Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CULTIVAREA ALGELOR
Monografie
Chiinu, 2016
CZU 633.529.3
C 94
Aprobat de:
Departamentul Biologiei Ecologie,
Consiliul Facultii de Biologie i Pedologie,
Senatul Universitii de Stat din Moldova
Recenzeni: Valeriu Rudic, doctor habilitat, profesor universitar,
academician;
Ludmila Rudi, doctor, confereniar cercettor;
Vera MiScu, doctor, confereniar cercettor
ISBN 978-9975-71-736-6
CUPRINS
Introducere...................................................................................................................... 6
CAPITOLUL I
CULTIVAREA ALGELOR NECESITATE ACTUAL........................................ 7
1.1. Argumentele privind necesitatea cultivrii algelor.................................................. 7
1.2. Producia mondial de biomas algal................................................................... 10
CAPITOLUL II
CARACTERISTICA GENERAL A PROCESULUI DE CULTIVARE A
ALGELOR.................................................................................................................. 15
CAPITOLUL III
COLECTAREA PROBELOR DE ALGE PENTRU CULTIVARE....................... 17
3.1. Colectarea probelor de alge din ecosistemele acvatice.......................................... 17
3.2. Colectarea algelor bentonice.................................................................................. 19
3.3. Colectarea algelor de perifiton............................................................................... 19
3.4. Colectarea algelor edafice...................................................................................... 19
3.5. Colectarea algelor aerofile..................................................................................... 20
CAPITOLUL IV
OBINEREA CULTURILOR DE ALGE DENSE.................................................. 21
4.1. Obinerea culturilor brute....................................................................................... 21
4.2. Obinerea culturilor monoalgale............................................................................ 22
4.2.1. Metoda dilurii......................................................................................... 22
4.2.2. Metoda microvegetal.............................................................................. 23
4.2.3. Metoda de selectare a culturilor algologice . ........................................... 23
4.2.4. Metoda de inoculare a algelor n interiorul agarului................................ 24
4.2.5. Metoda de separare a algelor prin centrifugare i sedimentare................ 24
4.2.6. Metoda de obinere a monoculturilor din culturi brute dense.................. 25
4.2.7. Selectarea monoculturilor prin intermediul fototaxisului......................... 26
CAPITOLUL V
OBINEREA CULTURILOR ALGALE PURE (AXENICE)............................... 27
5.1. Obinerea culturilor algale pure prin utilizarea antibioticelor................................ 27
5.2. Utilizarea metodelor de filtrare pentru nlturarea bacteriilor din culturile
de microalge........................................................................................................... 33
5.3. Metoda de obinere a culturilor algale pure utiliznd mediile agarizate................ 34
3
Tindalizarea........................................................................................................ 81
Sterilizarea n cuptorul cu microunde................................................................. 82
Sterilizarea cu ajutorul lmpii ultraviolete......................................................... 82
7.4.2. Sterilizarea mediilor nutritive solide........................................................ 83
7.5. Pregtirea inoculului algal..................................................................................... 83
7.6. Condiiile de cultivare a algelor............................................................................. 84
7.6.1. Temperatura.............................................................................................. 85
7.6.2. Iluminarea................................................................................................. 86
CAPITOLUL VIII
METODE DE CULTIVARE A ALGELOR.............................................................. 88
8.1. Caracteristica general a metodelor de cultivare a algelor.................................... 88
Cultivarea periodic............................................................................................ 88
Cultivarea periodic n adncime....................................................................... 88
Cultivarea periodic ndelungat........................................................................ 89
Cultivarea multiciclic........................................................................................ 90
Cultivarea semicontinu..................................................................................... 90
Cultivarea continu............................................................................................. 91
Cultivarea sincronizat....................................................................................... 92
8.2. Cultivarea continu a algei Nostoc flagelliforme pe medii obinute pe baza
deeurilor de la complexele zootehnice................................................................. 92
8.3. Cultivarea periodic a algei Spirulina platensis pe ape reziduale zootehnice....... 96
8.4. Cultivarea periodic a algei Anabaenopsis sp....................................................... 99
8.5. Utilizarea metodei semicontinue la cultivarea algei Anabaenopsis sp................ 102
8.6. Utilizarea metodei de cultivare continu a algei Spirulina platensis pe ape
reziduale zootehnice............................................................................................. 107
CAPITOLUL IX
COLECII DE ALGE...............................................................................................114
9.1. Caracteristica general a coleciilor de alge..........................................................114
9.2. Tehnologii de meninere a algelor n colecii........................................................114
9.2.1. Meninerea pe medii nutritive solide i lichide.......................................114
9.2.2. Meninerea algelor prin crioconservare...................................................116
9.2.3. Meninerea algelor n colecii prin ahidrobioz.......................................117
Bibliografie..................................................................................................................118
Anexa nr.1. Medii nutritive utilizate pentru cultivarea algelor................................... 129
Anexa nr.2. Mediile nutritive optime pentru cultivarea unor specii de alge............... 149
Anexa nr.3. Condiiile optime de temperatur pentru cultivarea algelor.................... 155
Anexa nr.4. Date de contact privind coleciile de alge............................................... 160
5
Introducere
Cultivarea algelor este una dintre cele mai importante direcii actuale ale cercetrilor tiinifice de ordin biologic cu caracter practic. Datorit procesului de cultivare
putem obine biomas algal care este benefic pentru om n vastele sale activiti,
dar i pentru natur, contribuind la meninerea i reglarea echilibrului ecologic.
Datorit proprietilor i capacitilor sale, actualmente algele sunt studiate sub
toate aspectele: populaional, celular, molecular, atomic etc. Algele servesc drept
modele i pentru direcii tinifice ndeprtate de biologie, cum ar fi cele radiaionale,
biochimia, genetica etc. Astfel, pentru realizarea acestor cercetri este necesar ca
algele s fie cultivate i meninute.
Cu toate c aceast direcie tiinific este studiat i abordat n literatura de
specialitate, sunt necesare totui noi viziuni, descrieri i modificri pentru a completa informaiile teoretice, dar i pentru a eficientiza procesul practic de cultivare a
algelor. De aceea, n lucrare sunt selectate i prezentate att rezultatele cercetrilor
tinifice din literatura de specialitate, ct i cele proprii ale autorilor.
Prezenta monografie este elaborat pentru a dezvolta aceast direcie indispensabil progresului societii actuale. Lucrarea este structurat n nou capitole, n
care este caracterizat procesul de cultivare ncepnd cu colectarea probelor, obinerea culturilor algale dense i pure, urmnd caracteristica i aplicarea metodelor
de cultivare, caracteristica condiiilor de cultivare, specificarea necesarului de substane nutritive pentru alge i terminnd cu caracteristica metodelor de meninere a
algelor n colecii.
Autorii sper ca monografia va prezenta interes pentru specialitii n domeniu,
pentru studeni, masteranzi i doctoranzi specializai n biologie i ecologie, dar i
pentru toti cei interesai n a obine noi cunotine teoretico-aplicative n domeniul
cultivrii algelor.
CAPITOLUL I
CULTIVAREA ALGELOR NECESITATE ACTUAL
1.1. Argumentele privind necesitatea cultivrii algelor
Pentru valorificarea i exploatarea pe larg a algelor este necesar creterea major obinut prin cultivarea lor. Cultivarea algelor permite obinerea biomasei
algale care poate fi utilizat n practic. Cultivarea algelor poate fi efectuat
n condiii deschise n cmp i nchise n laborator. Avantajele cultivrii
algelor n condiii de laborator s-au dovedit a fi mai nalte, caracterizate prin
obinerea produselor ecologice fr impuriti, care au fost i sunt importante
pe fonul problemelor de mediu i sntate. Primele ncercri de cultivare a algelor n cultur de laborator au nceput cu mai bine de 130 de ani n urm, n
contextul cercetrilor de fiziologie vegetal.
Cultivarea algelor n condiii de reglare a activitilor vitale este una dintre direciile de perspectiv ale acvaculturii, biotehnologiei, algologiei practice
etc. La ora actual interesul fa de cultivarea n mas a algelor a crescut semnificativ1.
Necesitatea cultivrii algelor este argumentat de avantajele oferite i de
rezultatele foarte bune obinute la aplicarea biomasei algale n vaste domenii.
n ultimii ani un succes nalt i se atribuie industrializrii fotosintezei bazate
pe utilizarea algelor microscopice, capabile s asimileze carbonul din atmosfer i s elimine oxigen2.. Acest aspect prezint un solid argument n vederea
utilizrii algelor n ameliorarea procesului de nclzire global a Terrei.
Cultivarea algelor este argumentat i de faptul c algele fac parte din primul lan trofic al ecosistemelor acvatice i terestre, constituind materia organic primar din componentele anorganice ale mediului. Astfel, acest lucru sporete interesul pentru aplicarea practic a algelor, pentru sporirea produciei i
asigurarea echilibrului ecosistemelor.
Algele prezint surs important de hran a animelelor i omului. Algele
utilizate n practica de consum sunt colectate din natur i prin cultivare n condiii de laborator. Algele colectate din natur sunt mai puin sigure, deoarece n
biomasa algal se ntlnesc multe organisme (cum ar fi bacterii i nevertebrate)
care sunt greu de nlturat i uneori prezint pericol pentru oameni i animale n
rezultatul consumului. Cultivarea n condiii de laborator este mai costisitoare,
ns prezint siguran sporit, deoarece culturile cultivate sunt mai inti izolate i lipsite de alte organisme.
1
.., .., .., .. . : , 1999. 264 .
2
.. : . // , 1985, .92-95.
n ultima perioad sunt cultivate pe larg n cantiti mari algele roii, brune,
verzi i albastre-verzi. Conform criteriului cantitativ, biomas algal constituie
circa 20% din producia mondial a acvaculturii. Dintre cele mai importante
alge cultivate pentru utilizarea biomasei n alimentaie se menioneaz 81 specii de alge roii, 54 specii de alge brune, 25 specii de alge verzi, 8 specii de alge
albastre -verzi3,4.
Un alt argument care stimulez cultivarea industrial a algelor este coninutul biochimic al biomasei lor. n cele din urm, vom caracteriza coninutul
biochimic al ncrengturilor de alge cultivate industrial.
Algele roii au n componena biomasei glucide (pn la 70%), proteine
(20-40%), lipide (pn la 3%), cenu i alte substane (20%). Algele brune
au i ele un coninut major de glucide (pn la 70%), proteine (5-20%), lipide
(1-3%), cenu i alte substane (25-35%). Algele cianofite au n componena
biomasei glucide (pn la 60%), proteine (pn la 78%), n special ficobiliproteine, fieroritrin i ficocianin, lipide (2-12%). Algele verzi conin mai puine
glucide (30-40%), substane azotoase (40-45%), lipide (1-10%) i alte substane (10-20%)5.
Coninutul biochimic prezentat mai sus poate fi privit ca un aspect orientativ,
deoarece componena biochimic a biomasei algelor se poate modifica, ntr-o
oarecare msur, n funcie de specie, condiiile de cultivare, starea fiziologic
a celulelor, vrsta tulpinii etc.
Cultivarea algelor este argumentat i de utilizarea lor pe larg n scopuri medicale. Utilizarea algelor n scopul tratrii diferitelor boli era practicat n Orient
nc cu o mie de ani naintea erei noastre. La ora actual s-a descoperit c algele conin cele mai variate substane care influeneaz asupra activitii inimii,
stomacului, intestinului, glandelor endocrine, sistemului nervos i endocrin etc.
S-a demonstrat c algele au proprieti antisclerotice, mbuntesc procesele de
hematopoiez, sunt antioxidante, rein procesul de mbtrnire a organismului,
contribuie la eliminarea toxinelor din organism, la suplinirea organismului cu
substane biologic active i conin multe micro- i macroelemente necesare derulrii normale a activitii organismului uman. Unele alge sunt utilizate pentru
obinerea textilelor, hrtiei, vopselei, fiind cultivate n cantiti mari6.
Abbott I.A., Cheney D.P. Comercial uses of algal products: introduction und bibliography.
// Selected papers in phycology, vol. 2, 1982, p.779 -787.
4
Algal Biotehnology. Progres in biotehnology of photoautotrophic microorganism. // 6 Intern.
Conf. on applied algology, 1993. 84 p.
5
.. . : , 1972. 336 .
6
.., .. . ,
, . ; -: -, 1997.
155 .
3
Cultivarea algelor este stimulat i de utilizarea lor pe larg n agricultur. Algele sunt utilizate ca surs alimentar pentru animale, ca biostimulator al creterii plantelor de cultur, iar utilizarea lor n acest scop sporete pe an ce trece.
Algele sunt utilizare ca hran verde pentru animale n multe ri ale lumii (Islanda, Scoia, Danemarca, Noua Zeeland, SUA etc.), precum i ca supliment
n raia alimentar. Biomasa algal poate fi administrat animalelor n stare vie,
uscat, n form de fin i granulat. Din biomasa algelor se obin suplimente
nutritive pentru diverse animale care sunt destul de bogate n proteine, glucide,
lipide, peptide, vitamine, macro- i microelemente, aminoacizi etc.7
Algele sunt utilizate n scopul proteciei mediului, constituind surse de legturi chimice diverse care se elimin n mediu, n acelai timp i de substane
biologic active. Algele particip la formarea hidrobiocenozelor, influeneaz
proprietile organoleptice ale apelor, calitatea apelor de suprafa. mbogesc apele cu oxigen, epureaz apele poluate cu elemente biogene, metale grele, radionuclizi, contribuind la epurarea n general a tuturor componentelor
mediului.
Cultivarea algelor este argumentat i de necesitatea aplicrii algelor pentru sporirea fertilitii solului. n lipsa substanelor organice, algele cianofite
azotfixatoare contribuie la formarea fertilitii, creeaz asociaii cu bacteriile i
contribuie la fixarea azotului atmosferic i la acumularea substanelor organice,
la mbuntirea structurii solului, sporindu-i umiditatea, capacitatea lui antierozional. Contribuia algelor n acumularea substanelor organice este semnificativ; s-a demonstrat c n pustiurile din SUA algele contribuie la acumularea
a 300 kg/ha de substan organic. Substana organic acumulat de alge este
uor asimilat de plantele superioare i alte organisme ale biocenozelor. Viteza
de mobilizare a azotului i a carbonului din biomasa algelor determin tipul
de sol i regimul lui hidrotermic. Algele servesc ca factor de acumulare suplimentar a energiei solare n biomas; n afar de aceasta, din contul algelor se
mrete perioada vegetativ a fitocenozelor, ele contribuie la ameliorarea celor
mai poluate soluri cu pesticide, metale grele, petrol etc.
Un argument important pentru cultivarea masiv a algelor este i utilizarea
lor n calitate de biofertilizani. Algele cianofite azotfixatoare sunt cele mai
atractive specii utilizate ca biofertilizani. Aceste alge contribuie la acumularea
azotului n sol (din contul fixrii din atmosfer) accesibil plantelor i echilibreaz coninutul lui, iar dezvoltarea masiv a biomasei algelor azotfixatoare
nu cauzeaz poluarea biologic a solului cu azot atmosferic fixat, deoarece
procesul de fixare biologic a azotului la alge este autoreglabil. Aportul algelor
n economisirea azotului n sol este de 1044,22 mii t pe an. Algele cianofite
7
.., .. . ,
, . ; -: -, 1997.
155 .
pot fixa n solurile regiunilor cu clim moderat circa 20-557 kg/ha de azot (n
masa uscat), n solurile utilizate la cultivarea orezului 15-90 kg/ha anual. Biomasa algelor include o mare parte a cabonului, iar n rezultatul descompunerii
biomasei acesta se elibereaz n sol i contribuie la formarea aciziilor humici i
fulvici. Azotul celular (care constituie 40-60% din azotul fixat) la descompunerea biomasei algale este accesibil bacteriilor, ciupercilor, algelor nefixatoare de
azot i muchilor. Experimental s-a demonstrat c algele pot asigura 4,3-15%
din necesarul de azot din sol al plantelor superioare.
Algele sunt cultivate i pentru utilizarea biomasei algale n scop energetic.
Algele utilizeaz eficient energia solar, conservnd-o n biomas. n comparaie cu energia atomic, algele sunt surse de energie absolut sigure; utilizarea
lor nu contribuie la dereglarea echilibrului ecologic i nu genereaz poluarea
radioactiv sau termic a mediului. Din cantitatea total a energiei solare, ce
atinge anual suprafaa solului, plantele utilizeaz n medie 0,1%. Aceast cantitate este de cteva ori mai nalt dect necesarul global de energie. De aceea
se utilizeaz biogazul ca surs de energie din biomasa algelor pe calea abioconversiei. Algele permit sporirea cu 3-5% a eficacitii conversiei energiei solare. Astfel, algele pot servi ca reactor solar eficient. Pentru obinerea energiei
din biomasa algelor, n SUA, Japonia se practic pe larg cultivarea lor pe ape
reziduale. Se consider c 50-60 t de biomas uscat de alge pot genera 74 mii
kw/or de electricitate. Energia obinut n rezultatul fotosintezei algelor este
mai rentabil de convertit n gaz i se consider a fi concurent pe plan global
cu energia nuclear, cu toate c n toate cercetrile se evideniaz c algele sunt
mai avantajoase economic8. Astfel, cultivarea algelor pe ape reziduale permite
soluionarea mai multor probleme, cum ar fi: epurarea apelor, protecia mediului contra polurii, obinerea surselor suplimentare de energie i fertilizani,
economisirea i regenerarea resurselor naturale.
10
Tabelul 1
Producia global a biomasei microalgelor i aplicarea lor
Taxon
Produsul
Aplicarea
Producia
estimat,
t/an
Chlorella vulgaris
Extract din
biomas
Produs alimentar,
sntate, supliment
alimentar, cosmetic
2000
Spirulina platensis
Biomas,
ficocianin,
extract
Produs alimentar,
sntate, alimente
funcionale
3000
Dunaliella salina
Carotenoizi,
-caroten
Produs alimentar,
sntate, supliment
alimentar, cosmetic
1200
Nostoc fusiforme
Biomas
Produs alimentar,
sntate
600
Produs alimentar,
sntate
500
Haematococcus
pluvialis
Carotenoid
astaxantin
Farmacie, produs
alimentar aditiv,
acvacultur
50
Odontella aurita
Biomas
Cosmetic, alimentaie
20
http://www.algaemax.eu/more-in-detail.html
11
Compania
Martek
Algele cultivate
Crypthecodinium
SUA
Gates Foundation
Kappaphycus
SUA
R&D
Lobophora
Canada
Oceannutrition
Chlorella
Germania
Astaxa
Nannochloropsis sp.
Tetraselmis sp.,
Phaeodactylum
tricornutum,
Arthrospira
(Spirulina) platensis,
Chlorella vulgaris,
Scenedesmus sp.,
Haematococcus
pluvialis,
Porphyridium
cruentum,
Germania
Nutrinova
Uklaria
Frana
Austria
Marea
Britanie
Tabelul 2
Produsul obinut
Acid
docosahexaenoicomega 3
Caragenan
Macrolide
Extract de glucide
Omega 3
Dior
Panmol/Madaus
BSV
Odontella
Spirulia
Rhodophyta
Acid
docosahexaenoicomega 3
EPA
Vitamina B12
Biomas
Danisco
Ulva lactuca
Hexoz oxidaz
Astfel, dup cum observm, cei mai muli productori de biomas algal sunt
n SUA i n Germania, iar biomasa algal este utilizat n scopuri farmaceutice
i alimentare.
Jumtate din biomasa mondial a algelor este utilizat ca aliment, iar cea de a
doua jumtate servete drept surs pentru obinerea extractelor. Cele mai importante extracte obinute din biomasa algelor sunt: carotenoizii, ficobiliproteinele
i antioxidanii.
10
Egardt J., Lie ., Aulie J., Myhre P. Microalgae a market analysis carried out as part of
the Interreg KASK IVA project: Blue Biotechnology for Sustainable Innovations, Blue Bio.
Sweden, 2013. 79 p.
12
Valoarea economic a biomasei algale, estimat n anul 2010, era de 600 milioane de euro. Principala utilizare pe pia a biomasei algelor este: n scopuri
umane (74%), ca hran a animalelor (25%) i n calitate de produse cosmetice i
n scopuri de cercetare.
Conform altor autori, biomasa global a algelor cultivate se estimez la aproximativ 3,5-5 miliarde de euro. Din acestea, sectorarelor alimentar i sntate
li se atribuie 1,5 miliarde de euro, iar cercetrii i acvaculturii 0,5 miliarde de
euro11.
Actualmente sunt estimate calcule pentru obinerea a 1 kg de biomas algal
utilizat n diferite scopuri. Informaia respectiv este prezentat n Tabelul 3.
Tabelul 3
Costul estimat al biomasei algale n funcie de scopul utilizrii11
Scopul utilizrii
Produsul
Biomas
10-80
Aliment funcional
25-52
Aliment aditiv
10-130
Acvacultur
50-150
>10
Pigment
Astaxantin
2500-8000
Antioxidant
-caroten
>750
Superoxid dismutaz
>1000
Tocoferol
30-40
30-80
Astfel, putem constata c cele mai costisitoare produse obinute din biomasa
algelor sunt pigmenii estimai la 2500-8000 dolari pentru 1 kg, iar cea mai ieftin este biomasa algal utilizat n calitate de biofertilizant (ce nu depete 10
dolari/kg).
Pe plan mondial aproximativ 75,2% din toi productorii de biomas algal
sunt din domeniu public sau privat i abia 18,6% sunt din sfera instituiilor de
cercetare i inovare.
11
http://www.algaemax.eu/more-in-detail.html
13
Algele macrofite au i ele o importan economic destul de mare. Actualmente se estimez c valoarea economic global a biomasei algelor macrofite este
de 5,5-6 miliarde de euro.
O direcie strategic a cultivrii algelor, care n ultima perioad a cptat
rspndire mondial, este bazat pe obinerea biodiselului din biomasa algal.
Biomasa algal prezint surs important de obinere a petrolului, cu caracteristici care depesc multe plante oleagenoase (Tab. 4).
Tabelul 4
Producia medie de petrol a unor plante oleaginoase i a algelor12
Sursa de ulei
Randament (L.m2/yr-1)
Alge
4,7-17
Palmier
0,54
Jatropha
0,19
Rapi
0,12
Floareasoarelui
0,09
Soia
0,04
Rezultatele prezentate atest c algele sunt cultivate pe plan mondial n cantiti majore datorit utilizri biomasei algale n vaste domenii, valorificrii biomasei i comercializrii acesteia.
12
Schenk P.M., Thomas-Hall S., Stephens E., Marx U.C., Mussgnug J.H., Posten C., Kruse O.,
Hankamer B. Second Generation Biofuels: High-Efficiency Microalgae for Biodiesel Production.
BioEnergy Research, 2008, 1(1), p.20-43.
14
CAPITOLUL II
CARACTERISTICA GENERAL A PROCESULUI
DE CULTIVARE A ALGELOR
Dup cum am menionat, cultivarea algelor n condiii de laborator prezint
un interes tiinific major. Pentru efectuarea experimentelor de laborator privind
obinerea biomasei algale se utilizeaz culturile de alge. Cultivarea algelor n
condiii de laborator include un complex mare de operaii, care depind de scopul
i sarcinile cercetrilor, de caracteristicile specifice i biologice ale algelor etc.
Tehnica de cultivare a algelor este un proces destul de complicat. Tehnica de cultivare a fiecrei specii de alge este puin diferit, dar, totui, n mare parte trebuie
realizate aceleai etape de baz. Etapele cultivrii algelor sunt variate, ns n linii
mari trebuie realizate ase etape de baz13 (Fig. 1).
15
Primul i cel mai important pas este colectarea probelor de alge din natur
n locurile unde se dezvolt masiv (etapa 1), transportarea lor n laborator i
meninerea culturilor de alge dense pe mediile nutritive de unde au fost colectate
sau pe medii nutritive artificiale (etapa 2), dup care urmeaz o procedur mai
dificil de obinere a culturilor de alge curate pe baza utilizrii mediilor nutritive
artificiale solide, uneori i lichide (etapa 3). Cea mai mare dificultate n cultivarea algelor este obinerea n cultur a unei specii. Culturile algale ce conin o
singur specie trebuie lipsite de bacterii i alte microorganisme prin aplicarea
tehnicilor specifice (etapa 4). Dup realizarea cu succes a celor 4 etape urmeaz cultivarea algelor n condiii dirijate sub influena diferiilor factori pentru
determinarea condiiilor optime de cretere a biomasei algale (etapa 5). Un lucru important este i meninerea algelor n colecii, pentru asigurarea viabilitii
culturii n scopul ntreinerii ndelungate a algelor pentru viitoarele necesiti de
cultivare.
Etapele cultivrii algelor trebuie realizate consecutiv, una dup alt, pentru
obinerea culturilor algologice pure. Odat obinute, culturile algologice pure
trebuie meninute i cultivate dup procedee pe care le vom descrie n continuare. De menionat c fiecare etap de cultivare a algelor, indicat n Figura 1,
se realizeaz dup metode i procedee specifice, iar pentru obinerea biomasei
algale trebuie respectate cu strictee condiiile de cultivare. Astfel, pentru cultivarea eficient a algelor i obinerea biomasei algale vom descrie detaliat fiecare
etap n parte.
16
CAPITOLUL III
COLECTAREA PROBELOR DE ALGE PENTRU CULTIVARE
Una dintre cele mai importante etape este colectarea coret a probelor de alge
care asigur realizarea uoar a celorlalte etape generale ale cultivrii.
