Calitatea apei in

analize chimice;
Sisteme de
purificare
apaMilli-Q
Ciprian Mihai Vatca
Iasi, 29 octombrie 2019
Apa este cel mai simplu reactiv/solvent utilizat in laborator
Unde si cum este folosita apa?

• Spalare sticlarie • Dilutie si dizolvare

• Bai de apa • Omogenizare si ultrasonare
• Autoclave • Blank proba / linie de baza
• Camere climatice si de Pregatire • Clatire / spalare proba
stabilitate Pregatire proba
• Precipitare sau extractie
experiment

Reactie cu
(sau ca)
Curatare dupa proba
• Spalare manuala, clatire sau finalizarea • Apa ca reactiv chimic
curatare experimentului • Eluent sau tampon
• Alimenatare masini de spalat /analizei
• Baza pentru preparare medii
automate
• Catalizator
• Spalare (flushing)/clatire
instrumente • Teste de stres si de stabilitate

2
Contaminanti din apa
Apa nu este numai H2O.…

ioni
Substante organice

particule

bacterii

Gaze dizolvate

3 Katarzyna Mgłosiek
Apa…si apa ultrapura

Apa de robinet este H2O Apa ultrapura este H2O

Care contine diverse alte componente Fara nimic altceva

Apa ultrapura este cel mai

important reactiv dintr-un
laborator

4
Brand-ul Milli-Q
Suntem la a 7a generatie Milli-Q

Tehnologii simple precum

distilarea si deionizarea

1 2 3 4 5 6 7

<1967 1967 1973 1980 1989 Mid-90 2000 2005 2017

Super-Q – Primul Milli-Q – sisteme

sistem de apa pentru obtinere Primul “chain” Design nou: O noua platforma pentru 2 platforme noi:
ultrapura apa ultrapura de tratare a Introducerea a satisface cerinte din ce apare strategia
apei potabile consumabilelor in ce mai stringente: apa de tiering
pentru a de tip caseta – de tip II, sisteme noi de (targetare functie
produce apa face schimbul monitorizare, posibilitati de reglementari
ultrapura de consumabile noi de comunicare, de specifice),
mult mai facil prelevare apa, etc. concepul de POD,
etc…

5 Milli-Q IQ 7000 Launch presentation v0

O gama extinsa de produse
Adreseaza cerintele clientilor functie de aplicatie, volum, pret

Apa de robinet → apa Apa de robinet → apa pura/

ultrapura Volume ridicate
Cerinte stringente / reglementari stricte Cerinte stringente

Apa de robine → apa ultrapura

 Cerinte simple  +40 sisteme pentru aplicatii de laborator, 3 tipuri de
apa: tip 3, Tip 2, Tip 1 (Ultrapura)  9 sisteme mari, pentru consumuri
 3 tipuri de apa pentru a satisface diverse cerinte in ceea ridicate de apa
ce priveste caracteristici / buget  12 sisteme pentru analizoare clinice

Pentru consumuri de ordinul 100 L/zi Pana la 10,000 L/zi

6
Apa purificata – diverse calitati
Organisme de reglementare
Diferite organisme care reglementeaza calitatea apei destinate utilizarii in
laborator

ASTM: American Society for Testing and Materials

e.g. used in US public laboratories

CLSI: Clinical & Laboratory Standards Institute

CAP: College of American Pathologists
(define good practices / audit)

ISO: International Standard Organization

USP: United States Pharmacopoeia

EP: European Pharmacopoeia

FDA: Food & Drug Administration

(define good practice / audit)
Diferite calitati de apa apa purificate

Apa de tip III

• Spalare sticlarie/ bai de incalzire
• Alimentare sisteme apa ultrapura

Apa de tip II
Solutii tampon, preparare medii de cultura, reactivi pentru chimie
Alimentare camere climatice/ Umplere autoclav
Alimentare pentru sisteme obtinere apa ultrapura

Apa de tip I – apa ultrapura

 GC, HPLC, AA, ICP-MS – preparare faze mobile, blank-uri, preparare probe si
solutii tampon
 Culturi celulare, biologie moleculara
8
Etape de purificare
Exterior (Ce vede utilizatorul)

Interior (tehnologii de purifcare)

Osmoza inversa UV LAMP

Rezervor

254/265 nm
IPAKQUANTA

EDI
IPAKGard Lampa
(Electrodeionizare) UV Monitor TOC
185/254
sau 172
9 nm
Etape de purificare
Apa de tip II
Apa de tip III
Lampa UV Tanc de
Osmoza inversa stocare
Cartus pretratare 254 nm
(RO)

