Sunteți pe pagina 1din 173

Universitatea de Stat din Moldova

Laboratorul de Cercetri tiinifice Algologie

Sergiu Dobrojan, Victor alaru,


Vasile alaru, Victor Melnic, Galina Dobrojan

CULTIVAREA ALGELOR
Monografie

Chiinu, 2016

CZU 633.529.3
C 94

Aprobat de:
Departamentul Biologiei Ecologie,
Consiliul Facultii de Biologie i Pedologie,
Senatul Universitii de Stat din Moldova
Recenzeni: Valeriu Rudic, doctor habilitat, profesor universitar,

academician;

Ludmila Rudi, doctor, confereniar cercettor;

Vera MiScu, doctor, confereniar cercettor

Descrierea CIP a Camerei Naionale a Crii

Cultivarea algelor: Monografie / Sergiu Dobrojan, Victor alaru, Vasile


alaru [et al.]; Univ. de Stat din Moldova, Lab. de Cercet. t. Algologie.
Chiinu: CEP USM, 2016. 173 p.
Bibliogr.: p. 118-128 (169 tit.). 50 ex.
ISBN 978-9975-71-736-6.
633.529.3
C 94
Monografia este elaborat n cadrul Proiectului 14.819.18.02._A

ISBN 978-9975-71-736-6

S. Dobrojan, V. alaru i al.


CEP USM, 2016

CUPRINS
Introducere...................................................................................................................... 6
CAPITOLUL I
CULTIVAREA ALGELOR NECESITATE ACTUAL........................................ 7
1.1. Argumentele privind necesitatea cultivrii algelor.................................................. 7
1.2. Producia mondial de biomas algal................................................................... 10
CAPITOLUL II
CARACTERISTICA GENERAL A PROCESULUI DE CULTIVARE A
ALGELOR.................................................................................................................. 15
CAPITOLUL III
COLECTAREA PROBELOR DE ALGE PENTRU CULTIVARE....................... 17
3.1. Colectarea probelor de alge din ecosistemele acvatice.......................................... 17
3.2. Colectarea algelor bentonice.................................................................................. 19
3.3. Colectarea algelor de perifiton............................................................................... 19
3.4. Colectarea algelor edafice...................................................................................... 19
3.5. Colectarea algelor aerofile..................................................................................... 20
CAPITOLUL IV
OBINEREA CULTURILOR DE ALGE DENSE.................................................. 21
4.1. Obinerea culturilor brute....................................................................................... 21
4.2. Obinerea culturilor monoalgale............................................................................ 22
4.2.1. Metoda dilurii......................................................................................... 22
4.2.2. Metoda microvegetal.............................................................................. 23
4.2.3. Metoda de selectare a culturilor algologice . ........................................... 23
4.2.4. Metoda de inoculare a algelor n interiorul agarului................................ 24
4.2.5. Metoda de separare a algelor prin centrifugare i sedimentare................ 24
4.2.6. Metoda de obinere a monoculturilor din culturi brute dense.................. 25
4.2.7. Selectarea monoculturilor prin intermediul fototaxisului......................... 26
CAPITOLUL V
OBINEREA CULTURILOR ALGALE PURE (AXENICE)............................... 27
5.1. Obinerea culturilor algale pure prin utilizarea antibioticelor................................ 27
5.2. Utilizarea metodelor de filtrare pentru nlturarea bacteriilor din culturile
de microalge........................................................................................................... 33
5.3. Metoda de obinere a culturilor algale pure utiliznd mediile agarizate................ 34
3

5.4. Utilizarea metodelor chimice pentru obinerea culturilor algale axenice.............. 34


5.5. Utilizarea luminii ultraviolete pentru obinerea culturilor algale pure.................. 35
5.6. Aplicarea ultrasunetului pentru nlturarea bacteriilor din culturile algale........... 36
CAPITOLUL VI
CULTURILE ALGALE INTENSIVE...................................................................... 38
CAPITOLUL VII
TEHNOLOGII DE CULTIVARE A MONOCULTURILOR ALGALE................ 40
7.1. Medii nutritive pentru cultivarea algelor............................................................... 41
7.1.1. Macroelementele n nutriia mineral a algelor........................................ 42
Azotul................................................................................................................. 43
Fosforul............................................................................................................... 45
Kaliul.................................................................................................................. 47
Magneziul........................................................................................................... 48
Sulful.................................................................................................................. 48
Calciul................................................................................................................. 49
Sodiul.................................................................................................................. 50
7.1.2. Macroelementele n nutriia mineral a algelor cianofite......................... 51
7.1.3. Macroelementele n nutriia mineral a algelor verzi............................... 55
7.1.4. Macroelementele n nutriia mineral a algelor diatomee, roii,
galben-verzi.............................................................................................. 59
7.2. Microelementele n nutriia mineral a algelor . ................................................... 62
Fierul................................................................................................................... 62
Manganul............................................................................................................ 63
Zincul.................................................................................................................. 64
Cuprul................................................................................................................. 64
Molibdenul.......................................................................................................... 65
Borul................................................................................................................... 66
Cobaltul.............................................................................................................. 67
7.2.1. Microelementele n nutriia mineral a algelor cianofite . ....................... 68
7.2.2. Nutriia mineral cu microelemente a algelor verzi................................. 72
7.2.3. Nutriia mineral cu microelemente pentru cultivarea algelor diatomee,
roii, galben-verzi..................................................................................... 76
7.3. Prepararea mediilor nutritive................................................................................. 78
7.3.1. Prepararea mediilor nutritive lichide........................................................ 78
7.3.2. Prepararea mediilor nutritive solide......................................................... 80
7.4. Sterilizarea mediilor nutritive................................................................................ 80
7.4.1. Sterilizarea mediilor nutritive lichide....................................................... 81
Autoclavarea....................................................................................................... 81
4

Tindalizarea........................................................................................................ 81
Sterilizarea n cuptorul cu microunde................................................................. 82
Sterilizarea cu ajutorul lmpii ultraviolete......................................................... 82
7.4.2. Sterilizarea mediilor nutritive solide........................................................ 83
7.5. Pregtirea inoculului algal..................................................................................... 83
7.6. Condiiile de cultivare a algelor............................................................................. 84
7.6.1. Temperatura.............................................................................................. 85
7.6.2. Iluminarea................................................................................................. 86
CAPITOLUL VIII
METODE DE CULTIVARE A ALGELOR.............................................................. 88
8.1. Caracteristica general a metodelor de cultivare a algelor.................................... 88
Cultivarea periodic............................................................................................ 88
Cultivarea periodic n adncime....................................................................... 88
Cultivarea periodic ndelungat........................................................................ 89
Cultivarea multiciclic........................................................................................ 90
Cultivarea semicontinu..................................................................................... 90
Cultivarea continu............................................................................................. 91
Cultivarea sincronizat....................................................................................... 92
8.2. Cultivarea continu a algei Nostoc flagelliforme pe medii obinute pe baza
deeurilor de la complexele zootehnice................................................................. 92
8.3. Cultivarea periodic a algei Spirulina platensis pe ape reziduale zootehnice....... 96
8.4. Cultivarea periodic a algei Anabaenopsis sp....................................................... 99
8.5. Utilizarea metodei semicontinue la cultivarea algei Anabaenopsis sp................ 102
8.6. Utilizarea metodei de cultivare continu a algei Spirulina platensis pe ape
reziduale zootehnice............................................................................................. 107
CAPITOLUL IX
COLECII DE ALGE...............................................................................................114
9.1. Caracteristica general a coleciilor de alge..........................................................114
9.2. Tehnologii de meninere a algelor n colecii........................................................114
9.2.1. Meninerea pe medii nutritive solide i lichide.......................................114
9.2.2. Meninerea algelor prin crioconservare...................................................116
9.2.3. Meninerea algelor n colecii prin ahidrobioz.......................................117
Bibliografie..................................................................................................................118
Anexa nr.1. Medii nutritive utilizate pentru cultivarea algelor................................... 129
Anexa nr.2. Mediile nutritive optime pentru cultivarea unor specii de alge............... 149
Anexa nr.3. Condiiile optime de temperatur pentru cultivarea algelor.................... 155
Anexa nr.4. Date de contact privind coleciile de alge............................................... 160
5

Introducere

Cultivarea algelor este una dintre cele mai importante direcii actuale ale cercetrilor tiinifice de ordin biologic cu caracter practic. Datorit procesului de cultivare
putem obine biomas algal care este benefic pentru om n vastele sale activiti,
dar i pentru natur, contribuind la meninerea i reglarea echilibrului ecologic.
Datorit proprietilor i capacitilor sale, actualmente algele sunt studiate sub
toate aspectele: populaional, celular, molecular, atomic etc. Algele servesc drept
modele i pentru direcii tinifice ndeprtate de biologie, cum ar fi cele radiaionale,
biochimia, genetica etc. Astfel, pentru realizarea acestor cercetri este necesar ca
algele s fie cultivate i meninute.
Cu toate c aceast direcie tiinific este studiat i abordat n literatura de
specialitate, sunt necesare totui noi viziuni, descrieri i modificri pentru a completa informaiile teoretice, dar i pentru a eficientiza procesul practic de cultivare a
algelor. De aceea, n lucrare sunt selectate i prezentate att rezultatele cercetrilor
tinifice din literatura de specialitate, ct i cele proprii ale autorilor.
Prezenta monografie este elaborat pentru a dezvolta aceast direcie indispensabil progresului societii actuale. Lucrarea este structurat n nou capitole, n
care este caracterizat procesul de cultivare ncepnd cu colectarea probelor, obinerea culturilor algale dense i pure, urmnd caracteristica i aplicarea metodelor
de cultivare, caracteristica condiiilor de cultivare, specificarea necesarului de substane nutritive pentru alge i terminnd cu caracteristica metodelor de meninere a
algelor n colecii.
Autorii sper ca monografia va prezenta interes pentru specialitii n domeniu,
pentru studeni, masteranzi i doctoranzi specializai n biologie i ecologie, dar i
pentru toti cei interesai n a obine noi cunotine teoretico-aplicative n domeniul
cultivrii algelor.

CAPITOLUL I
CULTIVAREA ALGELOR NECESITATE ACTUAL
1.1. Argumentele privind necesitatea cultivrii algelor
Pentru valorificarea i exploatarea pe larg a algelor este necesar creterea major obinut prin cultivarea lor. Cultivarea algelor permite obinerea biomasei
algale care poate fi utilizat n practic. Cultivarea algelor poate fi efectuat
n condiii deschise n cmp i nchise n laborator. Avantajele cultivrii
algelor n condiii de laborator s-au dovedit a fi mai nalte, caracterizate prin
obinerea produselor ecologice fr impuriti, care au fost i sunt importante
pe fonul problemelor de mediu i sntate. Primele ncercri de cultivare a algelor n cultur de laborator au nceput cu mai bine de 130 de ani n urm, n
contextul cercetrilor de fiziologie vegetal.
Cultivarea algelor n condiii de reglare a activitilor vitale este una dintre direciile de perspectiv ale acvaculturii, biotehnologiei, algologiei practice
etc. La ora actual interesul fa de cultivarea n mas a algelor a crescut semnificativ1.
Necesitatea cultivrii algelor este argumentat de avantajele oferite i de
rezultatele foarte bune obinute la aplicarea biomasei algale n vaste domenii.
n ultimii ani un succes nalt i se atribuie industrializrii fotosintezei bazate
pe utilizarea algelor microscopice, capabile s asimileze carbonul din atmosfer i s elimine oxigen2.. Acest aspect prezint un solid argument n vederea
utilizrii algelor n ameliorarea procesului de nclzire global a Terrei.
Cultivarea algelor este argumentat i de faptul c algele fac parte din primul lan trofic al ecosistemelor acvatice i terestre, constituind materia organic primar din componentele anorganice ale mediului. Astfel, acest lucru sporete interesul pentru aplicarea practic a algelor, pentru sporirea produciei i
asigurarea echilibrului ecosistemelor.
Algele prezint surs important de hran a animelelor i omului. Algele
utilizate n practica de consum sunt colectate din natur i prin cultivare n condiii de laborator. Algele colectate din natur sunt mai puin sigure, deoarece n
biomasa algal se ntlnesc multe organisme (cum ar fi bacterii i nevertebrate)
care sunt greu de nlturat i uneori prezint pericol pentru oameni i animale n
rezultatul consumului. Cultivarea n condiii de laborator este mai costisitoare,
ns prezint siguran sporit, deoarece culturile cultivate sunt mai inti izolate i lipsite de alte organisme.
1
.., .., .., .. . : , 1999. 264 .
2
.. : . // , 1985, .92-95.

n ultima perioad sunt cultivate pe larg n cantiti mari algele roii, brune,
verzi i albastre-verzi. Conform criteriului cantitativ, biomas algal constituie
circa 20% din producia mondial a acvaculturii. Dintre cele mai importante
alge cultivate pentru utilizarea biomasei n alimentaie se menioneaz 81 specii de alge roii, 54 specii de alge brune, 25 specii de alge verzi, 8 specii de alge
albastre -verzi3,4.
Un alt argument care stimulez cultivarea industrial a algelor este coninutul biochimic al biomasei lor. n cele din urm, vom caracteriza coninutul
biochimic al ncrengturilor de alge cultivate industrial.
Algele roii au n componena biomasei glucide (pn la 70%), proteine
(20-40%), lipide (pn la 3%), cenu i alte substane (20%). Algele brune
au i ele un coninut major de glucide (pn la 70%), proteine (5-20%), lipide
(1-3%), cenu i alte substane (25-35%). Algele cianofite au n componena
biomasei glucide (pn la 60%), proteine (pn la 78%), n special ficobiliproteine, fieroritrin i ficocianin, lipide (2-12%). Algele verzi conin mai puine
glucide (30-40%), substane azotoase (40-45%), lipide (1-10%) i alte substane (10-20%)5.
Coninutul biochimic prezentat mai sus poate fi privit ca un aspect orientativ,
deoarece componena biochimic a biomasei algelor se poate modifica, ntr-o
oarecare msur, n funcie de specie, condiiile de cultivare, starea fiziologic
a celulelor, vrsta tulpinii etc.
Cultivarea algelor este argumentat i de utilizarea lor pe larg n scopuri medicale. Utilizarea algelor n scopul tratrii diferitelor boli era practicat n Orient
nc cu o mie de ani naintea erei noastre. La ora actual s-a descoperit c algele conin cele mai variate substane care influeneaz asupra activitii inimii,
stomacului, intestinului, glandelor endocrine, sistemului nervos i endocrin etc.
S-a demonstrat c algele au proprieti antisclerotice, mbuntesc procesele de
hematopoiez, sunt antioxidante, rein procesul de mbtrnire a organismului,
contribuie la eliminarea toxinelor din organism, la suplinirea organismului cu
substane biologic active i conin multe micro- i macroelemente necesare derulrii normale a activitii organismului uman. Unele alge sunt utilizate pentru
obinerea textilelor, hrtiei, vopselei, fiind cultivate n cantiti mari6.
Abbott I.A., Cheney D.P. Comercial uses of algal products: introduction und bibliography.
// Selected papers in phycology, vol. 2, 1982, p.779 -787.
4
Algal Biotehnology. Progres in biotehnology of photoautotrophic microorganism. // 6 Intern.
Conf. on applied algology, 1993. 84 p.
5
.. . : , 1972. 336 .
6
.., .. . ,
, . ; -: -, 1997.
155 .
3

Cultivarea algelor este stimulat i de utilizarea lor pe larg n agricultur. Algele sunt utilizate ca surs alimentar pentru animale, ca biostimulator al creterii plantelor de cultur, iar utilizarea lor n acest scop sporete pe an ce trece.
Algele sunt utilizare ca hran verde pentru animale n multe ri ale lumii (Islanda, Scoia, Danemarca, Noua Zeeland, SUA etc.), precum i ca supliment
n raia alimentar. Biomasa algal poate fi administrat animalelor n stare vie,
uscat, n form de fin i granulat. Din biomasa algelor se obin suplimente
nutritive pentru diverse animale care sunt destul de bogate n proteine, glucide,
lipide, peptide, vitamine, macro- i microelemente, aminoacizi etc.7
Algele sunt utilizate n scopul proteciei mediului, constituind surse de legturi chimice diverse care se elimin n mediu, n acelai timp i de substane
biologic active. Algele particip la formarea hidrobiocenozelor, influeneaz
proprietile organoleptice ale apelor, calitatea apelor de suprafa. mbogesc apele cu oxigen, epureaz apele poluate cu elemente biogene, metale grele, radionuclizi, contribuind la epurarea n general a tuturor componentelor
mediului.
Cultivarea algelor este argumentat i de necesitatea aplicrii algelor pentru sporirea fertilitii solului. n lipsa substanelor organice, algele cianofite
azotfixatoare contribuie la formarea fertilitii, creeaz asociaii cu bacteriile i
contribuie la fixarea azotului atmosferic i la acumularea substanelor organice,
la mbuntirea structurii solului, sporindu-i umiditatea, capacitatea lui antierozional. Contribuia algelor n acumularea substanelor organice este semnificativ; s-a demonstrat c n pustiurile din SUA algele contribuie la acumularea
a 300 kg/ha de substan organic. Substana organic acumulat de alge este
uor asimilat de plantele superioare i alte organisme ale biocenozelor. Viteza
de mobilizare a azotului i a carbonului din biomasa algelor determin tipul
de sol i regimul lui hidrotermic. Algele servesc ca factor de acumulare suplimentar a energiei solare n biomas; n afar de aceasta, din contul algelor se
mrete perioada vegetativ a fitocenozelor, ele contribuie la ameliorarea celor
mai poluate soluri cu pesticide, metale grele, petrol etc.
Un argument important pentru cultivarea masiv a algelor este i utilizarea
lor n calitate de biofertilizani. Algele cianofite azotfixatoare sunt cele mai
atractive specii utilizate ca biofertilizani. Aceste alge contribuie la acumularea
azotului n sol (din contul fixrii din atmosfer) accesibil plantelor i echilibreaz coninutul lui, iar dezvoltarea masiv a biomasei algelor azotfixatoare
nu cauzeaz poluarea biologic a solului cu azot atmosferic fixat, deoarece
procesul de fixare biologic a azotului la alge este autoreglabil. Aportul algelor
n economisirea azotului n sol este de 1044,22 mii t pe an. Algele cianofite
7
.., .. . ,
, . ; -: -, 1997.
155 .

pot fixa n solurile regiunilor cu clim moderat circa 20-557 kg/ha de azot (n
masa uscat), n solurile utilizate la cultivarea orezului 15-90 kg/ha anual. Biomasa algelor include o mare parte a cabonului, iar n rezultatul descompunerii
biomasei acesta se elibereaz n sol i contribuie la formarea aciziilor humici i
fulvici. Azotul celular (care constituie 40-60% din azotul fixat) la descompunerea biomasei algale este accesibil bacteriilor, ciupercilor, algelor nefixatoare de
azot i muchilor. Experimental s-a demonstrat c algele pot asigura 4,3-15%
din necesarul de azot din sol al plantelor superioare.
Algele sunt cultivate i pentru utilizarea biomasei algale n scop energetic.
Algele utilizeaz eficient energia solar, conservnd-o n biomas. n comparaie cu energia atomic, algele sunt surse de energie absolut sigure; utilizarea
lor nu contribuie la dereglarea echilibrului ecologic i nu genereaz poluarea
radioactiv sau termic a mediului. Din cantitatea total a energiei solare, ce
atinge anual suprafaa solului, plantele utilizeaz n medie 0,1%. Aceast cantitate este de cteva ori mai nalt dect necesarul global de energie. De aceea
se utilizeaz biogazul ca surs de energie din biomasa algelor pe calea abioconversiei. Algele permit sporirea cu 3-5% a eficacitii conversiei energiei solare. Astfel, algele pot servi ca reactor solar eficient. Pentru obinerea energiei
din biomasa algelor, n SUA, Japonia se practic pe larg cultivarea lor pe ape
reziduale. Se consider c 50-60 t de biomas uscat de alge pot genera 74 mii
kw/or de electricitate. Energia obinut n rezultatul fotosintezei algelor este
mai rentabil de convertit n gaz i se consider a fi concurent pe plan global
cu energia nuclear, cu toate c n toate cercetrile se evideniaz c algele sunt
mai avantajoase economic8. Astfel, cultivarea algelor pe ape reziduale permite
soluionarea mai multor probleme, cum ar fi: epurarea apelor, protecia mediului contra polurii, obinerea surselor suplimentare de energie i fertilizani,
economisirea i regenerarea resurselor naturale.

1.2. Producia mondial de biomas algal


Cultivarea industrial a algelor a cptat o larg rspndire n ntreaga lume.
Conform unor estimri, din cele 50.000 de specii de microalge, circa 10 sunt
cultivate industrial n scopul obinerii unor produse comercializabile (Spirulina, Crypthecodinium cohnii, Chlorella, Dunaliella salina, Ulkenia sp., Haematococcus pluvialis, Schizochytrium, Aphanizomenon flos-aquae, Euglena i
Odontella aurita). Din cele 10 specii cultivate industrial cel mai mare aport au
speciile Chlorella, Spirulina i Cryptecodinium.

.., .., .. . : . : , 1989. 605 .


8

10

Tabelul 1
Producia global a biomasei microalgelor i aplicarea lor
Taxon

Produsul

Aplicarea

Producia
estimat,
t/an

Chlorella vulgaris

Extract din
biomas

Produs alimentar,
sntate, supliment
alimentar, cosmetic

2000

Spirulina platensis

Biomas,
ficocianin,
extract

Produs alimentar,
sntate, alimente
funcionale

3000

Dunaliella salina

Carotenoizi,
-caroten

Produs alimentar,
sntate, supliment
alimentar, cosmetic

1200

Nostoc fusiforme

Biomas

Produs alimentar,
sntate

600

Aphanizomenon flos- Biomas


aquae

Produs alimentar,
sntate

500

Haematococcus
pluvialis

Carotenoid
astaxantin

Farmacie, produs
alimentar aditiv,
acvacultur

50

Odontella aurita

Biomas

Cosmetic, alimentaie

20

Producia mondial de biomas algal doar a unor specii analizate este de


7370 t pe an. Biomasa algei Spirulina platensis este estimat la cele mai mari
cantiti (3000 t/an), deoarece ea nu este toxic, fiind eficient sntii umane i
animale, iar cele mai mici cantiti de biomas algal nu depesc 20 t pe an (la
cultivarea speciei Odontella aurita).
Potrivit altor surse, producia mondial de biomas algal uscat este n prezent de aproximativ 7000 t pe an9.
Actualmente se consider c productorii mondiali de biomas algal cultiv
variate specii, n funcie de scop i produsul obinut (Tab. 2).

http://www.algaemax.eu/more-in-detail.html

11

Productorii mondiali de biomas algal10


ara
SUA

Compania
Martek

Algele cultivate
Crypthecodinium

SUA
Gates Foundation
Kappaphycus
SUA
R&D
Lobophora
Canada
Oceannutrition
Chlorella
Germania
Astaxa
Nannochloropsis sp.
Tetraselmis sp.,
Phaeodactylum
tricornutum,
Arthrospira
(Spirulina) platensis,
Chlorella vulgaris,
Scenedesmus sp.,
Haematococcus
pluvialis,
Porphyridium
cruentum,
Germania
Nutrinova
Uklaria
Frana
Austria
Marea
Britanie

Tabelul 2

Produsul obinut
Acid
docosahexaenoicomega 3
Caragenan
Macrolide
Extract de glucide
Omega 3

Dior
Panmol/Madaus
BSV

Odontella
Spirulia
Rhodophyta

Acid
docosahexaenoicomega 3
EPA
Vitamina B12
Biomas

Danisco

Ulva lactuca

Hexoz oxidaz

Astfel, dup cum observm, cei mai muli productori de biomas algal sunt
n SUA i n Germania, iar biomasa algal este utilizat n scopuri farmaceutice
i alimentare.
Jumtate din biomasa mondial a algelor este utilizat ca aliment, iar cea de a
doua jumtate servete drept surs pentru obinerea extractelor. Cele mai importante extracte obinute din biomasa algelor sunt: carotenoizii, ficobiliproteinele
i antioxidanii.
10
Egardt J., Lie ., Aulie J., Myhre P. Microalgae a market analysis carried out as part of
the Interreg KASK IVA project: Blue Biotechnology for Sustainable Innovations, Blue Bio.
Sweden, 2013. 79 p.

12

Valoarea economic a biomasei algale, estimat n anul 2010, era de 600 milioane de euro. Principala utilizare pe pia a biomasei algelor este: n scopuri
umane (74%), ca hran a animalelor (25%) i n calitate de produse cosmetice i
n scopuri de cercetare.
Conform altor autori, biomasa global a algelor cultivate se estimez la aproximativ 3,5-5 miliarde de euro. Din acestea, sectorarelor alimentar i sntate
li se atribuie 1,5 miliarde de euro, iar cercetrii i acvaculturii 0,5 miliarde de
euro11.
Actualmente sunt estimate calcule pentru obinerea a 1 kg de biomas algal
utilizat n diferite scopuri. Informaia respectiv este prezentat n Tabelul 3.
Tabelul 3
Costul estimat al biomasei algale n funcie de scopul utilizrii11
Scopul utilizrii

Produsul

Costul estimat, dolari/kg

Biomas

Produs alimentar pentru


sntate

10-80

Aliment funcional

25-52

Aliment aditiv

10-130

Acvacultur

50-150

Fertilizant pentru sol

>10

Pigment

Astaxantin

2500-8000

Antioxidant

-caroten

>750

Superoxid dismutaz

>1000

Tocoferol

30-40

Acizi grai saturai extract

30-80

Astfel, putem constata c cele mai costisitoare produse obinute din biomasa
algelor sunt pigmenii estimai la 2500-8000 dolari pentru 1 kg, iar cea mai ieftin este biomasa algal utilizat n calitate de biofertilizant (ce nu depete 10
dolari/kg).
Pe plan mondial aproximativ 75,2% din toi productorii de biomas algal
sunt din domeniu public sau privat i abia 18,6% sunt din sfera instituiilor de
cercetare i inovare.
11

http://www.algaemax.eu/more-in-detail.html

13

Algele macrofite au i ele o importan economic destul de mare. Actualmente se estimez c valoarea economic global a biomasei algelor macrofite este
de 5,5-6 miliarde de euro.
O direcie strategic a cultivrii algelor, care n ultima perioad a cptat
rspndire mondial, este bazat pe obinerea biodiselului din biomasa algal.
Biomasa algal prezint surs important de obinere a petrolului, cu caracteristici care depesc multe plante oleagenoase (Tab. 4).
Tabelul 4
Producia medie de petrol a unor plante oleaginoase i a algelor12
Sursa de ulei

Randament (L.m2/yr-1)

Alge

4,7-17

Palmier

0,54

Jatropha

0,19

Rapi

0,12

Floareasoarelui

0,09

Soia

0,04

Rezultatele prezentate atest c algele sunt cultivate pe plan mondial n cantiti majore datorit utilizri biomasei algale n vaste domenii, valorificrii biomasei i comercializrii acesteia.

12
Schenk P.M., Thomas-Hall S., Stephens E., Marx U.C., Mussgnug J.H., Posten C., Kruse O.,
Hankamer B. Second Generation Biofuels: High-Efficiency Microalgae for Biodiesel Production.
BioEnergy Research, 2008, 1(1), p.20-43.

14

CAPITOLUL II
CARACTERISTICA GENERAL A PROCESULUI
DE CULTIVARE A ALGELOR
Dup cum am menionat, cultivarea algelor n condiii de laborator prezint
un interes tiinific major. Pentru efectuarea experimentelor de laborator privind
obinerea biomasei algale se utilizeaz culturile de alge. Cultivarea algelor n
condiii de laborator include un complex mare de operaii, care depind de scopul
i sarcinile cercetrilor, de caracteristicile specifice i biologice ale algelor etc.
Tehnica de cultivare a algelor este un proces destul de complicat. Tehnica de cultivare a fiecrei specii de alge este puin diferit, dar, totui, n mare parte trebuie
realizate aceleai etape de baz. Etapele cultivrii algelor sunt variate, ns n linii
mari trebuie realizate ase etape de baz13 (Fig. 1).

Fig.1. Etapele generale ale cultivrii algelor.


.., .., .. . - . : , 1975. 241 c.
13

15

Primul i cel mai important pas este colectarea probelor de alge din natur
n locurile unde se dezvolt masiv (etapa 1), transportarea lor n laborator i
meninerea culturilor de alge dense pe mediile nutritive de unde au fost colectate
sau pe medii nutritive artificiale (etapa 2), dup care urmeaz o procedur mai
dificil de obinere a culturilor de alge curate pe baza utilizrii mediilor nutritive
artificiale solide, uneori i lichide (etapa 3). Cea mai mare dificultate n cultivarea algelor este obinerea n cultur a unei specii. Culturile algale ce conin o
singur specie trebuie lipsite de bacterii i alte microorganisme prin aplicarea
tehnicilor specifice (etapa 4). Dup realizarea cu succes a celor 4 etape urmeaz cultivarea algelor n condiii dirijate sub influena diferiilor factori pentru
determinarea condiiilor optime de cretere a biomasei algale (etapa 5). Un lucru important este i meninerea algelor n colecii, pentru asigurarea viabilitii
culturii n scopul ntreinerii ndelungate a algelor pentru viitoarele necesiti de
cultivare.
Etapele cultivrii algelor trebuie realizate consecutiv, una dup alt, pentru
obinerea culturilor algologice pure. Odat obinute, culturile algologice pure
trebuie meninute i cultivate dup procedee pe care le vom descrie n continuare. De menionat c fiecare etap de cultivare a algelor, indicat n Figura 1,
se realizeaz dup metode i procedee specifice, iar pentru obinerea biomasei
algale trebuie respectate cu strictee condiiile de cultivare. Astfel, pentru cultivarea eficient a algelor i obinerea biomasei algale vom descrie detaliat fiecare
etap n parte.

16

CAPITOLUL III
COLECTAREA PROBELOR DE ALGE PENTRU CULTIVARE
Una dintre cele mai importante etape este colectarea coret a probelor de alge
care asigur realizarea uoar a celorlalte etape generale ale cultivrii.
Colectarea probelor de alge din natur trebuie efectuat n perioada activ a
vegetaiei speciei. Pentru colectare trebuie selectate acele habitate unde specia de
alg se dezvolt n cantiti maximale i se afl ntr-o stare activ de via.14 Pentru realizarea colectrii probelor de alge avem nevoie de unele unelte specifice,
vase de depozitare a culturii i de aparate pentru determinarea caracteristicilor
fizice, fizicochimice i chimice ale locului de colectare.

3.1. Colectarea probelor de alge din ecosistemele acvatice


Colectarea probelor de alge din ecosistemele acvatice se realizeaz diferit n
funcie de habitatul speciei colectate. Din ecosistemele acvatice pot fi colectate
specii de fitoplancton fitobentos i perifiton.
n apele dulci din Europa se ntlnesc mai des urmtoarele ncrengturi:
Bacillariophyta alge diatomee (circa 15000 specii);
Chlorophyta alge verzi (circa 5700 specii);
Cyanophyta alge albastre-verzi (circa 1400 specii);
Euglenophyta alge euglenofite;
Chrysophyta alge crizofite;
circa 2000 specii
Cryptophyta alge criptofite15.
Colectarea probelor de alge din lacurile i rurile mari se realizeaz din stratul
unde se produce fotosinteza. n cazul n care transparena apei n locul de colectare este de 1 m, proba se va preleva de la adncimea de maximum 0,5 m. Probele
colectate se vor introduce n vas i se va aduga 1 l de ap din locul dat.
Pentru colectarea cantitativ a fitoplanctonului se utilizeaz plasa sau batometrul. Plasa pentru colectarea planctonului este pe larg aplicat n practic (mai
frecvent se utilizeaz plasa Gedi). Plasa este constituit dintr-un inel metalic de
care se unete un sac n form conic din pnz special sau sit confecionat din
nailon sau mtase. n regiunea de sus i cea de jos ale sacului se pune o pnz mai
puternic (de dorit s fie din ln). n partea de jos a plasei se gsete un phru,
unde se depoziteaz sedimentul fitoplanctonului la filtrarea prin plas. Pentru
plasa de colectare a fitoplanctonului se utilizeaz un strat de mtase gros (L 68 i
mai mare), rezistent, cu dimensiunea egal a gurilor sale. Aceast plas permite
colectarea pe vertical a probelor de alge pentru cultivare.
.., .., ..
: . : - , 2008. 152 .
15
.. , . : , 2008. 128 .
14

17

Fig.2. Plas de colectare a fitoplanctonului.

Aceast procedur de colectare este bazat pe filtrarea volumelor mari de ap


i permite captarea speciilor de alge ce se dezvolt masiv i nu numai, care habiteaz n apele lacurilor, mrilor, oceanelor.
Pentru colectarea fitoplanctonului mai poate fi utilizat i barometrul (Fig. 3) de
diferit tip. Se consider c este mai eficient s se utilizeze barometrul din sticl
chimic neutr sau din plastic cu volum de 1-5 l. Pentru colectarea fitoplanctonului marin poate fi utilizat barometrul de 5 l. Batometrul se fixeaz de un lan de
metal care se scufund la adncimea necesar.

Fig.3. Batometru de colectare a probelor de suprafa.


18

Colectarea algelor bentonice se realizat prin prelevarea nmolului de fund i a


sedimentului de pe el. Colectarea din sursele de ap de mic adncime (pn la 0,5-1,0 m) se
Colectarea
algelor
realizeaz prin scufundarea 3.2.
sifonului
cu un furtun
de bentonice
cauciuc i un capilar de sticl la capt.
Colectarea
algelor bentonice
mai poate
fi realizat
ajutorul nmolului
gleii saude
paharului,
Colectarea
algelor bentonice
se realizat
princu
prelevarea
fund i care este
16
de cu
pe ajutorul
el. Colectarea
din sursele
de mica adncime
ataat adesedimentului
un baston, sau
diferitelor
aparatededeap
colectare
nmolului.(pn la
0,5-1,0 m) se realizeaz prin scufundarea sifonului cu un furtun de cauciuc i un
capilar
sticl la capt.
algelor
bentonice imai
poate finumit
realizat
cu
Pentrude
colectarea
algelorColectarea
de fitobentos
se utilizeaz
aparatul
microbentometru,
ajutorul
gleii
sau
paharului,
care
este
ataat
de
un
baston,
sau
cu
ajutorul
diferiredat n Figura. 4, care se utilizeaz i pentru16 colectarea probelor de fitobentos supuse analizelor
telor aparate de colectare a nmolului.
calitative.17
Pentru colectarea algelor de fitobentos se utilizeaz i aparatul numit microbentometru, redat n Figura 4, care se utilizeaz i pentru colectarea probelor de
fitobentos supuse analizelor calitative.17

Fig.4.
Aparat de
a fitobentosului
(Microbentometru
C-1). C-1)
Fig.
4. Aparat
decolectare
colectare
a fitobentosului
(Microbentometru

3.3. Colectarea algelor de perifiton


3.3. Colectarea algelor de perifiton

Algele de perifiton se coelcteaz cu ajutorul uni cuit obinuit sau cu raclete


speciale,
care suntsesterilizate
preventiv.
Esteuni
important
ca algele
s
Algele de perifiton
coelcteaz
cu ajutorul
cuit obinuit
saude
cuperifiton
raclete speciale,
care
fie colectate npreun cu substratul, deoarece ele sunt strns fixate. Dup care
sunt sperilizate preventiv. Este important ca algele de perifiton s fie colectate npreun cu
se nltur substratul, iar algele prezente se introduc n vasul de colectare. Dup
substratul,
deoarecealgelor
ele sunt
fixate.
Dup
care se puin
nltur
substratul,
iar algele
introducerea
destrns
perifiton
n vas
se adaug
ap
din ecosistemul
ac-prezente se
introduc
n de
vasul
de se
colectare.
Dup
introducerea algelor de perifiton n vas se adaug puin ap
vatic
unde
colecteaz
probele.
din ecosistemul acvatic de unde se colecteaz probele.13

3.4. Colectarea algelor edafice

Colectarea probelor de
alge
edafice poate
fi efectuat
conform metodelor de
3.4.
Colectarea
algelor
edafice
colectare a probelor de alge supuse analizelor taxonomice sau a unor procedee
mai simplificate.
colectarea
se recomand
fie luat corect
Colectarea
probelorPentru
de alge
edaficealgelor
poate de
fi sol
efectuat
conforms metodelor
de colectare a
proba medie, pungile i instrumentele de colectare s fie sterile, probele s fie etiprobelor
de alge
supuse probelor
analizelordetaxonomice
sau
a unor procedee
Pentru
chetate.
Colectarea
alge de sol se
realizeaz,
de regul,mai
de lasimplificate.
adncicolectarea
algelor
se recomand
s fiealgelor
luat corect
proba
medie,depungile
i instrumentele
mea de
0-10 de
cm,sol
deoarece
majoritatea
habiteaz
n stratul
la suprafaa
solului. s
Uneori
poate fiprobele
colectatsproba
i din orizonturile
de adncime.
de colectare
fie sterile,
fie etichetate.
Colectarea
probelor n
de cazul
alge de sol se
n
care
pe
sol
se
dezvolt
masiv
algele
i
formeaz
o
pelicul,
se
recomand
realizeaz, de regul, de la adncimea de 0-10 cm, deoarece majoritatea algelor ca
habiteaz n
algele s fie colectate cu un strat subire de sol de pe un teritoriu cu dimensiuni
stratul de la suprafaa solului. Uneori poate fi colectat proba i din orizonturile
de adncime. n
care pot fi diferite n funcie de densitatea algelor: de la 10 la 100 cm2.
cazul n care pe sol se dezvolt masiv algele i formeaz o pelicul, se recomand algele s fie
16
..subire

.
.
colectate cu
un strat
de sol
de pe un :
teritoriu cu
dimensiuni
care:
pot fi diferite n funcie
, 2008. 199 c.
2
17
de densitatea
algelor: ..
de la
10 la 100
cm . : . :

, 2005. 128 .

Probele se colecteaz cu un cuit steril, fra sau hrle. n condiii de cmp sterilizarea
instrumentelor poate fi efectuat cu ajutorul19alcoolului etilic sau cu nfibgerea de multe ori a

16 .. . : . . : , 2008. 199
c.

Probele se colecteaz cu un cuit steril, fra sau hrle. n condiii de cmp


sterilizarea instrumentelor poate fi efectuat cu ajutorul alcoolului etilic sau cu
nfibgerea de multe ori a cuitului n solul de unde se colecteaz probele de alge.
Probele de alge i solul pot fi colectate n plicuri din hrtie dens sterile.18

3.5. Colectarea algelor aerofile


Colectarea poate fi efectuat de pe copaci, pereii cldirilor etc., cu ajutorul
unui cuit steril (mpreun cu substratul) ntr-un pachet de hrtie sau ntr-un vas
de sticl sterilizat preventiv.

18

80 .

o .. . : -. , 1990.

20

CAPITOLUL IV
OBINEREA CULTURILOR DE ALGE DENSE
Dup cum menionez d. prof. I.Cruu, dup colectarea probelor de alge
din natur urmeaz etape de lucru n ce privete realizarea culturilor de laborator,
care sunt:
culturi brute - dense;
culturi monoalgale;
culturi pure (,,axenice), lipsite de bacterii, ciuperci sau protozoare;
culturi intensive.

4.1. Obinerea culturilor brute


Culturile brute reprezinta prima etap de cultivare a algelor n laborator; n
esen, ele sunt reprezentate de probe (fragmente) preluate dintr-o biocenoz
natural i transferate n condiii de laborator. Aici, proba respectiv poate fi
divizat n mai multe pri, la fiecare fiind apoi adugate anumite substane
nutritive sau chiar medii complete, n funcie de specificul biocenozei iniiale
i de scopurile urmrite. Se recomand ca o poriune din proba iniial s fie
fixat, urmnd a oferi informaii referitoare la compoziia iniial a comunitilor de alge. Ulterior, aceste culturi brute, care, de regul, conin mai multe
specii (dar nu toate speciile existente iniial n algocenoza respectiv), servesc
drept surs pentru izolarea unor specii de alge ce urmeaz s devin culturi
monoalgale.19
La aceast etap pot fi realizai paii ilustrai n Figura 1, ce reprezint doar o
parte a schemei propuse de Guillard i Morton.20

Fig.5. Schema obinerii culturilor brute de alge.


19
Cru I. Cultura algelor pentru biomas i principii active: Note de curs, lucrri de
laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
20
Guillard R.R.L., and Morton S.L. Culture methods. // Hallegraeff G.M., Anderson D.M., and
Cembella A.D., eds. Manual on Harmful Marine Microalgae. UNESCO, Paris, 2003, p.7797.

21

4.2. Obinerea culturilor monoalgale


Probele care conin o singur specie de alge reprezint o etap important n
obinerea culturilor de laborator. Ele constituie rezultatul separrii dintr-o ,,policultura a unei singure specii de alge. Pentru obinerea culturilor algologice curate, trebuie s cunoatem informaia despre ciclul lor de via, despre structura
i reproducerea celulelor.
Pentru multe direcii de investigare, utilizarea culturilor monoalgale nu poate
asigura nivelul de precizie i rigurozitate tiinific necesar. Astfel, n majoritatea
proceselor care pot constitui obiectul studiului experimental (fotosinteza, nutriia
mineral, eliberarea unor substane ectocrine, rata de nmulire, productivitatea
culturii etc.), prezen n mediul nutritiv a altor organisme (precum bacteriile,
micromicetele sau chiar unele protozoare) poate determina interferene majore
i, n final, alterarea semnificativ a datelor obinute.
Pe de alt parte, prin consumul complementar de nutrieni, prin eliminarea
substanelor metabolice, organismele asociate algelor pot determina modificarea
condiiilor de nutriie i de via ale algei respective i, n final, scurtarea duratei
de existen/folosire a culturii.
n general, se poate considera c n condiiile cultivrii la scar mare a algelor,
sub cerul liber, n scopul obinerii de biomas, culturile de alge pot fi monospecifice, dar nu sunt, de regul, axenice.
n literatura de specialitate sunt cunoscute mai multe procedee de divizare a
algelor n monocultur. n cele din urm vom meniona cteva metode bazate pe
utilizarea mediilor nutritive agarizate i lichide.
Utilizarea agarului solid este frecvent aplicat n practica de obinere a monoculturilor algale. Concentraia agarului variaz de la o metod la alta, ns
n linii mari ea se situeaz n limitele 0,8-2%, unele alge pot crete pe agar cu
concentraii de 0,3-0,6%. Mediile agarizate permit apariia i dezvoltarea masiv
a ciupercilor, care ns pot fi nlturate prin filtrarea inoculului i a substanelor
organice. Dac se observ creterea masiv a ciupercilor, atunci aceste vase nu
trebuie deschise, ci aruncate. Mediile agarizate permit obinerea monoculturilor
algale peste o perioad de cteva zile pn la o lun (n cazul algelor marine).21

4.2.1. Metoda dilurii


nainte de a ncepe lucrul, algele trebuie incluse pe medii nutritive sterile sau
n ap distilat. Prima etap const n determinarea densitii suspensiei, a numrului de celule la 1 ml. Numrarea celulelor este comod de a fi efectuat n
camera Goreaev. Dup care, la necesitate, se efectueaz o serie de diluii (fiecare diluie urmeaz s fie efectuat de 10 ori) pn cnd n 0,1 ml din ultima
soluie diluat se vor conine 100 celule de alge. Aceast densitate a inoculului
.., .., .. C
: . : - , 2008. 152 .
21

22

garanteaz la inocularea pe medii agarizate apariia coloniilor din fiecare specie.


Diluarea se efectueaz cu pipete sterile n cilindre cu ap distilat steril, pe calea transmiterii suspensiei dintr-un cilindru n altul. Inoculul cu volumul de 0,1
ml se introduce n vasul Petri (cu mediul agarizat solid) cu ajutorul spechelului
steril uniform la suprafaa agarului. Dup care cecua se nchide i se expune la
lumin la cultivator sau la fereastra de nord. Peste ceva timp (de regul, peste 2-3
sptmni) la suprafaa agarului se formeaz puncte colonii de alge. Transparena discului de agar permite algelor din vasele nchise s ptrund n interiorul
agarului pn la fund. Cu ajutorul obiectivului cu mrimea de 2x i cu ocularul de
8x pot fi vizualizate coloniile crescute. Dintre acestea pot fi selectate colonii de
diferite forme dimensionale i, dup posibiliti, alge care sunt lipsite de ciuperci
i bacterii. Coloniile selectate se inoculeaz n vasul Petri (steril ce conine agar)
cu ajutorul buclei linii inoculate. Liniile ce vor crete vor prezenta monoculturi
ale diferitelor alge. Ele vor fi din nou expuse pe medii nutritive agarizate pn se
va obine o monocultur. Aceast metod este eficace pentru algele microscopice
unicelulare. Algele macroscopice i cele coloniale de multe ori se pierd n procesul de diluare i este greu de obinut inocul.22 Astfel, obinerea acestor alge n
monocultur este o procedur ndelungat i grea, dar posibil de realizat.

4.2.2. Metoda microvegetal


O alt metod eficace este metoda algologic microvegetal elaborat de ..
23, care propune utilizarea filtrelor membranare (Nr.4 i Nr.5) ce se
utilizeaz pentru selectarea algelor din cele crescute pe filtru, colonii sau celule
separate. Metoda const n folosirea filtrelor membranare sterile care se expun n
vasul Petri cu mediu agarizat cldu. O pictur de suspensie de alge (de dorit s
fie puine celule) se introduce cu pipeta pe filtru. Peste 2-3 sptmni algele cresc
pe suprafaa filtrului n form de colonii. Filtrul se vizualizeaz la microscop i
se selecteaz coloniile. Din ele, cu ajutorul ansei sau bisturiului, se ia o cantitate
mic de alge i se inoculeaz pe mediul nutritiv proaspt pregtit. Se recomand
ca dup extragerea filtrului de pe mediul agarizat acesta s fie expus pe o sticl
dezinfectat i s se lase puin la uscat la temperatura camerei. Dup finisarea
lucrului filtrul se introduce din nou n cecua Petri pe mediul agarizat, deoarece
n caz c nu s-a reuit obinerea monoculturii s existe rezerv de colonii algale
selectate.

4.2.3. Metoda de selectare a culturilor algologice


Att prima, ct i a doua metod de selectare a culturilor sunt destul de
complicate i n multe cazuri capricioase. De aceea, .. i ..
22
.. (Chlorophyta:
Tetrasporales, Chlorococcales, Chlorosarcinales). : , 1998. 351 .
23
.. -
// O , 1977, . 38, 1, c.41-47.

23

24 au elaborat o metod mai simpl i accesibil de obinere a monoculturilor, pentru selectarea celulelor i coloniilor algale de orice dimensiune. Potrivit acestei metode, n vasul Petri se introduce mediul nutritiv agarizat (1,6-1,8%
agar), la suprafaa mediului solid se introduce 0,2-0,3 ml de ap distilat sterilizat
(n funcie de mrimea cetii Petri) ce se distribuie cu ajutorul spatulei sterile.
Trebuie ca n 1,5-2 zile apa s se mbibe n mediu nutritiv. Dup administrarea apei n vasele Petri se adaug o cantitate redus de suspensie algal, ceaca
se nchide i se expune la lumin. Peste ceva timp (de regul, 2-3 sptmni)
la suprafaa agarului ncep s apar colonii de alge. Printre ele, de regul la
marginile vasului, pot fi gsite colonii cu o singur specie. Dac vom analiza
n interval variat diferite colonii, care se deosebesc i dup culoare, pe care le
inoculm pe mediu nutritiv proaspt, atunci putem obine monoculturi aproape
la toate speciile de alge prezente n mediul agarizat.
Dup cum se cunoate, n culturile acumulatoare cu vrsta se produce mbtrnirea i modificarea culturilor algale. La apariia noilor forme trebuie repetat procedura de selectare a monoculturilor.

4.2.4. Metoda de inoculare a algelor n interiorul agarului


Unele alge nu pot s creasc la suprafaa agarului, ci n interior. Pentru aceasta a fost elaborat, apoi modificat, metoda de selectare a algelor n monocultur din interiorul agarului. Metoda const n parcurgerea unor etape distinctive.
Inoculul algelor colectate din cmp se agit cu agarul lichid (nclzit) i
se toarn n vasul Petri. Agarul se rcete la o temperatur puin mai nalt
dect cea din cultivator. Vasele cu inocul i mediu agarizat se incubeaz la
temperatur stabilit i iluminare continu n cultivator. Dup cretere algele
pot fi selectate n monocultur cu ajutorul micropipetei. De regul, se utilizeaz micropipeta Pasteur sau capilarul de sticl. Pipeta Pasteur se sterilizeaz la
foc (lampa de spirt) fiind inut cu ajutorul pensetei. Pipeta trebuie uor sucit
deasupra flcrii pentru a o putea ntinde i rupe vrful, obinnd parc o a
subire. Vrful tubului obinut permite captarea algelor din interiorul agarului.25
Aceast metod se aplic att pentru selectarea algelor n monocultur, ct i
pentru meninerea ndelungat a culturii n laborator.