Colectarea probelor de alge din natur trebuie efectuat n perioada activ a
vegetaiei speciei. Pentru colectare trebuie selectate acele habitate unde specia de
alg se dezvolt n cantiti maximale i se afl ntr-o stare activ de via.14 Pentru realizarea colectrii probelor de alge avem nevoie de unele unelte specifice,
vase de depozitare a culturii i de aparate pentru determinarea caracteristicilor
fizice, fizicochimice i chimice ale locului de colectare.
17
Fig.4.
Aparat de
a fitobentosului
(Microbentometru
C-1). C-1)
Fig.
4. Aparat
decolectare
colectare
a fitobentosului
(Microbentometru
Colectarea probelor de
alge
edafice poate
fi efectuat
conform metodelor de
3.4.
Colectarea
algelor
edafice
colectare a probelor de alge supuse analizelor taxonomice sau a unor procedee
mai simplificate.
colectarea
se recomand
fie luat corect
Colectarea
probelorPentru
de alge
edaficealgelor
poate de
fi sol
efectuat
conforms metodelor
de colectare a
proba medie, pungile i instrumentele de colectare s fie sterile, probele s fie etiprobelor
de alge
supuse probelor
analizelordetaxonomice
sau
a unor procedee
Pentru
chetate.
Colectarea
alge de sol se
realizeaz,
de regul,mai
de lasimplificate.
adncicolectarea
algelor
se recomand
s fiealgelor
luat corect
proba
medie,depungile
i instrumentele
mea de
0-10 de
cm,sol
deoarece
majoritatea
habiteaz
n stratul
la suprafaa
solului. s
Uneori
poate fiprobele
colectatsproba
i din orizonturile
de adncime.
de colectare
fie sterile,
fie etichetate.
Colectarea
probelor n
de cazul
alge de sol se
n
care
pe
sol
se
dezvolt
masiv
algele
i
formeaz
o
pelicul,
se
recomand
realizeaz, de regul, de la adncimea de 0-10 cm, deoarece majoritatea algelor ca
habiteaz n
algele s fie colectate cu un strat subire de sol de pe un teritoriu cu dimensiuni
stratul de la suprafaa solului. Uneori poate fi colectat proba i din orizonturile
de adncime. n
care pot fi diferite n funcie de densitatea algelor: de la 10 la 100 cm2.
cazul n care pe sol se dezvolt masiv algele i formeaz o pelicul, se recomand algele s fie
16
..subire
.
.
colectate cu
un strat
de sol
de pe un :
teritoriu cu
dimensiuni
care:
pot fi diferite n funcie
, 2008. 199 c.
2
17
de densitatea
algelor: ..
de la
10 la 100
cm . : . :
, 2005. 128 .
Probele se colecteaz cu un cuit steril, fra sau hrle. n condiii de cmp sterilizarea
instrumentelor poate fi efectuat cu ajutorul19alcoolului etilic sau cu nfibgerea de multe ori a
16 .. . : . . : , 2008. 199
c.
18
80 .
o .. . : -. , 1990.
20
CAPITOLUL IV
OBINEREA CULTURILOR DE ALGE DENSE
Dup cum menionez d. prof. I.Cruu, dup colectarea probelor de alge
din natur urmeaz etape de lucru n ce privete realizarea culturilor de laborator,
care sunt:
culturi brute - dense;
culturi monoalgale;
culturi pure (,,axenice), lipsite de bacterii, ciuperci sau protozoare;
culturi intensive.
21
22
23
24 au elaborat o metod mai simpl i accesibil de obinere a monoculturilor, pentru selectarea celulelor i coloniilor algale de orice dimensiune. Potrivit acestei metode, n vasul Petri se introduce mediul nutritiv agarizat (1,6-1,8%
agar), la suprafaa mediului solid se introduce 0,2-0,3 ml de ap distilat sterilizat
(n funcie de mrimea cetii Petri) ce se distribuie cu ajutorul spatulei sterile.
Trebuie ca n 1,5-2 zile apa s se mbibe n mediu nutritiv. Dup administrarea apei n vasele Petri se adaug o cantitate redus de suspensie algal, ceaca
se nchide i se expune la lumin. Peste ceva timp (de regul, 2-3 sptmni)
la suprafaa agarului ncep s apar colonii de alge. Printre ele, de regul la
marginile vasului, pot fi gsite colonii cu o singur specie. Dac vom analiza
n interval variat diferite colonii, care se deosebesc i dup culoare, pe care le
inoculm pe mediu nutritiv proaspt, atunci putem obine monoculturi aproape
la toate speciile de alge prezente n mediul agarizat.
Dup cum se cunoate, n culturile acumulatoare cu vrsta se produce mbtrnirea i modificarea culturilor algale. La apariia noilor forme trebuie repetat procedura de selectare a monoculturilor.
24
Filtrarea uoar poate fi utilizat pentru nlturarea algelor diatomee i dinoflagelatelor de celulele mai mici. Aceast procedur poate fi repetat pn la curarea
total a culturii. Pentru dinoflagelatele care plutesc accelerat aceast procedur
trebuie realizat n timp scurt, deoarece algele pot nimeri n soluie. Centrifugarea
intens poate afecta celulele algelor sensibile. Puterea de centrifugare a probelor
colectate depinde de specia de alg i poate fi determinat empiric.
Metoda de sedimentare se utilizeaz pentru separarea celulelor ce nu se mic sau a celulelor grele. Probele se agit puin i se introduc n baloane cu fund
plat, cilindre sau alt vesel pentru sedimentare. Sedimentarea se efectueaz pn
cnd celulele necesare se depun pe fund, iar celulele mici vor fi suspendate n
soluie. Dup aceasta soluia de deasupra se arunc. Acest proces poate fi repetat
pn la obinerea rezultatului dorit.26
Aceast metod este eficace pentru culturile concentrate i cu celule mari, iar pentru culturile cu dimensiuni celulare mici este greu de aplicat. Pentru algele cu dimensiuni mici metoda de filtrare sau centrifugare poate fi combinat cu alte metode.
25
Inocularea probelor pe mediu lichid sterilizat se efectueaz n baloane Erlenmayer cu volum de 100 ml, volumul mediului lichid fiind de 50 ml. Se administreaz 40 mg de inocul pregtit, probele se agit puin i se expun la iluminare
continu i temperatura necesar. Dup ce se obine o cretere masiv a biomasei,
probele se microscopiaz, se selecteaz specia predominant i se expune din nou
pe mediu nutritiv. Etapele se repet pn la obinerea unei culturi monoalgale.
Aplicarea metodei permite obinerea monoculturilor algale ntr-un interval de
timp mai scurt dect prin aplicarea celorlalte metode.
26
CAPITOLUL V
OBINEREA CULTURILOR ALGALE PURE (AXENICE)
Pentru stabilirea activitii algelor trebuie s avem culturi algale pure din punct
de vedere bacteriologic. Ideea despre culturi bacteriologic pure a fost naintat
de Koch i Pasteur. De menionat c obinerea culturilor algale pure se realizeaz nu dintr-o celul, ci din populaie algal, care la cultivarea ndelungat sau la
schimbarea condiiilor de cultivare pot suferi unele modificri ce pot contribui la
schimbarea proprietilor culturii algale. De aceea, trebuie s stimulm obinerea
tulpinilor sau a clonelor selectate dintr-o celul. Selectarea dintr-o celul se poate
realiza atunci cnd se obine o monocultur clon a tulpinii din natur.28
Culturile algale pure sunt preferate n cazul cultivrii algelor pentru obinerea
biomasei utilizate n alimentaia uman, ca surs medicamentoas i n cadrul
cercetrilor tiinifice. n cele ce urmeaz vom descrie unele modaliti de obinere a culturilor algale pure.
27
Tehnicile de tratare a culturilor algale cu antibiotice variaz n funcie de preparat, de concentraia i timpul tratrii i au un efect letal asupra bacteriilor. Preparate antibiotice pot fi utilizate att separat, ct i mixt (compuse din combinarea
a mai multor antibiotice), unele fiind utilizate la etapa iniial, iar altele la etapa
final de distrugere a bacteriilor din culturile algale.
Sensibilitatea algelor la antibiotice se modific ntr-un spectru larg i depinde
de specificul biologic al organismului. Un lucru extrem de important, n acest
sens, este concentraia antibioticelor administrate. Unele concentraii contribuie
la distrugerea total a tulpinilor algale, iar alte concentraii contribuie la distrugerea bacteriilor i nu afecteaz algele. Astfel, n lucrarea lui .. i
coautorii31 se evideniaz dozele de antibiotice letale pentru unele alge i dozele
necesare, care nu afecteaz tulpinile algale (doar bacteriile), acestea fiind prezentate n tabelele 5 i 6.
28
29
Trichoderma sp.
0,20
0,40
0,04
0,04
>0,10
>0,10
>0,61
0,1
2,91
1,45
>3,03
>3,03
>3,03
0,40
0,02
1,51
>3,03
0,72
0,14
0,01
>0,10
Penicilin
Chlorella vulgaris
Scenedesmus
obliquus
Ankistrodesmus
falcatus
Pseudomonas ovalis
Pseudomonas
pyocyaneum
Pseudomonas sp.
Achromobacter
harthlebii
Flavobacterium
sulfurum
Sterratia rubra
Bacillus mycoides
Bacillus cereus
Penicillium
chloroleucon
Aspergillus
ochraceae
Gramicidin
Specia
Aurantin
0,10
0,0005
0,10
0,03
0,10
Streptomicin
2,00
0,10
0,01
0,20
0,10
1
0,10
0,02
0,05
0,02
Colimicin
Levomicetin
0,02
>0,02
>0,20
0,02
0,20
0,02
0,20
>0,20
0,0005
0,06
0,23
0,01
0,01
0,01
0,01
0,11
0,05
0,20
0,20
0,0005 >0,10
Cloetetraciclin
0,05
1,00
0,50
0,20
0,10
0,05
0,05
0,50
0,05
>0,05
0,05
0,05
0,05
>0,10 >0,05
0,05 0,02
Oxitetraciclin
Antibioticele
Polimixin
>0,10
>0,0025
>0,05
0,02
0,15
Eritromicin
0,0005
>0,1
>0,1
>0,1
0,01
0,15
0,1
0,1
Nestatin
Grizemin
0,1
0,05
0,01
0,1
0,025
>0,1
0,01
>0,1
>0,1
0,01
0,025
0,1
0,05
0,05
0,015
0,05
0,025
0,05
Candicidin
Tertraciclin
Tabelul 5
Trihotecin
30
Chlorella vulgaris
Scenedescmus obliquus
Ankistrodesmus falcatus
Pseudomonas ovalis
Pseudomonas
pyocyaneum
Pseudomonas sp.
Achromobacter
harthlebii
Flavobacterium
sulfurum
Sterratia rubra
Bacillus mycoides
Bacillus cereus
Penicillium
chloroleucon
Aspergillus ochraceae
Trichoderma sp.
Specia
0,08
0,04
0,04
0,04
0,04
0,04
0,73
0,14
1,45
0,36
>3,03
2,91
Penicilin
0,01
0,001
0,20
>0,10
Gramicidin
0,91
3,03
3,03
0,14
0,14
Aurantin
0,10
<0,01
0,01
0,005
0,10
0,01
Streptomicin
0,10
>0,10 <0,10
0,0005 <0,01
0,01
0,01
0,05
Levomicetin
0,01
0,10
0,02
0,01
0,02
0,01
0,02
0,05
0,05
Colimicin
0,02
0,06
0,003
0,003
0,008
0,008
0,05
0,01
0,003
Clortetraciclin
0,03
0,2
0,05
0,05
0,05
0,03
0,02
0,005
0,01
0,03
0,05
0,01
0,02
0,01
0,02
0,05
0,01
0,005
0,02
Oxitetraciclin
Nestatin
Grizemin
Eritromicin
Polimixin
Tertraciclin
0,01 0,0005
0,01
0,01
0,0025
0,0005
0,025
0,05
0,025
0,005
0,05
0,025
0,005
0,005
0,01
0,01
0,005
0,008
0,005
0,005
0,005
0,02 0,005
0,005 0,0005 0,008
0,01 0,10 <0,0005 0,001 0,005
0,02 0,001 <0,0005 0,001 0,005
0,01 >0,005 >0,1
0,01
>0,005 0,005
>0,1
Antibioticele
Candicidin
Tabelul 6
Concentraiile antibioticelor ce nu influeneaz creterea algelor i rein complet dezvoltarea
microorganismelor, mg/ml
Dup cum observm, cele mai mari doze de antibiotic administrate pot fi de penicilin (de 3 mg/ml), iar cele mai
mici sunt de candicidin i levomicetin care n concentraii de 0,0005 mg/ml stopeaz creterea algelor.
0,01
0,05
0,05
0,001
0,005
0,001
Trihotecin
31
32
sau se congeleaz la temperatura de 200C. Pentru eliminarea bacteriilor se propune utilizarea a 6 tuburi cu mediu nutritiv ce conine urmtoarele concentraii
de antibiotice: 0%; 0,5%; 1%; 5%; 7,5%; 10%, la care se inoculeaz suspensia
algal. Se agit bine tuburile, se nchid i se expun la incubare pe noapte la condiii optime de temperatur i iluminare. Peste un interval de 16, 24, 40, 48, 72,
i 80 de ore se ia cte o pictur din fiecare tub i se inoculeaz n vase separate
ce conin mediu nutritiv sterilizat proaspt pregtit. Se monitorizeaz procesul
de cretere a algelor; acolo unde se observ cea mai rapid cretere, se consider
ca alga s-a acomodat mai rapid. Din acel vas se preiau probe pentru a fi supuse
analizelor bacteriologice (pentru verificarea puritii culturilor algale).
De menionat c utilizarea antibioticelor care au proprieti mutagene poate
contribui la formarea modificrilor genetice la algele cultivate.
Aceast metod permite nlturarea bacteriilor din culturile algale, dac acestea au dimensiuni mai mici dect celulele algelor. Metoda prevede utilizarea filtrului Nucleopor cu diametrul porilor de 8 , deoarece el permite trecerea celulelor algelor microscopice. Pentru aceasta poate fi utilizat dispozitivul prezentat
n Figura 7. Aparatul este format dintr-un dispozitiv de plasare a filtrului cu diametrul de 25 mm (A). Dispozitivul de plasare a filtrului are la capt o sering de
sticl cu dop de cauciuc (1), iar la baz un tub de cauciuc sau silicon (2). Tubul
33
(2) este conectat la un balon Buchner (3) de extragere n vid, care este conectat la
o pomp, cu capacitate mic, de extragere n vid (4). Tubul (2) are conexiune cu
un tub aferent nzestrat cu clem (C), la captul creia este ataat un suport (B)
cu membran cu diametrul porilor de 0,22 , prin care ptrunde aerul sterilizat
preventiv. Tubul (2) mai are conectat o clem (D) care, ca i clema anterioar
(C), are funcia de a regla presiunea aerului n vid. Presiunea n vid se regleaz
astfel nct mediul nutritiv cu culturile algale s se filtreze lent.35
Prin acest procedeu au fost sterilizate alga cianofit Aphanizomenon flosaquae f. gracile (Lemm.) Elenk. i alga diatomee Asterionella formosa Hass,
fiind obinute culturi algologice pure.
Este una dintre cele mai vechi metode de purificare i poate fi aplicat doar
pentru algele care se dezvolt pe suprafaa agarului sau n interiorul lui. Aceast
metod, dup cum am menionat n capitolele precedente, poate fi utilizat att
pentru purificarea algelor de bacterii, ct i pentru obinerea culturilor unialgale.
n agar pot fi administrate antibiotice sau substane chimice antibacteriene. Se
propune ca mediile agarizate s fie autoclavate iniial, dup care gelifierea s se
produc la temperatura de 170C care nu influeneaz negativ asupra activitii
antibioticelor. Agarozele care s-au solidificat la temperaturi reduse sunt foarte
importante pentru purificarea algelor cianofite, n special pentru speciile genului
Mycrocystis. Aceast metod se utilizeaz n combinare cu metodele de ultrasunet i centrifugare. Cu ajutorul acestei metode a fost obinut i una din speciile
36 37 38
genului Synechococcus.36-38
34
36
Solp H., Starr M.P. Principles of isolation, cultivation and conservation of bacteria. // The
Procaryotes. Vol. 1. Vienna: Springer-Verlag, 1981, p.135-175.
47
Watanabe M.M., Suda S., Kasai F., Sawaguchi T. Axenic cultures of three species of
Microcystis (Cyanophyta= Cyanobacteria). // Bull. Jap. Fed. Culture Coll., 1985, p.5763.
48
Brown R.M., Jr., Bischoff H.W. A new and useful method for obtaining axenic cultures of
algae. // Phycol. Soc.Amer. News Bull., 1962, vol. 15, p.43-44.
46
37
CAPITOLUL VI
CULTURILE ALGALE INTENSIVE
Creterea intensiva a algelor n condiii de laborator vizeaz n principal cercetri
ce necesit obinerea, relativ rapid, a unor cantiti destul de mari de biomas.49
Culturile intensive de alge pot fi eficiente dac vor corespunde urmtoarelor
cerine:
1. Culturile algale trebuie s posede o intensitate sporit a fotosintezei la cultivarea pe medii minerale cu concentraii mari de sruri, care ar permite
s adugm mai rar elemente nutritive i s obinem o cretere intensiv a
algelor.
2. Culturile algale trebuie s posede o energie mare de cretere n condiii de
iluminare cu intensitate mare. Iluminarea optim a suspensiei poate fi uor
realizat, de aceea pentru asigurarea luminii toate celulele din suspensie se
folosesc de intensitatea mare a luminii care duce la iluminarea mare a unor
poriuni ale celulelor, ndeosebi la suspensiile agitate. Pentru cultivare sunt
mai convenabile acele culturi care au un coeficient mai mare de utilizare a
energiei.
3. S fie culturi algale termofile, deoarece intensitatea mare a luminii i temparaturii este o cerin de cretere a lor. Speciile de alge termofile au o
energie de dezvoltare mai mare, de aceea ele au o perspectiv mai mare n
cultivarea intensiv.
4. Culturile algale trebuie s posede proprietatea de a inhiba dezvoltarea microflorei strine (bacteriilor i altor specii de alge).
5. Formele microscopice unicelulare sau formele coloniale mici de alge sunt
mai accesibile cultivrii intensive n comparaie cu algele macrofite. Aceasta se argumenteaz prin faptul c microalgele se pot uor ajusta la cultivarea n adncime, pot fi bine agitate, au un contact mai mare cu CO2 i cu
lumina. Formele ce formeaz mucilagii, bule etc. pot fi la fel acceptate pentru cultivarea intensiv. Pe lng aceasta, se cere ca speciile de microalge
s fie bine studiate i s nu posede un ciclu de dezvoltare complicat. Cele
mai studiate i aplicate n cultivarea intensiv sunt algele verzi, protococoficeele unicelulare, algele albastre-verzi i cele diatomee.50
6. Culturile algale trebuie s fie uor de colectat, separat de mediu nutritiv sau
se elaboreaz metode pentru realizarea eficient a acestor cerine.
7. Culturile algale necesit a fi studiate n detaliu n condiii de laborator i s
fie stabilit tehnologia de cultivare.
49
Cru I. Cultura algelor pentru biomas i principii active: Note de curs, lucrri de
laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
50
.., .. : , 1962. 58 .
38
Pentru a cultiva intensiv o specie de alg selectat trebuie s respectm cerinele sus-menionate i s cunotem informaia expus n chestionarul inclus n
Tabelul 7.
Tabelul 7
Poziiile necesare la cultivarea intensiv a algelor
Informaia necesar
Poziia sistematic a speciei (regn, ncrengtur, clas, ordin,
familie, gen, specie)
Fotografia microscopic a speciei
Locul de unde a fost prelevat proba, habitatul
Modul de obinere a culturii (dint-o celul separat sau dintr-o
colonie)
Caracteristicile morfologice ale tulpinii pe medii agarizate
(dimensiunile celulelor, formele i culoarea)
Caracteristicile morfologice ale tulpinii pe medii lichide
(dimensiunile celulelor, formele i culoarea)
Rezistena culturii (la bacterii, ciuperci, virui)
Modul de expunere a biomasei pe mediile lichide (la suprafa,
n adncime, fixat de perei etc.)
Mediul nutritiv utilizat pentru cultivare (componena mediului
solid i a celui lichid)
Cantitatea inoculului (la inocularea pe medii solide i lichide)
Caracteristica creterii pe mediile solide (durata fazelor i
viteza de cretere)
Caracteristicile creterii pe medii lichide (durata fazelor i
viteza de cretere)
Biomasa obinut pe medii solide (pe o perioad de 10-30
zile)
Biomasa obinut pe medii lichide (pe o perioad de 6-12
zile)
Concentraia de CO2 administrat n mediile nutritive lichide
Condiiile de cultivare pe medii solide i lichide (umiditatea
aerului, temperatura, iluminarea)
Metoda de cultivare (pe medii solide i lichide)
Instalaii utilizate pentru cultivare (aparate, vesel, caracteristica
instalaiei etc.)
pH-ul mediilor nutritive (la nceputul cultivrii i la sfritul
cultivrii)
Caracteristicile biochimice ale culturii (proteine, glucide,
lipide, vitamine etc.)
39
Rezultatul
CAPITOLUL VII
TEHNOLOGII DE CULTIVARE A MONOCULTURILOR ALGALE
CaPitolUl vII. TEHNOLOGII DE CULTIVARE A
alGale
de cultivareMonoCUltUrilor
a algelor reprezint
ansamblul de procese,
Tehnologiile
metode i
tehnici ce trebuie
aplicate
i respectate
pentru
obinerea
biomasei
algale.
Tehnologiile
de cultivare
a algelor reprezint
ansamblul
de procese,
metode i tehnici
ce
aplicate i respectate
pentrumari,
obinerea
algale.
Astfel,trebuie
considerm,
n linii
cbiomasei
tehnologiile
de cultivare a algelor obiAstfel, considerm,
mari, distinctive.
c tehnologiile de
cultivare etape
a algelorprevd
obinute nselectarea
nute n monocultur
includn5linii
etape
Aceste
monocultur includ 5 etape distinctive. Aceste etape prevd selectarea i prepararea mediilor
i prepararea
mediilor nutritive, pregtirea i inocularea algelor, identificarea
nutritive, pregtirea i inocularea algelor, identificarea i respectarea condiiilor de cultivare
i respectarea
condiiilor
de cultivare
urmat de
selectarea
i aplicarea
urmat de
selectarea i aplicarea
metodei corespunztoare
de cultivare
pentru obinerea
biomasei metodei
algale utilizate
vaste domenii pentru
(Fig. 8). obinerea biomasei algale utilizate n vaste
corespunztoare
dencultivare
domenii (Fig. 8).
Fig. 8. Schema
tehnologic
cultivare a algelor.
Fig. 8. Schema
tehnologic
dedecultivare
a algelor.
40
52
41
citologice, fiziologo-biochimice etc. Mediile solide sunt utilizate pentru pstrarea coleciilor algale (muzeu).58
Una dintre cele mai eseniale aspecte ale tehnologiilor de cultivare a algelor
este asigurarea cu elemente necesare nutriiei minerale. Pentru sinteza substanelor biologic active n biomasa algelor este necesar ca acestea s fie asigurate
cu macro- i microelemente. Majoritatea algelor au nevoie de azot pentru sinteza proteinelor. Pentru creterea eficient a algelor mediile nutritive trebuie s
conin i P, K, Mg, S. Calciul, de exemplu, este necesar doar n concentraii
reduse. Printre elementele ce sunt necesare pentru cultivarea algelor cianofite
se enumer i natriul, care face parte din grupa macroelementelor eseniale.
.., .. o . ,
1984. 336 .
59
.., .., .. . . . : , 1989. 605.
60
.. K .
// , 1983, .74-80.
58
42
Azotul
Numeroase
lucrri
fost
consacrate determinrii
determinrii rolului
chimice,
inclusiv a
Numeroase
lucrri
au au
fost
consacrate
roluluielementelor
elementelor
chimin aviaa
algelor, n
printre
un loc printre
important
l ocup
lucrrile
cercettorilor
ce,azotului,
inclusiv
azotului,
viaacare
algelor,
care
un loc
important
l ocupdin fosta
62 63 64 65 66
62-66
62 63 64 65 66
Uniune
Sovetic
.
lucrrile cercettorilor din fosta Uniune Sovetic.
.., .., ..
.
,..
1997.
184 .
..,
..,
62
..
. , 1997. 184 .
. //
. , 1981, c.139147.
6263
..
1965.
-
..,
..
. ,
272 .
64
.
.
. . ,
1981.
c.139147.
..,
..,//
..
63
..
.
. 1965.
272 .1980, c. 140157.
.
// ..,
.
,
65
64 .. , . // .
.., .., ..
.
.,
1952, c. 392.- . // -
66
..
. . 1980,
c. 140157. . // ,
1945, .14, 4, c.248 253.
61
61
65
.. "" , . // . . . 1952,
c. 392.
43
40
44
Fosforul
45
la procesele de fosforilare, n biosinteza i degradarea glucidelor, lipidelor, substanelor proteice. Fosforul este un nutrient care are un rol principal n procesele
metabolice fundamentale, cum sunt respiraia i fotosinteza.84, 85
Limitarea fosforului deregleaz toate procesele metabolice ce in de folosirea
energiei n celulele algelor.86 n cazul insuficienei de fosfor la cultivarea algei
Spirulina maxima se produce ncetinirea fotosintezei i micorarea cantitativ a
acizilor nucleici i eterilor fosfai.87 De rnd cu azotul, fosforul deseori limiteaz
creterea microalgelor n natur.88 Fosforul este administrat algelor n form de
H2PO4 i/sau HPO4.
n cercetrile sale C.. 89 demonstreaz importana fosforului
pentru alga Spirulina platensis. Experienele realizate de ea denot c cantitatea
de fosfor necesar pentru majorarea biomasei algale este de 18,73 mg/l adugate
n mediul Zarrouc. A fost demonstrat i corelaia dintre azot i fosfor ce duce la
creterea biomasei n faza liniar (fiind n raport de 4,3:1).