EDI (Electro-
deionization)

Q-POD – punct de
prelevare
Apa de tip I
(Cu filtru final)
Cartus de
Lampa UV purificare
185 nm

Monitor TOC
& Celula de rezistivitate
10
 Etape de purificare
IPAKQUARD EDI UV 185/254 sau 172 nm + IPAK Quanta
UV 254/265 nm POU Filter

Indeparteaza 95%-
99% dintre ioni Indeparteaza ionii Distruge Purificare finala, inainte de
Indeparteaza Indeparteaza compusi
contaminantii care pot (Rezulta Apa de tip III) (Rezulta apa de tip II) microorganisme organici utilizate
afecta sistemul
(Rezulta apa de tip I) (diferite filtre pentru diferite
RO aplicatii)

RO EDI UV-254 UV-254 AC IX UV-185 µ filter

Ioni X X X
Substante X X X
organice
Particule X X
Bacterii X X X X X

11 Title of Presentation| DD.MM.YYYY

 Etape de purificare
IPAKQard H

Indeparteaza  Contine carbune activ pentru indepartare clor din apa;

contaminantii care pot
afecta sistemul
 Un continut ridicat de clor afecteaza membrana de osmoza
inversa
 Polifosfati pentru a preveni depunerile de CaCO3
 Important mai ales daca duritatea apei este ridicata
 Consumabila care trebuie schimbata periodic

12 Title of Presentation| DD.MM.YYYY

Etape de purificare
Osmoza inversa - principiu
• Mecanism de indepartare contaminanti: filtrare bazata pe dimeniune particule – membrana
semi-permeabila
• O presiune a apei de miniumum 5 bar este necesara pentru a asigura eficienta membrane
semi-permeabile
• Eficienta in indepartarea ionilor: 95% - 99%
• Eficienta in indepartare particule, bacterii, molecule organice: >99%
Ions 95% -
99% Organic mol.
Apa de +
Particulates +
alimentare sub Bacteria >
Permeat
presiune 99% Apa de tip III

Reject RO membrane

13
Etape de purificare
Membrana dispusa in forma de spirala pentru maximizare suprafata
Apa de alimenta re - Port de
Curgere tangentiala RO Alimentare sanitizare
Cartridge apa
Celula de
conductivitate pentru alimentare

Rejectat
MILLIPORE
MILLIPORE MILLIPORE
Reverse
Reverse Reverse

Spiral RO
Osmosis
Osmosis Osmosis
Element
Element Element

Membrane Part
Part #
Rev
PF05099
# PF05099
Rev 1196
1196
Part # PF05099
Rev 1196
Carcasa
Spiral RO
membrane

Rejectat
Permeat

Permeat

14
Etape de purificare
Recirculare si stocare
In sistemele Merck – o blucla de recirculare este prevazuta pentru a diminua
consumul de apa
→ Calitate mai slaba a apei de alimentare = conditii mai dure de utilizare
Procesul de purificare prin osmoza inversa este un process lent (cativa litri/h)

→ este necesara stocarea permeatului (pentru a asigura necesarul de apa in Rezervor

de stocare
laborator)
RO cartridge
MILLIPORE

Alimentare apa
- presiune
Permeat
Apa de tip 3
Rejectat

Bucla de recirculare

15
Etape de purificare
Electrodeionizarea – o tehnologie consistenta si de
incredere pentru purificare apa

Electrodeionizarea este o tehnologie cheie

pentru a obtine apa purificata de calitate
inalta (tip II)

16 Katarzyna Mgłosiek
Etape de purificare
Modul EDI – constructie si principiu de functionare

Purificarea se bazeaza pe:

- Strat mixt cu rasini

-
schimbatoare de ioni
Curent electric care
+ A C A C -
indeparteaza continuu
ionii si regenereaza Na+ Cl- OH-
rasina H+ Cl- Na+
- Fiecare compartiment
al modulului EDI este
alimentat cu apa de tip Cl- Na+
III
OH-
H+ Cl- Na+
Na+ Cl-

Drain Produs – Apa de tip II

A – Membrana permeabila pentru anioni
C – Membrana permeabila pentru cationi

17 Katarzyna Mgłosiek
Etape de purificare
Modul EDI – constructie si principiu de functionare

In compartimentul catodului:
- Strat de carbune activ conductiv
- Genereaza ioni OH- in tot
compartimentul catodului
- Previne depunerile pe suprafata
catodului
- Prelungeste durata de viata a
modului EDI

