CALCULE TOXICOLOGICE.

EXPRIMAREA CONCENTRAIEI I DOZELOR

Cum s-a artat anterior, baza efectelor toxice este relaia doz-rspuns. ntr-o situaie clinic practic, doza nu este cunoscut aproape n nici un caz. Un animal bolnav ce prezint semne clinice de intoxicaie, este posibil s fi fost expus la o cantitate de toxic cunoscut sau suspectat aflat probabil ntr-o concentraie mai mic de 100% ntr-un produs comercial sau ntr-o surs natural. Proprietarul animalului poate s fi observat expunerea, cum ar fi consumul de ctre animal a unor tablete sau a unui posibil toxic, cum ar fi ciocolata. Uneori, animalele cu semne clinice de intoxicaie subacut sau cronic sunt suspectate de consumul unor toxice gsite n hran. Analiza alimentelor poate arta o concentraie n ppm (pri per milion), mg/kg, g/g sau %, concentraia toxicului din hran trebuind apoi s fie raportat la o toxicitate cunoscut exprimat n mg/kg greutate vie. n toate aceste circumstane, clinicianul veterinar trebuie, mai nti, s coreleze cantitatea de toxic probabil cu o doz raportat la greutatea corporal i apoi s decid dac este necesar terapia de detoxifiere sau tratamentul antidotic. Dac doza este mic, observarea atent a animalului, fr tratament, poate fi o opinie valid. De altfel, clinicianul trebuie s fac investigaii privind doza probabil, ca parte a procesului de luare a deciziilor, pentru a institui tratamentul sau doar punerea sub observaie a animalului. Abilitatea de a transforma corect valorile concentraiei i dozei i de a transforma diferitele exprimri ale expunerii, este esenial n practica medical i este la fel de important n toxicologia clinic. Principiile dozrii i calculelor practicate n farmacologie i terapeutic sunt asemntoare cu cele folosite n toxicologie. De o importan aparte n toxicologie, este transformarea diferitelor exprimri ale concentraiei, cum sunt cele stabilite n tabele i cele obinute prin analize de laborator. Toxicologul este, apoi, provocat s coreleze nivelul contaminrii alimentelor cu semnele clinice observate ntr-o intoxicaie suspectat. Urmtoarele exemple au scopul de a clarifica cteva dintre aceste calcule i de a arta cum sunt acestea folosite n toxicologia clinic. Exprimarea concentraiei i dozelor n toxicologia veterinar Proporia n care se gsete un agent toxic n hran, ap, momeli i soluii este, deseori, exprimat ca un raport greutate/greutate (ex. g/t, mg/kg, g/g), ca un raport greutate/volum (ex. mg/ml, mg/dl, mg/l) sau ca o proporie a toxicului din mediul n care este coninut, cum ar fi %, pri per milion (ppm), pri per miliard (part per billion ppb) i pri per trilion (ppt). Pentru o evaluare toxicologic corect, trebuie nelese relaiile dintre aceste exprimri. Relaiile i echivalenele exprimrilor obinuite ale concentraiei, folositoare n calculele i interpretarea toxicologiei veterinare, sunt prezentate n tabelul 3.1. Tabelul 3.1. Corelaiile exprimrilor uzuale cu valorile lor toxicologice echivalente Exprimare sau msuri
1 ppm 1 ppm 1 ppm

Valoare echivalent
1mg/kg 1 g/g 0,0001%

1 ppm 1 ppm 1 ppb 1 ppb 1% 1 mg/dl 1 uncie 1 livr 1 kg 1 litru 1 galon 1 linguri 1 lingur 1 ceac 1 quart

1000 ppb 1000000 ppt 0,000001% 1 ng/g 10000 ppm 10 ppm sau 10 mg/l 28,35 g 453,6 g 2,205 livre 0,908 quarts 3,785 litri 5 ml 15 ml 8 uncii sau 227 ml 32 uncii sau 946 ml

