Metode în vivo şi biomarkeri pentru studierea acţiunii antispastice

1.Introducere

Muşchii netezi sunt formaţi din miocite care se află în contact între ele de-alungul unei
zone ce reprezintă circa 5% din suprafaţa membranară, realizând punţi citoplasmatice
intercelulare prin care se transmite excitaţia de la un miocit la altul, din aproape în aproape, în
interiorul unui muşchi neted. Muşchii netezi gastro-intestinali au inervaţie dublă
parasimpatică (stimulatoare) şi simpatică (inhibitoare).

Numeroşi factori (chimici, fizici, mecanici, inflamaţii, tumori) acţionând direct asupra

muşchilor netezi digestivi la nivelul mucoasei digestive sau la distanţă pot produce contracturi
spastice ale acestor muşchi. Acestea sunt însoţite întotdeauna de dureri de diferite intensităţi,
de durată mai mare sau de tip colicativ, de tulburări motorii şi uneori secretorii.

  Antispasticele reprezintă un grup de medicamente mult folosite în terapeutica

pentru înlăturarea spasmelor muşchilor netezi ai aparatului digestiv şi tractului genito-urinar,
care apar în inflamaţii, litiază, tumori sau înaintea investigaţiilor endoscopice în general. În
cazurile acute şi în formele clinice grave, pentru un efect mai intens se administrează
injectabil. În cazurile cronice şi în formele clinice medii şi uşoare se administrează oral. Multe
antispastice pot fi administrate rectal, sub formă de supozitoare, în cazurile de neutilitate a
căilor orale (voma, convulsii, comă) şi în pediatrie. Sindromul intestinului iritabil, colica
biliară, renală, gastrita, colita și pancreatita sau dismenoreea pot afecta un număr mare de
pacienți și de obicei necesită un tratament antispastic pentru ameliorarea simptomelor.  

Clasificare in funcţie de tipul de mecanism:

 -Neurotrope

-Anticolinergice antimuscarinice (parasimpatolitice) de tip atropinic

 -Ganglioplegice

 -Miotrope de tip papaverinic

1
a) Antispastice neurotrope parasimpatolitice

- naturale: atropina

-sinteză: butilscopolamoniu, propantelina, oxifenoniu, oxifenciclimina, fenpipramida,

otilonium, oxibutinin, propiverina)

b) Antispastice miotrope

- naturale: papaverina

-sinteză- antispastice pure: mebeverina, drotaverina, pitofenona

- antispastice – analgezice: noraminofenazona (metamizol)

Clasificarea antispasticelor neurotrope în funcţie de teritoriul predominant deacţiune:

 -Antispastice digestive (atropina, butilscopolamoniu, propantelina,oxifenoniu,

otilonium, fempipramida)

-Antispastice urinare (oxibutinin, propiverina)

(1,2)

2.Metode în vivo

În vivo se referă la experimentele realizate într-un organ, sau pe un țesut al

unui organism viu. Testele pe animale și studiile clinice sunt două forme de cercetare în vivo.
Un test efectuat in vitro înseamnă că este efectuat în afara unui organism viu și se face de
obicei țesuturi, organe sau celule izolate.

2.1.Efectele în vivo ale diferitelor medicamente antispastice asupra vezicii urinare la şobolan
utilizând contracțiile induse de aplicația aplicată locală KCl

Contracțiile provocate local de KC1, induse asupra vezicii urinară, au fost inhibate
doza-dependent de administrarea i.v de antagoniști ai calciului cum ar fi nifedipina,
nicardipină și verapamil. Celelalte spasmolitice testate (oxibutinină, terodilină, flavoxat și
papaverină), au prezentat o inhibare a contracțiilor non-dependente de doze. În vivo, potența
antagoniștilor de calciu a fost legată de activitatea lor în vitro, în timp ce activitatea celorlalte

2
spasmolitice a fost superioară în vivo.

