Vajaiala Biochimia Efortului

GRAZIELA ELENA VJIAL
BIOCHIMIA EFORTULUI (ediie revzut i adugit)
Universitatea SPIRU HARET
Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei VJIAL; GRAZIELA ELENA Biochimia efortului / Graziela Elena Vjial Bucureti Editura Fundaiei Romnia de Mine, 2002. 140 p.; 20,5 cm. Bibliogr. ISBN 973-582-559-7 577.1:612.766.1
Editura Fundaiei Romnia de Mine, 2002 ISBN: 973-582-559-7
Redactor: Janeta LUPU Tehnoredactor: Laureniu Cozma TUDOSE Coperta: Stan BARON Bun de tipar: 10.10.2002; Coli de tipar: 8,75 Format: 16/61x86 Editura i Tipografia Fundaiei Romnia de Mine Splaiul Independenei, nr. 313, sector 6, O.P. 83 Tel.: 410.43.80; Fax: 410.51.62; www.SpiruHaret.ro
UNIVERSITATEA SPIRU HARET

FACULTATEA DE EDUCAIE FIZIC I SPORT
GRAZIELA ELENA VJIAL
BIOCHIMIA EFORTULUI
(ediie revzut i adugit)
EDITURA FUNDAIEI ROMNIA DE MINE Bucureti, 2002

I. NOIUNI INTRODUCTIVE DE CHIMIE I BIOCHIMIE
Biochimia se ocup cu combinaiile hidrocarburilor pe care le ntlnim n organism i mai cu seam cu transformrile suferite de acestea, motiv pentru care chimia organic constituie temelia biochimiei. Cunotinele temeinice n chimia organic i n primul rnd nelegerea formelor structurale, constituie premizele unui studiu raional al biochimiei. Scurtele precizri care urmeaz, nu trebuie s se substituie studiului chimiei organice; ele accentueaz deliberat importana acesteia, servesc ca un ndreptar oricnd la ndemn i atrag n primul rnd atenia asupra unor grupe de substane i reacii de o deosebit importan pentru biochimie. I.1. Structura atomului Atomul se definete ca fiind cea mai mic particul dintr-o substan, care, prin procedee chimice obinuite, nu mai poate fi fragmentat n particule mai simple. Atomul este o component a materiei, neutr din punct de vedere electric, de dimensiuni foarte reduse i cu o structur complex. Cercetri ndelungate au condus la concluzia c atomul se caracterizeaz prin urmtoarele proprieti: - este o particul material; - invizibil; - n continu micare; - neutr din punct de vedere electric; - divizibil prin procedee fizice; - poate exista independent; - particip efectiv n reaciile chimice. Substanele chimice sunt alctuite din atomi diferii, care se deosebesc prin structur, mas, dimensiuni i proprieti. Atomul oricrui element chimic este alctuit din dou pri distincte: - partea central, numit nucleul atomului;
5
- regiunea exterioar, numit nveliul electronic al atomului (fig. 1).

nveliul electronic
Nucleu
Fig. 1
I.1.1. Nucleul atomului Nucleul corespunde unei particule materiale care, ntr-un volum extrem de mic concentreaz aproape toat masa atomului. Particulele cuprinse n nucleu se numesc nucleoni. Cei mai importani nucleoni sunt: - protonul + 1 p, particul material ncrcat cu o sarcin 1 pozitiv i cu masa relativ egal cu 1; particul material neutr din punct de vedere - neutronul 1 0 n, electric i cu masa aproximativ egal cu a protonului. Fiecare tip de atom are un anumit numr de protoni n nucleu. De exemplu, nucleul atomului de hidrogen are un proton, cel al atomului de heliu 2 protoni .a.m.d. Numrul protonilor din nucleu este o caracteristic a atomului i reprezint sarcina nuclear a acestuia. Numrul protonilor din nucleu se numete numr atomic i se noteaz cu Z. Specia de atomi cu acelai numr atomic cu Z formeaz un element chimic. Atomul este caracterizat i de numrul total de particule din nucleu numrul de protoni Z + numrul de neutroni n. Suma dintre numrul de protoni i numrul de neutroni din nucleu se numete numr de mas i se noteaz cu A. Aceste dou caracteristici ale atomului, Z i A, preced simbolul chimic, atunci cnd dorim s reprezentm complet un element. De exemplu: A =1 A=4 A =16 Z =1 H Z = 2 He Z = 80
6
Cunoscnd numrul atomic Z i numrul de mas A se poate deduce numrul neutronilor n cuprins n nucleul atomului;
n=AZ
Speciile de atomi cu acelai numr de protoni (deci aceeai sarcin nuclear Z), dar cu numr de neutroni diferii (numr de mas diferit) poart numele de izotopi. n natur, majoritatea elementelor sunt amestecuri de izotopi. Orice izotop este caracterizat prin numrul atomic Z i numrul de particule din nucleu: A = Z + n. Deci, pentru un element E, un izotop oarecare al acestuia se va nota: A Z E. De exemplu: 1 2 3 1H 2H 1H hidrogen uor hidrogen greu tritiu (protoni) (deuteriu) sau 10 11 12 13 14 15 16 6C 6C 6C 6C 6C 6C 6C Izotopii aceluiai element, avnd acelai numr atomic Z, au acelai numr de electroni i aceeai structur a nveliului electronic, deci i aceleai proprieti chimice. Acetia au ns proprieti fizice diferite, datorit masei atomice diferite. De menionat, c nucleul atomic, indiferent crui atom aparine, nu se modific n timpul reaciilor chimice. Stabilitatea mare a nucleului se datorete existenei forelor nucleare, care se manifest prin atracii foarte puternice ntre toi nucleonii. I. 1.2. nveliul de electroni al atomului n jurul nucleului unui atom se deplaseaz, cu viteze foarte mari, particule materiale ncrcate negativ, numite electroni (fig. 2).
Electron Nucleu
Fig.2 7
Totalitatea electronilor care graviteaz n jurul nucleului formeaz nveliul electronic al atomului. Electronul se noteaz 0 este o particul fundamental cu 1 e, sarcin electric negativ 1, cu masa neglijabil i cu dimensiuni foarte reduse (diametrul su este de 1,4/1013cm.). Atomul fiind neutru din punct de vedere 4 electric, rezult c numrul sarcinilor negative 3 2 este egal cu numrul sarcinilor pozitive. Deci 1 numrul electronilor din nveliul electronic este egal cu al protonilor din nucleul atomului. Cercetrile au dovedit c nveliul K electronic este format din unul pn la apte L straturi, care se gsesc la distane diferite de M N nucleu i care se numeroteaz de la nucleu spre exterior cu cifre arabe: 1, 2, 3, 4, 5 etc. sau cu Fig.3 litere: K, L, M, N, O, P i Q (Fig. 3). La rndul su un strat poate avea mai multe substraturi. n micarea lor y rapid n jurul nucleului, electronii nu urmeaz nite traiectorii precise. Cu z toate acestea, ei se pot gsi, cu mare probabilitate, n anumite regiuni ale spaiului din jurul nucleului, formnd nori de electricitate negativ (nori x electronici) numii orbitali. De exemplu: atomul de hidrogen are un singur electron care n micarea sa nentrerupt se poate apropria mai mult Atomul de hidrogen sau mai puin de nucleu, meninndu-se (orbital de tip S) n interiorul unei regiuni de form sferic (orbitali de simetrie sferic). Pe lng micarea n jurul nucleului, electronul execut i o micare n jurul axei sale, numit micare de spin. Micarea de spin se poate produce n dou sensuri: una n sensul micrii acelor unui ceasornic i alta n sens invers. Dac un electron se rotete ntr-un sens i alt electron n sens opus, se spune c cei doi electroni au spin opus. ntr-un orbital nu pot exista dect maximum doi electroni cu spin opus numii electroni cuplai.
8
Un orbital ocupat cu doi electroni cuplai se reprezint convenional astfel:
Un orbital n care se gsete un singur electron ( necuplat) se indic astfel:
Orbitalii au diferite forme i energii. Se cunosc patru tipuri de orbitali: Orbitali de tip s au forma sferic i conin maximum doi electroni. Orbitali de tip p au doi lobi egali, situai de o parte i de alta a nucleului; ntr-un substrat sunt trei orbitali p, orientai n spaiu dup cele trei axe de coordonate (x, y, z), notndu-se cu Px, Py, Pz. Deoarece fiecare orbital conine maximum doi electroni, substratul de tip p se completeaz pn la 6 electroni. Orbitali de tip d au form mai complicat, sunt n numr de cinci i se completeaz cu pn la 10 electroni. Orbitali de tip f sunt n numr de apte i sunt complet ocupai cnd au 14 electroni. Numrul maxim de electroni, Nmax., care se pot plasa pe un strat este dat de relaia: 2 N max . = 2 n s n care ns este numrul stratului. Cu relaia de mai sus, putem deduce numrul maxim de electroni de pe un strat. De exemplu: stratul 1 (K) cuprinde unul pn la maximum 2 electroni 2 12 stratul 2 (L) cuprinde unul pn la maximum 8 electroni 2 22 stratul 3 (M) cuprinde unul pn la maximum 18 electroni 2 32 stratul 4 (N) cuprinde unul pn la maximum 32 electroni 2 42 Structurile de 2 electroni pe primul strat (K), respectiv de 8 electroni pe ultimul strat, cunoscute sub numele de dublet respectiv octet, corespund unor structuri stabile. Electronii fiecrui strat au anumite energii. Energia electronilor crete de la stratul K spre exterior (fig. 4). n ocuparea straturilor, electronii tind s se aranjeze pe straturi de energie ct mai joas, aa cum rezult din tabelul 1.
9
E 7 6 5 4 3 2 1
32 18 8 2
STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL
Q P O N Q M L K
Fig. 4 Graficul variaiei energiei Tabelul 1 Observaii
Nr. atomic Z 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
Denumirea electronului
Simbol chimic
Numrul electronilor pe straturi K L M 1 2 2 2 12 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 2 3 4 5 6 7 8 8 8 8 8 8 8 8 8 1 2 3 4 5 6 7 8
Hidrogen Heliu Litiu Beriliu Bor Carbon Azot Oxigen Fluor Neon Sodiu Magneziu Aluminiu Siliciu Fosfor Sulf Clor Argon
H He Li Be B C N 0 F Ne Ns Mg Al Si P S Cl Ar
Un singur electron pe stratul K Structur stabil de dublet Atomii elementelor au primul strat (K) complet i stratul (L) n curs de completare Primele dou straturi complet ocupate (K dublet, L corect) Atomii elementelor au primele dou straturi complete ocupate i stratul trei (M) n curs de completare Pe stratul K dublet iar pe L i M - octet
Cum se poate observa din tabelul 1, aeznd elementele n ordinea crescnd a numrului atomic, se remarc faptul c nveliul
10
electronic a dou elemente succesive difer printr-un electron care se numete electron distinctiv. Ordinea ocuprii cu electroni a straturilor i substraturilor se stabilete innd seama de urmtoarele reguli: - electronul distinctiv tinde s ocupe n atom locul vacant de energie minim; - ntr-un orbital nu pot exista dect maximum doi electroni de spin opus (principiul lui Pauli); - un orbital nu poate fi ocupat cu doi electroni, dect dup ce toi orbitalii substratului respectiv sunt ocupai cu cte un electron (regula lui Hund). Ocuparea cu electroni a straturilor ai substraturilor
Simbol Nr. atomic s H He Li Be B C N O F Ne 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 s strat substrat p 1 s1 1 s2 1 s 2 2 s1 1 s2 2 s2 1 s2 2 s2 2 p1 1 s2 2 s2 2 p2 1 s2 2 s2 2 p3 1 s2 2 s2 2 p4 1 s2 2 s2 2 p5 1 s2 2 s2 2 p6 Configuraie electronic
ntruct proprietile elementelor sunt determinate de numrul i reparaia electronilor pe straturi, structura nveliului electronic are o deosebit importan pentru stabilirea valenei i a proprietilor chimice ale elementelor.
