Examen practic chimie sem.

II 2013
SODIUL (Na+) cation extracelular si POTASIUL (K+) cation intracelular VALORI NORMALE: Na: 136-145 mEg/L K: 3.5-5 mEg/L DETERMINARE: metoda flamofotometrica Se pulverizeaza cu un curent de aer, dupa dilutie, serul sau plasma de analizat. Aerosolii se amesteca cu un gas carburant (acetilena-aer) si se ard intr-un bec special. Atomii de Na si K sunt excitati si emit spectrele caracteristice. Concentratia fiecarui ion este proportional cu intensitatea fluxului luminous, care este proportional cu a fotocurentului care-l declanseaza, masurat la un galvanometru. VARIATI: Hiponatremii: - Tulburari digestive (diaree, voma) - Afectiuni renale - Deficit de aldosterone Hipernatremii: - Lipsa de apa sau exces de Na Hipopotasemii: - Tulburari neuromusculare si cardiac associate cu alcaloza metabolica si hiperaldosterism - Mai rar, insuficienta CSR, afectiuni renale
1

CLORUL (Cl-) anion extracellular, activeaza amilaza salivara. Clorul este responsabil, impreuna cu sodiul, de volumul lichidului extracelular si de osmolaritatea plasmatica. Clorul mentine integritatea celulara prin influenta sa asupra presiunii osmotice si a echilibrului acido-bazic. VALORI NORMALE: 96 106 mEg/L DETERMINARE: prin metoda dozarii cu azotat mercuric (metoda Schales) Se titreaza cu nitrat mercuric solutia de apa, ser si sol. difenilcarbazona pana la virajul culorii spre violet VARIATII: in tulburari ale metabolismuluihidroelectrolitic Hipocloremia: - Diaree, voma - Acidoza si diureza diabetic - Hiperhidratare - Afectiuni renale (reabsortia Na si Cl defectuoasa si se elimina NaCl) Hipercloremia: - Deshidratari - Boala Addison - Diabet insipid si alte cazuri in care se modifica echilibrul Na - apa

CALCIUL (Ca+) - Ca difuzabil ionizat (46%)

2

- Ca difuzabil neionizat (14%) complexat cu acid citric - Ca nedifuzabil (8%)

VALORI NORMALE: 8.5 - 10.3 mg% Ca ionizat: 4.25 5.25 mg% DETERMINARE: prin metoda colorimetrica arsenazo enzimatica (III) Ca, in reactive cu arsenazo III la pH neutru, conduce la formarea unui complex colorat a carui intensitate este direct proportional cu concentratia de Ca. VARIATII: - In functie de parathormon (creste calcemia), calcitonina (scade calcemia) si vitamina D3 - Ca legat de proteine scade in acidoze si creste in alcaloze

MAGNEZIUL (Mg+): cofactor important pentru numeroase enzime intracelulare, inclusive pt cele caer au ca substrat ATP VALORI NORMALE: 1.8 3 mg% (1.5 2.5 mEg/L) DETERMINARE: cu galben titan Mg2+ formeaza in mediul alcalin cu galben titan un compus colorat rosu. Se citesc extinctiile probei si standard: mEg/L Mg=Ep/Es x 4 VARIATII:

asociata cu hipocalcemia: cresterea excitabilitatii neuromusculare si cardiac. Se intalneste in tetania prin deficieanta Mg2+, malabsortie, tratament cu diuretice, acidoza diabetic, hiperparatiroidism.

- Hipermagnezemia impiedica transmiterea inpulsului nervos si determina atrofia musculara. Apare in afeciuni renale, boala Addison, mielom multiplu Simptomele hipomagnezemiei: - Crampe musculare - Aritmii - Osteoporoza si osteomalacie - Depresie - Coma

FOSFORUL (P) - Anion intracelular. Fosforul intra in compozitia oaselor si a dintilor, este unul din constituentii acizilor nucleici, nucleoproteinelor, fosfolipidelor din membranele celulare; este de asemenea implicat in mentinerea echilibrului acido-bazic, in stocarea si transferul de energie, in procese enzimatice VALORI NORMALE: 4 7 mg% - copii 3 4.5 mg% - adulti DETERMINARE: metoda spectofotometrica cu agent de reducere acid 2amino-4-naftolsulfonic. Se formeaza un complex colorat albastru. VARIATII: c% este influentata de hormonal paratioidian, vit. D, functia renala, metabolismul osos sau nutritive. Hiperfosfatemi:
4

- Insuficienta renala - Hipoparatiroidism - Supradoze cu vit. D

Hipofosfatemii: - Hiperparatiroidism - Avitaminoza D (rahitism si osteomalacie) - Diabet, inanitie - Malabsortie. Fosfatemia este influentata si de metabolismul gluidic, deoarece o parte importanta a osforului plasmatic si intracelular se este sub forma de glucozo-6-fosfat.

