Utilizarea microorganismelor in bioremedierea solurilor poluate cu

petrol
Factorul principal care transform, aproape total sau ireversibil, resursele naturale
regenerabile n resurse neregenerabile este poluarea.
Atunci cnd una dintre resursele regenerabile este grav afectat de ctre poluare, se poate
considera c s-a produs degradarea mediului nconjurtor, avnd consecine pe termen lung,
greu sau imposibil de evaluat i corectat. u ncape ndoial , c solul este capitalul cel mai
preios de care omul dispune pentru satisfacerea nevoilor i ambiiilor sale. !a urma urmelor , cel
puin pn la inventarea fotosinte"ei artificiale , cu toii depindem de stratul subire i roditor de
la suprafaa #amnatului, de unde se e$trag majoritatea resurselor necesare vieii.%nul din marile
parado$uri este c omul tinde s-i periclite"e i"vorul vieii din netiin , neglijen , lcomie ,
sau din alte cau"e. Aa se face c n timp ce te&nicile moderne i ngduie s introduc n
circuitul productiv milioane de &ectare de teren , ce pn ieri erau socotite inerte pe vecie , n
paralel, alte milioane de &ectare fertile devin improprii cultivrii , datorit tot aciunii omului. 'e
cnd omul a nceput s acione"e iraional mpotriva naturii, suprafaa terenurilor supuse
deertificarii a crescut cu un miliard de &ectare i acest proces avansea" ntr-un ritm accelerat .
(n fiecare an , "eci de milioane de &ectare de soluri productive sunt ) devorate de drumuri, de
u"ine i de orae , de &ale de deeuri i re"iduuri re"ultate din activitatea industrial , victime ale
luptei inegale dintre iarb verde i asfalt.
#rincipalele surse de poluare sunt* activitatea e$tractiva, prelucrarea i transportul
ieiului i produselor petroliere, poluantii re"ultai de la aceste surse afectnd att aerul , apele
de suprafa i subterane , vegetaia i n special solul. Fenomenele de poluare determin
modificri importante la nivelul fitosferei i "oosferei, precum i al microorganismelor, ducnd
la dispariia unui mare numr de specii, determinnd scderea fertilitii solului, cea mai
important proprietate a acestuia care permite susinerea vieii vegetale i animale i implicit
omului.
(n scopul satisfacerii cerinelor fundamentale ale conceptului de de"voltare durabil , i
anume , reali"area, la scar planetar , a unui proces de de"voltare economic , social i
+
politic , care s menin i, eventual , s de"volte resursele de evoluie ale planetei i ale speciei
umane, s-au propus trei obiective pragmatice*
,educerea polurii generate de activitatea speciei umane n procesul de evoluie , aa
cum se desfoar el n pre"ent-
,econstructia ecologic , respectiv reali"area unui ec&ilibru de stabilitate mare pentru
mediul nconjurtor.
Aciunea de reducere a poluarii, ba"at n e$clusivitate pe nelegerea tiinific a
mecanismelor acestui fenomen , este o aciune de durat prea mare n raport cu interesele
oamenilor afectai de efectele negative ale acesteia..ste necesar o aciune de reducere a
polurii care s se desfoare n timp real, de care s beneficice"e i oamenii care )acum
sunt victimile ei. 'e aceea, e$ist o preocupare permanenta de cunoatere a comportrii
i efectelor substanelor c&imice introduse n sol asupra ecosistemului, precum i a
degradrii naturale a acestora sau prin diferite te&nici .
(n "onele de e$tracie a petrolului, fenomenele de poluare cu re"iduuri de petrol i cu ape
u"ate, uneori srate, sunt destul de e$tinse , impactul asupra ecosistemelor depind intensitatea
altor aciuni antropice. #etrolul modific radical proprietile solului , att fi"ice i c&imice ct i
cele biologice . Acesta formea" o pelicul impermeabil la suprafaa solului care mpiedic
circulaia apei n sol i sc&imbul de ga"e dintre sol i atmosfer , producnd a$fisierea rdcinilor
i favori"nd manifestarea procesului de reducere . #e msura ce solul devine mai anaerob scade
numrul i activitatea metabolic a bacteriilor . #etrolul , fiind bogat n carbon organic / 012
&idrocarburi 3 , crete raportul 45 n sol, influennd negativ activitatea microbiologica i
nutriia plantelor cu a"ot. (n "onele de e$tracie a petrolului problema polurii solului datorit
acestei activiti devine i mai complicat deoarece , concomitent cu poluarea cu re"iduuri
petroliere, are loc i o poluare cu ape u"ate, srate, capabile s provoace i o salini"are puternic
a solurilor poluate cu petrol. (n condiiile unei astfel de poluri solul devine practic neproductiv,
fiind scos complet din circuitul economic.
