Metabolismul proteinelor 1

Proteinele reprezint substane nutritive deosebit

de importante, ca singura surs de azot asimilabil
de ctre organism i furnizatoare de aminoacizi
eseniali.
Numai o alimentaie diversificat asigura aportul
n aminoacizii necesari.
Alimentele de originea animal sunt bogate n
proteine: n preparatele din carne procentul este
ridicat (20%).
Oule conin aproximativ 13% proteine, dar sunt
bogate n colesterol (glbenu).
Este mult mai redus procentul de protein n
alimentele de origine vegetal: leguminoase,
pine, cereale.
Legtura proteinelor cu constituenii lor
aminoacizii este indisolubil n toate procesele
vitale.
Proteinele din organismele vii permanent
regenereaz.
Pentru meninerea constant a proporiei lor,
viteza de sintez i de degradare a proteinelor
trebuie egalat, ceea ce constituie o stare
dinamic stabil.
Viteza de rennoire se exprim prin perioada de
njumtire.
La obolani proteinele musculare au o perioad
de njumtire egal cu 30 zile, cele hepatice
5-6 zile, enzimele ore sau minute.
Proteinele din esuturile i fluidele organismului
sunt utilizate ntr-o msur foarte mic pentru
producerea de energie.
n inaniie, dup epuizarea rezervelor de glucide
i lipide, are loc degradarea lor cu utilizarea
catenelor hidrocarbonate ale aminoacizilor, ce
asigur durata supravieuirii.
Excesul de proteine alimentare servete direct
sau indirect (biosinteza lipidelor, glucidelor) n
scop energetic. Organismele vii nu sunt capabile
s depoziteze proteine pentru cerine strict
energetice.
Echilibrul Azotat
Asigurarea sintezei de proteine necesit prezena
n cantiti suficiente a celor 20 de aminoacizi.
Lipsa unui aminoacid esenial stopeaz sinteza
proteinelor, catabolismul aminoacizilor
neutilizai, sporete pierderea azotului cu urina i
micoreaz creterea.
Echilibrul azotat negativ exist cnd cantitatea de
azot pierdut de organism depete cantitatea
consumat.
Aceast afirmaie continu pn cnd deficiena
aminoacidului esenial este corectat.
Echilibrul azotat negativ, de asemenea, poate
aprea n sindroame de malabsorbie, febr,
traum, cancer i producerea excesiv a
hormonilor catabolici (hipercortizolism).
Cnd azotul consumat n regimul alimentar
egaleaz pierderilor de azot, organismul se afl n
echilibru azotat (adulii normali).
Cnd consumul azotului depete pierderile de
azot avem un echilibru azotat pozitiv (creterea
activ i reparaia tisular, sarcina,
recovalescena).
Calitatea i cantitatea proteinelor
n alimentaie
Proteinele din alimentaie furnizeaz azot organic
i aminoacizii eseniali.
Pentru aprecierea cantitativ a necesitilor
proteice trebuie de luat n consideraie calitatea
proteinei, ca determinat de compoziia
aminoacizilor eseniali n cantiti
corespunztoare.
Dac concentraia unui aminoacid este mai mare
sau mai mic dect a altora, utilizarea celor din
urm ar trebui s fie deprimat i va fi reflectat
n creterea insuficient.
Proteinele din cereale sunt lipsite de lizin, nu
suport creterea optimal.
Cu toate acestea, selecia genetic i programele
de nmulire au produs urmai de cereale cu un
coninut mai nalt de lizin.
Proteinele de origine animalier carne, ou,
lapte, cacaval, carne de pasre i pete sunt de
calitate bun din momentul cnd furnizeaz toi
aminoacizii eseniali.
Gelatina, protein derivat din colagen, e lipsit
de triptofan.
n general, proteinele vegetale sunt srace n
calitate din cauza c sunt lipsite de unul sau altul
aminoacizi eseniali.
Cea mai bun calitate a proteinelor vegetale a
fost gsit n legume i nuci.
Astfel o diet pur vegetarian necesit o
planificare atent pentru a obine o combinaie
de proteine care furnizeaz cantiti necesare a
tuturor aminoacizilor eseniali.
Combinaiile de proteine vegetale complementare
include orez i alune, gru ntreg sau gru uscat
mcinat (bulgar), boabe de soie i smn de
susan.
La persoanele cu o diet vegetarian pur poate
aprea deficiena de vitamina B
12
.
Cu toate c proteinele vegetale utilizate de unele
singure nu aprovizioneaz toi aminoacizii
eseniali, componena lor n diet furnizeaz
aminoacizi neeseniali care, n caz contrar, va
trebui s fie sintetizai la cheltuielile de azot a
aminoacizilor eseniali.
Aprecierile rezultate ale necesitilor proteice
zilnice sunt pentru aduli - 0.8 g/kg; nou-nscui -
2.2 g/kg; copii mici (0,5-1 an) - 2 g/kg.
n timpul sarcinii i lactaiei este recomandat un
consumul proteic suplimentar peste nivelul
normal.
Dac consumul de carbohidrai i lipide este
insuficient pentru necesitile energetice,
proteinele din regimului alimentar sunt utilizate
pentru prentmpinarea deficitului energetic i va
rezulta n echilibrul azotat negativ.
Malnutriia energiei proteice
Dou dereglri ale nutriiei energiei proteice
care sunt larg rspndite ntre copii n spaii
economic deprimate sunt kwashiorkor i
marasmus.
Kwashiorkor este determinat de consumul
inadecvat de protein de calitate bun i a dietei
ce const n primul rnd din produse alimentare
bogate n amidon (rdcini de igmana, cartofi,
banane, porumb, manioca) i lipsite de ali
nutrieni eseniali.
Victimele au greutate i funcia inimii i a
rinichilor dereglat; volumul sangvin,
hematocritul i concentraia albuminelor serice
este micorat;
Se observ atrofia pancreasului i intestinelor;
micorarea rezistenei imunologice; vindecarea
ncetinit a rnilor i reglarea anormal a
temperaturii.
Semnele clinice caracteristice includ edeme,
ascit, insuficiena creterii, apatie, schimbarea
pigmentaiei i ulcerarea, pierderea prului,
mrirea ficatului, anorexie i diaree.
Marasmus rezult n urma deficienei proteice i
consumului de energie, ca i n foamete.
Se observ atrofia generalizat a muchilor i a
esuturilor subcutanate, slbire, pierderea
esutului adipos.
Edema apare n kwashiorkor, dar nu n
marasmus; cu toate acestea, deosebirea dintre
aceste dou dereglri nu este totdeauna clar.
Tratamentul la marasmus necesit suplimentar
proteine i surs de energie.
Indivizii sufer de nutriie inadecvat datorit
bolii sau depresiunii nervoase i sunt sensibili la
infecii.
Pacienii manifest vindecarea ntrziat a rnii
cu durata sporit a internrii n spital.
Astfel, malnutriia poate cauza morbiditate,
mortalitate i are consecine economice grave.
Trauma, arsura sau septicemia, pot, de
asemenea, precipita malnutriia graie
hipermetabolismului cauzat de sistemul
neuroendocrin.
Diagnosticul fix i interveniile nutriionale
corespunztoare este necesar n administrarea
pacienilor.
Nivelele proteinelor serice (albumina,
transferina) i proteina fixatoare de retinol, sunt
utilizate ca parametri biochimici n diagnosticul
malnutriiei.
Transferina este un indicator senzitiv al
deficienei proteice i este efectiv n evaluarea
nsntoirii.

