Microbiologie, Virologie,

Imunologie
www.microbio.ucoz.com
ef catedr - Valeriu RUDIC
profesor, academician
Valentina VOROJBIT
d. . m., confereniar

ntroducere n microbiologie.
Metodele microbiologice de
diagnostic.
Clasificarea i nomenclatura
microorganismelor.
Morfologia bacteriilor.

Microbiologie (mikros bios logos mic,

viu, studiu). Microbiologia studiaz
microorganismele i activitile lor.
Microorganisme / microbi organisme
microscopice, cu dimensiuni de ordinul m
(10-6 m) sau nm (10-9 m).
Mi/o reunesc bacteriile i alte tipuri de
organisme: alge, ciuperci microscopice
(fungi, micete), protozoare, virusuri i
agenti subvirali, de ex. prioni.
Termenul microb a fost utilizat n 1878
de chirurgul francez Charles-Emmanuel
Sedillot.

LUMEA MICROBIAN

Vrsta (3,5 mlrd ani!!!)

Abundena i diversitatea
60% din biomas;
ap, aer, sol - scoara terestr la 15 km!, surse termale la 100
grade C;
5500 specii descrise mai puin de 1% din apr. 106 specii
necultivabile n laborator
Informaia genetic
genomul Pseudomonas aeruginosa - 5000 gene,
diversitate genetic superioar eucariotelor, schimb intens de
material genetic
Sisteme eficiente de percepere a lumii, comunicare i
adaptare la condiii variate ale mediului

Microbiologia studiaz:
forma mi/o
structura
nutriia
metabolismul
creterea i multiplicarea mi/o (pentru a le
identifica)
urmrete relaiile mi/o cu organismelegazd i cu mediul ambiant

DE CE STUDIEM MICROORGANISMELE?

Studiul mi/o utile, inofensive

Producerea antibioticelor
Obinerea medicamentelor (streptokinaza, insulina), vaccinurilor,
etc. prin tehnologii de ADN recombinant
Producerea alimentelor: unt, brnz, cacaval, chefir, yaurt, oet,
alcool, cacao, cafea, etc.
Rol de insecticide biologice
Fabricarea plasticului biodegradabil
Descompunerea deeurilor i metanului
Extragerea metalelor din minerale (Cu, Au, Li, etc)
Asigurarea rolului major n ciclurile geochimice, etc

Studiul mi/o patogene i oportuniste

- Prevenirea i controlul maladiilor infecioase

Disciplinele microbiologice n raport cu:

Particularitile biologice ale mi/o:
Algologia, Protozoologia, Micologia,
Bacteriologia, Virologia
Aplicaia practic: Microbiologia medical
(umana, veterinar), industrial, alimentar,
agricol, etc
Habitatul: Microbiologia solului,
Microbiologia marin, Microbiologia
cosmic, etc
Taxonomia microbian
Genetica microbian
Ecologia microbian

MICROBIOLOGIA MEDICAL
STUDIAZ:
Relaiile dintre microorganisme i gazda lor
uman
Capacitile patogene ale mi/o
Capacitile antiinfecioase ale gazdei
Principiile i metodele diagnosticului
etiologic al infeciilor
Bazele terapiei antimicrobiene
Bazele profilaxiei antimicrobiene

METODELE MICROBIOLOGICE
DE DIAGNOSTIC

1.

2.
3.

DIAGNOSTICUL DIRECT
Const n detectarea agentului patogen, a
componentelor lui sau a unui produs (ex. toxina)
n prelevate de la bolnav sau din mediul extern
Examenul microscopic - studierea mi/o n stare
vie/nativ sau n frotiuri colorate. Este o metod
de orientare. Informeaza despre prezena
bacteriilor, forma lor, structura, numrul.
Depistarea antigenelor microbiene solubile n
lichide biologice (ser sangvin, LCR, urin)
Examenul bacteriologic izolarea pe medii
nutritive a culturilor pure de bacterii, care vor fi
identificate i testate la sensibilitate fa de
antibiotice

4. Examenul biologic (metoda

experimental) inocularea directa a
produsului patologic la animale de laborator
receptive. Mi/o se multiplic provocnd
maladia tipic. Din lichide biologice sau
esuturi afectate bacteria poate fi izolat i
identificat.
5. Identificarea ADN sau ARN microbian
prin tehnici de biologie molecular


1.