Stabilirea raportului optim dintre azot i fosfor este important, n special n
cazul cultivii algelor pe ape reziduale, facilitnd astfel selectarea concentraiei
optime.
Insuficiena fosforului mineral reduce sinteza oricrui pigment i blocheaz
sinteza la nivel de transcripie.90 n lipsa fosforului la lumin se distrug chiar i
carotenoizii care, de regul, sunt mai siguri la fotodistrucie.91 Concentraia fosforului din mediul nutritiv de cultivare a algei Spirulina platensis influeneaz
asupra coninutului de pigmeni din celule. .. i .. 92 au
demonstrat c n lipsa fosforului (timp de 6-7 zile) celulele algei Spirulina platensis pierd total pigmenii, dar i pstreaz forma de via. n lipsa fosforului
pigmenii se distrug de 5 ori mai mult dect n lipsa azotului.
Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i
Pedagogic, 1993, p.244-264.
85
Tarmure C. Biochimie structural i metabolic. Cluj- Napoca: Dacia, 1996, p.4358.
86
.., .. Spirulina platensis (NORDST.)
GEITL. . // M, 2002, . 60, .21-26.
87
Baldia S.F., Fukami K., Nuishijima T., Hata Y. Growth response of Spirulina platensis to
somo physico- chemical factors and the kinetics of phosphourus utillization. // EISH, 1995, no2,
p.351-335.
88
Dubinsky Z. Productivity af algae under natural, Handboc of microalgal mass culture. Ed.
Richmond A. Boca Raton CRC. Pres, 1986, p.101- 115.
89
C.. Spirulina platensis (NORDST.) GEITL.
. // , 2007, . 74, c.18-20.
90
Geider R.J, Maklntire H.L., Kana T.M., A dynamic of photoadaptation in phytoplankton. //
Limnol. Oceanorg., 1996, no 1, p.1-15.
91
k .. . // . . , 1989, .1-167.
92
.., .. Spirulina platensis (NORDST.)
GEITL. . // M, 2002, . 60, .21-26.
84
46
Kaliul
Unul dintre elementele nutritive de nenlocuit necesare pentru cultivarea algelor
este kaliul. Kaliul practic nu poate fi nlocuit cu alte elemente, doar n unele procese
individuale el se substituie cu natriu i rubidiu. n celule kaliul se gsete practic
n form solubil i determin structura coloidal chimic a citoplasmei i funcionarea activ a celulei. Cu tatoate c nu intr n componena proteinelor, lipidelor,
glucidelor, este necesar celulelor pentru sinteza lor. Consumul kaliului este realizat
printr-un proces metabolic activ legat de utilizarea luminii i energiei celulare n
condiii autotrofe sau n cazul nutriiei heterotrofe, folosind legturile organice.
Insuficiena acestui element n mediul nutritiv al algelor contribuie la inhibarea fotosintezei i majorarea respiraiei, diminuarea proceselor de biosintez a
glucigelor, lipidelor, protidelor i a diviziunii celulare.
n cazul micorrii concentraiei de kaliu apare cloroza. La adugarea kaliului
n mediul nutritiv de cultivare a algelor se normalizaz procesele de respiraie, de
acumulare a lipidelor i proteinlor.
Necesarul de kaliu pentru biosinteza a 1 kg de biomas uscat a algei Chlorella vulgaris este de 15-16 g. La cultivarea continu a algei Chlorella vulgaris
s-a nregistrat consumul minimal de 10-11 g de kaliu pentru sinteza a 1 kg de
biomas uscat.
Consumul de kaliu de ctre celulele algelor este dependent i de concentraia altor sruri. La concentraia nalt de NaCl (20 g/l) n mediul de cultivare a
algei Chlorella vulgaris se reduce de dou ori consumul de kaliu. Pentru cultivarea microalgelor Spirulina platensis, Dunaliella tertiolecta i Cyanidium
caldarium n scopul obinerii biomasei, necesarul de kaliu este de 1000 mg/l
(n form de KNO3).95
Gh. Neamu96 susine c raportul optim dintre coninutul potasiului intracelular i cel extracelular, la plante, este de 25:1. Potasiul are un rol important
93
.., .. Spirulina platensis (NORDST.)
GEITL. . // M, 2002, . 60, .21-26.
94
Fogg G.E. Phosporus in primary aquatic plants. // Water Res., 1973, no7, vol.12, p.77-89.
95
.. -
o. , 1983. 240 .
96
Neamu G. Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i
Pedagogic, 1993, p.244-264.
47
Magneziul
Magneziul este important pentru alge, fiind component al clorofilei i al multor
altor legturi organice. Are un rol nsemnat n reaciile de fosforilare i contribuie la
meninerea echilibrului compuilor macroergici, precum i la metabolismul acidului fosforic. Intervine aproape n toate procesele metabolice ce necesit ATP.
Insuficiena magneziului, spre exemplu, n mediul nutritiv de cultivare a algei Chlorella vulgaris contribuie la reducerea biosintezei proteinelor, la majorarea coninutului de glucide i la reducerea creterii culturii. Influeneaz asupra
schimbului de acizi nucleici.
Pentru biosinteza a 1 kg de biomas uscat a algei Chlorella vulgaris se consum 4-6 g de magneziu. La cultivarea continu a acestei alge necesitatea n magneziu este de 3,3 g la biosinteza a 1 kg de biomas (recalculat la mas uscat).
Magneziul particip n procesele de biosintez a clorofilei, protidelor, glucidelor, lipidelor etc. Ionii acestui element chimic mresc permeabilitatea membranelor celulare, favorizeaz absorbia fosforului. Magneziul se comport ca un
reglator al metabolismului calciului. Absorbia magneziului n celulele plantelor
este reglat de raportul dintre potasiu i magneziu i de pHul mediului.100, 101
Magneziul este utilizat pentru cultivarea algelor, de regul, n form de sulfat
de magneziu care, pe lng magneziu, asigur celulele i cu sulf. Ca surs de
magneziu poate fi utilizat i carbonatul de magneziu, care asigur n paralel i
stabilizarea pH-ului la utilizarea n componena mediilor nutritive a legturilor
acide. Pentru cultivarea industrial se utilizeaz kaliumagneziu, ce servete ca
surs de magneziu, kaliu i sulf.
Sulful
Sulful este unul dintre elementele necesare pentru cultivarea algelor. Intr n
componena proteinelor, fermenilor, peptidelor, aminoacizilor ce conin sulf, fiTarmure C. Biochimie structural i metabolic. Cluj- Napoca: Dacia, 1996, p.4358.
Chiu I. Biochimie. Vol. I. Timioara: Mitron, 1999, p.94111.
99
.. -
o. , 1983. 240 .
100
Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic
i Pedagogic, 1993, p.244-264.
101
Stancic M. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i Pedagogic, 2003, p.4378.
97
98
48
ind un component al multor altor legturi organice din celulele algelor. Unele
legturi ale sulfului particip n cadrul reaciilor de oxidoreducere, n biosinteza
i metabolismul multor substane. n particular, rolul sulfului este important n
determinarea proprietilor i structurii de transformare a moleculelor proteice.
Majoritatea algelor consum sulful din legturile oxidative sulf-sulfai.
Sulful particip n cadrul metabolismului general i se reduce (de la sulfai
pn la sulfhidril). n unele condiii specifice n celule se poate realiza procesul
de recuperare a sulfailor. Sulful anorganic din celulele algelor nu permite acumularea producenilor toxici ai oxidrii aminoacizilor ce conin sulf.
La reducerea concentraiei de sulf n mediul nutritiv pn la 3,3 g la 1 kg de biomas algal (recalculat la masa uscat) celulele algei Chlorella vulgaris resimt
insuficiena lui. Acest lucru condiioneaz majorarea dimensional a celulelor
acestei alge, ceea ce indic c se modific mecanismul de dividere celular.
Ca surs de sulf n mediile nutritive de cultivare a algelor cel mai frecvent
se utilizeaz sulfaii sau alte forme ale sulfului. La cultivarea unei alte alge din
genul chlorela (Chlorella pyrenoidosa) poate fi utilizat sulful din tiosulfai, din
aminoacizii metionina i cistina. n mediile nutritive sulful este sub forma sulfailor (sau a acidului sulfuric).
La cultivarea speciilor din genul Chlorela coninutul de sulf n celule, de obicei, se situeaz ntre 4 i 11 g la 1 kg biomas uscat.102
Sulful se introduce n mediile nutritive n forma sulfailor de magneziu, de
kaliu, de amoniu, de zinc, de fier, de cupru.
Calciul
Un alt element nutritiv necesar pentru cultivarea algelor este calciul. Comparativ
cu plantele superioare, algele au o necesitate mai mic de calciu. Ionii de calciu au
un rol important n stabilizarea structurii membranare, permit absorbia de ctre celule a anionilor i cationilor. ndeprtarea calciului determin creterea schimbului
fluxului de ioni din celul. Acest element micoreaz permeabilitatea membranelor
protoplasmatice, modific pH-ul mediului deplasndu-l spre valori bazice. mpiedic ieirea potasiului din celule n timpul mbtrnirii acestora. Pe lng acestea,
103, 104, 105
se evideniaz i aciunea bicatalitic n numeroase procese biochimice.103-105
Calciul poate fi exclus din mediul nutritiv de cultivare a algelor prin tratarea special a mediilor. Ca rezultat, are loc micorarea creterii biomasei algei
Chlorella vulgaris. La adugarea a 0,001-0,2 mg/l de Ca dezvoltarea culturii de
clorel revine la norm.
102
.. - . , 1983. 240 .
103
Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic
i Pedagogic, 1993, p.244-264.
104
Stancic M. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i Pedagogic, 2003, p.4378.
105
CachitaCosma D., Deliu C., Rakosy-Tican L., Ardelean A. Tratat de biotehnologie
vegetal. Vol. I. Cluj- Napoca: Dacia, 2003, p.10-18.
49
La alte alge, cum ar fi specile genurilor Chlorococcum, Amphora .a., insuficiena calciului ncetinete deplasarea.
Administrarea acestui element n doz de 0,4 mg/l contribuie la acumularea
cuprului n celulele algei scenedesmusului i la inhibarea creterii biomasei. Se
consider c calciul ptruns n celule apr liganda locul cu aciune toxic a
cuprului.
Calciul, n forma carbonatului de calciu, contribuie la reglarea pH-ului mediului nutritiv, n cazul utilizrii legturilor fiziologice acide. Carbonatul de calciu
este puin solubil i nu contribuie la bazificarea puternic a mediului nutritiv.
ns, utilizarea carbonatului de calciu, n unele condiii, poate contribui la infectarea culturilor algale cu bacterii parazite.
Pentru stabilizarea pHului mediului nutritiv de cultivare a algelor se recomand utilizarea carbonatului de magneziu, care nu afecteaz cultura.
n unele cazuri pentru cultivarea industrial a algelor poate fi utilizat apa de
suprafa sau subteran, care are n componena sa calciu.106
Sodiul
Natriul este un element necesar pentru cultivarea algelor cianofite; la excluderea lui din mediu nutritiv multe culturi se dezvolt slab. Lipsa natriului n mediul nutritiv pentru cultivarea algei Anabaena cylindrica contribuie la reducerea
concentraiei clorofilei i a coninutului de azot organic din celule. n cazul insuficienei natriului algele elimin din celule n form organic o parte mare a
carbonului fixat anterior.
Rezistena algelor la natriu, n form de NaCl, este diferit. Mai puin rezistente sunt formele filamentoase, multe din ele nu rezist la concentraia de 10 g/l,
iar alte alge i stopeaz creterea la concentraia de 20 g/l. Algele cianofite unicelulare pot crete pe medii nutritive cu concentraii de 30 g/l NaCl, iar la 50-90
g/l creterea lor, de regul, se oprete. Sunt ns unele specii, cum ar fi cele din
genurile Microcystis, Synechocystis, Aphanocapsa, Myxosarcina, care pot crete
i la concentraii de 90 g/l NaCl.
Unele cercetri demonstreaz c n cazul surplusului de NaCl n mediul nutritiv de cultivare a algelor se prelungesc fazele de cretere i se frneaz procesul
de reproducere a celulelor algale. Se minimizeaz procesul de sintez a clorofilei,
dar fotosinteza continue i, n rezultat, se produc modificri morfologice (crete
volumul i masa celular). Nu se produc modificri ale concentraiei proteinelor
i glucidelor din celulele algale. n cazul excesului de NaCl n mediul nutritiv de
cultivare se produce plasmoliza, se decoloreaz cromatoforii, se stopeaz reproducerea i celulele mor.
Sodiul se gsete n plante, predominant n lichidele extracelulare. Contribuie la reglarea presiunii osmotice i la circulaia apei. nlocuiete potasiul
.. - . , 1983. 240 .
106
50
51
Eucapsis (necesit asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N41,2-139,36; P-35,56; K-264,11-476,51;
Mg-7,39-19,72; S-27,12-46,14; Ca-15,16-54,52; Na- 56,64-77,45);
Anabaenopsis (poate fi cultivat prin asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele macroelemente (mg/l) ): N0-85,44; P-0,06-7,11; K-0,12-7,11;
Mg-0,03-7,39; S-0,03-9,75; Ca-0,1-1; Na- 0-0,09);
Cylindrospermum (trebuie ca mediile nutritive s conine urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N0-279,85; P-0,06-53,35; K-0,12224,42; Mg-2,46-19,72; S-3,25-44,19; Ca-0,1-40; Na- 0-108,4);
Tolypothrix i Oscillatoria (mediile nutritive trebuie s conin urmtoarele macroelemente (mg/l); N0-139,36; P-35,56; K-476,51; Mg-19,72;
S-27,12; Ca-54,52; Na-56,64);
Anabaena (prefer macroelementele (mg/l): N0-279,85; P-7,11-35,56; K7,11-476,51; Mg-7,39-19,72; S-9,75-27,12; Ca-1-54,52; Na- 0-414,58);
Calothrix (concentraia macroelementelor trebuie s fie urmtoarea (mg/l):
N0-279,85; P-4,48-53,35; K- 0,12-476,51; Mg-19,72; S-3,25-44,19; Ca0,1-54,52; Na-0-108,4) (Tab. 8).
Cea mai mare necesitate n macroelemente au speciile de alge cianofite din
genurile Microcystis (N279,85 mg/l; P-61,88 mg/l; K- 937,42 mg/l; Mg-24,25
mg/l; S-32,04,19 mg/l; Ca-29,99 mg/l; Na-46,02 mg/l) i Spirulina (N412 mg/l;
P-88,92 mg/l; K- 713,21 mg/l; Mg-19,72 mg/l; S-210 mg/l; Ca-25,55 mg/l; Na676,2 mg/l) (Tab. 8). Astfel, constatm c pentru cultivarea speciilor de alge din
genurile Microcystis i Spirulina vor fi necesare cheltuieli mai mari pentru mediile nutritive, deoarece au nevoie de cantiti mai nalte de macroelemente.
De menionat c concentraia azotului pentru genurile Anabaenopsis, Cylindrospermum, Tolypothrix, Oscillatoria, Anabaena i Calothrix poate fi egal cu
zero. Acest lucru se explic prin faptul c speciile acestor genuri au capacitatea
de fixare biologic a azotului atmosferic. Totui, pentru cultivarea industrial a
lor n scopul obinerii biomasei furajere, alimentare sau farmaceutice trebuie asigurat un coninut mai nalt de azot (indicat anterior).
La nivel de familii, necesitatea de macroelemente n mediile nutritive este
urmtoarea:
Coccobactreaceae, Merismopediaceae, Pleurocapsaceae, Dermocarpaceae, Chamaesiphonaceae, Mastigocladaceae, Nostocaceae, Nodulariaceae, Schizothrichaceae, Plectonemataceae, Scytonemataceae (concentraia optim a macroelementelor mg/l este de: N-139,36; P-35,56; K-476,51;
Mg-19,72; S-27,12; Ca-54,52; Na-56,64).
Holopediaceae (mediile nutritive trebuie s conin macroelementele specifice genului Coccopedia);
Gloeocapsaceae (prefer mediile nutritive cu urmtoarele macroelemente
(mg/l): N-41,2-139,36; P-35,56; K-264,11-476,51; Mg-7,39-19,72; S-27,
12-46,14; Ca-15,16-54,52; Na-56,64-77,45).
52
Anabaenaceae (necesarul de macroelemente este urmtorul (mg/l): N0279,85; P-0,06-53,35; K-0,12-224,42; Mg-2,46-19,72; S-3,25-44,19; Ca0,1-54,52; Na- 0-414,58);
Concentraia de microelemente necesar pemtru cultivarea algelor din familia Scytonemataceae este asemntoare cu cea a familiilor Coccobactreaceae, Merismopediaceae, Pleurocapsaceae, Dermocarpaceae, Chamaesiphonaceae, Mastigocladaceae, Nostocaceae, Nodulariaceae, Schizothrichaceae i Plectonemataceae, excepie fcnd azotul, care poate s
lipseasc;
Rivulariaceae (este repartizat de genul Calothrix, respectiv i macroelementele sunt specifice acestui gen);
Microcistidaceae pot fi cultivate pe medii nutritive asigurate cu urmtoarele
macroelemente (mg/l): N-139,36-279,85; P- 35,56-61,88; K-47, 51-937,42;
Mg-19,72-24,25; S-27,12-32,04; Ca-29,99-54,52; Na-46,02-56,64);
Oscillatoriaceae (mediile nutritive trebuie s posede urmtoarea componen de microelemente (mg/l): N0-412,85; P-35,56-88,92; K- 476,51713,21; Mg-19,72; S-27,12-210; Ca-25,55-54,52; Na-56,64-676,2).
La nivel de clase necesitatea n macroelemente este urmtoarea:
Chroococceae (mediile nutritive trebuie s conin macroelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): N-41,2-279,85; P-35,56-61,88; K-134,
68-937,42; Mg-7,39-24,25; S-27,12-24,25; Ca-15,16-54,52; Na-56,64196,34);
Chamaesiphoneae (macroelementele trebuie s fie aceleai ca i pentru
ordinele, familiile i genurile care o reprezint);
Hormogoneae (concentraia macroelementelor variaz i se prezint astfel (mg/l): N-0-412,85; P-0,06-88,92; K-0,12-713,21; Mg-0,03-19,72;
S-0,03-210; Ca-0,1-54,52; Na-0-676,2).
.
53
54
Taxoni
Gloeocapsaceae
Holopediaceae
Merismopediaceae
Microcistidaceae
Familie
Coccobactreaceae
Oscillatoriales
Schizothrichaceae
Plectonemataceae
Rivulariaceae
Oscillatoriaceae
Scytonemataceae
Nodulariaceae
Pleurocapsaceae
Dermocarpaceae
Chamaesiphonaceae
Mastigocladales Mastigocladaceae
Nostocales
Nostocaceae
Anabaenaceae
Pleurocapsales
Dermocarpales
Ordin
Chroococcales
Myxosarcina
Cyanotheca
Chamaesiphon
Mastigocladus
Amorphonostoc
Anabaena
Anabaenopsis
Cylindrospermum
Nodularia
Microchaete
Scytonema
Tolypothrix
Calothrix
Oscillatoria
Spirulina
Phormidium
Symploca
Lyngbya
Microcoleus
Plectonema
Gen
Synechocystis
Synechococcus
Coccopedia
Merismopedia
Microcystis
Aphanothece
Gloeocapsa
Eucapsis
139,36
139,36
139,36
139,36
139,36
0-279,85
0-85,44
0-279,85
139,36
139,36
139,36
0-139,36
0-279,85
0-139,36
412
139,36
139,36
139,36
139,36
139,36
N
139,36
139,36
84,85
139,36
279,85
139,36
139,36
41,2-139,36
35,56
35,56
35,56
35,56
35,56
7,11-35,56
0,06-7,11
0,06-53,35
35,56
35,56
35,56
35,56
4,48-53,35
35,56
88,92
35,56
35,56
35,56
35,56
35,56
P
35,56
35,56
53,34
35,56
61,88
35,56
35,56
35,56-48,19
K
476,51
476,51
134,68
476,51
937,42
476,51
476,51
364,11
476,51
476,51
476,51
476,51
476,51
476,51
7,11-476,51
0,12-7,11
0,12-224,42
476,51
476,51
476,51
476,51
0,12-476,51
476,51
713,21
476,51
476,51
476,51
476,51
476,51
S
27,12
27,12
213,53
27,12
32,04
27,12
27,12
27,12
46,14
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
7,39-19,72 9,75-27,12
0,03-7,39 0,03-9,75
2,46-19,72 3,25-44,19
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
3,25-44,19
19,72
27,12
19,72
210
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
Mg
19,72
19,72
19,72
19,72
24,25
19,72
19,72
7,39-19,72
Tabelul 8
Ca
Na
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
196,34
54,52
56,64
29,99
46,02
54,52
56,64
54,52
56,64
15,16
- 56,64 54,52
-77,45
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
1-54,52
0-414,58
0,1-1
0-0,09
0,1-40
0-108,4
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
0,1-54,52 0-108,4
54,52
56,64
25,55
676,2
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
Tabelul 9
Coninutul macroelementelor necesare pentru cultivarea algelor cianofite
din diferite clase
Clasa
Chroococceae
Chamaesiphoneae
Hormogoneae
N
P
41,2-279,85 35,56-61,88
139,36
35,56
476,51
19,72
27,12
54,52
56,64
0-412
0,06-88,92
0,12-713,21
0,03-19,72
0,03-210
0,1-54,52
0-676,2
Genul Hydrodictyon poate fi cultivat pe medii care conin urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N-14,67-41,54; P- 11,86-31,12;
K-68,61-78,56; Mg-3,28-7,39; S-5,81-9,75; Ca-0,43-15,16; Na-0,68-78,005.
Raportul dintre N:P:K:Mg:S:Ca:Na este de la 1:0,81:4,68:0,22:0,39:0,03:0,05
pn la 1:0,75:1,89:0,18:0,23:0,36:1,88.
Genul Dunaliella mediile nutritive trebuie s fie mai bogate n macroelemente. Concentraia macroelementelor ce trebuie asigurat este urmtoarea
(mg/l): N-349,36; P-45,52; K-1024,26; Mg-4930; S-6505,67; Ca-0; Na45627,74.
La nivel de familii, necesitatea macroelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor este urmtoarea:
Chlamydomonadaceae i Ulotrichaceae este necesar ca mediile nutritive s conin urmtoarele concentrai de macroelemente (mg/l): N-0,014139,36; P-0,002-35,56; K-0,004-476,51; Mg-0,001-19,72; S-0,001-27,12;
Ca-0-96,6; Na-0-56,64;
Ankistrodesrmaceae prefer macroelemente n urmtoarele cantiti
(mg/l): N-14,67-139,36; P-11,86-35,56; K- 68,61-476,51; Mg- 3,28-19,72;
S-5,81-27,12; Ca- 0,43-96,6; Na- 0,68-56,64.
Trentepohliaceae i Selenastraceae pot fi cultivate pe medii ce conin urmtoarele macroelemente (mg/l): N- 14,67; P- 11,86; K- 68,61; Mg- 3,28;
S-5,81; Ca- 0,43; Na-0,68.
Asteromonadaceae pot fi cultivte pe medii cu urmtorul coninut de macroelemente (mg/l): N-0,014-14,67; P- 0,002-11,86; K-0,004-68,61; Mg0,001-3,28; S-0,001-5,81; Ca-0-0,43; Na-0-0,68.
Chlorellaceae i Scenedesmaceae concentraia macroelementelor din
mediile nutritive este urmtoarea (mg/l): N-0,014-139,36; P-0,002-35,56;
K-0,004-476,51; Mg-0,001-19,72; S-0,001-27,12; Ca-0-96,6; Na-0-56,64;
Chlorococcaceae pot fi cultivate pe medii nutritive cu urmtoarele
concentraii de microelemente (mf/l): N-14,67-139,36; P-11,86-35,56; K68,61-476,51; Mg- 3,28-19,72; S-5,81-27,12 ; Ca- 0,43-96,6; Na- 0,6856,64;
Oocystaceae, Coelastraceae, Botryococcaceae, Desmidiaceae pot fi cultivate pe medii nutritive ce conin macroelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): N-139,36; P-35,56; K-476,51; Mg-19,72; S-27,12; Ca-96,6;
Na-56,64;
Hydrodictyaceae concentraia macroelementelor n mediul nutritiv trebuie s fie urmtoarea (mg/l): N-14,67-41,54; P- 11,86-31,12; K-68,6178,56; Mg-3,28-7,39; S-5,81-9,75; Ca-0,43-15,16; Na-0,68-78,005;
Dunaliellaceae speciile pot fi cultivare pe medii nutritive ce conin macroelemente specifice genului Dunaliella.
La nivel de ordin concentraiile de macroelemente necesre de a fi asigurate n
mediile nutritive se prezint astfel:
56
Chlamydomonadales pot fi cultivate pe medii nutritive ce conin macroelemente, menionate mai sus, pentru familia Chlamydomonadaceae;
Ulotrichales i Chlorococcales pot fi cultivate pe medii untritive ce conin urmtoarele macroelemente (mg/l): N-0,014-139,36; P-0,002-35,56;
K-0,004-476,51; Mg-0,001-19,72; S-0,001-27,12; Ca-0-96,6; Na-0-56,64;
Volvocales pentru a fi cultivat trebuie s fie asigurat cu macroelemente n
urmtoarele concentraii (mg/l): N-349,36; P-45,52; K-1024,26; Mg-4930;
S-6505,67; Ca-0; Na-45627,74;
Desmideales a fost studiat doar o familie i un gen. Pentru cultivarea
acestor specii este necesar ca mediile nutritive s conin macroelemete,
menionate mai sus, pentru genul Staurastrum.
