LP 6

Dozarea ureei, creatininei si acidului uric / 2 ore

Dozarea ureei
Introducere
Ureea reprezinta produsul de excretie al amoniacului din organism.
Amoniacul rezultat din catabolismul aminoacizilor este transformat
la nivelul ficatului in uree prin procesul de ureogeneza.
Ureea impreuna cu AA, creatinina, acid uric, polipeptide, reprezinta
azotul neproteic total care nu este continut de proteine.
Metoda de dozare enzimatica cu ureaza
Principiul metodei
Ureea este transformat in amoniac i dioxid de carbon sub actiunea
ureazei.
Ionii de amoniu in mediu alcalin reactioneaza cu hipocloritul si
salicilatul de sodiu formand un compus colorat in verde.
Intensitatea culorii este direct proportionala cu concentratia ureei.
Tehnica de lucru
-se pregatesc 3 eprubete: martor (M), prob (P), standard (S);
- se pipeteaz n eprubete conform tabelului:
Reactivi
M
S
R 1 (ureaz)
1 ml
1 ml
ap distilat
10 l
standard
10 l
prob
se agit i se incubeaz timp de 5 min la 37 grd C
R 2 (hipoclorit, NaOH)
1 ml
1ml

P
1 ml

10 l
1 ml

Se agit i se incubeaz 5 min la 37 grd C

Se citesc extinciile probei Ep i standardului Es fa de martor la
=578 nm.
Calcul

Concentraia probei = Ep / Es x Cs
mg uree / 100 ml ser = Ep / Es x Cs
unde
Cs = 50 mg/dl
Valori normale
Sange: 20 40 mg%
Urina 24 - 30 g/24 h
Variatii fiziologice
Varsta >60 ani 50 mg%
La consumatori de carne val. aproape de lim sup.
In ultimul trim de sarcina val scazute fatul consuma aa
Interpretarea variaiei valorilor
Valorile serice ale ureei sunt dependente de 3 factori: catabolismul proteic
(aduse prin aport alimentar sau produse de catre organism), diureza
(eliminare urinara), si capacitatea functionala renala.
Din acest motiv se cere ca rezultatele acestui test sa fie corelate cu
rezultatele altor teste cum ar fi testarea creatinemiei si a acidului uric
sanguin.
Variatii patologice
Valori crescute
Cauze renale
glomerulonefrite, nefropatii tubulare, TBC renala, tumori
renale, insuficienta renala acuta si cronica
Cauze extrarenale hipercatabolism proteic, stari de toxicoza si soc
datorate hemoragiilor, arsurilor, traumatismelor.
Valori scazute
Insuficienta hepatica grava

ACID URIC
Definitie
Acid organic care se gaseste in sange si urina, rezultand din arderea
proteinelor. Este produsul final al degradarii purinelor libere: adenina,
hipoxantina, guanina.
Patologia lui este in primul rand dominata de gut, boal specific omului.
Nivelul acidului uric in sange se numeste uricemie.
Acidul uric este produs prin degradarea unor substante chimice numite
purine urinare, provenite din acidul dezoxiribonucleic (DNA) si intra in
circulatia sangelui prin alimentatie sau prin distrugerea celulelor in
organism. O mare parte din acidul uric este depozitat in urina de catre
rinichi, restul fiind excretat prin fecale.
Daca o cantitate de acid este produsa in excces sau nu e indeajuns pentru
a fi excretata, se acumuleaza, ducand la aparitia gutei - o inflamatie la
nivelul articulatiilor.
Cele mai frecvente cauze pentru acumularea acidului uric sunt date fie de
o tendinta genetica de a-l produce in exces, fie o disfunctionalitate la
nivelul rinichilor.
Dozarea acidului uric cu uricaza
Principiul metodei
Acidul uric este transformat in alantoin si ap oxigenat sub
aciunea uricazei.
Apa oxigenata sub actiunea peroxidazei si a unor compui colorai
formeaza un derivat de chinon rou violet.
Intensitatea culorii este direct proporional cu concentraia de acid
uric.
Tehnica de lucru
-se pregatesc 3 eprubete: martor (M), standard (S), prob (P)
- se pipeteaz n eprubete conform tabelului:
Reactivi
R1+R2
ap distilat

