17.11.

2012

Organite nedelimitate de membrane

17.11.2012

Organitele unei celule eucariote tipice

Aspect Structur Membrana celular Compoziie Bistrat lipidic, coninnd fosfolipide, steroizi i proteine Funcie Izolaie, protecie, sensibilitate, suport, controleaz intrareaieirea de materiale

Citosolul

Componenta fluid a citoplasmei Proteine organizate in filamente fine sau tuburi subiri
Prelungiri ale membranei coninnd microfilamente Prelungiri ale membranei coninnd dublete de microtubuli n ir de 9+2 Citoplasm coninnd doi centrioli aezai perpendicular, fiecare centriol fiind compus din 9 triplete de microtubuli ARN i proteine; ribozomi fixai, legai de RER, ribozomi liberi, rspndii n citoplasm Cilindru gol din enzime proteolitice cu proteine reglatoare la capete

Distribuie materialele prin difuzie Rezisten i susinere, micarea structurilor celulare i a materialelor, micarea celular
Mrete aria suprafeei pentru a facilita absorbia materialelor extracelulare Deplasarea materialelor pe suprafaa celular Esenial pentru micarea cromozomilor n timpul diviziunii celulare, organizarea microtubulilor n citoschelet Sinteza proteinelor

Citoscheletul Microtubuli Microfilamente

Microvilii

Cilii

Centrozomul

Centriol
Ribozomii

Proteazomii

Degradarea i reciclarea proteinelor intracelulare

Organitele unei celule eucariote tipice

Aspect Structur Compoziie Funcie

Mitocondriile

Membran dubl, cu plici ale membranei interne (criste) adpostind enzime metabolice importante
Reea de canale membranoase rspndite n citoplasm Are ribozomi ataai de membrane Nu are ribozomi ataai Seturi de membrane aplatizate (saculi) i camere (cisterne)

Produc 95% din ATP-ul necesar celulei

Reticulul endoplasmic RER REN Aparatul Golgi

Sinteza de produi de secreie, stocare intracelular i transport Modificarea i mpachetarea proteinelor nou sintetizate Sinteza lipidelor i a carbohidrailor Stocare, alterare i mpachetare a produilor de secreie i a enzimelor lizozomale

Lizozomii

Vezicule coninnd enzime puternice de digestie

Vezicule coninnd enzime de degradare Nucleoplasm coninnd nucleotide, enzime, nucleoproteine, cromatin, nconjurate de membran dubl Regiune dens a nucleoplasmei coninnd ADN i ARN

ndeprtarea intracelular a organitelor defecte sau a patogenilor

Neutralizarea compuilor toxici Controlul metabolismului, stocarea i procesarea informaiei genetice, controlul sintezei proteice Locul sintezei ARNr i al asamblrii subunitilor ribozomale

Peroxizomii Nucleul Membrana nuclear Por nuclear Nucleol

17.11.2012

RIBOZOMII granulele lui Palade

George Emil Palade
Laureat al premiului Nobel - 1974

Localizarea ribozomilor
Liberi - Se gsesc cel mai frecvent grupai de-a lungul unei molecule de ARNm, formnd poliribozomi = polizomi Ataai reticulului endoplasmic tot sub form de polizomi

17.11.2012

Ribozomii liberi
Gsii n citoplasm (citosol) Pot apare singuri sau grupai sub form de polizomi Mai numeroi n celulele implicate n sinteza proteinelor proprii solubile n citoplasm sau care formeaz structuri citoplasmatice importante

Ribozomii liberi

17.11.2012

Polizomi - MET

Reticulul endoplasmic rugos

Polizomi ataai pe suprafaa RE Bine reprezentat n celulele care secret proteine de export (ex: celulele pancreatice) Sintetizeaz proteine care vor intra n constituia membranelor sau vor fi mpachetate n vezicule i stocate n citoplasm sau exportate nafara celulei

17.11.2012

Ribozomi liberi i RER

Ribozomii liberi i ataai (RER)

17.11.2012

Ergastoplasma M.O.

Ribozomii
Particule ribonucleoproteice, 15-30 nm, prezeni att la procariote ct i la eucariote Gsii n citosol, mitocondrii i cloroplaste la toate celulele eucariote cu excepia hematiei adulte Se mic de -a lungul ARNm i sintetizeaz proteine Leag i orienteaz ARNm i aminoacil-ARNt Realizeaz interaciuni ntre codoni i anticodoni n aminoacil ARNt Catalizeaz formarea legturilor peptidice ntre resturile aminoacidice adiacente - ribozime

17.11.2012

Tipuri de ribozomi
Ribozomi 70 S la procariote
50 S + 30 S

Ribozomi 80 S la eucariote
60 S + 40 S

S = Svedberg o msur a ratei de sedimentare a unui component centrifugat, care depinde att de greutatea molecular ct i de forma tridimensional a componentului