11
I.1.3. Legtura dintre structura atomului i sistemul periodic Aranjnd elementele n ordinea crescnd a sarcinii nucleare ca n tabelul 1, s-a remarcat c unele proprieti se repet n mod periodic. Plasnd unele sub altele, elementele care au acelai numr de electroni pe ultimul strat, se obine o clasificare reprezentativ sub forma unui tabel, cunoscut sub numele de sistemul periodic al elementelor. Aceast clasificare are la baz legea periodicitii. Proprietile fizice i chimice ale elementelor se repet n mod periodic, deci sunt funcii periodice ale sarcinii nucleare Z. Sistemul periodic este format din perioade i grupe. Perioada este irul cuprins ntre dou gaze rare succesive. Grupa este coloana vertical care cuprinde elemente cu aceeai configuraie electronic pe ultimul strat. Numrul atomic Z, notat pentru fiecare element, este important ntruct ne indic: - numrul protonilor din nucleul atomului; - numrul electronilor din nveliul de electroni; - ordinea n care se succed elementele n sistemul periodic (numrul de ordine). A =16 De exemplu, oxigen Z = 8 O, ne indic faptul c oxigenul conine 8 protoni n nucleu i 8 electroni n nveliul de electroni i c este al 8-lea element n sistemul periodic. Pentru elementele din grupele principale, numrul de electroni de pe primul strat este egal cu numrul grupei. De exemplu, magneziu i calciu sunt situate n grupa a II-a principal, pentru c atomii lor au doi electroni pe ultimul strat. Deci, cunoscnd grupa n care este situat un element, putem determina numrul electronilor de pe ultimul strat al atomului respectiv. Numrul straturilor electronice este egal cu numrul perioadei. De exemplu, magneziu i aluminiu sunt situate n perioada a 3-a, pentru c au n curs de completare stratul al 3-lea (M). Cunoscnd deci n ce perioad este situat un element, se poate deduce numrul stratului periferic n curs de completare. I.2. Noiunea de structur chimic Aranjamentul spaial sub forma cruia se organizeaz atomii care alctuiesc o molecul oarecare a fost denumit de A.M. Butlerov (1861), structur chimic. Ca urmare a dezvoltrii chimiei organice, s-a ajuns la concluzia c noiunea de structur chimic nu poate fi privit numai din punct de
12
vedere al aranjamentului spaial al atomilor, ci are un coninut mult mai complex. n general, pentru o molecul organic structura chimic reprezint rezultanta interdependenei simultane a urmtorilor factori: a) tipul i numrul atomilor componeni; b) succesiunea lor de legare n molecul; c) dispoziia lor spaial (distane interatomice i unghiuri de valen); d) natura i energia legturilor chimice dintre atomi; e) natura i intensitatea interaciilor electronice dintre anumii atomi ai moleculei. Structura chimic a unei molecule reprezint aspectul su cel mai caracteristic i definitoriu deoarece ea determin proprietile sale generale (mecanice, fizice, chimice, biochimice); orice modificare aduse structurii chimice provoac modificri corespunztoare ale proprietilor. De exemplu, binecunoscutul aminoacid alanina (acidul aminopropionic) cu urmtoarea structur:
n care se constat: la acelai atom de C sunt legai 2 atomi de oxigen i vecintatea imediat a unei grupri aminice i a unei grupri carboxil, legarea atomului de azot de carbon i de hidrogen, legarea la acelai atom de carbon a patru substitueni diferii hidrogen, metil, amino, carboxil. Toate aceste particulariti structurale determin anumite proprieti alaninei i anume: stare de agregare solid, punct de topire 295oC, solubilitate n ap, nsuiri de aminoacid etc. Deplasarea gruprii aminice la cellalt atom de carbon (o modificare structural minim) corespunde alaninei cu formula:
Proprietile chimice ale alaninei corespund tot unui aminoacid, dar care se topete la 2000C i nu mai prezint activitate optic. n cazul n care are loc o modificare structural profund, de exemplu, cei doi atomi de oxigen sunt legai de azot, substana va deveni un nitroderivat 1-nitropropanul:
13
proprietile sale fizice i chimice fiind net deosebite de cele ale unui aminoacid. 1-nitropropanul este un lichid glbui, cu PF = 1310C, insolubil n ap i se poate reduce la n propil amin. Concluzionnd putem afirma c micile modificri structurale aduse unei molecule oarecare, duc la modificri n special ale proprietilor fizice ale substanei, pe cnd modificrile structurale profunde duc n special la modificarea proprietilor chimice. Relaia reciproc structurproprieti permite descrierea proprietilor generale ale unei substane a crei structur este cunoscut, i, invers, permite stabilirea structurii chimice prin cunoaterea proprietilor sale generale. I. 3. Legturi chimice n compuii organici Legturile chimice din compuii organici sunt, n majoritatea cazurilor, legturi covalente ntre atomii elementelor organogene de C, H, O, N, S i halogen . a. Ele iau natere ntre atomi purtnd fiecare cel puin un electron nemperecheat sau, mai exact, cel puin un orbital monoelectronic. Doi electroni nemperecheai aparinnd la doi atomi independeni se pot cupla, realiznd o legtur covalent. Altfel spus, doi orbitali atomici monoelectronici se acoper reciproc ntr-o anumit msur formnd un orbital molecular; acesta conine totdeauna doi electroni de spin opus care aparin la doi atomi identici sau diferii. Un astfel de orbital molecular se poate forma din orbitali atomici ai unor atomi identici sau diferii, formndu-se legturi covalente omogene, respectiv legturi covalente heterogene.
Cum se observ din exemplele de mai sus, fiecare atom a pus n comun cte un electron, astfel se formeaz o legtur covalent
14
simpl, realizat prin doi electroni (dublet) denumii sigma (). Se observ c atomul de carbon particip la formarea legturilor simple numai n stare hibridizat, n exemplele de mai sus de tip sp3. Hidrogenul i halogenii au orbitali monoelectronici n stare fundamental, fiind monocovaleni, formeaz numai legturi simple, legturi realizate printr-un singur dublet electronic. ntre doi atomi, identici sau diferii, se pot pune n comun i cte doi electroni din partea fiecruia, dac n structura electronic a atomilor respectivi apar cel puin doi orbitali monoelectronici. De exemplu, perechile de atomi de mai jos:
au pus n comun cte doi electroni din partea fiecruia. S-a stabilit n acest mod, o legtur covalent dubl, realizat prin patru electroni sau dou dublete electronice de legtur, unul denumit sigma () i cellalt pi (). Participarea atomului de C la formarea legturilor duble va fi posibil numai dac adopt starea de hibridizare sp2. Cnd ntre cei doi atomi se pot pune n comun cte trei electroni din partea fiecruia, vor rezulta trei dublete electronice de legtur, unul de tip sigma () i dou de tip pi (), ceea ce corespunde formrii unei legturi triple. n acest caz, atomul de carbon adopt starea de hibridizare sp. Compuii organici n care atomii componeni sunt legai prin covalene simple se numesc compui saturai, iar cei n care atomii componeni sunt legai prin covalene simple i una sau mai multe legturi covalente multiple (duble sau triple) sunt denumii compui nesaturai. Aa cum am afirmat, carbonul nu particip la formarea de covalene dect n starea hibridiz a structurii sale electronice. El realizeaz legturi covalente prin unul, dou sau trei dublete electronice comune, adic legturi simple, duble sau triple corespunztoare strilor sale de hibridizare: sp3, sp2 sau sp (fig. 5). Atomul de carbon este tetracovalent, cel de azot tricovalent, cel de oxigen dicovalent i halogenii monocovenleni.
15
Fig. 5. Structura legturilor covalente dintre doi atomi de carbon a legtur simpl; b legtur dubl; c legtur tripl.
Strile electronice ale atomului de carbon sunt reprezentate n fig. 6.
Fig.6. Reprezentarea strilor electronice ale atomului de carbon. a legtur simpl; b legtur dubl; c legtur tripl. 16
Pe lng caracterul lor simplu, sau multiplu, legturile covalente prezint o serie de proprieti specifice, care determin apariia structurii chimice la moleculele ce conin astfel de legturi ntre atomii componeni. Acestea sunt: a) legtura covalent este dirijat n spaiu, pe direcii bine determinate, care se conserv tot timpul existenei moleculei n care apar; b) legturile covalente fac ntre ele unghiuri ale cror valori sunt constante pentru o substan chimic dat; c) legtura covalent este caracterizat prin dou mrimi fizice specifice: energia de legtur i distana interatomic sau mai exact, internuclear. Energia de legtur Ee reprezint cantitatea de energie degajat la formarea unei legturi covalente ntre doi atomi. Distanele interatomice sau lungimea legturilor covalente reprezint suma razelor covalente ale atomilor legai sau distana minim la care se pot apropia cele dou nuclee ale celor doi atomi ce se leag, pentru ca energia sistemului s aib cea mai sczut valoare. De menionat c pe msur ce distana interatomic scade, energia de legtur crete, aceste dou mrimi avnd o variaie invers; d) numai atomii legai covalent alctuiesc molecule propriu-zise (compuii ionici nu sunt formai din molecule). I.4. Gruprile funcionale Elementul fundamental al tuturor combinaiilor organice sunt hidrocarburile. n hidrocarburi valenele atomilor de carbon rmase libere sunt saturate cu hidrogen. Varietatea combinaiilor organice este determinat i de apariia n hidrocarburi a gruprilor funcionale. Dup cum sunt substituii unul sau mai muli atomi de hidrogen, distingem: funcii monovalente: - OH (gruparea hidroxid),
- NH2 (gruparea aminic)
funcii bivalente: funcii trivalente: Trebuie subliniat c reaciile chimice ale diferitelor clase de substane sunt de cele mai multe ori reacii ale gruprilor funcionale. Alcoolii sunt compui hidroxilici n care gruparea funcional (-OH) este legat la un atom de carbon saturat. Alcoolii au formula general R OH.
17
Alcoolii pot fi clasificai dup trei criterii: a) dup natura radicalului hidrocarbonat din care face parte atomul de carbon saturat purttor al gruprii funcionale n: alcooli saturai CH3 CH2 CH2 OH alcooli nesaturai CH2 = CH CH2 OH alcool alilic alcooli aromatici C6H5 CH2 OH alcool benzilic b) dup numrul gruprilor funcionale: alcooli monohidroxilici CH3 CH2 OH alcool etilic alcooli di(poli) hidroxilici CH2 CH2 | | OH OH
1,2 etandiol (glicol) alcool n propilic
c) dup natura atomului de carbon saturat care poart gruparea funcional n: alcooli primari R CH2 CH alcooli secundari R
CH OH
alcooli teriari R
R R
R C OH
Derivaii alcoolilor cu acizii organici i cu acidul fosforic poart numele de esteri.
