Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
LP Biofizica
LP Biofizica
LUCRRI PRACTICE
BIOFIZIC MEDICAL
Teren Ovidiu
Petcu Lucian Cristian
Vasile Monica
-2009-
Ovidius University Press, 2009
Facultatea de Medicin
Disciplina Biofizic
Aleea Universitatii nr. 2
Constana
Romania
Tel/Fax: 0241-605000
Copyright2004
Toate drepturile sunt rezervate Editurii Universitii Constana
Ovidius University Press
2
Lucrri Practice de Biofizic Medical
PREFA
3
Ovidius University Press, 2009
4
Lucrri Practice de Biofizic Medical
CUPRINS
5
Ovidius University Press, 2009
6
Lucrri Practice de Biofizic Medical
I. Noiuni teoretice
A. Indicatori de tendin central
Indicatorii de tendin central sunt valori ce localizeaz ntr-un
fel oarecare mijlocul setului de date. Dintre indicatorii de tendin
central menionm:
Modul - valoarea care apare cel mai frecvent.
Un set de date poate fi non-modal (dac toate valorile posibile au
aceeai frecven), mono-modal (o singur valoare maximal), multi-
modal (cu mai multe valori ce apar cu aceeai frcven maximal).
Mijlocul - media aritmetic a valorilor extreme ale setului de
date.
Mediana - valoarea ce mparte setul de date n dou grupe egal
populate.
Pentru setul de date S={X1,..., Xn}, ordonat cresctor, cnd
n=2k+1 (numr impar de date), mediana este Me=Xk+1. n cazul aceluiai
set dar pentru n=2k (numr par de date), mediana este:
X k X k 1
Me
2
Media - cele mai folosite sunt: media aritmetic (Xma),
geometric (XG), armonic (XH) i cuadratic (XQ). Se poate arta uor c
aceste medii se afl n relaia:
X H X G X ma X Q
7
Ovidius University Press, 2009
B. Indicatori de poziie
Indicatorii de poziie sunt folosii pentru localizarea unui anumit
subgrup de date n relaie cu restul eantionului. Se numesc -cuantile
acei indicatori ce mpart eantionul n pri egal populate. Cele mai
utilizate sunt: cvartila (qk), decila i percentila (pk), valori ce mpart
datele n pri coninnd o ptrime, o zecime, sau o sutime din elemente.
S considerm un set de date ordonat cresctor unde L este
valoarea cea mai mic din set iar H valoarea cea mai mare.
x= Xmax - Xmin
Toate deviaiile medii fa de un indicator de tendin central
(media aritmetic, geometric, cuadratic, armonic sau modul, mediana,
notate generic prin <x>) se definesc n acelai fel, ca medii ale diferenei
ntre valoarea msurat i indicatorul respectiv.
Mai general este momentul centrat de ordin q, mq(x) fa de
media x. n continuare vom analiza semnificaia i utilitatea unora dintre
momentele centrate:
- m1(x)=0, momentul centrat de ordinul 1, nu aduce nici o
informaie, ntruct ia valoarea zero oricare ar fi distribuia datelor; din
aceast cauz nu este folosit.
- m2(x) se numete varian (V); rdcina ptrat a varianei se
numete deviaie ptratic, notat cu . Ambele mrimi arat
mprtierea datelor.
Orice rezultat experimental trebuie prezentat prin media
aritmetic deviaia. Intervalul (<x>-, <x>+) se numete interval de
ncredere sau confiden.
ntruct n biologie i medicin sunt n general puine date de
procesat, trebuie s se nlocuiasc variana V cu variana standard SV
i deviaia n cu deviaie standard n-1 sau SD (se utilizeaz indicatorii
standard n-1 i SV cnd n<30, adic setul are mai puin de 30 de valori).
- m3(x) este numit nclinare sau oblicitate i se utilizeaz la
definirea coeficientului de asimetrie, ac (numit n englez skewness i
notat SKEW)
9
Ovidius University Press, 2009
m3
ac SKEW ( x )
3
Funcie de valorile acestui coeficient exist trei tipuri de
distribuii: cu nclinare pozitiv, nul i negativ, aa cum reiese din
cazurile prezentate mai jos, unde Mo=modul, Me=mediana, <x>=media.
10
Lucrri Practice de Biofizic Medical
- deviaia standard: n 1
1
n 1
12 ... 2n
Rezultatul determinrilor (R) n urma prelucrrilor statistice a
datelor, se prezint sub forma:
11
Ovidius University Press, 2009
R X med n 1
Dup efectuarea acestor calcule, putem trage concluzia c
valoarea real X a mrimii ctuate se afl n intervalul:
I (X med n 1 , X med n 1 )
Acest interval se numete interval de confiden sau interval de
ncredere.
Problem: Pentru etalonarea unui colorimetru s-au realizat un
numr de n = 5 determinri, iar valorile transmisiei au fost urmtoarele:
50.2, 49.1, 49.6, 50.3, 48.9. S se calculeze rezultatul determinrilor (R)
i intervalul de confiden (I).
B. Reprezentarea grafic a datelor
Procesele fizice, chimice, biologice, etc., procese ce depind de
mai muli parametrii, pot fi reprezentate folosind un sistem de referin
format din dou drepte concurente n plan, sau trei drepte concurente n
spaiu, numite axe. Dac axele sunt perpendiculare cte dou, atunci
sistemul se numete rectangular.
