ACADEMIA DE TIINE A MOLDOVEI

INSTITUTUL DE MICROBIOLOGIE

Cu titlul de manuscris
C.Z.U.: 635.8:582

STEPANOV VITALIE

BIOTEHNOLOGIA CULTIVRII CIUPERCII PLEUROTUS

OSTREATUS I OBINERII BIOPRODUSELOR VALOROASE

03.00.23-biotehnologie
Tez de doctor n biologie

Conductor tiinific:
RUDIC Valeriu,
academician, profesor universitar
Om Emerit al Republicii Moldova
Autor: STEPANOV Vitalie

Chiinu 2005

CUPRINS
NTRODUCERE.......................................................................................................... 4
CAPITOLUL I. BAZIDIOMICETELE OBIECTE ALE CERCETRILOR
BIOTEHNOLOGICE..............................................................................................................

CAPITOLUL II. MATERIAL I METODE DE CERCETARE............................ 20

2.1Obiectul de studiu.................................................................................................................

20

2.2Metode de cercetare..............................................................................................................

20

2.2.1 Izolarea i pstrarea culturii pure. Prepararea materialului semincer...............

20

2.2.2 Studierea caracterelor morfo-culturale............................................................... 20

2.2.3 Determinarea compoziiei biochimice...............................................................

21

2.2.4 Mediile de nutriie..............................................................................................

23

2.2.5 Productivitatea...................................................................................................

24

2.2.6 Valoarea nutritiv............................................................................................... 25

2.2.7 Consumul de celuloz i lignin........................................................................

25

2.2.8 Activitatea fiziologic a extractelor de P. ostreatus..........................................

25

2.2.9 Analiza statistic................................................................................................

25

CAPITOLUL

III.

SELECTAREA

TULPINILOR

DE

PLEUROTUS

OSTREATUS N FAZELE LICHID I SOLID DE CULTIVARE...............................

26

3.1 Obinerea biomasei i activitatea hidrolitic la cultivarea submers a ciupercii P.

ostreatus.....................................................................................................................................

26

3.2 Estimarea coeficientului de cretere a ciupercii P. ostreatus pe medii agarizate la

temperaturi diferite..................................................................................................................... 29
3.3 Recolta carpoforilor la cultivarea n faza solid de fermentare a ciupercii P.
ostreatus.....................................................................................................................................

31

CAPITOLUL IV. PARTICULARITI BIOLOGICE DE CULTIVARE A

CIUPERCII PLEUROTUS OSTREATUS N FAZA SOLID DE FERMENTARE .......

39

4.1 Cultivarea ciupercii P. ostreatus pe medii nutritive agarizate.............................................

39

4.1.1 Aciunea surselor de carbon i azot asupra creterii miceliului P. ostreatus pe

medii agarizate...........................................................................................................................

39

4.1.2 Influena criteriului termic asupra creterii miceliului P. ostreatus .................. 43

4.2 Cultivarea intensiv a ciupercii P. ostreatus pe diverse substraturi nutritive......................

47

4.2.1 Selectarea substraturilor nutritive......................................................................

47

3
4.2.2 Componena biochimic a substraturilor la cultivarea P. ostreatus................... 61
4.2.3 Valoarea nutritiv a carpoforilor P. ostreatus.................................................... 70
CAPITOLUL V. PARTICULARITI BIOLOGICE DE CULTIVARE A
CIUPERCII PLEUROTUS OSTREATUS N FAZA LICHID DE FERMENTARE...... 79
5.1 Aciunea surselor de carbon i azot asupra creterii miceliului P. ostreatus cultivat
submers......................................................................................................................................

79

5.2 Valoarea nutritiv a miceliului P. ostreatus cultivat submers.............................................

84

5.3 Dinamica biosintezei unor enzime hidrolitice i a acumulrii biomasei proteice la

cultivarea submers a ciupercii P. ostreatus pe medii nutritive complexe..............................

89

CAPITOLUL VI. PROCEDEE BIOTEHNOLOGICE DE CULTIVARE A

CIUPERCII PLEUROTUS OSTREATUS I OBINEREA BIOPRODUSELOR
VALOROASE..........................................................................................................................

102

6.1 Elaborarea procedeelor de obinere a bioproduselor P. ostreatus........................................ 102

6.1.1 Procedee de obinere a carpoforilor cu valoare nutritiv nalt.........................

102

6.1.2 Procedeu de sporire a rentabilitii procesului tehnologic.................................

103

6.1.3 Procedee de obinere a produselor proteice furajere..........................................

106

6.1.4 Procedee de obinere a biomasei alimentare......................................................

107

6.1.5 Procedeu de preparare a materialului semincer granulat..................................

109

6.2 Activitatea fiziologic a extractelor de P. ostreatus asupra germinrii i creterii

seminelor de gru......................................................................................................................

110

SINTEZA REZULTATELOR OBINUTE.............................................................. 114

CONCLUZII................................................................................................................. 117
RECOMANDRI PRACTICE..................................................................................

118

REFERINE BIBLIOGRAFICE............................................................................... 119

ADNOTARE................................................................................................................. 132
...................................................................................................................... 133
ABSTRACT..................................................................................................................

134

INTRODUCERE
Actualitatea temei investigate
Ritmul de dezvoltare, valoarea sa incontestabil i eficacitatea biotehnologiilor moderne nu
cedeaz unor aa domenii, ca cosmonautica i tehnicile de calcul, impactul socioeconomic
determinnd caracterul revoluionar al acestei disciplini [43, 50, 72, 80, 136, 161]. Una din
prioritile majore ale biotehnologiei este susinerea ramurii agrare prin orientarea ei spre utilizarea
tehnologiilor avansate, prin promovarea culturilor agricole profitabile, generatoare de venituri
sporite. Ca obiect biotehnologic, n ultimii ani, n rndurile microbiologilor i biotehnologilor se
acord o tot mai mare atenie cultivrii ciupercilor bazidiale. Prioritile ciupercilor Pleurotus fa
de alte bazidiomicete sunt: viteza sporit de cretere a miceliului i competitivitatea nalt fa de
microflora concurent; capacitatea utilizrii ca substrat nutritiv a resturilor vegetale rezultate din
industria agro-industrial, alimentar i silvicultur; simplitatea relativ a tehnicilor de cultivare i
de prelucrare a substraturilor utilizate; desfurarea procesului tehnologic n lipsa solului de
acoperire; folosirea substraturilor celulozice uzate la furajarea animalelor sau n calitate de
ngrminte bioorganice valoroase; rezistena la boli virotice, bacteriene i fungice; valoarea nalt
nutritiv a carpoforilor i miceliului cultivat submers; caracteristicile organoleptice remarcabile i
capacitatea de meninere ndelungat a calitilor tehnice [1, 3, 11, 13, 64, 93, 108, 114, 115, 116,
134, 135, 142, 183, 184].
n ultimul timp, datorit deficitului de alimente i a polurii excesive a mediului
nconjurtor, noiunea de deeu a fost reevaluat, punndu-se accent pe reutilizarea deeurilor n
general, i a celor celulozice n special, n vederea asigurrii de substraturi abundente i ieftine
pentru orice proces tehnologic, realizat cu ajutorul microorganismelor capabile s hidrolizeze
celuloza [19]. Sporirea resurselor proteice pe calea sintezei microbiologice poate fi realizat prin
producerea n mas a miceliului i carpoforilor ciupercilor, care prin calitile nutritive i delicioase
ale acestora posed avantaje eseniale fa de alte produse de origine vegetal. Numeroase cercetri
[11, 40, 99, 115, 151, 181] au evideniat capacitatea de cretere intensiv a ciupercilor putregaiului
alb pe diverse substraturi celulozice, printre care i celor ce aparin speciei Pleurotus ostreatus.
Totui, aceast capacitate nu i-a gsit o larg utilizare n biotehnologia proceselor de convertire a
resurselor locale n produse cu valoare nutritiv ridicat, iar starea n care se afl cercetrile
tiinifice privind hidroliza materiei vegetale nu corespunde cerinelor practice ale economiei
naionale.

5
Necesitatea

utilizrii complete a reziduurilor agro-industriale de natur vegetal i

convertirea resurselor locale n produse cu valoare nutritiv ridicat sunt impuse

de cererea

economiei de pia, pe de o parte i de situaia ecologic precar, pe de alt parte. n contrast cu

progresele nregistrate n domeniile aplicative i teoretice referitor la tehnologiile de cultivare a
ciupercilor bazidiale comestibile, ncadrarea lor efectiv n rezolvarea cerinelor practice ale
economiei naionale rmne nc o problem insuficient rezolvat i un domeniu deschis cercetrii,
problema conversiei microbiologice a materiei vegetale fiind destul de actual pentru Republica
Moldova, att din punct de vedere al soluionrii deficitului proteic, ct i al redresrii situaiei
ecologice create. De aceea, deosebit de actuale sunt cercetrile orientate spre obinerea tulpinilor
nalt productive ale ciupercii bazidiale Pleurotus ostreatus, utilizarea diverselor substraturi
reziduale celulozice, optimizarea parametrilor tehnologici de cultivare a tulpinilor de perspectiv i
elaborarea tehnologiilor de obinere a produselor proteice, nutreurilor i a substanelor
bioactive[11, 56, 114, 115, 116, 127, 134, 142, 181, 184].
Pornind de la cele expuse, scopul investigaiilor tiinifice a constat n studierea
particularitilor biologice de cultivare a ciupercii Pleurotus ostreatus i elaborarea procedeelor
biotehnologice de obinere a bioproduselor fungice valoroase cu o aplicare larg n diverse domenii
aplicative.
Pentru realizarea acestui scop au fost trasate urmtoarele obiective:

Screeningul raional ealonat pentru selectarea unor tulpini Pleurotus ostreatus cu

mai multe caliti preioase;

Determinarea aciunii unor factori, ca sursele de azot i carbon, temperatura,

iluminarea, ventilarea, umiditatea asupra caracterelor morfo-culturale i biochimice
la Pleurotus ostreatus;

Utilizarea practicilor de diversificare a mediilor nutritive din rndul materialelor

lignocelulozice provenite din reziduurile agro-industriale poluante, dar inofensive
pentru om;

Elucidarea posibilitii de obinere a proteinei furajere prin ameliorarea valorii

nutritive a diverselor substraturi reziduale celulozice la cultivarea n faza solid i
lichid de fermentare a ciupercii Pleurotus ostreatus;

Evaluarea valorii biologice (nutritive) a carpoforilor Pleurotus ostreatus cultivai n

faza solid de fermentare pe diverse substraturi lignocelulozice;

Cercetarea exigenelor de nutriie i a altor factori ce contribuie la o cretere i

dezvoltare abundent a ciupercii Pleurotus ostreatus pe diverse medii nutritive

6
ieftine i nedeficitare pentru utilizarea acesteia ca productor valoros al biomasei
miceliene cultivate submers i al enzimelor hidrolitice;

Evaluarea valorii biologice (nutritive) i organoleptice a miceliului de Pleurotus

ostreatus cultivat submers pentru stabilirea posibilitii de valorificare a biomasei
culturale n alimentaie;

Stabilirea posibilitii de utilizare a extractelor de Pleurotus ostreatus n calitate de

stimulatori de origine natural n fitotehnie;

Elaborarea procedeelor noi de obinere a bioproduselor de P. ostreatus.

Inovaia tiinific:
Se propun trei tulpini autohtone noi de Pleurotus ostreatus (P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04), ce prezint interes prin productivitatea i calitatea biologic
(nutritiv) nalt a carpoforilor cultivai pe diverse substraturi reziduale celulozice, prin sinteza
componentelor proteice valoroase i a altor substane bioactive la cultivarea submers.
Pentru tulpinile P. ostreatus testate au fost determinate diferenele morfo-culturale i
biochimice, selectate mediile optime de nutriie i caracterizat valoarea nutritiv a carpoforilor i
miceliului cultivat submers.
Au fost perfecionate metodele de eviden a productivitii culturii P. ostreatus i propus o
modalitate nou de evaluare a rentabilitii procesului tehnologic n condiii experimentale.
n baza tulpinilor P. ostreatus selectate au fost elaborate diverse procedee tehnologice de
cultivare i obinere a bioproduselor fungice valoroase.
Semnificaia i valoarea aplicativ a lucrrii:
Din punct de vedere al perspectivei biotehnologice a fost apreciat potenialul biologic al
unor tulpini ce aparin speciei P. ostreatus, trei din acestea (P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB03 i CNMN-FB-04) fiind selectate i recomandate att pentru obinerea unei recolte nalte de
carpofori, ct i pentru o productivitate major a biomasei i biosintezei de enzime hidrolitice la
cultivarea submers.
A fost propus un procedeu de sporire a rentabilitii procesului tehnologic, implementarea n
practic fiind aplicat n cadrul unei structuri specializate de producere intensiv a ciupercilor
comestibile de ser.
Este propus modalitatea de preparare a materialului semincer granulat i producerii
miceliului comercial prin utilizarea biopreparatului n baza miceliului P. ostreatus cultivat submers.

7
Datorit efectului stimulator pe care-l produc, substraturile nutritive uzate - folosite la
cultivarea ciupercii P. ostreatus - reprezint o surs de substane bioactive, astfel nct acestea pot fi
utilizate n fitotehnie n calitate de regulatori ai creterii seminelor de gru.
A fost demonstrat posibilitatea obinerii bioproduselor fungice valoroase prin valorificarea
materiei vegetale secundare i convertirea acesteia n produse proteice alimentare i furajere.

Postulatele de baz prezentate pentru susinere:

1. Tulpinile selectate de P. ostreatus (P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i
CNMN-FB-04) obiecte biotehnologice de perspectiv, graie productivitii nalte i
coninutului biochimic de calitate.
2. Integrarea tehnologiilor de cultivare a tulpinilor ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 n procesul de valorificare a reziduurilor secundare
vegetale - prin producerea proteinei furajere i alimentare.
3. Biomasa miceliului P. ostreatus cultivat submers supliment proteic valoros pentru
produsele alimentare i furajere.
4. Substratul celulozic uzat, dup recoltarea carpoforilor P. ostreatus - surs de
stimulatori naturali n fitotehnie.
5. Perspective ale biotehnologiei aplicate noi procedee de obinere a bioproduselor
fungice valoroase.

Aprobarea lucrrii:
Rezultatele cercetrilor au fost comunicate i discutate la a III-a Conferin Naional
Microorganismele i metaboliii lor n economia naional (Chiinu, 1996), A II-a Conferin
Internaional Romnia i romnii n tiina contemporan (Braov, 1997), Congresul al VII-lea al
Societii tiinifice a Geneticienilor i Amelioratorilor din R. M. Genetica i ameliorarea plantelor
i animalelor n Republica Moldova (Chiinu, 1999), Simpozionul Biodiversitatea vegetal a
Republicii Moldova (Chiinu, 2001), Conferina a VI-a Internaional
(Moscova, 2001), Conferina tinerilor cercettori
consacrat aniversrii a 40-a a A..M. i a 55-a de la formarea primelor instituii academice
(Chiinu, 2001), Congresul II al Societii de Fiziologie i Biochimie vegetal din Republica
Moldova Fiziologia i biochimia plantelor la nceput de mileniu: realizri i perspective
(Chiinu, 2002), Simpozionul Tehnologii biologice avansate i impactul lor n economia
Moldovei (Chiinu, 2002), Conferina a II-a Internaional

8
(Donetsc, 2002), Conferina tinerilor savani ai Academiei de
tiine a Moldovei (Chiinu, 2003), Conferina tiinific republican Valorificarea rezultatelor
tiinifice baza dezvoltrii durabile a economiei naionale (Chiinu, 2004), Conferina tinerilor
savani ai Academiei de tiine a Moldovei (Chiinu, 2004).

Aportul personal:
Ideia efecturii investigaiilor tiinifice aparine conductorului tiinific academicianului
Valeriu Rudic i subsemnatului. Partea experimental aparine n cea mai mare parte autorului.
Analiza aminoacizilor a fost ndeplinit de colaboratorii Centrului de Automatizare i Metrologie,
iar unele consultaii au fost generos oferite de ctre dr. Alexandra Deseatnic i Alla Dvornina,
crora le exprim sincerele mulumiri i respect.

Publicaii:
La tema tezei au fost publicate 22 lucrri tiinifice, inclusiv 14 de unul singur.
Structura i volumul tezei:
Teza este constituit din introducere, revista literaturii, materiale i metode de cercetare,
rezultatele investigaiilor i discuiile prezentate n patru capitole, sinteza rezultatelor obinute,
concluzii, recomandri practice, bibliografie, ce conine 187 surse tiinifice citate i rezumatele n
limbile romn, englez i rus. Teza este prezentat pe 134 pagini de text tehnoredactat la
computer, inclusiv 35 tabele i 28 figuri, dintre care 14 fotografii.

Cuvinte-cheie: Pleurotus ostreatus, screening, faz solid de fermentare, protein furajer,

protein alimentar, valoare nutritiv, cultivare submers, biomas, aminoacizi, fitotehnie,
bioproduse.

CAPITOLUL I
BAZIDIOMICETELE OBIECTE ALE CERCETRILOR
BIOTEHNOLOGICE
Rezolvarea problemei deficitului proteic constituie o preocupare major, utilizarea
ciupercilor n acest scop oferind posibiliti ncurajatoare de soluionare a acesteia. Iniial, n calitate
de productori proteici, prin anii 50-60 ai secolului trecut au fost utilizate specii de micromicete
aparinnd genurilor Aspergillus, Penicillum, Alternaria i Fusarium [51]. Totodat, tehnologiile de
obinere a produselor proteice pe baz de ascomicete prezint dificulti majore din cauza
pericolului de sporulare, iar ciupercile genurilor Aspergillus i Penicillium n anumite condiii de
cultivare pot produce diverse micotoxine cu efecte mutagen i cancerigen [182]. Utilizarea
ciupercilor bazidiale n aceste scopuri prezint un interes sporit datorit lipsei dezavantajelor susmenionate. Astfel, miceliul ciupercilor bazidiale Pleurotus ostreatus, Panus tigrinus i Flammulina
velutipes cultivat submers nu este toxic i conine pn la 40-60% protein brut. Digerabilitatea
produsului obinut constituie circa 80%, ceea ce depete valoarea nutritiv a unor aa produse de
origine vegetal, ca grul, orezul, soia. Aminoacizii ce predomin sunt: glicina, acizii aspartic i
glutamic, de asemenea pentru P. ostreatus lizina i alanina, pentru F. velutipes fenilalanina i
tirozina. Biomasa ciupercilor bazidiale conine toi aminoacizii eseniali [134, 184]. n timpul de
fa miceliul ciupercilor comestibile este folosit sub form de praf uscat ca supliment alimentar
valoros pentru supe, sosuri, concentrate de legume i crnuri. Graie structurii filamentoase miceliul
de ciuperci poate fi adugat i n cacavaluri, produse de panificaie, mezeluri i semifabricate din
carne [54, 87]. Cercetrile medico-biologice i clinice ale biomasei fungice Trametes pubescens
932-2 a stabilit caracterul non-toxic a acesteia, prezena aciunii oncostatice, hepatoprotectoare i
imunomodulatoare. Preparatul n baza T. pubescens este certificat n calitate de supliment alimentar
cu un coninut valoros al proteinei brute (35-60%), acizilor grai eseniali, fosfolipidelor,
ergosterinei, vitaminelor din grupul B, macro- i microelementelor [140]. Pe baza miceliului
ciupercilor Panus tigrinus i Daedalea confragosa n Rusia au fost elaborate preparatele pantigrin i
daedalin, coninutul proteinei pentru 1kg de produs obinut fiind echivalent cu cel al unui kilogram
de carne [175]. n Ucraina preparatul alimentar pe baz de P. ostreatus este recomandat ca
supliment proteic valoros pentru produsele din crupe i legume [135], iar n Japonia n baza
extractului de ciuperci se prepar buturi speciale [87].
Miceliul ciupercilor este apreciat i datorit marei varieti de vitamine cu activiti
fiziologice i farmacodinamice deosebit de importante ca cel al tiaminei, riboflavinei, biotinei,
piridoxinei, ergosterinei, acizilor pantotenic, folic, nicotinic i ascorbic [128, 180]. O mare parte a

10
ciupercilor pot acumula cantiti importante de vitamine, depind chiar i depozitul vitaminos al
ficatului de bovine [166].
Bazidiomicetele prezint surse mai puin importante de lipide (2-12%), componentele cruia
sunt similare uleiurilor vegetale [127,164]. Dup Morozova G. i col. [166], coninutul i calitatea
acizilor grai pentru ciuperci se apropie de cea a uleiurilor de ctin i floarea-soarelui. n faza
lichid i solid de cultivare, pe medii sintetice i agarizate, miceliul P. ostreatus a prezentat acizi
grai valoroi, majoritatea aparinnd acizilor grai saturat i nesaturat: palmitic i respectiv linoleic
[5, 125]. Dup cum se tie, acidul linoleic face parte din categoria acizilor grai eseniali, deficitul
cruia duce la reprimarea creterii i funciilor reproductive, micorarea rezistenei la infecii,
afectarea i lezarea esuturilor epiteliale.
Aproximativ 40% din numrul total al bazidiomicetelor sintetizeaz antibiotice de o mare
diversitate biochimic i fiziologic caracterizate prin terpenoizi, purine, pirimidine, chinone,
radicali fenolici etc. [7, 23, 24]. Reprezentanii familiilor Polyporaceae i Agaricaceae au
demonstrat o activitate antibiotic major, preparatele cele mai cunoscute fiind lenzitina (izolat din
Lenzites septaria), pleurotina (izolat din Pleurotus griseus) i psaliotina (izolat din Psalliota
xanthoderma) [185]. Pe baz de bazidiomicete n timpul de fa sunt utilizate mai mult de 14
antibiotice antibacteriene i 3-4 antifungice [184].
Datorit resurselor genetice considerabile i calitii biologice remarcabile, ciupercile
comestibile pot soluiona problema deficitului proteic i deschid calea unor noi aplicaii practice de
perspectiv. Din cele aproximativ 2000 specii de ciuperci comestibile mai mult de 20 specii sunt
valorificate n scopuri comerciale i doar numai 3-5 specii sunt cultivate la modul industrial.
Numeroase cercetri sunt dedicate cultivrii unor aa specii, ca Agaricus bisporus, Pleurotus
ostreatus, Lentinus edodes,

Flammulina velutipes, Volvariela volvacea, Stropharia rugoso-

annulata. Actualmente, cercetrile sunt orientate spre cutarea noilor specii valoroase de ciuperci,
realizarea tehnologiilor avansate, procedeelor de pregtire a substraturilor nutritive, obinerii
produselor proteice i a substanelor bioactive [9, 12, 38, 68, 123, 155, 172].
Tehnologiile moderne de cultivare a bazidiomicetelor permit obinerea unei recolte de 120
150 kg/m2 pentru 4 6 cicluri tehnologice pe an. Realizarea unui randament eficient la cultivarea
intensiv a ciupercilor comestibile este determinat de selectivitatea substratului nutritiv, utilizarea
tulpinilor hibride nalt productive, folosirea maxim a spaiului de cultivare, reglarea automatizat a
condiiilor de microclim, mecanizarea proceselor tehnologice, ndeplinirea msurilor profilactice i
de igien a muncii [114, 121]. O larg utilizare de interes biotehnologic o au ciupercile comestibile
ce aparin genului Pleurotus. n ultimii ani se remarc o cretere continu a produciei de ciuperci
Pleurotus, care ntre timp s-a consolidat ntr-o ramur de o importan economic deosebit pentru

11
industria alimentar [11]. Situndu-se pe al treilea loc n lume i al doilea n Europa ca volum de
producere, ciupercile Pleurotus prezint caracteristici organoleptice remarcabile, sunt bogate n
proteine, fibre, hidrai de carbon, vitamine i sruri minerale. Pe lng cantiti importante de
substane proteice, lipide, vitamine pstrvul de fag (Pleurotus ostreatus) sintetizeaz i diveri
compui de natur aromatic, polizaharide de o nalt activitate antioxidant [118]. Este cunoscut
faptul, c compuii fenolici reprezint antioxidani remarcabili, eficiena fiindu-i determinat de
capacitatea acestora de a neutraliza formele active oxigenate [85] sau de imobilizare a ionilor de fer
[171]. Studiul repartiiei cantitative a compuilor fenolici n carpofori, miceliu i n lichidul cultural
la P. ostreatus a stabilit prezena lor maxim (1600 mg%) n carpofori, fapt ce le permite a fi
recomandai n calitate de materie valoroas, att n industria alimentar, ct i n medicina
netradiional [117]. De asemenea, datorit compoziiei chimice valoroase, biomasa (miceliul,
carpoforii) Pleurotus spp. este folosit la elaborarea preparatelor profilactice i medicamentoase de
un spectru larg de aciune: antivirotic, antitumoral, antibiotic, imunomodulator. Astfel, din P.
ostreatus s-a separat o fracie de heteropolizaharide, iar din Fomes fomentarius un glucan
extracelular, ambele cu activiti antitumorale i antitoxice [2].
Potrivit concepiilor actuale, statutul antioxidant al organismului fungic este determinat de
radicalii peroxizi ai lipidelor care sunt implicai nemijlocit n atacul acestuia asupra ligninei [152].
Extractele din miceliul macromicetelor au o activitate antioxidant mult mai mare fa de
micromicete, fapt ce se datoreaz constituiei i funcionrii diferite n organizare [119]. Obinerea
principiilor bioactive de origine fungic cu diverse efecte fiziologice cum sunt antioxidanii este
actual, datorit importanei acestora pentru industria farmaceutic, medicin, cosmetologie etc.
[67, 120]. Activitatea antioxidant a lichidului cultural pentru unele specii de bazidiomicete ce
aparin genurilor Agaricus, Tremella i Ganoderma este propus n calitate de remediu pentru
prevenirea i combaterea unor forme a cancerului, cardiopatiei, hepatitei, ulcerului stomacal,
nefritei, hipertoniei, proceselor de mbtrnire a organismului [96]. Capacitatea de aprare a ADNului celular fa de stresul oxidativ este specific speciilor Pleurotus ostreatus, P. sajor-caju,
Flammulina velutipes, Agaricus bisporus, Lentinus edodes, Ganoderma lucidum, Volvariella
volvacea, Phellinus linteus, Auricularia auricula-judae i Hypsizygus marmoreus [22, 39, 79, 90,
114].
Utilizarea particularitilor unor specii de bazidiomicete de a adsorbi i a ndeprta metalele
grele este de perspectiv, fapt pentru care acestea pot servi n calitate de bioindicatori ai polurii
mediului nconjurtor [10, 21, 70, 138]. S-a stabilit, c fungii putregaiului alb (Pleurotus ostreatus
(Fr.) Kumm., Coriolus hirsutus (Fr.) Murill., Coriolus zonatus (Fr.) Quel., Cerrena maxima (Fr.)
Murill., Cerrena unicolor (Fr.) Quel.) sunt capabili de sorbia cromului din mediul de nutriie (6g la

12
100g de miceliu uscat), ceea ce poate fi folosit pe larg la ndeprtarea Cr din deeurile industriale
lichide [21]. Adsorbia maxim a Cd2+ (80-92%) de ctre miceliul P. sajor-caju din mediul lichid a
fost observat n faza exponenial de cretere a biomasei ciupercii, fapt pentru care este susinut
ideea utilizrii acesteia n scopul ndeprtrii metalelor grele i a bioregenerrii [10].
Fungii implicai n degradarea lemnului au fost grupai dup modul n care altereaz
structura lemnului n trei mari categorii: fungii putregaiului alb, brun i moale. Fungii putregaiului
alb sunt considerai ca principalii ageni ai degradrii ligninei n natur, atacul acestora ducnd la o
decolorare a esuturilor i la pierderea rezistenei mecanice a lemnului. Bazidiomicetele cu activitate
lignolitic major sunt capabile de utilizarea substanelor persistente, rezistente la degradarea
natural, ce au influiene distructive asupra biosului i, n mod special, asupra omului. Codificate
sub denumirea de POP-uri (poluani organici persisteni), acestea sunt dioxinele, fenolii, pesticidele,
vopselele etc.[138]. Soluiile de 25 i 200 mg/ml de pentaclorfenol dup 72 ore sunt degradate n
proporie de 100 i respectiv 60% de ctre lacaza bazidiomicetului Coriolus versicolor [94].
Erbicidul atrazin dup 5 i 40 zile a fost consumat n proporie de 50 i respectiv 80-92% de ctre
fungii putregaiului alb Cerrena maxima, Coriolopsis fulvocenera i Coriolus hirsutus productori
activi al lacazei [156]. O capacitate excepional de a degrada lignina o au fungii putregaiului alb
aparinnd genului Pleurotus, condiiile de cultivare i n special compoziia mediului de nutriie
influennd mult modul de degradare a acesteia. Activitatea complexului de enzime lignolitice pus
n eviden la ciupercile Pleurotus este utilizat n biotehnologia proceselor de convertire a
materialelor celulozice n produse alimentare i furajare, de biodegradare a poluanilor organici
persisteni, xenobioticilor i a deeurilor industriale [11, 18]. De ctre cercettorii japonezi au fost
studiate aciunea i mecanismul degradrii poluantului 2,2bis (4-hidroxilfenil) propan (bisfenol A)
larg folosit n chimie i medicin. Pentru degradarea biologic a poluantului a fost folosit
bazidiomicetul Pleurotus ostreatus, care dup 12 zile de cultivare a metabolizat aproximativ 80%
bisfenol A [33].
Producerea industrial a ciupercilor este nsoit de acumularea sporit a substraturilor
reziduale fermentate aproximativ 5kg la fiecare kilogram de ciuperci colectate. Substratul uzat
reprezint un produs agro-industrial rezidual, colonizat cu miceliul activ al ciupercii i mbogit cu
diveri metabolii secundari, printre care i ai enzimelor lignolitice principalii ageni ai
biodegradrii hidrocarburilor aromatice poluante. Astfel, substratul celulozic uzat, dup recoltarea
carpoforilor, poate fi utilizat n calitate de produs ce contribuie la degradarea xenobioticilor i a
remedierii solului contaminat de diveri poluani organici persisteni. Dup 4 sptmni de incubare
a substratului uzat cu solul contaminat de pesticidul DDT, concentraia iniial a xenobioticului
persistent, sub influena ciupercii P. ostreatus, s-a micorat de la 573mg pn la 356mg DDT/kg

13
sol. n acelai mod, cultura ciupercii Lentinus edodes a metabolizat fenaclorfenolul, ceea ce a
contribuit la remedierea cu 60% a solului contaminat [75].
Resursele mondiale silvice ocup aproximativ 30% din suprafaa uscat a pmntului. O
bun parte din ele sunt expluatate n industria lemnului ca sortimente inferioare sau deeuri, sub
form de achii, rumegu, fibre lemnoase etc. din care se obin plci aglomerate i fibro-lemnoase
ce se utilizeaz n construcie. Procesul tehnologic de fabricare a plcilor se desfoar la
temperaturi nalte sub presiune i este precedat de aglomerarea materialelor lemnoase cu rini
fenol-formaldehidice sau ureo-formaldehidice

cu proprieti adezive. Lianii sintetici au

proprietatea de a se descompune n timp n fenoli i formaldehide compui foarte toxici pentru

om, astfel nct fabricarea plcilor ecologic pure fr utilizarea lianilor sintetici a ajuns s fie o
prerogativ a biotehnologiilor avansate. n tehnologia fabricrii plcilor lemnoase ecologic pure se
folosesc bazidiomicetele ce aparin genurilor Panus, Pleurotus, Coriolus. Ciuperca este cultivat
submers n fermentatoare mari (de volumul 0,1-1m3) pn la realizarea nivelului maxim de sintez a
enzimelor lichidului cultural, dup care se trece la tratarea materialelor lignocelulozice, procesul
tehnologic n faza a doua desfurndu-se n condiii nesterile la temperaturi obinuite [132, 173,
174, 179].
Din punct de vedere chimic lignoceluloza este alctuit din fibrile de celuloz incluse ntr-o
matrice de lignin i hemiceluloz. Ciupercile putregaiului alb sunt productori caracteristici de
fenoloxidaze extracelulare cu caracter oxidativ n care moleculele de oxigen sunt folosite n
dearomatizarea nucleului benzenic (demetilare, hidroxilare, oxidare a lanurilor laterale etc.) i
descompunerea produilor alifatici rezultai. Prin cuplarea acestora, radicalii formai (fenolici,
carboxilici etc.) pot suferi transformri, inclusiv i polimerizri, astfel nct n prezena agentului
termic i a presiunii exercitate asupra biocompozitelor polizaharidele i produii degradrii ligninei
sunt implicai n diverse reacii de polimerizare cu constituirea legturilor suplimentare ntre fibrele
lignocelulozice. Acest fapt duce la mbuntirea indicilor fizico-mecanici i igienici ai
biocompozitelor i exclude utilizarea lianilor sintetici costisitori i toxici pentru sntatea omului.
n scopul evidenierii corelrii ntre profunzimea biodegradrii ligninei i indicilor fizico-mecanici a
plcilor aglomerate a fost cercetat aciunea inoculumului Panus tigrinus asupra rumeguului de
lemn [173]. Timpul optim de expunere a fost de 5-6 zile. La aceast etap degradarea ligninei este
maxim, fapt ce duce la formarea unui numr mare de grupe funcionale cu proprieti adezive.
Transformrile ligninei i formarea unor noi produi la biodegradarea ligninei majoreaz coerena
ntre materialul folosit. n acest mod, elaborarea biotehnologiei de fabricare a plcilor aglomerate
prin intermediul bazidiomicetelor se refer la una din cele mai avansate direcii n obinerea
materialelor de construcie ecologic pure [132, 174, 179]. Importana acestui proces biotehnologic

14
rezid i din utilizarea multipl a lichidului cultural, care poate fi completat cu obinerea
enzimelor, biomasei alimentare i zaharurilor fermentescibili, ceea ce se concretizeaz ntr-o
realizare nu numai ecologic pur, ci i economic rentabil.
n scopul obinerii proteinei alimentare i furajere a fost elaborat, prin intermediul ciupercii
Pleurotus ostreatus, tehnologia de prelucrare a deeurilor de foioase i conifere din industria
lemnului [183]. Introducerea acestei tehnologii la un ir de intreprinderi de expluatare i
industrializare a lemnului a artat un randament sporit al recoltei de carpofori pn la 20-30% fa
de substratul nutritiv utilizat. Calitatea carpoforilor obinui corespunde n totalitate normelor
igienice i ecologice. Coninutul proteinei pentru rumeguul i cojile copacilor de conifere a fost
majorat de 4 i respectiv 7,5 ori. Valoarea unitilor furajere pentru cojile copacilor de conifere s-a
mrit de la 0,09 la 0,56.
Ciupercile unor specii ce aparin genurilor Pleurotus i Coriolus au demonstrat n faza solid
de fermentare o nalt activitate a enzimelor hidrolitice (celulaze, xilanaze, pectinaze) i a
oxidoreductazelor (peroxidaze, lacaze) [176]. Datorit complexului de enzime hidrolitice i
oxidoreductoare de o specifitate nalt fa de substrat n procesele de hidroliz i oxidare
macromicetele studiate au majorat de 3-15 ori coninutul zahrului n substrat, degradarea
materialelor lignocelulozice constituind 30-42% pentru celuloz i 15,0-16,8% pentru lignin. A
fost stabilit o majorare a substanelor proteice cu un coninut nalt al lizinei, acidului glutamic,
fenilalaninei i treoninei, hidrailor de carbon fermentescibili, acizilor grai. Graie coninutului mic
al acizilor nucleici i lipsei substanelor toxice, substraturile fermentate pot fi folosite pe larg la
furajarea animalelor (bovine, porcine).
Substratul mpnzit cu miceliul de pstrv posed un miros plcut de ciuperci i poate fi
folosit ca supliment proteic valoros n calitate de nutre, eficacitatea maxim realizndu-se la
utilizarea acestuia n stare proaspt. n acelai timp, n cazul depozitrii sau transportrii
substratului fermentat, acesta necesit o pasteurizare cu abur la 600C timp de 1-2 zile [144].
Substituirea a 5-10% a raiei zilnice la porci, oi, viei i gini cu substratul fermentat i pasteurizat
(600C timp de 2 zile), dup recoltarea carpoforilor de pstrv, nu a exercitat vre-o influien
negativ asupra strii fiziologice a animalelor i psrilor [32]. Suplimentarea cu 200g de substrat
fermentat a raiei zilnice majoreaz greutatea vieilor de 25-50kg cu 10-17%, iar pentru vieii cu
greutatea de 200-220kg a fost stabilit raionalitatea substituirii acesteia cu 40%, ceea ce duce la o
micorare a costului nutreului cu 23% [63, 107]. Substratul fermentat, dup recoltarea carpoforilor
Pleurotus, poate fi utilizat i n calitate de ngrmnt bioorganic valoros. Folosind substratul
fermentat n calitate de ngrmnt, savanii cehi [45] au obinut o majorare a recoltei castraveilor
de ser cu 29%.

15
Ciupercile bazidiale sunt privite nu numai din punctul de vedere al obinerii proteinei
furajere i alimentare, ci i ca material preios pentru obinerea substanelor biologic active i a
medicamentelor. Substanele biologic active ce se conin n aceste ciuperci nltur efectele nocive
ale elementelor radioactive din corpul uman, iar coninutul mare de protein previne i vindec
hepatita, ulcerul gastric, micoreaz procentul de colesterol i acioneaz ca anticancerigen [61, 78,
96, 140, 154]. n acest scop sunt folosii carpoforii i miceliul vegetativ cultivat pe substraturile
solide sau lichide. Astfel, din miceliul ciupercilor Trichotecium roseum, Pleurotus ostreatus i
Lentinus edodes cultivat n faza solid de fermentare de ctre o grup de cercettori [154] a fost
preparat o form medicamentoas, numit micoenzimol. Preparatul conine un complex de
enzime hidrolitice, proteinaze cu efect fibrino-trombolitic, antibiotice de un spectru larg de aciune,
precum i vitamine din grupul B, acid ascorbic, vitamina A, aminoacizi eseniali etc. Graie
compoziiei sale preioase, preparatul medicamentos este recomandat pentru folosirea lui local ca
unguent n scopul tratrii arsurilor, ulcerului trofic, exemelor, candidomicozelor etc.
Actualmente, ciupercile comestibile pot servi drept surse non-convenionale a unui ir de
remedii curative, profilactice i medicinale [15, 16]. Utilizarea n scopuri terapeutice a carpoforilor
i biomasei fungice cu un coninut sporit de microelemente este de perspectiv, studiul potenialului
terapeutic al ciupercii P. ostreatus fiind susinut de prezena n componena acestuia a 44 de
microelemente. Prin cultivarea ciupercilor n condiii controlate poate fi sporit i coninutul de
microelemente cu efect sanogen. Introducerea iodului, zincului i a manganului n substratul
celulozic supus fermentrii de ctre P. ostreatus a sporit de 14,4-16,0 ori fa de martor nivelul
microelementelor n ciuperci, capacitatea excepional de metabolizare a bioelementelor prezentnd
un interes sporit n elaborarea unor preparate bioactive fungice [89].
Printre polimerii eseniali, constitueni ai biomasei fungice chitina, polizaharidele i
pigmenii sunt cunoscui pentru aplicaiile lor n medicin. n prezent, componentele bioactive
menionate anterior sunt utilizate la elaborarea preparatului Mycoton un biopolimer complex nontoxic obinut din peretele celular al bazidiomicetelor, care conine chitin -70%, -1,3 i -1,6glucane 20%, melanin 10%. Chitina manifest o capacitate unical de adsorbie a metalelor
grele (Pb, Hg, Bi, Cr, etc), elementelor radioactive (U, Pu, Am, Sr, etc), endotoxinelor; fr a
afecta, n acelai timp, metabolismul salin i de adsorbie a unor microelemente biogene (Na, K, Ca,
etc). Polizaharidele sunt cunoscute, n special, datorit efectelor antitumorale, antivirale i
imunostimulatoare. Melaninele protejeaz celula fungic de aciunea negativ a factorilor nocivi,
manifestnd prin aceasta o activitate antioxidant, antimutagen, antibacterial, foto- i
radioprotectoare [26, 27, 61, 78, 82].

