CURSUL 1

!!! Santorio Santorio: (1561-1636) Medicina bazat pe date msurabile Primul experiment Primul Congres International de Biofizica: Stockholm, 1961
Isaac NEWTON (1642-1727) Pn la el lumea fizic era prost neleas. El a demonstrat c aceasta este guvernat de legi matematice de o mare precizie A oferit fizicii moderne instrumentele intelectuale eseniale Alexander Pope: Natura i Legile Naturii stteau ascunse n Noapte. Dumnezeu a spus, S fie Newton! i s-a fcut Lumin.

1. Fizica pentru organism: Antichitate: actuiune terapeutic a unor agenOi fizici (soarele ...) n prezent: dispozitive complexe pentru cercetare, diagnostic i tratament 2. Fizica n organism: Studiul structurilor i al proceselor fiziologice i patologice din corpul uman, folosind metode i concepte fizice. 3. Fizica mpotriva organismului: Studiul efectelor nocive ale unor factori fizici (radiatii, presiune, temperatur). tiina modern se definete prin metodologia sa, care a fost formulat prin 3 postulate valabile nc i azi: Existenta unor legi universale, cu caracter matematic Descoperirea acestor legi prin experimentul tiinific Reproductibilitatea perfect a datelor experimentale !!! Comparaie ntre variaia greutii prin ingestia de alimente i excreie. n sec. al XV-lea - al XVI-lea, pentru prima oar, boala este transformat n date msurabile. Mai nti Nicolaus Cusanus (1401-1464) susine ideea msurrii n medicin, iar Santorio Santorio (Capodistria, 1561 Veneia, 1636) introduce msurrile precise n studiul proceselor fiziologice i patologice. Santorio a ncercat s elaboreze o definiie cantitativ a fenomenelor vitale i a devierilor lor patologice, ceea ce mai trziu se va numi metabolism (1863). Autoexperiment efectuat de Santorio Santorio n 1620: cu ajutorul unui scaun-balan, a studiat modificrile greutii sale corporale nainte i dup ingestia alimentelor Galileo Galilei (1564-1642) Una din primele descrieri ale mecanicii clasice; Bazele astronomiei fizice prin observatii cu telescopul; Revolutie: consacra modelul heliocentric al sistemului solar; Alti cercetatori: Ren Descartes (1596-1650): - teoria om-main Giovanni Alfonso Borelli (1608 -1679) Stephen Hales n 1718 Prima msurare a presiunii rdcinilor fora osmotic 1

Claude Bernard (1813 1878)

Fondatorul medicinii experimentale. 1865 L'Introduction l'tude de la mdecine exprimentale. Ideea fundamental a fixitii mediului intern, ulterior corespunznd homeostaziei.

Biofizica este o tiin de frontier care are drept obiective: Studiul fenomenelor fizice i biofizice din structurile vii, utiliznd: Studiul efectelor factorilor fizici asupra organismelor vii: Radiaii ionizante i neionizante,temperat ur, ultrasunete, electricitate, cmp magnetic, gravitaie

Luigi Galvani (1737-1798) printele bioelectricitii: a descoperit electricitatea animal, n 1771, prin experimente pe broate (model animal). Isaac NEWTON (1642-1727) - Cea mai influent personalitate din istoria tiinei occidentale Claude Bernard (1813 1878) [Biolog, medic, fiziolog i om de tiin francez] Laennec (Rene Theophile Hyacinthe): stetoscopul 1817 IV. Clasificarea domeniilor BIOFIZICII Dou criterii : Domeniile fizicii clasice Nivelul de organizare a biosistemelor TREI OBIECTIVE IMPORTANTE: A) S neleag structurile i fenomene fizice ale corpului uman (normale si patologice), folosind metode i concepte fizice. Ex.: Rolul biofizicii n cunoaterea unei boli: drepanocitoza B) S contribuie cu tehnici fizice i dispozitive la diagnostic, tratament i cercetarea medical. Ex: Bazele fizice ale imagisticii medicale C) Studiul aciunii factorilor fizici din mediu. ex.: Accidentul de la Cernobl

Hemoglobina poate avea structura: primara, secundara, tertiara sau cuaternara. Lantul polipeptidic se formeaza prin reactii de condensare.