Coordonatele (xa, ya) ale unui punct A ntr-un sitem rectangular
avnd originea O msoar proieciile segmentului OA pe ax.
x
r x 2 y 2 , arctg
y
Pentru ca reprezentarea grafic a datelor n coordonate
rectangulare s fie ct mai clar, se recomand s se in cont de
urmtoatele indicaii:
-asigurarea unei reprezentri grafice ct mai intuitive const n
alegerea scrii corespunztoare att pe scara absciselor ct i pe scara
ordonatelor (atunci cnd valorile variabilelor x sau y ncep de la un
numr oarecare, acest numr se recomand s fie reprezentat ct mai
aproape de originea axei respective).
-indicaiile de pe axele x i y trebuie s fie ct mai simple, adic
cu ct mai puine cifre (de regul indicaiile de pe axe nu trebuie s
conin numere cu mai mult de dou cifre; dac numerele sunt mai mari
trebuie indicat un factor de multiplicare la sfritul axei alturi de
unitile de msur).
-pe fiecare ax trebuie s se indice denumirea sau simbolul
mrimii reprezentate pe axa respectiv i n mod obligatoriu unitile de
msur.
13
Ovidius University Press, 2009
Tabelul 1
Timp
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
(ore)
Temp.
37,1 37,5 37,9 38 38,2 38,4 38,8 39 39,2 39,5
(C0)
40
39,5
Tem peratura (grd C)
39
38,5
38
37,5
37
36,5
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Tim p (ore)
14
Lucrri Practice de Biofizic Medical
15
Ovidius University Press, 2009
40
39,5
38,5
38
37,5
37
36,5
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Tim p (ore)
16
Lucrri Practice de Biofizic Medical
I. Noiuni teoretice
Microscopul reprezint un instrument optic alctuit dintr-un
ansamblu de dioptrii (sferici) i centrai ce are rolul de a forma imagini
mult mrite ale unor obiecte de dimensiuni mici.
Microscopul este alctuit din :
- sistemul mecanic
- sistemul electric
- sistemul optic
18
Lucrri Practice de Biofizic Medical
19
Ovidius University Press, 2009
.
Figura 2.3. Eritrocitele vzute la microscop prin micrometrul ocular.
21
Ovidius University Press, 2009
I. Noiuni teoretice
Metodele clasice de microscopie nu pot pune n eviden detaliile
preparatelor atunci cnd acestea au dimensiuni foarte mici (sub 1 m) sau
nu prezint un contrast bun (detaliile au aceeai culoare ca i restul
preparatului). n aceast situaie, la dispoziia observatorului stau
metodele de colorare a preparatului sau tehnicile speciale de microscopie.
Tehnicile de colorare (ce se vor studia n cadrul disciplinei de
Histologie) prezint n anumite situaii cteva dezavantaje: necesit o
cantitate mare de timp, manopera i substane chimice; nu pot fi
observate celule sau organisme vii; imaginea obinut difer mai mult sau
mai puin de structura real.
Pentru nlturarea acestor deficiene pot fi utilizate tehnicile
speciale de microscopie. Dintre acestea amintim:
- Microscopia de imersie
- Microscopia n ultraviolet (UV)
- Microscopia de cmp ntunecat
- Microscopia de polarizare
- Microscopia de fluorescen
22
Lucrri Practice de Biofizic Medical
1. Microscopia de imersie
Cele dou tehnici de microscopie prezentate (transmisie i
reflexie) nu permit o mrire mai mare de 1000 de ori deoarece apare
fenomenul de difracie a luminii pe detaliile preparatului.
Pentru a permite observarea unor detalii mai fine una din soluii
este introducerea ntre obiect i obiectiv a unui lichid omogen,
transparent i izotrop cu indice de refracie ct mai mare, numit lichid de
imersie. De obicei, se utilizeaz ulei de cedru (n=1.3-1.5) sau compui
sintetici (n=1.3-1.6). n acest mod se poate crete mrirea pn la cca.
2000 de ori fr s apar fenomenul de difracie. Un alt avantaj al
folosirii imersiei este mrirea luminozitatii imaginii:
2h
(1 )
E d h
E0 n2 1
unde:
E - iluminarea imaginii cu lichid de imersie
E0 - iluminarea imaginii n absena lichidului
h - distana obiectiv-obiect
d - diametrul obiectivului
n - indicele de refracie al lichidului de imersie
E=(1.2-4)E0
n cazul utilizrii tehnicii de imersie este necesar ca preparatul s
fie acoperit cu o lamel pentru ca lichidul de imersie s nu modifice
23
Ovidius University Press, 2009
2. Microscopia de ultraviolet
O alt modalitate de a crete puterea separatoare este micorarea
lungimii de und a radiaiei folosite pn n domeniul ultraviolet UV
(610-10, 3.810-7)m. n acest mod s-au putut distinge obiecte de
dimensiuni de 0,15m, atingndu-se o mrire de 6000-7000 de ori.
n cazul folosirii radiaiei UV este necesar ca toate componentele
optice ale microscopului s fie realizate din cuartz deoarece sticla
comun este opac la acest tip de radiaii.
Imaginea final va fi obinut pe un ecran de proiecie acoperit
cu o substana fluorescent. n cazul folosirii radiaiei UV este obligatorie
folosirea ochelarilor i a ecranelor de protecie deoarece retina este foarte
sensibil n acest domeniu de lungimi de und.
