UNIVERSITATEA DE TIINE A G R O N O M I C E l MEDICIN VETERINARA - BUCURETI

FACULTATEA DE AGRICULTUR

Biolog EMILIA BRNDUA S N D U L E S C U

TEZ DE DOCTORAT

STUDIUL MORFOLOGIEI, BIOLOGIEI I C O M B A T E R I I C I U P E R C I L O R F I T O P A T O G E N E A L E S E M I N E L O R DE T O M A T E

C O N D U C T O R TIINIFIC: PROF. DR. DOC. EUGENIU DOCEA

2006

CUPRINS INTRODUCERE 1. Origine i arie de rspndire 2. Importan economic i alimentar CAPITOLUL I MICOFLORA PATOGEN A SEMINELOR DE T O M A T E 1.1 Posibiliti de contaminare a seminelor de tomate 1.2 Principalele ciuperci patogene transmisibile prin smna de tomate 1.3 Localizarea inoculului patogen la nivelul seminei de tomate 1.4 Istoricul apariiei atacului ciupercilor patogene transmise prin smna de tomate 1.5 Metode de identificare a ciupercilor patogene n loturile de semine 1.5.1 Metode clasice de identificare 1.5.1.1 Metoda sugativei 1.5.1.2 Metoda plcilor cu agar 1.5.1.3 Metoda vaselor de vegetaie 1.5.2 Metode alternative de identificare 1.5.2.1 Tehnici imunologice 1.5.2. 2 Metode moleculare 1.6 Implicaiile economice ale atacului ciupercilor patogene transmise prin seminele de tomate CAPITOLUL II STADIUL ACTUAL AL CERCETRILOR PRIVIND MORFOLOGIA, BIOLOGIA l ECOLOGIA PRINCIPALELOR CIUPERCI PATOGENE 26 24 18 19 19 21 22 23 23 23 15 14 13 12 12 7 7 8

TRANSMISIBILE PRIN SMNA DE T O M A T E 2.1 Al/emana dauci (Khn) Groves et Skolko f. sp. salam (Ell. et. Mart.)

Neerg., sin Alternariaporri

(Ell.) Neerg. f. sp. solani (Ell. et. Mart.) Neerg..

A l te maria al le mata f. sp. lycopersici Grogan et. al., Al te maria (Fr.) Wiltshire - Alternarioza 2.2 Fulvia fulva Cook - Ptarea cafenie a frunzelor de tomate 2.3 Botrytis cinerea Pers. - Putregaiul cenuiu 2.4 Fusarium oxysporum - Fuzarioza 2.5 Vert ici da h Kleb. - Verticilioza 2.6 Didymella lycopersici 2.7 Phytophthora Kleb. - Putregaiul bazei tulpinii

tenuissima 26 33 37

Schielt.f. sp. lycopersici (Sacc.) Snyder et Hansen 40 44 47 49

infestam (Mont.) de - Mana tomatelor

CAPITOLUL III MSURI DE PREVENIRE I C O M B A T E R E A CIUPERCILOR PATOGENE T R A N S M I S E PRIN SMNA DE T O M A T E 3.1 Metode culturale 3.2 Cultivarea de soiuri rezistente la boli 3.3 Msuri i mijloace chimice 3.4 Alternative nepoluante CAPITOLUL IV MATERIALE I M E T O D E DE C E R C E T A R E Obiectivele lucrrii 4.1 MATERIALE 4.1.1 Material biologic fungic 4.1.2 Material biologic vegetal 4.1.3 Material utilizat n vederea irigrii prin filtrare lent 4.1.4 Produse chimice utilizate pentru cercetri de prevenire i combatere a patogenilor Alternaria danci f.sp. solum i Al te mar ia alternata f.sp. lycopersici 4.2 METODE DE CERCETARE 4.2.1 Metode pentru izolarea i identificarea speciilor patogene i saprofite 4.2.2 Metode pentru studierea creterii, dezvoltrii i sporulrii ciupercilor Alternaria danci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 92 89 88 89 53 53 57 60 65 79 79 81 81 82 85

4.2.3 Metode pentru estimarea influenei temperaturii i pH-ului asupra creterii ciupercilor patogene Al Ierna ha dauci f.sp. sol ani i Ahe maria alternata f.sp. lycopersici 4.2.4 Metode pentru estimarea virulenei speciilor Al ternar ia alternata f.sp. lycopersici i Al ternar ia dauci f.sp. solani 95 101 94