CURSUL 2
DREPANOCITOZA (anemia falciform, siclemia)
boala cea mai intens cercetat, din toat patologia uman boal molecular tipic: descrierea sa a marcat naterea medicinii moleculare denumirea iniial = anemie mediteraneean (familii de bolnavi cu anemie + tulburri renale) microscopul optic cu contrast de faz: anemie cu hematii deformate, n form de secer (falcus - latin sau drepanos greac), descris de Dresbach - 1904; Herrick - 1910 UN SINGUR aminoacid este nlocuit: acidul glutamic este nlocuit cu valina: Glu <-> Val => HbS Acidul glutamic (Glu), un amino acid incrcat negativ, este nlocuit cu valina (Val), care nu are nici o sarcin. Inlocuirea unui singur aminoacid n structura primar a hemoglobinii determin schimbarea structurii conformaionale i apariia hemoglobinii S, respectiv modificarea formei hematiei.

Studiul Hb: structura primar i structura conformaional

ACCIDENTUL NUCLEAR DE LA CERNOBIL

La 26 Aprilie 1986 la 03:23:44 a.m. reactorul 4 de la Cernobil, lng Pripyat n Ukraina a explodat. O cantitate de radioactivitate de ordinul a 12 exabecquereli (1018) sau ~ 300 mCi a fost eliberat n atmosfer timp de circa 10 zile, contaminnd intens o zon de 150 000 km2, locuit de circa 6 milioane de persoane.

Metode care au contribuit la descifrarea mecanismelor drepanocitozei: cromatografie difracie cu raze X microscopie electronic de baleiaj forma eritrocitelor genetic mod de transmitere i de producere Drepanocitoza este o boal genetic. Ea se transmite autosomal recesiv: pentru ca un pacient s manifeste boala, trebuie s aib cte o gena mutant de la fiecare printe.

ACCIDENTUL NUCLEAR DE LA CERNOBIL

CONTAMINAREA RADIOACTIV: Din reactorul avariat au fost eliberate peste 40 de elemente radioactive, ndeosebi n primele 10 zile dup accident. Cele mai abundente au fost: iodul (I-131), cesiul (Cs-137) i stroniul (ndeosebi Sr-90). Dup accident, Cs-137 a fost cel mai persistent radioizotop, din cauza timpului de njumtire mare (30a) Particule de diferite mrimi au fost eliberate: particule mici: 0.3 1.5 micrometri(diametru aerodynamic) Particule mari: 10 micrometri Norul radioactiv a migrat spre: Rusia, Europa, ndeosebi rile nordice. Ukraina, Belarus , si Russia au fost contaminate pe suprafee mari; 336,000 de oameni au fost evacuai.

ACCIDENTUL de la Fukushima
Pozitia geografica Fukushima: al doilea "accident major" de Nivel 7 n istoria industriei nucleare; radiaia eliberata ca urmare a evenimentelor de la Fukushima, in 12 aprilie, a fost doar aproximativ 10% din cea eliberata in cazul accidentului de la Cernobl (1986), de asemenea, evaluat ca nivel 7. Localitati din Japonia in jurul centralei nucleare. Pe o raza de 20-30 Km au fost evacuate si luate masuri special.