2.

DIAGNOSTICUL INDIRECT (imunologic)

Serodiagnosticul depistarea i titrarea
anticorpilor specifici n serul bolnavului. Ei
apar peste 7-10 zile de la debutul maladiei si
persist deseori dup vindecare
Intradermoreaciile (metoda alergic)
ntroducerea pe cale epidermic sau
intradermic a alergenului microbian i
apariia, peste 2-4 zile, a unei reacii celulare
locale (eritem, infiltrat). Reacia pozitiv
semnific o stare de hipersensibilitate
specific (ntlnire repetat cu acest agent)

CLASIFICAREA I NOMENCLATURA
MICROORGANISMELOR

1.
2.

3.

Lumea microbian este extrem de divers,

ceea ce determin necesitatea aranjrii lor n
grupe conform asemnrii lor.
Se disting 3 noiuni:
Taxonomie tiina despre clasificare
Clasificare aranjarea organismelor n grupe
sau taxoni n funcie de asemnri sau nrudiri
Nomenclatura numirea tiintific a grupelor
taxonomice conform unor reguli internaionale

Clasificarea fenotipic (prima tentativ Carl von Linne n

sec. XVII) - reunirea mi/o n baza caracterelor fenotipice
comune (caractere morfologice, de cultur, fiziologice,
biochimice, antigenice, etc)
Clasificarea genotipic
- Gradul de omologie a secvenelor nucleotidice ale ADN
microbian. Tulpinile cu gradul de omologie de cel putin 70 %
aparin unei specii, de 30 % - aceluiai gen, etc
- Gradul de omologie a secvenelor nucleotidice ale ARN
ribosomal
- Coninutul relativ de guanin+citozin (GC%) al ADN
purificat. La bacterii variaz ntre 25 i 75 %.
Clasificarea filogenetic
Determin locul mi/o ntr-un arbore filogenetic i se bazeaz pe
studiul fosilelor sau al HLA.

Principalele grupe taxonomice (taxoni)

Domeniu
Regn
Tip
Clas
Ordin
Familie
Gen
Specie (unitate fundamental)

n cadrul speciilor pot fi delimitai taxoni

infraspecifici (variante / tipuri), care prezint
diferene minore n activitatea biochimic sau
fiziologic (biovar), n structura antigenic (serovar),
n gradul de patogenitate (patovar), n sensibilitatea
la bacteriofagi (lizovar) sau la antibiotice
(antibiovar).
Pot fi utilizai ca markeri epidemiologici pentru
descifrarea unor focare epidemice (infecii
nozocomiale, toxiinfectii alimentare, etc)
Culturile microbiene ce aparin unei specii, dar sunt
izolate n laborator din diverse prelevate sau n
perioade de timp diferite reprezint tulpini
bacteriene (sue). Tulpinile corespund n general
caracterelor de specie, dar pot manifesta variaii
nesemnificative.

Conform ultimei clasificri internaionale ale

microorganismelor (Bergey's Manual of
Systematic Bacteriology, 2001) se disting:
I.
Forme acelulare (virusuri, viroizi, prioni)
II.
Forme celulare, repartizate n 3 domenii:
Bacteria procariote (bacterii adevrate,
eubacterii).
a)
Bacterii cu perete celular fin, gram-negative;
b)
Bacterii cu perete celular gros, gram-pozitive;
c)
Bacterii lipsite de perete celular (micoplasme)
Archaea procariote, perete celular fr
peptidoglican, cu habitat n condiii extremale
Eukarya eucariote. Include regnurile Fungi,
Animalia (subregnul Protozoa) i Plantae