Ribozomii 80S
Aspect ME: granule electronodense de 15-30 nm Structur: alctuii din dou subuniti: - subunitatea mare - subunitatea mic

17.11.2012

Subunitatea mare ribozomal 60S

Subunitatea mic ribozomal 40S

17.11.2012

Subunitile ribozomale

Proprietile ribozomilor eucariotici

Ribozom Subunitatea mic

Subunitatea mare

Constanta de sedimentare Masa (kDa) ARN ARN Procentul ARN Proteine 4220

80S

40S

60S

1400 18S

2820 28S 5.8S 5S

60% 40%

50% 50%

65% 35%

10

17.11.2012

Funcii
Traducerea informaiei genetice (sinteza lanurilor polipeptidice):
Localizate n citosol polizomii liberi
Destinate exportului sau compartimentelor celulare delimitate de endomembrane polizomii ataai RER

Etapele traducerii informaiei genetice

Iniierea - legarea la subunitatea mic a ARNm i a Aminoacil ARNt, urmat de legarea subunitii mari Elongarea sinteza legturilor peptidice cu ARNt legat la situsurile aminoacil (A) i peptidil (P) Terminarea - codonul stop

11

17.11.2012

Structura ARNt - universal

4 reg. cu baze complementare tulpini 4 reg. lipsite de baze complementare bucle Anticodonul recunoate codonul de pe ARNm Captul 3 leag aminoacidul sub ac. aminoacil sintetazei

Situsurile de legare ARN ale ribozomului

Situsul pentru ARNm Situsuri pentru ARNt
1.Situsul A: leag aminoacil-ARNt 2.Situsul P: leag polipeptidul n curs de sintez cuplat cu ARNt 3.Situsul E: leag o molecul de ARNt fr rest aminoacil/peptidil

12

17.11.2012

Polizomi sinteza lanului polipeptidic

Sinteza aminoacil-ARNt
Se realizeaz de ctre aminoacil-ARNt sintetaze 20 de enzime ce recunosc specific cei 20 aminoacizi i anticodonii asociai de la nivelul moleculeleor de ARNt Aminoacil-ARNt realizeaz legtura dintre secvena codonilor din ARNm i structura primar a proteinelor

13

17.11.2012

Iniierea sintezei lanului polipeptidic

complex de preiniiere
subunitatea mic ribozomal, primul aminoacil-ARNt, iniiator, (ntotdeauna metionin-ARNt) factorii eucariotici de iniiere eIF1 eIF4

Complexul se ataeaz pe ARNm i detecteaz codonul start - AUG

Iniierea sintezei lanului polipeptidic

14

17.11.2012

Iniierea sintezei lanului polipeptidic (II)

complexul de iniiere
legarea subunitii ribozomale 60S pierderea factorilor de iniiere. Met-ARNt este situat n situsul P al ribozomului

n situsul A se ataeaz aminoacil-ARNt corespunztor urmtorului codon din ARNm

Iniierea sintezei lanului polipeptidic

15

17.11.2012

Iniierea sintezei lanului polipeptidic (III)

catalizarea sintezei legturii peptidice dintre metionin i al doilea aminoacid, cu transferul dipeptidului pe al doilea ARNt

Simultan, subunitatea mare ribozomal se deplaseaz cu 3 baze n direcia 3 a ARNm, astfel nct ARNt iniiator ajunge n situsul E

Iniierea sintezei lanului polipeptidic

16

17.11.2012

Elongarea
ncepe cnd ARNt-dipeptidil este transferat din situsul A n situsul P, proces care va continua pe toat lungimea ARNm

ntotdeauna n situsul A se va alinia un alt codon care va fi recunoscut de anticodonul corespunztor din ARNt i care va lega un nou aminoacid la catena polipeptidic

Elongarea lanului polipeptidic

17

17.11.2012

Ribozomii = ribozime

18

17.11.2012

Terminarea sintezei lanului polipeptidic

n dreptul situsului A ajunge codonul stop (UAA; UAG; UGA) pentru care nu exist ARNt cu anticodon complementar Codonii stop recunoscui de un factor de terminare, care se leag n situsul A i produce hidroliza legturii dintre catena polipeptidic i ARNt din situsul P Lanul polipeptidic este modificat n continuare prin hidroliza i ndeprtarea radicalului metionil.

