Biochimie-Facultatea de Inginerie medicală 2022-2023

Lucrarea nr. 1
Acizi, baze, pH si solutii tampon
Introducere
Acizii si bazele sunt frecvent intalnite in viata de zi cu zi. Acizii sunt compusi care pot dona protoni
(ioni de hidrogen). Bazele sunt compusi care pot accepta protoni. Aceasta clasificare este cunoscuta ca teoria
Bronsted –Lowry.
Scala de pH, este o scala logaritmica si arata concentratia solutiei in protoni, avand valori de la 0 la
14. Intrucat apa are o valoare a pH-ului egala cu 7, deci neutru, inseamna ca la valori mai mici de 7 avem de
a face cu solutii acide, iar la valori mai mari de 7 cu solutii bazice.
Masurarea pH-ului este una din cele mai frecvente si mai importante proceduri utilizate in biochimie.
pH-ul conditioneaza structura si activitatea macromoleculelor biologice. Masurarea pH-ului pentru sânge şi
urină este o metodă utilizată in mod obisnuit în diagnoza medicală.
pH-ul unei solutii poate fi masurat cu ajutorul unor hartii indicatoare impregnate cu compusi organici
care au capacitatea de a-si schimba culoarea pentru diferite valori ale pH-ului. Masuratori mai precise ale pH-
ului se pot realiza cu ajutorul pH-metrului.
Cand acidul clorhidric, de exemplu, reactioneaza cu apa, HCl este un acid pentru ca cedeaza un
proton formand baza conjugata Cl - in timp ce apa accepta un proton (deci este o baza) trecand in ionul
hidroniu.

În cazul unui acid tare, procesul de disociere are echilibrul puternic deplasat spre dreapta, cu grade de
disociere ale acidului apropiate de 1 iar concentraţia de protoni la sfârşitul reacţiei, [H+], este egală cu
concentraţia normală iniţială a acidului tare, [HA], deci pH-ul, la concentraţii nu foarte mari este:

pH = - lg [H+] =-lg[HA]

In cazul solutiilor unor acizi slabi HA gradul de disociere este mult mai scazut si procesul de ionizare
este unul de echilibru. In acest caz valoarea pH-ului se determina utilizand constanta de aciditate:
[ H + ][ A− ]
K A=
[ HA ]

p K a - lg [ HA ]
sau simplificat pH=
2

In cazul bazelor tari se aplică aceleaşi relaţii echivalente pentru OH -.

pOH = - lg [OH-] =-lg[A-] si pH=14 – pOH

In cazul bazelor slabe sau a sarurilor provenite dintr-un acid slab si o baza tare, care pot reactiona cu
apa, cu refacerea acidului din care provin, conform ecuatiei:
[ CH 3 COOH ] [ HO− ]
K B=
[ CH 3 COO− ]

se pot aplica relatiile echivalente:

pOH = p KB - lg ¿ ¿ ¿
pH=14 – pOH pKB =14-pKA
 Biochimie-Facultatea de Inginerie medicală 2022-2023

Exista solutii care au capacitatea de a rezista schimbarilor de pH la adaugarea unei mici cantitati de
acid sau baza. Ele poarta numele de solutii (sau sisteme) tampon si sunt in general constituite dintr-un
amestec de acid slab si baza sa conjugata (de ex. acidul acetic si acetatul de sodiu). Solutiile tampon au
capacitatea de a stabiliza pH-ul la o anumita valoare, dependenta de raportul acid/baza conjugata, si a carui
valoare poate fi determinata cu ajutorul ecuatiei Henderson-Hasselbach.
pH = pK A −lg
( )
[ HA ]
[ A− ]

1. Utilizarea hartiilor indicatoare pentru masurarea pH-ului

Materiale necesare:
Solutie HCl 0.1 M
Solutie NaOH 0.1M
Apa distilata
Pipete
Cilindri gradati
Eprubete
Indicator universal de pH

A. Masurarea pH-ului solutiilor acide

Mod de lucru
Se pregatesc 6 eprubete si se noteaza cu ajutorului markerului cu nr. de la 1 la 6. In eprubeta nr. 1 se
introduc 10 ml solutie HCl 0.1M. in celelalte eprubete (notate de la 2 la 6) se introduc cate 9 ml apa distilata.
Din eprubeta nr. 1 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 2. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 2 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 3. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 3 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 4. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 4 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 5. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 5 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 6. Se
agita usor pentru amestecare.

Cu ajutorul hartiei indicatoare se masoara pH-ul pentru fiecare din cele 6 eprubete si se completeaza
tabelul urmator:

Eprubeta nr. pH calculat pH masurat

1
2
3
4
5
6

Eprubetele se spala si se pregatesc pentru urmatorul experiment.