FIERUL (Fe+) - compusi HEM VALORI NORMALE: 50 175 g% DETERMINARE: prin metoda ferrozina. In ser, fierul migreaza spre transferina. In mediu acid, fierul disociaza din complexul format si poteina din ser ramana in solutie. Dupa reducerea cu acid ascorbic, fierul este convertit intr-un complex colorat cu reactivul de ferrozina. VARIATII: Sideremia scade in: - Anemii feriprive
5

- Carente de fier - Activara brusca a eritropoiezei (dupa hemoragii, tratamentul cu vit. B12) - Deficitul sever de transferina (infectii cornice, procese neoplazice) Sideremia creste: - In toate situatile in care degradarea eritrocitelor si eliberarea de fier din Hb decurge mai rapid decat procesul de captare a fierului in maduva osoasa: In anemiile: aplastica, siderocrestica, megaloblastica si hemolitica - In hepatite acute si cornice: eliberare de feritina din celulele lezate

PROTEINELE PLASMATICE ROLURI: enzime, homoni, receptori, aticorpi, componente structural VALORI NORMALE: 6 8 g% DETERMINARE: prin metoda biuretelui. Legaturile peptidice din protein formeaza cu ionul de cupu, in solutie alcalina, un complex colorat violet. VARIATII: Hipoproteinemii: - Sindromul nefrotic - Malabsortie - Afectiuni hepatice Hiperproteinemii: - Inflamatii cornice
6

- Colagenoze - Leucemii - Mielom multiplu - Macroglobulinimie Waldenstrom

GLUCOZA ROLURI: indispensabila pentru activitatea unor cellule din organism, in special sistemul nervos. Glucidele sunt cele mai importante elemente enegetice (65% din energia necesara organismului) VALORI NORMALE: 65 110 mg% DETERMINARE: prin metoda colorimetrica enzimatica (GOD-PAP) Glucoza +O2,---- acid gluconic + H2O2 (enz. GOD) VARIATII: Hipoglicemia: - Incapacitatea ficatului de a mentine homeostazia glicemica care poate rezulta dintr-o secretie excesiva de insulin, captarea celulara excesiva a glucozei sau diminuarea glicogenolizei si a gluconeogenezei. - Alcoholism: creste NADH care inhiba GNG - Insuficiente hepatice - Adenoame ale insulelor Langerhans - Boala Addison Hiperglicemia:
7

- Diabet zaharat - Deficit de insulin - Hiperfunctia CSR - Pancreatita acuta Hiperglicemia determina glicozurie, hipercetonemie, cetonurie.

LIPIDELE TOTALE VALORI NORMALE: 400 800 mg% DETERMINARE: In prezenta H2SO4 concentrat, la cald, lipidele formeaza prin oxidari degradative cetone, care se condenseaza cu valina si H3PO4 formand compusi colorati violet. Lipidele serice sunt calculate in comparative cu un standard care contine o cantitate cunoscuta de trioleina. VARIATII: Determinarea lipidelor totale in ser este utilizata ca un test de screening pentru depistarea dislipidemilor. Pentru a stabili cauzele exacte ale

hiperlipidemiei se impune analiza diferentiata a fractiunilor lipidice si lipoproteice, Hiperlipidemia apare in insuficiente hepatice, iar hipolipidemia, mai rara, se coreleaza cu necroza hepatica avansata si malabsortie.

