BIOFIZICA RECEPIEI AUDITIVE

1. Introducere 2. Sistemul auditiv periferic, aspecte biofizice Urechea extern, funcii Urechea medie i amplificarea semnalului acustic Urechea intern, generaliti 3. Analiza semnalului n urechea intern. Mecanica cohlear 4. Traducerea semnalului acustic, mecanisme biofizice 5. Aspecte bioelectrice ale excitaiei auditive

Introducere Vibraiile mecanice ale mediului nconjurtor care au frecvenele cuprinse ntre 16 - 20.000 Hz produc n analizorul auditiv uman senzaia de sunet. Sunetele reprezint mrimi subiective care stau la baza percepiei auditive. Prin intermediul sistemului auditiv, n particular, i al celorlalte organe de sim, n general, omul stabilete o comunicare cu mediul exterior. De aceea, undele acustice din domeniul de frecven specificat anterior constituie pentru analizorul auditiv semnale acustice. Ele vor fi supuse unui ir de prelucrri informaionale, n urma cruia vor rezulta senzaiile auditive de zgomot, muzic sau vorbire articulat. n acest fel, comunicarea pe care omul o stabilete cu mediul nconjurtor cu ajutorul sistemului auditiv poate fi caracterizat drept o comunicare audio-verbal. n cadrul acestei comunicri elementul obiectiv este reprezentat de fenomenul fizic, respectiv unda acustic, iar elementul subiectiv de ctre senzaia de sunet. Mrimile fizice, obiective, sunt denumite mrimi acustice, iar cele subiective, legate de percepia auditiv, sunt denumite mrimi sonore. Generarea senzaiei auditive reprezint etapa final a lanului complex de prelucrri i transformri ale semnalului acustic de la intrarea acestuia n analizorul auditiv i pn la nivelul cortexului, unde ajung impulsurile nervoase rezultate n procesul de traducere a vibraiilor mecanice n influx nervos. Conform unei mpriri clasice, analizorul auditiv const din dou sisteme principale: 1) sistemul auditiv periferic 2) sistemul auditiv central Sistemul auditiv periferic (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ) conine urechea extern i urechea medie, care sunt adaptate funciei de transmitere a semnalului acustic i urechea intern, care asigur analiza vibraiilor acustice i traducerea semnalului acustic n influx nervos. Sistemul auditiv central conine cile nervoase, care asigur transmiterea influxului nervos, i ariile auditive, la nivelul crora este analizat informaia i generat senzaia auditiv. n cele ce urmeaz se vor discuta numai aspectele biofizice ale funcionrii sistemului auditiv periferic

Sistemul auditiv periferic, aspecte biofizice

Dup cum s-a menionat anterior, sistemul auditiv periferic asigur trei funcii principale: 1) transmiterea vibraiei acustice 2) analiza semnalului acustic 3) traducerea semnalului acustic n influx nervos.

1) Funcia de transmitere a semnalului acustic se realizeaz n sistemul auditiv periferic pe dou ci: calea aerian, n care intervin urechea extern i urechea medie, i calea osoas, care are un rol secundar n audiia natural, dar care prezint un mare interes n practica clinic i audiologic. 2) Funcia de analiz a semnalului acustic este asigurat de ctre diferitele compartimente ale urechii interne i implic mecanisme complexe de tip pasiv i activ, ncepnd cu o analiz Fourier la nivelul membranei bazilare i terminnd cu amplificarea activ a semnalului la nivelul celulelor ciliate externe ale organului lui Corti. 3) Funcia de traducere, realizat la nivelul urechii interne de ctre celulele ciliate din organul lui Corti se refer la transformarea energiei mecanice de vibraie n energia bioelectric prin intermediul unor procese electrochimice complexe, iar transmiterea informaiei auditive la nivelul cortexului prin influx nervos este asigurat de celulele ciliate interne.

Urechea extern i funciile acesteia Urechea extern este alctuit din pavilion i conductul (meatul) auditiv extern. La captul intern al conductului auditiv extern se afl timpanul care separ urechea extern de urechea medie.

Pavilionul particip la trei funcii: 1) protecia urechii; 2) localizarea surselor sonore; 3) amplificarea semnalului sonor. 1) Pavilionul asigur protecia mecanic a conductului auditiv extern fa de diferitele agresiuni: ocuri, cureni de aer, ptrunderea unor corpi strini etc. 2) Funcia de localizare a surselor sonore se bazeaz pe diferenele care exist ntre cmpurile acustice la intrarea n conducturile auditive ale celor dou urechi. 3) Funcia de amplificare i are originea n special n efectele de focalizare i rezonan datorate reliefului pavilionului. Conca, n special, are (prin concavitatea sa accentuat) un efect de focalizare a razelor sonore, care duce la o cretere a nivelului sonor cu civa decibeli. Aceast cretere este funcie de frecvena i incidena undelor acustice. Amplificarea prin rezonan este de fapt rezultatul aciunii ansamblului pavilion-conduct auditiv extern.

Conductul auditiv extern (CAE) Conductul auditiv extern este un canal de form aproximativ cilindric, sinuos, cu o lungime medie de 25 mm i avnd un diametru cuprins ntre 5 i 10 mm. mpreun cu conca, CAE reprezint (din punct de vedere acustic) un tub umplut cu aer, care are o extremitate deschis i cealalt nchis prin membrana timpanic (tub nchis). El acioneaz ca un rezonator Helmholtz amortizat, care ndeplinete urmtoarele funcii: transform undele acustice sferice n unde plane, constituie sediul unor unde staionare i prezint o rezonan specific. Att msurtorile experimentale, ct i calculul teoretic, au artat c frecvenele de rezonan ale ansamblului conc CAE i ale CAE singur sunt de aproximativ 2.500 Hz, respectiv 3.400 Hz (figura).