 Biochimie-Facultatea de Inginerie medicală 2022-2023

B. Masurarea pH-ului solutiilor bazice

Mod de lucru
Se pregatesc 6 eprubete si se noteaza cu ajutorului markerului cu nr. de la 8 la 13. In eprubeta nr. 13
se introduc 10 ml solutie NaOH 0.1M. in celelalte eprubete (notate de la 8 la 12) se introduc cate 9 ml apa
distilata.
Din eprubeta nr. 13 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 12. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 12 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 11. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 11 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 10. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 10 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 9. Se
agita usor pentru amestecare.
Din eprubeta nr. 9 se masoara 1ml solutie cu ajutorul unei pipete si se adauga in eprubeta nr. 8. Se
agita usor pentru amestecare.
Cu ajutorul hartiei indicatoare se masoara pH-ul pentru fiecare din cele 6 eprubete si se completeaza
tabelul urmator:

Eprubeta nr. pH calculat pH masurat

13
12
11
10
9
8

Eprubetele se spala si se pregatesc pentru urmatorul experiment.

C. Prepararea unor solutii tampon si determinarea capacitatii de tamponare

Materiale necesare
Solutie acid acetic 0.1M
Solutie acetat de sodiu 0.1M
Apa distilata
Eprubete
Indicator universal de pH
pH-metru

a. Prepararea solutiei tampon A

Intr-o eprubeta se introduc 10 ml solutie acetat 0.1M si apoi 10 ml solutie acid acetic 0.1M. Se agita
bine pentru dizolvare si apoi se masoara pH-ul solutiei obtinute cu hartie indicatoare si cu pH-metrul si se
noteaza.

b. Prepararea solutiei tampon B

Intr-o eprubeta se introduc 18 ml solutie acetat 0.1M si apoi 2 ml solutie acid acetic 0.1M. Se agita
bine pentru dizolvare si apoi se masoara pH-ul solutiei obtinute cu hartie indicatoare si cu pH-metrul si se
noteaza.

c. Prepararea solutiei tampon C

 Biochimie-Facultatea de Inginerie medicală 2022-2023

Intr-o eprubeta se introduc 18 ml solutie acid acetic 0.1M si apoi 2 ml solutie acetat 0.1M. Se agita
bine pentru dizolvare si apoi se masoara pH-ul solutiei obtinute si cu hartie indicatoare si cu pH-metrul se
noteaza.

d. Verificarea proprietatilor de tamponare a solutiei tampon A.

Din solutia A se iau 10 ml, si se introduc intr-o eprubeta, apoi se adauga 1 ml solutie HCl 0.1M. Se
agita, apoi se masoara pH-ul si se noteaza.
In eprubeta initiala cu solutie A se adauga 1ml solutie NaOH 0.1M, se agita apoi se masoara pH-ul si
se noteaza.

e. Verificarea proprietatilor de tamponare a solutiei tampon B.

Din solutia B se iau 10 ml, si se introduc intr-o eprubeta, apoi se adauga 1 ml solutie HCl 0.1M. Se
agita, apoi se masoara pH-ul si se noteaza.
In eprubeta initiala cu solutie B se adauga 1ml solutie NaOH 0.1M, se agita apoi se masoara pH-ul si
se noteaza.

f. Verificarea proprietatilor de tamponare a solutiei tampon C.

Din solutia C se iau 10 ml, si se introduc intr-o eprubeta, apoi se adauga 1 ml solutie HCl 0.1M. Se
agita, apoi se masoara pH-ul si se noteaza.
In eprubeta initiala cu solutie C se adauga 1ml solutie NaOH 0.1M, se agita apoi se masoara pH-ul si
se noteaza.
Se completeaza tabelul urmator:
Solutie pH calculat pH-masurat
(pKa =4.75) Cu hartie indicatoare Cu pH-metru
Acid acetic 0.1M
Acetat de sodiu 0.1M
Solutie A
Solutie A dupa adaugare HCl
Solutie A dupa adaugare NaOH
Solutie B
Solutie B dupa adaugare HCl
Solutie B dupa adaugare NaOH
Solutie C
Solutie C dupa adaugare HCl
Solutie C dupa adaugare NaOH

Intrebari:
1. Din cele trei solutii A, B si C care considerati ca are cele mai bune proprietati de tamponare pentru
domeniul de pH=4-5?

2. Care este pH-ul unei soluții obținută prin dizolvarea a 1 mL soluție HCl 0.5 M în 499 mL apă?

3. pKa pentru H2PO4- este 6.86. Care este pH-ul unei solutii in care raportul [HPO 42-]/[H2PO4-] este 10? Dar
cand este 0.1?

4. Considerand pH-ul mediu al sangelui de 7.4 calculati raportul HCO 3-/H2CO3 din sange (pKa=6.4). Care va
fi acest raport in cazul unei persoane extenuate fizic al cărei sânge are pH-ul de 7.1?