.liminnd efectele polurii i refcnd starea iniial a ecosistemelor se pune n aplicare
conceptual de de"voltare durabil, care, n domeniul tiinei solului, repre"int optimi"area
funciilor solului generatoare de fertilitate. Avnd n vedere c poluarea cu iei, produse i
re"iduuri petroliere afectea" nsi capacitatea solurilor de a susine viaa , elaborarea unor
metodologii de remediere se impun ca o necesitate.
6
7e&nologiile de depoluare a solului, constau n primul rnd , n tratamente fi"ice i c&imice
asupra profilului de sol n scopul favori"arii i accelerrii proceselor de biodegradare a
re"iduurilor petroliere deversate. Acestea trebuie s includ, deci, ntregul ansamblu de
tratamente necesare asigurrii condiiilor favorabile de"voltrii intensive a acelor populaii de
microorganisme din sol , cu abiliti metabolice n degradarea &idrocarburilor din iei, respectiv
asigurarea n sol a unei afnri ct mai profunde , pentru ca microorganismele / predominant
aerobe3 s fie adecvat aprovi"ionate cu o$igen , precum i a unei fertili"ri corespun"toare cu
ngrminte organice i minerale , mai ales cu a"ot, pentru ca, prin metabolismul microbian s
poat fi consumate i eliminate re"ervele e$cesive de carbon din sol reali"ate prin poluarea cu
&idrocarburi din iei. 'e altfel , problema refacerii terenurilor cu soluri poluate cu compui
organici provenii din iei poate fi re"olvat cu succes numai prin studierea detaliat a
mecanismului pierderii fertilitii, a caracteristicilor cantitative a unora sau altora dintre
sc&imburile care se petrec n desfurarea proceselor din sol.
4ele mai importante proprieti ale petrolului, din punctual de vedere al interaciunii cu
solul sunt*
starea de agregare 8 amestec de compui lic&i"i n care sunt
di"olvati compui soli"i i ga"oi-
caracterul &idrofob 8 respinge moleculele de ap , este nemiscibil cu
apa , formea" o pelicul superficial-
continutul ridicat de carbon organic / pn la 19 2 3
raportul 45 foarte mare.
7oate aceste proprieti determin interaciuni specifice ale re"iduurilor de petrol cu solul
producnd modificarea caracteristicilor fi"ice , c&imice i biologice ale solului. :olurile poluate
cu petrol pre"int la suprafaa o pelicul impermeabil care mpiedic circulaia apei n sol i
sc&imburile de ga"e ntre sol i atmosfer, producnd asfi$ierea rdcinilor i favori"nd
manifestarea proceselor de reducere. #etrolul fiind bogat n carbon organic / conine 01 2
&idrocarburi 3 crete raportul 45 n sol influennd negativ activitatea microbiologica i nutriia
cu a"ot a plantelor. .fectul imediat al polurii solului cu petrol se reflect n nsi perturbarea
activitii microbilogice din sol. Astfel, n primele sptmni dup deversare, n funcie de
intensitatea polurii , are loc reducerea activitii microbiologice din sol, situaie confirmat de
anali"ele privind respiraia solului / degajare de dio$id de carbon 3 i activitatea en"imatica
;
/ de&idrogena"ica3. Apoi n condiii optime de temperatur se manifest o tendin de revenire la
starea microbiologica normal a solului, deoarece numeroase bacterii, drojdii, microfungi i c&iar
alge sunt capabile s degrade"e &idrocaburile.
#rin urmare , biodegradarea apare ca un mijloc operaional pentru combaterea polurii cu
petrol i de aceea se consider c strategia depoluarii solului afectat de contaminarea cu
re"iduuri petroliere const n favori"area mijloacelor natrurale de eliminare a acestora.