4.2.5. Metoda de separare a algelor prin centrifugare i sedimentare


Separarea algelor prin centrifugare i sedimentare este eficace pentru desprirea organismelor ce se deosebesc dup dimensiuni. Aceast metod permite separarea celulelor mai mari i grele de cele mai mici i uoare, precum i de bacterii.
.., .. . .. // . , 1983, .92-104.
25
.., .., ..
: . : - , 2008. 152 .
24

24

Filtrarea uoar poate fi utilizat pentru nlturarea algelor diatomee i dinoflagelatelor de celulele mai mici. Aceast procedur poate fi repetat pn la curarea
total a culturii. Pentru dinoflagelatele care plutesc accelerat aceast procedur
trebuie realizat n timp scurt, deoarece algele pot nimeri n soluie. Centrifugarea
intens poate afecta celulele algelor sensibile. Puterea de centrifugare a probelor
colectate depinde de specia de alg i poate fi determinat empiric.
Metoda de sedimentare se utilizeaz pentru separarea celulelor ce nu se mic sau a celulelor grele. Probele se agit puin i se introduc n baloane cu fund
plat, cilindre sau alt vesel pentru sedimentare. Sedimentarea se efectueaz pn
cnd celulele necesare se depun pe fund, iar celulele mici vor fi suspendate n
soluie. Dup aceasta soluia de deasupra se arunc. Acest proces poate fi repetat
pn la obinerea rezultatului dorit.26
Aceast metod este eficace pentru culturile concentrate i cu celule mari, iar pentru culturile cu dimensiuni celulare mici este greu de aplicat. Pentru algele cu dimensiuni mici metoda de filtrare sau centrifugare poate fi combinat cu alte metode.

4.2.6. Metoda de obinere a monoculturilor din culturi brute dense


Aceast metod are ca scop obinerea monoculturilor algale la utilizarea att
a mediilor solide, ct i lichide. Ea poate fi utilizat, n special, pentru obinerea
culturilor algologice pure de alge edafice sau aerofile. Probele de alge colectate
din natur (n cazul cnd algele formeaz cruste nflorirea solului), se expun
n apa distilat sterilizat. O poriune mic se microscopiaz i se determin, n
funcie de parametrii morfologici, care alge predomin.
Dup care selectm specia ce ne intereseaz. Probele se spal bine (de 45 ori
cu apa distilat) pentru nlturarea primar a particulelor solide i a altor alge, dar i
a bacteriilor ce sunt alipite crustei. Apoi algele sunt expuse din nou n apa distilat,
fiind supuse procedurii de centrifugare pentru separarea secundar de unele bacterii
i nevertebrate. Dup centrifugare probele se utilizeaz pentru inoculare.
Inocularea n vasul Petri pe mediu agarizat sterilizat (cu concentraia de 1,5%)
se va efectua astfel: 1. Coloniile n form de crust se vor dispersa cu ajutorul
pensetei sterile n buci mai mici (cu lungimea de 0,1-0,25 cm i limea de
0,05-0,07 cm) i mai mari (cu lungimea de 0,05-0,07 cm i limea de 0,02-0,03
cm). 2. Bucile mai mari se aranjeaz n form de cerc la suprafaa mediului
agarizat la distana de 1 cm de marginea cecuei (distana dintre bucile mari de
alge fiind de 2 ori mai mare dect lungimea lor) formnd prima circumferin, iar
bucile mici se aranjeaz la fel n form de cerc la suprafaa mediului agarizat
(distana dintre bucile mici fiind de dou ori mai mare dect lungimea lor) formnd a dou circumferin. 3. n mijlocul celei de a doua circumferine se expune
o poriune mic de crust (Fig. 6). Probele inoculate se expun n cultivator la
iluminare continu i temperatura necesar.
.., .., ..
: . : - , 2008. 152 .
26

25

Fig.6. Inocularea algelor colectate pe mediu agarizat.

Inocularea probelor pe mediu lichid sterilizat se efectueaz n baloane Erlenmayer cu volum de 100 ml, volumul mediului lichid fiind de 50 ml. Se administreaz 40 mg de inocul pregtit, probele se agit puin i se expun la iluminare
continu i temperatura necesar. Dup ce se obine o cretere masiv a biomasei,
probele se microscopiaz, se selecteaz specia predominant i se expune din nou
pe mediu nutritiv. Etapele se repet pn la obinerea unei culturi monoalgale.
Aplicarea metodei permite obinerea monoculturilor algale ntr-un interval de
timp mai scurt dect prin aplicarea celorlalte metode.

4.2.7. Selectarea monoculturilor prin intermediul fototaxisului


Fototaxisul poate fi utilizat pentru obinerea monoculturilor de flagelate.
Aceast metod este eficient dac proba conine o specie dominant de flagelate
ce posed fototaxis. Dac sunt mai multe specii de acestea, atunci procesul de
selectare n monocultur se complic.
Pentru aplicarea acestei metode este necesar o instalaie special ce conine
o surs de lumin. Cea mai simpl instalaie const dintr-un tub umplut cu mediu
nutritiv steril. La un capt se afl proba de alge, la cellalt sursa de lumin.
Dup ce celulele se vor deplasa la o distan n mediul nutritiv steril, ele pot fi
separate cu ajutorul micropipetei i introduse din nou n mediu nutritiv steril.
Pentru eficientizarea procesului de separare a celulelor exist un dispozitiv special (ce const dintr-o colb cu o mnec integrat). Astfel, proba de alge i bilele
sterile se introduc n colba cu mediu nutritiv, alturi de care se introduce sursa de
lumin. Dup ce celulele algelor se deplaseaz n mneca colbei, aceasta se ntoarce astfel ca bilele s nchid mneca, iar mediul nutritiv rmas se exclude.
O alt metod complicat prevede utilizarea unei micropipete special construite pentru separarea flagelatelor de alte organisme. O parte din vrful pipetei se
arunc, iar celulele care s-au deplasat n partea superioar a pipetei se introduc
n vase speciale. Unele celule ale algelor ce nu se deplaseaz pot s se mite prin
agar la sursa de lumin. Dup migrarea spre lumin celulele separate pot fi colectate pentru cultivarea ulterioar.27
.., .., ..
: . : - , 2008. 152 .
27

26

CAPITOLUL V
OBINEREA CULTURILOR ALGALE PURE (AXENICE)
Pentru stabilirea activitii algelor trebuie s avem culturi algale pure din punct
de vedere bacteriologic. Ideea despre culturi bacteriologic pure a fost naintat
de Koch i Pasteur. De menionat c obinerea culturilor algale pure se realizeaz nu dintr-o celul, ci din populaie algal, care la cultivarea ndelungat sau la
schimbarea condiiilor de cultivare pot suferi unele modificri ce pot contribui la
schimbarea proprietilor culturii algale. De aceea, trebuie s stimulm obinerea
tulpinilor sau a clonelor selectate dintr-o celul. Selectarea dintr-o celul se poate
realiza atunci cnd se obine o monocultur clon a tulpinii din natur.28
Culturile algale pure sunt preferate n cazul cultivrii algelor pentru obinerea
biomasei utilizate n alimentaia uman, ca surs medicamentoas i n cadrul
cercetrilor tiinifice. n cele ce urmeaz vom descrie unele modaliti de obinere a culturilor algale pure.

5.1. Obinerea culturilor algale pure prin utilizarea


antibioticelor
Antibioticele sunt substane cu efect bactericid sau bacteriostatic, cu toxicitate
selectiv, obinute prin biosintez microbian.29 Pentru nlturarea bacteriilor din
culturile algale se utilizeaz antibioticele antibacteriene cu spectru de aciune ngust (cum ar fi penicilina, streptomicina), dar i cu spectru de aciune larg (cum ar
fi clortetraciclina, ocitetraciclina, tetraciclina) care sunt active pe bacterii Gram
pozitive i negative, coci Gram pozitivi i negativi, spirochete, leptospire, chlamidii, micoplasme etc.
Antibioticele pot fi utilizate pentru nlturarea bacteriilor din culturile algale
fr a le afecta, ns ele sunt utilizate rar n practica de cultivare.
Utilizarea antibioticelor pentru nlturarea bacteriilor prevede anumite momente ce trebuie luate n considerare:

La administrarea antibioticelor se reduce sinteza pereilor celulari. Pentru
stimularea diviziunilor celulare trebuie adugate substane organice, deoarece aceste antibiotice distrug bacteriile doar n cazul creterii active a
celulelor.

Nu se recomand s utilizm n paralel inhibitori ai divizrii peretelui celular (cum ar fi, de exemplu, penicilina) i inhibitori ai creterii celulelor.30
.., .. . , 1962. 58 .
29
Toma F. Bacteriologie general: Curs. Bucureti, 2005. 70 p.
30
.., .., ..
: . : - , 2008. 152 .
28

27

Tehnicile de tratare a culturilor algale cu antibiotice variaz n funcie de preparat, de concentraia i timpul tratrii i au un efect letal asupra bacteriilor. Preparate antibiotice pot fi utilizate att separat, ct i mixt (compuse din combinarea
a mai multor antibiotice), unele fiind utilizate la etapa iniial, iar altele la etapa
final de distrugere a bacteriilor din culturile algale.
Sensibilitatea algelor la antibiotice se modific ntr-un spectru larg i depinde
de specificul biologic al organismului. Un lucru extrem de important, n acest
sens, este concentraia antibioticelor administrate. Unele concentraii contribuie
la distrugerea total a tulpinilor algale, iar alte concentraii contribuie la distrugerea bacteriilor i nu afecteaz algele. Astfel, n lucrarea lui .. i
coautorii31 se evideniaz dozele de antibiotice letale pentru unele alge i dozele
necesare, care nu afecteaz tulpinile algale (doar bacteriile), acestea fiind prezentate n tabelele 5 i 6.

.., .., .. . - c : : , 1975. 241 c.


31

28

29

Trichoderma sp.

0,20
0,40
0,04
0,04
>0,10
>0,10

>0,61
0,1

2,91

1,45
>3,03
>3,03

>3,03
0,40

0,02

1,51
>3,03

0,72
0,14

0,01
>0,10

Penicilin

Chlorella vulgaris
Scenedesmus
obliquus
Ankistrodesmus
falcatus
Pseudomonas ovalis
Pseudomonas
pyocyaneum
Pseudomonas sp.
Achromobacter
harthlebii
Flavobacterium
sulfurum
Sterratia rubra
Bacillus mycoides
Bacillus cereus
Penicillium
chloroleucon
Aspergillus
ochraceae

Gramicidin

Specia

Aurantin
0,10
0,0005

0,10

0,03
0,10

Streptomicin
2,00
0,10
0,01

0,20
0,10

1
0,10

0,02

0,05
0,02

Colimicin

Levomicetin
0,02
>0,02
>0,20

0,02

0,20
0,02

0,20
>0,20

0,0005

0,06
0,23

0,01

0,01
0,01

0,01
0,11

0,05

0,20
0,20
0,0005 >0,10

Cloetetraciclin
0,05
1,00
0,50

0,20

0,10
0,05

0,05
0,50

0,05

>0,05
0,05
0,05

0,05

>0,10 >0,05
0,05 0,02

Oxitetraciclin

Antibioticele
Polimixin
>0,10

>0,0025

>0,05

0,02
0,15

Eritromicin
0,0005
>0,1

>0,1

>0,1
0,01

0,15

0,1
0,1

Nestatin

Grizemin

0,1
0,05

0,01
0,1

0,025

>0,1
0,01

>0,1
>0,1

0,01

0,025

0,1

0,05

0,05

0,015

0,05

0,025

0,05

0,005 0,025 0,0005 0,005

0,025 0,0303 0,05


0,01 0,025 0,025

Candicidin

Concentraia antibioticelor ce stopeaz complet creterea algelor


i bacteriilor, mg/ml

Tertraciclin

Tabelul 5

Trihotecin

30

Chlorella vulgaris
Scenedescmus obliquus
Ankistrodesmus falcatus
Pseudomonas ovalis
Pseudomonas
pyocyaneum
Pseudomonas sp.
Achromobacter
harthlebii
Flavobacterium
sulfurum
Sterratia rubra
Bacillus mycoides
Bacillus cereus
Penicillium
chloroleucon
Aspergillus ochraceae
Trichoderma sp.

Specia

0,08
0,04
0,04
0,04
0,04
0,04

0,73
0,14

1,45

0,36
>3,03
2,91

Penicilin
0,01
0,001
0,20
>0,10

Gramicidin

0,91
3,03
3,03
0,14
0,14

Aurantin
0,10
<0,01

0,01
0,005
0,10
0,01

Streptomicin

0,10
>0,10 <0,10
0,0005 <0,01

0,01
0,01
0,05

Levomicetin
0,01
0,10
0,02

0,01

0,02
0,01

0,02
0,05

0,05

Colimicin
0,02
0,06

0,003

0,003
0,008

0,008
0,05
0,01
0,003

Clortetraciclin
0,03
0,2
0,05

0,05

0,05
0,03

0,02
0,005
0,01
0,03
0,05

0,01
0,02
0,01

0,02

0,05
0,01
0,005
0,02

Oxitetraciclin

Nestatin

Grizemin

Eritromicin

Polimixin

Tertraciclin
0,01 0,0005
0,01
0,01

0,0025

0,0005
0,025

0,01 >0,005 0,0005


0,01 0,0025
0,1

0,05
0,025
0,005

0,05
0,025

0,005
0,005

0,01
0,01
0,005
0,008

0,005

0,005
0,005

0,02 0,005
0,005 0,0005 0,008
0,01 0,10 <0,0005 0,001 0,005
0,02 0,001 <0,0005 0,001 0,005
0,01 >0,005 >0,1
0,01
>0,005 0,005
>0,1

Antibioticele
Candicidin

Tabelul 6
Concentraiile antibioticelor ce nu influeneaz creterea algelor i rein complet dezvoltarea
microorganismelor, mg/ml

Dup cum observm, cele mai mari doze de antibiotic administrate pot fi de penicilin (de 3 mg/ml), iar cele mai
mici sunt de candicidin i levomicetin care n concentraii de 0,0005 mg/ml stopeaz creterea algelor.

0,01
0,05

0,05

0,001
0,005
0,001

Trihotecin

Dozele de antibiotice prezentate n Tabelul 6 pot fi considerate ca rezistena


algelor la anumite concentraii de antibiotice. Rezistena algelor la antibiotice
poate fi natural sau dobndit, n funcie de condiiile de cultivare, coninutul
mediilor nutritive etc. n cazul dat antibioticele exercit influen negativ doar
asupra bacteriilor, iar asupra algelor influneaz pozitiv.
Sursele de specialitate, mai recente, menioneaz trei modaliti de disrugere
a bacteriilor prin utilizarea antibioticelor.
Prima modalitate eliminarea bacteriilor din mediul nutritiv de cultivare a
algelor. n literatura de specialitate se propune utilizarea mail multor antibiotice
combinate. Spre exemplu: la 100 mg de penicilin G se adaug 25 mg sulfat de
dehidrostreptomicin i 25 mg de sulfat de gentomicin care sunt dizolvate n 10
ml ap distilat (sau deionizat), dup care se sterilizeaz prin filtru membranar.
Soluia se pstreaz ngheat pn la utilizare (pentru pstrarea soluiei congelate se recomand utilizarea tuburilor de policarbonat). Pentru aplicare se utilizeaz
soluia decongelat (care se menine cel puin 5 zile la temperatura de 37C ),
soluia decongelat se poate pstra la circa 4C timp de cteva sptmni. Doza
standard de aplicare este de 0,5 ml antibiotic mixt la 50 ml de mediu nutritiv
pentru cultivarea algelor. Aceast concentraie este destul de bine suportat de
multe specii de alge.
Concentraia optim de antibiotic mixt poate fi determinat prin inocularea monoculturii (aflat n faza exponenial de cretere n volum de la 0,5 pn la 5 ml
n funcie de densitatea culturii i mrimea celulelor) n 50 ml de mediu nutritiv
proaspt preparat (administrat n 5 vase). n primul vas nu se administreaz antibiotic, n cel de al doilea 0,25 ml, n al treilea 0,5 ml, n al patrulea 1 ml i n cel
de al cincilea 2 ml de antibiotic. Administrarea antibioticelor trebuie efectuat
la sfritul zilei de inoculare, astfel c peste aproximativ 15, 24, 36 i 48 ore de la
administrarea algelor s colectm cu ajutorul micropipetei o colonie sau o celul
de alg pentru a putea fi inoculat pe mediul nutritiv proaspt pregtit (care este
preventiv sterilizat). Dup aceasta se realizeaz un test de identificare a bacteriilor
din culturile algale.
Avantajele primei metode de combatere a bacteriilor const n faptul c antibioticele nu influeneaz radical dezvoltarea algelor, iar dezavantajul principal
este c procedura necesit timp i efort mare, mai ales pentru splarea celulelor
dup extragerea de pe mediu cu antibiotic. Aceast metod poate fi utilizat, n
special, pentru celulele flagelatelor, diatomeelor mari, dinoflagelatelor mari i
formelor coloniale.
O alt metod de nlturare a bacteriilor din culturile algale este cea propus
de Droop32 , care este simpl i eficient. Aceast metod poate fi aplicat culturilor cu dimensiuni celulare mici i cu o vitez mare de cretere.
Droop M.R. A procedure for routine purificationof algal cultures with antibiotics. // Brit.
Phycol. Bull., 1967, no3, p.295.
32

31

Unul din procedeele propuse de Droop prevede utilizarea unui amestec de


antibiotice compus din: sulfatbenzilpenicilina G 2500 mg/l, cloramfenicol 200
mg/l; neomicin 200 mg/l, actidione (pentru nlturarea ciupercilor) 400 mg/l.
Multe surse tiinifice susin c aceste concentraii de antibiotic sunt extrem de
mari i contribuie la distrugerea celulelor algale. Antibioticele selectate de Droop
sunt utilizate pentru distrugerea bacteriilor gram pozitive (n special penicilina),
iar celelalte distrug bacteriile Gram pozitive prezente n mediile de cultivare a
algelor i n coloniile algale.
Un alt procedeu de combatere a bacteriilor din culturile monoalgale este transferul secvenial al culturilor algale ntr-o serie de baloane cu mediu nutritiv sterilizat
ce conin antibiotice care difer de la un balon la altul. Acestea permit algelor s
supravieuiasc i s creasc eventual i la concentraii reduse. Esena metodei
const n faptul c la fiecare trecere a culturilor algale dintr-un balon n altul se
reduce numrul bacteriilor. Aceast metod permite distrugerea pas cu pas a bacteriilor, cu toate c este posibil a distruge toate bacteriile odat (conform celorlalte dou procedee sus-menionate). Acest procedeu este mai puin toxic pentru
culturile algale, dect celelalte dou procedee. n afara de aceasta, antibioticele
mixte pot fi fatale pentru metaboliii unor alge, ns ar putea suprima creterea
altora. Aceast metod este avantajoas, deoarece un antibiotic poate distruge
unele bacterii, iar alte antibiotice pot distruge alte bacterii, astfel c ntr-un final
obinem o cultur algal pur. Aplicarea metodei date asigur acomodarea algelor la antibiotice i creterea biomasei i eliminarea bacteriilor. Aceast metod a
fost utilizat pentru purificarea algei Micromonas flagela pusilla i a permis nlturrea total a bacteriilor. Astfel, au fost utilizate secvene de urmtoarele antibiotice: penicilin (1 g/l), neomicin (250 mg/l), gentamicin (1 g/l) i kanamycin
(0,5 sau 1 g/l). Primul antibiotic se administreaz la inoculul de 20%. Dup trei
zile n mediul nutritiv proaspt pregtit se introduce al doilea antibiotic, dup ce
se inoculeaz 20% din prima prob. Peste urmtoarele trei zile se administreaz
al treilea antibiotic (gentamicina) i se inoculeaz 20% din cea de a doua prob.
Dup urmtoarele patru zile se introduce ultimul antibiotic (din cele sus-menionate) i se administreaz aceeai cantitate de inocul din combinaia precedent.
Astfel c la sfritul perioadei de expunere tulpina algal s-a purificat, fiind lipsit totalmente de bacterii.33
Pentru culturile de microalge marine se propune utilizarea metodei elaborate
de S.Slocombe,34 care garanteaz excluderea total a bacteriilor din culturile algale. Astfel, se prepar 20 ml de antibiotic prin diluarea n ap distilat a cefatoxinei
(500 mg/l), carbenicilinului (500 mg/l), kanamycinei (200 mg/l i augmentinului
(200 mg/l). Soluia se sterilizeaz prin filtrare (utiliznd filtru cu diametrul de
0,22 ), se depoziteaz ntr-un flacon steril i se pstreaz n frigider 4 sptmni
33
Guillard R.R.L. Purification methods for microalgae. // Algae culturing techniques, 2005,
p.117-132.
34
Ibidem.

32

sau se congeleaz la temperatura de 200C. Pentru eliminarea bacteriilor se propune utilizarea a 6 tuburi cu mediu nutritiv ce conine urmtoarele concentraii
de antibiotice: 0%; 0,5%; 1%; 5%; 7,5%; 10%, la care se inoculeaz suspensia
algal. Se agit bine tuburile, se nchid i se expun la incubare pe noapte la condiii optime de temperatur i iluminare. Peste un interval de 16, 24, 40, 48, 72,
i 80 de ore se ia cte o pictur din fiecare tub i se inoculeaz n vase separate
ce conin mediu nutritiv sterilizat proaspt pregtit. Se monitorizeaz procesul
de cretere a algelor; acolo unde se observ cea mai rapid cretere, se consider
ca alga s-a acomodat mai rapid. Din acel vas se preiau probe pentru a fi supuse
analizelor bacteriologice (pentru verificarea puritii culturilor algale).
De menionat c utilizarea antibioticelor care au proprieti mutagene poate
contribui la formarea modificrilor genetice la algele cultivate.

5.2. Utilizarea metodelor de filtrare pentru nlturarea


bacteriilor din culturile de microalge
Pentru separarea celulelor algale de bacterii mai poate fi utilizat metoda de filtrare. Filtrarea se realizeaz utiliznd o instalaie special, prezentat n Figura 7.

Fig.7. Aparat de filtrare pentru nlturarea bacteriilor din culturile algale.

Aceast metod permite nlturarea bacteriilor din culturile algale, dac acestea au dimensiuni mai mici dect celulele algelor. Metoda prevede utilizarea filtrului Nucleopor cu diametrul porilor de 8 , deoarece el permite trecerea celulelor algelor microscopice. Pentru aceasta poate fi utilizat dispozitivul prezentat
n Figura 7. Aparatul este format dintr-un dispozitiv de plasare a filtrului cu diametrul de 25 mm (A). Dispozitivul de plasare a filtrului are la capt o sering de
sticl cu dop de cauciuc (1), iar la baz un tub de cauciuc sau silicon (2). Tubul
33

(2) este conectat la un balon Buchner (3) de extragere n vid, care este conectat la
o pomp, cu capacitate mic, de extragere n vid (4). Tubul (2) are conexiune cu
un tub aferent nzestrat cu clem (C), la captul creia este ataat un suport (B)
cu membran cu diametrul porilor de 0,22 , prin care ptrunde aerul sterilizat
preventiv. Tubul (2) mai are conectat o clem (D) care, ca i clema anterioar
(C), are funcia de a regla presiunea aerului n vid. Presiunea n vid se regleaz
astfel nct mediul nutritiv cu culturile algale s se filtreze lent.35
Prin acest procedeu au fost sterilizate alga cianofit Aphanizomenon flosaquae f. gracile (Lemm.) Elenk. i alga diatomee Asterionella formosa Hass,
fiind obinute culturi algologice pure.

5.3. Metoda de obinere a culturilor algale pure utiliznd mediile


agarizate

Este una dintre cele mai vechi metode de purificare i poate fi aplicat doar
pentru algele care se dezvolt pe suprafaa agarului sau n interiorul lui. Aceast
metod, dup cum am menionat n capitolele precedente, poate fi utilizat att
pentru purificarea algelor de bacterii, ct i pentru obinerea culturilor unialgale.
n agar pot fi administrate antibiotice sau substane chimice antibacteriene. Se
propune ca mediile agarizate s fie autoclavate iniial, dup care gelifierea s se
produc la temperatura de 170C care nu influeneaz negativ asupra activitii
antibioticelor. Agarozele care s-au solidificat la temperaturi reduse sunt foarte
importante pentru purificarea algelor cianofite, n special pentru speciile genului
Mycrocystis. Aceast metod se utilizeaz n combinare cu metodele de ultrasunet i centrifugare. Cu ajutorul acestei metode a fost obinut i una din speciile
36 37 38
genului Synechococcus.36-38

5.4. Utilizarea metodelor chimice pentru obinerea culturilor


algale axenice

Pentru obinerea culturilor axenice se utilizeaz i metodele chimice, care


constau n splarea algelor cu soluii dezinfectante de anumite concentraii. Cele
mai frecvente antiseptice utilizate la sterilizarea algelor sunt urmtoarele:
I. Fenolul (acid carbolic) n concentraie de 0,01-1%;
II. Rivanol n concentraie de 0,01-0,1%;
35
Heaney By S.I., Jaworsk G.H.M. A simple separation technique for purifying micro-algae.
// Br. phycol., 1977, no.12, p.171-174.
36
Guillard R.R.L. Purification methods for microalgae. // Algal culturing techniques, 2005,
p.117-133.
37
Watanabe M.M., Suda S., Kasai F., Sawaguchi T. Axenic cultures of three species of Microcystis (Cyanophyta= Cyanobacteria). // Bull. Jap. Fed. Culture Coll., 1985, p.57-63.
38
Watanabe M.M. et al. Purification of freshwater picoplanktonic cyanobacteria by pourplating in ultra-low-gelling-temperature agarose. // Phycol. Res., 1998, p.71-75.

34

III. Alcool etilic n concentraie de 1-10%;


IV. Detergeni (Dero, de exemplu) n concentraie de 1%.
Una din metodele de sterilizare chimic este cea propus de .. ,
care prevede utilizarea rivanolului (n concentraie de 0,1%) i bromului. Astfel,
se propune utilizarea rivanolului proaspt (de 0,1% obinut prin diluie cu ap
distilat) care se adaug n concentraie de 0,5-20 mg/l la mediul nutritiv steril.
Pe mediul cu rivanol se inoculeaz algele. La concentraii nalte de rivanol algele rezist 4-5 ore, iar la concentraii mici pn la 3 zile. Cele mai rezistente
sunt algele clorococoficee, iar pentru cianofite are aciune letal (excepie prezentnd formele mucilaginoase). Dup administrarea rivanolului algele trebuie bine
splate. Pentru sterilizarea algelor diatomee maritime se recomand utilizarea
iodului. Procedura se realizeaz astfel: se adaug 1-2 picturi de iod n 50 ml
de mediu nutritiv. Algele se menin timp de 1-2 minute, dup ce se separ i se
utilizeaz la inocularea pe mediu nutritiv proaspt pregtit.
Pentru sterilizarea culturilor de Clamodomonas i Euglena de bacterii se propune utilizarea cofeinei n concentraie de 0,01-0,03 mol la mediul mineral. Pentru sterilizarea algelor verzi, albastre-verzi i diatomee de bacterii se mai utilizeaz actidionul (C15H23O5N) cu masa molar de 297,39, care este considerat
antibiotic de origine chimic.
Sterilizarea cu detergeni poate fi aplicat pentru algele cianofite i verzi.
Metoda se realizeaz prin adugarea a 2 picturi de detergeni la 50 ml de suspensie algal, dup care se agit cu fenol (de 1%) n raport de 1 parte suspensie
la 4 pri soluie de fenol. Soluia obinut se centrifugheaz, iar celulele algelor (care cad n sediment) se spal cu ap distilat steril. Dup care algele se
expun pe medii nutritive agarizate (2% agar + 0,5% glucoz) pentru cretere.
Coloniile crescute se mai inoculeaz pe agar de cteva ori pn nu se asigur
sterilitatea bacteriologic.

5.5. Utilizarea luminii ultraviolete pentru obinerea culturilor


algale pure
Principiul acestei metode const n nlturarea bacteriilor din culturile algale
prin utilizarea luminii ultraviolete cu radiaia ultraviolet de tip C. Pentru aceasta se aplic lampa germicid care genereaz radiaie de 254 nm. Efectele letale
ale radiaiei ultraviolete asupra bacteriilor sunt n limitele de 240-280 nm (cu
capacitatea maxim la 260 nm). Astfel, radiaia ultraviolet trece prin celulele
bacteriilor i iniial este absorbit de ADN, ceea ce are drept urmare stoparea
reproducerii. Se produce o leziune asupra bazelor pirimidinice timina i citozina care sunt afectate i formeaz legturi anormale, numite dimeri pirimidinici.
Ca rezultat se mpiedic replicarea i transcripia ADN-ului i are lor inhibarea
creterii i moartea celulelor bacteriene. n afar de alterarea ADN-ului razele ultraviolete dezintegreaz celulele algelor prin producerea radicalilor liberi
35

substane fotochimice toxice. Expunerea ndelungat la radiaia ultraviolet


contribuie la distrugerea celulelor vegetative i a sporilor bacteriilor.39
Aceast metod permite nlturarea bacteriilor heterotrofe i virusurilor datorit reaciei lor la iluminarea ultraviolet, deoarece acizii lor nucleici sunt mai
puin protejai. Iluminarea ultraviolet este una din modalitile de separare a
algelor de bacterii. Radiaia ultraviolet poate fi aplicat n cazul cnd bacteriile
se lipesc de celulele mai mari ale algelor.40, 41
Procedura se realizeaz astfel: culturile algelor se expun pe sticla de cuar i se
plaseaz sub lampa germicid timp de 10-20 min. la distana de 20-30 cm. Dup
iluminare algele se inoculeaz pe mediu agarizat i se verific puritatea lor.
n procesul de lucru cu lmpile germicide cercettorii trebuie s posede ochelari protectori, haine specifice i s nu se afle n box pe perioada de sterilizare.
La influena radiaiei ultraviolete pot aprea mutani rezisteni.42 De menionat
c utilizarea lmpilor germicide, care au proprieti mutagene, poate duce la formarea modificrilor genetice la culturile algelor.

5.6. Aplicarea ultrasunetului pentru nlturarea bacteriilor


din culturile algale
Ultrasunetele sunt vibraii acustice (cu o frecven de peste 20000 Hz), care se
obin n aparate speciale ce permit trecerea unui curent alternativ de nalt frecven printr-un cristal de cuar. Vibraiile masei cristalului de cuar, sub aciunea
impulsurilor electrice, duc la dezintegrarea rapid a celulelor bacteriene.43 Astfel
de vibraii transmise ntr-o camer umplut cu ap induc modificri de presiune
i formarea unor minuscule caviti asemntoare unor bule de lichid, fenomen
numit cavitaie. Bulele au o via scurt, se umfl i creeaz puncte intense de
turbulen care pot deforma i rupe celulele din vecintate. Bacilii Gram negativi
sunt foarte sensibili la aceste vibraii, iar cocii Gram pozitiv i sporii bacteriilor
sunt foarte rezisteni la aceste vibraii.44, 45
Pentru probele cu particule separate ale algelor se propune utilizarea ultrasunetului urmat de centrifugare. Aceast metod a fot aplicat pentru nlturarea
Bogdan A.T., ogoe I., Cmpeanu Gh., Ivana S., Enache T., Britareanu S., Iudith I.,
Popescu A. Microbiologia alimentelor. Vol 1. Bucureti, 2011. 294 p.
40
Guillard R.R.L., Morton S.L. Culture methods: // Hallegraeff G.M., Anderson D.M., and
Cembella A.D., (eds). Manual on Harmful Marine Microalgae. UNESCO, Paris, 2003, p.77-97.
41
.., .., ..
: . : - , 2008. 152 .
42
.., .., .. . - . : , 1975. 241 c.
43
Blidari C.F., Petru-Vancea A. Biotehnologie. Lucrri practice de laborator. Oradea, 2006.
103 p.
44
Bogdan A.T., ogoe I., Cmpeanu Gh. i al. Microbiologia alimentelor: Vol. 1. Bucureti,
2011. 294 p.
45
Simiona I. Bacteriologie general. Bucureti, 2005.
39

36

bacteriilor din culturile algelor cianofite.46 M.Watanable47 a nlturat bacteriile


din cultura de Microcystis infectat timp de 30 s la frecvena de 20 kHz, unde,
ca rezultat, majoritatea coloniilor se divizau n celule separate. Soluia se centrifugheaz i se dizolv cu ap distilat de 4 ori, dup care celulele separate se
izoleaz cu ajutorul micropipetei. M.Shirahai i coautorii48 au aplicat materialul
pe mediu agarizat utiliznd aceleai tehnici de separare i centrifugare. Pentru
separarea algelor eucariote poate fi aplicat metoda cu ultrasunet cu intensitate
mic (90 kHz), timp de 5-20 min.

Solp H., Starr M.P. Principles of isolation, cultivation and conservation of bacteria. // The
Procaryotes. Vol. 1. Vienna: Springer-Verlag, 1981, p.135-175.
47
Watanabe M.M., Suda S., Kasai F., Sawaguchi T. Axenic cultures of three species of
Microcystis (Cyanophyta= Cyanobacteria). // Bull. Jap. Fed. Culture Coll., 1985, p.5763.
48
Brown R.M., Jr., Bischoff H.W. A new and useful method for obtaining axenic cultures of
algae. // Phycol. Soc.Amer. News Bull., 1962, vol. 15, p.43-44.
46

37

CAPITOLUL VI
CULTURILE ALGALE INTENSIVE
Creterea intensiva a algelor n condiii de laborator vizeaz n principal cercetri
ce necesit obinerea, relativ rapid, a unor cantiti destul de mari de biomas.49
Culturile intensive de alge pot fi eficiente dac vor corespunde urmtoarelor
cerine:
1. Culturile algale trebuie s posede o intensitate sporit a fotosintezei la cultivarea pe medii minerale cu concentraii mari de sruri, care ar permite
s adugm mai rar elemente nutritive i s obinem o cretere intensiv a
algelor.
2. Culturile algale trebuie s posede o energie mare de cretere n condiii de
iluminare cu intensitate mare. Iluminarea optim a suspensiei poate fi uor
realizat, de aceea pentru asigurarea luminii toate celulele din suspensie se
folosesc de intensitatea mare a luminii care duce la iluminarea mare a unor
poriuni ale celulelor, ndeosebi la suspensiile agitate. Pentru cultivare sunt
mai convenabile acele culturi care au un coeficient mai mare de utilizare a
energiei.
3. S fie culturi algale termofile, deoarece intensitatea mare a luminii i temparaturii este o cerin de cretere a lor. Speciile de alge termofile au o
energie de dezvoltare mai mare, de aceea ele au o perspectiv mai mare n
cultivarea intensiv.
4. Culturile algale trebuie s posede proprietatea de a inhiba dezvoltarea microflorei strine (bacteriilor i altor specii de alge).
5. Formele microscopice unicelulare sau formele coloniale mici de alge sunt
mai accesibile cultivrii intensive n comparaie cu algele macrofite. Aceasta se argumenteaz prin faptul c microalgele se pot uor ajusta la cultivarea n adncime, pot fi bine agitate, au un contact mai mare cu CO2 i cu
lumina. Formele ce formeaz mucilagii, bule etc. pot fi la fel acceptate pentru cultivarea intensiv. Pe lng aceasta, se cere ca speciile de microalge
s fie bine studiate i s nu posede un ciclu de dezvoltare complicat. Cele
mai studiate i aplicate n cultivarea intensiv sunt algele verzi, protococoficeele unicelulare, algele albastre-verzi i cele diatomee.50
6. Culturile algale trebuie s fie uor de colectat, separat de mediu nutritiv sau
se elaboreaz metode pentru realizarea eficient a acestor cerine.
7. Culturile algale necesit a fi studiate n detaliu n condiii de laborator i s
fie stabilit tehnologia de cultivare.
49
Cru I. Cultura algelor pentru biomas i principii active: Note de curs, lucrri de
laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
50
.., .. : , 1962. 58 .

38

Pentru a cultiva intensiv o specie de alg selectat trebuie s respectm cerinele sus-menionate i s cunotem informaia expus n chestionarul inclus n
Tabelul 7.
Tabelul 7
Poziiile necesare la cultivarea intensiv a algelor
Informaia necesar
Poziia sistematic a speciei (regn, ncrengtur, clas, ordin,
familie, gen, specie)
Fotografia microscopic a speciei
Locul de unde a fost prelevat proba, habitatul
Modul de obinere a culturii (dint-o celul separat sau dintr-o
colonie)
Caracteristicile morfologice ale tulpinii pe medii agarizate
(dimensiunile celulelor, formele i culoarea)
Caracteristicile morfologice ale tulpinii pe medii lichide
(dimensiunile celulelor, formele i culoarea)
Rezistena culturii (la bacterii, ciuperci, virui)
Modul de expunere a biomasei pe mediile lichide (la suprafa,
n adncime, fixat de perei etc.)
Mediul nutritiv utilizat pentru cultivare (componena mediului
solid i a celui lichid)
Cantitatea inoculului (la inocularea pe medii solide i lichide)
Caracteristica creterii pe mediile solide (durata fazelor i
viteza de cretere)
Caracteristicile creterii pe medii lichide (durata fazelor i
viteza de cretere)
Biomasa obinut pe medii solide (pe o perioad de 10-30
zile)
Biomasa obinut pe medii lichide (pe o perioad de 6-12
zile)
Concentraia de CO2 administrat n mediile nutritive lichide
Condiiile de cultivare pe medii solide i lichide (umiditatea
aerului, temperatura, iluminarea)
Metoda de cultivare (pe medii solide i lichide)
Instalaii utilizate pentru cultivare (aparate, vesel, caracteristica
instalaiei etc.)
pH-ul mediilor nutritive (la nceputul cultivrii i la sfritul
cultivrii)
Caracteristicile biochimice ale culturii (proteine, glucide,
lipide, vitamine etc.)
39

Rezultatul

CAPITOLUL VII
TEHNOLOGII DE CULTIVARE A MONOCULTURILOR ALGALE
CaPitolUl vII. TEHNOLOGII DE CULTIVARE A
alGale
de cultivareMonoCUltUrilor
a algelor reprezint
ansamblul de procese,

Tehnologiile
metode i
tehnici ce trebuie
aplicate
i respectate
pentru
obinerea
biomasei
algale.
Tehnologiile
de cultivare
a algelor reprezint
ansamblul
de procese,
metode i tehnici
ce
aplicate i respectate
pentrumari,
obinerea
algale.
Astfel,trebuie
considerm,
n linii
cbiomasei
tehnologiile
de cultivare a algelor obiAstfel, considerm,
mari, distinctive.
c tehnologiile de
cultivare etape
a algelorprevd
obinute nselectarea
nute n monocultur
includn5linii
etape
Aceste
monocultur includ 5 etape distinctive. Aceste etape prevd selectarea i prepararea mediilor
i prepararea
mediilor nutritive, pregtirea i inocularea algelor, identificarea
nutritive, pregtirea i inocularea algelor, identificarea i respectarea condiiilor de cultivare
i respectarea
condiiilor
de cultivare
urmat de
selectarea
i aplicarea
urmat de
selectarea i aplicarea
metodei corespunztoare
de cultivare
pentru obinerea
biomasei metodei
algale utilizate
vaste domenii pentru
(Fig. 8). obinerea biomasei algale utilizate n vaste
corespunztoare
dencultivare
domenii (Fig. 8).

Fig. 8. Schema
tehnologic
cultivare a algelor.
Fig. 8. Schema
tehnologic
dedecultivare
a algelor.

Tehnologiile de cultivare a algelor trebuie respectate, studiate i ajustate etapelor de


evoluie a societii, dar i condiiilor de mediu. Rezultatul final, ce reflect eficacitatea
Tehnologiile
de cultivare a algelor trebuie respectate, studiate i ajustate etapeimportan i necesitatea tehnologiei este biomasa algal. Pe an ce trece, biomasa algal gsete
lor de evoluie
a societii, dar i condiiilor de mediu. Rezultatul final ce reflect
tot mai multe ntrebuinri n diverse domenii, ca: protecia mediului, biotehnologie, medicin,
eficacitatea,
importana i necesitatea tehnologiei este biomasa algal. Pe an ce
agricultur etc. Algele sunt utilizate la soluionarea unor astfel de probleme biologice generale
trece, biomasa
algal gsete tot mai multe
ntrebuinri n diverse domenii, ca:
37
protecia mediului, biotehnologie, medicin, agricultur etc. Algele sunt utilizate
la soluionarea unor astfel de probleme biologice generale, cum ar fi elucidarea mecanismelor de difereniere i prolifiere, interaciunea celulelor cu mediul,
adaptarea, mbtrnirea, mobilitatea biologic, transformrile maligne i multe
altele. Ele sunt surse (material) pentru crearea producenilor celulari, utilizai

40

n scopul ridicrii productivitii animalelor i pentru selectarea noilor soiuri de


plante. Culturile celulare sunt utilizate la tratarea bolilor ereditare, n calitate de
testobiecte la experimentarea substanelor farmacologice noi, pentru menine51-54
rea genofondului, a speciilor de animale i plante pe cale de dispariie.51, 52, 53, 54
Utilizarea biomasei algale permite soluionarea urmtoarelor probleme tiinifico-aplicative: 1) studierea dinamicii i cinetica creterii i consumului de
substane; 2) studierea influenei dintre specii; 3) studierea principiilor limitrii; 4) studierea influenei diferiilor factori de mediu asupra dezvoltrii i
funcionrii ecosistemelor; 5) soluionarea obiectivelor de dirijare i optimizare
a cercetrilor algologice.55
Algele marine au nceput a fi cultivate cu aproximativ 300 de ani n urm,
ns abia la nceputul anilor 70 ai secolului XX cultivarea lor capt o rspndire i o amploare la nivel mondial.56

7.1. Medii nutritive pentru cultivarea algelor


Mediile nutritive prezint un amestec de substane chimice diferite ca natur
chimic, complexitate, provenien, consisten, care asigur algele cu substane nutritive i energie necesar creterii i dezvoltrii. Actualmente se cunosc
numeroase medii nutritive utilizate la cultivarea algelor.
Mediile nutritive pot fi clasificate dup trei criterii principale:
Dup consisten lichide, semisolide, solide;
Compoziia chimic naturale, sintetice, semisintetice;
Frecvena i scopul utilizrii n laborator uzuale i speciale.57
Mediile nutritive recomandate pentru cultivarea artificial a algelor sunt variate (unele reete de medii nutritive sunt prezentate n Anexa nr. 1). Selectarea
mediilor nutritive depinde de specificul obiectului cultivat i de scopul cultivrii. Mediile nutritive pot fi lichide i solide (agarizat). Mediile lichide se
utilizeaz pentru obinerea biomasei algelor i pentru cercetrile morfologice,
. . : , 1983. 263 .
.. . :
, 2004. 64 .
53
. . . : , 1978.
300 .
54
.., .., .., .. . B: , 2008, .9-18.
55
.., .., o .. . , 1997. 184 .
56
.. (Gracilaria): . B:
M, 2002, . 60, .5070.
57
Bogdan A.T., ogoe I., Cmpeanu Gh. i al. Microbiologia alimentelor. Vol.1. Bucureti,
2011. 294 p.
51

52

41

citologice, fiziologo-biochimice etc. Mediile solide sunt utilizate pentru pstrarea coleciilor algale (muzeu).58
Una dintre cele mai eseniale aspecte ale tehnologiilor de cultivare a algelor
este asigurarea cu elemente necesare nutriiei minerale. Pentru sinteza substanelor biologic active n biomasa algelor este necesar ca acestea s fie asigurate
cu macro- i microelemente. Majoritatea algelor au nevoie de azot pentru sinteza proteinelor. Pentru creterea eficient a algelor mediile nutritive trebuie s
conin i P, K, Mg, S. Calciul, de exemplu, este necesar doar n concentraii
reduse. Printre elementele ce sunt necesare pentru cultivarea algelor cianofite
se enumer i natriul, care face parte din grupa macroelementelor eseniale.

7.1.1. Macroelementele n nutriia mineral a algelor


Macroelementele, de rnd cu microelementele, sunt componente necesare
ale talului algal, au un rol definitoriu i determin intensitatea dezvoltarii lor.59
Elementele biogene sunt acele substane ce intr mereu n componena organismelor i sunt necesare pentru dezvoltare. Dintre acestea un rol deosebit i se
atribuie azotului i fosforului. Azotul intr n componena tuturor moleculelor
proteice, iar fosforul este un component obligatoriu al substanelor nucleare,
avnd un rol important n cadrul reaciilor de oxidoreducere. Caliul, calciul,
sulful i magneziul sunt la fel de necesare ca i azotul i fosforul. Caliul se utilizez n cantiti mari de ctre alge i trebuie s se regseasc n mediile nutritive. Magneziul intr n componena clorofilei, care este un pigment esenial ce
fotosintetizeaz, fiind prezent la multe ncrengturi de alge. Problema privind
stabilirea concentraiei optime de macroelemente este abordat i studiat pn
la ora actual.
Concentraia substanelor din mediul nutritiv de cultivare a algelor care asigur dezvoltarea cea mai nalt a biomasei algale poate fi asociat cu necesitatea de substane nutritive n celulele algale.60
n urma cercetrilor de laborator, .. , .. , ..
o au demonstrat c procesul de cretere a biomasei algelor este condiionat cu consumul de elemente biogene ce se manifest n trei stadii (Fig. 9).

.., .. o . ,
1984. 336 .
59
.., .., .. . . . : , 1989. 605.
60
.. K .
// , 1983, .74-80.
58

42

n urma cercetrilor de laborator .., , .., , .., o au demonstrat


c procesul de cretere a biomasei algelor este condiionat cu consumul de elemente biogene ce
se manifest n trei stadii (Fig. 9).

Fig. 9. Stadiile procesului de consum al substanelor nutritive pe parcursul creterii

Fig.9. Stadiile procesului de consum al substanelor nutritive


pe parcursul creterii
biomasei algale. 61
biomasei algale.61

n stadia A are loc consumul de substane biogene n celulele algale fr majorarea


n stadiuldeA celule.
are locnconsumul
biogene n
celuleleconcomitent
algale frcumanumrului
stadia B de
se substane
realizeaz dividerea
celulelor
consumul
jorarea
numrului
de
celule.
n
stadiul
B
se
realizeaz
dividerea
celulelor
concosubstanelor nutritive, iar n stadia C divizarea celulelor fr consumul substanelor din mediul
mitent
cu(din
consumul
substanelor
nutritive,
nutritiv
contul rezervelor
celulare
interne). iar n stadiul C divizarea celulelor

fr consumul substanelor din mediul nutritiv (din contul rezervelor celulare


Aceste stadii pot doar parial s corespund cu fazele de cretere evideniate dup curba de
interne).
Aceste Astfel,
stadii stadia
pot doar
parial
s corespund
cu fazele
cretere
evideniate
cretere.
A este
o parte
din lagfaz (deoarece
la de
inceputul
lagfazei
nu se produce
dup
curba
de
cretere.
Astfel,
stadiul
A
este
o
parte
din
lagfaz
(deoarece
nici creterea i nici consumul de substane nutritive), iar stadiile B i C se includla n faza
nceputul
lagfazei
nu se produce nici creterea i nici consumul de substane nuexponenial
a creterii.
tritive), iar stadiile B i C se includ n faza exponenial a creterii.
Azotul

Azotul

Numeroase
lucrri
fost
consacrate determinrii
determinrii rolului
chimice,
inclusiv a
Numeroase
lucrri
au au
fost
consacrate
roluluielementelor
elementelor
chimin aviaa
algelor, n
printre
un loc printre
important
l ocup
lucrrile
cercettorilor
ce,azotului,
inclusiv
azotului,
viaacare
algelor,
care
un loc
important
l ocupdin fosta
62 63 64 65 66
62-66
62 63 64 65 66
Uniune
Sovetic
.
lucrrile cercettorilor din fosta Uniune Sovetic.
.., .., ..

.
,..
1997.
184 .

..,
..,


62
..
. , 1997. 184 .

. //
. , 1981, c.139147.
6263

..


1965.
-

..,
..
. ,
272 .
64

.
.
. . ,
1981.
c.139147.
..,

..,//
..

63


..
.
. 1965.
272 .1980, c. 140157.
.
// ..,

.
,
65
64 .. , . // .
.., .., ..
.
.,
1952, c. 392.- . // -

66

..