18
Eterii iau natere ca produs al hidrolizei ntre dou molecule de alcool
Fenolii. Sunt compui hidroxilici, n care gruparea hidroxil se afl legat la un atom de carbon al unui nucleu benzenic. Formula general este Ar OH. Cel mai simplu fenol este un derivat hidroxilat al benzenului (hidroxibenzen) numit fenol cu formula molecular i structural:
Gruparea amino (NH2) Aminele sunt compui organici care conin n molecula lor una sau mai multe grupri funcionale amino. Denumirea aminelor se face cu numele radicalilor hidrocarbonai legai la azot urmat de cuvntul amin. Aminele se pot clasifica n amine primare, secundare sau teriare, fiind considerate ca produi de substituire parial sau total a hidorgenului amonic cu radicali hidrocarbonai.
Calitatea de primar, secundar, teriar, atribuit diferitelor amine nu trebuie confundat cu cea ntlnit la alcooli, ea semni19
ficnd aici gradul de substituire a hidrogenului i nu natura atomului de carbon care poart gruparea funcional. Gruparea carbonil
C = O
Compuii carbonici reprezint o clas de substane organice care conin n molecula lor una sau mai multe grupri funcionale carbonil. Gruparea lor determin existena a dou grupri organice: - funciunea aldehid, n care gruparea carbonil este legat de un radical hidrocarbonat i de un atom de hidrogen cu excepia primului termen al seriei, aldehid formic; - funciunea ceton, n care gruparea carbonil este legat de doi radicali hidrocarbonai, identici sau diferii.
Iminele sunt substane cu o dubl legtur > C = N; ele hidrolizeaz n general foarte uor i sunt stabile numai n anumite compoziii. Din aceast categorie fac parte bazele pirimidinice i guanidina, substane cu rol important n biochimie. Gruparea carboxil Se ntlnete n acizii carboxilici sau organici care au urmtoarea formul general: Ca structur, gruparea carboxil este format dintr-o grupare carbonil >C = O i o grupare hidroxil OH unite la acelai atom de carbon. Caracterul cetonic sau aldehidic, propriu gruprii carbonil, nu se manifest la acizii organici; de asemenea, acizii carboxilici au o tendin mult mai pronunat de a ceda protoni (H+) dect alcoolii:
n organismul uman, la pH fiziologic, majoritatea acizilor organici figureaz ca anioni i anume ca sruri.
20
n tabelul 2 sunt prezentai acizii organici pe care i ntlnim mai frecvent n biochimie. Aceti derivai ai acizilor provin Esteri ai acizilor din radicalul acid reacie de echilibru: i se formeaz din acid i alcool ntr-o
Tabelul nr. 2
Acizi i sruri importante
21
n celule sunt prezeni numeroi esteri. Amide n afar de esteri, un rol important n biochimie l joac i amidele; acestea sunt combinaii n care gruparea hidroxil a acidului este nlocuit cu gruprile NH2 sau NHR. Dintre diferitele amide, o importan deosebit o are ureea. Aceasta este diamida acidului carbonic:
I. 5. Izomeria compuilor organici Fenomenul izomeriei compuilor organici a fost sesizat prima dat n 1823 de ctre J. von Leibig. Se numesc izomeri dou sau mai multe substane organice care au aceeai formul molecular (aceeai compoziie), dar care prezint proprieti fizico-chimice diferite. n chimia organic apar numeroase tipuri de izomerie, deosebite ntre ele prin: - cauzele specifice care le determin; - condiiile structurale sau de compoziie necesare; - consecinele lor. Clasificarea diferitelor tipuri de izomerie ine seama de sediul deosebirilor structurale, care poate fi: catena de baz sau un anume atom (eventual mai muli) din molecul. Din acest punct de vedere se schieaz urmtoarea clasificare:
deosebiri de caten IZOMERI deosebiri de configuraie - de caten - de poziie - de funciune - de compensare - geometric
- cis-trans - sin-anti - erito-treo (de configuraie) - cu C asimetric - fr C asimetric
- optic 22
- alenic - spiranic - atropic
n continuare sunt descrise cteva tipuri de izomerie, care prezint importan pentru compuii organici din organism. I. 5.1. Izomeria de poziie Izomeria de poziie se caracterizeaz printr-o aezare diferit a uneia sau mai multor grupri la lanul carbonic. De exemplu, dicloretanul, C2H4Cl2, prezint doi izomeri:
CH3 CH Cl Cl 1,1 dicloretan C6H8O7 acid citric OH H2C C CH2 COOH COOH COOH acidul citric CH3 CH2 CH2 C3H8O H2C H C OH C H CH2 CH2 Cl Cl 1,2 dicloretan
COOH
COOH COOH acidul izocitric CH3 CH CH3 OH alcool n-propilic (2 propanol)
OH alcool izopropilic (1 propanol)
Izomerii de mai sus se deosebesc prin poziia gruprii funcionale hidroxil. Butena C4H8 prezint doi izomeri de poziie diferii ntre ei, ca structur, prin poziia dublei legturi:
1 CH2 = 2 3 4 CH CH2 CH3 1 buten legtura dubl ntre C1 i C2 1 2 3 4 CH3 CH = CH CH3 2 - buten legtura dubl ntre C2 i C3
23
Din exemplele date rezult i condiia apariiei acestui tip de izomerie (sub aspectul numrului minim de atomi de carbon din caten) care depinde de particularitatea structural considerat: - n cazul unei legturi multiple sunt necesare cel puin 4 atomi de carbon; - n cazul unei grupri funcionale sunt necesare cel puin trei atomi de carbon; - n cazul unei perechi de heteroatomi sunt suficieni chiar doi atomi de carbon n catena respectiv. Izomeria de poziie este ntlnit i la catenele ciclice, alifatice sau aromatice posednd cel puin doi substitueni. De exemplu, dimetil ciclohexanul C8H16, apare sub forma a trei izomeri de poziie diferii ntre ei prin poziia reciproc a celor doi substitueni:
Acelai fenomen se constat i la derivaii disubstituii ai benzenului care apar sub forma izomerului orto (1,2), meta (1,3) sau para (1,4).
Fig. 7. Acidul ciclobutan-dicarboxilic 24

Acest tip de izomerie se datoreaz existenei fenomenului de blocare a rotirii libere a doi atomi de carbon legai direct: o astfel de blocare apare atunci cnd cei doi atomi fac parte dintr-un ciclu plan (cazul menionat mai sus) sau sunt unii prin legtur dubl. n asemenea condiii, n molecula din care fac parte cei doi atomi de carbon unii direct apare un plan de referin: n primul caz planul ciclului (figura 6), n cel de al doilea caz (figura 7) planul al legturii duble. Fa de aceste planuri, perechile de substitueni la cei doi atomi de carbon se dispun rigid n spaiu. Trebuie ndeplinit condiia de neidentitate a substituenilor aceluiai atom de carbon: a b i c d.
Fig. 8.
Existena acestui tip de izomerie modific, uneori apreciabil, att proprietile fizice, ct i pe cele chimice. I.5.3. Izomeria optic (enantiomeria) Se ntlnete la compuii organici care prezint asimetrie molecular, n cazul cel mai simplu cele care au patru substituieni diferii la un atom de C; n acest caz este vorba de atomul de C
25
asimetric (corect atom de carbon substituit asimetric). Substanele considerate asimetrice nu se pot suprapune peste imaginea lor n oglind. Prezena acestei nsuiri a unui compus organic este pus n eviden prin studiul comportrii sale n lumin polarizat: substanele care prezint lumin polarizat rotesc planul luminii polarizate n toate strile de agregare (solid, lichid, gazoas), precum i n soluie: ele prezint izomerie optic i sunt numite, din acest motiv, optic activ. Orice substan optic activ apare ntotdeauna sub forma unei perechi de structuri, numii antipozi optici sau enatiomeri (din limba greac; enentios = opus, meros = parte). Deoarece compoziia i proprietile fizico-chimice sunt riguros identice pentru ambii termeni ai unei perechi de enantiomeri, deosebirea dintre ei se stabilete tot din comportarea fa de lumina polarizat. Enantiomerul care rotete planul luminii polarizate spre dreapta sau n sensul acelor unui ceasornic este denumit dextrogir i notat cu semnul (+); cel care rotete planul luminii polarizate spre stnga, n sens opus acelor unui ceasornic, se numete levogir i se noteaz cu semnul (). Amestecul echimolar al celor doi enantiomeri este optic inactiv, prin compensarea reciproc a unghiurilor de rotaie. Un astfel de amestec este numit racemic i se noteaz cu simbolul (). Dup cauzele care determin apariia asimetriei moleculare, izomeria optic poate fi de dou feluri: cu carbon asimetric i fr carbon asimetric. Izomeria generat de carbonul asimetric are o mai mare rspundere i importan dect cealalt. n figura 8 este prezentat atomul de carbon asimetric. De exemplu, n cazul acidului cloropropionic, atomul de C din poziia 2 este asimetric; el realizeaz cele patru covalene cu patru substitueni: H, CH3, COOH i Cl (fig. 9). Cei doi enantiomeri au aceleai proprieti fizice i chimice, deosebindu-se ntre ei numai prin semnul unghiului de rotaie; amestecul lor echimolar va fi un racemic (lipsit de activitate optic). Compuii optic activi rspndii n natur apar ca enantiomeri distinci, fie cel dextrogir (+), fie numai cel levogir (-), ca n cazul hidroxiacizilor, aminoacizilor etc. Produii de sintez n toate cazurile sunt amestecuri racemice (optic inactive). Izomeria geometric i cea optic pot s fie ntlnite adesea mpreun. Izomeria optic prezint o importan deosebit, n special n domeniul biochimiei, deoarece multe din procesele biochimice din
26
organismele animale sau vegetale, desfurndu-se sub aciunea stereospecific a diverselor enzime, folosesc sau produc molecule asimetrice, sub forma unui singur enantiomer, dextrogir sau levogir.
Fig. 8
H
Fig. 9
27
n fig. nr. 10 snt redate aceste ci diferite de catabolism ale glucidelor.