Bioremedierea cu ajutorul microorganismelor
(n cadrul metodelor biologice de depoluare a solului aplicate n ntreaga lume cele mai
e$perimentate sunt fitoremedierea/cu ajutorul plantelor3,fitotransformarea, bioremedierea
ri"osferica, fitostabili"area, fitoe$tractia, ri"ofiltrarea si nu in ultimul rand bioremedierea cu
ajutorul microorganismelor bioremedierea. Activitatea acestora de a folosi &idrocarburile din
iei drept surs de carbon i energie, este considerat cea mai eficient alternativa, in special,
datorit faptului c nu implic perturbarea sever i ireversibil a structurii i implicit nsuirile
pedogenetice ale solului afectat i costului relativ sc"ut. (n cadrul acestui proces comple$, cnd
biodegradarea ieiului este complet, acesta este supus transformrilor metabolice de ctre
microorganisme pn la obinerea de 4<
6
si =
6
<.
>iodegradarea &idrocarburilor din iei este un proces foarte complicat, din cau"a
diversitii grupelor de compui din compo"iia acestuia, cu structuri c&imice i comple$itate
molecular diferite* alcani/metan , etan, propan3, copusi aromatici, parafine, rasini, asfaltene. (n
iei, compuii aromatici aparin la dou clase* &idrocarburi monoaromatice* / >7.?* ben"en,
toluen, etilben"en, $ilen3 i &idrocarburi aromatice policiclice / #A=s- naftalen, fenantren,
antracen, ben"o@aApBren3 ambele fiind to$ice.
umeroase microrganisme &eterotrofe din sol , att bacterii ct i fungi, sunt capabile s
utili"e"e &idrocarburile din iei ca surs de energie pentru creterea i de"voltarea celular.
Astfel , &idrocarburile aromatice , c&iar i cele cu solubilitate redus, cum sunt * antracenul,
p&enantrenul, pBrenul, +,6-ben"opBrenul, i crBsenul sunt descompuse microbiologic n sol. u
este nc foarte clar cunoscut modul n care aceste substane sinteti"ate n laborator sau produse
industrial pot fi modificate i c&iar minerali"ate de ctre comunitile naturale de
C
microorganisme. :unt totui cunoscute cteva procese bioc&imice care pot avea loc n
biodegradare, prine care * &idroli"a, &idro$ilarea, o$idarea, de&alogenarea, demetilarea sau alte
de"alc&ilari, metilarea , de"aminarea, clivarea legturilor esterice, polimeri"area, conjugarea,
strategia folosit de ctre microorganisme fiind funcie de natura c&imic a poluantului. 4el mai
bine descifrate sunt*
hidroliza- unul dintre cele mai comune procese prin care microorganismele inactivea"
substanele to$ice poluante
hidroxilarea- adiia unui &idro$il /<=3 la o molecul aromatic sau alifatic prin care
aceasta este transformat ntr-o substan mai puin to$ic. Astfel, compuii aromatici
sunt degradai prin &idro$ilare i o$igenare, iar cei alifatici prin D-o$idare
dehalogenarea. umeroase re"iduuri industriale conin in molecula lor clor sau ali
&alogeni, a cror nlturare le transform din substane to$ice n substane inofensive
dezalchilarea. Foarte multe pesticide conin n molecula lor radicali alc&il, a cror
nlturare le face s piard activitatea pesticid. .rbicidul diuron devine complet neto$ic
prin nlturarea de ctre microorganisme a radicalului -4=
;
.
metilarea. Adiia gruparii metil 4=
;
poate inactiva fenolii.
4apacitatea microorganismelor de a recicla prin procese degradative substanele organice
sintetice , dei foarte mare, este totui limitat de recalcitranta molecular a unora dintre aceti
compui. 4ele mai importante ci de optimi"are a condiiilor biodegradrii constau n asigurarea
unor condiii de mediu favori"ate pentru creterea i multiplicarea microorganismelor
degradative, i anume * continuturi adecvate de a"ot, fosfor, fier potasiu, calciu, magne"iu, sulf i
microelemente * cupru, "inc, molibden, cobalt, fier, mangan, precum i umiditate, reacie i
temperatur optime.7oi aceti parametri e$ercit o influena direct asupra ratei de cretere,
numrului i activitii fi"iologice a populaiilor de microorganisme , iar optimi"area lor este
principalul mecanism de stimulare a biodegradrii substanelor $enobiotice poluante.