Pentru a evalua efectele potențiale ale noilor entități chimice asupra contractilității
vezicii urinare, sunt necesare modele adecvate in vivo pe animale (șobolan, cobai, câine,
iepure, porc). Metoda se bazează pe măsuratori cistometrografice prin înregistrarea vezicii
urinare, detectată după implantarea unui cateter transuretral sau transvesical. Împreună cu
aceste tehnici sofisticate, au fost dezvoltate și alte modele de screening în vivo a compușilor
spasmolitici pe baza efectelor spasmogene induse de mai multi agoniști obișnuiți utilizați în
studiile in vitro și administrați intravenos sau topical pe vezica expusă la animalele
anesteziate.

Animalele au fost anesteziate cu uretan intramuscular (1,5 g / kg), și printr-o incizie

mediană a abdomenului, vezica a fost expusă și pregătită pentru înregistrarea răspunsului.O
vena jugulară a fost canulată pentru administrarea medicamentelor, și ambele uretere au fost
legate pentru a preveni descărcarea renală și debutul contracțiilor de golire datorate umplerii
vezicii urinare.Vezica a fost inițial golită de presiunea manuală ușoară și a fost apoi umplut
prin cateter cu 0,2 ml de soluție salină preîncălzită (37 ° C). Capătul liber al cateterului era
conectat la un traductor de presiune, iar modificările de presiune au fost amplificate și
înregistrate de un înregistrator Battaglis-Rangoni. Vezica a fost menținută la o temperatură
constantă și umidificată prin picurare continuă cu soluție salină preîncălzită. Au fost lăsate să
se echilibrează timp de 15 minute, apoi contractilitatea organului a fost testată prin picurare cu
KCl. După contracție, vezica urinară a fost spălată cu 0,4 ml de soluție salină, apoi s-au
repetat contracțiile la fiecare 10 min. La sfârșitul experimentelor, "viabilitatea" vezicii urinare
a fost evaluată prin injectare intravenoasă de 100mg / kg albastru Evans în soluție salină
0,9%; datele experimentale au fost acceptate numai atunci când vasele de sânge vezicale se
colorau în albastru în decurs de 20 de secunde. Efectele administrării intravenoase a
medicamentelor testate au fost verificate comparativ cu faza dinaintea administrarii. După au
fost obținute trei contracții comparabile (media a fost reținută ca valoare bazală),
medicamentele (sau soluția salină) au fost administrate i.v. și contractilitatea a fost retestată la
fiecare 10 minute timp de 1 oră. Efectele medicamentelor administrate i.v au fost evaluate
prin compararea AUC teoretic și AUC practic cu testul Student T pentru date pereche. La
administrarea de oxibutinină, s-a observat o inhibare relativ ridicată, dar nu dependentă de
doză, a contracțiilor induse de KCl. Inhibarea contracțiilor vezicii urinare prin aplicare locală
de KCl reprezintă, prin urmare o bună, cantitativă, sensibilă și reproductibilă metodă de
screening numai pentru medicamentele antispastice dotate cu activitate puternică antagonistă

3
a calciului, cum ar fi 1,4-dihidropiridinele (3).

2.2. Metode în vivo pe tractul gastro-intestinal

Biomarkerii sunt indicatori măsurabili ai proceselor normale, patologice sau

răspunsurilor farmacologice la o intervenție terapeutică. Pentru a îmbunătăți dezvoltarea și
utilizarea biomarkerilor, a fost propus un sistem de scoruri de diferite tipuri de biomarkeri, în
funcție de impactul acestora asupra dezvoltării medicamentelor. Modificările pozitive ale
biomarkerilor care implică ameliorarea bolii pot fi luate ca puncte finale în timpul dezvoltării
medicamentului.