16
Aplicarea unor factori fizici nepoluani de reglare a cilor metabolice ofer o posibilitate de
valorificare complex a potenialului biotehnologic pentru bazidiomicete. O aplicabilitate practic
din acest punct de vedere prezint iradierea obiectului biologic, proces fizic ce se explic prin
absorbia energiei fotonilor i inducerea unei stri de excitare a moleculei sistemului biologic. n
dependen de intensitatea i componena spectral a sursei de iradiere se poate constata o stimulare
sau o inhibare a unei
fructificarea),

din fazele de dezvoltare a ciupercii (creterea miceliului vegetativ,

schimbarea

particularitilor

fiziologo-biochimice

(pigmentarea,

activitatea

biochimic) etc. [147]. Ca urmare a iradierii cu raze UV i gama a ciupercilor Agaricus bisporus i
Pleurotus ostreatus, unii cercettori [139] au stabilit o aciune pozitiv privind recolta carpoforilor.
De asemenea, utilizarea sursei de iradiere lazer de diferite lungimi de und, n special a luminii
monocromatice roie i verde, a stimulat creterea miceliului vegetativ la L. edodes, P. ostreatus i
H. erinaceus pe diverse substraturi nutritive, a micorat esenial timpul necesar fructificrii, recolta
carpoforilor fiind majorat cu 36-60% [169, 170].
Studiile unui grup de cercettori [145] au vizat stabilirea modului de accelerare a creterii
miceliului P. ostreatus prin modificarea componenei mediului nutritiv cu ajutorul stimulatorilor de
cretere. Efectul biostimulatorilor de cretere, dup prerea cercettorilor, este condiionat de
nlturarea stresului de adaptare exprimat prin acomodarea efectiv a sistemului enzimatic al
fungilor la noile condiii i surse de nutriie. Astfel, preparatul de natur steroidal epin n
concentraia de 2,510-7mg/ml - a majorat de 1,4-1,6 ori fa de martor creterea miceliului P.
ostreatus pe mediu agarizat i de 1,5-1,9 ori la cultivarea submers.
Datorit ratei de descompunere limitat, macromoleculele de lignin sunt compuii organici
cei mai persisteni n biosfer. Eficiena cea mai mare n degradarea ligninei o au ciupercile
filamentoase din grupul bazidiomicetelor, i anume cele care produc putregaiul alb [20, 42]. Pn n
prezent s-au emis numai scheme ipotetice asupra modului n care microorganismele degradeaz
lignina. n acelai timp, se tie, c biodegradarea ligninei este nsoit de implicarea nemijlocit att
a enzimelor lignolitice, ct i a radicalilor peroxizi ai lipidelor [119]. Degradarea ligninei de ctre
fungii putregaiului alb reprezint un proces al metabolismului secundar ca rspuns la insuficiena
surselor de azot i carbon din mediul de nutriie [150]. Deficitul azotului pentru ciuperci duce la
sintetizarea intens a enzimelor lignolitice i trecerea culturii n faza staionar de cretere.
Utilizarea surselor suplimentare de azot asigur ridicarea nivelului de sintez a proteinelor cu
metabolizarea preferenial a polizaharidelor (celuloz). n acelai timp, are loc inhibarea degradrii
ligninei, ceea ce duce la micorarea digerabilitii in vitro [151]. De aceea, folosirea unor
concentraii mari de compui ai azotului pentru obinerea produselor cu o digerabilitate major nu
este recomandat. Cercetrile n ceea ce privete majorarea coninutului azotului total n

17
substraturile fermentate de ctre bazidiomicete are ca obiectiv obinerea produselor proteice
furajere. Pentru a constata majorarea digerabilitii paielor de gru Hatakka, ntr-un studiu
experimental, a cultivat bazidiomicetul P. ostreatus [29, 30]. Dup 36 de zile coninutul ligninei i
celulozei n substratul fermentat a sczut cu 10-45% i respectiv 15-55%, iar la a 90 zi de cultivare
digerabilitatea produsului fermentat a constituit 50%. Digerabilitatea paielor de gru dup 90-120
zile de cultivare cu P. ostreatus, P. ostreatus f. florida i P. cornucopiae s-a majorat de la 40% la
50-59,8%, ceea ce corespunde indicilor digerabilitii fnului de calitate superioar [49]. La
cultivarea ciupercii P. ostreatus pe un substrat compus din rumegu de lemn i tre de gru (9:1)
coninutul azotului s-a majorat cu 22-32%, tulpina testat utiliznd 31-33% celuloz i 21-26%
lignin [128].
Formarea prin fotosintez a hidrailor de carbon ridic problema productivitii de biomas
ca purttor de energie. Dac biomasa este recoltat ca purttor de energie, criteriul de evaluare al
culturii agricole nu mai este cantitatea de boabe, tuberculi, fibre etc. recoltat la hectar, ci producia
anual de biomas ca substan uscat [60]. Prelucrarea biomasei n condiii de fermentare, n afar
de biogaz, ne poate oferi produse alimentare de o nalt calitate: furaje pentru nutriia animalelor i
ngrminte bioorganice valoroase. Spre exemplu, pentru cultura ciupercilor Pleurotus substratul
nutritiv poate fi pregtit din paie de gru, randamentul constituind aproximativ 0,5kg ciuperci la 1kg
paie uscate [56], ceea ce depete de 3-5 ori valoarea de pia a produsului primar grul [86]. n
plus, substratul celulozic uzat poate fi folosit fie la furajarea animalelor sau ca ngrmnt organic
de calitate [98, 129, 151, 175].
Pentru a cerceta majorarea digerabilitii paielor de gru, cercettorii cehi i slovaci au
studiat perspectiva de cultivare a 13 bazidiomicete din grupul fungilor putregaiului alb (Pleurotus
ostreatus, Tramates giblosa, Lentinus tigrinus etc.).Cercetrile au relevat, c cea mai mare parte a
bazidiomicetelor studiate pot fi folosite la convertirea paielor de gru ntr-o hran mai calitativ
pentru rumegtoare [37]. La cultivarea bazidiomicetelor pe diverse substraturi vegetale se formeaz
un complex proteino-enzimatic ce conine pe lng proteine i zaharuri solubile. n componena sa
intr la fel i aminoacizi liberi, ceea ce ofer posibilitatea folosirii lui ca hran pentru rumegtoare
i psri [1].
Capacitatea de producie Pleurotus exprimat prin randament, respectiv prin cantitatea de
ciuperci rezultat la 100 kg material celulozic nsmnat reprezint 10-24%, respectiv 30-70% fa
de materialul celulozic uscat [57]. Randamentul maxim realizat n urma screeningului tulpinilor i
speciilor de Pleurotus (P. ostreatus, P. cornicopiae, P. pulmonarius, P. eryngii i P. citrinopileatus)
a fost gsit pentru P. ostreatus i P. pulmonarius 16,4% fa de substratul nutritiv nsmnat
[181]. Cultivarea ciupercii Pleurotus sajor-caju pe paie de gru, orez, sorg, soia i bumbac (cu

18
adaos organic DaI) a permis obinerea unor randamente superioare, rezultatele privind recolta
fiind urmtoarele: paiele de gru 650 g/kg, paiele de orez 701 g/kg, paiele de sorg 475 g/kg,
paiele de soia 1019 g/kg, tulpinile i frunzele de bumbac 1039 g/kg. [64].
Realizarea unui ciclu tehnologic finisat, fr deeuri, impune cu necesitate i utilizarea
substratului uzat. Astfel, dup recoltarea carpoforilor de pstrv, substratul celulozic neconsumat
poate fi convertit cu ajutorul viermilor n biogumus, folosit n continuare n calitate de ngrmnt
la cultivarea plantelor agricole [55].
Pentru producerea prin intermediul ciupercii Pleurotus a proteinei furajere i alimentare
cea mai de perspectiv materie vegetal n condiiile Republicii Moldova sunt paiele de cerealiere.
Anual, n RM se acumuleaz sute de mii tone de paie, dintre care numai o parte mic sunt folosite
n ramura agro-industrial, restul nu sunt deloc valorificate sau sunt arse. Paiele reprezint hrana cea
mai ieftin i energetic pentru rumegtoare, astfel nct conform valorii energetice aceasta din
urm se apropie de cea a grului. n acelai timp, din cauza coninutului mic al proteinei i mare al
celulozei, valoarea nutritiv este mic. Digerabilitatea sczut a paielor se datoreaz faptului, c n
procesul de dezvoltare a plantelor hidraii de carbon i proteinele de calitate nalt sunt transferate
n gru, cele de o calitate mai joas meninndu-se n paie [111].
n Republica Moldova o mare atenie se acord i valorificrii prin intermediul ciupercilor
Pleurotus a resturilor vegetale obinute la curarea de primvar a viei de vie i livezilor. La
cultivarea ciupercii P. ostreatus pe resturile obinute de la curarea pomilor fructiferi eficacitatea
biologic a fost maxim 42%, azotul total dup 10-12 zile de fermentare atingnd valoarea de
0,63% fa de 0,40% pentru martor. Dup recoltarea carpoforilor, consumul celulozei i ligninei
pentru aceast cultur a atins cotele de 16,2% i respectiv 12,7% [142].
Aspectul metodologic al direciei de cercetare privind cultivarea n faza lichid la
bazidiomicete a fost iniiat prin anii 50 ai secolului trecut. Cultivarea submers a bazidiomicetelor
ofer posibiliti majore de intensificare a tuturor proceselor biotehnologice, permite ameliorarea
unor aa indici biochimici, ca coninutul de proteine, aminoacizi, lipide i a altor componente ale
miceliului ciupercii. Sub acest aspect exist opinii, care susin, c n viitorul apropiat tehnologia
clasic de cultivare a ciupercilor n faza solid de fermentare va fi nlocuit cu cultivarea submers
[184]. n acelai timp, studiul indicilor tehnico-economici la valorificarea deeurilor celulozice n
fazele lichid i solid de cultivare a fungilor a stabilit superioritatea procesului tehnologic n faza
solid de fermentare, sinecostul produsului proteic obinut fiind de 1,5-3,0 ori mai mic [105].
Viesturs V. i col. [95] au alt opinie: fermentarea n faza solid nu realizeaz avantaje eseniale
fa de cultivarea submers.

19
Sinecostul biomasei proteice la cultivarea bazidiomicetelor este relativ nalt de 2-10 ori
fa de cel al drojdiilor, ceea ce denot faptul c n timpul apropiat ciupercile, dup prerea unor
cercettori [151], nu vor concura cu drojdiile la producerea proteinei furajere. n acelai timp, din
cauza coninutului nalt al acizilor nucleici numai pn la 10% din raionul proteic poate fi nlocuit
cu biomasa drojdiilor sau bacteriilor. Proteinele ciupercilor bazidiale, ns, pot fi folosite n
alimentare n cantiti mari, pn la substituirea total a proteinelor animaliere [162].
Sporirea eficienei economice a proceselor biotehnologice de cultivare a bazidiomicetelor
comestibile poate fi realizat prin includerea, ca pri componente, a dou domenii: obinerii, pe de
o parte a produsului finit, respectiv a proteinei alimentare, furajere i a substanelor bioactive, i, pe
de alt parte - a utilizrii complete a reziduurilor agro-industriale ce polueaz mediul nconjurtor.
Importana acestor procese biotehnologice este confirmat i susinut de multitudinea cercetrilor
tiinifice privind cultivarea n fazele lichid i solid de fermentare a ciupercilor bazidiale,
capacitatea redutabil de convertire a reziduurilor vegetale n produse valoroase de sintez
prezentnd o realizare nu numai economic rentabil, ci i ecologic pur.

20

CAPITOLUL II
MATERIAL I METODE DE CERCETARE
2.1 Obiectul de studiu. Ca obiect de studiu au fost utilizate 12 tulpini de P. ostreatus
(P. ostreatus M1, M2, M3, M4, M5, M6, M7, H-7, M8, M9, 1010, M11) depozitate n colecia
Institutului de Microbiologie al A..M., trei din ele (P. ostreatus M1, M4 i 1010) fiind selectate i
propuse spre cercetare n posibilitatea de aplicare ale acestora n diverse practici biotehnologice. n
continuare, tulpinile P. ostreatus M1, M4 i 1010 au fost depozitate n Colecia Naional de
Microorganisme Nepatogene, numerele de nregistrare atribuite fiind: P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i respectiv CNMN-FB-04.
Fructificarea bazidiomicetelor reprezint cel mai sigur procedeu de identificare la nivel de
specie [127, 134], astfel nct apartenena tulpinilor la specia Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.)
Kummer a fost determinat conform caracterelor morfologice a carpoforilor ciupercii n perioada
maturizrii acestora.

2.2 Metode de cercetare. Tehnicile de investigare i metodele utilizate sunt acceptate

de toi cei care lucreaz cu culturi pure nepatogene, inclusiv i cu ciuperci bazidiale.
2.2.1 Izolarea i pstrarea culturii pure. Prepararea materialului semincer. Conform
metodei propuse de autori [126, 127], tulpinile P. ostreatus au fost izolate n cultur pur din
carpoforii ciupercii pe mediul agarizat cu mal de bere 60Balling la 2710C. Caracterele morfoculturale ale ciupercii P. ostreatus au fost meninute prin rensmnarea periodic la fiecare 6-8
luni pe medii agarizate proaspete, pstrarea ei fiind asigurat la temperatura de 410C. Materialul
semincer a fost preparat n baz de suport granulat (gru) n flacoane de sticl (1l) conform metodei
[127]. n calitate de inoculum pentru miceliul de nsmnare granulat a servit cultura ciupercii P.
ostreatus crescut n eprubet (20 cm3) cu mal de bere 60Balling agarizat, iar n calitate de
inoculum pentru cultivarea submers - miceliul ciupercii P. ostreatus obinut n faza lichid de
cultivare pe mediile nutritive Czapek i mal de bere. n scopul majorrii punctelor de cretere i
intensificrii proceselor metabolice la cultivarea submers a ciupercii P. ostreatus, inoculumul a
fost preventiv omogenizat cu dispozitivul MPW-302 (Polonia) i introdus n mediul de nutriie n
cantitate de 10%V.
2.2.2 Studierea caracterelor morfo-culturale. La selectarea tulpinilor P. ostreatus n faza

21
solid de fermentare s-a estimat coeficientul de cretere pe medii agarizate [77]. n calitate de
mediu nutritiv standard a fost folosit mediul agarizat cu mal de bere 60Balling, cercetrile fiind
efectuate pe cutiile Petri a cte 5 repetri fiecare la temperaturile de 220 i 280C. La a 3-ea i a 6-ea
zi de cultivare s-a msurat diametrul i nlimea coloniilor (mm), iar densitatea s-a apreciat
conform gradaiei: 1-rar, 2-medie, 3- dens. Estimarea coeficientului de cretere (CC) s-a efectuat
conform formulei [134]: CC=dhg/t, unde d-diametrul coloniei (mm), h-nlimea coloniei (mm), gdensitatea (1, 2, 3) i t-vrsta coloniei (zile).
Caracterele morfo-culturale ale tulpinilor P. ostreatus selectate (P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04) au fost studiate pentru temperaturile de 40, 70, 200, 250, 300 i 380C
[112, 127, 149]. Estimarea creterii liniare i a coeficientului de cretere pentru temperaturile
optime de cultivare (200, 250 i 300C) s-au efectuat ncepnd cu ziua a treia pn la mpnzirea
total a cutiei Petri, iar pentru temperaturile limite de cretere (40, 70 i 380C) pn la 26 zile de
cultivare.
Exigenele de nutriie pentru tulpinile P. ostreatus testate au fost stabilite n fazele solid i
lichid de cultivare ale acestora. Tulpinile P. ostreatus selectate au fost cultivate pe mediul nutritiv
Czapek cu nlocuirea surselor de azot sau carbon testate. n calitate de inoculum la cultivarea solid
a servit miceliul culturii de 5 zile crescut pe mediul agarizat cu mal de bere 60Balling, fiecare cutie
Petri experimental fiind nsmnat cu cte-un disc de miceliu (=7mm) i incubat la
temperatura de 2710C. La a 3-ea i a 6-ea zi de cultivare au fost studiate caracterele morfo culturale. Sursele de carbon din mediul sintetic Czapek s-au prezentat sub form de monozaharide
(glucoza, galactoza xiloza, arabinoza), dizaharide (maltoza, zaharoza, lactoza), polizaharid
(amidon) i alcool (manit). Sursele anorganice ale azotului s-au prezentat sub forma srurilor de
amoniu (NH4NO3, (NH4)3PO4, (NH4)2SO4) i nitrailor (NaNO3, NH4NO3), iar cele ale azotului
organic sub forma aminoacizilor (asparagina, acidul aspartic). Sursele de carbon i azot
menionate mai sus au fost testate i la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04. Tulpinile P. ostreatus selectate au fost cultivate pe mediul nutritiv
Czapek cu nlocuirea surselor de azot sau carbon testate, intensitatea de cretere i caracterele
morfo-culturale fiind caracterizate dup 240 ore de fermentare.
Pentru efectuarea studiilor privind caracterele morfo-culturale ale carpoforilor P. ostreatus
cultivai pe diverse substraturi celulozice au fost msurate lungimea picioruelor, diametrul
plriilor, greutatea carpoforilor, calculat recolta i periodicitatea valurilor de recolt.
2.2.3 Determinarea compoziiei biochimice. Biomasa, carpoforii i probele de substrat au
fost uscate i mrunite la moara electric de laborator, trecute printr-o sit cu diametrul de 1mm i

22
plasate n sticlue cu capace, pstrarea lor fiind asigurat la rcoare i ntuneric pn la efectuarea
analizelor biochimice. Compoziia biochimic a substraturilor celulozice fermentate a fost
determinat n fazele mpnzirii complete (12 zile) i fructificrii (dup 2-3 valuri de recolt -90
zile). Pentru determinarea n dinamic a compoziiei biochimice a substraturilor i carpoforilor au
fost propuse metodele cunoscute n biochimie [112, 126, 146, 165].
Azotul total i proteina brut. Metoda se bazeaz pe arderea i mineralizarea probelor cu
acid sulfuric concentrat n prezena catalizatorului (metoda Kielhdal) [112]. Dup ardere, n soluiile
probelor testate se adaug reactivul Nessler i se colorimetreaz la lungimea undei 400nm,
densitatea optic a probelor fiind stabilit fa de curba de calibrare a soluiilor standardizate cu
NH4+. Azotul total (%) se determin conform formulei:
N=

a d 100
, unde
p

a cantitatea azotului total obinut dup colorimetrare, mg; d diluia; p masa probei, mg.
Cantitatea de protein brut a fost calculat n baza coeficientului 6,25.
Carbonul (%) a fost determinat conform metodei Nikitin [165]. Metoda se bazeaz pe
oxidarea substanelor organice cu amestecul de H2SO4 concentrat i a bicromatului de potasiu
(K2Cr2O7) la 1500C. Soluiile cu carbon se rcesc, se colorimetreaz la lungimea de und 590 nm,
densitatea optic a probelor fiind stabilit fa de curba de calibrare a soluiilor standardizate cu
glucoz.
Calculul cantitii de carbon (%) s-a realizat n baza relaiei:
C(%) =

EK
, unde
P

E densitatea optic a probei; K ctg unghiului de nclinare a curbei de calibrare fa de

coordonata abscisei; P masa probei, g.
Celuloza brut a fost determinat prin metoda Kursner-Ganek [146]. Metoda se bazeaz pe
oxidarea, dizolvarea i solubilizarea diverilor compui chimici, n afar de celuloz, prin folosirea
amestecului (1:10) de HNO3 concentrat i acid acetic (80%). Dup hidroliz proba a fost splat n
ap distilat, alcool etilic i eter, uscat la 1050C i cntrit.
Coninutul celulozei brute (%) se determin conform formulei:
X=(A1-A)100/P, unde
A-masa uscat a filtrului; A1-masa uscat a filtrului i precipitatului; P-masa probei,
(1g0,0002g).
Lignina brut a fost determinat prin cntrirea probelor rezultate din hidroliza celulozei i
hemicelulozei cu soluia de acid sulfuric (72%) conform metodei Klasson [146].

23
Componena calitativ i cantitativ a aminoacizilor a fost determinat prin metoda
hidrolizei acide urmat de identificarea acestora la analizatorul AAA-339 .
Hidrolazele. Activitatea endopolimerazelor (celulaza, amilaza, proteaza) a fost determinat
conform aciunii filtratului de cultur asupra substratelor corespunztoare (CMC-Na-1%, amidon
solubil 1%, jelatin 1%) prin metoda vscozimetric [126]. Activitatea celulazic a fost
determinat colorimetric prin dozarea zaharurilor reductoare formate n urma aciunii enzimelor
asupra soluiei de 1% a carboximetilcelulozei de sodiu (CMC-Na) timp de 30 minute la temperatura
500C i asupra hrtiei de filtru timp de 60 minute la temperatura de 500C [84]. Reacia enzimatic se
stopeaz prin fierbere la baia de ap timp de 10 minute, activitatea enzimatic aflndu-se prin
diferena dintre cantitatea de zahr reductor rezultat n condiii standard de activitate. Ca unitate
de activitate enzimatic s-a considerat acea cantitate de enzim, care n condiii specifice dup 30 de
minute i respectiv 1 or de aciune asupra filtratului formeaz 1mg de glucoz.
Activitatea amilazic a fost determinat la valoarea PH-ului 4,7 prin metoda colorimetric cu
iod [159].
Activitatea lipolitic s-a determinat prin metoda titrimetric n zilele a 7-ea i a 14-ea,
utiliznd n calitate de substrat emulsia de 40% ulei de msline n alcool polivinilic de 2% [159].
Substana absolut uscat a fost determinat prin uscarea probei la 1050C pn la o mas
constant i cntrirea ei la cntarul analitic [146]. Toi parametrii biochimici au fost raportai la
substana absolut uscat.

2.2.4 Mediile de nutriie. Pentru efectuarea studiilor privind cultivarea intensiv a tulpinilor
P. ostreatus n faza solid de fermentare au fost folosite substraturile nutritive n urmtoarele
proporii:
1. paie (100%) - (PG),
2. paie + rumegu de lemn (2/3+1/3) - (PGL),
3. paie + coji de floarea-soarelui (2/3+1/3) - (PGFS),
4. paie + coceni de porumb (2/3+1/3) - (PGC).
Prelucrarea termic a substraturilor celulozice a fost realizat conform tehnologiei
hidrotermice, pentru care s-au aplicat dou procedee de preparare ale acestora: fermentarea
substraturilor celulozice la temperatura de 500-550C timp de 32 ore i prelucrarea termic la 950C
timp de 1 or [157]. Umiditatea substraturilor nutritive dup pasteurizare a prezentat valori cuprinse
ntre 70-76%, iar pentru inoculare a fost folosit miceliu crescut pe suport de gru n cantitate de 3,84,8% fa de substratul celulozic umed.

24
Substratul nsmnat (4-8kg) a fost introdus n saci de polietilen neperforai de
dimensiunile 5070 i 3050cm. Sacii cu substratul celulozic nsmnat au fost tasai i plasai n
camera de incubare n condiii de obscuritate la temperatura de 26020C, unde au fost inui pn la
mpnzirea lor deplin. Dup mpnzirea complet a substraturilor nutritive sacii au fost scoi i
trecui n camera de fructificare, unde s-au meninut parametrii necesari fructificrii ciupercii P.
ostreatus: temperatura 70-170C, umiditatea 75-95%, iluminarea 50-200 luci/or i aeraia 6-8
schimburi/or.
Screeningul tulpinilor P. ostreatus privind acumularea biomasei la cultivarea submers a
fost efectuat folosind mediul nutritiv complex n baz de fin de soia (0,5%) i fin de porumb
(2%) [149]. Diversitatea i activitatea enzimelor hidrolitice a fost realizat n dou variante: a) fin
de soia (0,5%) + fin de porumb (2%) i b) fin de soia (0,5%) + coji de floarea-soarelui (2%).
Cultivarea submers a pstrvului de fag s-a desfurat n baloane Erlenmeyer cu cte 150ml mediu
nutritiv fiecare la temperatura de 27010C. Aerarea a fost realizat printr-o agitare pe un dispozitiv
rotativ cu 180 r.p.m. timp de 10 zile. Pentru a stabili posibilitatea de valorificare a biomasei
miceliene n alimentaie a fost utilizat mediul de nutriie n baza malului de bere 60Balling.

2.2.5 Productivitatea. Recolta carpoforilor a fost calculat conform: a) raportului procentual

ntre masa carpoforilor proaspei i masa substratului umed; b) eficacitii biologice (EB,%).
Calcularea eficacitii biologice (EB, %) permite o caracterizare mai exact a productorului i se
determin prin formula [71]:
EB=(m/m1)100, unde
m masa carpoforilor proaspei, g.;
m1 masa substratului uscat, g.
Relaia de mai sus exclude unele erori legate de diferenele ntre umiditatea substraturilor
nutritive.
Deoarece umiditatea carpoforilor variaz n limite destul de largi, masa lor a fost recalculat
conform formulei [148]: A=BC/D, unde A masa carpoforior dup recalculare; B masa
carpoforilor din eantionul de prob; C coninutul substanelor uscate la 100g ciuperci din
eantionul de prob; D=0,1 cantitatea substanelor uscate ce se conine n carpoforii cultivai n
condiii optimale (10%). Includerea masei carpoforilor recalculai n formula EB exclude erorile
legate de diferenele ntre umiditatea carpoforilor colectai.
Biomasa tulpinilor P. ostreatus testate a fost separat de lichidul de cultur prin filtrare pe
hrtia de filtru, uscat la 1050C pn la o mas constant i cntrit la cntarul analitic [146].

25

2.2.6 Valoarea nutritiv a carpoforilor i miceliului P. ostreatus a fost estimat prin

calcularea indicilor aminoacizilor eseniali (EAA) i nutritiv conform metodelor propuse de autori
[14, 62]. Calculul a fost realizat n baza relaiilor:
Indicele EAA =

Suma de aminoacizi esentiali in produsul examinat

,
Suma de aminoacizi esentiali in albumina oului de gaina (FAO)

Indicele nutritiv =

Indicele EAA continutul de proteina, %

.
100

2.2.7 Consumul de celuloz (C) i lignin (L) s-au calculat conform formulelor [113]:
C(%)=100-K(100-D)/K0
L(%)=100-K(100.D)/K0, unde
D-consumul substratului nutritiv, %;
K i K0 coninutul procentual de celuloz sau lignin pentru varianta martor i respectiv pentru
variantele rezultate n urma cultivrii ciupercii pe diverse substraturi nutritive.
Raportul cantitativ de asimilare a celulozei i ligninei a fost caracterizat prin indicele
xilolizei: Ic=C/C+L, unde C i L reprezint consumul celulozei i ligninei, % [178].
Pentru fiecare variant de mediu, la sfritul fermentaiei, s-a calculat coeficientul de
utilizare a substratului: k=Y/Mc, unde Y masa uscat a carpoforilor colectai (kg) i Mc
consumul masei uscate a substratului nutritiv (kg) [163].

2.2.8 Activitatea fiziologic a extractelor P. ostreatus. La finisarea ciclului tehnologic

substraturile uzate au servit drept surse de substane bioactive. Extractele P. ostreatus au fost
obinute prin diluarea substraturilor nutritive uzate cu ap n raport de 0,1 i 1% timp de 1 or.
Aciunea extractelor P. ostreatus asupra capacitii de germinare i cretere a seminelor de gru a
fost testat pe soiul Seleanka. n calitate de martor au servit seminele tratate cu ap distilat,
cercetrile fiind ndeplinite a cte 3 repetri fiecare conform metodei [137]. Capacitatea de ncolire
a seminelor a fost apreciat conform energiei germinative, care exprim numrul de semine
germinate n decursul a trei zile.
2.2.9 Analiza statistic. Comparaia n perechi a variantelor din test cu varianta martor i
diferenele semnificative au fost apreciate prin metoda statistic cu utilizarea t-criteriului Student.
Datele experimentale au fost supuse prelucrrii statistice i analizei de corelaie n baza programului
computerizat Microsoft Excel.

26

CAPITOLUL III
SELECTAREA TULPINILOR DE PLEUROTUS OSTREATUS N FAZELE
LICHID I SOLID DE CULTIVARE
Studiul comparativ a mai multor tulpini de Pleurotus ostreatus cu referin la exigenele de
nutriie, acumularea biomasei, activitatea biosintetic, precum i alte particulariti biologice
caracteristice organismelor vii, este un factor ce determin eficiena procesului selectiv. Aprecierea
potenialului biologic din punct de vedere al perspectivei biotehnologice este determinat, n primul
rnd de rata creterii miceliului ciupercii n fazele lichid i solid. Estimarea coeficientului de
cretere [77], mrimea cruia se determin prin calcularea diametrului, densitii, nlimii i vrstei
coloniei caracterizeaz cel mai bine dinamicul i particularitile creterii ciupercii pe medii
agarizate. Dei, o atare evaluare nu poate fi comparat n mod obiectiv cu cele cultivate pe medii
lichide, unde se calculeaz biomasa acumulat pe unitate de timp, totui, pentru etapa iniial de
selectare este suficient pentru a caracteriza gradul de cretere al tulpinilor studiate.
Scopul cercetrilor pentru Capitolul III este screening-ul celor mai productive tulpini
Pleurotus ostreatus ce evideniaz aa activiti metabolice, ca acumularea biomasei i biosinteza
enzimelor hidrolitice la cultivarea submers, viteza de cretere pe medii nutritive agarizate, recolta
de carpofori n posibilitatea utilizrii tulpinilor selectate n diverse procese biotehnologice.

3.1 Obinerea biomasei i activitatea hidrolitic la cultivarea submers a

ciupercii Pleurotus ostreatus
Cercetarea capacitii de cretere intensiv a miceliului P. ostreatus cultivat submers n faza
lichid este necesar pentru evidenierea celor mai productive tulpini n scopul elaborrii unui
proces economic rentabil de obinere a biomasei i a substanelor bioactive.
Pentru investigri au fost folosite 12 tulpini de pstrv: P. ostreatus M1, M2, M3, M4, M5,
M6, M7, H-7, M8, M9, 1010 i M11. Cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus n scopul
obinerii biomasei a fost efectuat pe mediul nutritiv complex, utiliznd ca surse organice de azot i
carbon fin de soia (0,5%) i fin de porumb (2%) [149]. Creterea pstrvului de fag s-a
desfurat n baloane Erlenmeyer de 750 ml cu cte 150 ml mediu nutritiv fiecare la temperatura de
2710C. Aerarea a fost realizat n condiii de agitare continu pe un dispozitiv rotativ cu 180 r.p.m.
timp de 10 zile. Biomasa tilpinilor P. ostreatus s-a separat de lichidul de cultur prin filtrare pe
hrtia de filtru, filtratul mediului de cultur servind drept surs de enzime hidrolitice extracelulare.

27
Potrivit unor studii [83], la cultivarea submers a ciupercilor comestibile n scopul obinerii
biomasei alimentare, productivitatea acestora nu trebuie s cuprind valori sub 1g/l/zi sau s
acumuleze mai puin de 10g/l BAU n etapa iniial de selectare. n urma studiului efectuat s-a
stabilit, c tulpinile P. ostreatus testate corespund cerinelor naintate de autori [83], valorile
acumulrii biomasei la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus testate fiind cuprinse ntre 1013 g/l BAU (Fig. 1). Cele mai productive tulpini de pstrv s-au dovedit a fi P. ostreatus M1 cu
13g/l BAU i P. ostreatus M2 cu 12,4 g/l BAU.

14

13,0

12,4
11,0

Biomasa, g/l BAU

12

12,0
10,9

11,7

10,8

10,5

10,0

10,6

10,4

10,5

10
8
6
4
2
0
M1

M2

M3

M4

M5

M6

M7

H7

M8

M9

1010

M11

Tulpinile P. ostreatus

Figura 1. Acumularea biomasei la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus testate (g/l

BAU)
Metabolismul organismelor vii se realizeaz prin intermediul enzimelor care particip la
degradarea diverilor polimeri de origine organic, asigurnd prin aceasta energia necesar pentru
biosinteze, cretere, multiplicare etc. n majoritatea lor aceti compui organici se prezint ca nite
biopolimeri vegetali care trebuie descompui pn la monomeri, astfel pentru aceasta e necesar ca
organismul heterotrof s secrete n mediu enzime extracelulare de o specificitate nalt fa de
substratul de nutriie n procesele de hidroliz i oxidare. Hidrolazele sunt enzime ce catalizeaz
degradarea biologic a substratului de nutriie i se prezint la ciuperci, n majoritatea lor, ca enzime
extracelulare. Deosebim enzime constitutive ce se formeaz de la nceputul ontogenezei i
inductive, care apar n dependen de condiiile mediului nconjurtor [122]. n cazul enzimelor
hidrolitice inductive pentru biosinteza celulazelor este necesar includerea unor compui cu 1-4
legturi (celuloz), de aceea, n mediul de nutriie, am utilizat n calitate de inductor coji de
floarea-soarelui, substrat bogat n celuloz. Diversitatea i activitatea biosintetic ale enzimelor
hidrolitice au fost testate pe dou medii nutritive: I) fin de soia (0,5%) + coji de floarea soarelui
(2%) i II) fin de soia (0,5%) + fin de porumb (2%) [149], (Tab. 1).

28
Tabelul 1
Biosinteza enzimelor hidrolitice la cultivarea submers a ciupercii Pleurotus ostreatus pe
mediile cu coji de floarea-soarelui (I) i fin de porumb (II)
Sursa
Celulaza
Amilaza
Proteaza
Tulpina
de
lichefiant, zaharolitic, lichefiant, zaharolitic, lichefiant,
P.ostreatus
carbon
%
%
U/ml
%
U/ml
72
6,2
75
I
90
1,5
M1
70
4,5
60
II
85
0,7
25
1,6
50
I
92
1,6
M2
35
3,0
41
II
85
0,9
I
82
0,6
70
4,0
75
M3
II
82
0,6
63
4,5
53
I
86
0,8
50
3,0
82
M4
II
0
0
0
0
53
66
I
92
1,3
85
9,5
M5
66
II
86
0,5
72
3,8
I
80
1,2
30
0
54
M6
II
0
0
62
0
17
I
84
1,2
20
2,0
54
M7
II
65
1,2
53
2,0
19
I
84
1,2
80
3,5
31
H-7
II
73
1,0
72
2,0
19
I
83
0,2
85
82
7,5
M8
II
79
0,3
28
81
3,7
I
81
0,2
25
2,0
60
M9
II
90
0,2
40
1,8
48
I
85
1,4
47
2,5
84
1010
II
44
0
41
1,0
87
I
81
1,2
40
0
64
M11
II
67
0
0
0,2
27
Astfel, caracterul inductiv s-a manifestat pe deplin la tulpinile P. ostreatus M4 i M6, la care
sinteza celulazelor a avut loc numai pe mediul cu coji de floarea-soarelui.
Cu toate acestea, unele tulpini ale speciei P. ostreatus (P. ostreatus M3, M7, H7, M9) au
manifestat o nalt activitate celulazic i pe substratul ce nu coninea coji de floarea-soarelui n
calitate de inductor, ceea ce denot prezena caracterului constitutiv de sintez al hidrolazelor.
Manifestarea ambelor caractere: inductiv i constitutiv - sunt specifice tulpinilor P. ostreatus M1,
M2 i M5. Activitatea de zaharificare a acestor tulpini n prezena inductorului (coji de floareasoarelui) este aproximativ de 1,8-2,6 ori mai mare fa de mediul cu fin de porumb.
Tulpinile studiate sunt i amilolitic active. Amilazele sunt considerate n majoritatea cazurilor
ca enzime constitutive, complexitatea acestora n ontogenez schimbndu-se att calitativ, ct i
cantitativ i depinde de vrsta culturii [122]. Activitatea amilazic de zaharificare pe mediul cu coji

29
de floarea-soarelui pentru tulpinile P. ostreatus M5 i M8 a fost de 2,0 2,5 ori mai mare dect pe
mediul cu fina de porumb.
Cele mai active tulpini din punct de vedere al sintezei proteazei s-au dovedit a fi P. ostreatus
M1, M3, M4, M8 i 1010, dar numai tulpina P. ostreatus 1010 a manifestat o nalt activitate
proteazic pentru ambele medii de cultivare.
Analiza succint a rezultatelor obinute n vederea trierii tulpinilor P. ostreatus ce corespund
unui randament maxim al acumulrii de biomas i al sintezei de enzime hidrolitice la cultivarea
submers a permis selectarea a cinci tulpini de pstrv: P. ostreatus M1, M2, M5, M8 i 1010. La
aceast etap a procesului selectiv au fost evideniate i alese cu preponderen acele tulpini P.
ostreatus, care au avut o nalt activitate hidrolitic pentru ambele medii de cultivare, ceea ce din
punct de vedere al diversificrii mediilor nutritive poate fi avantajos. Tulpinile P. ostreatus M1 i
M2 din punct de vedere al sintezei celulazei lichefiante (85-92%) i a celei de zaharificare (0,7-1,6
U/ml) pentru mediile nutritive cu coji de floarea-soarelui i fin de porumb sunt cele mai active.
Indicii acumulrii biomasei cultivate submers pentru aceste tulpini (P. ostreatus M2 i M1) au
nregistrat valori maxime 12,4 i respectiv 13,0g/l BAU. Cele mai active tulpini privind nivelul
activitii amilazice de zaharificare au fost P. ostreatus M5 i M8: 3,7-3,8 U/ml pentru mediul cu
fin de porumb i 7,5-9,5 U/ml pentru mediul cu coji de floarea-soarelui. Activitatea amilazic
lichefiant la aceste tulpini (P. ostreatus M5 i M8) a constituit 72-85%. O nalt activitate
proteazic n cazul ambelor medii de cultivare s-a nregistrat la tulpina P. ostreatus 1010, proteaza
lichefiant avnd valori cuprinse ntre 84-87%.
Rezultatele obinute in s confirme i unele date bibliografice de specialitate [115, 116, 127,
134] privind perspectiva cultivrii submerse a ciupercii P. ostreatus n scopul obinerii biomasei
miceliene i a substanelor bioactive.

3.2 Estimarea coeficientului de cretere a ciupercii P. ostreatus pe medii

nutritive agarizate la temperaturi diferite
n studiul caracterelor morfo-culturale ale diferitelor grupe sistematice, inclusiv i a
bazidiomicetelor, viteza de cretere pe medii agarizate adesea se estimeaz prin calcularea
diametrului coloniei [134]. Totui, coloniile cu acelai diametru nu sunt identice. Avnd un mediu
nutritiv favorabil cultura formeaz o colonie mai dens i mai nalt, iar pe un mediu nefavorabil
cultura crete repede pe toat suprafaa agarului, dar cu o densitate i o nlime redus. De aceea, la
aceiai cretere liniar, coloniile se deosebesc prin densitate i nlime, ceea ce caracterizeaz
biomasa acumulat la unitate de suprafa.

30
Folosind modelarea matematic, s-au ntreprins ncercri de estimare mai exact a vitezei de
cretere pe medii agarizate [65, 69]. n studierea caracterelor morfo-culturale la ciuperci se
estimeaz coeficientului de cretere (CC) [77], care pe lng diametrul coloniei ia n consideraie
att densitatea, ct i nlimea ei. Densitatea se determin reieind din lungimea sumar a hifei
principale i ramificaiilor de orice ordin pe o unitate de suprafa, iar nlimea coloniei se msoar
de la suprafaa mediului agarizat (mm).
Pentru o caracterizare mai complet a capacitii de cretere a tulpinilor de P. ostreatus
cultivate pe mediul standard cu mal de bere s-au ales dou regimuri de temperatur: 22oC i 28oC.
n tabel sunt prezentate rezultatele obinute la estimarea CC pentru 12 tulpini de Pleurotus ostreatus
(Tab.2).
Tabelul 2
Estimarea coeficientului de cretere (CC) la cultivarea ciupercii Pleurotus ostreatus pe medii
nutritive agarizate cu mal de bere
220C
280C
Tulpina
P.ostreatus
Zile
d
h
g
CC
d
h
g
CC
M1
27,6 7,4
2,0
33,7
4,4
2,0
136,25,8
98,94,2
M2
24,0 5,4
2,4
38,0 4,6
2,2
103,76,2
128,26,4
M3
22,0 4,0
1,6
38,2 4,4
2,4
56,32,8
134,54,8
M4
25,3 6,0
2,8
26,0 4,4
2,6
141,63,6
99,15,1
M5
23,0 5,7
2,0
37,6 7,0
2,0
87,45,0
175,57,8
M6
26,0 7,4
2,0
33,8 4,0
2,0
128,37,3
90,16,8
3
M7
20,8 5,0
2,0
35,0 4,0
3,0
69,33,1
140,010.0
H7
20,6 4,6
2,0
37,3 4,0
2,2
63,21,2
109,46,3
M8
22,2 5,0
2,0
28,2 4,0
2,0
75,36,3
75,23,7
M9
24,0 5,5
2,0
29,8 3,6
2,2
88,02,4
71,55,0
1010
26,0 6,2
2,6
38,4 4,6
2,6
139,74,6
153,17,6
26,6 5,8
2,0
2,4
M11
102,910,2 38,3 4,8
147,19,4
M1
73,4 7,2
2,0
83,8 6,2
2,0
173,27,3
176,28,5
M2
75,2 5,6
2,0
88,0
4,8
2,4
140,44,7
169,08,9
M3
64,0 5,0
2,0
88,6
4,6
2,4
106,74,6
163,06,4
M4
73,0 6,0
2,2
74,8
4,6
2,6
149,18,7
160,65,6
M5
66,4 5,8
2,0
87,8 6,8
2,2
128,48,6
218,914,6
M6
77,6 7,2
2,0
2,0
118,411,2
186,312,4 84,6 4,2
6
M7
67,2 5,4
2,0
81,0 4,2
2,8
121,04,6
158,88,8
H7
65,8 5,2
2,0
86,6 4,4
2,2
114,17,0
139,75,8
M8
65,0 5,0
2,0
82,0 4,2
2,0
108,34,7
114,88,7
M9
70,6 5,4
2,0
73,2 4,0
2,0
127,16,5
97,67,6
1010
76,0 6,0
2,2
88,8 4,6
2,6
167,28,1
177,09,5
M11
77,0 5,8
2,0
89,0 4,8
2,4
148,96,4
170,97,5

CC = dhg/t, unde

d diametrul coloniei, mm; h nlimea coloniei, mm; t- timpul cultivrii, zile;

g densitatea coloniei (dup sistemul: 1-rar, 2-medie, 3-dens).

31
Comparnd CC al coloniilor P. ostreatus crescute pe mediile agarizate cu mal de bere,
constatm o diversitate n ceea ce privete atitudinea unor tulpini la factorul temperatur. Astfel,
valorile CC pentru unele tulpini de P. ostreatus cultivate la temperatura de 22oC s-au dovedit a fi
mai mari dect fa de cele cultivate la 28oC, fapt ce se datoreaz nlimii (h) majore a hifelor
ciupercii. Pentru tulpinile P. ostreatus M1, M4, M6 i 1010 cultivate la temperatura de 22oC, CC la
a 3-ea i a 6-ea zi au avut valori cuprinse ntre 128,3-141,6 i respectiv 160,6-186,3 uniti
convenionale (u.c.). n acelai timp, conform literaturii de specialitate i a observrilor proprii,
temperatura de 26o-28oC este optimal creterii i dezvoltrii miceliului pstrvului de fag. Aceasta
corespunde cu datele din tabel la msurarea diametrului i densitii coloniilor, care s-au dovedit a fi
mai mari dect fa de cele cultivate la temperatura de 22oC. Cu un CC de 147,1-175,5 u.c. n ziua a
3-ea i 170,9-218,9 u.c. n ziua a 6-ea, temperatura de 28oC a fost cea mai eficient creterii
tulpinilor P. ostreatus 1010, M5, M11 i M1. E de menionat faptul, c tulpina P. ostreatus M1 n
ziua a 3-ea nu a manifestat o cretere notabil, totui, pe parcursul cultivrii aceasta a dat dovad de
un potenial ridicat, valorificndu-se printr-un CC de 173,2 uniti convenionale la ziua a 6-ea.
Astfel, n rezultatul estimrii coeficientului de cretere la temperaturi diferite, au fost selectate
6 tulpini de pstrv: P. ostreatus M1, M4, M5, M6, 1010 i M11. Aceste tulpini posed o cretere
sporit (CC=160,6-218,9) pe mediul agarizat cu mal de bere i vor fi utilizate n etapa urmtoare de
selectare pentru obinerea carpoforilor.