Digestia proteinelor alimentare
Absorbia aminoacizilor are loc numai dup
degradarea hidrolitic a proteidelor, datorit
aciunii combinate a enzimelor proteolitice din
sucurile gastric, pancreatic i intestinal.
Cantitatea aminoacizilor liberi n alimentele
naturale e minor.
Dei toate enzimele catalizeaz hidroliza
legturilor peptidice, ele difer specific.
Se disting exopeptidaze i endopeptidaze (ce
scindeaz legturile peptidice, formate de
aminoacizi la extremitile i n interiorul
lanului).
Majoritatea enzimelor sunt secretate n forme
inactive (proenzime, zimogeni) i sunt active
doar ntr-un anumit segment.
Anume astfel se produce protejarea celulelor
reproductive i a canalelor prin care acestea sunt
secretate.
Activarea lor are loc prin detaarea unor
oligopeptide, cu formarea centrului activ.
Digestia n stomac. Enzimele proteolitice
digestive principale secretate de celulele
stomacului sunt: pepsina, gastrixina, renina.
Pepsina este sintetizat i secretat de ctre
celulele principale ale mucoasei gastrice n
forma sa inactiv pepsinogenul.
n mediul acid al sucului gastric, pepsinogenul
este activat att prin proteoliza limitat, ct i
autocatalitic, de ctre pepsin.
O poriune a tractului digestiv uman
n calitate de substrat pentru pepsin servesc
proteinele native alimentare sau denaturate la
fierbere.
Endopeptidaza-pepsina, atac specific legturile
peptidice la care particip, prin grupele aminice,
aminoacizii aromatici.
n msur mai mic sunt disponibile pentru atare
proces metionina, leucina i acizii dicarboxilici.
Se consider c pepsina produce un efect
pronunat asupra proteinelor denaturate, ce conin
grupe SH libere.
Durata limitat de stare a bolului alimentar n
stomac duce la formarea amestecului de
polipeptide.
Gastrixina (pepsina C) i renina (chimozina)
sunt enzime aflate n sucul gastric al sugarilor.
Secvena aminoacidic le confer o omologie
perfect i activeaz la un pH egal cu 3.
Renina, n prezena Ca
2+
, transform cazeina
laptelui n paracazein, hidrolizat apoi de
pepsin.
Celulele secundare secreteaz soluiile 0,16 M
HCl i 0,007 M KCl cu resturi de ali electrolii.
Totodat, se mai secret i factorul intern.
Concentraia H
+
n stomac e de 10
6
mai mare
dect n plasm.
Micorarea aciditii gastrice influeneaz
considerabil degradarea proteinelor (se observ
la achilie, anemia pernicioas).
Cea mai simpl ipotez presupune c
mecanismul de secreie este analog cu
transportul protonilor, dependent de ATP n
cadrul funcionrii ATP-azei din membrana
intern mitocondrial.
n ultimii ani s-a conturat rolul H
+
, K
+
ATP-azei
n reglarea secreiei HCl n mucoasa gastric.
E component din familia enzimelor, ATP-aza
membranelor plasmatice, de rnd cu H
+
, K
+

ATP-aza, Ca
+
ATP-aza.
Modelul H
+
,K
+
ATP-azei
ATP
ADP + Pi
H
+
,K
+
-ATP-aza
K
+
K
+
-canal
H
+
K
+
Cl
-
Cl
-
Cl
-
-canal
HCO
3
-
H
2
O + CO
2
H
2
CO
3
H
2
CO
3
H
+
+ HCO
3
Membrana apical
Membrana bazolateral
Sistemele de transport n celula parietal ce determin secreia HCl
Mecanismul ce determin activarea
secreiei HCl
n celulele nesecretoare parietale
H
+
, K
+
ATP-aza este neactiv i-i concentrat n
vezicule, n citozol, n apropierea suprafeei
apicale membranare.
Activarea secreiei e nsoit de trecerea acestor
vezicule spre suprafaa apical i contopirea cu
membrana.
Un rol activ i aparine citoscheletului acestor
celule.
Proteinele i schimb poziia. n celula activ,
F-actina se depisteaz n apropierea suprafeei
apicale membranare i n canalele intracelulare,
iar miozina i proteinele filamentoase prsesc
aceste locuri.
n proces particip i proteinele fixatoare de
GTP, ce sunt depistate n celulele parietale.
Una din aceste proteine (masa molecular 23
kDa), numit Rab-2, i modific localizarea la
activarea secreiei, n acelai mod ca i H
+
, K
+

