Diagnosticul de laborator al infectiilor

cauzate de Diaporthe vaccinii

Student: Gilca Ionut Vladut
Grupa:BA
 Diaporthe vaccinii Sheareste un agnet
patogen care se gaseste pe tulpini, lăstari și
frunze la specii de afine si cauzează afecțiuni
de fosfomie si putregai al frunzelor.

Fig. 1 (A) Simptome ale Diaporthe vaccinii pe crengi de Vaccinium corymbosum.

(B) Conidiomata pe tulpina de afine.
(https://gd.eppo.int/taxon/DIAPVA/documents)
 Simptomatologia bolii

• La soiurile de afine susceptibile, este • Frunzele infectate prezintă pete

afectarea tulpinilor lemnoase de 1 an crescând la 1 cm cu picnidii care
cu muguri de florisimptomul apar
predominant în Carolina de Nord.
• D.vaccinii provoacă o decolorare
• în 2 săptămâni .
maro a xilemului tulpinii sub
simptome de ofilire
• Fructele infectate devin maroniu- Fig.2 (A) Simptome cauzate de Diaporthe vaccinii pe crenguțe de
Vaccinium macrocarpon. (B) Conidiomate pe tulpina de afine
roșcat, moi, de multe ori se despart
și provoacă scurgeri

Fig. 3 Afine cu simptome de putregai viscid cauzate de Diaporthe

vaccinii (dreapta, inoculare artificială) și afine sănătoase (stânga).
 Metode de izolare
• Izolarea ciupercilor din părțile de
plante aeriene. Pentru identificare,
agentul patogen trebuie obținuta
cultura în stare pura, parti de crenguțe
(5-7 cm lungime, conținând părți
sănătoase, precum și leziuni).
• Mai întâi materialul este excizat cu un
bisturiu, este spălat în apă sterilă, apoi •
materialul este scufundat timp de 1
min în soluție de NaOCl 2% și spălat
din nou în apa sterila.
• După uscare, bucățile mărunțite sunt
așezate pe mediu agar.
• D. vaccinii crește bine pe Agar de
dextroză de cartof (PDA), (MEA) și
MSM . MSM este mult mai adecvat
pentru izolarea Diaporthe vaccinii din
țesutul vegetal și dimensiunea
picnidiei și conidiilor mai apropiate de
marimea lor naturala .
Se pun la incubat în camere umede la
22-25 ° C pe o perioada de 12/12 h
perioadă de lumină / întuneric.
Camerele ar trebui să fie periodic
umezite și examinat zilnic la microscop
stereoscopic.
 Retete de medii de cultura pentru
izolarea patogenului
• Compozitia mediului de cultura MSM
• Tulpini uscate trifoi dulce-40g
• Agar tehnic nr.3 (oxoid)-12 g
• Apa distilata –pana la 1L
Mediul este agitat si incalzit la 100˚C timp de 60
de minute (~500 rotatii/min)
Se sterilizeaza timp de 15 minute la 110 ˚C