Nomenclatura mi/o
Numirea mi/o este stabilit de ctre Comitetul
Internaional de Bacteriologie Sistematic.
Nomenclatura taxonilor are la origine un substantiv
grec sau latin, care definete cel mai evident caracter
al mi/o studiate, la care se adaug un anumit sufix
latin.
Ordinul Actinomycetales, Spirochaetales
Familia Enterobacteriaceae, Spirochaetaceae
Genul Staphylococcus, Leptospira, Clostridium,
Pseudomonas
Specia denumire binar (Gen + specie): Escherichia
coli, Staphylococcus aureus, Mycobacterium
tuberculosis, etc.

EXEMPLU:
Specia Escherichia coli
Genul Escherichia
Familia Enterobacteriaceae
Ordinul Enterobacteriales
Clasa Gammaproteobacteria
Tipul Proteobacteria
Domeniul - Bacteria

BACTERIOLOGIA GENERALA.
CELULA BACTERIAN

Bacteriile sunt organisme unicelulare

procariote autonome, cu dimensiuni ntre
0,2 i 10 m (Spirochaeta 250 m) i
care difer esenial de celulele eucariote
animale sau vegetale.

0
2
4

Mycoplasma genitalium 0,4 m

Staphyloccocus aureus 0,9 m
Haemophilus influenzae 1,2 m
Escherichia coli 1,5 m
Bacillus megaterium 4,0 m

8
10
12

Eritrocite 8,0 m

Celule eucariote

Celule procariote

Aparatul nuclear nucleu cu nucleoli, Molecul de ADN circular,

nconjurat de membran nuclear
lipsa membranei nucleare
Cromozomi cu structur complex, Structur
cromozomic
histone asociate, set diploid
simpl, set haploid
Celula se divide prin mitoz sau meioz

Diviziune binar

Lipsa peretelui celular (n caz de Prezena peretelui celular ce

prezen conine chitina sau celuloza)
conine
obligator
peptidoglican
Prezena organitelor celulare

Absena organitelor celulare,

citoplasma omogen, necompartimentat

2 tipuri de ribosomi n citoplasm i n Toi ribosomii sunt identici

mitocondrii sau cloroplaste
Coeficientul
de
ribosomului
80 S (citoplasma)
70 S (mitocondrii)

sedimentare

al 70 S (50S , 30 S)

MORFOLOGIA BACTERIILOR
Morfologic se disting 4 grupe de bacterii:
Forme sferice (coci)
Forme alungite, cilindrice (bastonae)
Forme ncurbate/spiralate
Bacterii polimorfe: Actinomyces, Rickettsia,
Chlamydia, Mycoplasma

Formele sferice (coccus)

n funcie de planurile de diviziune i poziia

celulelor-fiice dup diviziune, cocii prezint
urmtoarele moduri de grupare:

Diplococi (Diplococcus) perechi (neisserii bob de cafea, pneumococi - lanceolati)

Streptococi (Streptococcus) - lanuri
Tetracoci (Micrococcus) cte 4 celule
Sarcine (Sarcina) pachete din 8-16-32 coci
(sarcio a lega)
Stafilococi (Staphylococcus) grmezi
neregulate de coci (staphyle - ciorchine)

Formele alungite, cilindrice

(bastonae)

1. Bacterium bastonae cu capetele rotunjite,

nu formeaz spori (Mycobacterium,
Corynebacterium, enterobacterii, etc)
2. Bacillus bastonae mari cu capetele retezate,
formeaz spori ce nu depesc diametrul celulei
(ex.: Bacillus anthracis). Posibil aranjarea n
lanuri - streptobacili
3. Clostridium bastonae cu capetele rotunjite,
formeaz spori ce depesc diametrul celulei
(ex.: Clostridium tetani, Clostridium botulinum,
C. perfringens, etc)

Formele ncurbate (spiralate)

1. Vibrio (de la cuv. lat. vibrio - tremurtor)
bastonae ncurbate (1/2 spir, aspect
de virgul) (ex.: Vibrio cholerae)
2. Spirillum celule spiralate rigide Campylobacter, Helicobacter 2 spire,
aspect de pasre n zbor (ex.:
Campylobacter jejuni)
3. Spirochaeta celule spiralate, cu 5-25
spire, flexibile (ex.: Treponema,
Leptospira, Borrelia)

EXAMENUL MICROSCOPIC

1.