Urechea medie i amplificarea semnalului acustic Urechea medie este o cavitate de mici dimensiuni - cca. (1552 )mm3 - n care se gsete aer i care poate comunica cu faringele prin intermediul trompei lui Eustache. Urechea medie este n contact cu urechea extern i cu urechea intern, fiind separat de prima prin membrana timpanic, iar de cea de-a doua prin intermediul ferestrelor oval i rotund.

Transmiterea semnalului acustic n urechea medie este realizat cu ajutorul unui lan de oscioare: ciocanul, nicovala i scria, care acioneaz ca un sistem de prghii prin care micrile timpanului sunt transmise ferestrei ovale. Timpanul este o membran elastic circular, avnd un diametru de aproximativ 1 cm, situat la captul intern al conductului auditiv extern i dispus oblic n raport cu direcia general a acestuia. Membrana timpanic, care acioneaz ca un receptor de presiune, este insensibil la variaiile de vitez, dar este foarte sensibil la variaiile de presiune. Ea intr n vibraie datorit undelor staionare care se formeaz n conductul auditiv extern. Msurarea deplasrii maxime a membranei timpanice arat c la pragul de audibilitate ea variaz ntre ~10-7 m pentru frecvenele joase i ~ 10-11 m (0,1 ) la frecvena de 3.000 Hz. Deci, pentru frecvenele nalte ea este de ordinul de mrime al dimensiunilor atomului de hidrogen. Cu alte cuvinte, n apropierea pragului de audibilitate, amplitudinea medie a micrilor timpanului este de ordinul nanometrilor. Variaiile de presiune acustic, care se situeaz ntr-un domeniu caracterizat de o valoare inferioar de 20 mPa (la pragul de audibilitate) i de valori superioare n jurul a 20 Pa (pragul dureros), sunt mult mai mici dect valoarea presiunii atmosferice (~ 105 Pa)(figura). De aceea, este foarte important ca presiunile aerului de-o parte i de alta a membranei timpanice s fie egale, pentru a permite ca micrile timpanului s se efectueze doar sub influena presiunii acustice. Egalizarea presiunilor se face n mod reflex n cursul deglutiiei, cscatului sau strnutului prin deschiderea orificiului faringian al trompei lui Eustache, orificiu care n mod normal este nchis. Lanul de oscioare i adaptarea de impedan Cele trei oscioare, ciocanul, nicovala i scria, asigur transmiterea vibraiei sonore de la timpan la fereastra oval. Funcia lanului timpano-osicular este aceea de a adapta impedana joas a mediului aerian la impedana nalt a mediului lichid al urechii interne. Ciocanul, care este cel mai lung dintre oscioare, are capul ncastrat n membrana timpanic, astfel nct micrile timpanului vor fi preluate i transmise nicovalei i scriei. Talpa scriei ptrunde n fereastra oval, pe care o etaneizeaz cu ajutorul unui inel de fibre elastice (ligamentul inelar). Cele trei oscioare se comport ca un sistem de prghii prin a crui aciune scade amplitudinea vibraiilor, dar se realizeaz o mrire a forei la nivelul ferestrei ovale (figura). Ciocanul i nicovala se rotesc ca un tot unitar n jurul unei axe care trece prin apofiza scurt a nicovalei i de-a lungul prii timpanice a ciocanului. Deoarece, atunci cnd sunt msurate n raport cu aceast ax, mnerul ciocanului este o prghie mai lung dect apofiza lung a nicovalei, la nivelul scriei fora se mrete de cca. 1,3 ori. Dar aciunea cea mai important a sistemului timpano-osicular const n amplificarea presiunii acustice datorit raportului mare dintre aria timpanului i cea a ferestrei ovale. Se poate arta cn absena sistemului de adaptare a impedanelor, numai o miime din energia undelor acustice ar fi transferat urechii interne, restul fiind reflectat. Prin creterea presiunii la nivelul ferestrei ovale se maximizeaz transferul de putere din exterior spre interior. Dac se neglijeaz pierderile de putere prin frecare se poate calcula un raport teoretic al presiunilor acustice la nivelul ferestrei ovale i timpanului, raport care reprezint funcia de transfer H a urechii medii: unde pe , Fe , Se reprezint, respectiv, presiunea la nivelul timpanului, fora exercitat de apsarea pe membrana timpanic i suprafaa timpanului, iar pi, Fi, Si - presiunea, fora de apsare i suprafaa n cazul ferestrei ovale. Aria membranei timpanice este n jurul valorii de 64 mm2, iar talpa scriei are aproximativ 3,2 mm2. Deoarece nu ntreaga arie a timpanului contribuie la transmiterea vibraiei acustice datorit variaiei cu frecvena a micrilor diferitelor poriuni ale acesteia, se estimeaz aria eficace la 60-70% din aria total. De aceea, raportul ariilor Se/Si poate avea valori ntre 13 i 16. n acest caz funcia de transfer are valori ntre: 131,3 = 17 i 161,3 = 21. Conform datelor experimentale, funcia de transfer a urechii medii are o mrime aproape constant n domeniul de frecvene important pentru auz (16 9000 Hz). Prin intervenia lanului timpano-osicular este evitat interfaa aer-lichid, interfa care prezint un factor de transmisie foarte sczut. Dar, dei acest sistem duce la o amplificare de presiune, acionnd ca o pres hidraulic, i la o cretere a forei, datorit efectului de prghie, nu se produce i o amplificare a energiei. Din contra, punerea n micare a sistemului de oscioare absoarbe 40%

