Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Titular:
ef de lucrri dr.biolog Malschi Dana,
Membru asociat al Academiei de tiine Agricole i Silvice
2014-2015
FIA DISCIPLINEI
1. Date despre program
1.1 Instituia de nvmnt superior
1.2 Facultatea
1.3 Departamentul
1.4 Domeniul de studii
Specializarea
2. Date despre disciplin
2.1 Denumirea disciplinei
2.2 Titularul activitilor de curs
2.3 Titularul activitilor de seminar
2.4 Anul de studiu
4 2.5 Semestrul
Competene
transversale
Competene
profesionale
7.1 Obiectivul
general al
disciplinei
7.2 Obiectivele
specifice
Tematica
8.1 Curs Tehnologii avansate de bioremediere (Teme)
CAP. I. Noiuni de baz privind bioremedierea ecosistemelor naturale i antropizate.
1. Obiectivele disciplinei. Introducere in problematica tehnologiilor de bioremediere. Biodegradarea poluanilor
sub aciunea microorganismelor. Bioremedierea cu ajutorul comunitilor microbiene.
2. Diagnosticul polurii. Norme de calitate a apelor, aerului i solurilor.
3. Indicatori biologici de poluare. Bioindicatori n mediul acvatic. Bioindicatori in mediul terestru.
Legislaia de mediu privind metodele de evaluare a polurii prin bioindicatori.
4. Bioremedierea prin depoluarea i biodegradarea substanelor organice.
CAP II. Tehnologii de bioremediere pentru depoluarea i restaurarea biotopurilor i ecosistemelor degradate.
5. Bioremedierea ecosistemelor acvatice (zone umede, ruri, lacuri, mri, estuare).
Biotehnologii de remediere a apelor poluate. Epurarea biologic a apelor. Bioremedierea apelor subterane,
contaminate i a apelor uzate cu ajutorul microorganismelor (bacterii, cianobacterii, fungi) i plantelor superioare.
6. Bioremedierea ecosistemelor terestre naturale i antropizate.
7. Bioremedierea solurilor contaminate prin biodegradarea compusilor organici sintetici.
8. Bioremedierea solurilor contaminate cu hidrocarburi. Principiile proceselor de bioremediere a solurilor
contaminate cu hidrocarburi. Factori care afecteaz biodegradarea solurilor poluate cu hidrocarburi
(Densitatea populatiilor microbiene. Reactia solului. Concentratia elementelor nutritive. Continutul de ap al
solului.).
9. Bioremedierea solurilor contaminate cu metale grele. Metode de bioreremediere a solurilor i substratelor
10. Reconstructia ecologic prin bioremediere in zona poluata istoric a exploataiei miniere Bloaja Biu,
Maramure.
11. Fitoextracia de metale grele din apele acide din zona Certej/Muntii Metaliferi/Deva, jud.Hunedoara.
12. Reabilitare ecologic a poluarii istorice n arealul metalurgic Zlatna - fosta uzina de prelucrare a cuprului
ampelum S.A./O.S. Abrud.
13. Tehnologii de reconstrucie ecologic n perimetrul exploataiei miniere Roia Montan.
14. Tehnologii de bioremediere a haldelor de steril din zona minier aurfer Baia-Mare.
15. Evaluarea riscului ambiental i reconstrucia ecologic n perimetrul exploataiei miniere de sulf Climani, jud.
Suceava.
16. Managementul ecologic al exploataiei miniere Fundu-Moldovei, Jud.Suceava.
17. Bioremedierea terenurilor si apelor poluate din perimetrul platformei de deeuri a Combinatului chimic
Trnveni
18. Tehnologii de decontaminare biologic a solului poluat cu petrol in perimetrul exploataiei petroliere Suplacul
de Barcu.
19. Bioremediere i reconstrucie ecologic pe zona poluata industrial a prului Cugir, jud.Alba.
20. Biotehnologiile de depoluare a apelor uzate la Staia de epurare Bistria.
21. Ecotehnologii de rempdurire dupa defriri in zona Ludu-Trnveni.
22. Beneficiile ambientale ale bio si ecotehnologiilor in agroecosistemul cu perdele forestiere de protectie
antierozionala Cean-Boldu din Cmpia Transilvaniei sub aspectul impactului de mediu, evaluarii riscului si
securitatii productiei agricole.
23. Utilizarea unor biotehnologii in combaterea integrata a duntorilor plantelor de cultur.
24. Utilizarea feromonilor in managementul integrat al lepidopterelor la cultura porumbului.
25. Depoluarea biologic prin fitoextracia poluantilor (metale grele, coloranti, ftalati etc.).
26. Utilizarea unor plante acvatice (Lemna minor) pentru bioremedierea apelor poluate
27. Fitoremedierea (cu Lolium perenne L.) a solurilor poluate
Proiectul = un referat stiintific de aprox. 10 pagini, cu documentatie mentionata in text si in Bibliografie, predat in
format ppt pentru prezentare si listat/indosariat.
Bibliografie
1. Cristea, V., Simone Denaeyer, 2004. De la biodiversitate la OGM-uri? Colectia Universitas Seria Biologie, Ed.
Eikon, Cluj-Napoca.
2. Denu I. (Eds.), 2000. Reabilitarea Ecologic si Managementul Siturilor Degradate De Industria Minier. Ed.
Univ.De Nord, Baia-Mare
3. Elena Gavrilescu, 2006. Evaluarea Ecosistemelor Acvatice. Ed. Sitech, Craiova.
4. Ghidra V. 2004. Ecotoxicologia Si Monitorizarea Principalilor Poluanti. Ed. Studia. Cluj -Napoca
5. Kiss t. tefanic Gh., Daniela Paca, Dragan-Bularda M., Eva Zborovschi, Crian R., 1991. Enzimologia Mediului
nconjurtor. Enzimele i Fertilitatea Solului. Vol. I. Ed. Ceres, Bucureti
6. Kiss tefan, Dragan-Bularda Mihail, Daniela Paca, 1993. Enzimologia Mediului nconjurtor. Enzimologia
Solurilor Tehnogene. Vol. Ii. Ed. Ceres, Bucureti
7. Oros V. 2002. Reabilitare Ecologica A Siturilor Degradate Industrial. Ed.Univ.Transilvania, Brasov
8. Malschi Dana, 2009. Integrated Pest Management In Relation To Environmental Sustainability. Part I.
Ecological Management Of Wheat Pests. Course Notes And Practical Applications. Manual Online. Faculty Of
Environmental Sciences, Babe-Bolyai University, Cluj-Napoca. Bioflux Publishing House, P. 200.
Http://Www.Editura.Bioflux.Com.Ro/Carti-2009/
9. Malschi Dana, 2009. Biotehnologii Si Depoluarea Sistemelor Ecologice. (Tehnologii De Depoluare
Biologica,Tehnologii De Bioremediere. Reconstructia Ecologica). Note De Curs Si Aplicatii Practice. Manual In
Format Electronic. Facultatea De Stiinta Mediului. Universitatea Babes-Bolyai. Editura Bioflux, Cluj-Napoca. P. 200.
978-606-92028-5-2. Http://Www.Editura.Bioflux.Com.Ro/Carti-2009/ .
10.
MALSCHI DANA, 2011, Caiet de practic pentru laboratorul didactic de biotehnologii, format electronic,
http://enviro.ubbcluj.ro/cercetare/laboratoare/Laborator de biotehnologii.php/.
MALSCHI DANA, 2014. Indrumar de lucrari practice Biotehnologii si depoluarea sistemelor ecologice,
format electronic, http://enviro.ubbcluj.ro/cercetare/laboratoare/Laborator de biotehnologii.php/
Evaluare
Tip activitate
10.4 Curs
10.5 Seminar/laborator
Colocviu
Notare pe parcurs i
proiect.
proiect.
10.3 Pondere
din nota final
50 %
50 %
Benzina, exceptnd componenii care conin sulf, oxigen i azot, este un amestec de
hidrocarburi. n orice benzin comercial exist mai mult de 100 de hidrocarburi diferite n
proporii variate. Compuii aromatici (benzen i toluen), alcanii (n-hexan) i alte molecule cu mai
mult de 8 atomi de carbon sunt componentele principale ale benzinei.
Hidrocarburile aromatice ca benzenul i toluenul au coeficieni de partiie aer- ap mici i
vor tinde s se repartizeze n faza apoas. Alcanii ca n-hexanul au coeficieni de partiie aer - ap
mari, determinnd repartiia lor n aer. Ciclohexanul i 1-hexanul reprezint hidrocarburile cu
coeficieni de partiie intermediari.
n Ordinul Ministrului Apelor, Pdurilor i Proteciei Mediului nr.756 din 3 noiembrie 1997
pentru aprobarea Reglementrii privind evaluarea polurii mediului, sunt prezentate ca valori ghid
pentru coninutul total de hidrocarburi petroliere n sol urmtoarele:
o valori normale: mai puin de 100 mg/kg;
o valori de alert pentru soluri sensibile: 200 mg/kg;
o valori de alert pentru soluri mai puin sensibile: 1.000 mg/kg;
o valori de intervenie pentru soluri sensibile: 500 mg/kg;
o valori de intervenie pentru soluri mai puin sensibile: 2.000 mg/kg.
Solurile sensibile includ toate solurile din zonele rezideniale i recreaionale, solurile
folosite pentru scopuri agricole i solurile din zonele nedezvoltate.
Solurile mai puin sensibile includ toate solurile cu folosin comercial i industrial i
suprafeele de teren care vor cpta o astfel de folosin n viitorul apropiat.
Estimarea intensitii gradului de ncrcare a solului cu petrol (dup Toti i colab.,
1999) este urmtorul:
o sub 0,1%: extrem de slab ncrcat;
o 0,1-0,2%: foarte slab ncrcat;
o 0,2-0,4%: slab ncrcat;
o 0,4-0,5%: slab-moderat ncrcat;
o 0,5-1,0%: moderat ncrcat;
o 1,0-5,0%: puternic ncrcat;
o 5,0-10,0%: foarte puternic ncrcat;
o peste 10,0%: excesiv ncrcat.
1.1.
Bacterii:
Trichloroethylena (TCE): Desulfitobacterium hafniense, Burkholderia cepacia Burkholderia
kururiensis, Desulfuromonas chloroethenica, Janibacter terrae. Pseudomonas putida,
Rhodococcus ruber, Wautersia numazuensis.
Biphenyl: Burkholderia xenovorans, Pseudomonas pseudoalcaligenes, Cupriavidus necator,
Rhodococcus opacus, Rhodococcus ruber, Novosphingobium aromaticivorans, Sphingomonas sp.
, Novosphingobium stygium , Novosphingobium subterraneum , Sphingobium yanoikuyae,
Thamnostylum piriforme,
Biphenyli: Yarrowia lipolytica.
PAH : Mycobacterium vanbaalenii.
Fungi:
PAH : Coriolopsis floccosa, Dichomitus squalens, Fomitopsis spraguei, Ganoderma lucidum,
Irpex lacteus, Lentinus crinitus, Lentinus sp., Oligoporus sp. , Phanerochaete chrysosporium,
Phellinus gilvus, Pleurotus eryngii ,
Stropharia rugosoannulata, Trametes villosa , Trichaptum byssogenus.
(dup www.dsmz.de/strains/degradtn.htm. DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen
GmbH, Braunschweig, Germany. DSMZ - Degradation (including Fermentation, Oxidation, Utilization)
Solurile reprezint rezervoare cheie pentru poluanii din mediu, depozitarea i persistena
poluanilor n sol fiind dependente de o serie de factori: de schimburile atmosferice, de formarea
reziduurilor de grani, de ngroparea poluanilor i de biodegradarea lor.
Biodegradarea implic desfacerea compuilor organici,
prin intermediul biotransformrii n metabolii mai puin compleci,
prin mineralizarea n minerale anorganice, H2O, CO2 (aerob) sau CH4
(anaerob).
Att bacteriile ct i fungii au fost intens studiai pentru capacitatea de a degrada o gam
larg de poluani ai mediului, inclusiv hidrocarburi aromatice policiclice, hidrocarburi
halogenate i compui nitroaromatici.
Enzimele/lanurile biochimice necesare pentru studiile iniiale ale transformrii sunt adesea
specifice pentru anumii contaminani ai mediului, transformndu-i n metabolii care pot fi
asimilai n mai multe lanuri principale desfurate de bacterii.
Gradul i rata biodegradrii depind de mai muli factori cum ar fi pH-ul, temperatura,
oxigenul, populaiile microbiene, gradul de aclimatizare, accesibilitatea la nutrieni, structura
chimic a compuilor, proprietile de transport celular i degradarea chimic pe medii de cultur.
Unele substane chimice noi, nedegradabile, care arareori apar n natur, pot fi
transformate incomplet, deoarece lipsesc cile microorganismelor pentru degradarea lor complet.
ntruct microorganismele nu au lanuri metabolice pentru mineralizarea anumitor chimicale
sintetice noi, au totui capacitatea de a dezvolta n timp astfel de sisteme catabolice.
n procesele de bioremediere, se ntlnete des ca obiectiv folosirea tehnologiilor
microbiene pentru a accelera rata de descompunere a poluanilor.
Muli contaminani ai solului se gsesc n condiii anaerobe.
Cu civa ani n urm, prin observaiile asupra declorinrii anaerobe n timp a PCB
(bifenoli-policlorurai) din sedimentele Rului Hudson, s-a demonstrat c microorganismele pot
transforma contaminanii n condiii anaerobe.
La sfritul anilor 80, s-a artat clar c hidrocarburile pot fi degradate i n absena
oxigenului. Acest sistem anaerob de degradare, necesit prezena unor acceptori de electroni
terminali precum fierul (III), oxidul de mangan sau azotat, pentru a nlocui funcia de
acceptor de electroni a oxigenului, din sistemele aerobe.
Sunt foarte intense cercetrile legate de mecanismele catalitice ce faciliteaz catabolismul
anaerob al poluanilor. Procesele anaerobe sunt foarte eficiente pentru ndeprtarea atomilor
clorinai din PCB i n degradarea altor contaminani halogenai.
