Test Colocviu Proteomica

1. Scrieti formula dipeptidelor glicillizina si lizilglicina si explicati care este

diferenta dintre acestea.
1p

2. Un tetramer cu structura cuaternara are 600 aa. Cate nucleotide are acest
tetramer si cate nucleotide are monomerul fara structura cuaternara
corespunzator acestui tetramer?
1p
Nucleotide: 600x3=1800
Monomer:1800/4=450

3. O proteina de 50 kD, de concentratie 1.5 mg/ml, se afla in 45 ml solutie

tampon fosfat. Descrieti un procedeu prin care aceasta proteina este
concentrata la 15 mg/ml.
1p

4. Se da urmatorul amestec de proteine:

- Proteina 1: 150 kD
- Complex homotetrameric, fiecare monomer avand masa moleculara de 25 kD.
- Proteina 2: 75 kD.
a. Precizati care este ordinea de separare a proteinelor pe un gel SDS-PAGE.
Argumentati raspunsul.
1p
De la cel mai greu la cel mai usor: proteina 1(150kD)
Proteina2(75kD)
Dimer proteina 1(50kD)
Monomer proteina 1(25kD)
Presupun ca se sindeaza numai in monomer si dimer (nu sunt sigura)

b. Precizati ordinea in care se vor elua proteinele din amestec in cazul separarii
prin tehnica gel filtrarii. Argumentati raspunsul.
1p

5. Ce procentaj de acrilamida este necesar pentru a realiza separarea optima

pe un gel SDS-PAGE a unei proteine de 75 kD: 7.5%, 15%, 17%? 1 p
Dar a unei proteine de 7.5 kD? 1 p
Argumentati raspunsurile.

6. Protocolul de preparare a unui gel de migrare cu 12% acrilamida/bisacrilamida este

urmatorul:
Vt = 30 ml
Tampon gel de migare pH 8.8: 7.5 ml
Acrilamida/Bisacrilamida: 12 ml
H2O: 10.3 ml
persulfat de amoniu (APS) 10%: 100 l
TEMED: 100 l
Cum se prepara un gel cu 17% acrilamida/bisacrilamida in acelasi volum final
de 30 ml?
1p
Acr/bis: 17ml
Apa: 5.3ml
Restul raman la fel

7. Un amestec de proteine contine: Proteina 1 cu masa de 45 kD si sarcina

electrica neta pozitiva, Proteina 2 cu masa de 78 kD si sarcina electrica neta
pozitiva si Proteina 3 cu masa de 75 kD si sarcina electrinca neta negativa.
Elaborati un protocol in scopul purificarii Proteinei 2 din amestec.
1p

+ 1 p oficiu