din energia incident, ceea ce corespunde unei atenuri de cca. 3 dB. Disfunciile lanului timpano-osicular au ca rezultat producerea unor surditi de transmisie i pot fi puse n eviden cu ajutorulaudiogramelor n conducere aerian. Urechea medie nu are un rol de transmisie pur pasiv. Att muchiul ciocanului, ct i muchiul scriei - stapedius - se pot contracta, limitnd amplitudinea de deplasare a oscioarelor i diminund nivelul de amplificare, deci transmiterea de energie urechii interne. n acest fel, prin reflexul stapedian se realizeaz protecia urechii interne. Fereastra oval transmite lichidelor urechii interne micrile lanului timpano-osicular. Semnalul acustic se propag prin canalul vestibular (rampa vestibular), trece prin helicotrem i se ntoarce spre urechea medie prin rampa timpanic la al crei capt se aflfereastra rotund. Fereastra rotund are un rol de membran de expansiune pentru lichidele incompresibile ale urechii interne. Micrile platinei scriei nu s-ar putea efectua liber dac rampa vestibular ar fi un spaiu coninnd lichid, nchis printr-un capt rigid. Elasticitatea ferestrei rotunde d posibilitatea realizrii deplasrilor coloanei de lichid, induse de micrile scriei. Conducerea osoas reprezint un proces de transmitere a undelor acustice spre urechea intern prin intermediul esutului osos. n audiia natural a sunetelor care provin din mediul nconjurtor, conducia sunetului pe cale osoas nu are o importan practic deoarece cantitatea de energie care ajunge la urechea intern n acest mod are un nivel n medie cu 60 dB mai sczut dect n cazul celei transmise prin lanul timpano-osicular. Urechea intern, generaliti Urechea intern este plasat ntr-un sistem complex de caviti i canale, numit labirintul osos. La rndul su, labirintul osos este divizat n dou pri: labirintul posterior, n care se afl organele echilibrului (vestibulul i canalele semicirculare) i labirintul anterior, care formeaz cohleea sau melcul, n care se gsesc organele auzului. Cohleea este un tub osos care are o lungime de aproximativ 3 cm, nfurat n helix (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ) spiral (elice spiral), efectund dou ture i jumtate n jurul unei coloane centrale osoase numit columel. Tubul este crestat pe toat lungimea sa de ctre o lam osoas plan, numit lama spiral, care pornete din columel. n interiorul columelei se afl fibrele nervului cohlear, care provin din ganglionul spiral al lui Corti, aflat ntrun canal din lama spiral (figura). Lama spiral se continu cu o poriune membranoas, numit membrana bazilar, care este ntins ntre lama spiral i ligamentul spiral extern. La baza tubului, lama spiral are o lime mai mare iar membrana bazilar este mai ngust, n timp ce, n partea superioar, lama spiral devine din ce n ce mai ngust iar membrana bazilar se extinde. La extremitatea apical se afl o deschiztur, numit helicotrem, care permite comunicarea ntre cele dou compartimente. Compartimentul aflat sub lama spiral este numit rampa timpanic (canalul timpanic) i conine un lichid numit perilimf. La captul dinspre casa timpanului se gsete fereastra rotund. Compartimentul de deasupra lamei spirale este, la rndul su, separat n alte dou compartimente, prin membrana lui Reissner. Partea sa superioar, coninnd de asemenea perilimf, se numete rampa vestibular (canalul vestibular) i la captul ei dinspre casa timpanului se gsete fereastra oval. ntre rampa timpanic i rampa vestibular se afl cel de-al treilea compartiment, canalul cohlear sau labirintul membranos. Canalul cohlear este mrginit n partea superioar de membrana lui Reissner, iar n partea inferioar de membrana bazilar, aflat n prelungirea lamei spirale. n interiorul canalului cohlear se afl endolimfa. Membrana bazilar are o form trapezoidal (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ), cu o lime de aproximativ 0,15 mm la baz i de aproximativ 0,45 mm la apex i este alctuit din cca. 42.000 de fibre transversale aflate ntr-o substan fundamental omogen. Membrana bazilar variaz continuu n dimensiuni, de la baz, unde este groas i ngust, spre apex, unde este larg i subire. Deoarece grosimea ei nu este constant ci diminueaz spre apex, apare un gradient de rigiditate care-i confer proprieti mecanice speciale. Organul lui Corti. Pe membrana bazilar se afl situat organul lui Corti (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ), alctuit dintr-un ansamblu de celule ciliate i de celule de susinere, crora li se adaug nite celule de tip special numite pilierii lui Corti. Acestea din urm alctuiesc o formaiune special numit tunelul lui Corti, umplut cu un lichid nrudit cu perilimfa, numit cortilimf (exist totui unele controverse privind compoziia ionic a cortilimfei). Celulele ciliate, n numr de cca. 19.000 n cohleea uman, reprezint receptorul neurosenzorial al sistemului auditiv. Celulele ciliate, care sunt de dou tipuri, celule ciliate externe i celule ciliate interne, sunt flancate de celule de susinere interne i externe, de celule Deiters, celule Claudius i celule Hensen. Celulele ciliate, inervate de fibre nervoase aferente i eferente, sunt