. . 1980,
c. 140157. . // ,
1945, .14, 4, c.248 253.
61

61

65
.. "" , . // . . . 1952,
c. 392.
43

40

Azotul se conine n apele naturale servind ca surs nutritiv pentru algele ce


habiteaz ecosistemele acvatice.67 Este un element indispensabil pentru biosinteza substanelor proteice, intr n componena moleculelor aminoacizilor, acizilor
nucleici, clorofilelor, alcaloizilor, amidelor etc. Efectul maximal al azotului asupra creterii i dezvoltrii algelor se realizeaz n cazul n care se afl n raport
optim cu fosforul i potasiul.68 Reprezint factorul limitativ pentru algele oleagenoase i este unul din componentele de baz ale mediilor nutritive.69, 70
Dup datele lui . a71, cea mai bun concentraie a azotului pentru
alge este de 5-10 mg/l n forma de NO3. Azotul amoniacal, n comparaie cu cel
nitric, se consum de 10 ori mai mult de algele albastre-verzi. Nitriii la fel pot
fi consumai de alge, dar n prezena lor celulele se modific i capt o form
neobinuit.72
Azotul este folosit n cea mai mare parte de ctre algele albastre-verzi i, ca
rezultat, coninutul lui n celule este mai mare. La algele diatomee coninutul azotului n celule este de 1,53%, la cele verzi de 2-8%, la cianofite variaz de la 7 la
12% n biomasa uscat.73 Metabolismul azotului, aspectul morfologic i nutriia
Spirulinei, dar i a altor alge, n regim diferit de cultivare rmne pn n prezent
neneles n totalitate. La limitarea azotului scade concentraia ficobiliproteinelor
din biomas.74 Reducerea cantitii de azot sub form de nitrat din mediul nutritiv
contribuie la scderea productivitii i a cantitii de proteine din biomasa algal. Cercetrile efectuate de .. i coautorii75 denot c productivitatea
Spirulinei, sinteza proteinelor, clorofileia, cficocianinei i carotenoizilor sunt
direct dependente de concentraia nitratului de azot n mediul nutritiv. Astfel,
s-a demonstrat c concentraiile de 500 mg N/l, 200 mg N/l i 100 mg N/l duc
la creterea semnificativ (8,6 - 8,5% BAU/ m2 zi) a productivitii Spirulinei.
Nivelul proteinelor la variantele 500 i 200 mg N/l se stabilete ncepnd cu a 6-a
67
.., .., .., .., .., .., .., .., .. . ,
2005. 640 .
68
Stancic M. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i Pedagogica, 2003, p.4378.
69
Manabe E., Hiroyuki, and H. Morio. Spirulina Culture for Enhanced Manufacture of
Linolenie Acid, Chem. Abstr, 116:8225, 1992.
70
Kyle D.J. Specialty Oils from Microalgae: Perspective, // Biotechnoloyy of Plant Fats and
Oils, Edited, by J. Rattray, American Oils Chemists Society, Champaiyn, 1991, p.130-143.
71
.. - . // - . .-., 1965, 12-32 c.
72
.. : . ,
1983. 72 .
73
.. , . // .
. ., 1952, c.392.
74
.. . . : , 1990, .1
196.
75
.., .., .., .. P
Spirulina (Artrospira) Platensis (Nordst) Gitler
. // M, 2002, . 62, c.6266.

44

zi i rmne neschimbat pn la a 18-a zi (62 - 52% BAU). La concentraia de


100 mg N/l sunt mai puine proteine, iar de la a 9-a zi pn la a 18-a zi descrete
pn la 30,9% BAU.
Pentru obinerea biomasei algale ieftine putem folosi apele reziduale bogate
n elemente biogene, ceea ce permite reducerea sinecostului mediului nutritiv, i
paralel fiind rezolvat problema purificrii apelor.76, 77
Odat cu creterea productivitii algelor are lor reducerea concentraiei de
azot din mediul de cultivare, fapt ce demonstreaz posibilitatea purificrii apelor reziduale bogate n azot.78 Rezultate semnificative, soldate cu consumul
nalt al azotului, au fost observate i n cazul utilizrii n procesul de purificare
a apelor reziduale de la complexele zootehnice a speciilor de alge Oscillatoria
limnetica, Chlorella vulgaris, Scenedesmus quadricauda, Synechocystis salina.79, 80
Azotul, n special cel amoniacal, servete ca o modalitate de optimizare a
coninutului de acid linolenic n celulele Spirulinei. E.Manabe i H.Morio81
au demonstrat posibilitatea sporirii cantiti de acid linolenic din biomasa
algei Spirulina platensis prin adugarea srii de NH4Cl. Dup 72 ore de la
administrarea azotului amoniacal cantitatea acidului linolenic a crescut ajungnd la valoarea de 15,0 mg/g mas uscat. Coninutul acizilor grai palmitic
i oleic la fel se majoreaz de la 15 la 50 mg/l, dar descrete dup 48 ore de
cultivare.82, 83

Fosforul

Fosforul face parte i el din rndurile elementelor biogene indispensabile


pentru organismele vegetale, ns majorarea cantitii lui este duntoare pentru
ecosisteme. Fosforul contribuie la formarea acizilor nucleici, a unor coenzime
(NADP+, NAD+ etc.), se afl n componena unor lipide complexe, a nucleotidelor etc. Fosforul are o aciune favorabil asupra biosintezei clorofilelor, particip
76
.., .. Platimonas viridis Rouch. // M, 2006, . 70, .52-60.
77
C.. Spirulina platensis (NORDST.)
GEITL. . // , 2007, 74, c.18-20.
78
Besker E.W. Spirulina alga of Life. // Bull. Inst. Oceanolorg., 1993, no12, p.141-155.
79
Faintuch B.L., Sato S., Aquarone E. Use of different nitrogen sources in the production of
biomass of Oscillatoria limnetica. // Afrev. Microbiol., 1992, 23, no 1, p.32- 36.
80
Iachim M. Rolul algelor i unor plante vasculare n procesul de epurare biologic a apelor
reziduale de la complexele zotehnice: Tez de doctor. Chiinu, 2007. 131 p.
81
Manabe E., Morio, and T.Hiroyuki, I.D. Naoka, S.Koji, and M.Tadashi. Influence of
Ammonium Chloride on Growth and Fatty Acid Production by Spirulina Platensis. //Appl.
Biochem. Biotechnol., 34-35: 274-281, 1992.
82
Manabe E., Hiroyuki, and H.Morio. Spirulina Culture for Enhanced Manufacture of
Linolenie Acid. // Chem. Abstr., 116:8225, 1992.
83
Chaudhury B.K. De S., and Bhattacharyya D.K. Effect of Nitroyen Sources on Linolenic
Acid Accumulation in Spirulina platensis. // Jaocs, 1995, vol. 76, no 1, p.153-155.

45

la procesele de fosforilare, n biosinteza i degradarea glucidelor, lipidelor, substanelor proteice. Fosforul este un nutrient care are un rol principal n procesele
metabolice fundamentale, cum sunt respiraia i fotosinteza.84, 85
Limitarea fosforului deregleaz toate procesele metabolice ce in de folosirea
energiei n celulele algelor.86 n cazul insuficienei de fosfor la cultivarea algei
Spirulina maxima se produce ncetinirea fotosintezei i micorarea cantitativ a
acizilor nucleici i eterilor fosfai.87 De rnd cu azotul, fosforul deseori limiteaz
creterea microalgelor n natur.88 Fosforul este administrat algelor n form de
H2PO4 i/sau HPO4.
n cercetrile sale C.. 89 demonstreaz importana fosforului
pentru alga Spirulina platensis. Experienele realizate de ea denot c cantitatea
de fosfor necesar pentru majorarea biomasei algale este de 18,73 mg/l adugate
n mediul Zarrouc. A fost demonstrat i corelaia dintre azot i fosfor ce duce la
creterea biomasei n faza liniar (fiind n raport de 4,3:1).
Stabilirea raportului optim dintre azot i fosfor este important, n special n
cazul cultivii algelor pe ape reziduale, facilitnd astfel selectarea concentraiei
optime.
Insuficiena fosforului mineral reduce sinteza oricrui pigment i blocheaz
sinteza la nivel de transcripie.90 n lipsa fosforului la lumin se distrug chiar i
carotenoizii care, de regul, sunt mai siguri la fotodistrucie.91 Concentraia fosforului din mediul nutritiv de cultivare a algei Spirulina platensis influeneaz
asupra coninutului de pigmeni din celule. .. i .. 92 au
demonstrat c n lipsa fosforului (timp de 6-7 zile) celulele algei Spirulina platensis pierd total pigmenii, dar i pstreaz forma de via. n lipsa fosforului
pigmenii se distrug de 5 ori mai mult dect n lipsa azotului.
Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i
Pedagogic, 1993, p.244-264.
85
Tarmure C. Biochimie structural i metabolic. Cluj- Napoca: Dacia, 1996, p.4358.
86
.., .. Spirulina platensis (NORDST.)
GEITL. . // M, 2002, . 60, .21-26.
87
Baldia S.F., Fukami K., Nuishijima T., Hata Y. Growth response of Spirulina platensis to
somo physico- chemical factors and the kinetics of phosphourus utillization. // EISH, 1995, no2,
p.351-335.
88
Dubinsky Z. Productivity af algae under natural, Handboc of microalgal mass culture. Ed.
Richmond A. Boca Raton CRC. Pres, 1986, p.101- 115.
89
C.. Spirulina platensis (NORDST.) GEITL.
. // , 2007, . 74, c.18-20.
90
Geider R.J, Maklntire H.L., Kana T.M., A dynamic of photoadaptation in phytoplankton. //
Limnol. Oceanorg., 1996, no 1, p.1-15.
91
k .. . // . . , 1989, .1-167.
92
.., .. Spirulina platensis (NORDST.)
GEITL. . // M, 2002, . 60, .21-26.
84

46

.. 93 afirm c la algele albastre-verzi nu se observ o corelaie


strict ntre numrul lor i coninutul de fosfor. Dup datele lui Fogg,94 aceasta
se explic prin faptul c ele au vacuole gazoase ce regleaz flotabilitatea lor i le
permite ca noaptea s coboare n partea de jos a zonei fotice bogat n fosfor, iar
dimineaa din nou s urce la exterior. Este important nu doar concentraia fosforului de una singur, dar i corelaia dintre azot i fosfor. Se consider normal
corelaia dintre azot i fosfor n celulele algelor n raport de 15:1.

Kaliul
Unul dintre elementele nutritive de nenlocuit necesare pentru cultivarea algelor
este kaliul. Kaliul practic nu poate fi nlocuit cu alte elemente, doar n unele procese
individuale el se substituie cu natriu i rubidiu. n celule kaliul se gsete practic
n form solubil i determin structura coloidal chimic a citoplasmei i funcionarea activ a celulei. Cu tatoate c nu intr n componena proteinelor, lipidelor,
glucidelor, este necesar celulelor pentru sinteza lor. Consumul kaliului este realizat
printr-un proces metabolic activ legat de utilizarea luminii i energiei celulare n
condiii autotrofe sau n cazul nutriiei heterotrofe, folosind legturile organice.
Insuficiena acestui element n mediul nutritiv al algelor contribuie la inhibarea fotosintezei i majorarea respiraiei, diminuarea proceselor de biosintez a
glucigelor, lipidelor, protidelor i a diviziunii celulare.
n cazul micorrii concentraiei de kaliu apare cloroza. La adugarea kaliului
n mediul nutritiv de cultivare a algelor se normalizaz procesele de respiraie, de
acumulare a lipidelor i proteinlor.
Necesarul de kaliu pentru biosinteza a 1 kg de biomas uscat a algei Chlorella vulgaris este de 15-16 g. La cultivarea continu a algei Chlorella vulgaris
s-a nregistrat consumul minimal de 10-11 g de kaliu pentru sinteza a 1 kg de
biomas uscat.
Consumul de kaliu de ctre celulele algelor este dependent i de concentraia altor sruri. La concentraia nalt de NaCl (20 g/l) n mediul de cultivare a
algei Chlorella vulgaris se reduce de dou ori consumul de kaliu. Pentru cultivarea microalgelor Spirulina platensis, Dunaliella tertiolecta i Cyanidium
caldarium n scopul obinerii biomasei, necesarul de kaliu este de 1000 mg/l
(n form de KNO3).95
Gh. Neamu96 susine c raportul optim dintre coninutul potasiului intracelular i cel extracelular, la plante, este de 25:1. Potasiul are un rol important
93
.., .. Spirulina platensis (NORDST.)
GEITL. . // M, 2002, . 60, .21-26.
94
Fogg G.E. Phosporus in primary aquatic plants. // Water Res., 1973, no7, vol.12, p.77-89.
95
.. -
o. , 1983. 240 .
96
Neamu G. Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i
Pedagogic, 1993, p.244-264.

47

n biosinteza, transportul i depozitarea glucidelor, reglarea presiunii osmotice


etc. Importana metabolic nsemnat a potasiului rezult i din faptul c este
agent catalitic i un activator a peste 46 de sisteme enzimatice, meninnd un
mediu ionic favorabil activitilor enzimatice. Ionul de potasiu contribuie n mod
substanial la reglarea coninutului de ap din celule, stimuleaz fotosinteza i
biosinteza substanelor proteice. Potasiul are un rol de baz n procesul de meninere funcional normal a celulelor, n reglarea permeabilitii membranelor
citoplasmatice, n metabolismul azotului.97, 98, 99

Magneziul
Magneziul este important pentru alge, fiind component al clorofilei i al multor
altor legturi organice. Are un rol nsemnat n reaciile de fosforilare i contribuie la
meninerea echilibrului compuilor macroergici, precum i la metabolismul acidului fosforic. Intervine aproape n toate procesele metabolice ce necesit ATP.
Insuficiena magneziului, spre exemplu, n mediul nutritiv de cultivare a algei Chlorella vulgaris contribuie la reducerea biosintezei proteinelor, la majorarea coninutului de glucide i la reducerea creterii culturii. Influeneaz asupra
schimbului de acizi nucleici.
Pentru biosinteza a 1 kg de biomas uscat a algei Chlorella vulgaris se consum 4-6 g de magneziu. La cultivarea continu a acestei alge necesitatea n magneziu este de 3,3 g la biosinteza a 1 kg de biomas (recalculat la mas uscat).
Magneziul particip n procesele de biosintez a clorofilei, protidelor, glucidelor, lipidelor etc. Ionii acestui element chimic mresc permeabilitatea membranelor celulare, favorizeaz absorbia fosforului. Magneziul se comport ca un
reglator al metabolismului calciului. Absorbia magneziului n celulele plantelor
este reglat de raportul dintre potasiu i magneziu i de pHul mediului.100, 101
Magneziul este utilizat pentru cultivarea algelor, de regul, n form de sulfat
de magneziu care, pe lng magneziu, asigur celulele i cu sulf. Ca surs de
magneziu poate fi utilizat i carbonatul de magneziu, care asigur n paralel i
stabilizarea pH-ului la utilizarea n componena mediilor nutritive a legturilor
acide. Pentru cultivarea industrial se utilizeaz kaliumagneziu, ce servete ca
surs de magneziu, kaliu i sulf.

Sulful

Sulful este unul dintre elementele necesare pentru cultivarea algelor. Intr n
componena proteinelor, fermenilor, peptidelor, aminoacizilor ce conin sulf, fiTarmure C. Biochimie structural i metabolic. Cluj- Napoca: Dacia, 1996, p.4358.
Chiu I. Biochimie. Vol. I. Timioara: Mitron, 1999, p.94111.
99
.. -
o. , 1983. 240 .
100
Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic
i Pedagogic, 1993, p.244-264.
101
Stancic M. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i Pedagogic, 2003, p.4378.
97
98

48

ind un component al multor altor legturi organice din celulele algelor. Unele
legturi ale sulfului particip n cadrul reaciilor de oxidoreducere, n biosinteza
i metabolismul multor substane. n particular, rolul sulfului este important n
determinarea proprietilor i structurii de transformare a moleculelor proteice.
Majoritatea algelor consum sulful din legturile oxidative sulf-sulfai.
Sulful particip n cadrul metabolismului general i se reduce (de la sulfai
pn la sulfhidril). n unele condiii specifice n celule se poate realiza procesul
de recuperare a sulfailor. Sulful anorganic din celulele algelor nu permite acumularea producenilor toxici ai oxidrii aminoacizilor ce conin sulf.
La reducerea concentraiei de sulf n mediul nutritiv pn la 3,3 g la 1 kg de biomas algal (recalculat la masa uscat) celulele algei Chlorella vulgaris resimt
insuficiena lui. Acest lucru condiioneaz majorarea dimensional a celulelor
acestei alge, ceea ce indic c se modific mecanismul de dividere celular.
Ca surs de sulf n mediile nutritive de cultivare a algelor cel mai frecvent
se utilizeaz sulfaii sau alte forme ale sulfului. La cultivarea unei alte alge din
genul chlorela (Chlorella pyrenoidosa) poate fi utilizat sulful din tiosulfai, din
aminoacizii metionina i cistina. n mediile nutritive sulful este sub forma sulfailor (sau a acidului sulfuric).
La cultivarea speciilor din genul Chlorela coninutul de sulf n celule, de obicei, se situeaz ntre 4 i 11 g la 1 kg biomas uscat.102
Sulful se introduce n mediile nutritive n forma sulfailor de magneziu, de
kaliu, de amoniu, de zinc, de fier, de cupru.

Calciul
Un alt element nutritiv necesar pentru cultivarea algelor este calciul. Comparativ
cu plantele superioare, algele au o necesitate mai mic de calciu. Ionii de calciu au
un rol important n stabilizarea structurii membranare, permit absorbia de ctre celule a anionilor i cationilor. ndeprtarea calciului determin creterea schimbului
fluxului de ioni din celul. Acest element micoreaz permeabilitatea membranelor
protoplasmatice, modific pH-ul mediului deplasndu-l spre valori bazice. mpiedic ieirea potasiului din celule n timpul mbtrnirii acestora. Pe lng acestea,
103, 104, 105
se evideniaz i aciunea bicatalitic n numeroase procese biochimice.103-105
Calciul poate fi exclus din mediul nutritiv de cultivare a algelor prin tratarea special a mediilor. Ca rezultat, are loc micorarea creterii biomasei algei
Chlorella vulgaris. La adugarea a 0,001-0,2 mg/l de Ca dezvoltarea culturii de
clorel revine la norm.
102
.. - . , 1983. 240 .
103
Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic
i Pedagogic, 1993, p.244-264.
104
Stancic M. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i Pedagogic, 2003, p.4378.
105
CachitaCosma D., Deliu C., Rakosy-Tican L., Ardelean A. Tratat de biotehnologie
vegetal. Vol. I. Cluj- Napoca: Dacia, 2003, p.10-18.

49

La alte alge, cum ar fi specile genurilor Chlorococcum, Amphora .a., insuficiena calciului ncetinete deplasarea.
Administrarea acestui element n doz de 0,4 mg/l contribuie la acumularea
cuprului n celulele algei scenedesmusului i la inhibarea creterii biomasei. Se
consider c calciul ptruns n celule apr liganda locul cu aciune toxic a
cuprului.
Calciul, n forma carbonatului de calciu, contribuie la reglarea pH-ului mediului nutritiv, n cazul utilizrii legturilor fiziologice acide. Carbonatul de calciu
este puin solubil i nu contribuie la bazificarea puternic a mediului nutritiv.
ns, utilizarea carbonatului de calciu, n unele condiii, poate contribui la infectarea culturilor algale cu bacterii parazite.
Pentru stabilizarea pHului mediului nutritiv de cultivare a algelor se recomand utilizarea carbonatului de magneziu, care nu afecteaz cultura.
n unele cazuri pentru cultivarea industrial a algelor poate fi utilizat apa de
suprafa sau subteran, care are n componena sa calciu.106

Sodiul
Natriul este un element necesar pentru cultivarea algelor cianofite; la excluderea lui din mediu nutritiv multe culturi se dezvolt slab. Lipsa natriului n mediul nutritiv pentru cultivarea algei Anabaena cylindrica contribuie la reducerea
concentraiei clorofilei i a coninutului de azot organic din celule. n cazul insuficienei natriului algele elimin din celule n form organic o parte mare a
carbonului fixat anterior.
Rezistena algelor la natriu, n form de NaCl, este diferit. Mai puin rezistente sunt formele filamentoase, multe din ele nu rezist la concentraia de 10 g/l,
iar alte alge i stopeaz creterea la concentraia de 20 g/l. Algele cianofite unicelulare pot crete pe medii nutritive cu concentraii de 30 g/l NaCl, iar la 50-90
g/l creterea lor, de regul, se oprete. Sunt ns unele specii, cum ar fi cele din
genurile Microcystis, Synechocystis, Aphanocapsa, Myxosarcina, care pot crete
i la concentraii de 90 g/l NaCl.
Unele cercetri demonstreaz c n cazul surplusului de NaCl n mediul nutritiv de cultivare a algelor se prelungesc fazele de cretere i se frneaz procesul
de reproducere a celulelor algale. Se minimizeaz procesul de sintez a clorofilei,
dar fotosinteza continue i, n rezultat, se produc modificri morfologice (crete
volumul i masa celular). Nu se produc modificri ale concentraiei proteinelor
i glucidelor din celulele algale. n cazul excesului de NaCl n mediul nutritiv de
cultivare se produce plasmoliza, se decoloreaz cromatoforii, se stopeaz reproducerea i celulele mor.
Sodiul se gsete n plante, predominant n lichidele extracelulare. Contribuie la reglarea presiunii osmotice i la circulaia apei. nlocuiete potasiul
.. - . , 1983. 240 .
106

50

n unele procese biochimice, contribuind la economisirea acestui element. Se


gsete n cantiti mai mari n algele marine i n plante terestre ce habiteaz pe terenuri srturoase. n plante sodiul se gsete sub form de combinaii anorganice (cloruri, azotai, fosfai, sulfai, carbonai), precum i organici
(axalai, tartrai de sodiu etc.). Cantitile mici de sodiu stimuleaz biosinteza
proteinelor i activarea nitratreductazei. n caren de sodiu sporete activitatea
nitratreductazei, care determin transformarea nitrailor n nitrii. Iat de ce
este absolut necesar introducerea n mediu nutritiv al Spirulinei a sodiului,
clorului i potasiului.107, 108

7.1.2. Macroelementele n nutriia mineral a algelor cianofite


Stabilirea concentraiilor optime de macroelemente ce trebuie asigurat pentru
cultivarea algelor cianofite prezint un mare interes att tiinific, ct i practic.
Determinarea concentraiilor optime de macroelemente faciliteaz esenial cercetrile biotehnologice consacrate optimizrii mediilor nutritive pentru cultivarea
algelor n scopul majorrii coninutului de substane biologic active din biomasa
algal. Stabilirea concentraiilor optime de macroelemente va permite aplicarea
uoar a metodelor continue i semicontinue de cultivare a algelor. Dozele stabilite vor permite identificarea noilor surse netradiionale de medii nutritive pentru
cultivarea algelor, realizarea experimentelor de studiere a speciilor de alge, precum i cultivarea periodic uoar a acestora.
Concentraiile optime de macroelemente se caracterizeaz n funcie de poziia sistematic a algelor. Concentraiile optime de macroelemente necesare pentru
cultivarea algelor cianofite studiate au fost stabilite prin calculul acestor elemente
din recetele cu medii nutritive (Anexa nr.1, Anexa nr.2).
Conform datelor din tabelele 8 i 9, algele cel mai frecvent cultivate aparin la
6 ordine, 17 familii i 28 genuri.
Indiferent de apartenena sistematic (gen, familie, ordin etc.), unele specii de
alge au necisitatea n diferite elemente de o anumit concentraie.
Astfel, pentru cultivarea algelor cianofite din genurile Synechocystis, Synechococcus, Merismopedia, Aphanothece, Gloeocapsa, Myxosarcina, Chamaesiphon,
Mastigocladus, Nostoc, Nodularia, Microchaete, Scytonema, Phormidium, Symploca, Lyngbya, Microcoleus, Plectonema, Cyanotheca este necesar ca mediile
nutritive s conin macroelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): N-139,36;
P-35,56; K-476,51; Mg-19,72; S-27,12; Ca-54,52; Na-56,64 (Tab. 8).
Algele anumitor genuri au preferine specifice fa de componena mediului
nutiritiv. Dintre acestea putem enumera urmtoarele genuri:

Coccopedia (concentraia optim a macroelementelor este (mg/l): N-84,85;
P-53,34; K-134,68; Mg-19,72; S-213,53; Ca-54,52; Na-196,34);
107
108

Chiu I. Biochimie. Vol. I. Timioara: Mitron, 1999, p.94111.


Tarmure C. Biochimie structural i metabolic. Cluj- Napoca: Dacia, 1996, p.4358.

51


Eucapsis (necesit asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N41,2-139,36; P-35,56; K-264,11-476,51;
Mg-7,39-19,72; S-27,12-46,14; Ca-15,16-54,52; Na- 56,64-77,45);

Anabaenopsis (poate fi cultivat prin asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele macroelemente (mg/l) ): N0-85,44; P-0,06-7,11; K-0,12-7,11;
Mg-0,03-7,39; S-0,03-9,75; Ca-0,1-1; Na- 0-0,09);

Cylindrospermum (trebuie ca mediile nutritive s conine urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N0-279,85; P-0,06-53,35; K-0,12224,42; Mg-2,46-19,72; S-3,25-44,19; Ca-0,1-40; Na- 0-108,4);

Tolypothrix i Oscillatoria (mediile nutritive trebuie s conin urmtoarele macroelemente (mg/l); N0-139,36; P-35,56; K-476,51; Mg-19,72;
S-27,12; Ca-54,52; Na-56,64);

Anabaena (prefer macroelementele (mg/l): N0-279,85; P-7,11-35,56; K7,11-476,51; Mg-7,39-19,72; S-9,75-27,12; Ca-1-54,52; Na- 0-414,58);

Calothrix (concentraia macroelementelor trebuie s fie urmtoarea (mg/l):
N0-279,85; P-4,48-53,35; K- 0,12-476,51; Mg-19,72; S-3,25-44,19; Ca0,1-54,52; Na-0-108,4) (Tab. 8).
Cea mai mare necesitate n macroelemente au speciile de alge cianofite din
genurile Microcystis (N279,85 mg/l; P-61,88 mg/l; K- 937,42 mg/l; Mg-24,25
mg/l; S-32,04,19 mg/l; Ca-29,99 mg/l; Na-46,02 mg/l) i Spirulina (N412 mg/l;
P-88,92 mg/l; K- 713,21 mg/l; Mg-19,72 mg/l; S-210 mg/l; Ca-25,55 mg/l; Na676,2 mg/l) (Tab. 8). Astfel, constatm c pentru cultivarea speciilor de alge din
genurile Microcystis i Spirulina vor fi necesare cheltuieli mai mari pentru mediile nutritive, deoarece au nevoie de cantiti mai nalte de macroelemente.
De menionat c concentraia azotului pentru genurile Anabaenopsis, Cylindrospermum, Tolypothrix, Oscillatoria, Anabaena i Calothrix poate fi egal cu
zero. Acest lucru se explic prin faptul c speciile acestor genuri au capacitatea
de fixare biologic a azotului atmosferic. Totui, pentru cultivarea industrial a
lor n scopul obinerii biomasei furajere, alimentare sau farmaceutice trebuie asigurat un coninut mai nalt de azot (indicat anterior).
La nivel de familii, necesitatea de macroelemente n mediile nutritive este
urmtoarea:

Coccobactreaceae, Merismopediaceae, Pleurocapsaceae, Dermocarpaceae, Chamaesiphonaceae, Mastigocladaceae, Nostocaceae, Nodulariaceae, Schizothrichaceae, Plectonemataceae, Scytonemataceae (concentraia optim a macroelementelor mg/l este de: N-139,36; P-35,56; K-476,51;
Mg-19,72; S-27,12; Ca-54,52; Na-56,64).

Holopediaceae (mediile nutritive trebuie s conin macroelementele specifice genului Coccopedia);

Gloeocapsaceae (prefer mediile nutritive cu urmtoarele macroelemente
(mg/l): N-41,2-139,36; P-35,56; K-264,11-476,51; Mg-7,39-19,72; S-27,
12-46,14; Ca-15,16-54,52; Na-56,64-77,45).
52


Anabaenaceae (necesarul de macroelemente este urmtorul (mg/l): N0279,85; P-0,06-53,35; K-0,12-224,42; Mg-2,46-19,72; S-3,25-44,19; Ca0,1-54,52; Na- 0-414,58);

Concentraia de microelemente necesar pemtru cultivarea algelor din familia Scytonemataceae este asemntoare cu cea a familiilor Coccobactreaceae, Merismopediaceae, Pleurocapsaceae, Dermocarpaceae, Chamaesiphonaceae, Mastigocladaceae, Nostocaceae, Nodulariaceae, Schizothrichaceae i Plectonemataceae, excepie fcnd azotul, care poate s
lipseasc;

Rivulariaceae (este repartizat de genul Calothrix, respectiv i macroelementele sunt specifice acestui gen);

Microcistidaceae pot fi cultivate pe medii nutritive asigurate cu urmtoarele
macroelemente (mg/l): N-139,36-279,85; P- 35,56-61,88; K-47, 51-937,42;
Mg-19,72-24,25; S-27,12-32,04; Ca-29,99-54,52; Na-46,02-56,64);

Oscillatoriaceae (mediile nutritive trebuie s posede urmtoarea componen de microelemente (mg/l): N0-412,85; P-35,56-88,92; K- 476,51713,21; Mg-19,72; S-27,12-210; Ca-25,55-54,52; Na-56,64-676,2).
La nivel de clase necesitatea n macroelemente este urmtoarea:

Chroococceae (mediile nutritive trebuie s conin macroelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): N-41,2-279,85; P-35,56-61,88; K-134,
68-937,42; Mg-7,39-24,25; S-27,12-24,25; Ca-15,16-54,52; Na-56,64196,34);
Chamaesiphoneae (macroelementele trebuie s fie aceleai ca i pentru
ordinele, familiile i genurile care o reprezint);
Hormogoneae (concentraia macroelementelor variaz i se prezint astfel (mg/l): N-0-412,85; P-0,06-88,92; K-0,12-713,21; Mg-0,03-19,72;
S-0,03-210; Ca-0,1-54,52; Na-0-676,2).

.

53

54

Taxoni

Gloeocapsaceae

Holopediaceae
Merismopediaceae
Microcistidaceae

Familie
Coccobactreaceae

Oscillatoriales

Schizothrichaceae
Plectonemataceae

Rivulariaceae
Oscillatoriaceae

Scytonemataceae

Nodulariaceae

Pleurocapsaceae
Dermocarpaceae
Chamaesiphonaceae
Mastigocladales Mastigocladaceae
Nostocales
Nostocaceae
Anabaenaceae

Pleurocapsales
Dermocarpales

Ordin
Chroococcales

Myxosarcina
Cyanotheca
Chamaesiphon
Mastigocladus
Amorphonostoc
Anabaena
Anabaenopsis
Cylindrospermum
Nodularia
Microchaete
Scytonema
Tolypothrix
Calothrix
Oscillatoria
Spirulina
Phormidium
Symploca
Lyngbya
Microcoleus
Plectonema

Gen
Synechocystis
Synechococcus
Coccopedia
Merismopedia
Microcystis
Aphanothece
Gloeocapsa
Eucapsis
139,36
139,36
139,36
139,36
139,36
0-279,85
0-85,44
0-279,85
139,36
139,36
139,36
0-139,36
0-279,85
0-139,36
412
139,36
139,36
139,36
139,36
139,36

N
139,36
139,36
84,85
139,36
279,85
139,36
139,36
41,2-139,36
35,56
35,56
35,56
35,56
35,56
7,11-35,56
0,06-7,11
0,06-53,35
35,56
35,56
35,56
35,56
4,48-53,35
35,56
88,92
35,56
35,56
35,56
35,56
35,56

P
35,56
35,56
53,34
35,56
61,88
35,56
35,56
35,56-48,19

K
476,51
476,51
134,68
476,51
937,42
476,51
476,51
364,11
476,51
476,51
476,51
476,51
476,51
476,51
7,11-476,51
0,12-7,11
0,12-224,42
476,51
476,51
476,51
476,51
0,12-476,51
476,51
713,21
476,51
476,51
476,51
476,51
476,51

S
27,12
27,12
213,53
27,12
32,04
27,12
27,12
27,12
46,14
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
7,39-19,72 9,75-27,12
0,03-7,39 0,03-9,75
2,46-19,72 3,25-44,19
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
3,25-44,19
19,72
27,12
19,72
210
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12
19,72
27,12

Mg
19,72
19,72
19,72
19,72
24,25
19,72
19,72
7,39-19,72

Concentraia macroelementelor, mg/l

Tabelul 8

Ca
Na
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
196,34
54,52
56,64
29,99
46,02
54,52
56,64
54,52
56,64
15,16
- 56,64 54,52
-77,45
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
1-54,52
0-414,58
0,1-1
0-0,09
0,1-40
0-108,4
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
0,1-54,52 0-108,4
54,52
56,64
25,55
676,2
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64
54,52
56,64

Concentraia macroelementelor necesar pentru cultivarea algelor cianofite

Tabelul 9
Coninutul macroelementelor necesare pentru cultivarea algelor cianofite
din diferite clase
Clasa
Chroococceae
Chamaesiphoneae
Hormogoneae

N
P
41,2-279,85 35,56-61,88

Concentraia macroelementelor, mg/l


K
Mg
S
Ca
Na
134,68-937,42 7,39-24,25 27,12-24,25 15,16-54,52 56,64-196,34

139,36

35,56

476,51

19,72

27,12

54,52

56,64

0-412

0,06-88,92

0,12-713,21

0,03-19,72

0,03-210

0,1-54,52

0-676,2

7.1.3. Macroelementele n nutriia mineral a algelor verzi


Pentru cultivarea algelor verzi sunt utilizate medii nutritive care, n majoritate,
se deosebesc de mediile aplicate pentru cultivarea algelor cianofite. Concentraia
macroelementelor necesar pentru cultivarea algelor verzi variaz n funcie de
poziia sistematic, specie, gen, familie, ordin i clas.
Nutriia mineral a algelor verzi are unele asemnri, dar i deosebiri, n funcie de gen.
Preferinele genurilor algelor verzi n nutriie mineral se prezint astfel:

Genurile Haematococus,Chlamydomonas, Stichococcus, Ulothrix, Chlorella, Scenedesmus prefer urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l):
N-0,014-139,36; P-0,002-35,56; K-0,004-476,51; Mg-0,001-19,72; S-0,00127,12; Ca-0-96,6; Na-0-56,64. Raportul dintre N:P:K:Mg:S:Ca:Na este de la
1:0,14:0,28:0,07:0,07:0:0 pn la 1:0,25:3,42:0,14:0,19:0,69:0,41;

Genurile Trentepohlia i Dictyococcus, Pediastrum, Kirchneriella mediul
nutritiv trebuie asigurat cu urmtoarele macroelemente (mg/l): N- 14,67; P11,86; K- 68,61; Mg- 3,28; S-5,81; Ca-0,43; Na-0,68. Raportul optim dintre
N:P:K:Mg:S:Ca:Na este urmtorul: 1:0,81:4,68:0,22:0,39:0,03:0,05);

Genurile Chodatella, Coelastrum, Dictyosphaerium, Staurastrum au urmtoarele preferine de macroelemente (mg/l): N- 139,36; P- 35,56; K-476,51;
Mg-19,72; S-27,12; Ca-96,6; Na-56,64. Raportul dintre N:P:K:Mg:S:Ca:Na
este urmtorul: 1:0,25:3,42:0,14:0,19:0,69:0,41;

Genurile Ankistrodesmus, Tetraedron, Chlorococcum, Neochloris, Coccomyxa au nevoie de macroelemente n urmtoarele doze (mg/l): N- 14,67139,36; P-11,86-35,56; K- 68,61-476,51; Mg- 3,28-19,72; S-5,81-27,12;
Ca-0,43-96,6; Na-0,68-56,64. Raportul dintre N:P:K:Mg:S:Ca:Na este
de la 1:0,81:4,68:0,22:0,39:0,03:0,05 pn la 1:0,25:3,42:0,14:0,19:0,69:
0,41;

Genul Asteromonaspoate poate fi cultivat prin asigurarea urmtoarelor
concentraii de macroelemente (mg/l): N-0,014-14,67; P-0,002-11,86;
K-0,004-68,61; Mg-0,001-3,28; S-0,001-5,81; Ca-0-0,43; Na-0-0,68. Raportul dintre N:P:K:Mg:S:Ca:Na este n limitele 1:0,14:0,28:0,07:0,07:0:
0 1:0,81:4,68:0,22:0,39:0,03:0,05.
55

Genul Hydrodictyon poate fi cultivat pe medii care conin urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N-14,67-41,54; P- 11,86-31,12;
K-68,61-78,56; Mg-3,28-7,39; S-5,81-9,75; Ca-0,43-15,16; Na-0,68-78,005.
Raportul dintre N:P:K:Mg:S:Ca:Na este de la 1:0,81:4,68:0,22:0,39:0,03:0,05
pn la 1:0,75:1,89:0,18:0,23:0,36:1,88.

Genul Dunaliella mediile nutritive trebuie s fie mai bogate n macroelemente. Concentraia macroelementelor ce trebuie asigurat este urmtoarea
(mg/l): N-349,36; P-45,52; K-1024,26; Mg-4930; S-6505,67; Ca-0; Na45627,74.
La nivel de familii, necesitatea macroelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor este urmtoarea:

Chlamydomonadaceae i Ulotrichaceae este necesar ca mediile nutritive s conin urmtoarele concentrai de macroelemente (mg/l): N-0,014139,36; P-0,002-35,56; K-0,004-476,51; Mg-0,001-19,72; S-0,001-27,12;
Ca-0-96,6; Na-0-56,64;
Ankistrodesrmaceae prefer macroelemente n urmtoarele cantiti
(mg/l): N-14,67-139,36; P-11,86-35,56; K- 68,61-476,51; Mg- 3,28-19,72;
S-5,81-27,12; Ca- 0,43-96,6; Na- 0,68-56,64.

Trentepohliaceae i Selenastraceae pot fi cultivate pe medii ce conin urmtoarele macroelemente (mg/l): N- 14,67; P- 11,86; K- 68,61; Mg- 3,28;
S-5,81; Ca- 0,43; Na-0,68.

Asteromonadaceae pot fi cultivte pe medii cu urmtorul coninut de macroelemente (mg/l): N-0,014-14,67; P- 0,002-11,86; K-0,004-68,61; Mg0,001-3,28; S-0,001-5,81; Ca-0-0,43; Na-0-0,68.

Chlorellaceae i Scenedesmaceae concentraia macroelementelor din
mediile nutritive este urmtoarea (mg/l): N-0,014-139,36; P-0,002-35,56;
K-0,004-476,51; Mg-0,001-19,72; S-0,001-27,12; Ca-0-96,6; Na-0-56,64;

Chlorococcaceae pot fi cultivate pe medii nutritive cu urmtoarele
concentraii de microelemente (mf/l): N-14,67-139,36; P-11,86-35,56; K68,61-476,51; Mg- 3,28-19,72; S-5,81-27,12 ; Ca- 0,43-96,6; Na- 0,6856,64;
Oocystaceae, Coelastraceae, Botryococcaceae, Desmidiaceae pot fi cultivate pe medii nutritive ce conin macroelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): N-139,36; P-35,56; K-476,51; Mg-19,72; S-27,12; Ca-96,6;
Na-56,64;
Hydrodictyaceae concentraia macroelementelor n mediul nutritiv trebuie s fie urmtoarea (mg/l): N-14,67-41,54; P- 11,86-31,12; K-68,6178,56; Mg-3,28-7,39; S-5,81-9,75; Ca-0,43-15,16; Na-0,68-78,005;

Dunaliellaceae speciile pot fi cultivare pe medii nutritive ce conin macroelemente specifice genului Dunaliella.
La nivel de ordin concentraiile de macroelemente necesre de a fi asigurate n
mediile nutritive se prezint astfel:
56


Chlamydomonadales pot fi cultivate pe medii nutritive ce conin macroelemente, menionate mai sus, pentru familia Chlamydomonadaceae;

Ulotrichales i Chlorococcales pot fi cultivate pe medii untritive ce conin urmtoarele macroelemente (mg/l): N-0,014-139,36; P-0,002-35,56;
K-0,004-476,51; Mg-0,001-19,72; S-0,001-27,12; Ca-0-96,6; Na-0-56,64;
Volvocales pentru a fi cultivat trebuie s fie asigurat cu macroelemente n
urmtoarele concentraii (mg/l): N-349,36; P-45,52; K-1024,26; Mg-4930;
S-6505,67; Ca-0; Na-45627,74;

Desmideales a fost studiat doar o familie i un gen. Pentru cultivarea
acestor specii este necesar ca mediile nutritive s conin macroelemete,
menionate mai sus, pentru genul Staurastrum.
Analiza concentraiei macroelementelor necesare pentru cultivarea diferitelor
clase sistematice ale algelor verzi se prezint astfel:

Chlorococcophyceae i Ulotrichophyceae este necesar s asigurm mediile nutritive practic cu aceleai concentraii de macroelemente, excepie
fcnd Na, care pentru algele din clasa Chlorococcophyceae este mai nalt
(0-78,005 mg/l);
Zygnematophyceae poate fi cultivat pe medii nutritive cu urmtoarele
concentraii de macroelemente (mg/l): N-139,36; P-35,56; K-476,51; Mg19,72; S-27,12; Ca-96,6; Na-56,64;

Volvocophyceae are cea mai mare cerin fa de macroelemente. Pentru
cultivarea speciilor din clasa Volvocophyceae mediile nutritive trebuie
s conin urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N-0,014349,36; P-0,002-45,52; K-0,004-1024,26; Mg-0,001-4930; S-0,0016505,67; Ca-0-96,6; Na-0-45627,74 (Tab. 11).
Astfel, constatm c odat cu ascendena n treapta sistematic de la specie
la clas se observ variaii mari ale concentraiilor de macroelemente necesare
pentru cultivarea algelor verzi.

57

58

Volvocales
Desmideales

Dunaliellaceae
Desmidiaceae

Selenastraceae
Scenedesmaceae

Hydrodictyaceae

Oocystaceae
Coelastraceae
Botryococcaceae

Chlorococcaceae

Trentepohliaceae
Ankistrodesrmaceae
Asteromonadaceae
Chlorellaceae

Ulotrichaceae

Ulotrichales

Chlorococcales

Familie
Chlamydomonadaceae

Ordin
Chlamydomonadales

Taxoni

0,014-14,67

0,002-11,86 0,004-68,61

0,001-3,28

0,001-5,81

K
Mg
S
0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
11,86
68,61
3,28
5,81
11,86-35,56 68,61-476,51 3,28-19,72 5,81-27,12

P
0,002-35,56

Dunaliella
Staurastrum

Pediastrum
Kirchneriella
Scenedesmus

14,67
11,86
68,61
3,28
5,81
14,67
11,86
68,61
3,28
5,81
0,014-139,36 0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12
349,36
45,52
1024,26
4930
6505,67
139,36
35,56
476,51
19,72
27,12

0,014-139,36 0,002-35,56 0,004-476,51 0,001-19,72 0,00127,12


14,67-139,36 11,86-35,56 68,61-476,51 3,28-19,7
5,81-27,12
Tetraedron
Chlorococcum 14,67-139,36 11,86-35,56 68,61-476,51 3,28-19,72 5,81-27,12
14,67-139,36 11,86-35,56 68,61-476,51 3,28-19,7
5,81-27,12
Neochloris
14,67-139,36 11,86-35,56 68,61-476,51 3,28-19,72 5,81-27,12
Coccomyxa
11,86
68,61
3,28
5,81
Dictyococcus 14,67
139,36
35,56
476,51
19,72
27,12
Chodatella
139,36
35,56
476,51
19,72
27,12
Coelastrum
35,56
476,51
19,72
27,12
Dictyosphae- 139,36
rium
5,81-9,75
Hydrodictyon 14,67-41,54 11,86-31,12 68,61-78,56 3,28-7,39

Chlorella

Asteromonas

Gen
N
Haematococus 0,014139,36
Chlamydomo- 0,014139,36
nas
Stichococcus 0,014139,36
0,014Ulothrix
139,36
Trentepohlia 14,67
Ankistrodesmus 14,67-139,36

Concentraia macroelementelor, mg/l

0
96,6

45627,74
56,64

0,6878,005
0,68
0,68
0-56,64

0,68-56,64
0,68-56,64
0,68-56,64
0,68-56,64
0,68
56,64
56,64
56,64

0,43-96,6
0,43-96,6
0,43-96,6
0,43-96,6
0,43
96,6
96,6
96,6
0,4315,16
0,43
0,43
0-96,6

0-56,64

0-0,68
0-96,6

0-0,43

0,68
0,68-56,64

0-56,64

0-96,6
0,43
0,43-96,6

0-56,64

0-56,64

0-96,6
0-96,6

Na
0-56,64

Tabelul 10

Ca
0-96,6

Coninutul macroelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor verzi, mg/l

Tabelul 11
Concentraia macroelementelor necesar pentru cultivarea diferitelor
clase de alge verzi
Clas
Chlorococcophyceae
Ulotrichophyceae
Zygnematophyceae
Volvocophyceae

N
0,014-139,36

P
0,002-35,56

Concentraia macroelementelor, mg/l


K
Mg
S
0,004-476,51 0,001-19,72
0,001-27,12

Ca
0-96,6

Na
0-78,005

0,014-139,36

0,002-35,56

0,004-476,51

0,001-19,72

0,001-27,12

0-96,6

0-56,64

139,36

35,56

476,51

19,72

27,12

96,6

56,64

0,001-4930

0,001-6505,67

0-96,6

0-45627,74

0,014-349,36

0,002-45,52 0,004-1024,26

7.1.4. Macroelementele n nutriia mineral a algelor diatomee, roii,


galben-verzi
innd cont de faptul c algele diatomee, roii i cele galben-verzi prezint interes mai redus pentru cultivare, din aceste ncrengturi am analizat doar
unii reprezentani ai acestora ce sunt mai frecvent cultivai. Astfel, informaia
prezentat este specific n general genurilor analizate i speciilor n particular.
De aceea, necesarul de macroelemente specific pentru familii, ordine i clase
de alge diatomee, roii i cele galben-verzi nu poate fi abordat cu exactitate,
deoarece aceste uniti taxonomice ntrunesc mult mai multe specii care nu au
fost analizate.
Pentru cultivarea algelor diatomee din genul Nitzschia mediul nutritiv trebuie asigurat cu urmtoarele macroelemente: N-139,36 mg/l; P-35,56 mg/l;
K-476,51 mg/l; Mg-19,72 mg/l; S-27,12 mg/l; Ca-96,6 mg/l; Na-56,64 mg/l
(Tab. 12). Aceste concentraii sunt caracteristice i pentru cultivarea unor specii
de alge verzi, deaoarece sunt cultivate pe acelai mediu nutritiv.
Nutriia mineral cu macroelemente pentru cultivarea algelor roii este mai
mare comparativ cu cultivarea speciilor din genul Nitzschia. Algele roii analizate aparin genurilor Porphyridium i Cyanidium, care au necesitate variat de
macroelemente din mediul nutritiv. Speciile din genul Porphyridium pot fi cultivate pe medii cu urmtoarele concentraii de macroelemente (mg/l): N-202,63;
P-88,2; K-713,97; Mg-242,56; S-320,04; Ca-44,12; Na-493,54. Concentraia
macroelementelor pentru nutriia mineral a algelor din genul Cyanidium este
mai mic comparativ cu speciile genului Porphyridium. Concentraia optim a
macroelementelor pentru cultivarea speciilor de alge din genul Cyanidium este
urmtoarea (mg/l): N-247,2; P-6,4; K-16,16; Mg-3,54; S-4,68; Ca-8,18; Na- 9
(Tab. 13).
Pentru cultivareea algelor galben-verzi concentraia macroelementelor este
mai redus dect pentru cultivarea algelor roii. Concentraiile macroelemen59

telor variaz i n funcie de genul algelor. Cultivarea algelor din genul Chloridella poate fi realizat pe medii ce conin urmtoarele doze de macroelemente
(mg/l): N-14,67; P- 11,86; K-68,61; Mg-3,28; S-5,81; Ca-0,43; Na-0,68. Cele
din Pleurochloris necesit cantiti variate de macroelemente (mg/l): N-0,01414,67; P- 0,002-11,86; K-0,04-68,61; Mg-0,001-3,28; S-0,001-5,81; Ca-0-0,77;
Na-0,68. Algele din genul Chlorocloster au preferine mai mari de macroelemente (de 1,2-99 ori) dect cele din genul Pleurochloris (Tab. 14)

60

61

Ordin

P
476,51

K
19,72

Mg
27,12

S
96,6

Ca

Ordin

Taxoni
Familie

Gen

Mg

Ca

Concentraia macroelementelor, mg/l


Na

Tabelul 13

56,64

Na

Tabelul 12

Ordin

Heterococcales

Heterococcophyceae

Familie
Pleurochloridaceae

Taxoni

Chlorocloster 41,2

53,16 83,94

0,014- 0,002- 0,0414,67 11,86 68,61

68,61

Pleurochloris

11,86

P
14,67

Chloridella

Gen

5,81

0,43

Ca

0,68

Na

7,39

9,82

15,97

67,62

0,001- 0,001- 0-0,77 0,68


3,28
5,81

3,28

Mg

Concentraia macroelementelor, mg/l

Tabelul 14
Coninutul macroelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor galben-verzi, mg/l

Clas

Rhodellophyceae Porphyridiales Porphyridiaceae Porphyridium 202,63 88,2 713,97 242,56 320,04 44,12 493,54

Clas

Gen

Nitzschiaceae Nitzschia 139,36 35,56

Familie

Concentraia macroelementelor, mg/l

Coninutul macroelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor roii, mg/l

Pennatophyceae Raphinales

Clas

Taxoni

Coninutul macroelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor diatomee, mg/l

7.2. Microelementele n nutriia mineral a algelor


Microelementele se manifest deseori n calitate de factori limitativi ai creterii celulelor algale. Sunt necesare n cantiti mici, dar au o importan deosebit pentru cultivare, deoarece intr n componena multor fermeni. n categoria lor pot fi incluse 10 cele mai importante elemente: Fe, Mn, Zn, Cu, B, Si,
Mo, Cl, V, Co. Din punct de vedere fiziologic, pot fi divizate n trei categorii
n funcie de necesitate: 1) pentru fotosintez Mn, Fe, Cl, Zn i V; 2) pentru
metabolismul azotului Mo, B, Co, Fe; 3) pentru alte funcii metabolice Mn,
B, Co, Cu, Si.109
Coninutul unor microelemente din componena biomasei algale este mult mai
nalt dect n plantele superioare i cloroplaste (Tab. 15).
Tabelul 15
Coninutul de fier i raportul unor metale n diferite grupe ale regnului
vegetal i cloroplastelor 110
Sursa
Alge
Plante
arhegoniate
Plante
angiosperme
Cloroplaste

Fe, mg/kg
1800
650

Fe/Cu
70
50

Fe/Zn
20
9

Fe/Mn
36
2

Fe/Mo
4000
1480

180

10

300

720

10

34

240

Astfel, analiznd rezultatele prezentate n Tabelul 15, observm c biomasa


algelor conine cantiti mult mai mari de microelemente dect cea a plantelor
arhegoniate, angiosperme i chiar n cloroplastele celulare. Conform acestor rezultate, biomasa algelor conine de 2,77-10 ori mai mult Fe dect plantele arhegoniate i angiosperme, la fel i concentraia Cu, Zn, Mn este mai nalt n
biomasa algal.