Un model de boală ar trebui să imite cât mai mult posibil starea clinică a bolii și să
permită investigarea mecanismelor fiziopatologice neclare în vederea dezvoltării unor noi
opțiuni terapeutice potențiale. În ciuda diferențelor incontestabile între specii, modelele
animale reprezintă încă sursa majoră de informații despre sistemul biologic și oferă un mijloc
inestimabil de a studia interacțiunile fiziologice și biochimice complexe. Predictivitatea
modelului bolii va depinde în mod substanțial de eforturile de optimizare și validare științifică
a modelului, atât în ceea ce privește asemănarea, cât și transferabilitatea la om. Obiectivele
farmacologice și biomarkerii trebuie să fie reproduse și să fie susceptibile la modularea
farmacologică în modelul animal, pentru a se asigura că modelul este predictiv pentru un efect
terapeutic la om. Valoarea reală a translației unui biomarker este reprezentată de capacitatea
sa de a fi complet informativă după validarea sa în studiile clinice.Un model animal folosit ca
instrument de screening în dezvoltarea de medicamente ar trebui să reproducă în mod ideal
biomarkeri diferiți, oferind puncte multiple pentru a evalua pe deplin spectrul de activitate al
unui compus testat. Selecția exactă a punctelor finale joacă un rol esențial în asigurarea valorii
translaționale a modelelor de boală și ar trebui să țină cont de sensibilitatea și specificitatea
fiecărui criteriu final față de prezicerea activității. Deși dezvoltarea de noi medicamente
pentru tratamentul sindromul intestinului iritabil poate fi facilitată de modele animale
preclinice, trebuie să recunoaștem că un singur model de eficacitate suficient de predictiv încă
nu există și investigatorii au opțiunea de a utiliza mai multe modele pentru a evalua diferite
aspecte ale fiziopatologiei acestui sindorm.

Tehnicile utilizate pentru înregistrarea motilității sau măsurarea tranzitului la animale

pot să difere de tehnicile folosite la om, dar punctele finale sunt identice.

4
 Analiza motilității colonului implică inserarea intrarectală a unei coroane de sticlă de 2
până la 3 cm în colon în șoarecii treji și măsurarea timpului are nevoie pentru ca marginea să
părăsească anusul. Există o variabilitate mare care este probabil datorată defecării induse de
stres la șoareci.

Activitatea motorie a colonului la șoareci a fost evaluată utilizând metode pe bază de

apă și manometre. Deși aceste măsuri de presiune îmbunătățesc capacitatea de a evalua
motilitatea colonului dincolo de limitele testelor de expulzare a bilelor, ele rămân măsuri
izolate de contractilitate.

Există mai multe forme de stimulare și obiective pentru măsurarea durerii viscerale:

(a) stimuli mecanici: experimentele pot fi efectuate la șobolani treji sau anesteziați, iar cel mai
frecvent utilizat stimul al durerii la animale este distensia unui segment intestinal cu un balon
conectat la un barostat pentru a măsura concomitent complianța și răspunsul la stimulul
dureros.

(b) Stimuli chimici: infuzarea de glicerol în colonul de șobolan printr-un cateter implantat
cronic induce crampe abdominale. Acest model este considerat relevant deoarece glicerolul
intracolonic induce durerea abdominală la om și mimează durerea raportată de pacienții cu
sindromul intestinului iritabil.

(c) Alți stimuli: importanța altor modele de durere viscerală, cum ar fi "whriting test"
(constând într-o injecție intraperitoneală a unui compus iritant, cum ar fi acidul acetic).

În modelele menționate mai sus, este important să se facă distincția între evaluarea
alodiniei (răspuns scăzut la stimulul dureros) și hiperalgeziei (răspuns îmbunătățit la stimulul
dureros). Un obiectiv final utilizat în mod obișnuit este contracția mușchilor abdominali
indusă prin distensie rectală sau colorectală la șobolan; contracțiile sunt înregistrate prin
electromiografie.

În concluzie, selectarea unuia sau mai multor modele animale definitive de

hiperalgezie viscerală nu este posibilă și utilizarea rezultatelor obținute de la mai multe
modele de animale poate crește probabilitatea selectării medicamentelor eficiente pentru
dezvoltarea ulterioară. Deoarece durerea, deși o problemă majoră nu este singurul simptom
care afectează calitatea vieții, modelele animale care detaliază efectele medicamentelor asupra

5
motilității și sensibilității viscerale pot adăuga o dimensiune suplimentară evaluării noilor
compuși (4,5).