18 Title of Presentation| DD.MM.YYYY

De incredere, eficienta si prietenoasa cu mediul
Tehnologia Elix
Tehnologia Elix (ex. Elix 3)
Consum redus de energie - 80W/h
Consum redus de apa – 20 l/h
(15% recuperare = 3 L apa pura/h)
Distilare
Consum ridicat de energie – 0,8 KW/h
Consum ridicat de apa 50-200l/h
(apa de racire ~15 L pentru fiecare litru de apa
pura produs; apa reziduala)

Proces de productie complet

Curatare cu acid HCl
automatizat
Fara posibilitatea monitorizarii calitatii apei
Recircularea apei in procesul de productie pentru a
preveni recontaminarea Fara monitorizarea duratei de viata a
componetelor aparatului, nu indica momentul
Control complet automatizat al sitemului, alarme si
inlocuirii
alerte afisate pe display
Fara automatizare
Control complet al calitatii apei in fiecare
etapa de productie
• Contaminantii din apa pot fi preluati de
picaturile de condens

*calitate constanta a apei in timp • Apa pura produsa este fierbine (~80oC) – este
necesara racirea pentru majoritatea aplicatiilor
*costuri predictibile

Smart choice
*prietenoasa cu mediul

19
Etape de purificare
Lampa UV in sistemele de purificare apa
UV 254/265 nm UV 185/254 sau 172 nm

Distrugere microorganisme Foto-oxidarea urmelor organice

Utilizare Utilizare
In procesele de purificare a apei de tip III si II In procesul de obtinere a apei ultrapura
In rezervoare pentru apa de tip III si II
Rezervoare
Elix
de apa
Advantage
purificata
Etape de purificare
Foto-oxidarea moleculelor organice
Procesul de foto-oxidare:
Apa iradiata cu UV 185/254 sau 172 nm → radicali liberi
Radicalii liberi ataca moleculele organice → oxidare

Molecula Molecula
organica neutra organica cu
sarcina electrica
UV 185/254
sau 172 nm
+
CO2 H 2O

Expunere de scurta Expunere de lunga

durata: durata:
Aparitia moleculelor Degradarea completa a
organige cu sarcina
moleculelor organice
electrica
Etape de purificare
Foto-oxidarea moleculelor organice
UV
185/254
sau 172 +
nm
CO2 H 2O
Molecula Molecula
organica organica cu Rasini schimbatoare
neutra sarcina de ioni
electrica

Expunere de lunga durata: daca durata de expunere la lumina UV este suficienta moleculele organice sunt
degradate complet
→ nu este posibila datorita curgerii care limiteaza expunerea la UV

Expunere de scurta durata: molculele organice cu sarcina electrica sunt indepartate cu ajutorul rasinilor
schimbatoare de ion dupa etapa de expunere UV → principal etapa de purificare pentru obtinere apa
ultrapura.
Flexibilitate in aplicatii – selectare filtru final

Millipak® LC-Pak® VOC-Pak®

EDS-Pak® Carbune activ
Biopak®
Filtru final pentru Faza stationara C18 Carbune activ
pentru indepartare Pentru indepartare
indepartare particule si pentru indepartare pentru indepartare
organice volatile contaminare biologica
bacterii urme organice molecule EDs

Specificatii: Specificatii:
Specificatii: Specificatii: Specificatii:
Apa de alimentare RNase <1 pg/mL
Bacterii <0.01 cfu/mL Apa de alimentare Apa de alimentare
<5ppb TOC → 300L DNase <5 pg/mL
<5ppb TOC → 500L <5ppb TOC → 300L
apa fara VOC Pyrogens <0.001 EU/mL
apa calitate LC apa fara EDs Bacteria <10 cfu/100mL
23
Brand-uri si aplicatii
Tip de aparat functie de aplicatie

 Cromatografie
Milli-Q  Cea mai inalta puritate  Biologie moleculara
Super-Q  Indepartare totala contaminati  Urme metale

Milli-Q IQ  Indepartare contaminanti specifici

Apa ultrapura / Tip I

 Foarte pura  Titrare, determinari pH, analize UV-Vis

(Elix)
 Calitate constanta, independent de  Microbiologie (filtru final de 0.22 um)
(AFS) timp/ volum  Clatire sticlarie, dispozitive climatice
Milli-Q CLX / Milli-Q HX
Pura / Tip II / Clinical

 Alimentare autoclav
 Apa pura
 Camere climatice / camera de
(RiOs)  Calitatea apei purificate depinde de stabilitate (fara sensibilitate la silicagel)
Milli-Q HR calitatea apei de alimentare
 Clatiri non-critice
Pura / Tip III

