor injectabile etc.
Antisepsia reprezint
nlturarea sau distrugerea formelor
vegetative microbiene de pe
tegumente, mucoase sau din plgi.
Se realizeaz cu ajutorul substanelor
antiseptice, netoxice pentru tegument
(ex. alcool etilic 70, tinctur de iod
5%, KMnO4 0,1%, detergeni
cationici etc).
24. Sterilizarea prin
caldura umeda.
a.Metode,
presiune,
temperatura si
aplicatii
Sterilizarea prin cldur
umed este cea mai eficient
metod de sterilizare i are ca
mecanism coagularea
proteinelor i degradarea
enzimelor. Se poate folosi
pentru diferite substane n
soluie, sticlrie (cu excepia
pipetelor i lamelor),
instrumentar chirurgical
(metalic, de cauciuc sau
bumbac), medii de cultur,
aparate de filtrat etc.
Autoclavarea este esenial
att pentru laboratoarele de
microbiologie ct i pentru unitile
sanitare n general, indiferent de
sistemul public sau privat.
Vaporii de ap realizeaz:

la 0,5 atmosfere o
temperatur de 115C,

la 1 atmosfer o
temperatur de 121C i
respectiv

134C la 2 atmosfere.
25. Sterilizarea prin
caldura uscata
a.Metode, presiune,
temperatura si aplicatii

Sterilizarea prin cldur:

a) Sterilizarea prin cldur
uscat are ca mecanism oxidarea sau
carbonizarea structurilor bacteriene.
Amintim cteva dintre variantele
tehnice:
a1 Sterilizarea prin nclzire la
incandescen (la rou) reprezint
introducerea i meninerea n flacra
becului Bunsen pn la nroire, pe
toat lungimea, a obiectului care
urmeaz a fi sterilizat. Se poate
aplica pentru ansa bacteriologic (cu
bucl sau fir) sau pentru spatul.

spitalelor, n Romnia au existat

astfel de incineratoare n structura
unitii sanitare respective. n lipsa
unui incinerator propriu, unitatea
sanitar trebuie s ncheie un
contract de prestri servicii cu o
firm de profil. Din punctul de
vedere al laboratorului de
microbiologie ar putea fi supuse
incinerrii materiale de unic
folosin din plastic, reziduuri
organice solide, gunoi, cadavrele
animalelor de experien etc.
26. Bacteriofage

Flambarea reprezint trecerea

prin flacr (de cteva ori) a unui
obiect, fr a se atinge temperatura
de incandescen. Flambarea se
aplic pentru portans, gtul unui
recipient de sticl (tub, eprubet,
flacon etc) sau pentru capilarul
pipetelor Pasteur i nu reprezint
sterilizare.
a2. Sterilizarea cu aer cald se
realizeaz n etuv (pupinel, cuptor
Pasteur). Etuva este o cutie metalic
cu perei dubli. Cu ajutorul unor
rezistene electrice i a unui
termostat se obine i menine
temperatura pentru sterilizare.
Uniformizarea temperaturii n
interiorul aparatului este realizat cu
ajutorul unui sistem de ventilaie.
Pentru majoritatea materialelor
care urmeaz a fi sterilizate,
temperatura din etuv trebuie s
ating 180C, pentru o durat de 1
or sau 160C pentru o durat de 2
ore. Pot exista i alte variante, de
exemplu n funcie de dimensiunea
obiectelor de sterilizat.
Sterilizarea cu aer cald este
indicat pentru obiecte de sticl,
obiecte de porelan, pulberi inerte i
termostabile, uleiuri anhidre,
instrumentar chirurgical (pentru
instrumentarul metalic este de
menionat faptul c repetarea
sterilizrii, n timp, conduce la
declirea oelului) etc.
Nu se vor steriliza n etuv
soluiile apoase, obiectele de plastic,
obiectele de cauciuc, vat, bumbac,
fibr sintetic, alte materiale
termolabile, materiale contaminate
din laborator.
a3. Incinerarea reprezint
arderea pn la obinerea de cenu.
Exist anumite reguli stricte privind
incinerarea, pentru a preveni
diferitele tipuri de poluare. n cazul