Fig. 10 Cile de catabolism ale glucidelor
I.6. Noiuni introductive de biochimie Biochimia este un domeniu al studiului vieii. Obiectul ei const n cercetarea fenomenelor vieii, cu ajutorul metodelor chimice. Biochimia are dou domenii principale: a) biochimia descriptiv; b) biochimia dinamic. Biochimia descriptiv se ocup de cunoaterea naturii chimice a prilor componente ale celulei i se identific n linii mari cu chimia substanelor naturale. Simpla descriere a substanelor chimice ar oferi ns o imagine static, un instantaneu al celulei vii sau al organismului viu, fiind astfel improprie obiectivului de a cerceta fenomenele vieii. Dinamica fascinat a celulei vii, permanenta ei modificare, reprezint o caracteristic proprie vieii, iar studiul transformrilor chimice care au loc n interiorul ei constituie obiectul biochimiei dinamice. Biochimia modern este aadar, n primul rnd, biochimia dinamic. Prin aceasta trebuie s nelegem nti fenomenele metabolismului, transformarea i catabolismul alimentelor n scopul
28
obinerii energiei chimice i al sintezei substanei proprii celulei. Aceste reacii au loc sub aciunea catalitic a enzimelor, al cror studiu constituie un capitol larg al biochimiei. Prin metabolism se nelege schimbul de substane care are loc ntre organism i mediul nconjurtor (adic schimbul dintre protoplasm i substanele din mediul exterior), precum i ansamblul transformrilor fizico-chimice, care au loc la nivelul fiecrei celule. Totalitatea acestor reacii fizico-chimice, care se petrec la nivelul fiecrei celule dup absorbia substanelor alimentare i pn la obinerea de produse finale precum i totalitatea acestei succesiuni de produse intermediare i de modificri chimice i fizico-chimice, care intervin n schimburile dintre protoplasm i substanele din mediul exterior, constituie metabolismul intermediar. Metabolismul intermediar al organismului se manifest n dou forme antagoniste i independente de anabolism i catabolism. Prin anabolism se nelege ansamblul transformrilor chimice, care reprezint fenomene de sintez n organism, adic fenomene de construcie. Procesele anabolice (de asimilaie) sunt n general procese chimice ce se petrec cu consum de energie, din care cauz sunt definite ca procese endotermice sau endergonice. Ele folosesc energia eliberat n reaciile catabolice. Totalitatea fenomenelor de degradare, care au loc n organism, poart numele de fenomene de catabolism. Catabolismul are rolul de a asigura organismului energia necesar funciilor sale vitale, cum sunt de exemplu, fenomenele de construcie a edificiului atomic. Metabolismul energic este constituit din totalitatea modificrilor energetice care nsoesc metabolismul intermediar. n anabolism asistm la un proces de asimilare, de transformare a materiei nevii n materia vie; n catabolism, asistm la un proces invers, de dezasimilaie, de transformare a materiei vii n materie nevie. Prin metabolism, materia vie se afl ntr-o continu rennoire. Viaa nu poate exista deci n afara metabolismului. I.6.1. Compoziia elementar i sumar a organismului Cercetrile referitoare la compoziia elementar a materiei vii au artat prezena, n primul rnd, a urmtoarelor 12 elemente: C, H, O, N, S, P, Cl, Ca, Mg, K, Na i Fe. Ele intr n organism n proporie de 99,0% din masa organismului i se numesc macroelemente. Din cauz c intr n alctuirea masei organismului n proporie de 99,0% se mai numesc elemente plastice.
29
n afar de macroelemente, n alctuirea organismului intr n proporie de 1% alte elemente, care se afl n cantiti foarte mici, n limita unei sutimi sau miimi de miligram pentru fiecare, ele au fost numite microelemente sau oligoelemente. Macroelementele i microelementele formeaz mpreun familia elementelor biogene. n organismul viu, elementele plastice se gsesc sub form de diferite combinaii ca: a. apa care constituie un factor important de legtur ntre organism i mediu, servete la meninerea presiunii osmotice i la reglarea concentraiei ionilor de hidrogen i de hidroxil n organism. Are rol chimic, provocnd fenomene de hidratare, de hidroliz, de oxido-reducere i de sintez; b. srurile minerale despre al cror rol vom discuta la metabolismul mineral; c. substane organice plastice, care sunt elemente de construcie anatomic ale organismului: glucidele, lipidele i protidele. d. substane organice active (catalizatori biochimici) care apar n organism n cantitate foarte mic i provoac transformri chimice pe care le sufer substanele plastice sau determin diferite procese fiziologice (vitaminele, enzimele, hormonii, acizii nucleici i unitile lor structurale . a.); e. produse intermediare i finale de metabolism care se acumuleaz sau se elimin din organism. O evaluare procentual n greutate a diferitelor componente ale unui individ adult, efectuat cu aproximaie bun, ofer urmtoarea proporie a elementelor plastice: ap 61,6%, proteine, lipide 13,8% sruri minerale 8,1% i glucide 1,5%. Aceste elemente nu sunt toate la fel de importante. Lipidele, de exemplu, se pot reduce pn la o zecime din valoarea lor fr riscuri deosebite, n timp ce proteinele nu pot fi reduse peste 14%. Nici glucidele nu pot fi reduse sub valoarea de 1,2% n greutate fr a avea grave consecine asupra sntii.
30
II. PROTIDE
Sunt substane ce intr n alctuirea celulei, avnd rol de elemente de construcie anatomic i substane cu rol catalitic i funcional. Protidele conin patru elemente: C, H, O, N; mai pot conine S i P i uneori Fe, Mg, Cu . a. II.1. Clasificarea protidelor O clasificare a acestor substane, bazat pe numrul de aminoacizi care le-au generat, este prezentat n schema de mai jos:
MONOPROTIDE (aminoacizi) PEPTIDE POLIPROTIDE INFERIOARE POLIPEPTIDE (mai mult de 5 aminoacizi) PROTIDE PROTEINE (haloproteide sau halproteine) POLIPROTIDE SUPERIOARE PROTEIDE (heteroproteine) fosfoproteide glicoproteide nucleoproteide cromoproteide metalproteide lipoproteide 31
n organism, n numeroase cazuri, proteinele nu apar libere ci cuplate cu alte substane denumite grupri prostetice care nu mai conin n molecula lor aminoacizi i se numesc proteide. Proteinele i proteidele formeaz mpreun familia substanelor proteice. II. 2. Aminoacizii (monoprotide) Dup cum arat denumirea, aminoacizii sau acizii aminai posed n molecula lor dou grupri funcionale caracteristice: gruparea aminic (-NH2) i gruparea carboxilic (-COOH). Totdeauna gruparea aminic se gsete n poziia fa de gruparea carboxilic. Cei mai muli aminoacizi (la numr) particip la formarea proteinelor care alctuiesc protoplasma celulei vii i care alctuiesc enzimele. Cel mai simplu reprezentat al aminoacizilor este glicocolul sau glicina H2N-CHc-COOH. La ceilali acizi aminai, pe lng gruparea aminic la carbonul alfa mai exist un radical R purttor de carbon aromatic sau alifatic, care la rndul lui poate s mai poarte i alte grupri funcionale. Formula general este aadar:
O // C OH | H2N C H | R L Aminoacid O // C OH | NH2 C | H R Formula general O // C OH | H C NH2 | R D - Aminoacid
Dac n formula general R nu nseamn H, ci un lan carbonic, atunci carbonul este substituit asimetric; n acest caz va fi optic activ, deci prezint izomeria optic. Distingem dou serii sterice, seria L i seria D. Aminoacizii pe care i ntlnim n proteine aparin seriei L. II. 2.1. Clasificarea aminoacizilor Exist diferite principii de clasificare a aminoacizilor. i vom mpri n patru grupe: a. aminoacizi cu radical R nepolar, deci cu o caten lateral de hidrocarbur pur: glicina, alanina, valina, leucina, izoleucina, prolina i fenil-alanina;
32
b. aminoacizii care au n catena lateral grupri neionizate, dar cu aciune polar (cum sunt OH, SH, -CO, NH2 i unele heterociluri): tirozina, triptofanul, serina, treonina, cisteina i cistina, precum i metionina. Din acest grup fac parte i asparagina i glutamina, amidele aminoacizilor (din grupa C); prin formarea amidelor, gruparea carboxil i-a pierdut proprietile acide, c. acizii amino-dicarboxilici; acetia conin n radicalul R o a doua grupare carboxil: acizii glutamic i aspartic; d. aminoacizii bazici sau acizi diamino-monocarboxilici; acetia conin nc o grupare bazic suplimentar: lizina, arginina, histidina. Organismul uman nu are capacitatea s sintetizeze toi aminoacizii. Unii trebuie s fie procurai prin hran i de aceea poart denumirea de aminoacizi eseniali. Aminoacizii eseniali pentru om sunt urmtorii: valina, leucina, izoleucina, lizina, metionina, treonina, fenilalanina i triptofanul, la care se adaug cei parial eseniali histidina i arginina. II.2.2. Proprieti generale ale aminoacizilor II.2.2.1. Proprieti fizice Proprietile fizice sunt determinate ntr-un grad foarte mare de structura ionic dipolar a acestor compui. n stare pur sunt solide albe, solubile n ap (excepie L cistina, L tironina), greu solubile n alcooli, aproape insolubile n eter, prezint puncte de topire foarte ridicate; aminoacizii naturali sunt optic activi mai ales levogiri. n soluii apoase formeaz ioni bipolari (amfioni):
NH2 R CH COOH R CH NH3 COO
Aminoacizii au caracter amfoter; n acid se comport ca o baz i n mediu alcalin se comport ca un acid. II. 2.2.2. Proprieti chimice Proprietile chimice se datoreaz celor dou grupri prezente n molecule aminoacizilor. a) Proprieti chimice datorate gruprii amino: - reacioneaz cu acizii minerali cu formare de sruri de amoniu; - se pot acila cu clorurile sau anhidridele acizilor formnd amide substituite; - se condenseaz cu aldehidele cu formare de baza Schiff.
33
O reacie important este dezaminarea aminoacizilor n reacie cu acidul azotos:
Reacia este folosit pentru dozarea cantitativ a aminoacizilor prin msurarea volumului de azot dezvoltat (metoda Van Slyke). n organism sub aciunea enzimelor specifice dezaminazele are loc degradarea hidrolitic cu dislocarea gruprii NH2 sub form de amoniac (NH3) i formarea hidroxiacidului corespunztor.
n organism, amoniacul se elimin prin dezaminare oxidativ (prin dehidrogenare enzimatic n prezena oxidazelor) cu formare de cetoacid. Dezaminarea poate fi i reductiv n prezena enzimelor reductoare hidrogenaze) cnd se formeaz amoniac i acizi carboxilici. b) Proprieti chimice datorate gruprii carboxil: Dintre proprietile chimice datorate prezenei n molecul a gruprii carboxilice amintim reacia de decarboxilare. Bacteriile intestinale i de putrefacie n mediu slab acid, descompun aminoacizii cu eliminare de bioxid de carbon.
c) Reacii n care intervin ambele grupri: Formarea de legturi peptidice Reacia const n eliminarea apei ntre gruparea carboxil a unui aminoacid i gruparea amino aparinnd altui aminoacid:
34
Aceast proprietate a aminoacizilor are o mare importan pentru c st la baza formrii peptidelor, a polipeptidelor i a proteinelor n general. Dup cum este uor de observat, la ambii aminoacizi aparinnd dipeptidului a rmas cte o grupare funcional liber. Un aminoacid are grupare carboxil liber, care se poate combina cu gruparea amino (NH2) liber a unui alt aminoacid cu formarea unui tripeptid, iar cellalt aminoacid are gruparea amino liber, care la rndul ei se poate combina cu gruparea carboxil a altui aminoacid cu formarea unui tetrapeptid .a.m.d. II.2.3. Catabolismul aminoacizilor Cile generale comune de degradare a tuturor aminoacizilor sunt: a) degradarea prin dezaminare; b) degradarea prin transaminare; c) degradarea prin decarboxilare. Degradarea aminoacizilor prin dezaminare este o cale fercvent de degradare a acestor componente; mecanismul dezaminarii se poate realiza pe trei ci: - dezaminare oxidativ; - dezaminare hidrolitic; - dezaminare reductiv. Despre aceste tipuri de reacii s-a discutat la proprietile chimice ale aminoacizilor datorate gruprii NH2. Reacia de transaminare constituie unul din mecanismele cruciale ale metabolismului aminoacizilor i al interrelaiei metabolice ntre aminoacizi (respectiv proteine), glucide i lipide. Reacia de transaminare const n transferul gruprii aminice a unui aminoacid pe un cetoacid cu formarea unui aminoacid nou (corespunztor cetoacidului iniial) i a unui cetoacid nou (corespunztor aminoacidului iniial). n aceast reacie nu se formeaz amoniac liber, deci nu este o reacie simpl de dezaminare. Enzimele care catalizeaz reacia de transaminare cu numele de transaminaze sau transferaze. n mecanismul general al transaminrii biologice un rol central l au aminoacizii dicarboxilici, acidul glutamic i acidul aspartic, pentru care exist n organism sub o form foarte activ transaminazele corespunztoare: glucamicotransaminaza i asparticotransaminaza. Enzimele care catalizeaz reaciile de transaminare aparin grupei enzimelor de transfer, sunt aminoferaze, coenzima acestora fiind piridoxal 5' fosfatul.