Clinicianul se poate orienta fie dup datele legate de toxicitate exprimate n mg/kg greutate vie, fie dup un tabel sau dup rezultatele unor analize de laborator care exprim concentraia toxicului n hran, ap sau momeli, ca proporii sau raport greutate/greutate. Stabilirea corect a riscului toxicologic depinde de abilitatea clinicianului de a transforma diferitele exprimri toxicologice ntr-un numitor comun echivalent. O situaie clinic obinuit este reprezentat de necesitatea transformrii concentraiei toxicului n hran sau momeal n valoarea toxicitii de baz raportat la greutatea corporal. Urmtoarele probleme clinice ilustreaz acest calcul.
Problema clinic 1 Dac doza toxic de colecalciferol (raticid) este de 2 mg/kg greutate vie, iar concentraia acestuia n momeal este de 0,075%, poate fi toxic o momeal n greutate de 2 uncii pentru un cine de 35 de livre, care consum toat momeala o singur dat? Soluie: Pentru a evalua acest risc, trebuie s se cunoasc sau s se presupun urmtoarele: Cantitatea de hran sau momeal consumat Greutatea animalului Concentraia toxicului n hran sau momeal n acest caz, mai nti se transform cifrele, pe ct este posibil, n sistemul metric: Cine de 35 livre/(2,2 livre/kg) = 15,9 kg 0,075% reprezint 750 mg colecalciferol/ kg sau 0,75 mg colecalciferol/g de momeal 2 uncii de momeal x 28,35 g/uncie = 56,7 g momeal Deci, cantitatea total de colecalciferol consumat este exprimat astfel: 56,7 g momeal x (0,75 mg colecalciferol/g momeal) = 42,5 mg colecalciferol consumat

42,5 mg colecalciferol 2,67 mg/kg cine de 15,9 Kg

Din calcule reiese c expunerea la aceast doz de colecalciferol poate determina un risc crescut de apariie a intoxicaiei. Dac se cunoate sau se presupune concentraia de vitamina D dintr-o hran complet pentru animale de companie, ar putea fi nevoie s se calculeze potenialul de producere a intoxicaiei prin contaminarea hranei.
Problema clinic 2 Cotinund exemplul cu momeala cu un alt scenariu, s presupunem c vitamina D, la o doz de 2000 UI/kg/zi pentru 1-2 sptmni, poate determina o intoxicaie acut la cini. Dac o hran pentru cini a fost completat accidental cu o concentraie de 1000 Ui/livr, poate determina intoxicaia consumul acestei hrane, pe termen lung? Soluie:

n acest caz, informaiile necesare sunt extinse de la problema 1, deoarece noi nu cunoatem cantitatea de material contaminat consumat. Din cunotinele actuale: cantitatea de hran consumat de un cine de 35 de livre este de 2,5% din greutatea corporal Reamintim din problema 1 c un cine de 35 de livre are 15,9 kg: 15,9 kg x 0,025 = 0,3975 kg (cantitatea de hran ingerat ntr-o zi) Vitamina D n hran n concentraie de 1000 UI/livr: 1000 UI/livr x 2,2 livre/kg = 2200 UI/kg de hran

Cantitatea total zilnic de vitamina D = 0,3975 kg/zi x (2200 UI/kg de hran) = 874,5 UI/zi Doza pentru un cine de 15,9 kg 874,5 UI/zi 55 UI/kg/zi 15,9 kg

n acest exemplu clinic, doza zilnic de 55 UI/kg greutate vie, este de aproximativ dou ori mai mare dect valoarea recomandat, dar mult mai sczut dect doza toxic cunoscut de 2000 UI/kg. Substanele toxice pentru animalele mici pot s fie exprimate, uneori, n diferite uniti de msur n snge sau alte lichide ale corpului. Cele mai obinuite sunt pri per milion (ppm), miligrame per decilitri (mg/dl) i miliechivaleni per litru (mEq/l). Dac rezultatele analizelor de laborator sunt date n una dintre aceste uniti de msur, dar informaiile despre doza toxic sunt la dispoziia clinicianului n alte uniti de msur, abilitatea de le transforma n uniti de msur comparabile este esenial pentru interpretare. Problema clinic 3 ilustreaz aceast transformare. Problema clinic 3 ilustreaz diferena dintre ppm i mg/dl (1 mg/dl = 10 ppm) i arat c pentru transformarea din mg/dl n mEq/l trebuie s se cunoasc valena i greutatea atomic a substanelor toxice respective sau metalelor. Intoxicaiile, probleme clinice dificile, pot s fie rezolvate, cel mai bine, prin respectarea principiilor de baz i calculelor relevante pentru evaluarea unei expuneri probabile la toxice i factorii ce pot influena rspunsul organismelor la acestea. Adugnd la acestea cunotinele despre efectele sistemice i medicale ale toxicelor asupra organismelor, precum i principiile terapiei antidotice i de detoxifiere ar trebui s se obin rezultatele cele mai bune posibile n terapia intoxicaiilor la animale.
Problema clinic 3 La un cine cu semne clinice nervoase, suspectat de intoxicaie cu sare, rezultatele analizelor toxicologice de laborator indic o valoare a sodiului seric de 3600 ppm. Valorile normale cunoscute n practic sunt 135-145 mEq/l. Analizele de laborator sunt un indicator al hipernatremiei ce sugereaz intoxicaia cu sare? Soluie: n acest caz, va fi necesar transformarea unitilor de msur n care sunt exprimate rezultatele analizelor de laborator n mEq/l pentru interpretare. Exist o formul de transformare a mg/dl n mEq/l. Pentru a folosi aceast formul, se procedeaz astfel: Se transform ppm n mg/dl Dac 1 ppm = 1 mg/l i 1 mg/dl = 10 mg/l, atunci mprind ppm la 10 = mg/dl (3600 ppm : 10 = 360 mg/dl)