4.2.5 Patografia alteraariozei tomatelor 4.2.6 Metode pentru confirmarea rolului seminei n transmiterea altemariozei tomatelor 4.2.7 Metode de prevenire i combatere a agenilor patogeni Alternaria alternata f. sp. lycopersici i Alternaria dauci f.sp. solani

101

102

4.2.7.1 Metoda utilizat n vederea irigrii prin filtrare lent 102

4.2.7.2 Metode chimice de prevenire i combatere a speciilor patogene Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 4.2.7.3 Alternative nepoluante 4.2.7.3.1 Metode utilizate pentru testarea bicarbonatului de sodiu n vederea prevenirii i combaterii speciilor patogene Alternaria dauci f.sp.solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 114 103 114

4.2.7.3.2 Metode utilizate pentru testarea chitozanului n vederea prevenirii i combaterii speciilor patogene Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 4.2.7.3.3 Metode pentru cercetri de combatere biologic a patogenilor Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 4.2.7.3.4 Metode pentru determinarea aciunii extractelor vegetale asupra creterii miceliene a ciupercii Alternaria dauci f.sp. solani CAPITOLUL V REZULTATE I DISCUII 5.1 Izolarea i identificarea agenilor patogeni 5.2 Rezultate privind caracterizarea morfologic a speciilor 124 126 126 120 117

A lt maria sol ani i Al ic maria alternata f.sp. lycopcrsici 5.3 Rezultate privind influena mediilor de cultur asupra creterii i sporulrii speciilor Al te maria danci f.sp. s olani i Alternri a al te mal a f.sp. ly copers ici 5.4 Influena temperaturii asupra creterii, dezvoltrii i sporulrii ciupercilor patogene Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 5.5 Influena pH-ului asupra creterii, dezvoltrii i sporulrii ciupercilor patogene Alternaria danci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 5.6 Virulena speciilor AIternaria alternata f.sp. i Alternaria dauci f.sp. solani 5.6.1 Rezultate privind virulena speciilor Alternaria alternata f.sp. lycopersici i lycopersici

128

133

138

141

143

Alternaria dauci f.sp. solani - teste in vitro la semine 5.6.2 Rezultate privind virulena speciilor Alternaria alternata f.sp. lycopersici i

143

Alternaria dauci f.sp. solani - teste in vitro pe frunze detaate 5.6.3 Rezultate privind virulena speciilor Alternaria alternata f.sp. lycopersici i

150

Alternaria dauci f.sp. solani - teste in vitro pe fructe 5.6.4 Rezultate privind virulena speciilor Alternaria alternata f.sp. lycopersici i

156

Alternaria dauci f.sp. solani - teste in vivo pe plante la ghivece 5.7 Rezultate privind exprimarea simptomelor de altemarioz 5.8 Rezultate privind diseminarea speciilor patogene Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 5.9 Msuri de prevenire i combatere a ciupercilor Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 174 171 160 165

5.9.1 Metode agrotehnice i culturale de combatere a atacului tuturor agenilor patogeni 5.9.2 Rezultate privind irigarea prin filtrare lent 5.9.3 Rezultate privind prevenirea i combaterea chimic a speciilor patogene Alternaria i Alternaria alternata f.sp. lycopersici 5.9.3.1 Rezultate privind estimarea eficacitii in vitro pe mediul de cultur PDA (potato-glucose-agar) 5.9.3.2 Rezultate privind estimarea eficacitii fungicidelor prin teste in vitro pe frunze detaate 5.9.3.3 Rezultate privind estimarea eficacitii fungicidelor prin teste in vitro pe fructe detaate 5.9.3.4 Rezultate privind estimarea eficacitii prin teste in vivo pe plante de tomate la ghivece 5.9.3.5 Rezultate privind estimarea eficacitii fungicidelor testate in vivo pe plante de tomate cultivate n cmp 5.9.4 Rezultate obinute prin testarea alternativelor nepoluante 5.9.4.1 Rezultate obinute n prevenirea i 195 200 191 187 183 176
chinei