2.3.Teste în vivo pe oameni

S-a testat eficacitatea drotaverinei în sindromul intestinului iritabil. Studiul a fost unul
randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo. Pacienții cu simptome pentru această boală care
au îndeplinit criteriile au fost repartizați la grupuri de tratament cu drotaverină și placebo.
Fiecare pacient admis la studiu a primit la întâmplare un comprimat de drotaverină HCl 80 mg
sau placebo de trei ori pe zi timp de 4 săptămâni. Pacienții au fost rugați să revină o data pe
saptămâna timp de 4 saptămâni pentru analize. Datele zilnice ale simptomelor au fost
colectate folosind jurnalul pacientului în timpul perioadelor de tratament și urmărire. T test de
tip Mann-Whitney (two-tailed) a fost utilizat pentru a compara modificările simptomelor
dintre drotaverină și grupurile placebo. Rezultatul a fost considerat statistic semnificativ.
Intensitatea durerii a fost măsurată cu scala analog vizuală.

Scala vizuală analogică (SVA) este reprezentarea vizuală a amplitudinii durerii pe care un

pacient crede că o resimte. Această scală poate lua mai multe forme, atât ca o scală a durerii
cât şi ca o scală de calmare a durerii. Amplitudinea este reprezentată printr-o linie, de obicei
lungă de 10 cm, cu sau fără crestături în dreptul fiecărui centimetru. Lungimea optimă pentru
măsurarea durerii pare a fi de 10 cm. Un capăt indică lipsa durerii, în timp ce celălalt
reprezintă cea mai puternică durere imaginabilă. Scara este completată de pacient, care este
rugat să traseze un semn pe linia care reprezintă nivelul de durere resimţit. Distanța măsurată
în milimetri, pornind de la capătul care indică lipsa durerii, reprezintă măsurarea modalităţii
deosebite de cuantificare. Acest test se poate repeta cu ușurință în timp. SVA poate fi utilizată
pentru a evalua durerea în anumite momente, dar oferă rezultate mai sigure atunci când este
limitată la experimentarea durerii în timpul producerii acesteia, decât la amintirea unei
experienţe anterioare. O variantă a SVA este scala atenuării durerii, pentru care capetele
stabilesc tocmai gradul de atenuare. Pacientul este rugat să înscrie, pe linia dintre cele două
extreme, dimensiunea durerii comparativ cu un moment anterior: nicio atenuare corespunde
cu 0 la sută şi ameliorarea completă cu 100 la sută (6,7).

3.Metode în vitro utilizate pentru a evalua compusii antispastici

6
3.1. Modelul gastrointestinal

Intestinul subțire este caracterizat prin suprafața sa mare, ca urmare a pliurilor sale
circulare, vililor și microvililor. Este cea mai lungă parte a sistemului GI (aproximativ 5
metri) și 5% din lungimea sa inițială corespunde duodenului (caracterizat prin absența
mezenterului) și apoi jejunul (aproximativ 40% din lungimea intestinală), care se încheie cu
ileonul. Este organul de absorbție a nutrienților și al digestiei în organisme. Aceste funcții se
efectuează în principal în duoden și jejun.

Principalele tipuri de mișcări intestinale sunt segmentarea și peristaltismul.

Segmentarea este cea mai frecventă în intestinul subțire și constă în contracții ale stratului
muscular circular în zone foarte apropiate. Contracțiile durează între 11-12 și 8-9 contracții pe
minut în duoden și respectiv ileon. Atunci când această segmentare este ritmică, contracțiile
sunt alternate cu relaxare. Acest tip de mișcare are ca efect un mixaj al chimului (lichidul acid
care trece de la stomac la intestinul subțire) cu secrețiile digestive, permițând un contact optim
cu mucoasa intestinală. În cazul peristalisului, contracțiile secțiunilor succesive ale
mușchiului neted circular determină mișcarea conținutului intestinal în formă anterogradă.
Mișcarea scurtă peristaltică are loc și în intestinul subțire, dar mai puțin frecvent decât
mișcările de segmentare. Valurile peristaltice traversează rar mai mult de 10 cm de intestin și,
datorită frecvenței scăzute de propulsie a chimului, în această zonă se efectuează, de
preferință, digestia și absorbția. Peristaltismul este reglementat în principal de acțiunea
nervoasă a plexului mienteric (plexul Auerbach).