ATP-aza, ce confirm participarea ei n procesul

contopirii veziculelor.
Secreia HCl de celule este activat de histamin,
gastrin, acetilcholin.
Toate au receptori respectivi H
2
(histamina) i
M cu toate subtipurile (3) pentru acetilcholin.
Receptorul pentru gastrin se refer la tipul B
ca i la colecistokinin.
Consecutivitatea proceselor e puin studiat.
Gastrinele sintetizate i secretate de partea
piloric a stomacului, sunt perfect studiate,
deosebit de active fiind formele sulfat ale
gastrinelor.
Gastrinele poteniaz efectul histaminei.
Ultima e fixat de H
2
receptori, mrind nivelul
AMPc celular; n consecin, se majoreaz Ca
2+
intracelular, trecnd n celul prin membrana
plasmatic.
Celulele int pentru proteinkinazele AMPc
dependente conin proteine membranare i
citozolice.
Una din ele este Cl-canalul, ce n final limitez
secreia HCl.
La activarea cu histamin are loc translocarea
unor proteine din citozol n membran, care
interacioneaz cu H
+
, K
+
- ATP-aza, trasmind
informaia la proteinele int.
Incontestabil c inhibitorii carbanhidrazei (E), de
altfel ca i cianidele, iodacetatul, dinitrofenolul,
anihileaz secreia.
ntre pereii mucoasei membranare exist o
disproporie de potenial.
Hormonii sunt reglatori intracelulari cu efect
receptoric.
Gastrinele amplific concentraia Ca
2+

intracelular, pe cnd acetilcholina induce
eliberarea Ca
2+
i din exteriorul celulei.
Se atest drept efectiv metoda de investigare
vizavi de eventuala secreie a acidului clorhidric
prin aplicarea probei cu histamin, care
acioneaz conform mecanismului redat anterior.


Gastrina (inducie)
Histidin decarboxilaza (in) Histidin decarboxilaza (a)
His Histamina
Adenilatciclaza (in) Adenilatciclaza (a)
ATP AMPc AMP
FDE
Proteinkinaza (in)
Proteinkinaza (a)
Carbanhidraza (in) Carbanhidraza (a, fosforilat)
Sinteza HCl
Schema influenei gastrinei asupra sintezei HCl
Digestia n intestin
Proteoliza n intestin este asigurat de sucul
pancreatic ce conine endo- i exopeptidaze n
forme active.
Tripsinogenul este convertit n tripsin prin
detaarea de la captul N-terminal al unui
hexapeptid.
Procesul e influenat de enterokinaza intestinal,
ct i de autocataliz (efectul enterokinazei de
2000 de ori mai pronunat).
Tripsina hidrolizez legturile peptidice, cu
participarea grupelor carboxil ale aminoacizilor
arginina i lizina.
Chimotripsina se secreteaz n forma neactiv
chimotripsinogenul, drept activatori servind
tripsina i autocataliticul, ce detaeaz dou
peptide de la lanul compus din 245 aminoacizi,
cu instituirea unei conformaii active ce posed
legturi disulfidice ncruciate.
Enzima are o specificitate mai ampl, hidrolizez
legturile peptidice formate de grupa COOH, a
Phe, Tyr, Trp. De altfel, scindeaz i amidele,
esterii, derivaii acil.
Elastaza se obine din proelastaz, catalizeaz
ruperea legturilor formate de aminoacizi
hidrofobi relativ mici glicina, alanina, serina, e
activat de tripsin.
Carboxipeptidaza A este o enzim ce conine
Zn, scindeaz aminoacizii aromatici mai
intensiv, ncepnd de la captul C-terminal, dect
cei alifatici.
Atunci cnd ionul de Zn se modific la Ca, se
declaneaz activitatea esterazic.
Carboxipeptidaza B acioneaz asupra
peptidelor, avnd la captul C-terminal resturi de
Arg i Lys.
Definitivarea hidrolizei se soldez prin
implicarea enzimelor intestinale (din intestinul
subire).
Prioritar funcionez intracelular dup deplasarea
n enterocite sau n procesul traversrii celulelor
epiteliale.
Aminopeptidazele leucin aminopeptidaza
conine Zn, pe care o poate activa Mn; posed o
specificitate N-terminal a peptidelor.
Alanin aminopeptidaza e specific la captul N-
terminal al alaninei.
Dipeptidazele glicil-glicin dipeptidaz.
Prolinaza scindeaz legturile peptidice, cu
participarea grupei COOH a prolinei.
Prolidaza cu participarea grupei NH a
prolinei.
Digestia i absorbia proteinelor
Se observ, c o hidroliz efectiv poate avea
loc i la rezecia stomacului, pe cnd
insuficiena pancreasului are consecine mai
grave pentru organismul uman.
pH-ul sucului pancreatic (7,8 8,3) e izotonic
cu plasma: concentraia de HCO
3

depete de
3 ori concentraia similar din plasm.
Secretina stimuleaz eliminarea unui suc
pancreatic srac n enzime, prin intermediul
AMPc.