Analiza concentraiei macroelementelor necesare pentru cultivarea diferitelor
clase sistematice ale algelor verzi se prezint astfel:
Chlorococcophyceae i Ulotrichophyceae este necesar s asigurm mediile nutritive practic cu aceleai concentraii de macroelemente, excepie
fcnd Na, care pentru algele din clasa Chlorococcophyceae este mai nalt
(0-78,005 mg/l);
Zygnematophyceae poate fi cultivat pe medii nutritive cu urmtoarele
concentraii de macroelemente (mg/l): N-139,36; P-35,56; K-476,51; Mg19,72; S-27,12; Ca-96,6; Na-56,64;
Volvocophyceae are cea mai mare cerin fa de macroelemente. Pentru
cultivarea speciilor din clasa Volvocophyceae mediile nutritive trebuie
s conin urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N-0,014349,36; P-0,002-45,52; K-0,004-1024,26; Mg-0,001-4930; S-0,0016505,67; Ca-0-96,6; Na-0-45627,74 (Tab. 11).
Astfel, constatm c odat cu ascendena n treapta sistematic de la specie
la clas se observ variaii mari ale concentraiilor de macroelemente necesare
pentru cultivarea algelor verzi.
57
58
Volvocales
Desmideales
Dunaliellaceae
Desmidiaceae
Selenastraceae
Scenedesmaceae
Hydrodictyaceae
Oocystaceae
Coelastraceae
Botryococcaceae
Chlorococcaceae
Trentepohliaceae
Ankistrodesrmaceae
Asteromonadaceae
Chlorellaceae
Ulotrichaceae
Ulotrichales
Chlorococcales
Familie
Chlamydomonadaceae
Ordin
Chlamydomonadales
Taxoni
0,014-14,67
0,002-11,86 0,004-68,61
0,001-3,28
0,001-5,81
K
Mg
S
0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
11,86
68,61
3,28
5,81
11,86-35,56 68,61-476,51 3,28-19,72 5,81-27,12
P
0,002-35,56
Dunaliella
Staurastrum
Pediastrum
Kirchneriella
Scenedesmus
14,67
11,86
68,61
3,28
5,81
14,67
11,86
68,61
3,28
5,81
0,014-139,36 0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
349,36
45,52
1024,26
4930
6505,67
139,36
35,56
476,51
19,72
27,12
Chlorella
Asteromonas
Gen
N
Haematococus 0,014139,36
Chlamydomo- 0,014139,36
nas
Stichococcus 0,014139,36
0,014Ulothrix
139,36
Trentepohlia 14,67
Ankistrodesmus 14,67-139,36
0
96,6
45627,74
56,64
0,6878,005
0,68
0,68
0-56,64
0,68-56,64
0,68-56,64
0,68-56,64
0,68-56,64
0,68
56,64
56,64
56,64
0,43-96,6
0,43-96,6
0,43-96,6
0,43-96,6
0,43
96,6
96,6
96,6
0,4315,16
0,43
0,43
0-96,6
0-56,64
0-0,68
0-96,6
0-0,43
0,68
0,68-56,64
0-56,64
0-96,6
0,43
0,43-96,6
0-56,64
0-56,64
0-96,6
0-96,6
Na
0-56,64
Tabelul 10
Ca
0-96,6
Tabelul 11
Concentraia macroelementelor necesar pentru cultivarea diferitelor
clase de alge verzi
Clas
Chlorococcophyceae
Ulotrichophyceae
Zygnematophyceae
Volvocophyceae
N
0,014-139,36
P
0,002-35,56
Ca
0-96,6
Na
0-78,005
0,014-139,36
0,002-35,56
0,004-476,51
0,001-19,72
0,001-27,12
0-96,6
0-56,64
139,36
35,56
476,51
19,72
27,12
96,6
56,64
0,001-4930
0,001-6505,67
0-96,6
0-45627,74
0,014-349,36
0,002-45,52 0,004-1024,26
telor variaz i n funcie de genul algelor. Cultivarea algelor din genul Chloridella poate fi realizat pe medii ce conin urmtoarele doze de macroelemente
(mg/l): N-14,67; P- 11,86; K-68,61; Mg-3,28; S-5,81; Ca-0,43; Na-0,68. Cele
din Pleurochloris necesit cantiti variate de macroelemente (mg/l): N-0,01414,67; P- 0,002-11,86; K-0,04-68,61; Mg-0,001-3,28; S-0,001-5,81; Ca-0-0,77;
Na-0,68. Algele din genul Chlorocloster au preferine mai mari de macroelemente (de 1,2-99 ori) dect cele din genul Pleurochloris (Tab. 14)
60
61
Ordin
P
476,51
K
19,72
Mg
27,12
S
96,6
Ca
Ordin
Taxoni
Familie
Gen
Mg
Ca
Tabelul 13
56,64
Na
Tabelul 12
Ordin
Heterococcales
Heterococcophyceae
Familie
Pleurochloridaceae
Taxoni
Chlorocloster 41,2
53,16 83,94
68,61
Pleurochloris
11,86
P
14,67
Chloridella
Gen
5,81
0,43
Ca
0,68
Na
7,39
9,82
15,97
67,62
3,28
Mg
Tabelul 14
Coninutul macroelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor galben-verzi, mg/l
Clas
Rhodellophyceae Porphyridiales Porphyridiaceae Porphyridium 202,63 88,2 713,97 242,56 320,04 44,12 493,54
Clas
Gen
Familie
Pennatophyceae Raphinales
Clas
Taxoni
Fe, mg/kg
1800
650
Fe/Cu
70
50
Fe/Zn
20
9
Fe/Mn
36
2
Fe/Mo
4000
1480
180
10
300
720
10
34
240
Fierul
Este un microelement necesar la cultivarea algelor, deoarece particip n multe procese fiziologice. Formele lui metabolice sunt fermenii ce conin fier, ca:
catalaza, peroxidaza, citocromoxidaza, variai citocromi i feroproteine (ferodoxin, fiero-flavoproteide). Proteinele fierice particip n reaciile oxidoreductoare
ale fotosintezei, respiraiei, metabolismului glucidelor, la fixarea azotului atmosferic. Fierul i molibdenul intr n componena nitrogenazei, care catalizeaz
recuperarea azotului molecular n procesul de fixare a azotului.
Insuficiena fierului conduce la reducerea creterii algelor, ca rezultat al micorrii fotosintezei i apariiei clorozei. Dup adugarea fierului n mediul nu109
.., .., .. . . . : , 1989. 605 .
110
.. . -, 2004. 336 .
62
Manganul
63
Zincul
Zincul este parte component a fermenilor, care influeneaz asupra metabolismului glucidelor, proteinelor, fotosintezei i regleaz potenialul oxidoreductor al celulelor. Zincul se conine n fermeni n concentraii de 0,2-0,3%.
Actualmente se cunosc mai bine de 40 de fermeni ce conin zinc. Zincul fortific
biosinteza acizilor nucleici i influenez asupra activitii fermenilor metabolismului nucleic.114
n rezultatul experimentelor efectuate cu algele Euglena i Chlorella s-a stabilit c zincul are o legtur direct n sinteza ARN i a proteinelor. Insuficiena
Zn contribuie la reducerea sintezei ARN i proteinelor, dar nu influeneaz asupra
sintezei ADN-ului. Cultivarea algei Euglena pe medii nutritive cu coninut insuficient de zinc contribuie la dispariia ribosomilor citoplasmatici, meninndu-i
structura. La adugarea zincului acest proces se regleaz i ribosomii celulari
reapar, meninndu-i structura.115
Zincul acioneaz i ca stabilizator al componentelor membranelor biologice.
Acest element se leag mai uor n membrana celular a algelor comparativ cu
alte microelemente (cum ar fi Fe, Cd, Co, Cu) i determin reactivitatea lor.
Zincul, n doze de 5-20 mg/l, este propus pentru nlturarea bacteriilor din
cultura infectat de clorela.
Cuprul
64
Molibdenul
Molibdenul se gsete n plante n forma anionilor de (MoO42-). Molibdenul se
consider microelementul metabolismului azotului, deoarece intr n componena centrelor active ale nitratreductazei (HO) i nitrogenazei, ndeplinind funcia
de fixare biologic a azotului. Acest element este necesar n special n mediile
ce conin azot nitric, sau n condiiile cnd azotul molecular este unica surs
nutritiv de azot. La fixarea biologic a azotului molibdenul poate fi nlocuit cu
vanadiul, care ns este mai puin efectiv dect molibdenul. Astfel, molibdenul
are un rol decisiv n procesul de fixare biologic a azotului, care n cantiti nu
prea mari persist n nitrogenaz chiar i la substituirea lui cu vanadiu n mediul
nutritiv de cultivare a algelor.
Albergoni V., Piccini E., Coppellotti O. Response to heavy metals in organism. Excretion and
accumulation of physiological and nonphysiological metals in Euglena gracilis. // omparative
Biochem. Physiol., 1980, vol.67, n2, p.121-127.
118
.., .., .. Eustigmatos magnuis (B. Petersen) Hibberd (Eustigmatophyta) Hantzschia amphioxis
(Ehrenberg) Grunow in Cleve et Grunow (Bacillariphyta) .
// , 2009, .6 (100), c.609-610.
119
.., .., .., .., ..,
.., .., .., .. . , 2005.
640 .
117
65
Insuficiena molibdenului contribuie la acumularea unor cantiti mari de nitrai i se frneaz creterea algelor. La cultivarea algei cianofite Nostoc muscorum n insuficien de molibden, celulele capt o culoarea galben-verde, ca
rezultat al reducerii concentraiei de ficocianin i clorofil.
Conform datelor noastre, s-a demonstrat c la cultivarea algei Nostoc flagelliforme pe medii nutritive lipsite de azot i molibden nu se atest modificri morfologice ale celulelor algale, iar pe perioada de cultivare se desfoar toate fazele
de cretere.
Molibdenul este component al mai multor fermeni i poate fi n formele
Mo(VI) i Mo(V). Se cunosc mai bine de 20 de fermeni ce conin molibden,
dintre care menionm: aldehidoxidaza, sulfitoxidaza, xantindehidrogenaza, xantinoxidaza etc. n cazul fermenilor nitratreductaza i xantinoxidaza molibdenul
intr n componena molibdopterinei, sau molibdocofactorului (Mo-Co). Mo-Co
se formeaz i se distruge uor i este un centru activ al nitratreductazei, unde n
prezena molibdenul nitraii se transform n NO2..120
Pentru fixarea biologic a azotului sunt necesare cantiti mai mari de molibden dect n cazul reducerii nitrailor, iar n mediile nutritive care conin azot
amoniacal molibdenul nu este necesar.
Molibdenul este necesar plantelor n cantiti mai mici dect alte microelemente. Simptomele morfologice n cazul insuficienei molibdenului uneori apar
dereglri ale culturii algale asemntoare cu cele aprute n cazul insuficienei
azotului.115, 116
Borul
Borul este parte component a grupei metaloizilor i n soluii apoase la concentraii mai mici de 25 mM persist n form monomer B(OH)3 sau n form
ionic B(OH)4-. Borul se mai ntlnete n plante n form complex cu legturile organice. Absorbia borului este dependent direct de pH. Borul se conine n
peretele celular i constituie circa 60-80% din cantitatea lui, fiind legat cu polizaharidele pectinice. n cazul insuficienei borului, proprietile fizice ale peretelui
celular se modific, se inhib rapid elasticitatea celulelor, se modific formarea
peretelui celular i funcionarea plasmolemei. Cu toate acestea, se consider c
borul particip n unele procese, cum ar fi: sinteza i structura peretelui celular,
metabolismul glucidelor, ARN, fenoluri, respiraie, transportul zaharurilor, funcionarea plasmolemei, reglarea procesului de cretere i dezvoltare.
Borul, n comparaie cu microelementele metalice, nu este component sau activator al fermenilor. Elementul respectiv este un formator de complexe, care, la
fel ca i calciul, formeaz uor legturi coordinative cu substanele ce au legturi
ale grupei-OH n poziia cis. Posibil, ar exista o concuren direct ntre bor i
calciu pentru locul de legtur a polimerilor peretelui celular.
Borul reprezint un element necesar plantelor superioare i unelor alge n procesul de cultivare. Experienele efectuate cu alge marine i alge diatomee terestre au
120
.. . -, 2004. 336 .
66
Cobaltul
Cobaltul ndeplinete mai multe funcii specifice i nespecifice n celulele
microorganismelor. Este de nenlocuit din componena coenzimei cobalamina,
particip la multe reacii fermentative. Datorit proprietilor lui de a forma xelaturi cu legturile organice, acioneaz activ n cadrul unor reacii specifice din
celulele microorganismelor. Se consider c sporete activitatea antibacterian,
influennd asupra bacteriei Salmonella pullorum.
Concentraia optim a cobaltului variaz n funcie de specia microorganismelor, regimul de cultivare i specificul microorganismelor. n unele condiii speciale microorganismele au capacitatea de a se acomoda la doze nalte de cobalt.
Experimental s-a demonstrat c cobaltul este necesar pentru cultivarea algelor cianofite Nostoc muscorum, Calothrix parietina, Coccochloris peniocystis,
Microcystis aeruginosa. La concentraiile cobaltului de 0,003 mcg/l s-a majorat
creterea biomasei (cu 58%) i concentraia azotului, iar concentraia de 0,04
mcg/l este optim pentru creterea bun a culturilor. Ionii de cobalt n concentraii mici (0,2-0,4 mg/l), pot fi substituii cu vitamina B12 n cantiti mici (0,0075
mcg/l), nemodificnd creterea culturii. Este necesar att algelor cianofite azotfixatoare, ct i celor neazotfixatoare, indiferent de sursa de azot (molecular sau
din srurile introduse n mediu). De rnd cu cuprul i zincul, cobaltul se atribuie
elementelor active algicide: concentraii de 1 mg/l inhib creterea microcistesului pe mediul nutritiv.
Excesul de cobalt n mediul nutritiv inhib creterea algelor. Astfel, la cultivarea algei Euglena gracilis n prezena acestui element n doze mari (mai mari de
4,4 mg/l) are loc stoparea total a creterii.
.. -
oo. , 1983. 240 .
121
67
Cobaltul este necesar pentru multe microorganisme n forma specific vitamina B12, sau n forma uneia din cobamidele de cobalt, care pot fi sintetizate sau
adugate direct n medii nutritive.
Pentru fixarea biologic a azotului molecular plantele superioare au nevoie
de cobalt. n plante acest element se gsete n form ionic i ca legturi porfirinice cianocobalamine (vitamina B12). Insuficiena cobaltului influeneaz
asupra aspectului exterior, simptomele fiind asemntoare cu cazul insuficienei
azotului.122
68
Cylindrospermum are nevoie de urmtoarele concentraii de microelemente
(mg/l): Fe-0,0001-0,5; Mn-0-0,5;Zn-0-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0-0,009; B-00,4; Co-0-0,0004;
Anabaena i Calothrix pentru cultivare sunt necesare urmtoarele microelemente (mg/l): Fe-0-1,86; Mn-0-0,66; Zn-0-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0-0,54;
B-0-0,4; Co-0-0,01;
Microcystis poate fi cultivat pe medii nutritive ce conin microelemente n
urmtoarele doze (mg/l): Fe-0,002; Mn-0,5; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,01;
B-0,4; Co-0,01;
Spirulina mediile nutritive trebuie s fi ndestulate cu microelemente n
urmtoarele concentraii (mg/l): Fe-2; Mn-0,31-0,5; Zn-0,05; Cu-0-0,02;
Mo-0,009-0,155; B-0,4; Co-0-0,01 (Tab. 16).
La nivelul familiilor concentraia de microelemente necesar pentru cultivare
este urmtoarea:
Coccobactreaceae, Merismopediaceae, Pleurocapsaceae, Dermocarpaceae, Chamaesiphonaceae, Mastigocladaceae, Nostocaceae, Nodulariaceae, Scytonemataceae, Schizothrichaceae, Plectonemataceae concentraia optim a microelementelor este (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05;
Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004;
Microcistidaceae au necesiti de microelemente ce variaz, ns n linii
generale ele se cuprind n urmtoarele limite (mg/l): Fe-0,002-1,86; Mn0,5-0,66; Zn-0,05: Cu-0,02; Mo-0,01-0,54; B-0,4-0,16; Co-0,0-0,004;
Holopediaceae mediile nutritive trebuie s conin microelementele indicate mai sus pentru genul Coccopedia, deoarece a fost analizat doar un
gen al acestei familii;
Cultivarea reprezentanilor familiei Gloeocapsaceae poate fi realizat
prin asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele microelemente (mg/l);
Fe-0-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,009-0,54; B-0,16-0,4; Co-00,004.
Algele din familia Anabaenaceae au urmtoarea nutriie mineral (mg/l):
Fe-0-1,86; Mn0-0,66; Zn-0-0,06; Cu-0-0,03; Mo-0-0,54; B-0-0,4; Co-00,02.
Familia Rivulariaceae este reprezentat de genul Calothrix, respectiv i
microelementele sunt specifice acestui gen.
Familia Oscillatoriaceae are urmtoarele preferine de nutriie mineral
cu microelemente (mg/l): Fe-1,86-2; Mn-0,31-0,66; Zn-0-0,5; Cu-0-0,02;
Mo-0,009-0,54; B-0,16-0,4; Co-0-0,01.
Specificul nutriiei minerale a macroelementelor pentru diferite clase de alge
cianofite cultivate se prezint astfel:
Clasa Chroococceae prefer n nutriia mineral urmtoarele microelemente (mg/l): Fe-0-1,86; Mn-0,5-2,51; Zn-0,05-0,25; Cu-0,02; Mo-0,009-0,54;
B-0,16-1,99; Co-0-0,01.
69
Clasa Chamaesiphoneae se nutrete cu microelemente specifice pentru
ordinele, familiile i genurile ce le reprezint (pentru speciile studiate de
noi).
Clasa Hormogoneae are preferine de microelemente variate, care se prezint astfel (mg/l): Fe-0-2; Mn-0-0,66; Zn-0-0,66; Cu-0-0,03; Mo-0-0,54;
B-0-0,4; Co-0-0,02 (Tab. 17).
Dup cum observm, nu exist concentraii fixe de microelemente specifice
claselor, cu excepia clasei Chamaesiphoneae, deoarece am analizat reprezentani doar a dou ordine, 3 familii i 3 genuri. Spre deosebire de macroelemente,
microelementele au variaii mai mici ale limitelor superioare i celor inferioare
necesare pentru cultivarea algelor cianofite. Cu toate acestea, pentru cultivarea
speciilor de alge cianofite este necesar s cunoatem poziia sistematic i, reieind din aceasta, s identificm mediul nutritiv sau s optimizm un mediu
nutritiv nou.
70
Tabelul 16
Coninutul microelementelor n mediile nutritive de cultivare
a algelor cianofite, mg/l
Taxoni
Ordin
Chroococcales
Pleurocapsales
Dermocarpales
Familie
Coccobactreaceae
Gen
Synechocystis
Synechococcus
Holopedia- Coccopeceae
dia
Merismope- Merismodiaceae
pedia
Microcisti- Microcysdaceae
tis
Aphanothece
GloeocapGloeosaceae
capsa
Eucapsis
Pleurocapsaceae
Dermocarpaceae
Chamaesiphonaceae
Mastigo- Mastigoclacladales
daceae
Nostoca- Nostocales
ceae
Anabaenaceae
Myxosarcina
Cyanotheca
Chamaesiphon
Mastigocladus
Amorphonostoc
Anabaena
Anabaenopsis
Cylindrospermum
Nodularia- Nodularia
ceae
Microchaete
Scytonema- Scytonetaceae
ma
Tolypothrix
Rivularia- Calothrix
ceae
Mn
0,66
Zn
0,05
Cu
0,02
Mo
0,54
B
0,16
Co
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
0,68
2,51
0,25
0,08
0,06
1,99
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
0,002
0,5
0,05
0,02
0,01
0,4
0,01
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
0-1,86
0,66
0,05
0,02
1,86
0,66
0,05
0,02
0,009-0,54 0,160,40
0,54
0,16
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
0-1,86
0,00010,001
0,00010,5
0-0,40
0-0,40
0-0,01
0-0,02
0-0,40
0-0,0004
1,86
1,86
0,66
0,66
0,05
0,05
0,02
0,02
0,54
0,54
0,16
0,16
0,004
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
1,86
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
0-1,86
0-0,40
0-0,01
71
0-0,004
Oscillatoriales
Oscillatoriaceae
Schizothrichaceae
Plectonemataceae
Oscilla- 1,86
toria
Spirulina 2,00
Phormidium
Symploca
Lyngbya
Microcoleus
Plectonema
0,66
0,05
0,02
0,05
1,86
0,310,5
0,66
1,86
1,86
1,86
1,86
0,54
0,16
0,004
0,40
0-0,01
0,05
0-0,02 0,0090,155
0,02
0,54
0,16
0,004
0,66
0,66
0,66
0,05
0,05
0,05
0,02
0,02
0,02
0,54
0,54
0,54
0,16
0,16
0,16
0,004
0,004
0,004
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,004
Tabelul 17
Coninutul microelementelor necesare pentru cultivarea algelor
din clasele de cianofite
Clasa
Chroococceae
Chamaesiphoneae
Hormogoneae
Fe
0-1,86
Mn
0,5-2,51
1,86
0,66
0,05
0,02
0-2,00
0-0,66
0-0,06
0-0,03
B
0,16-1,99
Co
0-0,01
0,54
0,16
0,004
0-0,54
0-0,40
0-0,02
Ordinul Volvocales poate fi cultivat pe medii nutritive ce trebuie s fie asigurate cu microelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): Fe -2,008;
Mn-0,5; Zn -0,05; Cu- 0,015; Mo - 0,01; B0,4; Co -0.
Ordinul Desmideales trebuie asigurat cu microelemente n urmtoarele
concentraii (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16;
Co-0,004.
Nutriia mineral pentru cultivarea unor clase de alge verzi este diferit.
n linii generale, ea se prezint astfel:
Clasele Chlorococcophyceae i Ulotrichophyceae se nutresc cu microelemente ale cror concentraii (mg/l) variaz: Fe-0,002-1,86; Mn-0-0,66;
Zn-0-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0-0,54; B-0-0,16; Co-0-0,004.
Clasa Zygnematophyceae poate fi cultivat pe medii nutritive cu urmtoarele concentraii de microelemente (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05;
Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004.
Clasa Volvocophyceae mediile nutritive trebuie s conin: Fe-0,002-2,008
mg/l; Mn - 0-0,66 mg/l; Zn-0-0,05 mg/l; Cu-0-0,02 mg/l; Mo-0-0,54 mg/l;
B-0-0,4 mg/l; Co-0-0,004 mg/l.
Astfel, constatm c odat cu ascendena n treapta sistematic de la specie
la clas se observ variaii mari ale concentraiilor de microelemente necesare
pentru cultivarea algelor verzi.