Diversitatea modelelor experimentale utilizate pentru testarea compușilor antispastci

este mare. Aceste modele folosesc în principal organe izolate sau animale vii. Odată ce
organul este extras din animal, motilitatea intestinală este evaluată prin administrarea unei
substanțe. Organelor extrase poate fi viabile ore întregi atunci când sunt plasate într-o soluție
fiziologică, cum ar fi Ringer, Jalon, Tyrode și Krebs.

Cele mai utilizate organe pentru a efectua studiile sunt ileonul, duodenul, inima,
traheea și jejunul porcusorului de guinea (cobai). Aceleași organe pot fi de asemenea extrase
din iepure, șoarece, șobolan și hamster. Este preferata prepararea ileonului.

Unele avantaje ale efectuării experimentelor in vitro sunt următoarele:

7
 (i) diferite substanțe pot fi evaluate în țesuturile proaspete fără factori de absorbție,
excreție metabolică sau interferențe datorate reflexelor nervoase;
(ii) (ii) este posibilă cuantificarea efectului produs de un medicament precis
determinat;
(iii) (iii) este mai ușor să se obțină curbe doză-efect , cum ar fi în mușchiul neted, unde
se măsoară contracția obținută sub influența unui spasm.

3.2. Ileonul de cobai si stomacul de sobolan

Ileonul este îndepărtat și tăiat în benzi de aproximativ 2 cm lungime și apoi plasat într-
o baie plină cu o soluție izotonică. Studiile electrofiziologice sunt efectuate prin înregistrarea
grafică a contracțiilor cu ajutorul unui traductor, care este calibrat cu 30 de minute înainte de
începerea experimentului. În general, pentru a determina curbele de răspuns la doză ale
substanței antispastice, este utilizat un interval de 0,01 până la 0,03 μM. La șobolani,
stomacul este îndepărtat și corpul și fundul stomacului sunt tăiate în benzi de aproximativ 5
mm x 15 mm și plasate pe o soluție caldă preîncălzită.

3.3.Compușii utilizați pentru a determina o activitate spastică

Principalii compuși utilizați sunt acetilcolina, atropina, BaCl2, carbacolul, histamina,

KCI și serotonina. Acetilcolina este un neurotransmițător în neuronii parasimpatici care
inervează intestinul. Răspunsul la acetilcolină este reglementat prin activarea celor două tipuri
de receptori muscarinici: M2 și M3. Activarea acestor receptori cauzează contracții prin
creșterea concentrației intracelulare de Ca2+ prin IP3 . Atropina este un antagonist competitiv
competitiv al receptorilor muscarinici de acetilcolină M1, M2, M3, M4 și M5.

Pentru producerea contracțiilor sunt folosite substanțe diferite. De exemplu, BaCl2

induce contracții prin mobilizarea Ca2 + legat de membrană, carbacolul este un medicament
agonist colinergic) care leagă și activează receptorii de acetilcolinei, histamina acționează fie
accelerând eliberarea acetilcolinei, fie interacționând supra-aditiv cu acetilcolina la nivelul
mușchiului neted, în timp ce KCl mărește activitatea canalului Ca2 + voltaj dependent prin
creșterea Ca2+ liberă intracelulară în mușchiul neted. Serotonina este, de asemenea, un
important neurotransmițător depozitat în principal în tractul digestiv, afectând activitățile
secretoare și motorii. La concentrații mari, acționează ca un vasoconstrictor prin contractarea
mușchiului neted endotelial direct sau prin potențarea efectelor altor vasoconstrictoare (8,9).

4.Biomarkeri pentru acțiunea antispastică

8
 Biomarkerii sunt critici pentru dezvoltarea rațională a terapiilor medicale, însă persistă
o confuzie semnificativă cu privire la definițiile și conceptele fundamentale implicate în
utilizarea lor în cercetarea și practica clinică. Definiția de bază a unui biomarker este: "O
caracteristică care este măsurată ca un indicator al proceselor biologice normale, procese
patologice sau răspunsuri la o expunere sau o intervenție." Această definiție cuprinzătoare
cuprinde intervențiile terapeutice și poate fi derivată din analize moleculare, histologice,
radiografice sau fiziologice. Atunci când nivelul unui biomarker se modifică ca răspuns la
expunerea la o substanță terapeutică, acesta poate fi numit un biomarker farmacodinamic / de
răspuns. Acest tip de biomarker este extraordinar de util atat in practica clinică cât și în
dezvoltarea terapeutică. Un medicament candidat pentru o afecțiune care nu modifică
parametrul cheie al acestui biomarker în studiile de fază 1 nu ar merita continuarea analizării.
Interpretarea biomarkerilor de farmacodinamică / răspuns nu este întotdeauna simplă.