Incapacitatea microorganismelor de a mineraliza unii contaminani specifici i capacitatea
lor de a-i transforma parial este o dovad c aceste organisme necesit alte substraturi pentru
cretere. n astfel de situaii, contaminanii sunt transformai, ca exemplu, n cometabolism.
Gama larg de structuri pentru moleculele de PAH- hidrocarburi aromatice policiclice
necesit ca microorganismele degradatoare s posede o gam de enzime capabile s accepte PAH ca
i substrat, sau s posede un numr mic de enzime care s fie specifice fa de substraturile cu PAH.
n timp, ntr-un anumit sistem particular de bioremediere, unele dintre hidrocarburile aromatice
policiclice (PAH) pot s nu se transforme deloc sau pot fi doar parial catabolizate pn la produi
finali.
Procesele aerobe i anaerobe cometabole particip de asemenea la degradarea
compuilor organici halogenai.
Dei mecanismele degradrii aerobe a contaminanilor chimici sintetici pe baz de azot
nu au fost complet elucidate, multe cercetri se desfoar pentru a determina mecanismele
degradative implicate. Tipurile de reacii catalitice participative cuprind dezaminri,
nitroreduceri, N-dezalchilri, deesterificri, declorinri i hidrolize. n primele etape ale
catabolismului sunt mult implicate monooxigenazele i dioxigenazele, nitroreductazele i esterazele
(Raport RESOLMET, 32161 / 2008).
9
10
11
Primele observaii asupra acestui proces de a degrada hidrocarburile dateaz din anul
1895, cnd Miyoshi (Geamanu, 2002) a observat c straturile subiri de parafin (considerat
biologic inert) sunt ptrunse de hifele de Bothrytis cinerea.
Ulterior, s-a demonstrat c mai multi microfungi din sol, inclusiv Penicillium glaucum pot
ataca parafina, descompunnd-o si utiliznd-o ca unic sursa de carbon i energie.
Importana fenomenului n natur a fost semnalat pe baza frecvenei ridicate a
microorganismelor active n sol i a incapacitii de acumulare a unor hidrocarburi sintetizate de
plante sau unor ceruri produse de insecte.
Capacitatea de a degrada hidrocarburile este larg raspndit n lumea
microorganismelor, fiind ntlnit la bacterii (inclusiv actinomicete), la levuri, la fungii
filamentoi, la alge.
Prezente n sol, n apele dulci i marine i n unele sedimente, ntr-o gam larg de
condiii de mediu, aceste microorganisme au capacitatea de a sintetiza un spectru larg de enzime
care asigur degradarea hidrocarburilor individuale i potenialul de ndeprtare sau de
conversie a ieiului din mediu.
n timp ce n ecosistemele nepoluate numrul microorganismelor care utilizeaz
hidrocarburile poate reprezenta doar 0,1% din total, n cele poluate poate ajunge pna la 100% din
numarul microorganismelor viabile. Aceasta se datoreaz faptului c n mediile cu niveluri nalte de
poluare are loc modificarea compoziiei n specii microbiene prin eliminarea acelora sensibile la
poluant.
n ultimele trei decenii s-au identificat peste 200 de specii de microorganisme capabile s
metabolizeze hidrocarburile, microorganisme care au fost numite hidrocarbonoclastice.
n urma analizrii microbiologice a probelor de soluri poluate cu iei unele n concentraii
excesive (>30%), au fost izolate tulpini bacteriene cu o nalt rat de supravieuire n aceste
condiii severe de poluare. Tulpinile bacteriene au fost multiplicate, izolate i purificate prin
cultivarea diluiilor zecimale succesive de sol pe medii nutritive solidificate.
1.1.3 Condiiile de aplicare a bioremedierii hidrocarburilor in situ
Bioremedierea in situ fa de celelalte tehnici de remediere este n mai mare msur
dependent de condiiile locale i de proprietile solului. Astfel, factorii care joac un rol
important n proiectarea cu succes a unui sistem de bioremediere cuprind:
structura chimic a poluanilor
suplimente naturale de macro/micronutrieni,
disponibilitatea acceptorilor,
prezena unor bacterii indigene capabile s degradeze poluanii i
caracteristicile subsolului.
Structura chimic a poluanilor
Biodegradabilitatea produilor petrolieri este dependent de structura chimic a
diferitelor componente. Astfel, cu ct hidrocarburile petroliere sunt mai solubile cu att ele sunt mai
biodegradabile. Hidrocarburile cu viscozitate mare sunt mai puin biodegradabile din cauza
dificultilor fizice n stabilirea contactului ntre poluani i microorganisme, sau ntre nutrieni i
acceptori. Exemplu: Gazolina care are o solubilitate ntre 50 i 100 ppm i o viscozitate cuprins
ntre 0,5 i 0,6 cSt; este considerat mult mai uor biodegradabil dect motorina, care are o
solubilitate de 1 ppm i o viscozitate cuprins ntre 40 i 600 cSt.
Structurile chimice simple sunt mai uor de degradat dect structurile ramificate care se
degradeaz mai lent. Degradarea hidrocarburilor de ctre microorganisme este n general atribuit
bacteriilor, ns i ciupercile indigene pot realiza acest lucru.
12
BACTERII
FUNGI
Achromobacter sp.
Acinetobacter sp.
Aerobacter aerogenes
Agrobacterium tumefaciens
Alcaligenes dinitrificans
Alcaligenes eutrophus
Alcaligenes xylosoxidans
Arthrobacter sp.
Bacillus brevis
Bacillus cereus
Bacillus circulans
Bacillus coagulans
Bacillus megaterium
Bacillus pumilis
Bacillus subtilis
Brevibacterium sp.
Chromobacterium sp.
Citrobacter freundii
Clostridium pasteurianum
Clostridium michiganense
Clostridium rectum
Corynebacterium sp.
Cytophaga sp.
Erwina sp.
Flavobacterium sp.
Klebsiella pneumoniae
Micrococcus sp.
Mycobacterium sp.
Nocardia sp.
Proteus sp.
Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas cepacia
Pseudomonas diminuta
Pseudomonas melophthara
Pseudomonas putida
Pseudomonas flourescens
Pseudomonas stutzeri
Rhodococeus corallinus
Rhyzobium sp.
Sarcina sp.
Serratia marsescens
Spirillum sp.
Sphingomonas herbicidivorans
Sphingomonas paucimobilis
Streptomyces annomoneus
Vibrio sp.
Xanthomonas sp.
Acremonium sp.
Aspergillus sp.
13
Aureobasidium sp.
Beauveria sp.
Candida sp.
Chrysosporium sp.
Cladosporium sp.
Cochliobolus sp.
Cyathus bulleri
Cylindrocarpon sp.
Debarymyces sp.
Fusarium sp.
Geotrichum sp.
Gliocladium sp.
Graphium sp.
Humicola sp.
Monila sp.
Mortierella sp.
Paecilomyces sp.
Penicillium sp.
Phanerochaete chrysosporium
Phanerochaete sordida
Phorma sp.
Rhodotorula sp.
Saccharomyces sp.
Scolecobasidium sp.
Sporobolomyces sp.
Sprotrichum sp.
Spicaria sp.
Tolypocladium sp.
Torulopsis sp.
Trametes versicolor
Trichoderma viride
Pentru degradarea complet a hidrocarburilor uoare, sunt necesare mai multe specii de
bacterii. Populaiile indigene de bacterii prezente n sol conin amestecul necesar de bacterii pentru
a face posibil degradarea. n cazul hidrocarburilor mai grele, se adaug preparate comerciale
pentru suplimentarea populaiei de bacterii native.
Nutrienii
Nutrienii sunt elementele chimice necesare bunei dezvoltri a microorganismelor, care pot
fi clasificai n micronutrieni i macronutrieni. Pentru o dezvoltare i o reproducere optim a
microorganismelor implicate n procesul de bioremediere trebuie ca la nivelul solului s fie
disponibile cantiti suficiente de nutrieni, iar acetia s fie n formele i concentraiile specifice
fiecrui proces.
Macronutrienii necesari populaiilor de bacterii sunt reprezentai de carbon, azot i fosfor,
iar raportul optim dintre cei trei compui C:N:P este de 100:10:1.
n sol exist cantiti suficiente din cei trei macronutrieni. Astfel, sursele cele mai frecvente
de azot sunt amoniacul i srurile nitrate, n timp ce cele mai frecvente surse de fosfor sunt
ortofosfaii i tripolifosfaii. Preparatele comerciale de bacterii disponibile pe pia constau n
amestecurile de azot, fosfor i enzime, componente de neutralizare i soluii tampon sau surse pure
de azot i/sau fosfor.
Micronutrienii necesari la nivelul solului pentru o bun desfurare a procesului de
bioremediere sunt: sulful, potasiul, sodiul, calciul, magneziul, fierul, manganul, zincul i cuprul.
14
15
16
Benzenul este considerat unul din cei mai importani poluani organici n apele
subterane (Anderson i Lovley, 1997, citai in Raport RESOLMET, 32161/2008) prezint un factor
de risc ridicat pentru sntatea populaiei datorit toxicitii i solubilitii sale ridicate. Este clasat
pe locul 5 pe lista prioritilor naionale din Statele Unite ale Americii (NPL = National Priorities
List) i s-a gsit n mai mult de 50% din 1428 site-uri ale NPL.
Hidrocarburile cu un singur nucleu aromatic, ca: benzenul, toluenul, etilbenzenul,
xilenul, cunosute sub numele generic de BTEX, sunt de obicei coninute n benzin i sunt
substane foarte volatile. Datorit toxicitii i solubilitii lor ridicate, acetia reprezint factori de
risc ridicat pentru sntatea populaiei.
Toluenul. n ceea ce privete biodegradarea toluenului, Geobacter metallireducens a fost
primul organism obinut n cultur pur capabil s oxideze anaerob toluenul, transformndu-l
complet n CO2, cu reducerea Fe III. Specia a fost incapabil s reduc ali compui BTEX. Primul
pas n catabolismul toluenului este adiia de fumarat la gruparea metil a toluenului, cu formare de
benzilsuccinat (Fig. 1), reacie realizat de enzima benzilsuccinat sintaz. Benzilsuccinatul liber se
ntlnete n bulionul de Thauera aromatica, drept produs intermediar i se consider a fi cel care
determin calea genetic pentru catabolismul toluenului.
Fig. 1
Diferite studii au demonstrat c specii ale genurilor Thauera i Azoarcus degradeaz
toluenul. Thauera aromatica i Azoarcus tolulyticus (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Primele dou microorganisme capabile de degradarea anaerob a benzenului au fost
izolate i descrise de Coates et al., 2001, 2002 citati de Raport RESOLMET, 32161/2008); aceste
microorganisme sunt nrudite i fac parte din genul Dechloromonas; ele oxideaz benzenul la CO2
n absena O2. Calea biochimic de degradare anaerob a benzenului nu este cunoscut, dar exist
idei pentru reaciile iniiale, incluznd o alchilare cu formare de toluen, o hidroxilare cu formare de
fenol sau o carboxilare cu formare de benzoat (Fig. 2). Studii anterioare independente, realizate pe
sedimente sau pe culturi mbogite, au demonstrat formarea fenolului i benzoatului ca
intermediari extracelulari, n timpul procesului de degradare anaerob a benzenului. Degradarea
anaerob a etilbenzenului. Doar trei microorganisme au fost descrise ca fiind capabile de acest tip
de metabolism (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Biodegradarea anaerob a celor trei izomeri structurali ai xilenului a fost sudiat n
condiii azotat- i sulfat-reductoare. Studii bazate pe sedimente sau culturi mbogite au
demonstrat biodegradarea p-xilenului n absena oxigenului, dar nu exist nici o cultur pur care s
mineralizeze complet p-xilenul, pn la CO2.
De asemenea, au fost izolate diferite microorganisme capabile s mineralizeze complet
meta- i orto-xilenul. Multe din aceste microorganisme sunt nrudite una cu cealalt, dar i cu cele
care degradeaz toluenul. Reaciile iniiale implicate n oxidarea anaerob a m-xylenul sunt
considerate ca fiind similare cu cele care oxideaz toluenul n condiii azotat-reductoare i
presupun o adiie iniial de fumarat la una din gruprile metil, cu formare de 3-metilbenzilsuccinat
(sau 2- metilbenzilsuccinat, dup caz) care este rapid oxidat la 3-metilbenzoat (sau 2-metilbenzoat,
dup caz) (Raport RESOLMET, 32161/2008).
17
Fig. 2
Hidrocarburile alifatice saturate (alcanii) sunt larg rspndite n mediul terestru i marin.
Acetia fie sunt produi de organismele vii sau rezult din diferite procese. n comparaie cu
numeroase hidrocarburi aromatice, alcanii sunt considerai netoxici, chiar dac cei cu caten scurt
se tie c afecteaz membranele biologice. Prima evideniere a procesului de degradare
anaerob a alcanilor de ctre o cultur pur s-a realizat cu un microorganism sulf-reductor,
nrudit cu specii ale genului Desulfococcus (Raport RESOLMET, 32161/2008).
o pH-ul mediului
Procesul de bioremediere se desfoar n condiii optime pentru un pH cuprins ntre 6 i 8,
cu valoarea ideal n jurul valorii 7. n zonele n care activitatea bacterian este intens, exist
posibilitatea apariiei unor soluri uor acide, datorate apariiei de componeni acizi intermediari. n
plus, dioxidul de carbon, un produs final al metabolismului hidrocarburilor, contribuie la
scderea pH-ului deoarece dioxidul de carbon dizolvat formeaz acid carbonic. Majoritatea
produilor disponibili n procesul de bioremediere ofer i ageni de neutralizare i soluii tampon.
o Temperatura
Este un factor care influeneaz bioactivitatea, astfel c rata de biodegradare a
hidrocarburilor aproape se dubleaz, la fiecare variaie de 10oC peste o temperatur medie
cuprins ntre 5 i 25 C. n plus, temperatura apelor subterane poate afecta disponibilitatea
oxigenului, deoarece acesta este dependent de temperatur, astfel c oxigenul este mai solubil n
ap rece dect n ap cald. Un avantaj al bioremediereii in situ este acela c temperatura n
subteran rmne aproape constant n timpul anului.