35
Intensitatea reaciei de transaminare este foarte diferit pentru diverse esuturi. Transaminarea este intens n esutul muscular, creier, ficat, rinichi, mucoasa intestinal; foarte puin intens n organele glandulare, esuturile embrionare i neoplazice. II.2.4. Biosinteza aminoacizilor n afar de cile speciale de biosintez specific fiecrui aminoacid n parte exist ci generale de biosintez a lor i anume: - calea transaminrii directe; - calea cuplrii aminrii reductive a acidului cetoglutaric cu transaminarea de pe acidul glutamic astfel sintetizat pe cetoacizii corespunztori diverilor aminoacizi. Biosinteza aminoacizilor prin transaminare are loc cel mai frecvent din cetoacizi corespunztori acidului glutamic, aspartic i alaninei i anume cetoacizii cetoglutamic, oxalilacetic i piruvic, care conin catena de carbon a acidului glutamic i, respectiv aspartic i alaninei. Aceti cetoacizi vom vedea c sunt metabolii care apar intermediar n ciclul Krebs i stabilesc astfel conexiunea metabolismului protidic cu cel al glucidelor i lipidelor. Energia necesar sintezei acestor cetoacizi este luat n cea mai mare parte din ATP, sintetizat la rndul su n cursul proceselor de fosforilare oxidativ care au loc n catena de oxidare: Biosinteza aminoacizilor prin intermediul acidului glutamic este o cale major de sintez a acestor componente. Conexiunea reaciei de aminare reductiv catalizat de glutamicdehidrogenaza cu reacia de transaminare catalizat de glutamictransaminaz poate duce la sinteza i degradarea tuturor aminoacizilor; prin aceasta acidul glutamic constituie o component cheie a ntregului metabolism al aminoacizilor. Acid glutamicdehidrogeneza, enzim care catalizeaz aminarea reversibil, este o dehidrogenaz NAD dependent i aciunea sa duce la sinteza acidului glutamic din amoniac i acidul cetoglutaric (reacia1). Acidul glutamic astfel sintetizat transfer gruparea aminic pe un cetoacid sub aciunea catalitic a glutamictransaminazei, ceea ce duce la sinteza unui aminoacid nou (reacia 2). Poziia special pe care o ocup acidul glutamic n metabolismul tuturor celorlali aminoacizi este datorat existenei n aproape toate esuturile a enzimelor specifice corespunztoare acestei componente i anume a unei glutamicdehidrogenaze i a unei glutamictransaminaze foarte active, care prin aciunea lor cuplat introduc acest aminoacid la punctul de ncruciare a unor multiple procese metabolice.
36
NAD
FAD
citocrom
citocromoxidaza
O2
II.2.5. Rolul aminoacizilor n organism Aminoacizii liberi au funcie energogen i rol plastic prin includerea n proteine. Intervin n procesele de detoxificare a organismului i au aciuni metabolice diverse particulare fiecruia n parte. Intervenia diferiilor aminoacizi n biochimismul celular este de mare importan i se pare c au implicaii majore n efort, att la nivelul musculaturii striate, ct i al proceselor integrative neurohumorale. Dintre aminoacizii utilizai n susinerea efortului menionm: acidul glutamic, acidul aspartic, arginina, glicocolul, tirozina i lizina.
37
Acidul glutamic este un constituent al tuturor proteinelor. Are loc central n ntregul metabolism azotat i este o component cheie n conexiunea metabolismului azotat cu metabolismele glucidelor i lipidelor. Acidul aspartic alturi de cel glutamic controleaz metabolismul azotat prin mecanismul transaminrii. Particip la biosinteza bazelor purinice i pirimidinice, la biosinteza ureei a treoninei i i alaninei. Arginina este un aminoacid parial esenial, indispensabil din alimentaie. Arginina este un aminoacid glucogenic prin intercorelaia sa metabolic cu ornitina care la rndul su este corelat metabolic cu acidul glutamic. Este protector hepatic. Glicocolul sau glicina (H2NCO2COOH) este cel mai simplu aminoacid; este un aminoacid glucogenic, deci poate fi introdus n ciclul de degradare oxidativ a glucidelor. Particip la biosinteza nucleului porfirinic i purinic, la biosinteza creatinei i serinei. Intervine n procesele de detoxificare din organism prin formarea cu unele produse toxice a unor compui de eliminare netoxici de exemplu, cu acidul benzoic acidul hipuric, cu fenolii, acizii fenilaceturici, cu acidul nicotinic, acidul nicotinuric. Lizina este un aminoacid esenial, aglucogenic i acetogenic cu rol deosebit n structura proteinelor naturale datorit celor dou grupri aminice terminale. II.3. Peptide Polipeptide Peptidele sunt compui organici care au n molecul cel puin o legtur peptidic (-CO-NH-). Legtura peptidic se formeaz ntre gruparea amino a unui aminoacid i gruparea carboxil a altui aminoacid, precum i ali compui naturali cu legtur de tip peptidic. Dup numrul resturilor de aminoacid din molecul polipeptidele se clasific n: - oligopeptide cu numr limitat al resturilor de aminoacid (di, tri, tetra); - polipeptide cu un numr mai mare de aminoacizi (peste patru). Caracteristic acestor substane este reacia biuretului, n mediu alcalin cu sulfatul de cupru dau coloraie violet.
38
II.3.1. Peptide existente n stare natural Dintre dipeptide menionm Carnozina (-alanil L histidina) i Anserina derivat metilat al carnozinei. Se gsesc n esutul muscular. Tripeptida Glutation (-L-glutamil L cisteinil-glicocol) are un rol important n organism, particip la transferul de electroni. Glutationul se comport ca un sistem redox (datorit gruprilor tiolice libere). Are rol activator a numeroase enzime. Dintre tripeptide mai menionm Melanostatina (MSH)-hormon melano-citostimulator, secretat i eliberat de hipofiz i factorul de eliberare a hormonului tirotrop (TRH-tirotropin releasing hormon). Dintre polipeptidele naturale enumerm: Somatoliberina (factor de reglare a hormonului de cretere SRF), factorul de eliberare al ACTH (hormon adrenocorticotrop), factor de eliberare a hormonului luteinizant (LH) Luliberina; Elediosina, un polipeptid cu aciune vasodilatatoare i stimulatoare a musculaturii netede, de asemenea stimuleaz secreia salivar i gastrointestinal. Un polipeptid cu rol important n organism este Angiotensina I i II, cu aciune hipertensiv i stimulatoare a musculaturii netede care se formeaz n plasma sanguin. Pe lng rolul de reglare al presiunii arteriale, angiotensina regleaz balana Na+, hipersecreia primar de aldosteron (hormon mineralocorticoid) i regleaz metabolismul apei. Glucogenul sau factorul hiperglicemiant reactiveaz fosforilaza hepatic, crete viteza de transformare a glicogenului hepatic n glucozafosfatglucoza 6 fosfat glucoza liber. Excesul de glucagon duce la hiperglicemie. Opus lui este hormonul hipoglicemiant calcitonina. Dintre polipeptidele naturale ciclice, alctuite din L aminoacizi enumerm: vasopresina i ocitocina. Vasopresina are aciune antidiuretic, iar ocitocina acioneaz asupra musculaturii netede (mai ales asupra uterului). II.3.2. Rolul peptidelor i polipeptidelor n organism a) sunt componente structurale ale esuturilor (anserina i carnozina); b) transportori de electroni (glutationul I); c) factori de reglare a activitii unor glande cu secreie intern (factori de eliberare secretai de hipotalamus); d) factori de sulfatare; e) rol de hormoni
39
adrenocorticotrop i melanocitostimulator glucagonul, calcitonina insulina f) antibiotice (gramicidinele, tirocidinele); g) toxine (faloidina); h) inhibitori naturali ai enzimelor etc. II.4. Proteine II.4.1. Principii structurale ale proteinelor Proteinele sunt parte component a fiecrei celule, formeaz elementele contractile i enzimele, care pun n libertate energia necesar ntreinerii vieii, sunt prezente n snge, unde ndeplinesc funcii de transport. n funcie de nsuirile lor, proteinele pot s fie extraordinar de variate; citm doi reprezentani n general, mai bine cunoscui: pe de o parte proteinele albuului de ou (albumina), care se denatureaz la fierbere, sunt uor solubile n ap, intr foarte uor n reacie, pe de alt parte, cheratina unghiilor i copitelor complet insolubil, dure, relativ inerte i rezistente din punct de vedere chimic. O clasificare a proteinelor este greu de fcut. Se pot stabili totui dou grupe: scleroproteinele insolubile, cu structur fibrilar i servesc ca substane de susinere i de schelet; sferoproteinele solubile n ap sau soluii saline, (prot. globulare) ale cror molecule nu sunt filiforme, ci sferice i care ar putea deocamdat s fie caracterizate prin nsuirile reprezentanilor cunoscui, ca albuul de ou sau serul sanguin. Construcia chimic a proteinelor const n condensarea unui numr mare de acizi aminai pe principiul peptidelor. Un fragment din lanul peptidic ar avea astfel urmtoarea formul structural:
iar problema structurii ne ntoarce la ntrebarea iniial: care este nsuirea sau secvena dup care se succed aminoacizii, adic ce semnificaie au n aceast formul radicalii R, pn la Rx?
40
Este uor de imaginat c un lan de atomi att de lung, cum se formeaz atunci cnd mai multe sute de aminoacizi se unesc ntr-o molecul, poate s fie dispus n spaiu n mod felurit, ca un lan ntins, ca un ghem dezordonat sau ca o spiral ordonat. Dispoziia lanurilor n spaiu poart denumirea de conformaie n lan. II.4.2. Secvena aminoacizilor Cea dinti secven mai mare care a reuit s fie stabilit, a fost cea a insulinei (Sauger, 1954), un polipeptid format din 51 de aminoacizi. Din datele de pn acum se poate constata c acizii aminai sunt de obicei grupai, aspect ntlnit i n cazul aminoacizilor bazici i aromatici. Se tie precis c toate moleculele aceleiai proteine prezint aceeai secven i se tie n prezent c aceast secven este stabilit pe cale genetic. Se observ concordane mai mult sau mai puin mari n secvena proteinelor cu aceeai funcie, dar de origine diferit. n asemenea cazuri, este vorba de proteine omoloage. II.4.3. Macrostructura proteinelor Dac structura intim sau fin se refer la natura, proporia i succesiunea diferiilor aminoacizi ce intr n molecula proteic, macrostructura, reflect forma pe care o ia n spaiu lanul polipeptidic format din sute de aminoacizi. Dispoziia lanului polipeptidic n spaiu se numete conformaie n lan. Forma pe care o ia lanul polipeptidic n spaiu poate fi: filiform, ghem sau spiral ordonat. Conformaia n lan include urmtoarele structuri: a) structura primar corespunde modului de organizare a edificiului polipeptidic ce poate forma un lan deschis sau nchis i o anumit secven a aminoacizilor n interiorul lanului; b) structura secundar corespunde unei plieri sau rsuciri, meninut prin legturi de afinitate de tip special, diferite de legturile polipeptidice (conformaia de spiral datorit legturilor de hidrogen ntre aminoacizii dintr-un lan polipeptidic); c) structura teriar datorit legrii diferitelor catene polipeptidice prin legturi de tip special, intercatenare, diferite de legturile intercatenare de tip peptidic. Funcioneaz ca enzime, hormoni, virui etc.
