“ASFAR”viridae African Swine Fever And Related viruses
Program strategic: Ro – supraveghere porcii domestici si mistreti pentru mentinerea
statutului de tara oficial libera de PPA Toate probele provenite de la cazurile suspecte de pestă porcină clasică, cu rezultat negativ pentru această boală, sunt testate obligatoriu şi pentru pesta porcină africană. Diateza hemoragica Diateza hemoragica Diateza hemoragica Diateza hemoragica Diateza hemoragica Diateza hemoragica si splenomegalie ! Edem gelatinos al peretelui vezicii biliare “manşon perivezicular” Supraveghere stare de sanatate suine Cazurile suspecte (din import sau comert intracomunitar) se investigheaza imediat, cu recoltare de probe de organe care se timit pentru diagnostic la LNR-IDSA Pentru mistreti gasiti morti - toate judetele de granita cu Republica Moldova si Ucraina În cazul în care România se va afla în situatia unui risc epidemiologic în relatie cu tari sau zone vecine (Ucraina, Bulgaria): a. Supravegherea serologica pe probe de ser sau lichid toracoabdominal prelevate de la mistreti concomitent cu probele prelevate pentru PPC. b. Supravegherea virusologica prin PCR pe probe de organe, prelevate de la mistreti gasiti morti care la testele virusologice pentru PPC au prezentat rezultat negativ. Conform Programului strategic 2014, diagnosticul de laborator se confirma astfel: a. Confirmarea unui focar primar de PPA prin teste virusologice se face când se obtin 2 teste virusologice pozitive (PCR+IFD). b. Confirmarea unui focar secundar de PPA prin teste virusologice se face când se obine 1 test virusologic pozitiv. c. Confirmarea unui focar de PPA prin teste serologice se face când se obtin 2 teste serologice pozitive (ELISA+Testul de imunoperoxidaza, ELISA + Imunobloting) corelate cu datele epidemiologice si clinice. Notificarea bolii se face în conformitate cu prevederile Ordinului presedintelui ANSVSA nr. 79/2008 Se interzice cresterea libera a porcinelor domestice în vecinatatea fondurilor de vânatoare, precum si pe suprafata gropilor de gunoi si în raza acestora, în scopul evitarii contactul cu popultia de mistreti. Se interzice accesul porcilor domestici din exploatatiile nonprofesionale în suprafata efectiva a fondurilor de vânatoare TESTUL HEMADSORBTIEI (HAD) Principiu: cultivarea virusului PPA pe leucocite de porc (sau pe celule de măduvă osoasă) determină adsorbţia globulelor roşii pe aceste celule, cu formarea unor rozete caracteristice cu aspect muriform si aparitia unor incluzii şi inducerea efectului citopatic. Până în prezent hemadsorbţia nu s-a constatat la nici un alt virus patogen pentru porc, ceea ce permite utilizarea acesteia în diagnosticul bolii. În plus, hemadsorbţia se pare că are şi o specificitate de tip, caracter folosit în stabilirea unor diferenţe antigenice între diverse tulpini izolate. HAD este un test specific, cu o sensibilitate satisfăcătoare şi apare cu frecvenţa cea mai mare în primele 4 zile de la inocularea culturilor. INHIBAREA HEMADSORBTIEI (IHAD) Inhibarea hemadsorbţiei de către anticorpii specifici din serul antipestos, este utilizată pentru verificarea specificităţii unor imagini de hemadsorbţie insuficient de caracteristice, şi pentru depistarea anticorpilor în serul unui animal suspect sau pentru titrarea anticorpilor din serul animalelor hiperimunizate, situaţie în care inocularea culturilor de leucocite se face cu virus cunoscut. IHAD oferă o certitudine de 95 - 98 %. Ţinând cont de pluralitatea antigenică a virusului PPA, este posibil rezultatul negativ la IHAD, dacă virusul şi serul cu care se lucrează nu sunt omologe. Pentru efectuarea IHAD culturile de leucocite care au rozetat sunt supuse unui soc osmotic, aceasta realizandu-se prin tratare cu NaCl 3,5% (eritorcitele sunt distruse aproape instantaneu dar leucocitele isi pastreaza capacitatea de a adsorbi). Se elimina solutia cloruro-sodica si se acopera leucocitele cu un ser specific omolog, mentinandu-se o ora la 37ºC. Ulterior se adauga cateva picaturi de suspensie de hematii, se mentine amestecul 2 ore la termostat si apoi se examineaza la microscop pentru evidentiarea rozetelor cu scopul de a confirma/infirma boala. Daca in materialul de cercetat exista virus PPA in IHAD are loc cuplarea cu anticorpii din ser iar la adaugarea suspensiei de eritrocite nu se mai formeaza rozete.