18
mai usor tratat. Sorbia, ca i diluia i dispersia, reduc concentraia i masa contaminanilor
n apa freatic, dar nu distrug contaminanii.
n diferite situaii, atenuarea natural constituie o opiune efectiv, ieftin de curire i cea
mai bun cale de a rezolva unele probleme de contaminare, chiar dac unii autori o eticheteaz ca
fiind lips de aciune. Atenuarea natural este n realitate o abordare activ care se
concentreaz pe confirmarea i monitorizarea proceselor de remediere natural mai mult
dect pe ncrederea total n tehnologiile inginereti. Hidrocarburile mobile i toxice din
carburani scuri din rezervoare sunt candidai buni pentru aplicarea atenurii naturale. Nu numai
c este dificil s-i prinzi datorit mobilitii ridicate i adncimii mari la care se afl, dar ei sunt i
contaminanii ce pot fi distrui cel mai uor prin biodegradare (US EPA-1996).
Oppelt (1999) recomand ca nainte de a decide ce metod de remediere poate fi folosit s
se trec prin urmtoarele faze:
o identificarea poluanilor prezeni n acel loc;
o evaluarea riscului pentru oameni i mediu lund n considerare fiecare dintre poluani;
o investigarea vitezei i dispersiei apei freatice;
o evaluarea cantitii de poluani localizai n acel loc;
o analiza metodelor accesibile de degradare fizic, chimic i biochimic ori de atanuare
a poluanilor;
o calculul duratei proceselor de remediere pentru fiecare metod n parte;
o evaluarea costurilor pentru fiecare metod accesibil;
o cercetarea reaciei sociale la metodele propuse;
o alegerea i aplicarea celei mai potrivite metode de remediere.
Fitoremedierea
Centrul de Analiz a Tehnologiilor de Curire a Apelor Freatice din Statele Unite ale
Americii recomand pentru curirea solului i apei poluate cu hidrocarburi fitoremedierea, metod
care utilizeaz plantele.
Avantajele majore raportate de fitoremediere n comparaie cu tehnologiile de curire
tradiionale includ posibilitatea generrii a mai puine reziduuri secundare, asociat cu deranjarea
minim a mediului ambiant i abilitatea de a lsa solul pe loc i n condiii folositoare pentru
urmtorul tratament. Dezavantajele citate n literatur includ lungimea mare a timpului cerut pentru
fitoremediere (de obicei mai multe sezoane de vegetaie), adncimea limitat a apei freatice (90-300
cm) i posibilitatea intrrii contaminantului n lanul alimentar prin consumul plantelor de ctre
animale.
Un interes particular l prezint faptul c diferite plante mpreun cu microorganismele
asociate lor, au fost identificate ca fiind capabile s creasc viteza de ndeprtare a hidrocarburilor
petroliere din solul contaminat.
n majoritatea studiilor gramineele i leguminoasele au fost semnalate pentru potenialul
lor de fitoremediere a locurilor contaminate cu hidrocarburi petroliere. Avantajul acestora l
constituie sistemul radicular fibros i puternic dezvoltat, ce exploreaz un volum mare de sol
pn la adncimea de 3 m. Acestea prezint o diversitate genetic inerent care le poate da un
avantaj n competiia ce apare la instalarea n condiii de sol nefavorabile. n plus leguminoasele ar
putea avea un avantaj fa de plantele neleguminoase n procesul de fitoremediere datorit abilitii
lor de a fixa azotul, nemaifiind astfel n competiie cu microorganismele i celelalte plante pentru
cantitile limitate de azot asimilabil din solul contaminat cu petrol.
Cele trei mecanisme primare prin care plantele i microorganismele cur solul i apa
freatic poluate cu hidrocarburi petroliere sunt:
o degradarea,
o nmagazinarea i
o transferul hidrocarburilor din sol n atmosfer.
20
Plantele i rdcinile lor pot influena indirect degradarea prin alterarea condiiilor fizice i
chimice din sol. Explorarea solului de ctre rdcini ajut n a prinde la un loc, ntr-un
contact strns, plantele, microorganismele, elementele nutritive i contaminanii.
Plantele ofer solului materie organic, att dup moartea lor ct i n timpul vieii prin
pierderea celulelor din vrful rdcinilor i excreiile de mucilagii, substanele gelatinoase
fiind un lubrefiant pentru penetrarea rdcinilor prin sol. Materia organic poate reduce
bioaccesibilitatea unor hidrocarburi petroliere, n special a celor ce sunt lipofile i legate de
materia organic.
n accord cu cercetrile efectuate de Dineen i colab. (1989), succesul bioremedierii solurilor
contaminate cu hidrocarburi petroliere depinde de urmtorii 5 factori:
o Microbiologia solului. Microorganismele ce degradeaz petrolul vor fi prezente n
zonele n care concentraia hidrocarburilor petroliere depete standardele care impun
curirea.
o Chimia solului. Concentraiile de elemente nutritive (NPK) i oxigen vor fi adecvate
meninerii creterii microorganismelor, i, n acelai timp, srurile i metalele grele nu
trebuie s fie prezente la nivele toxice.
o Fizica solului. Permeabilitatea pentru aer a solului trebuie s fie adecvat pentru a
permite o bun micare a oxigenului i azotului n solul afectat i a evita creterea
concentraiilor de bioxid de carbon.
o Morfologia solului. Stratificaia solului n zonele afectate va fi bine cunoscut pentru a
putea proiecta un bun sistem de tratare.
Adncimea apei freatice, direcia i gradientul de curgere a apei freatice, prezena sau
absena produselor de flotare i concentraia hidrocarburilor petroliere n apa freatic trebuie
s fie cunoscute nainte de implementarea bioremedierii in situ, n scopul evitrii
recontaminrii solului curat de ctre apa freatic.
n cazul n care solul este poluat att cu reziduuri de petrol ct i cu ap srat, msurile de
bioremediere se mbin cu msuri corespunztoare de desalinizare, respectiv amenajri
pentru splarea srurilor pe profilul de sol i captarea apelor de splare ntr-un sistem de
drenaj pentru a putea fi epurate nainte de deversarea n emisar.
Compostarea
Compostarea este procesul prin care materialele reziduale organice sunt degradate n
humus ca produs final. Compostarea implic interaciunea unei varieti de microorganisme
incluznd bacterii, protozoare, actinomicete i ciuperci. n operaiunile de compostare, bacteriile
mezofile i termofile sunt principalele responsabile de descompunerea proteinelor, lipidelor i
grsimilor. Protozoarele consum aceste categorii de compui organici, care constitue o surs de
hran i pentru bacterii. Abundena protozoarelor n operaiunile de compostare este redus puternic
atunci cnd temperatura este ridicat n domeniul termofil. Actinomicetele i ciupercile sunt
prevalente n timpul fazelor de compostare mezofil i termofil. Ele sunt considerate a fi
responsabile pentru degradarea compuilor organici compleci, cum sunt carbohidraii i celuloza
(Fan i Tafuri, 1998).
Principiile proceselor de bioremediere a solurilor contaminate cu hidrocarburi
Tehnicile de bioremediere includ un numr de sisteme ori procese care utilizeaz
microorganismele pentru tratarea solurilor i apelor freatice pentru degradarea ori descompunerea
reziduurilor periculoase, inclusiv hidrocarburile petroliere. Populaiile microbiene din siturile
contaminate au fost capabile s degradeze hidrocarburi, solveni clorurai, fenoli, PCB (bifenil
policlorurai) i diferite pesticide. i totui, bacteriile nu pot degrada toi contaminanii, sau i pot
degrada prea lent. i unii contaminani degradabili pot s nu fie accesibili pentru microorganisme
deoarece, spre exemplu, ei sunt prea strns legai de particulele solului (Hart, 1996). Citnd pe
Bouwer, Hart (1996) arat c bioremedierea a fost folosit cu succes pentru controlul contaminrii
cu hidrocarburi.
Limitele bioremedierii in situ:
-procesul poate fi mai lent dect la tehnicile ex situ,
-poate fi greu condus
-poate ca s nu ofere rezultate bune n solurile argiloase, ori n straturile mai profunde ale
solului, acolo unde oxigenul nu poate fi distribuit prin tratamente de suprafa. Sunt frecvent
nregistrate dificulti cu controlul fluxului n zona nesaturat. n plus, n cazul tuturor tehnicilor de
remediere in situ, subprodusele intermediare pot fi mai mobile i periculoase dect componentele
originale (Frick i colab.,1999).
Verstraete i Top (1999) atrag atenia asupra heterogenitii solului, sistemul sol prezentnd
o mare variabilitate spaial a proprietilor sale, care induce restricii n procesul de bioremediere.
Proprietile chimice ce joac un rol important n procesul de adsorbie, cum sunt pH-ul i
coninutul de materie organic, prezint o distribuie variabil ridicat. Aceast heterogenitate
afecteaz puternic cinetica de adsorbie i echilibrul dintre constituenii chimici i substanele
xenobiote. Transportul contaminanilor reactivi, care sunt adsorbii de argil, materia organic a
solului, etc. este de asemenea afectat de heterogenitatea proprietilor fizice i chimice ale solului.
Este important de notat c datorit modului de formare i dezvoltare a agregatelor structurale ale
solului, unii pori sunt n contact cu dinamica mediului ambiant, dar alii sunt inchii.
Microorganismele sunt separate spaial i destul de puine. Solul reprezint un mediu ambiant ostil
pentru microorganismele selecionate i introduse de om pentru bioremediere, care niciodat nu i
poate menine numrul i activitatea celulelor iniiale dac ele nu au un avantaj selectiv.
Metoda de decontaminare in situ a apei freatice i solului poluate cu hidrocarburi are trei
faze succesive i complementare: decontaminarea hidraulic, drenajul activ cu ajutorul
produselor tensioactive i biodegradarea (Moser, 1997).
Recuperarea hidraulic este aplicat cu prioritate pentru partea de petrol uor mobilizabil i
poate extrage pn la 26% din petrol.
Faza a doua, drenajul activ cu ajutorul produselor tensioactive, se compune din dou pri:
una de infiltrare a tensioactivului specific, biodegradabil i netoxic, i recuperarea
petrolului i tensioactivului n zona nesaturat cu care ocazie se recupereaz circa 12,5 %
22
petrol i 90% tensioactiv, i a doua parte ce const n tratarea lentilelor de petrol din zona de
sprijin orizontal prin injecia de tensioactiv n profunzime, n vederea favorizrii recuperrii
corpurilor de impregnare restante.
Faza a treia biodegradarea const n reabilitarea prin biodegradare a hidrocarburilor
reziduale. Tehnica folosit are n vedere optimizarea aportului de elemente nutritive i de
oxigen .
Factori care afecteaz biodegradarea solurilor poluate cu hidrocarburi
Biodegradarea produselor petroliere n sol este influenat de proprietile fizice i chimice
ale produselor petroliere i solului, gradul de poluare, condiiile climatice i prezena populaiilor
microbiene n sol.
Densitatea populatiilor microbiene.
Microorganismele capabile s degradeze hidrocarburile sunt distribuite peste tot n natur. n
soluri, pentru degradarea hidrocarburilor, sunt importante att ciupercile ct i bacteriile.
Paii biochimici importani n fragmentarea hidrocarburilor petroliere sunt oxidarea alcanilor
cu catene drepte sau ramificate i desfacerea nucleelor aromatice prin activiti enzimatice. Nici o
plant sau animal superior nu sunt cunoscute ca avnd astfel de posibiliti i relativ puine
microorganisme posed sistemul enzimatic necesar pentru a realiza aceti pai cruciali (Dineen i
colab.,1989).
Tipurile actuale i abundena microorganismelor depind de condiiile climatice, vegetaie,
sol i tipul de contaminani la care organismele au fost expuse. Biodegradarea rapid a
hidrocarburilor petroliere cere prezena unui nivel optim de bacterii n sol.
Densitatea nativ a populaiei bacteriene n sol poate fi estimat prin tehnicile de numrare
a microbilor care msoar unitile de colonii formate pentru consumarea petrolului sau prin
respirometrie, care msoar nivelul de bioxid de carbon eliberat. S-a sugerat c de la 106 la 108
uniti formatoare de colonii pe gramul de sol uscat vor asigura degradarea dorit a
hidrocarburilor petroliere. Totui, numai densitatea microbian nu este un indicator direct al
activitii bacteriene ori al vitezei de degradare (Fan i Tafuri, 1998).
Orizonturile de suprafa ale solurilor, unde exist oxigen i elemente nutritive n
concentraii adecvate, conin aproximativ 107-109 microorganisme/g de sol. Dintre acestea, numai
aproximativ 0,1-1 % sunt microorganisme care pot degrada petrolul. Dup contactul cu
hidrocarburile petroliere, solurile se ajusteaz din punct de vedere microbiologic, astfel nct
numrul de bacterii capabile de biodegradare crete de la 106 la 108 (Dineen, 1989).
Uneori, hidrocarburile persist chiar n medii care conin specii capabile de biodegradare,
deoarece organismele nu au acces la compuii pe care ar putea s-i metabolizeze. Inaccesibilitatea
organismelor poate fi rezultatul nemiscibilitii hidrocarburilor cu apa sau adsorbiei lor pe
sol. Hidrocarburile sunt puternic adsorbite pe sol, ceea ce le reduce toxicitatea efectiv dar le
limiteaz viteza de biodegradare.
n cadrul tehnologiei de bioremediere, un rol esenial l au lucrrile solului, care au nu
numai rolul de a pregti patul germinativ i de ntreinere a culturilor, ci mai ales pe cel de aerare a
solului, de cretere a capacitii de reinere a apei, de reglare a regimului aerohidric, de rupere a
peliculei de petrol care mpiedic schimbul de gaze ntre sol i atmosfer, de diluie a poluantului
prin amestecarea cu sol nepoluat i reducerea n acest fel a concentraiei poluantului n zona de
dezvoltare a sistemului radicular, de cretere a suprafeelor de contact dintre sol i poluant i deci de
cretere a suprafeei de atac de ctre microorganisme, de aerare forat n momentul efecturii
lucrrilor, etc.