Definitie

Structura

Tipuri de
interactiun
ea fagbacterii

Bacteriofagul
Bacteriofagii sunt virusuri care
paraziteaz bacteriile (de exemplu,
bacteriofagii T1-T7 cu specificitate
pentru E. coli). Bacteriofagii (fagii)
au fost descoperii n 1915. Prof.
Mihai Ciuc obine n anul 1921
primele tulpini lizogene. n 1949 se
nfiineaz n Romnia un Centru
naional pentru bacteriofagi. Fagii au
o structur mai complex dect cea a
virusurilor obinuite. Se descriu:
1. capul fagului are form de prism
hexagonal bipiramidal. Conine
ADN dublu catenar helicoidal sau
ARN nconjurat de capsida format
din capsomere (nveli proteic); fagii
ARN pot avea un numr mic de gene
(ex. 3) n timp ce fagii ADN pot avea
pn la 150 gene;
2. coada fagului are structur
proteic, simetrie helicoidal; are rol
de adsorbie, ajutnd fagul s
penetreze bacteria. Se descriu
urmtoarele formaiuni:
- cilindrul axial;
- teaca cozii;
- placa bazal (cu croetele de
fixare);
- fibrele cozii (formnd un strat n
jurul tecii cozii).
Toate proteinele fagice pot conduce
la apariia de anticorpi, descoperire

utilizat n studierea nrudirii dintre

diferii bacteriofagi.
Relaii bacteriofag-bacterie
ntre bacteriofag i bacteria gazd se
pot stabili dou tipuri de relaii:
- de tip litic sau productiv;
- de lizogenizare sau de tip reductiv.

27. Interactiunea fagbacteriilor:

a.Ciclul litic:
Et
ap
e
ii.Evidentiere
Ciclul litic are mai multe etape
i anume:
1. Adsorbia: Ataarea este
specific. Exist receptori strict
specifici la nivelul bacteriofagului,
ce recunosc receptori de la nivelul
bacteriei. Fixarea pe receptori este
iniial reversibil (prin fibrele cozii),
apoi ireversibil (prin croetele plcii
bazale). Adsorbia fagic modific
permeabilitatea membranei
citoplasmatice bacteriene.
2. Penetrarea: Fagul elibereaz
muramidaza care lizeaz mureina din
peretele bacterian. Teaca cozii se
contract i antreneaz cilindrul axial
prin peretele bacterian, ducnd apoi
la injectarea ADN-ului fagic n
citoplasma bacterian;
3. Multiplicarea: Dup
aproximativ 4-5 minute, funcia
ADN-ului bacterian este blocat i
preluat de ADN-ul fagic ce
coordoneaz sinteza componentelor
proprii. Se sintetizeaz un numr
nsemnat de proteine virale.
4. Maturarea (ansamblarea)
fagului
5. Liza bacteriei (ex. datorit
sintezei unor enzime asemntoare
lizozimului) i eliberarea
bacteriofagului matur, virulent.
Bacteriile lizosensibile permit
adsorbia, penetrarea i multiplicarea
fagilor viruleni pn la realizarea
lizei celulei bacteriene.

atile
bact
eriilo
r
lizog
en

Evidenierea ciclului litic la

nivelul culturilor bacteriene:

n mediu lichid (tulbure),

inocularea fagului litic
corespunztor duce dup
cteva zeci de minute
(uneori chiar i cteva
zile) la limpezirea
mediului;

pe mediu solid,
nsmnat uniform,
inocularea fagului litic
duce la apariia unei zone
de liz, clar, bine
circumscris (spotul de
bacteriofagie), metod
utilizat n lizotipie;

dac se amestec o
suspensie de fagi cu o
pictur de cultur (pur)
bacterian, iar tulpina
respectiv are receptori
potrivii bacteriofagilor i
aceast suspensie se
amestec cu geloz
nclzit putem transfera
suspensia ntr-o plac
Petri;