41
ntre lanurile polipeptidice ale diferitelor structuri primare puse n libertate prin degradarea hidrolitic cu ajutorul enzimelor proteolitice (pepsina i tripsina) se pot stabili diverse legturi; legturi de hidrogen ntre hidrogenul azotului aminic al unui aminoacid i oxigenul carbonului carbonilic al altui aminoacid. Catena peptidic a proteinei va fi cilindru elipsoidat ( hilix). Dup Pauling, legtura de hidrogen are loc ntre gruparea CO a unui lan i gruparea NH a altui lan. Astfel de legturi mai dau gruprile OH i SH din catenele laterale ale edificiului polipeptidic. Un edificiu format astfel nu este rigid, are aptitudinea de a pierde sau ctiga electroni i protoni, determinnd anumite caracteristici fiziologice ale substanelor proietice; legturi covalente ntre dou lanuri peptidice diferite (ntre dou resturi de cistein). Se ntlnesc n cazul proteinelor ce prezint mare rezisten mecanic (Keratinele); legturi electrovalente (de tip salin) se pot stabili ntre gruparea COOH liber a restului glutamic i NH2 liber de tip guanidic; legturi Van der Waals. Lanurile peptidice nu sunt liniare, ntinse ci mpturite. Totul este un edificiu tridimensional. n organism proteinele se gsesc n soluii apoase i sub aciunea enzimelor specifice se degradeaz hidrolitic. Aceste enzime specifice determin totodat i sinteza proteinelor din aminoacizi. Fenomenul reversibil n organism are loc cu consum mare de energie, pe care o procur cu ajutorul actului respirator. II.4.4. Hemoglobinele Hemoglobinele formeaz pigmenii roii respiratori ai sngelui i au rol de fixare, transport i depunere a oxigenului atmosferic la nivelul esuturilor. Toate hemoglobinele conin 0,33% fier. Hemoglobina are o greutate molecular de 67.000, este un agregat format din patru lanuri peptidice fiecare coninnd o grup de hem. Hemoglobina este o protein globina care are ca grupare prostetic hemul. Hemul are structura porfirinic. Porfirina este substana a crei molecul de baz porfirina, este alctuit din 4 cicluri pirolice legate ntre ele prin patru puni de metenil, formnd un nucleu n care atomii de azot din aceste patru cicluri sunt orientai spre interior. Doi atomi
42
Protein + H2O aminoacizi
de azot pirolic au fixat cte un atom de hidrogen mobil (ce poate fi nlocuit cu metale), iar ceilali doi atomi de azot sunt legai de ciclul pirolic prin legturi duble. n ciclul porfirinic legtura dubl alterneaz cu legtura simpl, iar ciclul pirolic cu cel izopirolic. Hemoglobina cu oxigenul molecular formeaz oxihemoglobina care transport oxigenul din alveolele pulmonare la toate organele i esuturile i l depune pentru a se reduce din nou n hemoglobin. Hemoglobina este socotit o pseudoenzim. Fixarea i eliberarea oxigenului depinde de presiunea oxigenului. La presiune mare fixeaz oxigenul i la presiune mic l elibereaz n esut. globina care este toxic.
Hb + O2 n plmni HbO2 Cu oxidul de carbon (CO) hemoglobina formeaz carboxihemo-
II.4.5. Metabolismul proteinelor i rolul proteinelor n organism II.4.5.1. Rolul proteinelor n organism Proteinele sunt uniti primordiale ale materiei vii. Rolul proteinelor n organism este multiplu i anume: a) Rol structural: sunt componente ale tuturor celulelor; sunt necesare creterii i refacerii esuturilor degradate prin uzur; b) Rol funcional activ n dirijarea proceselor metabolice, datorit calitilor de componente structurale ale enzimelor i ale unor hormoni; c) Rol fizico-chimic datorit caracterului lor coloidal i amfoter. Particip la diverse procese de reglare i anume: reglarea presiunii osmotice, echilibrelor la limita de faze (echilibru electrostatic, permeabilitatea prin membrane, repartiia ionilor), reglarea echilibrului acidobazic; d) Rol energetic prin degradarea compuilor lor de transformare pn la etapa final de CO2 i H2O. Pentru biosinteza proteinelor este indispensabil prezena unitilor structurale aminoacizii. Cile mai importante de sintez ale aminoacizilor sunt aminarea i transaminarea. Reacia de transaminare reprezint un punct de legtur esenial ntre metabolismul glucidelor i cel al protidelor, asigurnd constana echilibrului azotat n organism. Acidul glutamic se afl n majoritatea esuturilor i intervine n sinteza tuturor aminoacizilor neeseniali. Aa cum am menionat la aminoacizi, organismul uman nu poate sintetiza aminoacizii din compuii anorganici ai azotului sau din azot molecular, prin procese cuplate cu procesele de
43
oxidoreducere donatoare de energie i i procur aminoacizii (eseniali) prin aportul alimentar al proteinelor care conin aceti aminoacizi sau prin biosinteza lor din alte componente. Pentru proteine nu exist un organ special de depozitare cum este ficatul pentru glucide sub forma de glicogen hepatic i nici un esut specializat cum este esutul adipos pentru lipide. Pentru proteine organismul are o capacitate limitat de depozitare i aceast depozitare nu are loc ntr-un singur organ sau esut ci n toate. Spre deosebire de glucide i lipide, unde aportul excesiv duce la o cretere a depozitrii acestora n organism, pentru proteine, aportul nu duce la o depozitare a excesului, ci la o intensificare a degradrii lor. Capacitatea organismului de a-i menine prin mecanisme multiple i echilibrate un raport constant ntre sinteza i degradarea proteinelor, ntre aportul lor alimentar i eliminarea produselor de degradare azotate, constituie echilibrul azotat al organismului. Pentru construirea proteinelor organismului n cretere, este necesar un bilan azotat pozitiv, adic aportul exterior al azotului s ntreac eliminarea. Dup Rubner, necesitatea proteinic minim ar fi n medie de 100-200 g proteine/zi. Aceast valoare depinde ns n mare msur de natura proteinei i, mai sigur, de calitatea ei (compoziia n aminoacizi eseniali). Se introduce astfel noiunea de necesitate calitativ a azotului, ceea ce condiioneaz diferene n eficacitatea diferitelor proteine alimentare. Astfel proteinele de origine animal (lapte, carne, ou) prezint o component calitativ mult mai eficace dect proteinele de origine vegetal, rolul proteinelor fiind n esen, procurarea tuturor aminoacizilor necesari sintezei proteinelor proprii organismului i n special, aminoacizii eseniali. Hrana trebuie s conin un minim necesar pentru fiecare din aminoacizii eseniali, pe care organismul nu-i poate sintetiza sau i sintetizeaz extrem de lent i, n acelai timp, o cantitate minim de azot necesar sintezei aminoacizilor neeseniali pe care organismul i poate deci sintetiza din ali compui. Aceste valori determin minimul proteic de care are nevoie organismul. De menionat c metabolismul azotat este n larg msur sub control hormonal. Deficiena insulinic duce la o balan azotat negativ, iar aportul de hormoni androgeni la o retenie de azot. Hormonul tiroidian este necesar mobilizrii proteinelor musculare, n timp ce hormonul de cretere este necesar meninerii proteinelor musculare; acesta, n absena hormonului tiroidian, intervine mai mult asupra colagenului dect asupra miozinei.
44
II.4.5.2. Biosinteza proteinelor Aa cum am artat, fiecrei proteine i este caracteristic o anumit secven a aminoacizilor constitueni i o anumit structur spaial. Secvena aminoacizilor este transmis ereditar de ADN informaia genetic fiind stocat la nivelul cromatinei cromozomiale pe lanul dublu helicoidal al ADN-ului sub forma codului genetic. Prin cod genetic se nelege modul cum sunt nscrise n molecula de ADN, prin secvena de patru baze azotate, succesiunea a cca 20 de aminoacizi ce intr n structura tuturor proteinelor. Codul genetic permite descifrarea informaiei genetice, adic transcripia secvenei azotate din ADN n secvena de aminoacizi din proteine. Fenomenul de transcripie, respectiv de decodificare i recodificare a ADN-ului de ctre ARNi are loc la nivelul nucleului celular. Biosinteza proteic are loc n mai multe etape i anume: n prima etap aminoacizii sunt activai de enzime specifice n prezena ATP-ului i a ionilor de magneziu, formnd mpreun un complex. Aminoacidul activat este legat apoi de ARN-ul de transfer sau ARN s solubil. Fiecare aminoacid are un ARN solubil specific, purttor al unui triplet numit codon, alctuit din trei baze azotate. ARNs are rolul de a transporta aminoacizii pe ribozomii citoplasmatici. Ribozomii sunt particule submicroscopice alctuite din ARN ribozomal i proteine. Ei pot sintetiza numai atunci cnd sunt ncrcai cu ARNi care, aa cum am menionat, se sintetizeaz n cromozomii din nucleu i apoi trece pe ribozomii citoplasmatici care sunt locul de biosintez a proteinelor. ARNi dirijeaz aranjarea aminoacizilor legai de ARN-ul de transfer i conduce la biosinteza unor proteine cu o structur corespunztoare codului genetic coninut n molecula ADN. ARNi servete drept matrice pentru sinteza proteic. Particulele ribozomale se fixeaz la captul ARN-ului informaional i progreseaz de-a lungul acestuia n cursul biosintezei iar la cealalt extremitate se detaeaz elibernd proteina. Polipeptidul format se desprinde de pe ribozomi, n prezena ATP i a ionilor de Mg2+ i se leag ulterior n mod specific de alte lanuri polipeptidice, dnd natere macromoleculei diverselor proteine. Rennoirea proteinelor are loc destul de rapid. n 24 de ore n organism se rennoiesc cca 400 g proteine. Viteza acestui proces variaz ns de la un esut la altul (proteinele ficatului se rennoiesc mult mai rapid dect cele ale muchilor).
45
II. 4.5.3. Catabolismul proteinelor Degradarea hidrolitic a proteinelor tisulare proprii are loc n toate esuturile i se realizeaz sub aciunea unui complex de enzime numite catepsine. n urma degradrii hidrolitice rezult aminoacizii, care urmeaz cile generale de catabolism ale aminoacizilor. Prezentm mai jos schema general a degradrii proteinelor n organism.