3.3 Recolta carpoforilor la cultivarea n faza solid de fermentare

a ciupercii P. ostreatus
Cultivarea n vederea obinerii recoltei de carpofori reprezint o etap important n procesul
selectrii tulpinilor de perspectiv. Rezultatele unor cercetri [73,129] indic o corelare pozitiv
ntre activitatea metabolic a miceliului i recolta de carpofori. Reieind din cele expuse i
conducndu-ne de datele experimentale ce evideniaz activiti metabolice, precum nivelul
acumulrii biomasei cultivate submers, capacitatea de cretere pe medii agarizate la temperaturi
diferite, biosinteza unor enzime hidrolitice (celulaza, amilaza, proteaza) am ales 7 tulpini, i
anume P. ostreatus M1, M2, M4, M5, M6, 1010 i M11. Aceste tulpini au fost cultivate n
continuare pe paie de gru (100%) substratul tradiional la creterea pstrvului de fag [48, 102].
Calitatea substratului celulozic la nsmnare este determinat de selectivitatea acestuia i se
prezint ca o nsuire a materialului nutritiv pentru care sunt create condiiile optime necesare unei
colonizri rapide i eficiente de ctre cultura ciupercii. Crearea selectivitii se realizeaz prin
dezinfectarea termic a substratului nutritiv care urmrete scopul eliminrii din masa acestuia a

32
competitorilor i duntorilor animali i vegetali. Aceasta permite obinerea unei recolte nalte i
stabile pe tot parcursul ciclului tehnologic, contribuind la degradarea hidrolitic a substratului i la
utilizarea materiei vegetale ca surse de energie i sinteze. Prelucrarea termic a substratului a fost
realizat conform tehnologiei hidrotermice cea mai rspndit metod de pasteurizare folosit de
ctre cultivatorii de ciuperci [157].
Pentru pasteurizare s-a dispus de un vas cu volumul de lucru 4m3 i o capacitate de
ncrcare a materialului celulozic 10 baloturi de paie cu greutatea de 9-11 kg fiecare. Umezirea
baloturilor de paie s-a efectuat direct n vasul de fermentare i reprezint o etap foarte important,
fapt ce are ca scop asigurarea unei rezerve de umiditate pe tot parcursul cultivrii.
Umiditatea paielor la cultivarea bazidiomicetelor poate varia n limite destul de largi. Totui,
umiditatea mai mic de 70% duce la ncetinirea proceselor microbiologice ce au loc n substratul
supus fermentrii. Cnd umiditatea substratului depete 80% - se micoreaz volumul fazei
gazoase i se activeaz dezvoltarea bacteriilor anaerobe de putrefacie, nrutind prin aceasta
colonizarea substratului de ctre miceliul ciupercii [142]. Astfel, prin stropiri repetate a baloturilor
de paie substratul celulozic a fost umezit pn la 70-75%.
Sursa termic a servit aburii fierbini provenii de la elementele de nclzire a apei. Dispuse n
partea de jos a vasului, elementele de nclzire au fost acoperite cu ap i desprite de substratul
celulozic printr-o plas metalic, astfel ptrunderea aburului s-a fcut direct n masa substratului.
Aburul a fost injectat progresiv timp de 3 ore pn la realizarea temperaturii de 60-650C, dup
care a sczut la 50-550C, unde s-a meninut 32 ore (Figura 2).

70
60

50
40
30
20
10
0
0

12

24

36

48

60

72

ore
Figura 2. Variaia temperaturii (0C) substratului n procesul de pasteurizare a paielor de
gru

33
Procedeul de pregtire a substratului nutritiv prin pasteurizare urmrete scopul creterii i
multiplicrii n mas a bacteriilor termofile care utilizeaz toate formele de zaharuri existente, ceea
ce condiioneaz lipsa nutrienilor pentru mucegaiurile competitoare. Aplicarea acestei metode a
fost dictat de necesitatea crerii unei selectiviti biologice prin multiplicarea n masa substratului
nutritiv a bacteriilor termofile care asigur protecia biologic mpotriva competitorilor P. ostreatus.
Mecanismul aciunii bacteriilor temofile const i n crearea unui antagonism tipic pasiv, care are
mai mari urmri asupra ciupercilor competitoare, dect asupra miceliului P. ostreatus [59].
Rcirea materialului celulozic pasteurizat s-a executat n condiii igienice, utiliznd pentru
aceasta iradierea n prealabil a spaiului de dezinfectare termic cu lmpi bactericide. Dup
micorarea temperaturii pn la 24-280C, substratul nutritiv a fost nsmnat cu cultura ciupercii.
Calitatea i cantitatea miceliului introdus n substrat sunt factorii ce determin obinerea unei recolte
stabile de carpofori. La cultivarea industrial a ciupercii Pleurotus se folosete miceliu semincer
crescut pe suport de graminee, cantitatea necesar unei colonizri rapide i eficiente la cultivarea
intensiv fiind de 3-5% fa de masa substratului [40]. Pentru inoculare a fost folosit miceliu
semincer n cantitate de 4,0 4,8% fa de substratul nutritiv umed. nsmnarea miceliului
granulat s-a fcut prin dispersarea i amestecarea acestuia n masa substratului, astfel, prin
numeroasele puncte de contact pe care le prezint, acesta reduce cu mult timpul mpnzirii i
posibilitatea de a se contamina.
Pentru incubare au fost folosii saci de polietilen neperforai de mrimea 5070cm, fiecare
sac cu substrat celulozic nsmnat atingnd o greutate de 6-8kg. Dup inocularea substratului cu
miceliul ciupercii, n rezultatul proceselor metabolice, are loc majorarea coninutului de CO2 n
substrat. Crearea condiiilor de anaerobioz nu mpiedic creterea i maturarea miceliului deoarece
cultura ciupercii se dezvolt bine i n prezena unei cantiti nsemnate de CO2 n substrat.
Coninutul nalt de CO2 nu numai c stimuleaz creterea miceliului bureilor, dar i inhib
dezvoltarea microorganismelor concurente pentru substratul nutritiv [99]. Astfel, stabilitatea nalt
fa de concentraiile mrite de CO2 n substraturi este un factor esenial n biotehnologia cultivrii
intensive a ciupercii P. ostreatus.
Termostatarea substratului nutritiv nsmnat s-a executat la temperatura de 24-260C n
condiii de obscuritate deoarece lumina nu influeneaz mpnzirea materialului celulozic. Dup 2-3
zile, n rezultatul intrrii miceliului granulat n vegetaie, paiele au nceput s se mpnzeasc (Fig.
3). Temperatura substratului n aceast perioad a crescut cu 4-50C, de aceea, pentru evitarea
situaiei de autoaprindere a fost necesar ventilarea i amplasarea termometrului n masa acestuia.

34

Figura 3. Termostatarea substratului nutritiv la cultivarea ciupercii P. ostreatus

mpnzirea complet a substratului celulozic cu miceliul ciupercii a durat 16-23 zile, dup
care sacii au fost trecui n camera de fructificare. Sacii cu substrat au fost aranjai unul peste altul
pe crucioare mobile, astfel nct nlimea brichetelor a ajuns pn la 1,5-1,8m, ceea ce a dus la o
folosire maxim posibil a suprafeii de cultivare (Fig. 4).
Cercetarea morfogenezei carpoforilor Pleurotus (Fig. 5) arat c dezvoltarea bazidiocarpului
se afl ntr-o dependen de anumii factori fizici, ca temperatura, umiditatea, iluminarea i
coninutul de CO2. Realizarea unui randament sporit la cultivarea intensiv a ciupercii P. ostreatus
poate fi asigurat prin utilizarea camerelor cu reglare automatizat a condiiilor de microclim, de
aceea, camera de fructificare a fost amenajat cu aparataj tehnic de reglare a tuturor condiiilor
(temperatura, umiditatea, aeraia) de meninere a microclimei necesare fructificrii pstrvului de
fag (Fig. 6).
Regimul termic are o semnificaie important n toate etapele de cretere i dezvoltare ale
ciupercii, temperatura optimal de fructificare a speciei Pleurotus ostreatus aflndu-se n limitele
13-150C. Aplicarea ocului termic pentru cultura P. ostreatus este obligatorie i const n scderea
temperaturii cu 10-200C fa de cea a incubrii. Cu ct temperatura ocului termic este mai joas, cu
att perioada aplicrii lui este mai scurt. Astfel, temperatura mediului ambiant din camera de
fructificare a fost de 7-140C suficient pentru declanarea ocului termic, dar mai joas dect cea

35
optimal indicat fructificrii acestei specii. Dup 10 zile de la nceputil ocului termic s-a efectuat
deschiderea sacilor prin terea i ndeprtarea foliei de polietilen.

Figura 4. Cultivarea ciupercii Pleurotus ostreatus pe crucioare mobile

Figura 5.Morfogeneza carpoforilor Pleurotus ostreatus

36

Figura 6. Aparatajul tehnic pentru crearea condiiilor de microclim la cultivarea

ciupercii Pleurotus ostreatus
Atitudinea fa de condiiile umiditii la cultivarea pstrvului sunt diferite. Dac n timpul
iniierii fructificrii umiditatea relativ a aerului a fost de 90-95%, apoi pentru dezvoltarea normal
a carpoforilor 75-80%. Stropirea a fost aplicat prin pulverizare, utiliznd n acest scop presiunea
din reeaua orneasc.
Aeraia i concentraia de CO2 n aer are o influen asupra ambelor faze morfologice:
formarea primordiilor i maturizarea carpoforilor. n perioada de maturizare-recoltare, cnd
depirea concentraiei bioxidului de carbon de peste 0,1% poate duce la o dezvoltare anormal a
carpoforilor, aerisirea are un rol primordial [52, 53]. De aceea, aerisirea necesar s-a efectuat prin
asigurarea a 6-8 schimburi de aer/or, fr cureni de aer puternici pentru a nu provoca uscarea
brichetelor.
Sub influena luminii au loc diverse procese biochimice i biofizice ce conduc la reacii
morfologice i fototrope. n condiii de iluminare insuficient piciorul se alungete, iar plria
rmne mic. Lipsirea cu desvrire a luminii duce la o depigmentare total n rezultatul creia
ciupercile iau forma unui coral [98, 102]. Astfel, dac la iniierea fructificrii este necesar
iluminarea ciupercii Pleurotus cu 30-40 luci, apoi pentru fructificarea propriu-zis 80-100 luci
n decurs de 12 ore/zi. Totodat, pentru dezvoltarea normal a carpoforilor, ncepnd cu faza de
primordie, o importan deosebit o are cantitatea total a iluminrii [28]. Asigurarea iluminrii
necesare a fost realizat prin amplasarea a cte dou tuburi fluorescente de 60W deasupra

37
crucioarelor la fiecare 3m., astfel nct iluminarea tulpinilor testate de P. ostreatus a fost de 60-80
luci n decursul a 12 ore, cantitatea total fiind de 720-960 luci/zi, ceea ce este ndeajuns pentru
morfogeneza fructificrii normale a culturii pstrvului de fag.
Ciclul tehnologic de cultivare a durat mai mult dect se preconiza: 95-148 zile pentru 3-4
valuri de recoltare. Recolta medie la diferite tulpini P. ostreatus a variat de la 17,6 pn la 24,7%
fa de substratul nutritiv nsmnat (Tab.3).
Tabelul 3
Recolta carpoforilor la cultivarea ciupercii Pleurotus ostreatus pe paie de gru
Tulpina
Pleurotus
ostreatus

M1
M2
M4
M5
M6
1010
M11

I val de
recoltare,
% fa de
total

II val de
recoltare,
% fa de
total

III val de
recoltare,
% fa de
total

IV val de
recoltare,
% fa de
total

Desfurarea
ciclului
tehnologic,
zile

49,3
47,2
53,0
46,3
50,6
50,1
44,2

31,2
23,8
23,1
39,0
30,5
27,6
36,5

19,5
25,3
19,8
14,7
12,8
22,3
19,3

3,7
4,1
6,1
-

135
148
148
95
148
108
108

Recolta
medie,
% fa de
substratul
nutritiv
24,72,7
17,61,6
23,02,5
18,01,2
20,12,2
20,72,3
17,92,0

Procentual, media recoltei obinute pentru 3-4 valuri de fructificare este urmtoarea: I val - 4453% (n medie circa 50%); II val - 23-39% (media 26%); III val - 13-25% (media 19%); IV val
- 4-6% (media 5%).
Desfurarea ciclului tehnologic n timp s-a prezentat astfel: I val - 67-74 zile; II val - 85-100;
III val - 109-130; IV val -148. Pentru dou valuri de recolt a fost necesar 85-100 zile, recolta
ajungnd la 74-80% din totalul ei.
Din culturile examinate cele mai productive tulpini s-au dovedit a fi P. ostreatus M1 cu
recolta de 24,7%, P. ostreatus M4 cu 23,0% i P. ostreatus 1010 cu 20,7%. Conform datelor din
literatura de specialitate [129], recolta medie a bureilor cultivai pe paie de gru la modul intensiv
este de circa 15% pentru dou valuri de recoltare, deoarece valurile III i IV sunt nesemnificative i
ineficiente. n cazul nostru, dac nu lum n consideraie al III-ea i al IV-ea val de recolt, obinem
circa 16-20%, ceea ce denot c tulpinile sus-menionate au un potenial mare, graie rezultatelor
obinute.
Eficacitatea biologic a tulpinilor testate de P. ostreatus la cultivarea acestora pe paie de gru
se prezint astfel (Fig. 7):

38

88,2
90

82,8

82,1

85

EB,%

80

72,0

75

71,6
66,9

62,8

70
65
60
55
50
M1

M2

M4

M5

M6

1010

M11

Tulpinile P. ostreatus

Figura 7. Eficacitatea biologic (EB) a unor tulpini P. ostreatus cultivate pe paie de gru
Cei mai mari indici ai eficacitii biologice au fost nregistrai la tulpinile P. ostreatus M1, M4
i 1010: 88,2, 82,1 i respectiv 82,8%.
Astfel, n cadrul procesului selectiv al ciupercii P. ostreatus s-a utilizat un screening raional
ealonat, ceea ce a permis alegerea unor tulpini cu mai multe caliti dorite. n consecin, n urma
studiului efectuat am selectat tulpinile P. ostreatus M1, M4 i 1010, care pot fi recomandate att
pentru obinerea unei recolte nalte de carpofori, ct i pentru o productivitate major a biomasei i
biosintez de enzime hidrolitice la cultivarea submers. Tulpinile P. ostreatus M1, M4 i 1010 au
fost depozitate n Colecia Naional de Microorganisme Nepatogene (CNMN), numerele de
nregistrare atribuite fiind: P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i respectiv CNMN-FB-04.
n funcie de caracterele morfo-culturale i biochimice ale tulpinilor selectate de pstrv
acestea i pot gsi urmtoarele aplicaii:

tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 surs de carpofori (EB=88,2%), biomas (13,0g/l

BAU) i celulaze extracelulare (85-90% i 0,7-1,5 U/ml pentru celulaza lichefiant i
respectiv zaharolitic);

tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 surs de carpofori (EB=82,1%) i biomas

(12,0g/l BAU);

tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 surs de carpofori (EB=82,8%) i proteaze (8487% pentru proteaza lichefiant).

Reieind din acest fapt, se va elucida posibilitatea de utilizare a tulpinilor selectate n

elaborarea unei baze tiinifice cu o aplicare larg n biotehnologie.

39

CAPITOLUL IV
PARTICULARITI BIOLOGICE DE CULTIVARE A CIUPERCII
PLEUROTUS OSTREATUS N FAZA SOLID DE FERMENTARE

4.1 Cultivarea ciupercii P. ostreatus pe medii nutritive agarizate

Utilizarea mediilor nutritive agarizate prezint cele mai accesibile i eficiente tehnici de
referin pentru elucidarea caracterelor morfo-culturale la bazidiomicete, mediile universale
standardizate cele mai practicate fiind mustul i malul de bere agarizate [127].
4.1.1 Aciunea surselor de carbon i azot asupra creterii miceliului P. ostreatus pe medii
agarizate. Determinarea aciunii surselor de carbon i azot asupra creterii miceliului P. ostreatus
pe mediu agarizat constituie o metod potrivit, dat fiind gradul nalt de operativitate pe care-l
asigur. Totui, rezultatele obinute n acest caz sunt numai de ordin orientativ i nu pot fi
comparate n mod obiectiv cu cele cultivate pe medii lichide unde se calculeaz biomasa acumulat
pe unitate de timp.
Scopul investigaiilor este elucidarea caracterelor morfo-culturale i stabilirea necesitilor
nutritive n funcie de sursa de carbon sau azot asimilat n posibilitatea de aplicare a rezultatelor
obinute la producerea pe scar larg a miceliului de ciuperci P. ostreatus. Stabilirea adecvat a
exigenelor de nutriie n funcie de sursele de C sau N testate necesit prezena substanelor definite
i exact dozate, propriu mediilor nutritive sintetice. Pentru aceasta, mediul standard agarizat cu mal
de bere a fost nlocuit cu mediul agarizat Czapek, dat fiind faptul c ultimul corespunde cerinelor
naintate i este des practicat la cultivarea fungilor.
Cercetarea caracterelor morfologice i culturale ale reprezentanilor tulpinilor P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 a fost efectuat pe mediul nutritiv agarizat Czapek
cu nlocuirea surselor de azot sau carbon testate. n calitatea sursei unice de carbon au fost studiate
monozaharidele glucoza, galactoza xiloza, arabinoza; dizaharidele maltoza, zaharoza, lactoza;
polizaharidul amidon i alcoolul manit. Sursa de azot a servit mediul nutritiv cu NaNO3 (0,2
g/l), intensitatea de cretere fiind caracterizat prin calcularea coeficientului de cretere (CC) la a 3ea i a 6-ea zi de cultivare (Tab. 4).
Observrile fcute ne demonstreaz, c glucoza nu este ntocmai cea mai preferenial surs
unic de carbon pentru tulpinile P. ostreatus studiate, iar pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04
pe mediul cu glucoz s-a nregistrat o cretere foarte slab.
Sursa cea mai puin preferenial pentru toate tulpinile studiate de P. ostreatus s-a dovedit a fi
lactoza. Sursa optimal de carbon pentru P. ostreatus CNMN-FB-02 a fost maltoza, pentru P.
ostreatus CNMN-FB-03 - zaharoza, arabinoza, xiloza i maltoza, iar pentru P. ostreatus CNMN-FB-

40
04 manitul i zaharoza. Utilizarea preferenial a maltozei explic faptul creterii abundente a
miceliului P. ostreatus pe mediul cu mal de bere standardizat, astfel nct 90-92% din substana
uscat a acestuia reprezint hidrai de carbon, dintre care mai mult de jumtate (52,2%) maltoz
[177]. Alte surse de carbon sunt mai puin preferate nutriiei tulpinilor P. ostreatus testate.
Tabelul 4
Coeficientul de cretere (CC) al tulpinilor ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03
i CNMN-FB-04 pe mediul nutritiv Czapek agarizat cu diverse surse de carbon
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
Sursa de
Mm
Mm
Mm
carbon
3 zi
6 zi
3 zi
6 zi
3 zi
6 zi
21,90,4
13,90,3
22,50,1
17,20,3
16,40,9
12,80,4
glucoza
21,50,2
16,21,2
20,61,1
13,30,7
19,50,5
17,00,4
galactoza
18,70,8
15,50,5
18,61,3
16,00,6
xiloza
27,30,7
19,20,6
20,60,7
17,10,5
20,50,9
16,70,6
arabinoza
23,20,8
19,50,6
34,31,0
16,21,2
maltoza
22,50,2
22,01,5
27,31,7
19,00,3
21,90,6
15,31,1
zaharoza
27,00,1
19,50,5
32,70,4
26,50,5
17,00,6
9,80,2
14,61,1
14,30,7
19,61,2
11,20,1
lactoza
22,50,8
16,00,5
19,20,4
13,20,3
23,30,1
17,70,5
amidon
21,30,1
19,20,7
21,81,5
16,60,2
manit
28,61,2
26,90,7
Rezultatele obinute nu confirm unele date bibliografice de specialitate [91] cu privire la
folosirea preferenial a monozaharidelor fa de dizaharide, graie fosforilrii mai uoare a
primelor. Pentru sursele de carbon cu dizaharide, CC este mai mare dect pentru cel al surselor cu
monozaharide, cu excepie arabinozei pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03.
Tulpinile studiate de P. ostreatus folosesc att sursele de azot anorganice, ct i cele organice,
ns gradul lor de asimilare este diferit (Tab. 5). Sursele principale ale azotului anorganic se
prezint sub forma srurilor de amoniu (NH4NO3, (NH4)3PO4, (NH4)2SO4) i nitrailor (NaNO3,
NH4NO3), iar cele ale azotului organic sub forma aminoacizilor (asparagina, acidul aspartic).
Sursa de carbon a mediului nutritiv agarizat Czapek a servit glucoza (4 g/l).
Tabelul 5
Coeficientul de cretere (CC) al tulpinilor ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03
i CNMN-FB-04 pe mediul nutritiv Czapek agarizat cu diverse surse de azot
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
Sursa de
Mm
Mm
Mm
azot
3 zi
6 zi
3 zi
6 zi
3 zi
6 zi
10,50,9
7,90,2
14,50,3
11,20,1
9,40,1
7,00,4
NaNO3
10,80,7
31,41,8
18,80,8
22,50,1
12,71,2
25,21,8
NH4NO3
11,80,8
19,00,9
22,50,1
15,81,2
(NH4)2SO4
35,81,5
41,10,7
10,70,4
19,21,3
21,10,9
(NH4)3PO4
34,42,0
27,00,2
43,61,5
11,70,6
25,01,0
16,81,1
17,41,3
33,10,6
asparagina
28,21,1
11,30,6
24,81,7
13,50,4
18,00,3
14,71,1
17,71,1
ac. aspartic

41
n conformitate cu rezultatele obinute, srurile de amoniu pentru creterea tulpinilor studiate
ale ciupercii P. ostreatus sunt cele mai eficiente. Sursa de azot optimal pentru tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-02 s-a dovedit a fi (NH4)2SO4 i (NH4)3PO4, pentru P. ostreatus CNMN-FB-03
asparagina i (NH4)2PO4, iar pentru P. ostreatus CNMN-FB-04 - (NH4)3PO4 i (NH4)2SO4. Numai
n cazul sursei cu NaNO3 s-a nregistrat o cretere slab pentru toate tulpinile de P. ostreatus, ceea
ce denot faptul, c nitraii sunt folosii mult mai slab fa de sursele organice i anorganice cu
amoniu. Aceste rezultate sunt diferite de cele din literatura de specialitate care susine c sursele de
azot anorganice sunt folosite de P. ostreatus mai slab fa de cele organice [44]. S-a constatat c
asparagina este cea mai bun surs de azot pentru multe bazidiomicete celulozolitice [8]. n cazul
nostru numai pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 sursa de azot organic optimal a fost
asparagina, pentru P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04 prefereniale au fost sursele
anorganice (NH4)3PO4 i (NH4)2SO4.

Datorit variabilitii fenotipice existente n cadrul

speciei, caracterele morfo-culturale la cultivarea tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB03 i CNMN-FB-04 pe medii nutritive cu diverse surse de carbon i azot variaz (Tab. 6). Totodat,
rezultatele cptate la selectarea surselor de carbon i azot pe medii agarizate nu ntotdeauna se afl
ntr-o interdependen reciproc cu cele cultivate pe medii lichide, fapt confirmat att n literatura
de specialitate, ct i n cercetrile proprii.
Generaliznd cele expuse, putem meniona remarcabila diversitate i individualitate fa de
nutrienii consumai la tulpinile P. ostreatus testate. Dintre sursele de carbon studiate dizaharidele,
ca maltoza (P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03) i zaharoza (P. ostreatus CNMN-FB-03 i
CNMN-FB-04), monozaharidul galactoza (P. ostreatus CNMN-FB-03) i alcoolul manit (P.
ostreatus CNMN-FB-04) s-au dovedit a fi cele mai eficiente creterii i dezvoltrii tulpinilor de P.
ostreatus testate. n acelai timp, sursa de carbon cea mai puin preferenial pentru nutriia
ciupercii P. ostreatus este lactoza. Dintre sursele de azot studiate srurile de amoniu - (NH4)3PO4,
(NH4)2SO4 (P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04) i asparagina (P. ostreatus
CNMN-FB-03) sunt cele mai eficiente pentru nutriia tulpinilor P. ostreatus testate. Srurile cu
nitrai sunt folosite mai slab dect cele cu amoniu, cea mai slab cretere pentru toate tulpinile P.
ostreatus studiate nregistrndu-se n cazul sursei cu NaNO3.
Rezultatele cercetrilor efectuate pot fi folosite la elaborarea practicilor de diversificare a
mediilor nutritive agarizate i obinerii inoculumului de pstrv pentru reproducerea pe scar larg a
materialului semincer.

42
Tabelul 6
Caracterele morfo-culturale la P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB04 cultivate pe medii agarizate cu diverse surse de carbon i azot
Tulpina
P.ostreatus
CNMNFB02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04

Sursa

glucoz

galactoz

xiloz

arabinoz

maltoz

zaharoz

lactoz

amidon

manit

NaNO3

NH4NO3

(NH4)2SO4

(NH4)3PO4

asparagina

ac.aspartic

Densitatea
coloniei

nlimea
coloniei,
mm

Creterea
liniar,
mm/zi

medie
rar
rar
medie
rar
medie
medie
rar
rar
medie
medie
medie
medie
rar
rar
medie
medie
medie
medie
rar
medie
medie
rar
rar
medie
rar
medie
medie
rar
rar
medie
rar
medie
medie
rar
medie
medie
medie
medie
medie
medie
medie

1,0-1,5
0,5-1,0
0,5-1,0
1,0-1,5
0,5-1,0
1,0-1,5
1,0-2,0
1,0-1,5
1,0-1,5
1,0-2,0
1,0-1,5
1,0-1,5
1,5-2,0
1,0-1,5
1,0-1,5
1,0-1,5
1,0-1,5
1,0-1,5
1,0-1,5
1,0-1,5
1,5-2,0
1,0-2,0
0,5-1,0
1,0-1,5
1,5-2,0
0,5-1,0
1,0-1,5
0,5-1,0
0,5-1,0
0,5-1,0
1,5-2,0
0,5-1,0
1,0-1,5
1,5-2,0
1,0-1,5
1,0-1,5
1,5-2,0
1,0-1,5
1,0-1,5
1,0-2,0
1,0-1,5
1,5-2,0

6,0-6,3
11,3-11,7
8,3-8,7
4,7-6,7
12,8-13,7
5,0-5,7
5,0-5,3
12,0-12,8
5,0-5,5
7,7-9,5
10,7-13,0
9,7-11,2
6,7-8,3
12,5-12,8
10,0-11,7
5,5-6,3
8,7-12,8
11,5-12,0
2,5-3,3
6,3-7,0
2,8-3,7
6,0-7,2
13,0-13,3
11,2-12,3
6,2-6,7
11,1-11,2
11,3-12,3
5,2-8,2
14,0-14,7
6,5-7,8
7,2-8,7
13,3-14,6
7,7-9,0
8,5-9,7
13,6-15,0
13,3-14,0
8,0-9,2
14,3-15,0
13,6-15,0
7,8-9,0
13,0-14,7
9,5-10,3

medie
rar
medie

1,5-2,0
1,0-1,5
1,0-1,5

7,5-9,3
12,7-14,0
10,7-13,0

Aspectul coloniilor

Cretere radial, zone concentrice difereniate, miceliul aerian

mai slab dezvoltat
Cretere slab radial, uneori cu
marginea coloniei neregulat
Miceliu aerian dezvoltat, puin
abundent
Miceliu alb, pufos, cretere slab
radial
Miceliu aerian, ascendent, pufos

Miceliu abundent, bine dezvoltat,

alb, compact
Cretere slab, miceliu aerian alb,
pufos
Miceliu alb, puin pufos, mai
consistent n partea central i
mai puin abundent la periferie
Miceliu bogat, lnos cu marginea
coloniei rotund
Miceliu srac, hife subiri abea
vizibile
Miceliu srccios, cordoane
hifale ramificate
Miceliu bogat, hife nclcite,
uneori difereniate n zone
concentrice
Miceliu bogat, exist cordoane
hifale asemntoare unor
mturice
Pigmentare galben-gri a mediului
nutritiv sub forma unor zone
concentrice
Zone concentrice de o tent
galben-gri a mediului nutritiv

43
4.1.2 Influena criteriului termic asupra creterii miceliului P. ostreatus. Spre deosebire de
temperaturile extreme, care sunt nocive, temperaturile moderate permit desfurarea normal a
proceselor metabolice, ansamblul acestor valori termice reprezentnd zona temperaturilor de
dezvoltare n care exist temperaturi minime, optime i maxime de dezvoltare pentru specia dat
[106].
Scopul cercetrilor propuse a constat n stabilirea temperaturii optime creterii miceliului P.
ostreatus i a particularitilor de termotoleran - pentru elucidarea capacitii de adaptare n
sistemele biotehnologice.
Diferenele de cretere la cultivarea tulpinilor P. ostreatus este rezultatul variabilitii
fenotipice, un interes deosebit prezentnd stabilirea optimului i limitei de temperatur. Valorile
termice minime, optime i maxime pentru specia dat sunt indicate n unele surse bibliografice de
specialitate [127, 129, 134]. Astfel, limita minim de cretere la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 a fost cercetat pentru temperaturile de 40 i 70C, maxim
pentru 380C, optim pentru 200, 250 i 300C. n calitate de mediu nutritiv standard a fost folosit
mediul cu mal de bere agarizat, cercetrile fiind efectuate pe cutiile Petri a cte 5 repetri fiecare.
Pentru temperatura optim estimarea creterii liniare i a coeficientului de cretere (CC) s-au
efectuat ncepnd cu ziua a treia pn la mpnzirea total a cutiei Petri, iar pentru temperaturile
limite de cretere pn la 26 zile de cultivare. Rezultatele influenei regimului termic asupra
creterii tulpinilor P. ostreatus studiate sunt prezentate n tabelul 7.
n conformitate cu rezultatele obinute, tulpinile P. ostreatus testate au avut valori ale CC
cuprinse ntre 3,2 i 6,9 uniti convenionale (u.c.) pentru temperatura de 40C, 5,9 11,4 u.c.
pentru 70C, 28,4 53,5 u.c. pentru 200C, 31,1 66,7 u.c. pentru 250C i 39,3 63,6 u.c. pentru
300C. Temperaturile de 250 i 300C s-au dovedit a fi n limitele creterii optimale a miceliului
tulpinilor P. ostreatus studiate. Indicii creterii liniare i ai CC la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB03 i CNMN-FB-04 pentru toate temperaturile testate au avut aproximativ aceleiai valori,
deosebirile cele mai mari fiind nregistrate la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 fa de P. ostreatus
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04.
Potrivit literaturii de specialitate, pentru identificarea bazidiomicetelor la nivel de specie
criteriul termic poate servi ca un indice taxonomic suplimentar, diferenele cele mai mari fiind
nregistrate la minimele i maximele de temperatur [134]. Tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 a
demonstrat o capacitate valoroas din punct de vedere al creterii miceliului la temperatur nalt
(380C). Rezistena fa de temperatura nalt este propriu speciei P. florida, n acelai timp,
consistena i mrimea carpoforilor tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-02 a prezentat caracteristici ale
speciei P. ostreatus. Fiind nrudite genetic i apropiate din punct de vedere al caracterelor morfo-

44
culturale, P. florida este considerat de unii cercettori [34] ca o ras geografic a speciei P.
ostreatus.

02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04

Temperatura

CNMN-FB-

Tulpina
P.ostreatus

Tabelul 7
Estimarea coeficientului de cretere pentru tulpinile ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 la diferite valori ale regimului termic
Durata cultivrii (zile)

12

19

26

3,20,2
5,20,1
6,60,3
5,90,1
11,40,3
9,90,5

4,20,4
5,90,6
5,90,5
6,00,6
10,40,3
8,60,7

4,80,3
6,90,4
6,30,5
5,90,8
8,70,5
9,00,8

70

28,41,2
43,72,2
43,62,8
31,11,2
52,61,1
52,91,0
39,31,2
57,81,5
49,81,2

38,42,4
45,92,0
49,93,0
44,21,8
57,22,7
56,73,2
49,52,4
55,11,5
57,11,5

38,42,0
44,81,8
51,02,8
57,81,6
62,92,2
66,72,7
60,32,0
60,41,8
63,62,0

36,11,5
45,22,1
53,53,2

20,01,6
-

26,01,8
-

24,21,4
-

20
250
300
380

Tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 nu au manifestat nici o cretere notabil

la temperatura de 380C. Dup 15 zile, aceste tulpini au fost reamplasate la temperatura de 150C
unde au nceput s creasc, n acelai timp, CC a fost mic (3 6 uniti convenionale), creterea
fiindu-i vizibil afectat de temperatura anterioar (380C).
Coloniile P. ostreatus prezint o bun dezvoltare pe mediul agarizat cu mal de bere, totodat,
caracterele morfologice fa de variaia temperaturii sunt diferite. Astfel, cea mai bun dezvoltare a
miceliului aerian la P. ostreatus a fost pentru temperatura de 200C, iar tulpina P. ostreatus CNMNFB-02 pentru temperaturile nalte (300 i 380C) a prezentat colonii de o densitate major (Tab.8).
Astfel, n rezultatul cercetrii influenei criteriului termic asupra creterii miceliului tulpinilor
de P. ostreatus, au fost stabilii parametrii optimi i minimi de cretere pentru P. ostreatus CNMNFB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04. Conform temperaturii minime de cretere (40), valorile CC
au fost cuprinse ntre 3,2-4,8 uniti convenionale pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02, 5,26,9 u.c. pentru P. ostreatus CNMN-FB-03 i 5,9-6,6 u.c. pentru P. ostreatus CNMN-FB-04.
Temperatura maxim de cretere (380C) a avut un efect fungistatic fa de P. ostreatus CNMN-FB-

45
03 i CNMN-FB-04, iar pentru P. ostreatus CNMN-FB-02 CC a prezentat valori cuprinse ntre 20,026,0 uniti convenionale. Optimum de dezvoltare coincide cu intervalul termic cuprins ntre 250 i
300C, la care s-a nregistrat cele mai mari valori ale CC la a 7-ea zi de cultivare: 57,8-60,3 u.c.
pentru P. ostreatus CNMN-FB-02, 60,4-62,9 u.c. pentru P. ostreatus CNMN-FB-03 i 63,6-66,7 u.c.
pentru P. ostreatus CNMN-FB-04. Tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 a avut o cretere relativ mai
slab fa de P. ostreatus CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pentru temperaturile 40, 70, 200, 250 i
300C. n acelai timp, P. ostreatus CNMN-FB-02 a manifestat o nsuire preioas de cretere a
miceliului la temperatur nalt (380C). Aceast capacitate prezint un interes practic i poate fi
utilizat n cadrul procesului selectiv n scopul ameliorrii speciei P. ostreatus.

46
Tabelul 8
Caracterele morfo-culturale ale tulpinilor ciupercii P. ostreatus la diverse valori ale regimului
termic
Tulpina
P.ostreatus
CNMN-FB02

Temperatura

03
40
04

02
03

70

04

02
03
200
04

02

03

250

04

02
300
03

04
02
03
04

38
0

Aspectul coloniilor

Miceliu aerian, lnos, puin

abundent
Aspect pufos, filamentos,
cretere slab radial
Miceliul aerian i de substrat de
o culoare alb, pufos, zone
concentrice difereniate
Miceliu aerian slab dezvoltat,
cretere radial, marginea
neregulat
Miceliu aerian dezvoltat, lnos,
cretere slab radial
Alb, pufos, cretere radial,
marginea regulat
Miceliu aerian pufos, alb,
compact, concentrat mai mult
n zona central a coloniei
Miceliu aerian bine dezvoltat,
ascendent, consisten medie
Miceliul aerian alb, pufos,
unele cu zone concentrice,
marginea rotund, regulat
Culoare alb, aspect pufos, de o
consisten normal, zone
concentrice difereniate
Miceliu lnos, hife dispuse
radial ce cresc spre periferie,
abundent
Miceliu aerian bine dezvoltat,
consisten normal, conturul
neted
Miceliul aerian i de substrat
pufos, pslos, abundent, cu
zone concentrice bine
difereniate
Miceliu aerian mai puin
abundent, cu zone concentrice
slab pronunate
Miceliul alb, lnos, dispus
radial, conturul neted
Miceliu pslos, alb, consistent
Fr de cretere
Fr de cretere

Densitatea
coloniei

nlimea
coloniei,
mm

Creterea
liniar,
mm/zi

medie

2-3

0,7-0,9

medie

2-3

0,8-1,1

medie

2-3

0,8-1,0

medie

1-2

1,4-1,6

medie

2-3

2,0-2,4

medie

2-3

1,8-2,2

medie

3-4

6,8-8,2

medie

3-5

9,1-9,6

medie

3-5

9,9-10,4

medie

2-4

7,8-11,8

medie

2-3

11,4-13,6

medie

3-4

11,5-13,5

dens

2-3

8,6-11,8

medie

2-3

11,9-13,8

medie

2-3

12,2-14,3

dens
-

3
-

2,7-3,2
-

47

4.2 Cultivarea intensiv a ciupercii P. ostreatus pe diverse substraturi

nutritive
Elaborarea tehnologiilor moderne de utilizare a reziduurilor agro-industriale, ct i majorarea
eficacitii de sintez a produselor proteice corespund cerinelor practice la realizarea bioconversiei
materiei vegetale. Capacitatea de cretere intensiv a ciupercilor putregaiului alb pe diverse
substraturi celulozice i-a gsit o larg utilizare n biotehnologia proceselor de convertire a materiei
secundare vegetale n produse cu valoare nutritiv ridicat. Astfel, la cultivarea bazidiomicetelor din
genurile Pleurotus, Panus, Flammulina, Coriolus etc. se pot obine carpofori, care sunt ntrebuinai
n alimentare, iar substratul fermentat mbogit cu proteine i substane bioactive ca adaos furajer
sau biongrminte [40, 97, 98, 151].
Din punct de vedere tehnologic, principalele avantaje ale biotehnologiei cultivrii intensive a
bazidiomicetelor sunt urmtoarele:
-

sunt energoeconomice, deoarece se pot desfura perfect la temperaturi obinuite n

intervalul 15-30 0C i la presiuni normale;

-

se pot realiza n camere cu reglarea automatizat a condiiilor de microclim, astfel c sunt

independente de condiiile climaterice i asigur un randament sporit de utilizare a resurselor

umane, energetice i materiale;
-

reprezint cicluri tehnologice finisate fr deeuri, astfel c nu produc poluarea mediului

nconjurtor, iar substraturile celulozice uzate se folosesc fie n furajarea animalelor sau ca
ngrminte bioorganice valoroase;
-

utilizeaz ca materie prim iniial deeurile poluante rezultate din industria agro-

industrial, alimentar, silvicultur etc.

4.2.1 Selectarea substraturilor nutritive. Anterior, n urma cercetrii unor aa caracteristici
ca capacitatea de cretere intensiv la temperaturi diferite, acumularea biomasei i activitatea
biosintetic la cultivarea submers, recolta carpoforilor etc. au fost selectate trei tulpini nalt
productive de Pleurotus ostreatus: CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 (Capitolul III).
Obiectivul cercetrilor const n trierea substraturilor nutritive pentru obinerea unei productiviti
majore de carpofori la cultivarea intensiv a tulpinilor ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMNFB-03 i CNMN-FB-04 selectate anterior. Pentru realizarea acestui obiectiv se impune necesitatea
folosirii substraturilor celulozice ce corespund unui randament maxim de valorificare, cheltuielilor
minime la recoltarea, transportarea i pstrarea acestora, accesibilitii etc. n Republica Moldova
cele mai accesibile i potrivite substraturi nutritive pentru prelucrare sunt: paiele de graminee,
cocenii i tulpinile lor, cojile de floarea-soarelui, deeurile rmase de la industria de prelucrare a
sfeclei de zahr i viei de vie, diverse tulpini de plante, rumeguul de lemn etc. Calitatea

48
tehnologic a substratului nutritiv la cultivarea pstrvului este determinat, n primul rnd de
capacitatea acestuia de a ndestula necesitile fiziologice ale ciupercii n cretere. Materiile prime
ce intr n componena substratului de nutriie se difereniaz n funcie de caracteristicile lor fizice
i sunt determinate de aa parametri, ca mrimea particulelor, porozitatea, capacitatea de reinere a
apei, densitatea specific etc. [129, 157].
Datorit structurii sale afnate, capacitii remarcabile de mbibare a apei i densitii optimale
(0,4-0,6kg/l) obinute prin brichetare n saci de polietilen, paiele de gru asigur ct se poate de
bine schimbul de gaze, de ap i substane nutritive pentru miceliul introdus la nsmnare [108,
157]. Caracteristicile parametrilor fizici (mrimea particulelor, porozitatea, capacitatea de umectare,
densitatea specific) pentru unele substraturi celulozice, ca rumeguul de lemn, cojile de floareasoarelui, cocenii de porumb sunt inferioare paielor, astfel nct utilizarea acestora n procesul de
fermentare nrutete calitatea tehnologic a substratului, iar eficacitatea biologic este sczut [6,
157, 183].
Substratul tradiional la cultivarea bureilor sunt paiele de graminee. Totui, majorarea recoltei
de carpofori pentru unele specii ce aparin genului Pleurotus poate fi realizat prin amestecul n
diferite proporii a substraturilor celulozice [6]. Eficacitatea nlocuirii pariale a paielor de graminee
cu alte substraturi celulozice este demonstrat de multe cercetri ce in de domeniul biotehnologiei
cultivrii ciupercii P. ostreatus [36, 47, 102, 148]. Efectund cercetri n aceast direcie am
constatat, c substituirea n proporie de pn la 1/3 a paielor de gru cu alte substraturi nutritive
(rumegu de lemn, coji de floarea-soarelui, coceni de porumb) nu a nrutit parametrii fizici ai
mediilor de cultivare. Astfel, reieind din cele expuse mai sus, pentru obinerea carpoforilor P.
ostreatus au fost alese substraturile nutritive n urmtoarele proporii:
1. paie (100%) - (PG),
2. paie + rumegu de lemn (2/3+1/3) - (PGL),
3. paie + coji de floarea-soarelui (2/3+1/3) - (PGFS),
4. paie + coceni de porumb (2/3+1/3) - (PGC).
n etapa selectrii celor mai productive tulpini P. ostreatus (Capitolul III), dezinfectarea
termic a fost realizat prin fermentarea substratului celulozic la temperatura 500 550C timp de 32
ore. O alt metod de dezinfectare a substratului nutritiv este prelucrarea termic a acestuia prin
ridicarea, n scurt timp, a temperaturii apei pn la 80 950C pentru o perioad de 1 5 ore
[128,129]. Imediat dup dezinfectare apa se scurge, iar substratul se rcete i se nsmneaz cu
cultura ciupercii. Acest mod de pasteurizare, folosit la acest capitol, nu urmrete crearea unei
selectiviti biologice a substratului, ci reprezint un oc termic pentru toat microflora substratului;
este scurt n timp i decurge practic fr pierderea masei uscate a substratului nutritiv.

