=colecie de clone de ADN recombinant, care

conine toate secvenele provenite dintr-o

anumit surs: ADN genomic (nuclear) sau ADN
complementar (ADNc)
u extragerea ADN dintr-o celul somatic
(care conine informaia genetic cuprins n
genomul individului)
u fragmentarea prin digestie cu ajutorul unei
anumite enzime de restricie fragmente
de ADN de o anumita marime
u inserate separat ntr-un vector
=o molecul natural de ADN utilizat pentru
transportul secvenelor de ADN exogen ntr-o
celul gazd.
u Este capabil s se replice activ i
independent de genomul gazdei (de aceea se
mai numete i replicon), din care ulterior va
fi izolat n form pur.
u Vectorul care include un fragment de ADN
exogen se numete vector recombinant
 Vectori Descriere Dimensiuni
AND inglobat
Plasmide ADN bicatenar circular Pana la 10kb
extracromosomial, se gseste n bacterii,
crora le confer rezistena la diferite
antibiotice i metale grele.
Bacteriofag Virusuri care infecteaz i distrug Pana la 20kb
bacteriile
Cosmide Vectori artificiali: Plasmid+ un segment Pana la 50kb
de fag
Cromosomi BAC Deriv din plasmidul de fertilitate din 100-1000kb
artificiali E.Coli
YAC Deriva din drojdia de bere; plasmide care 100-1000 kb
pastreaza centromerul i telomerele
originale
u cuprinde copiile de ADNc ce corespund
tuturor moleculelor de ARN mesager
dintr-o anumit celul
u sunt folosite mai frecvent dect cele de
ADN genomic deoarece clonele obinute
corespund numai secvenelor codante ale
genei (fr introni), deci sunt mult mai
scurte
u se face n mai multe etape
u se obine ARN total din celul i apoi se
separ ARNm de celelalte tipuri de ARN
u produc copii de ADNc corespunztoare
fiecrui tip de ARNm cu ajutorul
transcriptazei inverse
u se inser n vectori de tip bacteriofag
lambda