Colecistokinina, eliminarea unui suc bogat n
enzime, stimulez contracia vezicii biliare.
Secreia colecistokininei duodenale e stimulat
de lipidele i polipeptidele din intestin.
Gastrinele sunt stimulatori ai secreiei de
insulin.
Polipeptide
Oligopeptide
Aminoacizi
Celulele paracrine intestinale
Celulele
pancreatice
Mucoase
intestinale ale
enterocitelor
Colecistokinaza

Pancreozimina

Secretina

Aminopeptidaze
Dipeptidaze

Enterokinaza

Tripsinogenul

Tripsina

Chimotripsinogenul

Proelastaza

Procarboxipeptidaza

Chimotripsina

Elastaza

Carboxipeptidaza

Scindeaz proteinele
pn la aminoacizi
liberi
Colecistokinaza

Mecanismele de reglare ale proteazelor
Pancreozimina

Absorbia aminoacizilor
Are loc la nivelul intestinului subire, fiind un
proces activ cu solicitri de energie, analog cu
transportul glucozei i dependent de Na
+
.
Sngele portal i transport n ficat, unde ia parte
la sinteza proteinelor proprii i serice.
Restul aminoacizilor din fond este distribuit cu
sngele celorlalte esuturi.
Absorbia aminoacizilor prin difuzie este limitat.

Transportul este mediat de proteine specializate
translocaze.
Exist cteva translocaze de grup ce transport
aminoacizii cu o structur analoag:
aminoacizi neutri cu molecule mici;
aminoacizi neutri cu molecule mari;
aminoacizi bazici;
aminoacizi cu caracter acid;
prolina.
Modelul heterodimeric al transportatorului aminoacizilor
Translocazele n multe privine seamn cu
enzimele: posed fenomenul de saturare cu
substrat, sunt sensibile la aciunea unor inhibitori.
Aminoacizii din grupe concureaz pentru
locusurile de fixare n translocaze absorbia
leucinei diminueaz absorbia izoleucinei i
valinei.
Lizina inhib absorbia argininei.
Dup alimentare, concentraia maxim de
aminoacizi n snge ajunge la 60 min. crete
intensiv abundena azotului peptid n snge.
Deseori proteinele native prin mucoasa
intestinal trec n snge.
Nou-nscuii conin n snge anticorpii colastrei
laptelui, fapt cauzat de o protein inhibitor
puternic al tripsinei, favorizat de concentraia
mic a enzimelor proteolitice n intestinul
copiilor, ce n final determin absorbia unor
cantiti mici de proteine.
i deci sunt suficiente pentru sensibilizarea
organismului cauza idiosincraziei la proteinele
alimentare (ou, lapte).
Vag rmne transportul peptidelor n snge la
holer, botulism, difterie etc.
Transportul aminoacizilor n celule este asigurat
de funcionarea ciclului -glutamilic activ n
intestin, creier, rinichi, glandele salivare.
n ciclu particip tripeptidul - glutation
(-glutamilcisteinilglicina) propriu tuturor
celulelor.
Rolul-cheie l joac enzima membranar
-glutamiltransferaza care iniiaz cataliza.
n calitate de donator al grupei -glutamil poate
servi oricare alt -glutamil peptid.
Toi aminoacizii pot servi ca acceptori, cu
excepia prolinei.
La transportul aminoacizilor, din exterior n
interiorul celulei se utilizeaz energia hidrolizei
legturilor peptidice ale glutationului, care apoi
regenereaz ntr-o secven de reacii
consecutive.
Membrana
R CH COOH
NH
2
R
CONH CH COOH
(CH
2
)
2
CH NH
2
COOH
R CH COOH
NH
2
NH
COOH
O
COOH
(CH
2
)
2
CH NH
2
COOH
CH NH
2
COOH
CH
2
SH
CONH CH
COOH
(CH
2
)
2
CH NH
2
COOH
CH
2
CH
2
SH
CONH CH
(CH
2
)
2
CH NH
2
COOH
CH
2
CH
2
SH
HOOC
CONH
NH
2
CH
2
COOH
CH
2
SH
H
2
N CH CONH CH
2
HOOC
-glutamil transferaza
-glutamil aminoacid
ATP
ADP + P
i
ATP
ADP + P
i
Cistinilglicina
Glutation
Glutation
sintetaza
-glutamilcisteina
Glicina
Cisteina
Aminoacid intracelular
5-oxiprolina
Acid glutamic
-glutamilcistein-
sintetaza
5-oxiprolinaza
-glutamilciclo-
transferaza
Peptidaza
ATP
+
H
2
O
ADP + P
i
Mecanismul de transfer
al aminoacizilor n celul
Ciclul -glutamil pentru transportul aminoacizilor
Aadar pentru transportul aminoacizilor n
celul e utilizat energia a trei legturi
macroergice de ATP.
Transportul intracelular al aminoacizilor este
asigurat i de transportatori membranari
specifici, funcia crora este reglat de insulin.
Majoritatea sunt sisteme de cotransport cu ioni
de sodiu, utiliznd energia ATP .
Sistemul A este specific pentru aminoacizii
aromatici i Ala, Ser i Gly.

Sistemul ASC intervine n transportul Ala, Ser i
Cys.
Aminoacizii bazici sunt transportai de sitemul
B+, iar cei cu caracter acid de sistemul X.
Sistemul N, prezent la nivelul hepatocitelor,
asigur transportul Gln, Asn i His.
Independent de pompa Na
+
funcioneaz
sistemul L, care intervine n transportul
aminoacizilor ramificai.