Microorganismele din mediul ambiant pot distruge compuii organici prin degradarea lor la
compui anorganici. Trei procese de transformare pot apare:
1. detoxifierea, incluznd mineralizarea (spre exemplu, conversia complet a compuilor
organici in compui anorganici cu ajutorul microorganismelor) i co-metabolismul (spre exemplu,
conversia compuilor organici in ali ompui organici);
23
concentraiilor substanelor cheie periculoase care se gsesc n reziduurile solide cu valorile limit
din legislaia romn i cu cele propuse de Uniunea European.
Clasificarea deeurilor i depozitarea acestora, in conformitate cu Directiva 1999/31/EC
("Directiva Landfill") - Anexa II- si Decizia 2003/33/EC, impun urmtoarele tipuri de testri:
Nivel 1. Caracterizare primar;
Nivel 2. Teste de verificare a conformitii.
Nivel 3. Verificri on-site.
Dintre Directivele Europene aflate strns legtur bioremedierea pot fi amintite:
HG nr. 128/2002 modificat i completat prin HG nr. 268/31.03.2005, care a introdus noi
limitri (care le anuleaz pe cele din Anexa nr. 3 a Ordinului MAPPM nr. 462)
privind incinerarea deeurilor care reprezint transpunerea Directivei 2000/76/CE;
procese metalurgice termice, producia de aluminiu i alte metale neferoase, fier sau oel;
arderi casnice;
25
26
28
Rezistena la bor, crom i teluriu este determinat tot de gene plasmidiale. Dup creterea
n prezena unor concentraii crescute de telurit, tulpini de Ps. aeruginosa i Ps. putida, purttoare
ale plasmidelor responsabile de rezistena la metal, acumuleaz structuri ce conin teluriu n
spaiul periplasmic.
Tot pe plasmide sunt situate n mod normal i genele care determin rezistena la arsen.
Arsenaii sunt redui la arsenii, care sunt eliminai la exteriorul celulei printr-un sistem de export.
A fost identificat i un operon cromosomal implicat n reglarea acestei ci metabolice. Operonul a
hibridizat cu segmente cromosomale ale unor enterobacteriacee, respectiv cu cel de Ps. aeruginosa.
Acest operon pare a fi precursorul evolutiv al operonilor plasmidiali, care, n plus, au avantajul de a
fi prezeni n mai multe copii n aceeai celul, creia i confer, n consecin, o capacitate mai
mare de rezisten la metale (Diorio i colab., 1995, Raport RESOLMET, 32161/2008).
Plasarea genelor responsabile de degradarea unor compui poluani cu impact att de mare,
ca i a unora care confer rezisten la aciunea toxic a metalelor grele, pe plasmide transferabile
chiar interspecific reprezint un mare avantaj.
Alte gene cu rol n degradarea hidrocarburilor sunt situate pe elemente transpozabile
(Raport RESOLMET, 32161/2008).
Date fiind progresele deosebite din domeniul geneticii moleculare, pot fi construite
plasmide sau ali vectori genetici deintori ai genelor de interes, care s aib o mare mobilitate
interspecific i, implicit, bacteriile posesoare s manifeste o mare eficien biotehnologic n
demersuri de mare actualitate, cum este i acela al prezentului proiect de cercetare.
De mare interes pentru biotehnologiile de remediere a mediului ambiant sunt i membri
genului Burkholderia (Beta-proteobacterie, ord. I Burkholderiales, fam. I Burkholderiaceae),
(Raport RESOLMET, 32161/2008). n ultimii ani acest interes a crescut progresiv, datorit legturii
cu poluarea chimic a mediului ambiental i preocuprilor de exploatare a capacitilor degradative
ale bacteriei n biotehnologiile de remediere. Atenia este reinut de dou specii ale genului:
Burkholderia cepacia (numit anterior Pseudomonas cepacia) i Burkholderia multivorans.
Sunt bacterii chemoorganoheterotrofe aerobe, dar pot folosi nitratul ca acceptor final de
electroni n respiraia anaerob.
Toate speciile genului au capacitatea de a acumula poli--hidroxibutirat (PHB) ca depozit
de C, care poate fi degradat i utilizat ca surs nutritiv atunci cnd condiiile de cretere devin
improprii. Capacitatea de a produce i stoca PHB este un mare avantaj n competiia interspecific
n habitatele naturale ale bacteriilor, de regul srace n nutrieni.
Speciile genului produc nenumrai siderofori. Pe medii deficiente n fier sintetizeaz (ca i
Ps. aeruginosa i Ps. fluorescens) acid salicilic, compus cu mare capacitate siderofor, de legare
a fierului i a altor metale.
Ca i speciile de Pseudomonas, Burkholderia cepacia este foarte eficient n degradarea
toluenului.
B. cepacia crete luxuriant pe medii ce conin ierbicide halogenate: acid 2,4,5triclorofenoxiacetic (2,4,5T) i acid 2,4-diclorofenoxiacetic (2,4D).
Tulpini naturale de B. cepacia sunt foarte active n degradarea bifenililor policlorinai.
Dehalogenarea apare frecvent dup clivarea inelului, ca i n cazul metabolismului altor compui
haloaromatici. Au fost construii hibrizi in vitro, care pot realiza degradarea total a 2-Cl, 3-Cl,
2,4-dicloro- i 2,4,5-triclorobifenilului (Havel i Reineke, 1991).
De multe ori, degradarea compuilor toxici poluani ai mediului nconjurtor este controlat
de gene situate pe plasmide. O plasmid de 50 kb poart genele rspunztoare de degradarea pnitrofenolului de ctre B. cepacia, urmnd o cale oxidativ cu formare de hidrochinon i nitrit
(Chauhan i colab., 2000). Plasmida este conjugativ i poate fi transferat la tulpini nepurttoare,
un avantaj n contextul demersului pentru gsirea celor mai potrivite tulpini pentru o decontaminare
ct mai eficient a mediului.
29
O cale nou de degradare a toluenului este asigurat de enzime a cror sintez este reglat
de gene situate pe plasmide: o cale de degradare inductibil, alta constitutiv, aceasta din urm fiind
reglat de gene situate pe plasmida TOM, de 108 kb.
Plasmida MOP poart gene implicate n catabolismul derivailor de ftalat, iar pe o
plasmid de numai 2 kb se gsesc genele responsabile de degradarea ierbicidelor care au n
formul fenilcarbamat (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Rolul microorganismelor n fixarea sau mobilizarea metalelor n sol
Mobilitatea diferiilor compui organici sau anorganici ai metalelor n sol, ca i n alte
habitate, este strns legat de starea lor de oxidare. Energia folosit de sistemele vii pentru
desfurarea activitilor vitale este asigurat de reaciile de oxidoreducere, catalizate de enzimele
primei clase oxidoreductaze, n sistemele biologice numite generic i dehidrogenaze, datorit
faptului c, de obicei, n lanul transportor de electroni, transferul de electroni este nsoit de
un transfer de protoni (H+).
Totalitatea reaciilor de oxidoreducere efectuate la nivelul diverselor componente
celulare, n urma crora celula obine energia necesar desfurrii propriei activiti vitale
constituie respiraia.
Tendina unui compus chimic de a accepta sau de a ceda electroni n reaciile de
oxidoreducere biologic este exprimat cantitativ de potenialul de oxidoreducere (redox) = Eh.
Pentru a vizualiza sensul transferului de electroni (H+) n sistemele biologice a fost
imaginat o ax pe care diferitele cupluri redox sunt aezate n ordinea cresctoare a potenialului
lor redox. Aceast ax mai poart numele turnul electronilor.
o Forma redus a perechii redox din vrful turnului
(valori negative; 2H+/H2: Eh = 0,421 V) are cea mai mare
tendin de a ceda electroni, deci de a se oxida;
o forma oxidat a cuplului de la baz are cea mai mare tendin de a accepta electroni,
deci de a se reduce (O2/H2O: Eh = +0,816 V).
Cuplurile redox situate la mijlocul turnului electronilor pot aciona n dou moduri:
o ca acceptori de electroni, pe care i preiau de la cuplurile cu potenial redox mai
negativ, situate spre vrful turnului;
o ca donori de electroni, pe care i cedeaz cuplurilor cu potenial redox mai pozitiv,
situate spre baza turnului.
n mediile lor de via, inclusiv n soluri, diferite grupe ecofiziologice de bacterii efectueaz
reaciile de oxidoreducere conform potenialelor redox prezentate n turnul de electroni (Raport
RESOLMET, 32161/2008).
Exemplu:
Desulfovibrio:
oxideaz H2 cu ajutorul SO42; 2H+/H2 (Eh = 0,42 V);
SO42/H2S (Eh = 0,22 V); Eh = 0,20 V;
4H2 + H2SO4 H2S + 4H2O + E (38 KJ/mol);
Beggiatoa:
Ca urmare a producerii acidului sulfuric, aciditatea n mediul lor natural poate s ajung la
1,5. Sunt bacteriile cele mai tolerante la aciditate cunoscute. Se dezvolt optim la pH 2-4. Sunt
obligat aerobe. Ca i Beggiatoa, se pot hrni i heterotrof. Habitatele naturale comune ale
bacteriilor sulfuroase nepigmentate sunt apele i solurile bogate n compui redui ai sulfului,
apele din mine, izvoarele sulfuroase.
Tot obligat aerob este i Th. ferrooxidans, care, dup cum o arat numele, oxideaz
compuii fierului n care acesta se gsete n stare bivalent, la compui n care Fe este trivalent, la
fel ca i alte ferobacterii sau bacteriile feruginoase (Gallionella, Sphaerotilus):
2FeSO4 + H2SO4 + O2 Fe2(SO4)3 + H2O + E
2Fe(OH)2 + O2 + H2O 2Fe(OH)3 + E
Bacteriile feruginoase se ntlnesc mai frecvent n ape i mai rar n soluri. Prezint o
importan practic n special pentru sistemele de aprovizionare cu ap. Conductele metalice pot
s fie corodate sub aciunea bacteriilor feruginoase. De asemenea, formarea compuilor oxidai, n
special a hidroxidului feric Fe(OH)3 compus insolubil, poate duce la colmatarea conductelor
metalice, prin depunere sub forma unor straturi de culoare roie-maronie, dup care se recunoate
prezena ferobacteriilor n mediile lor naturale de via (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Bacteriile denitrificatoare = nitrat reductoare au respiraie anaerob, folosind nitratul
drept acceptor final de electroni n sistemul transportor de electroni.
n prezena O2 fac respiraie aerob, chiar dac n mediu se gsesc i nitrai, datorit eficienei
energetice net superioare a respiraiei aerobe, precum i datorit represiei de ctre O2 a sintezei
nitratreductazei. Exist specii care, prin reaciile produse se ncadreaz n acelai timp la dou grupe
bacteriene distincte din punct de vedere ecofiziologic.
De exemplu, Thiobacillus denitrificans, facultativ aerob, n prezena O2 poate efectua reaciile de
oxidare a compuilor redui ai sulfului, dar n absena O2, pentru oxidarea acestora folosete
oxigenul din nitraii prezeni n mediu:
S + 2HNO3 H2SO4 + N2 + O2 + E
Astfel, Th. denitrificans este o bacterie sulfoficatoare, deoarece oxideaz compuii redui ai
sulfului cu formare de sulfai, iar pe de alt parte este o bacterie denitrificatoare, ntruct, n
condiiile specificate, produce N2 din nitrai. Este un exemplu tipic de respiraie anaerob, n care
acceptorul final de electroni (H) nu este O2 ci un compus anorganic oxidat (NO3). Unele bacterii
denitrificatoare pot oxida i compui redui ai fierului, altele pot face fermentaie, deci bacteriile
denitrificatoare au o gam foarte larg de opiuni n privina mecanismelor alternative ale
metabolismului energetic.
Bacteriile desulfoficatoare = sulfat-reductoare sunt tot bacterii anaerobe, la care
acceptorul final de electroni este sulfatul (SO42). Produsul final al reducerii sulfailor este
hidrogenul sulfurat (H2S). n reducerea asimilatorie a sulfailor, H2S este convertit n sulf organic,
n componena unor aminoacizi (eseniali: cisteina i metionina; neeseniali: glutation, taurin i
homocistein). n reducerea neasimilatorie este excretat n mediu. Specia desulfoficatoare tipic
este Desulfovibrio desulfuricans (Delta-proteobacterie). Reacia produs:
4H2 + H2SO4 H2S + 4H2O + E
Disproporionarea sulfului. Disproporionarea sau dismutaia este o reacie chimic n
urma creia un element este simultan redus i oxidat formnd doi produi diferii. Unele bacterii
sulfat reductoare au capacitatea de a scinda un compus al sulfului aflat ntr-o stare intermediar de
oxidare, n doi compui unul mai redus i cellalt mai oxidat dect substratul originar. De
exemplu, D. sulfodismutans poate descompune tiosulfatul (stare de oxidare intermediar) n sulfat
(mai oxidat) i hidrogen sulfurat (mai redus):
Na2S2O3 + H2O Na2SO4 + H2S + E
31
Procesul are semnificaie ecologic, deoarece asigur o cale prin care bacteriile
desulfoficatoare pot recupera energia unor compui ai sulfului intermediari, rezultai ca urmare a
oxidrii incomplete a H2S de ctre bacteriile sulf-oxidante (Beggiatoa, Thiobacillus).
Transformrile metalelor efectuate sub aciunea microorganismelor constituie o
verig cheie a ciclurilor metalelor n biosfer. Transformrile metalelor sunt dominate de
reaciile de oxidoreducere, complexarea compuilor organici i anorganici i schimbarea ntre
formele solubile i insolubile n ap.
