Circuitul azotului

Azotul este un element care are un rol foarte important n alctuirea substanelor organice (n
compoziia proteinelor, acizilor nucleici). El se gsete n natur, n humus, n organismele vii sau
moarte, n microorganisme etc. Rezerva de azot cea mai mare n natur o reprezint ns azotul
molecular din atmosfer, circa 80.000 tone N2 deasupra fiecrui hectar de pmnt (circa 77% din
greutatea atmosferei). Plantele superioare i animalele, ca i majoritatea microorganismelor, nu pot
asimila azotul sub aceast form pentru sinteze proteice. Unele bacterii i alge au acest posibilitate,
reuind astfel s introduc azotul atmosferic n circuitul biologic.
Cea mai mare parte a azotului din sol, care particip n circuitul biologic, se gsete n
compuii cu azot, de origine vegetal sau animal. Acetia sunt transformai de microorganisme
(bacterii i ciuperci) n cursul mineralizrii n compui anorganici, amoniac (NH3), nitrii (NO2-),
nitrai (NO3-), care sunt preluai din nou de plantele autotrofe, asigurnd astfel circuitul biologic al
azotului n natur i, prin aceasta, viaa pe Pmnt.
Coninutul de azot organic al solului este n funcie de tipul pedoclimatic (0,020-0,050% N =
slab aprovizionat; peste 0,20 % N = bine aprovizionat). Majoritatea azotului organic din sol se
gsete sub form de aminoacizi, ca proteine sau pectide.
n acizii humici ai solului, azotul organic reprezint 50-60% din cantitatea total, din care
circa 50% nu se elibereaz prin hidroliz.
Azotul anorganic din sol se gsete sub forma unor compui, cum sunt srurile de amoniu
(NH4+), nitrai (NO3-), nitrii (NO2-), sub form gazoas ca: protoxidul de azot (N2O), monoxidul
de azot (NO), dioxidul de azot (NO2) i chiar azotul molecular.
Concentraia de nitrai din sol depinde de: umiditate, aeraie, planta de cultur, capacitatea de
mineralizare i imobilizare a solului etc.
Circuitul azotului n sol poate fi mprit n urmtoarele faze:
Fixarea biologic, cnd N2 gazos din atmosfer, sub aciunea microorganismelor fixatoare de
azot, trece n sol sub form organic. n sol se mai gsete N proteic provenit din resturile vegetale
i cadavrele animale.
Amonificarea const n procesul de mineralizare a substanelor componente ale esuturilor
moarte (datorit microflorei proteolitice i amonificatoare) i eliberarea azotului sub form de
amoniac (NH3).

Nitrificarea este procesul n urma cruia amoniacul (NH3) este oxidat ntr-o prim etap la nitrit
(NO2-), de nitritbacterii, pentru ca n urmtoarea faz nitratbacteriile s oxideze nitritul n nitrat
(NO3-).
Denitrificarea este ultima faz, cnd o parte din nitrai (NO3-) se pierde prin reducerea lor de
ctre microorganisme la nitrii (NO2-), amoniac (NH3) i chiar azot gazos (N2), care se ntoarce din
nou n atmosfer.
Bacterii fixatoare de azot
Fixare liber
Fixarea simbiotic
Aerobe
Anaerobe
Legume
Alte plante
Clostridium
Azotobacter
Desulfovibrio
Frankia
Beijerinckia
Bacterii sulfuroase purpurii Rhizobium
Azospirillum
Klebsiella
bacterii nesulfuroase purpurii
bacterii sullfuroase verzi

Amonificarea
Amonificarea este procesul prin care microorganismele din sol degradeaz substanele
(moleculele) organice cu N i elibereaz azotul sub form de amoniac. n felul acesta, azotul din
compuii organici, inaccesibil plantelor, devine accesibil datorit amonificrii. S-a studiat
amonificarea unui mare numr de compui organici: proteine (i aminoacizi), acizi nucleici (i
nucleotide, nucleozide, baze purinice i pirimidinice), lipide i glucide cu N, creatinin, acid
hipuric, uree, alcaloizi etc.
Compuii de natur proteic sunt adui n stadiul de aminoacizi prin procesul de proteoliz, care
const n fragmentarea substanelor organice macromoleculare cu azot (proteice) datorit
exoenzimelor (proteaze). Proteazele sunt eliberate n sol de bacteriile din genurile Pseudomonas,
Flavobacterium, Bacillus, Clostridium, ca i de ciuper-cile Trichoderma, Aspergillus, Penicillium,
Mucor, Rhizopus.
Amonificarea are la baz reacia de dezaminare, care este n funcie de specia microbian i
condiiile de mediu i poate fi:
- dezaminare hidrolitic;
-

dezaminare hidrolitic urmat de decarboxilare;

dezaminare oxidativ, cu decarboxilare; dezaminare reductoare;

dezaminare reductoare cu decarboxilare, dezaminare cu desaturare;

dezaminare prin reacii de oxidoreducere ntre doi aminoacizi.