24
 Brand-uri diferite / calitati de apa diferite
Tip-uri de aparate functie de aplicatii

Milli-Q
Super-Q
Milli-Q IQ
Ultrapure / Type I

Elix
AFS
Milli-Q CLX / Milli-Q HX
Pure / Type II / CLRW

RiOs
Milli-Q HR
Pure / Type III / SRW

25
Apa ultrapura din apa potabila

26 Title of Presentation| DD.MM.YYYY

Sisteme de obtinere apa ultrapura din apa potabila

Milli-Q IQ 70xx
▪ Tehnologie Elix®
▪ Lampa UV pentru foto-oxidare integrata
▪ Monitor A10 TOC
▪ Produce apa de tip II stocata in rezervor si apa de tip I – la cerere Cerinte
▪ Pot fi montate pana la 3 POD-uri – puncta de prelevare (E-POD® stringente
si Q-POD®)
▪ Servicii extinse
▪ Trasabilitate - Millitrack Basic & Compliance

▪ Raport bun calitate / pret

▪ Produce apa de tip III – stocata in rezervor, si apa de tip I la cerere Cerinte
▪ Functia de prelevare este mai putin flexibila medii
▪ Lampa de foto-oxidare integrata
▪ Indicator TOC
Milli-Q Direct ▪ Servicii de mentenanta / reparatii / validare

▪ Pret redus, insa raport bun calitate / pret

▪ Usor de utilizat – mentenanta minima
▪ Lampa UV este optionala Cerinte
Direct-Q ▪ Punct de prelevare - optional de baza
▪ Plug & play

27
Apa ultrapura din apa pura

28
Sisteme pentru obtinere apa ultrapura din apa pura – Pozitionare

▪ Touchscreen intuitiv
▪ Punct de prelevare Q-POD® inovativ (pana la 4 Q-PODs pe unitate)
Cerinte
Milli-Q ▪ Design compact
stringente
IQ 7000 ▪ Lampa UV pentru oxidare fara mercur
▪ Functionalitati integrate pentru management date

▪ Cel mai bun raport calitate apa / calitate monitorizare (indicator TOC)

Milli-Q ▪ Mod convenabil de prelevare apa Cerinte

Reference ▪ Suport pentru calificare / validare medii
▪ Mentenanta simpla

▪ Prelevare simpla a apei purificate

Cerinte
Milli-Q ▪ Usor de instalat
de baza
▪
Synergy Usor de intretinut
▪ Design compact
29
Sisteme pentru obtinere apa pura din apa potabila

30
 Sisteme pentru obtinere apa pura din apa potabila
▪ Tehnologie Elix® & Osmoza inversa
▪ Lampa UV pentru distrugere bacterii

Milli-Q Elix ▪ Pot fi montate pana la 3 POD-uri – puncta de prelevate (E-POD®) Cerinte
Advantage ▪ Oferta extinsa de servicii / calibrare / validare stringente
▪ Diverse debite (pana la 15 L/h) si optiuni de stocare

▪ Tehnologie Elix® & Osmoza inversa

▪ Lampa UV pentru distrugere bacterii
Cerinte
Elix Essential (numai pentru Elix)
medii
▪ Diferite debite (pana la 24 L/h) si optiuni de stocare
RiOs Essential
▪ Display simplu dar intuitiv

▪ Modalitate simpla de prelevare apa Cerinte de

▪ Usor de instalat baza
▪ Usor de intretinut
▪ Design compact
31 RiOs Smart
Gama Large – pentru consumuri mari de apa

32 Title of Presentation| DD.MM.YYYY

Gama Large
 Solutii complete functie de cerinte referitoare la flexibilitate, spatiu, configuratie cladire, costuri de investitie si de
intretinere

Point of use
Bench top

Large
systems

Clinical Analyzer

Large
storage Typical lab equipments

33
Gama large
Milli-Q HR Milli-Q HX
(pana la 220 L/h) (pana la 150 L/h)
• Monitorizare in timp real de la distanta pentru cea mai buna productivitate – 24 / 7
• Touch Screen – manipulare convenabila
• Modul Elix – pentru apa de calitate constanta si inalta, costuri de functionare
reduse si predictibile
• Posibilitate de arhivare pentru laboratoare acreditate
• Sistem de osmoza inversa avansat – tehnologie E.R.A. pentru optimizarea
consumului de apa

SDS 500 • Sistem de back-up incorporat

• Capacitate de stocare – pana la 500 litri apa de tip III si apa de tip II
• Solutii de stocare si distributie
• Solutii de sanitizare functiie de nevoile beneficiarului
• Materiale si Design “State of the Art” pentru a conserva calitatea apei
• Compact, usor de instalat
Monitorizarea calitatii apei

Masurarea conductivitatii si a continutului de TOC sunt critice pentru a monitoriza calitatea apei
purificate!!!