bacteriofagii infecteaz
bacteriile; dup circa 30
minute bacteriile sunt
lizate i elibereaz fagii;
acetia difuzeaz prin
geloz i infecteaz
bacteriile situate n
apropiere i ciclul se reia;

o parte dintre bacterii

(cele care nu au receptori
potrivii) nu sunt
infectate i n timp se
multiplic iar cultura
bacterian opacizeaz
mediul; dup circa 18-24
de ore putem observa arii
cu celule lizate
(transparente) pe un fond
produs de cultura
bacterian (bacterii
nelizate), aceste arii
numindu-se plaje de
bacteriofagie; plajele
produse de bacteriofagii
viruleni sunt clare, n
comparaie cu plajele mai
puin clare produse de
bacteriofagii temperai
(fagii viruleni sunt acei
bacteriofagi care nu pot
evolua dect n ciclul
litic)
28. Interactiunea fagbacterie :
a.Ciclul lizogen
i.Pro
priet

Ciclul reductiv (de

lizogenizare) are aceleai etape,
iniial.
Dup adsorbie i penetrare,
ADN-ul fagic:

fie se integreaz liniar n

cromozomul bacteriei
gazd i se replic
sincron cu aceasta,

fie se circularizeaz i
ataat de membrana
citoplasmatic se replic
sincron cu diviziunea
bacteriei.
Bacteria a devenit lizogen, se
reproduce i transmite descendenilor
fagul latent (profag, fag temperat). n
anumite condiii profagul poate
deveni fag virulent. Fagul temperat
cel mai bine studiat este
bacteriofagul Lambda specific pentru
E. coli capsulat (K12).
Proprietile bacteriei lizogene:
1. este imun fa de un fag
omolog profagului;
2. pot aprea fenomene
importante din punct de vedere
genetic:
- transducia;
- conversia genetic (cu
producerea de exotoxine de ctre
unele bacterii lizogenizate, cum ar fi
toxina difteric, toxina scarlatinoas,
toxina botulinic de tip C, etc);
- recombinarea genetic
(atunci cnd o bacterie parazitat de
doi fagi diferii, dar nrudii,
elibereaz la sfritul ciclului litic pe
lng tipurile parentale i tipuri de
fagi care nsumeaz unele din
proprietile celor doi fagi parentali)
etc.;
- inducia fagic (sub influena
unor ageni inductori, de ex. raze
UV, sau spontan, profagul i
rectig virulena, devine fag
virulent, i produce liza bacteriei
respective).
29. Substante antibiotice
si chimioterapice

a.Definitie
b.Utilizari in
clinica si laborator.
Antibioticele i
chimioterapicele
antimicrobiene reprezint un
grup de substane
medicamentoase capabile s
distrug sau s inhibe
multiplicarea unor
microorganisme implicate
etiologic n bolile
infecioase. Au o aciune
selectiv asupra celulelor
microorganismelor,
exercitnd aciuni minime
asupra celulelor organismului
gazd. Aceste substane pot
fi:
- antibacteriene,
- antivirale,
- antifungice,
- antiparazitare.
n mod clasic, n aceast
grup de medicamente au
fost incluse i
antineoplazicele
(ex. dactinomycina,
doxorubicina, bleomycina).
Exist i antibiotice folosite
ca:
- inhibitori enzimatici (ex.
Lipstatin, sintetizat de
Streptomyces toxytricini),
- imunosupresori (ex.
Ciclosporina, sintetizat de
Tolypocladium inflatum),
- hipocolesterolemiante (ex.
Lovastatin, sintetizat de
Aspergillus terreus),
- insecticide,
- ierbicide etc.
30. Antibiotice bactericide
si bacteriostatice:

Definitii

Exemple

In funcie de efectul lor,

medicamentele
antimicrobiene pot fi
bacteriostatice i bactericide.
Un antibiotic este
bacteriostatic dac efectul
su se limiteaz la oprirea
multiplicrii bacteriene (ex.
tetraciclinele,
cloramfenicolul,

eritromicina, clindamicina,
sulfonamidele etc).
Un antibiotic este bactericid
dac aciunea sa duce la
distrugerea bacteriilor (ex.
penicilinele,
cefalosporinele,
polimixinele,
aminoglicozidele,
rifampicina, vancomicina,
streptograminele etc).
Trebuie cunoscute situaiile
patologice n care se poate
administra un antibiotic
bacteriostatic, precum i
situaiile n care este
absolut necesar
administrarea unui
antibiotic cu efect
bactericid (spre exemplu la
persoanele care prezint
imunodepresie).
31. Clasificarea
substantelor
antimicrobiene dupa
mecanismul de actiune (
4 mecanisme); exemple.
Clasificarea dup
mecanismul de aciune
a) ageni antimicrobieni care
acioneaz prin inhibarea
sintezei peretelui celular; au
efect bactericid i sunt
reprezentai de antibioticele
beta-lactamice (peniciline,
cefalosporine, carbapeneme
etc), glicopeptidele
(vancomicina, teicoplanina),
bacitracina, cicloserina,
fosfomicina, izoniazida etc;
b) ageni antimicrobieni care
acioneaz prin inhibarea
funciei membranei celulare;
au efect bactericid i sunt
reprezentai de polimixine
(polimixin B, colistin),
gramicidin, tirocidin,
imidazoli, nistatin,
amfotericin B etc (ultimele
trei fiind medicamente
antifungice);
c) ageni antimicrobieni care
acioneaz prin inhibarea

sintezei proteice la nivelul

ribozomilor; de exemplu
aminoglicozidele,
tetraciclinele,
cloramfenicolul, macrolidele,
lincosamidele (lincomicina,
clindamicina), acidul fusidic,
streptograminele etc;
d) ageni antimicrobieni care
acioneaz prin inhibarea
sintezei acizilor nucleici, de
exemplu rifampicina,
chinolonele, sulfonamidele,
trimetoprimul, pirimetamina,
novobiocina etc.
32.Rezistanta la
actiunea antibioticelor
Antibioticele betalactaminice inhib selectiv
sinteza peretelui celular n
mod diferit la bacteriile
Gram-pozitive fa de cele
Gram-negative (datorit
diferenelor dintre acestea n
ceea ce privete structura
peretelui). Pentru realizarea
acestei aciuni este necesar
legarea de receptori celulari
numii PBPs (penicillinbinding proteins).
Beta-lactaminele inhib de
exemplu reacia de
transpeptidare (de formare a
punilor peptidice) ntre
lanurile adiacente de
peptidoglican. Rezistena la
beta-lactamice apare de ex.
atunci cnd
microorganismele produc
enzime numite betalactamaze, care desfac
inelul beta-lactamic. Alte
mecanisme de rezisten
sunt reprezentate de:
alterarea porinelor din
membrana extern (Gramnegativi) ceea ce afecteaz
transportul
beta-lactaminelor ctre
sediul de aciune, mutaii
care afecteaz structura PBSs
i respectiv afinitatea fa de
beta-lactamine etc.
Polimixinele
(polimixina B, colistinul)
acioneaz selectiv pe

membrana germenilor Gramnegativi, printr-un mecanism

asemntor cu cel al
detergenilor cationici
deteriornd membrana. Se
leag i de lipo-poli-zaharid
i acioneaz asupra
membranei externe a
microbilor Gram-negativi. Nu
se recomand (de prim
intenie) pentru administrare
pe cale general. Rezistena
la polimixine apare rar.
Aminoglicozidele
(streptomicina, kanamicina,
gentamicina, spectinomicina,
tobramicina etc) se ataeaz
iniial de o protein
receptoare specific aflat pe
subunitatea 30S a
ribozomului bacterian i
blocheaz ulterior activitatea
normal a complexului de
iniiere necesar formrii de
peptide. n final determin
dezintegrarea poliribozomilor
i separarea lor n ribozomi,
incapabili de sintez proteic.
Rezistena la aminoglicozide
apare n special dac exist o
modificare a procesului de
transport activ n interiorul
celulei bacteriene. La
streptococi, enterococi,
germeni anaerobi etc. nu
exist un astfel de sistem de
transport i n aceste condiii
aceste bacterii nu sunt
sensibile la aminoglicozide. n
cazul bacteriilor sensibile,
rezistena poate aprea de
ex. prin producerea de
enzime care adenileaz sau
fosforileaz grupul hidroxil de
pe molecula
aminoglicozidului. Dintre cele
mai redutabile reacii
adverse putem aminti
nefrotoxicitatea i
ototoxicitatea.
Ciclinele (ex. tetraciclina) se
leag de subunitatea 30S a
ribozomilor bacterieni i nu
permit introducerea de noi
aminoacizi ntr-un lan
polipeptidic n curs de
formare. Rezistena este de
regul mediat plasmidic, dar