Amoniacul (NH3) produs n sol este, n parte, fixat de complexele argilo-humice, ceea ce
confer moleculei de amoniac o mai mare rezisten fa de aciunea microorganismelor
nitrificatoare i mpiedic levigarea azotului n sol. O alt parte din azot se fixeaz n plasma
celulelor microorganismelor, iar ceea ce a mai rmas este rapid oxidat formnd nitrii (NO2-) i
apoi nitrai (NO3-).
Mult amoniac se formeaz n urma descompunerii ureei i a altor compui azotoi organici
NH2
I
C = O + H2O

2 NH3 + CO2

I
NH2

2 NH3 + CO2 + H2O = (NH4)2CO2 + 12 cal

uree

Ali compui organici azotoi se descompun foarte greu - substanele humice din sol, care
formeaz diferite fraciuni ale humusului. Acest complex opune o mare rezisten fa de
descompunerea microbian.
Amoniacul, format prin descompunera substanelor organice cu azot, poate fi utilizat n
procese biotice i abiotice.
n procesele biotice, amoniacul (NH3), respectiv srurile de amoniu (NH4), sunt asimilate de
microorganismele din sol i de plantele superioare, pn la acid azotic (HNO3), respectiv nitrai
(NO3-). Ulterior, microorganismele nitrificatoare vor oxida aceti compui.
n procesle abiotice, amoniacul este absorbit de mineralele argiloase i neutralizeaz acizii din
sol; se volatilizeaz la pH-uri alcaline; este levigat n sol.

Nitrificarea

- const n oxidarea amoniacului (NH3); la nceput n acid azotos (HNO2) i apoi n acid azotic
(HNO3). Acest proces, care se desfoar n dou etape, se realizeaz de specii de microorganisme
diferite, strict autotrofe, unele oxideaz amoniacul (NH3) la nitrit (NO2-) (nitritbacteriile) i altele
de la nitrit (NO2-) la nitrat (NO3-) (nitratbacteriile). Microorganismele respective folosesc, ca surs
de carbon, bioxidul de carbon i carbonaii, iar ca surs de azot i energie, amoniacul, respectiv
nitraii (NO2-).
3

- Nitritbacteriile sunt clasificate n 4 genuri: Nitrosomonas (N. europeae), Nitrosospira (N.

briensis), Nitrosococcus (N. nitrosus i N. oceanus) i Nitrosolobus (N. multiformis).
2NH3 + 3O2 -------- > 2HNO2 + 2H2O + 156,6 cal
- nitratbacteriile cuprind trei genuri: Nitrobacter (N. winogradsky), Nitrospina (N. gracilis) i
Nitrococcus (N. mobilis).
2HNO2 + O2 -------- > 2HNO3 + 43,6 cal
Bacteriile nitrificatoare cele mai rspndite i active sunt Nitrosomonas i Nitrobacter.
Denitrificarea

Denitrificarea, n sens larg, se folosete pentru toate procesele de reducere a nitrailor (NO3-), i
anume:
Reducerea asimilatorie a nitriilor pn la N organic, de care sunt capabile toate
microorganismele, plantele superioare i micro-organismele care utilizeaz NO3- ca surs de azot.
Reducerea dezasimilatorie a nitrailor prin nitrii, cnd acetia (NO2) servesc ca acceptori
finali de electroni n locul O2 i care presupune:
- reducerea nitrailor la nitrii efectuat de 85% din bacteriile chemoheterotrofe din sol,
majoritatea actinomicetelor i unele ciuperci.
2HNO3 ------- > 2HNO2 + O2;
- reducerea nitrailor la amoniac este realizat de aproape 45% din bacteriile chemoheterotrofe
din sol.
HNO3 + H2O ------- > NH3 + 2O2 .
- reducerea nitrailor i nitriilor la NO, NO2 i N2 reprezint denitrificarea n sens strict.
Acest tip de denitrificare se poate realiza direct prin intermediul bacteriilor i indirect.
Denitrificarea direct este un proces anaerob i este realizat de bacterii heterotrofe, care reduc
nitraii cu ajutorul H din substanele organice (Pseudomonas denitrificans i Ps. stutzari), dar care
sunt i facultativ autotrofe, reducerea fiind realizat cu ajutorul H2.
2HNO3 + 5H2 ------ > N2 + 6H2O + energie
4