aranjate de-a lungul membranei bazilare n patru coloane lungi: o coloan de celule ciliate interne, n numr de cca. 3.500, i trei (uneori patru) coloane de celule ciliate externe, n numr de 13.000-16.000. irurile de celule ciliate externe i, respectiv, de celule ciliate interne se afl de-o parte i de alta a pilierilor lui Corti. Celulele ciliate externe, avnd un corp celular de form cilindric (25-45 mm nlime i 6 -7 mm diametru), se gsesc ntr-o structur lax, care le permite s se deformeze (figura (fig. dinhttp://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ )). Deasupra celulelor receptoare se ntinde o membran care const dintr-o matrice de substane fibrilare i dintr-un strat subire amorf, gelatinos, numitmembrana tectoria. La marginea exterioar a canalului cohlear se gsete o zon numit stria vascular, cu rol trofic important. O celul ciliat extern posed de-a lungul pereilor ei verticali membrane cu soluii de continuitate, realiznd jonciuni membranare cu celulele ciliate externe vecine. La polul apical al celulelor ciliate externe, care se scald n endolimf, se gsete o cuticul (1 - 2 mm grosime) (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ) strpuns de un mnunchi de prelungiri ale celulelor ciliate avnd forma unor bastonae cilindrice, numite stereocili. Stereocilii sunt grupai n form de W de aa manier nct lungimile cililor difer de la un rnd la cellalt, cilii din acelai rnd avnd aceeai lungime. Numrul cililor variaz de la o celul la alta (106 - 122), iar cilii cei mai lungi sunt n contact cu membrana tectoria (ncastrai n aceasta). Densitatea membranei tectoria este identic cu densitatea endolimfei astfel nct, n repaus, ea nu exercit nici o for asupra cililor. n structura stereocililor s-au pus n eviden proteine contractile (actin, miozin etc.), n special n rdcinile cililor. Nucleul celulelor ciliate externe se afl n zona bazal. Sub cuticul i sub nucleu se gsesc mitocondrii. Corpul celular al celulelor ciliate externe se scald, n partea inferioar, n lichidul perilimfatic. Inervarea celulelor ciliate externe este caracterizat de prezena n mare majoritate a conexiunilor eferente. Celulele ciliate interne se gsesc ntr-o structur celular mai dens, fiind situate mai aproape de membrana bazilar dect celulele ciliate externe, i sunt nconjurate de celule de susinere interne (figura) (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ). Lateral fa de celulele ciliate interne exist celule bordante. Celulele ciliate interne au un corp celular ovoid (35 mm lungime). Pe suprafaa lor superioar se afl un strat cuticular de 1 - 2 mm n care sunt implantai cca. 60 - 100 stereocili (figura). Nucleul celulelor ciliate interne este central, iar sub cuticul se gsete reticulul endoplasmic. n regiunea de deasupra nucleului se afl complexul Golgi i lizozomi, n cea de sub nucleu se gsesc ribozomi i mitocondrii. Ansamblul suprafeelor cuticulare ale celulelor ciliate constituie lama reticular. Aceast lam las s treac numai stereocilii i formeaz o barier etan ntre celulele ciliate i cortilimf pe de-o parte i endolimfa propriu-zis n cealalt parte. n acest fel, n endolimf ptrund numai stereocilii (figura micrografie electronic). Corpul celular al celulelor ciliate interne conine un mare numr de mitocondrii, indicnd o activitate metabolic intens. Stereocilii formeaz un trunchi de con oblic (sunt dispui n palisad), avnd un aranjament hexagonal. Stereocilii sunt aranjai n mod regulat, seciunea fasciculului fiind aproximativ circular. De-a lungul unui diametru al cercului lungimea stereocililor crete progresiv, iar n direciile perpendiculare pe acest diametru lungimile cililor sunt egale, astfel nct, fasciculul are un plan de simetrie bilateral. Spre deosebire de stereocilii celulelor ciliate externe, cei ai celulelor ciliate interne nu intr n contact cu membrana tectoria. La polul lor bazal, celulele ciliate interne realizeaz legturi sinaptice cu terminaii nervoase aferente (95%) i eferente.

Funciile celulelor ciliate Celulele ciliate au, n raport cu alte tipuri de celule senzoriale, dou proprieti remarcabile: extrema lor sensibilitate i viteza deosebit de mare cu care opereaz. Cercetrile din ultimele dou decenii, n special cele de electrofiziologie, au artat c, cele dou tipuri de celule ciliate, externe i interne, ndeplinesc funcii distincte. Dei acestea nu sunt complet clarificate, mai ales n cazul celulelor ciliate externe, se admite c: - Celulele ciliate interne reprezint veritabilii receptori, care asigur traducerea semnalelor care poart informaia auditiv n influx nervos, dei traducerea mecano-electric are loc i n celulele ciliate externe. Pentru aceasta pledeaz i numrul mare de fibre aferente cu care fac sinaps celulele ciliate interne. - Celulele ciliate externe prezint proprieti motrice datorate proteinelor contractile pe care le conin, prin care contribuie la amplificarea cohlear a semnalului acustic i la mecanismul de analiz realizat de urechea intern.