Atunci cnd un microorganism oxideaz sau reduce un metal, acesta precipit sau
devine solubil. De exemplu: Cr6+ este redus la Cr3+, care precipit sub form de oxizi, sulfuri
sau fosfai de crom (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Bacteriile care triesc n medii cu concentraii mari de metale dispun de mecanisme
fiziologice specifice, care le permit s supravieuiasc n aceste condiii improprii: precipitarea
extracelular, legarea ionilor metalici i eliminarea lor la suprafaa celulei, sechestrarea
intracelular, sub form de incluzii intracitoplasmatice.
Legarea cationilor la suprafaa celulei a devenit unul dintre cele mai atractive modele de
biotransformare. Acele metale care posed o configuraie a electronilor ce conine 10-12 straturi de
electroni sunt adesea toxice pentru organisme, la concentraii relativ sczute. n acest grup intr
Hg2+, Ag+, Pb2+, Cd2+, Zn2+.
Interaciunile metal-microorganism joac un rol important n numeroase biotehnologii, ca
bioremedierea, biomineralizarea, bioleierea, coroziunea microbian i de aceea suscit un
interes mereu crescut n ultimii ani. Se urmrete folosirea tulpinilor bacteriene n culturi pure sau
n consorii capabile s mobilizeze/imobilizeze ionii metalici (Satchanska i colab., 2005, dup
Raport RESOLMET, 32161/2008).
n vederea bioremedierii habitatelor poluate, contaminarea simultan cu metale, pesticide
sau hidrocarburi ridic probleme i mai greu de rezolvat.
Problema polurii cu reziduuri mixte, n special cu metale i hidrocarburi solicit nainte
de toate izolarea de tulpini cu nalte capaciti de biotransformare a acestor poluani. n consecin,
un scop major al tuturor biotehnologiilor care vizeaz depoluarea, pstrarea i conservare
habitatelor naturale const n gsirea microorganismelor cu cele mai performante capaciti de
transformare n sensul dorit, n exploatarea cilor metabolice naturale, creterea eficienei acestora,
pentru optimizarea procesului decontaminrii.
Remedierea metalelor implic adesea 5 abordri:
o izolarea,
o imobilizarea,
o mobilizarea,
o separarea fizic i
o extracia.
Imobilizarea i mobilizarea implic procese de bioremediere efectuate de bacterii.
Imobilizarea este o tehnic de reducere a mobilitii contaminantului prin alterarea proprietilor lui
fizico-chimice. Se folosesc microorganisme, iar procesul se poate desfura in situ sau ex situ
(Raport RESOLMET, 32161/2008).
Microorganismele pot mobiliza metalele prin leiere autotrof sau heterotrof, chelare
de ctre metabolii i siderofori, metilare i transformri redox. Leierea heterotrof este
atunci cnd microorganismul acidific mediul prin eflux de protoni (for protonmotrice), avnd
drept urmare eliberarea cationilor metalici. Leierea autotrof este atunci cnd bacteria acidofil
obine energia necesar fixrii CO2 prin oxidarea compuilor anorganici redui ai fierului (Fe2+) sau
a compuilor redui ai sulfului. Sideroforii sunt liganzi specifici ai Fe3+, dar pot lega i alte
metale, ca Mn, Mg, Cr etc. Metilarea implic grupul metil care este transferat pe cale enzimatic
pe un metal, formnd un numr de diferii metaloizi. Transformrile redox permit
microorganismelor s mobilizeze metalele, metaloizi i compuii organometalici. Exist numeroase
32
33
Monoxidul de carbon
Carbonat
Cyanamide CN2H2
Fe(III)
Fier feros Fe(II)
FeSO4
Hydrogen sulfurat H2S
Denumirea
Chrysiogenes arsenatis
Sulfurospirillum arsenophilum
Methanococcus maripaludis
Methanothermobacter marburgensis
Thiobacillus thioparus
Acetitomaculum ruminis
Acetohalobium arabaticum
Bacillus schlegelii
Bacillus sp.
Carboxydothermus restrictus
Clostridium formicaceticum
Moorella thermoacetica
Mycobacterium sp.
Bryantella formatexigens
Myrothecium verrucaria
Desulfuromonas palmitatis
Thermoterrabacterium ferrireducens
Acidithiobacillus ferrooxidans
Leptospirillum ferriphilum
Alicyclobacillus disulfidooxydans
Blastochloris sulfoviridis
Rhodovulum euryhalinum
Rhodovulum sulfidophilum
34
Mn(IV)
Nitrate
Oxid de azot NO
Pirita FeS2
Sulfat
Sulfide
(S2-) H2S,
NaHS, Na2S, Ag2S, CdS etc.
Sulfonai
Sulf
Thiosulfate (S2O32),
Desulfuromonas palmitatis
Geobacter bremensis
Geobacter pelophilus
Paracoccus solventivorans
Pseudomonas aeruginosa
Alicyclobacillus disulfidooxydans
Desulfomicrobium escambiense
Pandoraea norimbergensis
Paracoccus pantotrophus
Rhodovulum euryhalinum
Rhodovulum sulfidophilum
Thermithiobacillus tepidarius
Xanthobacter tagetidis
Clostridium pasteurianum
Acidianus ambivalens
Acidianus brierleyi
Acidianus infernus
Acidithiobacillus thiooxidans
Desulfomicrobium baculatum
Desulfomicrobium norvegicum
Desulfurococcus amylolyticus
Desulfurococcus mobilis
Desulfurococcus mucosus
Desulfuromonas acetoxidans
Geobacter bremensis
Geobacter pelophilus
Pandoraea norimbergensis
Pyrococcus furiosus
Pyrococcus woesei
Staphylothermus marinus
Thermithiobacillus tepidarius
Thermococcus celer
Thermofilum pendens
Thermoplasma volcanium
Thermoproteus neutrophilus
Thermoproteus tenax
Thiobacillus sp.
Thiomicrospira thyasirae
Blastochloris sulfoviridis
Chlorobium limicola
Prosthecochloris vibrioformis
Hydrogenophaga palleronii
Hydrogenophaga pseudoflava
Marichromatium purpuratum
Pandoraea norimbergensis
Paracoccus pantotrophus
Rhodovulum sulfidophilum
Thermithiobacillus tepidarius
Xanthobacter tagetidis
37
38
39
40
Fitoextracia
Fitoextracia, este o fitotehnologie dezvoltat pentru extracia metalelor grele din solurile
poluate, care a primit o atenie deosebit datorit caracteristicilor sale: costuri mai reduse,
noninvaziv i plcut la vedere. Tehnologia se bazeaz pe capacitatea unor plante de a extrage din
sol cantiti mari de metale. Hiperacumulatorii sunt plante care au capacitatea de a acumula,
transloca i rezista la concentraii mari de metale de-a lungul unui ciclu complet de cretere. n
special, Thlaspi caerulescens a fost identificat ca fiind un hiperacumulator pentru Zn i Cu.
Bioaccesibilitatea se refer la abilitatea unui produs chimic din mediul ambiant de a
interaciona cu receptorii umani ori ecologici i receptorii acestora i punctul final care va influena
metodele de determinare a bioaccesibilitii (Juhasz, 2006, dup Raport RESOLMET, 32161/2008).
Materia organic a solului, pH-ul i coninutul de argil sunt proprietile chimice ale solului
care influeneaz bioaccesibilitatea i toxicitatea pentru receptorii ecologici (ex. rme, plante). Un
studiu comparativ cu 21 tipuri de soluri naturale, multiplu contaminate i cu un numr mare de
plante i rme ca punct final a fost realizat pentru a determina efectele simple i combinate ale
proprietilor chimice ale solului asupra bioaccesibilitii i toxicitii. Solurile au fost astfel
selectate nct s asigure un domeniu combinat de pH al solului, coninut de carbon organic,
capacitate de schimb cationic, oxizi de Al i Fe i coninut de argil. n acest nou tip de abordare,
tipul de sol i nu concentraia contaminanilor au fost folosite pentru a produce o varietate de
bioaccesibiliti a metalelor i dozele de expunere.
Fitoextracia implic cultivarea uneia sau mai multor specii de plante hiperacumulatoare,
crora s li se creeze cele mai bune condiii de dezvoltare pentru a asigura o mas vegetal ct mai
mare, pentru a putea extrage, acumula i ndeprta o cantitate ct mai mare de metale. Masa
vegetal recoltat va fi supus altor tratamente de extracie a metalelor sau va fi uscat i incinerat,
iar cenua depus ntr-un depozit de gunoi controlat.
Aceste specii de plante remarcabile acumuleaz concentraii de 100 de ori mai mari de
elemente poluante dect plantele cultivate normal; unele plante cultivate sufer reduceri de producie
datorit fitotoxicitii metalelor. Tolerana la metale i hiperacumularea se desfoar pe solurile
mineralizate i sunt specifice metalelor prezente acolo unde plantele expuse prezint aceste trsturi.
Unele elemente sunt att de puternic legate de soluri, ori precipitate n rdcinile plantelor, c
plantele nu pot acumula niveluri suficient de ridicate pentru a asigura o fitoextracie folositoare. Nu
au fost identificate plante care s acumuleze 1 % Pb n biomasa suprateran fr ca s se aplice
ageni de chelatare pe sol pentru a dizolva Pb i preveni precipitarea lui n rdcinile plantelor.
Adugarea agenilor de chelatare produce o splare ctre apele freatice, lucru de care trebuie s se
in cont n studiu (Chaney i colab., 2006, citat de Raport RESOLMET, 32161/2008).
Tehnica fitoextraciei are un numr de avantaje care o poate face mult mai atractiv dect
alte tehnici de reabilitare:
reduce volumele ce trebuie depozitate n gropile de gunoi (la sfritul procesului
plantele sunt arse i astfel volumul cenuii este mult mai mic dect poate fi masa
solului contaminat);
economisete energia (procesul de curire se bazeaz pe energia solar);
opereaz foarte simplu;
nu deranjeaz vizual i este acceptabil pentru opinia public;
este relativ uor de aplicat pe suprafee contaminate extinse;
este posibil reciclarea produselor din procesele de fitoextracie;
este posibil de utilizat pentru o mare varietate de poluani (metale,
radionuclizi, substane organice) (Magistrelli i colab. 2002, citat de Raport RESOLMET,
32161/2008).
Caracteristicile plantelor capabile s fie folosite n procesul de fitoextracie includ:
41
unde
[ M ]p = coninutul de metal n plant (mg/kg);
[ M ]t = coninutul de metal din sol (mg/kg).
Cantitatea de poluani ndeprtat pe an pe unitatea de suprafa = producia biomasei poluat
(kg s.u./ha) x concentraia poluantului (mg/kg s.u.) x numrul de recoltri pe an = Y . Cp . n
Fiecare element are propriul echilibru chimic n soluri n acord cu pH-ul solului, fazele
sorbante ale solului, materia organic a solului, potenialul redox al solului, etc,. Dac un element
este numai slab legat n sol, el poate fi splat prin sol i contamineaz apa freatic. Avnd n vedere
pH-ul i chimismul elementelor, anionii i cationii monovaleni sunt de obicei splai (levigai).
Anionii divaleni cum sunt sulfaii sunt rapid levigai, n timp ce seleniaii, molibdaii, tungstaii i
alte cteva sunt splate numai la pH alcalin; la pH acid aceste elemente pot fi adsorbite bine de
oxizii de fier i alii. Arseniaii sunt adsorbii bine la pH acid i precipit ca mineral de Ca la pH
ridicat (dup Raport RESOLMET, 32161/2008).
Fitostabilizarea
Aceast tehnic poate fi folosit pentru a restabili covorul vegetal n locurile unde vegetaia
natural lipsete datorit concentraiilor mari de metale grele n orizontul de suprafa ori datorit
degradrilor fizice a materialelor de suprafa. Speciile tolerante pot fi folosite pentru restaurarea
vegetaiei locului, scznd totodat potenialul de migrare a contaminanilor sub influena eroziunii
eoliene i hidrice i de levigare ctre apa freatic (eroziunea i levigarea sunt frecvente pe terenurile
fr vegetaie).
Plantele pretabile pentru fitostabilizare ntr-un anumit loc trebuie:
s aibe toleran ridicat pentru contaminantul avut n vedere;
s asigure o producie ridicat a biomasei radiculare capabil s imobilizeze aceti
contaminani prin preluare, precipitare ori reducere;
s rein contaminanii aplicai n rdcin, mpiedicnd transferul n tulpini i frunze, pentru
a evita o depunere special.
Fitostabilizarea asigur reducerea riscului prin stabilizarea contaminanilor localizai n
apropierea suprafeei solului. Acest rezultat este asigurat de secreia de ctre plante a unor compui
ce influenteaz pH-ul solului i formeaz complexe metalice cu solubilitate redus. n plus plantele
ajut la reducerea eroziunii solului i la reducerea levigrii prin creterea evapotranspiraiei (Ma i
Kingscott, 1997) (dup Raport RESOLMET, 32161/2008).
42
30 km. Solurile sufer de acidificare, care determin srcirea acestuia n elemente nutritive, se
destructureaz, se declaneaz procese de pant (eroziune i alunecri), uscarea vegetaiei etc.
(Raport RESOLMET, 32161/2008).
3.1.3. Efectele polurii cu dioxid de sulf
Sulful este un element esenial pentru sntatea plantelor i animalelor, el fiind benefic n
aproximativ aceleai cantiti ca i fosforul. Sulful joac un rol asemntor i la animale, avnd un
rol critic n formarea sntoas a pielii, prului i a esutului lnos.
Limitele coninutului n sulf pentru solurile cu folosin mai puin sensibil:
Prag de alert: - 5000 mg/kg substan uscat (S);
400 mg/kg substan uscat (sulfuri);
5000 mg/kg substan uscat (sulfai).
Prag de intervenie: - 20.000 mg/kg substan uscat (S);
2000 mg/kg substan uscat (sulfuri);
50.000 mg/kg substan uscat (sulfai).
Oxizii de sulf au aciune duntoare att asupra organismului uman , regnului vegetal ct i
asupra construciilor din metal i piatr. Aciunea poluatoare a H2SO4 se exercit sub forma ploilor
acide, principalul factor generator al morii padurilor n trile industrializate.
