APLICAȚII PRACTICE ÎN

COMPARTIMENTUL DE
BIOCHIMIE DIN
LABORATOARE MEDICALE
1. Măsurare volume. Sticlările de laborator pt măsurat volume:
cilindru gradat, balon cotat.
2. Pipetare – pipeta de sticlă, pipetă cu volum reglabil
3. Centrifugare
4. Cântărire substanțe - balanță analitică
5. Soluții – concentrația procentuală și molară
6. Diluții – diluție serială (succesivă); diluții (1:50 versus 50x)
7. Diluții din urină: pt creatinină (1:100), acid uric (1:10), calciu,
glucoză, proteine, uree.
8. Diluții din ser / plasmă
9. Calcule analize: VLDL, LDL, Calciu ionic, lipide totale
10. Calcule statistice: media, coeficient de variație, deviația standard
Măsurare volume
Sticlările de laborator: cilindru gradat, balon cotat.
Pipete de sticlă
Pipete cu volum reglabil
 Masurarea volumelor
1. Pahar Berzelius
2. Pahar Erlenmeyer
3. Balon cotat
4. Cilindru gradat
Volumul minim măsurat nu
trebuie să fie mai mic de
20% din capacitatea
maximă a recipientului.
Exemplu: cilindru gradat de
500 ml măsoară corect
volume peste 100 ml. Nu
se măsoară volume sub
100 ml cu acest cilindru.
Pipetare
– pipete graduale, pipete cu volum reglabil

Tehnica de pipetare este diferită la pipetele graduale față de

cele cu volum reglabil.
 Pipete graduale

https://www.youtube.com/watch?v=Jc7DVy3-TFc
Pipete cu volum reglabil
monocanal, multicanal

https://www.youtube.com/watch?v=QGX490kuKjg

Volumul minim care se poate

pipeta este 20% din volumul
maxim al pipetei cu volum
reglabil (stabilit). De ex: cu
pipeta de 1000 microlitri nu se
pipetează volume sub 200
microlitri.

Sub 20% din vol max nu este

recomandabil sa pipetăm
deoarece pot apărea erori.
Cântărire substanțe - balanță analitică
Factori care afectează citirile la
balanța analitică:
Temperatura
Vibrații
Curenți de aer
Reacții chimice
Cântare necalibrate
Magneți
Eroare utilizator
Împământare necorespunzătoare
Manipularea necorespunzătoare a
probei
Centrifugare
Model de centrifugi
Tipuri de rotoare
 Model de centrifugi utilizate în laboratorul de analize medicale

 Centrifugi pentru vacutainere, pentru separare

ser/ plasmă – 5000 rpm
 Centrifugă cu viteză mare – 5 000 -10 000 rpm pt
tuburi Eppendorf (1,5 ml)
 Centrifugă pentru urini – 2 000 rpm
 Tipuri de rotoare

 Rotor unghiular fix - 35°

 Rotor swing-out
 Diferența între cele două rotoare este legată de separarea
particolelor din soluție: straturi orizontale (swing-out) sau
în straturi oblice (cu unghi fix).
Soluții – concentrația procentuală și molară

Soluţiile sunt amestecuri omogene din doua sau mai multe

substanţe care nu interacţionează chimic între ele. Substanţa
prezentă în exces se numeşte dizolvant sau solvent, iar
substanţa prezentă în cantitate mai mică poartă denumirea de
solvat, solut sau substanţă dizolvată.
Concentrația procentuală de masă și de volum
Concentraţia procentuală
de masă C (G/G) se
exprimă în procente (%) şi
reprezintă număr de grame
substanţă dizolvată în 100 g
soluţie.
Exemplu: O soluţie 10%
(G/G) este soluţia care
conţine 10 g substanţă
dizolvată în 100 g soluţie,
adică se obţine prin
dizolvarea a 10 g substanţă
 Concentraţia
procentuală de volum
C (G/V) se exprimă în
procente (%) şi reprezintă
număr de grame de
substanţă dizolvată în 100
ml soluţie.
 Exemplu: 100 ml dintr-o
soluţie 1% glucoză (G/V)
conţine 1 g glucoză
completat cu apă până la
100 ml.
 Concentrația molară
Concentraţia molară sau
molaritatea M se exprimă în
moli/l şi este definită prin
numărul de moli de substanţă
dizolvată într-un litru de soluţie.
 O soluţie molară (1M) este soluţia
care conţine 1 mol substanţă
dizolvată într-un litru de soluţie.
 Molul sau molecula gram
reprezintă cantitatea de substanţă
exprimată în grame, numeric
egală cu masa moleculară, care la
rândul ei este egală cu suma
maselor atomice ale atomilor
componenţi.
 Submultiplii unităţilor de bază se
folosesc din mie în mie, cu
prefixele şi simbolurile următoare:
 1 mM = 10-3 M = 1 mmol/l
 1 mM =10-6 M = 1 mmol/l
 1 nM = 10-9 M = 1 nmol/l
 Exemplu: Pentru prepararea unei
soluţii de NaCl 0,5 M se vor cântări
29 g NaCl, care se vor dizolva
într-un litru soluţie.
 A Na= 23 g
 A Cl= 35 g
 A NaCl= 23+35= 58 g
 0,5M NaCl= 58x0,5= 29 g
Conversia concentrației procentuale în concentrație
molară