74
75
Selenastraceae
Scenedesmaceae
Dunaliellaceae
Desmidiaceae
Volvocales
Desmideales
1,86
1,86
1,86
0,002-1,86
2,01
Pediastrum
Kirchneriella
Scenedesmus
Dunaliella
Oocystaceae
Coelastraceae
Botryococcaceae
Hydrodictyaceae
Staurastrum
1,86
1,86
1,86
1,86
1,86
0,1-1,86
0,002-1,86
0,002-1,86
0,1-1,86
Asteromonas
Chlorella
Tetraedron
Dictyococcus
Coccomyxa
Chodatella
Coelastrum
Dictyosphaerium
Hydrodictyon
Fe
0,002-1,86
0,002-1,86
0,002-1,86
0,002-1,86
1,86
1,86
Gen
Haematococus
Chlamydomonas
Stichococcus
Ulothrix
Trentepohlia
Ankistrodesmus
1,86
0,1-1,86
Chlorococcaceae
Trentepohliaceae
Ankistrodesrmaceae
Asteromonadaceae
Chlorellaceae
Taxoni
Familie
Chlamydomonadaceae
Ulotrichaceae
Chlorococcum
Neochloris
Chlorococcales
Ordin
Chlamydomonadales
Ulotrichales
0,66
0-0,66
0-0,66
0,070,66
0,66
0,070,66
0,66
0,66
0,66
0,66
0,66
0,070,66
0,66
0,66
0-0,66
0,50
0,05
0-0,05
0-0,05
0,0140,05
0,05
0,0140,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,0140,05
0,05
0,05
0-0,05
0,05
Co
0-0,004
0-0,004
0-0,004
0-0,004
0,004
0,004
0,54
0,54
0,54
0,54
0,54
0,54
0,54
0,54
0,02
0,54
0,02
0,54
0,02
0,54
0-0,02 0-0,54
0,015 0,01
0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0-0,02
0,02
0-0,02
0,16
0,16
0,16
0-0,16
0,4
0,004
0,004
0,004
0-0,004
0
0,16
0,004
0,16
0,004
0,16
0,004
0,16
0,004
0,16
0,004
0,01-0,16 0,003-0,004
0,16
0,004
0,01-0,16 0,003-0,004
Tabelul 18
Tabelul 19
Coninutul microelementelor necesare pentru cultivarea algelor verzi
Clasa
Chlorococcophyceae
Ulotrichophyceae
Zygnematophyceae
Volvocophyceae
Fe
0,002-1,86
0,002-1,86
1,86
0,002-2,008
B
0-0,16
0-0,16
0,16
0-0,4
Co
0-0,004
0-0,004
0,004
0-0,004
77
Ordin
Nitzschia
Gen
Ordin
Taxoni
Familie
Gen
1,86
Fe
0,66
Mn
0,05
Zn
0,02
Cu
0,54
Mo
Cyanidiaceae
Cyanidium
0,02
1,87
Fe
0,01
0,44
0,002
0,05
Zn
0,02
Cu
0,001
0,54
Mo
0,16
0,001
0,004
Co
0,004
Co
Tabelul 21
0,16
Clas
Familie
Heterococ- Pleurochloricales
daceae
Ordin
Taxoni
1,86
Fe
0,66
Mn
0,05
Zn
0,02
Cu
0,54
Mo
0,16
0,004
Co
Chlorocloster 0,1
0,07
0,045
0,015
0,03
Chloridella
Gen
Tabelul 22
Coninutul microelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor galben-verzi, mg/l
Heterococcophyceae
Cyanidiales
Clas
Nitzschiaceae
Familie
Tabelul 20
Pennatophyceae Raphinales
Clasa
Taxoni
78
Loturile experimentale
Mediul preparat clasic
(Xx)
0,2530,002
0,2530,002
0,5650,012
0,5520,013
0,7780,022
0,8510,033
0,9510,040
1,0880,050
12
1,5620,042
1,6040,052
15
1,7920,090
2,0020,100
79
Tabelul 24
Modificrile indicilor fiziologici ai algei Spirulina platensis cultivate pe
mediul Zarrouk conform procedeului propus
Zilele
de analiz
3
6
9
12
15
Loturile experimentale
Mediul preparat dup metoda
Mediul preparat clasic
nou
Viteza
Viteza de
Coeficien- Viteza de Viteza de Coeficiende recretere a
tul de rereprodu- cretere a tul de reprodu- populaiei producere
cere
populaiei producere
cere
0,116
0,156
2,233
0,112
0,149
2,181
0,046
0,106
1,376
0,062
0,149
1,541
0,029
0,086
1,222
0,035
0,118
1,278
0,071
0,305
1,642
0,056
0,258
1,474
0,019
0,115
1,147
0,099
0,119
1,248
Sterilizarea mediilor nutritive este operaiunea de distrugere a microorganismelor prezente ntr-un mediu nutritiv. Familiarizarea cu metodele de sterilizare
este necesar pentru desfurarea corect i reuit a procesului de cultivare a
algelor. Actualmente exist mai multe metode de sterilizare:
Metode care utilizeaz agenii fizici cldura, radiaia ultraviolet, filtrarea, ultrasunetul;
Metode care utilizeaz agenii chimici substane antiseptice etc.
125
Atlas R.M. Handbook of microbiological media fourth edition. New York, 2010. 2063 p.
80
7.4.1.Sterilizarea
Sterilizarea
mediilor
nutritive
lichide
7.4.1.
mediilor
nutritive
lichide
Autoclavarea
Autoclavarea
Mediile lichide se sterilizeaz, de regul, prin autoclavare (la temperatura
regul, prin autoclavare
(la temperatura
121C
timp de
deMediile
121Clichide
timp se
desterilizeaz,
20 min.).deAutoclavarea
reprezint
sterilizareadecu
vapori
de 20ap
min.).
Autoclavarea
reprezint
sterilizarea
cu
vapori
de
ap
sub
presiune
(Fig.
9).
Este
cel
sub presiune (Fig. 9). Este cel mai frecvent utilizat n practic (pentru
mai obinerea
frecvent utilizat
n practic
(pentru obinerea
culturilor
bacteriologic
curate), ieste
o
culturilor
bacteriologic
curate), este
o sterilizare
complet
sigur.
sterilizare
complet
i
sigur.
Vaporii
de
ap
supui
presiunii
rezult
cu
temperaturii
de
peste
Vaporii de ap supui presiunii rezult cu temperaturii de peste 100C. Astfel,
100C.
Astfel,
la 0,5 atmosfere
temperatura
de 115C;
1 atmosfer temperatura
temperatura este
de de
la 0,5
atmosfere
temperatura
este este
de 115C;
la la
1 atmosfer
este
126
126
121C;
la 1,5 atmosfere
de 127 C,
la 2127
atmosfere
135C.
121C;
la 1,5 atmosfere
de
C, la2deatmosfere
de 135C.
Fig.9.
utilizatelalacultivarea
cultivareaalgelor
algelor.
Fig. 9.Autoclavarea
Autoclavareamediilor
mediilor nutritive
nutritive utilizate
La
mediilor
nutritive
se acordat
atenie atenie
special special
strii acestora.
se
Lasterilizarea
sterilizarea
mediilor
nutritive
se acordat
striiDac
acestora.
modific
culoarea
sau
se
formeaz,
sediment
atunci
acest
mediu
nutritiv
nu
poate
fi
utilizat
la
Dac se modific culoarea sau se formeaz sediment, atunci acest mediu nutricultivare.
Mediul
poate
s
se
modifice
din
mai
multe
cauze,
de
aceea
trebuie
verificat
starea
lui
tiv nu poate fi utilizat la cultivare. Mediul poate s se modifice din mai multe
n timpul
etape
de pregtire.
Vitaminele
potnfitimpul
adugate
n mediu
dup
cauze,fiecrei
de aceea
trebuie
verificat
starea lui
fiecrei
etapenutritiv
de pregtire.
sterilizare,
deoarecepot
elefisunt
sensibilen
la sterilizare.
Vitaminele
adugate
mediu nutritiv dup sterilizare, deoarece ele sunt
sensibile la sterilizare.
Tindalizarea
Tindalizarea
Tindalizarea
o pasteurizare
3 ori la
3 zile. Se
Tindalizarea
esteeste
o pasteurizare
repetatrepetat
de 3 ori de
la interval
de interval
3 zile. Sede
recomand
recomand
pentru
mediile
nutritive
care
conin
diferite
substane
organice
pentru mediile nutritive care conin diferite substane organice (de exemplu, glucide). n(de
exemplu,
n intervalul
sterilizri
mediilecamerei
nutritive
secapstreaz
intervalul
dintre glucide).
sterilizri mediile
nutritive dintre
se pstreaz
la temperatura
pentru
sporii
la temperatura
camereila pentru
ca sporiicare
rmai
evolueze
la forme
rmai
nedistrui s evolueze
forme vegetative
vor finedistrui
distruse la s
urmtoarea
nclzire.
vegetative
vor fi distruse
urmtoarea
nclzire.n Tindalizarea
estecnd
o steTindalizarea
este care
o sterilizare
complet. la
Tindalizarea
se utilizeaz
locul autoclavrii,
rilizare
complet.
Tindalizarea
se
utilizeaz
n
locul
autoclavrii,
cnd
mediul
mediul nutritiv conine componente sensibile la creterea temperaturii.
nutritiv conine componente sensibile la creterea temperaturii.
CarolinaSupply
Biological
Supply
Company.
Culturing
Carolina Biological
Company.
Culturing
Algae. U.S.A.,
2012.Algae.
27 p. U.S.A., 2012. 27 p.
126
126
83
81
82
cludem contactul razelor cu corpul uman. n procesul funcionrii lmpilor se elimin ozon, care la fel este toxic pentru om. Razele ultraviolete la 260 nm au efect
letal asupra microorganismelor. Lmpile ultraviolete eman iluminare cu lungimea de und de la 240 la 280 nm. Energia variaz n funcie de mrimea lmpii
i se situeaz ntre 40 i 40000 mkW*c/cm2. Razele ultraviolete nu ptrund prin
sticla obinuit, de aceea pentru sterilizarea mediilor nutritive lichide cu volum
mare se recomand utilizarea lmpilor rezistente la ap pentru administrarea lor
subacvatic. Pe lng aceasta, lumina ultraviolet nu ptrunde uniform pe ntreg
volumul apei, se absoarbe i, odat cu ndeprtarea de la surs, se reduce. Aceast
problem poate fi soluionat prin utilizarea lmpilor mai puternice, prin agitarea
probelor i expunerea pe o perioad mai ndelungat.
83
de cretere;
Inoculul se separ de mediul nutritiv prin filtrare sau centrifugare;
Splarea inoculului (cu apa distilat) i sterilizarea;
Administrarea inoculului n forma optim i doza necesar;
Agitarea probelor inoculate.
Important n procesul de cultivare a algelor este i cantitatea de inocul. De regul, cantitatea inoculului algelor este de 0,40,5 g/l sau de 0,40,5 g/l calcul la biomas absolut uscat pentru cultivarea periodic. Pentru cultivarea continu sau
semicontinu inoculul trebuie administrat n funcie de cantitatea specific iniierii
fazei exponeniale de cretere (determinat anterior la cultivarea periodic).
Forma inoculului are i ea o importan deosebit n procesul de cultivare
a algelor. Pentru a studia influena formei de administrare a inoculului asupra
acumulrii biomasei algale au fost efectuate experimente de cultivare a algelor
Anabaenopsis sp. i Nostoc flagelliforme pe acelai mediu nutritiv lichid (Drew)
la administrarea inoculului n form ntreag i mrunit (Tab. 26).
Tabelul 26
Productivitatea algelor Anabaenopsis sp. i Nostoc flagelliforme la
administrarea formei variate a inoculului, g/l
Perioada
analizat,
zile
Anabaenopsis sp.
Nostoc flagelliforme
Forma de administrare
Forma de administrare
Mrunit
Xx
ntreag
Xx
Mrunit,
Xx
ntreag,
Xx
0,400,01
0,400,01
0,400,01
0,400,01
0,960,08
0,840,08
1,060,18
1,000,20
1,170,10
1,630,10
2,370,30
2,730,21
2,080,20
2,180,21
3,280,20
3,580,30
n rezultatul efecturii acestor experimente s-a demonstrat c pentru majorarea productivitii algelor cianofite Anabaenopsis sp. i Nostoc flagelliforme inocularea trebuie administrat n form ntreag, deoarece obinem practic aceleai
rezultate (Tab. 26).
7.6. Condiiile de cultivare a algelor
Pentru cultivarea algelor trebuiesc meninute i respectate condiii specifice de
temperatur, iluminare, agitare, care ar asigura creterea i dezvoltarea optim a
celulelor algale. De multe ori aceste condiii sunt i factori ce limiteaz creterea
biomasei algelor n procesul de cultivare, iar nerespectarea lor duce la aceea c
sistemul devine ineficient. n continuare, ne vom referi succint la fiecare din condiiile de cultivare a algelor.
84
7.6.1. Temperatura
Pentru cultivarea algelor tropicale i subtropicale temperatura optim este de
20-25C132, constatare susinut i de H.Belcher i E.Swale.133
Alte surse tiinifice menioneaz c pentru algele ce populeaz apele dulci i
apele srate (marine, oceanice) temperatura optim pentru cultivare este de 1525C. Iar temperaturile mai mari de 30C sunt considerate letale.134
Conform datelor FAO, temperaturile optimale pentru cultivarea algelor sunt
cuprinse, n general, ntre 16 i 27C n funcie de compoziia mediului nutritiv,
specii i, concret, de tulpina cultivat. Temperatura optim pentru cultivarea majoritii algelor este de 18-24C. Temperaturi mai mici de 16C ncetinesc creterea culturii, iar cele mai mari de 35C sunt letale pentru multe specii de alge.135
.. , .. , .. i coautorii136 consider
c pentru cultivarea algelor marine temperatura optim este de 282C. Spre
exemplu, Chlorella poate fi cultivat la temperatura de 30C, Platimonas de
25C, Dunaliela de 26-28C.
Pentru cultivarea algelor I.Laing137menioneaz alte valori ale temperaturilor
optimale: 17-22C. Temperaturile mai mici de 17C stopeaz creterea algelor, la
fel ca i n cazul temperaturilor mai mari de 27C.
n general, n literatura de specialitate exist preri diferite referitor la temperatura optim pentru cultivarea algelor. Din aceste considerente, n Anexa nr.3
prezentm speciile de alge i temperaturile optimale meninute la creterea acestora propuse de diferii autori.
Conform datelor din tabel, la cultivarea majoritii speciilor de alge cianofite
temperaturile optimale se situeaz n limitele 22-27C. Cu excepia unor specii care
prefer temperaturi mai reduse (Chroococcidiopsis thermalis 12C) sau mai nalte (Chroococcus globosus, Cyanidium caldarium, Nostoc flagelliforme, Spirulina
major, Spirulina maxima, Spirulina platensis, Spirulina subsalsa 25-35C).
Pentru majoritatea algelor verzi temperaturile optimale se includ n limitele
22-27C. i n acest caz avem unele excepii, cum ar fi Stichococcus chodati,
Stichococcus minor, Stichococcus mirabilis, Stichococcus sp., pentru care temperatura optim de cultivare este cuprins n limitele 15-20C.
Valorile optimale pentru cltivarea algelor diatomee, roii i euglenine sunt
cuprinse ntre 22 i 25C.
West J.A. Long-term macroalgal culture maintenance.// Algal culturing techniques, 2005,
p.157-163.
133
Belcher H., Swale E. Culturing Algae, a guide for schools and colleges. U.S.A., 1982. 25 p.
134
James D.E. Culturing algae. U.S.A., 2012. 27 p.
135
FAO. Manual on the production an duse of live food for aquaculture. Rome, FAO. 1996.
295 p.
136
.., .., .. .
. , 1986. 65 .
137
Laing I. Cultivation of marine uniclular algae. Lowestoft, 1991. 31 p.
132
85
7.6.2. Iluminarea
Algele sunt capabile s-i menin viteza optim de cretere la un interval larg
al iluminrii ce variaz de la o specie la alta.
Confor afirmaiilor lui I. Cruu138, intensitatea luminii, n cazul creterii dirijate a algelor, reprezint un factor de mediu extrem de important, nu doar prin
semnificaia sa, n sine, de element determinant al fotosintezei, ci i prin faptul
c, pe parcursul derulrii procesului de cretere a algelor, odat cu mrirea densitii suspensiei n mediul nutritiv apare un efect de autoumbrire n cadrul culturii
algale, ceea ce reprezint n fapt scderea intensitii radiaiei luminoase la nivelul culturii n ansamblul su.
Pentru a se evita efectele negative ale acestei situaii asupra productivitii
culturilor, au fost propuse trei tipuri de soluii tehnologice:
introducerea unor sisteme eficiente de agitare continu a suspensiei, astfel
ca, practic, toate celulele s primeasc cantitatea de lumin necesar pentru
realizarea fotosintezei;
creterea treptat a intensitii luminii, direct proporional cu creterea
populaional, respectiv mrirea ,,densitii optice a suspensiei algale;
ndeprtarea (recoltarea) periodic a unei pri din cantitatea de alge din
cultur, pentru a menine densitatea optic a suspensiei n limite convenabile pentru derularea normal a fotosintezei.139
Algele pot fi cultivate la lumina soarelui sau la o surs artificial de lumin
(lmpi luminescente sau fluorescente). La concentraii mici ale celulelor algale
(pn la 0,5 g/l biomas absolut uscat) iluminarea deasupra culturii nu trebuie s
fie mai mare de 10-12 klx. La concentaria biomasei de 0,5-1 g/l biomas absolut
uscat i mai mare algele trebuie cultivate la iluminare mai mare pn la 100
klx.140
Sursele artificiale de lumin, generate de lmpile fluorescente i incandescente,
au o eficacitate diferit. Lmpile incandescente sunt inferioare lmpilor fluorescente i sunt utilizate rareori pentru cultivarea algelor. Lmpile fluorescente au o durat
de funcionare foarte bun, o intensitate mai mare i sunt mai eficiente. P.W. Behrens141 menioneaz c fluxul luminos scade proporional cu durata de funcionare,
ca urmare a degradrii luminoforului sub aciunea vaporilor de mercur i datorit
nnegririi extremitilor tubului din cauza volatilizrii filamentului.
Unii autorii consider c cultivarea algelor, n general, trebuie s fie asigurat
cu lumin timp de 16 ore pe zi, 8 ore aflndu-se n ntuneric. n mod ideal cultu138
Cru I. Cultura algelor pentru biomasa i principii active: Note de curs, lucrri de
laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
139
Ibidem.
140
.., .., .. .
. , 1986. 65 .
141
Behrens P.W. Photobioreactors and fermentors: the light and dark sides of growing algae.
// Algal Culturing Techniques, 2005, p.189-203.
86
Wnse all rights reserved. Working with algae and cyanobacteria. U.S.A., 2012. 10 p.
West J.A. Long-term macroalgal culture maintenance. // Algal Culturing Techniques, 2005,
p.157-163.
144
Cru I. Cultura algelor pentru biomas i principii active: Note de curs, lucrri de
laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
142
143
87
CAPITOLUL VIII
METODE DE CULTIVARE A ALGELOR
8.1. Caracteristica general a metodelor de cultivare a algelor
Cele mai frecvente metode utilizate la cultivarea algelor, ndeosebi n scopuri
industriale, sunt: cultivarea periodic; periodic n adncime; multiciclic; semi145, 146 ,147
continu; continu.145-147
n continuare vom descrie i carcateriza succint fiecare metod de cultivare a
algelor.
Cultivarea periodic
88
medii nutritive lichide, cu agitarea periodic a culturilor, pentru echilibrarea condiiilor de cretere n diferite pri ale volumului de lucru din instalaia de cultivare, fapt ce a condus la apariia sistemelor dinamice de cultivare n adncime,
nzestrate cu echipament special. Cultivarea periodic n adncime, n fermentatoare, n comparaie cu cea de la suprafa, accelereaz creterea i dezvoltarea
microalgelor pe contul nlturrii aa-numitei ,,zone flmnde din jurul celulelor
i asigur obinerea unei culturi omogene cu agitare ideal. 151 n aa sisteme celulele se repartizeaz uniform n tot volumul fermentatorului i se afl n aceleai
condiii, avnd loc rspndirea uniform a mediilor nutritive i a produselor metabolice. Implementarea sistemelor dinamice n adncime ne permite s obinem
mai raional nu doar biomasa i endometaboliii, dar i exoprodusele de sintez
algal, eliminate de celule n mediul nconjurtor n rezultatul metabolismului.
Obinnd din start o rspndire larg n producerea drojdiei i antibioticelor, n
continuare metoda cultivrii n adncime se recomand ca fiind mai avantajoas
pentru cultivarea industrial i n condiii de laborator a microorganismelor, inclusiv a algelor.152
89
Cultivarea multiciclic
Cultivarea multiciclic se caracterizeaz prin faptul c ciclul de cultivare a
culturilor se repet de multe ori, fr sterilizarea multipl a mediului. n procesul
cultivrii multiciclice dependena concentraiei microalgelor i viteza specific
relativ (n fiecare ciclu) sunt asemntoare cu cele ale cultivrii periodice. Cultivarea multiciclic poate fi diferit. Ea poate fi efectuat ntr-un fermentator, repetnd de multe ori ciclul complet de dezvoltare a culturilor, fr ntrerupere pentru
sterilizare. La un fermentator se poate repeta sau micora ciclul, finisndu-l, de
exemplu, cu faza exponenial de cretere. Cultivarea multiciclic ofer posibilitatea de a implementa procesul multistadic i multiciclic, care este bazat pe
principiul repetrii i urmrii cultivrii periodice, parcurgnd cteva cultivatoare,
cu scopul de a utiliza cultura pe un termen lung. Cnd cultura ntr-un fermentator
ajunge la starea exponenial, o parte din ea se transfer n alt cultivator. n primul cultivator cultura continu s se dezvolte, pn la urmtorul stadiu. Cnd n
cel de-al doilea fermentator cultura de asemenea ajunge la starea exponenial, o
parte din ea se transfer n al treilea. Deoarece cultura atinge doar faza exponen155-157
ial, nu are loc mbtrnirea sau degenerarea ei.155156157
Cultivarea multiciclic a
microalgelor se utilizeaz att la obinerea biomasei, ct i a produselor de sintez ca proteinele, aminoacizii etc. Utilizarea acestei metode asigur reducerea
de cteva ori a cheltuielilor de obinere a produsului, n comparaie cu metoda de
cultivare periodic.
Cultivarea semicontinu
La cultivarea semicontinu n sistemele semicontinue descrcarea i ncrcarea total a cultivatorului se efectueaz o singur dat. n procesul de cretere
a culturii o parte din coninut se elimin, iar volumul eliberat se nlocuiete cu
mediul nutritiv proaspt pregtit. n aa mod funcioneaz sistemul de eliminarenlocuire. Astfel, cultivarea semicontinu se caracterizeaz prin densitatea i volumul culturii eliminate i adugarea mediului nutritiv proaspt pregtit n cultivatorul n funciune. Regimul stabilit la cultivarea semicontinu se caracterizeaz
154
.. . : , 1992. 192 .
155
.. . : ,
1978, c.230 -300.
156
.. . :
, 2004, c.464.
157
. . : , 1983. 263 .
90
Cultivarea continu
91
Cultivarea sincronizat
92
162
.. a
. // . Mo: , 1984.
163
.. . : ,
1978, c.230 -300.
93
Tabelul 27
Coninutul chimic al mediului utilizat la cultivarea algei
Nostoc flagelliforme
Concentraia
mediului
nutritiv
1%
5%
10%
pH
Xx
NH4+,
mg/l
Xx
7,150,25 16,991,03
7,320,27 84,955,25
7,660,31 169,9010,90
NO3 -,
mg/l
Xx
Indicii analizai
PO43-,
mg/l
Xx
0,120,01
0,620,06
1,250,11
1,540,16
7,730,80
15,471,70
HCO3-,
mg/l
Xx
Reziduu fix,
mg/l
Xx
32,031,52
160,127,62
320,2515,25
43,671,85
218,309,26
436,6618,52
Astfel, conform rezultatelor analizelor chimice ale apelor reziduale, putem constata c att concentraia de 1%, ct i cea de 10% sunt benefice pentru cultivarea
algei Nostoc flagelliforme. Concentraiile mai mari de 10% nu au fost utilizate ca
mediu de cultur, deoarece contribuie la obinerea unei cantiti reduse de biomas.
probele: n varianta de 1% atingea valoarea de 0,38 zile , n cea de 5% de 0,76 zile , iar n
proba de 10% de 0,72 zile -1(Tab.28).
94
La a 15-a zi valorile vitezei de cretere diminueaz n cazul tuturor mediilor, ceea ce
indic c are loc iniierea fazei staionare de cretere.
Tabelul 28
1%
0,03
0,38
0,34
Concentraia mediului
5%
0,05
0,76
0,71
10%
0,11
0,72
0,45
Un alt indice fiziologic, ce permite stabilirea dinamicii dezvoltrii algei Nostoc flagelliforme cultivate pe ape reziduale, este viteza de reproducere care indic
intensitatea reproducerii realizat prin creterea biomasei (Tab.29).
Tabelul 29
Viteza
de reproducere
algei flagelliforme
Nostoc flagelliforme
pe medii
cu
Viteza
de reproducere
a algeiaNostoc
cultivate pecultivate
medii cu adaos
de ape
-1
)
adaos de
ape
reziduale
(zile
-1
reziduale (zile )
Zilele de analiz
1%
1%0,089
0,089
0,110
0,110
0,100
0,100
Concentraia mediului
Concentraia
5%mediului
10%
5%
10%
5
0,114
0,184
5 10
0,114
0,184
0,203
0,193
10
0,203
0,193
15
0,166
0,124
15
0,166
0,124
Viteza de reproducere a algei Nostoc flagelliforme difer n funcie de perioada analizat
Viteza
de reproducere a algei Nostoc flagelliforme difer n funcie de perioai de concentraia mediului de cultur utilizat. n cazul probei de 1% observm c de la a 5-a la a
da
analizat
i de concentraia mediului de cultur utilizat. n cazul probei de 1%
10-a zi are loc o cretere cu 0,03, iar de la a 10-a la a 15-a zi se reduce cu 0,01. Pentru proba de
observm c de la a 5-a la a 10-a zi are loc o cretere cu 0,03, iar de la a 10-a la
5% la fel este caracteristic mrirea valorilor vitezei de reproducere de la a 5-a la a 10-a zi cu
a 15-a zi se reduce cu 0,01. Pentru proba de 5% la fel este caracteristic mrirea
0,089, pe cnd de la a 10-a la a 15-a zi are loc o diminuare cu 0,037; n cazul probei de 10%, de
valorilor vitezei de reproducere de la a 5-a la a 10-a zi cu 0,089, pe cnd de la
la a 5-a la a 10-a zi are loc o majorare cu 0,009, iar de la a 10-a pn la a 15-a zi a experienei
a 10-a la a 15-a zi are loc o diminuare cu 0,037; n cazul probei de 10%, de la a
viteza de reproducere a sczut cu 0,069.
Zilele de analiz
95
164
.. . : ,
1978, c.230 -300.
165
.. ( ). : , 1971.
96
Fig. 12. Productivitatea algei Spirulina platensis la cultivarea periodic pe ape reziduale
zootehnice.
Fig. 12. Productivitatea algei Spirulina
platensis la cultivarea periodic pe ape
reziduale zootehnice.
.