Concentraia aminoacizilor n plasm e de 0,35
0,65 g/L.
Aminoacizii sngelui sunt momentan asimilai
de esuturi i oragne (ficat, rinichi).
Alte organe le absorb mai selectiv.
Sunt descrise unele afeciuni ereditare,
caracterizate prin malabsorbia aminoacizilor.
Transportatorii intestinali sunt similari celor
localizai la nivelul tubilor renali i deci
anomaliile metabolice afecteaz i reabsorbia
tubular a aminoacizilor.
Afeciunile se manifest prin prezena n exces
n urin a anumitor aminoacizi.
n maladia Fanconi cauzat de anomaliile
reabsorbiei renale a aminoacizilor, fosfatului i
glucozei se depisteaz acidoz, semne de
rahitism i aminoacidurie generalizat.
Un sindrom de malnutriie proteic manifestat
prin retard de cretere, hipotonie muscular,
organomegalie i osteoporoz se instaleaz la
eliminarea marcat a lizinei aminoacid
esenial.
Cauza este afeciunea genetic, cu deficitul
transportatorului i pentru ali 3 aminoacizi
arginina, ornitina i cisteina.
Transportul aminoacizilor n celul
Metabolismul intracelular al aminoacizilor
necesit transportul lor prin membrana celular.
Transportul L-aminoacizilor mpotriva
gradientului de concentraie este un proces activ,
combinat cu sistemul de transport Na
+
-dependent,
ca i pentru glucoz.
Cel puin se cunosc cinci sisteme de transport
pentru aminoacizi n rinichi i intestine.
Ele transport aminoacizi neutri, aminoacizi
acizi, aminoacizi bazici, ornitina i cistina i,
respectiv, glicina i prolina.
n sistemul de transport dat, aminoacizii pot
rivaliza transportul (de ex., fenilalanina cu
triptofanul).
D-aminoacizii sunt transportai prin difuzie
simpl favorizai prin gradientul de concentraie.
Defectele motenite n transportul aminoacizilor
afecteaz celulele epiteliale ale tractului
gastrointestinal i tubilor renali.
Unele afecteaz transportul aminoacizilor neutri
(Boala Hartnup), altele a aminoacizilor bazici i
ornitinei i cistinei (cistinuria) sau glicinei i
prolinei.
Cistinoza este un defect de transport intracelular,
caracterizat de coninutul intralizozomal nalt de
cistin liber n sistemul reticuloendotelial,
mduva osoas, rinichi i ochi.
Dup degradarea proteinei (endocitoz) pn la
aminoacizii n lizozomi, aminoacizii sunt
transportai n citozol.
Msurarea activitii -GT serice are
semnificaie clinic.
Enzima este prezent n toate esuturile, dar
nivelul cel mai nalt este n rinichi; cu toate
acestea, enzima seric i are originea n
sistemul hepatobiliar.
Nivele ridicate de -GT seric sunt gsite n
urmtoarele dereglri:
obstrucia biliar intra- i posthepatic (-GT
seric mrit, ct i aminopeptidaza leucinic, 5-
nucleotidaza i fosfataza alcalin);
Cancerul pancreatic, n special, cnd este asociat
cu obstrucia hepatobiliar; boal hepatic
alcool-indus (-GT seric poate fi perfect
senzitiv la insultul hepatic indus de alcool) i
unele carcinome prostatice (serul la brbaii
normali are activitate 50% mai nalt dect la
femei).
De asemenea o activitate sporit este
indentificat la pacienii ce necesit fenobarbital
sau fenitoin, posibil, datorit induciei -GT n
celulele hepatice de ctre medicamente.
Fondul metabolic comun al aminoacizilor
Fondul metabolic comun al aminoacizilor
sanguini e de origine proteic alimentar,
susinut de hidroliza proteinelor tisulare, precum
i de sinteza lor endogen din compui de natur
neproteic.
n acest fond nu exist distincie de origine.
Fiecare esut i extrage tipul i cantitatea de
aminoacizi necesari momentului potrivit.
S-a mai constatat c n procesul evolutiv
organismele animalelor pierd capacitatea de a
sintetiza catene hidrocarburice pentru unii
-cetoacizi, corespondeni ai anumitor
aminoacizi i componente eseniale ale
majoritii proteinelor.
S-a demonstrat experimental pe obolani c este
indicat un anumit raport ntre coninutul acestor
aminoacizi indispensabili pentru creterea
optim.
Dac se ia cantitatea de triptofan ca msur
relativ de referin egal cu 1, apoi pentru
urmtorii aminoacizi ea se egaleaz cu: Lys 4;
Leu 4; Val i Phe 3,5; Met 3; Ile, Thr 2,5;
His 2; Arg 1.
Aproximativ acelai raport dintre aminoacizii
eseniali e caracteristic i organismului uman.
S-a stabilit c insuficiena unui aminoacid
deregleaz i absorbia celorlali.
n cazurile date e valabil legitatea de minimum
a lui Liebig: evoluia organismelor vii e
determinat de acea substan esenial, ce e
absorbit din alimente n cantiti mai mici.
n natur aproape c nu dinuie proteine de
valori incomplete.
Iat de ce trebuie s difereniem proteinele mai
valoroase de cele mai puin valoroase, adic de
calitate inferioar.
n general valoarea biologic a proteinelor e
apreciat dup gradul lor de asimilare i
compatibilitate n organism, de relaia dintre
componena aminoacidic a proteinelor utilizate
i gama aminoacizilor din proteinele
organismului.
Zeina proteina din porumb de exemplu nu
conine lizin i triptofan.
Surplusul de aminoacizi, comparativ cu
suficientul necesar pentru organism (spre
deosebire de acizii grai, glucoz) nu poate fi
depozitat i nici eliminat din organism; acest
surplus este consumat n calitate de combustibil
metabolic.
Procesul se iniiaz n urmtoarele cazuri:
1. Dac aminoacizii eliminai la o regenerare
normal a proteinelor nu se utilizeaz la sinteza
moleculelor lor.
2. Dac organismul ar asimila din alimente mai
muli aminoacizi dect necesit.
3. n inaniie sau diabet zaharat, cnd lipsesc
glucidele sau e dereglat asimilarea lor.
Fondul comun de aminoacizi echilibrat dup
necesitile organismului este utilizat n
biosinteza proteinelor.
Sinteza are loc la nivelul ribozomilor prin
traducerea informaiei genetice, vehiculate de
mRNA.
Sunt descrise afeciuni generalizate ale sintezei
proteinelor cauzate de malnutriie proteic
(sindromul Kwashiorkor) sau de malnutriie
proteincaloric.
Aceste maladii sunt caracterizate prin: reducerea
marcat a masei musculare, diminuarea
concentraiei proteinelor plasmatice (cauznd
edeme), hipotonie, astenie etc.
Consecine clinice majore se depisteaz i n
dereglrile atarii lanurilor oligozaharidice
(sindromul de hipoglicozilare) n procesul de
maturizare a glicoproteinelor.
Se manifest prin retard psihomotor i
neurologic, anomalii osoase i hipotonie
muscular, cu deces n primii ani de via.
Anomaliile sintezei unei anumite proteine
constituie un numr major de boli monogenetice
(peste 600).
La mutaiile sintezei unei proteine enzimatice,
receptorului sau unui transportator, afeciunea se
ncadreaz n grupul erorilor nnscute de
metabolism (peste 500 descrise la moment).
O surs de aminoacizi ai fondului metabolic
comun este proteoliza citoplasmatic sau
lizozomal.
Prima predomin n muchi, cealalt n ficat i
sistemul macrofagal.
Strile caracterizate prin amplificarea proteolizei
(hipercatabolice) sunt declanate de aciunea
hormonilor respectivi (catecolamine, cortizol,
citokine) ca rspuns la situaii extremale
(traume, oc, intervenii chirurgicale, arsuri,
infecii etc.).
De rnd cu biosinteza proteinelor exist i alte
ci metabolice n care sunt implicai
aminoacizii.
De asemenea funcioneaz ci comune ale unor
grupe de aminoacizi.
Prin implicaiile lor multiple, o deosebit
importan au procesele de dezaminare,
transaminare, decarboxilare.
Catabolismul grupelor amino
Decarboxilarea asigur formarea unei game
largi de amine biogene.
Transaminarea constituie o etap-cheie n
catabolismul i anabolismul aminoacizilor.
Grupele SH i OH ofer aminoacizilor
respectivi o serie de particulariti metabolice.
Sinteza fosfoadenozin-fosfosulfatului (PAPS)
Catabolismul are drept scop furnizarea energiei
i a unor componente structurale celulelor
imuncompetente i altor compui, ce au ca rol
susinerea funciilor vitale n condiiile unui
aport caloric limitat i regenerarea esuturilor
lezate.
n faza acut a inflamaiei crete nivelul
plasmatic al complementului, fibrinogenului,
proteinei C i se diminueaz concentraia
plasmatic a albuminei.
Soarta amoniacului
Format prin intermediul multiplelor ci
metabolice, este un compus deosebit de toxic.
Evolutiv amoniacul se utilizeaz:
1. O parte din NH
4
+
format la degradarea
aminoacizilor este reutilizat la biosinteza
compuilor azotai.
2. Surplusul de NH
4
+
la majoritatea vertebratelor
este transformat n uree i excretat din
organisme.
3. Psrile i reptilele terestre transform NH
4
+
n
acid uric pe care l elimin.
4. Animalele acvatice l secret sub form de
NH
4
+
.
NH
4
+
se formeaz n organismele animalelor, n
majoritatea cazurilor, pe calea transdezaminrii.
Amoniacul produs n intestin (sub aciunea
florei microbiene la degradarea proteinelor) este
absorbit i transportat prin sistemul-port spre
ficat.
Numai o cantitate forte mic de NH
4
+
este
dislocat n snge n form liber, fapt reflectat
de concentraia plasmatic redus: 10-20 mg la
100 mL.
Cea mai mare parte este sub form de glutamin
reacie catalizat de glutamin sintetaz, o
enzim localizat n toate celulele:

COO
-
HC NH
3
+
(CH
2
)
2
COO
-
NH
4
+
+
COO
-
HC NH
3
+
(CH
2
)
2
C O
H
2
N
ATP
ADP + Pi
Mg
2
+
E
Acidul glutamic
Glutamina
Transportul NH
4
+
n aceast form justific
concentraia plasmatic majorat de 3-5 ori a
glutaminei fa de ceilali aminoacizi.
Glutamina, substana neutr, netoxic penetreaz
uor membranele celulare.
n ficat i rinichi, sub influena glutaminazei, are
loc hidroliza ireversibil a glutaminei n glutamat
i NH
4
+
, din care se sintetizez ureea; 80-90% din
coninutul total de amoniac sunt transformate n
compusul vizat i eliminat prin urin.

Ureea se formez n cadrul unei secvene ciclice
de reacii tradiionale, denumite ciclul
ureogenetic sau Krebs Henseleit.
+
C NH (CH
2
)
3
NH
3
COO
-
O
H
2
N
CH
L-citrulina
Pi
CH CH
2
COO
- -
OOC
+
NH
3
L-aspartat
ATP
AMP + PPi
CH
2
COO
-
NH
C
NH
2
(CH
2
)
3
COO
-
NH
3
+
+
Argininosuccinat
HC N
H
HC
COO-
-
OOC
COO
-
Fumarat
H
H C
C
H
2
N C
NH
2
NH
(CH
2
)
3 CH COO
-
NH
3
+
+
L-arginina
Argininosuccinatliaza
Argininosuccinatsintetaza
NH
2
H
2
N
Ureea
C
O
H
2
O
Arginaza
+
+
NH
3
(CH
2
)
3
HC NH
3
COO
-
L-ornitina
Carbamoil fosfat sintetaza
L-ornitin-
carbamoil
transferaza
Mitocondria
Citozol
L-ornitina
NH
4
HCO
3
-
2ATP
+ +
2ADP + Pi
H
2
N C
O O
O
O
-
P O
-
Carbamoil fosfat
Ciclul ureogenetic (Krebs-Henseleit)
L-citrulina
Corelaia intre ciclul ureogenetic i ciclul Krebs
Amoniacul e foarte toxic pentru organismul
uman.
Efectul toxic al amoniacului se explic prin
concentraia mare de ioni de amoniu, ce
dezechilibreaz reacia catalizat de glutamat
dehidrogenaz, cu formarea glutamatului.