Fierul

Este un microelement necesar la cultivarea algelor, deoarece particip n multe procese fiziologice. Formele lui metabolice sunt fermenii ce conin fier, ca:
catalaza, peroxidaza, citocromoxidaza, variai citocromi i feroproteine (ferodoxin, fiero-flavoproteide). Proteinele fierice particip n reaciile oxidoreductoare
ale fotosintezei, respiraiei, metabolismului glucidelor, la fixarea azotului atmosferic. Fierul i molibdenul intr n componena nitrogenazei, care catalizeaz
recuperarea azotului molecular n procesul de fixare a azotului.
Insuficiena fierului conduce la reducerea creterii algelor, ca rezultat al micorrii fotosintezei i apariiei clorozei. Dup adugarea fierului n mediul nu109
.., .., .. . . . : , 1989. 605 .
110
.. . -, 2004. 336 .

62

tritiv de cultivare a algelor fotosinteza se restabilete ncet (n decursul ctorva


zile). Pentru sinteza clorofilei este necesar ca celulele algelor s fie asigurate cu
Fe. Fierul legat ocup aproape jumtate din masa cloroplastelor algelor.
Pentru a prentmpina sedimentarea fierului (la pH neutru al mediului nutritiv)
din mediile nutritive de cultivare a algelor, se recomand a se utiliza citratul de
natriu 10 mg la 5 mg Fe. Acest procedeu este efectiv chiar i la doze mari de
fosfor.111

Manganul

Manganul este un microelement necesar pentru cultivarea algelor. Insuficiena


manganului duce la reducerea creterii biomasei algale i contribuie la modificarea aspectului morfologic. Insuficiena manganului n mediile nutritive pentru
cultivarea algelor fotosintetizatoare frneaz dividerea celulelor i, ca rezultat,
apar celule cu form neobinuit, care sunt foarte mari n lime i lungime.
G.Reisner i J.Thompson au demonstrat c algele cu nutriie autotrof, cultivate pe medii nutritive lipsite de mangan, au o vitez redus de cretere a
biomasei. Din cauza insuficienei manganului, de regul, se reduce viteza fotosintezei, deoarece manganul particip la reaciile fotochimice ale fotosintezei.
Insuficiena manganului la alge n primul rnd influeneaz procesul de eliminare a oxigenului.
Se consider c legturile de mangan la alge sunt responsabile de activitatea
centrului de eliminare a oxigenului, a fotosistemei 2.112 Unii autori113 consider
c insuficiena manganului n mediul nutritiv preseaz procesul de eliminare a
oxigenului din celulele algelor cianofite i verzi.
Conform rezultatelor noastre, s-a demonstrat c algele cianofite Anabaenopsis
sp., Calothrix Elenkini, Cylindrospermum licheniforme, Nostoc commune var.
flagelliforme, N. gelatinosum, N. linckia pot fi cultivate pe mediu Drew lipsit de
mangan. Aceasta ns nu inhib creterea lor i eliminarea oxigenului.
De rnd cu necesitatea manganului n obinerea oxigenului fotosintetic, s-a
demonstrat rolul lui i al fierului n reaciile de reducere a fotosintezei. Insuficiena manganului sporete sensibilitatea clorofilei la distrugerea luminii, ceea
ce poate duce la apariia clorozei (ca un simptom al insuficienei manganului) la
iluminare sporit. Odat cu adugarea acestui element n mediile nutritive aceste
anomalii dispar. Insuficiena manganului contribuie i la reducerea concentraiei
de glucide din celulele algale.
Pentru obinerea a 1 kg de biomas uscat de clorel sunt necesare circa 2,560 mg de Mn.
Hopkins E., Wann F. Relation of hydrogen-ion concentration to growth of chlorella and to
availbility of iron. // Bot. Gaz., vol.81, n4, 1962, p.355-376.
112
Tel Or. E., Stewart W. Manganes and photosynthetic oxygen evolutio by algae. // Nature,
1975, vol.258, no 5537, p.715-716.
113
Gherhardt S. Mangan effekte in photosynthetischen reaktionen von Anacystis. // Ber., dt.
bot. Ges., 1966., no 11, p.63-68.
111

63

Zincul
Zincul este parte component a fermenilor, care influeneaz asupra metabolismului glucidelor, proteinelor, fotosintezei i regleaz potenialul oxidoreductor al celulelor. Zincul se conine n fermeni n concentraii de 0,2-0,3%.
Actualmente se cunosc mai bine de 40 de fermeni ce conin zinc. Zincul fortific
biosinteza acizilor nucleici i influenez asupra activitii fermenilor metabolismului nucleic.114
n rezultatul experimentelor efectuate cu algele Euglena i Chlorella s-a stabilit c zincul are o legtur direct n sinteza ARN i a proteinelor. Insuficiena
Zn contribuie la reducerea sintezei ARN i proteinelor, dar nu influeneaz asupra
sintezei ADN-ului. Cultivarea algei Euglena pe medii nutritive cu coninut insuficient de zinc contribuie la dispariia ribosomilor citoplasmatici, meninndu-i
structura. La adugarea zincului acest proces se regleaz i ribosomii celulari
reapar, meninndu-i structura.115
Zincul acioneaz i ca stabilizator al componentelor membranelor biologice.
Acest element se leag mai uor n membrana celular a algelor comparativ cu
alte microelemente (cum ar fi Fe, Cd, Co, Cu) i determin reactivitatea lor.
Zincul, n doze de 5-20 mg/l, este propus pentru nlturarea bacteriilor din
cultura infectat de clorela.

Cuprul

Cuprul joac un rol important n reaciile de fotosintez la alge. n comparaie


cu manganul, el influenez mult la fotoreducie i mai puin la reacia Hill. Participarea cuprului n reaciile fotosintezei este legat de coninutul su din citocromoxidaz. O parte mare a cuprului se gsete n proteinele moleculare mici cu
funcii catalitice care conin cupru (plastocianine). Plastocianinele i citocromul f
se consider transportori de electroni ntre fotosinteza 1 i fotosinteza 2. Concentraiile mari de cupru sunt toxice i conduc la micorarea fotosintezei, ndeosebi
n condiii de iluminare intens. La iliminarea redus toxicitatea cuprului este
mai mic. Astfel c dispersia fotosintezei, n prezena cuprului, conduce la acumularea produselor de asimilare n celulele algelor, care, la rndul lor, frneaz
procesul de dividere a celulelor.116
Pentru cultivarea algelor sunt necesare concentraii mici de cupru, care trebuie
asigurate n mediul nutritiv.
n multe cazuri, la pH neutru al mediilor nutritive cuprul se sedimenteaz sau
formeaz cu metaboliii eliminai n mediul nutritiv legturi solubile complexe.
Fosfatul, la pH de 5,1, sedimentez o parte din cupru, iar la pH de 5,9 l exclude
.. . //
, 1976, .5-16.
115
Prask J., Plocke D. A role for zinc in the cytoplasmic ribosomes of Euglena gracilis. // Plant
Physiol., 1971, vol. 48, no.2, p.150-155.
116
.. - . , 1983. c240.
114

64

total din soluie. Acelai efect se atest i la administrarea srii de Na2CO3 la pH


de 8,4: sedimenteaz total cuprul. Sedimentarea cuprului nu ntodeauna reduce
activitatea lui. Unele cercetri arat c la pH neutru al mediului nutirtiv de cultivare a algelor, cnd o parte mare de cupru se sedimenteaz, iar n soluie rmn
doar 8%, toxicitatea lui nu se reduce. Eliminrile extracelulare ale microalgelor
majoreaz rezistena lor la cupru, deoarece la formarea complexelor organice el
este mai puin toxic. De exemplu, celulele algei Euglena gracilis elimin n mediul nutritiv de cultivare glicopeptide, care prezint ageni de chelare a cuprului
i zincului, iar n rezultat algele i menin o vitez bun de cretere la concentraii de pn la 10 mg/l.117
Cuprul este un element mai toxic dect fierul i nichelul. Concentraiile sporite
de cupru influenez negativ asupra algelor, fapt evideniat i prin modificrile morfologice specifice ce se caracterizeaz prin decolorare, schimbarea culorii, micorarea dimensiunilor celulare, deformarea celulelor i granularea cloroplastelor.118
Cuprul poate fi redus din mediul nutritiv odat cu formarea legturilor lui
intracelulare complexe cu aminoacizii, polipeptidele i proteinele. Concentraile
mari de proteine celulare pot inactiva ionul de cupru, din care motiv la cantiti
mari de azot n mediul nutritiv al algelor consumul lui se majoreaz. Efect asemntor se atest i la adugarea n mediul nutritiv a Trilonului-B; n acest caz,
cuprul nu manifest influen toxic la concentraii nalte (pn la 30 mg/l).
Mai mult de 59% din cupru se gsesc n cloroplaste legat de plastocianine.119

Molibdenul
Molibdenul se gsete n plante n forma anionilor de (MoO42-). Molibdenul se
consider microelementul metabolismului azotului, deoarece intr n componena centrelor active ale nitratreductazei (HO) i nitrogenazei, ndeplinind funcia
de fixare biologic a azotului. Acest element este necesar n special n mediile
ce conin azot nitric, sau n condiiile cnd azotul molecular este unica surs
nutritiv de azot. La fixarea biologic a azotului molibdenul poate fi nlocuit cu
vanadiul, care ns este mai puin efectiv dect molibdenul. Astfel, molibdenul
are un rol decisiv n procesul de fixare biologic a azotului, care n cantiti nu
prea mari persist n nitrogenaz chiar i la substituirea lui cu vanadiu n mediul
nutritiv de cultivare a algelor.
Albergoni V., Piccini E., Coppellotti O. Response to heavy metals in organism. Excretion and
accumulation of physiological and nonphysiological metals in Euglena gracilis. // omparative
Biochem. Physiol., 1980, vol.67, n2, p.121-127.
118
.., .., .. Eustigmatos magnuis (B. Petersen) Hibberd (Eustigmatophyta) Hantzschia amphioxis
(Ehrenberg) Grunow in Cleve et Grunow (Bacillariphyta) .
// , 2009, .6 (100), c.609-610.
119
.., .., .., .., ..,
.., .., .., .. . , 2005.
640 .
117

65

Insuficiena molibdenului contribuie la acumularea unor cantiti mari de nitrai i se frneaz creterea algelor. La cultivarea algei cianofite Nostoc muscorum n insuficien de molibden, celulele capt o culoarea galben-verde, ca
rezultat al reducerii concentraiei de ficocianin i clorofil.
Conform datelor noastre, s-a demonstrat c la cultivarea algei Nostoc flagelliforme pe medii nutritive lipsite de azot i molibden nu se atest modificri morfologice ale celulelor algale, iar pe perioada de cultivare se desfoar toate fazele
de cretere.
Molibdenul este component al mai multor fermeni i poate fi n formele
Mo(VI) i Mo(V). Se cunosc mai bine de 20 de fermeni ce conin molibden,
dintre care menionm: aldehidoxidaza, sulfitoxidaza, xantindehidrogenaza, xantinoxidaza etc. n cazul fermenilor nitratreductaza i xantinoxidaza molibdenul
intr n componena molibdopterinei, sau molibdocofactorului (Mo-Co). Mo-Co
se formeaz i se distruge uor i este un centru activ al nitratreductazei, unde n
prezena molibdenul nitraii se transform n NO2..120
Pentru fixarea biologic a azotului sunt necesare cantiti mai mari de molibden dect n cazul reducerii nitrailor, iar n mediile nutritive care conin azot
amoniacal molibdenul nu este necesar.
Molibdenul este necesar plantelor n cantiti mai mici dect alte microelemente. Simptomele morfologice n cazul insuficienei molibdenului uneori apar
dereglri ale culturii algale asemntoare cu cele aprute n cazul insuficienei
azotului.115, 116

Borul

Borul este parte component a grupei metaloizilor i n soluii apoase la concentraii mai mici de 25 mM persist n form monomer B(OH)3 sau n form
ionic B(OH)4-. Borul se mai ntlnete n plante n form complex cu legturile organice. Absorbia borului este dependent direct de pH. Borul se conine n
peretele celular i constituie circa 60-80% din cantitatea lui, fiind legat cu polizaharidele pectinice. n cazul insuficienei borului, proprietile fizice ale peretelui
celular se modific, se inhib rapid elasticitatea celulelor, se modific formarea
peretelui celular i funcionarea plasmolemei. Cu toate acestea, se consider c
borul particip n unele procese, cum ar fi: sinteza i structura peretelui celular,
metabolismul glucidelor, ARN, fenoluri, respiraie, transportul zaharurilor, funcionarea plasmolemei, reglarea procesului de cretere i dezvoltare.
Borul, n comparaie cu microelementele metalice, nu este component sau activator al fermenilor. Elementul respectiv este un formator de complexe, care, la
fel ca i calciul, formeaz uor legturi coordinative cu substanele ce au legturi
ale grupei-OH n poziia cis. Posibil, ar exista o concuren direct ntre bor i
calciu pentru locul de legtur a polimerilor peretelui celular.
Borul reprezint un element necesar plantelor superioare i unelor alge n procesul de cultivare. Experienele efectuate cu alge marine i alge diatomee terestre au
120

.. . -, 2004. 336 .

66

demonstrat necesitatea borului. Astfel, s-a stabilit c la transferarea algei diatomee


Cylindrotheca fusiformis, cultivate pe mediu nutritiv asigurat cu bor, pe mediu nutritiv lipsit de el se stopeaz procesul de dividere (peste 24-30 de ore), se mrete
de dou ori volumul celulelor, iar peste un interval de 48 de ore se dubleaz viteza
de respiraie. Borul este necesar i pentru cultivarea algelor cianofite Nostoc muscorum, Anabaena cylindrica, contribuind la majorarea vitezei de cretere.
Contribuie la intensificarea procesului de fixare biologic a azotului la alga
Nostoc muscorum. Astfel c la adugarea nitrailor n mediul nutritiv ce coninea
bor alga Nostoc muscorum fixa o cantitate mai mare de azot i avea o cretere
mai nalt. Culturile crescute n insuficien de bor i pierd culoarea specific
celulelor, ca i n cazul insuficienei de fier.121
Experienele noastre au demonstrat c algele cianofite azotfixatoare nu sufer
modificri morfologice i se reproduc eficient pe medii nutritive lipsite de bor.
Astfel, putem constata c pentru unele microalge borul este un element necesar, iar alte culturi sunt indiferente fa de el i pot fi cultivate n lipsa lui.

Cobaltul
Cobaltul ndeplinete mai multe funcii specifice i nespecifice n celulele
microorganismelor. Este de nenlocuit din componena coenzimei cobalamina,
particip la multe reacii fermentative. Datorit proprietilor lui de a forma xelaturi cu legturile organice, acioneaz activ n cadrul unor reacii specifice din
celulele microorganismelor. Se consider c sporete activitatea antibacterian,
influennd asupra bacteriei Salmonella pullorum.
Concentraia optim a cobaltului variaz n funcie de specia microorganismelor, regimul de cultivare i specificul microorganismelor. n unele condiii speciale microorganismele au capacitatea de a se acomoda la doze nalte de cobalt.
Experimental s-a demonstrat c cobaltul este necesar pentru cultivarea algelor cianofite Nostoc muscorum, Calothrix parietina, Coccochloris peniocystis,
Microcystis aeruginosa. La concentraiile cobaltului de 0,003 mcg/l s-a majorat
creterea biomasei (cu 58%) i concentraia azotului, iar concentraia de 0,04
mcg/l este optim pentru creterea bun a culturilor. Ionii de cobalt n concentraii mici (0,2-0,4 mg/l), pot fi substituii cu vitamina B12 n cantiti mici (0,0075
mcg/l), nemodificnd creterea culturii. Este necesar att algelor cianofite azotfixatoare, ct i celor neazotfixatoare, indiferent de sursa de azot (molecular sau
din srurile introduse n mediu). De rnd cu cuprul i zincul, cobaltul se atribuie
elementelor active algicide: concentraii de 1 mg/l inhib creterea microcistesului pe mediul nutritiv.
Excesul de cobalt n mediul nutritiv inhib creterea algelor. Astfel, la cultivarea algei Euglena gracilis n prezena acestui element n doze mari (mai mari de
4,4 mg/l) are loc stoparea total a creterii.
.. -
oo. , 1983. 240 .
121

67

Cobaltul este necesar pentru multe microorganisme n forma specific vitamina B12, sau n forma uneia din cobamidele de cobalt, care pot fi sintetizate sau
adugate direct n medii nutritive.
Pentru fixarea biologic a azotului molecular plantele superioare au nevoie
de cobalt. n plante acest element se gsete n form ionic i ca legturi porfirinice cianocobalamine (vitamina B12). Insuficiena cobaltului influeneaz
asupra aspectului exterior, simptomele fiind asemntoare cu cazul insuficienei
azotului.122

7.2.1. Microelementele n nutriia mineral a algelor cianofite


Concentraiile optime ale microelementelor, ca i n cazul macroelementelor,
trebuie administrate pentru a putea cultiva unele alge cianofite n funcie de caracteristicile sistematice (specie, gen, familie, ordin i clas).
Concentraiile optime ale microelementelor necesare pentru cultivarea algelor
cianofite analizate de noi (prezentate n Anexa nr.2) au fost stabilite prin calculul
acestor elemente din recetele cu medii nutritive prezentate n Anexa nr.1.
Informaia ce cuprinde algele cianofite studiate n acest capitol aparin la 6
ordine, 17 familii i 28 genuri.
n cele ce urmeaz voma analiza aspectele nutriiei minerale cu microelemente pentru cultivarea algelor cianofite n funcie de apartenena sitematic.
Pentru cultivarea algelor cianofite din genurile Synechocystis, Synechococcus,
Merismopedia, Aphanothece, Gloeocapsa, Myxosarcina, Chamaesiphon, Mastigocladus, Amorphonostoc, Nodularia, Microchaete, Scytonema, Phormidium,
Symploca, Lyngbya, Microcoleus, Plectonema, Cyanotheca, Tolypothrix i Oscillatoria mediul nutritiv trebuie s conin microelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): Fe1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu- 0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004
(Tab.16). Raportul optim Fe:Mn:Zn:Cu:Mo:B:Co este urmtorul: 1:0,35:0,03:0,
01:0,29:0,09:0,002.
Unele genuri au o nutriie mineral a microelementelor specific; dintre acestea menionm:

Coccopedia concentraia optim a microelementelor este urmtoarea (mg/l): Fe0,68; Mn- 2,51; Zn-0,25; Cu- 0,08; Mo-0,06; B-1,99;
Co-0. Raportul optim Fe:Mn:Zn:Cu:Mo:B:Co este urmtorul
1:3,69:0,37:0,12:0,09:2,93:0;
Eucapsis poate fi cultivat prin asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele
concentraii de microelemente (mg/l): Fe-0-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu0,02; Mo-0,009-0,54; B-0,16-0,4; Co-0-0,004;

Anabaenopsis prefer urmtoarele microelemente (mg/l) ): Fe-0,00010,001; Mn-0-0,58; Zn-0-0,06; Cu-0-0,03; Mo-0-0,05; B-0-0,4; Co-0-0,02;
122

.. . .-., 2004. 336 .

68


Cylindrospermum are nevoie de urmtoarele concentraii de microelemente
(mg/l): Fe-0,0001-0,5; Mn-0-0,5;Zn-0-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0-0,009; B-00,4; Co-0-0,0004;

Anabaena i Calothrix pentru cultivare sunt necesare urmtoarele microelemente (mg/l): Fe-0-1,86; Mn-0-0,66; Zn-0-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0-0,54;
B-0-0,4; Co-0-0,01;

Microcystis poate fi cultivat pe medii nutritive ce conin microelemente n
urmtoarele doze (mg/l): Fe-0,002; Mn-0,5; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,01;
B-0,4; Co-0,01;

Spirulina mediile nutritive trebuie s fi ndestulate cu microelemente n
urmtoarele concentraii (mg/l): Fe-2; Mn-0,31-0,5; Zn-0,05; Cu-0-0,02;
Mo-0,009-0,155; B-0,4; Co-0-0,01 (Tab. 16).
La nivelul familiilor concentraia de microelemente necesar pentru cultivare
este urmtoarea:

Coccobactreaceae, Merismopediaceae, Pleurocapsaceae, Dermocarpaceae, Chamaesiphonaceae, Mastigocladaceae, Nostocaceae, Nodulariaceae, Scytonemataceae, Schizothrichaceae, Plectonemataceae concentraia optim a microelementelor este (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05;
Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004;

Microcistidaceae au necesiti de microelemente ce variaz, ns n linii
generale ele se cuprind n urmtoarele limite (mg/l): Fe-0,002-1,86; Mn0,5-0,66; Zn-0,05: Cu-0,02; Mo-0,01-0,54; B-0,4-0,16; Co-0,0-0,004;

Holopediaceae mediile nutritive trebuie s conin microelementele indicate mai sus pentru genul Coccopedia, deoarece a fost analizat doar un
gen al acestei familii;

Cultivarea reprezentanilor familiei Gloeocapsaceae poate fi realizat
prin asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele microelemente (mg/l);
Fe-0-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,009-0,54; B-0,16-0,4; Co-00,004.

Algele din familia Anabaenaceae au urmtoarea nutriie mineral (mg/l):
Fe-0-1,86; Mn0-0,66; Zn-0-0,06; Cu-0-0,03; Mo-0-0,54; B-0-0,4; Co-00,02.

Familia Rivulariaceae este reprezentat de genul Calothrix, respectiv i
microelementele sunt specifice acestui gen.

Familia Oscillatoriaceae are urmtoarele preferine de nutriie mineral
cu microelemente (mg/l): Fe-1,86-2; Mn-0,31-0,66; Zn-0-0,5; Cu-0-0,02;
Mo-0,009-0,54; B-0,16-0,4; Co-0-0,01.
Specificul nutriiei minerale a macroelementelor pentru diferite clase de alge
cianofite cultivate se prezint astfel:

Clasa Chroococceae prefer n nutriia mineral urmtoarele microelemente (mg/l): Fe-0-1,86; Mn-0,5-2,51; Zn-0,05-0,25; Cu-0,02; Mo-0,009-0,54;
B-0,16-1,99; Co-0-0,01.
69


Clasa Chamaesiphoneae se nutrete cu microelemente specifice pentru
ordinele, familiile i genurile ce le reprezint (pentru speciile studiate de
noi).

Clasa Hormogoneae are preferine de microelemente variate, care se prezint astfel (mg/l): Fe-0-2; Mn-0-0,66; Zn-0-0,66; Cu-0-0,03; Mo-0-0,54;
B-0-0,4; Co-0-0,02 (Tab. 17).
Dup cum observm, nu exist concentraii fixe de microelemente specifice
claselor, cu excepia clasei Chamaesiphoneae, deoarece am analizat reprezentani doar a dou ordine, 3 familii i 3 genuri. Spre deosebire de macroelemente,
microelementele au variaii mai mici ale limitelor superioare i celor inferioare
necesare pentru cultivarea algelor cianofite. Cu toate acestea, pentru cultivarea
speciilor de alge cianofite este necesar s cunoatem poziia sistematic i, reieind din aceasta, s identificm mediul nutritiv sau s optimizm un mediu
nutritiv nou.

70

Tabelul 16
Coninutul microelementelor n mediile nutritive de cultivare
a algelor cianofite, mg/l
Taxoni
Ordin
Chroococcales

Pleurocapsales
Dermocarpales

Familie
Coccobactreaceae

Gen
Synechocystis
Synechococcus
Holopedia- Coccopeceae
dia
Merismope- Merismodiaceae
pedia
Microcisti- Microcysdaceae
tis
Aphanothece
GloeocapGloeosaceae
capsa
Eucapsis

Pleurocapsaceae
Dermocarpaceae
Chamaesiphonaceae
Mastigo- Mastigoclacladales
daceae
Nostoca- Nostocales
ceae
Anabaenaceae

Myxosarcina
Cyanotheca
Chamaesiphon
Mastigocladus
Amorphonostoc
Anabaena
Anabaenopsis
Cylindrospermum
Nodularia- Nodularia
ceae
Microchaete
Scytonema- Scytonetaceae
ma
Tolypothrix
Rivularia- Calothrix
ceae

Concentraia microelementelor, mg/l


Fe
1,86

Mn
0,66

Zn
0,05

Cu
0,02

Mo
0,54

B
0,16

Co
0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

0,68

2,51

0,25

0,08

0,06

1,99

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

0,002

0,5

0,05

0,02

0,01

0,4

0,01

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

0-1,86

0,66

0,05

0,02

1,86

0,66

0,05

0,02

0,009-0,54 0,160,40
0,54
0,16

0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

0-1,86
0,00010,001
0,00010,5

0-0,66 0-0,05 0-0,02 0-0,54


0-0,58 0-0,06 0-0,03 0-0,05

0-0,40
0-0,40

0-0,01
0-0,02

0-0,50 0-0,05 0-0,02 0-0,009

0-0,40

0-0,0004

1,86
1,86

0,66
0,66

0,05
0,05

0,02
0,02

0,54
0,54

0,16
0,16

0,004
0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

1,86

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

0-1,86

0-0,66 0-0,05 0-0,02 0-0,54

0-0,40

0-0,01

71

0-0,004

Oscillatoriales

Oscillatoriaceae

Schizothrichaceae
Plectonemataceae

Oscilla- 1,86
toria
Spirulina 2,00
Phormidium
Symploca
Lyngbya
Microcoleus
Plectonema

0,66

0,05

0,02

0,05

1,86

0,310,5
0,66

1,86
1,86
1,86
1,86

0,54

0,16

0,004

0,40

0-0,01

0,05

0-0,02 0,0090,155
0,02
0,54

0,16

0,004

0,66
0,66
0,66

0,05
0,05
0,05

0,02
0,02
0,02

0,54
0,54
0,54

0,16
0,16
0,16

0,004
0,004
0,004

0,66

0,05

0,02

0,54

0,16

0,004

Tabelul 17
Coninutul microelementelor necesare pentru cultivarea algelor
din clasele de cianofite
Clasa
Chroococceae
Chamaesiphoneae
Hormogoneae

Concentraia microelementelor, mg/l


Zn
Cu
Mo
0,05-0,25
0,02
0,009-0,54

Fe
0-1,86

Mn
0,5-2,51

1,86

0,66

0,05

0,02

0-2,00

0-0,66

0-0,06

0-0,03

B
0,16-1,99

Co
0-0,01

0,54

0,16

0,004

0-0,54

0-0,40

0-0,02

7.2.2. Nutriia mineral cu microelemente a algelor verzi


Pentru cultivarea algelor verzi sunt necesare medii nutritive ce au n componen microelemente. Concentraia microelementelor necesar pentru cultivarea
algelor verzi difer n funcie de poziia sistematic, specie, gen, familie, ordin.
Algele verzi analizate de noi aparin la 4 clase, 5 ordine, 18 familii i 22 genuri.
Clasa Chlorococcophyceae este reprezentat de ordinul Chlorococcales, familiile Ankistrodesrmaceae cu genul Ankistrodesmus, familia Asteromonadaceae
cu genul Asteromonas, familia Chlorellaceae cu genurile Chlorella i Tetraedron,
familia Chlorococcaceae cu genurile Neochloris, Chlorococcum, Dictyococcus
i Coccomyxa, familia Oocystaceae cu genul Chodatella, familia Coelastraceae
cu genul Coelastrum, familia Botryococcaceae cu genul Dictyosphaerium, familia Hydrodictyaceae cu genurile Hydrodictyon i Pediastrum, familia Selenastraceae cu genul Kirchneriella, familia Scenedesmaceae cu genul Scenedesmus.
Clasa Volvocophyceae este reprezentat de ordinul Chlamydomonadales, familia Chlamydomonadaceae, genurile Haematococus i Chlamydomonas, de ordinul Volvocales, familia Dunaliellaceae, genul Dunaliella.
Clasa Ulotrichophyceae este reprezentat de ordinul Ulotrichales, familiile
Ulotrichaceae i Trentepohliaceae, genurile Ulothrix, Stichococcus i Trentepohlia.
72

Clasa Zygnematophyceae este reprezentat de ordinul Desmideales, familia


Desmidiaceae, genul Staurastrum.
Nutriia mineral cu microelemente necesar pentru cultivarea diferitelor genuri de alge este ntr-o oarecare msur aceeai i se prezint astfel:

Haematococus, Chlamydomonas, Stichococcus, Ulothrix, Chlorella, Scenedesmus este necesar s le asigurm cu urmtoarele concentraii de
microelemente (mg/l): Fe-0,002-1,86; Mn-0-0,66; Zn-0-0,05; Cu-0-0,02;
Mo-0-0,54; B-0-0,16; Co-0-0,004.

Trentepohlia, Ankistrodesmus, Chlorococcum, Dictyococcus, Coccomyxa,
Chodatella, Coelastrum, Dictyosphaerium, Pediastrum, Kirchneriella i
Staurastrum au urmtoarea nutriie mineral cu microelemente: Fe-1,86
mg/l; Mn-0,66 mg/l; Zn-0,05 mg/l; Cu-0,02 mg/l; Mo-0,54 mg/l; B-0,16
mg/l; Co-0,004 mg/l.

Hydrodictyon, Neochloris i Tetraedron au urmtoarele necesiti de microelemente n nutriia mineral (mg/l): Fe-0,1-1,86; Mn-0,07-0,66; Zn0,014-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0,54; B-0,01-0,16; Co-0,003-0,004.

Dunaliella are urmtoarele necesiti de microelemente (mg/l): Fe-2,008;
Mn-0,5; Zn-0,05; Cu-0,015; Mo-0,01; B-0,4; Co-0.
Nutriia mineral cu microelemente necesar pentru cultivarea algelor verzi
difer puin i se prezint astfel:

Chlamydomonadaceae, Ulotrichaceae, Asteromonadaceae, Chlorellaceae
i Scenedesmaceae mediile nutritive s conin urmtoarele microelemente (mg/l): Fe -0,002-1,86; Mn -0-0,66; Zn -0-0,05; Cu- 0-0,02; Mo 0-0,54; B -0-0,16; Co -0-0,004.

Trentepohliaceae, Ankistrodesrmaceae, Oocystaceae, Coelastraceae, Botryococcaceae, Selenastraceae i Desmidiaceae trebuiesc aprovizionate cu
microelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn0,05; Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004.

Hydrodictyaceae, Chlorococcaceae necesit asigurarea mediilor nutritive cu urmtoarele microelemente (mg/l): Fe-0,1-1,86; Mn-0,07-0,66;
Zn-0,014-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0,54; B-0,01-0,16; Co-0,003-0,004.

Dunaliellaceae pot fi utilizate medii nutritive ce conin microelemente
menionate pentru genul Dunaliella.
Nutriia mineral cu microelemente pentru cultivarea algelor la nivel de ordin
este urmtoarea:

Ordinul Chlamydomonadales reprezentanii lui pot fi cultivai pe medii
nutritive cu microelemente, menionate mai sus, pentru familia Chlamydomonadaceae.

Ordinele Ulotrichales i Chlorococcale prefer urmtoarele concentraii de
microelemente (mg/l): Fe-0,002-1,86; Mn-0-0,66; Zn-0-0,05; Cu-0-0,02;
Mo- 0-0,54; B-0-0,16; Co-0-0,004.
73


Ordinul Volvocales poate fi cultivat pe medii nutritive ce trebuie s fie asigurate cu microelemente n urmtoarele concentraii (mg/l): Fe -2,008;
Mn-0,5; Zn -0,05; Cu- 0,015; Mo - 0,01; B0,4; Co -0.

Ordinul Desmideales trebuie asigurat cu microelemente n urmtoarele
concentraii (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16;
Co-0,004.

Nutriia mineral pentru cultivarea unor clase de alge verzi este diferit.
n linii generale, ea se prezint astfel:

Clasele Chlorococcophyceae i Ulotrichophyceae se nutresc cu microelemente ale cror concentraii (mg/l) variaz: Fe-0,002-1,86; Mn-0-0,66;
Zn-0-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0-0,54; B-0-0,16; Co-0-0,004.

Clasa Zygnematophyceae poate fi cultivat pe medii nutritive cu urmtoarele concentraii de microelemente (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05;
Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004.

Clasa Volvocophyceae mediile nutritive trebuie s conin: Fe-0,002-2,008
mg/l; Mn - 0-0,66 mg/l; Zn-0-0,05 mg/l; Cu-0-0,02 mg/l; Mo-0-0,54 mg/l;
B-0-0,4 mg/l; Co-0-0,004 mg/l.
Astfel, constatm c odat cu ascendena n treapta sistematic de la specie
la clas se observ variaii mari ale concentraiilor de microelemente necesare
pentru cultivarea algelor verzi.

74

75

Selenastraceae
Scenedesmaceae
Dunaliellaceae

Desmidiaceae

Volvocales

Desmideales

1,86

1,86
1,86
0,002-1,86
2,01

Pediastrum
Kirchneriella
Scenedesmus
Dunaliella

Oocystaceae
Coelastraceae
Botryococcaceae
Hydrodictyaceae

Staurastrum

1,86
1,86
1,86
1,86
1,86
0,1-1,86

0,002-1,86
0,002-1,86
0,1-1,86

Asteromonas
Chlorella
Tetraedron

Dictyococcus
Coccomyxa
Chodatella
Coelastrum
Dictyosphaerium
Hydrodictyon

Fe
0,002-1,86
0,002-1,86
0,002-1,86
0,002-1,86
1,86
1,86

Gen
Haematococus
Chlamydomonas
Stichococcus
Ulothrix
Trentepohlia
Ankistrodesmus

1,86
0,1-1,86

Chlorococcaceae

Trentepohliaceae
Ankistrodesrmaceae
Asteromonadaceae
Chlorellaceae

Taxoni
Familie
Chlamydomonadaceae
Ulotrichaceae

Chlorococcum
Neochloris

Chlorococcales

Ordin
Chlamydomonadales
Ulotrichales

0,66

0-0,66
0-0,66
0,070,66
0,66
0,070,66
0,66
0,66
0,66
0,66
0,66
0,070,66
0,66
0,66
0-0,66
0,50
0,05

0-0,05
0-0,05
0,0140,05
0,05
0,0140,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,05
0,0140,05
0,05
0,05
0-0,05
0,05

Co
0-0,004
0-0,004
0-0,004
0-0,004
0,004
0,004

0,54
0,54
0,54
0,54
0,54
0,54

0,54
0,54

0,02

0,54

0,02
0,54
0,02
0,54
0-0,02 0-0,54
0,015 0,01

0,02
0,02
0,02
0,02
0,02
0-0,02

0,02
0-0,02

0,16

0,16
0,16
0-0,16
0,4

0,004

0,004
0,004
0-0,004
0

0,16
0,004
0,16
0,004
0,16
0,004
0,16
0,004
0,16
0,004
0,01-0,16 0,003-0,004

0,16
0,004
0,01-0,16 0,003-0,004

0-0,02 0-0,54 0-0,16


0-0,004
0-0,02 0-0,54 0-0,16
0-0,004
0-0,02 0,54 0,01-0,16 0,003-0,004

Concentraia microelementelor, mg/l


Mn
Zn
Cu
Mo
B
0-0,66 0-0,05 0-0,02 0-0,54 0-0,16
0-0,66 0-0,05 0-0,02 0-0,54 0-0,16
0-0,66 0-0,05 0-0,02 0-0,54 0-0,16
0-0,66 0-0,05 0-0,02 0-0,54 0-0,16
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16
0,66
0,05
0,02
0,54
0,16

Coninutul microelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor verzi, mg/l

Tabelul 18

Tabelul 19
Coninutul microelementelor necesare pentru cultivarea algelor verzi
Clasa
Chlorococcophyceae
Ulotrichophyceae
Zygnematophyceae
Volvocophyceae

Fe
0,002-1,86
0,002-1,86
1,86
0,002-2,008

Concentraia microelementelor, mg/l


Mn
Zn
Cu
Mo
0-0,66
0-0,05
0-0,02
0-0,54
0-0,66
0-0,05
0-0,02
0-0,54
0,66
0,05
0,02
0,54
0-0,66
0-0,05
0-0,02
0-0,54

B
0-0,16
0-0,16
0,16
0-0,4

Co
0-0,004
0-0,004
0,004
0-0,004

7.2.3. Nutriia mineral cu microelemente pentru cultivarea algelor


diatomee, roii, galben-verzi
Nutriia mineral cu microelemente pentru algele diatomee, roii i cele galbenverzi a fost determinat pe baza analizei reprezentanilor acestor specii (indicate n
Anexa nr. 2), care sunt mai frecvent cultivai (Tab. 20). Astfel, informaia prezentat este specific n general genurilor analizate i speciilor n particular. De aceea,
nutriia mineral cu microelemente caracteristice pentru familii, ordine i clase de
alge diatomee, roii i cele galben-verzi nu poate fi stabilit cu exactitate, deoarece
aceti taxoni ntrunesc mult mai multe specii pe care noi nu le-am analizat.
Pentru cultivarea algelor diatomee din genul Nitzschia mediul nutritiv trebuie
asigurat cu urmtoarele microelemente (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004 (Tab. 20). Aceste concentraii sunt caracteristice i pentru cultivarea unor specii de alge verzi.
Nutriia mineral cu microelemente pentru cultivarea algelor roii difer fa
de concentraiile caracteristice speciilor din genul Nitzschia. Algele roii, analizate de noi, aparin la dou genuri (Porphyridium i Cyanidium), care au nutriie
variat cu microelemente din mediile de cultivare. Speciile din genul Porphyridium pot fi cultivate pe medii nutritive cu urmtoarele concentraii de microelemente (mg/l): Fe-1,87; Mn-0,44; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004.
Concentraia microelementelor necesar pentru cultivarea algelor din genul Cyanidium este mai mic comparativ cu cea necesar speciilor genului Porphyridium.
Concentraia optim a microelementelor necesare pentru cultivarea speciilor de
alge din genul Cyanidium este urmtoarea (mg/l): Fe-0,02; Mn-0,01; Zn-0,002;
Cu-0; Mo-0,001; B-0; Co-0,001(Tab. 21).
Pentru cultivareea algelor galben-verzi concentraia microelementelor este diferit comparativ cu cea specific pentru cultivarea algelor roii. Concentraiile
optime ale microelementelor n nutriia algelor galben-verzi variaz, la fel, n
funcie de poziia sistematic a speciilor de alge. Cultivarea algelor din genul
Chloridella poate fi realizat pe medii ce conin urmtoarele doze de microelemente (mg/l): Fe-1,86; Mn-0,66; Zn-0,05; Cu-0,02; Mo-0,54; B-0,16; Co-0,004.
Algele genului Pleurochloris necesit cantiti variate de microelemente (mg/l):
Fe-0,002-1,86; Mn-0-0,66; Zn-0-0,05; Cu-0-0,02; Mo-0-0,54; B-0-0,16; Co-00,004. Algele din genul Chlorocloster au necesiti mai mici de microelemente
dect cele din genul Pleurochloris (Tab. 22).
76

77

Ordin
Nitzschia

Gen

Ordin

Taxoni
Familie

Gen

1,86

Fe
0,66

Mn
0,05

Zn
0,02

Cu
0,54

Mo

Cyanidiaceae

Cyanidium
0,02

1,87

Fe
0,01

0,44

0,002

0,05

Zn

0,02

Cu

0,001

0,54

Mo

0,16

0,001

0,004

Co

Concentraia microelementelor, mg/l


Mn

0,004

Co

Tabelul 21

0,16

Clas

Familie

Heterococ- Pleurochloricales
daceae

Ordin

Taxoni
1,86

Fe

0,66

Mn

0,05

Zn

0,02

Cu

0,54

Mo

0,16

0,004

Co

Chlorocloster 0,1

0,07

0,045

0,015

0,03

Pleurochloris 0 , 0 0 2 - 0-0,66 0-0,05 0-0,02 0-0,54 0-0,16 0-0,004


1,86

Chloridella

Gen

Concentraia microelementelor, mg/l

Tabelul 22
Coninutul microelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor galben-verzi, mg/l

Heterococcophyceae

Cyanidiales

Rhodellophyceae Porphyridiales Porphyridiaceae Porphyridium

Clas

Nitzschiaceae

Familie

Tabelul 20

Concentraia microelementelor, mg/l

Coninutul microelementelor m mediile nutritive de cultivare a algelor roii, mg/l

Pennatophyceae Raphinales

Clasa

Taxoni

Coninutul microelementelor n mediile nutritive de cultivare a algelor diatomee, mg/l

7.3. Prepararea mediilor nutritive


7.3.1. Prepararea mediilor nutritive lichide
Prepararea mediilor nutritive este o etap important a procesului de cultivare a algelor. Acest etap se realizeaz prin metode caracteristice pe care le
vom descrie n detaliu n continuare.
Metodele clasice de preparare a mediilor nutritive lichide pentru cultivarea
algelor includ urmtoarele etape:
1. Selectarea i utilizarea reactivelor chimice (ce sunt destinate pentru analize) indicate n recet;
2. Cntrirea i adugarea reactivelor n mediul nutritiv n ordinea indicat
n recet;
3. Fiecare sare se adaug n mediul nutritiv dup dizolvarea srii precedente;
4. Srurile de Fe (citrat de fer) se dizolv separat n volume mici de ap fiart, dup care se rcesc i se adaug n mediul nutritiv sterilizat;
5. n mediul nutritiv sterilizat i rcit se adaug soluia sterilizat de microelemente;
6. Pentru omiterea sedimentrii mediilor nutritive, componentele mediului
se recomand a fi pregtite separat n volume mici. Soluiile trebuie sterilizate i dup rcire ele se combin, fiind adugat volumul necesar de
ap;
7. Dup necesitate, se ajusteaz pH-ul cu ajutorul soluiilor speciale.123, 124
Aplicarea tehnicii de preparare a mediilor nutritive sus-menionate este destul de anevoioas, n special la cultivarea industrial a algelor. Pentru prepararea acestor medii sunt necesare cheltuieli, munca specialitilor nalt calificai,
legate de timpul necesar la dizolvarea reagenilor chimici. Astfel, pentru soluionarea acestei probleme propunem o modalitate de preparare a mediului nutritiv, pentru cultivarea n condiii de laborator i industrial, testat pe exemplul
algei Spirulina platensis.
Procedeul se desfoar prin adugarea reagenilor necesari n apa de robinet, pentru prepararea a 1 l de mediu Zarrouk i prin introducerea lor n balonul
Erlenmayer cu volum de 1 l. Dizolvarea reagenilor se produce utiliznd apa
potabil din robinet sub presiunea cuprins ntre 20 i 25 bari. Mediul preparat
astfel iniial are o culoare alb, dup care devine transparent. Pentru a putea
efectua o comparaie ntre metode, mediul nutritiv Zarrouk a fost preparat, la
fel pe baza apei din robinet, conform procedeului clasic (cu parcurgerea celor
123
.., .., .. . -
. : , 1975. 241 c.
124
Atlas R.M. Handbook of microbiological media fourth edition. New York, 2010. 2063 p.

78

7 etape sus-menionate). Alga Spirulina platensis, aflat n faza exponenial,


s-a inoculat pe mediile obinute, n cantitate de 0,2530,002g/l BAU. Cultivarea periodic a algei Spirulina platensis (n 5 repetri) s-a efectuat n baloane
Erlenmayer cu volum de 200 ml, volumul mediului constituind 200 ml. Recipientul a fost plasat la temperatura de 271C i iluminarea continu de 18-24
mii erg/cm2, cu agitare periodic n timpul zilei, pe parcursul a 15 zile.
Prepararea mediului nutritiv, conform procedeului, permite economisirea
a 40% din timpul alocat acestei etape tehnologice de cultivare (la prepararea
mediului sub presiune este nevoie de 9.13 min., iar conform procedeului clasic de 15.41min.), obinerea unei cantiti mai nalte de biomas algal (la a
15-a zi de cultivare biomasa atingea 2,0020,100g/l BAU pe mediul preparat
conform procedeului, iar n varianta cu mediu pregtit dup metoda clasic
1,7920,090 g/l BAU) (Tab. 23).
Tabelul 23
Productivitatea algei Spirulina platensis cultivate pe mediul Zarrouk
conform procedeului propus, g/l BAU
Zilele de
analiz

Loturile experimentale
Mediul preparat clasic
(Xx)

Mediul preparat conform


procedeului
(Xx)

0,2530,002

0,2530,002

0,5650,012

0,5520,013

0,7780,022

0,8510,033

0,9510,040

1,0880,050

12

1,5620,042

1,6040,052

15

1,7920,090

2,0020,100

Valorile vitezei de reproducere i de cretere a populaiei algale sunt mai


nalte n cazul preparrii mediului conform procedeului (atingnd 0,071- 0,305
zile-1 n faza exponenial CE) comparativ cu modalitatea clasic de preparare
(0,056-0,259 zile-1 n faza exponenial). Aceeai legitate este specific i n
cazul coeficientului de reproducere, care atest cele mai nalte valori n lotul
cu mediul nutritiv obinut pe baza dizolvrii reagenilor sub presiune (1,248)
la a 15-a zi, iar n lotul cu dizolvare prin agitare 1,147 (n aceeai perioad)
(Tab. 24).

79

Tabelul 24
Modificrile indicilor fiziologici ai algei Spirulina platensis cultivate pe
mediul Zarrouk conform procedeului propus
Zilele
de analiz

3
6
9
12
15

Loturile experimentale
Mediul preparat dup metoda
Mediul preparat clasic
nou
Viteza
Viteza de
Coeficien- Viteza de Viteza de Coeficiende recretere a
tul de rereprodu- cretere a tul de reprodu- populaiei producere
cere
populaiei producere
cere
0,116
0,156
2,233
0,112
0,149
2,181
0,046
0,106
1,376
0,062
0,149
1,541
0,029
0,086
1,222
0,035
0,118
1,278
0,071
0,305
1,642
0,056
0,258
1,474
0,019
0,115
1,147
0,099
0,119
1,248

Astfel, putem conclude c prepararea mediului nutritiv Zarrouk pe baza apei


din robinet sub presiune asigur intensificarea proceselor fiziologice ale algei
Spirulina platensis (Nordst.) Geitl., obinnd ca rezultat majorarea biomasei algale i economisirea timpului specific acestei etape tehnologice de cultivare.