Terminarea sintezei lanului polipeptidic

19

17.11.2012

Proteazomii
Descoperii in anii 80

Martin Rechsteiner

Alfred Goldberg

Proteazomii - definitie

Organite

Complexe enzimatice

20

17.11.2012

Degradarea proteinelor
Eseniala pentru celul deoarece:
asigura aminoacizi pentru o nou sintez proteic elimin enzimele aflate n exces ndeprteaz factorii de transcripie (aciunea genelor) care nu mai sunt necesari

Degradarea intracelular a proteinelor

1. Lizozomi
proteine extracelulare ajunse n celul prin endocitoz, endocitoz mediat de receptori i fagocitoz

2. Proteazomi
proteine endogene, factori de transcriere, cicline ale ciclului celular, proteine codificate de virusuri, proteine incorect pliate datorita unor greeli de translaie i proteine degradate de molecule din citosol.

21

17.11.2012

Structura proteazomului 26S

2.400kDa particula central (miez) 2 particule reglatoare

Particula central

2 inele

2 inele

22

17.11.2012

Particulele reglatoare 19S

Poplipeptide cu specificitate pentru ubiquitin 14 proteine diferite, 6 fiind ATP-aze La baz PA28

Ultrastructura proteazomilor SEM

23

17.11.2012

24

17.11.2012

Degradarea mediat de ubiquitin a proteinelor

The Royal Swedish Academy of Sciences has decided to award the Nobel Prize in Chemistry for 2004 "for the discovery of ubiquitin-mediated protein degradation" jointly to Aaron Ciechanover Technion Israel Institute of Technology, Haifa, Israel, Avram Hershko Technion Israel Institute of Technology, Haifa, Israel and Irwin Rose University of California, Irvine, USA

Ubiquitinizarea
Precede procesul de degradare a proteinei eticheta molecular = srutul morii Ubiquitina - proteina globular de 76 de aa cu un capat C-terminal aflat n citosol.

25

17.11.2012

26

17.11.2012

27

17.11.2012

28

17.11.2012

Incluziuni celulare
Spre deosebire de organite, incluziunile nu au funcii specifice Exogene Endogene

29

17.11.2012

Incluziunile celulare exogene

Fiziologice
Caroten (solubil n lipide)
Prea muli morcovi
Pielea devine portocalie

Patologice
Metale grele
Plumb i argint

Azbest, siliciu, carbon, praf

Incluziuni endogene
Picturi lipidice
Gsite n adipocite, hepatocite, celule secretoare de steroizi Aspect clar pe preparatele MO standard , electronodense n MET Rezerve nutritive importante

30

17.11.2012

HE

Adipocitul alb Sudan IV

Adipocitul brun

31

17.11.2012

Celula secretoare de steroizi

Incluziuni patologice lipide n hepatocite

32

17.11.2012

Glicogen
Princip ala form de depozitare a carbohidrailor Ficat,muchi,corticosuprarenal Tehnici speciale de evideniere MO In MET rozete de material electronodens Depozite mari de glicogen - Boala Pompe: hepatomegalie, deficien lizozomal

Glicogen carmin amoniacal Best

33

17.11.2012

Glicogen PAS (periodic acid Schiff)

Precursori enzimatici
Zimogen
La polul apical al celulelor Conin precursorii unor enzime Pancreas
tripsinogen

Celulele principale ale stomacului

pepsinogen

Glande salivare
Precursorul amilazei

34

17.11.2012

Incluziuni de zimogen - stomac

Precursori enzimatici
Mucinogeni Secretai de celulele caliciforme Gsite n epiteliul din tractul digestiv i respirator Mucinogenii sunt eliberai din celul prin exocitoz, se hidrateaz i formeaz mucusul Rol de protecie a mucoaselor Iritaiile locale duc uneori la eliberarea ntregului coninut celular

35

17.11.2012

Melanina

Pigmeni

Confer culoare pielii i prului Neuromelanina gsit n neuronii multipolari din substana neagr Conine dopamin Boala Parkinson
Caracterizat prin tremor, rigiditate musculari funcii motorii ncetinite

Resultatul degenerrii acestor neuroni Tratat cu L-dopa

Melanin n neuroni

36

17.11.2012

Pigmeni
Melanina
Confer culoare pielii i prului

Pigmeni
Lipofuscin
Funcie necunoscut, crete cu vrsta, mai ales n neuroni Galben maroniu, strlucitor Reprezint acumulri de materiale intracelulare insolubile rmase dup aciunea lizozomilor (corpi reziduali) Apare n SNC, muchi, suprarenale, cord i ficat

37

17.11.2012

Incluziuni pigmentare patologice

Bilirubin n hepatocite

Incluziuni pigmentare patologice

Bilirubin n celulele Kupfer

38

17.11.2012

Pigmeni
Hemosiderina n mduva osoas hematogen

Cristaloizi
Eozinofile Leococite granulare Granulele specifice au un miez cristaloid lamelar Ochi de pisic Functioneaz ca lizozomi Eozinofilele intervin n infecii parazitare Celule Leydig testiculare Cristaloizi ce plutesc liber n citoplasm Funcie necunoscut

39