24
Lucrri Practice de Biofizic Medical
4. Microscopia de polarizare
Microscopia de polarizare se utilizeaz n evidenierea i
observarea substanelor optic active ce se gsesc n preparat. Substanele
optic active au proprietatea de a roti planul luminii polarizate.
25
Ovidius University Press, 2009
5. Microscopia de fluorescen
Fluorescena este proprietatea anumitor substane de a emite
lumin (radiaie vizibil) atunci cnd sunt excitate cu radiaie UV.
Deoarece multe substane de interes medical prezint fluorescen (acizi
nucleici, proteine) aceast tehnic este foarte utilizat n practica de
laborator i de cercetare medical.
Fiecare substan ce prezint fluorescen este caracterizat de o
lungime de und de excitaie (n UV) i de o lungime de und de emisie
26
Lucrri Practice de Biofizic Medical
27
Ovidius University Press, 2009
28
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Modul de lucru:
A. Observarea nucleilor celulelor
-se aeaz lama cu preparat pe masua microscopului i se
fixeaz cu ajutorul clreilor;
-se aduce pe axul optic obiectivul x40 (sau x25) i se localizeaz
zona cu preparat;
-se coboar msua microscopului fr a deplasa preparatul;
-se aduce pe axul optic obiectivul Apo xl00;
-se aplic o pictur de lichid de imersie pe preparat (n dreptul
obiectivului);
-cu foarte mare atenie se coboar obiectivul pna ce se imer-
seaz n lichid;
-privind prin ocular se pune la punct imaginea.
29
Ovidius University Press, 2009
30
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Cromatografia si electroforeza
I. Noiuni teoretice
1. Cromatografia
Cromatografia reprezint o tehnic de separare a componentelor
unui amestec, ntre dou faze: una mobil i alta staionar, ca urmare a
deplasrii fazei mobile de-a lungul celei staionare i a antrenrii compo-
nentelor amestecului n micare, cu viteze diferite, ocupnd astfel poziii
diferite de-a lungul fazei staionare. n acest mod componentele sunt
separate i apoi identificate.
n funcie de natura fazelor se disting urmtoarele tipuri de
cromatografie:
Faza mobila Faza staionara Denumire
lichid lichid lichid - lichid (LL)
lichid solid lichid - solid (LS)
gaz solid gaz - solid (GS)
gaz lichid gaz - lichid (GL)
31
Ovidius University Press, 2009
32
Lucrri Practice de Biofizic Medical
33
Ovidius University Press, 2009
2. Electroforeza
Reprezint metoda de separare bazat pe migrarea sub influena
cmpului electric a substanelor ncrcate cu sarcin electric.
Eletroforeza poate fi folosit att n scop analitic (separarea
componenilor i dozarea lor), preparativ (obinerea unor componeni n
stare pur) dar i ca metod de studiu a proprietilor superficiale ale unor
celule sau organite celulare.
O particul ncrcata electric, cnd este dizolvat sau suspendat
ntr-un mediu lichid, sub influena unui cmp electric uniform, atinge o
vitez constant de migrare. Speciile ncrcate pozitiv se vor ndrepta
ctre catod, iar speciile ncrcate negativ ctre anod. Viteza de migrare a
ambelor specii va fi determinat de forele care acioneaz asupra lor.
Aceste forte sunt:
- fora de atracie electroforetic: F1 Q E
Figura 4.3. Forele ce acioneaz asupra unei particule ncrcate cu sarcin electric
suspendat ntr-un mediu lichid. Distribuia ionilor n stratul dublu electric de la suprafaa
unei particule scufundate ntr-un electrolit.
35
Ovidius University Press, 2009
36
Lucrri Practice de Biofizic Medical
38
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Figura 4.8. Tipuri de disproteinemie: (A) Inflamaie acut, (B) Inflamaie cronic, (C)
Sindrom nefrotic, (D) Enteropatie exudativ, (E) Ciroz hepatic, (F) Mielom multiplu,
(G) Hipogamaglobulinemie.
39
Ovidius University Press, 2009
40
Lucrri Practice de Biofizic Medical
D m
v
t s
S se calculeze intervalul de confiden i s se compare valorile
obinute cu cele din literatur.
m
v (vmed n 1, vmed n 1 )
s
41
Ovidius University Press, 2009
Sedimentarea si centrifugarea
I. Noiuni teoretice
1. Sedimentarea
Sedimentarea - Este o tehnic de separare ce se bazeaz pe
diferena de densitate dintre componentele amestecului. n practica
medical se utilizeaz nu numai ca tehnic de separare dar i ca o metoda de
analiz (VSH - viteza de sedimentare a sngelui).
Pentru o nelegere mai bun a procesului se poate modela
comportarea unei hematii n cmp gravitaional.
S consideram o suspensie de particule sferice de raz R i
densitate aflate ntr-un lichid de densitate 0 (0). Asupra particulelor
acioneaz urmtoarele forte:
4
- fora de greutate: G m g R3 g
3
4
- fora Arhimedic: FA m 0 g R 3 0 g
3
- fora de frecare cu moleculele lichidului - fora de vscozitate;
pentru particule sferice i viteze mici de deplasare, fora de vscozitate
este dat de legea lui Stokes: FV 6 R v
42
Lucrri Practice de Biofizic Medical
4 4
R 3 g R 3 0 g 6 R v
3 3
R g 0 1 (1)
2 2
v
9
L
Considernd v unde L este spaiul parcurs n micare
t
rectilinie i uniform iar t timpul de sedimentare, obinem:
L R 2 g 1 0
9 1
t
2
Dup cum se constat din relaia (1) viteza de sedimentare
depinde att de mrimea particulelor (R) ct i de interaciunea acestora
cu lichidul n care se afl, prin coeficientul de vscozitate .