7.3.2. Prepararea mediilor nutritive solide


La mediul lichid cu srurile dizolvate se adaug agar (15 g/l) pentru mediile
solide tipice. Concentraile mici de 7-10 g/l de agar se utilizeaz pentru obinerea
mediilor nutritive semisolide. Dup adugarea agarului mediul se nclzete pn
la fierbere pentru dizolvarea agarului. Mediul obinut se introduce n recipientul
de cultivare i se rcete. Dup solidificare mediul nutritiv este utilizat pentru
cultivare.125

7.4. Sterilizarea mediilor nutritive

Sterilizarea mediilor nutritive este operaiunea de distrugere a microorganismelor prezente ntr-un mediu nutritiv. Familiarizarea cu metodele de sterilizare
este necesar pentru desfurarea corect i reuit a procesului de cultivare a
algelor. Actualmente exist mai multe metode de sterilizare:

Metode care utilizeaz agenii fizici cldura, radiaia ultraviolet, filtrarea, ultrasunetul;

Metode care utilizeaz agenii chimici substane antiseptice etc.

125

Atlas R.M. Handbook of microbiological media fourth edition. New York, 2010. 2063 p.

80

7.4.1.Sterilizarea
Sterilizarea
mediilor
nutritive
lichide
7.4.1.
mediilor
nutritive
lichide
Autoclavarea

Autoclavarea
Mediile lichide se sterilizeaz, de regul, prin autoclavare (la temperatura
regul, prin autoclavare
(la temperatura
121C
timp de
deMediile
121Clichide
timp se
desterilizeaz,
20 min.).deAutoclavarea
reprezint
sterilizareadecu
vapori
de 20ap
min.).
Autoclavarea
reprezint
sterilizarea
cu
vapori
de
ap
sub
presiune
(Fig.
9).
Este
cel
sub presiune (Fig. 9). Este cel mai frecvent utilizat n practic (pentru
mai obinerea
frecvent utilizat
n practic
(pentru obinerea
culturilor
bacteriologic
curate), ieste
o
culturilor
bacteriologic
curate), este
o sterilizare
complet
sigur.
sterilizare
complet
i
sigur.
Vaporii
de
ap
supui
presiunii
rezult
cu
temperaturii
de
peste
Vaporii de ap supui presiunii rezult cu temperaturii de peste 100C. Astfel,
100C.
Astfel,
la 0,5 atmosfere
temperatura
de 115C;
1 atmosfer temperatura
temperatura este
de de
la 0,5
atmosfere
temperatura
este este
de 115C;
la la
1 atmosfer
este
126
126
121C;
la 1,5 atmosfere
de 127 C,
la 2127
atmosfere
135C.
121C;
la 1,5 atmosfere
de
C, la2deatmosfere
de 135C.

Fig.9.
utilizatelalacultivarea
cultivareaalgelor
algelor.
Fig. 9.Autoclavarea
Autoclavareamediilor
mediilor nutritive
nutritive utilizate
La
mediilor
nutritive
se acordat
atenie atenie
special special
strii acestora.
se
Lasterilizarea
sterilizarea
mediilor
nutritive
se acordat
striiDac
acestora.
modific
culoarea
sau
se
formeaz,
sediment
atunci
acest
mediu
nutritiv
nu
poate
fi
utilizat
la
Dac se modific culoarea sau se formeaz sediment, atunci acest mediu nutricultivare.
Mediul
poate
s
se
modifice
din
mai
multe
cauze,
de
aceea
trebuie
verificat
starea
lui
tiv nu poate fi utilizat la cultivare. Mediul poate s se modifice din mai multe
n timpul
etape
de pregtire.
Vitaminele
potnfitimpul
adugate
n mediu
dup
cauze,fiecrei
de aceea
trebuie
verificat
starea lui
fiecrei
etapenutritiv
de pregtire.
sterilizare,
deoarecepot
elefisunt
sensibilen
la sterilizare.
Vitaminele
adugate
mediu nutritiv dup sterilizare, deoarece ele sunt

sensibile la sterilizare.

Tindalizarea
Tindalizarea

Tindalizarea
o pasteurizare
3 ori la
3 zile. Se
Tindalizarea
esteeste
o pasteurizare
repetatrepetat
de 3 ori de
la interval
de interval
3 zile. Sede
recomand
recomand
pentru
mediile
nutritive
care
conin
diferite
substane
organice
pentru mediile nutritive care conin diferite substane organice (de exemplu, glucide). n(de
exemplu,
n intervalul
sterilizri
mediilecamerei
nutritive
secapstreaz
intervalul
dintre glucide).
sterilizri mediile
nutritive dintre
se pstreaz
la temperatura
pentru
sporii
la temperatura
camereila pentru
ca sporiicare
rmai
evolueze
la forme
rmai
nedistrui s evolueze
forme vegetative
vor finedistrui
distruse la s
urmtoarea
nclzire.
vegetative
vor fi distruse
urmtoarea
nclzire.n Tindalizarea
estecnd
o steTindalizarea
este care
o sterilizare
complet. la
Tindalizarea
se utilizeaz
locul autoclavrii,
rilizare
complet.
Tindalizarea
se
utilizeaz
n
locul
autoclavrii,
cnd
mediul
mediul nutritiv conine componente sensibile la creterea temperaturii.
nutritiv conine componente sensibile la creterea temperaturii.
CarolinaSupply
Biological
Supply
Company.
Culturing
Carolina Biological
Company.
Culturing
Algae. U.S.A.,
2012.Algae.
27 p. U.S.A., 2012. 27 p.

126

126

83

81

Sterilizarea n cuptorul cu microunde


Cu ajutorul acestei metode se sterilizeaz mediile lichide i solide cu volum
mic ( 1,5 l).127 Metoda prevede expunerea mediului nutritiv lichid pe 5-10 min.
la 700 W; mediile solide pe 20 min. la 600 W sau pe 45 min. la 600 W fr
ap. Cu ajutorul acestei metode de sterilizare putem atinge temperatura maxim
a mediului nutritiv de 84C. Aceast metod modific pH-ul mediului nutritiv,
dup rcire, n direcia bazic.
Cu ajutorul acestei metode pot fi sterilizate att mediile nutritive de cultivare a
algelor, ct i cele pentru cultivarea ciupercilor i bacteriilor (Tab. 25.)
Tabelul 25
Efectul utilizrii metodei de sterilizare cu microunde asupra
microorganismelor din mediile nutritive de cultivare a algelor, bacteriilor i
fungilor 128
nutritiv Mediu nutritiv
Mediu nutritiv Mediu
Timpul expunerii, pentru
pentru
cultivarea
pentru cultivarea
min.
cultivarea
algelor
fungilor
bacteriilor
0
+
+
+
3
+
+
+
5
+
+
8
+
10
Not: + prezena contaminrii; - lipsa contaminrii

Cu toate acestea, se recomand ca vitaminele s se adauge dup sterilizare.


Sterilizarea cu microunde este eficient n timp i permite evitarea polurii mediilor cu metale grele i sedimentarea carbonailor.129 Dezavantajul acestei metode
este c permite sterilizarea mediilor nutritive n volume mici, pe cnd autoclavarea permite sterilizarea unui volum mai mare de mediu (de 20 l).130

Sterilizarea cu ajutorul lmpii ultraviolete


Acest tip de sterilizare este pe larg utilizat, ns radiaia ultraviolet este periculoas pentru sntatea omului (n special pentru ochi), astfel c trebuie s ex127
.., .., ..
: . : - , 2008. 152 .
128
Keller M.D., Bellows W.K., Guilhd R.R.L. Microwave treatment for sterilization of
phytoplankton culture media. // J. Esp. Mar. Bid. Ed., 1988, vol. 117, p.279-283.
129
Jeng D.K.H., Kaczmarek K.A., Woodworth A.G., Balasky G. Mechanism of microwave
sterilization in the dry state. // Appl. Environ. Microbiol., 1987, no53:2133, p.7.
130
Kawachi M., Nol M.H. Sterilization and sterile technique. // Algal Culturing Techniques,
2005, p.65-81.

82

cludem contactul razelor cu corpul uman. n procesul funcionrii lmpilor se elimin ozon, care la fel este toxic pentru om. Razele ultraviolete la 260 nm au efect
letal asupra microorganismelor. Lmpile ultraviolete eman iluminare cu lungimea de und de la 240 la 280 nm. Energia variaz n funcie de mrimea lmpii
i se situeaz ntre 40 i 40000 mkW*c/cm2. Razele ultraviolete nu ptrund prin
sticla obinuit, de aceea pentru sterilizarea mediilor nutritive lichide cu volum
mare se recomand utilizarea lmpilor rezistente la ap pentru administrarea lor
subacvatic. Pe lng aceasta, lumina ultraviolet nu ptrunde uniform pe ntreg
volumul apei, se absoarbe i, odat cu ndeprtarea de la surs, se reduce. Aceast
problem poate fi soluionat prin utilizarea lmpilor mai puternice, prin agitarea
probelor i expunerea pe o perioad mai ndelungat.

7.4.2. Sterilizarea mediilor nutritive solide


Pentru sterilizarea mediilor nutritive solide, ca i n cazul mediilor lichide, de
regul, se utilizeaz autoclavarea (15 minute la 121C). La utilizarea vaselor Petri
agarul se repartizeaz uniform pe vasul steril cu instrumente sterile, dup care
se rcete. Pentru evitarea infectrii, volumul agarului nu trebuie s depeasc
jumtate din volumul vasului Petri.

7.5. Pregtirea inoculului algal


Inocularea algelor pentru cultivare se realizeaz dup metode speciale care variaz n funcie de caracteristicile de cretere a culturii, nivelul de adaptare la condiiile concrete de cultivare. De menionat c inoculul algal nu poate fi colectat
din culturile crescute pe medii agarizate, deoarece nu putem obine unul omogen.
Astfel, cultura crescut pe agar trebuie mai nti transferat pe medii lichide i,
dup ce a crescut 15-20 de zile, de pe aceste medii poate fi luat biomasa algal
n calitate de inocul.
n cazul culturilor ce cresc intens la omogenizare, probele se mrunesc (cu
ajutorul mainii cu cuite Aparatul utel prin expunerea culturii n aparat pe
10 min.). Cultura obinut, n cazul n care celulele au dimensiuni de 4-7 , se
filtreaz n vas steril (utiliznd filtru cu lent albastr).131
Uneori putem obine culturi fracionate prin centrifugare. n acest caz, pentru inoculare se utilizeaz fracii separate de celule sedimentate n rezultatul
centrifugrii.
Pentru pregtirea inoculului utilizat n cultivarea algelor propunem realizarea
urmtoarelor etape:

Extragerea inoculului algal se realizeaz din cultura care a crescut anterior
pe acelai mediu nutritiv;

Inoculul extras se obine din cultura aflat la mijlocul fazei exponeniale
.., .., .. . -
. : , 1975. 241 c.
131

83

de cretere;

Inoculul se separ de mediul nutritiv prin filtrare sau centrifugare;

Splarea inoculului (cu apa distilat) i sterilizarea;

Administrarea inoculului n forma optim i doza necesar;

Agitarea probelor inoculate.
Important n procesul de cultivare a algelor este i cantitatea de inocul. De regul, cantitatea inoculului algelor este de 0,40,5 g/l sau de 0,40,5 g/l calcul la biomas absolut uscat pentru cultivarea periodic. Pentru cultivarea continu sau
semicontinu inoculul trebuie administrat n funcie de cantitatea specific iniierii
fazei exponeniale de cretere (determinat anterior la cultivarea periodic).
Forma inoculului are i ea o importan deosebit n procesul de cultivare
a algelor. Pentru a studia influena formei de administrare a inoculului asupra
acumulrii biomasei algale au fost efectuate experimente de cultivare a algelor
Anabaenopsis sp. i Nostoc flagelliforme pe acelai mediu nutritiv lichid (Drew)
la administrarea inoculului n form ntreag i mrunit (Tab. 26).
Tabelul 26
Productivitatea algelor Anabaenopsis sp. i Nostoc flagelliforme la
administrarea formei variate a inoculului, g/l
Perioada
analizat,
zile

Anabaenopsis sp.

Nostoc flagelliforme

Forma de administrare

Forma de administrare

Mrunit
Xx

ntreag
Xx

Mrunit,
Xx

ntreag,
Xx

0,400,01

0,400,01

0,400,01

0,400,01

0,960,08

0,840,08

1,060,18

1,000,20

1,170,10

1,630,10

2,370,30

2,730,21

2,080,20

2,180,21

3,280,20

3,580,30

n rezultatul efecturii acestor experimente s-a demonstrat c pentru majorarea productivitii algelor cianofite Anabaenopsis sp. i Nostoc flagelliforme inocularea trebuie administrat n form ntreag, deoarece obinem practic aceleai
rezultate (Tab. 26).
7.6. Condiiile de cultivare a algelor
Pentru cultivarea algelor trebuiesc meninute i respectate condiii specifice de
temperatur, iluminare, agitare, care ar asigura creterea i dezvoltarea optim a
celulelor algale. De multe ori aceste condiii sunt i factori ce limiteaz creterea
biomasei algelor n procesul de cultivare, iar nerespectarea lor duce la aceea c
sistemul devine ineficient. n continuare, ne vom referi succint la fiecare din condiiile de cultivare a algelor.
84

7.6.1. Temperatura
Pentru cultivarea algelor tropicale i subtropicale temperatura optim este de
20-25C132, constatare susinut i de H.Belcher i E.Swale.133
Alte surse tiinifice menioneaz c pentru algele ce populeaz apele dulci i
apele srate (marine, oceanice) temperatura optim pentru cultivare este de 1525C. Iar temperaturile mai mari de 30C sunt considerate letale.134
Conform datelor FAO, temperaturile optimale pentru cultivarea algelor sunt
cuprinse, n general, ntre 16 i 27C n funcie de compoziia mediului nutritiv,
specii i, concret, de tulpina cultivat. Temperatura optim pentru cultivarea majoritii algelor este de 18-24C. Temperaturi mai mici de 16C ncetinesc creterea culturii, iar cele mai mari de 35C sunt letale pentru multe specii de alge.135
.. , .. , .. i coautorii136 consider
c pentru cultivarea algelor marine temperatura optim este de 282C. Spre
exemplu, Chlorella poate fi cultivat la temperatura de 30C, Platimonas de
25C, Dunaliela de 26-28C.
Pentru cultivarea algelor I.Laing137menioneaz alte valori ale temperaturilor
optimale: 17-22C. Temperaturile mai mici de 17C stopeaz creterea algelor, la
fel ca i n cazul temperaturilor mai mari de 27C.
n general, n literatura de specialitate exist preri diferite referitor la temperatura optim pentru cultivarea algelor. Din aceste considerente, n Anexa nr.3
prezentm speciile de alge i temperaturile optimale meninute la creterea acestora propuse de diferii autori.
Conform datelor din tabel, la cultivarea majoritii speciilor de alge cianofite
temperaturile optimale se situeaz n limitele 22-27C. Cu excepia unor specii care
prefer temperaturi mai reduse (Chroococcidiopsis thermalis 12C) sau mai nalte (Chroococcus globosus, Cyanidium caldarium, Nostoc flagelliforme, Spirulina
major, Spirulina maxima, Spirulina platensis, Spirulina subsalsa 25-35C).
Pentru majoritatea algelor verzi temperaturile optimale se includ n limitele
22-27C. i n acest caz avem unele excepii, cum ar fi Stichococcus chodati,
Stichococcus minor, Stichococcus mirabilis, Stichococcus sp., pentru care temperatura optim de cultivare este cuprins n limitele 15-20C.
Valorile optimale pentru cltivarea algelor diatomee, roii i euglenine sunt
cuprinse ntre 22 i 25C.
West J.A. Long-term macroalgal culture maintenance.// Algal culturing techniques, 2005,
p.157-163.
133
Belcher H., Swale E. Culturing Algae, a guide for schools and colleges. U.S.A., 1982. 25 p.
134
James D.E. Culturing algae. U.S.A., 2012. 27 p.
135
FAO. Manual on the production an duse of live food for aquaculture. Rome, FAO. 1996.
295 p.
136
.., .., .. .
. , 1986. 65 .
137
Laing I. Cultivation of marine uniclular algae. Lowestoft, 1991. 31 p.
132

85

7.6.2. Iluminarea
Algele sunt capabile s-i menin viteza optim de cretere la un interval larg
al iluminrii ce variaz de la o specie la alta.
Confor afirmaiilor lui I. Cruu138, intensitatea luminii, n cazul creterii dirijate a algelor, reprezint un factor de mediu extrem de important, nu doar prin
semnificaia sa, n sine, de element determinant al fotosintezei, ci i prin faptul
c, pe parcursul derulrii procesului de cretere a algelor, odat cu mrirea densitii suspensiei n mediul nutritiv apare un efect de autoumbrire n cadrul culturii
algale, ceea ce reprezint n fapt scderea intensitii radiaiei luminoase la nivelul culturii n ansamblul su.
Pentru a se evita efectele negative ale acestei situaii asupra productivitii
culturilor, au fost propuse trei tipuri de soluii tehnologice:
introducerea unor sisteme eficiente de agitare continu a suspensiei, astfel
ca, practic, toate celulele s primeasc cantitatea de lumin necesar pentru
realizarea fotosintezei;

creterea treptat a intensitii luminii, direct proporional cu creterea
populaional, respectiv mrirea ,,densitii optice a suspensiei algale;

ndeprtarea (recoltarea) periodic a unei pri din cantitatea de alge din
cultur, pentru a menine densitatea optic a suspensiei n limite convenabile pentru derularea normal a fotosintezei.139
Algele pot fi cultivate la lumina soarelui sau la o surs artificial de lumin
(lmpi luminescente sau fluorescente). La concentraii mici ale celulelor algale
(pn la 0,5 g/l biomas absolut uscat) iluminarea deasupra culturii nu trebuie s
fie mai mare de 10-12 klx. La concentaria biomasei de 0,5-1 g/l biomas absolut
uscat i mai mare algele trebuie cultivate la iluminare mai mare pn la 100
klx.140
Sursele artificiale de lumin, generate de lmpile fluorescente i incandescente,
au o eficacitate diferit. Lmpile incandescente sunt inferioare lmpilor fluorescente i sunt utilizate rareori pentru cultivarea algelor. Lmpile fluorescente au o durat
de funcionare foarte bun, o intensitate mai mare i sunt mai eficiente. P.W. Behrens141 menioneaz c fluxul luminos scade proporional cu durata de funcionare,
ca urmare a degradrii luminoforului sub aciunea vaporilor de mercur i datorit
nnegririi extremitilor tubului din cauza volatilizrii filamentului.
Unii autorii consider c cultivarea algelor, n general, trebuie s fie asigurat
cu lumin timp de 16 ore pe zi, 8 ore aflndu-se n ntuneric. n mod ideal cultu138
Cru I. Cultura algelor pentru biomasa i principii active: Note de curs, lucrri de
laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
139
Ibidem.
140
.., .., .. .
. , 1986. 65 .
141
Behrens P.W. Photobioreactors and fermentors: the light and dark sides of growing algae.
// Algal Culturing Techniques, 2005, p.189-203.

86

rile trebuie iluminate cu lmpi fluorescente de 40 W, iar dispozitivul de iluminare


s fie nsoit de cronometru. Unii autorii142 consider c pentru cultivarea algelor
se recomand ca iluminarea s fie de 4000-5000 lux. Intensitatea luminii poate
varia n funcie de cantitatea de biomas. Pentru inocul se recomand asigurarea
cu lumin de 500-1000 lux.
J.A. West143 la fel susine c cea mai optim surs de lumin pentru cultivarea
microalgelor n laborator este lumina artificial generat de lmpile fluorescente
de (15-36 W). Puterea maxim a acestor lmpi este de 80 mol fotoni*m-2*s-2 la
o distan de 50 mm. Pentru cultivarea macroalgelor aceast iluminare este prea
puternic. Ele prefer o intensitate mai redus a luminii.
Pentru cultivarea algelor n instalaii industriale, conform datelor lui I.Cru144,
radiaiile din domeniul luminii roii (n jurul lungimii de und de 600 nm) prezint eficien fotosintetic cea mai ridicat.

Wnse all rights reserved. Working with algae and cyanobacteria. U.S.A., 2012. 10 p.
West J.A. Long-term macroalgal culture maintenance. // Algal Culturing Techniques, 2005,
p.157-163.
144
Cru I. Cultura algelor pentru biomas i principii active: Note de curs, lucrri de
laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
142
143

87

CAPITOLUL VIII
METODE DE CULTIVARE A ALGELOR
8.1. Caracteristica general a metodelor de cultivare a algelor
Cele mai frecvente metode utilizate la cultivarea algelor, ndeosebi n scopuri
industriale, sunt: cultivarea periodic; periodic n adncime; multiciclic; semi145, 146 ,147
continu; continu.145-147
n continuare vom descrie i carcateriza succint fiecare metod de cultivare a
algelor.

Cultivarea periodic

Cultivarea periodic prevede inocularea celulelor algale n mediul nutritiv la


nceputul procesului i meninerea culturii pn la atingerea fazei propuse de
cretere a culturii. Concentraia microorganismelor n procesul cultivrii periodice crete, dup care se oprete din cauza limitrii substratului sau prin inhibarea
produselor metabolice toxice.148, 149 Pentru acest tip de cultivare sunt caracteristice modificri nencetate ale strii fiziologice a celulelor, cauzate de schimbrile
condiiilor produse de activitatea vital a celulelor nsei.150 Astfel, rezult c
cultivarea periodic poate menine reproducerea celulelor numai pentru o perioad de timp limitat. Dup faza exponenial de cretere, populaia ncepe a
suferi din cauza insuficienei elementelor nutritive sau este inhibat de produsele
metabolice, ceea ce duce la nrutirea strii fiziologice a celulelor. Practic toate
sistemele cultivrii periodice sunt nchise, deoarece microorganismele n ele se
reproduc i trec toate fazele de dezvoltare fr adaosul mediului nutritiv i extragerea biomasei mpreun cu mediul nutritiv.
La studierea dinamicii creterii culturii microorganismelor trebuie respectate
unele condiii, ca: viabilitatea inoculului, prezena n mediul nutritiv a tuturor
elementelor necesare, lipsa inhibitorilor, meninerea condiiilor fizico-chimice
optime n mediu.

Cultivarea periodic n adncime

Cultivarea periodic n adncime este utilizat la cultivarea organismelor pe


.. . :
, 2004, c.4-64.
146
.. (Gracilaria): O. :
M, 2002, . 60, .57-70.
147
.., .., .., .. . B: , 2008, .9-18.
148
. . : , 1983. 263 .
149 .., .. . K . :
, 2002. 105 .
150
.. . . a: , 1984. 280 .
145

88

medii nutritive lichide, cu agitarea periodic a culturilor, pentru echilibrarea condiiilor de cretere n diferite pri ale volumului de lucru din instalaia de cultivare, fapt ce a condus la apariia sistemelor dinamice de cultivare n adncime,
nzestrate cu echipament special. Cultivarea periodic n adncime, n fermentatoare, n comparaie cu cea de la suprafa, accelereaz creterea i dezvoltarea
microalgelor pe contul nlturrii aa-numitei ,,zone flmnde din jurul celulelor
i asigur obinerea unei culturi omogene cu agitare ideal. 151 n aa sisteme celulele se repartizeaz uniform n tot volumul fermentatorului i se afl n aceleai
condiii, avnd loc rspndirea uniform a mediilor nutritive i a produselor metabolice. Implementarea sistemelor dinamice n adncime ne permite s obinem
mai raional nu doar biomasa i endometaboliii, dar i exoprodusele de sintez
algal, eliminate de celule n mediul nconjurtor n rezultatul metabolismului.
Obinnd din start o rspndire larg n producerea drojdiei i antibioticelor, n
continuare metoda cultivrii n adncime se recomand ca fiind mai avantajoas
pentru cultivarea industrial i n condiii de laborator a microorganismelor, inclusiv a algelor.152

Cultivarea periodic ndelungat

Cultivarea periodic ndelungat prevede numai o singur umplere i o golire


a fermentatoarelor. Ciclul de dezvoltare a microalgelor n procesul de cultivare periodic ndelungat este mai lung fie din contul adaosului (periodic sau
nentrerupt), fie din cauza meninerii ndelungate a celulelor n sistem (cultura
dialitic). Concentraia microalgelor i viteza de cretere n procesele periodice
ndelungate sunt mai mari n comparaie cu procesele periodice obinuite.
Astfel, se prelungete att faza exponenial, ct mai ales faza de cretere liniar. Adaosul de substane nutritive n mediu transform procesul periodic n
proces periodic ndelungat i se utilizeaz, n general, la obinerea produselor
biosintezei, care mresc performana procesului.
La culturile periodice treptat se acumuleaz produse metabolice care inhib
creterea. Pentru sporirea productivitii sau n scopul ridicrii concentraiei biomasei se utilizeaz procesul de dializ.153 Cea mai simpl metod de acest gen
este cultivarea organismelor n saci de polietilen, dar aceast metod nu are o
rspndire larg. La cultivarea ndelungat periodic poate fi atribuit cultivarea
microalgelor n sisteme dialitice cu adaos de mediu, deoarece adaosul mrete
perioada de cretere i dezvoltare a populaiilor algale, ns acest sistem nu este
continuu, din cauza lipsei procedurii de extragere a biomasei. n sistemele dialitice cu adaos de mediu biomasa total crete pn cnd ajunge la aa o stare,
nct devine imposibil agitarea ei de mai departe. Astfel, metoda d posibilitatea
.. . : ,
1978. c.230 -300.
152
Sasson A. Biotehnologii i dezvoltare. Bucureti: Editura Tehnic, 1993. 303 p.
153
.., .. . : ,
1984. 160 .
151

89

de a cultiva microorganisme, inclusiv alge, pn la obinerea unui volum nalt


de biomas. Culturile dialitice se utilizeaz, n general, n trei cazuri: 1) pentru
produsul concentrat nedifundat; 2) pentru reducerea concentraiei produsului difundat, inhibnd creterea i mrirea produciei biomasei; 3) pentru acumularea
i separarea de la celule a produsului difundat.154

Cultivarea multiciclic
Cultivarea multiciclic se caracterizeaz prin faptul c ciclul de cultivare a
culturilor se repet de multe ori, fr sterilizarea multipl a mediului. n procesul
cultivrii multiciclice dependena concentraiei microalgelor i viteza specific
relativ (n fiecare ciclu) sunt asemntoare cu cele ale cultivrii periodice. Cultivarea multiciclic poate fi diferit. Ea poate fi efectuat ntr-un fermentator, repetnd de multe ori ciclul complet de dezvoltare a culturilor, fr ntrerupere pentru
sterilizare. La un fermentator se poate repeta sau micora ciclul, finisndu-l, de
exemplu, cu faza exponenial de cretere. Cultivarea multiciclic ofer posibilitatea de a implementa procesul multistadic i multiciclic, care este bazat pe
principiul repetrii i urmrii cultivrii periodice, parcurgnd cteva cultivatoare,
cu scopul de a utiliza cultura pe un termen lung. Cnd cultura ntr-un fermentator
ajunge la starea exponenial, o parte din ea se transfer n alt cultivator. n primul cultivator cultura continu s se dezvolte, pn la urmtorul stadiu. Cnd n
cel de-al doilea fermentator cultura de asemenea ajunge la starea exponenial, o
parte din ea se transfer n al treilea. Deoarece cultura atinge doar faza exponen155-157
ial, nu are loc mbtrnirea sau degenerarea ei.155156157
Cultivarea multiciclic a
microalgelor se utilizeaz att la obinerea biomasei, ct i a produselor de sintez ca proteinele, aminoacizii etc. Utilizarea acestei metode asigur reducerea
de cteva ori a cheltuielilor de obinere a produsului, n comparaie cu metoda de
cultivare periodic.

Cultivarea semicontinu

La cultivarea semicontinu n sistemele semicontinue descrcarea i ncrcarea total a cultivatorului se efectueaz o singur dat. n procesul de cretere
a culturii o parte din coninut se elimin, iar volumul eliberat se nlocuiete cu
mediul nutritiv proaspt pregtit. n aa mod funcioneaz sistemul de eliminarenlocuire. Astfel, cultivarea semicontinu se caracterizeaz prin densitatea i volumul culturii eliminate i adugarea mediului nutritiv proaspt pregtit n cultivatorul n funciune. Regimul stabilit la cultivarea semicontinu se caracterizeaz
154
.. . : , 1992. 192 .
155
.. . : ,
1978, c.230 -300.
156
.. . :
, 2004, c.464.
157
. . : , 1983. 263 .

90

prin oscilarea concentraiei organismelor n jurul uneia i aceleiai mrimi relativ


constante, cu o vitez specific de cretere a populaiei, la fel relativ constant.
Acest tip de cultivare poate fi realizat n sisteme deschise omogene unistadice i
poate fi aplicat n orice fermentator utilizat la cultivarea periodic, nzestrat cu
sisteme de agitare i aerare.
Cultivarea semicontinu, n diverse varieti, se utilizeaz n procesul de producere a algelor, drojdiilor .a.

Cultivarea continu

n comparaie cu cultivarea periodic, n procesul continuu mediul nutritiv se


introduce permanent, la fel permanent are loc i extragerea biomasei mpreun
cu produsele vitale. Regimul stabilit n cazul cultivrii continue se caracterizeaz
prin concentraia stabil a microalgelor, prin viteza specific de cretere a populaiei. Acest tip de cultivare se realizeaz n sisteme dinamice deschise, care pot
fi att omogene, ct i eterogene. Aceste sisteme sunt capabile s funcioneze
ntr-un interval lung de timp i ntr-un regim permanent.
n sistemele omogene cu agitare ideal microalgele cresc n mediul cultural
neschimbtor i n fiecare moment concret se gsesc n aceeai stare fiziologic,
adic ntr-o stare de echilibru dinamic, care se numete steady state. Concentraia tuturor produselor n interiorul fermentatorului i n soluia extras este
aceeai, iar viteza de diluare este egal cu viteza specific de cretere n timpul
echilibrului stabilit. Procesele date au unele avantaje tehnice, comparativ cu cele
periodice, deoarece teoretic pot fi realizate ntr-un interval de timp ndelungat.158
Oriice proces periodic poate fi transformat n proces continuu n flux. Cultivarea continu creeaz posibilitatea de a menine condiii permanente de cretere pe
calea obinerii unui aa coninut al mediului nutritiv, la care doar unul dintre factorii dorii poate limita creterea. Dac ntr-un astfel de proces densitatea populaiilor este determinat de coninutul chimic al mediului (concentraia factorului
limitativ de cretere), el se numete cultivare hemostat. Cultivarea hemostat n
condiii strict controlate st la baza studierii particularitilor fiziologice, biochimice i a altor proprieti generale ale celulelor microalgelor sau a culturilor de
alt natur. n cazul cultivrii continue n laborator pot fi modelate condiiile naturale, fapt ce poate ajuta la rezolvarea unor probleme ecologice. Astfel, ntr-un
interval de timp scurt pot fi urmrite fenomene care n condiii naturale sunt de
lung durat i pot fi stabilite legiti cu caracter ecologic.159
Un alt principiu de dirijare a acestor procese des utilizat este turbidostatul. n
acest caz, introducerea mediului nutritiv se efectueaz dup comanda elementului fotoelectric ce nregistreaz densitatea optic a culturilor. Spre deosebire
de hemostat, viteza de diluie se instaleaz automat, n funcie de densitatea
optic a culturii. Turbidostatul asigur obinerea unei viteze de cretere egale
158
.. 2:
. B: M, 2005, . 67, c.98-110.
159
.. . . : , 1984. 280 .

91

cu cea maximal, utilizat la studierea culturii, fixat n stadiul exponenial


de cretere. Hemostatul se utilizeaz n cazul vitezei de diluare ncepnd de
la valoarea cea mai mic pn la cea apropiat de valoarea maximal a vitezei
specifice de cretere.
n prezent sunt elaborate diferite variante de cultivare nentrerupt a microalgelor, ce funcioneaz dup principiul turbidostatului: pH stat, oxistat; CO2
stat, viscozistat .a., a cror denumire corespunde cu parametrul propus.160

Cultivarea sincronizat

Culturile de microalge, ca, de exemplu, Spirulina, chiar dac sunt luate n


acelai moment de nsmnare, reprezint o totalitate de celule care se afl n
diferite stadii de dezvoltare individual. Tendina de a obine culturi, ale cror celule se afl ntr-un anumit stadiu de dezvoltare, a contribuit la elaborarea metodei
sincronizate de diviziune a celulelor. Esena metodei este urmtoarea: utiliznd
diferite procedee, ca extragerea mecanic (metode selective), influena prin intermediul unor factori fizici, chimici i biologici, celulele algei din cultura respectiv se divid ntr-o singur stare fiziologic. Cultivarea sincronizat poate fi de
dou feluri: periodic i continu. Neajunsul primului tip de cultivare sincronizat const n faptul c culturile de organisme i pierd relativ repede (peste 2-3
generaii) capacitatea de diviziune sincronizat. A doua metod se bazeaz pe
faptul c din cultivator se extrage periodic jumtate din coninut la un interval
de timp egal unei generaii; simultan cu aceasta, se adaug aceeai cantitate de
mediu nutritiv proaspt.

8.2. Cultivarea continu a algei Nostoc flagelliforme pe medii


obinute pe baza deeurilor de la complexele zootehnice
Deeurile animaliere pot fi reciclate, prin utilizarea lor ca surs nutritiv la creterea algelor, obinnd profit mult mai nalt ca, de exemplu, n cazul folosirii lor pe
terenurile agricole ca ngrmnt organic. n afar de aceasta, algele au capacitatea
de epurare a acestor ape reziduale, caracterizat prin asimilarea unor indici chimici
i prin producerea, pe contul acestora, a unei mari cantiti de biomas algal, cu
un coninut biochimic valoros, care ulterior poate fi utilizat n agricultur, farmaceutic etc. Printre speciile de alge care pot fi cultivate pe medii alctuite
din deeurile lichide sau solide de la complexele zootehnice se numr i Nostoc flagelliforme. Unele cercetri161 atest c biomasa algei Nostoc flagelliforme
cultivate pe ape reziduale prezint o surs bogat de substane biologic active,
printre care: proteine 20,80%, lipide 5,57% i glucide 11,24%. De aceea,
.. . :
, 2004, c.464.
161
Usturoi R., alaru V. Nostoc flagelliforme surs de substane biologic active. n:
Conferina tiinific naional cu participare internaional Probleme actuale ale microbiologiei
i biotehnologiei, consacrat celei de-a 50-a aniversri de la fondarea Seciei de Microbiologie.
- Chiinu, 2009, p.158-160.
160

92

cultivarea periodic a algei Nostoc flagelliforme pe medii nutritive compuse din


ape reziduale de la complexele zootehnice, n scopul obinerii biomasei algale
i epurrii acestora, prezint un interes deosebit pentru cercetare i implementare n practic.
Cultivarea periodic a fost realizat prin inocularea iniial a algei pe mediu
de cultur compus din deeuri solide de la complexele zootehnice i excluderea
biomasei la sfritul experienelor. Volumul iniial al mediilor de cultivare constituia 200 ml, la care s-a inoculat alga cu doz de 0,5 g/l. Mediul de cultivare
este descris n Anexa nr.1. Experienele au fost efectuate n condiii de laborator
la temperatura de 28,51,02C i iluminarea continu de 1800-2400 lx, n trei
repetri.
Productivitatea algal a fost determinat conform metodei filtrelor uscate,
utiliznd urmtoarea formul de calcul: (B-A)5 (g/l), unde A greutatea filtrului splat i uscat; B greutatea filtrului cu biomas uscat i rcit pn la
temperatura camerei; 5 coeficientul de recalculare pentru 1 litru de suspensie algal.162 Viteza de cretere a populaiei algei Nostoc flagelliforme (Berk.et
Curt.) Elenk. a fost determinat conform procedeului propus de .. ,163
iar viteza de reproducere a algei a fost determinat dup criteriul stabilit de
.. . Coninutul chimic a fost determinat conform metodelor specifice pentru analiza apelor reziduale (fizico-chimice i chimice). Calculul statistic
al rezultatelor a fost stabilit utiliznd programa Microsoft excel-2007, cu determinarea mediei aritmetice (M) i a erorii standarde (m).
Apele reziduale conin cantiti semnificative de N, P, K, Na, Ca etc., care
constituie o surs incontestabil pentru creterea algelor. Pe lng aceasta, ele
prezint o problem major de mediu, contribuind la poluarea solului i apelor,
de aceea trebuie gestionate prin valorificare.
Analiza chimic a mediului de cultivare denot c pH-ul mediilor este situat
ntre valorile 7,15-7,66. Azotul amoniacal difer n funcie de concentraie: la
1% 16,991,09 mg/l, la 5% 84,955,45 mg/l i la 10% 169,910,9 mg/l.
Nitraii la fel se gsesc n cantitii mai mari n mediile cu concentraie mai
nalt: la concentraia de 10% 1,250,11 mg/l, la cea de 5% 0,620,0 mg/l,
iar la cea de 1% doar 0,120,01 mg/l. Ortofosfaii se situeaz n limitele de
15,47-1,54 mg/l, n mediile de 1-10%. Hidrogenocarbonaii, duritatea i reziduul fix descresc odat cu reducerea concentraiei mediului (Tab.27).

162
.. a
. // . Mo: , 1984.
163
.. . : ,
1978, c.230 -300.

93

Tabelul 27
Coninutul chimic al mediului utilizat la cultivarea algei
Nostoc flagelliforme
Concentraia
mediului
nutritiv
1%
5%
10%

pH
Xx

NH4+,
mg/l
Xx

7,150,25 16,991,03
7,320,27 84,955,25
7,660,31 169,9010,90

NO3 -,
mg/l
Xx

Indicii analizai
PO43-,
mg/l
Xx

0,120,01
0,620,06
1,250,11

1,540,16
7,730,80
15,471,70

HCO3-,
mg/l
Xx

Reziduu fix,
mg/l
Xx

32,031,52
160,127,62
320,2515,25

43,671,85
218,309,26
436,6618,52

Astfel, conform rezultatelor analizelor chimice ale apelor reziduale, putem constata c att concentraia de 1%, ct i cea de 10% sunt benefice pentru cultivarea
algei Nostoc flagelliforme. Concentraiile mai mari de 10% nu au fost utilizate ca
mediu de cultur, deoarece contribuie la obinerea unei cantiti reduse de biomas.

Fig.10. Productivitatea algei Nostoc flagelliforme cultivate pe ape reziduale.


Fig.10. Productivitatea algei Nostoc flagelliforme cultivate pe ape reziduale

Rezultatele investigaiilor efectuate atest c pe parcursul desfurrii expeRezultatele


investigaiilor
c pe parcursul
desfurrii
experienei
pn la
rienei
pn la
a 10-a zi s-aefectuate
observatatest
o cretere
considerabil
a biomasei
n toate
n special
n cazulconsiderabil
probei cu concentraia
8,140,4
g/l, pentru
a 10-aprobele,
zi s-a observat
o cretere
a biomasei de
n 10%
toate probele,
n special
n cazul
concentraia
de
5%
s-a
obinut
o
productivitate
de
7,710,32
g/l,
pe
cnd
pentru
probei cu concentraia de 10% 8,140,4 g/l, pentru concentraia de 5% s-a obinut o
concentraia
de 1% de
4,280,20
ncepnddecu1%
a 10-a
i pn
la fi- g/l.
productivitate
de 7,710,32
g/l,doar
pe cnd
pentru g/l.
concentraia
dezidoar
4,280,20
nelecu
experienei
zile)
s-a nregistrat
o cretere
lent a biomasei
algale:
ncepnd
a 10-a zi i(15
pn
la finele
experienei
(15 zile) mai
s-a Nr.egistrat
o cretere
mai n
lent a
cazul mediului de 1% se observ o cretere cu 1,42 g/l, pentru mediul de 5% cu
biomasei algale: n cazul mediului de 1% se observ o cretere cu 1,42 g/l, pentru mediul de 5%
3,14 g/l, iar n cazul mediului de 10% biomasa a diminuat cu 0,43 g/l. Aceasta se
cu 3,14 g/l, iar n cazul mediului de 10% biomasa a diminuat cu 0,43 g/l. Aceasta se explic
explic prin faptul c n mediile de cultivare cu adaos de ape reziduale la finele
prin faptul
c n mediile
deprocesul
cultivare de
cuepuizare
adaos deaape
reziduale la
finele experienei
a nceput
experienei
a nceput
substanelor
nutritive,
necesare creprocesul
epuizare a algei
substanelor
necesare creterii i dezvoltrii algei Nostoc
terii de
i dezvoltrii
Nostoc nutritive,
flagelliforme.
flagelliforme.
Rezultatele obinute denot c viteza de cretere se mrete pn la a 10-a zi,
n toate probele: n varianta de 1% atingea valoarea de 0,38 zile -1, n cea de 5%
-1
Rezultatele
se -1mrete
pn la a 10-a zi, n toate
de
0,76 zileobinute
, iar ndenot
proba c
de viteza
10% de
decretere
0,72 zile
(Tab.28).
-1
-1

probele: n varianta de 1% atingea valoarea de 0,38 zile , n cea de 5% de 0,76 zile , iar n
proba de 10% de 0,72 zile -1(Tab.28).
94
La a 15-a zi valorile vitezei de cretere diminueaz n cazul tuturor mediilor, ceea ce
indic c are loc iniierea fazei staionare de cretere.
Tabelul 28

La a 15-a zi valorile vitezei de cretere diminueaz n cazul tuturor mediilor,


ceea ce indic c are loc iniierea fazei staionare de cretere.
Tabelul 28
Viteza de cretere a populaiei algei Nostoc flagelliforme cultivate
pe ape reziduale (zile -1)
Zilele de analiz
5
10
15

1%
0,03
0,38
0,34

Concentraia mediului
5%
0,05
0,76
0,71

10%
0,11
0,72
0,45

Un alt indice fiziologic, ce permite stabilirea dinamicii dezvoltrii algei Nostoc flagelliforme cultivate pe ape reziduale, este viteza de reproducere care indic
intensitatea reproducerii realizat prin creterea biomasei (Tab.29).
Tabelul 29
Viteza
de reproducere
algei flagelliforme
Nostoc flagelliforme
pe medii
cu
Viteza
de reproducere
a algeiaNostoc
cultivate pecultivate
medii cu adaos
de ape
-1
)
adaos de
ape
reziduale
(zile
-1
reziduale (zile )
Zilele de analiz

1%
1%0,089
0,089
0,110
0,110
0,100
0,100

Concentraia mediului

Concentraia
5%mediului
10%
5%
10%
5
0,114
0,184
5 10
0,114
0,184
0,203
0,193
10
0,203
0,193
15
0,166
0,124
15
0,166
0,124
Viteza de reproducere a algei Nostoc flagelliforme difer n funcie de perioada analizat
Viteza
de reproducere a algei Nostoc flagelliforme difer n funcie de perioai de concentraia mediului de cultur utilizat. n cazul probei de 1% observm c de la a 5-a la a
da
analizat
i de concentraia mediului de cultur utilizat. n cazul probei de 1%
10-a zi are loc o cretere cu 0,03, iar de la a 10-a la a 15-a zi se reduce cu 0,01. Pentru proba de
observm c de la a 5-a la a 10-a zi are loc o cretere cu 0,03, iar de la a 10-a la
5% la fel este caracteristic mrirea valorilor vitezei de reproducere de la a 5-a la a 10-a zi cu
a 15-a zi se reduce cu 0,01. Pentru proba de 5% la fel este caracteristic mrirea
0,089, pe cnd de la a 10-a la a 15-a zi are loc o diminuare cu 0,037; n cazul probei de 10%, de
valorilor vitezei de reproducere de la a 5-a la a 10-a zi cu 0,089, pe cnd de la
la a 5-a la a 10-a zi are loc o majorare cu 0,009, iar de la a 10-a pn la a 15-a zi a experienei
a 10-a la a 15-a zi are loc o diminuare cu 0,037; n cazul probei de 10%, de la a
viteza de reproducere a sczut cu 0,069.
Zilele de analiz

5-a la a 10-a zi are loc o majorare cu 0,009, iar de la a 10-a pn la a 15-a zi a


experienei viteza de reproducere a sczut cu 0,069.

Fig.11. Modificrile pH-ului mediilor nutritive la cultivarea algei Nostoc flagelliforme.

Fig.11. Modificrile pH-ului mediilor nutritive la cultivarea algei Nostoc flagelliforme.

95

Analiznd modificrile pH-ului, observam c valorile acestuia variaz n dependen de


ziua experienei i de la o concentraie la alta. n prima zi media pH-ului este de 7,37. ncepnd
cu ziua a 5-a, pH-ul crete considerabil, n special n proba cu concentraia de 1% (9,15), pentru
5% 8,40, iar n mediul de 10% 8,05 (ceea ce denot c alga s-a acomodat la aceste medii i
are loc dividerea celulelor). ns, pn la finele experienei (la a 15-a zi), pH-ul se micoreaz.
De exemplu, n proba de 10% pH-ul era 8,30, n proba de 5% 9,37, iar n proba de 1% 9,16,

Analiznd modificrile pH-ului, observam c valorile acestuia variaz n


dependen de ziua experienei i de la o concentraie la alta. n prima zi media pH-ului este de 7,37. ncepnd cu ziua a 5-a, pH-ul crete considerabil, n
special n proba cu concentraia de 1% (9,15), pentru 5% 8,40, iar n mediul
de 10% 8,05 (ceea ce denot c alga s-a acomodat la aceste medii i are loc
dividerea celulelor). ns, pn la finele experienei (la a 15-a zi), pH-ul se micoreaz. De exemplu, n proba de 10% pH-ul era 8,30, n proba de 5% 9,37,
iar n proba de 1% 9,16, ceea ce se asociaz cu viteza de reproducere (unde
practic se respect aceeai legitate).
Analiza rezultatelor experimentelor efectuate atest c metoda de cultivare
periodic poate fi utilizat pentru cultivarea algei Nostoc flagelliforme pe ape
reziduale.

8.3. Cultivarea periodic a algei Spirulina platensis pe ape


reziduale zootehnice
Metoda periodic a fost aplicat i la cultivarea algei Spirulina platensis pe
ape reziduale zootehnice. Inocularea algei Spirulina platensis s-a realizat n
vase de sticl i de mas plastic cu volumul de 5 l, temperatura aerului fiind de
301C i iluminarea continu 18-24 mii erg/cm2. La prepararea mediilor cu
adaos de ape reziduale au fost utilizate deeurile de la complexele zootehnice
de bovine, porcine i cele avicole, colectate direct din canalul din grajd sau de
pe platformele de depozitare. n laborator se cntrete 1 kg de deeu, la care se
aduga 5 litri de ap din robinet, se agit i se las la temperatura de 25C pe o
perioad de 5 zile, peste fiecare 4-5 ore agitndu-se manual (n total, 15 minute
pe zi). Dup 5 zile, supernatantul era strecurat prin 2-3 straturi de tifon, pentru
nlturarea maximal posibil a particulelor solide. Pregtit n asemenea mod,
lichidul obinut din deeurile de la bovine, porcine i cele avicole era utilizat n
experiene n diferite concentraii. Concentraiile experimentate au fost obinute prin diluia lichidului cu ap distilat n proporie de 5% 10% 15% i 20%.
Viteza de cretere a populaiei algei Spirulina platensis a fost determinat
conform procedeului propus de .. 164, iar viteza de reproducere a algei
a fost determinat dup criteriul stabilit de .. .165

164
.. . : ,
1978, c.230 -300.
165
.. ( ). : , 1971.

96

Viteza de cretere a populaiei algei Spirulina platensis a fost determinat conform


procedeului propus de .. 165, iar viteza de reproducere a algei a fost determinat dup
criteriul stabilit de .. .166

Fig. 12. Productivitatea algei Spirulina platensis la cultivarea periodic pe ape reziduale
zootehnice.
Fig. 12. Productivitatea algei Spirulina
platensis la cultivarea periodic pe ape

reziduale zootehnice.

