Fam.

Enterobacteriaceae

Bacili Gram negativi

Mobili (cu exceptia Shigella, Yersinia, Klebsiella)
Nesporulati
Nepretentiosi nutritiv
Aerobi facultativi anaerobi
Catalazo pozitivi
Oxidazo negativi
Fermenteaza glucoza (cu /fara producere de gaz)
Reduc nitratii la nitriti
44 genuri (28 de genuri de interes medical)
Salmonella
Shigella
Yersinia

Escherichia
Klebsiella
Enterobacter
Serratia
Proteus
Bacterii ubicuitare

majoritatea speciilor intra in componenta

microbiotei comensale intestinale la om si
animale
pot coloniza si mucoasa genito-urinara
prezente in m extern (sol, apa, plante)

Categorii de patogenitate

Patogeni primari intestinali: Salmonella,

Shigella, Yersinia
Conditionat patogeni: pot produce infectii
daca
poseda
factori suplimentari de virulenta

(ex patotipuri de E coli)

exista deficiente ale apararii imune
Ocazional patogeni

Categoria
Patogene

Conditionat
patogene

Gen
Salmonella,
Shigella,
Yersinia, E coli
(fenotipuri
patogene)
Citrobacter,
Enterobacter,
Escherichia (alte
localizari decat
intestinala si
urinara),
Klebsiella,
Morganella,

Semnificatie
etiologica
Certa

Izolate semnificativ
in
probe
necontaminate
(LCR, colectii
neabcedate),
hemoculturi

Proteus, Serratia
Ocazional patogene Hafnia, Kluyvera,
Pantoea s.a.

Infectii intestinale (Salmonella, Shigella, Yersinia

enterocolitica,
Escherichia
coli
patotipuri
diareigene etc)
B.
Infectii cu alte localizari

Infectii urinare (Escherichia coli, Proteus mirabilis,

Enterobacter spp., Klebsiella pneumoniae etc)

Infectii respiratorii, frecvent nosocomiale (Klebsiella

pneumoniae, Enterobacter spp., Escherichia coli
etc)

Meningite neonatale (Escherichia coli)

Infectii ale plagilor chirurgicale (Proteus)

C. Infectii sistemice

Bacteriemii (Escherichia coli, Enterobacter spp.,

Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis)
A.

Septicemii (Salmonella Typhi, S. Paratyphi, Yersinia

pestis) Caractere microscopice

bacili gram negativi

Yersinia frecvent cocobacili
Proteus aspect polimorf
Klebsiella pot prezenta capsula (in produs
patologic)

Caractere cultivare
pe m simple, dupa 18-24 ore de incubare la 37C
formeaza
colonii de 2-3 mm, forma S;
Klebsiella, colonii mucoase, cu tendinta la
confluare

 Proteus culturi cu caracter invaziv, in valuri

concentrice
Serratia colonii pigmentate in rosu

pe geloza sange uneori colonii hemolitice

(caracter de tulpina, nu de specie!)
pe m diferentiale sau selective caractere de
diferentiere (ex fermentarea lactozei)

Caractere biochimice permit identificarea

preliminara

definitiva
prin utilizarea unor sisteme

conventionale
multitest mai multe teste in acelasi mediu (TSI,

MIU, MILF)

microtest (manuale / automate) baterii de teste

biochimice, unele cu citire rapida (4-6 ore)

Identificare

Caractere biochimice medii multitest

fermentarea unor zaharuri (glucoza, lactoza
etc)
producerea unor metaboliti (producerea de
indol evidentiata cu reactiv Erlich, de H2S)
prezenta unor enzime (ureaza, lizindecarboxilaza,
fenilalanindezaminaza etc)

Identificare

Caractere antigenice identificare prin r

de aglutinare
Ag O (somatic) definesc grupuri

 Ag H (flagelar) la tulpinile mobile definesc

tipuri
Ag de invelis: K (capsular) la Klebsiella si E
coli, B la Shigella, Vi la Salmonella

Algoritmul izolarii si identificarii

enterobacteriilor

Probe
Necontaminate
inchise, sange)
Urina

(maduva

osoasa,

colectii

Contaminate (materii fecale, bila, probe

necroptice, alimente suspecte)

Algoritmul izolarii si identificarii

enterobacteriilor

Medii de izolare in functie de tipul

probei
necontaminate: agar simplu + agar sange
sange: hemoculturi
urina: agar sange + agar Mac Conkey
contaminate: m de imbogatire + m selective
(MacConkey, ADCL, XLD, Hektoen, SS, Wilson
Blair) m cromogene

colonii izolate

Algoritmul izolarii si identificarii

enterobacteriilor

Medii multitest (TSI, MIU/MILF) pentru

identificare preliminara
Identificare definitiva
Teste biochimice
Serologica (lama/tub)
Tipare