46
III. LIPIDE
Definiie Lipidele sunt o clas heterogen de substane solubile n solveni organici (eter, aceton, cloroform etc.) insolubile n ap. Din punct de vedere chimic sunt esteri ai alcoolilor cu acizii grai cu greutate molecular mare. ntr-o prim clasificare lipidele se mpart, dup elementele pe care le compun, n: a) lipide simple (C, H, O); b) lipide complexe (C, H, O plus P, N sau S). III.1. Lipide simple Lipidele simple sunt esteri formai ntre un alcool sau polialcool i acizi grai saturai sau nesaturai. Componenta alcoolic este glicerina care posed 3 grupe hidroxilice (alcool trivalent):
Ca alcool trivalent, glicerina poate forma mono, di i triesteri, care se denumesc mono-, di- i trigliceride. Trigliceridele conin de multe ori 2 sau 3 acizi grai diferii. Prin hidroliz se poate distruge legtura esteric, componenii devenind liberi. Cu aceast ocazie nu rezult acizii grai liberi, ci srurile lor alcaline, adic spunuri. Spre deosebire de lipidele saponificabile care sunt insolubile n ap, spunurile sunt solubile n ap.
47
III.1.1 Acizii grai Sunt acizi carboxilici care intr n alctuirea grsimilor, conin cel puin 4 atomi de C, n marea majoritate sunt monocarboxilici saturai sau nesaturai, cu catena mai ales aciclic. Au numr par de atomi de C, cu excepia C5 i C7. Foarte rar ramificai, mai pot conine funcia alcoolic sau funcia aminic. Acizii grai nesaturai dau toate reaciile caracteristice substanelor etilenice (-C = C-) i prezint izomeria CIS TRANS. Exemplificm cu urmtorii acizi grai:
III.1.2. Trigliceride Aa cum am menionat sunt triesteri ai glicerinei cu acizii grai.
Uneori R R R n acest caz avem trigliceride mixte. Reacia de esterificare are loc ntre OH de la acid i hidrogenul de la alcool:
CH3 OH + CH3 CH2 COOH CH3 COOCH2CH3 H O
2
48
Gliceridele formeaz depozite de rezerv n esutul subcutanat. Amestecul cel mai ntlnit al trigliceridelor sub care apar n esuturi sau organe este tripalmitina, tristearina i trioleina. Gliceridele se degradeaz sub aciunea enzimelor numite lipaze (sunt hidrolizate n glicerin i acizi grai). Lipazele sunt hidrolaze i aparin grupei esterazelor. Legtura esterilor va fi scindat cu fixare de ap, cu formare de acizi grai liberi i, n prima faz, digliceride; dup o reacie mai ndelungat asupra grsimilor, esterazele pot separa al doilea i al treilea rest de acid gras. Lipazele se gsesc n concentraii mari mai ales n pancreas, n peretele intestinal i n ficat. Se cunosc dou lipaze, una insolubil care este activ la pH = 3,6 i una solubil, activ la pH = 8. Inhibitor pentru lipaze este chinina. Din categoria lipidelor simple mai menionm: cerurile, steridele i steroli. Nucleul steroidic st la baza hormonilor steroizi (colesterol, hormoni estrogeni i androgeni, corticosuprarenali . a.). III.2. Lipide complexe Lipidele complexe se clasific n 2 mari grupe: glicerolipide i sfingolipide. Fosfatidele se gsesc n toate celulele, sunt componente ale membranei celulare. esutul nervos este n special bogat n fosfatide, cerebrozide i gangliozide. Menionm cardiolipina, un fosfolipid izolat mai nti din muchiul inimii. Lecitinele i cefalinele prezint o importan biologic deosebit, n lecitine cea de a doua grup acid a acidului fosforic este esterificat cu nc un aminoalcool colina, iar cefalinele conin dou grupe de substane: colamincefalina (fosfatidiletanol amin) i serincefalin (fosfatidiliserin). Cum se observ colina este nlocuit de un aminoacid serina sau baza colamin (HO CH2 CH2 NH2). Gangliozidele se gsesc n concentraie mare n substana cenuie a creierului; dar se gsesc i n alte organe i n membrana eritrocitelor. Ele joac un rol important n transmiterea impulsului nervos la nivelul sinapselor. III.3. Metabolismul lipidelor Lipidele din organism provin din dou surse principale i anume: a) o surs direct, aceea a lipidelor din alimente; b) o surs indirect, n special din glucidele alimentare i din protidele alimentare. Ciclul lui Krebs este calea major de interconversiune a acestor trei grupe de substane. Participarea glucidelor n metabolismul lipidelor se extinde att n procesul de sintez a acizilor grai, ct i a glicerolului i sterolilor. Ficatul are un rol central n metabolismul lipidelor, rol ce se
49
extinde asupra tuturor etapelor acestui metabolism i anume: digestie, absorbie, depozitare, sintez, degradare i transformare. esutul hepatic are capacitatea de a seleciona preferenial acizii grai nesaturai. De asemenea, ficatul are capacitatea de a desatura acizii grai saturai. Reacia are loc sub control enzimatic (acid gras dehidrogenaza), care la om poate realiza numai dehidrogenarea cu formarea unui acid cu o singur dubl legtur n caten, deci de tipul acidului oleic. Dehidrogenarea are loc la nivelul carbonului 9 i 10 conform reaciilor: acid stearic acid oleic + H2 acid palmitic acid palmitoleic + H2 Nu poate sintetiza ns acizii grai cu legturi duble multiple ca: acid linoleic, linolenic i arahidonic, care din acest motiv sunt considerai ca eseniali. Ficatul mai are i capacitatea de a satura acizii grai nesaturai. Proces important, cnd alimentaia lipidic const n special din uleiuri vegetale. III.3.1. Catabolismul lipidelor Aa cum am mai menionat, prima etap a catabolismului lipidelor simple este hidroliza lor sub aciunea lipazelor. Prin desfacerea enzimatic a gliceridelor rezult glicerolul i acizii grai. Catabolismul lipidelor se reduce astfel la catabolismul glicerolului (glicerina) i, respectiv la catabolismul acizilor grai. n urma catabolismului lipidelor, rezult mult energie, 1 g de lipide elibereaz 9,3 kcal/g. III.3.1.1. Catabolismul glicerolului Glicerolul rezultat n urma scindrii lipolitice a gliceridelor, intr n circuitul de degradare a glucidelor cu care poate fi corelat la etapa glicolitic prin transformarea sa n -glicerofosfat, conform reaciei:
50
ac.fosfogliceric ac. piruvic acid lactic sau aldehid acetic. Oxidarea acidului piruvic urmeaz apoi ciclul lui Krebs. Prin transformarea glicerolului n L--glicerofosfat, aceast component intr n secvena glicolitic parcurgnd cile comune de metabolizare a glucidelor. Astfel glicerolul poate lua parte la glicogenez prin resinteza glicogenului din acidul lactic. O parte din glicerolul rezultat din scindarea hidrolitic este ns reutilizat pentru resinteza gliceridelor i fosfatidelor. III.3.1.2. Catabolismul acizilor grai Acizii grai reprezint componenta major din structura gliceridelor i, n general, a tuturor lipidelor, astfel c problema degradrii i sintezei acestor componente este de prim importan pentru metabolismul lipidelor. Asupra mecanismului de degradare oxidativ a acizilor grai exist dou teorii mai importante i anume: teoria oxidrii (Knoop) i teoria oxidrii (Verkade). Teoria oxidrii acizilor grai admite c oxidarea acestor componente are loc la metilul terminal al lanului de carboni. Teoria a fost formulat de Verkade. Calea oxidrii nu este cantitativ important. Are loc n special pentru acizii cu un numr de atomi de C ntre 8-12. Teoria oxidrii acizilor grai a fost formulat n 1904 de Knoop. Acizii grai care urmeaz a fi degradai prin oxidare, precum i produii intermediari care apar n cursul acestei degradri, nu particip la reacii sub form liber, ci cuplai cu coenzima A (HS-COA), formnd cu aceasta acilderivai ai COA (acil-COA) i care reprezint forma activ a acestor componente. Activitatea acidului gras este etapa de introducere a acidului gras n suita reaciilor de metabolizare. Activarea acidului gras se realizeaz prin cuplare cu COA, rezultnd acil-COA, forma sa activ. Reacia de activare are loc n prezena unei enzime specifice (tiokinaz) i reclam prezena ionilor de Mg2+ i a ATP. Acidul gras activat conine o legtur macroergic iar reacia de activare se desfoar n trei etape i anume:
Mg enz-AMP + PP rest pirofosfat a) enzime + ATP b) enz-AMP + AS-COA enz-SCOA + AMP c) enz-SCOA + acid gras acil-S-COA + enzim Acidul gras activat sub forma acil-S-COA intr n catena de degradare oxidativ.
2+
51
Fiecare scurtare a catenei acidului gras cu 2C conform teoriei oxidrii cuprinde o succesiune de 4 reacii pariale, dar care acum sunt interpretate ca fiind precedate de activarea acidului gras ce urmeaz a fi degradat. Succesiunea aceasta de reacii este: 1) dehidrogenarea acidului gras (prealabil activat) i formarea acidului nesaturat corespunztor (cu dubla legtur lng gruparea carboxil); 2) hidratarea acidului nesaturat (prin adiia apei la dubla legtur) i formarea hidroxiacidului corespunztor; 3) dehidrogenarea hidroxiacidului i formarea cetoacidului corespunztor; 4) clivarea unui fragment de 2C din molecula cetoacidului (sub aciunea O2) i formarea unui rest acetil i a unui nou acid gras cu 2C mai puin dect acidul gras de plecare.
52
Acidul gras nou format, poate intra din nou ntr-o secven de 4 reacii de acelai tip. Acest cuplu de 4 reacii se va repeta pn cnd toi carbonii din molecula acidului gras sunt transformai n resturi acetil. Succesiunea lor constituie ceea ce Lynen a denumit Spirala acizilor grai (figura 10). Secvena de 4 reacii se repet de un numr de ori egal cu jumtate, minus unu, din numrul carbonilor din molecula acidului 7 , secvena se va repeta gras (de exemplu, pentru acidul palmitic ( C16 de 7 ori) i constituie o spiral n care fiecare cuplu a celor 4 reacii constituie o spir. n fiecare spir 4H+ trec n catena de oxidare (catena de transfer de electroni) n care se elibereaz energia coninut n molecula acidului gras. Energia eliberat n cursul oxidrii se poate calcula astfel: fosforilarea oxidativ elibereaz 5ATP pentru fiecare spir, din care un ATP este consumat pentru activarea iniial a acidului gras. n cazul acidului palmitic vor fi eliberai deci 5 7 = 35 ATP i rmn eficace 34 ATP. n etapa de oxidare a resturilor acetil (ciclul acizilor tricarboxilici), dac se presupune c raportul de fosforilare oxidativ P/O este 3 se vor forma (3 4) 8 = 96 ATP. Deci n total 34 ATP + 96 ATP = 130 ATP sunt sintetizate pentru fiecare molecul din acest acid gras degradat pe calea oxidrii. n cazul degradrii acizilor grai cu un numr impar de atomi de carbon produsul final nu este restul acetil, ci restul propionil. III.3.2. Biosinteza lipidelor III.3.2.1. Biosinteza acizilor grai Sinteza acizilor grai poate avea loc pe dou ci distincte: a) calea mitocondrial (are loc n mitocondri) i folosete enzime implicate n spirala de degradare oxidativ; b) cale nemitocondrial (Wakil) i folosete acidul malonic activat (Malonil COA) Oricare ar fi calea de sintez a acizilor grai, punctul de plecare este acetatul sub forma sa activ de acetil COA (care provine att din catabolismul oxidativ al acizilor grai, ct i din metabolismul glucozei, respectiv din piruvat). Mecanismul de activare a acetatului a fost pus n eviden cu atomi marcai i are loc prin urmtoarea secven de reacii:
53
S-ar putea ca activarea s aib loc cu formarea intermediar a adenil acetatului
a) Calea mitocondrial Sinteza acizilor grai prin participarea sistemului mitocondrial are loc printr-o secven de 4 reacii, a cror succesiune n cazul formrii acidului stearic (C18) pe contul acidului palmitic (C16) este urmtoarea:
54
b) Calea malonil COA (Wakil) Este asemntoare cu prima, deosebirea const n faptul c alungirea catenei acidului gras se efectueaz cu ajutorul acidului malonic activat care provine din carboxilarea prealabil a acidului acetic, sub aciunea unei enzime de carboxilare (acetil COA carboxilaza) a crei coenzim este biotina, acetil-COA trece n malonil COA n prezena ATP ca donator de energie i a Mg2+. III.3.2.2. Biosinteza trigliceridelor Biosinteza trigliceridelor n diferitele esuturi poate s aib loc pe trei ci: a) Esterificarea direct a glicerolului (glicerinei) de ctre acizii grai sub aciunea lipazelor; aceasta este o cale minor, puin folosit. b) Din monogliceride n prezena ATP, COA i Mg2+ printr-o reacie de transacilare a acizilor grai activai sub form de acil SCOA, reacia este catalizat de transacilaz.