Monitorizarea conductivitatii:
- Celule de conductivitate

Monitorizarea TOC
- Monitor TOC
- Indicator TOC
Functionarea monitorului TOC

1. Apa intra in celula – proba izolata

Monitor A10 TOC

2. Lampa UV se aprinde, iradiaza continutul de

TOC apa si oxideaza continutul organic timp de 3 –
6 minute.
Moleculele organice - - -> CO2

3. Cresterea de conductivitate este masurata si

transformata in continut TOC
4. Monitorul TOC consta intr-o celula de quartz si
o lampa UV si este controlat de placa PC.
Monitor A10 TOC

Monitor A10 TOC este un dispozitiv de sine stator, portabil, alimentat cu apa purificata
ￚ pentru un sistem care nu are monitor TOC in configuratia
standard
ￚ pentru un punct de control ales de utilizator (remote)
ￚ pentru verificarea mai multor puncte

Monitor A10 TOC in sisteme de purificare apa:

 Milli-Q Advantage & Milli-Q IQ 70xx & MilliQ IQ 7000
 Elix (optional)
Indicator TOC

Ofera o indicatie a continutului TOC

→ mai putin precis si mai putin sofisticat fata de
A10 TOC Monitor
→ dispozitiv mai ieftin

Acelasi principiu de functionare ca A10 TOC:

 Foto-oxidarea moleculelor organice sub actiunea luminii
UV
→ creste conductivitatea apei
→ calcul continut TOC
Dar…
 Lampa UV lamp = aceeasi lampa UVon-line UV lamp
utilizata pentru purificarea apei
 Nu este izolata o proba specifica
 Foto-oxidarea si masurarea conductivitatii se realizeaza
pe parcursul procesului de purificare cand trece prin fata
lampii UV → timp scurt de expunere
E-Pod & Q-Pod Remote Dispensers

39
 Monitorizarea calitatii apei

Contaminanti ionici (Rezistivitate)

Contaminanti organici (TOC)

„Picuri fantoma”? Adducts?

Calitate slaba a picurilor?
Presiune ridicata in sistemul HPLC?

Conductivitate ridicata? TOC

ridicat?
Este cazul sa actionati!
40 Katarzyna Mgłosiek
Rolul apei in laboratorul de analiza

Preparare faze mobile Preparare standard, preparare

Cromatografia de lichide
medii de cultura

Preparare Apa MilliQ

brank Metoda analitica
Preparare probe
- extractie
- dilutie
Spalare si clatire - spalare
sticlarie /
instrumente de ✓ Apa purificata este necesara pentru a evita
laborator interferentele cu analitii de interes
41
✓ A otimiza utilizarea sistemului de analiza
Riscul principal asociat cu stocarea apei este contaminarea acesteia

▪ Contaminarea in timp este inevitabila. Un design

adecvat al tancului de stocare este crucial pentru
utilizator

▪ Surse de contaminare:
❖ Materialul din care este confectionat tancul – daca
materialul nu este selectat corespunzator
❖ Bacterii, alge, functie de tehnica de purificare si de
design-ul tancului
❖ Aerul din laborator - CO2, VOC, particule, acizi,
si/sau microorganisme

❖Solutia
❖ Design optim
❖ Vent filter
❖ ASM – modul de sanitizare automata si sanitizare

42
Contaminarea microbiologica

▪ Apa pura produsa de sistemele noastre are un continut scazut de microorganism

(<10cfu/ml with Elix Essential UV)
▪ Dar bacterii noi pot fi introduce in apa dupa productie

1. Bacteriile din apa

1. Bacterii din aer – 2. Bacteria pot intra in
picaturile de
pot patrunde in tanc in rezervor prin tubul de
condens de
timpul prelevarii o the overflow
deasupra nivelului
container when water is
apei
poured out Bacteri
a

Bacterii
2. Dezvoltare
biofilm sub nivelul
apei

43
In ciuda lipsei de nutrient anumite specii de bacterii pot fi prezente
in apa purificata

Bacterii in apa ultrapura Bacteriil se adapteaza la mediul cu continut

scazut de nutrienti din apa pura si ultrapura

▪ Ralstonia pickettii ▪ Isi reduc dimensiunile pentru

optimizarea necesarului de nutrienti
▪ Sphingomonas (Pseudomonas)
paucimobilis ▪ Unele bacterii se hranesc cu produsii de
descompunere ai bacteriilor moarte
▪ Bradyrhizobium
▪ Formeaza biofilm
▪ Burkholderia cepacia
▪ Brevundimonas vesicularis
▪ Pseudomonas aeruginosa
▪ Caulobacter crescentus
▪ Methylobacterium sp