i prin intermediul
transposonilor, ducnd de ex.
la sinteza unei proteine
membranare care mediaz
un aflux excesiv de
tetraciclin i astfel nu se
mai pot atinge concentraiile
bacteriostatice. Ciclinele se
absorb n stomac i intestin.
Sunt bacteriostatice.
Acioneaz pe germeni gram
pozitivi i gram negativi,
spirochete, mycoplasme,
rickettsii, chlamydii. Printre
reaciile adverse amintim
senzaiile de grea, voma,
diareea, toxicitatea renal i
hepatic, acumularea la nivel
osos i dentar.
Cloramfenicolul se leag de
subunitatea 50S a
ribozomilor bacterieni i
inhib peptidil-transferaza,
interfernd cu legarea de noi
aminoacizi n lanul peptidic
n curs de formare.
Rezistena poate aprea de
ex. prin sinteza de ctre
bacterii a unei acetiltransferaze sau a unei nitratreductaze. Acioneaz pe
germeni aerobi i anaerobi
gram pozitivi i gram
negativi. Este un
medicament bacteriostatic).
Are indicaii n abcesul
cerebral, febra tifoid,
salmoneloze sistemice,
infecii severe cu anaerobi.
Printre reaciile adverse cele
mai grave la care poate s
duc enumerm anemia
aplastic cu leucopenie i
agranulocitoz.
Macrolidele (eritromicina,
claritromicina etc) i
lincosamidele (lincomicina i
clindamicina) se leag de
subunitatea 50S a
ribozomului bacterian,
interfernd cu formarea
complexului de iniiere
pentru sinteza lanurilor
proteice. Rezistena poate
aprea datorit unei alterri
a proteinelor ribozomale sau
datorit sintezei unei enzime
care metileaz reziduuri de

adenin la nivelul ARNr.

Macrolidele sunt
bacteriostatice. Acioneaz
pe cocii gram pozitivi i gram
negativi, bacili gram pozitivi
i unii bacili gram negativi.
Pot aciona pe specii de
Mycobacterium. Au efect
asupra Treponema,
Mycoplasma i Chlamydia.
Sunt indicate n infeciile
strectococice la bolnavii cu
hipersensibilitate la
betalactamine dar i n
difterie, tuse convulsiv,
pneumonii atipice etc. Dintre
reaciile adverse amintim:
grea, vom, diaree, febr,
rash, reacii anafilactice.
Lincosamidele
(bacteriostatice) acioneaz
pe germeni gram pozitivi
aerobi i anaerobi i pe
germeni gram negativi
anaerobi.
Rifampicina inhib creterea
bacterian prin legarea de
ARN-polimeraza
ADN-dependent. Acioneaz
pe mycobacterii, coci gram
pozitivi i gram negativi, unii
bacili gram negativi, germeni
anaerobi gram pozitivi i
gram negativi. Dintre indicaii
putem meniona tratamentul
tuberculozei, leprei, infeciilor
stafilococice
meticilino-rezistente sensibile
(testarea sensibilitii
tulpinilor respective este
necesar).
Chinolonele (de exemplu
acidul nalidixic, norfloxacina,
ofloxacina, ciprofloxacina)
inhib sinteza ADN-ului
microbian prin blocarea ADNgirazei. Acioneaz pe unii
bacili gram negativi i gram
pozitivi, coci gram negativi i
gram pozitivi, micoplasme,
chlamydii. Dintre posibilelel
reacii adverse am putea
aminti: fotosensibilitate,
cefalee, vertij, convulsii.
Sulfamidele (sulfonamidele)
sunt analogi structurali ai
acidului paraaminobenzoic