mEq/l mg/dl x valena x 10 360 x 1 x 10 156,5 mEq/l greutatea atomic 23

Calcularea concentraiei i estimarea dozajului sunt eseniale pentru interpretarea datelor toxicologice care rezult din analizele de laborator sau din estimarea expunerii probabile. Toxicologul calculeaz dozajul substanei bazndu-se pe estimarea greutii corporale i a cantitii de alimente consumate n mod obinuit de animale (tabelul 3.2). Cantitatea ingerat este doar estimat, iar aceasta variaz mult n funcie de densitatea nutrientului, vrsta i greutatea animalului, efortul fizic, lactaie i temperatura ambiental. O problema obinuit n toxicologia clinic o reprezint greutatea de a evalua efectul (rspunsul) n corelaie cu doza. Calculele toxicologice necesit familiarizarea cu sistemul metric. Unitile metrice folosite i abrevierile utilizate n calculele toxicologice sunt prezentate n tabelul 3.3.

Estimarea expunerii la toxic a animalelor pe baza greutii corporale, cnd concentraiile n furaje sau ap sunt cunoscute. Cnd datele privind toxicitatea pentru animale sunt cunoscute, acestea sunt oferite adesea ca doz/kg corp, dar estimarea expunerii la toxicele din alimente sau furaje este prezentat sub form de concentraie n furaje. Acestea nu sunt valori echivalente, iar concentraiile din furaje i ap trebuie interpretate prin proporia n care acestea contribuie la dozaj. Tabelul 3.2. Consumul estimativ de hran pentru animale*
Specia Pisic Tineret Adult Cine Pui Tineret Adult Vaci de carne Vaci de un an (350 kg) n perioada de ngrare (600 kg) Vaci de lapte n perioada de gestaie n perioada de lactaie Ovine Miei (30 kg) Oi adulte nelactante Oi adulte n lactaie Consumul zilnic de hran uscat
(procent din greutatea corporal)

8,0 4,0 8,0 6,0 3,0 2,5 1,5 1,8 2,0 3,0 4,0 2,5 4,0

Tabelul 3.2.
(continuare)

Consumul estimativ de hran pentru animale*

Specia Suine Purcei sugari (15 kg) Purcei n perioada de ngrare (70 kg) Scroafe n lactaie Ecvine Mnz Adult Consumul zilnic de hran uscat
(procent din greutatea corporal)

7,0 4,5 3,0 4,0 3,0 2,0

* Consumul de hran este doar estimat, cantitatea putnd varia n limite largi n funcie de concentraia nutrientului, vrsta i greutatea animalului, micare, gestaie, lactaie i temperatura mediului ambiant.

Tabelul 3.3. Unitile metrice folosite n calculele toxicologice Unitatea Abreviere Echivalent (g)

Megagram Kilogram Miligram Microgram Nanogram Picogram Femtogram

M kg mg g ng pg fg

1 x 106 1 x 103 1 x 10-3 1 x 10-6 1 x 10-9 1 x 10-12 1 x 10-15

Eseniale pentru calcule sunt: Concentraia de substan chimic din furaj; Greutatea animalului expus la toxic (alternativ, calculele pot fi fcute pe baza unui kilogram de greutate corporal); Proporia din greutatea corporal a animalului corespunztoare furajului, apei sau momelii consumate, care trebuie determinat prin msurare sau estimare consultnd tabelele standard (tabelul 1.3.). De exemplu, dac un furaj care conine 100 ppm dintr-o substan chimic toxic este administrat la animale care n mod obinuit consum zilnic furaje n cantitate de 3% din greutatea lor corporal i dac fiecare kilogram de greutate animal necesit 3% ca aliment, atunci:
1kg x 0,03 = 0,03 kg de alimente zilnic