Acesta epuizeaz concentraia de -cetoglutarat
produs intermediar al ciclului Krebs, cu
reducerea reaciilor de generare a ATP, ce
deregleaz, n primul rnd, funcia creierului.
Ultima reacie e nsoit de crearea unui produs
intermediar macroergic fixat de enzim
(glutamil-5-fosfat). Centrul activ al glutamil
sintetazei, adiionnd NH
4
+
, formeaz glutamina,
cu eliberarea fosfatului.
Cile majore de transport a
amoniacului dup proteoliza muscular
Hiperamonemiile
Sunt cauzate de ctre erorile nnscute ale
ureogenezei i acidemiilor organice, imaturizarea
ficatului (hiperamonemia trectoare a nou-
nscutului).
Hiperamonemiile neonatale sunt caracterizate
prin vom, letargie, lipsa apetitului, atacuri de
aproplexie i com.
Defectele descrise pot fi identificate prin
msurrile de laborator corespunztoare.

n cazuri acute de hiperamonemie, ndeprtarea
excesului de amoniac prin dializ este o terapie
eficace.
n situaiile respective este important de a
interzice ingestia de proteine.
Au fost elaborate metode de tratament i s-a
artat a fi eficace perioade ndelungate de timp,
ce sunt bazate pe excreia de azot n forme
diferite de uree.
CH
3
C
O
~
+
SCoA
+
COO
-
CH CH
2
CH
2
COO
-
NH
2
CH
3
C
O
NH CH
COO
-
(CH
2
)
2 COO
-
HCO
3
-
NH
4
H
2
N C
O
O P
O
-
O
-
O
HSCoA
N - acetilglutamat sintaza
Carbamoil fosfat sintetaza I
2ATP 2ADP P
i
N-acetilglutamat
Sinteza N-acetilglutamatului i rolul lui
de activator n sinteza carbamoil fosfatului
Deficiena activitii enzimelor ciclului ureic
Chiar i eliminarea normal de azot i prevenirea
amonemiei toxice necesit funcionarea ciclului
ureic.
Copiii nscui cu deficien total a uneia sau mai
multor enzime al ciclului supravieuiesc, doar cel
mult cteva zile.
Multe deficiene enzimatice identificate sunt
pariale; se sugereaz ideia, c enzimele n cele
mai multe cazuri au probabil alterate valorile K
m
,
mai mult dect valorile V
m
.
Sunt cunoscute cazuri de deficien n fiecare
enzim a ciclului uric.
ntreruperea ciclului n orice punct afecteaz
metabolismul azotului pentru c, unii dintre
intermediari pot difuza din hepatocite, se
acumuleaz n snge, i trec n urin.
De aceea simptomologia, pronosticul i
tratamentul este diferit pentru fiecare deficien
enzimatic.
n general acestea sunt patologii grave cu indici
mrii de retard mintal, piticism, com i moarte
precoce.
Deficiena n carbomoilfosfat sintetazei (tip I):
Dieta cu proteine puine suplimentate cu arginin
a fost folosit n baza ipotezei c activarea
sintezei N-acetilglutamat de ctre arginin ar
stimula indirect nivelul sczut de carbamoilfosfat
sintetaz capabile s asigure ndeajuns
funcionarea ciclului uric.
n general, aceast deficien este asociat cu
retard mintal, letargie, com, vom, exitus dup
natere care poate fi consecin indirect a
perioadelor de hiperamoniemie necontrolat.
Deficiena n N-acetilglutamat sintetaza:
S-a depistat hiperamonemie i
hiperaminoacidemie generalizat la un nou-
nscut al crui ficat era incapabil de sinteza
N-acetilglutamatului.
n acest caz metabolismul normal al azotului era
meninut printr-o diet srac n proteine i
administrare de carbamoilglutamat, un analog al
N-acetilglutamatului ce este i un activator al
carbamoilfosfat sintetazei.
Deficiena n ornitin transcarbamoilaz (tipII):
Analiza genetic n deficien a ornitin
transcarbamoilazei, indic faptul c gena este
localizat pe cromozomul X.
Din aceast cauz brbaii sunt mai afectai ca
femeile, care sunt asimptomatice, ca
heterozigoi.
Pacienii cu deficiena OCT pot fi identificai la
administrarea bucal a unei singure doze de
alopurinol, urmat de determinarea excreiei
orotidinei.
Principiul fundamental al acestei probe const n
acumularea carbamoil fosfatului
intramitocondrial la OCT heterozigoi, acesta
difuzeaz n citoplasm, stimulnd biosinteza
pirimidinelor. Unul dintre intermediarii n
aceast cale orotidina se acumuleaz i duce
la orotidinurie.
Sensibilitatea acestui test este mrit de fluxul n
calea de biosintez a pirimidinelor. Sporirea
fluxului este realizat de ctre alopurinol, care
prin calea oxipurinol ribonucleotidei inhib
formarea produsului final uridin 5-fosfat (UMP)
n biosinteza pirimidinelor.
Corelaia metabolic ntre sinteza mitocondrial a carbamoil fosfatului
la formarea ureei i canalului carbamoil fosfat n sinteza pirimidinei
Diagnozele prenatale pot fi realizate de ctre
probele enzimelor corespunztoare i analiza de
DNA.
Hiperamonemie neonatal acut, indiferent de
cauz, este un pericol medical i necesit
micorarea imediat i rapid a nivelelor de
amoniu pentru a preveni efectele serioase la
nivelul creierului.
Msurrile includ hemodializa, transfuzia,
dializa peritoneal i administrarea hidrocloridei
argininei.
O terapie adecvat const n restricia dietei de
proteine i administrarea -ceto analogilor
aminoacizilor eseniali, ce reduce preluarea
total de azot i distrage azotul de la excreia
spre aminoacizii eseniali necesari sintezei
proteice.
Completarea argininei ca precursor al ornitinei
este esenial n ciclul ureei.