Sedimentarea poate fi deci folosit nu numai ca tehnic de
separare a unor particule de interes dar i ca metod de cercetare n
vederea obinerii unor informaii legate de aceste particule.
De mare importan clinic este determinarea vitezei de
sedimentare a eritrocitelor. n tabelul urmtor sunt prezentate valorile
normale obinute prin metoda Westergreen.
43
Ovidius University Press, 2009
2. Centrifugarea
Centrifugarea - reprezint o tehnic de separare a componentelor
unui amestec cu densiti diferite sub influena unui cmp centrifugal.
Deoarece viteza de sedimentare pentru particule de mrimea
hematiilor, sau mai mici, este deosebit de sczut, este necesar o metod
care s creasc fora activ (greutatea n cazul sedimentarii). Astfel, n
cazul centrifugrii, rolul forei de greutate l joac fora centrifug.
16 3 3 2
Fcf m a c R x
3
Neglijnd fora de greutate i considernd c migrarea duce la
creterea razei traiectoriei circulare, avem urmtoarele relaii:
Fa Fv Fcf
44
Lucrri Practice de Biofizic Medical
dx
Fv 6 R
dt
16 3 3 2
Fa R 0 x
3
dt 2 R 2 2 0
9 1 dx
8 x
Prin integrare obinem timpul necesar separrii:
t c ( R ) 2 0 ln f .
9 1 x
8 xi
Ultracentrifugarea - Pentru particule foarte mici cum ar fi
proteinele plasmatice sedimentarea prin centrifugarea obinuit este
practic nerealizabil din cauza fenomenelor de difuzie. Sunt necesare n
acest caz turaii deosebit de mari 15000rot/min.
Ultracentrifugele ce realizeaz aceste turaii trebuie s fie bine
stabilizate mecanic (pentru a evita fenomenul de bti care ar duce la
ruperea axului) i bine termostatate (pentru a mpiedica degradarea
termic).
Cnd sistemul este monodispers apare o limit net de separaie
ntre solvent i particulele dispuse la fundul eprubetei.
Cnd sistemul este polidispers apar mai multe cmpuri i este
necesar o ultracentrifugare fracionat. Se centrifugheaz pe rnd la
fiecare turaie de interes i se recolteaz sau sedimentul sau super-
natantul.
45
Ovidius University Press, 2009
46
Lucrri Practice de Biofizic Medical
B. Centrifugarea sngelui
Materiale necesare:
- sering i ac pentru puncie venoas
- eprubete de hemoliz
- stativ
- pipete gradate
- citrat trisodic 3,8%
- balan de echilibrare
- ser fiziologic
- eprubete de centrifugare
Mod de lucru:
-se recolteaz o cantitate de 5-6 ml snge dup metoda descris
anterior;
-se introduce n eprubeta de centrifugare 1ml citrat trisodic 3,8%,
4ml ser fiziologic i 5ml snge dup care se aseaz eprubeta pe balana
de echilibrare;
-pe platanul opus se aseaz o eprubet identic n care se
introduce ap distilat pn la echilibrarea balanei;
-se aeaz cele dou eprubete n centrifug n poziii diametral
opuse una fa de alta, se nchide capacul centrifugii i se regleaz la
2000rotatii/min, dup care se centrifugheaz 2minute;
-se scoate eprubeta i se masoar deplasarea frontului eritrocitar,
apoi se continu centrifugarea.
47
Ovidius University Press, 2009
Probleme:
1._Cunoscnd valorile fiziologice ale coeficientului de vscozitate
la brbat B=0,047Kg/ms i la femeie F=0,043Kg/ms, densitatea
eritrocitului =1095Kg/m3 i a plasmei o=1027Kg/m3 calculai din formula
vitezei de sedimentare ct ar trebui s fie raza eritrocitului presupus sferic.
2._Determinai viteza de sedimentare a unor particule de cret
suspendate ntr-un lichid i raza acestor particule presupuse sferice
cunoscnd apa=1 g/cm3, apa=1.05 10-3Kg/ms, creta=1,545 g/cm3.
3._Cunoscnd raza particulei de cret determinat anterior, evaluai
folosind modelul matematic al centrifugrii, timpul de centrifugare pentru
aceste particule suspendate ntr-un mediu vscos (glicerin). Se cunosc:
- =1000rot/min, (500rot/min)
- glicerina=13,93 10-3Kg/ms
- glicerina=1,26 g/cm3
- ln(x2/x1)=0,143
Verificai experimental rezultatul obinut.
48
Lucrri Practice de Biofizic Medical
I. Noiuni teoretice
n aceast lucrare ncercm s prezentm aplicaiile spectro-
fotometriei n ultraviolet i vizibil pentru substane n stare lichid,
lichide pure, amestecuri i n special soluii. Spectrele urmrite sunt
spectre moleculere electronice la care structura de rotaie nu mai apare iar
cea de vibraie se manifest numai n anumite cazuri printr-o structurare a
benzilor de absorbie care, n general, sunt largi i nerezolvate n linii.