Dac alimentele conin 100 ppm (mg/kg) de substan chimic i sunt necesare 0,03 kg de alimente, nseamn c se inger 3 mg de substan chimic / kg greutate corporal. Aceast relaie poate fi exprimat prin formula:
mg substan / kg greutate corporal = nivelul substanei toxice n furaj (ppm) x kg furaj ingerat greutate corporal (kg)

Ajustnd aceast formul, este posibil determinarea cantitii de toxic din furaj care va produce intoxicaia.
nivelul substanei toxice n furaj (ppm)= mg substan / kg greutate corporal x greutate corporal (kg) furaj ingerat (kg)

Dac procentul din greutatea corporal corespunztoare furajului consumat este cunoscut, atunci formula poate fi simplificat astfel:
mg substan / kg greutate corporal nivelul substanei toxice n furaj (ppm)= procent din greutatea corporal corespunztor furajului consumat

De exemplu:
ppm = 3 mg / kg greutate corporal 0,03 = 100 ppm

De reinut c termenul procentaj este exprimat ca fracie n loc sa fie exprimat ca numr ntreg (3%). Dup cum s-a artat, calculele corecte necesit estimri rezonabile ale cantitii de hran ingerat. Cantitatea de hran ingerat variaz n funcie de specie, talia i vrsta animalelor, precum i n funcie de efort, temperatura ambiental sau stri fiziologice (lactaia, gestaia etc.). Toxicitatea poate varia dac ntreaga cantitate de hran sau ap este ingerat rapid, ntrun singur tain, fa de cazul n care ar fi consumat fracionat pe toat durata zilei. Ingerarea fracionat permite realizarea detoxifierii metabolice i a excreiei, dar n unele cazuri crete tolerana fa de toxice, iar n altele toxicele se pot acumula n organism, la nivelul esuturilor pentru care au afinitate.

Cantitatea medie de ap ingerat de diferitele specii este de aproximativ de 2 ori mai mare dect cea de hran consumat. Consumul de ap variaz mult n funcie de condiiile meteorologice, efort, starea de sntate, palatabilitate etc. Estimarea rolului apei n expunerea la toxic trebuie s aib n vedere aceti factori fiziologici i de mediu. Estimarea dozajului n cazul expunerilor prin consumul de furaje stropite cu diverse substane toxice. Consumarea furajelor provenite de pe puni cultivate sau stropite cu diverse substane chimice, n funcie de remanena acestora, poate conduce deseori la apariia de intoxicaii. Prelevarea de probe i analiza acestora pot oferi o estimare a expunerii la toxic, dar uneori o estimare imediat, la faa locului, poate fi util pentru interpretarea probabilitii inducerii intoxicaiei. Informaiile utilizate pentru estimarea cantitii de substan chimic ingerat odat cu furajele stropite sunt reprezentate de: Cantitatea maxim de furaj consumat de animale n mod obinuit; Cantitatea de substan chimic aplicat per hectar; Cantitatea de furaj obinut pe unitatea de teren stropit. Contribuia unui kilogram de substan chimic (sc) per hectar la raia animalului ce consum furaje tratate poate fi calculat dup cum urmeaz. Dac un hectar de teren are 10.000 m i un kilogram are 1.000 de grame atunci
1000000 mg 10000 m2 = 100 mg sc / m2

Considernd c la un hectar se obin 2 tone de furaj, atunci

2 tone x 1000 kg/ton = 2000 kg / 10000 m2 = 0,2 kg/m2

Rezult 200 g furaj/m. Deci,

1000 g/kg 200 g/m2 x 100 mg sc/m2 = 500 mg sc/kg furaj

Astfel, n condiiile specificate, 1 kg de substan chimic pe hectar cultivat, de pe care se obin 2 tone de furaj, conine 500 ppm de substan chimic n furaj. Pentru obinerea cantitii de substan chimic n mg / greutate corporal se folosete urmtoarea modalitate de calcul:
Concentraia de substan chimic n furaj (ppm) x procentul din greutatea corporal corespunztor furajului consumat respectiv: 500 mg / kg x 0,03 = 15 mg / kg greutate corporal

Deci, n condiiile descrise i considernd c toat cantitatea de substan chimic stropit rmne pe furaj nefiind pierdut prin descompunere sau metabolizare, animalele care puneaz pe terenuri tratate vor primi 15 mg / kg greutate corporal sc pentru fiecare kilogram de sc aplicat pe teren.