44 Katarzyna Mgłosiek
Cum prevenim acumularea contaminatilor

 Pereti
algelor
opaci pentru a preveni trecerea luminii solare si dezvoltarea

Fundul plat trebuie evitata – pentru a

 evita acumularea contaminatilor

Robinet de drenare la cel mai

Posibilitate de drenare completa, cu jos nivel este perfect
 cel putin un punct de evacuare la cel
mai “jos” nivel al tancului
compatibil cu prezenta unui
robinet la nivel superior, ceea
ce permite prelevarea simpla
a apei din tanc

Umplerea tancului trebuie facuta in

 partea inferioara pentru a minimiza

contactul apa / aer, limitand astfel
A se evita umplerea “de sus”
deoarece, in acest fel, se
transferal contaminatilor din aer in maximizeaza contacul cuprafetei
apa apei cu aerul datorita efectului de
stropire

45 Katarzyna Mgłosiek
Selectarea materialului adecvat pentru tanc

Materialul din care este confectionat

tancul trebuie ales in asa fel incat sa
nu elibereze extractibile in apa
❖ Rezervoarele din sticla elibereaza ioni –
Na, sau coloizi - silice
❖ Rezervoarele din metal (staniu, otel)
elibereaza metale grele
❖ Unii polimeri elibereaza plastifianti
(PVC)
Trebuie sa previna formarea biofilmului

Tancurile din polietilena reprezinta, in general, cea mai adecvata solutie de

stocare pentru aplicatii de laborator

46 Katarzyna Mgłosiek
Selectarea procesului de fabricare a tancului
O suprafata neteda a tancului va limita absorbtia contaminantilor (particule sau bacterii). In
general sunt folosite 2 tehnici pentru fabricare rezervoarelor din polimeri:
❖ Turnare rotativa – polimerul topit este impins spre suprafata interna a matritei prin centrifugare
❖ Blow molding (turnare prin suflare) – polimerul topit este impins spre suprafata interna a matritei
folosind aer sub presiune. Moleculele de aer sub presiune permit obtinerea unei suprafete foarte netede
pentru rezervor

Polypropyle
BLOW MOLDING PROCESS

ne
Inner surfaces produced by
rotomolded
blow molding are smoother,
and therefore better to limit

Surface Finish
the risks of bacteria adhesion
to the wall

Polyethylene
blow-
molded

47
 Merck – proces de fabricatie si design optimizat

Tanc de polietilena obtinut prin “blow molding” (turnare prin suflare)

Polietilena
Material curat, nu elibereaza extractibili
Opac
Blow-Molded
Distribuire omogena a materialului
Suprafata neteda

Rezervor cilindric cu fund conic

Fara unghiuri ascutite
100% Drenabil
Suprafata minima de contact apa / aer

48 Katarzyna Mgłosiek
Contaminare din aer

La fiecare prelevare de apa din tanc, un volum de aer egal intra in tanc, aducand 3 tipuri de
contaminanti care vor afecta puritatea apei

❖ Dioxid de carbon (CO2) prezent in aerul din

orice laborator; se va dizolva in apa reducand
rezistivitatea
❖ Bacteriile sunt prezente in aer in
laboratoarele obisnuite si vor intra in tanc,
urmand a se dezvolta in apa
❖ Solventi volatili, cum ar fi acetona sau
toluen, sunt prezenti adesea in aer in
laborator. Cand se disolva in apa creste
nivelul TOC

49 Katarzyna Mgłosiek
Contaminarea apei din tanc poate fi evitata folosind un filtru de aer

Pentru a preveni introducerea contaminantilor in apa pura din tanc aerul trebuie sa treaca
printr-un mediu de purificare care sa indeparteze contaminantii

Tank Vent Filter

TANKMPK01 for Elix

TANKMPK02 for RiOs*

50
*TANKMPK02 recomandat pentru apa Rios contine numai membrana filtranta (0.45 µm)
Prevenirea acumularii biofilmului:
Modul de sanitizare automata (ASM)

❖ Pentru a preveni dezvoltarea bacteriilor si biofilmul se poate folosi o

lampa UV de 254 nm in interiorul tancului de stocare, intr-o pozitie care
sa permita luminii UV iradierea apei stocate, dar si iradierea peretilor si a
capacului tancului.