4ondiiile care favori"ea", precum i principalii factori implicai in bioremediere
sunt/ dup =enis, +00E3-
Factorii implicai n procesul de bioremediere
#re"enta agenilor degradrii
Abundenta iniial a agenilor degradrii
9
Ficroorganismele asociate
4apacitatea de multiplicare
ivelul concentraiei poluantului/poluantilor3
:olubilitatea poluantului
Adsorbtia poluantului de ctre microorganisme
,ecalcitranta poluantului
#re"enta altor ageni to$ici
#re"enta nutrientilor
#erioada de contaminare/ aclimati"area3
#re"enta acceptorilor de electroni
4onditiile fi"ice- umiditatea, temperatura, p&.
>iote&nologiile de depoluare a solurilor sunt clasificate n* aa numitele te&nologii in
situ, care se aplic direct teritoriului poluant i te&nologiile e$ situ, care se ba"ea" pe
ndeprtarea solului contaminat i transportarea lui la instalaii speciale de tratare /de obicei
reactoare3. #entru ca oricare te&nologie de bioremediere s poat fi aplicat n vederea nlturrii
unui poluant este necesar, n primul rnd, s se demonstre"e c substana respectiv / n ca"ul
ieiului, amestecul de substane3 este biodegradabil, iar n urma procesului de bioremediere nu
vor aprea efecte ecologice secundare nedorite.
Avantajele metodei de bioremediere sunt conectate cu faptul c acesta nu presupune
sc&imbarea drastic a structurii solului i a ec&ilibrului ecologic stabil. 'e asemenea, dup
ndeprtarea poluantului, activitatea normal a comunitilor de microorganisme caracteristice
/ nu numai acelea cu abiliti degradative3 se restabilete rapid. (n plus , aceast te&nologie are
cel mai sc"ut cost.
'e"avantajele provin ndeosebi din timpul relativ ndelungat de desfurare al procesului
de degradare i dificultatea in controlul acestuia.
Ficroflora majoritii solurilor necontaminate include n mod natural bacterii
degradatoare de &idrocarburi, aceast comunitate microbiana fiind selectiv mbogit printr-o
ndelungat e$punere la iei. Fulte dintre aceste substane constituente ale ieiului sunt supuse
atacului microorganismelor, biotransformarea lor fiind facilitat de en"imele care asigur n mod
G
normal desfurarea metabolismului acestora. Hncarcartura de microorganisme a unui sol
necontaminat, n timpul diferitelor se"oane este n jur de +IG-+I1 bacterii5g sol uscat..
4ele mai comune grupuri din sol sunt ActinomBces, bacteriile din genurile #seudomonas
i Agrobacterium, i mai puin repre"entative cele din genurile* A"otobacter, ,&i"obium,
itrosomonas i itrobacter. Astfel, e$ist dou te&nologii de ba" abordate n bioremediere*
prima, numit ecologic, este ba"at pe activarea microflorei degradative e$istente n sol/ cel
mai adesea prin adiia de nutrienti3, iar cea de-a doua, pe inocularea cu microorganisme
selecionate n laborator datorit capacitilor degradative sporite, opiunea pentru fiecare dintre
ele fiind fcut n funcie de re"ultatele anali"elor efectuate. 'ac microflor degradativa este
pre"enta in cantiti adecvate sau poate fi activat ori mbogit in situ ntr-un timp relativ scurt,
nu este necesar inocularea, fiind preferata metoda ecologic. #e de alt parte, dac microflor
degradativ este absent sau nu poate fi stimulat, se recomand inocularea.
#entru orice strategie de bioremediere se optea", alegerea trebuie s fie precedat de
anali"e microbiologice, c&imice i fi"ice, n funcie de re"ultatele crora solul poluat va trebui s
fie amendat pn la reali"area condiiilor optime pentru microflor degradativa. < alt problem
privind natura microflorei degradative selctionate n vederea producerii de bioinoculanti este
dac trebuie folosit un singur microorganism sau un amestec de specii, un consoriu din culturi
mi$te obinute din probe contaminate. < posibilitate superioar, privete utili"area
microorgansimelor manipulate genetic, n special prin te&nica A'-ului recombinant, prin care
s-au obinut microorganisme cu abiliti speciale n biodegradarea anumitor compui organici
poluani.