Devierea azotului de a produce altceva dect
uree este obinut prin administrarea benzoatului
de sodiu sau fenilacetatului de sodiu (sau de
calciu), care pot nlocui formarea ureei i
preveni amonemia toxic, conjugatele (amide)
sunt rapid eliminate n urin.
Reaciile ce formeaz aceste amide, au fost
crezute a fi importamte doar ca mijloc de a
elimina acizii organici strini ca acidul hipuric i
fenilacetilglutamin.
n capitolele respective sunt descrise reaciile
cum glicina poate fi format n cantiti mari din
majorele fonduri comune metabolice.
Glutamina este de asemenea valabil folosit ct
timp reaciile anaplerotice menin necesarul de
-cetoglutarat.
Cu menajeri atente reaciile de detoxifiere prin
utilizarea benzoatului i a fenilacetatului pot
nlocui formarea ureei i preveni amonemia
toxic, conjugatele sunt rapid eliminate n urin.
Un tratament adiional ce minimalizeaz
amonemia toxic este substituia n diet a
-cetoanalogilor ctorva aminoacizi; aceasta
reduce preluarea total de azot i distrage azotul
de la excreie spre aminoacizi eseniali necesari
pentru sintezele proteice.
Crete de asemenea i acidul orotic,
presupunmdu-se c carbamoilfosfatul nu poate fi
folosit pentru a forma citrulina, difuzeaz n
citozol, unde condenseaz cu aspartatul,
favoriznd n final sinteza orotatului.
Aceasta confirm c sinteza normal de orotat
este limitat n citozol de carbamoilfosfat
sintetaza II i c producia n exces a
carbomoilfosfatului menit pentru sinteza de uree
trece de normalul mecanism de control.
Acidul hipuric este secretat rapid pentru c
compensarea acestuia este de cinci ori mai mare
dect viteza de filtrare glomerular a acesteia.
Azotul glicinei deriv din amoniul dintr-o reacie
complex care utilizeaz CO
2
, NADH, N
5
, N
10
-
metilentetrahidrofotal (surs a unei singure
uniti de carbon) i piridoxal fosfat, catalizat de
ctre glicin sintaza mitocondrial (glicina
cliveaz enzima).
Administrarea fenilacetatului sau fenilbutiratului
mrete excreia fenilacetilglutaminei.
Excreia fenilacetilglutaminei produce pierderea
a doi atomi de azot.
Deficiena NAG sintazei nu poate fi tratat prin
administrarea NAG-ului, pentru c NAG sufer
inactivarea citozolic prin deacilare i nu este
prompt permeabil peste membrana
mitocondrial intern.
Un analog al NAG-ului, N-carbamoilglutamat,
activeaz CPSI, nu distribuie proprieti
nedorite ale NAG i ar fi efectiv n
administrarea acestei deficiene.
Deficiena n argininosuccinat sintetaz:
Incapacitatea de a continua ciclul uric prin
condensarea citrulinei cu aspartatul, determin
acumularea citrulinei n snge i excreaia sa n
urin.
n unele cazuri o majorare a azotului excretat
poate fi sub form de citrulin.
n intenia de a reduce aportul de azot, terapia
necesit o suplimentare specific de arginin
pentru sinteza proteinelor i formarea creatinei i
ornitinei, care de asemenea au i alte roluri, nu
numai n sinteza ureei.
Deficiena n argininosuccinat liaza:
Incapacitatea de a scinda argininosuccinatul
pentru a forma arginina, se aseamn cu
deficiena argininosuccinat sintetazei.
n acest caz argininosuccinatul este excretat n
cantiti mari.
Din motive neclare severitatea simptomelor
acestei boali variaz foarte mult, astfel fiind greu
de evaluat efectul terapiei.
Totui, restricia alimentar a azotului, excreia
alternativ de azot prin administrarera de benzoat
i fenilacetat, suplimentarea de arginin par a fi
folositoare.
Deficiena n arginaz:
Este o patologie rar ce cauzeaz anomalii n
dezvoltarea i funcia SNC.
Astfel arginina se acumuleaz i este excretat; la
fel ca i precursorii argininei i produii
metabolismului argininei.
O parte din uree de asemenea este excretat, fapt
atribuit unui tip secundar de arginaz, depistat n
rinichi.
Prin cantiti mici de azot n diet incluznd
aminoacizi eseniali, cu excepia argininei, sau n
unele cazuri folosind cetoanalogii n locul
aminoacizilor eseniali se obin rezultate
favorabile ca i adaosul de benzoat de sodiu.
Cea mai obinuit cauz a hiperamonemiei la
aduli este boala ficatului (de ex., datorit
abuzului de etanol, infecie sau cancer).
Abilitatea de a detoxifica amoniacul este
micorat n proporii de severitatea daunei.
n boli avansate (de ex., ciroze), hiperamonemia
este sporit prin manevrarea sngelui portal care
transport amoniacul de la tractul intestinal i
alte organe interne la circulaia sanguin
sistemic (traversnd ficatul) i duce la
encefalopatie portal-sistemic.
n plus la restricia dietei de proteine, creterea
colonial a bacteriilor trebuie s fie supresat de
ctre antibiotice i administrarea lactulozei - o
dizaharid neasimilabil.
Bacteriile tifoide catabolizeaz lactuloza la acizi
organici care convertesc NH
3
la NH
4
+
, astfel
micornd absorbia NH
3
n circulaia portal.
Catabolismul lactulozei, de asemenea, duce la
formarea particulelor osmotic active care atrag
apa n interiorul colonului, produc scaun acid i
permit pierderea amoniacului ca ioni de amoniu.
Lactuloza
(4-O--D-galactopiranozil--D-fructofuranoza)