49
Prin meninerea n ap n stare submers timp de 16 18 ore, substraturile testate au fost
umezite (72-76%), apoi supuse agentului termic la 95oC timp de 1 or. Pentru inoculare a fost
folosit miceliu semincer n cantitate de 3,8 4,2 % fa de substratul nutritiv umed.
Ca i pentru multe specii de bazidiomicete temperatura optimal creterii miceliului
P.ostreatus nu coincide cu temperatura necesar fructificrii. Conform rezultatelor obinute n
vederea aciunii temperaturii asupra creterii i dezvoltrii miceliului tulpinilor P. ostreatus CNMNFB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 (Capitolul 4.1.2), temperatura optimal se afl n limitele de
25-300C. Astfel, pentru temperatura de 280C mpnzirea complet a substraturilor a durat 11-12
zile. Diferene vizibile la mpnzirea substraturilor nu au fost nregistrate.
Dup mpnzirea complet a substraturilor (12 zile), sacii au fost scoi din termostat i plasai
n camera de fructificare, unde s-au meninut parametrii necesari fructificrii pstrvului de fag.
innd cont de faptul, c condiiile optimale fazelor vegetativ i reproductiv sunt diferite, pentru
fructificare au fost meninui urmtorii parametri: temperatura 1520C, umiditatea 80-90% (n
funcie de dezvoltarea carpoforilor), iluminarea utiliznd un sistem de tuburi fluorescente (50-200
luci timp de 12 ore/zi) i aeraia printr-un sistem de ventilare artificial (6-8 schimburi/or).
Desfurarea ciclului tehnologic pentru patru valuri de recoltare s-a prezentat astfel (Tab.9):
I val de recoltare 30-37 zile pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02, 32-36 zile
pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 i 36-55 zile pentru tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-04;
al II-lea val de recoltare 40-57 zile pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02, 48-62
zile pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 i 56-86 zile pentru tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-04;
al III-lea val de recoltare 70-88 zile pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02, 70-87
zile pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 i 74-113 zile pentru tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-04;
al IV-lea val de recoltare 100-117 zile pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02, 88117 zile pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 i 102-114 zile pentru tulpina P.
ostreatus CNMN-FB-04.
Primordiile la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03 pentru toate tipurile de
substraturi nutritive au aprut ntr-un interval de 22-28 zile, iar pentru tulpina P. ostreatus CNMNFB-04 la 30-49 zile (Fig. 8). Totui, carpoforii tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04 s-au maturizat
mai repede, i anume: la 5-6 zile fa de 7-10 zile pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i
CNMN-FB-03. Fructificarea s-a manifestat n 3-4 valuri de recoltare cu o peridiocitate de la 15 pn
la 32 zile fiecare. Pe parcursul experienei au fost msurate lungimea picioruelor, diametrul
plriilor, precum i greutatea carpoforilor (Tab. 10, 11).

50
Tabelul 9
Desfurarea n timp a ciclului tehnologic la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivate pe diverse substraturi celulozice
IV
III
II
I
Apariia
Tulpina
recolt, recolt, recolt, recolt,
Substratul
primordiilor,
P.ostreatus
CNMN-FBzile
zile
zile
zile
zile
102-117
78
56
31
22-23
02
117
87
61
35
25
03
PG
114
90-97
61-69
36-48
30-43
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04

PGL

24-28
23-24
48

30-34
33-34
54

56-57
55-62
86

86
77
113

113
100-104
-

PGFS

22-23
26
42-49

30
36
48-55

45-52
56-62
78-82

70-88
74-84
106

104
-

PGC

24-28
23
31-44

32-37
32
37-50

52-57
48
56-73

80-84
70-80
74-87

100
88-100
102

Analiznd datele din tabel, observm c pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 carpoforii
au dimensiuni i greuti mai mari dect pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB03. Plria ciupercii este socotit ca cea mai valoroas parte a carpoforului. De aceea, tulpina P.
ostreatus CNMN-FB-03 este mai valoroas din punct de vedere al calitilor tehnice n ceea ce
privete raportul dintre picior i plrie. Cu mici excepii, media greutii, lungimii piciorului i
diametrului plriei carpoforilor dup primul val de recoltare au indicii cei mai mari. Aceasta
denot faptul, c n prima faz de cultivare mediul nutritiv este optim dezvoltrii i creterii
ciupercii, dup ce selectivitatea substratului scade.
Pstrvul de fag are carpoforul gimnocarp, lipsit de velum i din aceast cauz eliberarea
sporilor se face pe msur ce plria se formeaz. Cu plrie n prima faz de primordie, la sfrit
carpoforul capt aspectul unui cornet (Fig. 9).
Aspectul exterior al carpoforilor P. ostreatus a fost examinat i exemplificat conform fazelor
fenologice. Dup Mateescu N. [57] se disting urmtoarele faze fenologice: primordii, cornet de
tineree, margine convex, margine dreapt, margine concav, margine rsucit i cornet de
btrnee (Fig. 8, 9, 10, 11).

Tabelul 10
Caracterele morfo-culturale ale carpoforilor P. ostreatus cultivai pe diverse substraturi celulozice

Lungimea
piciorului, cm
Mm

Diametrul
plriei, cm
Mm

Greutatea
medie a unui
carpofor, g
Mm

Lungimea
piciorului, cm
Mm

Diametrul
plriei, cm
Mm

Greutatea
medie a unui
carpofor, g
Mm

Lungimea
piciorului, cm
Mm

Diametrul
plriei, cm
Mm

Greutatea
medie a unui
carpofor, g
Mm

IV recolt

Greutatea
medie a unui
carpofor, g
Mm

III recolt

Diametrul
plriei, cm
Mm

II recolt

Lungimea
piciorului, cm
Mm

Substratul

Tulpina
P.ostreatus
CNMN-FB-

I recolt

PG

5,80,6
2,00,1
4,50,4

7,50,8
5,40,5
6,30,6

28,04,7
16,52,1
22,42,4

3,80,2
1,80,2
3,10,3

5,20,4
5,80,4
8,70,9

10,81,3
15,91,4
36,24,5

2,00,1
1,90,2
3,70,3

4,00,1
4,60,3
6,50,5

10,00,1
9,91,0
19,02,3

4,80,3
3,50,1
2,00,1

5,50,4
5,00,1
4,00,1

11,01,1
8,30,2
5,00,1

02
03
04

PGL

4,50,3
1,70,1
5,20,5

6,40,6
4,70,5
6,80,7

17,31,4
12,31,4
29,03,2

3,80,3
1,80,1
4,20,4

5,40,4
5,20,4
6,00,5

9,31,1
12,71,3
19,31,8

3,20,3
1,50,1
4,90,3

6,30,6
4,30,3
5,50,4

13,61,2
7,30,8
18,01,5

4,00,1
1,50,1
-

5,00,1
3,00,1
-

5,00,1
5,00,1
-

02
03
04

PGFS

3,40,3
2,00,1
5,40,5

6,00,4
5,80,6
8,60,8

13,42,0
18,72,2
46,65,6

3,00,3
2,20,2
5,00,4

5,00,5
5,40,5
6,40,7

8,41,5
11,61,3
21,32,4

3,20,3
2,10,1
4,20,5

5,20,4
4,70,3
5,30,4

8,20,9
11,41,0
8,60,6

3,00,1
-

5,00,1
-

15,00,1
-

PGC

5,90,5
2,00,2
6,30,5

7,40,8
4,30,3
8,80,9

21,84,7
11,01,6
39,04,3

3,30,3
2,00,1
4,40,5

4,70,5
5,10,4
8,30,8

7,00,5
9,90,7
35,64,0

3,40,2
2,10,1
4,60,4

3,80,3
5,50,1
7,20,6

8,20,7
16,61,7
21,12,6

3,90,2
2,40,1
3,80,2

6,30,3
4,10,2
5,50,3

8,10,6
10,20,8
13,61,0

02
03
04

02
03
04

52

Figura 8. Fazele fenologice primordii i cornet de tineree la Pleurotus ostreatus cultivat

pe paie de gru
Tabelul 11
Caracterele morfo-culturale ale carpoforilor P. ostreatus cultivai pe diverse substraturi
celulozice (media ciclului tehnologic pentru 3-4 valuri de fructificare)
Lungimea
Diametrul
Greutatea
Numrul
Tulpina
Substratul
piciorului,
plriei,
medie a unui carpoforilor
cm
cm
carpofor, g
la 1 kg de
P.ostreatus
Mm
Mm
Mm
substrat
CNMN-FB4,60,4
6,10,5
17,32,8
10,4
02
2,00,1
5,40,4
14,81,6
10,9
03
PG
4,00,3
6,60,9
22,62,6
8,6
04
4,10,3
6,00,5
13,71,2
10,2
02
1,70,1
4,70,4
11,31,2
11,4
03
PGL
4,70,4
6,20,6
22,52,2
8,6
04
3,30,3
5,60,4
11,21,7
11,1
02
2,10,1
5,50,5
15,41,7
8,7
03
PGFS
4,90,5
6,90,7
27,03,1
5,4
04
4,00,3
5,30,5
10,91,5
13,7
02
2,10,1
4,70,3
11,21,2
12,0
03
PGC
4,90,4
7,50,7
28,63,1
6,3
04

53

Figura 9. Faza fenologic de margine rsucit la Pleurotus ostreatus CNMN-FB-04

(aspect de cornet)

Figura 10. Fazele fenologice de margine convex i margine dreapt la tulpina ciupercii
Pleurotus ostreatus CNMN-FB-02 cultivat pe paie de gru

54

Figura 11. Faza fenologic margine dreapt la tulpina ciupercii Pleurotus ostreatus
CNMN-FB-03
Piciorul este situat marginal, de aceea carpoforul are plria puternic excentric, situat
asimetric fa de picior. Suprafaa plriei la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 este neted, deseori
ondulat, de nuan alb-cenuie pn la galben-brun (Fig. 10). Pentru tulpina P. ostreatus CNMNFB-03 suprafaa plriei este neted, de o nuan crem-alb (Fig. 12) pn la cenuie (Fig. 13, 14)
sau brun-nchis (Fig. 11), iar la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 - de o nuan brun-nchis pn
la cenuie, cu marginile mai nchise (Fig. 5, 9). Ciupercile apar n buchet, cuprinznd de la 1-2 pn
la 10-15 carpofori cu plriile suprapuse (Fig. 10). La baza buchetului carpoforii au dimensiuni mai
mari dect cele amplasate superior i ating n medie 50-70 mm n diametru.
Culorile gri sau galben-brun a plriilor Pleurotus se datoreaz acumulrii n prezena unei
intensiti luminoase sporite a pigmenilor galbeni (flavonelor) sau oranj (carotinoidelor). Deficitul
de lumin sau ntunericul profund duce la depigmentarea plriilor i, ca rezultat, acestea devin
albe. n afar de aceasta, exist tulpini de P. ostreatus la care culoarea alb a plriilor are un
caracter ereditar i e controlat de o singur gen recesiv [4]. Speciile de Pleurotus ce fructific la
temperaturi mai mari de 240C pot avea la fel plrii albe [17, 48]. n acelai timp, carpoforii P.
ostreatus CNMN-FB-03 cultivai n condiii de ser la temperaturi mai nalte (1910C) dect cele ce
sunt indicate acestei specii (1520C) au prezentat plrii de culoare crem-alb (Fig. 12). Dup I val
de recolt, tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 a fost reamplasat n condiii naturale (temperatura
930C, iluminarea natural i aerisirea liber), carpoforii aprui deosebindu-se esenial fa de cei
cultivai n condiii de ser.

55

Figura 12. Morfogeneza carpoforilor P. ostreatus CNMN-FB-03 cultivai n condiii de

ser la temperatura 1910C

Figura 13. Morfogeneza carpoforilor P. ostreatus CNMN-FB-03 cultivai n prezena

factorilor abiotici naturali la temperatura de 930C

Figura 14.Faza fenologic margine convex la carpoforii tulpinii P. ostreatus CNMN-FB03 cultivai n prezena factorilor abiotici naturali la temperatura de 930C

56
Morfogeneza carpoforilor P. ostreatus CNMN-FB-03 n prezena factorilor abiotici naturali
atest structuri reproductive difereniate: plria ciupercii este de o culoare bej, la maturitate
convex, de o consisten mai compact dect pentru cele cultivate la temperaturi mai nalte
(1910C) (Fig. 13, 14). Piciorul nserat lateral este robust, de culoare gri deschis, ngroat i acoperit
parial cu puf alb (Fig. 14).
Procentual, media recoltei obinute pentru 3-4 valuri de recoltare a fost urmtoarea: pentru I
val 40-68% (media circa 55%); al II-lea val 22-34% (media 29%); al III-lea val 4-25% (media
12%); al IV-lea val 1-12% (media 4%) (Tab. 12).
Tabelul 12
Recolta carpoforilor la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
cultivate pe diverse substraturi celulozice
Recolta
medie,
(%
II val de III val de IV val de
I val de
Tulpina
fa de
Substratul recoltare, recoltare, recoltare, recoltare,
P.ostreatus
CNMN-FBsubstratul
%
%
%
%
nutritiv)
61,6
30,5
2,1
5,8
02
18,22,3
61,5
25,0
9,5
4,0
03
PG
19,52,0
52,5
22,0
24,7
0,8
04
21,82,8
63,7
22,9
12,5
0,9
02
17,51,9
53,4
33,0
10,8
2,8
03
PGL
14,12,2
46,7
36,9
16,4
04
20,82,5
68,3
26,7
5,0
02
13,52,2
64,0
25,1
9,1
1,8
03
PGFS
13,31,1
60,2
33,0
6,8
04
16,41,4
49,0
28,5
14,3
8,2
02
16,42,0
40,4
32,3
17,4
9,9
03
PGC
14,21,9
45,8
30,7
11,6
11,9
04
22,21,1
Recolta carpoforilor a fost calculat conform raportului procentual ntre masa carpoforilor
proaspei i masa substratului umed. Din culturile examinate cea mai productiv tulpin pentru toate
substraturile testate s-a dovedit a fi P. ostreatus CNMN-FB-04 cu recolta cuprins ntre 16,4 i
22,2% fa de substratul nutritiv umed pentru 3-4 valuri de recoltare. Substratul de paie (PG),
tradiional la creterea bureilor, s-a dovedit a fi aproape optimal cultivrii celor trei tulpini testate,
valorificnd o recolt de ciuperci de la 18,2 pn la 21,8%.
Este notabil faptul, c tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 cultivat pe mediul PGC a nregistrat
cea mai nalt recolt 22,2%. Fa de tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03, tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-02 a fost mai productiv la recolta de carpofori pentru toate mediile nutritive, cu
excepia paielor (PG), unde P. ostreatus CNMN-FB-03 a acumulat 19,5% fa de 18,2% pentru
tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02. Cea mai mic recolt de carpofori la toate tulpinile de P.
ostreatus s-a nregistrat pe mediul PGFS 13,3-16,4%.

57
Eficacitatea biologic a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
cultivate pe diverse substraturi celulozice se prezint astfel (Figura 15).
Pleurotus ostreatus

100

EB,%

80

80,8
74,3
68,9

68,6
51,0
46,0

60

68,2
45,2

48,1 53,2

55,551,9

CNMN-FB-02
CNMN-FB-03

40

CNMN-FB-04

20
0
PG

PGL

PGFS

PGC

Figura 15. Eficacitatea biologic (EB, %) a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02,

CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivate pe diverse substraturi celulozice
Cei mai mari indici ai eficacitii biologice la toate tulpinile de P. ostreatus au fost nregistrai
pentru paie de gru (PG) 68,9-80,8%, iar tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 s-a dovedit a fi cea
mai productiv pentru toate substraturile testate: 53,2-80,8%. Cu toate c tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-04 cultivat pe substratul PGC a nregistrat cea mai nalt recolt de carpofori (22,2%,
Tab.10), eficacitatea biologic este mai sczut, fapt ce se datoreaz umiditi nalte a carpoforilor
(92%).
Conform literaturii de specialitate [144] al III-lea i al IV-lea valuri de recoltare sunt
nesemnificative, de aceea nu sunt colectate. Rentabilitatea valorificrii carpoforilor n funcie de
valurile de recoltare poate fi estimat reieind din raportul costului produciei de ciuperci realizate i
a cheltuielilor de consum. Analiznd datele experimentale privind obinerea recoltei de carpofori
(Tab. 12) i reieind din timpul necesar desfurrii ciclului tehnologic (Tab. 9) s-a ajuns la anumite
concluzii cu privire la raionalitatea colectrii carpoforilor de pe al III-lea i al IV-lea valuri de
recoltare.
Pentru estimarea eficacitii economice la cultivarea ciupercii Pleurotus este necesar
divizarea procesului tehnologic n dou etape. Prima etap a procesului tehnologic include n sine
costul manoperei, miceliului semincer, substraturilor nutritive utilizate, inclusiv depozitarea,
transportarea, pasteurizare, nsmnarea etc. A doua etap tehnologic se realizeaz prin
termostatarea, urmat de mpnzirea substraturilor nutritive, introducerea brichetelor deja mpnzite
n camera de fructificare i const n cheltuieli fixe pentru fiecare zi de ntreinere: manopera,
arenda spaiului de cultivare, serviciile de ntreinere etc.

58
Astfel, rentabilitatea economic a procesului tehnologic poate fi calculat prin formula
propus de noi:
R=

10aEB
, unde
b + cT

R - rentabilitate economic de cultivare a ciupercii P. ostreatus;

EB- eficacitatea biologic;
10- corecia la calcularea rentabilitii economice pentru 1t substrat nutritiv ;
a costul 1kg de ciuperci, lei;
b bilanul cheltuielilor efectuate n I-a etap tehnologic, lei;
c bilanul cheltuielilor efectuate n a II-a etap tehnologic, lei/zi;
T durata de cultivare a ciupercii, zile.
Conform estimrilor noastre la valorificarea unei tone de substrat celulozic uscat pentru
cultivarea ciupercilor Pleurotus bilanul cheltuielilor efectuate n prima etap constituie circa 3000
lei. n etapa a doua cheltuielile reprezint circa 70 lei/zi. Lund n consideraie preul mediu de
achiziie a carpoforilor 20 lei/kg valorile rentabilitii economice pentru tulpinile P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivate pe diverse substraturi nutritive au fost
estimate (Tab. 13).
Valoarea maxim supraunitar a raportului dintre venitul net obinut la realizarea recoltei de
carpofori i a costurilor de consum reprezint varianta tehnologic optim de cultivare. Dei EB a
tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04 pentru toate mediile nutritive utilizate este cea mai nalt,
rentabilitatea acestuia nu nregistreaz valori maximale, fapt ce se datoreaz ciclului tehnologic
prelungit. Totodat, valorificarea recoltei de carpofori de pe al III-lea val pentru substraturile PG,
PGL i PGC este rentabil, ceea ce, probabil, este condiionat de particularitile culturale ale
tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04.
Datorit ciclului tehnologic redus i a productivitii majore pentru I val de recolt, tulpinile
P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03 pentru substratul nutritiv PG i tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-02 pentru substratul nutritiv PGL au demonstrat o rentabilitate major a procesului
tehnologic chiar dup I recolt (1,24-1,77). Al IV-lea val de recolt nu este rentabil de colectat,
astfel nct valoarea rentabilitii este fie depit de valul de recolt precedent sau mai mic ca
unitatea.
n condiii de laborator estimarea rentabilitii procesului tehnologic este dificil de realizat.
O modalitate de evaluare a rentabilitii procesului tehnologic n condiii experimentale const n
determinarea indicelui randamentului (Ir), care poate fi determinat prin formula propus de noi: Ir =
EB/T, unde EB eficacitatea biologic (%), iar T durata ciclului tehnologic, zile. Relaia de mai
sus permite stabilirea unei distincte importante la elucidarea corect a productivitii raportat la

59
unitate de timp. Reieind din rentabilitatea ciclului tehnologic s-a calculat raportul optimal dintre
durata de cultivare i recolta de carpofori colectat pentru 2-3 valuri de recoltare (Tab.14).

PGFS

PGC

Bilanul
costurilor, lei

Realizarea
recoltei, lei

Rentabilitatea
economic

Bilanul
costurilor, lei

Realizarea
recoltei, lei

Rentabilitatea
economic

CNMN-FB-04

Rentabilitatea
economic

CNMN-FB-03

Realizarea
recoltei, lei

PGL

CNMN-FB-02
Bilanul
costurilor, lei

PG

Val de cultivare

Substratul

Tabelul 13
Eficacitatea economic de cultivare a ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03
i CNMN-FB-04 pe diverse substraturi nutritive
Pleurotus ostreatus

5170

9150

1,77

5450

8470

1,55

5940

8480

1,43

II

6920

13680

1,98

7270

11920

1,64

7550

12040

1,59

III

8460

13990

1,65

9090

13230

1,46

9580

16030

1,67

IV

10700

14850

1,39

11190

13780

1,23

10980

16160

1,47

5240

6500

1,24

5380

4910

0,91

6780

6410

0,95

8840

1,28

7060

7950

1,13

9020

11470

1,27

II

6920

III

9020

10110

1,12

8390

8940

1,07

10910

13720

1,26

IV

10910

10200

0,93

10140

9200

0,91

5100

6170

1,21

5520

6160

1,12

6640

6400

0,96

II

6360

8580

1,35

7130

8570

1,20

8600

9910

1,15

III

8530

9030

1,06

8530

9450

1,11

10420

10630

1,02

IV

10280

9620

0,94

5380

5440

1,01

5240

4190

0,80

6010

6250

1,04

II

6850

8600

1,26

6360

7540

1,19

7480

10440

1,40

III

8740

10190

1,17

8250

9350

1,13

8600

12020

1,40

IV

10000

11100

1,11

9440

10380

1,10

10140

13640

1,35

Conform indicilor Ir, tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 este cea mai productiv. Cu toate c
EB pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 este cea mai nalt pentru toate mediile nutritive, Ir
este cel mai mic, fapt ce se datoreaz ciclului tehnologic prelungit. Urmrind relaia dintre valorile
Ir (Tab. 14) i a rentabilitii procesului tehnologic (Tab. 13), se constat, c acestea sunt
interdependente. Astfel, calcularea indicelui randamentului constituie o metod indirect potrivit
de estimare a rentabilitii procesului tehnologic n condiii de laborator i poate fi utilizat n cadrul
selectrii celor mai productive tulpini de P. ostreatus.

60

68,4
56
59,6
61
80,2
93
44,2
56
39,7
58
57,3
86
42,9
48
42,9
59
49,6
80
55
43,0
48
37,7
81
60,1
n procesul seleciei mediilor

Rentabilitatea
economic

Eficacitatea
biologic,
%

Durata medie a
cultivrii,
zile

Recolta,
% fa de total

92,1
86,5
PG
99,2
86,2
86,4
PGL
83,6
95,0
89,1
PGFS
93,2
77,5
72,7
PGC
88,1
n concluzie se poate afirma, c

Indicele
randamentului,
%/zi

02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04

Substratul

Tulpina
P.ostreatus
CNMN-FB-

Tabelul 14
Productivitatea tulpinilor P. streatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivate
pe diverse substraturi celulozice

1,22
0,98
0,86
0,79
0,68
0,67
0,89
0,73
0,62
0,78
0,78
0,74
nutritive paiele

1,98
1,64
1,67
1,28
1,13
1,27
1,35
1,20
1,15
1,26
1,19
1,40
(PG) s-au

dovedit a fi substratul optimal de cultivare pentru toate tulpinile P. ostreatus testate, ceea ce se
confirm adugtor i la calcularea indicelui randamentului. Comparnd nivelul rentabilitii
economice pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 (59-98%)
cultivate pe substratul PG cu cel al ciupercii Agaricus bisporus (38-84%) [127], concluzionm, c
acestea sunt eficace i prezint valori superioare fa de o aa cultur nalt tehnologic cum este
ampinionul.
nlocuirea parial a paielor cu alte substraturi celulozice nu au dat rezultate pozitive n
vederea majorrii eficacitii biologice la P. ostreatus. n acelai timp, paiele de graminee
material celulozic provenit din agricultur sunt regenerate n fiecare an, iar n urma prelucrrii
industriale a prilor valoroase din aceste plante rezult mari cantiti de materie secundar vegetal
bogat n celuloz, puin sau deloc valorificat. Spre exemplu, la un hectar de gru de toamn cu o
productivitate de 4 tone de semine se poate obine ca produs secundar circa 3 tone paie de
graminee. Valorificarea total a paielor de gru prin intermediul tulpinilor Pleurotus ostreatus
selectate anterior ar aduce un beneficiu substanial de circa 1,8 2,1 tone carpofori, ceea ce
depete de 4,5 5,2 ori valoarea de pia a produsului primar grul. Conform unor estimri
volumul de producere de 1,5 2,0 tone de ciuperci ealonat pe parcursul ntregului an ar asigura o
persoan cu un loc stabil de lucru i un venit satisfctor, valorificarea util a paielor de pe un
hectar de gru pentru cultivarea ciupercilor Pleurotus constituind, de fapt, i o oportunitate de
creare a unui loc de munc [86].

61
4.2.2. Componena biochimic a substraturilor la cultivarea ciupercii P. ostreatus.
Biodegradarea substraturilor celulozice este un proces natural pe baza cruia are loc circuitul
carbonului n natur. Hidroliza materialelor celulozice este nfptuit de diverse asociaii de
microorganisme. Totui, o capacitate redutabil de degradare ale acestora o au fungii putregaiului
alb, care consum n mod special lignina, ceea ce permite folosirea lor n diferite procese
biotehnologice legate de majorarea valorii nutritive a substraturilor valorificate. De asemenea, muli
autori indic o reducere aproape proporional a ligninei i celulozei, nsoit de o majorare a
substanelor uor asimilabile n substraturile supuse fermentrii la cultivarea P. ostreatus, ceea ce
nemijlocit conduce la majorarea digerabilitii produsului fermentat [49, 104].
Scopul investigaiilor este elucidarea proceselor biochimice ce au loc n substraturile
lignocelulozice fermentate de tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
n posibilitatea utilizrii substraturilor valorificate n diverse domenii ale biotehnologiei aplicate.
Mediile nutritive i condiiile de cultivare a ciupercii P. ostreatus sunt prezentate n Capitolul 4.2.1.
Dinamica degradrii biologice a celulozei i ligninei depinde ntr-o mare msur de aa
factori, ca particularitile biologice ale speciei, condiiile de cultivare, fazele de dezvoltare ale
culturii, substratul de nutriie etc. Starea iniial a substratului: umiditatea, aeraia, mrimea
particulelor, prezena substanelor nutritive are o influen major asupra proceselor de fermentare
i asimilare a substratului de ctre miceliul ciupercilor [129]. Majorarea suprafeei de contact a
miceliului cu particulele substratului poate fi realizat prin mrunirea mecanic a substratului, fapt
ce duce la o asimilare mai activ a ligninei i celulozei. Dac rumeguul de lemn i cojile de
floarea-soarelui sunt accesibile fermentrii fr de mrunirea mecanic, apoi paiele i cocenii
necesit a fi mrunii pn la mrimea de 30-50 mm.
Un criteriu de apreciere a capacitii ciupercii de a degrada selectiv lignina l constituie
indicele xilolizei, care reprezint raportul cantitativ al consumului de celuloz fa de suma
consumului de celuloz i lignin [178]. Indicele xilolizei mai mic de valoarea 0,5 stabilete un
consum mai mare al ligninei fa de celuloz. Folosind acest criteriu, s-a cercetat pentru tulpinile P.
ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 capacitatea de degradare a ligninei i
celulozei. Rezultatele cu referin la modificarea componentelor de celuloz i lignin n procesul
de fermentare, precum i raportul cantitativ de asimilare al acestor constituieni vegetali (indicele
xilolizei Ic) sunt prezentate n tabelul 15.
Dup cum se vede din tabel, n faza mpnzirii totale a substraturilor nutritive (12 zile),
consumul ligninei pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 este mai mare dect cel al celulozei,
indicele xilolizei variind de la 0,06 pn la 0,37. De asemenea, pentru substraturile PG i PGFS
consumul ligninei la toate tulpinile testate a fost mai mare dect al celulozei i a constituit 3,914,5% pentru lignina fa de 0,9-5,6% pentru celuloz. Rezultatele multor cercetri confirm

62
observrile proprii: degradarea ligninei n faza de incubare a ciupercii P. ostreatus prezint valori
maxime i este mai mare dect pentru celuloz [49]. n acela timp, degradarea celulozei pentru
tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 pe substraturile PGL i PGC a fost mai intens dect pentru
lignin, indicele xilolizei avnd valorile de 0,62-0,69. Cu toate acestea, consumul masei uscate a
substraturilor testate dup 12 zile de cultivare cu P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i
CNMN-FB-04 a fost mic: aproximativ 2-4% (Figura 16).
Pleurotus ostreatus
5

4,3
3,7

CMU,%

4
3,0

3
2

3,9
2,8 2,6

3,1

2,4 2,4

CNMN-FB-02
CNMN-FB-03

1,6 1,51,7

CNMN-FB-04

1
0
PG

PGL

PGFS

PGC

Figura 16. Consumul masei uscate (CMU) a substraturilor dup 12 zile de cultivare cu
tulpinile ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 (%)
n faza fructificrii la P. ostreatus predomin procesul de utilizare a celulozei [143], raportul
dintre degradarea ligninei i a celulozei dup 90 zile de cultivare cu P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 variind aproape proporional. Astfel, pierderea greutii masei
uscate a substraturilor nutritive dup 90 zile de cultivare a fost de 36-50%, dintre care 36-46% a
constituit celuloza, iar 30-44% lignina (Figura 17, Tabelul 15). Utilizarea avansat a ligninei la
cultivarea tulpinilor P. ostreatus testate (30-44%) vine s confirme datele din literatura de
specialitate conform creia rata de descompunere a ligninei pentru reprezentanii ciupercilor
putregaiului alb este superioar i prezint valori pn la 40-42% fa de 15-20% pentru
micromicete [97].
Indicele xilolizei pentru toate tulpinile cultivate pe substratul PGL a fost de 0,49-0,50,
consumul celulozei i ligninei fiind foarte apropiate ca valori: 41,2-41,8% pentru celuloz i 42,142,6% pentru lignin. Pentru acest mediu nutritiv utilizarea ligninei a atins cote nalte i stabile,
totui, cel mai mare consum al ligninei a fost nregistrat la cultivarea tulpinii P. ostreatus CNMNFB-04 pe paie de gru (PG) - 43,9%. Astfel, tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 cultivat pe paie de
gru a nregistrat att o productivitate sporit la recolta de carpofori, ct i o capacitate redutabil
pentru degradarea ligninei n procesul conversiei materiei vegetale.

63

Indicele
xilolizei (Ic)
0,15
0,58
0,18
0,57
0,26
0,51

12
90
12
90
12
90

43,3
41,2
43,8
43,3
42,2
43,2
40,7

2,2
41,2
0,5
41,8
5,6
41,4

27,8
28,0
29,2
29,4
29,6
28,7
31,6

9,0
42,1
3,6
42,6
2,4
42,4

0,20
0,49
0,11
0,50
0,62
0,49

12
90
12
90
12
90

42,1
39,7
41,0
39,7
39,9
38,3
43,0

0,9
38,0
2,9
41,2
5,6
41,4

28,5
33,9
31,6
33,9
28,2
32,0
24,8

13,8
32,0
3,9
35,4
14,5
37,0

0,06
0,54
0,42
0,54
0,28
0,53

12
43,7
90
41,6
PGC
12
43,2
03
90
41,2
12
42,4
04
90
42,7
martor substratul nutritiv nefermentat.

1,2
40,3
2,2
42,7
4,5
36,1

24,9
27,8
25,0
28,9
25,0
25,8

2,1
30,6
1,6
30,3
2,0
32,9

0,37
0,57
0,58
0,58
0,69
0,52

39,4

Martor
02
PG
03
04
Martor
02
03

PGL

04
Martor
02
PGFS
03
04
Martor
02

Lignina, %

Consumul
de lignin,
%

Consumul
de celuloz,
%

5,8
33,3
5,2
34,5
4,4
43,9

Celuloza,
%

22,5
28,0
22,6
29,5
22,9
26,3
29,6

Timpul
cultivrii,
zile

1,0
45,8
1,2
45,8
1,6
45,2

Substratul

39,6
38,1
39,5
40,9
39,5
43,1
43,0

CNMN-FB-

12
90
12
90
12
90

Pleurotus
ostreatus

Tulpina

Tabelul 15
Componena biochimic a substraturilor celulozice la cultivarea tulpinilor Pleurotus ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03, i CNMN-FB-04 (%BAU)

23,5

E de menionat faptul, c cel mai mare consum al masei uscate la toate tulpinile testate a fost
stabilit dup 90 zile de cultivare pe paie de gru: 44-50%. Eficacitatea biologic (EB, %) pentru
acest mediu nutritiv a fost cea mai nalt: 68,9-80,8% fa de substratul nutritiv uscat, ceea ce poate
reiei din consumul mare al masei uscate i, n special, al celulozei (45-46%), deoarece unii autori
[81] indic o corelaie pozitiv dintre consumul de celuloz i recolta de carpofori colectat.
Totodat, cu o recolt nalt de carpofori (68,2%) tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 pe mediul
nutritiv PGC a avut un consum relativ mai mic al masei uscate (35,6%) i al celulozei (36,1%), ceea

64
ce nu permite a face o legtur sigur ntre consumul substratului i celulozei, pe de o parte i
recolta obinut la cultivarea ciupercii, pe de alt parte.
Pleurotus ostreatus
55

CMU,%

50
45

49,9
47,8
44,0

CNMN-FB-02

42,2
40,6
38,7

40

40,2

39,8
36,5

CNMN-FB-03

37,7 38,2
35,6

CNMN-FB-04

35
30
PG

PGL

PGFS

PGC

Figura 17. Consumul masei uscate (CMU) a substraturilor dup 90 zile de cultivare cu
tulpinile ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 (%)
Reieind din consumul masei uscate s-a estimat coeficientul utilizrii substratului k = Y/Mc,
unde Y masa uscat a carpoforilor colectai (kg) i Mc consumul masei uscate a substratului
nutritiv (kg) [163], (Tab.16).
Tabelul 16
Coeficientul utilizrii substraturilor nutritive la cultivarea tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
Pleurotus ostreatus
Substratul
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
PG

0,169

0,144

0,162

PGL

0,132

0,109

0,169

PGFS

0,124

0,121

0,141

PGC

0,145

0,129

0,191

Analiznd datele din tabel, observm c pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 coeficienii
de utilizare a substraturilor nutritive sunt cei mai mari, cu excepia tulpinii P. ostreatus CNMN-FB02 cultivat pe paie de gru (PG), la care coeficientul este puin mai mare dect pentru tulpina P.
ostreatus CNMN-FB-04: 0,169 fa de 0,162. Cel mai mare coeficient de utilizare a substratului a
fost nregistrat la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 cultivat pe mediul nutritiv PGC, ceea ce
rezult din consumul relativ mic al substratului celulozic (35,6%) i recolta nalt de carpofori
(EB=68,2%).

65
O particularitate important la cultivarea intensiv a ciupercii P. ostreatus este majorarea
coninutului de azot n substratul fermentat [128]. Pentru asigurarea unui nivel nalt de sintez a
proteinelor n substraturile supuse cultivrii n faza solid de fermentare se adaug, de regul,
diverse surse sintetice ale azotului organic sau anorganic. Majorarea concentraiei de azot duce n
majoritatea cazurilor la utilizarea selectiv a celulozei i inhib degradarea ligninei. Astfel, poate fi
obinut un produs cu un coninut nalt de proteine, ns cu o digerabilitate sczut. Dup Zadrazil
[102, 104], micorarea cantitativ a ligninei coreleaz cu majorarea digerabilitii in vitro. De aceea,
n acest context, am considerat necesar de a nu utiliza la cultivarea tulpinilor P. ostreatus CNMNFB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 nici o surs de azot suplimentar n substraturile
valorificate.
Coninutul azotului total n substraturile celulozice testate dup 12 zile de cultivare a tulpinilor
P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 a fost cu 3-54% mai mare fa de cel
iniial. Dup 90 zile de cultivare, n rezultatul colectrii carpoforilor, coninutul azotului total n
substraturile fermentate s-a micorat cu 1-33% fa de martor. Excepie constituie doar tulpina P.
ostreatus CNMN-FB-04 cultivat pe mediul nutritiv PGFS, n care azot a fost cu 15% mai mult
dect n substratul iniial. Reieind din coraportul azotului ce se coninea n substrat i a celui extras
prin intermediul ciupercilor, coninutul sporit al azotui total din substratul PGFS deriv din
cantitatea relativ mic a recoltei de carpofori colectat (Tab. 17).
Majorarea coninutului de azot la cultivarea P. ostreatus poate fi explicat prin pierderea
unei pri a masei uscate n rezultatul descompunerii pariale a substratului de nutriie pn la CO2
i H2O, mrind astfel coninutul relativ al azotului n substratul supus fermentrii [101]. Totodat,
analiznd rezultatele referitor la sporirea coninutului de azot dup 12 zile de cultivare pentru
tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04, s-a stabilit o majorare a
azotului total mai mare dect aceea care se coninea iniial n substratul propriu-zis. n aceast
privin exist preri contradictorii, totui, studiile lui Kurtzman [46] despre activitatea
microorganismelor azotfixatoare n substraturile destinate cultivrii P. ostreatus par a fi mai
elocvente. Efectund cercetri n aceast direcie s-a stabilit, c materiile prime ce intr n
componena substratului de nutriie pasteurizat sunt populate de bacterii termofile azotfixatoare ce
aparin genului Bacillus, contribuind prin aceasta la majorarea coninutului de azot n substratul
supus fermentrii [131].
n elucidarea posibilitii de valorificare a substraturilor nutritive i obinerii proteinei
furajere la cultivarea ciupercii P. ostreatus a fost selectat tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04, care
a atins cele mai mari valori privind majorarea azotului total n substraturile fermentate. Aminoacizii
reprezint sursa cea mai important de azot, componena acestora n substraturile testate la
cultivarea tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04 fiind prezentat n tabelul 18.

66

Tabelul 17
Coninutul azotului total, carbonului i proteinei brute (% fa de martor) n substraturile
nutritive la cultivarea tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
Coninutul
azotului
total, %

Coninutul
carbonului,
%

Raportul
C:N

Proteina
brut,
% fa de
martor

0,58

55,3

95

100

12
90
12
90
12
90

0,64
0,43
0,68
0,41
0,66
0,43
0,67

53,0
53,6
55,6
54,3
53,1
53,9
55,5

83
125
82
132
80
125
83

110
74
117
71
114
74
100

12
90
12
90
12
90

0,81
0,47
0,74
0,46
0,90
0,45
0,93

55,3
51,7
56,6
55,4
56,2
54,5
53,5

68
110
76
120
62
121
58

121
70
110
69
134
67
100

12
90
12
90
12
90

0,96
0,85
1,05
0,82
1,13
1,07
0,82

52,5
52,1
54,0
52,6
51,8
51,7
52,6

55
61
51
64
46
48
64

103
91
113
88
122
115
100

12
1,00
90
0,70
PGC
12
0,97
03
90
0,69
12
1,26
04
90
0,81
martor substratul nutritiv nefermentat.

50,9
50,4
52,5
51,7
52,3
50,4

51
72
54
75
41
62

122
85
118
84
154
99

Tulpina
P.ostreatus

Substratul

CNMN-FB-

Timpul
cultivrii,
zile

Martor
02

PG

03
04
Martor
02
03

PGL

04
Martor
02
PGFS
03
04
Martor
02

Valoarea biologic a proteinei furajere poate fi estimat prin raportul sumei aminoacizilor
eseniali fa de suma aminoacizilor accesibili. Pentru substraturile fermentate PGFS i PGC acest
raport variaz n limitele de 0,64-0,70, fapt pentru care aceste valori se apropie de cea a proteinei de
referin cazeinei (0,75). Valorile maxime (0,94-1,10) au fost obinute pentru substraturile PG i
respectiv PGL, proteinele acestora caracterizndu-se printr-o valoare biologic nalt. Cantitatea
total a aminoacizilor substraturilor testate a variat ntre 6,7 i 8,6 g/100g BAU.

67
Tabelul 18
Coninutul de aminoacizi n substraturile celulozice fermentate prin intermediul
tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04 (g/100g BAU)
Pleurotus ostreatus CNMN-FB-04
Aminoacizii
PGC
PGFS
PGFS
PGL
PG
12 zile
90 zile
12 zile
12 zile
12 zile
0,0989
0,1508
0,1394
0,2189
0,1376
Acidul cisteinic
0,1412
0,2082
0,0647
0,1402
0,0648
Taurin
0,6454
0,4513
0,7635
0,8437
0,9843
Acidul aspartic
0,4402
0,4539
0,4697
0,4398
1,2972
Treonin
0,4360
0,4616
0,4834
0,4889
0,6308
Serin
0,9090
1,0085
1,0757
0,9668
1,3153
Acidul glutamic
0,1619
0,1418
0,1542
0,1257
0,1912
Prolin
0,5161
0,4698
0,4566
0,4148
0,4708
Glicin
0,3884
0,4382
0,4309
0,3678
0,5553
Alanin
0,3997
0,3274
0,3098
0,2781
0,3945
Valin
0,5308
0,3957
0,5441
0,5131
0,6523
Cistein
0,0341
0,0466
0,0588
0,0672
0,0328
Metionin
0,6763
0,7782
0,2551
0,1782
0,3563
Izoleucin
1,0048
1,3313
0,4167
0,2949
0,3559
Leucin
0,1637
0,1873
0,1816
0,1056
0,1484
Tirozin
0,3324
0,3623
0,2653
0,2066
0,2500
Fenilalanin
0,0310
0,0109
0,0129
0,0104
0,0103
Acidul aminooleic
0,0221
0,0264
0,0305
0,0284
0,0209
Ornitin
0,0563
0,0860
0,0286
0,0216
0,0136
Etanolamin
0,1456
0,1270
0,1933
0,1419
0,1261
Lizin
0,0853
0,0745
0,1133
0,0841
0,0750
Histidin
0,2941
0,2771
0,4885
0,6331
0,3477
Triptofan
0,1091
0,1192
0,0627
0,1693
0,2046
Arginin
0,1207
0,1553
0,3090
0,1594
0,1174
Amoniac
7,6223
7,9338
6,9993
6,7392
8,6359
Suma aminoacizilor
identificai
3,5216
3,8974
2,6332
2,4932
3,4402
Suma aminoacizilor
eseniali
3,7512
3,5541
4,0900
3,8264
4,9485
Suma aminoacizilor
accesibili
4,5597
4,2835
5,0222
4,9461
6,6482
Suma aminoacizilor
imunoactivi
0,462
0,491
0,376
0,370
0,400
% aminoacizilor
ES/ST*
*ES eseniali; ST suma total.