Baze fizice ale imagisticii medicale

Principiul general al imagisticii medicale Agent fizic intial -> om -> agent fizic emergent -> detector -> procesare -> Imagine

FUKUSHIMA

CURSUL 3 Metode de studiu in biofizica

Clasificare:
Metode generale Observatia stiintifica Experimentul stiintific Metode specifice 1. Metode electrokinetice : Electroforeza i immunoelectroforeza 2. Metode cromatografice: (adsorbie, partiie, schimb de ioni, afinitate) 3. Centrifugare i ultracentrifugare 4. Metoda de liofilizare 5. Metode kinetice: Viscozimetrie Osmometrie Msurarea tensiunii superficiale 6. Metode optice: Fotocolorimetrie Turbidimetrie Nefelometrie Fluorimetrie Polarimetrie Refractometrie Flam-fotometrie 7. Metode electrice: Polarografie pH-metrie Conductometrie 8. Difracie cu raze X 9. Microscopia optic: Microscopul optic Microscopul cu contrast de faz Microscopul cu fluorescen Ultramicroscopul Microscopul polarizant Microscopul cu imersie 10. Microscopul electronic, microanaliza nuclear i alte tehnici n relaie. 11. Metode de spectrometrie optic : spectrometrie ultraviolet-vizibil 4

Schema unei celule animale tipice, care arat componentele subcelulare. Organite: (1) nucleoli (2) nucleu (3) ribozom (4) vezicul (5) reticulul endoplasmatic (ER) (6) aparatul Golgi (7) citoscheletul (8) reticulum endoplasmatic (9) mitocondrii ( 10) vacuole (11) citoplasma (12) lizozom (13) centriol.

Proteom - ansamblul de proteine produse de genom (aproximativ 60.000 de proteine la om).

Clasificarea Metodelor Biofizicii este bazat pe trei criterii:

I. Principiul fizic/biofizic al metodei (prezentat extensiv) II. n relaie cu modul de utilizare: metode de separare metode analitice (de analiz) III. n relaie cu complexitatea biosistemului : atomi, molecule celule esuturi organe, sisteme fiziologice.

spectrometrie Raman Spectrometrie RMN spectrometrie de mas 14. Metode radio-izotopice 15. Metode pentru studiul semnalului bioelectric (metoda patch-clamp - canale ionice i l.p.)

CURSUL 5
CROMATOGRAFIA=
metoda de separare si identificare a componentilor unui amestec
Prezinta 2 faze: Faza stationara Faza mobile

Cromatografia
Mecanisme diferite de retenie - 4 tipuri de cromatografie: 1. De adsorbie 3. De permeaie 2. De schimb ionic 4. De afinitate Ea Se bazeaz pe retenia diferit a componenilor amestecului n faza staionar: coeficient de distribuie sau de partaj. Concentraia component A n faza staionar Concentraia component A n faza mobil

c1 Pc c2
Form. Coef. Distrib Separarea unui anticorp dintr-un amestec prin cromatografie de afinitate:

A.Cromatografia de absorbtie
MikhaelTsvet, (18721919) botanist rus 1901, separarea clorofilei prin cromatografie de adsorbie pe coloan Retenia la suprafaa fazei staionare B. Cromatografia de afinitate n cromatografia de afinitate, un ligand care se cupleaz specific la o protein este fixat covalent de o matrice poroas (faza staionar). Cnd un amestec de proteine traverseaz faza staionar: - Proteina de separat se cupleaz cu ligandul, iar celelalte proteine din amestec sunt eliminate din coloan fr a fi reinute deloc. - Modificnd condiiile de eluie (pH acid) proteina reinut se detaeaz de faza staionar i este eliminat (recuperat). C. Cromatografie prin schimb ionic Ex! Generatorul de 99m-Tc (v. Aplicatii radioizotopi) `Ioni legai electrostatic la un suport insolubil i chimic inert sunt nlocuii reversibil de ali ioni din amestecul de separat: Suport+A- + Ion- Suport+Ion- + A-

Cromatografie prin schimb ionic

D.Cromatografie de permeaie - prin filtrare n gel n cromatografia de permeaie sau de filtrare n gel, (cromatografie de excludere sau tamisaj molecular), proteinele sunt separate dup mrimea i forma lor. Frecvent faza staionar este: dextran (Sephadex), agaroz sau poliacrilamid

Cromatografia de permeaie se poate folosi pentru estimarea masei moleculare Exemplu: Purificarea nucleazei stafilococului prin cromatografie de afinitate - compusul reprezentat n (b) a fost legat covalent la faza staionar (agaroz)