: ,
1978, c.230
la166 concentraia de 10%, care atinge valoarea de 3,770,04 g/l BAU, i ceva mai
.. ( ). :
puin
(3,250,05
97
Tabelul 30
Viteza de reproducere a algei Spirulina platensis cultivate dup
metoda periodic pe ape reziduale zootehnice, zile-1
Concentraia mediului
nutritiv, %
5
10
15
20
5
10
15
20
5
10
15
20
Ape reziduale de la
complexele
avicole
Ape reziduale de la
complexele
de porcine
Ape reziduale de la
complexele
de bovine
Proveniena
mediului nutritiv
Tabelul 31
Viteza de cretere a populaiei algei Spirulina platensis cultivate
dup metoda periodic pe ape reziduale zootehnice, zile-1
Ape reziduale de la
complexele
avicole
Ape reziduale de la
complexele
de porcine
Ape reziduale de la
complexele
de bovine
Proveniena
mediului nutritiv
Concentraia
mediului nutritiv, %
5
10
15
20
5
10
15
20
5
10
15
20
98
99
Mediulcnutritiv
Drew are
un avantaj
n aplicare,idar,
pe lng aceasta,
considerm
este incomplet,
deoarece
lipsesceconomic
multe macroelemente
microelemente,
sursa de
considerm c este incomplet, deoarece lipsesc multe macroelemente i microele-
care de
contribuie
la care
creterea
biomasei
algale i biomasei
la acumularea
biologic
CO
2, etc.,sursa
mente,
CO etc.,
contribuie
la creterea
algalesubstanelor
i la acumularea
2
substanelor
n celule.
Cantitatea sp.
biomasei
Anabaenopsis
sp.de
active
n celule. biologic
Cantitateaactive
biomasei
algei Anabaenopsis
obinutalgei
la cultivarea
pe mediul
obinute
cultivarea
penmediul
cultur
Drewlaeste
prezentat
Figura de
13. cultur Drew este prezentat n Figura 13.
Biomasa algei crete pn la a 12-a zi atingnd 1,0420,05 g/l, dup care descrete pn
la valoarea
iniial
(0,40,02
cantitate
de biomas
obinut
este suficient
Biomasa
algei
creteg/l).
pnns,
la aaceast
12-a zi
atingnd
1,0420,05
g/l,nudup
care des-i
pn
la valoarea
iniial
(0,40,02industrial
g/l). ns,
aceast
de biomas
nucrete
permite
dea utiliza
acest mediu
la cultivarea
a algei,
dar cantitate
poate fi aplicat
n form
obinut nu este suficient i nu permite de a utiliza acest mediu la cultivarea
solid
pentru meninerea
algeipoate
Anabaenopsis
sp. n
industrial
a algei, dar
fi aplicat
n colecia
form laboratorului.
solid pentru meninerea algei
Anabaenopsis sp. n colecia laboratorului.
Tabelul 32
Tabelul
32
Creterea biomasei algei Anabaenopsis sp. n funcie de pH-ul i temperatura
mediului
Creterea biomasei algei Anabaenopsis sp. n funcie de pH-ul i
temperaturanutritiv
mediului nutritiv
Perioada analizat,
zile
Indiciiexaminai
examinai
Indicii
temperatura
pH-ul
mediului
biomasei,
Perioada
creterea
mediului creterea
temperatura mediului pH-ul
mediului nutritiv, C
nutritiv
g/l/zi
analizat, zile
biomasei,
g/l/zi
nutritiv
nutritiv,
C
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
1
18,000,11
7,170,02
0
18,000,11
7,170,02
0
31
31,300,32
7,390,05
0,0710,003
31,300,32
7,390,05
0,0710,003
63
32,750,47
7,440,03
0,0560,002
96
30,700,30
8,040,01
0,0400,002
32,750,47
7,440,03
0,0560,002
129
29,360,48
7,740,06
0,0530,002
30,700,30
8,040,01
0,0400,002
1512
26,670,23
7,760,09
0
29,360,48
7,740,06
0,0530,002
Conform datelor din Tabelul 32, temperatura mediului nutritiv este n cretere. Iniial era
15
26,670,23
7,760,09
100
103
Conform datelor din Tabelul 32, temperatura mediului nutritiv este n cretere.
0
26,670,23C,
care este favorabil
algei Anabaenopsis
sp. pH-ul 0mediului
Iniial
era de 18,000,11
C, la apentru
6-a zi,creterea
de exemplu,
atingea 32,750,47
C, iar la
0
finele
26,670,23
care
favorabil
pentru lent.
creterea
algei
nutritivexperimentelor
crete pn la a 9-a
zi (8,040,01),C,
dup
careeste
se observ
o descretere
Biomasa
a
Anabaenopsis
sp.
pH-ul
mediului
nutritiv
crete
pn
la
a
9-a
zi
(8,040,01),
crescut cel mai mult de la 1-a la a 3-a zi, fiind egal cu 0,0710,003, urmat de o cretere puin
dup care se observ o descretere lent. Biomasa a crescut cel mai mult de la 1-a
mai redus n intervalul 3-6 zile (0,0560,002), iar dup a 6-a zi se observ o descretere, astfel
la a 3-a zi, fiind egal cu 0,0710,003, urmat de o cretere puin mai redus n
c la a 15-a3-6
zi sezile
reduce
pn la 0 (Tab. iar
32).dup
Analiza
raportului
dintre pH:biomas
algal denot
intervalul
(0,0560,002),
a 6-a
zi se observ
o descretere,
astfel
la a 6-a
zi reduce
odat cu pn
creterea
se mrete
i pH-ul,
iar la adintre
9-a zi pH:biomas
pH-ul crete;
cclapn
a 15-a
zi se
la 0biomasei
(Tab. 32).
Analiza
raportului
algal
pn lasea reduc
6-a zidup
odat
biomasei
se mrete
i pH-ul,
valoriledenot
creteriicbiomasei
carecusecreterea
observ oscilri
ale pH-ului,
iar indicele
de
iar
la
a
9-a
zi
pH-ul
crete;
valorile
creterii
biomasei
se
reduc,
dup
care
se
obcretere se reduce.
serv oscilri ale pH-ului, iar indicele de cretere se reduce.
Un lucru important n demararea cultivrii periodice este i stabilirea fazelor de cretere,
Un lucru
important n demararea cultivrii periodice este i stabilirea fazelor
care
ar indica,
conform
uneiaconform
din metodologii,
timpul
i cantitateatimpul
de biomas
obinut la
de
cretere,
care
ar indica,
uneia din
metodologii,
i cantitatea
de
biomas
cultivarea
vor realiza
conticultivareaobinut
continu alaalgei
(unde secontinu
vor realizaanalgei
flux (unde
continu sefazele
liniare indeflux
ncetinire)
nuu
fazele
liniare
i
de
ncetinire)
(Fig.
14).
(Fig. 14).
Fig. 14. Fazele de cretere a algei Anabaenopsis sp. la cultivarea periodic pe mediul de
Determinarea
fazelor de
debiomas
creterentr-un
este ointerval
procedur
necesar
stabilirea cantitii
de 2-24destul
ore saude
decomplicat.
24-168 ore, nUneori,
funcie
este
necesar
stabilirea
cantitii
de
biomas
ntr-un
interval
de
2-24
ore
sau de
de faza de cretere, condiiile de temperatur, iluminare, agitare, coninutul mediului nuritiv etc.
24-168 ore, n funcie de faza de cretere, condiiile de temperatur, iluminare,
La cultivarea
algei Anabaenopsis
sp. pe mediul
durata fazelor
a fost:
lag1 zi, log1
agitare,
coninutul
mediului nuritiv
etc. Ladatcultivarea
algei
Anabaenopsis
sp.zi,
pe
liniar
7
zile,
staionar
1
zi,
declin
3
zile
(Fig.
14).
mediul dat durata fazelor a fost: lag 1 zi, log 1 zi, liniar 7 zile, staionar
1Cea
zi, mai
declin
3 zile
(Fig. 14).
esenial
caracteristic
a dezvoltrii microalgelor este viteza de cretere, care determin
Cea
mai
esenial
caracteristic
a dezvoltrii
esteviteza
viteza
de crespecific
de
procesele de fotobiosintez i depinde de viteza
de sintezmicroalgelor
a biomasei.160 ns,
tere, care determin procesele de fotobiosintez i depinde de viteza de sintez a
cretere difer dela o faz la alta, fapt remarcat i de ali cercettori.
biomasei.
ns, viteza specific de cretere difer dela o faz la alta, fapt remarcat
i de ali cercettori.
tabelul 33
101
104
Tabelul 33
Caracteristica cinetic a creterii algei Anabaenopsis sp. cultivate pe
mediul de cultur Drew
Fazele de
cretere
Lag
Log
Liniar
ncetinire
Staionar
Declin
Cantitatea de
biomas, g/l
0,3800,01
0,6140,02
0,9650,03
1,0400,05
1,0400,051
0,4000,015
Productivitatea
maxim
0,0500,002
0,0380,002
0
-0,2130,012
Viteza specific de
cretere, zile-1
0,4790,015
0,0100,004
0,0180,00085
0
-0,3180,001
Conform metodologiei utilizate, pentru faza lag nu se indic modalitatea de
determinare a vitezei specifice i a productivitii maxime, aceasta se stabilete
ncepnd cu faza log. Valorile vitezei de cretere sunt cele mai nalte n cazul log
fazei (0,4790,015 zile-1), deoarece se determin dup un alt mod, pentru faza
liniar are valori de 0,0100,004 zile-1 care sunt relativ mici, iar pentru cea de
ncetinire se atest 0,0180,00085 zile-1; acelai lucru este specific i pentru productivitatea maxim. n cazul fazei staionare viteza de cretere i productivitatea
maxim este 0, iar n cazul fazei de declin se reduc substanial cantitatea de biomas, productivitatea maxim i viteza de cretere (Tab. 33). n urma rezultatelor
obinute putem constata c exist un raport direct dependent ntre viteza specific
de cretere i pH.
n rezultatul investigrilor realizate s-a constatat c alga Anabaenopsis sp. poate fi cultivat pe mediul Drew. Aceasta permite obinerea a maximum 1,040,05
g/l n decursul a 11-12 zile, ceea ce este puin pentru iniierea cultivrii industriale, iar pentru meninerea culturii n stare pur (pe mediul solid) este suficient.
Timp de 15 zile alga cultivat pe mediul Drew parcurge toate fazele de cretere
(ncepnd de la log i terminnd cu declin). pH-ul mediului este n raport direct proporional cu viteza specific de cretere i invers proporional cu creterea biomasei. Cele mai mari valori ale vitezei specifice a fazei liniare atingeau
0,0100,004 zile-1, ceea ce indic c creterea algei este redus i, respectiv, cantitatea de biomas este mic.
nutritiv proaspt pregtit, iar biomasa algal nu se exclude. Alga a fost cultivat n baloane
Erlenmayer cu volum de 100 ml. n calitate de inocul a fost utilizat alga cultivat pe mediul
lichid care se afla n faza exponenial de cretere, densitatea culturii inoculate fiind de
au fost antrenate mediile nutritive Drew i Gromov-6. Modelul cultivrii semi0,7370,032
g/l n
mediul
nutritiv
i de a2,271g/l
n mediul
nutritiv
Gromov-6
continue
a fost
realizat
prin Drew
excluderea
25%, 50%
i 75% din
volumul
medi- (Gr. 6).
ilor
nutritive
peste
un
interval
de
3
zile
i
nlocuirea
cu
acelai
volum
de
mediu
Cantitatea de inocul administrat a fost astfel selectat deoarece aceasta este specific
nutritiv proaspt pregtit, iar biomasa algal nu se exclude. Alga a fost cultivat
n baloane
Erlenmayerde
cucretere
volum de
100 ml.
n calitate de
a fostnutritive
utilizatdate, fapt
nceputului
fazei exponeniale
a algei
Anabaenopsis
sp. inocul
pe mediile
alga cultivat pe mediul lichid care se afla n faza exponenial de cretere, denstabilit la
cultivarea
dup de
metoda
periodic.
Pemediul
parcursul
experimentelor
sitatea
culturiianterioar
inoculate fiind
0,7370,032
g/l n
nutritiv
Drew i de au fost
2,271g/l
n mediulde
nutritiv
Gromov-6
(Gr. de
6). scurgere
Cantitateaa de
inocul administrat
determinate:
coeficientul
diluare
(), viteza
mediului
nutritiv ()ai viteza
fost astfel selectat deoarece160aceasta este specific nceputului fazei exponeniale
a fost
stabilit
prin diferena
specificdede
cretere
a culturii
(). Productivitatea
cretere
a algei
Anabaenopsis
sp. pe mediilealgal
nutritive
date,
fapt stabilit
la cul- dintre
tivareacurate
anterioar
Pe parcursul
au cu
fostsedimentarea
demasa filtrelor
(prindup
caremetoda
iniial periodic.
se trece apa
distilat) experimentelor
i masa filtrelor
terminate: coeficientul de diluare (), viteza de scurgere
a
mediului
nutritiv
()
i
biomaseiviteza
algale,
calcululdecorespunztor
efectundu-se
n g/l.169 A algal
fost determinat
indicele pH
specific
cretere a culturii
().160 Productivitatea
a fost stabilit
prin diferena
dintre masa
filtrelor C-944.
curate (prin
care iniial
se trece aapa
distilat) obinute
ului la aparatul
multifuncional
Consort
Prelucrarea
matematic
rezultatelor
i masa filtrelor cu sedimentarea biomasei algale, calculul corespunztor efectu168
s-a realizat
utiliznd
programa
Microsoft
Office
2010, fiind
determinat eroarea
A fostcomputerizat
determinat indicele
pHului
la aparatul
multifuncional
ndu-se
n g/l.
Consort C-944. Prelucrarea matematic a rezultatelor obinute s-a realizat utilistandardznd
(x) iprograma
media aritmetic
(X). Microsoft Office 2010, fiind determinat eroarea
computerizat
standard (x) i complet
media aritmetic
(X). algei Anabaenopsis sp. este imposibil, lucru care
Omogenizarea
a biomasei
Omogenizarea complet a biomasei algei Anabaenopsis sp. este imposibil,
determin
cultivarea
prin excluderea
mediului nutritiv.
Aceastanutritiv.
contribuie
la asigurarea
lucru
care determin
cultivareadoar
prinaexcluderea
doar a mediului
Aceasta
contribuie
la asigurarea
a biomasei
cu substane
permanent
a biomasei
algale permanent
cu substane
nutritive algale
noi; totodat,
se nutritive
elimin noi;
i produsele
totodat, se elimin i produsele metabolice acumulate n mediul nutritiv ca remetabolice
acumulate
n mediul
nutritiv
zultat
al creterii
biomasei
algale.ca rezultat al creterii biomasei algale.
dintreobiectivele
obiectiveletrasate
trasate aa fost
cantitativ
a biomasei
alUnulUnul
dintre
fostmonitorizarea
monitorizarea
cantitativ
a biomasei
algei
gei Anabaenopsis sp. obinute la cultivare dup metoda semicontinu (Fig. 15).
Anabaenopsis sp. obinute la cultivare dup metoda semicontinu (Fig. 15).
funcie de mediul nutritiv i volumul extras. Aplicarea acestei metode la cultivarea algei
169
.. . ,
, . ; :
0,5860,021
-0,1580,006
1,1300,04
0,3750,018
0,2500,012
40,2
0,5860,020
0,2500,01
0,2500,013
20,08
20,09
Xx
40,19
-0,2030,006
0,8190,042
Xx
40,18
0,0830,004
0,0830,004
Xx
-0,1590,007
1,3330,054
6-9
Xx
0,8320,045
3-6
Xx
75%
0,1660,008
Xx
20,09
Xx
0,5860,020
Xx
0,1240,005
Xx
50%
0,1660,008
25%
1,3330,060
1-3
1,3330,051
Perioada
analizat,
zile
104
Creterea algei Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Gromov-6 variaz n funcie de concentraiile extrase. La a 6-a zi de cultivare valorile vitezei specifice de
cretere indic rezultate negative n toate loturile experimentale, ceea ce arat c
procesul de reproducere s-a redus semnificativ. De la a 6-a la a 9-a zi se observ
majorarea intens a vitezei specifice de cretere. Cele mai bune rezultate se atest
n varianta cu 75% extragere (1,1300,02 zile-1), iar n variantele de 25% i 50%
se obin practic aceleai valori. Acest lucru denot c procesele reproductive sunt
mai intense n varianta cu 75% i, respectiv, se obine i o cantitate mai nalt
de biomas. Valorile coeficientului de diluare i ale vitezei de scurgere indic o
continuitate n ce privete creterea algei (Tab. 34).
Aplicarea metodei semicontinue la cultivarea algei Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Drew relev aceeai legitate. ns, procesul de acomodare a algei la
condiiile noi de cultivare este mai rapid i nu afecteaz att de mult activitatea
reproductiv. n toate loturile experimentale se observ reducerea vitezei de cretere n intervalul de la a 3-a la a 6-a zi. Cele mai semnificative reduceri ale vitezei
specifice de cretere s-au observat n variantele de 50% (unde a descrescut de
1,42 ori) i de 75% (cu o reducere de 3,90 ori). n perioada de la a 6-a la a 9-a zi
viteza specific de cretere s-a majorat n special n variantele cu 75% extragere
de mediu nutritiv, unde s-au atestat valori de 0,9100,028 zile-1 i cu 50% extragere 0,5850,026 zile-1, iar n proba 25% extragere de mediu nutritiv valorile
vitezei specifice de cretere s-au redus de 1,76 ori (Tab. 35).
Tabelul 35
Valorile indiciilor de cretere la cultivarea semicontinu a algei
Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Drew
40,19
0,2500,012
0,1750,017
40,18
0,2500,013
0,9100,028
0,6830,020
0,4790,013
0,5850,026
0,3750,018
0,1660,008
0,1660,008
40,2
20,08
20,09
0,6830,021
0,6030,022
6-9
0,3420,012
0,2500,01
0,0830,004
20,09
3-6
0,0830,004
0,6830,022
Xx
1,3330,054
0,1240,005
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
1,3330,060
1-3
Xx
1,3330,051
Perioada
analizat,
zile
105
caracteristic metodei periodice; altfel spus, alga s-a acomodat la condiiile noi induse i, ca
rezultat, se reduce biomasa n variantele cu 25-50% extragere i nlocuire. Pentru variantele de
75% i cele specifice la utilizarea mediului Drew de cultivare acest aspect nu s-a manifestat.
ncepnd cu a 6-a zi, alga era deja acomodat cultivrii respective, ceea ce contribuie la cretere
La a 3-a
zi se atest
biomaseiialgale
medii
nutritive,
ceea
accelerat
a biomasei
algalecreterea
care s-a Nr.egistrat
la a 9-apezi ambele
de cultivare
(Tab.
36).
ce indic faptul c s-a iniiat practic faza exponenial, deoarece s-ar realiza pn
Tabelul 36
atunci cultivarea periodic. ncepnd cu a 3-a zi, a demarat cultivarea semicontinu,
s-a efectuat prima excludere a mediului nutritiv i nlocuirea cu mediu proaspt,
biologice
cultivarea
semicontinu
a algei
Anabaenopsis
sp.
ceea Evidenierea
ce a condus legitii
la apariia
fazei la
lag,
caracteristic
metodei
periodice;
altfel spus,
algaZilele
s-a acomodat la condiiile
noi induse i, ca rezultat,Mediul
se reduce
biomasa n variMediul nutritiv Drew
nutritiv Gromov-6
antele
cu
25-50%
extragere
i
nlocuire.
Pentru
variantele
de
75%
cele specifice
monitorizate
Concentraiile mediilor excluse i nlocuitei
(%)
la utilizarea mediului
Drew
de
cultivare
acest
aspect
nu
s-a
manifestat.
25
50
75
25
50 ncepnd
75cu
a 6-a zi,
respective, ceea
la cretere
3 alga era deja
+ acomodat
+ cultivrii +
+ ce contribuie
+
+
accelerat
a
biomasei
algale
care
s-a
nregistrat
i
la
a
9-a
zi
de
cultivare
(Tab. +36).
6
+
+
+
9
+
+
+
+
+
Tabelul+ 36
total
3
3
3
3
3
Evidenierea legitii biologice la cultivarea semicontinu a algei 3
Anabaenopsis sp.
tendina
de cretere liniar Cele mai nalte valori s-au atestat n varianta cu 75% extragere de
Zilele
monitorizate
mediu
nutritiv (11,0260,50). La cultivarea algei pe mediul Drew valorile pH-ului, practic, nu se
25
50
75
25
50
75
n total
difereniaz n funcie de volumul mediului extras, fiind cuprinse ntre 7,2 i 7,26, cu devieri
neeseniale de 0,01-0,30 (Fig. 16).
b
109
106
c
Fig.
16.
Valorile
pH-ului
mediilor
nutritive
la cultivarea
algeialgei
Anabaenopsis
sp. dup
Fig.16. Valorile pH-ului mediilor nutritive
la cultivarea
Anabaenopsis
sp.
dup metoda
semicontinu
modificat:
a extragerea
a 25% nutritive;
din mediile
metoda
semicontinu
modificat;
a extragerea
a 25% din mediile
b nutritive;
extragerea
b extragerea
a 50%
din mediile
nutritive;
c extragerea
a mediile
75% dinnutritive.
mediile nutritive.
a 50%
din mediile
nutritiv;
c extragerea
a 75% din
n concluzie
ccea
ceamai
mai
optim
extragere
i nlocuire
a mediun concluzieputem
putem constata
constata c
optim
extragere
i nlocuire
a mediului
nutritiv
lui nutritiv s-a dovedit a fi de 75%, care contribuie la obinerea a celor mai mari
s-a dovedit a fi de 75%, care contribuie la obinerea a celor mai mari valori ale productiviti
valori
ale productiviti algale. Cel mai benefic mediu nutritiv este Gromov-6,
algale. Cel la
maicultivarea
benefic mediu
nutritiv
este Gromov-6,
deoarece
cultivarea
algei Anabaenopsis
deoarece
algei
Anabaenopsis
sp. pe
acestlamediu
reproducerea
celu-1
lelor
se desfoar
o vitez
maise nalt
(care
zile
).
sp. pe algale
acest mediu
reproducereacu
celulelor
algale
desfoar
cu atinge
o vitez1,1300,02
mai nalt (care
atinge
Metoda semicontinu
este mai eficient, deoarece contribuie la obinerea unei
-1
1,1300,02 zile ). Metoda semicontinu este mai eficient, deoarece contribuie la obinerea unei
cantiti nalte de biomas ntr-un interval redus de timp, accelereaz procesul de
cantiti nalte adecelulelor
biomas ntr-un
interval
timp, accelereaz
de reproducere
reproducere
vegetative
aleredus
algeideAnabaenopsis
sp.procesul
i reduce
din timpula
alocat
celuleloromogenizrii.
vegetative ale algei Anabaenopsis sp. i reduce din timpul alocat omogenizrii.
a
demonstrat
c
utilizarea
metodei
continue la cultivarea
de cultivare poate fi utilizat n sisteme deschise ce au posibilitatea de a funciona un termen lung
algelor Isochrisis galbana,
Monochrysis lutheris, Phaetoctilum tricornutum,
170 171
ntrun regim nentrerupt.
Thalassiosira
weisllogi, Dunalliela viridis n cultivatoare de tip nchis permite
meninerea
pe o172perioad
lung
de timp metodei
a culturilor
n faza
activ algelor
de cretere
i
a demonstrat
c utilizarea
continue
la cultivarea
Isochrisis
..
concentraie
optimal.
Aceeai
metod de
cultivareThalassiosira
a fost utilizat
i la Dunalliela
cultivagalbana, Monochrysis
lutheris,
Phaetoctilum
tricornutum,
weisllogi,
rea algei Haematococcus pluvialis pentru obinerea astaxantinei. Astfel, cea mai
viridis n
cultivatoare
tip nchis permite
perioad lung
de timp
a culturilor
nalt
cantitate
de de
astaxantin
a fostmeninerea
obinut pe
la oexcluderea
a 20%
din
biomasan
faza activ de cretere i concentraie optimal. Aceeai metod de cultivare a fost utilizat i la
169
. . : , 1983. 263 .
170
cultivarea
algei Haematococcus
pluvialis.
pentru obinerea
astaxantinei. Astfel,
cea mai nalt
..
:
, 2004, c.464.
170 171
. ..
.
: ,1983.
263 . . B: M, 2006, . 8, .5760.
171
.. . :
, 2004, c.464.
107
172
..
. B: M, 2006, . 8, .5760.
110
Indicii analizai
Productivitatea Coeficientul Viteza de
dup diluie, g/l de diluare
cretere a
(BAU)
()
culturii ()
Xx
Xx
0%
0,350 0,01
25%
0,620,01
0,460,01
Xx
Xx
Viteza de
scurgere a
mediului
nutritiv ()
Xx
1,340,02
0,510,019
0,130,01
Iniial
Peste 3 zile
172
.. .
Haematococcus pluvialis (Chlamydomonales) . B:
M. 2008, . 76, .7380.
173
.., .. Spirulina platensis Tetraselmis viridis
. B: M, 2005, . 70,
.9-11.
174
Ciferri O. Spirulina, the edible microorganism. In: Micobiological reviews, 1983,
p.567-569.
108
50%
75%
0,610,01
0,620,01
0,300,0
0,140,01
2,030,02
4,270,27
0,630,014
0,760,003
0,250,01
0,380,01
25%
0,940,03
Peste 6 zile
0,700,02
1,330,01
0,430,014
0,080,01
50%
0,600,01
0,290,00
2,020,04
0,490,017
0,170,01
75%
0,340,03
0,080,01
4,150,26
0,700,073
0,260,01
25%
50%
75%
1,540,05
0,640,06
0
0,480,05
0,560,07
0
0,090,01
0,170,01
0
25%
50%
75%
1,960,16
0,930,16
0
0,320,04
0,790,07
0
0,080,01
0,170,01
0
25%
50%
75%
3,360,42
0,790,19
0
0,510,04
0,400,03
0
0,080,01
0,170,01
0
25%
50%
75%
3,780,11
0,630,14
0
0,260,05
0,380,03
0
0,080,01
0,170,01
0
Peste 9 zile
1,140,03
1,340,01
0,320,03
2,020,04
0
0
Peste 12 zile
1,460,11
1,340,01
0,460,08
2,020,02
0
0
Peste 15 zile
2,510,31
1,330,01
0,390,10
2,060,05
0
0
Peste 18 zile
2,830,08
1,330,01
0,310,06
1,990,03
0
0
(Tab. 38). Ea duce la obinerea celei mai mari productiviti, atingnd la a 15-a
zi 1,54 g/l. Acelai lucru se observ i n cazul productivitii de dup diluare.