n procesul denitrificrii mai sunt implicate i bacteriile obligat autotrofe (Thiobacillus

denitrificans), care nu sunt obligat denitrificatoare.
6KNO3 + 5S + 2CaCO3 ->3N2 + 3K2SO4 + 2CaSO4 + 2CO2 + energie
Efectele denitrificrii. Din cele prezentate, rezult c denitrificarea este un proces
nefavorabil fertilitii solului, datorit pierderii de nitrai.
- Un aspect pozitiv este faptul c n solurile neaerate, unde se produc diferite substane toxice
pentru plante (n special etilen), prin reducerea nitrailor se obine o cantitate de oxigen care
atenueaz acest efect.
Fixarea biologic a azotului molecular
Fixarea azotului molecular atmosferic prin intermediul microorganismelor este o alt etap a
circuitului biologic al azotului.
- una din sursele importante i rentabile este fixarea biologic a azotului molecular. Acest proces
este realizat de anumite microorganisme denumite "fixatoare de azot", i anume: actinomicete, alge,
bacterii aerobe i anaerobe i bacterii simbiontice cu plantele leguminoase. Pn n prezent nu s-a
constatat capacitatea de fixare a N2 la nici un organism eucariot.
Fixarea azotului molecular atmosferic poate fi liber (nesimbiotic) i simbiotic.
Fixarea liber (nesimbiotic) a azotului molecular (N2)
Fixarea liber a azotului n sol se efectueaz de microorganisme care triesc libere i care pot fi:
aerobe sau anaerobe. Ambele tipuri i procur energia prin oxidarea substanelor organice
neazotate. Acest mod de nutriie se numete "prototrof".
Microorganismele libere, capabile de fixarea N2, aparin bacteriilor i cianobacteriilor (algele
albastre).
Bacteriile fixatoare de N2 libere, dup tipul de nutriie i respiraie, se grupeaz n:

bacterii chemioheterotrofe aerobe (Azotobacter, Azomonas, Beije-rinckia, Derxia etc.),

facultativ anaerobe (Klepsiella, Bacillus, Pseudomonas etc.),

anaerobe (Clostridium, Desulfovibrio, Desulfotomaculum etc.),

chemioautotrofe (Thiobacillus),

fotoorganoautotrofe (Rhodospirillum,Rhodopseudomonas,Rhodo-microbium),

fotolitoautotrofe (Chromatin, Clorobium).

- Cea mai mare eficien de fixare liber de N2 o au speciile de Azotobacter i Clostridium

pasteurianum.
Din Azobacter chrococcum s-a preparat n ara noastr biopreparatul Azotobacterin.
-

bacteria ncorporat aprovizioneaz solul cu azot (20-40 kg/ha)

secret i o serie de substane cu caracter stimulator asupra creterii plantelor:

heteroauxina, acid pentatenic, tiamin, ribofavin, acid nicotinic, B12

stimuleaz i dezvoltarea bacteriilor celulolitice, stabilind relaii metabolice i cu

Clostridium pasteurianum .
Fixarea simbiotic a azotului atmosferic
Dintre procariotele simbiotice fixatoare de N2 s-au studiat 6 grupe:

A) bacteriiile, care produc nodoziti radiculare la plantele leguminoase;

B) actinomicetele, care produc nodoziti radiculare la plantele leguminoase;

C) bacterii simbiotice, care produc nodoziti foliare;

D) cianobacteriile, care produc nodoziti;

E) cianobacteriile simbiotice, care nu produc nodoziti;

F) bacteriile din simbiozele asociative.

A) Bacteriile simbiotice care produc nodoziti radiculare la plantele leguminoase

M. Beijerinck (1888) a izolat, cultivat i a descris bacteria din nodoziti care triete n

simbioz cu leguminoasele, denumind-o Bacillus radicicola; ulterior, a fost denumit Bacterium