Analiza semnalului n urechea intern. Mecanica cohlear

Presiunea exercitat asupra ferestrei ovale de ctre talpa scriei d natere unor unde care se propag de-a lungul membranei bazilare, stimulnd celulele ciliate din organul lui Corti. Celulele ciliate interne trimit apoi semnale care codific frecvena, intensitatea i durata sunetului. n cazul unor unde de presiune foarte lente, cum ar fi cele produse de schimbrile de altitudine sau de infrasunete, are loc o deplasare a lichidului perilimfatic ntre cele dou rampe, vestibular i timpanic, prin helicotrem, pn la fereastra rotund ale crei micri sunt n contrafaz cu cele ale ferestrei ovale, compensndu-le. Pentru semnalele acustice din domeniul sonor (16 - 20.000 Hz), intr n vibraie membrana bazilar, a crei deformare depinde de frecvena vibraiei acustice. S-au emis diferite ipoteze privind modul n care vibraiile membranei bazilare sunt asociate cu frecvenele semnalelor acustice. Ipoteza rezonanei Cea mai veche ipotez privind modul n care funcioneaz membrana bazilar este ipoteza rezonanei. Structura special a membranei bazilare, cu forma trapezoidal (fig. dinhttp://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ), mai ngust la baz i mai larg la apex i cu cele 42.000 de fibre transversale, a determinat pe Ohm s elaboreze o teorie prin care s explice capacitatea de discriminare a nlimilor tonale de ctre analizorul auditiv, teoria zonal. Teoria zonal a fost ulterior dezvoltat de ctre Helmholtz, care a asemnat funcionarea membranei bazilare cu aceea a unei harpe, ale crei corzi intr n vibraie prin rezonan cu o frecven care depinde de lungimea acestora, deci de poziia pe care ele o ocup n lungul membranei bazilare (figura). Astfel, la baz, unde membrana este mai ngust, ea intr n rezonan cu frecvenele nalte, iar la apex, unde este mai larg, cu frecvenele joase. Acest fenomen poart numele de localizare sau tonotopie cohlear. Teoria Ohm-Helmholtz se mai numete i teoria rezonanei i, conform acestei teorii, vibraia fiecrei fibre se face independent de a celorlalte fibre. Unele aspecte ale teoriei rezonanei rmn valabile, ns att datele experimentale, ct i teoria arat c mecanismele de discriminare a frecvenelor sunt mai complexe. Teoria undei cltoare Un model mai complet care st la baza explicrii dependenei dintre localizarea pe membrana cohlear i frecvena undei acustice incidente i care, spre deosebire de cel al lui Helmholtz (model static), are un caracter dinamic, este modelul lui von Bksy. Von Bksy a demonstrat c vibraiile membranei bazilare nu dau natere unor unde staionare, ca n cazul corzilor unei harpe i c, ntruct fibrele membranei bazilare sunt cuplate anatomic i sunt slab tensionate, nu pot vibra independent. El a elaborat teoria undei cltoare (a undei propagate). Un element important n propagarea undei cltoare este reprezentat de gradientul de rigiditate care exist n lungul membranei bazilare, extremitatea dinspre baz fiind mai rigid dect cea dinspre apex. Trasnd curbele de rezonan ale membranei bazilare, von Bksy a constatat c n urma vibraiei mecanice a acesteia se realizeaz un spectru spaial de frecvene, etalat pe lungimea ei. Dar aceste curbe sunt foarte largi, suprapunndu-se pe poriuni ntinse, astfel nct, analiza efectuat de ctre membrana bazilar printr-un mecanism pasiv are ca rezultat o tonotopie (localizare) rudimentar, foarte ndeprtat de fineea rezoluiei pe care o demonstreaz studiile electrofiziologice i psihoacustice. Se poate spune, deci, c membrana bazilar efectueaz o analiz Fourieraproximativ a sunetelor complexe, n care nfurtoarele a dou unde cltoare (figura) se suprapun parial, att spaial ct i temporal. Explicaia rezoluiei nalte a sistemului auditiv, care poate permite discriminarea n frecven pn la n = 1 Hz, n zona central cmpului auditiv, a fost posibil numai dup ce s-au evideniat mecanismele active. Mecanismele de discriminare a frecvenelor pe membrana bazilar. Rolul celulelor ciliate externe Conform datelor actuale, exist dou tipuri de mecanisme care stau la baza analizei semnalului acustic i anume:

1) mecanisme pasive 2) mecanisme active. Mecanismele pasive pot fi puse n eviden i pe cohlee prelevate de la cadavre, n timp ce mecanismele active implic prezena unor proces vitale intacte. Mecanismele pasive rezult din proprietile mecanice i hidrodinamice ale membranei bazilare i ale lichidelor urechii interne. Prin acestea se efectueaz analiza Fourier la nivelul membranei bazilare. Mecanismele active, controversate i nc neelucidate complet, sunt declanate de ctre mecanismele pasive, care duc la propagarea undei n membrana bazilar. Unitatea de baz a amplificrii cohleare printr-un mecanism activ este celula ciliat extern. n cursul propagrii undei cltoare sunt stimulate celulele ciliate care se afl deasupra acelei regiuni a membranei bazilare care vibreaz cu amplitudine maxim. Vibraia membranei bazilare produce o deplasare relativ a lamei reticulare n raport cu membrana tectoria (figura). Datorit acestor micri, stereocilii celulelor ciliate externe sufer o nclinare i o forfecare, n urma crora are loc excitarea celulei ciliate prin deschiderea canalelor de K+ de la polul apical al stereocililor, urmat de depolarizarea celulei. Excitarea celulelor ciliate externe duce la schimbri rapide n lungimea acestora, asociate cu declanarea unui aa-numit mecanism motor n membrana bazolateral a fiecrei celule. Analiza structural a celulelor ciliate externe a evideniat existena unei mari concentraii de particule intramembranare, organizate n domenii semicristaline regulate n care distana dintre centrele particulelor este de cca. 13 nm. Acestea sunt unitile generatoare de for, compuse din proteine motoare, care detecteaz modificrile de potenial transmembranar i sufer tranziii conformaionale sau rearanjri. Fiecare particul ar putea reprezenta un complex proteic senzorimotor (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ), care detecteaz modificrile de potenial. Una dintre proteinele motoare implicate, care a fost identificat n ultimul deceniu, este numit prestin. Activitatea motoare a celulelor ciliate externe se exercit n faz cu micarea excitatoare, provocnd o rigidizare a planului celular i o amplificare a amplitudinii de deplasare a membranei tectoria ntr-o zon restrns a cohleei. Prin amplificarea micrii datorit celulelor ciliate externe, maximul de amplitudine caracteristic vibraiei membranei bazilare este transformat ntr-un vrf ngust i nalt, astfel nct are loc att o cretere a rezoluiei n frecven, ct i o intensificare de cca 100 de ori a semnalului acustic. Amplificarea cohlear ajunge la 40 dB. Pentru anumite frecvene, discriminarea ajunge pn acolo nct este excitat o singur celul ciliat. Aceast amplificare selectiv este foarte accentuat pentru frecvenele nalte i mai redus pentru cele joase. Maximul de amplitudine corespunde unei frecvene precise numit frecven caracteristic a irului de celule considerat. n acest fel, membrana bazilar mpreun cu celulele ciliate externe pot face o analiz Fourier mai fin a sunetelor complexe. mbtrnirea, nivelele sonore ridicate, drogurile ototoxice sau anoxia duc la alterarea celulelor ciliate externe i n special a stereocililor(figuri: 1, 2, 3). Leziunile sau disfunciile celulelor ciliate externe se traduc printr-o atenuare sau chiar o dispariie a mecanismelor active. Audiometric, n aceste cazuri se pune diagnosticul de surditate neurosenzorial cohlear: presbiacuzie, surditate traumatic, surditate ototoxic etc. n absena mecanismelor active subzist doar mecanismele pasive, fapt care are dou consecine importante de ordin psihoacustic: ridicarea pragului de audibilitate, prin scderea amplitudinii de vibraie a membranei bazilare i diminuarea selectivitii n frecven, prin creterea lrgimii vrfului de rezonan. Prin protezare auditiv este posibil compensarea primei consecine, printr-o amplificare convenabil a stimulului sonor. Cea dea doua consecin, reducerea selectivitii n frecven, nu poate fi compensat prin amplificare. n protezare se ncearc, n acest caz, amplificarea selectiv a unor frecvene i ameliorarea raportului semnal/zgomot la ieirea din protez, avnd ca scop, n special, mbuntirea nelegerii vorbirii. n acest sens, o importan deosebit o are dezvoltarea protezelor numerice. Transmiterea difereniat a semnalului acustic de la celulele ciliate externe la celulele ciliate interne. Ca urmare a micrii relative a membranei tectoria, amplificat prin contracia celulelor ciliate externe, stereocilii celulelor ciliate interne, care n mod normal (n stare de repaus) nu ating membrana tectoria, vor intra n contact cu aceasta i anume, n zona precis n care se situeaz maximul de amplitudine al undei. n urma acestei aciuni mecanice, celula ciliat intern va fi excitat printr-un mecanism specific, dnd natere unui influx nervos care se propag pe cile aferente spre sistemul nervos central. n acest fel,

nlimea tonal sub care se percepe frecvena semnalului acustic este codificat spaial, fiecare component a semnalului acustic fiind trimis sub forma unor poteniale de aciune ntr-o anumit regiune a cortexului auditiv. Otoemisiunile n anul 1978 Kemp a evideniat existena unor emisiuni acustice din cohlee, numite otoemisiuni (fig.

din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ), care se pot produce spontan, ca rspuns la stimulri acustice cu intensiti sub pragul de excitare neuronal sau n urma excitrii cohleei cu un curent electric. Domeniul de frecven al otoemisiunilor se situeaz n zona mijlocie a cohleei i este limitat la civa KHz (figura). Faptul c otoemisiunile sunt prezente la persoanele otologic normale a dus la propunerea folosirii lor n explorarea funcional cohlear, pentru a obine informaii suplimentare, care s le completeze pe cele furnizate de potenialele evocate auditive, mai ales n domeniul frecvenelor medii. Se constat c n surditile cohleare otoemisiunile dispar.