Escherichia coli

component important al microbiotei colonului

Mobil (majoritatea tulpinilor)
fermenteaza Glu cu producere de CO2,
fermenteaza lactoza
produce indol, test rosu metil +
Nu produce H2S , ureaza, fenilalanin
dezaminaza
Nu utilizeaza citratul ca unica sursa de carbon
(nu cultiva pe m m Simmons)
Infectii intestinale (patotipuri diareigene)
Infectii urinare (E. coli cea mai frecventa
cauza)
Meningite neonatale (E coli K1)
Pneumonii

Peritonite, colecistite
Bacteriemii
Infectii ale plagilor (etiologie

E coli enterotoxigen (ETEC)

mixta)

determina, dupa o incubatie de 1-2 zile,

diaree apoasa,
autolimitata, secundar expunerii
la apa
8
10
sau alimente contaminate (10 10
UFC)
Enterotoxine
codificate
de
gene
plasmidice
Toxina termolabila (TL) asemanatoare
structural si functional toxinei holerice; prin
unitatile B se leaga de receptori de pe
suprafata enterocitelor, iar prin subunitatea A
activeaza adenilat ciclaza, cu cresterea
nivelului cAMP, stimularea secretiei de Cl si

inhibarea absorbtiei Na din lumen

Toxina termostabila (TS) structura
asemanatoare; activeaza guanilat ciclaza

Adezine codificate de gene plasmidice

Fimbrii (Colonization Factor Antigens) CFA I, CFA

II, CFA IV
Anticorpi antiadezine au rol protector

E coli enterotoxigen (ETEC)

identificare
(laboratoare
de
referinta)
In vivo ansa ileala ligaturata (iepure),
inoculare intragastrica
(soarece n.n.)
In vitro
Efect citopatogen

 PCR: detectarea lt I, st I
ELISA detectarea LT, ST

E coli enterohemoragic (EHEC)

dupa ingestia de alimente contaminate
(doza infectanta 10-100
UFC)
incubatie de 3-7 zile
dureri abdominale, diaree (uneori cu
sange)
mai frecvent implicat serotipul O157H7,
dar si alte serotipuri (O26:H11, O45:H2,
O103:H2,
O111:H8,
O121:H19,
O145:H28)
la 5 - 10% din cei infectati : sdr hemolitic si

uremic
(anemie
hemolitica
microangiopatica, trombocitopenie, insuf
renala acuta)
Citotoxinele 1 si 2
asemanatoare structural toxinei Shiga
produsa de Shigella dysenteriae (toxine
Shiga-like, SLT)
efect citopatic pe celulele Vero
Diseminare sistemica
tropism pentru receptori de la nivel endotelial,
renal, pancreatic, cerebral
codificate de gene profagice

Adezina
intimina, proteina codificata cromosomal (eae
A), determina aplatizarea microvililor

E coli enterohemoragic (EHEC)identificare

In vitro
Incadrare in serogrupe aglutinare
efect citopatic pe celulele Vero
Detectarea genelor stx 1/2, eventual eae A
Detectarea toxinelor SLT 1 si SLT2 prin ELISA,
latexaglutinare

E coli enteroinvaziv (EIEC)

Determina diaree apoasa sau mai
rar febra, diaree cu mucus si
sange (sdr dizenteriform)
Invazia celulelor epiteliale, datorita
unor proteine Ipa codificate de
gene plasmidice
Penetrarea in celulele M ale mucoasei
colonului
Captarea de catre Mf, lizarea
fagozomului, supravietuire
intracelulara, eliberare in spatiul
subepitelial si endocitare de catre
celulele intestinale
Multiplicare intracelulara si extindere
la celule adiacente


Liza celulelor epiteliale
inflamator produc ulceratii

si

Enterotoxine

E coli enteroinvaziv (EIEC)

- identificare
in
vivo:
inoculare
in
sacul
conjunctival la cobai (test Sereny)
In vitro

Izolare pe m cu sorbitol,
identificare Ag
Efect citopatogen pe celule HeLa
Detectarea genei ipaH prin PCR

rasp

coli

apoi

enteropatogen

(EPEC)

Determina diaree apoasa uneori

prelungita, la copii < 1 an
Asociere cu anumite serotipuri
Atasare la enterocite prin adezina
fimbriala (Bundle forming
pilus, BFP), care favorizeaza formarea
de microcolonii aderente
Producerea unor proteine secretorii,
codificate cromosomal (esp )
Aderare prin intimina, codificata
cromosomal (eae A
Escherichia
coli
attaching
and
effacing)
modificari ale citoscheletului si
stergerea
microvililor
,
care

determina

alterarea
electrolitilor si

E coli
(EPEC)

enteropatogen

transportului
apei

In vitro
Incadrare in serogrupe aglutinare cu
seruri polivalente si monovalente
Efect citopatic pe celule Hep-2
Detectarea genei eae A prin PCR

E
coli
(EAEC)

enteroagregativ

Produce diaree apoasa persistenta,

uneori cu mucus,
Se ataseaza la suprafata enterocitelor
prin fimbrii (Aggregative
Adherence Fimbriae, AAF I - III)
codificate plasmidic
Stimuleaza
secretia
de
mucus
(biofilm)
Produce citotoxine care determina
necroza microvililor

