Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
2023
SIBIU
1
CONTROLUL MICROBILOGIC AL LAPTELUI ȘI A PRODUSELOR LACTATE ACIDE.
SCURT ISTORIC.
Hippocrate folosea atât laptele de iapă și capră, leac împortiva tuberculozei, iar cel de
vacă îl folosea împortiva anemiei și a podagrei (). Hippocrate deseori recomanda paciențiilor să
bea lapte de măgăriță. Avicenna credea că laptele de capră și cel de măgăriță este cel mai sănătos,
el afirmând că atât laptele cât și produsele lactate sunt de folos copiilor și bătrânilor, iar
recomandat ar fii ca laptele să fie băut cu miere si sare. Dar în Evul Mediu, au fost uitate
propietățiile curative ale laptelui și revenind în secolul al XVI-lea. A jucat un rol important
medicul medicul Raymond Restaurand, având la bază lucrarile lui Hippocrate, el cercetând
indicațiile și containdicațiile tratamentului cu lapte. (1)
Fig. 1 - lapte
S. Botkin zicea despre lapte că jocă un rol important contra pentru rinichi și împotriva
bolilor de inimă. Studiilor arhicunoscute ale lui I. Pavlov și a studenților, au avut o bază stiințifică
foarte bine argumentată ceea ce a confirmat rolul unic al laptelui dar și al produselor din lapte în
alimentația omului și a animalelor. (1)
- Proteine
- Glucide,
- Grăsimi,
- Vitamine
- Substanțe biologice active și substanțe minerale. (2)
Compoziția chimică a laptelui nu este constantă, și poate varia în funcție de vârstă, rasă,
perioada de lactație, anotimp,variațiile de temperatură, de condițiile climatice și de condițiile de
întreținere a animalului. (2)
În laptele matern sunt mai puține fracțuni ale cazeinei, corelația de cazeine la suma
albuminelor și a globulinelor în lapte de vacă fiind de 7:1 și în laptele matern de 1:1 (2)
Proteinele sunt niște substanțe complexe azotoase ce au o masa moleculară mare, iar sub
influiența acizilor, a bazelor, enzimelor pot forma polipeptide și aminoacizi. (2)
Proteinele din lapte sunt compleții din cauză că acestea au în compoziția lor toată gama
aminoacizilor esențiali (triptifan, leucina, izoleucina fenilalanina, lizina, valina, metionina,
treonina, gistidina), fără de care organismal copilului nu se poate dezvolta normal. Cele mai
bogate în aminoacizi sunt albumina și globulina iar valoarea nutritivă este superioară celei de
cazeină. (2)
3
Cazeina este o protein de bază a laptelui de vază care aparține grupului de fosfoproteide și în
lapte se află în calitate de complex special denumit de cazeinatcalciufosfat, fiind cunoscute trei
forme de cazeină: alfa - α, beta - β și gama - ɣ.(2)
Proteinele din lapte se caracterizează prin starea lor coloidală care este dizolvată în lapte și
sunt ușor atacați de enzime în tractul gastro-intestinal fiind ușor asimilate de către organismal
copilului. O influiență asupra asimilabilității proteinelor, o au microelementele, macroelementele
și vitaminele ce sunt în legătură strânsă cu proteina și joacă un rol catalitic. Gradul de asimilare a
proteinelor din lapte poate ajunge până la 90% dar în unele cazuri poate ajunge chiar până la 96-
98%. (2)
Compoziția laptelui.
4
Un component destul de important este grăsimea (lipidele), ce sunt prezentate în lapte ca
grăsimea din lapte, posedând o parte majoră din masa totală fiind de 80%, ce reprezintă un eter
complet al alcoolului de glicerină și a acizilor grași, iar cantitatea este destul de mare (60%). (2)
Laptele este un produs intergral care este rezultatul în urma mulsului care este obținut de la
animalele sănătoase și întreținute corespunzător, fără să prezinte urme de colostrum. Din punct de
5
vedere chimic laptele este un lichid ce are culoarea alb-opacă și având un gust dulceag, cu un pH
aproape neutru și are o compoziție chimică complexă. (4)
Densitatea normală pentru laptele crud de vacă este între 1,028 - 1,034 aciditatea titrabilă
în grade Soxhelt Henkel ( OSH), 6,8 – 7,8 și aciditatea titrabilă în grade Dornic (°D) este de 16 –
18, iar temperatura de congelare fiind de -0,55 si pH-ul fiind cuprins între 6,5 – 6,7.(4)
Caracteristicile microbiologice.