Benzile de absorbie din aceste domenii spectrale corespund
tranziiilor de pe nivelul electronic fndamental pe cele mai joase nivele
electronice excitate, pentru care tranziiile sunt permise conform legilor
de selecie. n aceste condiii tranziiile electronice implic cele mai mari
variaii de energie, iar frecvenele cuantelor absorbite se situeaz att n
domeniul vizibil ct i de ultraviolet al spectrului.
La aceste tranziii electronice particip electronii unor anumite
grupri structurale ale moleculelor numite cromofori. n cazul substan-
elor organice asemenea grupri structurale sunt reprezentate de legtura
simpl, dubl i tripl, gruparea bazic, etc.
Interacia cromoforilor ntre ei sau cu alte grupri atomice
provoac importante modificari ale spectru1ui de absorbie atribuit
cromoforului singur. n aceste condiii pot apare urmtoarele efecte:
- efectul batocromic - de deplasare a maximului de absorbie spre
lungimi de und mai mari (deplasarea spre rosu),
49
Ovidius University Press, 2009
50
Lucrri Practice de Biofizic Medical
51
Ovidius University Press, 2009
52
Lucrri Practice de Biofizic Medical
53
Ovidius University Press, 2009
54
Lucrri Practice de Biofizic Medical
55
Ovidius University Press, 2009
56
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Potenialul de aciune
I. Noiuni teoretice
n starea normal (numit stare de repaus) membrana celular
este polarizat, avnd faa intern mai negativ dect cea extern. n mod
uzual se ia faa intern drept referin.
Potenialul de membrana, Vm numit potenial de repaus, ia valori
de la minus civa milivoli, pentru majoritatea celulelor, pana la 60mV
pentru axo1ema, 90mV pentru sarcolema si chiar 200mV pentru
membranele, celulelor din organul electric al petelui torpila, Torpedo
californicum.
Figura 7.1 prezint ceea ce se ntmpl cnd axolema este
excitat de un stimul electric depolarizant. Dac depolarizarea depeste
o valoare critic (sau liminar), atunci membrana se depolarizeaz n
continuare din proprie iniiativa (pana la 0mV) i chiar se repolarizeaz
dar n sens contrar pana pe la +50mV. Apoi potenialul iniial este
restaurat.
Aceasta oscilaie de tensiune de circa 120mV n amplitudine i
1ms durat se numete potenial de aciune. Depolarizarea extern este
de fapt doar un declanator (trigger) al fenomenului ntruct energia
rspunsului specific al membranei provine de la metabolismul celular i
nu de la stimul.
57
Ovidius University Press, 2009
59
Ovidius University Press, 2009
60
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Efectul TTX
Adugarea de tetrodotoxin, TTX (o neurotoxin puternica
extras din ficatul i ovarele unui peste din Marea Japoniei, Sphoeroides
rubripes, i unii tritoni), n soluia de imersie a axonului, blocheaz
transportul de sodiu i nu are efecte directe notabile asupra transportului
de potasiu.
Figura 7.4 prezint efectul TTX asupra probabilitilor n, m, h, a
conductanelor de sodiu i potasiu, a potenialului de aciune. Toxina are
nevoie de ceva timp pentru a difuza n structur i a da efect. Cnd
conductana maxim a sodiului scade sub o valoare critic, membrana nu
mai rspunde.
62
Lucrri Practice de Biofizic Medical
63
Ovidius University Press, 2009
Efectul cesiului
Datorit competiiei la legarea de componentele proteice ale
membranei cu ceilali cationi monovaleni (n special cu ionii de K+)
prezenta cesiului n soluia de imersie afecteaz dinamica probabilitatilor
n, m si h i duce la o scdere semnificativ a conductanei superficiale a
potasiului i la o foarte mic cretere a conductanei de sodiu. Aceste
schimbri modific potenialul de aciune, crescndu-i puin durata dup
cum se observa n figura 7.5.
64
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Fenomene de transport
I. Noiuni teoretice
1. Difuzia
Difuzia pasiv reprezint fenomenul de transport pasiv, datorat
agitatiei termice, a unor particule din zonele de concentratie, densitate
mai ridicate, spre zonele cu valori mai mici ale acestor mrimi, printr-un
mediu suport omogen.
Fenomenul de difuzie pasiv este cel mai intens la gaze, unde
viteza termic este foarte mare i cel mai lent n cazul solidelor, unde
moleculele (sau ionii) au poziii relativ fixe n spaiu.
nainte de a prezenta legile difuziei, vom face unele precizri n
legatur cu anumii termeni folosii: flux i gradient.
Fluxul reprezint cantitatea de substan, sarcin, energie
transportat printr-o suprafa n unitatea de timp.
Prin gradient se ntelege variaia unei mrimi (concentraie,
densitate, potenial electric etc.) ntre dou puncte ale spaiului, raportat
la distana dintre cele dou puncte.
n aceste condiii definim difuzia ca cel mai general tip de
transport pasiv (spontan), produs de gradientul de concentraie (pentru
gaze), sau de gradientul de activatate chimic (pentru materia conden-
sat).
