Biochimie i tehnici de laborator

Prof. Dr. Gheorghe Coman

Conf. dr. Mihaela Badea

As. Drd. Nicusor Bigiu

Continutul disciplinei
I. Biochimie generala
Introducere in studiul biochimiei. Apa Zaharide (Monozaharide, Polizaharide) Oligozaharide,

Aminoacizi. Peptide. Proteine.

Lipide si membrane Enzime Acizi nucleici. Vitamine. Hormoni

Continutul disciplinei
II. Tehnici de laborator
Tehnici spectrometrice Tehnici biocromatografice Electroforeza si electroforeza capilara

Tehnici imunochimice
Tehnici aplicate de biologia moleculara Sisteme Biosenzori bioanalitice miniaturizate.

Introducere in studiul biochimiei

Apa. Sisteme apoase.

Chimia biologic sau biochimia

tiina care studiaz materia vie i fenomenele specifice

organizarea molecular,
compoziia

constituia chimic
corelaiile biomoleculelor componente i al proceselor de transformare (degradare i biosintez) a acestora, prin care se genereaz i se utilizeaz energia necesar manifestrilor vitale.

Metabolism celular
Reaciile organice sistem dinamic, continuu i interdependent la nivelul celulei vii.

au loc ntotdeauna n ap (ca solvent),

sunt catalizate de enzime se desfoar foarte rapid, dar controlat, temperaturi apropiate de cea a camerei.

Suma tuturor acestor reacii reprezint metabolismul celular i asigur pe de o parte energia necesar funciilor vitale ct i componentele celulare proprii necesare pentru dezvoltare i regenerare.

Biosisteme Biomolecule Bioelemente

Legturi chimice
Legturi ionice (electrostatice)

formarea ionilor pozitivi si negativi

atracia electrostatic
nu exist diferene de electronegativitate exist diferene de electronegativitate ntre nemetale de tip donor acceptor de perechi de electroni

Legturi covalente nepolare

Legturi covalente polare

Legturi covalent coordinative

Legturile de hidrogen
interacii necovalente care se exercit

intramolecular sau intermolecular

natur electrostatic -> sarcini electrice

pariale de semn opus

for de tip coulombian

stare intermediar n transferul unui proton

de la un acid la o baz

Legturile van der Waals

se manifest ntre doi atomi aflai la

distane cuprinse ntre (3-4)

sunt mai slabe (1Kcal/mol) mai puin specifice distribuia neuniform n timp, a sarcinii electrice tranzitorie) din jurul atomilor n (asimetria distribuia asimetrie

electronilor din jurul atomilor din apropiere.

Interaciile hidrofobe
tendina de grupare a moleculelor nepolare n prezena apei. se materializeaz prin eliminarea apei din sistem sunt nestoiechiometrice Exemple

constituirea membranelor interacii specifice enzim-substrat sau antigen-anticorp.

Apa. Sisteme apoase

Rolul apei

structural;

mediu lichid;
stabilizator al mediului biologic; generator de ioni hidroniu i hidroxid necesari pentru realizarea proceselor de tamponare, de cataliz enzimatic i hidroliz; efector direct al reaciilor de hidratare, hidroliz, oxidare; mediu de vehiculare a diferitelor substane termoregulator.

Solubilitatea n ap
Compui ionici

disociere hidratarea ionilor legturi de hidrogen cu moleculele apei interacii hidrofobe micele (acizi nucleici, lipide, proteine)

Compui neionici, dar polari

Compui nepolari, ce posed i grupri polare

HOH

hidrofil (lipofob) hidrofob (lipofil)

HOH

Ionizarea apei
acid + e- -> baza Bronsted - schimb protoni: acid - H+ -> baza
Lewis - schimb electroni:

caracter acid

H2O H2O + A
-

H + HO

HA + HO H3O
+ +

caracter bazic H2O + H

H2O + HB

H3O + B

Molecula apei prezint caracter amfoter

Sisteme apoase
apa nedisociat - concentraie molar mare i constant sisteme apoase conjugate acid-baz
HA + H2O
acid baza

H3O+ + Aacid conjugat baza conjugata

sisteme tampon
mecanisme
adaugare acid adaugare baza

A +H
+

+ -

HA 2 H2O

H3O + HO

Relatia Henderson-Hasselbach

A +H

HA

[A - ] [H ] K [HA]

[baza] pH pK lg [acid conjugat]

Punct de tamponare maxim

[baz] = [acid conjugat] pH = pK

Titrarea unui acid slab cu o baz tare

CH3COOH + ( Na+ + HO- ) CH3COO- + Na+ + H2O

pH E 7 A 0 0,5 1 Eq HO- / Eq H + C ( ) D B