Efecte asupra sntii populaiei i animalelor
Concentraiile de dioxid de sulf care produc efecte detectabile n organismele animale i
umane snt mult mai nalte dect cele corespunztoare pentru vegetaie. Efectele dioxidului de sulf
asupra omului se manifest n primul rnd printr-o iritaie a sistemului respirator. Aceasta apare la
concentraii de 5 ppm. n unele cazuri iritaia apare chiar la concentraii de 12 ppm i este
nsoit de spasm bronic la concentraii de 510 ppm. n ceea ce privete aciunea toxic acut a
dioxidului de sulf prin expuneri intermitente la concentraii mai ridicate, prerile diverilor autori
sunt ntru totul concordante. n privina aciunii cronice, prin expuneri continue la concentraii
relativ mici, prerile snt diferite i merg pn acolo nct neag o astfel de aciune. Numeroase
cercetri au dovedit ns efectele cronice ale expunerilor ndelungate la concentraii mici. S-a
dovedit c dioxidul de sulf odat intrat n organism prin cile respiratorii ajungee n snge i
produce tulburri n metabolismul glucidelor i n procesele enzimatice. n prezena particulelor
solide aciunea dioxidului de sulf determin efecte i mai grave.
La concentraii anuale de 100 fxg/m3 particule asociate cu concentraii de 30 ng/m3 dioxid
de sulf se constat o cretere a sensibilitii la diferite boli a copiilor. Concentraii de particule
cuprinse ntre 100130 fxg/m3 asociate cu concentraii de 120 fxg/m3 dioxid de sulf determin o
cretere a maladiilor respiratorii la copii. Dac la o concentraie de 300 p.g/m3 particule cu o
persisten n aer de cteva zile se asociaz o concentraie
Experienele fcute pe loturi de animale expuse la inhalaii de dioxid de sulf au scos n
eviden o mortalitate crescut. Ca i la om, dac dioxidul de sulf este absorbit pe particule solide
efectele snt i mai grave. Efectul aditiv determin o cretere a numrului de mbolnviri i decese
n rndul animalelor expuse.
Efecte asupra plantelor
Prezena dioxidului de sulf n atmosfer constituie principala cauz a proceselor distructive
asupra plantelor. Multe plante prezint o sensibilitate accentuat n comparaie cu oamenii i
animalele la acest poluant. Sensibilitatea este funcie de concentraie i de timpul de expunere.
Leziunile provocate de dioxid de sulf i tulburrile produse n asimilaia clorofilial
diminueaz fotosinteza. Mecanismul aciunii toxice a dioxidului de sulf asupra plantelor este nc
puin cunoscut. Se tie ns c aciunea sa toxic este determinat de proprietile sale oxidoreductoare i de aciditatea sa. O serie de factori ca luminozitatea puternic, umiditatea i
temperatura favorizeaz apariia leziunilor chiar la concentraii mai mici de dioxid de sulf.
Comportamentul diferitelor specii de vegetale la aciunea dioxidului de sulf este foarte
variat. Plantele cu frunze suculente prezint cea mai mare sensibilitate, n timp ce plantele cu frunze
aciculare prezint cea mai mare rezisten.
44
Dioxidul de sulf ca poluant atmosferic exercit asupra lumii umane cu totul alte efecte dect
dioxidul de sulf singur, aa cum se ntlnete uneori n atmosfera industrial. Sinergismul cu ali
poluani atmosferici, n special cu particulele solide, accentueaz efectele toxice ale dioxidului de
sulf.
Pagubele cele mai importante provocate de SO2 plantelor se petrec ziua, cnd activitatea
fotosintetic este maxim, aciunea fitotoxic a SO2 constnd n distrugerea clorofilei. Prin
expunerea unor plante la o atmosfer artificial de SO2 acestea au eliminat H2S numai n prezena
luminii.
Efecte asupra mediului
Dioxidul de sulf n prezena particulelor are o capacitate de distrugere i mai mare. Astfel,
oxizii de sulf corodeaz suprafeele metalice din cauza formarii acizilor, deterioreaz i decoloreaz
cldirile, atac marmura i orice piatr de construcie, deteriornd astfel monumentele. Aciditatea
aerului poluat datorat oxizilor de sulf deterioreaz i decoloreaz esturile, obiectele de piele etc.
Oxizii de sulf impreuna cu acizii sulfuros si sulfuric, conduc la aparitia unor fenomene de
decolorare a materialelor colorate, de slabire a rezistentei si elasticitatii a materialelor
45
oxidarea sulfiilor n zona de rdcin. Toate tulpinile Beggiatoa depoziteaz sulf, n prezena
H2S, dei aceste bacterii par a fi heterotrofe.
Bacteriile fototrofice, cum ar fi Chromatium i Chlorobium, au de asemenea, un rol
important n oxidarea sulfiilor.
Un numr de chemolitotrofe nefilamentoase care au capacitate oxidant a sulfului au fost
izolate. De exemplu, Sulfolobus se dezvolt n soluri acide fierbini.
Speciile Thiospira, Thiomicrospira i Macromonas au fost izolate din solurile de pdure
saturate cu ap. Importana acestor bacterii n oxidarea sulfului urmeaz a fi stabilit.
Schema din fig. 7 reprezint integrarea reaciilor biologice i chimice implicnd compuii
anorganici ai sulfului din sol.
S-a constatat c adugarea de sulf stimuleaz o cretere semnificativ a populaiei de
Thiobacillus. Oricum, se pare c nu exist nici o corelaie ntre procesele de oxidare a sulfului i
bacteriile Thiobacillus, cu excepia faptului c procesele de oxidare a sulfului sunt n general
reduse n soluri n lipsa acestor organisme. Astfel aceste procese de oxidare sunt accelerate n
sol prin inocularea cu populaia de Thiobacilli.
Implicarea organismelor heterotrofe n oxidarea sulfului din sol
Rolul dominant pe care l au thiobacili n oxidarea solului a fost menionat n cteva studii
privind rolul organismelor heterotrofe pe care l pot avea n proces. Faptul c majoritatea, dac nu
toate, microorganismelor heterotofe din sol, ntr-o anumit msur, sunt capabile de a oxida sulful,
sugereaz faptul c, probabil, ele pot participa la oxidarea elementar i la reducerea formelor de
sulf n sol. Oricum, rolul organismelelor heterotrofe n oxidarea sulfului din sol s-ar prea s fie
limitate de nivelurile sczute de carbon prezent pentru a sprijini organismele heterotrofe i
activitatea acestora.
Exist studii care arat c ciupercile pot folosi deeurile plantelor, cum ar fi paiele de
cereale, ca o surs de carbon n sprijinirea oxidrii sulfului. La polul opus, specii de fungi din
descompunerea lemnului au fost dovedite ca fiind incapabile s oxideze sulful cnd cresc din buci
de lemn introduse n sol. Cu toate acestea, anumite studii sugereaz c ciupercile Ectomycorrhizal
sunt capabile de a oxida sulful n cultur. Acestea susin faptul c microorganismele heterotrofe
ar putea avea un rol important n oxidarea sulfului, cel puin n anumite soluri, din punctul de
vedere al autorilor Lawrence i Germida.
Populaiile de heterotrofe capabile de a participa la aceast reacie au fost de zece mii de ori
mai mari dect populaiile de heterotrofe care au oxidat S0 in SO42-.
Bacteriile au tendina de a oxida sulful elementar S0 la S2O32-, iar fungii realizeaz
oxidarea complet la SO42-. n general, se produce puin S4O62- n urma reaciilor de oxidare.
Oxidanii heterotrofici ai sulfului au fost gsii, de asemenea, predominani n dou soluri
(luvisoluri cenuii) care confirm rapoartele anterioare cu privire la ambiguitatea oxidanilor de sulf
heterotrofi n marea varietate de soluri. Lawrence i Germida furnizez mai multe date pentru a
sublinia rolul heterotrofelor n oxidarea sulfului, artnd c rata de oxidare a sulfului crete
liniar cu biomasa microbian a solului.
Cu toate acestea, rmne dificil de precizat cu exactitate ratele de oxidare a sulfului ntre
oxidarea heterotrofelor i chemolitotrofelor. Se pare c, probabil, totui, acele populaii mixte de
microorganisme, inclusiv heterotrofele sunt responsabile de realizarea oxidrii sulfului n
majoritatea solurilor. n acest fel, de exemplu, S0 poate fi oxidat la S2O32- de ctre un grup de
microorganisme, i altele, pot oxida acest compus intermediar la produsul final, SO42-. Astfel de
interaciuni sinergice ntre oxidarea sulfului prin microorganisme au fost demonstrate n vitro.
46
47
Studiile fcute de Johnson, 1973, Choi,1992 i alii (Raport RESOLMET, 32161/2008) arat
superioritatea sorbenilor naturali organici fa de cei sintetici n aplicarea lor pentru
depoluarea solurilor, avnd n vedere capacitatea lor de biodegradare.
Dr. Ali Ghalambor, 1995, University of Southwestern Louisiana, arat c dac sorbenii
naturali sunt folosii ntr-un mod corespunztor, pot fi mult mai eficieni dect sorbenii sintetici i
subliniaz numeroasele avantaje ale sorbenilor naturali organici: biodegradabili, resurse
regenerabile, cost sczut, impact sczut asupra mediului, uor de procurat i manipulat.
n urma testelor efectuate pe o serie de sorbeni naturali i sintetici, Ghalambor, 1998,
ntrete ideea folosirii sorbenilor naturali n cazul unor poluari (deversari accidentale de
produse petroliere), argumentnd aceasta prin faptul c sorbenii uzai pot fi tratai prin
biodegradare n vrac (compostare), n acest mod degradndu-se att sorbentul ct i produsul
petrolier (dup Raport RESOLMET, 32161/2008).
Sorbenii acioneaz att prin mecanismul de absorbie i adsorbie, sau prin amndou.
Absorbenii opereaz ca nite burei i colecteaz produsul prin aciunea de capilaritate sau
suciune. Ei permit lichidului s ptrund n spaiul porilor materialului din care sunt confecionai,
n timp ce adsorbenii atrag lichidul pe suprafaa lor dar nu permit ptrunderea lor n material.
In anumite cazuri, materialele sorbente pot folosi ambele principii pentru recuperarea
produsului petrolier.
Absorbanii lucreaz cel mai bine cu produsele petroliere uoare, puin vscoase;
Adsorbanii au afiniti ctre produsele mai grele i mai vscoase.
Aplicarea la scar industrial a depolurii solurilor de contaminani de tip hidrocarburi
petroliere prin folosirea materialelor sorbente, nu este ntlnit n practica curent din Romnia,
att din lips de mijloace economice, ct i din lipsa unei baze tiinifice solide care s permit
abordarea cu succes, ntr-un timp real, a depolurilor discutate. n strintate exist o serie de
produse absorbante naturale pe baz de turb (PeatSorb, Spill Sorb, Oclansorb, etc) care sunt
folosite cu succes, att pentru depoluarea apelor ct i a solurilor (Raport RESOLMET,
32161/2008).
Metode de depoluare a solului
Clasificarea tehnologiilor de remediere a terenurilor poluate poate fi:
dup criteriul temporal, dup care tehnologiile se clasifica n :
aciuni iniiate - de izolare;
aciuni finale - de depoluare propriu - zisa
dup locul unde se realizeaz depoluarea ;
dup natura proceselor prin care se realizeaz depoluarea.
n funcie de locul n care se realizeaz remedierea se vorbete despre :
tehnologii aplicabile "in situ" - adic pe amplasamentul poluat;
tehnologii aplicabile "ex situ" - adic n afara amplasamentului
poluat; acestea implica extragerea materialului poluat (sol, roca, apa subterana) si
tratarea lui n instalaii sau pe suprafee special amenajate n limita perimetrului
poluat sau n afara lui.
Avantajele tehnologiilor aplicabile "in situ" rezulta din faptul ca amplasamentul
rmne relativ nederanjat, stratul poluat nefiind extras prin excavare. Solul tratat "in situ" i
pstreaz sau chiar i mbuntete structura fizica i fertilitatea; tratamentele "in situ" genereaz
cantiti mai mici de emisii (gazoase sau lichide) i deeuri solide.
Avantajele tratamentele aplicabile "ex situ" au avantajul ca:
permit n mai mare masura supravegherea condiiilor n care se desfoar procesul;
fac poluanii mai uor accesibili pentru distrugere sau eliminare;
permit un control mai accesibil al emisiilor si deeurilor rezultate din remediere.
48
50
construcii de maini, material de construcie etc. - 110 situri cu o suprafa total de 954,92
hectare; depozitele de deeurile menajere - 475 de situri contaminate pe o suprafa total de
684,62 hectare; fermele agricole - 47 de situri contaminate cu o suprafa total de 30,90 hectare.
Bioremedierea poate fi o metod cu un cost efectiv pentru decontaminarea solurilor poluate.
Cercetrile asupra degradrii poluanilor de ctre microrganisme au fost focalizate primar asupra
bacteriilor, care cresc mai repede i sunt supuse manipulrilor genetice. Utilizarea basidiomicetelor
n cercetrile de fitoremediere ofer mari promisiuni pentru remedierea solurilor contaminate cu
poluani de tipul hidrocarburilor.
Dintre metodele bioremediere in-situ fac parte: bioventilarea (o tehnologie care
stimuleaz microorganismele existente natural n sol pentru a degrada unii poluani din sol prin
asigurarea oxigenului necesar), fitoremedierea (o tehnic ce folosete plantele pentru a
ndeprta, transfera, stabiliza sau distruge contaminanii n sol), utilizarea terenurilor agricole
(solurile contaminate sunt amestecate cu amendamente de sol cum sunt agenii de reducere a
densitii aparente i elemente nutritive, sunt aplicate pe terenuri agricole curate i ncorporate n
sol; periodic se execut lucrri ale solului pentru mbuntirea aerrii i omogenizare),
atenuarea natural (un proces de bioremediere pasiv) i bioremedierea mbuntit
(cunoscut i ca biostimulare, implic aplicarea de microorganisme selecionate, nutrieni, donori de
oxigen, etc. pentru a accelera procesele naturale de biodegradare).
