LP 4

DOZAREA ENZIMATICĂ A GLICEMIEI.

DOZAREA ENZIMATICĂ A COLESTEROLULUI / 2 ORE
GLUCOZA SERICĂ

Glucoza este cel mai important monozaharid din sange. Rezulta din digestia carbohidratilor, din
conversia hepatica a glicogenului in glucoza si prin neoglucogeneza.

Glucoza este un furnizor indispensabil de energie care sustine activitatea celulara. Cei doi hormoni
care regleaza in mod direct nivelul glucozei in sange sunt glucagonul si insulina. Alti hormoni care
detin un rol important in metabolismul glucozei sunt: ACTH-ul, glucocorticoizii, adrenalina, tiroxina.

Tesuturi insulino-independente ⇒ glucoza trece în celula si în absenta insulinei: tesutul nervos,

eritrocitele

Tesuturi insulino-dependente ⇒ utilizarea glucozei se face doar în prezenta insulinei : tesutul hepatic,
tesutul muscular si tesutul adipos

Dozarea glucozei in ser(glicemia) prin metoda enzimatica

Principiul metodei
In prezenta glucozoxidazei glucoza este oxidata la acid gluconic. Apa oxigenata rezultata din reactie
reactionează cu fenolul și 4-aminoantipirina in prezenta peroxidazei rezultand un compus colorat in
rosu, fotocolorimetrabil.
Cantitatea de glucoza din proba este direct proporţionala cu intensitatea coloratiei obtinute.

glucozoxidaza
Glucoza + O2 acid gluconic + H2O2

peroxidaza
2H2O2 + fenol + 4-aminoantipirina quinonimina (rosu) + 4H2O

Reactivul:
Tampon pH = 7,4
Fenol
4-amino-antipirina
Glucozoxidaza
Peroxidaza

Probe: ser nehemolizat, plasmă heparinata, LCR

Modul de lucru

Standard, μL Proba, μL
Standard 30 -
Proba - 30
Reactivul 1950 1950

Repaus 10 minute, apoi se citesc extinctiile probei si standardului la λ = 520 nm fata de apa distilata.
Calcul: mg glucoza/dL sange = EP x ( C standard /Estandard)

Valori normale
Glicemia a jeun 80 – 100 mg/dL (post 8-10h)

Glicemie bazala modificata (prediabet) 105 – 126 mg/dL

Interpretarea valorilor glicemiei bazale si in cadrul testului de toleranta la glucoza se efectueaza

conform criteriilor ADA (American Diabetes Association):

Normoglicemie Conditii asociate cu Diabet zaharat

risc crescut de diabet
zaharat

Glicemie bazala <100 mg/dL (<5.6 100-126 mg/dL (5,6-6,9 ≥126 mg/dL
mmol/L)
mmol/L) (glicemie (7.0 mmol/L)
bazala
(2 valori in 2 zile
modificata)
diferite)

Glicemie la 2 ore dupa <140 mg/dL 140-200 mg/dL (7.8-11. ≥200 mg/dL
administrarea a 75g
(7.8 mmol/L) mmol/L) (≥11.1 mmol/L)
glucoza
(intoleranta la
(TTGO) glucoza)

Termenul de „hemoglobina glicata” descrie o varietate de compusi ce au in comun glicarea

hemoglobinei – reactia de atasare non-enzimatica a glucozei la molecula de hemoglobina.
Cum interpretăm valorile pentru hemoglobina glicata:
– limite normale ale HbA1c sunt între 4,8-5,6%
– cu risc de a dezvolta diabet zaharat (prediabet) atunci când valorea HbA1c este între 5,7-6,4%
– dacă HbA1c este mai mare sau egal cu 6,5% înseamnă că diabetul zaharat este deja instalat
Modificari patologice ale glicemiei

Hipoglicemie Hiperglicemie

- diabet zaharat dezechilibrat - diabet zaharat de tip 1; 2; 1,5

-insulinom (carcinomul celulelor insulare -diabet gestational
pancreatice)
-sindromul metabolic
-tumori extrapancreatice, de ex hepatom
-boala Cushing
- boala Addison
-hemocromatoza
-sindrom de malabsorbtie
-pancreatita acuta sau cronica
-necroza hepatica fulminanta
-neoplasm de pancreas
-deficiente enzimatice (galactozemie,sindromul
-obezitate, stil de viata sedentar
von Gierke)
-afectiuni renale cronice
-intoleranta ereditara la fructoza
COLESTEROLUL SERIC
Functiile colesterolului:
-constituent fundamental al membranelor celulare
-constituent al lipoproteinelor plasmatice
-precursor al hormonilor steroizi, acizilor biliari, colecalciferolului
Lipoproteinele plasmatice sunt:
1- Chilomicronii=98-99% lipide, 1-2%proteine
2- VLDL (very low density lipoproteins)= 89-94%lipide (60% trigliceride, 15%fosfolipide, 13%
esteri de cholesterol, 7% cholesterol liber)
3- LDL (low density lipoproteins)75-85% lipide (35-40% colesterol esterificat, 5-10% colesterol
liber, 8-12% trigliceride)
4- HDL (high density lipoproteins)= 50-55% lipide (20-30% fosfolipide, 17-23% cholesterol, 3-
6% trigliceride)

Prin urmare, colesterolul se determină pentru:

- Monitorizarea factorilor de risc crescut pentru boala coronariană;
- Screening-ul dislipidemiilor primare și secundare;
- Monitorizarea tratamentului dislipidemiilor (TG mari, HDL-col. mic)

Dozarea colesterolului total prin metoda enzimatica colorimetrica

Principiul metodei

Cholesterol-esteraza
Ester-colesterol + H2O cholesterol + acizi grasi

Colesteroloxidaza
Cholesterol + O2 colestenona + H2O2

Peroxidaza
2 H2O2 + 4-aminoantipirina quinonimina + 4H2O

Reactivul: tampon pH=6,5

Fenol
4-aminoantipirina
Cholesterol-esteraza
Colesteroloxidaza
Peroxidaza
Modul de lucru

Standard, μL Proba, μL
Standard 25
Proba 25
Reactivul 2000 2000

Repaus 10 minute
Se citesc extinctiile standardului si a probei la λ=520 nm fata de apa distilata

Calcul: mg colesterol/dL sange = EP x ( C standard /Estandard)

Valori normale:
Adulti
Optim
100- 200 mg/dL

Risc mediu
200-240 mg/dL

Crescut
≥240 mg/dL

Copii si adolescenti ( 12-18 ani):

Optim
170 mg/dl

Risc mediu
170-199 mg/dl

Crescut
≥200 mg/dl
Variatii patologice

Scaderi Cresteri

-Malabsorbție -Hiperlipoproroteinemii primare

- Maldigestie - Hipotiroidie
- Inaniție - Ateroscleroza
- Carențe alimentare - Colestaza
- Casexie - Sindrom nefrotic
- Afecțiuni hepatice, ciroze - Anorexie nervoasa
- Hipertiroidie - Guta
- Hipo-alfa-lipoproteinemie - Diabet
-Patologie hepatocelulara severa - Alcoolism
-Steatoza hepatica
-Sindrom metabolic
-Obezitate