radicicola, n prezent, bacteriile din nodozitile leguminoaselor aparin genului Rhizobium.
- caracteristici ale acestui gen:
Morfologic, bacteriile se prezint sub form de bastonae mobile (1,2-3,0 x 0,5-0,9),
datorit cililor (1-6 buc.).
Speciile de Rhizobium dezvoltndu-se n nodoziti, pe medii acide sau pe medii cu
alcaloizi, glicozide, antibiotice sau colorani, dau natere la bacteroizi. Forma bacteroizilor
variaz cu specia rizobiilor.
Bacteroizii din nodoziti nu se divid; ei fixeaz N2.
Rizobiile se dezvolt bine la pH = 6,5-7,2 i sunt obligat aerobe.
Temperatura optim este de 25oC.
Rizobiile sunt incapabile de a fixa N2 n afara nodozitilor.
necesit macroelementele P i K i microelementele molibden i cobalt.
Pentru cretere, biotina este vitamina foarte frecvent solicitat de rizobii. Unele tulpini, pe
lng biotin, au nevoie i de alte vitamine: tiamin, ribofalvin, piridoxin, acid pantotenic
6

.a. Sunt rizobii care produc vitamina B12 (Rh.meliloti) sau fitohormoni (acid b-indolilacetic,
gibereline, citokinine). Majoritatea acestora s-au gsit n nodozitile mature i btrne i n
solurile cultivate cu leguminoase (mai frecvente n rizosfera plantelor btrne).
Rizobiile pot fi atacate de rizobiofagi. Activitatea rizobiofagilor poate fi anihilat de unele
specii de Penicillium, Rhizopus i Bacillus. Sunt i rizobii lizorezistente
Rizobiile dispun de antigene O (somatice) i H (flagelare). Variabilitatea genetic a
caracteristicilor rizobiilor este foarte mare. n aceeai nodozitate pot exista tulpini foarte diferite
ntre ele din punct de vedere morfologic, fiziologic, al infeciozitii i capacitii de fixare a
N2. Nu s-au constatat corelaii ntre antigenitatea tulpinilor i rezistena lor la fagi, infeciozitate
i capacitatea de fixare a N2.
Formarea nodozitilor. n prima faz, rdcinile excret anumite substane cu efect
chimiotactic pozitiv asupra rizobiului specific pentru planta respectiv. Aceste substane numite
glucoproteine "recunosc" situsurile antigenice comune, prezente att pe suprafaa perilor radiculari,
ct i pe suprafaa rizobiului specific. n felul acesta, apare o punte biochimic ce leag celulele
rizobiului specific de perii radiculari. Rizobiile ptrund apoi n perii radiculari. Dup ptrunderea
rizobiilor, perii se deformeaz. Numai circa 5% din perii infectai produc nodoziti.
Aspectul morfologic al nodozitilor este un indiciu de apreciere a capacitii rizobiilor din
nodoziti de a fixa N. Dac nodozitile sunt numeroase i mici, nseamn c rizobiile sunt puin
efective. Cnd nodozitile sunt mai puin numeroase, mari i roii, nseamn c activitatea
rizobiilor este mai eficient. Exist o corelaie pozitiv ntre coninutul n vitamina B12 i
efectivitatea fixrii N2 de ctre diferite nodoziti de la aceeai plant.
Factorii care influeneaz rspndirea rizobiilor n sol
Tipul de sol. Prezena rizobiilor n sol este condiionat de existena leguminoaselor. Fixarea N2
este mai intens n solurile uoare dect n cele grele. Tulpinile izolate din cernoziomuri sunt mai
infecioase i mai efective dect cele izolate din podzoluri.
Vegetaia. Prezena plantelor gazd e o condiie esenial pentru existena rizobiilor.
Substanele organice. Prezena n sol a substanelor organice favorizeaz meninerea densitii
i a capacitii de infectare a bacteriilor.
Substanele anorganice. ngrmintele minerale cu fosfor acioneaz asupra dezvoltrii
rdcinilor i nodozitilor, precum i asupra fixrii N2.
pH. Rizobiile prefer, n general, solurile slab acide, neutre sau slab alcaline.
O2. Prezena oxigenului este absolut necesar, deoarece rizobiile sunt organisme aerobe.
Umiditatea. Coninutul optim de ap din sol este n funcie de necesitile de ap i aer ale
plantelor gazd i ale partenerilor de simbioz, n special a leguminoaselor.
7

Temperatura. Formarea nodozitilor este influenat att de temperatura solului ct i de

cea a aerului.
Adncimea. Cu ct crete adncimea n sol se constat o tendin de scdere a numrului de
rizobii.
Variaiile sezoniere influeneaz, ca i la celelalte microorganisme, numrul rizobiilor n sol.
Cel mai mic numr se constat iarna.

1.
2.
3.

5.
6.

componentele materiei
organice
eliberarea de NH4 prin
descompunere
4. Oxidarea NH4 la NO2 i
NO3
Denitrificarea
Fixarea azotului molecular