Important în dezvoltarea antispasticelor pentru sindromul intestinului iritabil este

modularea motilității gastro-intestinale prin modificarea contracției musculaturii netede. Orice
factor care influențează motilitatea poate fi considerat biomarker.

Polipeptida intestinală vasoactivă

Stimularea receptorilor PIV va inhiba contracția gastro-intestinala, care justifică

evaluarea în continuare a acestor receptori ca o țintă farmacologică pentru a controla
motilitatea GI. Activarea receptorilor existenți pe musculatura netedă crește nivelurile de
AMPc care conduc la activarea protein kinazei A dependentă de AMPc. Aceasta inhibă
influxul de Ca2+ ceea ce a duce la relaxarea musculaturii netede.

Sistemul purinergic

Neuronii purinergici care utilizează purine cum ar fi ATP și adenozină, joacă un rol
major în funcția GI. ATP este principalul neuroransmiţător purinergic din sistemul nervos
enteric al șoarecilor și oamenilor acționând ca un inhibitor în celula musculară netedă.
Direcționarea acestor receptori ar putea au efecte modulare asupra tranzitului GI și asupra
secreției.

Colecistokinina (CCK) este un hormon peptidic eliberat postprandial de intestinul

subțire superior pentru a modula motilitatea vezicii biliare și golirea gastrică. CCK
stimulează contracția musculaturii netede și se agraveaza starea pacienților cu sindromul
intestinului iritabil.

9
Serotonina

Serotonina (5-HT) este o moleculă dominantă în GI, care prezintă caracteristicile unui
neurotransmitator și ale unui hormon local. Serotonina joacă un rol important în modularea
funcțiilor GI, inclusiv motilitatea. Antagoniștii 5-HT3 inhibă excitația neuronilor motori
colinergici și contracția ceea ce duce la o scădere a motilității GI.

Tahikinina

Tahikininele (TK) sunt în mare parte prezente în tractul GI în comparație cu alte

organe periferice. Receptorii TK , NK1 și NK2 , sunt prezent pe celule musclulare netede și
NK3 pe neuroni. Acest receptor TK are un rol dublu în modularea motilității GI:

1. rolul lui inhibitor asupra motilității intestinale care implică calea simpatică;

2. rolul său modulator pe nervii colinergici si efectului său direct asupra musculaturii
netede care sporesc motilitatea GI.

Inhibarea NK2 apare ca o intervenție sensibilă pentru a modula motilitatea GI la

pacienții cu sindromul intestinului iritabil și este unul dintre mecanismele prin care
medicamentul spasmolitic, bromura de otoliniu, reduce motilitatea GI.

Dopamina

Manipularea receptorilor dopaminergici poate fi o intervenție potențială pentru a

modula tranzitul GI și contracția musculară netedă. Activarea receptorului D1 previne
eliberarea ACh de către sitemul nervos enteric. Dopamina inhibă motilitatea tractului GI si
relaxează musculatura netedă.

Endocanabinoizii

Receptorii canabinoizi, CB1 și CB2, sunt localizați pe neuronii din sistemul nervos
enteric. Receptorii CB1 sunt distribuiți presinaptic pe neuronii motori colinergici și activarea
lor previne eliberarea ACh, scade astfel motilitatea GI. Studii recente sugerează că activarea
receptorului CB1 duce la inhibarea eliberării ACh, eliberarea PIV și a substanței P, inhibând
reflexele peristaltice. De asemenea, au existat dovezi despre interacțiuni între sistemele
serotoninergice și canabinoide; într-un studiu recent, un agonist cu acțiune duală a receptorilor
CB1 și 5-HT3 a fost capabil să reducă hiper-motilitatea și durerea la șoareci cu sindromnul
intestinului iritabil.