Dintre metodele ex-situ fac parte: biogrmezi (sisteme inginereti n care solul poluat
excavat este combinat cu amendamente, depus ntr-o grmad de compostare i nchis pentru
tratament), bioreactoare (sisteme inginereti n care contaminanii sunt degradai, ntr-un mediu
specific, cu ajutorul microorganismelor), compostarea (proces biologic controlat prin care
contaminanii organici din sol sunt convertii de ctre microorganisme, n condiii aerobe i
anaerobe n subproduse nevtmtoare stabilizate) i utilizarea terenurilor agricole.
(http://www.resolmet.utcluj.ro )
53
54
crescute n oricare din mediile experimentate comparativ cu martorii indic existena unui
efect.
o Plante i materiale pentru experimentare. Plantele pentru experimentare tebuie crescute
din semine nedecorticate. Orzul (Hordeum vulgare L.) din varietatea CV Triumph a fost
folosit timp de mai muli ani i se recomand n mod curent. De altfel, sunt corespunztoare
i alte varieti de orz (nedecorticat), cu condiia s aib aceleai caliti de germinaie i de
alungire a rdcinilor.
o Raportul experimentului. Raportul experimentului include urmtoarele informaii:
o referire la aceast parte a ISO 11269;
o metod de a identifica cu precizie solul i proveniena sa;
varietatea de semine sau detalii despre alte specii de plante folosite;
condiii de cretere;
lungimea celei mai lungi rdcini a fiecrei plante din vasele care conin
nisip,
sol,
proba experimentat;
o descriere a aspectului vizual al solului i terenului, dac aceasta este
disponibil;
orice alte efecte observate;
rezultatele experimentului ( sub forma unui tabel), care s includ
tratamentul, numrul de repetiii i lungimea celei mai lungi rdcini a
fiecrei plante, i dac inhibarea creterii este statistic semnificativ sau nu,
sau nivelul de semnificaie pentru orice inhibare de cretere observat.
o Prelucrarea statistic a rezultatelor. Pentru a stabili limitele de ncredere pentru medii
s
Limita superioar
= Media + t
n
Limita inferioar
= Media t
s
n
n care:
s: abaterea standard
n: numrul de msurri
Pentru a estima diferenele semnificative ntre vase, se folosete ecuaia:
t=
x A xB
s A2 s B2
+
n A nB
stadii de cretere i dezvoltare ale unei varieti de plante terestre. Metoda este aplicabil i
pentru compararea unor soluri de calitate cunoscut i necunoscut.
o Definiii:
o
LOEC concentraia cea mai joas utilizat n test la care se observ c substana are un efect
statistic semnificativ
NOEC concentraie de testare imediat sub LOEC care cnd se compar cu martorul nu se
obine o diferen statistic semnificativ
Testele cu alge
Deoarece formele de existen ale metalelor i implicit toxicitatea lor sunt afectate de mai
muli factori fizico-chimici ce se schimb o dat cu condiiile de testare. Pe lng formele de
existen ale metalelor toxicitatea este afectat de factori chimici sau fizico-chimici precum raportul
dintre Ca+ i Mg+ i mai ales pH, pentru c ionii de hidrogen concureaz cu metalele grele pe
suprafaa algelor. O problem particular n testele cu alge este c adiia de fier, microelemente i
chelai la mediul de cretere reprezint o cerin nutriional. Aceti constitueni ai mediului
inevitabil schimb toxicitatea metalelor grele. Creterea algelor aduce noi modificri ale toxicitii
metalelor grele. n cele din urm metalele sunt absorbite n celulele algelor, cauznd o scdere a
toxicitii la nivele ridicate de toxicitate. n ciuda acestor dificulti, cu o optimizare adecvat, teste
cu alge asupra metalelor grele pot fi realizate n condiii n care influena sistemului de testare e
minim. Factorii cheie sunt ca biomasa de alge s fie meninut la un nivel redus, influena
chelailor, afierului i a microelementelor s fie minimizat i pH-ul s fie bine controlat.
Modificarea procedurilor testului de inhibiie a creterii algelor pentru a testa materiale ce
conin metale grele
Mediul de cretere trebuie modificat pentru a minimiza efectul chelailor n primul rnd
prin minimizarea concentraiei acestora i n al doilea rnd prin utilizarea unor cantiti echilibrate
stoichiometric de chelai i respectiv fier plus microelementele Zn, Co i Cu. Ca i chelat EDTA nu
este ideal pentru a fi utilizat n teste de toxicitate a metalelor pentru c FE(III)EDTA este un
complex ce se fotodescompune parial i pentru c EDTA formeaz complexe foarte puternice nu
doar cu fierul ci i cu alte metale i constantele de stabilitate exced cu mult pe cele ele complexelor
cu chelai naturali din ap. Acidul citric este un chelat alternativ.
Pentru a reduce densitatea de biomas algal final, perioada de testare a toxicitii
metalelor trebuie redus la dou zile.
57
Controlul strict al pH-ului este foarte important n testul cu metale deoarece pH-ul
influeneaz att forma de existen a metalului ct i toxicitatea acestuia.
Algele consum CO2, ceea ce ar duce la scderea pH-ului. Astfel controlul pH-ului n
culturile de alge este n primul rnd o problem de asigurare a unui transport faz gazoas/ap al
CO2 ce s depeasc cererea de CO2. Avnd doar bicarbonatul i aerul ca i sisteme tampon pot fi
obinute valori ale pH-ului ntre 7 i 9. Uneori adiia de tampoane sintetice poate fi de ajutor n
controlul strict al pH-ului mai ales la valori neutre sau mai mici. Aa numitul tampon biologic
zwitterionic conine grupri ionizabile att pozitive ct i negative i nu interfereaz cu procesele
chimice i biochimice implicate n creterea algelor (Raport RESOLMET, 32161/2008).
X0
58
1,683 g/g
1,547 g/g
1,437 g/g
1,190 g/g
- Thlaspi (pungulia)
Specii indicatoare: Lolium perenne i Lolium multiflora sunt foarte adecvate pentru a fi utilizate ca
indicatori de expunere. Aceste plante sunt frecvente n parcuri, pe marginea drumurilor, a
oselelor. Pe lng metale grele, ele sunt indicatori pentru S i F.
Alte specii ierboase utilizate ca bioindicatori pentru metale grele sunt:
- Melandrium album (opai) - (Pb)
- Thlaspi (punguli) - (Ni, Zn)
59
1027
874
806
754
2112
1483
2458
2076
190
300
240
233
Celtis occidentalis
565
1239
214
596
1194
262
451
1101
289
399
660
193
Ni
61
Cerine de
fertilitate
medii
medii
mici
medii
mari
medii
Tolerana
la pH
neutru,
calcaros
neutru,
calcaros
acid, neutru
neutru,
calcaros
neutru,
calcaros
neutru,
Tolerana Tolerana fa
la secet
de
temperatur
medie
rece, cald
Cultivatori
putini
mica
rece, cald
putini
medie
rece, cald
multi
medie
rece, cald
putini
medie,
rece, cald
multi
medie
rece, cald
Specie
63
(trs)
Deschampsia flexuosa (trs
mica)
Festuca arundinacea (piu
de livezi)
Festuca ovina (piuul oii)
mici
calcaros
acid
mare
rece, cald
mari
neutru, acid
mica
rece, cald
mici
acid, neutru
mare
putini
mici
mare
medii
medie
medie
rece, cald
multi
medie
rece, cald
multi
mici
neutru,
calcaros
neutru,
calcaros
neutru,
calcaros
neutru,
calcaros
acid, neutru,
calcaros
frig, rece,
cald
frig, rece,
cald
rece, cald
mare
frig,rece,
cald
multi
medii
medii
salbatica
Specie
salbatica
multi
multi
putini
Preferine
pentru sol
N,C
Preferine pentru
climat
cald
Existena n flora
Romaniei
-
A,N
AN
A,N
N,C
cald
rece, cald
cald
cald
++
+
A,N
A,N
A,N
N,C
cald
cald
cald
rece, cald
ornamental
++
A,N,C
N,C
A,N,C
rece, cald
rece, cald
rece, cald
cultivat
++
++
A,N,C
cald
++
A,N,C
A,N
N,C
cald
cald
rece
cultivat
++
A,N,C
N,C
rece
rece, cald
++
++
A,N,C
rece
64
Rspndire
in Romnia
++
65
Specii de arbori
Rspndire
in Romnia
++
++
+
+
++
++
cultivat
cultivat
++
cultivat
++
cultivat
++
++
++
++
++
++
++
++
+
cultivat
Arbuti.
Posibilitatea de alegere pentru arbuti este de asemenea imens. Aici nu se pune problema
unei utilizri comerciale, specific alese vor fi cele care au nsuirile cele mai adecvate fa de condiiile
terenului i care ndeplinesc bine rolul de fixare.
Dintre arbutii foarte valoroi, cu capacitatea de a fixa azotul sunt leguminoasele Ulex,
Sarothamnus i eleagnaceele Eleagnus (slcioara) i Hippofa rhamnoides (ctina alb). Ali
66
arbuti utilizai adesea pentru fixarea terenurilor degradate i pentru halde sunt sngerul (Cornus
sanguinea), cornul (Cornus mas), lemnul cinesc (Lygustrum vulgare), drobul (Cytisus
nigricans), drmozul i clinul (Viburnum lantana, Viburnum opulus), etc.
Sortimentul de specii forestiere care asigur rezultate bune pe halde este bogat, speciile
utilizate depinznd de condiiile staionale existente sau create prin lucrrile de ameliorare.
Speciile amelioratoare de sol (fixatoare de azot)
Speciile amelioratoare de sol (fixatoare de azot) precum salcmul (Robinia pseudacacia),
aninul (Alnus), slcioara (Eleagnus) i ctina alb (Hippofa rhamnoides) au dat rezultate
bune n toate cazurile. Ele au contribuit i la ameliorarea materialului de sol din halde n timp relativ
scurt i au stimulat creterea altor specii lemnoase cnd au fost cultivate n amestec cu acestea.
Dintre celelalte specii forestiere folosite pe halde au dat rezultate bune sau satisfcatoare
(Traci, 1985, Oros, 2002):
o pinii, in special pinul silvestru (Pinus sylvestris), pe haldele miniere i industriale cu
depozite grosiere i nisipoase, cu pH sub 7, i
o pinul negru (Pinus nigra) pe haldele calcaroase sau argiloase cu pH peste 7;
o plopii, mai ales plopul alb (Populus alba) i plopul tremurtor (Populus tremula),
i
o slciile (Salix alba, Salix caprea, Salix incana, etc.) pe haldele formate din
depozite nisipoase, din regiuni mai umede sau cu posibiliti de irigare;
o frasinul (Fraxinus excelsior), paltinul (Acer), cireul pdure (Cerasus avium),
o ulmul (Ulmus) i frasinul de Pensylvania (Fraxinus pensylvanica), ararul
ttresc (Acer tataricum) i altele, pe haldele cu condiii staionale ceva mai
favorabile sau pe care s-a aternut un strat de pmnt fertil;
o stejarul i stejarul rou (Quercus robur i Quercus borealis) pe haldele cu cele
mai bune condiii de sol;
o mesteacanul (Betula verrucosa), oetarul fals (cenuerul) (Ailanthus altissima),
o ararul american (Acer negundo), mojdreanul (Fraxinus ornus),etc. pe haldele cu
condiii staionale mai dificile (mesteacanul in zone mai umede pe haldele acide,
iar celelalte specii pe haldele din zone mai calde i secetoase - mai ales
mojdreanul);
o lemnul cinesc (Ligustrum vulgare), sngerul (Cornus sanguinea) i a1i
arbuti, pe diferite tipuri de halde, in amestec cu speciile menionate mai inainte.
Impdurirea haldelor
Analiza situaiei unor halde din Romnia i a datelor din literatura de specialitate l-au
condus pe Traci,1985 la concluzia c pentru caracterizarea codiiilor staionale ale haldelor i pentru
clasificarea staiunilor de halde, trebuie s se ia n considerare urmtorii factori principali:
o condiiile generale fitoclimatice, cu distingerea urmtoarei serii de tipuri de halde:
halde din regiuni de cmpie i coline, din step i silvostep;
halde din regiunile de dealuri din subzonele stejarului i gorunului;
halde din regiuni montane din subzonele fagului i molidului;
o proveniena materialului component, distingndu-se:
halde miniere,
halde industriale,
halde menajere, etc.;
o caracteristicile depozitelor din halde, distingndu-se:
halde din fragmente de roc grosiere (pietri, pietre, bolovani cu sau fr
material fin),
halde din materiale fine de roc (nisip, pulberi),
halde din materiale foarte fine (argil),
halde din cenu,
halde din zgur,.
67
Acoperirea cu un strat de sol fertil de 20-25 cm grosime este o metoda general valabil, util i
n cazul mpduririlor, ns foarte rar este utilizabil din considerente de costuri i posibiliti
de procurare a cantitailor de sol necesare.
Acoperirea cu alte materiale, nlocuitori de sol, precum nmoluri dragate din canale de irigaie
sau de desecare ori din canalele portuare, etc., nmoluri de la staiile de epurare municipale a
apelor menajere, este o alternativ adesea fezabil. Fiind bogate n materie organic, acestea
amelioreaz nsuirile materialului superficial din hald i aduce un aport de elemente
nutritive.
Mulcirea cu paie, ramuri, scoare, frunze, rumegu sau turb este o alt posibilitate de
ameliorare a materialelor, avnd efect pozitiv i in prevenirea eroziunii.
Alte lucrari de ameliorare a condiiilor de sol sunt cele de combatere a aciditii prin
tratare cu var sau calcar i de fixare sau neutralizare a substanelor nocive, fie prin spalarea
srurilor solubile, fie prin fixare cu gips, fosfogips sau alte tratamente.