❖ UV 254 timp de 10 – 30 minute / zi

▪ protectie completa in interiorul tancului (deasupra nivelului de
umplere)
▪ Are actiune bactericida direct asupra apei de stocare
▪ Se recomanda a fi operata 10 – 30 minute in perioade critice ale zilei:
inainte de a incepe lucrul sau in timpul pauzei de pranz

❖ TANKASMES pentru
platforma Essential
❖ TANKASMIN pentru
platforam Integral
Tank ASM

51
 Indepartarea biofilmului: Sanitizare chimica

Sanitizare chimica (agenti de oxidare, hidroxid de sodiu...etc) :

❖ Eficienti pentru suprafetele in contact direct cu apa (tanc si bucla de

distributie)

❖ Ineficienta pentru suprafete aflate deasupra nivelului de umplere (pot ramane

picaturi de condens contaminate)

❖ Spalarea / decontaminarea sunt consumatoare de timp

Cad tancul este re-umplut dupa sanitizare, picaturile ajung in apa pura si o contamineaza din nou cu
bacterii – contaminarea va re-veni la acealsi nivel dupa cateva saptamani.

La sfarsitul sanitizarii – continutul de agenti de sanitizare trebuie verificat pentru a evita interferentele in
analiza

ASM module – o solutie de prevenire

52 Katarzyna Mgłosiek
Bucla de recirculare pentru a preveni contaminarea apei

Elix Advantage - examplu

❖ Unii competitor folosesc bucla de
recirculare ca argument / avantaj
competitiv

❖ Recircularea prin modulul de deionizare

insa duce la reducerea duratei de utilizare
a acestui modul

Pentru sistemele Merck – bucla de recirculare este standard!!!

Pentru distributia apei purificate pe distante mari (>2m), o bucla de recirculare trebuie luata in considerare, iar
debitul de recirculare trebuie sa asigure o viteza de curgere de 1 cm/sec (la aceasta viteza, bacteriile se ataseaza
greu de suprafetele tuburilor, si astfel este limitata formarea biofilmului).

53 Katarzyna Mgłosiek
 Influenta
contaminantilor –
bacterii si particule

54
Ce inseamna apa MilliQ – specificatii apa ultra pura

Rezistivitate 18,2 MΩ*cm,

Conductivitate 0,055 uS/cm
TOC < 5 ppb
Particule >0,22um < 1 particle/ml
Bacterii < 0,01 cfu/ml

55 Katarzyna Mgłosiek
 Bacterii si particule
Efectul fazei mobile nefiltrate asupra coloanei
Typical Plugged Inlet Frit

Contaminare cu particule –
Contaminare microbiologica –
Faza mobile apoasa nefiltrata A
datorita utilizarii unei faze mobile
stocate in timp (in loc de proaspat
preparata)

56

Provided by Waters Corporation

Bacterii si particule: presiune ridicata in sistem

Monitorizarea presiunii: un bun indicator al calitatii

solventului si coloanei
Trend Plot for Channel: System Pressure
11000.0
10000.0
9000.0
8000.0
Pressure

Faza mobila “veche” Faza mobile preparata proaspat

7000.0
6000.0
5000.0
4000.0
3000.0
2000.0
1000.0 Variatia presiunii pentru 600 injectii consecutive
0.0
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550
Numar de injectii

Column Acquity UPLC 2.1x50 mm); Flow rate 0.6mL:min; Detection at 254 nm

57 Katarzyna Mgłosiek Provided by Waters Corporation

57
Bacterii si particule – utilizare apa MilliQ prospata

8500.00
8000.00
7500.00
7000.00
6500.00
System Pressure (PSI)

6000.00
5500.00
5000.00
4500.00
4000.00 Presiune stabila
3500.00 Repetabilitate
3000.00
2500.00
2000.00
1500.00
1000.00
500.00
0.00
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600
Run Number
Apa Milli-Q este recomandata pentru analize UHPLC/LC-MS
Presiunea in sistemul UHPLC pentru fiecare din cele 600 injectii de tip gradient, masurata la intervale de
0.50 min. Eluenti: apa ultrapura proapspata si acetonitril.

Injection: 2µL; System: Acquity UPLC ; Column: RP18 (1.7µm, 2.1x50 mm) at 35°C;
58 Gradient from 20% ACN to 90% ACN in 3 min; Flow rate 0.6mL:min; Detection at 254 nm
 DE evitat!

Experienta!

