ANTIBIOGRAMA

Principiu
Mod de lucru
Interpretare
Factori de eroare
PRINCIPIU:
 Antibiograma,este unul din examenele de
laborator frecvent cerut de clinica,reprezinta
studiul sensibilitatii unei tulpini bacteriene fata de
agentii antimicrobieni utilizati in terapeutica
 Principiu:-un inocul standardizat al tulpinii testate
este insamantat intr-un gradient discontinu de
concentratii ale medicamentului antimicrobian
realizat fie in placi cu mediu agarizat,fie in mediu
cu bulion nutritiv.Dupa incubarea adecvata este
urmarita concentratia minima
inhibitorie(CMI)
MOD DE LUCRU:
 Pe mediul solid (ex.agar Mueller-Hinton)
se insamanteaza tulpina bacteriana care
urmeaza a fi testata
 Acest procedeu se realizeaza cu ajutorul
tamponului de vata steril imersat in
suspensia bacteriana etalonata
 Se descarca tamponul in striuri paralele pe
toata suprafata mediului succesiv in trei
directii , o alta metoda este cea prin
inundare a placii si extragerea excesului
cu o seringa sterila
 Se lasa placile timp de 3-5min
pentru absorbtia inoculului
 Uscarea placilor insamantate
la temperatura camerei 5-15
min.,discurile se depun pe
placa in momentul cand nu
mai exista lichid pe supraf.
mediului
 Discurile cu antib. se depun la
o distanta de 15 mm de
marginea placii si de 30 mm
la distanata de centrele a 2
discuri vecine
 Dupa repartizarea discurilor
se incubeaza imediat la 37 C
timp de 16-18 ore
INTERPRETARE
 Se realizeaza cu ochiul liber dupa perioada de
incubatie
 Se masoara cu rigla gradata in mm diametrul
zonelor de inhibitie completa
 Se va urmarii prezenta coloniilor izolate din
interiorul zonelor de inhibitie care reprezinta
mutante rezistente in interiorul unei populatii
bacteriene predominanat sensibile
 Se recomanda repicarea acestor colonii si
retestarea sensibilitatii la antibiotice
ZONE DE INHIBITIE
-ANTIBIOGRAMA
 S-zona de inhibitie a
bacteriei testate este egala
sau aproape egala cu cea
de referinta
 R- bacteria testata are o
zona de inhibitie absenta
sau o raza de inhibitie mai
mica de 1/3 din raza zonei
de inhibitie la bacteria
testata
 I-bacteria testata are o
zona de inhibitie de ½ din
raza zonei de inhibitie la
bacteria de referinta
METODE DE EFECTUARE A
ANTIBIOGRAMEI
 Pentru efectuarea antibiogramei se foloseste
cultura pura,
 Cele mai utilizate tehnici sunt:
 Calitativa:-difuzimetrica- comuna
-comparativa etc.
Cantitativa:-metoda,dilutiilor-in mediu lichid
-in agar
-microdilutiilor
-testul E
CEA MAI FRECVENT FOLOSITA ESTE METODA
DIFUZIMETRICA
 INDICATIILE SI
CONTRAINDICATIILE
ANTIBIOGRAMEI
INDICATII:-se face in situatii bine stabilite:
1. in infectii bacteriene det de tulpini care au o
sensibilitate variabila la antibiotice,
-in infectii bacteriene severe
(septicemii,endocardite,peritonite etc.)
-in infectii localizate:cronicizate in care exista
riscul dezvoltarii unor tulpini rezistente la
antibiotice
2. In situatii epidemiologice: pentru combaterea
infectiilor nosocomiale,sau pentru sterilizarea
purtatorilor sanatosi de germeni
(stafilococ,salmonella,shigela)
Contraindicatii
 Cand agentul etiologic microbian are o
sensibilitate cunoscuta si intotdeuna
aceeasi (ex. Streptococul beta hemolitic
,pneumococ,bacilii G(+)si anaerobi)-
acestia sunt intotdeauna sensibili la
penicilina
 Antibiograma nu este recomandata in
infectiile usoare
 Nu se face antibiograma din flora totala
izolata- antibiograma globala da nastere la
erori