Cercetarea n dinamic a coninutului de aminoacizi pentru substratul nutritiv PGFS dup 12

i 90 zile de cultivare cu tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 a stabilit faptul, c componena
calitativ a aminoacizilor se menine la acelai nivel, cu excepia triptofanului i argininei.
Produsele proteice obinute la cultivarea tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04 n faza solid de
fermentare nu cedeaz proteinei de referin FAO privind coninutul unor aa aminoacizi eseniali,

68
ca fenilalanina, valina, iar dup coninutul treoninei i triptofanului o depesc cu mult. Totodat,
rezultatele obinute ne demonstreaz c substraturile fermentate sunt srace n metionin i lizin.
Coninutul aminoacizilor eseniali din produsele proteice obinute au fost comparate cu
rezultatele unor cercettori [162] (Tab. 19).
Tabelul 19
Coninutul aminoacizilor eseniali n unele produse proteice fungice recomandate [162,
p. 148] i n cele obinute n rezultatul cultivrii ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-04 pe diverse
substraturi lignocelulozice (12 zile de cultivare), %
Produsul proteic
Aminoacizii
recomandat
obinut
treonin
0,28
0,44-1,30
valin
0,32
0,31-0,40
metionin
0,22
0,03-0,06
izoleucin
0,22
0,26-0,78
leucin
0,49
0,36-1,33
fenilalanin
0,32
0,25-0,36
lizin
0,45
0,13-0,19
8,0-10,0
7,3-8,8
protein
Astfel, rezultatele obinute privind degradarea substraturilor lignocelulozice i mbogirea
acestora cu compui azotai confirm posibilitatea utilizrii ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-04 n
obinerea proteinei furajere. Substraturile fermentate testate pot fi folosite la furajarea animalelor
agricole dup 12 zile de cultivare cu P. ostreatus CNMN-FB-04, iar pentru mediul complex PGFS
i dup recoltarea a dou valuri de carpofori (90 zile).
Este cunoscut faptul, c asimilarea azotului depinde ntr-o mare msur de sursa i de
cantitatea carbonului prezent n mediul de nutriie, de aceea creterea miceliului ciupercii este
determinat de raportul dintre carbon i azot. Raportul carbon/azot optimal creterii miceliului i
fructificrii n faza solid de fermentare se afl conform unor studii n limitele 30/1 [35]. n
substraturile iniiale destinate cultivarii ciupercii P. ostreatus s-a primit un indice mult mai mare:
58-95/1, ceea ce ne demonstreaz faptul c miceliul culturii testate utilizeaz cu succes i
concentraii joase ale azotului prezent n mediile solide nutritive. Totodat, majorarea azotului total
n substraturi dup 12 zile de cultivare duce la o descretere a raportului carbon/azot. Aceasta
rezult din asimilarea carbonului ca surs energetic unde o parte semnificativ a carbonului se
pierde la respiraie sub form de CO2, iar azotul este metabolizat i reinut de biomasa culturii.
Astfel, micorarea raportului dintre carbon i azot la valorile cuprinse ntre 48-83/1 a stimulat,
probabil, inducerea i apariia fructificrii la tulpinile P. ostreatus testate [35].
Dup 90 zile de cultivare cantitatea de carbon n substraturi s-a micorat puin fa de cea
iniial. Datorit pierderii unei pri a azotului n rezultatul colectrii carpoforilor, indicele

69
carbon/azot s-a majorat, cu excepia tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04 pe mediile nutritive PGFS
i PGC.
n rezultatul investigaiilor efectuate s-a stabilit, c tulpinile P. ostreatus testate au manifestat
o capacitate redutabil de degradare a substraturilor lignocelulozice provenite din reziduurile agroindustriale. ncadrarea efectiv a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB04 la convertirea reziduurilor vegetale locale, relativ srace n compui azotai, n produse cu
valoare nutritiv ridicat, poate fi folosit n diverse procese biotehnologice ce in de producerea
proteinei furajere i alimentare. Cercetrile n ceea ce privete degradarea enzimatic a
constituenilor vegetali, ca celuloza i lignina, precum i majorarea coninutului azotului total n
substraturile nutritive valorificate au elucidat posibilitatea integrrii tehnologiilor de cultivare a
ciupercii P. ostreatus n lanul de valorificare util a reziduurilor vegetale. Astfel, dup 12 zile de
cultivare cu tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04, coninutul proteinei brute pentru substraturile
nutritive testate s-a majorat de la 3,6-5,8% la 7,3-8,8%, degradarea substraturilor nutritive
constituind 4,5-5,6% pentru celuloz i 2,0-14,5% pentru lignin. Acest fapt duce nemijlocit la
majorarea valorii nutritive i digerabilitii produsului fermentat, ceea ce poate fi folosit pe larg la
fabricarea nutreurilor combinate pentru animale (bovine, porcine). Semnificativ este faptul, c
substratul complex PGFS pentru P. ostreatus CNMN-FB-04 poate fi folosit la furajarea animalelor
i dup recoltarea a dou valuri de carpofori, coninutul azotului total dup 90 zile de cultivare
avnd valoarea de 115% fa de martor. Aceasta permite obinerea ntr-un singur ciclu tehnologic a
proteinei furajere i alimentare, prezentnd un proces biotehnologic finisat, fr poluarea mediului
nconjurtor.

70
4.2.3 Valoarea nutritiv a carpoforilor Pleurotus ostreatus. n present lipidele i hidraii de
carbon nu sunt deficitari n alimentarea omului. De aceea, la estimarea valorii nutritive a ciupercilor
o importan major se acord compuilor proteici. Carpoforii Pleurotus ostreatus constituie o bun
surs de proteine, ntruct coninutul n substane proteice raportat la substana absolut uscat este
cuprins ntre 7,0-41,6% [129]. Proteinele sunt constituite din 20 de aminoacizi, eseniali pentru om
fiind 9 din ele treonina, valina, metionina, izoleucina, leucina, tirozina, fenilalanina, lizina i
triptofanul. Dezichilibrul raportului ntre aminoacizi duce la o dereglare a echilibrului proteic,
administrarea corect asigurndu-i organismului viu o activitate normal a funciilor cu o
semnificaie esenial n metabolismul celular.
Valoarea biologic (nutritiv) a proteinei se afl ntr-o dependen de echilibrul aminoacizilor
si, reglementarea normelor ce caracterizeaz echilibrul aminoacizilor proteici fiind consemnat de
organizaia FAO (Food and Agricultural Organization), care a stabilit i a aplicat dou standarde
cel al proteinei oului de gin (albumina) i al laptelui uman (cazeina). La estimarea valorii nutritive
a carpoforilor este necesar cercetarea a trei factori condiionai reciproc : digerabilitatea proteinei,
coninutul proteinei i componena aminoacizilor [14].
Numeroase cercetri au descris destul de amnunit compoziia chimic a carpoforilor de P.
ostreatus [129, 142]. Totui, parametrii biochimici ai carpoforilor cultivai pe diverse substraturi
nutritive difer unul de altul, astfel nct cunoaterea aminoacizilor naturali ce intr n compoziia
ciupercilor este oportun pentru elucidarea posibilitii de utilizare a tulpinilor selectate n
biotehnologie. Este cunoscut faptul, c coninutul sporit al azotului total n substraturile celulozice
duce la o majorare a acestuia i n carpofori, ceea ce determin valoarea nalt nutritiv a ciupercilor
cultivate [103, 129]. nlocuirea parial a paielor de gru cu alte substraturi naturale (coji de floareasoarelui, rumegu de lemn, coceni) cu un coninut mai mare al azotului total (Capitolul 4.2.2)
reprezint o soluie potrivit, dat fiind ncadrarea efectiv ale acestora la convertirea reziduurilor
locale n produse cu valoare nutritiv mai ridicat dect pentru paiele de gru (100%). Obiectivul
cercetrilor const n ameliorarea valorii nutritive a carpoforilor P. ostreatus prin nlocuirea parial
a paielor de gru relativ srace n azot cu alte componente naturale mai bogate n compui ai
azotului. Eficiena utilizrii componentelor naturale rezult i din faptul, c acestea reprezint
reziduuri regenerabile ale complexului agroindustrial, deci sunt accesibile i ieftine. Mediile
nutritive, condiiile de cultivare i tulpinile P. ostreatus utilizate sunt prezentate n Capitolul 4.2.1.
Cunoscnd faptul, c coninutul aminoacizilor n carpoforii ciupercilor depinde de mediul
nutritiv a fost studiat compoziia aminoacizilor la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB03 i CNMN-FB-04 cultivate pe diverse substraturi celulozice. Rezultatele determinrii
componenei aminoacizilor totali n masa absolut uscat a carpoforilor la cultivarea tulpinilor P.

71
ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe diferite substraturi celulozice sunt
prezentate n tabelele 20, 21.
Tabelul 20
Coninutul de aminoacizi n carpoforii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMNFB-04 cultivai pe diverse substraturi celulozice (g/100 g BAU)
Pleurotus ostreatus
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
Aminoacizii
PG
PGL
PG
PGL
PG
PGL
0,2811
0,1239
0,2504
0,2695
0,3691
0,2425
Acidul cisteinic
0,2768
0,4558
0,1377
0,2934
0,4578
0,3670
Taurin
2,1608
2,4049
2,8439
3,4096
0,9800
2,8614
Acidul aspartic
1,1939
1,4111
1,7193
1,9149
0,4871
1,3975
Treonin
1,2420
1,5084
1,6879
1,7501
0,5207
1,4305
Serin
5,2346
5,1798
7,5284
7,8221
3,0244
6,1993
Acidul glutamic
0,4718
0,5855
1,0920
0,7101
0,1529
0,6098
Prolin
1,0895
1,3661
2,1301
1,9282
1,1062
1,5199
Glicin
1,4835
1,6486
2,5879
2,2712
0,9385
1,7153
Alanin
0,7222
0,6415
0,8183
0,8816
0,6467
0,7543
Valin
6,4875
7,0892
7,6472
7,6927
1,1540
5,7121
Cistein
0,2793
0,3038
0,0627
0,3318
0,0572
0,2611
Metionin
0,3180
0,4209
0,4846
0,6206
0,3365
0,4432
Izoleucin
1,5680
2,0481
2,5136
2,9804
1,6808
2,2137
Leucin
0,3867
0,6639
0,7429
1,0467
0,4900
0,7245
Tirozin
0,5858
0,8623
0,8744
1,1942
0,6836
0,7552
Fenilalanin
0,0604
0,0991
0,0876
0,1222
0,0256
0,0404
Acidul aminooleic
0,0949
0,1089
0,0805
0,0644
0,0660
0,2144
Ornitin
0,660
0,0527
0,0736
0,0479
0,0466
0,0472
Etanolamin
1,2601
1,3920
1,9169
2,0991
1,6204
1,6996
Lizin
0,3222
0,3380
0,4245
0,4791
0,2229
0,4206
Histidin
0,1015
0,1585
0,1488
0,1800
0,1266
0,0860
Triptofan
0,4701
0,9640
0,6611
1,2223
0,1522
1,0963
Arginin
0,2491
0,2560
0,2799
0,3403
0,0376
0,2290
Amoniac
26,1568
29,8269
36,5144
39,3323
15,3456
30,8118
Suma aminoacizilor
identificai
6,8213
8,5401
9,6243
11,9041
6,0140
9,1276
Suma aminoacizilor
eseniali
18,5564
20,4464
26,2603
26,6308
8,3666
20,7727
Suma aminoacizilor
accesibili
0,261
0,286
0,264
0,303
0,392
0,296
% aminoacizilor
ES/ST*
*ES eseniali; ST suma total.

72
Tabelul 21
Coninutul de aminoacizi n carpoforii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMNFB-04 cultivai pe diverse substraturi celulozice (g/100 g BAU)
Pleurotus ostreatus
Aminoacizii
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
PGFS
PGC
PGFS
PGC
PGFS
PGC
0,2596
0,8215
0,2331
0,1716
0,0447
0,5533
Acidul cisteinic
0,4726
0,3787
0,4044
0,2642
0,0458
0,4828
Taurin
2,4448
2,0601
3,7183
2,8816
0,5675
3,7196
Acidul aspartic
1,3601
1,2034
2,0561
1,6048
0,3142
2,1445
Treonin
1,4570
1,2817
2,0081
1,6105
0,3827
1,9985
Serin
6,0533
4,5042
8,9728
6,8587
3,0905
9,7684
Acidul glutamic
0,6284
0,5377
0,7420
0,8646
0,7414
0,7764
Prolin
1,4220
1,1440
2,1361
1,8059
1,1226
2,4263
Glicin
1,7668
1,3716
2,5038
2,1404
1,2453
2,5550
Alanin
0,8137
0,5484
0,9788
0,7694
0,4842
1,2023
Valin
5,4779
6,0482
6,4469
4,7744
4,9627
7,5269
Cistein
0,3130
0,1939
0,2934
0,1933
0,2071
0,2714
Metionin
0,4492
0,3780
0,6474
0,4785
0,5483
0,7234
Izoleucin
2,3579
1,7428
2,9015
2,2676
2,6681
3,2424
Leucin
0,7037
0,5758
0,9210
0,6003
0,8103
1,1900
Tirozin
0,9887
0,7979
1,1800
0,7727
1,1061
1,4439
Fenilalanin
0,0326
0,0383
0,1490
0,0240
0,0534
0,0549
Acidul aminooleic
0,1730
0,0850
0,1064
0,0697
0,1731
0,3467
Ornitin
0,0770
0,0693
0,0846
0,0460
0,0516
0,0622
Etanolamin
2,2212
1,4696
2,6681
1,8285
2,2911
2,6396
Lizin
0,5727
0,3674
0,6150
0,3810
0,5192
0,2920
Histidin
0,1882
0,1411
0,2074
0,0967
0,3867
0,1713
Triptofan
0,6620
0,3768
1,0223
1,0850
1,2772
1,7155
Arginin
0,0848
0,0725
0,1081
0,0716
0,0844
0,1147
Uree
0,4534
0,2307
0,3710
0,2860
0,2670
0,3165
Amoniac
30,8955
26,1352
40,9963
31,5895
23,0937
45,3072
Suma aminoacizilor
identificai
9,9267
7,2192
12,5699
9,4775
9,8023
13,8463
Suma aminoacizilor
eseniali
19,9539
17,5232
27,4490
21,5364
12,9229
29,9610
Suma aminoacizilor
accesibili
0,321
0,276
0,307
0,300
0,424
0,306
% aminoacizilor
ES/ST*
*ES eseniali; ST suma total.

73
Carpoforii P. ostreatus conin toi aminoacizii eseniali omului, iar n componena
aminoacizilor predomin acizii glutamic i aspartic, ceea ce este tipic ciupercilor comestibile [14].
Rezultatele cercetrilor au artat c carpoforii tulpinilor P. ostreatus conin 18 aminoacizi, dintre
care 9 aminoacizi sunt eseniali treonina, valina, metionina, izoleucina, leucina, tirozina,
fenilalanina, lizina i triptofanul. Menionm prezena aminoacizilor considerai imunoactivi[124]
n carpoforii ciupercii P. ostreatus, acetea fiind: acidul glutamic (3,02-9,77g/100g BAU), acidul
aspartic (0,57-3,72g/100g BAU), cisteina (1,15-7,69g/100g BAU), alanina (0,94-2,59g/100g BAU),
glicina (1,09-2,43g/100g BAU), serina (0,38-2,01g/100g BAU), treonina (0,31-2,06g/100g BAU),
valina (0,48-1,20g/100g BAU) i triptofanul (0,09-0,39g/100g BAU). Important este cantitatea
foarte nalt a aminoacidului ce conine sulf cisteina, care tradiional este un aminoacid deficitar
n carpoforii ciupercilor [14, 129]. Dac comparm indicele S/T a albuminei (0,47) cu cel al
carpoforilor P. ostreatus (0,53-1,67), constatm o diferen de 1,1 3,5 ori fa de proteina standard
a oului de gin. Asparagina i glutamina nu au fost depistate n carpofori, n schimb, acizii acestor
aminoacizi au constituit valori mari i aproape constante : 8 9% pentru acidul aspartic i 18 22%
pentru acidul glutamic.
Tulpinile studiate au avut diferene att n ceea ce privete coninutul n parte a fiecrui
aminoacid, ct i n cantitatea total a aminoacizilor proteinei totale. Astfel, de exemplu, cantitatea
total a aminoacizilor carpoforilor pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 a variat ntre 26,1 i
30,9 g/100g biomas absolut uscat (BAU), pentru P. ostreatus CNMN-FB-03 31,641,0 g/100g
BAU, iar pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 - 15,3-45,3 g/100g BAU.
Comparnd cantitatea aminoacizilor eseniali cu normele ntrite de FAO pentru proteina
ideal, s-a demonstrat c carpoforii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cu
unele excepii ntrec cantitativ proteina ideal cu 5 din 9 aminoacizi (Tab. 22). Acesta se refer la
treonin (115130 % fa de martor), leucin (101170 %), lizin (104207 %), tirozin (113120%) i fenilalanin (103-160%) (Figura 18).
Deficitare din punct de vedere al coninutului de aminoacizi eseniali sunt metionina (6 31 %
fa de albumin), izoleucina (33 63 %), triptofanul (30-90%) i valina (44 90%). Aceste date
corespund celor din literatura de specialitate, cu excepia cisteinei i lizinei, care au fost superioare
fa de coninutul de aminoacizi ce se conine n albumin. Cantitatea sporit a lizinei (104-207%
FAO) pentru ciupercile Pleurotus constituie un avantaj esenial fa de produsele de origine
vegetal tradiional deficitare n coninutul acestui aminoacid.

S/T raportul sumei aminoacizilor ce conin sulf (metionin+cistein) la suma azotului.

Tabelul 22
Coninutul de aminoacizi eseniali (g/100g protein) n proteina ideal i n proteina carpoforilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMNFB-03 i CNMN-FB-04 cultivai pe diferite medii nutritive
PG
Aminoacizii

PGL

PGFS

PGC
FAO

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

CNMN-

FB-02

FB-03

FB-04

FB-02

FB-03

FB-04

FB-02

FB-03

FB-04

FB-02

FB-03

FB-04

treonin

4,7

4,8

3,4

4,9

5,0

4,7

4,6

5,2

1,4

4,9

5,2

4,9

4,0

valin

2,9

2,3

4,5

2,2

2,3

2,5

2,7

2,5

2,2

2,2

2,5

2,8

5,0

metionin

1,1

0,2

0,4

1,1

0,9

0,9

1,1

0,7

0,9

0,8

0,6

0,6

3,5

izoleucin

1,3

1,4

2,4

1,5

1,6

1,5

1,5

1,6

2,5

1,5

1,5

1,7

4,0

leucin

6,2

7,0

11,8

7,1

7,8

7,4

7,9

7,3

11,9

7,1

7,3

7,4

7,0

tirozin

1,5

2,1

3,4

2,3

2,7

2,4

2,4

2,3

3,6

2,3

1,9

2,7

3,0

fenilalanin

2,3

2,4

4,8

3,0

3,1

2,5

3,3

3,0

4,9

3,2

2,5

3,3

3,0

lizin

5,0

5,4

11,4

4,8

5,5

5,7

7,5

6,7

10,3

6,0

5,9

6,0

5,5

triptofan

0,4

0,4

0,9

0,5

0,5

0,3

0,6

0,5

1,7

0,6

0,3

0,4

1,0

25,4

26,0

43,0

27,4

29,4

27,9

31,6

29,8

39,4

28,6

27,7

29,8

36,0

Suma
aminoacizilor
eseniali

75
Pleurotus ostreatus CNMN-FB-02
140
120

100
80
60
40
20
0
thr

val

met
PG

ile
PGL

leu
PGFS

tyr

phe

lys

trp

PGC

Pleurotus ostreatus CNMN-FB-03

140
120

100
80
60
40
20
0
thr

val

met
PG

ile
PGL

leu
PGFS

tyr

phe

lys

trp

PGC

Pleurotus ostreatus CNMN-FB-04

225
200
175
150
125
100
75
50
25
0
thr

val

met
PG

ile
PGL

leu
PGFS

tyr

phe

lys

trp

PGC

Figura 18. Coninutul de aminoacizi eseniali (% fa de proteina ideal FAO) n

carpoforii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivai pe diverse
substraturi celulozice

76
Un indice important ce caracterizeaz proteina este digerabilitatea acesteia, care reprezint un
raport dintre aminoacizii uor i greu hidrolizabili i poate fi calculat prin raportul dintre suma
argininei i lizinei fa de prolin. Cu ct acest indice este mai mare, cu att digerabilitatea proteinei
este mai nalt. Astfel, pentru proteina orezului acest indice se apropie de 4, la soia 2,1, iar la
graminee n jurul valorii 1 [168]. La tulpinile testate acest raport variaz n limite destul de largi,
majoritatea avnd valorile cuprinse ntre 3,4 5,0, proteinele carpoforilor caracterizndu-se printr-o
valoare nalt nutritiv.
Pentru estimarea valorii nutritive a carpoforilor P. ostreatus se propune calcularea indicelui
aminoacizilor eseniali (EAA), care reprezint raportul sumei aminoacizilor eseniali ce se conine
n produsul examinat la suma aminoacizilor eseniali din proteina oului de gin [62]. Valoarea
nutritiv nu depinde numai de coninutul aminoacizilor eseniali, ci i de cantitatea de protein, de
aceea pentru o caracterizare mai exact a valorii nutritive se estimeaz i indicele nutritiv [14], care
este produsul indicelui EAA i a coninutului de protein (%) raportat la 100% (Tab. 23). Astfel,
datorit coninutului nalt al proteinelor din carpoforii tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-03, indicele
nutritiv a atins valorile 23,8 33,1, fapt ce a permis a fi raportai la valorile nutritive a
leguminoaselor pentru boabe (indicele nutritiv = 21), ciupercilor de calitate superioar (indicele
nutritiv = 28) i soia (indicele nutritiv = 31).
Tabelul 23
Valoarea nutritiv a carpoforilor P. ostreatus cultivai pe diverse substraturi celulozice
Tulpina
P.ostreatus

PG

Indicele EAA
PGL
PGFS

PGC

PG

76,1
81,6
77,5

79,4
76,9
82,7

17,9
25,9
17,2

Indicele nutritiv
PGL
PGFS

PGC

CNMN-FB-

02
03
04

70,5
72,2
119,4

87,8
82,7
109,4

22,1
31,4
23,2

26,2
33,1
24,8

19,6
23,8
36,2

Indicele aminoacizilor eseniali (EAA) la carpoforii tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04 pentru

paie de gru (PG) a fost superior proteinei de referin FAO i a atins valoarea de 119,4. Totui,
datorit coninutului mic al proteinelor carpoforilor, indicele nutritiv a fost cel mai mic (17,2). Cea
mai nalt valoare a indicelui nutritiv a fost obinut la carpoforii tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04
pentru mediul PGC 36,2 i poate fi raportat la cea a crnii de porc (indicele nutritiv = 35).
Totodat, din cauza coninutului de substane greu digerabile, mai cu seam a chitinei i celulozei,
ciupercile cedeaz crnii, digerabilitatea carpoforilor constituind valori mai mici de 70% [14].
Pentru substratul celulozic PGFS, indicii nutritivi la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMNFB-03 au fost cei mai mari 26,2-33,1. Astfel, valoare nutritiv a carpoforilor P. ostreatus
constituie o trstur distinctiv a tulpinii (P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03) i depinde de
substratul nutritiv pe care este cultivat (P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03, CNMN-FB-04).

77
Generaliznd rezultatele expuse n Capitolul IV, conchidem urmtoarele:
n urma studierii tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
selectate anterior, s-au determinat diferenele morfo-culturale i biochimice, au fost selectate
mediile optime de nutriie i caracterizat valoarea nutritiv a carpoforilor.
Diferenele n ceea ce privete asimilarea diverselor surse de carbon i azot au fost elucidate la
utilizarea diverselor medii nutritive, tulpinile din aceiai specie deosebindu-se ntre ele prin
exigenele de nutriie, regimul termic, particularitile morfo-culturale.
Potrivit criteriului termic, tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 a demonstrat o capacitate
valoroas din punct de vedere al creterii la temperatur nalt (380C). Prin intermediul hibridizrii
intraspecifice aceast nsuire poate fi utilizat n cadrul procesului selectiv n scopul ameliorrii
speciei P. ostreatus.
Selectarea tulpinilor P. ostreatus numai dup principiul productivitii nu este suficient.
Pentru elucidarea particularitilor biotehnologice este necesar i determinarea unui ir de indici,
ca cel al randamentului (Ir), eficacitii economice, xilolizei (Ic), consumului masei uscate (CMU),
coeficientului de utilizare a substratului (k), valorii nutritive a carpoforilor (indicele nutritiv i
indicele aminoacizilor eseniali EAA) etc. Astfel, n procesul seleciei mediilor nutritive, paiele
(PG) s-au dovedit a fi substratul optimal de cultivare pentru toate tulpinile P. ostreatus testate, fapt
confirmat att de productivitatea major (EB=59,6-80,2%), ct i de indicele randamentului (0,861,22). Totodat, indicii nutritivi ai carpoforilor P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04 cultivai
pe paie de gru au fost cei mai mici (17,2-17,9), ceea ce minimalizeaz evenimentul obinerii unei
recolte nalte prin valoarea nutritiv sczut a acestora.
Cel mai mare coeficient de utilizare a substratului (0,191) a fost gsit la tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-04 cultivat pe mediul nutritiv PGC. Pentru acest mediu nutritiv tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-04 a atins cea mai nalt valoare a indicelui nutritiv (36,2), ceea ce a permis a fi
raportat la valoarea nutritiv a proteinelor animaliere (indicele nutritiv = 35). Dei, nlocuirea
parial a paielor de graminee cu coceni de porumb nu a majorat productivitatea ciupercilor la P.
ostreatus CNMN-FB-04, datorit calitilor nutritive superioare acest substrat poate fi recomandat
pentru cultivarea intensiv la obinerea carpoforilor cu valoare nutritiv nalt.
Tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 a manifestat att o productivitate sporit la recolta de
carpofori, ct i o capacitate redutabil pentru degradarea ligninei, indicele xilolizei dup 90 zile de
cultivare atingnd valorile de 0,49 0,53. Coninutul proteinei brute pe mediile nutritive testate
dup 12 zile de cultivare cu tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 s-a majorat de la 3,6-5,8% la 7,38,8%, degradarea materialelor celulozice constituind 4,5 5,6% pentru celuloz i 2,0 14,5%
pentru lignin. Acest fapt duce nemijlocit la majorarea valorii nutritive i a digerabilitii produsului

78
fermentat, ceea ce poate fi folosit pe larg la obinerea nutreurilor combinate pentru animale
(bovine, porcine).
Cei mai mari indici ai randamentului au fost obinui pentru substraturile nutritive PG, PGL i
PGFS la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 (0,79-1,22), fapt confirmat i de rentabilitatea major a
procesului tehnologic (1,28-1,98). Eficacitatea biologic pentru P. ostreatus CNMN-FB-02 este mai
mic dect pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04. n acelai timp, datorit ciclului tehnologic
redus (48-56 zile) i tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02

prezint interes deosebit n vederea

selectrii tulpinilor cu o productivitate precoce. Dei EB a tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04

pentru toate mediile nutritive utilizate este cea mai nalt, rentabilitatea procesului tehnologic nu
nregistreaz ntotdeauna valori maximale, fapt ce se datoreaz ciclului tehnologic prelungit (80-93
zile).
Carpoforii tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-03 pot fi caracterizai prin coninutul nalt al
proteinelor i calitilor tehnice deosebite (raportului optim dintre picior i plrie). Indicii nutritivi
au constituit 23,8 33,1 uniti convenionale, fapt ce au permis a fi raportai la valorile nutritive a
leguminoaselor pentru boabe (indicele nutritiv = 21), ciupercilor de calitate superioar (indicele
nutritiv = 28) i soia (indicele nutritiv = 31). Indicii nutritivi ai carpoforilor obinui n baza
substratului de nutriie PGFS pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03 au fost
cei mai mari 26,2 i respectiv 33,1 uniti convenionale, ceea ce rezult din coninutul nalt al
azotului total ce se conine n acest substrat (0,93%).
Studierea carpoforilor P. ostreatus cu referin la capacitatea de sintez a aminoacizilor
principalii compui organici ce particip la sinteza proteinelor a artat c tulpinile testate
formeaz aminoacizi n limite destul de largi: de la 15,3 pn la 45,3 g aminoacizi la 100 g BAU, n
care partea aminoacizilor eseniali alctuete 26,1 42,4% din totalul de aminoacizi identificai.
Componena acestora se caracterizeaz i printr-un coninut sporit al aminoacizilor imunoactivi:
18,30-21,41%BAU pentru P. ostreatus CNMN-FB-02, 22,54-29,03%BAU pentru P. ostreatus
CNMN-FB-03 i 8,98-31,51%BAU pentru P. ostreatus CNMN-FB-04. De asemenea, carpoforii P.
ostreatus ntrec cantitativ normele ntrite de FAO pentru proteina ideal cu 5 din 9 aminoacizi
eseniali : treonina (115-130%), leucina (101-170%), lizina (104-207%), tirozina (113-120%) i
fenilalanina (103-160%). Aminoacizii ce predomin sunt acizii glutamic, aspartic i cisteina.
Menionm cantitatea foarte nalt a aminoacidului ce conine sulf cisteina, care tradiional este un
aminoacid deficitar n carpoforii ciupercilor.
Investigaiile efectuate relev faptul c valoarea nutritiv a carpoforilor este determinat att
de compoziia substratului nutritiv, ct i de particularitile biologice ale tulpinilor Pleurotus
ostreatus.

79

CAPITOLUL V
PARTICULARITI BIOLOGICE DE CULTIVARE ALE CIUPERCII
PLEUROTUS OSTREATUS N FAZA LICHID DE FERMENTARE
5.1 Aciunea surselor de carbon i azot asupra creterii miceliului
P. ostreatus cultivat submers
Pentru a caracteriza exigenele de nutriie a microorganismului heterotrof este nevoie de
anumite studii de laborator ce prevd utilizarea practicilor de diversificare a mediilor culturale
nutritive. Aceste studii includ n mod obligatoriu i cercetarea aciunii surselor de azot i carbon
asupra creterii i a altor manifestri biologice ale microorganismului, astfel nct compuii C i N
ndeplinesc funcii cu o semnificaie esenial n metabolismul celular. Cercetrile privind
necesitile fiziologice n utilizarea diverselor surse de carbon i azot, precum i elaborarea unui
proces economic rentabil de obinere a biomasei proteice prin cultivarea submers a
bazidiomicetelor reprezint obiectivul multor studii n domeniul biotehnologiei microbiologice [74,
88, 110, 127, 134].
Scopul investigaiilor const n elucidarea caracterelor morfo-culturale i n determinarea
acumulrii biomasei la P. ostreatus n funcie de sursele de carbon i azot asimilate n ncercarea
de a stabili exigenele nutriionale pentru utilizarea acestuia n diverse procese biotehnologice.
Pentru cercetri au fost folosite tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMNFB-04 selectate anterior (Capitolul III). Tulpinile P. ostreatus selectate au fost cultivate n baloane
Erlenmeyer cu cte 150ml mediu nutritiv fiecare n condiii submerse, aerarea fiind realizat printro agitare pe un dispozitiv rotativ cu 180 r.p.m. timp de 10 zile. Componena mediului nutritiv este
urmtoarea: KH2PO4 1g., MgSO47H2O i KCl cte 0,5g. fiecare, FeSO4 0,1g., H2Odist.
1000ml, sursa de azot 0,2g., sursa de carbon 4g., PH iniial 5,6 [129]. n calitatea sursei unice
de carbon pe mediul sintetic au fost studiate monozaharidele glucoza, galactoza, xiloza,
arabinoza; dizaharidele maltoza, zaharoza, lactoza; polizaharidul amidon i alcoolul manit.
Sursa de azot a servit mediul nutritiv cu NaNO3 (0,2 g/l), intensitatea de cretere fiind caracterizat
prin acumularea biomasei absolut uscate (BAU,g/l) dup 240 ore de cultivare (Tab. 24).
Astfel, rezultatele obinute nu permit de a alege o surs preferenial pentru toate tulpinile P.
ostreatus testate i confirm unele date din literatura de specialitate privind asimilarea diferitelor
surse de carbon de ctre aceast cultur [130]. Dac pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 sursa
de carbon optimal este zaharoza, pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
nici o surs nu este de preferin.

80
Tabelul 24
Acumularea biomasei miceliene (BAU, g/l) la cultivarea tulpinilor ciupercii P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe mediul nutritiv Czapek cu diverse surse de
carbon
Pleurotus ostreatus
Sursa de
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
carbon
Mm
Mm
Mm
glucoza
1,36 0,03
0,73 0,04
0,76 0,03
galactoza
0,95 0,07
0,79 0,02
0,66 0,02
xiloza
1,24 0,07
0,87 0,07
0,55 0,05
arabinoza
0,54 0,03
0,58 0,04
0,81 0,03
maltoza
0,69 0,04
0,91 0,02
0,59 0,03
zaharoza
0,61 0,01
0,77 0,06
1,53 0,08
lactoza
0,74 0,05
0,91 0,07
0,76 0,07
amidon
1,30 0,08
0,93 0,08
0,76 0,03
manit
0,74 0,05
0,43 0,03
0,61 0,06
Tulpinile P. ostreatus testate utilizeaz att sursele de azot anorganice, ct i cele organice,
totodat gradul lor de asimilare este diferit (Tab. 25). Sursele anorganice ale azotului se prezint sub
forma srurilor de amoniu (NH4NO3, (NH4)3PO4, (NH4)2SO4) i nitrailor (NaNO3, NH4NO3), iar
cele ale azotului organic sub forma aminoacizilor (asparagina, acidul aspartic). Sursa de carbon a
mediilor nutritive cu azot testate a servit glucoza (4 g/l).
Azotul organic asigur o cretere mai eficient a miceliului ciupercii fa de srurile
minerale ale azotului [186]. n urma unor investigaii, se menioneaz, c asparagina este sursa de
azot optimal pentru multe bazidiomicete [8]. Prin cercetrile efectuate, s-a stabilit, c asparagina
este sursa de azot optimal pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03. n acelai
timp, pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 cele mai bune surse de azot sunt cele anorganice
NaNO3 i (NH4)3PO4.
Tabelul 25
Acumularea biomasei miceliene (BAU, g/l) la cultivarea tulpinilor ciupercii P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe mediul nutritiv Czapek cu diverse surse de
azot
Pleurotus ostreatus
Sursa de
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
carbon
Mm
Mm
Mm
NaNO3
1,22 0,02
1,22 0,03
1,64 0,06
NH4NO3
1,42 0,08
1,23 0,02
1,22 0,02
(NH4)2SO4
1,60 0,07
1,51 0,13
1,40 0,14
(NH4)3PO4
1,82 0,02
1,49 0,02
1,60 0,04
asparagina
1,50 0,07
2,53 0,13
1,87 0,07
ac. aspartic
2,31 0,06
1,69 0,16
1,53 0,12

81
Tulpinile P. ostreatus testate se caracterizeaz printr-o stabilitate a caracterelor morfoculturale, manifestat prin capacitatea de meninere i pstrare a identitii taxonomice i fenotipice.
Cercetrile privind caracterele morfo-culturale ale tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMNFB-03 i CNMN-FB-04 evideniaz la toate mediile nutritive utilizate structuri miceliene n form
de sfere rotunde, pufoase, uneori alungite, neregulate de diverse mrimi de la 0,5 la 6mm n
diametru, sau buci de filamente, conglomerate toate fiind specifice culturii P. ostreatus. S-a
constatat, c forma i diametrul sferelor miceliene depinde de viteza agitrii acestora, majorarea
rotaiilor dispozitivului

de cultivare submers pn la 500 r.p.m. ducnd la omogenizarea i

micorarea sferelor miceliene asemeni terciului de gri. n acelai timp, existena unei legturi
ntre formele morfologice a miceliului ciupercii cultivat submers i nivelul acumulrii biomasei nu
a fost stabilit [127].
Totaliznd rezultatele cercetrilor efectuate, constatm faptul, c tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-02 este cea mai eficient privind asimilarea diferitelor surse ale carbonului i azotului,
valorile acumulrii biomasei (BAU) n majoritatea lor fiind superioare fa de cele ale lui P.
ostreatus CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04. De aceea, n continuare, pentru selectarea mediului
nutritiv optim acumulrii biomasei a fost utilizat tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02. n
conformitate cu rezultatele obinute privind cultivarea submers a tulpinii P. ostreatus CNMN-FB02 zaharoza, glucoza, amidonul i asparagina au fost selectate ca surse de C i N eficiente
acumulrii biomasei. n acelai timp, melasa, care reprezint un produs rezidual provenit de la
extragerea zahrului de sfecl, conine pn la 52% zaharoz [177], utilizarea acesteia ca nlocuitor
al zaharozei contribuind la ieftinirea mediului de cultivare pentru cultura ciupercii.
S-a stabilit [110, 127], c melasa, malul de bere, peptonul i ureea reprezint surse de
carbon i azot eficiente acumulrii biomasei la cultivarea submers a ciupercii P. ostreatus. Astfel,
pentru selectarea mediului nutritiv la cultivarea ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02 au fost utilizate
att surse sintetice, ct i complexe: glucoza, amidonul, melasa, peptonul, asparagina, ureea i
malul de bere.
Rezultatele privind caracterele morfo-culturale i de acumulare a biomasei (BAU) la
cultivarea submers a ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02 variaz n funcie de concentraiile
surselor de C i N asimilate (Tab.26).
Dup cum se vede din tabel, productivitatea maximal a tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-02
s-a obinut la utilizarea malului de bere. Majorarea concentraiei malului de bere de la 40 la
120Balling duce la o intensificare a acumulrii biomasei miceliene, n acelai timp, la sporirea
concentraiei acestuia randamentul ciupercii se micoreaz. n acest mod, concentraiile malului de
bere 60-80Balling corespund randamentului optimal al acumulrii biomasei tulpinii P. ostreatus

82
CNMN-FB-02. Valorile BAU 16,51-17,84 g/l depesc cu mult valorile acumulrii biomasei
pentru restul surselor de carbon i azot testate, astfel nct malul de bere 60-80Balling asigur o
intensitate maxim a activitii metabolice, prezentndu-se ca mediu de nutriie eficient acumulrii
biomasei pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02.
Tabelul 26
Caracterele morfo-culturale i acumularea biomasei absolut uscate (BAU, g/l) la cultivarea
submers a tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-02 pe diverse medii nutritive sintetice i complexe
Sursa
Concentraia
Caracterele morfo-culturale i
BAU,
g/l
organoleptice
g/l
Sfere mici rotunde cu diametrul 1-3mm,
buci de hife i conglomerate; la extremitatea 0,40 0,03
10
superioar a fazei lichide pe colb se 0,49 0,04
glucoz
20
formeaz un inel de hife miceliene de substrat 0,84 0,05
40
i aeriene cu limea de 1-2mm, miros plcut, 1,14 0,07
60
slab floral
Sfere rotungite, pufoase, uneori ovale cu 1-5mm; pe colb se formeaz un inel de hife 0,43 0,03
melas
10
miceliene de o culoare castanie din cauza 1,40 0,06
30
mediului nutritiv, miros neutru sau slab de 0,92 0,06
60
ciuperci
Sfere mici rotunde, stelate - 0,5-3mm, albe;
10
0,24 0,01
la extremitatea superioar a fazei lichide pe 0,95 0,04
20
colb se formeaz un inel de hife miceliene de 1,58 0,03
40
amidon
limea 2-3mm, miros foarte plcut de 2,60 0,12
60
ciuperci
Cretere abundent n form de sfere rotunde
0
sau stelate, unele puin ovale cu - 2-6mm, 10,22 0,90
4 Balling
buci de hife mici - 0,5mm; pe colb, la 16,51 1,24
60Balling
mal
extremitatea superioar a fazei lichide se 17,84 1,06
80Balling
de bere
0
formeaz un inel din filamente aeriene i de 17,86 1,46
10 Balling
0
substrat cu limea de 5-10mm, miros foarte 19,02 1,88
12 Balling
plcut de ciuperci
Conglomerate de filamente, sfere rotunde sau 2,06 0,16
1,5
neregulate - 0,5-5mm, inel de hife 2,49 0,12
pepton
3,0
miceliene de limea 2-5mm, miros slab, 3,54 0,24
6,0
puin floral
Conglomerate de hife miceliene, sfere 0,67 0,03
0,5
rotungite pufoase - 0,5-4mm, inel de 0,89 0,05
asparagin
1,0
culoare alb de limea 2-3mm, miros plcut 1,38 0,10
2,0
de ciuperci
Buci de filamente i conglomerate rotunde 0,35 0,02
0,5
mici - 0,5-2mm, inel de hife miceliene slab 1,24 0,06
uree
1,0
pronunat
de limea 1-2mm, miros slab de 1,07 0,09
2,0
ciuperci
De rnd cu datele experimentale ale unor autori [127, 134] referitor la capacitatea de
asimilare a diferitelor nutrieni de ctre P. ostreatus, menionm faptul c mediile complexe bogate
n zaharide, aminoacizi, vitamine i diverse substane bioactive n condiiile cultivrii submerse sunt

83
mai eficiente acumulrii biomasei miceliene dect cele sintetice. Eficacitatea mediilor nutritive
complexe fa de cele sintetice poate fi explicat prin faptul, c unii constitueni intermediari
necesari activitii metabolice ale ciupercii sunt deja prezeni n mediul de nutriie i nu necesit a fi
sintetizai de novo. n componena mediilor nutritive complexe, ca de exemplu al malului de bere,
pe lng zaharide, substane azotate, vitamine i acizi grai se mai conin i compui ai fosforului,
sulfului, diverse microelemente, rolul crora n metabolismul bazidiomicetelor nu este elucidat pe
deplin. De aceea, realizarea unui mediu sintetic ce ar corespunde n totalitate exigenelor
nutriionale a unei tulpini de bazidiomicet este dificil, utilizarea pe scar larg a unui astfel de
mediu fiind puin probabil [127].
n concluzie, pe baza datelor experimentale obinute se poate afirma, c malul de bere poate
fi propus n calitate de mediu nutritiv eficient acumulrii biomasei miceliene pentru tulpina P.
ostreatus CNMN-FB-02. Valorile maxime ale acumulrii biomasei 16,51-17,84 g/l BAU au fost
primite pentru concentraiile 60-80Balling a malului de bere. Biomasa obinut posed i un miros
puternic i plcut de ciuperci, ceea ce este semnificativ n cazul utilizrii acesteia ca produs
alimentar. O alt particularitate pe lng obinerea biomasei alimentare este utilizarea miceliului
cultivat submers n calitate de inoculum pentru replicarea pe scar larg a materialului semincer
[127, 134]. Prin cercetrile efectuate am constatat, c folosirea a 8-10%V de inoculum P. ostreatus
cultivat submers duce la micorarea cu 2 zile a duratei de cultivare, ceea ce reduce i ieftinete
procesul tehnologic de preparare a materialului semincer granulat. Materialul semincer granulat
obinut n baza inoculumului P. ostreatus cultivat submers este fertil, capacitatea de fructificare
fiindu-i demonstrat n figura 19.