COLESTEROLUL VALORI NORMALE: 120 200 mg% DETERMINARE: metoda cu colesterol oxidaza si peroxidaza.
8

Cholesterol + apa--- cholesterol + AG (enz. Colesterol esteraza) VARIATII: sunt paralele cu cele ale lipidelor totale. Cresteri: - Hipercolesterolemia ereditara - Hipotiroidism - Diabet zaharat - Hepatita cronica Scaderi: - Hepatita acuta - Hipertiroidism - Infectii acute - Anemie - Malnutritie Concentratiile LDL si apo B au valoare prognostica fiind considerati factori de risc negativi in ateroscleroza, HDL si apo A sunt factori de risc pozitivi. HDL-c: 33 55 mg/dL la barbati 45 65 mg/dL la femei LDL-c: <100 mg/dL

LIPOPROTEINELE SERICE

Transporta colesterol

spre tesuturile extrahepatice si invers,

vehiculeaza alti compusi lipidici (vitamine liposolubile), contribuie la pastrarea compozitiei lipidice a membranelor, regleaza procese metabolice celulare. VALORI NORMALE: : 25-35% Pre : 10-19%, : 52-59% DOZARE: electroforeza Lipoproteinele, prin componntele lor proteice superficiale, poarta sarcini electrice si pot fi separate prin electroforeza. Separarea se efectueaza la pH alcalin, iar componentele sunt vizualizate cu coloranti ceu au afinitate pt lipide (negru Sudan) VARIATII: Dislipidemii ereditare Hiperlipoproteinemiile familiale.

TRIGLICERIDELE VALORI NORMALE: <165 mg% (50 150 mg%) DOZARE: metoda GPO-PAP VARIATII Hipertrigliceriedmia: - Primara in tip I, II, III, IV, V - Secundara: hipotiroidism, diabet, sindrom nefrotic, alcoholism, stress
10

Hipotrigliceridemia: - Primara: boala Tangier - Secundara: malnutritie, afectiuni ale parenchimului hepatic UREEA VALORI NORMALE: 20-40 mg% DOAZRE: metoda cinetica in UV Uree + apa + 2H+ ---- 2NH4 +CO2 (enz. Ureaza) VARIATII: Hiperuremia apare in glomerulonefrita acuta sau cronica si a altor afectiuni renale, ca urmare a unei ecretii defectuoase Scaderi ale uremiei: casexie si toate afectiunile hepatice, ficatul fiin sediul sintezei ureei.

ACIDUL URIC VALORI NORMALE: 2.5 6 mg% DOZARE: acidul uric formeaza impreuna cu uricaza un complex colorat ce poate fi masurat spectofotometric. VARIATII: Hiperuricemii: guta si sindromul lesch-nyhan Guta: cauzata de depunerea cristalelor de urati de sodium la nivelul articulatiilor si rinichilor,

11

CREATININA (metabolitul creatinei si fosfocreatinei) VALORI NORMALE: barbati: 0.7 1.2 mg% Femei: 0.5 1 mg% DOZARE: metoda cinetica Creatinina, intr-un mediu basic dat de Solutia de picrica, formeaza un complex colorar rosu-portocaliu. Masurand absortia la interval fixe se observa ca aceasta este direct proportional u concentratia creatininei in proba. VARIATII: In insuficiente renale, cresterea creatininei serice precede cresterea azotului neproteic total Creatinina reflecta masa musculara. In distrofiile musculare se inregistreaza valori crescute prin intensificarea catabolismului muscular. Determinarile de creatinina serica si urianara au semnificatie clinica in special pentru determinarea clearance-ului de creatinina. Acesta este un indicator al vitezei de filtrare glomerulara, servind ca test de monitorizare a functiei renale.

BILIRUBINA (catabolismul HEM-ului) VALORI NORMALE: Bb: 1.1 1.2 mg/dL Bb (conjugata): 0.1 0.4 mg/dL Bb (neconjugata): 0.2 0.7 mg/dL DOZARE: metoda Malloy-Evelvn

12

Bilirubina prin cuplare cu acidul diazobenze-sulfonic formeaza un compus azoic colorat rosu (ractia van den Bergh) VARIATII: HIPERBILIRUBINEMII: Cu Bb neconjugata: - Icter fizioloic neonatal - Icter nehemolitic congenital - Boala Gilbert - Hiperbilirubinemia toxica (disfunctia hepatica in urma intoxicarii cu cloroform) Cu ambele forme de Bb: - Icter hemolitic (degradare masiva a Hb, anemie pernicioasa) - Ictere hepatocelulare Cu Bb conjugata: - Icter colestatic