10
Sistemul opioid

Sistemul opioid contribuie la modularea activităţii secretorii a GI prin intermediul a

patru receptori majori de opioid miu(MOR), kappa (KOR), delta (DOR) și nociceptină
(NOR). Agoniștii MOR scad tranzitul și secreția GI. Bifalin, un analog de octapeptidă
encefalină, este un agonist al MOR / DOR care inhibă contracţiile colonulului și ileonului în
vitro și, de asemenea, motilitatea GI la șoarece. De asemenea, a fost eficient în ameliorarea
durerii abdominale.

Melatonina

Melatonina este un hormon sintetizat atât în glanda pineală cât și în celulele

enterocromafinice ale mucoasei GI. În afară de rolul său în reglarea dispoziției și gestionarea
tulburărilor de somn, melatonina are efecte de reglare asupra motilității GI, exercitând atât
excitație și efecte inhibitoare asupra musculaturii netede. Melatonina afectează motilitatea GI
într-o manieră dependentă de doză, dar mecanismul său exact este încă neclar. Doze mici de
melatonină stimulează motilitatea GI în timp ce dozele mari exercită efecte inhibitorii.

Glucagon-like peptide 1

Glucagon-like peptide 1 (GLP-1), un hormon incretinic, care este secretat din celulele
L ale intestinului postprandial, are un efect inhibitor semnificativ asupra motilității gastrice și
a intestinului subțire la doze mici atât la modelele animale cât și clinic. Un analog GLP-1 a
fost găsit pentru atenuarea durerii la pacienții care suferă de sindromul intestinului iritabil prin
intermediul capacității de relaxare a musculaturii intestinale.

Peptide active biologic

Peptidele biologic active includ neuropeptidul Y (NPY), peptida YY (PYY),

polipeptida pancreatică (PP); pot fi utilizate în reglarea funcțiilor GI . Toate peptidele
menționate au efecte inhibitoare asupra motilității și secreției GI.

Factorul de eliberare a corticotropinei

Sistemul de semnalizare a factorului de eliberare a corticotropinei (CRF) acționează în

colon și în creier. Sistemul CRF își exercită în principal efecte biologice prin interacțiunea cu
receptorii CRF1 și CRF2. Activarea CRF1 crește motilitatea colonului și afectează anumite
mecanisme implicate în fiziopatologia sindromului intestinului iritabil. Blocarea receptorului

11
CRF1 are efecte benefice ascupra relxării musculaturii netede intestinale.

5.Concluzii

În concluzie, testele în vivo pentru evaluarea activității antispastice sunt mai relevante
clinic dar au dezavantajul de a produce probleme etice, sunt scumpe și consumatoare de timp
în timp ce metodele de analiză în vitro sunt mai rapide, mai puțin costisitoare, repetabile și cu
diversitate mai mare, în acest sens existând mai multe experimente și date în literatură.

Biomarkerii sunt critici pentru descoperirile științifice, dezvoltarea noilor

medicamente. O abordare a dezvoltării biomarkerilor printr-o știință de reglementare
colaborativă care implică mai multe discipline este necesară pentru a se asigura că dezvoltarea
rațională, bazată pe dovezi ține pasul cu nevoile științifice și clinice.

Este importantă cercetarea de noi biomarkeri pentru studierea acțiunii antispastice și

pentru dezvoltarea de noi antispastice atât în sindromul intestinului iritabil cât și în alte
afecțiuni spastice (10,11).

6.Bibliografie

1. https://www.mdpi.com/1420-3049/24/9/1675/htm

2.Cristea AN - Tratat de farmacologie generală, Editura Medicală, București, 2006

3. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/105687199290018V

4. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3561631/

5. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5026190/

6. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4271014/

7. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5758179/

8. https://www.hindawi.com/journals/bmri/2018/3819714/

9. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4691965/

12
10. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5813875/

11.https://www.researchgate.net/publication/332067059_How_can_we_develop_better_antisp
asmodics_for_irritable_bowel_syndrome

13