Difuzia pasiv ntr-un mediu omogen se supune la dou legi,
cunoscute sub numele de legile lui Fick:
65
Ovidius University Press, 2009
66
Lucrri Practice de Biofizic Medical
67
Ovidius University Press, 2009
C1 V1
P
V V2
S C0 1 C1 t
V2
Problema n aceasta situatie o reprezint determinarea
concentraiei C1. Pentru aceasta se folosete metoda conductometric
deoarece pentru substanele ionice, ntre anumite limite ale concentraiei,
aceasta este proportional cu conductivitatea solutiei ().
Conductana este inverul rezistenei i se msoar n -1 (mho):
1
G
R
2. Osmoza
n unele situaii solvitul este mpiedicat s difuzeze ntre
compatimente datorit existenei unei membrane semipermeabile. n
aceast situaie sistemul tinde spre o stare stationar (steady state) i nu
spre o stare de echilibru, prin difuzia solventului prin membran.
Osmoza duce la apariia unei asimetrii a presiunii hidrostatice n
sistemul considerat. Diferena de presiune hidrostatic ce blocheaz
difuzia solvitului se numete presiune osmotic.
68
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Pentru soluii diluate presiunea este dat de legea lui Van't Hoff:
V nR T
unde: = presiunea osmotic
n = numrul de moli de substan osmotic activ dizolvai
R = constanta universal a gazelor
T = temperatura absolut
n cazul soluiilor de electrolii se introduce un factor de corecie (i)
dependent de gradul de disociere al electrolitului:
V in R T
69
Ovidius University Press, 2009
Figura 8.4. (1) surs de tensiune, (2) punte Wheastone, (3) cuv cu electrozi.
70
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Figura 8.5. (1) surs de tensiune, (2) punte Wheastone, (3) vas de difuzie.
72
Lucrri Practice de Biofizic Medical
I. Noiuni teoretice
Vscozitatea este fenomenul de frecare intern ce apare n
sistemele lichide. Fenomenul de vscozitate se manifest n dou
ipostaze: cnd o particul se mic n raport cu un lichid staionar
vscozitate static i cnd straturile adiacente de lichid se mica unele n
raport cu altele vscozitate dinamica.
Vscozitatea static face obiectul unei alte lucrri practice de
tehnici de separare (sedimentarea).
Vscozitatea dinamic n cazul lichidelor reale care curg se
constat c acest proces are loc n straturi subiri vecine, moleculele din
acelai strat avnd aceeai vitez, n timp ce moleculele din straturile
vecine au viteze diferite.
ntre moleculele straturilor vecine (ca i ntre moleculele
aceluiai strat) se exercit fore de atracie, forte ce se opun deplasrii
relative a acestor straturi, determinnd apariia unei frecri interne n
lichide numit vscozitate.
Dac n timpul curgerii straturile de lichid rmn paralele,
curgerea este cunoscut sub numele de curgere laminar. Pentru
curgerea laminar, fora de vscozitate este dat de legea lui Newton:
dv
Fv S
dx
unde: = coeficientul de vscozitate dinamica a lichidului
73
Ovidius University Press, 2009
dv
= gradientul de vitez
dx
S = aria comun a celor doua straturi
Coeficientul de vscozitate depinde de natura lichidului i de
temperatur (scznd cu creterea temperaturii). Lichidele pentru care
este valabil relaia de mai sus se numesc lichide Newtoniene. Marea
majoritate a lichidelor de interes medical (lichidul cefalorahidian, plasma
sangvin, serul sangvin, urina) sunt lichide Newtoniene.
Vscozitatea dinamic este un fenomen foarte important n
circulaia sngelui.
S consideram un vas de snge de lungime L i raza R la capetele
cruia acioneaz o diferen, de presiune p=p1p2>0 (unde p1 este
proiecia presiunii sistolice pn n acel teritoriu iar p2 rezistena
periferic). La peretele vasului ader o pelicul fin de lichid ce rmne
n repaus. Dac diferena de presiune nu este foarte mare, atunci curgerea
are loc n pturi cilindrice paralele, cu viteze din ce n ce mai mari de la
periferie spre ax (figura 9.1).
Figura 9.1. Curgerea unui fluid printr-un tub cilindric de lungime L i raza R; p1, p2 sunt
presiunile ce acioneaz la capetele tubului (p = p1 p2>0)
74
Lucrri Practice de Biofizic Medical
R 4 (p1 p 2 )
(1)
8 L
Pentru lichidele care curg n conducte se introduce aa numitul
numr Reynolds:
vr
Re
unde: r = raza conductei
= densitatea fluidului
v = viteza de curgere
= coeficientul de vscozitate dinamic a lichidului
Pentru sngele din arterele mari exist o valoare critic a
numrului Reynolds (ReCR) egal cu 1000. n funcie de aceast valoare
exist mai multe regimuri de curgere a sngelui :
a) pentru Re< 1000, curgerea este laminar
b) pentru 1000< Re<2000, curgerea este nestabil
c) pentru Re > 2000, curgerea devine turbulent (cu vrtejuri)
n sistemul cardiovascular uman, curgerea turbulent poate s
apar n aorta, imediat deasupra valvulelor sigmoide, n perioada de
expulzie a sngelui (cnd viteza sngelui atinge cea mai mare valoare).
Aceast curgere turbulent este caracterizat prin zgomote caracteristice.
Turbulena (consumatoare de energie) poate s apar i n alte vase, n
stri patologice, cnd vscozitatea sngelui este mult mai sczut
(anemie, sau n cazul scderii CO2 din snge).