Comparnd productivitatea Spirulinei cultivate pe diverse ape reziduale, s-a constatat c


celeComparnd
mai bune rezultate
se obin n aSpirulinei
15-a i a 20-a
zi de cultivare
pe apeape
cu dejecii
de las-a
productivitatea
cultivate
pe diverse
reziduale,

constatat c cele mai bune rezultate se obin n a 15-a i a 20-a zi de cultivare


165
pe
ape..
cu dejecii
de la complexele
de bovine.
Acestea
se refer,
n-300.
primul rnd,

.
: ,
1978, c.230
la166 concentraia de 10%, care atinge valoarea de 3,770,04 g/l BAU, i ceva mai
.. ( ). :
puin
(3,250,05

, 1971. g/l BAU) la concentraia de 5% (Fig. 12). Biomasa de Spirulin


obinut este de aproximativ 3-7 ori mai mare dect cea de pe apele cu dejecii de
98
la complexele de porcine i cele avicole.
Productivitatea maxim a Spirulinei pe
apele reziduale de 10% cocentraie cu dejecii de la bovine coincide cu creterea
lungimii filamentului, n general, i a celulelor, n particular. Totodat, crete i
limea lor. Pe apele reziduale de 5% concentraie cu dejecii de la complexele
de bovine, unde la fel a fost constatat una dintre cele mai mari productiviti a
Spirulinei, creterea lungimii filamentului este urmat de micorarea lungimii celulelor. Ceea ce mrturisete c n aceste condiii are loc o cretere semnificativ
a vitezei de diviziune a celulelor algale.
Esenial n cercetrile de cultivare periodic este i stabilirea indicilor de
cretere (viteza de reproducere, viteza de cretere a populaiei algale). Aceti indicatori poart o informaie importan legat de desfurarea fazelor de cretere
i de intensitatea lor.

97

Tabelul 30
Viteza de reproducere a algei Spirulina platensis cultivate dup
metoda periodic pe ape reziduale zootehnice, zile-1
Concentraia mediului
nutritiv, %
5
10
15
20
5
10
15
20
5
10
15
20

Ape reziduale de la
complexele
avicole

Ape reziduale de la
complexele
de porcine

Ape reziduale de la
complexele
de bovine

Proveniena
mediului nutritiv

Perioada monitorizat, zile


1-5
5-10
10-15 15-20
0,08
0,02
0,06
0,02
0,09
0,04
0,05
0,008
0,05
0,001
0,02
0,03
0,06
0,01
-0,02
0,04
0,05
0,01
-0,01
0,05
0,08
-0,02
0,04
0,002
0,06
0,007
-0,02
0,008
0,04
-0,01
0,02
0,03
0,02
0,03
-0,002
0,03
-0,002 0,008
0,004
0,02
-0,01 -0,002
0,02
0,02
-0,03
0
0
0

Tabelul 31
Viteza de cretere a populaiei algei Spirulina platensis cultivate
dup metoda periodic pe ape reziduale zootehnice, zile-1

Ape reziduale de la
complexele
avicole

Ape reziduale de la
complexele
de porcine

Ape reziduale de la
complexele
de bovine

Proveniena
mediului nutritiv

Concentraia
mediului nutritiv, %
5
10
15
20
5
10
15
20
5
10
15
20
98

Perioada monitorizat, zile


1-5
5-10
10-15 15-20
0,15
0,05
0,27
0,13
0,19
0,12
0,32
0,07
0,07
0,002
0,04
0,07
0,09
0,03
-0,04
0,09
0,08
0,02
-0,02
0,1
0,2
-0,06
0,1
0,008
0,11
0,01
-0,04
0,01
0,06
-0,02
0,02
0,06
0,02
0,04
-0,004 0,05
-0,003
0,008
0,004
0,02
-0,01
-0,002
0,014
0,02
-0,03
0
0
0

Rezultatele indicate n Tabelul 30 au fost calculate reieind din cantitatea de


biomas a algei Spirulina platensis specific intervalelor monitorizate (1-5 zile,
5-10 zile, 10-15 zile, 15-20 zile) exprimat n g/l biomas absolut uscat. Datele obinute denot c la cultivarea periodic a algei Spirulina platensis pe ape
reziduale viteza de reproducere se modific, de la un interval la altul i de la o
concentraie la alta. Aparatul reproductiv sufer modificri eseniale n special
n mediile nutritive cu concentraii de 15-20%, unde se atest rezultate negative
(cea ce indic c pe perioada respectiv celulele nu se reproduc i practic se distrug). Cele mai mari valori ale vitezei de reproducere a algei Spirulina platensis
(0,08-0,09 zile-1) se atest n perioada 1-5 zile la concentraiile de 5-10% ape
reziduale de la complexele de bovine i porcine. Iar cele mai mici rezultate se
atest la cultivarea periodic pe medii compuse din ape reziduale de la complexele avicole 15-20% (0 i - 0,002 zile-1).
Viteza de cretere a populaiei algale indic aceeai legitate ca i n cazul vitezei de reproducere, deoarece populaia algal nu poate crete dac nu se produce
reproducerea celulelor (Tab. 31).
Astfel, putem constata c aplicarea metodei de cultivare periodic a algei Spirulina platensis ne-a permis s identificm mediile optime compuse din ape reziduale pentru modelarea ulterioar a acestora.

8.4. Cultivarea periodic a algei Anabaenopsis sp.


Aplicarea metodei de cultivare periodic a algei Anabaenopsis sp. a fost realizat utiliznd mediul nutritiv Drew, sterilizat prin metoda fizic. Cultivarea
s-a efectuat n baloane Erlenmayer cu volum de 250 ml. n calitate de inocul
s-a utilizat alga Anabaenopsis sp. cultivat pe mediul lichid care se afla n faza
exponenial de cretere, obinut conform metodologiei descrise n Capitolul 7,
densitatea culturii inoculate fiind de 0,4 g/l. Experienele au demarat n condiii
de laborator la temperatura de 28-300C i la intensitatea luminii de 4000 lx. Creterea biomasei a fost determinat dup formula: (AnA0)/n, unde An cantitatea
de biomas obinut peste n zile, A0 cantitatea iniial de biomas, n perioada analizat (zile). Productivitatea algal a fost stabilit conform metodei difereniale.166 Indicele pHului a fost stabilit cu ajutorul aparatului multifuncional
Consort C944. Productivitatea maxim i viteza specific de cretere au fost
determinate conform procedeului descris de .. .167 Calculul statistic
al rezultatelor a fost efectuat utiliznd programa Statistica 6, cu determinarea
mediei aritmetice (X) i a erorii standarde (x). Experimentele au fost efectuate n
6 repetri.
166
.., .., .. . - . // : , 1975. 241 c.
167
.. 2:
. B: M, 2005, . 67, c.98-110.

99

Calculul statistic al rezultatelor a fost efectuat utiliznd programa Statistica 6, cu determinarea


mediei aritmetice (X) i aerorii standarde (x). Experimentele au fost efectuate n 6 repetri.
Mediul nutritiv Drew are un avantaj economic n aplicare, dar, pe lng aceasta,

Mediulcnutritiv
Drew are
un avantaj
n aplicare,idar,
pe lng aceasta,
considerm
este incomplet,
deoarece
lipsesceconomic
multe macroelemente
microelemente,
sursa de
considerm c este incomplet, deoarece lipsesc multe macroelemente i microele-

care de
contribuie
la care
creterea
biomasei
algale i biomasei
la acumularea
biologic
CO
2, etc.,sursa
mente,
CO etc.,
contribuie
la creterea
algalesubstanelor
i la acumularea
2

substanelor
n celule.
Cantitatea sp.
biomasei
Anabaenopsis
sp.de
active
n celule. biologic
Cantitateaactive
biomasei
algei Anabaenopsis
obinutalgei
la cultivarea
pe mediul
obinute
cultivarea
penmediul
cultur
Drewlaeste
prezentat
Figura de
13. cultur Drew este prezentat n Figura 13.

Fig.13. Productivitatea algei Anabaenopsis sp. cultivate pe mediul nutritiv Drew.

Fig.13. Productivitatea algei Anabaenopsis sp. cultivate pe mediul nutritiv Drew.

Biomasa algei crete pn la a 12-a zi atingnd 1,0420,05 g/l, dup care descrete pn

la valoarea
iniial
(0,40,02
cantitate
de biomas
obinut
este suficient
Biomasa
algei
creteg/l).
pnns,
la aaceast
12-a zi
atingnd
1,0420,05
g/l,nudup
care des-i

pn
la valoarea
iniial
(0,40,02industrial
g/l). ns,
aceast
de biomas
nucrete
permite
dea utiliza
acest mediu
la cultivarea
a algei,
dar cantitate
poate fi aplicat
n form
obinut nu este suficient i nu permite de a utiliza acest mediu la cultivarea

solid
pentru meninerea
algeipoate
Anabaenopsis
sp. n
industrial
a algei, dar
fi aplicat
n colecia
form laboratorului.
solid pentru meninerea algei
Anabaenopsis sp. n colecia laboratorului.
Tabelul 32

Tabelul
32
Creterea biomasei algei Anabaenopsis sp. n funcie de pH-ul i temperatura
mediului
Creterea biomasei algei Anabaenopsis sp. n funcie de pH-ul i
temperaturanutritiv
mediului nutritiv

Perioada analizat,
zile

Indiciiexaminai
examinai
Indicii
temperatura
pH-ul
mediului
biomasei,
Perioada
creterea
mediului creterea
temperatura mediului pH-ul
mediului nutritiv, C
nutritiv
g/l/zi
analizat, zile
biomasei,
g/l/zi
nutritiv
nutritiv,
C
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
1
18,000,11
7,170,02
0
18,000,11
7,170,02
0
31
31,300,32
7,390,05
0,0710,003
31,300,32
7,390,05
0,0710,003
63
32,750,47
7,440,03
0,0560,002
96
30,700,30
8,040,01
0,0400,002
32,750,47
7,440,03
0,0560,002
129
29,360,48
7,740,06
0,0530,002
30,700,30
8,040,01
0,0400,002
1512
26,670,23
7,760,09
0
29,360,48
7,740,06
0,0530,002
Conform datelor din Tabelul 32, temperatura mediului nutritiv este n cretere. Iniial era

15

26,670,23

7,760,09

de 18,000,11C, la a 6-a zi, de exemplu, atingea 32,750,47C, iar la finele experimentelor

100
103

Conform datelor din Tabelul 32, temperatura mediului nutritiv este n cretere.
0
26,670,23C,
care este favorabil
algei Anabaenopsis
sp. pH-ul 0mediului
Iniial
era de 18,000,11
C, la apentru
6-a zi,creterea
de exemplu,
atingea 32,750,47
C, iar la
0
finele
26,670,23
care
favorabil
pentru lent.
creterea
algei
nutritivexperimentelor
crete pn la a 9-a
zi (8,040,01),C,
dup
careeste
se observ
o descretere
Biomasa
a
Anabaenopsis
sp.
pH-ul
mediului
nutritiv
crete
pn
la
a
9-a
zi
(8,040,01),
crescut cel mai mult de la 1-a la a 3-a zi, fiind egal cu 0,0710,003, urmat de o cretere puin
dup care se observ o descretere lent. Biomasa a crescut cel mai mult de la 1-a
mai redus n intervalul 3-6 zile (0,0560,002), iar dup a 6-a zi se observ o descretere, astfel
la a 3-a zi, fiind egal cu 0,0710,003, urmat de o cretere puin mai redus n
c la a 15-a3-6
zi sezile
reduce
pn la 0 (Tab. iar
32).dup
Analiza
raportului
dintre pH:biomas
algal denot
intervalul
(0,0560,002),
a 6-a
zi se observ
o descretere,
astfel
la a 6-a
zi reduce
odat cu pn
creterea
se mrete
i pH-ul,
iar la adintre
9-a zi pH:biomas
pH-ul crete;
cclapn
a 15-a
zi se
la 0biomasei
(Tab. 32).
Analiza
raportului
algal
pn lasea reduc
6-a zidup
odat
biomasei
se mrete
i pH-ul,
valoriledenot
creteriicbiomasei
carecusecreterea
observ oscilri
ale pH-ului,
iar indicele
de
iar
la
a
9-a
zi
pH-ul
crete;
valorile
creterii
biomasei
se
reduc,
dup
care
se
obcretere se reduce.
serv oscilri ale pH-ului, iar indicele de cretere se reduce.
Un lucru important n demararea cultivrii periodice este i stabilirea fazelor de cretere,
Un lucru
important n demararea cultivrii periodice este i stabilirea fazelor
care
ar indica,
conform
uneiaconform
din metodologii,
timpul
i cantitateatimpul
de biomas
obinut la
de
cretere,
care
ar indica,
uneia din
metodologii,
i cantitatea
de
biomas
cultivarea
vor realiza
conticultivareaobinut
continu alaalgei
(unde secontinu
vor realizaanalgei
flux (unde
continu sefazele
liniare indeflux
ncetinire)
nuu
fazele
liniare
i
de
ncetinire)
(Fig.
14).
(Fig. 14).

Fig. 14. Fazele de cretere a algei Anabaenopsis sp. la cultivarea periodic pe mediul de

Fig.14. Fazele de cretere a algei Anabaenopsis sp. la cultivarea periodic pe


cultur
Drew.Drew.
mediul
de cultur

Determinarea fazelor de cretere este o procedur destul de complicat. Uneori este

Determinarea
fazelor de
debiomas
creterentr-un
este ointerval
procedur
necesar
stabilirea cantitii
de 2-24destul
ore saude
decomplicat.
24-168 ore, nUneori,
funcie
este
necesar
stabilirea
cantitii
de
biomas
ntr-un
interval
de
2-24
ore
sau de
de faza de cretere, condiiile de temperatur, iluminare, agitare, coninutul mediului nuritiv etc.
24-168 ore, n funcie de faza de cretere, condiiile de temperatur, iluminare,
La cultivarea
algei Anabaenopsis
sp. pe mediul
durata fazelor
a fost:
lag1 zi, log1
agitare,
coninutul
mediului nuritiv
etc. Ladatcultivarea
algei
Anabaenopsis
sp.zi,
pe
liniar

7
zile,
staionar

1
zi,
declin

3
zile
(Fig.
14).
mediul dat durata fazelor a fost: lag 1 zi, log 1 zi, liniar 7 zile, staionar
1Cea
zi, mai
declin
3 zile
(Fig. 14).
esenial
caracteristic
a dezvoltrii microalgelor este viteza de cretere, care determin
Cea
mai
esenial
caracteristic
a dezvoltrii
esteviteza
viteza
de crespecific
de
procesele de fotobiosintez i depinde de viteza
de sintezmicroalgelor
a biomasei.160 ns,
tere, care determin procesele de fotobiosintez i depinde de viteza de sintez a
cretere difer dela o faz la alta, fapt remarcat i de ali cercettori.
biomasei.
ns, viteza specific de cretere difer dela o faz la alta, fapt remarcat
i de ali cercettori.
tabelul 33

101
104

Tabelul 33
Caracteristica cinetic a creterii algei Anabaenopsis sp. cultivate pe
mediul de cultur Drew
Fazele de
cretere
Lag
Log
Liniar
ncetinire
Staionar
Declin

Cantitatea de
biomas, g/l
0,3800,01
0,6140,02
0,9650,03
1,0400,05
1,0400,051
0,4000,015

Productivitatea
maxim
0,0500,002
0,0380,002
0
-0,2130,012

Viteza specific de
cretere, zile-1
0,4790,015
0,0100,004
0,0180,00085
0
-0,3180,001


Conform metodologiei utilizate, pentru faza lag nu se indic modalitatea de
determinare a vitezei specifice i a productivitii maxime, aceasta se stabilete
ncepnd cu faza log. Valorile vitezei de cretere sunt cele mai nalte n cazul log
fazei (0,4790,015 zile-1), deoarece se determin dup un alt mod, pentru faza
liniar are valori de 0,0100,004 zile-1 care sunt relativ mici, iar pentru cea de
ncetinire se atest 0,0180,00085 zile-1; acelai lucru este specific i pentru productivitatea maxim. n cazul fazei staionare viteza de cretere i productivitatea
maxim este 0, iar n cazul fazei de declin se reduc substanial cantitatea de biomas, productivitatea maxim i viteza de cretere (Tab. 33). n urma rezultatelor
obinute putem constata c exist un raport direct dependent ntre viteza specific
de cretere i pH.
n rezultatul investigrilor realizate s-a constatat c alga Anabaenopsis sp. poate fi cultivat pe mediul Drew. Aceasta permite obinerea a maximum 1,040,05
g/l n decursul a 11-12 zile, ceea ce este puin pentru iniierea cultivrii industriale, iar pentru meninerea culturii n stare pur (pe mediul solid) este suficient.
Timp de 15 zile alga cultivat pe mediul Drew parcurge toate fazele de cretere
(ncepnd de la log i terminnd cu declin). pH-ul mediului este n raport direct proporional cu viteza specific de cretere i invers proporional cu creterea biomasei. Cele mai mari valori ale vitezei specifice a fazei liniare atingeau
0,0100,004 zile-1, ceea ce indic c creterea algei este redus i, respectiv, cantitatea de biomas este mic.

8.5. Utilizarea metodei semicontinue la cultivarea algei


Anabaenopsis sp.
Cultivarea semicontinu este o metod eficient ce poate fi utilizat n practica
industrial de obinere a biomasei algale.
Cultivarea semicontinu a algei Anabaenopsis sp. a fost efectuat n condiii
de laborator la temperatura de 28-30C i la intensitatea luminii de 4000 lx, pe o
perioad de 9 zile. Pentru realizarea metodei de cultivare a algei Anabaenopsis sp.
102

nutritiv proaspt pregtit, iar biomasa algal nu se exclude. Alga a fost cultivat n baloane
Erlenmayer cu volum de 100 ml. n calitate de inocul a fost utilizat alga cultivat pe mediul
lichid care se afla n faza exponenial de cretere, densitatea culturii inoculate fiind de
au fost antrenate mediile nutritive Drew i Gromov-6. Modelul cultivrii semi0,7370,032
g/l n
mediul
nutritiv
i de a2,271g/l
n mediul
nutritiv
Gromov-6
continue
a fost
realizat
prin Drew
excluderea
25%, 50%
i 75% din
volumul
medi- (Gr. 6).
ilor
nutritive
peste
un
interval
de
3
zile
i
nlocuirea
cu
acelai
volum
de
mediu
Cantitatea de inocul administrat a fost astfel selectat deoarece aceasta este specific
nutritiv proaspt pregtit, iar biomasa algal nu se exclude. Alga a fost cultivat
n baloane
Erlenmayerde
cucretere
volum de
100 ml.
n calitate de
a fostnutritive
utilizatdate, fapt
nceputului
fazei exponeniale
a algei
Anabaenopsis
sp. inocul
pe mediile
alga cultivat pe mediul lichid care se afla n faza exponenial de cretere, denstabilit la
cultivarea
dup de
metoda
periodic.
Pemediul
parcursul
experimentelor
sitatea
culturiianterioar
inoculate fiind
0,7370,032
g/l n
nutritiv
Drew i de au fost
2,271g/l
n mediulde
nutritiv
Gromov-6
(Gr. de
6). scurgere
Cantitateaa de
inocul administrat
determinate:
coeficientul
diluare
(), viteza
mediului
nutritiv ()ai viteza
fost astfel selectat deoarece160aceasta este specific nceputului fazei exponeniale
a fost
stabilit
prin diferena
specificdede
cretere
a culturii
(). Productivitatea
cretere
a algei
Anabaenopsis
sp. pe mediilealgal
nutritive
date,
fapt stabilit
la cul- dintre
tivareacurate
anterioar
Pe parcursul
au cu
fostsedimentarea
demasa filtrelor
(prindup
caremetoda
iniial periodic.
se trece apa
distilat) experimentelor
i masa filtrelor
terminate: coeficientul de diluare (), viteza de scurgere
a
mediului
nutritiv
()
i
biomaseiviteza
algale,
calcululdecorespunztor
efectundu-se
n g/l.169 A algal
fost determinat
indicele pH
specific
cretere a culturii
().160 Productivitatea
a fost stabilit
prin diferena
dintre masa
filtrelor C-944.
curate (prin
care iniial
se trece aapa
distilat) obinute
ului la aparatul
multifuncional
Consort
Prelucrarea
matematic
rezultatelor
i masa filtrelor cu sedimentarea biomasei algale, calculul corespunztor efectu168
s-a realizat
utiliznd
programa
Microsoft
Office
2010, fiind
determinat eroarea
A fostcomputerizat
determinat indicele
pHului
la aparatul
multifuncional
ndu-se
n g/l.
Consort C-944. Prelucrarea matematic a rezultatelor obinute s-a realizat utilistandardznd
(x) iprograma
media aritmetic
(X). Microsoft Office 2010, fiind determinat eroarea
computerizat
standard (x) i complet
media aritmetic
(X). algei Anabaenopsis sp. este imposibil, lucru care
Omogenizarea
a biomasei
Omogenizarea complet a biomasei algei Anabaenopsis sp. este imposibil,
determin
cultivarea
prin excluderea
mediului nutritiv.
Aceastanutritiv.
contribuie
la asigurarea
lucru
care determin
cultivareadoar
prinaexcluderea
doar a mediului
Aceasta
contribuie
la asigurarea
a biomasei
cu substane
permanent
a biomasei
algale permanent
cu substane
nutritive algale
noi; totodat,
se nutritive
elimin noi;
i produsele
totodat, se elimin i produsele metabolice acumulate n mediul nutritiv ca remetabolice
acumulate
n mediul
nutritiv
zultat
al creterii
biomasei
algale.ca rezultat al creterii biomasei algale.
dintreobiectivele
obiectiveletrasate
trasate aa fost
cantitativ
a biomasei
alUnulUnul
dintre
fostmonitorizarea
monitorizarea
cantitativ
a biomasei
algei
gei Anabaenopsis sp. obinute la cultivare dup metoda semicontinu (Fig. 15).
Anabaenopsis sp. obinute la cultivare dup metoda semicontinu (Fig. 15).

Fig.15. Productivitatea algei Anabaenopsis sp. obinute la cultivarea dup

Fig. 15. Productivitatea algei


Anabaenopsis
sp. obinute la cultivarea dup
metoda
semicontinu.
168
.. .
metoda
semicontinu.
,

, .
; : , 2012. 728 .

Productivitatea algei Anabaenopsis sp. cultivate dup metoda semicontinu difer n


103

funcie de mediul nutritiv i volumul extras. Aplicarea acestei metode la cultivarea algei

169

.. . ,
, . ; :

Productivitatea algei Anabaenopsis sp. cultivate dup metoda semicontinu


difer n funcie de mediul nutritiv i volumul extras. Aplicarea acestei metode
la cultivarea algei Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Gromov-6 permite obinerea unor rezultate nalte, n special la extragerea a 75% din mediu, unde la a
9-a zi s-a atestat 10,780,81 g/l. Extragerea a 25% i a 50% din mediul nutritiv
Gromov-6 permite obinerea a 7,810,70 8,100,74 g/l n acelai interval. Pe
mediul nutritiv Drew cele mai mari cantiti de biomas se obin la extragerea a
75% din mediul nutritiv, iar cele mai reduse la extragerea a 25%. La cultivarea pe mediul nutritiv Gromov-6 se observ oscilri manifestate de descretere
urmate de cretere, ceea ce se explic prin acomodarea algei la modul de cultivare. Productivitatea algei cultivate pe mediul nutritiv Drew este n continu
cretere, ceea ce denot c n cazul deficitului iniial de substane nutritive acomodarea la metoda semicontinu de cultivare este mai rapid, astfel c prima
excludere a mediului nutritiv nu influeneaz procesul de reproducere.
Monitoringul indicatorilor fiziologici de cretere a algei Anabaenopsis sp. la
cultivare dup metoda semicontinu la fel atest diferene n funcie de cantitatea
de mediu extras (Tab. 34).
Tabelul 34
Valorile indiciilor de cretere la cultivarea semicontinu a algei
Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Gromov-6

0,5860,021
-0,1580,006
1,1300,04

0,3750,018
0,2500,012

40,2

0,5860,020

0,2500,01

0,2500,013

20,08
20,09

Xx

40,19

-0,2030,006
0,8190,042

Xx

40,18

0,0830,004
0,0830,004

Xx

-0,1590,007

1,3330,054

6-9

Xx

0,8320,045

3-6

Xx

75%

0,1660,008

Xx

20,09

Xx
0,5860,020

Xx
0,1240,005

Xx

50%

0,1660,008

25%

1,3330,060

1-3

Cantitatea de mediu nutritiv extras i substituit

1,3330,051

Perioada
analizat,
zile

104

Creterea algei Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Gromov-6 variaz n funcie de concentraiile extrase. La a 6-a zi de cultivare valorile vitezei specifice de
cretere indic rezultate negative n toate loturile experimentale, ceea ce arat c
procesul de reproducere s-a redus semnificativ. De la a 6-a la a 9-a zi se observ
majorarea intens a vitezei specifice de cretere. Cele mai bune rezultate se atest
n varianta cu 75% extragere (1,1300,02 zile-1), iar n variantele de 25% i 50%
se obin practic aceleai valori. Acest lucru denot c procesele reproductive sunt
mai intense n varianta cu 75% i, respectiv, se obine i o cantitate mai nalt
de biomas. Valorile coeficientului de diluare i ale vitezei de scurgere indic o
continuitate n ce privete creterea algei (Tab. 34).
Aplicarea metodei semicontinue la cultivarea algei Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Drew relev aceeai legitate. ns, procesul de acomodare a algei la
condiiile noi de cultivare este mai rapid i nu afecteaz att de mult activitatea
reproductiv. n toate loturile experimentale se observ reducerea vitezei de cretere n intervalul de la a 3-a la a 6-a zi. Cele mai semnificative reduceri ale vitezei
specifice de cretere s-au observat n variantele de 50% (unde a descrescut de
1,42 ori) i de 75% (cu o reducere de 3,90 ori). n perioada de la a 6-a la a 9-a zi
viteza specific de cretere s-a majorat n special n variantele cu 75% extragere
de mediu nutritiv, unde s-au atestat valori de 0,9100,028 zile-1 i cu 50% extragere 0,5850,026 zile-1, iar n proba 25% extragere de mediu nutritiv valorile
vitezei specifice de cretere s-au redus de 1,76 ori (Tab. 35).
Tabelul 35
Valorile indiciilor de cretere la cultivarea semicontinu a algei
Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Drew

40,19

0,2500,012

0,1750,017

40,18

0,2500,013

0,9100,028

0,6830,020

0,4790,013
0,5850,026

0,3750,018

0,1660,008
0,1660,008

40,2

20,08
20,09

0,6830,021

0,6030,022

6-9

0,3420,012

0,2500,01

0,0830,004

20,09

3-6

0,0830,004

0,6830,022

Xx

1,3330,054

0,1240,005

Cantitatea de mediu nutritiv extras i substituit


25%
50%
75%

Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx
Xx

1,3330,060

1-3

Xx
1,3330,051

Perioada
analizat,
zile

105

caracteristic metodei periodice; altfel spus, alga s-a acomodat la condiiile noi induse i, ca
rezultat, se reduce biomasa n variantele cu 25-50% extragere i nlocuire. Pentru variantele de
75% i cele specifice la utilizarea mediului Drew de cultivare acest aspect nu s-a manifestat.
ncepnd cu a 6-a zi, alga era deja acomodat cultivrii respective, ceea ce contribuie la cretere
La a 3-a
zi se atest
biomaseiialgale
medii
nutritive,
ceea
accelerat
a biomasei
algalecreterea
care s-a Nr.egistrat
la a 9-apezi ambele
de cultivare
(Tab.
36).

ce indic faptul c s-a iniiat practic faza exponenial, deoarece s-ar realiza pn
Tabelul 36
atunci cultivarea periodic. ncepnd cu a 3-a zi, a demarat cultivarea semicontinu,
s-a efectuat prima excludere a mediului nutritiv i nlocuirea cu mediu proaspt,
biologice
cultivarea
semicontinu
a algei
Anabaenopsis
sp.
ceea Evidenierea
ce a condus legitii
la apariia
fazei la
lag,
caracteristic
metodei
periodice;
altfel spus,
algaZilele
s-a acomodat la condiiile
noi induse i, ca rezultat,Mediul
se reduce
biomasa n variMediul nutritiv Drew
nutritiv Gromov-6
antele
cu
25-50%
extragere
i
nlocuire.
Pentru
variantele
de
75%
cele specifice
monitorizate
Concentraiile mediilor excluse i nlocuitei
(%)
la utilizarea mediului
Drew
de
cultivare
acest
aspect
nu
s-a
manifestat.
25
50
75
25
50 ncepnd
75cu
a 6-a zi,
respective, ceea
la cretere
3 alga era deja
+ acomodat
+ cultivrii +
+ ce contribuie
+
+
accelerat
a
biomasei
algale
care
s-a
nregistrat
i
la
a
9-a
zi
de
cultivare
(Tab. +36).
6
+
+
+
9
+
+
+
+
+
Tabelul+ 36
total
3
3
3
3
3
Evidenierea legitii biologice la cultivarea semicontinu a algei 3

Not: + creterea biomasei algale; - reducerea biomasei algale.

Anabaenopsis sp.

La cultivarea algei Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Gromov-6 valorile pH-ului au

Mediul nutritiv Drew

Mediul nutritiv Gromov-6

tendina
de cretere liniar Cele mai nalte valori s-au atestat n varianta cu 75% extragere de
Zilele

Concentraiile mediilor excluse i nlocuite (%)

monitorizate
mediu
nutritiv (11,0260,50). La cultivarea algei pe mediul Drew valorile pH-ului, practic, nu se
25

50

75

25

50

75

n total

difereniaz n funcie de volumul mediului extras, fiind cuprinse ntre 7,2 i 7,26, cu devieri
neeseniale de 0,01-0,30 (Fig. 16).

Not: + creterea biomasei algale; - reducerea biomasei algale.

La cultivarea algei Anabaenopsis sp. pe mediul nutritiv Gromov-6 valorile


pH-ului au tendina de cretere liniar. Cele mai nalte valori s-au atestat n varianta cu 75% extragere de mediu nutritiv (11,0260,50). La cultivarea algei pe
mediul Drew valorile pH-ului, practic, nu se difereniaz n funcie de volumul
mediului extras, fiind cuprinse ntre 7,2 i 7,26, cu devieri neeseniale de 0,010,30 (Fig. 16).

b
109
106

c
Fig.
16.
Valorile
pH-ului
mediilor
nutritive
la cultivarea
algeialgei
Anabaenopsis
sp. dup
Fig.16. Valorile pH-ului mediilor nutritive
la cultivarea
Anabaenopsis
sp.

dup metoda
semicontinu
modificat:
a extragerea
a 25% nutritive;
din mediile
metoda
semicontinu
modificat;
a extragerea
a 25% din mediile
b nutritive;
extragerea

b extragerea
a 50%
din mediile
nutritive;
c extragerea
a mediile
75% dinnutritive.
mediile nutritive.
a 50%
din mediile
nutritiv;
c extragerea
a 75% din

n concluzie
ccea
ceamai
mai
optim
extragere
i nlocuire
a mediun concluzieputem
putem constata
constata c
optim
extragere
i nlocuire
a mediului
nutritiv
lui nutritiv s-a dovedit a fi de 75%, care contribuie la obinerea a celor mai mari
s-a dovedit a fi de 75%, care contribuie la obinerea a celor mai mari valori ale productiviti
valori
ale productiviti algale. Cel mai benefic mediu nutritiv este Gromov-6,
algale. Cel la
maicultivarea
benefic mediu
nutritiv
este Gromov-6,
deoarece
cultivarea
algei Anabaenopsis
deoarece
algei
Anabaenopsis
sp. pe
acestlamediu
reproducerea
celu-1
lelor
se desfoar
o vitez
maise nalt
(care
zile
).
sp. pe algale
acest mediu
reproducereacu
celulelor
algale
desfoar
cu atinge
o vitez1,1300,02
mai nalt (care
atinge
Metoda semicontinu
este mai eficient, deoarece contribuie la obinerea unei
-1
1,1300,02 zile ). Metoda semicontinu este mai eficient, deoarece contribuie la obinerea unei
cantiti nalte de biomas ntr-un interval redus de timp, accelereaz procesul de
cantiti nalte adecelulelor
biomas ntr-un
interval
timp, accelereaz
de reproducere
reproducere
vegetative
aleredus
algeideAnabaenopsis
sp.procesul
i reduce
din timpula
alocat
celuleloromogenizrii.
vegetative ale algei Anabaenopsis sp. i reduce din timpul alocat omogenizrii.

8.6. Utilizarea metodei de cultivare continu a algei


Spirulina platensis pe ape reziduale zootehnice
8.6. Utilizarea metodei de cultivarea continu a algei Spirulina platensis pe

Cultivarea continu se efectueaz


prin excluderea
ape reziduale
zootehnice parial i periodic a biomasei i adugarea mediului nutritiv pentru meninerea substanelor biogene la
se de
efectueaz
prin
excluderea
parial
i periodic
a biomasei
nivelulCultivarea
cuvenit. continu
Acest tip
cultivare
poate
fi utilizat
n sisteme
deschise
ce aui
169, 170
posibilitatea
de a nutritiv
funciona
unmeninerea
termen lung
ntrunbiogene
regim nentrerupt.
adugarea mediului
pentru
substanelor
la nivelul cuvenit. Acest tip
171
..

a
demonstrat
c
utilizarea
metodei
continue la cultivarea
de cultivare poate fi utilizat n sisteme deschise ce au posibilitatea de a funciona un termen lung
algelor Isochrisis galbana,
Monochrysis lutheris, Phaetoctilum tricornutum,
170 171
ntrun regim nentrerupt.
Thalassiosira
weisllogi, Dunalliela viridis n cultivatoare de tip nchis permite
meninerea
pe o172perioad
lung
de timp metodei
a culturilor
n faza
activ algelor
de cretere
i
a demonstrat
c utilizarea
continue
la cultivarea
Isochrisis
..
concentraie
optimal.
Aceeai
metod de
cultivareThalassiosira
a fost utilizat
i la Dunalliela
cultivagalbana, Monochrysis
lutheris,
Phaetoctilum
tricornutum,
weisllogi,
rea algei Haematococcus pluvialis pentru obinerea astaxantinei. Astfel, cea mai
viridis n
cultivatoare
tip nchis permite
perioad lung
de timp
a culturilor
nalt
cantitate
de de
astaxantin
a fostmeninerea
obinut pe
la oexcluderea
a 20%
din
biomasan

faza activ de cretere i concentraie optimal. Aceeai metod de cultivare a fost utilizat i la
169
. . : , 1983. 263 .
170
cultivarea
algei Haematococcus
pluvialis.
pentru obinerea
astaxantinei. Astfel,
cea mai nalt

..
:

, 2004, c.464.
170 171

. ..

.
: ,1983.
263 . . B: M, 2006, . 8, .5760.
171

.. . :
, 2004, c.464.
107
172
..
. B: M, 2006, . 8, .5760.
110

algal i nlocuire a acesteia cu mediu nutritiv.172 Utiliznd aceast metod, ..


173 obine la fel rezultate semnificative. Indicii productivitii la a 5-a
zi de cultivare ating valoarea de 2,40 g/l, deci mai mic ca n cazul cultivrii prin
metoda neproporional n flux, unde productivitatea atingea 3,82 g/l, dar mai
mare ca n cazul utilizrii metodei de acumulare a biomasei (2,36 g/l).
Cultivarea Spirulinei pe ape reziduale este una dintre direciile actuale ale biotehnologiei. Cultivarea pe apele reziduale comunale, industriale sau de la complexele zootehnice deschide noi posibiliti de obinere a proteinelor i a altor substane biologic active la un pre mult mai redus. n acelai timp, algele contribuie
la epurarea biologic a apelor reziduale.174
Reieind din cele menionate, am iniiat cultivarea Spirulinei platensis pe apele reziduale de la complexele zootehnice specializate n creterea bovinelor, psrilor i porcinelor. La etapa iniial (n prima zi de cultivare), Spirulina a fost
inoculat n concentraia de 0,350 g/l biomas absolul uscat (BAU). Concentraia mediilor compuse din ape reziduale utilizate la cultivarea algei a fost de 10%
n varianta cu ape reziduale de la porcine i de 5% n variantele cu ape reziduale
de la psri i bovine. Concentraiile menionate au fost selectate i utilizate n
experiene ca fiind cele optime pentru obinerea unei cantiti maxime de protein n biomas, dar i a biomasei algale.
Cultivarea Spirulinei pe apele reziduale avicole dup metoda dat asigur obinerea unei productiviti mai nalte (Tab. 37).
Tabelul 37
Cultivarea Spirulinei pe apele reziduale de la complexele avicole dup
metoda cultivrii continue
Productivitatea
Procentul
iniial, n g/l
biomasei
(BAU)
extrase

Indicii analizai
Productivitatea Coeficientul Viteza de
dup diluie, g/l de diluare
cretere a
(BAU)
()
culturii ()

Xx

Xx

0%

0,350 0,01

25%

0,620,01

0,460,01

Xx

Xx

Viteza de
scurgere a
mediului
nutritiv ()
Xx

1,340,02

0,510,019

0,130,01

Iniial

Peste 3 zile

172
.. .
Haematococcus pluvialis (Chlamydomonales) . B:
M. 2008, . 76, .7380.
173
.., .. Spirulina platensis Tetraselmis viridis
. B: M, 2005, . 70,
.9-11.
174
Ciferri O. Spirulina, the edible microorganism. In: Micobiological reviews, 1983,
p.567-569.

108

50%
75%

0,610,01
0,620,01

0,300,0
0,140,01

2,030,02
4,270,27

0,630,014
0,760,003

0,250,01
0,380,01

25%

0,940,03

Peste 6 zile
0,700,02
1,330,01

0,430,014

0,080,01

50%

0,600,01

0,290,00

2,020,04

0,490,017

0,170,01

75%

0,340,03

0,080,01

4,150,26

0,700,073

0,260,01

25%
50%
75%

1,540,05
0,640,06
0

0,480,05
0,560,07
0

0,090,01
0,170,01
0

25%
50%
75%

1,960,16
0,930,16
0

0,320,04
0,790,07
0

0,080,01
0,170,01
0

25%
50%
75%

3,360,42
0,790,19
0

0,510,04
0,400,03
0

0,080,01
0,170,01
0

25%
50%
75%

3,780,11
0,630,14
0

0,260,05
0,380,03
0

0,080,01
0,170,01
0

Peste 9 zile
1,140,03
1,340,01
0,320,03
2,020,04
0
0
Peste 12 zile
1,460,11
1,340,01
0,460,08
2,020,02
0
0
Peste 15 zile
2,510,31
1,330,01
0,390,10
2,060,05
0
0
Peste 18 zile
2,830,08
1,330,01
0,310,06
1,990,03
0
0

La extragerea a 25% din biomas se observ tendina evident de majorare a


productivitii algale dup fiecare extragere i nlocuire cu mediu nutritiv corespunztor. Acelai lucru l observm i dup diluie. Coeficientul de diluare, care
indic exactitatea diluiei i extraciei, rmne practic neschimbat n toate variantele analizate. Cea mai nalt vitez de cretere a biomasei a fost observat la a
3-a i a 15-a zi de cultivare, fiind corespunztor de 0,513 i 0,510. Viteza de scurgere a mediului la concentraia dat este n descretere pn la a 15- a zi, dup
care rmne neschimbat. La extragerea a 50% obinem o cantitate puin mai
redus de biomas dup fiecare diluie. Cea mai nalt productivitate n aceast
variant a fost nregistrat la a 12-a zi (0,93 g/l).
Dup a 12-a zi productivitatea algei n aceast variant treptat se reduce. n
acelai timp, se observ o majorare continu a vitezei de scurgere a mediului
pn la a 15-a zi, fapt ce demonstreaz c, odat cu creterea valorilor vitezei de
scurgere a mediului, obinem o descretere a productivitii. Extragerea a 75%
din biomas nu poate fi recomandat, dat fiind faptul c la a 9-a zi productivitatea
algei se reduce pn la 0.
Metoda cultivrii continue poate fi folosit i n cazul cultivrii Spirulinei
platensis pe apele reziduale de la porcine. Ca i n cazul apelor reziduale de la
ntreprinderile avicole, cea mai avantajoas extragere s-a dovedit a fi cea de 25%
109

(Tab. 38). Ea duce la obinerea celei mai mari productiviti, atingnd la a 15-a
zi 1,54 g/l. Acelai lucru se observ i n cazul productivitii de dup diluare.
Coeficientul de diluare rmne neschimbat practic la toate concentraiile pe parcursul ntregii perioade a experienelor. Valorile vitezei de cretere a biomasei
tind s se mreasc pn la a 12-a zi, cnd ating cota maxim (0,390), dup care
are loc descreterea. Valorile vitezei de scurgere sunt invers proporionale fa de
cele ale vitezei de cretere. n cazul extragerii a 50% din biomas, productivitatea
maxim se observ la a 15-a zi de cultivare, atingnd cota de 1,04 g/l. Productivitatea de dup diluare la fel este mai nalt la a 15-a zi. La extragerea a 50% se
observ o sporire a vitezei de cretere, comparativ cu extragerea precedent, cota
maxim fiind atins la a 12-a zi (1,218), dup care se diminueaz la urmtoarele
extrageri. Ca i n cazul precedent, viteza de scurgere a mediului se micoreaz
odat cu creterea valorilor vitezei de cretere a biomasei, cele mai mici rezultate
fiind nregistrate la a 12-a zi. Extragerea a 75% din biomas la fel nu este recomandabil, deoarece, ncepnd cu a 6-a zi de extragere, se obine o productivitate
joas, iar la a 12-a zi alga piere.
Tabelul 38
Cultivarea Spirulinei pe apele reziduale de la complexele de porcine dup
metoda cultivrii continue
Procentul
biomasei
extrase

Indicii analizai
Productivitatea Productivitatea Coeficientul Viteza de
iniial, n g/l
dup diluie,
de diluare
cretere a
(BAU)
g/l (BAU)
()
culturii ()
Xx

Xx

Xx

Xx

Viteza de
scurgere a
mediului
nutritiv ()
Xx

0,250,02
0,370,01
0,470,06

0,130,01
0,260,01
0,360,03

0,360,01
0,550,04
0,690,07

0,090,01
0,170,01
0,250,01

0,340,04
0,580,12
0,340,04

0,090,01
0,170,01
0,260,02

0,390,08

0,080,01

Iniial
0%

0,350 0,01

25%
50%
75%

0,440,02
0,420,00
0,430,01

25%
50%
75%

0,600,02
0,440,01
0,260,03

25%
50%
75%

0,770,05
0,480,08
0,080,00

25%

1,110,21

0
Peste 3 zile
0,310,00
1,340,01
0,200,00
2,070,06
0,110,02
3,980,74
Peste 6 zile
0,440,01
1,360,03
0,210,00
2,050,05
0,060,00
4,130,40
Peste 9 zile
0,560,04
1,350,01
0,230,04
2,100,13
0,020,00
4,721,26
Peste 12 zile
0,830,16
1,320,01

110

50%
75%

1,010,30
0

25%
50%
75%

1,540,43
1,040,29
0

25%
50%
75%

1,310,34
0,920,24
0

0,500,15
2,010,03
0
0
Peste 15 zile
1,160,32
1,330,01
0,510,14
2,000,02
0
0
Peste 18 zile
0,980,26
1,340,01
0,460,13
2,040,04
0
0

1,220,17
0

0,170,01
0

0,350,06
0,540,05
0

0,080,01
0,170,01
0

0,130,01
0,440,02
0

0,090,01
0,170,01
0

Pe apele reziduale de la complexele de bovine se pot obine cantiti nalte de


biomas (Tab. 39).
Ca i n cazurile cu apele de la complexele avicole i de porcine, extragerea a
25% din suspensie contribuie la obinerea celei mai nalte cantiti de biomas,
cea mai nalt productivitate atingnd la a 15-a zi 2,36 g/l. Acelai lucru l putem
spune i n cazul productivitii de dup diluie. Coeficientul de diluare rmne
practic neschimbat n toate variantele analizate.
Tabelul 39
Cultivarea Spirulinei pe apele reziduale de la bovine dup metoda
cultivrii continue
Procentul
biomasei
extrase

Indicii analizai
Productivitatea Productivitatea Coeficientul
iniial, g/l
dup diluie,
de diluare
(BAU)
g/l (BAU)
()
Xx

Xx

Xx

Viteza de
cretere a
culturii ()
Xx

Viteza de
scurgere a
mediului
nutritiv ()
Xx

0,460,04
0,590,04
0,760,21

0,130,01
0,250,01
0,380,01

0,420,03
0,610,04
0,860,03

0,090,01
0,170,01
0,260,01

0,420,07
0,250,02
0,570,02

0,090,01
0,170,01
0,260,01

Iniial
0%

0,350 0,01

25%
50%
75%

0,580,03
0,580,02
0,610,00

25%
50%
75%

0,840,07
0,680,07
0,420,05

25%
50%
75%

1,230,08
0,420,06
0,210,04

0
0
Peste 3 zile
0,430,02
1,360,01
0,290,01
2,020,03
0,150,01
4,170,43
Peste 6 zile
0,620,06
1,350,02
0,330,03
2,020,03
0,090,01
4,470,25
Peste 9 zile
0,900,058
1,350,02
0,210,03
2,020,05
0,040,01
5,191,16

111

25%
50%
75%

1,680,26
0,670,10
0

25%
50%
75%

2,360,46
0,690,09
0

25%
50%
75%

2,300,31
0,630,04
0

Peste 12 zile
1,250,19
1,330,01
0,330,05
2,010,03
0
0
Peste 15 zile
1,770,35
1,340,01
0,340,04
2,010,04
0
0
Peste 18 zile
1,720,4
1,340,01
0,310,02
2,010,05
0
0

0,360,08
0,900,04
0

0,080,01
0,170,01
0

0,370,03
0,530,03
0

0,080,01
0,170,01
0

0,190,03
0,460,04
0

0,080,01
0,170,01
0

Valorile vitezei de cretere a culturii sunt n descretere de la a 3-a zi. Viteza


de scurgere a mediului la concentraia dat oscileaz puin, dar practic are aceeai
tendin ca i n cazul vitezei de cretere a culturii. La extragerea a 50% obineam
o cantitate minim de biomas, ce nu depea 0,69 g/l i care pn la sfritul
experienelor scade, concomitent i n cazul productivitii de dup diluare. Viteza de cretere a biomasei comparativ cu extracia precedent este mai mare,
atingnd 0,896 la a 12-a zi. La extragerea dat se observ o oscilare a valorilor
vitezei de scurgere n direcia reducerii lor. Extragerea a 75% din biomas nu
poate fi recomandat, dat fiind faptul c nu permite obinerea unei productiviti
satisfctoare.
n continuare am analizat cantitatea total de biomas de Spirulin cultivat
pe diverse ape reziduale, ca urmare a utilizrii metodei de cultivare continu
(Tab. 40).
Tabelul 40
Cantitatea total a biomasei de Spirulina platensis crescut pe apele
reziduale de la complexele de porcine, bovine i avicole dup metoda
cultivrii continue
(g/l BAU)
Cantitatea biomasei
extrase
Bovine
Porcine
Avicole

Apele reziduale
50%
Xx
2,13 0,10
2,64 0,11
2,45 0,12

25%
Xx
4,01 0,16
2,36 0,10
5,92 0,27

75%
Xx
1,00 0,05
0,60 0,03
0,81 0,03

Extragerea a 25% din biomas i adugarea mediului compus din ape reziduale contribuie la obinerea celei mai mari cantiti de biomas, n cazul utilizrii
apelor reziduale de la complexele de bovine i cele avicole. n acest caz obinem
112

o biomas de 6,21 ori mai mare dect la cultivarea prin metoda periodic, pe o
perioad de 20 de zile, n varianta cu apele reziduale de la complexele avicole.
Acelai lucru se observ i la cultivarea Spirulinei pe mediu nutritiv alctuit pe
baza apelor reziduale de la complexele de bovine i porcine, obinnd un spor
de 1,06 i, respectiv, de 1,74 ori fa de metoda cultivrii periodice. Extragerea a
50% din biomas duce la obinerea unei cantiti mai nalte de biomas de Spirulin doar n cazurile folosirii mediului compus din apele reziduale de la porcine.
Dac comparm rezultatele cu metoda de cultivare periodic, observm c att
n cazul utilizrii mediului compus din ape reziduale de la porcine, ct i n cazul
celui de la complexele avicole obinem o cretere de 1,95 i 2,57 ori. La extragerea a 75% din biomas obinem cantiti nensemnate pentru toate variantele
analizate, fapt ce confirm ineficiena extragerii date.

113

CAPITOLUL IX
COLECII DE ALGE
9.1. Caracteristica general a coleciilor de alge
Coleciile de alge prezint o modalitate de conservare a genofondului algal i
de meninere a culturilor de alge valoroase care pot fi utilizate n procesul de cultivare. Astfel, pe plan mondial au fost elaborate cu succes multe strategii, proiecte
care permiteau identificarea i nregistrarea coleciilor de alge ntr-o baz global
de date. Actualmente sunt cunoscute mai multe surse tiinifice care menionaz
175176177178
coleciile de alge de pe diferite continente.175-178
Una dintre cele mai importante baze
de date electronice a coleciilor mondiale de alge este cea a Federaiei Mondiale
a Coleciilor de Culturii.179 Actualmente, n registrul bazei de date a acestei Federaii sunt nregistrate 3060 de specii i varieti de alge meninute n condiii de
colecii. Pe sate-ul oficial al Federaiei Mondiale a Coleciilor de Culturi sunt nregistrate coleciile de alge, dintre care: n Europa 47 (majoritatea n Frana (6)
i n Federaia Rus (5); pe continentul american 15; n Asia 38 (majoritatea
n Thailanda 8); n Australia 8 colecii.
Datele de contact privind coleciile mondiale de alge sunt prezentate n Anexa nr. 4.