Din punct de vedere microbiologic, laptele este un ecosistem complex, fiind constituit
din specii de microorganism comensale și saprofite, ce se găsesc de obicei pe pielea animalelor.
(4)
Surse de contaminare a laptelui crud sunt animalele, omul, mediul înconjurător și
artopdele, deoarece pe epitrlicul cutanat și pe mucos al animalului, pot fi prezenți agenți
condiționați-patogeni de bacterii din genurile Staphylococcus, Micrococcus, Streptococcus.
Majoritatea germenilor patogeni ce se găsesc în laptele crud provin de obicei din tubul digestiv al
animalelor, care se elimină odată cu materialele fecale contaminându-se ugerul animalului si
așternutul.(5)
6
Pentru fiecare tipologie în parte, se identifică următorii indicatori.
a) Indicatorii de specificitate sau indicatorii prothnologici, (4)
b) Indicatorii de calitate, (4)
c) Indicatorii de salubritate. (4)
Bacteriile lactice sau GRAS sunt organisme de origine alimentară, care recunoscute să
sigure pentru sănătatea omului, utilizate în mod curent în produse alimentare precum carnea,
laptele şi unele produse vegetale. Bacteriile lactice sunt microorganisme ce au o largă răspândire
în natură, iar unele specii constituindu-se parte integrantă din microflora tubului digestiv, iar la
majoritatea speciilor de animale, inclusiv la om. În prezent s-au identificat specii de bacterii
GRAS în următoarele genuri: Lactobacillus Tetragenococcus, Enterococcus, Aerococcus,
Pediococcus Streptococcus, Leuconostoc, Oenococcus, Vagococcus, Carnobacterium şi
Weisella. (4)
Bolile ce se transmit de la animal la om prin intermediul laptelui. (4)
- Boli virale, infectii cu adevnovirus, hepatita virală, infecția rickettsiene, boli bacteriene,
febra Q, botulism, tuberculoză, febră aftoasă, salmonella, colibacilare, stafilococice. (4)
- Boli parazitare: giardia oxiuroză, teniază, toxoplasmoză, (4)
- Micotoxicoze aflatoxicoze etc. (4)
7
METODE ȘI TEHNICI AVANSATE DE APRECIERE A CALITATII
LAPTELUI ŞI PRODUSELOR LACTATE.
Principiul metodei.
Tehnica de lucru.
9
Fig. A 2 Fig. B 3
Fig. C 4
În figurile de mai sus sunt reprezentate părțiile
componente ale unui analizator automat Birochrom 30.
(4)
Acest aparat utilizează o coloană de schimb ionic
care este format din litiu iar cealaltă este de sodiu la
45°C. Acest aparat are variant și de o precoloană ce
reține NH3 soluție. Probele sunt răcite la 8°C, fiind
absorbite din eprubete de pe tamburul aparatului cu ajutorul unei seringi si sunt spălate cu alcool
izoamilic.(4)
În urma extracției, cu
hidroliză aminoacizii solubilizați în soluție tampon pH=2.2, este introdus în coloană. Coloană
10
cromatografică a fost eliberată cu aceiași soluție tampon, si toți aminoacizii au un pH sub
punctul lor isoelectric, adică sunt încărcații pozitiv si aminoacizii sunt legati de rășină. (4)
Fig. 7 Cromatograma aminoacizilor liberi din proba de lapte (cu negru rezoluţia picurilor; cu
albastru rezoluţia picurilor aminoacizilor)
11
Acestă metodă microbiologică se realizează cu aparatul Bactoscan(4)
Principiul metodei.