Figura 19. Fructificarea pstrvului de fag n baza inoculumului Pleurotus ostreatus

cultivat submers
Rezultatele obinute in s confirme i unele date din literatura de specialitate [74, 102, 127,
134] cu privire la perspectiva cultivrii submerse a ciupercii P. ostreatus n scopul obinerii
biomasei alimentare.

84

5.2 Valoarea nutritiv a miceliului P. ostreatus cultivat submers

Studiul cultivrii submerse a unor specii de bazidiomicete n scopuri alimentare impune cu
necesitate cercetarea nivelului i randamentului de acumulare a biomasei miceliene, determinarea
inofensivitii i valorii nutritive a acesteia, analiza comparativ i stabilirea gradului de similaritate
a componentelor proteice a biomasei miceliene cu a carpoforilor ciupercii produsul tradiional
folosit n alimentaie.
Posibilitatea utilizrii miceliului de ciuperci comestibile n scopuri alimentare se apreciaz,
mai nti de toate prin estimarea valorii nutritive, determinate de coninutul proteinei,
componentelor calitative i digestibilitii biomasei culturale.
Digestibilitatea proteinelor n carpoforii ciupercilor comestibile se estimeaz la valori de
pn la 70% [14]. Unii autori [88, 134] au stabilit, c n dependen de sursa de carbon utilizat,
digestibilitatea proteinei fungice la cultivarea submers a miceliului de Lentinus edodes, Pleurotus
ostreatus, Panus tigrinus, Flammulina velutipes ajunge pn la 80-90%.
Prin cercetrile efectuate asupra animalelor de laborator, menite s pun n eviden
inofensivitatea miceliului P. ostreatus cultivat submers, s-a constatat c biomasa acestuia nu este
toxic i poate fi folosit n alimentaie [134]. Semnificativ este i faptul, c bazidiomicetele la
cultivarea submers nu formeaz spori care pot provoca boli alergice pentru personalul de deservire,
un astfel de pericol existnd real la cultivarea ascomicetelor [184].
Scopul cercetrilor efectuate a constat n evaluarea valorii biologice (nutritive) a miceliului
tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivate submers pentru
stabilirea posibilitii de valorificare a biomasei miceliene n alimentaie.
Tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 au fost cultivate n
baloane Erlenmeyer cu cte 150 ml mal de bere 60Balling fiecare n condiii submerse la
temperatura de 2710C, aerarea fiind realizat printr-o agitare pe un dispozitiv rotativ cu 180 r.p.m.
timp de 10 zile. Biomasa obinut a fost uscat, cntrit i analizat din punct de vedere al
componenei aminoacizilor totali (Tab.27).
Rezultatele cercetrilor au artat c biomasa P. ostreatus obinut conine 18 aminoacizi,
dintre care 9 sunt eseniali. Cantitatea total a aminoacizilor biomasei miceliene pentru tulpinile P.
ostreatus testate a variat ntre 21,3-34,2% (g/100g BAU), n componena aminoacizilor
predominnd acizii glutamic i aspartic, ceea ce este caracteristic carpoforilor de bazidiomicete
[14].
Componena calitativ a aminoacizilor eseniali pentru toate tulpinile P. ostreatus testate se
menine aproape la acelai nivel, cantitativ acestea fiind comparate cu normele ntrite de FAO
pentru proteina ideal (Tab.28).

85
Procentual, cantitatea aminoacizilor eseniali raportat la protena de referin FAO se
prezint astfel: treonina 168-182%, valina 178-274%, metionina 14-31%, izoleucina 75112%, leucina 66-101%, tirozina 47-63%, fenilalanina 83-87%, lizina 33-40%, triptofan
80-140% (Fig.20).
Tabelul 27
Coninutul de aminoacizi n biomasa P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i
CNMN-FB-04 cultivate submers pe mal de bere 60Balling (g/100g BAU)
Pleurotus ostreatus
Aminoacizii
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
0,1360
0,1544
0,1744
Acidul cisteinic
0,2226
0,2218
0,1920
Taurin
2,0670
2,6067
2,8658
Acidul aspartic
1,4487
1,7665
2,4425
Treonin
1,4968
1,8573
1,9379
Serin
4,5056
6,5767
8,3863
Acidul glutamic
0,3637
0,5389
0,6063
Prolin
1,0135
1,2126
1,4646
Glicin
1,2354
1,5940
1,9166
Alanin
2,8249
2,8630
2,9523
Valin
1,4016
1,7543
2,2597
Cistein
0,2357
0,1789
0,1651
Metionin
0,6623
0,7850
1,5010
Izoleucin
1,1057
1,2278
2,3619
Leucin
0,2900
0,4961
0,5950
Tirozin
0,5271
0,6774
0,8465
Fenilalanin
0,0988
0,1195
0,1958
Acidul aminouleic
0,0904
0,1387
0,1874
Ornitin
0,0555
0,0737
0,1234
Etanolamin
0,3618
0,5341
0,7316
Lizin
0,2894
0,2111
0,3277
Triptofan
0,2390
0,3600
0,5170
Histidin
0,5996
1,2962
1,4136
Arginin
0,1862
0,1531
0,2248
Amoniac
Suma aminoacizilor
21,2709
27,2447
34,1645
identificai
Suma aminoacizilor
8,2941
9,9000
13,2592
eseniali
Suma aminoacizilor
12,3736
16,6367
20,0323
accesibili
Suma aminoacizilor
16,2829
20,4422
24,5534
imunoactivi
% aminoacizilor
0,390
0,363
0,388
ES/ST*
*ES eseniali; ST suma total.

86
Tabelul 28
Coninutul de aminoacizi eseniali (g/100g protein) n proteina ideal (FAO) i proteina
miceliului P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivat submers pe mal
de bere (60Balling)
Pleurotus ostreatus
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03
CNMN-FB-04
Aminoacizii
FAO
7,0
6,7
7,3
4,0
treonin
13,7
10,8
8,9
5,0
valin
1,1
0,7
0,5
3,5
metionin
3,2
3,0
4,5
4,0
izoleucin
5,3
4,6
7,1
7,0
leucin
1,4
1,9
1,8
3,0
tirozin
2,6
2,6
2,5
3,0
fenilalanin
1,8
2,0
2,2
5,5
lizin
1,4
0,8
1,0
1,0
triptofan
Suma aminoacizilor
37,5
33,1
35,8
36,0
eseniali

Pleurotus ostreatus

300

200

100

0
thr

val

met

CNMN-FB-02

ile

leu

CNMN-FB-03

tyr

phe

lys

trp

CNMN-FB-04

Figura 20. Coninutul de aminoacizi eseniali (% fa de proteina ideal FAO) n

miceliul P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivat submers pe mal
de bere (60Balling)
Astfel, biomasa P. ostreatus cultivat submers pe mediul nutritiv cu mal de bere conine o
cantitate ce depete de 1,68-2,74 ori valorile aminoacizilor eseniali ntrite de FAO pentru
treonin i valin, n acelai timp, aminoacizii limitativi sunt metionina i lizina.
Pentru estimarea valorii nutritive a biomasei tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMNFB-03 i CNMN-FB-04 au fost calculai indicii aminoacizilor eseniali (EAA) i indicii nutritivi [14,
62], (Tab.29).
Nivelul acumulrii biomasei miceliene i indicele aminoacizilor eseniali (EAA) au atins
pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 cele mai mari valori 17,3 g/l BAU i respectiv 104,2%.

87
Pentru acest indice EAA, valoarea indicelui nutritiv a fost de 21,6, fapt ce a permis a fi raportat la
valoarea nutritiv a leguminoaselor pentru boabe (indicele nutritiv=21). Biomasa obinut ntrece
cantitativ proteina ideal cu 3 din 9 aminoacizi eseniali. Aceasta se refer la treonin (175%),
valin (274%) i triptofan (140%). Limitate din punct de vedere al coninutului aminoacizilor
eseniali sunt metionina (31%), lizina (33%) i tirozina (47%).
Tabelul 29
Biomasa absolut uscat (g/l, BAU) i valoarea nutritiv a miceliului P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivat submers pe must de bere 60Balling
Tulpina
P. ostreatus
BAU, g/l
Indicele EAA
Indicele nutritiv
17,31,2
104,2
21,6
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03

9,50,8

91,9

24,3

CNMN-FB-04

8,00,7

99,4

33,1

Unii autori [14, 31] indic faptul, c proteinele unor specii de bazidiomicete posed caliti
deosebite i pot fi raportate la valoarea proteinelor animaliere. Astfel, datorit coninutului nalt i
valoros al proteinelor biomasei miceliene indicele nutritiv pentru P. ostreatus CNMN-FB-04 a atins
valoarea 33,1, fapt pentru care acesta se apropie de valoarea nutritiv a crnii de porc (indicele
nutritiv =35). Biomasa P. ostreatus CNMN-FB-04 este cea mai echilibrat din punct de vedere al
componenei aminoacizilor si, totodat, nivelul acumulrii biomasei miceliene este cel mai mic
8,0 g/l BAU. Tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 nu cedeaz proteinei de referin FAO privind
coninutul unor aa aminoacizi, ca leucina, izoleucina i triptofanul, iar dup coninutul treoninei i
valinei o depete cu mult. n acelai timp, biomasa obinut este srac n lizin i metionin.
Mrirea cantitii de biomas nu reflect n mod obligatoriu o cretere echilibrat, deoarece
ea poate rezulta din sinteza i acumularea substanelor de rezerv, n absena sintezei componentelor
proteice ceea ce determin valoarea nutritiv sczut a acesteia. Valoarea biologic (nutritiv) a
ciupercii nu poate nregistra o majorare nelimitat deoarece este condiionat, pe de o parte de
epuizarea nutrienilor disponibili, n special a compuilor azotai din mediu i, pe de alt parte de
acumularea biomasei care se supune legitii distribuirii normale a componentelor proteice, n acord
cu particularitile de cretere i dezvoltare a organismului heterotrof. n conformitate cu rezultatele
obinute, se constat o corelare invers ntre productivitate i valoarea nutritiv la carpofori i
biomasa P. ostreatus. Spre exemplu, productivitatea carpoforilor P. ostreatus pentru mediul nutritiv
PG este major, n acelai timp valoarea nutritiv este sczut (Capitolul IV., Tab.14, 23). Aceasta
se refer i la biomasa cultivat submers pentru care indicele nutritiv mic corespunde unui nivel
major al acumulrii biomasei miceliene (Tab.29).
Analiza comparativ a compoziiei chimice ntre carpoforii ciupercii i biomasa cultural
pentru tulpinile P. ostreatus testate a determinat faptul, c pe lng similaritatea acestora au fost

88
evideniate i deosebiri (Tab.20, 21, 27). Cele mai mari diferene privind coninutul aminoacizilor
eseniali au fost gsite pentru valin i lizin. Coninutul aminoacizilor totali n carpofori i biomas
pentru tulpinile P. ostreatus testate sunt date n tabelul 30.
Tabelul 30
Date compararive privind coninutul aminoacizilor totali (g/100g BAU) n carpofori i
miceliu la cultivarea n fazele solid i lichid a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
Miceliu cultivat submers
Tulpina
Carpofori cultivai pe
(mal de bere 60Balling)
P. ostreatus
diverse substraturi
lignocelulozice
26,1 30,9
21,3
CNMN-FB-02
CNMN-FB-03

31,6 41,0

27,2

CNMN-FB-04

15,3 45,3

34,2

Dup cum rezult din tabel, coninutul aminoacizilor totali n carpofori este mai mare dect
n biomasa cultivat submers. Excepie prezint carpoforii tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-04
cultivai pe substraturile nutritive PG, PGL i PGFS (Tab.20, 21) pentru care sumele aminoacizilor
totali au constituit valori mai mici dect pentru biomasa cultivat submers: 15,3-30,8 g/100g BAU
fa de 34,2 g/100g BAU. Dei muli cercettori consider biomasa cultivat submers mai valoroas
dect carpoforii ciupercii n ceea ce privete coninutul proteinei [31, 186], datele referitoare la
componena chimic i valoarea biologic a carpoforilor i miceliului cultivat submers sunt
contradictorii. Cantitativ, diferenele componentelor chimice pentru carpofori i miceliul cultural
pot fi semnificative pn i la nivel de tulpin, acestea fiind determinate de aa factori, ca vrsta
culturii, mediul de nutriie, condiiile de cultivare etc. Asigurarea condiiilor optime de dezvoltare la
cultivarea submers ofer posibiliti majore de intensificare a tuturor proceselor biotehnologice,
permite ameliorarea unor aa indici biochimici, ca coninutul de proteine, aminoacizi i a altor
componente ale miceliului ciupercii, i obinerea, n final, a biomasei culturale cu caliti
prognozate.
Astfel, n rezultatul studierii tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMNFB-04 selectate anterior au fost stabilite diferenele morfo-culturale i biochimice, a fost selectat
mediul optim de nutriie i caracterizat valoarea nutritiv a miceliului cultivat submers. Nivelul
acumulrii biomasei miceliene a atins cea mai mare valoare la cultivarea tulpinii P. ostreatus
CNMN-FB-02 pe mediul nutritiv cu mal de bere (16,51-17,84g/l BAU). Cercetrile privind
determinarea valorii nutritive a miceliului tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i
CNMN-FB-04 cultivate submers au elucidat posibilitatea valorificrii biomasei miceliene n
alimentaie. Miceliul obinut posed un miros plcut de ciuperci i se caracterizeaz printr-o valoare
nutritiv nalt, fapt pentru care acesta poate fi utilizat ca supliment proteic valoros.

89

5.3 Dinamica biosintezei unor enzime hidrolitice i a acumulrii biomasei

proteice la cultivarea submers a ciupercii Pleurotus ostreatus
pe medii nutritive complexe
Bazidiomicetele xilotrofe n contrast cu alte ciuperci din aceiai diversitate ecologic posed
o capacitate redutabil de cretere intensiv n condiiile cultivrii submerse. Acestea secret
enzime hidrolitice i oxidoreductoare de o specificitate nalt fa de substrat, provocnd astfel
degradarea materialelor celulozice n compui uor asimilabili, proprii necesitilor fiziologice
constructive i energetice.
O larg utilizare de interes biotehnologic o au ciupercile xilotrofe ce aparin genului
Pleurotus. Pe lng cantiti importante de substane proteice, fibre, hidrai de carbon, vitamine
pstrvul de fag (Pleurotus ostreatus) sintetizeaz i diverse enzime ale complexelor celulazice,
hemicelulazice i ligninazice [116, 118]. Obinerea n exclusivitate a biomasei proteice prin
convertirea de ctre bazidiomicete a materiei prime vegetale nu este de perspectiv. Una din
condiiile determinante care asigur eficacitatea biotehnologiilor n timpul de fa este obinerea, de
rnd cu biomasa fungic, a produselor valoroase de sintez, n special a enzimelor hidrolitice
(celulaze, xilanaze, pectinaze, amilaze, proteaze) i oxidoreductazelor (peroxidaze, lacaze) [187].
Diversitatea i activitatea biosintetic a componentelor enzimatice la cultivarea submers a ciupercii
P. ostreatus sunt influenate de compoziia mediului nutritiv i durata de cultivare [116]. Scopul
cercetrilor a fost studierea n dinamic a biosintezei unor enzime hidrolitice (celulaza, amilaza,
lipaza) i a acumulrii biomasei proteice la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe medii nutritive complexe. Activitatea biosintetic a
enzimelor hidrolitice a fost testat n dinamic timp de 14 zile pe dou medii nutritive: 1) fin de
soia (0,5%) + fin de porumb (2%) i 2) fin de soia (0,5%) + coji de floarea soarelui (2%).
Un rol esenial n asigurarea unui randament sporit al biomasei i biosintezei de metabolii
celulari revine cantitii i strii fiziologice a miceliului ciupercii introdus n mediul de nutriie.
Rezultatele cercetrilor au artat, c pentru nsmnarea mediilor nutritive lichide este necesar
folosirea unui inoculum fiziologic activ, aflat n faza de cretere exponenial a ciupercii P.
ostreatus (4-6 zile). n scopul majorrii punctelor de cretere i intensificrii proceselor metabolice
la cultivarea submers a ciupercii P. ostreatus, inoculumul a fost preventiv omogenizat i introdus
n mediul de nutriie n cantitate de 10%V, ceea ce reprezint 1,2-1,6 g/l BAU.
Concentraia ionilor de hidrogen n mediu exercit o influen major asupra caracterului
procesului metabolic, PH-ul optim creterii i dezvoltrii miceliului de ciuperci Pleurotus fiind
stabilit pentru valorile 5-6 i 9 [134]. PH-ul iniial al mediilor complexe cu coji de floarea-soarelui i
fin de porumb a fost de 5,6 i respectiv 6,7. Pe parcursul cultivrii ciupercii P. ostreatus CNMN-

90
FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04, PH-ul mediului nutritiv a oscilat n limitele 5,9...8,4 pentru
ca ulterior, la sfritul cultivrii (14 zile) s devin 8,3-8,4 (Tab. 31).
Rata de cretere maximal () o caracteristic a acumulrii biomasei ciupercii n faza
exponenial de cretere prezint valori cuprinse ntre 0,034 or-1 pentru P. ostreatus CNMN-FB03 i 0,04 or-1 pentru P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04. Aceste date corespund
rezultatelor unor cercettori [134] privind estimarea ratei specifice de cretere la cultivarea
submers a ciupercii P. ostreatus. Timpul de generaie (g), respectiv timpul necesar pentru dublarea
biomasei este de 20,4 ore pentru P. ostreatus CNMN-FB-03 i 17,3 ore pentru P. ostreatus CNMNFB-02 i CNMN-FB-04.
Optimiznd mediul nutritiv i condiiile de cultivare submers n fermentatoare de 3 i 10 l a
ciupercii P. ostreatus, Solomko E. [82] a obinut rezultate ce totalizaz 16-18 g/l BAU dup 4-5 zile
de fermentare. Productivitatea maxim la cultivarea submers n fermentatoare a fost obinut n
faza exponenial de cretere a tulpinilor brevetate Pleurotus ostreatus 1300 i Panus tigrinus 131
4-7 g/l/zi [134]. Aceste date corespund rezultatelor proprii, valorile acumulrii biomasei pentru
mediul complex cu fin de soia (0,5%) i porumb (2%) constituind 16,20 i 15,67 g/l BAU la
tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04 cultivate submers timp de 4 zile. Perioada
creterii exponeniale ale acestora este de 48 ore i corespunde zilelor 2-4, productivitatea maxim
obinut fiind de 6-6,2 g/l/zi (Fig. 21).
n cazul tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04 cultivate submers pe mediul
organic complex n baza finii de porumb substratul fermentabil este aproape integral convertit la
biomas chiar n ziua a 4-a (Fig. 22). Pentru mediul cu coji de floarea-soarelui tulpinile P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 au nregistrat valori maxime dup 6 zile de cultivare
22,00, 20,27 i respectiv 21,60 g/l BAU (Tab. 31). n acelai timp, substratul fermentabil n baza
cojilor de floarea-soarelui nu a fost convertit n biomas, de aceea nu poate fi utilizat dect numai n
calitate de adaos furajer pentru animale. O alt modalitate de obinere a biomasei alimentare este
separarea miceliului de substratul insolubil neutilizat. Datorit fenomenului specific de cretere a
biomasei miceliene n form de pelete (conglomerate, sfere), acestea pot fi uor separate, ceea ce
prezint un avantaj n procesele biotehnologice de fermentare [58].
Determinarea activitii sumare a complexului celulazic n baza hidrolizei hrtiei de filtru
(HF) este o metod pe larg utilizat i acceptat datorit simplitii de realizare a acesteia i
faptului, c hrtia de filtru reprezint celuloz nativ, rezistent la degradare. n acelai timp,
activitatea nalt a complexului celulazic n baza hidrolizei hrtiei de filtru nu coincide n timp cu
viteza maxim de formare a glucozei rezultat din degradarea carboximetilcelulozei substituite.
Activitatea maxim de zaharificare a hrtiei de filtru n prezena inductorului (coji de floarea-

91
soarelui) a fost stabilit pentru P. ostreatus CNMN-FB-03 n zilele 6 i 11 de cultivare i a constituit
0,102 Uml-1 i respectiv 0,139 Uml-1. Capacitatea maxim de acumulare a celulazelor capabile s
hidrolizeze HF pentru mediul cu fin de porumb a fost mai tardiv, tulpina ciupercii P. ostreatus
CNMN-FB-04 nregistrnd o activitate de 0,108 Uml-1 la a 14-a zi de fermentare (Tab. 31, Fig. 23).

BAU, g/l

P. ostreatus
20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
0

10 11 12 13 14

zile
CNMN-FB-02

CNMN-FB-03

CNMN-FB-04

Figura 21. Biomasa absolut uscat (BAU) la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe mediul cu fin de soia i porumb

Figura 22
A. Biomasa ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02 cultivat submers pe mediul fin de
soia (0,5%) + fin de porumb (2%) (4 zile)
B. Biomasa ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02 cultivat submers pe mediul fin de
soia (0,5%) + coji de floarea-soarelui (2%) (4 zile)

92
Pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 cultivat pe mediul nutritiv bogat n celuloz (coji
de

floarea-soarelui)

acumularea

maxim

celulazelor

ce

determin

degradarea

carboximetilcelulozei a fost prezent n ziua a 7-a, valoarea acesteia constituind 0,938 Uml-1.
Tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 a manifestat o nalt activitate celulazic n zilele 9, 11 i 13,
nivelul biosintezei enzimelor studiate fiind mai redus dect n ziua a 7-a, nregistrnd 0,830-0,843
Uml-1. Pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04 valorile maxime de biosinteza a
celulazelor capabile s hidrolizeze substratul solubil (Na-CMC) a fost de 0,386 i 0,832 Uml-1 n
zilele 12 i respectiv 13 de cultivare. O nalt activitate hidrolitic (celulazic) n cazul ambelor
medii de cultivare utilizate s-a nregistrat n zilele 11 (P. ostreatus CNMN-FB-04) 0,392-0,446
Uml-1, 12 (P. ostreatus CNMN-FB-02) 0,375-0,386 Uml-1 i 14 (P. ostreatus CNMN-FB-04)
0,387-0,448 Uml-1. Aceast perioad corespunde fazei de declin i, ca urmare, concentrarea
hidrolazelor s-ar datora trecerii n mediu a celulazelor intracelulare n urma proceselor de autoliz
produse de enzimele proteolitice endogene.
Pentru tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivate submers
figurile 24 i 25 prezint dinamica biosintezei amilazelor n decursul a 4-14 zile. n dependen de
durata cultivrii, s-au nregistrat dou maxime distincte de biosintez a amilazelor, manifestarea
celui de-al doilea maxim de activitate enzimatic cantitativ fiind mai nsemnat dect primul.
Pentru mediul ce conine fin de porumb primul punct maxim se nscrie pe curb n zilele 67, iar pentru mediul cu coji de floarea-soarelui n zilele 8-10, activitatea amilazic constituind
1,44-2,07 Uml-1 i respectiv 1,22-2,88 Uml-1. Fa de mediul cu fin de porumb al doilea punct
maxim se nscrie pe curb n zilele 10-11, iar fa de mediul cu coji de floarea-soarelui n zilele
11-12, valorile activitii amilolitice oscilnd ntre 2,20-2,88 Uml-1 i respectiv 1,84-3,07 Uml-1.
Tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 cultivat submers pe mediul ce conine coji de floarea-soarelui
a nregistrat cea mai nalt activitate amilolitic n zilele 10 i 12, valorile activitii hidrolitice
determinate n condiii standard la PH-ul 4,7 constituind 2,88 i respectiv 3,07 Uml-1. Cel de-al
doilea punct maxim coincide cu trecerea culturii n faza de declin n cursul creia are loc iniierea
proceselor de autoliz a celulelor fungice. Ca urmare, n urma lizei celulelor, are loc eliberarea i
acumularea suplimentar n lichidul de cultur a amilazelor intracelulare, ceea ce determin
activitatea amilolitic ridicat la a 10-12 zi de cultivare a ciupercii.

93
Tabelul 31

02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04
02
03
04

I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II
I
II

Durata
cultivrii,
zile

Mediul
de nutriie

Tulpina

P.ostreatus
CNMN-FB-

Dinamica biosintezei unor enzime hidrolitice

i acumularea biomasei absolut uscate (BAU) la cultivarea submers a ciupercii Pleurotus
ostreatus pe medii nutritive complexe cu fin de porumb (I) i coji de floarea-soarelui (II)

10

11

12

13

14

Activitatea hidrolitic a
celulazelor (Uml-1) asupra
carboximetilcelulozei
de sodiu (Na-CMC)
0,054
0,196
0,109
0,087
0
0,174
0,065
0,210
0,462
0,775
0,022
0,103
0,011
0,144
0
0,938
0
0,076
0,141
0,196
0,081
0,380
0
0,158
0,136
0,185
0,428
0,843
0
0,223
0,242
0,152
0,136
0,680
0,032
0,255
0,120
0,228
0,054
0,830
0,392
0,446
0,375
0,386
0,150
0,490
0,419
0,185
0,098
0,381
0,214
0,843
0,218
0,832
0,367
0,280
0,160
0,435
0,387
0,448

hrtiei de filtru
(HF)
0,016
0
0
0
0
0,060
0,044
0,076
0,056
0,102
0,060
0,071
0
0,020
0
0,027
0,033
0,065
0,025
0,014
0
0,046
0
0,017
0,027
0,022
0,030
0,058
0
0,038
0,027
0,016
0,011
0,036
0,020
0,043
0,022
0,033
0,030
0,139
0,065
0,065
0,054
0,033
0
0,082
0,049
0,011
0
0,060
0,010
0,041
0,011
0,044
0,003
0,022
0
0,041
0,108
0,047

Amilaza,
Uml-1
0
0
0
0
0
0
0
urme
2,07
0,46
0
0
1,87
0
0,42
urme
1,44
0,30
0,78
0,46
0,46
1,67
1,06
1,22
0,46
1,60
urme
1,45
0,74
0,32
0,62
0,22
0,46
2,88
2,20
0,46
2,32
1,84
2,48
urme
0,63
2,56
urme
0,86
1,16
3,07
urme
1,67
1,60
0,42
urme
urme
0,32
1,60
0,46
0,32
0,67
0,57
0,46
urme

Lipaza,
Uml-1

375
375
125
375
250
250

375
250
375
250
625
250

BAU,
g/l

PH-ul

16,20
20,13
10,80
20,73
15,67
18,60
16,13
22,00
11,40
20,27
15,87
21,60
15,33
20,93
11,20
19,87
14,67
20,47
15,33
21,20
10,13
19,80
15,13
18,67
14,33
21,47
10,92
19,67
14,33
19,20
13,00
21,93
13,20
19,60
13,27
20,00
14,00
19,93
12,40
19,60
12,33
19,80
13,47
21,13
11,80
20,00
11,73
18,20
13,07
20,20
12,00
19,33
11,27
18,93
11,93
20,06
11,73
18,13
12,53
18,73

6,7
7,0
7,4
6,7
6,8
6,8
6,7
7,1
7,3
6,3
7,0
7,4
6,7
7,8
7,7
6,7
7,4
7,0
6,6
8,1
5,9
6,3
6,9
6,3
6,8
7,7
7,1
7,9
6,2
6,3
7,5
7,4
6,4
7,9
6,5
7,2
8,1
8,3
6,3
8,1
7,5
8,3
7,6
8,0
7,1
8,4
8,2
8,0
8,2
8,2
8,0
8,3
7,4
7,9
8,3
8,4
8,3
8,4
8,3
8,3

94

1
CMCaza, U/ml

CMCaza, U/ml

0,5
0,4
0,3
0,2
0,1

0,8
0,6
0,4
0,2
0

0
4

10

11 12 13

14

CNMN-FB-02

10

11 12 13

14

CNMN-FB-03

CNMN-FB-04

CNMN-FB-02

0,12

CNMN-FB-03

CNMN-FB-04

0,16
HFaza, U/ml

HFaza, U/ml

zile

zile

0,09
0,06
0,03

0,12
0,08
0,04
0

0
4

10 11

12 13

14

10 11 12 13 14

zile

zile

3
CNMN-FB-02

CNMN-FB-03

CNMN-FB-02

CNMN-FB-04

CNMN-FB-03

CNMN-FB-04

Figura 23. Biosinteza celulazelor (Uml-1) la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus

CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe mediile complexe cu fin de porumb (1,3)
i coji de floarea-soarelui (2,4)
Pleurotus ostreatus

U/ml

CNMN-FB-02

CNMN-FB-03

CNMN-FB-04

3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
4

10

11

12

13

14

zile
Figura 24. Biosinteza amilazelor (Uml-1) la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe mediul complex cu fin de porumb

95

Pleurotus ostreatus

U/ml

CNMN-FB-02

CNMN-FB-03

CNMN-FB-04

3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
4

10

11

12

13

14

zile
Figura 25. Biosinteza amilazelor (Uml-1) la cultivarea submers a tulpinilorP. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe mediul complex cu coji de floarea-soarelui
Unele micromicete posed o capacitate biosintetic sporit a lipazelor [76], n acelai timp
studierii metaboliilor lipolitici sintetizai de ctre ciupercile bazidiale nu se acord atenia cuvenit.
Datorit coninutului nalt de grsimi fina de soia stimuleaz efectiv biosinteza lipazelor, fapt
pentru care aceasta este pe larg utilizat n componena mediilor nutritive la selectarea unor tulpini
de fungi perspectivi productori de lipaze. Cercetarea activitii lipolitice la tulpinile P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 a fost efectuat pe mediile complexe ce conin fin
de soia n zilele 7 i 14 de cultivare. Activitatea lipolitic a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02 i
CNMN-FB-04 dup 7 zile de cultivare a constituit 375 i respectiv 250 Uml-1 pentru ambele medii
nutritive testate. Mediul cu coji de floarea-soarelui pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 s-a
dovedit a fi mai eficient acumulrii enzimelor lipolitice, activitatea acestuia constituind 375 Uml-1
fa de 125 Uml-1 pentru mediul cu fin de porumb. La sfritul cultivrii (14 zile) s-a nregistrat o
activitate lipolitic de 250 Uml-1 la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMNFB-04 pe mediul cu coji de floarea-soarelui i 375 Uml-1 la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i
CNMN-FB-03 pentru mediul cu fin de porumb. Valoarea major a activitii lipolitice a fost
stabilit n ziua a 14-a de fermentare la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 pentru mediul fin de
soia (0,5%) + fin de porumb (2%) - 625 Uml-1.
Rezultatul activitii metabolice de biosintez este reflectat n compoziia chimic a ciupercii,
constituirea fiecrui component celular fiind dirijat prin mecanisme de control care coordoneaz
biosinteza n funcie de condiiile oferite de mediu i a necesitilor vitale ale organismului
heterotrof. Determinarea calitativ a componentelor biomasei fungice este relevant deoarece
aceasta reflect i caracterizeaz valoarea biologic a produsului obinut. n dependen de
substratul nutritiv fermentat procesul de biosintez maxim a proteinelor se desfoar n diferite

96
perioade ale creterii i dezvoltrii ciupercii P. ostreatus. Dinamica acumulrii proteinei cu referin
la suma aminoacizilor identificai atest o majorare a acesteia fa de martor pentru ambele medii
nutritive testate. Pentru mediul complex ce conine fin de porumb acumularea maxim a
proteinelor ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04 a fost nregistrat la a 4-a zi de
cultivare i corespunde valorilor maxime ale acumulrii biomasei fungice: 11,9-15,0% protein i
respectiv 15,7-16,2g/l BAU. n cazul tulpinii P. ostreatus CNMN-FB-03 biosinteza maxim a
proteinelor (17,9-18,0%) se atest n zilele 4-6 i corespunde fazei de ncetinire a creterii ciupercii
de pstrv (Fig. 26).

Figura 26. Dinamica acumulrii proteinei n biomasa absolut uscat (BAU) a ciupercii P.
ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivat submers pe mediile nutritive
cu coji de floarea-soarelui (I) i fin de porumb (II)
Studiul metabolismului de biosintez a proteinelor n cazul mediului de nutriie cu coji de
floarea-soarelui a artat, c acumularea compuilor proteici se realizeaz treptat, valorile maxime de
biosintez ale acestora fiind obinute la sfritul cultivrii ciupercii P. ostreatus la a 12-14 zi de
fermentare (8,2-11,0% protein). Aceasta se datoreaz faptului c cojile de floarea soarelui
reprezint un substrat mai puin accesibil i este convertit la biomas mult mai anevoios dect fina
de porumb.
Biomasa ciupercii P. ostreatus cultivat submers conine 18 aminoacizi, dintre care 9 sunt
eseniali. Rezultatele determinrii n dinamic a coninutului aminoacizilor eseniali (g/100g
protein) pentru toate tulpinile P. ostreatus cultivate submers pe mediile de nutriie n baza finii de
porumb i a cojilor de floarea-soarelui sunt date n Tab. 32 i Tab. 33, acestea fiind comparate cu
martorul i cu normele ntrite de FAO pentru proteina ideal.

97
Tabelul 32

izoleucin

leucin

tirozin

fenilalanin

lizin

triptofan

aminoacizilor
imunoactivi

metionin

% aminoacizilor
ES/ST

valin

FAO

4,0

5,0

3,5

4,0

7,0

3.0

3,0

5,5

1,0

36,0

Martor

4,6

0,3

0,5

2,7

8,8

3,0

4,3

3,3

0,3

27,8

0,277

63,7

6,3
5,8
4,5
5,4
4,6
4,7
4,4
4,8
5,5
6,2
4,1
4,7

8,2
9,1
12,1
10,9
3,0
5,2
5,8
7,7
5,9
7,2
8,6
9,1

0,8
0,7
0,5
0,4
0,5
0,9
0,6
0,5
0,5
0,2
0,6
0,5

3,3
3,0
2,3
2,6
2,7
2,6
2,2
2,7
2,7
2,8
2,2
2,9

7,0
6,5
7,0
5,1
8,2
6,9
5,5
5,4
6,7
5,9
4,8
4,9

2,0
1,7
1,7
1,8
4,5
1,6
1,4
1,9
2,4
1,7
1,3
1,6

3,6
2,8
2,9
2,8
6,9
4,0
3,2
3,3
3,4
3,6
3,0
3,2

4,1
4,0
3,2
3,4
3,0
3,3
3,7
4,0
3,8
3,5
3,3
3,9

0,4
0,6
0,6
0,5
0,3
0,4
0,4
1,0
0,7
0,5
0,6
0,6

35,7
34,2
34,8
32,9
33,7
29,6
27,2
31,3
31,6
31,6
28,5
31,4

0,351
0,389
0,487
0,343
0,313
0,348
0,401
0,325
0,313
0,348
0,441
0,335

70,9
65,0
59,0
71,5
66,4
64,9
61,0
70,4
69,7
67,8
59,0
69,8

CNMNFB-04

CNMNFB-03

CNMNFB-02

treonin

Tulpina
P. ostreatus
zile

Aminoacizii eseniali

aminoacizilor
eseniali

Dinamica coninutului de aminoacizi eseniali (g/100g protein) n proteina ideal (FAO) i

proteina miceliului P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivat submers pe
mediul nutritiv cu fin de soia i porumb

4
6
8
10
4
6
8
10
4
6
8
10

martor mediul nutritiv iniial nefermentat,

ES eseniali; ST suma total.
Cele mai nalte valori privind suma total a aminoacizilor eseniali pentru mediul cu fin de
porumb au fost obinute n ziua a 4-a (31,6-35,7g/100g protein), iar pentru mediul cu coji de
floarea-soarelui la a 12-14 zi de fermentare (37,0-41,6g/100g protein). Suma total a
aminoacizilor eseniali n cazul martorului a fost mult mai mic, valoarea acestuia constituind
27,8g/100g protein pentru mediul cu fin de porumb i 38,1g/100g protein pentru mediul cu coji
de floarea-soarelui.
Pentru mediul complex cu fin de porumb cantitatea aminoacizilor eseniali raportat la
proteina de referin FAO se prezint astfel: treonina 103-252%, valina 60-218%, metionina 6-26%,
izoleucina 55-83%, leucina 69-117%, tirozina 47-150%, fenilalanina 93-230%, lizina 55-75%,
triptofanul 30-100%. Cantitatea aminoacizilor esenilai raportat la proteina de referin FAO
pentru mediul cu coji de floarea-soarelui se ncadreaz n urmtoarele limite: treonina 105-172%,
valina 90-348%, metionina 3-20%, izoleucina 63-90%, leucina 51-90%, tirozina 40- 87%,
fenilalanina 77-163%, lizina 56-104, triptofanul 30-140%. Astfel, biomasa P. ostreatus cultivat
submers ntrece cantitativ proteina ideal cu 3-4 din 9 aminoacizi eseniali. Deficitare din punct
de vedere al coninutului de aminoacizi eseniali sunt: metionina, izoleucina, leucina, tirozina, lizina
i triptofanul.

98

3,0
4,0
2,3
3,2
4,0
3,6
3,9
3,6
3,5
3,1
3,7
3,6
3,9
2,7
4,4
4,9
4,8
3,7
3,3
3,4

5,5
5,5
3,4
3,1
3,7
3,4
4,9
4,0
4,1
5,7
4,6
4,4
4,0
3,9
5,4
4,8
4,6
4,4
4,3
4,6

1,0
0,4
0,6
0,6
0,5
0,3
0,6
0,4
0,9
0,9
0,7
0,5
0,9
0,7
1,4
0,7
0,7
0,3
0,4
0,5

36,0
28,1
30,3
32,6
32,9
34,4
40,8
41,6
30,3
30,2
31,0
33,3
40,8
39,6
33,6
31,2
33,4
34,7
35,5
37,0

0,296
0,334
0,379
0,335
0,348
0,411
0,421
0,334
0,459
0,345
0,341
0,416
0,408
0,343
0,423
0,354
0,346
0,370
0,391

aminoacizilor
imunoactivi

triptofan

3,0
2,0
1,7
1,5
2,0
1,9
2,2
1,9
1,7
1,2
1,8
2,0
2,1
1,8
1,5
2,2
2,6
1,9
2,0
1,8

% aminoacizilor
ES/ST

lizin

7,0
5,7
5,4
5,3
5,7
5,5
5,8
5,1
5,6
5,3
5,5
5,1
4,8
4,3
6,3
3,6
6,2
5,3
4,9
4,9

aminoacizilor
eseniali

fenilalanin

4,0
2,7
2,9
2,9
3,3
3,1
3,4
3,1
2,9
2,5
3,0
3,1
2,9
2,8
3,2
2,6
3,6
3,1
2,6
2,8

tirozin

3,5
0,4
0,6
0,7
0,4
0,6
0,4
0,6
0,6
0,5
0,1
0,7
0,7
0,6
0,6
0,6
0,5
0,6
0,5
0,3

leucin

5,0
0,9
6,5
8,9
7,6
10,3
13,6
16,5
4,5
6,8
5,5
8,3
15,9
17,4
5,0
6,5
6,0
9,6
11,5
12,5

izoleucin

metionin

4,0
6,5
6,9
6,4
5,7
5,7
6,0
6,4
6,5
4,2
6,1
5,6
5,6
5,4
5,8
5,3
4,4
5,8
6,0
6,2

valin

CNMN-FB-04

CNMN-FB-03

CNMN-FB-02

FAO
Martor
4
6
8
10
12
14
4
6
8
10
12
14
4
6
8
10
12
14

treonin

Tulpina
P. ostreatus
zile

Tabelul 33
Dinamica coninutului aminoacizilor eseniali (g/100g protein) n proteina ideal (FAO) i
proteina miceliului P. ostreatus CNMN-FB-02 CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 cultivat
submers pe mediul nutritiv cu fin de soia i coji de floarea-soarelui
Aminoacizii eseniali

65,0
67,3
63,0
67,4
67,7
64,3
68,2
66,4
53,8
66,2
68,6
68,5
70,0
65,1
57,1
62,0
69,3
67,6
66,9

martor mediul nutritiv iniial nefermentat,

ES eseniali; ST suma total.
Coninutul aminoacizilor eseniali raportat la suma total a aminoacizilor proteici (ES/ST*)
pentru P. ostreatus este de 0,313-0,487, iar a aminoacizilor considerai imunoactivi 53,8-71,5%.
Aminoacizii necesari pentru sinteza proteinelor fungice pot fi gsii n mediul de nutriie, unde
provin, de regul, din aciunea enzimelor proteolitice. n cazul mediilor srace n anumii
aminoacizi, acetea trebuie sintetizai n cursul metabolismului. Cantitativ, coninutul valinei este
mic la martor: 0,3 g/100g BAU pentru mediul nutritiv cu fin de porumb i 0,9 g/100g BAU
pentru mediul cu coji de floarea-soarelui. Acesta nu acoper necesitile ciupercii P. ostreatus n
valin astfel, nct are loc iniierea biosintezei aminoacidului deficitar. Determinarea n dinamic
(4-14 zile) a coninutului de valin n produsele vegetale convertite n biomas de ctre P. ostreatus
a stabilit o cretere progresiv care depete cu mult cantitatea iniial a aminoacidului dat
(martorului): de 10-40 ori pentru mediul cu fin de porumb i de 5-19 ori pentru mediul cu coji de
floarea-soarelui (Tab. 32, 33).