(PABA) i inhib dihidropteroat-sintetaza. Se

formeaz analogi
nefuncionali ai acidului folic,
metabolismul celulei
bacteriene fiind astfel
inhibat. Rezistena apare prin
alterarea dihidropteroatsintetazei scznd
capacitatea de legare a
sulfonamidelor i este
mediat plasmidic.
Rezistena la un membru al
familiei trebuie nregistrat
ca rezisten i fa de
celelalte substane cu
structur similar.
Trimetoprimul, omolog al
acidului dihidrofolic, inhib
reductaza acestui acid.
Sulfamidele i trimetoprimul
pot fi utilizate separat pentru
a inhiba creterea
bacterian. Dac sunt ns
utilizate mpreun, vor
produce o blocare dubl n
secvena sintezei de ADN,
rezultnd o cretere marcat
a activitii lor (sinergism). O
astfel de substan, frecvent
folosit n practica medical,
este cotrimoxazolul (ex.
biseptol), coninnd
sulfametoxazol i
trimetoprim.
Pirimetamina, la fel ca i
trimetoprimul, inhib dihidrofolat-reductaza.
Unele antibiotice, cum ar fi
actinomicinele, sunt inhibitori
eficieni ai sintezei de ADN;
dar realizeaz aceast
inhibiie att la nivelul celulei
bacteriene ct i la nivelul
celulei animale, nefiind
suficient de selective pentru
a putea fi utilizate n terapia
antibacterian.

33. Definiti notiunile de:

Simbioza

Omensaliz
m

Parazitism

Cu o parte din microorganismele

ntlnite organismul stabilete
relaii de simbioz, convieuirea
fiind folositoare pentru ambii
parteneri (de exemplu sinteza de
vitamine la care particip unii
coliformi intestinali).
Foarte multe din microorganismele
care alctuiesc microflora normal
se afl n relaii de comensualism
cu organismul, germenii depinznd
nutriional de gazd, creia nu i
creeaz prejudicii. Aceast
convieuire exprim ns un
echilibru instabil, care poate fi
uor tulburat. Diferii factori (ai
gazdei, din mediul extern sau
biologici intrinseci ai germenilor)
pot modifica aceste relaii, astfel
nct unele microorganisme din
flora normal pot manifesta
aspecte patogene - este vorba de
microorganismele condiionat
patogene.
Relaia de parazitism tipic apare
ns doar atunci cnd
microorganismele se dezvolt n
detrimentul gazdei, cu manifestri
clinice mai mult sau mai puin
evidente.
Astfel, n cazuri extreme unele
bacterii sunt obligatoriu parazite,
nu se pot dezvolta dect n
organismul gazdei (de exemplu
Mycobacterium leprae,
Treponema pallidum, Chlamydia
pneumoniae etc). Alte bacterii sunt
facultativ parazite, putnd tri i
libere n natur, dar o dat
ptrunse n organism stabilesc cu
acesta relaii de parazitism (de
exemplu Clostridium tetani,
Clostridiile gangrenei gazoase,
Salmonella typhi etc).
34. Definiti patogenitatea
si virulenta; exmple de de
factori de patogenitate
Patogenitatea reprezint capacitatea
unui germen de a declana n
organismul gazd fenomene
morbide, patogene, modificri locale,
generale i functio laesa.
Patogenitatea este un atribut de
specie i este determinat genetic.
Virulena reprezint gradul diferit de
patogenitate exprimat n cadrul unei
specii. Este un atribut al tulpinii