Coeficientul de diluare rmne neschimbat practic la toate concentraiile pe parcursul ntregii perioade a experienelor. Valorile vitezei de cretere a biomasei
tind s se mreasc pn la a 12-a zi, cnd ating cota maxim (0,390), dup care
are loc descreterea. Valorile vitezei de scurgere sunt invers proporionale fa de
cele ale vitezei de cretere. n cazul extragerii a 50% din biomas, productivitatea
maxim se observ la a 15-a zi de cultivare, atingnd cota de 1,04 g/l. Productivitatea de dup diluare la fel este mai nalt la a 15-a zi. La extragerea a 50% se
observ o sporire a vitezei de cretere, comparativ cu extragerea precedent, cota
maxim fiind atins la a 12-a zi (1,218), dup care se diminueaz la urmtoarele
extrageri. Ca i n cazul precedent, viteza de scurgere a mediului se micoreaz
odat cu creterea valorilor vitezei de cretere a biomasei, cele mai mici rezultate
fiind nregistrate la a 12-a zi. Extragerea a 75% din biomas la fel nu este recomandabil, deoarece, ncepnd cu a 6-a zi de extragere, se obine o productivitate
joas, iar la a 12-a zi alga piere.
Tabelul 38
Cultivarea Spirulinei pe apele reziduale de la complexele de porcine dup
metoda cultivrii continue
Procentul
biomasei
extrase
Indicii analizai
Productivitatea Productivitatea Coeficientul Viteza de
iniial, n g/l
dup diluie,
de diluare
cretere a
(BAU)
g/l (BAU)
()
culturii ()
Xx
Xx
Xx
Xx
Viteza de
scurgere a
mediului
nutritiv ()
Xx
0,250,02
0,370,01
0,470,06
0,130,01
0,260,01
0,360,03
0,360,01
0,550,04
0,690,07
0,090,01
0,170,01
0,250,01
0,340,04
0,580,12
0,340,04
0,090,01
0,170,01
0,260,02
0,390,08
0,080,01
Iniial
0%
0,350 0,01
25%
50%
75%
0,440,02
0,420,00
0,430,01
25%
50%
75%
0,600,02
0,440,01
0,260,03
25%
50%
75%
0,770,05
0,480,08
0,080,00
25%
1,110,21
0
Peste 3 zile
0,310,00
1,340,01
0,200,00
2,070,06
0,110,02
3,980,74
Peste 6 zile
0,440,01
1,360,03
0,210,00
2,050,05
0,060,00
4,130,40
Peste 9 zile
0,560,04
1,350,01
0,230,04
2,100,13
0,020,00
4,721,26
Peste 12 zile
0,830,16
1,320,01
110
50%
75%
1,010,30
0
25%
50%
75%
1,540,43
1,040,29
0
25%
50%
75%
1,310,34
0,920,24
0
0,500,15
2,010,03
0
0
Peste 15 zile
1,160,32
1,330,01
0,510,14
2,000,02
0
0
Peste 18 zile
0,980,26
1,340,01
0,460,13
2,040,04
0
0
1,220,17
0
0,170,01
0
0,350,06
0,540,05
0
0,080,01
0,170,01
0
0,130,01
0,440,02
0
0,090,01
0,170,01
0
Indicii analizai
Productivitatea Productivitatea Coeficientul
iniial, g/l
dup diluie,
de diluare
(BAU)
g/l (BAU)
()
Xx
Xx
Xx
Viteza de
cretere a
culturii ()
Xx
Viteza de
scurgere a
mediului
nutritiv ()
Xx
0,460,04
0,590,04
0,760,21
0,130,01
0,250,01
0,380,01
0,420,03
0,610,04
0,860,03
0,090,01
0,170,01
0,260,01
0,420,07
0,250,02
0,570,02
0,090,01
0,170,01
0,260,01
Iniial
0%
0,350 0,01
25%
50%
75%
0,580,03
0,580,02
0,610,00
25%
50%
75%
0,840,07
0,680,07
0,420,05
25%
50%
75%
1,230,08
0,420,06
0,210,04
0
0
Peste 3 zile
0,430,02
1,360,01
0,290,01
2,020,03
0,150,01
4,170,43
Peste 6 zile
0,620,06
1,350,02
0,330,03
2,020,03
0,090,01
4,470,25
Peste 9 zile
0,900,058
1,350,02
0,210,03
2,020,05
0,040,01
5,191,16
111
25%
50%
75%
1,680,26
0,670,10
0
25%
50%
75%
2,360,46
0,690,09
0
25%
50%
75%
2,300,31
0,630,04
0
Peste 12 zile
1,250,19
1,330,01
0,330,05
2,010,03
0
0
Peste 15 zile
1,770,35
1,340,01
0,340,04
2,010,04
0
0
Peste 18 zile
1,720,4
1,340,01
0,310,02
2,010,05
0
0
0,360,08
0,900,04
0
0,080,01
0,170,01
0
0,370,03
0,530,03
0
0,080,01
0,170,01
0
0,190,03
0,460,04
0
0,080,01
0,170,01
0
Apele reziduale
50%
Xx
2,13 0,10
2,64 0,11
2,45 0,12
25%
Xx
4,01 0,16
2,36 0,10
5,92 0,27
75%
Xx
1,00 0,05
0,60 0,03
0,81 0,03
Extragerea a 25% din biomas i adugarea mediului compus din ape reziduale contribuie la obinerea celei mai mari cantiti de biomas, n cazul utilizrii
apelor reziduale de la complexele de bovine i cele avicole. n acest caz obinem
112
o biomas de 6,21 ori mai mare dect la cultivarea prin metoda periodic, pe o
perioad de 20 de zile, n varianta cu apele reziduale de la complexele avicole.
Acelai lucru se observ i la cultivarea Spirulinei pe mediu nutritiv alctuit pe
baza apelor reziduale de la complexele de bovine i porcine, obinnd un spor
de 1,06 i, respectiv, de 1,74 ori fa de metoda cultivrii periodice. Extragerea a
50% din biomas duce la obinerea unei cantiti mai nalte de biomas de Spirulin doar n cazurile folosirii mediului compus din apele reziduale de la porcine.
Dac comparm rezultatele cu metoda de cultivare periodic, observm c att
n cazul utilizrii mediului compus din ape reziduale de la porcine, ct i n cazul
celui de la complexele avicole obinem o cretere de 1,95 i 2,57 ori. La extragerea a 75% din biomas obinem cantiti nensemnate pentru toate variantele
analizate, fapt ce confirm ineficiena extragerii date.
113
CAPITOLUL IX
COLECII DE ALGE
9.1. Caracteristica general a coleciilor de alge
Coleciile de alge prezint o modalitate de conservare a genofondului algal i
de meninere a culturilor de alge valoroase care pot fi utilizate n procesul de cultivare. Astfel, pe plan mondial au fost elaborate cu succes multe strategii, proiecte
care permiteau identificarea i nregistrarea coleciilor de alge ntr-o baz global
de date. Actualmente sunt cunoscute mai multe surse tiinifice care menionaz
175176177178
coleciile de alge de pe diferite continente.175-178
Una dintre cele mai importante baze
de date electronice a coleciilor mondiale de alge este cea a Federaiei Mondiale
a Coleciilor de Culturii.179 Actualmente, n registrul bazei de date a acestei Federaii sunt nregistrate 3060 de specii i varieti de alge meninute n condiii de
colecii. Pe sate-ul oficial al Federaiei Mondiale a Coleciilor de Culturi sunt nregistrate coleciile de alge, dintre care: n Europa 47 (majoritatea n Frana (6)
i n Federaia Rus (5); pe continentul american 15; n Asia 38 (majoritatea
n Thailanda 8); n Australia 8 colecii.
Datele de contact privind coleciile mondiale de alge sunt prezentate n Anexa nr. 4.
114
115
116
din vasul Dewar, se expun n ap cald (de 37C) timp de cteva minute (n
general, mai puin de 2 minute), se elimin lichidul expus deasupra mediului
186 187 188
solid. Cultura se inoculeaz n mediu proaspt pregtit.186-188
Day J.G., Brand J.J. Cryopreservation methods for maintaining cultures. // Algal culturing
tehniques, 2005, p.165-187.
187
Day J.G. Cryopreservation of Microalgae and Cyanobacteria. Cryopreservation and
Freeze-Drying Protocols. USA, 2007, p.141-151.
188
http://www.utex.org/protocols.aspx
189
Alpert P. The limits and frontiers of desiccation tolerant life. Integr. // Comp. Biol.,
45:685-695, 2005.
190
Crowe J.H, Hoekstra F.A, Crowe L.M. Anhydrobiosis. // Annu Rev Physiol., 1992, 54,
p.579-599.
191
.. . // , : . (, 27-30 2006 .). - , 2006, c.173-174.
192
.. : . ... . . . , 2008. 25 .
186
117
Bibliografie
1. Abbott I.A., Cheney D.P. Comercial uses of algal products: introduction und
bibliography. // Selected papers in phycology, 1982, vol. 2, p.779-787.
2. Albergoni V., Piccini E., Coppellotti O. Response to heavy metals in organism. Excretion andaccumulation of physiological and nonphysiological
metals in Euglena gracilis. // Comparative Biochem. Physiol., 1980, vol.
67, no. 2, p.121-127.
3. Algal Biotehnology. Progres in biotehnology of photoautotrophic microorganism. // 6 Intern. Conf. on applied algology, 1993. 84 p.
4. Alpert P. The limits and frontiers of desiccation tolerant life. Integr. //
Comp. biol., 2005, 45:685-695.
5. Atlas R.M. Handbook of microbiological media fourth edition. New York,
2010. 2063 p.
6. Baldia S.F., Nishijima T., Hata Y., Fucami K. Growth characteristics of
blue green alga Spirulina platensis for nitrogen utilization. // Nippon Suisan Gakkaishi., 1991, 57, no 4, p.645-654.
7. Baldia S.F. Fukami K., Nuishijima T., Hata Y., Growth response of Spirulina platensis to somo physico- chemical factors and the kinetics of phosphourus utillization. // EISH, 1995. no 2, p.351-335.
8. Bealy A., Kato T., Ota Y. Spirulina (Artrospira) potenial aplication as an
animal fud supliment. // J. Appl., Phycol., 1996, 8, no 4-5, p.143-147.
9. Behrens P.W. Photobioreactors and fermentors: the light and dark sides of
growing algae. // Algal Culturing Techniques, 2005, p.189-203.
10. BelcherH., Swale E. Culturing Algae, a guide for schools and colleges.
U.S.A., 1982. 25 p.
11. Belkinova D.S., Kirjakov I.K., Mladenov R.D. Catalogue of the strains of
plovdiv algal culture collection (PACC). // Trav. Sci. Univ. Plovdiv., Plantarum (2), 2002, 38(6), p.3-78.
12. Besker E.W. Development of spirulina research in developing county india.
// Spirulina Algae of life. // Bull. Inst. Oceanorg.,1993, no12, p.141-155.
13. Besker E.W. Spirulina alga of life. // Bull. Inst. Oceanolorg., 1993, no12,
p.141-155.
14. Biodiesel Production. BioEnergy Research 1(1):20-43.
15. Blidari C.F., Petru-Vancea A. Biotehnologie. Lucrri practice de laborator.
Oradea, 2006. 103 p.
16. Bogdan A.T., ogoe I., Cmpeanu Gh., Ivana S., Enache T., Britareanu
S., Iudith I., Popescu A. Microbiologia alimentelor. Vol 1. Bucureti, 2011.
294 p.
17. Brown R.M., Jr., Bischoff H.W. A new and useful method for obtaining
axenic cultures of algae. // Phycol. Soc.Amer. News Bull., 1962, vol. 15,
p.43-44.
118
18. CachitaCosma D., Deliu C., Rakosy- Tican L., Aedelea A. Tratat de biotehnologie vegetal. Vol. I. Cluj- Napoca: Dacia, 2003, p.10-18.
19. Carolina Biological Supply Company. Culturing Algae. U.S.A., 2012. 27 p.
20. Catalogue of the national culture collection (UKNCC). List of algae and
protozoa. USA, 2001. 231 p.
21. Cru I. Cultura algelor pentru biomas i principii active: Note de curs,
lucrri de laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
22. Chaudhury B.K. De S., Bhattacharyya D.K. Effect of nitroyen sources on
linolenic acid accumulation in Spirulina platensis. //Jaocs, 1995, vol. 76,
no 1, p.153-155.
23. Chiu I. Biochimie. Vol. I. Timioara: Mitron, 1999. p.94-111.
24. Ciferri O. Spirulina, the edible microorganism. In: Micobiological reviews,
1983, p.567-569
25. Cozza K.L. Costa J.A.V. Lipdios em Spirulina. Vetor Rev. Cienc. Exatas
Eng., 2000, no 10, p.69-80.
26. Crowe J.H, Hoekstra F.A, Crowe L.M. Anhydrobiosis. // Annu. Rev. Physiol., 1992, 54, p.579-599.
27. Day J.G. Cryopreservation of Microalgae and Cyanobacteria. Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols, USA, 2007, p.141-151.
28. Day J.G., Brand J.J. Cryopreservation methods for maintaining cultures. //
Algal culturing tehniques, 2005, p.165-187.
29. Day J.G., Lukavsk J., Friedl Th., Brand J.J., Campbell Ch.N., Lorenz M.,
Elster J. Pringsheims living legacy: CCALA, CCAP, SAG and UTEX culture collections of algae. Nova Hedwigia, 2004, 79, no1-2, p.27-37.
30. Dobrojan S. Modificrile morfofiziologice i biochimice ale algei Spirulina
platensis (Nordst.) Geitl. cultivate pe ape reziduale i utilizarea ei: Tez de
doctor n tiine biologice. Chiinu, 2011.
31. Dobrojan S., alaru V., alaru V. Utilizarea apelor reziduale de la complexele zootehnice la cultivarea industrial a algei Spirulina platensis
(NORDST.) Geitl. // Studia Universitatis. Seria ,,tiine ale naturii, 2009,
nr.6 (26), p.46-50.
32. Dobrojan S., Gorbatenco C., Dobrojan G., Stratulat I. Cultivarea algei Nostoc flagelliforme pe medii obinute pe baza deeurilor de la complexele
zootehnice. // Studia Universitatis, 2012, nr.1 (51), p.19-22.
33. Dobrojan S., Dobrojan G., alaru V. Cultivarea algei cianofite Spirulina
platensis utiliznd ca mediu apele reziduale de la complexele de porcine. //
International Conference of young Researches, 2010, nr.8, p.60.
34. Dobrojan S., alaru V.M., alaru V.V., Dobrojan G., Stratulat I. Procedeu
de preparare a mediului nutritiv pentru cultivarea algei Spirulina platensis
(Nordst.) Geitl. // Al 3-lea Simpozion. Lacurile de acumulare din Romnia.
Tipologie, Valorificare, Protecie, 2012, p.3.
35. Droop M.R. A procedure for routine purificationof algal cultures with antibiotics. // Brit. Phycol. Bull., 1967, no3, p.295.
119
53. Keller M.D., Bellows W.K., Guilhd R.R.L. Microwave treatment for sterilization of phytoplankton culture media // J. Esp. Mar. Bid. Ed., 1988, vol.
117, p.279-283.
54. Kyle D.J. Specialty Oils from Microalgae: Perspective, in Biotechnoloyy
of Plant Fats and Oils. // Edited by J.Rattray, American Oils Chemists Society, Champaiyn, 1991, p.130-143.
55. Laing I. Cultivation of marine uniclular algale. Lowestoft, 1991. 31 p.
56. Lcia Helena Pelizer, J.C.M. Carvalho, Sunao Sato, Iracema de Oliveira
Moraes, Spirulina platensis growth estimation by pH determination at different cultivations conditions. // Journal of Biotechnology, 2002, vol. 5,
no. 3.
57. Manabe E., Morio, and T. Hiroyuki, I.D. Naoka, S. Koji, and M.Tadashi.
Influrnce of ammonium chloride on growth and fatty acid production by
Spirulina platensis. // Appl. Biochem. Biotechnol, 1992, 34-35: 274-281.
58. Manabe E., Hiroyuki and H. Morio. Spirulina Culture for Enhanced Manufacture of Linolenie Acid. // Chem. Abstr., 1992, 116:82258.
59. Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti:
Editura Didactic i Pedagogic, 1993, p.244-264.
60. Prask J., Plocke D. A role for zinc in the cytoplasmic ribosomes of Euglena
gracilis. // Plant Physiol., 1971, vol. 48, no2, p.150-155.
61. Richmond A. Handbok of microalgal mass culture. // Boca Raton: CRC
Press, 1996, p. 528.
62. Richmond A. Handbook of microalgal mass culture. CRC Press, Boston,
1990.
63. Richmond A. Handbook of microalgal culture biotechnology and applied
phycology. Blackwell Science, Oxford, 2004.
64. Sasson A. Biotehnologii i dezvoltare. Bucureti: Editura Tehnic, 1993.
303 p.
65. Schenk P.M., Thomas-Hall S., Stephens E., Marx U.C., Mussgnug J.H.,
Posten C., Kruse O., Hankamer B. Second Generation Biofuels: High-Efficiency Microalgae for Biodiesel Production. // Bio Energy Research, 2008,
no1(1), p.20-43.
66. Simiona I. Bacteriologie general. Bucureti, 2005.
67. Solp H., Starr M.P. Principles of isolation, cultivation and conservation of
bacteria. // The Procaryotes. Vol. 1. Vienna: Springer-Verlag, 1981. p.135175.
68. Stancic M. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i Pedagogic, 2003, p.43-78.
69. Tarmure C. Biochimie structural i metabolic. Cluj- Napoca: Dacia,
1996, p.43-58.
70. Tel Or. E., Stewart W. Manganes and photosynthetic oxygen evolutio by
algae. // Nature, 1975, vol. 258, no5537, p.715-716.
121
118. .., .. . , , . ;
-: -, 1997. 155 .
119. .. . // , 1945, .14, 4, .248-253.
120. .. - . , 1981. 210 .
121. .. Scenedesmus acutus
Meyen. // (), 1970, 9, .353363.
122. ..
- . // - . , 1969, .920.
123. ..
. B: , 2006, . 8,
.57-60.
124. .. . :
, 2012. 728 c.
125. .., .., .. . , 1997. 184 .
126. .. . ,
, . ; : , 2012. 728 .
127. .. . : .
: , 2008. 199 c.
128. .. . // , 1974, .11, .3-19.
129. .., .. - .
// . (,
, ). ., 1991, .300-304.
130. .. . // , 1983, .74-80.
131. .. . // . ., 1972, . 57, 2, .182197.
132. .., .. .
- . // .
., 1972, .8, 3. .47-55.
133. ..
. // . ., 1985, .70, 8,
.1009-1018.
125
164. .., ..
K . //
, 1983, . 81-86
165. http://www.algaemax.eu/more-in-detail.html
166. http://www.utex.org/protocols.aspx
167. http://www.wfcc.info
168. http://www-cyanosite.bio.purdue.edu
169. http://gcm.wfcc.info
128
Cantitatea, g/l
Ca(NO3)2
0,04
K2HPO4
0,01
MgSO4*7H2O
0,025
Na2CO3
0,02
Na2SiO3*9 H2O
0,025
FeCl3*6 H2O
0,0008
Anexa nr.1
Beneche
Ingredientul
Cantitatea, g/l
MgSO4*7H2O
0,1
Ca(NO3)2
0,5
K2HPO4
0,2
FeC6H5O7
0,0033
C6H8O7
0,0033
Cantitatea, g/l
KNO3
K2HPO4*3 H2O
0,2
MgSO4*7H2O
0,2
CaCl2*6H2O
0,15
NaHCO3
0,2
Soluie de microelemente
1 ml
pH
129
Soluia de microelemente pentru mediul nutritiv Nr.6 (Gromov B.V., Titanova N.N.)
Ingredientul
Cantitatea, g/l
0,22
ZnSO4*7H2O
1,81
MnSO4
0,08
CuSO4*5H2O
2,63
NaBO3*5H2O
1
(NH4)6Mo7O24*4H2O
9,3
FeSO4*7H2O
1,2
CaCl2
0,02
Co(NO3)2*6H2O
EDTA (trilon B)
10
Mediul nutrtiv Nr.16 (Gromov B.V., Titanova N.N.)
Ingredientul
Cantitatea, g/l
NaHCO3
16,8
K2HPO4*3H2O
0,5
NaNO3
2,5
K2SO4
NaCl
MgSO4*7H2O
0,2
CaCl2*6H2O
0,04
FeSO4
0,01
EDTA
0,08
Soluie de microelemente
1 ml
Soluie de microelemente pentru mediul nutritiv Nr. 16 (Gromov B.V., Titanova N.N.)
Ingredientul
Cantitatea, g/l
H3BO3
2,86
MnCl2
1,81
ZnSO4*7H2O
0,22
CuSO4*5H2O
0,08
MoO3
0,015
130
Cantitatea, g/l
2,86
1,13
0,222
0,39
0,049
0,079
Saluia B
Ingredientul
K2HPO4
Na2CO3
NaHCO3
Cantitatea, g/l
1
8,04
27,22
Cantitatea, g/l
3,1
2,23
0,22
0,088
0,145
0,054
0,474
0,189
0,154
0,037
0,033
0,199
0,083
Cantitatea, g/l
2,02
0,348
0,246
0,11
0,117
0,485
1 ml/l
1 ml/l
132
Cantitatea, g/l
Soluia I
H3BO3
2,86
MnCl2*4H2O
1,81
ZnSO4*7H2O
0,22
CuSO4*5H2O
0,06
MoO3
0,015
Soluia II
NH4VO3
0,023
K2Cr2(SO4)2*2H2O
0,096
NiSO4*7H2O
0,048
Na2WO4*2H2O
0,018
Ti2(SO4)3
0,04
Co(NO3)*6H2O
0,044
Cantitatea, g/l
MgSO4*7H2O
0,2
K2HPO4*3H2O
0,3
CaCl2*6H2O
0,2
Na2SO4
0,4
(NH4)2SO4
0,4
NaCl
0,17
FeC6H5O7
0,003
Microelemente
5 ml/l
Cantitatea, g/l
Soluia I
H3BO3
2,86
MnCl2*4H2O
1,81
ZnSO4*7H2O
0,222
CuSO4*5H2O
0,06
MoO3
0,018
NH4VO3
0,023
Cantitatea, g/500 ml
NaHCO3
13,61
Na2CO3
4,03
K2HPO4*3H2O
0,5
Cantitatea, g/500 ml
NaNO3
2,5
K2SO4
NaCl
MgSO4*7H2O
0,2
CaCl2*2H2O
0,04
6 ml
Chu-soluie de microelemente
1 ml
Vitamina B12
1 ml
134
Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004
Chumicroelemente
Ingredientul
CuSO4*5H2O
ZnSO4 *7H2O
CoCl2*6H2O
MnCl2*4H2O
Na2MoO4*2H2O
H3BO3
Na2EDTA
Cantitatea, g/l
0,02
0,044
0,02
0,012
0,012
0,62
0,05
Vitamina B12
Soluia de cianocobalamin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer.
Soluia de cianocobalamin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de
0,45 .
Ingredientul
Soluie bufer (Sigma H-3375)
Cianocobalamin
Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,027
Cantitatea, g/l
2,3
1,5
1 ml
5 ml
135
MgSO4*7H2O (6 g/l)
Na2CO3 (4 g/l)
CaCl2*2H2O (2,5 g/l)
Na2SiO3*9 H2O (4,64 g/l)
C6H8O7 (4,8 g/l)
pH
P-IV soluie metalic
Ingredientul
Na2EDTA*2H2O
FeCl3*6H2O
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CoCl2*6H2O
Na2MoO4*2H2O
5 ml
5 ml
10 ml
10 ml
1 ml
7,8
Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004
Cantitatea, g/l
0,3
0,2
0,2
0,1
2
0,2 ml
1 ml
7,5
Cantitatea, g/l
2,9
1,81
0,11
0,08
0,018
136
Cantitatea, g/l
2,9
1,81
0,11
0,08
0,018
Cantitatea, g/l
0,2
0,2
0,1
0,0001
0,0001
0,0001
0,0001
0,0001
1 ml
7-7,5
137
Ingredientul
Soluia A
Soluia B
KNO3
NaNO3
Soluia A
Ingredientul
MgSO4*7H2O (4%)
CaCl2*2H2O (1,2%)
NaCl (3,8%)
Soluie de microelemente
Volumul, ml
500
500
500
500
Soluia B
Ingredientul
K2HPO4
Concentraia, g/0,5l
28
Ingredientul
AA Fe-EDTA
MnCl2*4H2O
MoO3
ZnSO4*7H2O
CuSO4*5H2O
H3BO3
NH4VO3
CoCl2*6H2O
Cantitatea, g/l
1,5
0,04
0,075
0,036
0,006
0,006
0,001
0,02
1 ml
7,1
Concentraia, g/l
2,86
1,81
0,22
0,39
O,079
0,0494
Mediul nutritiv Z-8
Cantitatea, g/l
46,7
5,9
2,5
139
Cantitatea, g/l
3,1
2,1
Soluia 3 pentru mediul Z-8
Cantitatea, g/l
0,1
0,0667
0,0333
0,000022
0,00181
140
CuSO4*5H2O
NaBO3*4H2O
(NH4)6Mo7O24*4H2O
FeSO4*7H2O
CaCl2
Co(NO3)2H2O
EDTA
0,000079
0,00263
0,001
0,0093
0,0012
0,00002
0,01
Cantitatea, g/l
0,2
0,2
Urme
Urme
Mediu cu extract din sol
Ingredientul
K2HPO4
MgSO4*7H2O
Extract de sol
Ap distilat
Cantitatea, g/l
0,02
0,02
100 ml
900ml
Extractul de sol se prepar prin dizolvarea a 1 kg sol de grdin n 1 l ap distilar, se agit i se las pe 30 minute, dup care se filtreaz i se utilizeaz.