< activitate prodigioas n ingineria genetic microbiana a fost depus pornind de la
tulpini de #seudomonas, fiecare capabil s degrade"e patru clase de &idrocarburi re"ultate din
fractionarea petrolului. :-a urmrit o cale original 8 i anume , combinarea n acelai
microorganism a unor plasmide purttoare de gene care controlea" procesul de degradare n
amestecuri petroliere comple$e. Astfel, s a reali"at celebrul microorganism modificat genetic
#seudomonas putida n care s-a introdus plasmidele coninnd informaia genetic necesar
sinte"ei unui comple$ en"imatic capabil s degrade"e patru clase de compui din iei. 'ei ar
putea fi utile n bioremedierea solurilor poluate, necunoaterea consecinelor eliberrii n mediu a
acestor microorganisme modificate genetic, nu a permis folosirea lor practic n acest scop.
E
7oate eforturile tiinei din ultimii ani au dovedit faptul c bioremedierea este o metod
superioar de depoluare a solurilor, eficient i mult mai ieftin comparativ cu metodele fi"ico-
c&imice cunoscute. .$ist numeroase rapoarte cu prvire la succesul bioremedierii unor medii
poluate in care s-a folosit ndeosebi metoda ecologic de depoluare, ba"at pe folosirea
fertili"antorilor sau5i a donorilor5acceptrilor de electroni n scopul stimulrii microflorei
degradative e$istente deja n acele situri. :-au nregistrat mari progrese n ceea ce privete
bioremedierea solurilor puternic poluate cu iei i descreterea nivelului to$icitii acestora, pn
la capabilitatea de a susine creterea plantelor.
#arametrii clasici de msurare n laborator a eficicacitatii unui proces de bioremediere
sunt numrtorile poluantilor cu microorganisme , determinarea ratei respiraiei microbiene
/ consumul de o$igen sau producerea de bio$id de carbon3 i monitori"area ratei dispariiei
poluantului din sol. Hnocularea solului poluat cu microorganisme selecionate este principala
verig te&nologic a bioremedierii in situ. Ameliorarea solurilor poluate prin te&nici de
bioremediere depinde n primul rnd de o ct mai buna nelegere a proceselor microbiologice
care au loc n acest sens, o cat mai bun caracteri"are a sitului i o determinare ct mai precis a
naturii i concentraiei poluantului. Ficroorganismele , forme de via aparent att de simple ,
sunt o componenta e$treme de bine organi"at, numai innd seam de grija i riguro"itatea cu
care-i controlea" propriul metabolism, sau transmiterea de informaii ntre celule prin
intermediul recent descoperitilor feromoni microbieni .
#rocesle informaionale, de comunicare att intracelulara, ct i ntre celulele comunitii
de microorganisme constituie esena vieii microbiene, iar nelegerea cailor i sensurilor acestor
interaciuni la nivelul creterii i activitii microorganismelor n sol devine cea mai important
direcie de cercetare pentru viitor. %n e$emplu de progres n acest sens s-a reali"at prin )
nsmnarea de informaii specifice n comunitatea microbiana prin mecanismul de transfer
ori"ontal al genelor. #rin ncorporarea de gene specifice coninute n plasmide ntr-unul sau mai
muli membri ai comunitii indigene, s-a reuit ndeprtarea unui poluant cu o rat mult
superioar cu ca"ul n care sistemul nu a fost inoculat.
>ioremedierea este un proces foarte eficient n refacerea solurilor poluate cu iei datorit
diversitii mari i abundenei genurilor bacteriene i fungice capabile s metaboli"e"e
&idrocarburile, care fac solul un mediu favorabil biodegradrii ieiului.
1
<biectivul final al oricrui proiect de remediere este acela de a reduce situl respectiv la
condiiile anterioare contaminrii, care includ mbuntirea general a nsuirilor solului,
reinstalarea vegetaiei sau obinerea, n ca"ul solurilor agricole de producii vegetale
satisfctoare.
BIBLIOGRAFIE
+. Ale$ander F.,>iodegradation and >ioremediation,Academic #ress,:an 'iego eJ KorL
>oston !ondon 7oLBo 7oronto,+00C.
6. 'umitru F., F.7oti,Moiculescu Anca-,ovena,-'econtaminarea solurilor poluate cu compui
organici,.dit.:itec&.4raiova,6II9.
;. Florea .,'umitru- F.,Ntiina :olului n ,omnia n secolul al??-lea,.dit.4artea pentru
7oi,>ucureti,6II6.
0