2.

Studiaz morfologia i structura bacteriilor,

precum i caracterele lor tinctoriale.
Examenului microscopic pot fi expuse lichide
biologice sterile (snge, LCR, lichid pleural),
precum i prelevate nesterile din cile respiratorii,
tubul digestiv, aparatul uro-genital, tegument,
urechi, ochi, etc
Examenul microscopic poate fi efectuat:
n stare nativ (preparate umede, necolorate:
ntre lam i lamel, pictur suspendat).
Studiaz morfologia, mobilitatea bacteriilor,
unele activiti (ex.: sporogeneza)
n frotiuri (preparate fixate i colorate)

Prepararea frotiului
1. Etalarea materialului microbian (produs
patologic, cultur microbian) n strat subire pe
suprafaa unei lame de sticl degresat
2. Uscarea
3. Fixarea (termic, chimic). Omoar microbii i
marete afinitatea lor pentru colorani
4. Colorarea. Asigur contrastul dintre microbi i
fondul preparatului
5. Examinarea frotiului la microscopul optic cu
imersie

Caracter tinctorial capacitatea bacteriilor

de a fixa diferii colorani
Coloranii bazici (violetul de genian sau
de metil, fucsina bazic, albastrul de metilen,
vezuvina, chrizoidina, etc) au afinitate pentru
structurile acide ale celulei bacteriene
Tipuri de coloraii: simple, complexe
(difereniale, speciale)

ETAPELE ISTORICE DE EVOLUIE

A MICROBIOLOGIEI
I EMPIRIC (pn n sec. XV)
Hippocrate considera c maladiile infecioase sunt cauzate de
modificarea aerului prin miasme
Girolamo Fracastoro, de la Universitatea din Padua, a presupus
existena unei seminaria contagiosus , mi/o infectante, capabile s
se multiplice
II MORFOLOGIC (sec. XVI XVIII)
Antonie van Leeuwenhoek, 1673 prima observare i descriere a
mi/o
III - FIZIOLOGIC (sec. XIX)
Theodor Schwann i Frantz Schultze discrediteaz teoria generaiei
spontane. Louis Pasteur, Robert Koch confirm teoria germenilor.

Louis Pasteur a demonstrat specificitatea

proceselor fermentative (bolile vinului), a
identificat agenii cauzali ai bolii viermilor de
mtase, a preparat vaccinuri eficiente pentru
prevenirea turbrii, antraxului, holerei ginilor, a
susinut necesitatea sterilizrii instrumentelor,
bandajelor, etc.
Robert Koch a utilizat frotiul, a ntrodus
mediile de cultur solide, a izolat agentul
antraxului i al tuberculozei. Autor al teoriei de
confirmare a rolului etiologic al unui mi/o
(postulatele lui Koch)

Ilia Mecinicov argumenteaz rolul antagonist al

florei intestinale normale, a descoperit fagocitoza
i rolul inflamaiei n aprarea antimicrobian.
Alexander Fleming descoper penicilina
Emil Roux propune mediul de cultivare a agentului
difteriei, obine i utilizeaz serurile imune antitoxice
contra difteriei, fondator al imunitii umorale
Victor Babe fondator al microbiologiei n Romnia,
autor al primului manual de microbiologie. Studiaz
rabia.
Ion Cantacuzino a studiat patogeneza holerei,
tuberculozei, vaccinul i vaccinarea antiholerica.
Fondatorul colii de microbiologie din Romnia