Traducerea semnalului acustic, mecanisme biofizice Funcia de traducere a semnalului mecanic n semnal electric se realizeaz att la nivelul celulelor ciliate externe, ct i la nivelul celulelor ciliate interne. Dar, conform datelor actuale, traducerea semnalului acustic n influx nervos care poart spre cortex informaia auditiv se efectueaz numai n celulele ciliate interne. Celulele ciliate interne sunt, prin aranjamentul lor spaial, n contact att cu endolimfa din canalul cohlear, prin suprafaa lor apical, ct i cu perilimfa din rampa timpanic, prin partea lor bazal. Cele dou lichide intracohleare au concentraii ionice diferite. n endolimf,concentraiile (fig. din http://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ) ionilor de K+ i Na+ sunt asemntoare cu cele din interiorul celulelor i anume, concentraiile de K+ sunt mari i cele de Na+ mici, n timp ce n perilimf situaia este invers. Potenialul de membran este modificat n urma micrii fasciculului de stereocili iar rspunsul este dependent de direcie. Dac vrful fasciculului se mic pe axa de simetriebilateral spre cilii cei mai lungi (figura) se produce o depolarizare de pn la -40 mV. Dac fasciculul este deplasat pe aceeai ax, dar n direcia opus, se produce o hiperpolarizare, iar potenialul transmembranar crete pn la -65 mV. Depolarizarea, respectiv hiperpolarizarea, se datoreaz deschiderii, respectiv blocrii suplimentare, a unor canale ionice care se gsesc n zona apical a celulelor ciliate externe i care las s treac dinspre exterior spre interiorul celulei ionii pozitivi cu dimensiuni mai mici de 6 . Este vorba n special de ionii de K+ care au concentraii mari n endolimf. Mecanismul de deschidere a acestor canale a putut s fie descris ca urmare a unor cercetri relativ recente de electrofiziologie, n special pe baza lucrrilor lui Hudspeth i ale colaboratorilor, care au artat c n vfurile stereocililor se gsesc canale ionice. S-a observat n microscopie electronic existena unor filamente, numite legturi apicale (tip links) (fig. dinhttp://www.iurc.montp.inserm.fr/cric51/audition/ ) care leag vrfurile cililor de corpul cililor vecini, mai nali. S-a constatat c dac aceste filamente sunt lezate, se inhib deschiderea canalelor ionice. Hudspeth a fcut urmtoarea ipotez, susinut de ctre datele experimentale: Legturile apicale sunt conectate la porile canalelor ionice, pe care le pot manevra n funcie de nclinarea cililor (figura). Prin nclinarea ntr-o parte sau cealalt, fluxul de ioni care ptrund n celul poate fi mrit sau micorat. n acest fel, se poate spune c celulele ciliate interne utilizeaz un mecanism asemntor aciunii unui resort pentru a deschide canalele ionice, la nclinarea cililor. Un asemenea mecanism evit procesele chimice lente. De aceea rspunsul celulelor ciliate interne este foarte rapid, astfel nct ele pot fi excitate de pn la 20.000 de ori pe secund. Este gritoare comparaia cu sistemul vizual, a crui funcionare se bazeaz pe o cascad de reacii chimice i n care rezoluia este de numai 24 imagini pe secund. S-a calculat c celulele ciliate sunt att de sensibile, nct o deflexie de ordinul diametrului atomului de hidrogen este suficient pentru a face s apar rspunsul celular. Deflexia stereocililor spre cilii cei mai nali este nsoit de scderea rezistenei transmembranare. Prin deschiderea canalelor ionice de la polul apical al cililor, n celul intr un flux de ioni pozitivi. Intrarea ionilor de K + n celul duce la depolarizarea ei. La nclinarea stereocililor n sens invers, se produce o hiperpolarizare a celulei. Intrarea ionilor de K+ n celul sub efectul deformaiei mecanice duce ladepolarizarea celulei. Depolarizarea se propag n ntreaga celul, pn n zona bazal. n poriunea bazal a membranei se afl canale de Ca2+ iar n apropierea lor se gsesc vezicule cu neurotransmitori. Depolarizarea duce la deschiderea

canalelor de Ca++ sensibile la variaiile de potenial, cu intrarea consecutiv a ionilor de Ca ++. Creterea concentraiei ionilor de Ca++ duce la accentuarea depolarizrii i antreneaz fuzionarea veziculelor cu neurotransmitori cu membrana presinaptic. La fuzionarea veziculelor cu membrana, neurotransmitorii sunt eliberai n spaiul sinaptic i declaneaz apariia i propagarea potenialului de aciune pe fibra nervoas. Creterea nivelului de Ca ++ duce, pe de alt parte, la activarea unor canale de K+ aflate n membrana bazolateral a celulei, care sunt Ca++dependente. Ionii de K+ ies din celul i celula se repolarizeaz.

Aspecte bioelectrice ale excitaiei auditive

Tehnicile electrofiziologice permit nregistrarea activitii electrice asociate funcionrii sistemului auditiv. n funcie de nivelul la care se efectueaz msurtorile se disting: - potenialele nregistrate la nivelul lichidelor intracohleare - potenialele nregistrate la nivelul celulelor ciliate - potenialele nregistrate la nivelul fibrelor aferente ale nervului cohlear - potenialele globale, la nivelul nervului cohlear. Poteniale electrice la nivelul lichidelor cohleare n absena oricrei stimulri, ntre diferitele pri ale cohleei exist diferene de potenial permanente. Rampa timpanic, care conine perilimf, are practic acelai potenial cu esuturile nconjurtoare i lichidele corpului. Rampa vestibular, n care se afl de asemenea perilimf, este uor pozitiv n raport cu cea timpanic (o diferen de potenial de +2 - +5 mV). Canalul cohlear, care conine endolimf, are n raport cu rampa timpanic o polarizare pozitiv, avnd fa de aceasta o diferen de potenial de 80 - 100 mV. Analiza ionic a endolimfei a artat c aceasta are practic compoziia unui lichid intracelular, n care concentraia ionilor de potasiu este mult mai mare dect aceea a ionilor de sodiu: [K+] = 150 mM, [Na+] = 7 mM. Perilimfa are, n schimb, o compoziie ionic asemntoare cu aceea a lichidului cefalorahidian: [K+] = 7 mM, [Na+] = 140 mM. O serie de observaii au artat c potenialul canalului cohlear este datorat existenei unui transport activ cu sediul n stria vascular, transport la baza cruia se afl pompa ionic electrogenic Na+, K+-ATPaza.