75
Ovidius University Press, 2009
Vscozitatea sngelui
Vscozitatea sngelui, la temperatura de 37oC, este de
aproximativ 4 ori mai mare dect cea a apei, sngele fiind un lichid
nenewtonian. Mai mult, sngele nu constituie o faz omogen, ci un
sistem dispers heterogen, mai precis, o suspensie de elemente figurate n
plasm.
Tot lichidele nenewtoniene sunt i soluiile coloidale i
macromoleculare, pentru care coeficientul de vscozitate depinde de
concentraia particulelor dispersate, conform legii lui Einstein:
=d(1+KV)
unde: d = coeficientul de vscozitate dinamic al mediului respectiv,
V = volumul fazei dispersate din unitatea de volum a suspensiei,
K = constant ce depinde mrimea i natura particulelor
dispersate (pentru proteine globulare K=4-10)
76
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Dispozitivul experimental:
Pentru determinarea vscozitii unor lichide se folosete
dispozitivul Ostwald. Acesta este confecionat dintr-un tub de sticl n
forma literei "U" avnd o ramur (A) cu un diametru de aproximativ 2cm
prevzut cu un rezervor de 3ml capacitate i respectiv o ramur (B)
avnd un diametru de aproximativ 0.8cm cu un rezervor de 2ml
capacitate situat n partea superioar. Acest rezervor este delimitat de
dou tuburi capilare i este prevzut cu dou repere R1 si R2.
Ramura (B) continu cu sistemul de aspiraie alctuit dintr-un tub
de cauciuc, un tub de sticl prevzut cu un orificiu lateral i o pomp de
cauciuc.
77
Ovidius University Press, 2009
Mod de lucru:
Se introduce apa distilat n ramura A. Cu ajutorul sistemului de
aspiraie se ridic apa n ramura B undeva deasupra reperului R1. Se
elibereaz pompa iar n momentul cnd suprafaa lichidului se afl n
dreptul reperului R1 se pornete cronometrul i se msoar intervalul de
timp necesar apei s curg ntre R1 si R2.
Se nlocuiete lichidul de referina (ap distilat) cu lichidul de
studiu i se repet procedeul prezentat mai sus. Pentru calcul
coeficientului de vscozitate se va folosi relaia (2).
Se vor efectua 15 determinri pentru fiecare lichid n parte iar
datele experimentale se vor introduce n tabelul de mai jos.
78
Lucrri Practice de Biofizic Medical
I. Noiuni teoretice
_O substan lichid este separat de atmosfera nconjurtoare
(n care se gsesc i vaporii si) printr-o ptur superficial. Moleculele
din ptura superficial se gsesc n condiii care se deosebesc de cele din
interiorul lichidului astfel:
Figura 10.1. Moleculele din ptura superficial se gsesc n condiii diferite dat de
moleculele din interiorul lichidului: (a1) molecul situat n interiorul lichidului,
(a2) molecul situat n stratul superficial.
79
Ovidius University Press, 2009
80
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Figura 10.2. Forma pe care o ia o pictur de lichid, pentru un lichid care nu ud pereii
vasului i pentru un lichid care ud pereii vasului.
82
Lucrri Practice de Biofizic Medical
F = 2r V
FG 2 r g
G = m g = v g n
Vg
2r n
K (1)
n
unde: K = constant ce depinde de tipul stalagmometrului utilizat
= densitatea lichidului
n = numr de picturi
Dispozitivul experimental folosit (stalagmometrul) este prezentat
n figura 10.5. Este alctuit dintr-un tub de sticl prevzut cu dou
poriuni capilare, una vertical (A) i una orizontal (B), un tub vertical
(C) ce prezint un rezervor de volum V i un sistem de aspiraie (D)
alctuit dintr-un tub de cauciuc, un tub de sticl prevzut cu un orificiu
lateral i o par de cauciuc.
83
Ovidius University Press, 2009
84
Lucrri Practice de Biofizic Medical
85
Ovidius University Press, 2009
I. Noiuni teoretice
Densitatea unei substane este o mrime fizic caracteristic
substanei respective. Densitatea absolut se definete ca fiind masa
unitii de volum.
m
(1)
V
avnd ca unitate de msur g/cm3 i kg/m3.
Mrimile prin care se definete densitatea, respectiv masa i
volumul, sunt dependente de presiune i temperatur, aceti factori
influennd valoarea densitii. De aceea, determinarea densitii
corpurilor solide i lichide se va face la temperatur constant n tot
timpul determinrii, iar pentru gaze trebuie respectat i condiia
meninerii constante a presiunii.
Deoarece determinarea densitii presupune msurarea masei i a
volumului, n practic se determin densitatea prin comparatie cu
densitatea unui corp de referin (densitatea relativ), de obicei apa
distilat pentru solide i lichide i aerul atmosferic uscat pentru gaze.
Astfel, densitatea relativ se definete ca fiind raportul dintre
densitatea a unui corp i 0 densitatea corpului de referint:
d (2)
0
86
Lucrri Practice de Biofizic Medical
87
Ovidius University Press, 2009
88
Lucrri Practice de Biofizic Medical
89
Ovidius University Press, 2009
Masa
Soluia picnometrului d
m1 m2 m3
1
2
90
Lucrri Practice de Biofizic Medical
I. Noiuni teoretice
Prin refracie se nelege schimbarea direciei unei raze de lumin
la trecerea prin suprafaa de separaie a dou medii transparente cu indici
de refracie diferii.