99
Pentru estimarea n dinamic a valorii nutritive a biomasei tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 au fost calculate indicele aminoacizilor eseniali (EAA) i
indicele nutritiv (Tab. 34).
Tabelul 34
Dinamica valorii nutritive a biomasei P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB04 cultivat submers pe medii nutritive ce conin fin de porumb i coji de floarea-soarelui
Indicele EAA
Indicele nutritiv
Tulpina
zile
Pleurotus
fin
coji floareafin
coji floareaostreatus
porumb
soarelui
porumb
soarelui
77,2
82,2
6,7
6,4
Martor
84,2
5,6
4
99,2
11,8
95,0
90,6
10,3
4,7
6
CNMN-FB-02
96,7
91,4
10,2
5,9
8
91,4
95,6
9,0
6,4
10
113,3
9,3
12
14
115,6
12,7
84,1
16,7
5,6
4
93,6
82,2
83,9
14,8
4,4
6
CNMN-FB-03
75,6
86,1
11,8
5,8
8
86,9
92,5
11,3
7,3
10
12
113,3
12,2
110,0
9,4
14
93,3
5,2
4
87,8
13,2
87,8
86,7
11,5
5,1
6
CNMN-FB-04
79,2
92,8
8,1
4,8
8
87,2
96,4
9,9
6,3
10
98,6
7,6
12
102,8
8,4
14
martor mediul nutritiv iniial nefermentat.
Indicele maxim al aminoacizilor eseniali (EAA) pentru toate tulpinile P. ostreatus cultivate
pe mediul cu fin de porumb a fost obinut n ziua a 4-a (87,8-99,2% FAO), ceea ce corespunde
unei majorri de 114-128% fa de martor (77,2% FAO). Pentru tulpinile P. ostreatus cultivate pe
mediul cu coji de floarea-soarelui aceast majorare este de 125-141% fa de martor i corespunde
zilelor 12-14 de fermentare. Aceiai legitate se observ i la estimarea indicelui nutritiv, valorile
acestuia fiind maxime n ziua a 4-a pentru toate tulpinile P. ostreatus cultivate submers pe mediul
cu fin de porumb (11,8-16,7 uniti convenionale) i, respectiv, n a 12-14-a zi de fermentare
pentru tulpinile P. ostreatus cultivate pe mediul cu coji de floarea-soarelui (8,4-12,7 uniti
convenionale).
Apreciind coninutul aminoacizilor totali n biomasa P. ostreatus cultivat submers pe mediile
mal de bere (Cap. 5.2), fin de soia (0,5%) + fin de porumb (2%) i fin de soia (0,5%) + coji
de floarea-soarelui (2%), putem afirma, c mediul de nutriie n baza malului de bere (60B) asigur

100
o intensitate superioar de acumulare a aminoacizilor totali, sporul nregistrat prezentnd o majorare
de 1,5-4,2 ori fa de restul mediilor testate. Aceast diferen s-ar datora compoziiei diferite a
mediilor nutritive testate, malul de bere prezentnd o surs mult mai bogat n carbohidrai simpli
eficieni n reaciile de metabolism.
Rezultatele obinute n Capitolul V pot fi expuse ntr-o sintez:
n urma studiului efectuat privind cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 selectate anterior au fost determinate caracterele morfo-culturale i
biochimice, alese mediile de nutriie, durata de cultivare ce corespunde randamentului optimal al
acumulrii biomasei proteice i ale biosintezei unor enzime hidrolitice, caracterizat valoarea
nutritiv a biomasei fungice.
Exigenele nutriionale a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
cultivate submers au fost estimate prin utilizarea mediilor nutritive sintetice cu includerea diverselor
surse de carbon i azot i a mediilor nutritive complexe, malul de bere (6-80Balling) prezentndu-se
ca un mediu de nutriie eficient acumulrii biomasei (16,5-17,8g/l BAU). Cercetrile privind
determinarea valorii nutritive a miceliului tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i
CNMN-FB-04 cultivate submers pe mal de bere au elucidat posibilitatea valorificrii biomasei
miceliene n alimentare. Cantitatea total a aminoacizilor biomasei miceliene pentru tulpinile P.
ostreatus testate a variat ntre 21,3-34,2%(g/100g BAU), biomasa obinut ntrecnd cantitativ
proteina ideal (FAO) cu 2-3 aminoacizi eseniali. Indicii nutritivi au constituit 21,6-33,1 uniti
convenionale, fapt pentru care acetea pot fi raportai la valorile nutritive a leguminoaselor pentru
boabe (indicele nutritiv = 21) i se apropie de valoarea nutritiv a proteinelor animaliere (indicele
nutritiv pentru carnea de porc = 35). Miceliul obinut posed un miros plcut de ciuperci i se
caracterizeaz printr-o valoare nutritiv nalt, astfel nct acesta poate fi utilizat ca supliment
proteic valoros.
Miceliul P. ostreatus cultivat submers n baza malului de bere poate fi utilizat i n calitate de
inoculum pentru replicarea pe scar larg a materialului semincer granulat, folosirea a 8-10%V de
inoculum reducnd i ieftinind procesul tehnologic de preparare a acestuia.
Pentru mediul complex cu fin de soia (0,5%) i porumb (2%) productivitatea maxim a fost
obinut la cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-04 i CNMN-FB-02 (15,67 16,2g/l BAU) dup 4 zile de fermentare.
Activitatea maxim a hidrolazelor studiate a fost obinut la cultivarea tulpinii P. ostreatus
CNMN-FB-03 pe mediul bogat n celuloz (coji de floarea-soarelui). Pentru aceast tulpin,
acumularea maxim a celulazelor ce determin degradarea carboximetilcelulozei a fost prezent n
ziua a 7-a 0,938 Uml-1, iar a activitii de zaharificare a hrtiei de filtru n zilele 6 i 11 de

101
cultivare (0,102 i respectiv 0,139 Uml-1). Nivelul acumulrii celulazelor (Na-CMC-aza, HF-aza)
pentru mediul de nutriie ce conine n calitate de inductor coji de floarea-soarelui este mai nalt,
demonstrnd prin aceasta caracterul inductiv de sintez al acestora. Valorile maxime ale activitii
amilolitice determinate n condiii standard la PH-ul 4,7 au fost nregistrate pentru tulpina P.
ostreatus CNMN-FB-03 n zilele 10 i 12 (2,88 i respectiv 3,07 Uml-1). Tulpinile studiate posed i
activitate lipolitic (125-625 Uml-1).
Studiul metabolismului de biosintez a proteinelor n cazul mediului de nutriie cu coji de
floarea-soarelui a artat, c acumularea compuilor proteici se realizeaz treptat, valorile maxime de
biosintez ale acestora fiind obinute la sfritul cultivrii ciupercii P. ostreatus la a 12-14 zi de
fermentare (8,2-11,0% protein). Majorarea coninutului de protein pentru acest mediu nutritiv a
fost de 105-141% fa de martor, iar a aminoacizilor eseniali de 139-201%. Pentru mediul
complex ce conine fin de porumb concentraia maxim a proteinelor ciupercii P. ostreatus
CNMN-FB-02 i CNMN-FB-04 a fost nregistrat la a 4-a zi de cultivare i corespunde valorilor
11,9-15,0% protein. Fa de martor aceasta reprezint o cretere cu 138-174% a coninutului de
protein i cu 177-199% a coninutului de aminoacizi eseniali.
n acest mod, cercetrile efectuate ne permit a concluziona c tulpinile P. ostreatus testate
prezint un interes deosebit pentru biotehnologie, graie faptului, c acestea pot acumula ntr-un
timp relativ scurt o cantitate major de biomas proteic fungic, ct i diveri metabolii celulari
valoroi, n special, a enzimelor hidrolitice (celulaze, amilaze lipaze). Acumularea maxim a
proteinelor (18,0%) a fost gsit la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 n ziua a 6-a i corespunde
unui nivel nalt al biosintezei enzimelor celulozolitice (0,462 Uml-1 pentru Na-CMC-aza i 0,056
Uml-1 pentru HF-aza) i amilolitice (2,07 Uml-1). Maximum de biomas obinut la ziua a 4-a pentru
mediul complex cu fin de porumb i a 6-a pentru mediul cu coji de floarea-soarelui nu corespunde
nivelului major de biosintez a enzimelor testate la tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMNFB-04. Concentrarea maxim a hidrolazelor studiate corespunde fazei de declin a ciupercii P.
ostreatus i se datoreaz trecerii n lichidul cultural a enzimelor intracelulare n urma procesului de
liz a celulelor fungice. n consecin, realizarea eficient a procesului biotehnologic de obinere n
comun att a biomasei fungice, ct i a enzimelor hidrolitice pentru tulpinile P. ostreatus CNMNFB-02 i CNMN-FB-04 s-ar datora unui compromis n ceea ce privete durata de cultivare
deoarece este condiionat, pe de o parte de acumularea constituenilor celulari (biomasa, proteina)
i, pe de alt parte de biosinteza metaboliilor celulari (enzimele hidrolitice).

102

CAPITOLUL VI
PROCEDEE BIOTEHNOLOGICE DE CULTIVARE A CIUPERCII
PLEUROTUS OSTREATUS I OBINEREA BIOPRODUSELOR
VALOROASE
Bazidiomicetul P. ostreatus prezint un obiect biotehnologic cu perspective deosebite n
diverse domenii aplicative [11, 27, 55, 57, 75, 179], eficiena cultivrii acestuia fiind determinat de
extinderea i intensificarea procedeelor tehnologice avansate, i de obinerea bioproduselor
valoroase.

6.1 Elaborarea procedeelor de obinere a bioproduselor P. ostreatus

Cercetrile privind elaborarea procedeelor de obinere a bioproduselor P. ostreatus sunt
destinate obinerii carpoforilor i biomasei cu un coninut nalt al proteinei, aminoacizilor eseniali,
inclusiv i a celor imunoactivi. Valorificarea materiei vegetale secundare i convertirea acesteia
n produse proteice alimentare i furajere este determinat de condiiile i componena mediilor de
cultivare, precum i de utilizarea tulpinilor P. ostreatus nalt productive.
Procedeele elaborate sunt bazate pe utilizarea:

tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02,

CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 (hotrrile

acordrii brevetelor de invenii MD, nr.4520, 4521 i cererii de brevet MD a.2005

0147);

componenei mediilor de nutriie care asigur creterea, dezvoltarea i biosinteza

produselor necesare (paie, rumegu de lemn, coji de floarea-soarelui, mal de bere,
fin de porumb, soia).

condiiilor i parametrilor tehnici de cultivare a ciupercii P. ostreatus (temperaturii,

umiditii, aeraiei, iluminrii, preparrii mediilor nutritive, cantitii de inoculare a
materialului semincer, timpului de cultivare etc.).

6.1.1 Procedee de obinere a carpoforilor cu valoare nutritiv nalt. Rezultatul tehnic

nregistrat const n obinerea unei recolte majore de o calitate nutritiv valoroas, utiliznd pentru
aceasta medii nutritive accesibile i ieftine PGL, PGFS, PGC. Pentru realizarea procedeelor de
obinere a carpoforilor cu valoare nutritiv nalt se propun dou tulpini noi de pstrv P.
ostreatus CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 (hotrrile acordrii brevetelor de invenii MD, nr.4520
i 4521 din 19.08.2005), condiiile de cultivare fiind descrise n Capitolul IV.

103

Obinerea carpoforilor cu valoare nutritiv nalt n baza tulpinii Pleurotus ostreatus

CNMN-FB-03

A. Mediul nutritiv de cultivare sunt paiele de gru i rumeguul de lemn (2:1) umezite pn la
72% i supuse pasteurizrii la 950C timp de 1 or. Pentru inoculare a fost folosit miceliu semincer n
cantitate de 4,00,2% fa de substratul nutritiv umed. Desfurarea n timp a ciclului tehnologic
pentru dou valuri de recolt a fost de 58 zile, pentru care s-a colectat 39,7% carpofori fa de
substratul nutritiv uscat. Indicele nutritiv al carpoforilor constituie 31,4 uniti convenionale.
Aminoacizii totali ai biomasei absolut uscate (BAU) reprezint 385 mg/g, dintre care partea
aminoacizilor imunoactivi-278mg/g BAU, iar a aminoacizilor eseniali -119 mg/g BAU.
B. Mediul nutritiv de cultivare sunt paiele de gru i cojile de floarea-soarelui (2:1) umezite
pn la 72% i supuse pasteurizrii la 950C timp de 1 or. Pentru inoculare a fost folosit miceliu
semincer n cantitate de 4,00,2% fa de substratul nutritiv umed. Desfurarea n timp a ciclului
tehnologic pentru dou valuri de recolt a fost de 59 zile, pentru care s-a colectat 42,9% carpofori
fa de substratul nutritiv uscat. Indicele nutritiv al carpoforilor constituie 33,1 uniti
convenionale. Aminoacizii totali ai biomasei absolut uscate (BAU) reprezint 400 mg/g, dintre
care partea aminoacizilor imunoactivi-290 mg/g BAU, iar a aminoacizilor eseniali -126 mg/g
BAU.

Obinerea carpoforilor cu valoare nutritiv nalt n baza tulpinii Pleurotus ostreatus

CNMN-FB-04

Mediul nutritiv de cultivare sunt paiele de gru i cocenii de porumb (2:1) umezite pn la
72% i supuse pasteurizrii la 950C timp de 1 or. Pentru inoculare a fost folosit miceliu semincer n
cantitate de 4,00,2% fa de substratul nutritiv umed. Desfurarea n timp a ciclului tehnologic
pentru trei valuri de recolt a fost de 81 zile, pentru care s-a colectat 60,1% carpofori fa de
substratul nutritiv uscat. Indicele nutritiv al carpoforilor constituie 36,2 uniti convenionale.
Aminoacizii totali ai biomasei absolut uscate (BAU) reprezint 438 mg/g, dintre care partea
aminoacizilor imunoactivi-315 mg/g BAU, iar a aminoacizilor eseniali -138 mg/g BAU.

6.1.2 Procedeu de sporire a rentabilitii procesului tehnologic. Rentabilitatea economic

de cultivare a ciupercii P. ostreatus este determinat de durata perioadei de desfurare a ciclului
tehnologic. Capacitatea fructificrii precoce la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 (cererea
brevetului de invenie MD a.2005 0147 din 23.05.2005) reprezint o nsuire preioas, asigurnduse n felul acesta o rentabilitate superioar (98%) n cadrul procesului tehnologic de cultivare a
ciupercii de pstrv. Mediul nutritiv de cultivare sunt paiele de gru (100%) umezite pn la 72% i

104
supuse pasteurizrii la 950C timp de 1 or. Pentru inoculare a fost folosit miceliu semincer n
cantitate de 4,00,2% fa de substratul nutritiv umed. Desfurarea n timp a ciclului tehnologic
pentru dou valuri de recolt a fost de 56 zile, pentru care s-a colectat 68,4% carpofori fa de
substratul nutritiv uscat.

Implementarea n practic a ciupercii Pleurotus ostreatus CNMN-FB-02 n cadrul

procesului tehnologic de cultivare intensiv pe paie de graminee

Cercetrile privind cultivarea intensiv a pstrvului de fag in s se finalizeze cu aplicarea

rezultatelor obinute n producerea pe scar larg a carpoforilor P. ostreatus. Introducerea tulpinilor
P. ostreatus de productivitate performant, n special pentru spaiile rurale i suburbane, ofer
posibilitatea de lansare a unui business durabil pentru antreprenorii interesai, care la rndul su va
rezolva i sarcina social de asigurare a populaiei cu produse alimentare autohtone de calitate.
Randamentul nalt i rentabilitatea sporit pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02

cultivat la

modul intensiv pe paie de gru (Capitolul IV) constituie o siguran de circulaie rapid a fondurilor
bneti investite, utilizarea acesteia n cadrul structurilor specializate de producere intensiv a
ciupercilor comestibile de ser prezentnd o oportunitate de creare a locurilor de munc i de
obinere a unui profit stabil.
Implementarea n practic a fost aplicat n cadrul structurii specializate de producere a
ciupercilor SRL Ciuperci n perioada 15.09.2003 / 05.06.2004. n aceast perioad au fost
executate 4 cicluri tehnologice, durata fiecrui ciclu de cultur, respectiv a perioadei de recoltare
fiind de 55-60 zile pentru dou valuri de recolt.
Prelucrarea termic a paielor a fost realizat conform tehnologiei hidrotermice prin
dezinfectare cu abur, aburul tehnologic fiind dirijat prin conducte ntr-un vas de capacitatea 2-2,5
tone substrat celulozic umectat. Paiele de gru au fost preventiv mrunite i inute 24 ore submers
n ap pentru mbibare. La nsmnare s-a utilizat miceliul ciupercii de pstrv crescut pe suport
granulat (gru), cantitatea folosit fiind de 3-4% fa de substratul celulozic umed.
Capacitatea de producie exprimat prin cantitatea de ciuperci raportat la 100kg material
celulozic uscat a fost de 64-71% pentru dou valuri de recolt. Rata rentabilitii pentru tulpina
P.ostreatus CNMN-FB-02 cultivat pe paie de gru a fost estimat la 85-95%, ceea ce reprezint
aproape o dublare a mijloacelor bneti investite.
Cercetrile de implementare n practic a pstrvului de fag au servit drept baz pentru
elaborarea regulamentului tehnologic de cultivare intensiv a ciupercii P. ostreatus, rezultatele
obinute fiind prezentate schematic (Fig. 27).

Figura 27. Schema fluxului tehnologic de cultivare intensiv a ciupercii P. ostreatus pe diverse substraturi celulozice

106
6.1.3 Procedee de obinere a produselor proteice furajere. n studiul realizat anterior
(Capitolul IV) a fost demonstrat posibilitatea obinerii unor produse furajere cu coninut sporit de
substane azotate. Capacitatea ciupercii P. ostreatus de convertire a materiei vegetale secundare i
de sintez a unor substane cu proprieti biologice unice cum sunt proteinele, enzimele etc. poate fi
asigurat prin cultivarea acesteia att n faza solid de fermentare, ct i n cea lichid (Fig. 27, 28).

Obinerea produselor proteice furajere la cultivarea n faza solid de fermentare a

ciupercii P.ostreatus CNMN-FB-04

A. Mediul nutritiv de cultivare sunt paiele de gru i cocenii de porumb (2:1) umezite pn la
72% i supuse pasteurizrii la 950C timp de 1 or. Pentru inoculare a fost folosit miceliu semincer n
cantitate de 4,00,2% fa de substratul nutritiv umed. Dup repartizarea n saci a amestecului
nsmnat acetea sunt plasai n camera de termostatare la temperatura de 28 0C n condiii de
obscuritate. Faza de cretere vegetativ, respectiv a mpnzirii substratului nutritiv cu miceliul
ciupercii se desfoar ntr-o perioad de 11-12 zile de la nceputul nsmnrii. Coninutul
proteinei brute dup 12 zile de cultivare cu P.ostreatus CNMN-FB-04 se majoreaz pn la 8,8%,
ceea ce nseamn o cretere cu 154% fa de martor (substratul iniial nefermentat). Aminoacizii
totali ai produsului furajer obinut constituie 86 mg/g BAU, dintre care partea aminoacizilor
imunoactivi - 66 mg/g BAU, iar a aminoacizilor eseniali - 34 mg/g BAU.
B. Mediul nutritiv de cultivare sunt paiele de gru i cojile de floarea-soarelui (2:1) umezite
pn la 72% i supuse pasteurizrii la 950C timp de 1 or. Pentru inoculare a fost folosit miceliu
semincer n cantitate de 4,00,2% fa de substratul nutritiv umed. Dup recoltarea a dou valuri de
carpofori (EB=49,6%), coninutul proteinei brute la a 90 zi de cultivare este de 6,9%, ceea ce
reprezint o majorare cu 115% fa de martor(substratul iniial nefermentat). Aminoacizii totali ai
produsului furajer obinut constituie 67 mg/g BAU, dintre care partea aminoacizilor imunoactivi 49 mg/g BAU, iar a aminoacizilor eseniali - 25 mg/g BAU. Astfel, substratul celulozic PGFS
fermentat prin intermediul ciupercii P.ostreatus CNMN-FB-04 poate fi folosit n calitate de produs
furajer i dup recoltarea a dou valuri de carpofori. Aceasta permite obinerea ntr-un singur ciclu
tehnologic a proteinei alimentare i furajere, prezentnd un proces biotehnologic finisat, fr
poluarea mediului nconjurtor.

Obinerea produselor proteice furajere la cultivarea n faza lichid de fermentare a

tulpinilor ciupercii P.ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03.

Mediul nutritiv n baza finii de soia (0,5%) i cojilor de floarea-soarelui (2%) este sterilizat
timp de 40min la 1210C. Inoculumul P.ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03 se omogenizeaz
i se introduce n mediul de nutriie n cantitate de 10%V, sau 12-16g BAU. Durata cultivrii este

107
de 12-14 zile, timp n care coninutul proteinei se majoreaz pn la 10,8-11,0%, ceea ce reprezint
138-141% fa de martor. Indicele nutritiv al produsului furajer constituie 12,2-12,7 uniti
convenionale. Aminoacizii totali ai biomasei absolut uscate (BAU) reprezint 111-113 mg/g,
dintre care partea aminoacizilor considerai imunoactivi 74-75 mg/g BAU, iar a aminoacizilor
eseniali 46-47 mg/g BAU. Lichidul cultural al mediului de nutriie dup 12-14 zile de cultivare
cu tulpinile P.ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03 posed activitate celulazic (0,28-0,49 Uml1

), amilazic (0,32-3,07 Uml-1), lipazic (250 Uml-1).

6.1.4 Procedee de obinere a biomasei alimentare. Biomasa P. ostreatus cultivat submers

pe diverse medii lichide este recomandat n calitate de supliment alimentar valoros cu un coninut
major al proteinelor, acizilor grai eseniali, vitaminelor, hidrailor de carbon, substanelor
bioactive. Realizarea procedeelor eficiente de un randament sporit la cultivarea ciupercii n faza
lichid de fermentare este determinat de componena mediilor de nutriie, de utilizarea tulpinilor
nalt productive, de condiiile i perioada de cultivare, de cantitatea i calitatea inoculumului de
nsmnare etc. [87, 125, 134, 135, 184] (Fig. 28).

Obinerea biomasei proteice alimentare la cultivarea submers a tulpinii Pleurotus

ostreatus CNMN-FB-02

A. Mediul de nutriie este malul de bere 60Balling sterilizat timp de 20min la 1160C.
Inoculumul de pstrv preventiv omogenizat este introdus n mediul de nutriie n cantitate de
10%V. Tulpina P.ostreatus CNMN-FB-02 este cultivat submers timp de 10 zile la temperatura de
2710C, aerarea fiind realizat printr-o agitare la 180 r.p.m. Randamentul obinut este de
17,31,2g/l BAU. Indicele nutritiv al produsului alimentar constituie 21,6 uniti convenionale.
Aminoacizii totali ai biomasei absolut uscate (BAU) reprezint 213 mg/g, dintre care partea
aminoacizilor imunoactivi 163 mg/g BAU, iar a aminoacizilor eseniali 83 mg/g BAU.
Biomasa obinut posed un miros plcut de ciuperci.
B. Mediul de nutritiie este fina de soia (0,5%) i porumb (2%) sterilizat timp de 40min la
1210C. Inoculumul de pstrv (4-6 zile) este preventiv omogenizat i introdus n mediul de nutriie
n cantitate de 10%V, ceea ce reprezint ~16g/l BAU. Tulpina P.ostreatus CNMN-FB-02 este
cultivat submers timp de 96 ore la temperatura de 2710C, aerarea fiind realizat printr-o agitare la
180 r.p.m. Randamentul obinut este de 16,2g/l BAU, iar coninutul proteinei 11,9%, ceea ce
reprezint o majorare de 1,38 ori fa de martor (substratul iniial nefermentat). Aminoacizii totali ai
produsului alimentar obinut constituie 122 mg/g BAU, aminoacizii imunoactivi 84 mg/g BAU,
iar cei eseniali 43 mg/g BAU. Miceliul posed un miros plcut de ciuperci.

Cultivarea n faza solid de fermentare a ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i

CNMN-FB-04 pe diverse substraturi celulozice (paie, rumegu de lemn, coji de floarea-soarelui, coceni).

Obinerea proteinei alimentare

(carpoforii tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMNFB-03 i CNMN-FB-04)
mediile de nutriie: PG, PGR, PGFS, PGC;
condiiile cultivrii:
temperatura - 1520C;
umiditatea relativ 80-90%;
iluminarea 50-200 luci 12 ore/zi;
aeraia 6-8 schimburi aer/or;
durata de cultivare 48-86 zile;
productivitatea (EB) pn la 80%;
indicii nutritivi pn la 36,2 u.c.;
rentabilitatea economic pn la 98%.

Obinerea proteinei furajere

Extragerea
principiilor bioactive
din substratul uzat i
utilizarea acestora n
fitotehnie

(tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04)

mediul de nutriie PGC;
condiiile cultivrii:
temperatura - 280C, umiditatea -72%,
durata cultivrii -12 zile.
coninutul proteinei 8,8%

Prepararea materialului semincer

granulat n baza inoculumului de
Pleurotus ostreatus cultivat submers

mediul de nutriie: PGFS;

condiiile cultivrii:
temperatura -15-280C, umiditatea -72%
durata de cultivare 90 zile;
coninutul proteinei 6,9 %.

Cultivarea n faza lichid de fermentare a ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe

medii nutritive cu mal de bere, fin de porumb, soia, coji de floarea-soarelui.

Obinerea proteinei alimentare

(tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04)
mediile de nutriie mal de bere 60 (B), fin de soia (0,5%) : fin
de porumb (2%); temperatura - 2710C, aeraia 180 r.p.m.,
durata cultivrii 4-10 zile, cantitatea inoculumului 10%V.
productivitatea 8,0 17,3 g/l BAU;
coninutul proteinei 11,9-34,1 %;
indicii nutritivi -11,8-33,1 u.c.

Obinerea proteinei furajere

(tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03)

mediul de nutriie fin de soia(0,5%) : coji de floarea-soarelui
(2%); temperatura - 2710C, aeraia 180 r.p.m., durata
cultivrii 12-14 zile, cantitatea inoculumului 10%V.
productivitatea pn la 20 g/l BAU;
coninutul proteinei 10,8-11,0 %;
indicii nutritivi -12,2-12,7 u.c.

Figura 28. Perspectivele utilizrii tulpinilor ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 n diverse domenii
ale biotehnologiei aplicate.

109

Obinerea biomasei proteice alimentare la cultivarea submers a tulpinii Pleurotus

ostreatus CNMN-FB-03

Mediul de nutritiie este fina de soia (0,5%) i porumb (2%) sterilizat timp de 40min la
1210C. Inoculumul de pstrv (4-6 zile) este preventiv omogenizat i introdus n mediul de nutriie
n cantitate de 10%V, ceea ce reprezint ~12g/l BAU. Tulpina P.ostreatus CNMN-FB-03 este
cultivat submers timp de 96 ore la temperatura de 2710C, aerarea fiind realizat printr-o agitare la
180 r.p.m. Randamentul obinut este de 10,8g/l BAU, iar coninutul proteinei 17,9%, ceea ce
reprezint o majorare de 2,07 ori fa de martor (substratul iniial nefermentat). Aminoacizii totali ai
produsului alimentar obinut constituie 182 mg/g BAU, aminoacizii imunoactivi 119 mg/g
BAU, iar cei eseniali 57 mg/g BAU. Biomasa posed un miros plcut de ciuperci.

Obinerea biomasei proteice alimentare la cultivarea submers a tulpinii Pleurotus

ostreatus CNMN-FB-04

A. Mediul de nutriie este malul de bere 60Balling sterilizat timp de 20min la 1160C.
Inoculumul de pstrv preventiv omogenizat este introdus n mediul de nutriie n cantitate de
10%V. Tulpina P.ostreatus CNMN-FB-04 este cultivat submers timp de 10 zile la temperatura de
2710C, aerarea fiind realizat printr-o agitare la 180 r.p.m. Randamentul obinut este de 8,00,7g/l
BAU. Indicele nutritiv al produsului alimentar constituie 33,1 uniti convenionale. Aminoacizii
totali ai biomasei absolut uscate (BAU) reprezint 342 mg/g, dintre care partea aminoacizilor
imunoactivi 245 mg/g BAU, iar a aminoacizilor eseniali 133 mg/g BAU. Miceliul obinut
posed un miros plcut de ciuperci.
B. Mediul de nutritiie este fina de soia (0,5%) i porumb (2%) sterilizat timp de 40min la
0

121 C. Inoculumul de pstrv (4-6 zile) este preventiv omogenizat i introdus n mediul de nutriie
n cantitate de 10%V, ceea ce reprezint ~14g/l BAU. Tulpina P.ostreatus CNMN-FB-04 este
cultivat submers timp de 96 ore la temperatura de 2710C, aerarea fiind realizat printr-o agitare la
180 r.p.m. Randamentul obinut este de 15,67g/l BAU, iar coninutul proteinei 15,0%, ceea ce
reprezint o majorare de 1,74 ori fa de martor. Aminoacizii totali ai produsului alimentar obinut
constituie 155 mg/g BAU, aminoacizii imunoactivi 105 mg/g BAU, iar cei eseniali 48 mg/g
BAU. Biomasa obinut posed un aromat plcut de ciuperci.

6.1.5 Procedeu de preparare a materialului semincer granulat. Tradiional, prepararea

materialului semincer granulat se face n baza inoculumului de pstrv cultivat n eprubete pe
coloane oblice cu mal de bere agarizat [2, 126, 144]. Dezavantajul procedeului dat este durata
relativ mare de mpnzire a materialului semincer, procesul de cultivare fiind influenat de numrul
mic al punctelor de cretere.

110
Prepararea materialului semincer granulat (gru, 100%) n baza miceliului P. ostreatus
cultivat submers este lipsit de acest dezavantaj. Capacitatea miceliului cultivat submers de a reduce
perioada de mpnzire este determinat de numrul major al punctelor de contact cu substratul
nutritiv granulat. Pentru aceasta miceliul ciupercii este cultivat submers pe mediul lichid cu mal de
bere 60(B) timp de 6-10 zile, dup care acesta se omogenizeaz i se introduce n mediul de nutriie
n cantitate de 8-10%V. Inoculumul omogenizat reprezint un preparat biologic pregtit n condiii
sterile de laborator din cultura pur a ciupercii P. ostreatus, capabil de a asigura fructificarea i de a
realiza o producie sporit i stabil. Acesta este un lichid albicios, de consistena laptelui, alctuit
din hifele ciupercii dezagregate n mediul de nutriie lichid, cu concentraia de 12-16g/l BAU.
mpnzirea total a substratului nutritiv cu miceliul de pstrv cultivat submers (101zile) duce la
micorarea cu dou zile a duratei de cultivare, ceea ce reduce i ieftinete procesul tehnologic de
preparare a materialului semincer granulat. Acest procedeu poate fi folosit pentru prepararea pe
scar larg a materialului semincer granulat i producerea miceliului comercial (Fig. 27, 28).

6.2 Activitatea fiziologic a extractelor Pleurotus ostreatus asupra

germinrii i creterii seminelor de gru
Procesele biochimice ce au loc n faza germinrii seminelor sunt strns legate cu schimbul de
substane al plantei n cretere. Viabilitatea i energia germinativ a seminelor exercit o influen
determinant asupra roadei, de aceea naintea semnatului seminele sunt tratate cu diveri
stimulatori chimici costisitori.
O metod avantajoas de tratare a seminelor nainte de semnare este cea biologic ce propune
folosirea metaboliilor de natur bioactiv: lichide native, extracte etc. Dup cum este bine
cunoscut, ciupercile bazidiale prezint surse de principii bioactive de o mare diversitate biochimic,
ca polizaharide, lipide, proteine, enzime, vitamine, antibiotice, diveri compui aromatici etc. [117,
184], o performan n aplicarea metaboliilor fungici reprezentnd obinerea unor preparate
medicamentoase [61, 78, 125].
Pierderea greutii masei uscate a substraturilor nutritive la cultivarea tulpinilor P. ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 a fost de 36-50% (Capitolul 4.2.2), ceea ce
reprezint 1/3-1/2 din materialul celulozic iniial. Acumularea sporit a substraturilor celulozice
uzate aproximativ 1kg la fiecare 0,6-1,6 kg ciuperci Pleurotus necesit o revalorificare, astfel
nct acestea s nu polueze mediul nconjurtor. Substratul uzat reprezint un produs fermentat,
colonizat de ctre miceliul activ al ciupercii i nnobilat cu diveri metabolii secundari surse ale
unor substane de natur bioactiv [32, 45, 63, 75, 107]. Printre substanele bioactive studiate se afl

111
i fitohormonii, cei mai cunoscui la ciuperci fiind giberilinele [153]. Producerea industrial a
fitohormonilor este un proces nc destul de costisitor, n acelai timp problemei valorificrii
metaboliilor fungici nu se acord atenia cuvenit [167]. n prezent se distinge o direcie de
dezvoltare a unor noi principii i tehnologii fondate pe utilizarea netradiional a bazidiomicetelor
ca produceni de substane bioactive. Astfel, substratul celulozic uzat, dup recoltarea carpoforilor,
poate servi drept surs de stimulatori naturali n fitotehnie [133]. Aceiai autori [133, p.142]
evideniaz faptul, c extractul nu manifest efecte mutagenice, astfel nct influena pozitiv a
substanelor bioactive este satisfcut i de aciunea moderat i inofensiv a acestuia asupra
plantelor de cultur utilizate.
n pofida interesului viu pe care-l suscit, criteriile i principiile n vederea stabilirii modului i
metodelor de utilizare a substanelor bioactive fungice nu sunt elucidate pe deplin. Deficiena n
cauz necesit o studiere mai ampl - n dependen de specie, tulpin fungic, de substratul nutritiv
utilizat la cultivarea acestuia, de doz, faza de tratare etc. Scopul cercetrilor efectuate a fost
studierea aciunii extractelor P. ostreatus asupra germinrii i creterii seminelor de gru n funcie
de substratul nutritiv uzat, de tulpina utilizat i doza de aciune.
Pentru cercetri tulpinile ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
au fost cultivate pe urmtoarele substraturi nutritive:
1. paie de gru (100%)-(PG);
2. paie de gru + rumegu de lemn (2/3+1/3) (PGL);
3. paie de gru +coji de floarea-soarelui (2/3+1/3) (PGFS);
4. paie de gru + coceni de porumb (2/3+1/3) (PGC).
Ciclul tehnologic a durat 100-117 zile pe parcursul cruia s-au colectat carpoforii aprui,
substraturile uzate servind drept surs de substane bioactive. Extractele au fost obinute prin
amestecul substraturilor uzate cu ap n raport de 0,1 i 1% timp de 1 or. Aciunea extractelor P.
ostreatus asupra germinrii i creterii seminelor de gru a fost testat asupra soiului Seleanca,
cercetrile fiind ndeplinite a cte 3 repetri fiecare conform metodei [137]. Capacitatea de ncolire
a seminelor a fost apreciat conform energiei germinative, care exprim numrul de semine
germinate n decursul a trei zile. Drept martor au servit seminele tratate cu ap distilat. Pentru
aprecierea diferenelor semnificative dintre variante s-a aplicat comparaia n perechi a variantelor
din test cu varianta martor dup t-criteriul Student.
Investigaiile efectuate asupra germinrii i creterii seminelor de gru au demonstrat faptul, c
tratarea seminelor naintea semnatului cu extractul apos - rezultat din diluia substraturilor
nutritive folosite la cultivarea ciupercii P. ostreatus - manifest aciune stimulatoare fa de lotul
martor n diluiile de 0,1 i 1% (Tabelul 35). Efectul diluiilor propuse n dependen de tulpin

112
sau substratul utilizat difer de la caz la caz. Astfel, diluia extractului apos de 1% manifest
aciune stimulatoare asupra acumulrii biomasei totale la plantulele grului, n acelai timp sporul
nregistrat pentru unele variante este mic, de aceea prezint lips de autenticitate pentru P=0,05. La
diluia de 0,1% sporul de acumulare a biomasei totale pentru variantele testate statistic este autentic
i prezint o majorare de 110,8 121,8% fa de martor.
Conform metodei efectuate [137], msurarea greutii rdcinilor este mai demonstrativ, de
aceea se recomand msurarea n parte a greutii coleoptilelor i rdcinilor. Ulterior, s-a stabilit
un efect mai pronunat de stimulare a rdcinilor fa de coleoptile, masa uscat a sistemului
radicular prezentnd un spor de 109,6 129,2% fa de martor. Pentru masa uscat a coleoptilelor
acest spor este de 109,0 120,9% fa de martor.
Energia germinativ a martorului se caracterizeaz printr-un procent relativ nalt (88,6%), astfel
nct raportul dintre seminele germinate pentru variantele care au fost tratate cu extractele propuse
spre testare i cea de referin au avut valori apropiate. Referitor la analiza comparativ a efectului
extractelor P. ostreatus asupra ncolirii seminelor de gru nu s-a stabilit o corelaie cert, partea
seminelor germinate prezentnd valori cuprinse ntre 95,9 108,6% fa de lotul martor.
Reieind din datele prezentate n tabel constatm o sporire mai pronunat a biomasei totale
(119,0-121,5%) a seminelor ncolite pentru ambele diluii la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04
pentru substratul complex PGC, procentul de germinare avnd valorile de 102,8-107,4% fa de
martor. Efectul pozitiv al diluiilor de 0,1 i 1% este prezent i la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02
pentru substraturile complexe PGL i PGFS, la care s-a stabilit o majorare fa de martor cu 15,7
23,1% a biomasei totale i cu 0,9 8,6% a seminelor germinate. Diluia de 0,1% pentru paie de
gru la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-03 a fost cea mai eficient acumulrii masei totale (121,8%),
procentul de germinare a seminelor fiind de106,2% fa de martor.
Astfel, datorit efectului stimulator pe care-l produc, substraturile nutritive uzate - folosite la
cultivarea ciupercii P. ostreatus - reprezint o surs de substane bioactive, care pot fi utilizate n
fitotehnie n calitate de regulatori ai creterii seminelor de gru (Fig. 28). Efectul de stimulare a
proceselor de cretere la gru s-ar datora prezenei n componena extractului P. ostreatus a
complexului celulazic (Capitolul V) capabil s asigure o degradare parial a tegumentului seminei,
determinnd prin aceasta o majorare a permiabilitii pentru ap fa de endospermul embrionului.
Mai mult ca att, capacitatea tulpinilor P. ostreatus de a sintetiza diveri ageni bioactivi - n funcie
de tulpin, substrat i doz de aciune - poate exercita o influen determinant asupra proceselor de
reactivare metabolic i morfogenetic a seminelor de gru aflate n repaus.

Diluia, %

Substratul

CNMN-FB-

Tulpina
P.ostreatus

Tabelul 35
Aciunea extractului Pleurotus ostreatus asupra germinrii i creterii seminelor de gru
Biomasa absolut uscat, mg
Masa coleoptilelor
Masa rdcinilor
Masa total
Mm
T* real
% fa
Mm
T*
% fa
Mm
T*
% fa
de
real
de
real
de
martor
martor
martor

Martor
02
03

1. paie,
100%

04
02
03
04
02
03
04

2. paie +
rumegu
de lemn
(2/3+1/3)
3. paie +
coji de
floareasoarelui
(2/3+1/3)

02
03
04

4. paie +
coceni
(2/3+1/3)

0,1
1
0,1
1
0,1
1
0,1
1
0,1
1
0.1
1
0,1
1
0,1
1
0.1
1
0,1
1
0,1
1
0.1
1

48,71,6
53,10,4
50,11,8
57,82,3
50,80,5
55,51,0
54,90,7
53,41,3
57,40,5
53,61,1
58,93,1
56,41,7
51,41,0
54,32,3
56,21,6
55,61,2
52,20,8
54,42,1
56,31,1
56,11,8
53,71,1
55,92,0
50,31,7
56,91,4
57,52,1

2,67
0,58
3,25
1,25
3,60
3,55
2,28
5,19
2,52
2,92
3,30
1,43
2,00
3,31
3,45
1,96
2,16
3,91
3,07
2,58
2,81
0,69
3,86
3,33

*T-valoarea criteriului autenticitii teoretice Tteoretic 0,05 = 2,78.