59 Katarzyna Mgłosiek
Apa ultrapura stocata in recipiente de plastic

A nu se utiliza daca continutul de organice interfera in analiza

Se recomanda sticla borosilicate bruna
direct injection of the solvents Bruker Esquire 3000+ ion trap
60 Katarzyna Mgłosiek MS operated in ESI+ mode
Apa ultrapura stocata in sticla borosilicate – influenta in analiza LC-MS

direct injection of the solvents Bruker Esquire 3000+ ion trap

MS operated in ESI+ mode
61 Katarzyna Mgłosiek
Apa HPLC stocata in recipiente de plastic si respectiv de sticla

9 days
6 days
25 hr
2 days
7 hr
0 days
5 hr
3 hr

1 hr
0 hr

▪ Apa Milli-Q® stocata in recipient din plastic Apa Milli-Q stocata in recipient de sticla pentru 25h
(Nalgene®)
Analiza HPLC (214 nm)
Analiza HPLC (214 nm)
Proba de apa: 60 mL coloanal C18 debit 1 mL/min
Proba de apa: 60 mL coloanal C18 debit 1 mL/min

62
Influenta stocarii apei in ion-cromatografie
Water injections :
8 mL preconcentration
Gradient
7,5
µS/cm Water Pouch
6,5 HCO3 -
Bottled water

5,5 NO3 - Distilled water

Milli-Q “A”
Gradient
4,5
“B”
Milli-Q Element
3,5
Simplicity
Cl -
2,5
F-
1,5

0,5

-0,5 min
0 5 10 15 20 25 30

63
Spalare si clatire

Reziduu de detergent pe sticlarie

Pentru clatire finala se recomanda apa de tip Elix – pot alimenta masini de spalare sticlarie
automate
64
Spalare si clatire

Clatire si eliminare urme detergenti

Sticla borosilicate clatita cu apa MilliQ – foarte important pentru analize de urme

65 Katarzyna Mgłosiek
 Blank-uri – evitare interferente

Primii cativa litri de apa ultrapura se arunca, ulterior se preleveaza apa pentru
analiza – pentru a evita contaminarea din mediul din laborator

Linie de baza pentru HPLC si LC-MS

100 mL

1 Liter
3 Liters

5 Liters

Blank

66
 Blank-uri – evitare interferente
 Flush the water purification system before taking water
4 +MS, 0.0-3.0min #(2-158)
x10
Milli-Q (Monday, first delivery after weekend)
335.1

4
499.1
2 241.0
425.0 547.1625.1
397.0
100.2178.9
57.7 706.3
896.5 m/z
0
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000

4
x10
+MS, 0.0-3.0min #(1-149)

Milli-Q – fresh water, after discarding couple of liters

6

2
m/z
0
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000

67
 Aprox .1L de apa – discard – pentru a elimina bacteriile

Volume Week 1 Week 2 Week 3 Week 4

delivered (L) (CFU/mL) (CFU/mL) (CFU/mL) (CFU/mL)
0.0 73 5 35 86
0.5 22 1 2 25
1.0 0 0 2 3
3.0 0 0 0 0

apa Bacterii in apa

Membrana

Bacterii din aer

68 Katarzyna Mgłosiek
 Schimbarea cu regularitate a consumabilelor

Influenta unui filtru final “vechi”

Cromatograma apa ultrapura

Apa MilliQ proaspat
produsa
„filtru final vechi
(> 18 luni)

Filtru nou

System: ACQUITY® UPLC; Column: BEH Shield RP18 (1.7µm, 2.1x50 mm) at 35°C;
Gradient 0% to 100% acetonitrile in 5 min ; Flow rate 0.6 mL/min; Detection at 254 nm

69

69
 Alte surse de contaminare

▪ Alegerea filtrului adecvat pentru preparare faze mobile

– Filtrele pot fi o sursa de contaminare
– Filtrele pot elibera sulfati, clor, calciu, potasiu, sodiu

Proba filtrate prin

(A) Membrana din nylon (B) Polytetrafluoroethylene (PTFE)

70 Katarzyna Mgłosiek
O gama completa de servicii pentru produsele oferite

Validare Instalare

Verificare si
Garantie
calibrare

Planuri de Reparatii si
service
piese de
schimb

71
Apa in laborator nu este “doar apa”- este un reactiv, iar prima conditie pentru un reactiv
premium este sa avem un sistem care produce o apa de calitate constanta si dovedita, in
concordanta cu tehnicile de analiza intrumentala, si servicii prin care acesta sa fie intretinut
corespunzator.

Multumesc pentru atentie!

72