ELECTROFOREZA PROTEINELOR SERICE VALORI NORMALE: Albumine: 50 60% 1: 5-7% 2: 6-10%

13

: 8-13% : 10-18% METODA Intr-o solutie tampon cu pH alcalin (6.8 -9) amfionii macromoleculari proteici poarta o sarcina neta negativa si vor migra intr-un camp electric spre anod. Viteza de migrare depinde mai ales de marimea moleculelor si de sarcina lor electrica. Indiferent de suportul flosit (hartie, gel de poliacrilamida), prin electroforeza se separa 5 fractiuni proteice. VARIATII: DISPROTEINEMII: - ciroza hepatica scad albuminele , cresc si -globulinele (curba comuna) - sindrom nefrotic scad albuminele, cresc marcant -2 globulinele - inflamatie acuta scad albumine, cresc -1, -2 (marcant) si gama-globulinele - inflamatie cronica albumine, cresc -1, -2 si gama-globulinele - gamopatie monoclonala scad albumine si cresc marcant -globulinele

TRANSAMINAZE Catalizeaza ractia de transfer a unei grupari amino de la un -aminoacid la un cetoacid. GOT glutamat-oxaloacetat-transaminaza: (in muschi, miocard, ficat) DETERMINARE metoda cinetica fara piridoxal fosfat Principiu: L-asparat + 2- oxoglutarat--------- glutamat + oxaloacetat VALORI NORMALE: pana la 40 U/L GPT glutamat-piruvat-transaminaza (in ficat)
14

DETERMINAREe: metoda cinetica fara piridoxal fosfat Principiu: L-alanina + 2-oxoglutarat----- L-glutamat + piruvat VALORI NORMALE: pana la 40 U/L VARIATII: - Cresteri marcante GOT: infarct miocardic, hepatita virala si acuta, necroza toxica a ficatului, stari de soc - Cresteri moderate GOT: hepatite cronica, ictere mecanice, mononucleoza infectioasa, anemii hemolitiec severe - Cresteri marcante GPT: hepatita virala acuta si necroza toxica a ficatului - Cresteri moderate GPT; hepatita cronica, ciroze, mononucleaza infectioasa

FOSFATAZA ALCALINA:

izoenzime de provenienta osoasa si hepatica

precum si cele de origine renala sau intestinala. VALORI NORMALE: barbati: 53-128 U/L Femei: 42-98 U/L Copii: pana la 500 U/L DETERMINARE: metoda cinetica colorimetrica p-Nitrofenilfosfat + apa-----Fosfat + p-Nitrofenol (AP) VARIATII: Cresteri: - Boala paget
15

- Afectiuni biliare - Hepatite - Osteomalacie - Rahitism Scaderi: - Cretinism - Deficitul de vt. C - Hipofosfatemie din afectiuni hepatice, obstructia biliara

LIPAZA SERICA Valori normale: pana la 1.5 U/L DETERMINARE: metoda titrimetrica. AG eliberati prin hidroliza uleiului de floarea soarelui, sub actiunea lipazei serice, se titreaza cu solutie NaOH 0.005N VARIATII: creste in afectiuni inflamatorii acute ale pancreasului, cresterea lipazei fiind mai precoce si mai persistenta decat amilaza.

-AMILAZA DESFACE LEGATURI 1.4 GLICOZIDICE CU FORMARE DE OLIGOZAHARIDE REDUCATOARE (dextrine) maltoza si glucoza. VALORI NORMALE Ser: <100 U/l Urina: femei: <447 U/l .. barbati <491 U/l
16

DETERMINARE: prin test fotometric enzimatic. Are loc conversia tuturor PNP-oligomaltozidelor produse pein activarea amilazei. VARIATII - Cresteri marcante in pancreatita acuta si insuficiente renale - Cresteri moderate in cancerul de cap de pancreas, afectiuni ale gl. Salivare, afectiuni abdominale acute (ulcer perforat, colecistita) - Scaderi moderte: atrofiile pancreasului - Dozarea lor se face pentru investigarea pancreasului, in pancreatitele acute

GAMMA GLUTAMILTRANSPEPTIDAZA VALORI NORMALE: femei <32 U/l Barbati <49 U/l DETERMINARE: test cinetic colorimetric. GGT catalizeaza transferul de acid glutamic catre acceptorul glicilglicina. Procesul edcurge cu formare de 5-amino-2-nitrobenozat care prezinta absorbanta la 405 nm. Cresterea absorbantei este direct proportionala cu activitatea enzimei. VARIATII: Determinarea reflecta hepatotoxicitatea, chimica si etilica. GGT este privita si ca un marker al stresului oxidativ (implicare in metabolsimul glutationului)

17

18

19

20

21