Bacteriile și ciupercile sunt separate de matricea de bază și colorate, iar numerotarea
imaginilor se face utilizând analizatorul de
citometrie în flux. (4)
Mod de utilizare:
Se încălzește laptele la 40°C
Fig. 8 Aparat Bactoscan
- Tratarea laptelui se face cu soluție
enzimatică,
- Colorarea bacteriilor
- Iluminarea cu lampa xenon si studierea se face la microscop pentru a se determina
bacterille, acestea având culoarea roșie. Capacitatea aparatului este de a efectua 100-150
de probe pe oră. (5)
Toate soluțiile au fost cu preparate folosind apă deionizată și substanțe chimice de calitate
analitică. Etanol anhidru (Merck, Darmstadt, Germania), albastru de bromotimol (Sigma,
Steinheim, Germania) și roșu fenol (Synth, Diadema, SP, Brazilia) fiind utilizați ca reactivi. În
total, au fost analizate 95 de probe de lapte, 80 probe lapte crud, analizate anterior de NIR, și 15
probe compuse din lapte integral, semi-degresat și degresat, procesate sub ultra -temperatura
ridicata (UHT) si achizitionat pe piata locala. Probele de lapte crud au avut conținut de proteine
variind de la 2,71% - 3,84% m/v și un conținut de grăsime de la 2,42% - 4,29% m/v cu pH de la
6,68 - 6,73. (6)
O soluţie de roşu fenol 0,1% a fost preparată prin dizolvarea a 100 mg de indicator acid-
bazic în 50 ml etanol anhidru iar ridicarea volumului la 100 ml cu apă. O soluție de albastru de
bromotimol 0,1% m/v a fost preparată în mod similar. (6)
12
APARAT
Suportul pentru telefoane mobile a fost fixat în fața cutiei pentru a menține camera smartphone-
ului la 10,5 cm de centrul tubului. Luminozitatea dispozitivului a fost ajustată la val. max (+ 3,0)
așa cum este recomandat. (6)
Proceduri propuse
După omogenizarea probei, 500 µL de lapte au fost transferați în tuburi de polipropilenă incoloră
de 2 mL, împreună cu 70 µL de soluție de roșu fenol 0,1 % m/v, iar tuburile au fost agitate
manual timp de 30s. Culoarea indicatorului acido-bazic a fost monitorizată din intensitatea
radiației reflectate măsurată în condiții controlate. Imaginile au fost convertite în valori RGB și
combinația de canale G și B a fost folosită ca semnal analitic (S), după corectarea cu valorile de
referință (G0 și B0) măsurate cu ajutorul tuburilor umplute cu apă. Toate testele au fost efectuate
în trei exemplare la temperatura camerei (25 ± 1 °C). (1) S = | G1 − B1 | (6)
In care:G1 = semnal rezultat măsurat în canalul G (G1=G0 − G).B1 = semnal rezultat măsurat în
canalul B (B1=B0 − B). (6)
Referințe de procedură
Când s-a adăugat albastru de bromotimol la probele de lapte cu valori ale pH-ului
cuprinse între 5,0 și 7,0, variațiile semnalelor analitice nu au fost semnificative, din cauza
adsorbției scăzute a colorantului la suspensiile coloidale la pH < 7,0. Adsorbția albastrului de
bromotimol la proteine este împiedicată într-un mediu etanolic. Cu toate acestea, roșul fenolului a
produs vizual modificări de culoare în intervalul obișnuit de pH pentru lapte și efectul adsorbției
asupra proteinelor a fost evidențiat prin compararea intensităților de culoare cu și fără lapte.
Aciditatea medie modulează interacțiunile proteină-proteină și apă-proteină. În intervalul de pH
așteptat pentru lapte (adică 6,6 ≤ pH ≤ 6,8), interacțiunile proteină-apă sunt favorizate și câteva
fracții proteice hidrofobe pot fi legate de roșu fenol. Concentrațiile mai mari de acid favorizează
interacțiunile proteină-proteină, care provoacă precipitarea proteinelor și favorizează adsorbția
14
indicatorului acido-bazic. Cu toate acestea, într-un mediu alcalin, structura micelară a proteinelor
din lapte este alterată, ceea ce duce la noi posibilități de legături proteină-roșu fenol. Strategia
propusă ia în considerare efectele acestor procese asupra culorii indicatorului. (6)
BIBLOGRAFIE.
https://lactalis-alba.md/beneficiile-produselor-lactate/lapte-un-pic-de-istorie/ (1)
https://lacta.md/ro/blog/19-compozitia-chimica-a-laptelui (2)
15
https://romanian.cri.cn/home/health/3403/20220418/749853.html (3)
https://www.researchgate.net/publication/
278022528_TEHNICI_AVANSATE_DE_APRECIERE_A_CALITATII_LAPTELUI_SI
_PRODUSELOR_LACTATE(4)
https://ro.scribd.com/document/339802896/Propriet%C4%83%C5%A3i-Organoleptice-
Ale-Laptelui-de-Consum (5)
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0889157522003337 (6)
16