Potenialele receptoare (potenialele celulelor receptoare) n stare de repaus (n absena unei stimulri) celulele ciliate prezint un potenial de repaus de aproximativ -60 mV n raport cu mediul extracelular. n urma stimulrii acustice, prin ndoirea cililor celulelor ciliate interne, se declaneaz mecanismul traducerii mecano-electrice prin care, n urma deschiderii canalelor ionice i ptrunderii ionilor de potasiu n celul, are loc o depolarizare a acesteia i apare un potenial receptor, diferena de potenial fa de exterior cobornd la -40 mV. Cu stimuli auditivi pot fi nregistrate dou tipuri de poteniale: potenialul microfonic cohlear i potenialul de sumaie. Potenialul microfonic reprezint o activitate electric care precede formarea influxului nervos. Potenialul microfonic se poate msura de-o parte i de alta a membranei bazilare sau la nivelul ferestrei rotunde, n raport cu un electrod indiferent. Potenialul microfonic nregistrat urmrete forma de und a stimulului care i-a dat natere semnnd cu rezultatul unei nregistrri cu ajutorul unui microfon. Potenialul de sumaie se poate de asemenea msura la nivelul ferestrei rotunde i al canalului cohlear i reprezint o variaie continu a potenialului, care este prezent pe toat perioada stimulrii. Potenialul de sumaie are o form care urmrete nfurtoarea temporal a stimulului.

Originea potenialelor receptoare microfonic i de sumaie Aceste dou tipuri de poteniale se datoreaz activitii electrice a celulelor ciliate externe i interne. Ambele tipuri de celule ciliate convertesc deplasarea stereocililor lor, cauzat de micarea relativ a lamei reticulare i a membranei tectoria, ntr-un curent de traducere care produce o modulare a potenialului receptor al celulei. Pe baza nregistrrilor intracelulare i prin utilizarea unor substane ototoxice (cum ar fi canamicina) care distrug celulele ciliate externe s-au adus unele clarificri privind originea potenialelor cohlearemicrofonice i de sumaie (figura). Astfel, s-a putut arta c potenialul microfonic cohlear este datorat n cea mai mare msur (90%) activitii celulelor ciliate externe, n timp ce potenialul de sumaie este rezultatul unei activiti de redresare a celulelor ciliate interne. Activitatea electric a unei fibre nervoase. Curbe de acord Tehnicile moderne de electrofiziologie au permis efectuarea de msurtori precise la nivelul unei fibre aferente a nervului cohlear. Potenialele electrice nregistrate n acest fel reflect activitatea de traducere mecano-electric a unui numr foarte mic de celule sau chiar a unei singure celule. Msurtorile electrice au evideniat dou tipuri de activitate la nivelul fibrei nervoase: 1) o activitate spontan, care exist n absena stimulului acustic; 2) o activitate de rspuns la aciunea stimulilor acustici. Activitatea spontan const n producerea unor trenuri de poteniale de aciune, de amplitudine constant i distribuie temporal aleatoare. Numrul de impulsuri pe secund variaz destul de mult de la o fibr la alta, ntre 0,1 i 100, dar pentru o aceeai fibr rmne relativ constant. Activitatea de rspuns la stimulul acustic se caracterizeaz printr-o cretere a numrului de poteniale de aciune peste valoarea caracteristic activitii spontane. Fibra rspunde la un stimul acustic atunci cnd valoarea acestuia atinge o valoare prag. Pragul de rspuns al unei fibre este definit ca fiind nivelul de stimulare acustic care produce o cretere decelabil a numrului de poteniale de aciune n raport cu valoarea de repaus. Se constat c pe msur ce intensitatea stimulului crete, numrul de impulsuri n unitatea de timp va crete, dar c la un anumit nivel de stimulare, numit nivel de saturaie, aceast cretere nceteaz. Diferena n dB dintre valoarea pragului de rspuns i valoarea de saturaie reprezint dinamica rspunsului fibrei respective. Curbele de acord. Prin curb de acord a unei fibre nervoase se nelege reprezentarea grafic a pragului de rspuns al fibrei n funcie de frecvena sunetului. Se constat c graficul are o form caracteristic, de V, cu un vrf ascuit, care corespunde valorii minime a pragului pentru o fibr dat. Frecvena care corespunde acestei valori minime se numete frecvena caracteristic sau optim a fibrei. Se observ c forma (alura) curbei de acord este asemntoare cu cea a curbei de deplasare transversal a membranei bazilare, astfel nct rspunsul diferitelor fibre traduce localizarea (tonotopia) cohlear. ntr-adevr, valorile frecvenelor caracteristice difer n funcie de partea cohleei inervat de fibrele respective i anume, pentru fibrele care inerveaz zona bazal frecvenele caracteristice se afl n domeniul frecvenelor nalte, iar pentru cele care inerveaz zona apexului situaia este invers. Dinamica de rspuns a unei fibre nu depete valoarea de 40 dB. De aceea, pentru a codifica dinamica de 120 dB a urechii umane, exist mai multe tipuri de fibre, cu praguri de rspuns diferite. Activitatea electric global la nivelul nervului cohlear Activitatea electric global, nregistrat cu ajutorul unor electrozi plasai direct pe nervul cohlear, reprezint suma activitilor electrice ale tuturor fibrelor care-l constituie. Ele reflect activitatea electric a ansamblului celulelor ciliate. Potenialul global conine mai multe unde succesive. Asemenea nregistrri globale nu aduc aproape nici un fel de informaii privind mecanismele fundamentale ale proceselor bioelectrice care stau la baza excitaiei auditive.