REZUMAT

TITLUL LUCRĂRII

INVESTIGAREA MECANISMELOR DE ACȚIUNE ALE OUABAINEI ASUPRA

TUMORILOR SOLIDE

TÎRZIU, ALEXANDRU, grupa 52, seria F, licență

COORDONATOR ȘTIINȚIFIC

CONF. UNIV. DR. BOJIN MARIA-FLORINA

 REZUMATUL LUCRĂRII

SCOPUL LUCRĂRII: Prezenta lucrare își propune investigarea efectelor ouabainei asupra dezvoltării
și invaziei celulelor tumorale în vederea utilizării acesteia ca nouă terapie anti-tumorală.
MATERIALE ȘI METODE: Celule din linia SK-BR3 au fost cultivate în mediul McCoy, îmbogățit
cu FCS, 10% și Pen/Strep, 1%. Proliferarea și confluență celulară a fost evaluată în dinamică folosind
microscopul CytoSmart. Celulele au fost expuse la concentrații diferite de ouabaină (10-9 M, 10-8 M,
10-6 M, 10-5 M) timp de 24 h, apoi a fost investigată viabilitatea celulară folosind testul cu Annexin
V/ PI și testul cu MTT. Expresia genică de VEGF, c-myc și a subunităților de pompă Na+/K+ a fost
determinată prin RT-PCR. Expresia VEGF, vimentină, PanCK și Ki67 a fost documentată prin
imunofluorescență și imunocitochimie. Modificările expresiei de EGFR, integrina-β1 și VCAM-1 au
fost investigate în flux-citometrie. Adeziunea celulară a fost investigată cu o cameră de flux cu
pompă peristaltică. Studiul pilot in vivo a folosit șoareci CD1 Nu/Nu cărora li s-au implantat tumori
SK-BR3 înglobate în MatriGel. Cele 3 loturi de șoareci (control, celule tumorale pre-tratate cu
ouabaină și șoareci tratați cu ouabaină post-implantațional) au fost observate 4 săptămâni, apoi
tumorile au fost excizate, secționate și analizate histopatologic, folosind HE.
REZULTATE: Indicele Ki-67 a scăzut comparativ cu controlul (61,68% vs. 19,31%, p<0,05) și
expresia Her2 a scăzut. În imunofluorescență, a fost decelată scăderea expresiei de vimentină, PanCK
și VEGF. Testul Annexin V/ PI arată o creștere a numărului de celule apoptotice (75,67%)
comparativ cu controlul (6,15%). Citometria de flux identifică creșterea numărului de celule pre-
apoptotice post-expunere și o scădere a expresiei de EGFR, integrină beta-1 și VCAM-1, cele din
urmă corelându-se cu scăderea adeziunii celulare în camera de flux. Examinarea HE relevă numeroase
celule cu aspect apoptotic și capacitate infiltrativă redusă.
CONCLUZII: Ouabaina exercită efecte pro-apoptotice și influențează semnificativ celulele tumorale
atât structural, cât și funcțional, oferind o alternativă terapeutică anti-tumorală.