100
109,0
102,9
118,7
104,3
114,0
112,7
109,7
117,9
110,1
120,9
115,8
105,5
111,5
115,4
114,2
107,2
111,7
115,6
115,2
110,3
114,8
103,3
116,8
118,1

35,31,4
44,11,4
41,00,9
44,51,7
39,00,4
39,61,0
40,90,9
45,31,8
46,01,5
42,41,4
45,31,8
38,30,9
39,81,9
45,60,9
41,10,8
42,01,1
36,30,5
39,81,3
37,70,9
37,00,5
42,01,0
40,21,2
38,70,3
43,10,2
44,61,4

4,44
3,42
4,18
2,54
2,50
3,36
4,39
5,21
3,59
4,39
1,80
1,91
6,19
3,60
3,76
0,67
2,36
1,44
1,14
3,89
2,66
2,37
5,52
4,70

100
124,9
116,1
126,1
110,5
112,2
115,9
128,3
130,3
120,1
128,3
108,5
112,7
129,2
116,4
119,0
102,8
112,7
106,8
104,8
119,0
113,9
109,6
122,1
126,3

84,03,1
97,20,9
91,12,3
102,33,4
89,80,9
95,12,0
95,81,4
98,73,1
103,41,3
96,12,2
104,24,3
94,72,6
91,22,5
99,93,2
97,22,4
97,62,0
88,51,4
94,22,9
94,11,6
93,11,8
95,72,1
96,13,2
89,01,8
100,01,6
102,13,5

4,09
1,84
3,98
1,80
3,01
3,47
3,35
5,77
3,18
3,81
2,64
1,81
3,57
3,37
3,69
1,32
2,40
2,90
2,54
3,12
2,72
1,39
4,59
3,87

100
115,7
108,5
121,8
106,9
113,2
114,0
117,5
123,1
114,4
124,0
112,7
108,6
118,9
115,7
116,2
105,4
112,1
112,0
110,8
113,9
114,4
106,0
119,0
121,5

Seminele
germinate,
% fa de
martor
100
97,7
105,6
106,2
100,5
98,1
97,0
101,6
102,3
101,6
95,9
102,8
102,8
100,9
108,6
102,3
98,1
97,8
97,0
99,3
98,1
101,6
97,0
107,4
102,8

114

SINTEZA REZULTATELOR OBINUTE

Elaborarea tehnologiilor moderne de utilizare a reziduurilor vegetale agro-industriale i
convertirea acestora n produse cu valoare nutritiv nalt reprezint obiectivul multor cercetri n
domeniul cultivrii ciupercilor bazidiale.
Actualitatea tematicii abordate a fost determinat de lipsa unor tulpini autohtone nalt
productive a ciupercii bazidiale de Pleurotus ostreatus, ct i a procedeelor simple i economic
avantajoase de convertire a resurselor vegetale locale n produse cu valoare nutritiv ridicat pentru
economia naional.
ncadrarea efectiv a ciupercii Pleurotus ostreatus la convertirea reziduurilor vegetale n
produse cu valoare nutritiv mai ridicat poate fi folosit n diverse procese biotehnologice ce ine
de producerea proteinei furajere i alimentare. Cercetrile efectuate n acest domeniu au condus la
selectarea, depozitarea i brevetarea a trei tulpini noi de pstrv: P. ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 perspectivi productori de nsemntate industrial.
Referitor la analiza comparativ a rezultatelor bibliografice s-a stabilit, c tulpinile selectate de
P. ostreatus posed o productivitate i o valoare nutritiv mai nalt dect productorii existeni [57,
129, 142, 144]. Randamentul maximal al recoltei de carpofori pentru tulpina P. ostreatus 7bis
cultivat la modul intensiv n Romnia este de 14-16% fa de substratul celulozic nsmnat [57].
Recolta maxim realizat n urma screeningului a mai multor tulpini de Pleurotus a fost gsit
pentru P. ostreatus i P. pulmonarius 16,4% fa de substratul celulozic nsmnat [181]. Pentru
tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 selectate de noi i cultivate pe
paie de gru randamentul a fost de 18,2-21,8%, ceea ce reprezint o majorare cu aproximativ 3033% fa de alte tulpini P. ostreatus cunoscute.
Rentabilitatea economic de cultivare a ciupercii P. ostreatus este determinat de durata
perioadei de desfurare a ciclului tehnologic. Durata perioadei de recoltare pentru tulpina P.
ostreatus 7bis este de 70-80 zile pentru 2-3 valuri de fructificare [57]. Capacitatea fructificrii
precoce la tulpina P. ostreatus CNMN-FB-02 (48-56 zile) selectat de noi reprezint o nsuire
preioas (cererea brevetului de invenie MD a.2005 0147 din 23.05.2005), asigurndu-se n felul
acesta o rentabilitate superioar (98%) n cadrul procesului tehnologic de cultivare a ciupercii de
pstrv.
Tulpinile de bazidiomicete P. ostreatus 853 i 928 cultivate la modul intensiv n Ucraina sunt
productori de carpofori de o calitate nutritiv valoroas: indicii nutritivi ai carpoforilor au
constituit 19,29-21,63 uniti convenionale [129, p. 127]. Pentru realizarea procedeelor de obinere
a carpoforilor cu valoare nutritiv nalt au fost propuse dou tulpini noi de pstrv - P. ostreatus

115
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04, la cultivarea acestora utilizndu-se medii nutritive accesibile i
ieftine PGL, PGFS i PGC (hotrrile acordrii brevetelor de invenii MD, nr.4520 i 4521 din
19.08.2005). Indicii nutritivi ai carpoforilor au constituit 31,4-36,2 uniti convenionale, fapt
pentru care acetea pot fi raportai la valorile nutritive a soiei (indicele nutritiv = 31) i a proteinei
animaliere (indicele nutritiv = 35).
Biomasa P. ostreatus cultivat submers pe diverse medii lichide este recomandat n calitate
de supliment alimentar valoros cu un coninut major al compuilor proteici [134, 135, 184].
Randamentul maximal al biomasei absolut uscate (BAU) pentru tulpina bazidiomicetului P.
ostreatus OB-2 cultivat submers timp de 12 zile pe mediul complex cu mal de bere 60Balling
constituie 6,45 g/l BAU [142]. Suma total a aminoacizilor biomasei proteice pentru tulpinile P.
ostreatus 109 i F-1300 cultivate submers pe mediul de nutriie anorganic cu concentrat din
suc de cartofi reprezint 24,2-29,2% BAU [180]. Cercetrile privind determinarea randamentului i
valorii nutritive a miceliului tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04
cultivate submers au elucidat posibilitatea valorificrii biomasei miceliene n alimentare, rezultatele
obinute constituind valori mai nalte dect n sursele bibliografice citate. Nivelul acumulrii
biomasei miceliene pentru tulpinile selectate de pstrv a atins valorile de 8,0-17,3g/l BAU dup 10
zile de cultivare pe mediul nutritiv n baza malului de bere 60(B). Cantitatea total a aminoacizilor
biomasei fungice pentru tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 reprezint 34,2% BAU, iar indicele
nutritiv 33,1 uniti convenionale, fapt pentru care valoarea nutritiv a acesteia se apropie de cea
a proteinei animaliere (cererea brevetului de invenie MD a.2005 0255 din 05.09.2005). Miceliul P.
ostreatus cultivat submers n baza malului de bere poate fi utilizat i n calitate de inoculum pentru
replicarea pe scar larg a materialului semincer granulat, folosirea a 8-10%V de inoculum
reducnd i ieftinind procesul tehnologic de preparare a acestuia.
O productivitate major a biomasei proteice alimentare a fost obinut la cultivarea submers a
tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 pe mediul de nutriie n baza
finii de soia (0,5%) i porumb (2%). Randamentul biomasei fungice dup 4 zile de cultivare a fost
de 10,8-16,2 g/l BAU, iar coninutul proteinei a prezintat o majorare de 1,38-2,07 ori fa de martor.
Biomasa obinut posed un miros plcut de ciuperci i poate fi utilizat ca supliment alimentar
valoros.
Cercetrile n ceea ce privete degradarea enzimatic a constituenilor vegetali ca celuloza i
lignina, precum i majorarea coninutului azotului total n substraturile nutritive valorificate au
elucidat posibilitatea integrrii tehnologiilor de cultivare a ciupercii P. ostreatus n lanul de
valorificare util a reziduurilor vegetale. Astfel, dup 12 zile de cultivare cu tulpina P. ostreatus
CNMN-FB-04, coninutul proteinei brute pentru substraturile nutritive testate s-a majorat pn la

116
154%, degradarea constituenilor substraturilor nutritive reprezentnd 4,5-5,6% pentru celuloz i
2,0-14,5% pentru lignin. Acest fapt duce nemijlocit la majorarea valorii nutritive i digerabilitii
produsului fermentat, ceea ce poate fi pe larg folosit la fabricarea nutreurilor combinate pentru
animale (bovine, porcine). Semnificativ este faptul, c substratul complex PGFS pentru P. ostreatus
CNMN-FB-04 poate fi folosit la furajarea animalelor i dup recoltarea a dou valuri de carpofori,
coninutul azotului total dup 90 zile de cultivare avnd valoarea de 115% fa de martor. Aceasta
permite obinerea ntr-un singur ciclu tehnologic a proteinei furajere i alimentare, prezentnd un
proces biotehnologic finisat, fr poluarea mediului nconjurtor.
Capacitatea ciupercii P. ostreatus de convertire a materiei vegetale secundare i de sintez a
unor substane cu proprieti biologice unice cum sunt proteinele poate fi asigurat prin cultivarea
acesteia i n faza lichid de fermentare. Coninutul proteinei la cultivarea submers a tulpinilor
ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02 i CNMN-FB-03 dup 12-14 zile de fermentare pe mediul de
nutriie n baza finii de soia (0,5%) i a cojilor de floarea-soarelui (2%) s-a majorat pn la 10,811,0%, ceea ce reprezint o cretere de 138-141% fa de martor. Lichidul cultural posed activitate
celulazic, amilazic, lipazic.
n afar de produse alimentare de o nalt calitate i furaje pentru nutriia animalelor,
prelucrarea materiei vegetale secundare n condiii de fermentare ne poate oferi i principii
bioactive cu diverse efecte fiziologic active. Datorit efectului stimulator pe care-l produc,
substraturile nutritive uzate - folosite la cultivarea ciupercii P. ostreatus - reprezint o surs de
substane bioactive, care pot fi utilizate n fitotehnie n calitate de regulatori ai creterii seminelor
de gru. Efectul de stimulare a proceselor de cretere la gru (pn la 24% fa de martor) s-ar
datora prezenei n componena extractului P. ostreatus a complexului celulazic capabil s asigure o
degradare parial a tegumentului seminei, determinnd prin aceasta o majorare a permeabilitii
pentru ap fa de endospermul embrionului. Mai mult ca att, capacitatea tulpinilor P. ostreatus de
a sintetiza diveri ageni bioactivi - n funcie de tulpin, substrat i doz de aciune - poate exercita
o influen determinant asupra proceselor de reactivare metabolic i morfogenetic a seminelor
de gru aflate n repaus.
Examinnd aspectele socio-economice i ecologice ale valorificrii reziduurilor vegetale
locale, concluzionm, c acest domeniu ne ofer posibilitatea integrrii tehnologiilor de cultivare a
ciupercilor Pleurotus n dezvoltarea complex i durabil a regiunilor rurale i suburbane, rezolv
sarcina social de asigurare a populaiei cu produse alimentare de calitate i de ndestulare cu hran
a animalelor.

117

CONCLUZII
1. Tulpinile P. ostreatus CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 reprezint obiecte biotehnologice de
perspectiv ca productori de carpofori cu valoare nutritiv nalt, indicii nutritivi ai
carpoforilor cultivai pe diverse substraturi celulozice constituind 31,4-36,2 uniti
convenionale. Aminoacizii totali ai biomasei absolut uscate (BAU) reprezint 385-438mg/g
BAU, dintre care partea aminoacizilor imunoactivi 278-315mg/g BAU, iar a
aminoacizilor eseniali - 119-138mg/g BAU. Tulpinile sunt depozitate n CNMN a RM i
protejate de brevete de invenii.
2. n procesul de triere a mediilor nutritive solide, paiele de gru s-au dovedit a fi substratul
optimal de cultivare pentru toate tulpinile P. ostreatus testate, fapt confirmat att de
productivitatea nalt a recoltei de carpofori (EB=59,6-88,2%), ct i de indicele major al
randamentului (0,86-1,22).
3. Valoarea maxim a rentabilitii economice (1,98) a fost stabilit la cultivarea ciupercii P.
ostreatus CNMN-FB-02 pe paie de gru, utilizarea acesteia n cadrul structurilor specializate
de producere intensiv a ciupercilor comestibile de ser prezentnd un domeniu de activitate
ce ofer importante beneficii socio-economice i ambientale. Tulpina este depozitat n
CNMN a RM.
4. Cultura pstrvului de fag a demonstrat un randament superior de utilizare a reziduurilor
lignocelulozice agro-industriale, rata de descompunere a masei uscate fiind de 36-50%,
dintre care 36-46% celuloz i 30-44% lignin. Convertirea reziduurilor vegetale de P.
ostreatus n produse cu valoare nutritiv nalt a constituit circa 0,45-0,88kg ciuperci
proaspete la 1kg materie vegetal uscat.
5. Majorarea azotului total n substraturile nutritive fermentate a elucidat posibilitatea de
obinere a proteinei furajere, coninutul proteinei brute pentru materiile vegetale utilizate
dup 12 zile de cultivare cu tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04 majorndu-se de la 3,65,8% la 7,3-8,8%. Degradarea avansat a ligninei i asigurarea unui nivel nalt de sintez a
proteinelor n substraturile supuse fermentrii de ctre tulpina P. ostreatus CNMN-FB-04
duce la majorarea valorii nutritive i a digerabilitii produsului fermentat, ceea ce poate fi
pe larg folosit n furajarea animalelor (bovine, porcine).
6. La cultivarea submers a tulpinilor P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB04 au fost obinute bioproduse de o valoare nutritiv nalt (pn la 21,6-33,1 uniti
convenionale) cu un coninut sporit al aminoacizilor totali, eseniali, imunoactivi.
Bioprodusele obinute n baza mediilor de nutriie ce conin fin de soia (0,5%), fin de

118
porumb (2%) i coji de floarea-soarelui (2%) prezint o majorare fa de martor cu 138207% a componentelor proteice, posed un miros plcut de ciuperci i pot fi utilizate n
calitate de supliment proteic valoros pentru produsele alimentare i furajere.
7. Miceliul P. ostreatus cultivat submers duce la micorarea cu dou zile a duratei de preparare
a materialului semincer granulat i poate fi utilizat n calitate de inoculum pentru replicarea
pe scar larg a miceliului comercial.
8. Datorit efectului stimulator pe care-l produc, substraturile nutritive uzate - folosite la
cultivarea ciupercii P. ostreatus - reprezint o surs de substane bioactive, care pot fi
utilizate n fitotehnie, n calitate de regulatori ai creterii seminelor de gru.

RECOMANDRI PRACTICE
Conform procedeelor elaborate, tulpinile ciupercii P. ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03
i CNMN-FB-04 sunt recomandate pentru cultivare industrial n calitate de surse proteice
alimentare i furajere, productori ai metaboliilor fungici de natur bioactiv cu perspective
deosebite n diverse domenii aplicative.

119

REFERINE BIBLIOGRAFICE
1.AGUILAR A., MARTINEZ WET.

A sustainable model for rural production of edible

mushrooms in Mexico. Micologia-Neotropical-Aplicada. 1998, 11. p.77-96.

2.AKHMEDOVA Z. R., DALIMOVA G. N. Biotechnology for production of different hydrolytic,
oxidative enzymes from fungi. International Symposium Modern Problems of Microbial
Biochemistry and Biotechnology. Pushcino, 2000. c.139.
3.ANDRIE V. Producerea ciupercilor. UASM. Chiinu, 2002.-182p.
4.ASRITA J. Genetic study of white fruit-bodies of Pleurotus ostreatus. Rept. Tottori Micol. Inst.
Jap.- 1974. 11.- 1. P. 58-68.
5.BABITSKAYA V., PUCHKOVA T., SCHERBA V., OSADCHAYA O. Biologically active
substances of mycelia and fruiting bodies of mushrooms Lentinus Fr. and Pleurotus (Fr.) P. Karst.
IJMM. Vol. 3. 2001. p.106.
6.BALAZS S. Effect of composition and head-treatment of culture medium on formation of fruit
bodies Pleurotus ostreatus and Pleurotus florida. Publ. Univ. Horticult., Budapest, 1979, 10, p.
191-198.
7.BERDY J. Adv. Microbiol. 1974. V.18. 2. p.309-406.
8.BERRY D. R. The enviromental control of the physiology of filamentous fungi. The Filamentous
Fungi. London, 1975, p. 16-32.
9.CHANG S. T., MILES P.G. Mushroom biology a new discipline. The Mycologist. 1992. Vol.6.
p.64-65.
10.CIHANGIR N., SAGLAM N. Removal of cadmium by Pleurotus sajor-caju basidiomycetes.
Acta biotechnol. 1999. 19, 2. p. 171-177.
11.COLEH R., RESKY L., HADAR Y. Biotechnological applications and potential of wooddegrading mushrooms of the genus Pleurotus. Appl. Microbiol. and Biotechnol. 2002. 58. 5,
c.582-594.
12.COLGER R. Growing and showing exotic mushrooms. Mycologist. 1993. Vol.7. 2. p.71-72.
13.COSTENCO T., COSTENCO C. Ciuperci din Moldova. ARC. Chiinu, 2004.-96p.
14.CRISAN E. V., SANDS A. Nutritional value. The biology and cultivation of edible mushrooms.
New York: Acad.press, 1978. p. 137-168.
15.DENISOVA N. Traditions of using medicinal mushrooms among the Nations of the Words.
IJMM. Vol. 3. 2001. p.98.

120
16.DVORNINA A., RUDIC V., DVORNINA E. Dietary supplements with curative and
prophylactic properties made from the edible and medicinal mushroom Lentinus edodes (Berk.)
Sing. biomass. IJMM. Vol. 3. 2001. p.137.
17.EGER G., EDEN G., WISSING E. Pleurotus ostreatus breeding potential of a new cultivated
mushroom. Theor. And Appl. Genet.- 1976.-47.3. p. 155-163.
18.ELISASHVILI V., KACHLISHVILI E., CHUCHUA D., TSIKLAURI N., KHARDZIANI T.
Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.) Kumm. and Lentinus edodes (Berk.) Sing. lignocellulolytic enzyme
activity. IJMM. Vol. 3. 2001. p.140.
19.ENACHE E., ZARNEA G. Microbiologie industrial i biotehnologie. Iai, 1986. p.203.
20.ERIKSSON K.-E. L., BLANCHETTE R. A., ANDER P. Microbial and enzymatic degradation
of wood and wood components. Berlin: Springer Verlag, Hedelberg, Fed. Rep. Germany, 1990.
407p.
21.EVANS CHRISTINE S., VENESS ROBERT G., ULLAH MILLIE A. Breakdown of plant
polymers by fungi and their potential for use bioremediation. J. Chem. Technol. and Biotechnol.
1998. 71, 4. p.357-359.
22.FEDOTOV O. V. Antioxidizing activity of micelium of mushrooms stocks Pleurotus (Fr.)
Kumm. and Flammulina (Curt.: Fr) Sing. IJMM. 2001. Vol. 3. 2-3. p.143.
23.GAVRILOVA L., FOMINA V. Antibiotic action of cultivated basidiomycetes. IJMM. Vol. 3.
2001. p.145.
24.GERASIMENYA V., EFREMENKOVA O., KAMZOLKINA O. et al. Antimicrobian and
antitoxic action of Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.) Kumm. Extracts. IJMM. Vol. 3. 2001. p.147.
25.GINTEROVA A., JANOTKOVA O., VALOVIC K. Hliva ustricova. Pestovanie a spracovanie.
Bratislava: Raca. 1976. 67c.
26.GONTCHAROVA I., BABITSKAYA V., SCHERBA V. et al. Melanin pigments of medicinal
mushrooms. IJMM. Vol. 3. 2001. p.148.
27.GOROVOJ L. Biotechnology for chitin-containing materials production from mushroom
biomass. IJMM. Vol. 3. 2001. p.149.
28.GYRKO P. Die Rolle der Belichtung bei dem Anbau des Austernsietlings (Pleurotus ostreatus).
Mushroom Science. VIII: Proc. Eighth Intern. Sci. Congr. Cultivat. Edible Fungi. London. 1972. s.
461-469.
29.HATAKKA A. Appl. Biochem. Biotechnol. 1983. Vol.18. 6. p.350-357.
30.HATAKKA A. Appl. Biochem. Biotechnol. 1984. Vol.9. 4. p.363-364.
31.HATTULA M.L., GYLLENBERG H.G. Adaptability to submerged culture and amino acid
contents of certain fleshy fungi common in Finland. Karstenia, 1969, 9., p.39-45.

121
32.HEZZIG J., DVORAK M., VEZNIK Z. Treatment of litter straw by application of the fungus
Pleurotus ostreatus (Jacq.) Fr. Biol. Chem. Vyz.Hospod. Zvirat. 1968. 3. p.249-253.
33.HIRANO TAEKO, HONDA YOICHI, WATANABE TAKASHI, KUWAHARA MASAAKI.
Degradation of bisfenol A by the lignin degrading enzyme, manganese peroxidase, produced by
the white-rot basidiomycete Pleurotus ostreatus. Biosci., Biotechnol. and Biochem. -2000. 64.
9. c.1958-1962.
34.HILBER O. Die Gattung Pleurotus (Fr.) Kummer. Bibl. Mycol. 1982. 87. s.464.
35.HORRIERE F. Etudie compative des exigences trophiques de quelque basidiomycetes
superieurs fructufiant sur milieux synthetiques. Analyse bibliographique. Mushroom Sci. 1979. 10,
pt. 1, p. 665-683.
36.IMBERNON M., BRIAN C., GRANIT S. New strains of Pleurotus. Mushroom J.,1983.-N 124,
p. 117-123.
37.JALC D., NERUD F., SIROKA P. Biological treatment of wheat straw by white-rot fungi. 17
Int. Symp. Anim. Physiol., Kosice, 1997.
38.JONG S. C., BIRMINGHAM J. M. Medicinal and therapeutic value of the Shiitake Mushroom.
Adv. Appl. Microbiol. 1993. Vol. 39. p.153-184.
39.JOSE N., AJITH T. A., JANARDHANAN K. K. Antioxidant, antiinflammatory and antitumor
activities of Pleurotus sajor-caju (Fr.) Sing. IJMM. 2001. Vol. 3. 2-3. p.166.
40.KALBERER P. The cultivation of Pleurotus ostreatus: experiments to elucidate the influence of
different culture conditions on the crop yield. Mush., Tokyo, 1974, p. 653-661.
41.KANESHIRA T. Lignocellulosic agricultural waste degraded by Pleurotus ostreatus. Develop.
Ind. Microbiol., 1977, 4, p.591-597.
42.KIRK T. K., FARELL R. L. An. Rev. Microbiol. 1987. V.71. 4. p.465-505.
43.KISHORE G., SHEWMAKER C. Biotechnology: Enhancing human nutrition in development
and developing worlds. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1999.-96. 11. p.5968-5972.
44.KOVACS G. Nitrogenforrasok hatusa Pleurotus ostreatus torzsekre. Micol. Kozl., 1978. 1-2.
s.57-62.
45.KRIZ J., STANEK M., KAUSAR T. Vliv bedly cervanahici Lepiota rhacoides Vit a hlivy
ustriche Pleurotus ostreatus (Jacq.) Kumm. na rust okurek (Cucumes sativus L.) pri spolecnem
pestovani na stame. Vestn. pest., 1980. 1. s.55.
46.KURTZMAN R.H. Nitrogen fixation by Pleurotus? Mushroom Science, X: Proc. Tenth. Intern.
Sci. Congr. Cultivat. Edible Fungi. Paris, 1978, p. 427-435.
47.LABORDE J.,DELMAS J. Le pleurote : Un nouveau shampignon comestible cultive. Bull. Fed.
Nat. Syndicate Agricol.Cult.Champignons.-1974.-32. 1, s. 631-652.

122
48.LI S. F. Studies on the tolerance to elevated temperatures in Pleurotus ostreatus . B-ca micol.1980.-65. 1. p.1-86.
49.LINDENFELSER L. A., DETROY R. W., RAMSTACK J. M. et al. Biological modification of
the lignin and cellulose components of wheat straw by Pleurotus ostreatus. Dev. Ind. Microbiol.
1979, 20, p.541-551.
50.MACER D., MARY A. Changing attitudes to biotechnology in Japan. Nature Biotechnol. 2000.
18. 9. p.945-947.
51.MACRIS J., KOKKE R. Eur. J. Appl. Microbiol. 1977. 4. 1. p.93-99.
52.MANACHERE G. Morphogenese des carpophores de basidiomycetes superieurs. Rev. mycol.1978.- 42. 2.-s. 191-251.
53.MANACHERE G. Conditions essential for controlled fruiting of macromycetes a review.
Trans.Brit.Mycol.Soc. 1980. 75, 2.-p.255-270.
54.MANE A., MANE G., BANTEY V. et al. Oyster mushroom powder: an effective supplement
for daily bread of Indians. IJMM. Vol. 3. 2001. p.178.
55.MANUKOVSKY N. S., KOVALEV V. S., RYGALOV V. Y. et al. Waste bioregeneration in
live support CES: development of soil organic substrate. Advances in Space Research. 1997.
Vol.20. 10. p.1827-1832.
56.MATEESCU N. Cultura ciupercilor Pleurotus. Editura CERES. Bucureti, 1992.
57. MATEESCU N. Ciupercile Pleurotus., M.A.C.T., Bucureti,1999, -143 p.
58.METZ B. From pulp to pellet: An engineering study on the morphology of molds. Ph.
d. thesis. Delft. 1976. p.23-27.
59.MRAZKOVA L., STANEK M. Antagonismus bacterii osidlujicic slamu vuci Pleurotus
ostreatus, Chaetomium olivaceum, Trichoderma sp. Vestn. pest. 1978. 14. 2. s.42-44.
60.MUSC G., GIURC R. Microbiologie industrial i biotehnologie. Iai, 1986. p.36.
61.NAKONECHNAYA A., DRANNIK G., GOROVOJ L. et al. Effect of a Mycoton preparation
on biochemical and immunological parameters of a syndrome of endogenic intoxication and
secondary immunodeficiency. IJMM. Vol. 3. 2001. p.187, 188.
62.OSER B.L. An integrated essential aminoacid index for predicting the biological value of
proteins. Protein and amino acid nutrition. New York: Acad. Press, 1959. p. 221-229.
63.PASMIK M. Vyskum skrmovania aktivolanej slamy miceliom Pleurotus ostreatus vykrmovymi
osipanymi. Zborniki Celostatni zjazd pestovatelov hlivy. Bratislava: Raca, 1985. s.47-56.
64.PATIL M. B, JADHAV V. T. Studies on preservation of oyster mushroom Pleurotus sajor-caju.
J. Maharashtra Agr. Univ. 1999. 24. 3. c.302-303.

123
65.PIRT S. J. A kinetic study of the mode of growth of surface colonies of bacteria and fungi. J.
Gen. Microbiol. 1967. 47. 2. p.181-197.
66.PLATT M., CHIT J., HENIS J. Growth of Pleurotus ostreatus on cotton straw. Mushroom J.,
1982, 120, p.425-427.
67.POTTERAT O. Antioxidants and free radical scavengers of natural origin. Curr. Org. Chem.
1997. Vol.1. p.415-440.
68.RAJARATHNAM

S.,

SCHASHIREKA

M.,

BANO

Z.

Biopotentialites

of

the

Basidiomacromycetes. Adv. Appl. Microbiol. 1992. Vol. 37. p.233-361.

69.RIGHELATO R. C. Growth kinetics of micelial fungi. In: The filamentous fungi. Vol.1.
Industrial mycology. Eds. J.E. Smith. D. R. Berry. London: Edward, 1975. p.79-103.
70.ROVBEL N.,GONTCHAROVA I., SOCOLOVA T. Sorption of toxic metals by medicinal
basidiomycetes. Int. Journ. of Med. Mush. Vol. 3. 2001. p.213.
71.ROYSE D. J., BATLER C. C. Effects of genotype, spawn run time and substrate formulation on
biological efficiency of shiitake. Appl. Envir. Microbiol., 1976, vol. 52, 6, p. 1425-1427.
72.RUDIC V. Aspecte noi ale biotehnologiei moderne. Chiinu: tiina. 1993. 140p.
73.RYSAVA J., STANEK M. Vyuzivove pozadavky micelia a vynosy plodnic kmenu Agaricus
bisporus. In: 3 Intern. symp. physiology. Ecology and cultivation of edible fungi. Prahue. 1979. p.
20-22.
74.SAKAMOTO R., NIMI T., TAKAHASHI S. Effect of carbon and nitrogen sourses on
submerged culture of edible fungi. J. Agr. Chem. Soc. Jap. -52, 2., 1978. p.75-81.
75.SASEK V., EGGEN T. Use of edible and medicinal mushrooms spent compost in remediation
of polluted soils. IJMM. Vol. 3. 2001. p.235.
76.SRBU T., DESEATNIC A., TIURIN J., LABLIUC S. Obinerea de tulpini microbiene
productoare de lipaze. Fiziologia i biochimia plantelor la nceput de mileniu: realizri i
perspective. Chiinu, 2002. p. 273-276.
77.SEMERDZIEVA M., CEJP K. Investigation of micelial growth in some gill fungi under
laboratory conditions. Folia microbiol. 1966. 11, 2. p.146-154.
78.SENYUK O., GOROVOJ L. Health protection and restoration under low-level irradiation
conditions using a Mycoton preparation. IJMM. Vol. 3. 2001. p.219, 220.
79.SHI Y.-L., JAMES A. E., BENZIE I.-F. F., BUSWELL J. A. Prezention of oxidative damage to
cellular DNA by mushrooms derived components. IJMM. 2001. Vol. 3. 2-3. p.221.
80.SIME J. Sustaining the growth of UK biotechnology. Nature Biotechnol. 1999.-17. 5. p.442443.

124
81.SIVAPRAKASAM K., KANDASWAMY T.K. Influence of the growth of Pleurotus ostreatus
(Fr.) Sing on cellulose content of the substrate. Madras Agr.J.,1981, 9, p.628-630.
82.SOLOMKO E. Nutritional and medicinal benefits of Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.) Kumm.
submerged cultures. IJMM. Vol. 3. 2001. p.223.
83.SOLOMONS G. L. Submerged culture production of micelial biomass. In: The Filamentous
fungi. Industrial mycology. London: Edward Arnold. 1975. p. 249-263.
84.SOMOGYI M. J. Biol. Chem., 19, 1, 1952.
85.SORATA V., TAKAHAMA U., KIMURA M. Biochem. Biophis. Acta. 1984. Vol. 799. p. 313317.
86.SPNU V. Considerente privind importana dezvoltrii agricultirii cu mediu controlat n
Moldova. Ed. AGEPI. Chiinu, 2002. p. 97-102.
87.STAMETS P. Growing gourmet medical mushrooms. Hong Kong: Ten Speed Press, 1993. 552p.
88.SUGIMORI T., OYAMA Y., OMICHI T. Studies on Basidiomycetes I. Production of micelium
and fruit body from moncarbohydrate organic substances. J. Fermant. Technol. -1971.-49. 5.
p.435-446.
89.TEPLYAKOVA T. V. Mushroom-based biologically active substances. IJMM. Vol. 3. 2001.
p.231.
90.TOWERS G-H. N., PAGE J. E., HUDSON J. B. Light-mediated biological activities of natural
products from plants and fungi. Curr. Org. Chem. 1997. Vol.1. 4. p.395-414.
91.TSAO G. T. Production of oxalic acid by a wood-rotting fungus. Appl. Microbiol., 1963. 11.
3. p.249-255.
92.TRANDAF F., TRANDAF V., LEOCA R. Suporturi noi de cretere i rezultatele preliminare la
cultura ciupercii Pleurotus ostreatus n ser. Inst. Cerc. Legume i fructe, 1978, 9, p. 205-212.
93.TUDOR I. Ciuperci comestibile Agaricus i Pleurotus. Alex-Alex. Bucureti, 2001.-127p.
94.ULLAH M. A., BEDFORD C. T., EVANS C. S. Reactions of pentachlorphenol with laccase
from Coriolus versicolor. Appl. Microbiol. and Biotechnol. 2000. 53, 2. p.230-234.
95.VIESTURS V., LEITE M., STRIKAUSKA S. Monitoring and control of plant raw material
bioconversion: VTT Symp. Espoo, 1985. 60. p. 103-124.
96.WANG G. Dismutase compound as ant-senility nutrient liquid. CN Patent 1107713, publ.
09.06.1995.
97.ZADRAZIL F., SCHLIEMANN J. Einfluss der Temperatur auf Habitus und Farbung des
Basidiocarps von Pleurotus. Art. Champignon, 1972, 12, s. 25-32.

125
98.ZADRAZIL F. The ecology and industrial production of Pleurotus ostretus, Pleurotus florida,
Pleurotus cornucopiae and Pleurotus eryngii. Mushroom Sciense, IX: Proc. Ninth Intern. Sci.
Congr. Cultivat. Ediblec. Fungi, Tokyo, 1974, p. 621-652.
99.ZADRAZIL F. Influence of CO2 concentration of the mycelium growth of three Pleurotus
species. Eur. J. Appl. Microbiol. Biotehnol., 1975, 1, p. 327-335.
100.ZADRAZIL F. Eur.J. Appl. Microbiol. Biotehnol. 1977, Vol.4, 4, p.273-281.
101.ZADRAZIL F. The conversion of straw into feed by Basidiomycetes. Eur. Appl. Microbiol
Biotehnol., 1977, 4, p. 273-281.
102.ZADRAZIL F. Cultivation of Pleurotus. The biology and cultivation of edible mushroom.
New York Etc.:Acad. Press, 1978, p.521-557.
103.Zadrazil F. Influence of ammonium nitrate and organic supliments on the yield of Pleurotus
sajor-caju (Fr) Sing. Eur. J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1980. 9. p.31-35.
104.ZADRAZIL F., Brunnert H. Investigation of physical parameters important for the solid state
fermentation of straw by white rot fungi. Eur. J. Appl. Microbiol. 1981, 11. p.183-188.
105.ZADRAZIL F., Peerally A. Biotechnol. Lett. 1986. Vol.8. 9. p.663-666.
106. ZARNEA G. Tratat de microbiologie general. Editura Academiei Romne. Bucureti, 1994.
p. 170-174.
107.ZATKA P. Vyuzitie vyplodeneho substratu pri vykrnic hovadzieho dobytka. Zborniki
Celostatni zjazd pestovatelov hlivy. Bratislava: Raca, 1985. s.40-46.
108.ZHANG R., LI X. Mushroom cultivation with rice and wheat straw. Annual International
Meeting. Orlanda, Florida. USA. 1998. -10p.
109. ,., .., .. , 1987, 2, .
88-94.
110... 427993 , (51) ..12/00. Pleurotus ostreatus (Fr) Kummer
BF-1300 . .., .., ..,
.. . 29.10.74. . 18.
111. . . . ., 1984.
112. . . . -
, 1970. 487 .
113. . ., . .
. . . . . 34, 3, 1998. . 270-276.
114. . .
. . 2001. 4. . 20-22.

126
115. . . Pleurotus ostreatus. I.
. . 5. 1992. .65-68.
116. . . Pleurotus ostreatus.
II. . . 5. 1992. .69-71.
117. . ., .., . ., . . Pleurotus ostreatus
. . . 1996.
. 32. 2. 203-210.
118. . ., . ., . .
- . .
. 1997. .33. 5. .559-563.
119. . ., . .
. . . 2002. .38. 2. .169-173.
120. . ., . ., . .
. . .37. 5.
2003. .63-68.
121. . . . .
.-. . . ., 2000. 4. .102-103, 139.
122. . . . . 1988. .145-155.
123. . ., . .
. . .31. 6. 1997. .64-75.
124. ., .
. . . . . 1986. 7. .61-64.
125. . ., . ., .., . .
Pleurotus ostreatus Flammulina velutipes
. . . 2002. .38. 4. .405-412.
126. . . . - , ,
1973.240 .
127. .., . ., . .
. . , 1983. .238-250.
128. . . . ..

Pleurotus

ostreatus.

, 1986, 5 . 392-395.
129. .., ..
, 1987, . 74-84.

127
130. .. Pleurotus ostreatus
. . .22. 6, 1988. . 516-519.
131. .., . . Bacillus
Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr) Kumm.
. , . 29, 5-6, 1995. . 1-7.
132. . .
. .
. 1999. .35. 5. .590-595.
133. . ., . ., . .
. IV .
. . 2001. .142.
134. . . . .
, 1988. 144.
135.

.,

. : - . . , 1997. . 37-38.
136. . . : .
. . . . . . -. 1999. 2. .93-104.
137. . . . , 1969. . 188-189.
138. . ., . ., . ., . .

. . . 20-21 .: . . . 2(10) . . -,
-. 1998. .2, .49.
139. . . . . .
. ., 2002. . 286-287.
140. . . Trametes Fr.
: . . . . . .
. . .:. .-. .-. 2003. 24 .
141. .., .., .., .
: . . . , , 1985,
. 62-67.
142. . . . -
. , 1990. 112.

128
143. . .
Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr) Kumm. , . 22, 5, 1988. .
399-403.
144. . ., . ., . . .
. 1992. -160 .
145. . ., . ., . ., . .
Pleurotus ostreatus.
. .36. 4. 2002. .44-47.
146. . ., . ., . . .
. . , 1987. 430.
147. . ., . .
. : , 1982. 168.
148. . ., . . P.
streatus. . 1989, . 23, 5, . 485-487.
149. . ., . ., . .
Pleurotus
. Genetica i ameliorarea plantelor i animalelor n Republica Moldova. Chiinu, 1999.
p.748-751.
150. . ., . ., . ., . ., . .
Panus tigrinus F-3616D
. : . . .. . 1999. -. .71-72.
151. . ., . ., . .
. . 1984. 69.
152. . . . . . . .
: , 1998. .185-188.
153. . ., . .
. III . -
. . . .-. 1993. .311.
154.

.,

. Microorganismele i metaboliii lor n economia

naional. III Conferin naional cu participare internaional. Chiinu. 1996. p. 74-75.

129
155. . .
- Lentinus edodes. -2004. .
. . 2004. . 77.
156. . ., . ., . . .
. .
. 2000. .38. 4. .413-418.
157. . ., . . . II
. , 2002, .21-31.
158. .., ., .., .. .
: . . . , 1982, .2, .227-228.
159. . :
. 1982. . 57-62, 75-75.
160. . . ., 1980, 293 .
161. . . . . . .
2000.-6. 4..14-18.
162. . ., . ., . .
. . , 1988, 261 .
163. . ., . .
. , . 32, 5, 1998. .
67-70.
164. . ., . ., . .
. .: 1982.
165. . . . .: - , 1989. 304 .
166. . ., . ., . .
. . . ., . 1985. . 21-38.
167. . ., . ., . .
. Fiziologia i biochimia plantelor la
nceput de mileniu: realizri i perspective. Mater. Congr. II. Societatea de Fiziologie i Biochimie
Vegetal din Republica Moldova. Chiinu. 2002. p.153-157.
168. . ., . .
. , . 25, 3, 1991. . 233-239.
169. . ., . ., . . . . 2003. 2.
.59-64.

130
170.

..,

..

. . 2004. 5. .6467.
171. . ., . ., . ., . .
, , . : , 1988. 25.
172. . . Lentinus edodes:
. . . . 2004. . 108.
173. . ., . ., . ., . .
Panus tigrinus -
. . .-. . 1999. -. . 61-62.
174. . ., . . . ., . .
Panus tigrinus. . . 2002. .38. 5.
.529-533.
175. . . . .:
- , 1989. -55.
176. . ., . ., . ., . .
- .
--: . . . .-. ., . 1997, .1.
.131-132.
177. . . . . .:
. 1990. -240.
178. . ., . ., . ., . .
. 6, 1985. . 94-100.
179. . ., . ., . .
. .:, 1998. 166.
180. . ., . ., . . .
- Pleurotus ostreatus (Fr.) Kumm. .
. 1987. .23. 2. .230-236.
181. . . Pleurotus
(Fr.) Kumm. . . . - . 2001. 53. .293-296.
182. . ., . . . .: , 1985. 319.
183. . ., . ., . ., . .
. . .-. : . .
. . 1997. . 179-180.

131
184. . .
. . . 1998. .34. 6. .597-608.
185. . . . .-.: , 1965.
194.
186. .., .., .. .
. ., 1969. . 243.
187. . . .
. .27. 6. 1993. .83-93.

132

ADNOTARE
Stepanov Vitalie Biotehnologia cultivrii ciupercii Pleurotus ostreatus i obinerii
bioproduselor valoroase. Teza de doctor n biologice. Chiinu, 2005, 35 tab., 28 fig., 187
referine bibliografice.

Cuvinte-cheie: Pleurotus ostreatus, screening, faz solid de fermentare, protein furajer, protein
alimentar, valoare nutritiv, cultivare submers, biomas, aminoacizi, fitotehnie, bioproduse.

Lucrarea reprezint un studiu comparativ a mai multor tulpini de Pleurotus ostreatus cu

referin la unele particulariti morfo-culturale i biochimice de cultivare ale acestora, o apreciere a
potenialului biologic al ciupercii de pstrv din punct de vedere al perspectivei biotehnologice.
n rezultatul selectrii tulpinilor ce prezint interes prin capacitatea de cretere sporit pe
mediile solide i lichide de cultivare, prin sinteza componentelor proteice valoroase i a
metaboliilor fungici bioactivi, au fost izolate, cercetate i depozitate n Colecia Naional de
Microorganisme Nepatogene trei tulpini noi de pstrv - Pleurotus ostreatus CNMN-FB-02,
CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04.
A fost demonstrat posibilitatea obinerii carpoforilor cu valoare nutritiv nalt i a furajelor
cu coninut sporit de substane azotate, aminoacizi eseniali i imunoactivi. La cultivarea tulpinii
Pleurotus ostreatus CNMN-FB-04 pe substratul complex n baza paielor i cocenilor de porumb
(2:1) au fost obinui carpofori cu un coninut nalt al aminoacizilor totali n biomasa absolut uscat:
438mg/g BAU, dintre care 315mg/g BAU reprezint partea aminoacizilor imunoactivi, iar
138mg/g BAU - a aminoacizilor eseniali . Capacitatea ciupercii Pleurotus ostreatus de a degrada
complexul lignocelulozic i de a converti reziduurile vegetale n produse proteice de sintez duce la
majorarea valorii nutritive i poate fi utilizat n calitate de procedeu de obinere a bioproduselor
fungice valoroase.
Tulpinile Pleurotus ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 i CNMN-FB-04 sintetizeaz
diveri exometabolii celulari n mediul de nutriie, n special, enzime hidrolitice (celulaze, amilaze,
proteaze, lipaze). La tratarea seminelor de gru cu exometaboliii de Pleurotus ostreatus se atest o
sporire a biomasei totale a seminelor ncolite (pn la 24%), ceea ce permite utilizarea acestora n
calitate de biostimulatori ai proceselor fiziologice i biochimice n fitotehnie.
Miceliul Pleurotus ostreatus cultivat submers poate fi utilizat i n procesul tehnologic de
preparare pe scar larg a materialului semincer i de producere a carpoforilor.

133

Pleurotus ostreatus
. . . , 2005,
35 ., 28 ., 187 . .
: Pleurotus ostreatus, , ,
, , , , ,
, , .
-
Pleurotus ostreatus
.
, ,

,
- Pleurotus ostreatus
CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 CNMN-FB-04.

(:, 2:1)
Pleurotus ostreatus CNMN-FB-04 438 / ...,
315 / ... - 138 / ... Pleurotus ostreatus

.
, Pleurotus ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03
CNMN-FB-04 ,
, (, , , ).
P. ostreatus
( 24%)
- .
P. ostreatus

.

134

ABSTRACT
Stepanov Vitalie Biotechnology of cultivation of Pleurotus ostreatus mushroom and
obtaining valuable bioproducts Dissertation submitted for the degree of Doctor of Biological
Sciences. Chisinau, 2005, 35 tables, 28 figures, 187 bibliographical references.

Key words: Pleurotus ostreatus, screening, solid state fermentation, fodder protein, food
protein, nutritive value, submerged cultivation, biomass, amino acids, phytotechny, bioproducts.

Morphological, cultural and

biochemical properties of Pleurotus ostreatus strains were

studied to estimate the biotechnological perspectives of this oyster mushroom.

Three new strains of Pleurotus ostreatus - CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 and CNMN-FB-04
were isolated, investigated and deposited in the National Collection of Nonpathogenic
Microorganisms as a result of the search for the strains with high growth rates, protein and
secondary metabolite production under the solid state and submerged fermentation conditions.
The presented results demonstrate possibilities of obtaining fruit bodies of high nutritive
value and fodder for agricultural animals, rich in nitrogen and particularly in essential and
immunoactive amino acids. It was found that the strain Pleurotus ostreatus CNMN-FB-04, treated
with a special complex substrate (straw:corn stump, 2:1), was able to accumulate 438 mg/g a.d.m.
of amino acids, including 315 mg/g a.d.m. of immunoactive and 138 mg/g a.d.m. of essential
amino acids. The abilities of Pleurotus ostreatus to decompose lignocellulose and to enrich with
fungal protein different plant residues from agriculture increases the fodder value of the latter and
can be used as a means of production of fodder proteins.
The strains of Pleurotus ostreatus CNMN-FB-02, CNMN-FB-03 and CNMN-FB-04 were
found to be active in producing different exometabolites into the media and, in particular, in
producing a complex of hydrolytic enzymes (cellulase, amylase, proteinase, lipase). These
exometabolites can be used as biological stimulators of physiological and biochemical processes in
phytotechny. The treatment of the wheat seeds (before sawing) with the exometabolites increased
the biomass of the seedlings (up to 24%).
The submerged mycelium of Pleurotus ostreatus can be also used in the technologies of
production of fruit bodies as one of the means of quick obtaining of large quantities of fungal
mycelium for sawing.