174 175

f.sp. solani 176

combaterea alternata de 200

patogenilor Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria f.sp. sodiu 5.9.4.2 Rezultate obinute n prevenirea i lycopersici cu ajutorul

bicarbonatului

combaterea f.sp. 206

patogenilor Alternaria lycopersici

dauci f.sp. solani i Alternaria

alternata

cu ajutorul chitozanului

5.9.4.3 Rezultate privind interrelaia biologic a ciupercilor patogene Alternaria dauci f.sp. solani i Alternaria alternata f.sp. cu diferii antagoniti 5.9.4.4 Rezultate privind eficacitatea unor extracte vegetale cu proprieti fungicide CAPITOLUL VI CONCLUZII BIBLIOGRAFIE 228 249 253 lycopersici 212

INTRODUCERE

IMPORTANTA CULTURII TOMATELOR 1. O r i g i n e i arie de rspndire

Tomatele au centrul de origine ntr-o regiune ngust, muntoas, a Andesuliii - Peru, Ecuador i Chile. "Rudele" primitive ale tomatelor se ntlnesc n numeroase i diverse medii, fiind parte a florei autohtone unice a Insulelor Galapagos (Nin-Liu D.O., 2004). Specia de origine este Lycopersicon var. cerasiforme esculenium

care a fost folosit n Mexic nc din anul 200 .e.n. Tomatele,

semnalate de Cristofor Columb n anul 1498, au fost mult timp considerate plante ornamentale. In anul 1557 Matthiola le numete "pomme d'amour' . Cultivarea tomatelor. n afara centrului lor de origine, se pare c a avut loc pentru prima dat n civilizaiile timpurii ale Mexicului. Fiecare specie a genului Lycopersicon i are originea, ngust localizat, astfel: L pemvianum provine din
4

partea sudic a Perului i nordul statului Chile; /.. hirsutum provine din zone de altitudine (2200-2500) din Auzi, iar L. esculentum, cu subspeciile spontane,

semicultivate i cultivate, s-a format pe un areal mult mai extins, n Columbia. Ecuador, Peru, Bolivia i Mexic. n Europa, tomatele au fc.-.t cultivate, pentru prima dat. n Spania i Portugalia sub denumirea de "mere peruviene", apoi n Italia, iar mai trziu, la sfritul secolului al XVl-lea, tomatele au fost introduse n Anglia unde considerate ca fiind plante toxice. Aici au nceput s se cultive dup dou secole. in Frana au fost utilizate iniial ca plante ornamentale, iar n anul 1778 ca legume. n Germania, Elveia, rile nordice, tomatele sunt cultivate dup anul 1870, iar n Rusia, dei introduse nc din secolul al XVIl-lea, au fost cultivate abia n anul 1880.

n China i Japonia tomatele au fost introduse n secolul al XVl-lea, odat cu cartoful, iar n America de Nord au ptruns n secolul al XIX- lea (Neamu Maria., 2001). n Romnia cultivarea lor este cunoscut din secolul al XlX-lea, cnd s-a

fcut trecerea, treptat, de la cultura n aer liber, la solarii i apoi la cultivarea tomatelor n ser.

2. I m p o r t a n e c o n o m i c i a l i m e n t a r

Tomatele se situeaz printre legumele cu importan economic major, att n ceea ce privete hrana oamenilor, ct i datorit obinerii unor venituri mari de ctre productori, ele fiind cultivate n toat lumea, fie n aer liber, fie n culturi protejate. n vederea asigurrii unui aport ealonat de legume proaspete pe toat durata anului, a avut loc, att n ara noastr ct i pe plan mondial, o cretere rapid a produciei de legume n spaii protejate, obinndu-se, astfel, legume i n timpul iernii. Suprafaa cultivat cu tomate i producia medie, la hectar variaz de la an la an, att pe plan mondial ct i n Romnia (tabelele 1,2). n ara noastr, din suprafaa total cultivat cu legume, tomatele ocup aproximativ 24%. Din punct de vedere economic, culturile protejate reprezint un sector de producie intensiv, care aduce mari beneficii productorilor prin valorificarea

produciei. In mod curent, tomatele au o rat de consum ridicat n majoritatea rilor. Din punct de vedere alimentar, multilateralitatea consumului tomatelor n form proaspt (salat, diferite preparate, etc.) sau prelucrat (bulion, conserve, sucuri, etc.) ca i adaptabilitatea lor au jucat roluri majore n utilizarea rapid i rspndirea acestor legume. Tomatele sunt o important surs de vitamina A i C, dar nu numai (tabelul 3).