Mediul nutritiv Tamia
Ingredientul
KNO3
MgSO4*7H2O
KH2PO4
FeSO4*7H2O
EDTA
H3BO3
Concentraia, mg/l
5
2,5
1,25
0,003
0,037
2,86
141
MnCl2*4H2O
ZnSO4*7H2O
MoO3
NH4VO3
1,81
0,222
17,64
229,6
Concentraia, mg/l
66,7
33,3
100
1 ml
Concentraia, mg/l
66,7
33,3
100
1 ml
1000
1000
1 ml
Cantitatea, g/l
0,22
1,81
0,079
2,63
1
9,3
1,2
0,02
10
142
Cantitatea g/l
NH4Cl
MgSO4*7H2O
CaCl2*2H2O
5
2
1
Concentraia, mg/l
0,1
0,01
0,01
0,001
Concentraia, g/100 ml
11,8
4
5
5
1,95
2,67
143
Volumul, ml/l
1
1
1
1
6
1
1
1
Vitamina B12
Soluia de cianocobalamin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de cianocobalamin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45.
Ingredientul
Cantitatea, g/200 ml
Soluie bufer (Sigma H-3375)
2,4
Cianocobalamin
0,027
Soluia de vitamina biotin
Soluia de biotin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de
biotin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45 .
Ingredientul
Cantitatea, g/200 ml
Soluie bufer (Sigma H-3375)
2,4
Biotin
0,005
P-IV soluie metalic
Ingredientul
Na2EDTA*2H2O
FeCl3*6H2O
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CoCl2*6H2O
Na2MoO4*2H2O
Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004
Volumul, ml/l
10
10
10
10
10
6
1
144
Cantitatea g/400 ml
10
1
3
7
1
Vitamina B12
Soluia de cianocobalamin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de cianocobalamin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45.
Ingredientul
Soluie bufer (Sigma H-3375)
Cianocobalamin
Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,027
Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,005
Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004
Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,067
0,004
Cantitatea, g/l
0,25
0,075
145
KH2PO4
CaCl2
NaCl
MgSO4*7H2O
FeCl3
MnSO4*4H2O
ZnSO4*7H2O
H3BO4
CuSO4*5H2O
pH
0,175
0,025
0,025
0,075
0,0003
0,0003
0,0002
0,0002
0,00006
6,8-7,2
Mediul nutritiv Proteaz
Cantitatea, g/l
116
50
2,5
0,2
0,01
0,04
1 ml/l
Cantitatea, g/l
2,86
1,81
0,222
0,06
0,018
0,023
146
Cantitatea, g/l
16
12,5
2,46
1,24
0,496
0,26
0,05
0,05
1 ml
Cantitatea, g/l
0,22
1,81
0,079
2,63
1
9,3
1,2
0,02
10
148
Anexa nr.2
Mediile nutritive optime pentru cultivarea unor specii de alge
ALGELE CIANOFITE
Speciile de alge cultivate
Ammatoidea simplex Woronichin
Anabaena arctica var. spiroides Kiselev
A. augatumalis Schmidll. str. Janke
A. constricta (Szaf.) Geitler
A. contorta Bachm.
A. cylindrica Lemmermann
A. oscillarioides Bory de Saint-Vincent ex Bornet
& Flahault
A. variabilis Ktzing ex Bornet & Flahault
Anabaena sp.
Anabaenopsis sp.
Anacystis nidulans N.L. Gardner
Aphanocapsa thermalis Brgger
Aphanothece bullosa (Meneghini) Rabenhorst
Aphanothece clathrate West et. G.S. West
A. saxicola Ngeli
Calothrix clavata G.S. West
C.ix Elenkini Kossinskaja
C. thermalis Hasngirg ex Bornet & Flahault
C. viguieri Frmy
Chamaesiphon confervicola A.Braun in
Rabenhorst
Chlorogloea microcystoides Geitler
Chroococcidiopsis thermalis Geitler
Chroococcus globosus (Elenkin) Hindk
Coccopedia limnetica O.V. Troitzkaja
C. turkestanica E.Kiseleva
Cyanidium caldarium (Tilden) Geitler
Cyanotheca longipes Pascher
Cylindrospermum alatosporum F.E. Fritsch
C. licheniforme Ktzing ex Bornet & Flahault
Eucapsis alpina F.E. Clements & H.L. Schantz
Gloeocapsa alpicola (Lyngbye) Bornet
149
Foggs
Hapalosiphon stuhlmannii Hieronymus
Nr.6
Lyngbya aestuarii f. major Elenkin
Nr.6
Mastigocladus bursa Dickie
Nr.6
Merismopedia glauca (Ehrenberg) Ktzing
Nr.6
M. punctata Meyen
Nr.6
Microchaete tenera Thuret ex Bornet & Flahault
Nr.6
Microcoleus vaginatus Gomont ex Gomont
BG11
Microcystis aeruginosa (Ktzing) Ktzing
Nr.6
Myxosarcina chroococcoides Geitler
Nr. 6
Nodularia spumigena Mertens ex Bornet &
Flahault
Nr.6, BG 11, Z-8, Drew, DS
Nostoc commune var. flagelliforme Bornet &
Flahault
N. ellipsosporum Rabenhorst ex Bornet & Flahault Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Bonds
modificat
N. gelatinosum f. halophilum (Hansgirg) Elenkin Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov,
Nawawy, DS
Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov,
N. linckia Bornet ex Bornet & Flahault
DS, Allen
Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov,
N. flagelliforme (Berk.et Curt.) Elenkin
DS, Allen
Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov
N. muscorum C.Agardh ex Bornet & Flahault
Nr. 6
N . paludosum (Ktz.) Elenkin
Nr. 6
N . punctiforme (Ktz.) Elenkin
Nr.6, Drew
Oscillatoria splendida Greville ex Gomont
Nr.6, Drew
O. subbrevis Schmidle
Nr.6, Drew
Phormidium autumnale f. tenue West & G.S.West
Nr.6, Drew
Ph. autumnale Gomont
Nr.6, Drew
Ph. autumnale var. minus Gardner
Nr.6
Ph. favosum Gomont
Nr.6
Ph. favosum var. minus Vasishta
Nr.6
Ph. foveolarum f. moniliforme Anand
Nr.6
Ph. foveolarum Gomont
Nr.6
Ph. inundatum Ktzing ex Gomont
Nr.6
Ph. molle Gomont
Nr.6
Ph. subfuscum Ktzing ex Gomont
Nr.6
Ph. tadzschicicum Meln.
Nr.6
Ph. tenuissimum Woronichin
Nr.6
Ph. uncinatum Gomont ex Gomont
Nr.6
Plectonema boryanum Gomont
Nr.6
P. nostocorum Bornet ex Gomont
Nr.6
Scytonema sp.
150
ALGELE VERZI
Specia
Ankistrodesmus acicularis (Braun) Korshikov
A. arcuatus Korshikov
A. braunii var. minutus Playfair
A. convolutus Corda
A. falcatus (Corda) Ralfs
A. nannoselene Skuja
A. pseudomirabilis Korshikov
A. spiralis (W.B.Turner)Lemmermann
A. rotundus Korshikov
Ankistrodesmus sp.
Asteromonas gracilis Artari
Chlamydomonas eugametos Moewus
Ch. gloeogama f.Humicola
Ch. gyrus Pascher
Ch. moewusii Gerloff
Ch. reinhardtii P.A.Dangeard
Chlorella ellipsoidea Gerneck
Ch. luteo-viridis Chodat in Conrad & Kufferath
Ch. luteo-viridis var. aureoviridis Mayer
Ch. minita (Naeg.) Olimanns
Ch. ovalis Butcher
151
Nr.3
Nr.3
Nr.3, Nr.6, Prat
Nr.3
Nr.3, Bristols
Nr.1, Bristols
Nr.1, Bristols
Nr.3, Nr.6, Bristols
Nr.3
Nr.1
Nr.3
Nr.3
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Nr.3
Nr.3
Nr.3
Nr.3
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Aratium
Nr.6, MES volvox, Prat
Nr.1, Prat
Nr.6
Nr.1
Nr.6
Nr.3, Bold 1 NV
Nr.3
Nr.3
153
Nr.3
Nr.3, Bristols
Nr.3, Bristols
Bold 1 NV modificat
Nr.6, Bristols
Nr.3, Bristols
Nr.6, Bristols
Nr.3
Nr.3
Nr.6, Bristols, Proteaz
Nr.6, Prat, Proteaz
Nr.3, Prat, Bristols
Nr.1, Prat, Bristols
Nr.3, Prat
Nr.6, Prat
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Nr.3, Proteaz
Nr.6
Nr.3, Nr.6, Proteaz, Prat
Nr.6, Prat
Nr.3, Proteaz, Prat
Nr.6, Proteaz, Prat
Nr.3
Nr.1, Nr.3, Nr.6, Proteaz, Prat
Nr.6
Nr.6
Bristol
Nr.1
Prat
Nr.6
Nr.3, Bristol
Nr.6
Nr.1, Nr.6
Nr.1
154
Anexa nr.3
Condiiile optime de temperatur pentru cultivarea algelor
ALGE CIANOFITE
Specia
Temperatura optim, C
22
Anabaena arctica var. spiroides Kiselev
22
A. augatumalis Schmidll. str. Janke
22
A. constricta (Szaf.) Geitler
22
A. contorta Bachm.
22
A, cylindrica Lemmermann
22
A. oscillarioides Bory de Saint-Vincent ex Bornet
& Flahault
22
Anabaena variabilis Ktzing ex Bornet & Flahault
22
Anabaena sp.
23-27
Anabaenopsis sp.
25
Calothrix clavata G.S. West
25
C. Elenkini Kossinskaja
25
C. thermalis Hasngirg ex Bornet & Flahault
25
C. viguieri Frmy
12
Chroococcidiopsis thermalis Geitler
25-30
Chroococcus globosus (Elenkin) Hindk
37
Cyanidium caldarium (Tilden) Geitler
25
Cylindrospermum alatosporum F.E. Fritsch
25
C. licheniforme Ktzing ex Bornet & Flahault
25
Gloeocapsa alpicola (Lyngbye) Bornet
25
Hapalosiphon stuhlmannii Hieronymus
22
Lyngbya aestuarii f. major Elenkin
25
Mastigocladus bursa Dickie
25
Merismopedia glauca (Ehrenberg) Ktzing
25
M. punctata Meyen
25
Microchaete tenera Thuret ex Bornet & Flahault
25
Microcoleus vaginatus Gomont ex Gomont
25
Microcystis aeruginosa (Ktzing) Ktzing
25
Nodularia spumigena Mertens ex Bornet &
Flahault
25
Nostoc commune var. flagelliforme Bornet &
Flahault
25
N. ellipsosporum Rabenhorst ex Bornet & Flahault
25
N. gelatinosum f. halophilum (Hansgirg) Elenkin
22
N. linckia Bornet ex Bornet & Flahault
25-35
N. flagelliforme (Berk.et Curt.) Elenk.
25
N. muscorum C.Agardh ex Bornet & Flahault
155
25
25
25
12-25
12-25
25
25
25
25
15-25
25
25
25
15-25
25
25
22
22-25
25-30
25-30
25-30
25-30
25
25
25
25
25
22
22
22
ALGE VERZI
Specia
Ankistrodesmus acicularis (Braun) Korshikov
A. arcuatus Korshikov
A. braunii var. minutus Playfair
A. convolutus Corda
A. falcatus (Corda) Ralfs
A. nannoselene Skuja
A. pseudomirabilis Korshikov
156
Temperatura optim, C
25
25
25
25
25
25
25
A. rotundus Korshikov
A. spiralis (W.B.Turner)Lemmermann
Ankistrodesmus sp.
Chlamydomonas eugametos Moewus
Chlamydomonas gloeogama f.Humicola
Ch. gyrus Pascher
Ch.moewusii Gerloff
Ch.reinhardtii P.A. Dangeard
Chlorella ellipsoidea Gerneck
Ch. luteo-viridis Chodat in Conrad & Kufferath
Ch. luteo-viridis var. aureoviridis Mayer
Ch. minita (Naeg.) Olimanns
Ch. ovalis Butcher
Ch. paramecii Loefer
Ch. protothecoides Krger
Ch. pyrenoidosa H.Chick
Ch. terricola Gollerbach
Ch. variegata Beijerinck
Ch. vulgaris Beyerinck
Ch. vulgaris var. viridis Chodat
Chlorella sp.
Chlorococcum aplanosporum Arce & Bold
Ch. ellipsoideum Deason & H.C. Bold
Chlorococcum humicola var. incrassatum F.E.
Fritsch & R.P. John
Ch. hypnosporum Starr
Ch. intermedium Deason & Bold
Ch. macrostigmatum R.C. Starr
Ch. minutum R.C.Starr
Ch. perforatum Arce & Bold
Ch. pinguideum Arce & H.C. Bold
Ch. polymorphum Bischoff & Bold
Ch. punctatum Arce & H.C. Bold
Ch. wimmeri (F.W. Hilse) Rabenhorst
Chodatella balatonica Scherffel in Kol
Coelastrum cambricum W.Archer
Coelastrum microporum Ngeli in A.Braun
Coelastrum proboscideum var. dilatatum Vischer
Dunaliella salina (Dunal) Teodoresco
Haematococcus pluvialis Flotow
Hormidium dissectum (F.Gay) Chodat
157
25
25
22
25
25
25
25
25
22-25
22
22
25
25
22
22
25
22-25
25
25-27
25
25
22
22
22
25
22
22
22-25
22
25
25
25
22
25
25
25
25
27
25-27
22
22
22
22
25
25
25
25
25
25
25
25
22
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
15-20
20
20
20
25
25
25
25
Temperatura optim, C
22
158
Temperatura optim, C
25
Temperatura optim, C
25
25
22-25
25
159
Anexa nr.4
EUROPA
Armenia
Denumirea instituiei: Colecia naional de culturi microbiene a Republicii Armenia
Coresponden: Prof. Evrik Afrikian, tel. (37410) - 65 08 83, email: microbio@
sci.am; afrikian2002@yahoo.com.
Pagina electronic: http://www.sci.am/resorgs.php?oid=41&langid=1
Austria
Denumirea instituiei: Colecia de alge a Institutului de botanic
Coresponden: Prof. asociat G.Gaertner, tel. (43) 512-507-2715; email: georg.
gaertner@uibk.ac.at
Pagina electronic: http://botany.uibk.ac.at/
Belgia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge cianofite (sub)polare
Coresponden: Prof. asociat Annick Wilmotte, tel. (32) 4-366 33 87; email:
BCCM.ULC@ulg.ac.be; awilmotte@ulg.ac.be
Pagina electronic: http://bccm.belspo.be/about/ulc.php
Bulgaria
Denumirea instituiei: Colecia de alge a Universitii din Sofia
Coresponden: Dr. Blagoy Uzunov, tel. (359) 888-22-3165, email. blagoy_uzunov@abv.bg
Pagina electronic: Cehia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge a Universitii Charles din Praga
Coresponden: Prof. asociat Pavel Skaloud, tel. (42) 0-221951648; email: skaloud@natur.cuni.cz
Pagina electronic: http://botany.natur.cuni.cz/algo/caup.html
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de organisme autotrofe
Coresponden: Josef Jur, tel. (420) 384-721 156, email: josef.juran@ibot.cas.cz
Pagina electronic: http://ccala.butbn.cas.cz/
Danemarca
Denumirea instituiei: Colecia de culturi scandinave de alge i protozoare
Coresponden: Prof. asociat Gert Hansen, tel. (45) 35-322303, email: gerth@
bio.ku.dk, sccap@bio.ku.dk
Pagina electronic: http://www.sccap.dk/
160
161
164
Turcia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge
Coresponden: Meltem CONK- DALAY, tel. (90) 232-3884955, email: meltemconkdalay@gmail.com; meltemconkdalay@egemacc.com
Pagina electronic: http://www.egemacc.com/
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge a Institutului Soley
Coresponden: Prof. asociat Nazan Calisir, tel. (90) 216-6140997; email: ncalisir@soley.cn
Pagina electronic: http://www.algaeinstitute.com
Regatul Unit al Marii Britanii i al Irlandei de Nord
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge i protozoare
Coresponden: Rachel Saxon, tel. (44) 1631-559000, email: ccap@sams.ac.uk
Pagina electronic: http://www.ccap.ac.uk
Denumirea instituiei: Colecia de culturi a asociaiilor biologice marine
Coresponden: Angela Ward, tel. (44) 1752-63334, email: MBACC@mba.ac.uk
Pagina electronic: http://www.mba.ac.uk/culturecollection
Ucraina
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge herbarul Universitii
din Harkov
Coresponden: Prof. Tatjana Dogadina, tel. (380) 57-707-55-29, email: botany.100.years@gmail.com; Tatjana.V.Dogadina@univer.kharkov.ua
Pagina electronic: http://botany.univer.kharkov.ua/cwu-macc.html
Republica Moldova
Denumirea instituiei: Colecia laboratorului de cercetri tiinifice Algologie,
Universitatea de Stat din Moldova
Coresponden: Prof. V.V. alaru, tel. (373) 22 57-77-92, email: salaruvictor@
yahoo.com
Pagina electronic: http://usm.md/?page_id=10083
Denumirea instituiei: Colecia naional de microorganisme nepatogene
Coresponden: Acad. Valeriu Rudic, tel. (373) 22 73-98-78, email: acad.rudic@
mail.md, acadrudic@yahoo.com
Pagina electronic: http://www.imb.asm.md/pages0-20-0-ro.htm
Romnia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge cianofite i alge a Institutului de
cercetri biologice din Cluj-Napoca
Coresponden: Prof. Drago Nicolae, tel. (+4)0264598084, email: ndragos@
hasdeu.ubbcluj.ro
Pagina electronic: http://www.icbcluj.ro/about-us/departamentul-de-taxonomie-si-ecologie/domenii-de-activitate
165
AMERICA
Argentina
Denumirea instituiei: Banca Naional a Microorganismelor
Coresponden: Dr. Montecchia Marcela S, tel. (54) - 11 4524 8061; email:
mmontecc@agro.uba.ar
Pagina electronic: http://www.agro.uba.ar/investigacion/inba/banco
Brazilia
Denumirea instituiei: Colecia brazilian de alge cianofite Universitatea Sao
Paulo
Coresponden: Prof. Maria C. Bittencourt-Oliveira; tel. (55) 19-342-94169;
email: mbitt@esalq.usp.br
Pagina electronic: http://www.esalq.usp.br
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge marine
Coresponden: Prof. asociat Ana Maria Pires-Vanin, tel. (55) 11-818-6541,
email: secrdob@netuno.io.usp.br
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Coelcia culturilor de microalge acvatice
Coresponden: Prof. Armando a. HeNr.iques Vieira, tel. (55) 16-33066682,
email: ahvieira@ufscar.br
Pagina electronic:Canada
Denumirea instituiei: Colecia Centrului de cercetri n infeciologie
Coresponden: Prof. asociat Maurice Boissinot, tel. (1) 418-555-4444-42705;
email: maurice.boissinot@crchul.ulaval.ca; michel.g.bergeron@crchul.ulaval.ca
Pagina electronic: http://www.cri.ulaval.ca/
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge i alge cianofite a Universitii
din Toronto
Coresponden: Heather Roshon, tel. (1) 519-746-0614, email: hdroshon@uwaterloo.ca
Pagina electronic: http://www.phycol.ca/
Denumirea instituiei: Colecii de culturi ale Pacificului de Nord-Est
Coresponden: Donna Dinh, tel. (1) 604-822-4825, email:cccm@interchange.
ubc.ca
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Universitatea Alberta, Colecia de microfungi i herbarum
Coresponden: Dr. Connie Gibas, tel. (1) 780-987-4811, email: cgibas@ualberta.ca; lynne.sigler@ualberta.ca
Pagina electronic: http://www.uamh.devonian.ualberta.ca/
166
Australia
Denumirea instituiei: Universitatea de culturi microbiene din Queenslandcolecia
Coresponden: Prof. asociat L. I. Sly, tel. (61) 7-377-3694, email: l.sly@
uq.edu.au.
Pagina electronic: http://www.biosci.uq.edu.au/micro
Denumirea instituiei: Laboratorul Naional de referin n micologie medical
a Australiei
Coresponden: K.A. Weeks, tel. (61) 2-99267135, email: RNSPO01.KWeeks@doh.health.nsw.gov.au
Pagina electronic:
Denumirea instituiei: Colecia naional de culturi algale a Australiei
Coresponden:Ian Jameson, tel. (61) 3-62325222; email: ian.jameson@csiro.
au; cathy.johnston@csiro.au
Pagina electronic: http://www.csiro.au/ANACC
Denumirea instituiei: Colecia de culturi algale a Universitii Murdoch.
Coresponden: Prof. asocit Michael A. Borowitzka, tel. (61) 89-332-2333;
email: borowitz@possum.murdoch.edu.au
Pagina electronic: 167
ASIA
China
Denumirea instituiei: Centrul Chinezesc pentru colecii de culturi tipice
Coresponden: Prof. asociat Fang Peng, tel. (86) 27-68752056, email: cctcc@
whu.edu.cn; fangpeng2@yahoo.com.cn
Pagina electronic: http://www.cctcc.org/
Denumirea instituiei: Colecia de biologie marin germiplasm
Coresponden: Xiao-Yan Hu, tel. (86) 532-2879062, email: xyhu@ms.qdio.
ac.cn
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Centrul Naional de colecii de culturi medicale
Coresponden: Prof. asociat Li Fengxiang, tel. (86) 10-67017755
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Colecia culturilor de alge acvatice a Academiei de tiine
a Chinei
Coresponden: Prof. Lirong Song, tel. (86) -2768780806, email: lrsong@ihb.
ac.cn; fachb@ihb.ac.cn
Pagina electronic: http://algae.ihb.ac.cn
India
Denumirea instituiei: Facilitatea naional pentru alge cianofite marine
Coresponden: Prof. Lakshmanan UMA, tel. (91) 431-2407084, email: lumaprabakar@yahoo.com; dharmarpraba@yahoo.com
Pagina electronic: http://www.nfmc.res.in
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de ciuperci i uniti de cercetare a
Universitii din Goa
Coresponden: Dr. Nandkumar Kamat, tel. (91) 0832-6519349, email: nandkamat@gmail.com; nkamat@unigoa.ac.in
Pagina electronic:
Denumirea instituiei: Colecia naional de microorganisme industriale
Coresponden: Prof. asociat D.V. Gokhale, tel. (91) 20-25902670, email: ncim@
ncl.res.in
Pagina electronic: http://www.ncl-india.org/ncim/
Denumirea instituiei: Tehnologii de alimentare i fermentare, Universitatea
Mumbai
Coresponden: Prof. asociat P. R. Kulkarni, tel. (91) 22-4145616, email: prk@
fft.udct.ernet.in
Pagina electronic: 168
Filipine
Denumirea instituiei: Colecia culturilor de alge
Coresponden: Prof. asociat Milagrosa R. Martinez
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Institutul dezvoltrii tehnologiilor industriale
Coresponden: Prof. asociat Claro M. Santiago, tel. (63) 823-8071
Pagina electronic:
Denumirea instituiei: Colecia naional de microorganisme din Filipine
Coresponden: Dr. Rosario G. Monsalud, tel. (63) 49-536-2884, email: pncm@
uplb.edu.ph; rgm_pncm@yahoo.com
Pagina electronic: http://www.laguna.net/biotech/
Sri Lanka
Denumirea instituiei: Universitatea Jaffna Botany
Coresponden: Prof. asociat K. Theivendirarajah, tel. (94) 25283
Pagina electronic: Thailanda
Denumirea instituiei: Departamentul Biologie aplicat, Facultatea de tiine
Coresponden: Prof. asociat Suree Nanasombat, tel. (66) 2-7373000, email: knsuree@kmitl.ac.th
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Ramura Bacteriologie i microbiologie a solului, Departamentul Argicultur
Coresponden: Yenchai Vasuvat.
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Departamentul Microbiologie, Facultatea de tiine
Coresponden: Prof. asociat Tanapat Palaka, tel. (66)2-218 5071, email:
Tanapat.P@chula.ac.th
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Departamentul Biologie, Facultatea de tiine
Coresponden: Sumonthip Bunnag, tel. (66) 241331-34
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Institutul de Cercetri Alimentare i dezvoltare de produse, Universitatea Kasetsart
Coresponden: Chakamas Wongkhalaung, tel. (66) 2-5795552; email: ifrcmw@
nontri.ku.ac.th.
Pagina electronic: 171
172
CULTIVAREA ALGELOR
Monografie
Redactor Ariadna Strungaru
Asisten computerizat Maria Bondari
Bun de tipar 18.12.2015. Formatul 70x100 1/12.
Coli de tipar 14,5. Coli editoriale 15,0.
Comanda 132/15. Tirajul 50 ex.
Centrul Editorial-Poligrafic al USM
str. Al. Mateevici, 60, Chiinu, MD 2009