microbiene agresoare. Variabilitatea

n exprimarea patogenitii depinde
de condiiile n care triete
microorganismul respectiv (de
exemplu, o populaie bacterian care
a pierdut virulena n condiii
nefavorabile poate redeveni virulent
n anumite condiii, aa cum se
ntmpl cu tulpina vaccinal BCG
la pacienii cu infecie HIV / SIDA).
Virulena poate fi cuantificabil de
ex. prin numrul de microorganisme
necesare n condiii standard pentru a
omor 50% dintr-un grup de animale
(acest numr este numit DL50, adic
doza letal 50%).
Factorii care condiioneaz
patogenitatea i virulena unei specii
(tulpini) microbiene pot fi:
- multiplicarea i invazivitatea
manifestat de germenii patogeni;
- multiplicarea i elaborarea de
toxine de ctre germenii toxigeni (n
general exotoxine).
35. Flora microbiana
normala a
organismului uman
Cea mai puin neleas parte a
organismului ndeplinete funcii
eseniale fiziologice, nutriionale i
de protecie. Complexitatea acestui
sistem ascunde mecanisme ce
influeneaz anatomia, fiziologia, ct
i patologia uman. Flora normal
intestinal cntrete aproximativ 1
kg i conine o bun parte din
celulele corpului uman.
Speciile bacteriene ce colonizeaz
sistemul intestinal sunt foarte variate.
Flora normal este unic, variind
semnificativ de la un individ la altul,
iar compoziia ei se menine
constant lungi perioade de timp.
Astfel a aprut noiunea de
amprent microbian unic.Aceste
bacterii sunt de 10 ori mai
numeroase dect celulele eucariote
ale corpului uman. n colon exist
cele mai multe microorganisme
comensale: 1011-1012 UFC/ml.
Colonul este organul cel mai activ
metabolic din ntreg organismul.
36. Definiti notiunele de
exotoxina si endotoxina
Exotoxinele sunt elaborate n general
de microbi Gram-pozitivi
lizogenizai (de exemplu bacilul
difteric, streptococul beta hemolitic
de grup A, Clostridium botulinum)
sau codificat plasmidic (Clostridium

tetani, Bacillus anthracis), dar i de

bacili Gram-negativi, prin mecanism
cromozomial (V. cholerae,
Bordetella pertussis, Shigella shiga,
Pseudomonas aeruginosa) sau sub
control plasmidic (unele tulpini de E.
coli).
Au structur proteic, fiind formate
dintr-un domeniu B (bind)
obligatoriu, necesar legrii de
receptorii celulei gazd i
internalizrii ulterioare a poriuni
enzimatice A (active). Exotoxina nu
i exercit efectele toxice dect dup
ce poriunea A este eliberat din
structura iniial. Sunt secretate n
timpul vieii germenilor. Sunt
difuzibile la distan. Toxicitatea lor
este foarte mare, doza letal fiind de
circa 0,1 g/kg corp (pn la 1 ng/kg
corp n cazul toxinei botulinice).
Au afinitate diferit n funcie de
specia care le-a elaborat (de exemplu
pentru miocard, SNC, rinichi n
cazul bacilului difteric).
Manifestrile clinice apar dup o
perioad de laten (cnd toxina este
deja fixat pe celulele int).
Multe din bolile produse pot fi
considerate toxiinfecii i reprezint
urgene medicale, toxina putnd fi
neutralizat numai dac este liber n
circulaie.
Au putere antigenic mare, fa de
ele aprnd anticorpi antitoxin.
Un alt exemplu important privind
exotoxinele se refer la Tcd A i Tcd
B, produse de Clostridium difficile i
care acioneaz asupra celulelor
intestinului gros, fiind responsabile
de o boal diareic uoar, pn la
colit fulminant. Ele produc la acest
nivel leziuni microscopice, dar i
leziuni mari, asemntoare unor
plgi; endoscopic, se vor identifica
nodul Endotoxinele au fost
evideniate la germenii Gramnegativi, la nivelul membranei
externe. Sunt elaborate de acetia i
apoi incluse n peretele bacterian,
eliberndu-se n urma distrugerii
germenilor. Au structur
lipopolizaharidic (LPZ sau LOZ), n
constituia lor intrnd acizi grai, un
lipid A i lanuri de polizaharide.
Au efecte toxice la nivelul celulelor
majoritii mamiferelor; aceste efecte
sunt similare indiferent de specia
bacterian care le elibereaz.
Toxicitatea lor este ceva mai redus
(n comparaie cu exotoxinele), dar
pot aciona la mai multe nivele
inducnd apariia febrei, leucopeniei,