M
1 ml
20 l

S
1 ml

P
1 ml

standard
prob

20 l
20 l

Se agit i se incubeaz 5 min la 37 grd C

Se citesc extinciile probei Ep i standardului Es fa de martor la
=520 nm.
Calcul
Concentraia probei = Ep / Es x Cs
mg acid uric / 100 ml ser = Ep / Es x Cs
unde
Cs acid uric = 60 mg/dl
Valori normale
In sange:

2,5 6,5 mg/100 ml ser la aduli;

1 - 3 mg/100 ml ser la copii;
In urina:
0,25 - 0,8 g/urina 24 h la aduli;
La copii sub 1 an, valoarea acidului uric este pana la 25
mg/kg corp/24h.
Variaii fiziologice
Valoarea acidului uric variaz in funcie de alimentatie, sex, varsta, factori
genetici, diferite stari fiziologice (effort fizic, menopauza).
Alimentatia bogata in purine determina cresterea acidului uric in timp ce
alimentatia saraca in purine produce o scadere pana la 0,8 mg / 100 ml
sange.
La copii, acidul uric este mai scazut decat la adulti, la barbati valoarea lui
este mai crescuta decat la femei, dar e relativ constant de-alungul vietii.
La femei, uricemia este mai mica inaintea menopauzei si mai mare dupa
aceasta, cand poate atinge valorile prezente la barbati.

Variaii patologice

Valorile crescute se intalnesc in urmatoarele cazuri patologice:

Guta
Insuficienta renala cronica
Leucemie
Boli infectioase
Poliglobulie
Procese insotite de degradari tisulare precum si dupa radioterapie
Tratamente cu medicamente antimicotice si antimetabolice
Terapie cu ACTH sau hidrocortizon
Toxicoza gravidica
Intoxicatiile cu plumb si mercur
Scderi patologice:
Valorile scazute ale uricemiei sunt mentionate in boala Wilson, dupa
administrare de medicamente uricozurice in sindromul Tony-DebreFanconi, leziuni renale, afectiuni hepatice severe
DOZAREA CREATININEI:
Principiul metodei, valori normale, variaii patologice.
Creatinina este cel mai constant constituient azotat din sange, deoarece
nu este influentat de regimul alimentar, efort fizic, etc. Variaza doar in
functie de eliminarea sa renala.
Sinteza creatininei are loc in ficat si rinichi. Creatinina, ca si ureea, este
eliminata prin urina. Ambele substante se gasesc in concentratii fiziologice
constante in sange, care le transporta.
Concentratia de creatinina in urina poate fi utilizata ca valoare de referinta
pentru excretia unor analiti (albumina, alfa-amilaza).
Determinarea creatininei prin metoda Jaffe
Principiul metodei
Creatinina reduce acidul picric, in mediu puternic alcalin, la acid picramic
de culoare galben-portocalie, fotocolorimetrabil.
Intensitatea culorii este direct proportionala cu concentratia de creatinina.

Tehnica de lucru
- se pregatesc 3 eprubete: martor (M), standard (S), prob (P)
- se pipeteaz n eprubete conform tabelului:
Reactivi
ap distilat
standard
prob
solutie acid picric
solutie NaOH 10%

M
0,5 ml
1,5 ml
0,1 ml

S
0,5 ml
1,5 ml
0,1 ml

P
0,5 ml
1,5 ml
0,1 ml

Se agit i dup 20 min se citesc extinc iile probei Ep i standardului

Es fa de martor la =530 nm.
Calcul
Concentraia probei = Ep / Es x Cs
mg creatinin / 100 ml ser = Ep / Es x Cs
unde
Cs creatinin = 1 mg/dl
Valori normale
In sange:
La adulti: 0,5-1,2 mg creatinina la 100 ml
La copii: 1,2 mg creatinina la 100 ml
In urina:
1,0 - 1,5 g creatinina / 24h
Variaii patologice
Valorile crescute ale creatininei sunt prezente in ser si in urina.
In ser, creatinina are un nivel ridicat in:
insuficienta renala cronica
distrofia musculara progresiva
eclampsie
acromegalie
In urina:
acromegalie

diabet
hipotiroidism

Creteri ale creatininei mai pot aparea in :

afectiuni extrarenale cu diaree, varsaturi, transpiratii profuze
postoperator in interventii de urgenta
oc, politraumatisme
dezordini metabolice, diabet zaharat, hiperuricemie
mielom
sarcina
tratamente cu droguri toxice renal
Scaderi patologice
Hipocreatinemia se intalneste in:
insuficienta renala cronica
afectiui musculare
hipertiroidism