La organizarea activitii de instalare a vegetaiei forestiere se recomand ca din speciile
tipice pentru fiecare staiune de halde s se aleaga 2 - 3 specii ntre care s fie cel puin una dintre
cele amelioratoare de sol (fixatoare de azot), respectiv salcm, anin sau catina alb. Amestecul de
plante indicat este cel in buchete de 50 - 100 m 2 sau in benzi pure alterne, late de 5-10 m.
Ctina alb i ali arbuti pot fi folosii i n culturi n amestec intim cu speciile de talie mare
sau in rnduri pure alterne cu acestea.
Se va evita amestecul intim, n rnduri alterne sau n buchete mici de pin cu salcm, anin
sau salcioar, deoarece foioasele menionate, avnd creteri mai mari in primii ani, copleesc i
elimind pinul din cultur. Unele specii ca salcmul i aninul pot fi folosite i n culturi pure.
Pentru taluzuri, dup realizarea lucrrilor de consolidare specifice, se va realiza plantarea
puieilor. Din sortimentul de specii recomandat se va alege o singur specie, evident, cea mai potrivit
condiiilor staionale. Cu deosebire, se utilizeaz n aceste cazuri specii fixatoare de azot precum
ctina alb, salcmul i aninii. Foarte rar, pentru a realiza efecte peisajistice, se utilizeaza
combinaii de dou specii. Desimea culturilor va fi 0,3-1m x 2-3m, cea mai mica desime va fi n
cazul plantaiilor de salcm (0,8-1m x 2-2,5 m) iar cea mai mare n cazul plantaiilor n cordon de
ctin alb (0,3-0,5m x 2-2,5m).
Gazonarea prealabil sau concomitent cu plantarea este foarte recomandat pentru
prevenirea eroziunii, utilizndu-se n special lupinul peren pentru nverzirea taluzurilor.
Intreinerea. Fertilizare i amendare. Acestea sunt la fel de importante pentru arbori ca i
pentru ierburi i leguminoase. Dac deficienele i pH-ul nu sunt corectate la inceput i
meninute la valori normale in continuare, creterea arborilor va fi slab. Dup mai muli ani,
copacii vor nrdcina suficient de adnc pentru a ajunge s furnizeze nutrieni in cantitile
necesare, dar creterea iniial slab poate conduce la moartea copacilor prin vandalism,
datorit animalelor ori prin competiia cu vegetaia inconjurtoare. Dac stocul de sol fertil de la
plantare este bine fertilizat i aduce un aport de nutrieni pentru primul an, principala grij va fi
acordat pentru anii al doilea i al treilea. Nutrienii limitativi vor fi, ca i in cazul ierburilor, azotul
i fosforul.
Vegetaia nsoitoare. Intruct copacii sunt plantai la densitate mic, o mare parte din
teren ramne neprotejat i atunci un covor vegetal poate fi important. Acesta nu este necesar
dac terenul este plat, dar in pantele expuse la eroziune, covorul vegetal devine esenial. Acesta
poate fi realizat dintr-un amestec de graminee cu leguminoase sau numai leguminoase, acestea din
urm sunt valoroase i prin fixarea azotului. Dar covorul vegetal va intra in competiie pentru
nutrieni i apa cu tinerii arbori i chiar pentru lumin dac arborii sunt foarte mici. Astfel, speciile
ierboase trebuie alese cu grij, iar rata de nsmnare trebuie s fie foarte mic, mult mai mic
dect in cazul pajitilor. Chiar i aa, poate deveni necesar ca vegetaia s fie combtut in jurul
arborilor, prin tiere sau erbicidare in anul al doilea i al treilea. Astfel de lucrri sunt obinuite
pentru plantaiile forestiere pe terenurile erodate, la acestea se vor aduga i alte lucrri de
intreinere specifice in funcie de insuirile staiunii de hald, dupa Oros, 2002.
(http://www.resolmet.utcluj.ro )
69
gruparile incarcate negativ de pe peretele celular (Fig. 1), cu sarcina negativa prezenta pe straturile
polizaharidice care inconjoara peretele celular (Fig. 2) sau cu sarcinile negative ale polizaharidelor
eliberate in mediul inconjurator (apa) (Fig. 3), (dupa Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti,
2009).
Fig. 3. Interactia cationilor metalici cu sarcinile negative ale polizaharidelor eliberate in mediu (apa) (dupa
Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009).
Al
Cd
Cyanobacterii
/ Sorbia (mmol g-1)a sau
Eficiena ndeprtrii metalului(%)b
Spirulina platensis / 0.0045a,c
Spirulina maxima / 0.0145a,c
Mastigocladus laminosus / #113 0.0284a,c
Anabaena nodosum
/ 0.087a
Anaabena nodosum
/ 0.81a
Anabaena sp. BCC
/ 2 85b
Anabaena variabilis NIES / 23 57b
Anacystis nidulans n.r.
Aphanocapsa halophytia n.r.
Calothrix marchica BCC / 4 57b
Calothrix marchica BCC / 6 87b
Calothrix parietina TISTR 8093 / 0.70a
Calothrix sp. BCC10 / 89b
Calothrix sp. TISTR 8130 82b
Chlorococcus paris n.r.
Cylindrospermum sp. BCC / 20 65b
Gloeocapsa sp. BCC / 25 96b
Gloeothece magna 3.78a,c
Hapalosiphon hibernicus BCC 27 90b
Hapalosiphon sp. BCC 30 62b
Hapalosiphon welwitschii BCC 34 75b
Lyngbya hieronymusii BCC 41 97b
Lyngbya spiralis BCC 42 80b
Lyngbya taylorii 0.37a
Mastigocladus laminosus #113 0.0048a,c
Mastigocladus sp. BCC 36 78b
Nostoc rivularis n.r.
Microcystis aeruginosa f. aeruginosa NIES 44 95.3b
Microcystis aeruginosa f. fl os-aquae C3-40 1.23a,c
Nostoc linckia n.r.
Nostoc sp. BCC 50 94b
Nostoc commune. BCC 76 69b
Nostoc micropicum BCC 77 72b
Nostoc piscinale. BCC 47 82b
Nostoc punctiforme BCC 48 73b
Nostoc punctiforme BCC 49 84b
Oscillatoria amoena BCC 53 83b
Oscillatoria jasorvensis BCC 56 94b
Oscillatoria agardhii BCC 52 90b
Phormidium angustissimus BCC 68 87b
Phormidium molle BCC 7193 95b
Phormidium valderianum BDU 30501 83b
Rivularia sp. BCC 80 88b
Spirulina platensis 0.0035a,c
Spirulina maxima 0.0017a,c
Spirulina platensis 0.33a
Spirulina platensis 1.07a
Spirulina vulgaris 1.00a
Stigonema sp. BCC 90 89b
Synechococcus sp. PCC 7942 0.06a
Tolypotrix tenuis TISRT 8063 0.80a
Tolypotrix tenuis 0.18a
Tolypotrix tenuis BCC 100 53b
Co
Cr
Fe
Cyanobacterii
/ Sorption (mmol g-1)a sau
Eficiena ndeprtrii metalului(%)b
Oscillatoria angustissima / 0.26a
Spirulina sp.
/ 0.0002a
Phormidium valderianum BDU / 30501 n.r.
Aphanocapsa halophytia 0.29a
Cyanospyra capsulata 0.36a
Cyanothece CE 4 1.83a
Cyanothece ET 5 0.59a
Cyanothece PE 14 0.26a
Cyanothece TI 4 1.29a
Cyanothece VI 13 0.93a
Cyanothece VI 22 1.08a
Cyanothece 16Som 2 3.77a
Nostoc PCC 7936 0.07a
Spirulina sp. 0.19a
Synechococcus sp. PCC 7942 0.10a
Phormidium laminosum 94.8b
Mn
Ni
72
Pb
Zn
Hg
Sn
Cu
73
74
75
Bibliografie :
Doris Bohme, Susanne Hufe, 2003. Research for the Environment. 4th Edition (ISSN 0948-6925), 134 pages. EDS.:
Doris Bohme, Susanne Hufe, iunie 2003. Published by UFZ Centre for Environmental Research Leipzig-Halle,
http://www.ufz.de/index.php?en=2293
CRISTEA V., HODISAN I., POP I., EMILIA BECHIS, GROZA G., GALAN P., 1990. Reconstrucia ecologic a
haldelor de steril minier. I. Dezvoltarea vegetaiei spontane. n Contribuii botanice, Univ. din Cluj-Napoca, Grdina
botanic: 33-38.
Cunningham, S.D. and Berti, W.R., 1993. Remediation of contaminated soils with green plants: An overview. In Vitro
Cell. Dev. Biol. (Tissue Culture Association), 29, 207212.
Ensley, B.D., 1995. Will plants have a role in bioremediation? In: Fourteenth Annual Symposium 1995 in Current
Topics in Plant Biochemistry, Physiology and Molecular Biology, 1995.
Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009. Heavy Metal Removal with Exopolysaccharide-Producing
Cyanobacteria. In Heavy Metals in the Environment (2009), eds.: Lawrence K. Wang, J. Paul Chen, Nazih K.
Shammas, Yung-Tse Hung. CRC Press. Taylor & Francis Group. pp 89-123.
Peter Kuschk, Arndt Wiener, Roland Mller, Matthias Kstner, 2005. Constructed Wetlands Treating Wastewater
with Cenoses of Plants and Microorganisms. Web page: www.phyto.ufz.de A Research Association at UFZ Centre
for Environmental Research Leipzig-Halle. In the Helmholtz Association. Published by UFZ Centre for
Environmental Research Leipzig-Halle. Printed by System Print Medien GmbH Dezember 2005
KISS T., DRAGAN-BULARDA M., DANIELA PACA, 1993. Enzimologia mediului nconjurtor. Enzimologia
solurilor tehnogene.Vol. II. Ed. CERES, Bucureti.
Kumar, P.B.A.,1995. Phytoextraction: The use of plants to remove metals from soils. Environmen. Sci. Technol., 29,
12321238.
MALSCHI Dana, 2009. Biotehnologii si depoluarea sistemelor ecologice. (Tehnologii de depoluare biologica,
Tehnologii de bioremediere. Reconstructia ecologica). Note de curs si aplicatii practice. Manual in format electronic
Facultatea de Stiinta Mediului, Universitatea Babes-Bolyai Cluj-Napoca. Editura Bioflux, Cluj-Napoca. 2009, P. 200.
978-606-92028-5-2. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Note de curs si aplicatii practice. Manual
in format electronic. Facultatea de Stiinta Mediului, Universitatea Babes-Bolyai. Editura Bioflux, Cluj-Napoca, 2009,
http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
634
pg.,
plane
color,
ISBN
978-606-92028-4-5.
http://www.editura.bioflux.com.ro/docs/malschi2.pdf/
Muntean, V., 1995-1996, Bacterial indicator of mud quality, Contrib. Bot., 73-76.
Muntean, V., Crian, R., Paca, D., Kiss, S., Drgan-Bularda, M., 1996, Enzymological classification of salt lakes in
Romania, Int. J. Salt Lake Res., 5 (1), 35-44.
76
Muntean, V., Paca, D., Crian, R., Kiss, S., 2001, Potenialul enzimatic n sterilul de la o min de zinc i plumb supus
recultivrii biologice, Lucrrile celei de a XVI-a Conferine Naionale pentru tiina Solului, Publicaiile Societii
Naionale Romne pentru tiina Solului, 30B, 65-73.
Muntean, V., Nicoar, A., Groza, G., 2005, Microbiological research on iron mine spoils submitted to bioremediation,
Contrib. Bot., 40, 259-266.
Muntean, V., Groza, G., 2006, Bacterial potential of the experimental plots installed on the iron mine spoils in Iara,
Contrib. Bot., 41 (2), 101-107.
Muntean, V., 2007, Bacterial and enzymatic indicators of water and sediment pollution in the Arie river, Stud. Univ.
Babe-Bolyai, Biol., 52 (1), 87-92.
Muntean, V., Groza, G., 2007, Bacterial and enzymatic potential of the experimental plots installed on the iron mine
spoils in Iara, Stud. Univ. Babe-Bolyai, Biol., 52 (2), 101-108.
OROS, V., 1996, Aspecte ecotoxicologice ale polurii apelor cu metale grele. n vol.: Cercetri noi in mineritul i
metalurgia neferoas". Lucrrile sesiunii tiintifice 35 ani de nvmnt Superior in Baia Mare 17-19 oct. Vol. III,
"Ingineria Mediului", 133 - 139.
OROS V., 2000. Recultivarea biologic a terenurilor degradate datoril activitii miniere de suprafa i depozitrii
deeurilor. n DENU I. (eds.), Reabilitarea ecologic i managementul siturilor degradate de industria minier. Ed.
Univ.de Nord, Baia-Mare, 2000.
OROS V., 2002. Biomonitoring. In Poluarea si monitorizarea mediului, Ed..Univ.Transilvania, Brasov. p.60-73.
OROS VASILE, 2002. Reabilitare ecologic a siturilor degradate industrial. Ed. Univ. Transilvania Braov. Cap.IV.
Recultivarea biologica a terenurilor degradate p.134-153
RAMADE, F., 1987, Precis d'Ecotoxicologie. Ecologie Fondamentale. Mc Grow Hill. Ramade, F., 1992,Precis
d'Ecotoxicologie. Maisson, Paris.__
Raskin, I., 1994. Bioconcentration of metals by plants. Environ. Biotechnol., 5, 285290.
Salt, D.E.1995. Phytoremediation A novel strategy for the removal of toxic metals from the environment using plants.
Biotechnology, 13, 468474.
Nazih K. Shammas, 2009. Management and Removal of Heavy Metals from Contaminated Soil. In Heavy Metals in
the Environment (2009), eds.: Lawrence K. Wang, J. Paul Chen, Nazih K. Shammas, Yung-Tse Hung. CRC Press.
Taylor & Francis Group. Boca Raton London New York. Pp.381-430
*** http://www.resolmet.utcluj.ro. Raport RESOLMET, contract 32161 / 2008)
*** http://www.dsmz.de/strains/degradtn.htm. DSMZ - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen
GmbH, Braunschweig, Germany. DSMZ - Degradation (including Fermentation, Oxidation, Utilization)
77