hiperpermeabilitii vasculare,
hipotensiunii arteriale pn la colaps,
sindromului de coagulare
intravascular diseminat etc. Sunt
implicate ntre altele n apariia
ocului endotoxic (se elibereaz o
cantitate de endotoxin proporional
cu numrul germenilor distrui).
Studiile arat c mortalitatea n ocul
endotoxic este n relaie destul de
direct cu cantitatea de
endotoxin/ml, fiind de circa 80% la
cazurile la care se identific 100
uniti endotoxin / ml de plasm.
Aa cum am menionat n capitolul
privind structura bacterian,
componenta toxic este reprezentat
de lipidul A; totui, i polizaharidul
O (structur antigenic) contribuie la
patogenitate s-a dovedit c
bacteriile de la care s-a extras
polizaharidul O sunt mai uor
distruse prin mecanisme care implic
sistemul complement. LPZ aflat n
circulaie se cupleaz cu proteine
plasmatice (LPS-binding plasma
proteins) i apoi este recunoscut prin
intermediul receptorilor CD14 de
ctre monocite i macrofage. Se
activeaz rspunsul inflamator,
coagularea intravascular, apariia de
hemoragii i n final poate rezulta
ocul. Sunt implicate mai multe
citokine, de ex. IL-1, IL-6, IL-8 i
TNF- care la rndul lor stimuleaz
cutia Pandorei i respectiv
producia de leucotriene i
prostaglandine (cu efect de cretere a
fenomenelor inflamaiei). Sunt
activate att sistemele de coagulare
ct i sistemul complement iar
cascadele de reacii care apar sunt
rareori reversibile n urma
tratamentului.
Puterea antigenic i imunogen este
mai redus fa de exotoxine. LPZ n
calitate de mitogen stimuleaz o
activare policlonal a LB, cu secreia
de IgG i IgM.
n afara LPZ sau LOZ, mai sunt i
alte endotoxine, prezente la bacteriile
Gram-pozitive:
- delta endotoxina prezent la
Bacillus thuringiensis, toxin care nu
afecteaz omul, deoarece acesta nu
prezint enzime i receptori care s o
proceseze;
37. Definiti notiunile
de anatoxina si
antitoxina.
Anatoxinele

Exotoxinele pot fi detoxifiate ntr-un

anumit interval de timp sub aciunea
conjugat a temperaturii i
formolului. Prin acest procedeu i
pierd puterea toxic, dar i menin
puterea imunogen i devin
anatoxine. Anatoxinele se utilizeaz
n profilaxia bolilor produse de
germenii respectivi (n cadrul
vaccinurilor DTP, DT, dT, ATPA,
ADPA etc), precum i pentru
hiperimunizarea animalelor n scopul
obinerii de seruri antitoxice
(antidifteric, antitetanic, antibotulinic
etc).
Antitoxinele
Avnd structur proteic, exotoxinele
sunt imunogene i determin apariia
de anticorpi specifici (antitoxine)
care pot neutraliza in vitro sau in
vivo activitatea toxic prin cuplare
specific cu toxina. Se pot obine
astfel seruri imune utile n
seroterapia specific.
De regul aceste seruri sunt
preparate pe cal i sunt utile n
neutralizarea exotoxinelor (ex. n
tratamentul difteriei, tetanosului,
botulismului).
Administrarea antitoxinelor trebuie
fcut cu precauie datorit faptului
c anticorpii preparai pe cal
reprezint n acelai timp i antigene
pentru gazda uman, dar n acelai
timp ct mai curnd posibil.
Tratamentul acestor entiti clinice
este complex i nu reprezint
subiectul acestui manual.
Administrarea antitoxinelor trebuie
fcut dup o testare a unei eventuale
hipersensibiliti i n cazul c
aceasta exist se recurge la
desensibilizare i abia ulterior la
seroterapie (administrarea de
antitoxin). O alternativ ar fi
administrarea de imunoglobuline
umane specifice, dac acestea sunt
disponibile.