E
coli
(DAEC)

aderent

difuz

Produce diaree apoasa la copii de 1-5

ani
Adezine fimbriale

Modificarea microvililor

Fenotipuri uropatogene
cauza a > 80% din infectiile urinare necomplicate
Asociere cu anumite serotipuri O (1, 2, 4, 6, 7, 16,
18, 75)
Factori de patogenitate:
adezine fimbriale (PAP, P associated pili) recunosc
Ag prezente pe suprafata celulelor uroepiteliale si a
hematiilor (grup sangvin P)
Adezine nefimbriale
aerobactina fixarea Fe
hemolizine inhiba fagocitoza
capsula polizaharidica (serotipuri capsulare K1, 2,
3, 5 sa)

Fenotipuri bacteriemice

Factor de patogenitate: antigen capsular K1

(similitudine structurala cu Ag capsular de grup B al
Neisseria meningitidis si cu glicopeptide cerebrale)
Determina meningite neonatale ( ca si
Streptococcus agalactiae si Listeria monocytogenes)

Diagn de laborator
Produs patologic in functie de sdr clinic
Materii fecale
Urina
Sputa
Lichid peritoneal
Sange
Puroi

LCR

Sdr diareic implicarea unui fenotip patogen de E

coli, in absenta izolarii unui patogen
Diagn fenotipului diareigen - metode
Moleculare
Fenotipice

Klebsiella, Enterobacter, Serratia

Fermenteaza lactoza (Lac +)

Produc acetoina din glucoza (r Voges-Proskauer
poz.)
cultiva pe m cu citrat (m Simmons)
Specii
K pneumoniae (susp pneumoniae, subsp
ozenae, subsp rhinoscleromatis), K oxytoca
Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes
Serratia marcescens

Klebsiella

Fermenteaza lactoza
Produc acetoina din glucoza (r Voges-Proskauer
poz.)
Nu produce H2S
cultiva pe m cu citrat (m Simmons)

indol
Negativ K pneumoniae (susp pneumoniae,
subsp ozenae, subsp rhinoscleromatis),
Pozitiv K oxytoca

Klebsiella pneumoniae

prezenta in microbiota colonului; poate

coloniza mucoasa oro-faringiana
Factori de virulenta

Capsula
polizaharidica
(77
serotipuri);
serotipurile K1 si K2 mai virulente
Fenotip hipermucos (sinteza abundenta de
polizaharid capsular) asociat infectiilor
invazive; gena plasmidica rmp regleaza
expresia genei cps
LPS inhiba fixarea complementului,
stimuleaza eliberarea de citokine
Siderofori (aerobactin)
Fimbrii (pili)

Infectii (mai ales nosocomiale, asociate unor

investigatii invazive)
pulmonare
infectii ale plagilor si arsurilor,
Bacteriemii, septicemii
urinare (serotip K2)
abcese hepatice (serotip K1)
Peritonite la pacienti cu ascita (dupa E coli)
Endoftalmita (secundar septicemiilor)
Meningita nosocomiala (postoperatorie)
Identificare
Microscopie
Cultivare pe m simple sau slab selective
colonii mari, mucoide, cu tendinta la confluare
Biochimica preliminara m multitest (TSI, MILF)
-Biochimica definitiva- set largit(20 teste)sau
sisteme microtest

Tratament

Natural rezistente la aminopeniciline

Sensibilitate variabila; tulpinile nosocomiale
frecvent multirezistente, prin producerea

ESBL
(rezistenta
la
majoritatea
betalactaminelor,
inclusiv
ureidopeniciline,
cefalosporine, aztreonam)
carbapenemaze

Multirezistenta la antibiotice: ESKAPE

Enterococcus faecium
Staphylococcus aureus
Klebsiella pneumoniae
Acinetobacter
Pseudomonas aeruginosa
Enterobacter

Enterobacter

Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes

Mobili
Fermenteaza Glu cu producerea unor cantitati mari
de gaz
Fermenteaza Lac
Nu produce indol, H2S, fenilalanin decarboxilaza
Doar
Enterobacter
aerogenes
produce
lizindecarboxilaza
Infectii similare K pneumoniae
Natural
rezistente
la
aminopeniciline,
cefalosporine gen I
Rezistenta variabila

Proteus
Proteus mirabilis, P. vulgaris

Componente ale microbiotei intestinale la om si

animale

Mobili,

Lactozo neg, produc H2S, fenilalanin-dezaminaza,

ureaza

Nu produc lizindecarboxilaza; P. vulgaris este

indol neg

Infectii urinare (ureaza alcalinizeaza urina,

favorizand precipitarea sarurilor si formarea
calculilor; pe suprafata calculilor persista
Proteus)

bacteriemii, infectii ale plagilor

Pe medii neselective crestere cu caracter

invaziv Tratament

Natural rezistente la polimixine si tetracicline

Sensibilitate variabila la alte Atb
Testarea sensibilitatii la Atb antibiograma
difuzimetrica