 M(mol/l)= C%×10: masa moleculară

 Exemplu: soluție de ser fiziologic (NaCl):

 concentrația procentuală = 0,9%,
 concentrația molară = 0,9x10:58=0,155M
Problema 1. Problema 2.
 Să se exprime, în
Ce cantitate de clorură de
procente, concentraţia sodiu şi apă trebuie luate
soluţiei preparată din pentru a prepara 500 g
280 g apă şi 40 g ser fiziologic.
zahăr.
 (Răspuns: 4,5 g NaCl;
 (Răspuns: 12,5% 495,5 g apă)
zahăr)
 Diluții
-Diluție 1:9 = 1 vol X+ 9 vol Y; diluție de 10 ori
-Diluție 1:4 = 1 vol X + 4 vol Y; diluție de 5 ori

-Diluați de 51 ori sol tampon A: 1 vol A + 50 vol apă

-Problemă: diluați de 100 ori urina pentru determinarea creatininei

urinare. Cum procedați pt obținerea unui mililitru de urină diluată?
-Răspuns: 10 microlitri urina x 100 – 10 microlitri = 990 microlitri

apă distilată, +10 microlitri urină nediluată

 Diluția serială

Exemplu:
Soluție NaOH 40% diluție serială
de 3 ori, 1 ml+1ml:
1. 1/2 , conc = 20%
2. 1/4, conc = 10%
3. 1/8 , conc = 5%
 Calcule utile analize:
VLDL, LDL, Calciu ionic, lipide totale
Calciu ionic seric [mg/dl]:
Ca++ = (6xCa -PT/3):(PT+6)
unde Ca[mg/dl]; PT [g/dl]
Lipide totale [mg/dl]
Lipide totale = 2,25 x Colesterol total + Trigliceride + 90
unde colesterol total [mg/dl], trigliceride [mg/dl]
VLDL [mg/dl] = Trigliceride [mg/dl] : 5
LDL [mg/dl] = Colesterol total – (VLDL+HDL) [mg/dl]
 CALCULE STATISTICE
APLICABILE
DETERMINARILOR CANTITATIVE

MEDIA-INTERVALUL

DEVIAȚIA STANDARD-COEFICIENT DE VARIAȚIE

MEDIA
 MEDIANA

 Mediana unui set de valori măsurate este valoarea care cade în mijloc
când valorile măsurate sunt aranjate în ordinea mărimii.

 Exemplu: în șirul de determinări:

 13, 13, 13, 13, 14, 14, 16, 18, 21 mediana e valoarea din mijlocul

șirului scris în ordine crescătoare = 14

 INTERVALUL

 Reprezintă domeniul de valori cuprins

între valoarea maximă și minimă dintr-
un șir de valori.
 În mod corect, Valorile normale se
numesc Interval Biologic de
Referință
 Exemple:
 în șirul de valori: 13, 13, 13, 13, 14,

14, 16, 18, 21 intervalul este cuprins

între valoarea maxima (21) și
minimă (13) = 8.
 În grafic (ex. nr frunzelor pe o

plantă) intervalul e cuprins între 3 și

8.
 Exercițiu

 Găsiți media, valoarea modală (modul), mediana și intervalul pentru

următoarea listă de valori:
 1, 2, 4, 7
 Media: (1 + 2 + 4 + 7) ÷ 4 = 14 ÷ 4 = 3,5
 Mediana: numerele sunt scrise deja în ordine crescătoare, nu trebuie rescrisă
lista. Se constată un număr par de valori. În acest caz mediana este media între
valorile din mijloc, respectiv 2 și 4. (2 + 4) ÷ 2 = 6 ÷ 2 = 3
 Modul este numărul care se repetă cel mai des. În această listă fiecare număr
apare doar o singură dată, deci nu avem nici o clasă modală (mod).
 Intervalul este cuprins între 1 și 7, diferența dintre extreme fiind 6.
 Rezultate:
 media: 3.5; mediana: 3; modul: nu este; interval: 6
MEDIA-MEDIANA-MODUL-INTERVALUL
Distribuția normală: mediana = media = modul
DEVIATIA (ABATEREA) STANDARD
CALCULUL DEVIAȚIEI STANDARD (SD, DS)
 Exemplu de calcul al deviației standard (s, SD)

 Șirul de valori:
 4, 2, 5, 8, 6.

 1. Calculează media:

 Media = 25/ 5 = 5.
 2. Calculeză pentru fiecare valoare în parte

 x1 = 4
 x2 = 2
 x3 = 5
 x4 = 8
 x5 = 6
 3. Calculează:
 4. Calculeză deviația standard (s, SD):
 Coeficientul de variatie (CV%)

De obicei CV% crește odată cu creșterea concentrației analitului.

CV% este util:
1. când se compară PRECIZIA unei metode de determinare: de ex.
determinarea glucozei prin metoda cu gluckinază sau hexokinază.
2. Evaluarea PRECIZIEI unui aparat folosind aparate diferite dar
aceiași reactivi (același lot reactiv și același lot de control pe aparate
diferite)