9.2. Tehnologii de meninere a algelor n colecii


La momentul actual se utilizeaz un spectru larg de procedee ce permit a pstra
culturile de microalge. Printre acestea cele mai importante sunt: liofilizarea, crioconservarea, pstrarea algelor n stare de anhidrobioz, pe mediile lichide, agarizate, n azotul lichid .a. Fiecare din metodele utilizate are particulariti specifice.

9.2.1. Meninerea pe medii nutritive solide i lichide


.. i .. 180 propun utilizarea tehnologiilor clasice de meninere al algelor n colecii, care prevd inocularea lor pe medii nutritive solide (agarizate) sau lichide sterile. ns, cea mai corect i mai practic
James D.E. Culturing algae. U.S.A., 2012. 27 p.
Egardt J., Lie ., Aulie J., Myhre P. Microalgae a market analysis carried out as part of
the Interreg KASK IVA project: Blue Biotechnology for Sustainable Innovations, Blue Bio.
Sweden, 2013. 79 p.
177
Catalogue of the national culture collection (UKNCC). List of algae and protozoa. USA,
2001. 231 p.
178
Belkinova D.S., Kirjakov I.K., Mladenov R.D. Catalogue of the strains of plovdiv algal
culture collection (PACC). // Trav. Sci. Univ. Plovdiv, Plantarum (2), 2002, 38(6), p.3-78.
179
http://www.wfcc.info
180
.., ..
. // , 1983, .57-74.
175
176

114

metod este inocularea pe medii solide. Dup inocularea algelor probele se


expun la lumin pe 1-1,5 sptmni. Culturile meninute pe medii lichide trebuie s fie agitate periodic. Dup ce algele cresc bine, lucru care se observ
prin colorarea agarului i formarea unei pelicule, baloanele i vasele Pietri se
expun n frigider la temperatura de 6-10C cu iluminarea redus de 300-500 lux
generat de lmpi luminescente. n aa mod, culturile pot fi meninute un timp
ndelungat i necesit doar uneori (peste 1,5-2 luni) inocularea n cazul uscrii
mediilor solide.
.. i .. 181 propun, practic, aceeai tehnologie, care
ns se deosebete de cea precedent. Deosebirea principal este c dup inocularea culturii probele se expun, timp de cteva zile, la iluminare continu de
2000 lux i la temperatura de 25C. Ulterior culturile se menin pe vitrine de
sticl la 15C i iluminare timp de 8 ore pe zi. Inocularea culturilor se realizeaz peste fiecare 2-3 luni. Se propune ca fiecare specie s fie meninut pe mediu
solid i lichid.
.. 182 propune meninerea culturilor de alge n condiii variate, care difer n funcie de preferinele lor. Astfel, tulpinile mezofile trebuie
meninute n frigider la temperatura de 4-6C, cele termofile la temperatura
camerei. Recultivrile pot fi efectuate peste 3 sptmni. Autorul propune pentru unele culturi de alge inocularea s fie efectuat o dat n lun la temperatura
de 24C i iluminarea de 6000 lux.
.. i .. 183 menioneaz c la meninerea algelor n
colecii se aplic inocularea periodic (peste fiecare 2-3 luni) pe mediu nutritiv.
Dup inoculare culturile sunt pstrate, timp de 32 sptmni, n condiii de iluminare cu intensitatea de 3000-4000 lux (10-12 ore din 24 ore) la temperatura
de 25C. n continuare culturile se pstreaz n condiii de iluminare natural i
la temperatura de 10-15C.
.. 184 susine c culturile de alge cianofite axenice pot fi
pstrate n dulapuri de sticl la iluminare natural (sau la 300-500 lux) la temperatura camerei pe medii lichide sau solide (1% agar). Inocularea se produce
o dat n dou luni. Iar culturile infectate bacteriologic se pstreaz pe medii
lichide i minerale n termostat la temperatura de 20C i se inoculeaz de dou
ori pe an.
181
.., .. . // , 1983, .1-27.
182
.. .
// , 1983, .74-80.
183
.., .. K . // ,
1983, .81-86.
184
.. - . // , 1983, .86-91.

115

D.S. Belkinova 185 i coautorii la fel menioneaz c culturile algale (fiecare


specie) se menin n dou eprubete cu medii solide (agarizate 1,7-2%) nclinate
n termostat la temperatura de 12C i intensitatea luminii sczut (600 lux);
nsmnarea se efectueaz o dat pe an. Culturile pot fi meninute i pe medii
lichide, n dou variante, la temperatura camerei (17-25C) i la lumina natural; inocularea se face de dou ori pe an.

9.2.2. Meninerea algelor prin crioconservare


Pentru aplicarea acestei metode este necesar s dispunem de: azot lichid i
un vas special (Dewar) amenajat cu polie pentru meninerea cutiilor de depozitare; un container de depozitare Nalgene ce menine 1C; congelator (care
congeleaz la -80C); o cutie de depozitare ptrat (care va menine 81 tuburi
de 2 ml ce permit depozitarea azotului); loc steril; o centrifug cu rotator adaptat pentru tuburile de 2 ml. Crioconservarea tulpinilor de alge solide (agatizate
nclinate) se realizeaz n modul urmator:
1. Se prepar medul nutritiv agarizat steril, pe care se menine alga. n tubul de
crioconservare (de 2 ml) se toarn 1 ml mediu agarizat i tubul se nclin. Dup
solidificare se inoculeaz alga i se expune n condiii normale de cretere;
2. Mediul nutritiv se dilueaz cu metanol la 5% (v/v) la adugarea metanolului probele se expun la o iluminare redus;
3. Containerul de depozitare Nalgene ce conine izopropanol se plaseaz
ntr-un frigider (la temperatura de 4C) cu cel puin o zi nainte de a fi utilizat
pentru crioconservare;
4. Cutia de depozitare a criotuburilor se plaseaz n vasul Dewar ce conine
azot lichid, cu cel puin cteva ore nainte de fi utilizat;
5. Mediul nutritiv cu etanolul, pstrat la latemperatura camerei, se adaug
ncet, astfel nct agarul s fie nclinat n flaconul ngheat pn cnd volumul
total de material n flacon atinge 1,5-1,8 ml. La introducerea algelor n flacon
culturile trebuie s rmn pe mediu solid.
6. Probele se expun la rece. n vasul scos din frigider se plaseaz flacoanele
i se expun ntr-un congelator la -80C.
7. Dup cel puin 1,5 ore (nu se recomand a le depozita peste noapte) de
pstrare n congelator (la temperatura de -80C), vasul de congelare este scos.
Cutia de depozitare este imediat extras de pe suport. Apoi flacoanele congelate
se transfer n cutia din vasul Dewar, unde sunt depozitate pe termen lung sau
scurt. Cutia din vasul Dewar nu trebuie s rmn fr azot lichid. La necesitate, cutia cu probele de alge poate fi eliminat din vasul Dewar pentru puin timp
(mai puin de 3 minute), astfel ca temperatura criotubului s nu fi mai mic de
-130C. Pentru activarea algelor crioconservate flacoanele ngheate se exclud
185
Belkinova D.S., KirjakovI. K., Mladenov R.D. Catalogue of the strains of plovdiv algal
culture collection (PACC). // Trav. Sci. Univ. Plovdiv, Plantarum (2), 2002, 38(6), p.3-78.

116

din vasul Dewar, se expun n ap cald (de 37C) timp de cteva minute (n
general, mai puin de 2 minute), se elimin lichidul expus deasupra mediului
186 187 188
solid. Cultura se inoculeaz n mediu proaspt pregtit.186-188

9.2.3. Meninerea algelor n colecii prin ahidrobioz


Anhidrobioza este starea organismului n care se stopeaz temporar funciile
vitale datorit deshidratrii pariale sau totale. Aceast stare se caracterizeaz
prin ncetinirea metabolismului. O definiie cantitativ a deshidratrii complete
este, probabil, uscarea pn la <0,1g H2O g-1 de mas uscat, fiind echivalentul
uscrii aerului pn la 50% la umiditatea relativ de 20C. Aceast cantitate este
valabil doar pentru celulele izolate n condiii de laborator. Adaptarea organismelor la anhidrobioz (deshidratare) se bazeaz pe capacitatea acestora de a echilibra potenialul apos intern n raport cu mediul nconjurtor uscat i capacitatea
de a-i restabili funciile normale dup rehidratare.189
Procedeul de meninere a algelor n starea de anhidrobioz se realizeaz astfel:
biomasa algal (0,1 ml suspensie) colectat de pe mediu nutritiv lichid (aflat la
sfritul fazei exponeniale de cretere) se deshidrateaz la temperatura de 3060C n termostat timp de 24 ore. Dup aceasta biomasa se expune n flacoane
nchise ermetic i se pstreaz n stare uscat n termostat la umiditatea aerului
de 8-14% (umiditatea variaz n funcie de specie) i la temperatura de 15-20C.
Conform acestui procedeu, algele pot fi pstrate timp de 6 ani, iar dup aceasta
190 191 192
pot fi reactivate.190-192
Aceast metod de meninere a algelor n colecii este mai ieftin i accesibil,
deoarece nu necesit asigurarea cu spaiu mare pentru culturi, iluminare i nu este
necesar s efectum inocularea periodic pe medii nutritive (lichide sau solide).

Day J.G., Brand J.J. Cryopreservation methods for maintaining cultures. // Algal culturing
tehniques, 2005, p.165-187.
187
Day J.G. Cryopreservation of Microalgae and Cyanobacteria. Cryopreservation and
Freeze-Drying Protocols. USA, 2007, p.141-151.
188
http://www.utex.org/protocols.aspx
189
Alpert P. The limits and frontiers of desiccation tolerant life. Integr. // Comp. Biol.,
45:685-695, 2005.
190
Crowe J.H, Hoekstra F.A, Crowe L.M. Anhydrobiosis. // Annu Rev Physiol., 1992, 54,
p.579-599.
191
.. . // , : . (, 27-30 2006 .). - , 2006, c.173-174.
192
.. : . ... . . . , 2008. 25 .
186

117

Bibliografie
1. Abbott I.A., Cheney D.P. Comercial uses of algal products: introduction und
bibliography. // Selected papers in phycology, 1982, vol. 2, p.779-787.
2. Albergoni V., Piccini E., Coppellotti O. Response to heavy metals in organism. Excretion andaccumulation of physiological and nonphysiological
metals in Euglena gracilis. // Comparative Biochem. Physiol., 1980, vol.
67, no. 2, p.121-127.
3. Algal Biotehnology. Progres in biotehnology of photoautotrophic microorganism. // 6 Intern. Conf. on applied algology, 1993. 84 p.
4. Alpert P. The limits and frontiers of desiccation tolerant life. Integr. //
Comp. biol., 2005, 45:685-695.
5. Atlas R.M. Handbook of microbiological media fourth edition. New York,
2010. 2063 p.
6. Baldia S.F., Nishijima T., Hata Y., Fucami K. Growth characteristics of
blue green alga Spirulina platensis for nitrogen utilization. // Nippon Suisan Gakkaishi., 1991, 57, no 4, p.645-654.
7. Baldia S.F. Fukami K., Nuishijima T., Hata Y., Growth response of Spirulina platensis to somo physico- chemical factors and the kinetics of phosphourus utillization. // EISH, 1995. no 2, p.351-335.
8. Bealy A., Kato T., Ota Y. Spirulina (Artrospira) potenial aplication as an
animal fud supliment. // J. Appl., Phycol., 1996, 8, no 4-5, p.143-147.
9. Behrens P.W. Photobioreactors and fermentors: the light and dark sides of
growing algae. // Algal Culturing Techniques, 2005, p.189-203.
10. BelcherH., Swale E. Culturing Algae, a guide for schools and colleges.
U.S.A., 1982. 25 p.
11. Belkinova D.S., Kirjakov I.K., Mladenov R.D. Catalogue of the strains of
plovdiv algal culture collection (PACC). // Trav. Sci. Univ. Plovdiv., Plantarum (2), 2002, 38(6), p.3-78.
12. Besker E.W. Development of spirulina research in developing county india.
// Spirulina Algae of life. // Bull. Inst. Oceanorg.,1993, no12, p.141-155.
13. Besker E.W. Spirulina alga of life. // Bull. Inst. Oceanolorg., 1993, no12,
p.141-155.
14. Biodiesel Production. BioEnergy Research 1(1):20-43.
15. Blidari C.F., Petru-Vancea A. Biotehnologie. Lucrri practice de laborator.
Oradea, 2006. 103 p.
16. Bogdan A.T., ogoe I., Cmpeanu Gh., Ivana S., Enache T., Britareanu
S., Iudith I., Popescu A. Microbiologia alimentelor. Vol 1. Bucureti, 2011.
294 p.
17. Brown R.M., Jr., Bischoff H.W. A new and useful method for obtaining
axenic cultures of algae. // Phycol. Soc.Amer. News Bull., 1962, vol. 15,
p.43-44.
118

18. CachitaCosma D., Deliu C., Rakosy- Tican L., Aedelea A. Tratat de biotehnologie vegetal. Vol. I. Cluj- Napoca: Dacia, 2003, p.10-18.
19. Carolina Biological Supply Company. Culturing Algae. U.S.A., 2012. 27 p.
20. Catalogue of the national culture collection (UKNCC). List of algae and
protozoa. USA, 2001. 231 p.
21. Cru I. Cultura algelor pentru biomas i principii active: Note de curs,
lucrri de laborator. Bacu: Universitatea din Bacu, 2007. 99 p.
22. Chaudhury B.K. De S., Bhattacharyya D.K. Effect of nitroyen sources on
linolenic acid accumulation in Spirulina platensis. //Jaocs, 1995, vol. 76,
no 1, p.153-155.
23. Chiu I. Biochimie. Vol. I. Timioara: Mitron, 1999. p.94-111.
24. Ciferri O. Spirulina, the edible microorganism. In: Micobiological reviews,
1983, p.567-569
25. Cozza K.L. Costa J.A.V. Lipdios em Spirulina. Vetor Rev. Cienc. Exatas
Eng., 2000, no 10, p.69-80.
26. Crowe J.H, Hoekstra F.A, Crowe L.M. Anhydrobiosis. // Annu. Rev. Physiol., 1992, 54, p.579-599.
27. Day J.G. Cryopreservation of Microalgae and Cyanobacteria. Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols, USA, 2007, p.141-151.
28. Day J.G., Brand J.J. Cryopreservation methods for maintaining cultures. //
Algal culturing tehniques, 2005, p.165-187.
29. Day J.G., Lukavsk J., Friedl Th., Brand J.J., Campbell Ch.N., Lorenz M.,
Elster J. Pringsheims living legacy: CCALA, CCAP, SAG and UTEX culture collections of algae. Nova Hedwigia, 2004, 79, no1-2, p.27-37.
30. Dobrojan S. Modificrile morfofiziologice i biochimice ale algei Spirulina
platensis (Nordst.) Geitl. cultivate pe ape reziduale i utilizarea ei: Tez de
doctor n tiine biologice. Chiinu, 2011.
31. Dobrojan S., alaru V., alaru V. Utilizarea apelor reziduale de la complexele zootehnice la cultivarea industrial a algei Spirulina platensis
(NORDST.) Geitl. // Studia Universitatis. Seria ,,tiine ale naturii, 2009,
nr.6 (26), p.46-50.
32. Dobrojan S., Gorbatenco C., Dobrojan G., Stratulat I. Cultivarea algei Nostoc flagelliforme pe medii obinute pe baza deeurilor de la complexele
zootehnice. // Studia Universitatis, 2012, nr.1 (51), p.19-22.
33. Dobrojan S., Dobrojan G., alaru V. Cultivarea algei cianofite Spirulina
platensis utiliznd ca mediu apele reziduale de la complexele de porcine. //
International Conference of young Researches, 2010, nr.8, p.60.
34. Dobrojan S., alaru V.M., alaru V.V., Dobrojan G., Stratulat I. Procedeu
de preparare a mediului nutritiv pentru cultivarea algei Spirulina platensis
(Nordst.) Geitl. // Al 3-lea Simpozion. Lacurile de acumulare din Romnia.
Tipologie, Valorificare, Protecie, 2012, p.3.
35. Droop M.R. A procedure for routine purificationof algal cultures with antibiotics. // Brit. Phycol. Bull., 1967, no3, p.295.
119

36. Dubinsky Z. Productivity af algae under natural, Handboc of microalgal mass


culture. // Ed. Richmond A- Boca Raton CRC. Press, 1986, p.101-115.
37. Egardt J., Lie ., Aulie J., Myhre P. Microalgae a market analysis carried
out as part of the Interreg KASK IVA project: Blue Biotechnology for Sustainable Innovations, Blue Bio. Sweden, 2013. 79 p.
38. Faintuch B. L., Sato S., Aquarone E., Use of different nitrogen sources in
the production of biomass of Oscillatoria limnetica. // Afrev. Microbiol.
1992. 23, no1, p.32-36.
39. FAO. Manual on the production an duse of live food for aquaculture. Rome,
FAO, 1996. 295 p.
40. Findeneg J. Factors controlling primary prodyctivity, especially withregard
to water replenishment, stratification and mixing. // Proceendingsof the 1
B. P. Symposium on Prymary Productivity in Aquatic Enviroments. Pallanza, 1965, vol. 18, p.105-119.
41. Fogg G.E. Phosporus in primary aquatic plants. // Water Res., 1973, 7, vol.
12, p.77-89.
42. Frana M.B., Panek A.D., Eleutherio E.C. Oxidative stress and its effects
during dehydration. // Comp. Biochem. and Phys., Part A, 2007, 146:621631.
43. Geider R.J., Maklntire H.L., Kana T.M. A dynamic of photoadaptation in
phytoplankton. // Limnol. Oceanorg, 1996, no1, p.1-15.
44. Gherhardt S. Mangan effekte in photosynthetischen reaktionen von Anacystis. // Ber., dt. bot. Ges., 1966., no11, p.63-68.
45. Guillard R.R.L. Purification methods for microalgae. // Algal culturing techniques, 2005, p.117-133.
46. Guillard R.R.L., Morton S.L. Culture methods. // Hallegraeff G.M., Anderson D.M., and Cembella A.D., (eds). Manual on Harmful Marine Microalgae. UNESCO, Paris, 2003, p.77-97
47. Heaney By S.I., Jaworsk G.H.M. A simple separation technique for purifying micro-algae. // Br. phycol., 1977, no12, p.171-174.
48. Hopkins E., Wann F. Relation of hydrogen-ion concentration to growth of
chlorella and to availbility of iron. // Bot. Gaz., vol. 81, no 4, 1962, p.355376.
49. Iachim M. Rolul algelor i al unor plante vasculare n procesul de epurare
biologic a apelor reziduale de la complexele zotehnice: Tez de doctorat.
Chiinu, 2007, p.131.
50. James D.E. Culturing algae. U.S.A., 2012. 27 p.
51. Jeng D.K.H., Kaczmarek K.A., Woodworth A.G., Balasky G. Mechanism
of microwave sterilization in the dry state. // Appl. Environ. Microbiol.,
1987, no 53:2133, p.7.
52. Kawachi M., Nol M.H. Sterilization and sterile technique. // Algal Culturing Techniques, 2005, p.65-81.
120

53. Keller M.D., Bellows W.K., Guilhd R.R.L. Microwave treatment for sterilization of phytoplankton culture media // J. Esp. Mar. Bid. Ed., 1988, vol.
117, p.279-283.
54. Kyle D.J. Specialty Oils from Microalgae: Perspective, in Biotechnoloyy
of Plant Fats and Oils. // Edited by J.Rattray, American Oils Chemists Society, Champaiyn, 1991, p.130-143.
55. Laing I. Cultivation of marine uniclular algale. Lowestoft, 1991. 31 p.
56. Lcia Helena Pelizer, J.C.M. Carvalho, Sunao Sato, Iracema de Oliveira
Moraes, Spirulina platensis growth estimation by pH determination at different cultivations conditions. // Journal of Biotechnology, 2002, vol. 5,
no. 3.
57. Manabe E., Morio, and T. Hiroyuki, I.D. Naoka, S. Koji, and M.Tadashi.
Influrnce of ammonium chloride on growth and fatty acid production by
Spirulina platensis. // Appl. Biochem. Biotechnol, 1992, 34-35: 274-281.
58. Manabe E., Hiroyuki and H. Morio. Spirulina Culture for Enhanced Manufacture of Linolenie Acid. // Chem. Abstr., 1992, 116:82258.
59. Neamu G., Cmpeanu Gh., Socaciu C. Biochimie vegetal. Bucureti:
Editura Didactic i Pedagogic, 1993, p.244-264.
60. Prask J., Plocke D. A role for zinc in the cytoplasmic ribosomes of Euglena
gracilis. // Plant Physiol., 1971, vol. 48, no2, p.150-155.
61. Richmond A. Handbok of microalgal mass culture. // Boca Raton: CRC
Press, 1996, p. 528.
62. Richmond A. Handbook of microalgal mass culture. CRC Press, Boston,
1990.
63. Richmond A. Handbook of microalgal culture biotechnology and applied
phycology. Blackwell Science, Oxford, 2004.
64. Sasson A. Biotehnologii i dezvoltare. Bucureti: Editura Tehnic, 1993.
303 p.
65. Schenk P.M., Thomas-Hall S., Stephens E., Marx U.C., Mussgnug J.H.,
Posten C., Kruse O., Hankamer B. Second Generation Biofuels: High-Efficiency Microalgae for Biodiesel Production. // Bio Energy Research, 2008,
no1(1), p.20-43.
66. Simiona I. Bacteriologie general. Bucureti, 2005.
67. Solp H., Starr M.P. Principles of isolation, cultivation and conservation of
bacteria. // The Procaryotes. Vol. 1. Vienna: Springer-Verlag, 1981. p.135175.
68. Stancic M. Biochimie vegetal. Bucureti: Editura Didactic i Pedagogic, 2003, p.43-78.
69. Tarmure C. Biochimie structural i metabolic. Cluj- Napoca: Dacia,
1996, p.43-58.
70. Tel Or. E., Stewart W. Manganes and photosynthetic oxygen evolutio by
algae. // Nature, 1975, vol. 258, no5537, p.715-716.
121

71. Toma F. Bacteriologie general. Curs. Bucureti, 2005. 70 p.


72. Usturoi R., alaru V. Nostoc flagelliforme surs de substane biologic
active. // Conferina tiinific naional cu participare internaional Probleme actuale ale microbiologiei i biotehnologiei, consacrat celei de-a
50-a aniversri de la fondarea Seciei de Microbiologie. Chiinu, 2009,
p.158-160.
73. Vollenwaider R. Okologische Untersuchungen von planktischen Algenan
experimenteller Grundlage. // Schweiz. Z. Hydrobiol., 1950, Bd. 12, H.2,
s.194-212.
74. Vonshak, A. Spirulina platensis (Arthrospira) - physiology, cell biology
and biotechnology. Taylor & Francis, Londres, 1996.
75. Watanabe M.M., Suda S., Kasai F., Sawaguchi T. Axenic cultures of three
species of Microcystis (Cyanophyta= Cyanobacteria). // Bull. Jap. Fed.
Culture Coll., 1985, p.57-63.
76. Watanabe, M.M., et al. Purification of freshwater picoplanktonic cyanobacteria by pour-plating in ultra-low-gelling-temperature agarose. // Phycol.
Res., 1998, p.71-75.
77. West J.A. Long-term macroalgal culture maintenance. // Algal Culturing
Techniques, 2005, p.157-163.
78. Wnse all rights reserved. Working with algale and cyanobacteria. U.S.A.,
2012.10 p.
79. Yamaguchi K., Mori E., Tamura G. Nitrite reductase in the cyanobacterium
Spirulina platensis. // Agric Biol. Chem., 1985, no10, p.3061-3002.
80. . . : ,
1983. 263 .
81. .., .., .., .., .., .., .., .., ..
. , 2005. 640 .
82. .., .. . ..
. // . .,
1983, c.92-104.
83. . ., . . . . . . 200 .
84. .., .. -
. // . // . .
., 1982, . 185, c.137-145.
85. .. . : , 1972. 336 .
86. .., .., ..
. a, 2000.
150 .
122

87. .. . : , 1992. 192 .


88. .. . :
, 2004, c.4-64.
89. .., .. Spirulina platensis
Tetraselmis viridis . B: M, 2005, . 70, .9-11.
90. ..
Spirulina platensis
(Nordst.) Geitl. . // M, 2002, .
60, .48-52.
91. .. Spirulina platensis (Nordst.)
Geitl. . // . . . . - . , 2003, 1, c.128132.
92. .. Spirulina
platensis (NORDST.) GEITL . // M, 2003, . 64, .78-81.
93. .. . // . , 1981,
c.139-147.
94. .., .., .. . . . : , 1989, .605.
95. .., .., ..

. //
. , 1980, . 140-157.
96. .. . ,
1982. 198 .
97. .. - . // . , 1981, .17,
3, .121-122.
98. .., .. . , 1965. 272 .
99. .. .
// . ., 1990, . 75, 4, .454-461.
100. .., .. . , 1962. 58.
101. .., ..
. // , 1983, .57-74.
123

102. ..; ..; .. : . :


- , 2008. 152 .
103. .., .. Spirulina
platensis (NORDST.) GEITL. . // M, 2002, . 60, c.21-26.
104. . . - . // , 1983, .86-91.
105. .., .. . : , 1984. 160 .
106. .., .., ..

Dunaliella salina. // , 2007, . 74, .21-22.
107. C.. Spirulina platensis
(NORDST.) GEITL. . // , 2007,
74, c.18-20.
108. .., .. . // ,
1983, .1-27.
109. .. - . // , 1961, .15,
6, .1108-1128.
110. .. , . //
. . ., 1952, .3-92.
111. .. -
. // - . .-, 1965, c.12-32.
112. .., .. Melosira italica . // , 1959, .59. .126-130.
113. .. . ., 1985. 244 .
114. .., .. .
. : , 2002. 105 .
115. o .. . : - , 1990. 80 .
116. .. . //
. .1. , 1961, .50-54.
117. .. . ., 1980,
.1. 657 .
124

118. .., .. . , , . ;
-: -, 1997. 155 .
119. .. . // , 1945, .14, 4, .248-253.
120. .. - . , 1981. 210 .
121. .. Scenedesmus acutus
Meyen. // (), 1970, 9, .353363.
122. ..
- . // - . , 1969, .920.
123. ..
. B: , 2006, . 8,
.57-60.
124. .. . :
, 2012. 728 c.
125. .., .., .. . , 1997. 184 .
126. .. . ,
, . ; : , 2012. 728 .
127. .. . : .
: , 2008. 199 c.
128. .. . // , 1974, .11, .3-19.
129. .., .. - .
// . (,
, ). ., 1991, .300-304.
130. .. . // , 1983, .74-80.
131. .. . // . ., 1972, . 57, 2, .182197.
132. .., .. .
- . // .
., 1972, .8, 3. .47-55.
133. ..
. // . ., 1985, .70, 8,
.1009-1018.
125

134. .. . . - , 2004. 336 .


135. ..
. // .
, 1989, .1-167.
136. .., .., .., .. P
Spirulina (Artrospira) Platensis (Nordst)
Gitler . // ,
2002, . 62, .62-66.
137. ..
(Gracilaria): . : , 2002, . 60, .57-70.
138. .. : . , 1983. 72 .
139. .. . // , 1977, . 38,
1, c.41-47.
140. .. . . : ,
1984. 280 .
141. .., ..
// , 1981, .21, . 3, .523-528.
142. .. . //
, 1976, .5-16.
143. .. . : , 1978, .230-300.
144. .., .., .., .. . : , 1999. 264 .
145. .. a . // . Mo: ,
1984.
146. .., .., ..
Eustigmatos magnuis (B. Petersen) Hibberd
(Eustigmatophyta) Hantzschia amphioxis (Ehrenberg) Grunow in Cleve
et Grunow (Bacillariphyta) . // , 2009, 6 (100), c.609-610.
147. .. :
. // , 1985, .92-95.
148. .. .. .. .. ..
. . .. .. .. .. .. - . :
, 1975. 241 c.
126

149. .., .., .., .., .., .., .., ..,


.., ..
. , 1986. 65 .
150. .. . // , 1990,
.1-196.
151. .. .
. : , 2005. 128 .
152. .. . o Haematococcus pluvialis (Chlamydomonales) . B: M, 2008, . 76, .73-80.
153. .. .. .. -
(Cyanophita), // , 2002, 4, c.491-501.
154. .., ..
. , 1984. 336 .
155. .. 2: . B: , 2005, . 67, c.98-110.
156. .., . . Platimonas viridis Rouch. //
, 2006, . 70, .52-60.
157. .., .., .., .. . B: , 2008, . 9-18.
158. .. -
. , 1983. 240 .
159. .. .., .. .
55. .
// , 2001, 27, . 6, c.444-448.
160. .. , . :
, 2008. 128 .
161. .. ( ). : , 1971.
162. ..
// , :
. - (, 27-30
2006 .). , 2006, .173-174.
163. ..
: . ... . . . ,
2008. 25 .
127

164. .., ..
K . //
, 1983, . 81-86
165. http://www.algaemax.eu/more-in-detail.html
166. http://www.utex.org/protocols.aspx
167. http://www.wfcc.info
168. http://www-cyanosite.bio.purdue.edu
169. http://gcm.wfcc.info

128

Medii nutritive utilizate pentru cultivarea algelor


Chu 10 (g/l)
Ingredientul

Cantitatea, g/l

Ca(NO3)2

0,04

K2HPO4

0,01

MgSO4*7H2O

0,025

Na2CO3

0,02

Na2SiO3*9 H2O

0,025

FeCl3*6 H2O

0,0008

Anexa nr.1

Beneche
Ingredientul

Cantitatea, g/l

MgSO4*7H2O

0,1

Ca(NO3)2

0,5

K2HPO4

0,2

FeC6H5O7

0,0033

C6H8O7

0,0033

Mediul nutrtiv Nr.6 (Gromov B.V., Titanova N.N.)


Ingredientul

Cantitatea, g/l

KNO3

K2HPO4*3 H2O

0,2

MgSO4*7H2O

0,2

CaCl2*6H2O

0,15

NaHCO3

0,2

Soluie de microelemente

1 ml

pH

Dup sterilizare se ajusteaz la 7,5-8 cu


ajutorul sol. de NaOH (de 10%)

129

Soluia de microelemente pentru mediul nutritiv Nr.6 (Gromov B.V., Titanova N.N.)
Ingredientul
Cantitatea, g/l
0,22
ZnSO4*7H2O
1,81
MnSO4
0,08
CuSO4*5H2O
2,63
NaBO3*5H2O
1
(NH4)6Mo7O24*4H2O
9,3
FeSO4*7H2O
1,2
CaCl2
0,02
Co(NO3)2*6H2O
EDTA (trilon B)
10
Mediul nutrtiv Nr.16 (Gromov B.V., Titanova N.N.)
Ingredientul
Cantitatea, g/l
NaHCO3

16,8

K2HPO4*3H2O

0,5

NaNO3

2,5

K2SO4

NaCl

MgSO4*7H2O

0,2

CaCl2*6H2O

0,04

FeSO4

0,01

EDTA

0,08

Soluie de microelemente

1 ml

Soluie de microelemente pentru mediul nutritiv Nr. 16 (Gromov B.V., Titanova N.N.)
Ingredientul
Cantitatea, g/l
H3BO3

2,86

MnCl2

1,81

ZnSO4*7H2O

0,22

CuSO4*5H2O

0,08

MoO3

0,015
130

Mediul nutritiv Zarrouk


Ingredientul
Cantitatea, g/l
NaHCO3
16,8
NaNO3
2,5
K2HPO4*3H2O
0,5
K2SO4
1
NaCl
1
MgSO4*7H2O
0,2
CaCl2*6H2O
0,04
FeSO4
0,01
EDTA
0,08
Soluie de microelemente
4 ml
pH
9,5
Soluie de microelemente pentru mediul nutritiv Zarrouk
Ingredientul
H3BO3
MnCl2*4H2O
ZnSO4*7H2O
NaMoO4*5H2O
Co(NO3)2*6H2O
CuSO4*5H2O

Cantitatea, g/l
2,86
1,13
0,222
0,39
0,049
0,079

Mediul nutritiv Aiba i Ogawa (AO)


Se prepar prin combinaia soluiilor A+B (raport 1:1), pH 9,4-9,8
Soluia A
Ingredientul
Cantitatea, g/l
NaCl
2
MgSO4*7H2O
0,4
K2SO4
2
CaCl2*2H2O
0,08
NaNO3
5
FeSO4*7H2O
0,02
Microelemente
2 ml
131

Saluia B
Ingredientul
K2HPO4
Na2CO3
NaHCO3

Cantitatea, g/l
1
8,04
27,22

Microelementele pentru soluia A


Ingredientul
H3BO3
MnSO4
ZnSO4*7H2O
(NH4)6Mo7O24*4H2O
Co(NO3)2*6H2O
VOSO4*6H2O
Al(SO4)3K2SO4*2H2O
NiSO4(NH4)2SO4*6H2O
Cd(NO3)2*4H2O
Cr(NO3)2*7H2O
Na2WO4*2H2O
KBr
KI

Cantitatea, g/l
3,1
2,23
0,22
0,088
0,145
0,054
0,474
0,189
0,154
0,037
0,033
0,199
0,083

Mediul nutritiv pentru Microcystis


Ingredientul
KNO3
K2HPO4*3H2O
MgSO4*7H2O
CaCl2*6H2O
NaCl
Tris (4 mM)
Soluie Fe+EDTA
Soluie de microelemente

Cantitatea, g/l
2,02
0,348
0,246
0,11
0,117
0,485
1 ml/l
1 ml/l

132

Soluia de microelemente n mediul nutritiv pentru Microcystis


Ingredientul

Cantitatea, g/l
Soluia I

H3BO3

2,86

MnCl2*4H2O

1,81

ZnSO4*7H2O

0,22

CuSO4*5H2O

0,06

MoO3

0,015
Soluia II

NH4VO3

0,023

K2Cr2(SO4)2*2H2O

0,096

NiSO4*7H2O

0,048

Na2WO4*2H2O

0,018

Ti2(SO4)3

0,04

Co(NO3)*6H2O

0,044

Soluia Fe+EDTA se cntrete 0,01 g/l FeSO4*7H2O + 0,08 g/l EDTA:


acestea se intorduc ntr-un balon i timp de 12 ore se adug aer fr CO2. Soluia
obinut poate fi utilizat mai mult de un an.
Mediul nutritiv pentru Coccopedia
Ingredientul

Cantitatea, g/l

MgSO4*7H2O

0,2

K2HPO4*3H2O

0,3

CaCl2*6H2O

0,2

Na2SO4

0,4

(NH4)2SO4

0,4

NaCl

0,17

FeC6H5O7

0,003

Microelemente

5 ml/l

pH, dup sterilizare

2-3 se ajusteaz cu HCl sau H2SO4


133

Soluia de microelemente n mediul nutritiv pentru Coccopedia


Ingredientul

Cantitatea, g/l
Soluia I

H3BO3

2,86

MnCl2*4H2O

1,81

ZnSO4*7H2O

0,222

CuSO4*5H2O

0,06

MoO3

0,018

NH4VO3

0,023

UTEX mediu nutritiv pentru Spirulina


Se adaug 500 ml soluie 1 + 500 ml soluie 2, mediul se sterilizeaz i se
pstreaz n frigider.
Soluia 1
Ingredientul

Cantitatea, g/500 ml

NaHCO3

13,61

Na2CO3

4,03

K2HPO4*3H2O

0,5

Soluia 1 se sterilizeaz prin autoclavare.


Soluia 2
Ingredientul

Cantitatea, g/500 ml

NaNO3

2,5

K2SO4

NaCl

MgSO4*7H2O

0,2

CaCl2*2H2O

0,04

P-IV soluie metalic

6 ml

Chu-soluie de microelemente

1 ml

Vitamina B12

1 ml

134

P-IV soluie metalic


Ingredientul
Na2EDTA*2H2O
FeCl3*6H2O
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CoCl2*6H2O
Na2MoO4*2H2O

Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004
Chumicroelemente

Ingredientul
CuSO4*5H2O
ZnSO4 *7H2O
CoCl2*6H2O
MnCl2*4H2O
Na2MoO4*2H2O
H3BO3
Na2EDTA

Cantitatea, g/l
0,02
0,044
0,02
0,012
0,012
0,62
0,05

Vitamina B12
Soluia de cianocobalamin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer.
Soluia de cianocobalamin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de
0,45 .
Ingredientul
Soluie bufer (Sigma H-3375)
Cianocobalamin

Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,027

Mediul nutritiv Allen


Ingredientul
Tampon Hepes
NaNO3
P-IV soluie metalic
K2HPO4*7H2O (6 g/l)

Cantitatea, g/l
2,3
1,5
1 ml
5 ml
135

MgSO4*7H2O (6 g/l)
Na2CO3 (4 g/l)
CaCl2*2H2O (2,5 g/l)
Na2SiO3*9 H2O (4,64 g/l)
C6H8O7 (4,8 g/l)
pH
P-IV soluie metalic
Ingredientul
Na2EDTA*2H2O
FeCl3*6H2O
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CoCl2*6H2O
Na2MoO4*2H2O

5 ml
5 ml
10 ml
10 ml
1 ml
7,8
Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004

Mediul nutritiv Nawawy


Ingredientul
K2HPO4*3H2O
MgSO4*7H2O
K2SO4
CaCO3
Glucoz
FeCl3*6H2O, 1% (proaspt pregtit)
Soluie de microelemente
pH

Cantitatea, g/l
0,3
0,2
0,2
0,1
2
0,2 ml
1 ml
7,5

Soluie de microelemente Nawawy


Ingredientul
H3BO3
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CuSO4*5H2O
(NH4)6Mo7O24*4H2O

Cantitatea, g/l
2,9
1,81
0,11
0,08
0,018
136

Mediul nutritiv Bonds modificat


Ingredientul
Cantitatea, g/l
K2HPO4*3H2O
0,175
KH2PO4
0,075
MgSO4*7H2O
0,075
NaNO3
0,250
CaCl2
0,025
NaCl
0,025
K2SO4
0,2
FeCl3
1 pictur
Soluie de microelemente
1 ml
pH
7,5
Soluie de microelemente pentru mediul Bonds
Ingredientul
H3BO3
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CuSO4*5H2O
(NH4)6Mo7O24*4H2O

Cantitatea, g/l
2,9
1,81
0,11
0,08
0,018

Mediul nutritiv Fogg


Ingredientul
K2HPO4
MgSO4*7H2O
CaCl2
Na2MoO4
MgCl2
H3BO3
CaSO4
ZnSO4
Fe-EDTA
pH (se ajusteaz cu ajutorul HCl sau
NaOH)

Cantitatea, g/l
0,2
0,2
0,1
0,0001
0,0001
0,0001
0,0001
0,0001
1 ml
7-7,5
137

Mediul nutritiv Allen i Arnon ce conine nitrai


Cantitatea, g/l
Volumul
25 ml
6,25 ml
0,253
0,21

Ingredientul
Soluia A
Soluia B
KNO3
NaNO3
Soluia A
Ingredientul
MgSO4*7H2O (4%)
CaCl2*2H2O (1,2%)
NaCl (3,8%)
Soluie de microelemente

Volumul, ml
500
500
500
500
Soluia B

Ingredientul
K2HPO4

Concentraia, g/0,5l
28

Soluia de microelemente pentru mediile nutritive Allen i Arnon


Concentraia, mg/l
Volumul, ml
160 ml
360
36
44
15,8
572
4,6
8

Ingredientul
AA Fe-EDTA
MnCl2*4H2O
MoO3
ZnSO4*7H2O
CuSO4*5H2O
H3BO3
NH4VO3
CoCl2*6H2O

Soluia de AA Fe EDTA 5,2 g KOH se dizolv n 186 ml apa distilat +


20,4 g Na2EDTA*2H2O. 13,7 g de FeSO4*7H2O se dizolv n 364 ml apa distilat. Soluiile se amestec mpreun; astfel, se obine Fe-EDTA (pH-ul soluiei
este de 3,5).
138

Mediul nutritiv BG-11


Ingredientul
NaNO3
K2HPO4
MgSO4*7H2O
CaCl2*2H2O
C6H8O7
C6H8O7*Fe*H3N
EDTANa3Mg
Na2CO3
Soluie de microelemente
pH (dup sterilizare se ajusteaz cu
1M NaOH sau HCl )

Cantitatea, g/l
1,5
0,04
0,075
0,036
0,006
0,006
0,001
0,02
1 ml
7,1

Soluia de microelemente pentru mediul BG11


Ingredientul
H3BO3
MnCl2*4H2O
ZnSO4*7H2O
NaMoO4*2H2O
CuSO4*5H2O
Co(NO3)2*6H2O

Concentraia, g/l
2,86
1,81
0,22
0,39
O,079
0,0494
Mediul nutritiv Z-8

Se prepar prin adugarea a 10 ml soluie 1 + 10 ml soluie 2 + 10 ml soluie 3


+ 1 ml soluie 4; se aduce pn la un litrul cu ap distilat; se autoclaveaz. PH
se situeaz ntre 6 i 7.
Soluia 1pentru mediul Z-8
Ingredientul
NaNO3
Ca(NO3)2*4H2O
MgSO4*7H2O

Cantitatea, g/l
46,7
5,9
2,5

139

Soluia 2 pentru mediul Z-8


Ingredientul
K2HPO4
Na2CO3

Cantitatea, g/l
3,1
2,1
Soluia 3 pentru mediul Z-8

Soluia 3 mediul Z-8 se prepar prin adugarea a 10 ml soluie A + 9,5 ml


soluie B; se aduce la 1 l cu apa distilat. Soluia A se prepar astfel: 2,8 g FeCl3
se dizolv n 100 ml 0,1N HCl. Soluia B se prepar astfel: 2,9 g EDTANa2 se
dizolv n 100 ml 0,1 N NaOH.
Soluia 4 pentru mediul Z-8
Ingredientul
Cantitatea, g/100 ml
Na2WO4*2H2O
0,033
(NH4)6Mo7O24*4H2O
0,880
KBr
1,2
KI
0,83
ZnSO4*7H2O
2,87
Cd(NO3)2*4H2O
1,55
Co(NO3)2*6H2O
1,46
CuSO4*5H2O
1,25
NiSO4(NH4)2SO4*6H2O
1,98
Cr(NO3)3*9H2O
0,41
V 2O 5
0,089
KAl(SO4)2*12H2O
4,74
H3BO3
31
MnSO4*7H2O
1,6 g/l
Mediul nutritiv Gromov
Ingredientul
KNO3
K2HPO4
MgSO4*7H2O
ZnSO4*7H2O
MnSO4

Cantitatea, g/l
0,1
0,0667
0,0333
0,000022
0,00181
140

CuSO4*5H2O
NaBO3*4H2O
(NH4)6Mo7O24*4H2O
FeSO4*7H2O
CaCl2
Co(NO3)2H2O
EDTA

0,000079
0,00263
0,001
0,0093
0,0012
0,00002
0,01

Mediul nutritiv Drew


Ingredientul
K2HPO4
MgSO4*7H2O
CaCl2
FeCl3

Cantitatea, g/l
0,2
0,2
Urme
Urme
Mediu cu extract din sol

Ingredientul
K2HPO4
MgSO4*7H2O
Extract de sol
Ap distilat

Cantitatea, g/l
0,02
0,02
100 ml
900ml

Extractul de sol se prepar prin dizolvarea a 1 kg sol de grdin n 1 l ap distilar, se agit i se las pe 30 minute, dup care se filtreaz i se utilizeaz.
Mediul nutritiv Tamia
Ingredientul
KNO3
MgSO4*7H2O
KH2PO4
FeSO4*7H2O
EDTA
H3BO3

Concentraia, mg/l
5
2,5
1,25
0,003
0,037
2,86
141

MnCl2*4H2O
ZnSO4*7H2O
MoO3
NH4VO3

1,81
0,222
17,64
229,6

Mediul nutritiv Nr.1 (Gromov B.V., Titanova N.N.)


Ingredientul
K2HPO4
MgSO4*7H2O
KNO3
Microelemente

Concentraia, mg/l
66,7
33,3
100
1 ml

Mediul nutritiv Nr.3 (Gromov B.V., Titanova N.N.)


Ingredientul
K2HPO4
MgSO4*7H2O
KNO3
Microelemente
Pepton
Glucoz
Ap de drojdii

Concentraia, mg/l
66,7
33,3
100
1 ml
1000
1000
1 ml

Soluia de microelemente pentru mediile Nr.1, 3


Ingredientul
ZnSO4*7H2O
MnSO4
CuSO4*5H2O
NaBO3*5H2O
(NH4)6Mo7O24*4H2O
FeSO4*7H2O
CaCl2
Co(NO3)2*6H2O
EDTA

Cantitatea, g/l
0,22
1,81
0,079
2,63
1
9,3
1,2
0,02
10
142

Mediu nutritiv pentru Chlamydomonas


Pentru a prepara 1 l de mediu nutritiv se iau 50 ml soluie A + 50 ml soluie B +
1 ml soluie Fe EDTA.
Soluia A pentru mediul nutritiv Chlamydomonas
Ingedientul

Cantitatea g/l

NH4Cl
MgSO4*7H2O
CaCl2*2H2O

5
2
1

Soluia B pentru mediul nutritiv Chlamydomonas


Ingedientul
Cantitatea g/l
K2HPO4
14,4
KH2PO4
7,2
Mediul nutritiv Prat
Ingredientul
KNO3
K2HPO4
MgSO4*7H2O
FeCl3*6H2O

Concentraia, mg/l
0,1
0,01
0,01
0,001

Mediul nutritiv MES-volvox


Ingredientul
Ca(NO3)2*4H2O
MgSO4*7H2O
Na2glicerofosfat*5H2O
KCl
MES
P-IV soluie metalic
NH4Cl
Vitamina B12
Soluie de vitamine biotin

Concentraia, g/100 ml
11,8
4
5
5
1,95
2,67

143

Volumul, ml/l
1
1
1
1
6
1
1
1

Vitamina B12
Soluia de cianocobalamin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de cianocobalamin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45.
Ingredientul
Cantitatea, g/200 ml
Soluie bufer (Sigma H-3375)
2,4
Cianocobalamin
0,027
Soluia de vitamina biotin
Soluia de biotin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de
biotin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45 .
Ingredientul
Cantitatea, g/200 ml
Soluie bufer (Sigma H-3375)
2,4
Biotin
0,005
P-IV soluie metalic
Ingredientul
Na2EDTA*2H2O
FeCl3*6H2O
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CoCl2*6H2O
Na2MoO4*2H2O

Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004

Mediul nutritiv Bold 1 NV


Ingredientul
NaNO3
CaCl2*2H2O
MgSO4*7H2O
K2HPO4
NaCl
Soluie metalic P-IV
Soluie de vitamina B12
Soluie de vitamina biotin
Soluie de vitamina tiamin

Volumul, ml/l
10
10
10
10
10
6
1

144

Cantitatea g/400 ml
10
1
3
7
1

Vitamina B12
Soluia de cianocobalamin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de cianocobalamin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45.
Ingredientul
Soluie bufer (Sigma H-3375)
Cianocobalamin

Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,027

Soluia de vitamina biotin


Soluia de biotin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de
biotin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45 .
Ingredientul
Soluie bufer (Sigma H-3375)
Biotin

Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,005

P-IV soluie metalic


Ingredientul
Na2EDTA*2H2O
FeCl3*6H2O
MnCl2*4H2O
ZnCl2
CoCl2*6H2O
Na2MoO4*2H2O

Cantitatea, g/l
0,75
0,097
0,041
0,005
0,002
0,004

Soluie de vitamina tiamin


Soluia de tiamin se ajusteaz pn la pH de 7,8 cu soluia bufer. Soluia de
tiamin ajustat se filtreaz utiliznd filtru cu diametrul de 0,45.
Ingredientul
Soluie bufer (Sigma H-3375)
Tiamin
Na2MoO4*2H2O

Cantitatea, g/200 ml
2,4
0,067
0,004

Mediul nutritiv Bristols


Ingredientul
NaNO3
K2HPO4

Cantitatea, g/l
0,25
0,075
145

KH2PO4
CaCl2
NaCl
MgSO4*7H2O
FeCl3
MnSO4*4H2O
ZnSO4*7H2O
H3BO4
CuSO4*5H2O
pH

0,175
0,025
0,025
0,075
0,0003
0,0003
0,0002
0,0002
0,00006
6,8-7,2
Mediul nutritiv Proteaz

Se obine prin adugarea proteazei peptonice 1 g la 1 l mediu nutritiv


Bristols.
Mediul nutritiv Artarium
Ingredientul
NaCl
MgSO4*7H2O
KNO3
KH2PO4
FeSO4*7H2O
EDTA
Soluie de microelemente

Cantitatea, g/l
116
50
2,5
0,2
0,01
0,04
1 ml/l

Microelemente pentru mediul Artarium


Ingredientul
H3BO3
MnCl2*4H2O
ZuSO4*7H2O
CuSO4*5H2O
MoO3
NH4VO3

Cantitatea, g/l
2,86
1,81
0,222
0,06
0,018
0,023

146

Mediu nutritiv Nr.12 (Gromov B.V., Titanova N.N.)