Fie o raz de lumin care cade pe suprafaa de separaie a dou
medii sub un unghi de inciden (i). Raza sufer fenomenul de refracie
(figura 12.1) i intr n al doilea mediu sub unghiul de refracie (r). ntre
cele dou unghiuri exist relaia:
sin i n 2 v1
n 21 (1)
sin r n1 v 2
unde:
v1 = viteza de propagare a luminii n mediul cu indice de refracie n1
v2 = viteza de propagare a luminii n mediul cu indice de refracie n2
n21 = indice de refractie relativ (al mediului 2 fa de mediul 1)
91
Ovidius University Press, 2009
92
Lucrri Practice de Biofizic Medical
93
Ovidius University Press, 2009
95
Ovidius University Press, 2009
96
Lucrri Practice de Biofizic Medical
97
Ovidius University Press, 2009
I. Noiuni teoretice
Lumina, ca orice und electromagnetic, const dintr-un cmp
electric (E) i un cmp magnetic (B). Cele dou cmpuri oscileaz n
faz, perpendicular pe direcia de propagare (figura 13.1), fiind perpen-
diculare i ntre ele. Lumina este o unda transversal.
98
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Figura 13.2. Diferena dintre lumina natural, lumina total polarizat i lumina parial
polarizat din punctul de vedere al direciei de oscilaie a vectorului cmp electric.
99
Ovidius University Press, 2009
100
Lucrri Practice de Biofizic Medical
unde:
c = concentraia procentual a substanei (g la 100ml soluie);
l = lungimea stratului de substan strbtut (l = 0.19014m);
= unghiul de rotaie determinat;
101
Ovidius University Press, 2009
Mod de lucru:
- privind prin ocular se potrivete sursa de lumin (dac este
cazul) prin micarea stnga dreapta a suportului becului;
- pentru a obine 0 se luczeaz cu tubul gol;
- prin rotirea plcii interioare se observ o imagine divizat net n
trei cmpuri (o band ntunecat mrginit de dou cmpuri luminoase
(figura 13.6a); rotind n continuare se caut imaginea n care banda
luminoas este mrginit de dou cmpuri ntunecate (figura 13.6b); ntre
cele dou imagini extreme se caut obinerea unui cmp cu luminozitate
uniform i minim (figura 13.6c).
103
Ovidius University Press, 2009
0 1 2
Soluia 1
Soluia 2
Soluia 3
Media (i)
n-1
-
C -
104
Lucrri Practice de Biofizic Medical
Telecobaltoterapia
I. Noiuni teoretice
Radiaia Cobalt-60 este considerat ca o radiaie de energie mult
mai sczut dect cea obinut cu acceleratoare liniare. Fascicolul de
radiaii al Cobalt-60 prezint o serie de particulariti de ordin calitativ,
geometric i cantitativ.
1. Calitatea fascicolului
Izotopul radioactiv artificial Cobalt-60 se obine prin reacia
(n, ), din elementul natural Cobalt-59.
27 Co 0 n 27 Co
59 1 60
Dezintegrarea 60
27 Co are loc n cascad: fiecare atom emite o
radiaie beta cu energia E=0.31MeV i doi fotoni gamma de 1.17 MeV i
60
1.33MeV, trecnd n elementul 28 Ni .
105
Ovidius University Press, 2009
106
Lucrri Practice de Biofizic Medical
107
Ovidius University Press, 2009
108
Lucrri Practice de Biofizic Medical
2. Geometria fascicolului
Fascicolul de radiaii este definit prin mai muli parametrii care
se utilizeaz n calcule dozimetrice:
a)_Distana F fa de surs, exprimat ca:
- distana surs-piele (DSP), respectiv distana dintre planul
frontal al sursei i suprafaa de intrare n mediul iradiat, msurat n axul
central al fascicolului;
- distana surs-ax (DSA), care la aparatele cu montaj izocentric
corespunde distanei dintre planul frontal i axul de rotaie.
109
Ovidius University Press, 2009
110
Lucrri Practice de Biofizic Medical
unde:
- D med A,DSP debitul dozei absorbite n mediul iradiat, pentru un
111
Ovidius University Press, 2009
unde:
- D med A,DSP,p = debitul dozei absorbite n mediu, pentru cmpul
distana DSP
- RPA,DSP,p = randamentul n profunzime pentru cmpul A,
D cGy
Timp expunere =
D med ( A ,DSP,p ) cGy
min
b) Calculul cu raportul esut-aer: tehnica de iradiere cu DSA
(DTS) fix se utilizeaz la aparatele cu montaj izocentric, dimensiunea
cmpului de iradiere fiind luat n axul de iradiere sau centrul volumului
tumoral. Debitul dozei n punctul p se calculeaz dup formula:
cGy
DA, DSA, p Exp( DSA) C f RTA( A, p)
min
unde:
- D A,DSA,p = debitul dozei absorbite pentru cmpul de seciune
113
Ovidius University Press, 2009
D cGy
Timpul de expunere =
D ( A ,DSA,p ) cGy
min
114
Lucrri Practice de Biofizic Medical
116
Lucrri Practice de Biofizic Medical
117
Ovidius University Press, 2009
118
Lucrri Practice de Biofizic Medical
119
Ovidius University Press, 2009
120
Lucrri Practice de Biofizic Medical
121
Ovidius University Press, 2009
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
122