Ingredientul
KCl
NaCl
MgSO4*7H2O
KNO3
K2HPO4
Ca(NO3)*4H2O
KBr
KI
Microelemente

Cantitatea, g/l
16
12,5
2,46
1,24
0,496
0,26
0,05
0,05
1 ml

Soluie de microelemente pentru mediul nutritiv Nr.12


Ingredientul
ZnSO4*7H2O
MnSO4
CuSO4*5H2O
NaBO3*5H2O
(NH4)6Mo7O24*4H2O
FeSO4*7H2O
CaCl2
Co(NO3)2*6H2O
EDTA

Cantitatea, g/l
0,22
1,81
0,079
2,63
1
9,3
1,2
0,02
10

Medii nutritive de provenien natural


Mediul Pringsheims
Procedeul 1. Se cntrete 1 kg sol de grdin (humus din frunze descompuse), se fierbe 1 or n 1 l ap din robinet. Soliuia se las pe 2 zile, dup care se
toarn. Soluia care urmeaz a fi utlilizat ca mediu nutritiv se dizolv de 6 ori cu
apa distilat, la 1 litru mediu nutritiv se adaug 0,5 g KNO3. nainte de utilizare
mediul nutritiv trebuie sterilizat.
Procedeul 2. Solul de grdin se dizolv cu ap (raport 1:2) i se las pe cteva
zile. nainte de utilizare soluia se dizolv n raport de 1:10 sau 1:50 i se nclzete 5 minute la autoclav.
147

Mediul nutritiv Danilova


Solul se dizolv cu apa distilat (raport 1:4) timp de 3 minute, dup care se
filtreaz. Soluia filtrat de dizov cu apa distilat (raport 1:3), iar la 1 l mediu se
adaug srurile KH2PO4 0,2 g i Ca(NO3)2 0,2 g.
Mediul nutritiv DS (elaborat de noi)
Se cntresc cte 200 g de fecale de la porcine, bovine i psri (prospt colectate sau care se menin n frigider maximum 6 luni), se dizolv (prin agitare permanent) cu apa distilat (n raport de 1:5). Fracia lichid se separ de cea solid
prin filtrare, efectuat n mai multe etape (utiliznd tifonul, hrtia de filtru, hrtia
cu lent albastr). Soluia obinut se dilueaz cu ap distilat la concentraia de
5% (sau 50 ml soluie + 950 ml ap distilat). pH ul mediului nutritiv 7,1-7,4.
nainte de utilizare mediul nutritiv obinut se sterilizeaz prin expunerea la lampa
germicid timp de 20 de minute.

148

Anexa nr.2
Mediile nutritive optime pentru cultivarea unor specii de alge
ALGELE CIANOFITE
Speciile de alge cultivate
Ammatoidea simplex Woronichin
Anabaena arctica var. spiroides Kiselev
A. augatumalis Schmidll. str. Janke
A. constricta (Szaf.) Geitler
A. contorta Bachm.
A. cylindrica Lemmermann
A. oscillarioides Bory de Saint-Vincent ex Bornet
& Flahault
A. variabilis Ktzing ex Bornet & Flahault
Anabaena sp.
Anabaenopsis sp.
Anacystis nidulans N.L. Gardner
Aphanocapsa thermalis Brgger
Aphanothece bullosa (Meneghini) Rabenhorst
Aphanothece clathrate West et. G.S. West
A. saxicola Ngeli
Calothrix clavata G.S. West
C.ix Elenkini Kossinskaja
C. thermalis Hasngirg ex Bornet & Flahault
C. viguieri Frmy
Chamaesiphon confervicola A.Braun in
Rabenhorst
Chlorogloea microcystoides Geitler
Chroococcidiopsis thermalis Geitler
Chroococcus globosus (Elenkin) Hindk
Coccopedia limnetica O.V. Troitzkaja
C. turkestanica E.Kiseleva
Cyanidium caldarium (Tilden) Geitler
Cyanotheca longipes Pascher
Cylindrospermum alatosporum F.E. Fritsch
C. licheniforme Ktzing ex Bornet & Flahault
Eucapsis alpina F.E. Clements & H.L. Schantz
Gloeocapsa alpicola (Lyngbye) Bornet
149

Mediile nutritive utilizate


pentru cultivare
Nr. 6
Nr. 6, BG 11
Nr. 6, BG 11
Nr. 6, BG 11
Nr. 6, Foggs, v
Nr. 6, Drew, Foggs, BG 11,
Chu-10, Allen
Nr. 6, BG 11
Nr. 6, BG 11, Drew, Chu-10,
Allen
Nr. 6. BG 11
Z-8, Drew, DS
Chu-10, Allen
Nr. 6
Nr. 6
Nr. 6
Nr. 6
Nr. 6, Chu-10, BG 11
Nr. 6, Drew, Chu-10, BG 11
Nr. 6, Chu-10, BG 11
Nr. 6, Chu-10, BG 11
Nr. 6
Nr. 6
Nr. 6
Nr. 6
Coccopedia
Coccopedia
Nr. 6
Nr. 6
Chu-10, Drew, BG 11, Bonds
modificat
Drew, BG 11, Allen, Nawawy
Nr. 6, Bonds modificat
Nr. 6

Foggs
Hapalosiphon stuhlmannii Hieronymus
Nr.6
Lyngbya aestuarii f. major Elenkin
Nr.6
Mastigocladus bursa Dickie
Nr.6
Merismopedia glauca (Ehrenberg) Ktzing
Nr.6
M. punctata Meyen
Nr.6
Microchaete tenera Thuret ex Bornet & Flahault
Nr.6
Microcoleus vaginatus Gomont ex Gomont
BG11
Microcystis aeruginosa (Ktzing) Ktzing
Nr.6
Myxosarcina chroococcoides Geitler
Nr. 6
Nodularia spumigena Mertens ex Bornet &
Flahault
Nr.6, BG 11, Z-8, Drew, DS
Nostoc commune var. flagelliforme Bornet &
Flahault
N. ellipsosporum Rabenhorst ex Bornet & Flahault Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Bonds
modificat
N. gelatinosum f. halophilum (Hansgirg) Elenkin Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov,
Nawawy, DS
Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov,
N. linckia Bornet ex Bornet & Flahault
DS, Allen
Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov,
N. flagelliforme (Berk.et Curt.) Elenkin
DS, Allen
Nr.6, BG 11, Drew, Z-8, Gromov
N. muscorum C.Agardh ex Bornet & Flahault
Nr. 6
N . paludosum (Ktz.) Elenkin
Nr. 6
N . punctiforme (Ktz.) Elenkin
Nr.6, Drew
Oscillatoria splendida Greville ex Gomont
Nr.6, Drew
O. subbrevis Schmidle
Nr.6, Drew
Phormidium autumnale f. tenue West & G.S.West
Nr.6, Drew
Ph. autumnale Gomont
Nr.6, Drew
Ph. autumnale var. minus Gardner
Nr.6
Ph. favosum Gomont
Nr.6
Ph. favosum var. minus Vasishta
Nr.6
Ph. foveolarum f. moniliforme Anand
Nr.6
Ph. foveolarum Gomont
Nr.6
Ph. inundatum Ktzing ex Gomont
Nr.6
Ph. molle Gomont
Nr.6
Ph. subfuscum Ktzing ex Gomont
Nr.6
Ph. tadzschicicum Meln.
Nr.6
Ph. tenuissimum Woronichin
Nr.6
Ph. uncinatum Gomont ex Gomont
Nr.6
Plectonema boryanum Gomont
Nr.6
P. nostocorum Bornet ex Gomont
Nr.6
Scytonema sp.
150

Spirulina major Ktzing ex Gomont


S. maxima (Setchell & N.L.Gardner) Geitler
S. platensis (Nordst.) Geitler
S. subsalsa Oersted ex Gomont
Symploca thermalis Gomont
Synechococcus cedrorum Sauvageau
S. elongatus (Ngeli) Ngeli
Synechococcus sp.
Synechocystis aquatilis Sauvageau
S. minuscula Woronichin
S. salina Wislouch
Tolypothrix curta N.L. Gardner
T. distorta Ktzing ex Bornet & Flahault
T. tenuis Ktzing ex Bornet & Flahault

UTEX mediu Spirulina


Nr.16, AO, Zarrouc, UTEX
mediu Spirulina
Nr.16, AO, Zarrouc, UTEX
mediu Spirulina
UTEX mediu Spirulina
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nawawy, Nr.6
Nawawy, Nr.6
Nawawy, Nr.6

ALGELE VERZI
Specia
Ankistrodesmus acicularis (Braun) Korshikov
A. arcuatus Korshikov
A. braunii var. minutus Playfair
A. convolutus Corda
A. falcatus (Corda) Ralfs
A. nannoselene Skuja
A. pseudomirabilis Korshikov
A. spiralis (W.B.Turner)Lemmermann
A. rotundus Korshikov
Ankistrodesmus sp.
Asteromonas gracilis Artari
Chlamydomonas eugametos Moewus
Ch. gloeogama f.Humicola
Ch. gyrus Pascher
Ch. moewusii Gerloff
Ch. reinhardtii P.A.Dangeard
Chlorella ellipsoidea Gerneck
Ch. luteo-viridis Chodat in Conrad & Kufferath
Ch. luteo-viridis var. aureoviridis Mayer
Ch. minita (Naeg.) Olimanns
Ch. ovalis Butcher
151

Mediile nutritive utilizate


pentru cultivare
Nr.3
Nr.6
Nr.6, Nr.1
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.3, Prat
Nr.1
Nr.6
Nr.3
Chlamydomonas, Nr.6, Nr.3
Nr.3
Nr.6, Prat
Nr.1
Nr.6
Nr.3
Nr.3

Ch. paramecii Loefer


Ch. protothecoides Krger
Ch. pyrenoidosa H.Chick
Ch. terricola Gollerbach
Ch. variegata Beijerinck
Ch. vulgaris Beyerinck
Ch. vulgaris var. viridis Chodat
Chlorella sp.
Chlorococcum aplanosporum Arce & Bold
Ch. ellipsoideum Deason & H.C. Bold
Ch. humicola var. incrassatum F. E. Fritsch & R.P.
John
Ch. hypnosporum Starr
Ch. intermedium Deason & Bold
Ch. macrostigmatum R.C. Starr
Ch. minutum R.C. Starr
Ch. perforatum Arce & H.C. Bold
Ch. pinguideum Arce & H.C. Bold
Ch. polymorphum Bischoff & Bold
Ch. punctatum Arce & H.C. Bold
Ch. wimmeri (F.W. Hilse) Rabenhorst
Chodatella balatonica Scherffel in Kol
Chromochloris cinnabarina Kol & F.Chodat
Coccomyxa dispar Schmidle
C. lacustris (Chodat) Chodat
Coelastrum cambricum W.Archer
C. microporum Ngeli in A.Braun
C. proboscideum var. dilatatum Vischer
Dictyococcus pseudovarians Korshikov
Dictyosphaerium pulchellum var. ovatum
Korshikov
Dunaliella salina (Dunal) Teodoresco
Haematococcus pluvialis Flotow
Hormidium dissectum (F.Gay) Chodat
H. flaccidum (Ktzing) A.Braun
H. fluitans (Gay) Heering
H. nitens G.A.Klebs
Hydrodictyon reticulatum (Linnaeus) Bory de
Saint-Vincent
Kirchneriella cornuta Korshikov
K. obesa (West) West & G.S. West
152

Nr.3
Nr.3
Nr.3, Nr.6, Prat
Nr.3
Nr.3, Bristols
Nr.1, Bristols
Nr.1, Bristols
Nr.3, Nr.6, Bristols
Nr.3
Nr.1
Nr.3
Nr.3
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Nr.3
Nr.3
Nr.3
Nr.3
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Aratium
Nr.6, MES volvox, Prat
Nr.1, Prat
Nr.6
Nr.1
Nr.6
Nr.3, Bold 1 NV
Nr.3
Nr.3

K. subsolitaria G.S. West


Mesotaenium caldariorum (Lagerheim) Hansgirg
Neochloris alveolaris H.C. Bold
N. conjuncta P.A. Archibald
N. fusispora G.Arce & H.C. Bold
N. gelatinosa Herndon
N. minuta G.Arce & H.C. Bold
Pediastrum boryanum (Turpin) Meneghini
Pseudospongiococcum protococcoides Gromov &
Mamkaeva
Scenedesmus acuminatus (Lagerheim) Chodat
S. acutiformis Schrder
S. acutus f. alternans Hortobagyi
S. acutus Meyen
S. bijugatus Ktzing
S. brasiliensis var. quadrangularis (Corda) Borge
S. carinatus (Lemmermann) Chodat
S. dactylococcoides Chodat
S. dimorphus (Turpin) Ktzing
S. dispar Brbisson
S. ecornis (Ehrenberg) Chodat
S. falcatus Chodat
S. longus var. naegelii Brbisson
S. obliquus (Turpin) Ktzing
S. obtusiusculus Chodat
S. quadricauda (Turpin) Brbisson in Brbisson &
Godey
S. quadricauda var. abundans (Kirchner) Hansgirg
S. serratus (Corda) Bohlin
Scenedesmus sp.
Scotiella nivalis (Chodat) Fritsch
Staurastrum punctulatum Brbisson in Ralfs
Stichococcus chodati (Bialosuknia) Heering
S. minor Ngeli
S. mirabilis Lagerheim in Wittrock & Nordstedt
Stichococcus sp.
Tetradron bitridens Beck-Mannagetta
T. caudatum (Corda) Hansgirg
T. minimum (A.Braun) Hansgirg
Trentepohlia annulata F.Brand

153

Nr.3
Nr.3, Bristols
Nr.3, Bristols
Bold 1 NV modificat
Nr.6, Bristols
Nr.3, Bristols
Nr.6, Bristols
Nr.3
Nr.3
Nr.6, Bristols, Proteaz
Nr.6, Prat, Proteaz
Nr.3, Prat, Bristols
Nr.1, Prat, Bristols
Nr.3, Prat
Nr.6, Prat
Nr.6
Nr.6
Nr.6
Nr.3
Nr.6
Nr.3, Proteaz
Nr.6
Nr.3, Nr.6, Proteaz, Prat
Nr.6, Prat
Nr.3, Proteaz, Prat
Nr.6, Proteaz, Prat
Nr.3
Nr.1, Nr.3, Nr.6, Proteaz, Prat
Nr.6
Nr.6
Bristol
Nr.1
Prat
Nr.6
Nr.3, Bristol
Nr.6
Nr.1, Nr.6
Nr.1

ALGE DIATOMEIE (Bacillariophyta)


Speciile de alge cultivate

Mediile nutritive utilizate


pentru cultivare
Nr.6

Nitzschia communis Rabenhorst

ALGE ROII (Rhodophyta)


Speciile de alge cultivate
Porphyridium cruentum (S. F. Gray) Ngeli

Mediile nutritive utilizate


pentru cultivare
Nr.12

ALGE EUGLENINE (Euglenophyta)


Speciile de alge cultivate

Mediile nutritive utilizate


pentru cultivare
Proteaz
Bristols
Bristols
Bristols

Euglena gracilis Klebs


E. proxima Dang
E. clara Skuja
E. oblonga Schmitz

ALGE GALBEN-VERZI (Xanthophyta)


Speciile de alge cultivate
Chloridella neglecta (Pascher & Geitler) Pascher
Chlorocloster dactylococcoides Pascher
Pleurochloris magna J.B. Petersen
P. pyrenoidosa Pascher

154

Mediile nutritive utilizate


pentru cultivare
Nr.1
Bristol
Nr.3, Prat
Bold

Anexa nr.3
Condiiile optime de temperatur pentru cultivarea algelor
ALGE CIANOFITE
Specia
Temperatura optim, C
22
Anabaena arctica var. spiroides Kiselev
22
A. augatumalis Schmidll. str. Janke
22
A. constricta (Szaf.) Geitler
22
A. contorta Bachm.
22
A, cylindrica Lemmermann
22
A. oscillarioides Bory de Saint-Vincent ex Bornet
& Flahault
22
Anabaena variabilis Ktzing ex Bornet & Flahault
22
Anabaena sp.
23-27
Anabaenopsis sp.
25
Calothrix clavata G.S. West
25
C. Elenkini Kossinskaja
25
C. thermalis Hasngirg ex Bornet & Flahault
25
C. viguieri Frmy
12
Chroococcidiopsis thermalis Geitler
25-30
Chroococcus globosus (Elenkin) Hindk
37
Cyanidium caldarium (Tilden) Geitler
25
Cylindrospermum alatosporum F.E. Fritsch
25
C. licheniforme Ktzing ex Bornet & Flahault
25
Gloeocapsa alpicola (Lyngbye) Bornet
25
Hapalosiphon stuhlmannii Hieronymus
22
Lyngbya aestuarii f. major Elenkin
25
Mastigocladus bursa Dickie
25
Merismopedia glauca (Ehrenberg) Ktzing
25
M. punctata Meyen
25
Microchaete tenera Thuret ex Bornet & Flahault
25
Microcoleus vaginatus Gomont ex Gomont
25
Microcystis aeruginosa (Ktzing) Ktzing
25
Nodularia spumigena Mertens ex Bornet &
Flahault
25
Nostoc commune var. flagelliforme Bornet &
Flahault
25
N. ellipsosporum Rabenhorst ex Bornet & Flahault
25
N. gelatinosum f. halophilum (Hansgirg) Elenkin
22
N. linckia Bornet ex Bornet & Flahault
25-35
N. flagelliforme (Berk.et Curt.) Elenk.
25
N. muscorum C.Agardh ex Bornet & Flahault
155

Oscillatoria splendida Greville ex Gomont


O. subbrevis Schmidle
Phormidium autumnale f. tenue West & G.S. West
Ph. autumnale Gomont
Ph. autumnale var. minus Gardner
Ph. favosum Gomont
Ph. favosum var. minus Vasishta

25
25
25
12-25
12-25
25
25

Ph. foveolarum f. moniliforme Anand


Ph. foveolarum Gomont
Ph. inundatum Ktzing ex Gomont
Ph. molle Gomont
Ph. subfuscum Ktzing ex Gomont
Ph. tadzschicicum Meln.
Ph. tenuissimum Woronichin
Ph. uncinatum Gomont ex Gomont
Plectonema boryanum Gomont
Pl. nostocorum Bornet ex Gomont
Scytonema sp.
Spirulina major Ktzing ex Gomont
S. maxima (Setchell & N.L.Gardner) Geitler
S. platensis (Nordst.) Geitl.
S. subsalsa Oersted ex Gomont
Synechococcus cedrorum Sauvageau
S. elongatus (Ngeli) Ngeli
Synechococcus sp.
Synechocystis aquatilis Sauvageau
S. salina Wislouch
Tolypothrix tenuis Ktzing ex Bornet & Flahault
T. curta N.L.Gardner
T. distorta Ktzing ex Bornet & Flahault

25
25
15-25
25
25
25
15-25
25
25
22
22-25
25-30
25-30
25-30
25-30
25
25
25
25
25
22
22
22

ALGE VERZI
Specia
Ankistrodesmus acicularis (Braun) Korshikov
A. arcuatus Korshikov
A. braunii var. minutus Playfair
A. convolutus Corda
A. falcatus (Corda) Ralfs
A. nannoselene Skuja
A. pseudomirabilis Korshikov
156

Temperatura optim, C
25
25
25
25
25
25
25

A. rotundus Korshikov
A. spiralis (W.B.Turner)Lemmermann
Ankistrodesmus sp.
Chlamydomonas eugametos Moewus
Chlamydomonas gloeogama f.Humicola
Ch. gyrus Pascher
Ch.moewusii Gerloff
Ch.reinhardtii P.A. Dangeard
Chlorella ellipsoidea Gerneck
Ch. luteo-viridis Chodat in Conrad & Kufferath
Ch. luteo-viridis var. aureoviridis Mayer
Ch. minita (Naeg.) Olimanns
Ch. ovalis Butcher
Ch. paramecii Loefer
Ch. protothecoides Krger
Ch. pyrenoidosa H.Chick
Ch. terricola Gollerbach
Ch. variegata Beijerinck
Ch. vulgaris Beyerinck
Ch. vulgaris var. viridis Chodat
Chlorella sp.
Chlorococcum aplanosporum Arce & Bold
Ch. ellipsoideum Deason & H.C. Bold
Chlorococcum humicola var. incrassatum F.E.
Fritsch & R.P. John
Ch. hypnosporum Starr
Ch. intermedium Deason & Bold
Ch. macrostigmatum R.C. Starr
Ch. minutum R.C.Starr
Ch. perforatum Arce & Bold
Ch. pinguideum Arce & H.C. Bold
Ch. polymorphum Bischoff & Bold
Ch. punctatum Arce & H.C. Bold
Ch. wimmeri (F.W. Hilse) Rabenhorst
Chodatella balatonica Scherffel in Kol
Coelastrum cambricum W.Archer
Coelastrum microporum Ngeli in A.Braun
Coelastrum proboscideum var. dilatatum Vischer
Dunaliella salina (Dunal) Teodoresco
Haematococcus pluvialis Flotow
Hormidium dissectum (F.Gay) Chodat
157

25
25
22
25
25
25
25
25
22-25
22
22
25
25
22
22
25
22-25
25
25-27
25
25
22
22
22
25
22
22
22-25
22
25
25
25
22
25
25
25
25
27
25-27
22

Hormidium flaccidum (Ktzing) A.Braun


H. fluitans (Gay) Heering
H. nitens G.A. Klebs
Hydrodictyon reticulatum (Linnaeus) Bory de
Saint-Vincent
Kirchneriella cornuta Korshikov
K. obesa (West) West & G.S. West
K. subsolitaria G.S. West
Scenedesmus acuminatus (Lagerheim) Chodat
S. acutiformis Schrder
S. acutus f. alternans Hortobagyi
S. acutus Meyen
S. bijugatus Ktzing
S. brasiliensis var. quadrangularis (Corda) Borge
S. carinatus (Lemmermann) Chodat
S. dactylococcoides Chodat
S. dimorphus (Turpin) Ktzing
S. dispar Brbisson
S. ecornis (Ehrenberg) Chodat
S. falcatus Chodat
S. longus var. naegelii Brbisson
S. obliquus (Turpin) Ktzing
S. obtusiusculus Chodat
S. quadricauda (Turpin) Brbisson in Brbisson &
Godey
S. quadricauda var. abundans (Kirchner) Hansgirg
S. serratus (Corda) Bohlin
Scenedesmus sp.
Staurastrum punctulatum Brbisson in Ralfs
Stichococcus chodati (Bialosuknia) Heering
Stichococcus minor Ngeli
S. mirabilis Lagerheim in Wittrock & Nordstedt
Stichococcus sp.
Tetradron bitridens Beck-Mannagetta
T. caudatum (Corda) Hansgirg
T. minimum (A.Braun) Hansgirg
Trentepohlia annulata F.Brand

22
22
22
25
25
25
25
25
25
25
25
22
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
25
15-20
20
20
20
25
25
25
25

ALGE DIATOMEE (Bacillariophyta)


Specia
Nitzschia communis Rabenhorst

Temperatura optim, C
22
158

ALGE ROII (Rhodophyta)


Specia
Porphyridium cruentum (S.F.Gray) Ngeli

Temperatura optim, C
25

ALGE EUGLENINE (Euglenophyta)


Specia
Euglena gracilis Klebs
E. proxima Dang
E. clara Skuja
E. oblonga Schmitz

Temperatura optim, C
25
25
22-25
25

159

Anexa nr.4
EUROPA

Date de contact privind coleciile de alge

Armenia
Denumirea instituiei: Colecia naional de culturi microbiene a Republicii Armenia
Coresponden: Prof. Evrik Afrikian, tel. (37410) - 65 08 83, email: microbio@
sci.am; afrikian2002@yahoo.com.
Pagina electronic: http://www.sci.am/resorgs.php?oid=41&langid=1
Austria
Denumirea instituiei: Colecia de alge a Institutului de botanic
Coresponden: Prof. asociat G.Gaertner, tel. (43) 512-507-2715; email: georg.
gaertner@uibk.ac.at
Pagina electronic: http://botany.uibk.ac.at/
Belgia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge cianofite (sub)polare
Coresponden: Prof. asociat Annick Wilmotte, tel. (32) 4-366 33 87; email:
BCCM.ULC@ulg.ac.be; awilmotte@ulg.ac.be
Pagina electronic: http://bccm.belspo.be/about/ulc.php
Bulgaria
Denumirea instituiei: Colecia de alge a Universitii din Sofia
Coresponden: Dr. Blagoy Uzunov, tel. (359) 888-22-3165, email. blagoy_uzunov@abv.bg
Pagina electronic: Cehia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge a Universitii Charles din Praga
Coresponden: Prof. asociat Pavel Skaloud, tel. (42) 0-221951648; email: skaloud@natur.cuni.cz
Pagina electronic: http://botany.natur.cuni.cz/algo/caup.html
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de organisme autotrofe
Coresponden: Josef Jur, tel. (420) 384-721 156, email: josef.juran@ibot.cas.cz
Pagina electronic: http://ccala.butbn.cas.cz/
Danemarca
Denumirea instituiei: Colecia de culturi scandinave de alge i protozoare
Coresponden: Prof. asociat Gert Hansen, tel. (45) 35-322303, email: gerth@
bio.ku.dk, sccap@bio.ku.dk
Pagina electronic: http://www.sccap.dk/
160

Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge (NIVA)


Coresponden: Jesper H. Andersen, tel. (45) 8896 9670, email: post@niva-denmark.dk
Pagina electronic: www.niva-denmark.dk
Denumirea instituiei: Centrul de Alge din Danemarca
Coresponden: Dr. Michael Bo Rasmussen, tel. (45) 30783168, email: mir@
bios.au.dk
Pagina electronic: mir@bios.au.dk
Finlanda
Denumirea instituiei: Colecii de culturi algale
Coresponden: Pekka Oivanen, tel. (358) 2-94159311, email: pekka.oivanen@
helsinki.fi
Pagina electronic: http://www.helsinki.fi/hambi/
Frana
Denumirea instituiei: Algotehnic, laborator de criptogamie
Coresponden: Prof. Alain Coute, tel. (33) 1-40793196, email: acoute@mnhn.
fr; yep@mnhn.fr
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Algobanc Caen, Universitatea Caen Basse-Normandia
Coresponden: Prof. asociat Benoit Veron, tel. (33) 2 31 56 64 27, email: algobank@unicaen.fr, benoit.veron@unicaen.fr
Pagina electronic: http://www.unicaen.fr/algobank
Denumirea instituiei: Centrul de resurse biologice al Institutului Pasteur
Coresponden: Dr. Chantal Bizet, tel. (33) 1-45688775, email: crbip@pasteur.fr
Pagina electronic: http://www.crbip.pasteur.fr/
http://www.wfcc.info/index.php/collections/display/
Denumirea instituiei: Colecia de culturi Nantes
Coresponden: Prof. asociat Vona Meleder, tel. (33) 2-51125656, email: vona.
meleder@univ-nantes.fr; laurent.barille@univ-nantes.fr
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge cianofite. Pasteur
Coresponden: Rosmarie Rippka, tel. (33) 1-45-68-84, email: collectionpcc@
pasteur.fr
Pagina electronic: http://cyanobacteria.web.pasteur.fr/

161

Denumirea instituiei: Colecia de culturi Roscoff


Coresponden: Dr. Daniel Vaulot, tel. (33) 2-98 29 23 23, email: rcc@sb-roscoff.fr
Pagina electronic: http://www.sb-roscoff.fr/Phyto/RCC/
Germania
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge a Universitii Cologne
Coresponden: Dr. Barbara Melkonian, tel. (49) - 221 470 8097, email: barbara.
melkonian@uni-koeln.de
Pagina electronic: http://www.ccac.uni-koeln.de
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge criofile
Coresponden: Dr. Thomas Leya, tel. (49) 331 58187 304, email: thomas.leya@
izi-bb.fraunhofer.de
Pagina electronic: http://cccryo.fraunhofer.de
Denumirea instituiei: Colecia de culturi algale a Universitii Gttingen
Coresponden: Dr. Maike Lorenz, tel. (49) - 551-395740, email: epsag@unigoettingen.de; mlorenz@uni-goettingen.de
Pagina electronic: http://epsag.uni-goettingen.de
Denumirea instituiei: Colecia de alge i Zighematophyceae din Hamburg
Coresponden: Prof. asociat Klaus von Schwartzenberg, tel. (49) 40-42816-599,
email: fbsi001@rrz.uni-hamburg.de
Pagina electronic: http://www.biologie.uni-hamburg.de/bzf/zeph/zephsvcke.htm
Colecie: Microalge
Italia
Denumirea instituiei: Centrul de cercetri ale microorganismelor autotrofe
Coresponden: Prof. G. Florenzano
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Mycotheca Universitatea Taurinensis
Coresponden: Prof. asociat Giovanna Cristina Varese, tel. (39) - 011 670 5984,
email: cristina.varese@unito.it; info.mut@unito.it
Pagina electronic: www.mut.unito.it/
Colecie: Alge
Norvegia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge (NIVA)
Coresponden: Camilla H. C. Hagman, tel. (47) 90615679, email: culturecollection@niva.no; camilla.corneliussen@niva.no
Pagina electronic: http://niva-cca.no/
162

Denumirea instituiei: Institutul de cercetri marine


Coresponden: Petter Fossum, tel. (47) 55 23 84 77, email: petter.fossum@imr.no
Pagina electronic: http://www.imr.no/
Denumirea instituiei: Centrul de piscicultur i acvacultur NTNU
Coresponden:Trine Galloway, tel. (47) 73595000, email: trina.galloway@sintef.no
Pagina electronic: https://www.ntnu.edu/marine/sealab/about
Polonia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge baltice a Univerisitii Gdansk
Coresponden: Prof. Adam Latala, tel. (48) 58-523-6894, email: oceal@univ.
gda.pl
Pagina electronic: http://ccba.ug.edu.pl/
Portugalia
Denumirea instituiei: Colecia de alge Coimbra
Coresponden: Prof. Lilia Santos, tel. (351) - 239 855 230, email: liliamas@
ci.uc.pt
Pagina electronic: http://acoi.ci.uc.pt
Federaia Rus
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge din Siberia
Coresponden: Prof. asociat Igor Kozhevnikov, tel. (7) 391-2445906, email:
ikozhevnikov@inbox.ru; nell69@mail.ru
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Colecia de alge a Institutului de biologie a apelor interioare, Academia de tiine a Rusiei
Coresponden: Dr. Evgeniy Gusev, tel. (+7) 08547-24042, email: evsergus@
yahoo.com; algogus@yandex.ru
Pagina electronic: http://www.ibiw.ru/index.php?p=sub&id=1&lang=ru
Denumirea instituiei: Colecia de alge a Universitii din St. Petersburg
Coresponden: Prof. Alexander V. Pinevich, tel. (7) 812-4506740, email:
A.Pinevich@spbu.ru; k.kulichihin@spbu.ru
Pagina electronic: http://microbio.museums.spbu.ru/?q=collection
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge a Institutului de fiziologie a
plantelor
Coresponden: Elena S. Kuptsova, tel. (7) 95-9039380, email. kuptsova@ippras.ru; losnet@ippras.ru
Pagina electronic: http://www.ippras.ru/
163

Denumirea instituiei: Peterhof, colecia genetic de microalge


Coresponden: Prof. asociat Alexander S. Chunayev, tel. (7) 812-4278851
Pagina electronic: Slovacia
Denumirea instituiei: Departamentul de genetic al Universitii din Bratislava
Coresponden: Prof. asociat Vlckova Viera, tel. (42) 1-2-60296302, email: vlckova@fns.uniba.sk
Pagina electronic: Spania
Denumirea instituiei: Banca Naional a Algelor din Spania
Coresponden: Dr. Antera Martel Quintana, tel. (34) 928-133290, email: amartel@marinebiotechnology.org; antera.martel@ulpgc,es
Pagina electronic: http://bea.marinebiotechnology.org/
Suedia
Denumirea instituiei: Chalmers Universitatea de Technologii, Gteborg
Coresponden: Dr. Eva Albers, tel. (46) 31 772 38 44, email: eva.albers@chalmers.se
Pagina electronic: http://www.chalmers.se/
Denumirea instituiei: Universitatea Linnaeus
Coresponden: Prof. Catherine Legrand, tel. (46)480-44 7309, email: catherine.
legrand@lnu.se
Pagina electronic: http://lnu.se/
Denumirea instituiei: Universitatea Mlardalen
Coresponden: PhD. Emma Nehrenheim, tel. (46) 21-101484, email: emma.
nehrenheim@mdh.se
Pagina electronic: http://www.mdh.se
Denumirea instituiei: Universitatea suedez de tiine agricole
Coresponden: Francesco Gentili, tel. 090-7868196, email: francesco.gentili@
slu.se
Pagina electronic: http://www.slu.se
Elveia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi algale din Elveia
Coresponden: Prof. Martin Sievers, tel. (41) 58-9345716, email: martin.sievers@zhaw.ch; dasen@ccos.ch
Pagina electronic: http://www.ccos.ch/

164

Turcia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge
Coresponden: Meltem CONK- DALAY, tel. (90) 232-3884955, email: meltemconkdalay@gmail.com; meltemconkdalay@egemacc.com
Pagina electronic: http://www.egemacc.com/
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge a Institutului Soley
Coresponden: Prof. asociat Nazan Calisir, tel. (90) 216-6140997; email: ncalisir@soley.cn
Pagina electronic: http://www.algaeinstitute.com
Regatul Unit al Marii Britanii i al Irlandei de Nord
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge i protozoare
Coresponden: Rachel Saxon, tel. (44) 1631-559000, email: ccap@sams.ac.uk
Pagina electronic: http://www.ccap.ac.uk
Denumirea instituiei: Colecia de culturi a asociaiilor biologice marine
Coresponden: Angela Ward, tel. (44) 1752-63334, email: MBACC@mba.ac.uk
Pagina electronic: http://www.mba.ac.uk/culturecollection
Ucraina
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge herbarul Universitii
din Harkov
Coresponden: Prof. Tatjana Dogadina, tel. (380) 57-707-55-29, email: botany.100.years@gmail.com; Tatjana.V.Dogadina@univer.kharkov.ua
Pagina electronic: http://botany.univer.kharkov.ua/cwu-macc.html
Republica Moldova
Denumirea instituiei: Colecia laboratorului de cercetri tiinifice Algologie,
Universitatea de Stat din Moldova
Coresponden: Prof. V.V. alaru, tel. (373) 22 57-77-92, email: salaruvictor@
yahoo.com
Pagina electronic: http://usm.md/?page_id=10083
Denumirea instituiei: Colecia naional de microorganisme nepatogene
Coresponden: Acad. Valeriu Rudic, tel. (373) 22 73-98-78, email: acad.rudic@
mail.md, acadrudic@yahoo.com
Pagina electronic: http://www.imb.asm.md/pages0-20-0-ro.htm
Romnia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge cianofite i alge a Institutului de
cercetri biologice din Cluj-Napoca
Coresponden: Prof. Drago Nicolae, tel. (+4)0264598084, email: ndragos@
hasdeu.ubbcluj.ro
Pagina electronic: http://www.icbcluj.ro/about-us/departamentul-de-taxonomie-si-ecologie/domenii-de-activitate
165

AMERICA

Argentina
Denumirea instituiei: Banca Naional a Microorganismelor
Coresponden: Dr. Montecchia Marcela S, tel. (54) - 11 4524 8061; email:
mmontecc@agro.uba.ar
Pagina electronic: http://www.agro.uba.ar/investigacion/inba/banco
Brazilia
Denumirea instituiei: Colecia brazilian de alge cianofite Universitatea Sao
Paulo
Coresponden: Prof. Maria C. Bittencourt-Oliveira; tel. (55) 19-342-94169;
email: mbitt@esalq.usp.br
Pagina electronic: http://www.esalq.usp.br
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microalge marine
Coresponden: Prof. asociat Ana Maria Pires-Vanin, tel. (55) 11-818-6541,
email: secrdob@netuno.io.usp.br
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Coelcia culturilor de microalge acvatice
Coresponden: Prof. Armando a. HeNr.iques Vieira, tel. (55) 16-33066682,
email: ahvieira@ufscar.br
Pagina electronic:Canada
Denumirea instituiei: Colecia Centrului de cercetri n infeciologie
Coresponden: Prof. asociat Maurice Boissinot, tel. (1) 418-555-4444-42705;
email: maurice.boissinot@crchul.ulaval.ca; michel.g.bergeron@crchul.ulaval.ca
Pagina electronic: http://www.cri.ulaval.ca/
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge i alge cianofite a Universitii
din Toronto
Coresponden: Heather Roshon, tel. (1) 519-746-0614, email: hdroshon@uwaterloo.ca
Pagina electronic: http://www.phycol.ca/
Denumirea instituiei: Colecii de culturi ale Pacificului de Nord-Est
Coresponden: Donna Dinh, tel. (1) 604-822-4825, email:cccm@interchange.
ubc.ca
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Universitatea Alberta, Colecia de microfungi i herbarum
Coresponden: Dr. Connie Gibas, tel. (1) 780-987-4811, email: cgibas@ualberta.ca; lynne.sigler@ualberta.ca
Pagina electronic: http://www.uamh.devonian.ualberta.ca/
166

Statele Unite ale Americii


Denumirea instituiei: Centrul National pentru alge marine i microbiot Provasoli-Guillard
Coresponden: Sara Yentsch, tel. (1) 207-315-2567, email: syentsch@bigelow.org
Pagina electronic: http://ncma.bigelow.org/
Denumirea instituiei: Colecia de culturi a Serviciului de cercetri agricole
Coresponden: Dr. Todd Ward, tel. (1) 309-681-6394, email: Todd.Ward@ars.
usda.gov
Pagina electronic: http://Nr.rl.ncaur.usda.gov/
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de alge a Universitii Texas Austin
Coresponden: Prof. asociat Jerry Brand, tel. (1) 512-471-4019, email: utalgae@uts.cc.utexas.edu; jbrand@mail.utexas.edu
Pagina electronic: http://www.utex.org
OCEANIA

Australia
Denumirea instituiei: Universitatea de culturi microbiene din Queenslandcolecia
Coresponden: Prof. asociat L. I. Sly, tel. (61) 7-377-3694, email: l.sly@
uq.edu.au.
Pagina electronic: http://www.biosci.uq.edu.au/micro
Denumirea instituiei: Laboratorul Naional de referin n micologie medical
a Australiei
Coresponden: K.A. Weeks, tel. (61) 2-99267135, email: RNSPO01.KWeeks@doh.health.nsw.gov.au
Pagina electronic:
Denumirea instituiei: Colecia naional de culturi algale a Australiei
Coresponden:Ian Jameson, tel. (61) 3-62325222; email: ian.jameson@csiro.
au; cathy.johnston@csiro.au
Pagina electronic: http://www.csiro.au/ANACC
Denumirea instituiei: Colecia de culturi algale a Universitii Murdoch.
Coresponden: Prof. asocit Michael A. Borowitzka, tel. (61) 89-332-2333;
email: borowitz@possum.murdoch.edu.au
Pagina electronic: 167

ASIA

China
Denumirea instituiei: Centrul Chinezesc pentru colecii de culturi tipice
Coresponden: Prof. asociat Fang Peng, tel. (86) 27-68752056, email: cctcc@
whu.edu.cn; fangpeng2@yahoo.com.cn
Pagina electronic: http://www.cctcc.org/
Denumirea instituiei: Colecia de biologie marin germiplasm
Coresponden: Xiao-Yan Hu, tel. (86) 532-2879062, email: xyhu@ms.qdio.
ac.cn
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Centrul Naional de colecii de culturi medicale
Coresponden: Prof. asociat Li Fengxiang, tel. (86) 10-67017755
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Colecia culturilor de alge acvatice a Academiei de tiine
a Chinei
Coresponden: Prof. Lirong Song, tel. (86) -2768780806, email: lrsong@ihb.
ac.cn; fachb@ihb.ac.cn
Pagina electronic: http://algae.ihb.ac.cn
India
Denumirea instituiei: Facilitatea naional pentru alge cianofite marine
Coresponden: Prof. Lakshmanan UMA, tel. (91) 431-2407084, email: lumaprabakar@yahoo.com; dharmarpraba@yahoo.com
Pagina electronic: http://www.nfmc.res.in
Denumirea instituiei: Colecia de culturi de ciuperci i uniti de cercetare a
Universitii din Goa
Coresponden: Dr. Nandkumar Kamat, tel. (91) 0832-6519349, email: nandkamat@gmail.com; nkamat@unigoa.ac.in
Pagina electronic:
Denumirea instituiei: Colecia naional de microorganisme industriale
Coresponden: Prof. asociat D.V. Gokhale, tel. (91) 20-25902670, email: ncim@
ncl.res.in
Pagina electronic: http://www.ncl-india.org/ncim/
Denumirea instituiei: Tehnologii de alimentare i fermentare, Universitatea
Mumbai
Coresponden: Prof. asociat P. R. Kulkarni, tel. (91) 22-4145616, email: prk@
fft.udct.ernet.in
Pagina electronic: 168

Denumirea instituiei: Colecia de culturi algale din VISVA-BHARATI


Coresponden: Prof. asociat Jnanendra Rath, tel. (91) 947-4766362, email: vbcca@visva-bharati.ac.in; jrath@visva-bharati.ac.in
Pagina electronic: http://www.visva-bharati.ac.in/
Indonezia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi biotehnologice a Institutului de tiine
Coresponden: Harmastini, tel. (62) 21-8754587
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Colecia de culturi de microorganisme i celule
Coresponden: Prof. asociat Dwi Andreas Santosa, tel. (62) 251-510927, email:
dsantosa@indo.net.id; icbb@bogor.indo.net.id
Pagina electronic: http://www.icbb.org
Denumirea instituiei: Colecia de culturi a Institutului de tehnologii Bandung
Coresponden: Prof. asociat Ibrahim Sastramihardja, tel. (62) 22-2506454
Pagina electronic: Iran
Denumirea instituiei: Colecia de culturi a Institutului de cercetri i biotehnologii agricole
Coresponden: Dr. Hassan Salimi, tel. (98) 261-2709485, email: hasan_salimi@
yahoo.com; sara_am57@yahoo.com
Pagina electronic: http://www.abrii.ac.ir
Denumirea instituiei: Colecia de culturi tipice persane
Coresponden: Dr. Farzaneh Azizmohseni, tel. (98) - 21 5627 5510, email: mohseni@irost.ir; ptcc@irost.ir
Pagina electronic: http://ptcc.irost.org
Japonia
Denumirea instituiei: Colecia de culturi a Institutului de biotiin molecular
i celular
Coresponden: Prof. asociat Akira Yokota, tel. (81) 3-5841-7827, elami: uayoko@mail.ecc.u-tokyo.ac.jp
Pagina electronic: http://www.iam.u-tokyo.ac.jp/misyst/ColleBOX/IAMcollection.html
Denumirea instituiei: Colecia japonez de microorganisme
Coresponden: Dr. Moriya Ohkuma, tel. (81) 29-836-9556, email: inquiry@
jcm.riken.jp
Pagina electronic: http://www.jcm.riken.jp/
169

Denumirea instituiei: Colecia de culturi a Institutului de biotehnologie marin


Coresponden: Prof. asociat Hiroaki Kasai, tel. (81) 193-26-6581, email: mbic@
mbio.jp; hiroaki.kasai@mbio.jp
Pagina electronic: http://www.mbio.jp/mbic/
Denumirea instituiei: Colecia culturilor microbiene a Institutului naional de
studii de mediu
Coresponden: Prof. asociat Fumie Kasai, tel. (81) 298-50-2556, email: mcc@
nies.go.jp
Pagina electronic: http://mcc.nies.go.jp/
Coreea
Denumirea instituiei: Colecia de culturi tipice din Coreea
Coresponden: Dr. Doo-sang Park, tel. (82) 42-8604600, email: dspark@kribb.
re.kr, sales@kribb.re.kr
Pagina electronic: http://kctc.kribb.re.kr/English/index.aspx
Denumirea instituiei: Centrul de culturi de microalge marine Coreea
Coresponden: Prof. Sung Bum Hur, tel. (82) 51-620-6132, email: hurs@pknu.
ac.kr; algae@kmcc.re.kr
Pagina electronic: http://www.kmcc.re.kr
Malaysia
Denumirea instituiei: Departamentul de Biochimie, Facultatea de medicin,
Universitatea Malaya
Coresponden: Prof. asociat Chee Woon Wang, tel. (60) 3-7595745, email:
wangcw@medicine.med.um.edu.my
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Coleciia de culturi industriale
Coresponden: Prof. asociat Marco Antonio Ortiz, tel. (52) 5-6223855,
email:mao@servidor.unam.mx
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Colecia microbian cepas
Coresponden: Prof. asociat M. J. Quintero, t
Pagina electronic:
Pakistan
Denumirea instituiei: Colecii de culturi - tip din Pakistan
Coresponden: Prof. asociat Shahjahan Baig, tel. (92) 42-5757323-7
Pagina electronic: 170

Filipine
Denumirea instituiei: Colecia culturilor de alge
Coresponden: Prof. asociat Milagrosa R. Martinez
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Institutul dezvoltrii tehnologiilor industriale
Coresponden: Prof. asociat Claro M. Santiago, tel. (63) 823-8071
Pagina electronic:
Denumirea instituiei: Colecia naional de microorganisme din Filipine
Coresponden: Dr. Rosario G. Monsalud, tel. (63) 49-536-2884, email: pncm@
uplb.edu.ph; rgm_pncm@yahoo.com
Pagina electronic: http://www.laguna.net/biotech/
Sri Lanka
Denumirea instituiei: Universitatea Jaffna Botany
Coresponden: Prof. asociat K. Theivendirarajah, tel. (94) 25283
Pagina electronic: Thailanda
Denumirea instituiei: Departamentul Biologie aplicat, Facultatea de tiine
Coresponden: Prof. asociat Suree Nanasombat, tel. (66) 2-7373000, email: knsuree@kmitl.ac.th
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Ramura Bacteriologie i microbiologie a solului, Departamentul Argicultur
Coresponden: Yenchai Vasuvat.
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Departamentul Microbiologie, Facultatea de tiine
Coresponden: Prof. asociat Tanapat Palaka, tel. (66)2-218 5071, email:
Tanapat.P@chula.ac.th
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Departamentul Biologie, Facultatea de tiine
Coresponden: Sumonthip Bunnag, tel. (66) 241331-34
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Institutul de Cercetri Alimentare i dezvoltare de produse, Universitatea Kasetsart
Coresponden: Chakamas Wongkhalaung, tel. (66) 2-5795552; email: ifrcmw@
nontri.ku.ac.th.
Pagina electronic: 171

Denumirea instituiei: Colecii de culturi de soia Rizobii i de alge cianofite


Coresponden: Dr. Kanjana Chansa-ngavej, tel. (66) 2-513-4852, email: kanjanachansa@hotmail.com
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Institutul de biologie molecular i genetic, Universitatea
Mahidol
Coresponden: Piengchan Sonthayanon, tel. (66) 2-441-9003-1234, email: stprj@mahidol.ac.th
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Secia microbiologie, Universitatea Chiang Mai
Coresponden: Abhinya Plikomol, tel. (66) 53-943346-1507, email: scboi016@
chiangmai.ac.th
Pagina electronic: Denumirea instituiei: Institutul de cercetri tiinifice i tehnologice din Thailanda
Coresponden: Dr. Chatrudee Suwannachart, tel. (66) 2-577-9028, email: mircen@tistr.or.th; chatrudee@tistr.or.th
Pagina electronic: http://www.tistr.or.th/tistr_culture

172

Sergiu Dobrojan, Victor alaru,


Vasile alaru, Victor Melnic, Galina Dobrojan

CULTIVAREA ALGELOR
Monografie
Redactor Ariadna Strungaru
Asisten computerizat Maria Bondari
Bun de tipar 18.12.2015. Formatul 70x100 1/12.
Coli de tipar 14,5. Coli editoriale 15,0.
Comanda 132/15. Tirajul 50 ex.
Centrul Editorial-Poligrafic al USM
str. Al. Mateevici, 60, Chiinu, MD 2009