c) Din L glicerofosfat i acil-COA. Este calea cea mai important de sintez a trigliceridelor i coreleaz metabolismul acestor componente cu cel al fosfatidelor; ca produi intermediari se formeaz acizii fosfatidici.
III. 4. Rolul lipidelor n organism 1. Rol energetic reprezint un depozit energetic concentrat i cea mai economic cale de rezerv de energie 1 g de lipide elibereaz 9,3 cal., pe cnd 1 g de protide sau glucide 4,5 cal. Constituenii din molecula lipidelor care determin rolul energetic al acestor componente sunt n special acizii grai. Aa cum se cunoate, consumul energetic al organismului n efort este ridicat (5000 6000 kcal). ntr-o curs de ciclism consumul energetic poate ajunge pn la 11.000 kcal.
55
Efortul submaxim poate fi meninut perioade prelungite de timp. Utilizarea combustibilului n cursul efortului submaxim urmeaz o succesiune ordonat de etape care se bazeaz la nceput pe hidraii de carbon. Pe msur ce se continu antrenamentul, muchiul efector obine o cantitate crescnd de energie din acizii grai liberi circulani. Antrenamentul aerob (metabolism energetic aerob) sporete dependena organismului fa de lipide ca furnizor de energie i astfel se diminueaz dependena de glucide (cursele de fond 5000-1000, maraton, schi-fond, ciclism fond i not fond). Contribuia lipidelor i hidrailor de carbon la producerea energiei poate fi influenat, n mare msur de regimul alimentar. Adaptarea organismului la un regim alimentar bogat n lipide, poate cauza o schimbare substanial n utilizarea substratului, de la glucide la lipide. 2. Rol structural ptura de grsimi depozitat ca material de rezerv n diferitele depozite lipidice joac rol de susinere, de protecie, de izolare termic i electric. Lipidele particip de asemenea n structura membranelor celulare. Lipoproteinele de diferite tipuri sunt constitueni ai esuturilor citoplasmatice i particip la toate procesele vitale celulare. 3. Rol de solveni i vehiculani ai unor componente biologice importante, insolubile n ap, dar liposolubile, cum sunt vitaminele liposolubile (A, D, E, K). Prin aceasta au rol n procesele metabolice la care particip aceste componente liposolubile i n special vitaminele liposolubile, deci n osificare, n coagulare etc. 4. Rol de vitamine l au acizii grai cu legturi duble multiple (acidul linoleic, linolenic i arahidonic) cunoscui sub numele de vitaminele F, deoarece ndeplinesc n organism funcii speciale i acesta nu-i poate sintetiza. Aportul lor alimentar este indispensabil.
56
IV. GLUCIDE (ZAHARIDE)
Formula brut a glucidelor este Cn(H2O)n sau (CH2O)n din aceast cauz se mai numesc hidrai de carbon. Dup structura chimic sunt polialcooli aldehidici sau cetonici, fie derivai ai acestora; din aceast cauz, glucidele sunt clasificate n dou mari grupe: A. Glucide simple OZE monoglucide care au n molecul de la 3 10 atomi de C i mai multe grupe hidroxil. Din aceast grup fac parte triozele, tetrozele, pentozele, hexozele .a. B. Glucide complexe care sunt derivai ai monozaharidelor OZIDE. Se formeaz prin eliminarea apei dintre una sau mai multe molecule de monoglucid sau dintre o molecul de monoglucid i o alt substan. Dup modul de formare OZIDELE se mpart n gliconi sau poliglucide (eliminarea apei are loc ntre molecule de monoglucid) i glicozizi cnd cea de a doua molecul care particip la reacie poate fi un alcool, fenol, amin sau tioalcool. Componena neglucidic este denumit aglicon.
IV.1. Monoglucide (monozaharide) OZE Ozele sunt, din punct de vedere al funciei lor chimice, alcooli aldehide sau alcooli cetone. Sunt produse de oxidare ale polialcoolilor, n care o grupare alcool primar este transformat n grupare aldehid n cazul aldozelor, iar o grupare alcool secundar este transformat n grupare cetonic n cazul cetozelor.
57
Ozele monozaharidele sunt deci aldoze sau cetoze. Dup numrul carbonilor din molecul, ozele pot fi dioze (C2H4O2), trioze (C3 H6O3), tetroze (C4H8O4), pentoze (C5H10O5), hexoze (C6H12O6) etc. n natur se gsesc n special oze cu 5 i 6 carboni. Cel mai simplu monozaharid este glicoaldehida sau glicoloza, cu 2 atomi de C.
Cele cu 3 atomi de carbon sunt cele prezentate mai sus gliceroaldehida i dihidroxiacetona. Cele cu 4 atomi de carbon nu sunt gsite n produsele naturale. Pentozele, cu 5 atomi de carbon sunt rspndite n natur (arabinoze, xiloze, lixoza, riboza). Hexozele, monozaharide cu 6 atomi de carbon n molecul, sunt cele mai rspndite n natur (glucoza, galactoza, manoza, fructoza). S-a convenit a se numerota carbonul din molecula monozaharidelor ncepnd cu carbonul aldehidic cu numrul 1, carbonul cetonic notat cu numrul 2.
58
IV.1.1. Constituia i structura monozaharidelor Monozaharidele au n general o caten neramificat. Se cunosc trei monozaharide naturale ramificate (apioza, hameloza i streptonoza). Structura neramificat a glucidelor a fost pus n eviden prin experienele de reducere cu acid iodhidric (HI) i din datele asupra sintezei i degradrii glucidelor. Monozaharidele conin grupri alcool ( ) care au fost identificate prin reaciile lor caracteristice. Aceste grupri alcool din molecula ozelor sunt grupri alcool libere. Ele mai conin gruparea aldehid sau ceton.
Identificarea acestor grupri se face de asemenea prin reaciile lor caracteristice. Cercetrile au dovedit c monozaharidele nu prezint toate reaciile caracteristice gruprilor aldehidice sau cetonice, ci numai unele din ele. Monozaharidele nu sunt deci aldehide sau cetone adevrate ci pseudoaldehide sau pseudocetone, n care funcia aldehidic sau cetonic este mascat printr-o legtur intramolecular a acestor funcii. S-au admis astfel urmtoarele: ) ar exista iniial sub forma unei a) gruparea carbonilic ( ) speciale, cu reactivitate mai mare, grupri hidroxilice ( numit hidroxil glicozidic sau hidroxil semiacetalic cu nsuiri deosebite de ale hidroxilului alcoolic obinuit; b) ntre carbonul gruprii carbonilice i un alt carbon din molecul s-ar forma un ciclu prin intermediul oxigenului. Compuii formai se numesc semiacetali. Se numete semiacetal n general, un compus rezultat dintr-o grupare alcoolic i o grupare carbonilic, respectiv prin cuplarea acestor dou grupri:
59
n cazul monozaharidelor, aceast reacie are loc ntre gruparea carbonilic i o grupare alcool din interiorul aceleiai molecule i se formeaz un semiacetal ciclic care se scrie astfel:
Explicaia ciclizrii monozaharidelor o gsim n orientarea tetraedric a atomului de C, care permite formarea spontan a ciclurilor lipsite de tensiune (ciclurile penta i hexatomice) care sunt mai stabile. Monozaharidele se prezint sub form piranozic sau furanozic. Ambele forme constituie un heterociclu cu oxigen, forma piranozic cuprinznd un ciclu de 5 carboni i un oxigen (6 atomi), forma furanozic un ciclu de 4 carboni i un oxigen (5 atomi). Denumirea acestor heterocicluri deriv de la prototipurile lor piranul i, respectiv, furanul.
Cnd se folosesc formulele lui Fischer ntre C1 i C4 sau C5 se pun linii lungi de legtur.
Howarth a propus o formulare spaial, ciclul furanozic e reprezentat ca un pentagon, iar cel piranozic ca un hexagon.
60
Examinarea cu raze X arat c cei cinci atomi ai ciclului piranozic sunt n acelai plan, pe cnd atomul de oxigen este n alt plan. H i OH pot fi deasupra sau dedesuptul planului atomilor de C. Valenele care leag atomii aflai n planul din fa i deasupra planului ciclului se noteaz cu linii groase, iar valenele de dedesuptul acestui plan, prin linii subiri. Hidroxilul de la C carbonilic C1 la aldoze i C2 la cetoze n formularea piranozic sau furanozic poate avea dou poziii posibile: una desupra planului, alta dedesuptul acestui plan. Aceast ornduire explic existena celor doi izomeri i care corespund poziiei diferite a hidroxilului carbonilic, care va fi n sus i de aceeai parte cu oxigenul punii oxidice n cazul izomerului sau n jos i n opoziie cu oxigenul punii oxidice n cazul izomerului . Gruprile fixate la carboni sunt dispuse deasupra sau dedesuptul planului moleculei, acele grupri care erau scrise la dreapta n formularea liniar a catenei apar dedesuptul planului ciclului, pe cnd acelea care erau scrise la stnga apar deasupra ciclului. Conform acestei notaii, formulele se pot scrie cu indicarea atomilor de carbon care particip la structura ciclului i a hidrogenilor, sau cu omiterea lor.
61
IV.1.2. Izomeria monozaharidelor Existena izomerilor n cazul monozaharidelor se datoreaz unui triplu fenomen de izomerie concomitent i anume: 1. Metameriei (izomerie de compensaie); de exemplu: aldohexoz i cetohexoz
2. Izomeriei geometrice care apare datorit aezrii diferite a substituenilor la atomul de C fa de planul dublei legturi sau planul ciclului. a) Diasteroizomeri aa cum au artat fiecare monozaharid poate exista n dou forme i care se gsesc n echilibru n soluie.
62
b) Epimeri sunt epimere monozaharidele care se deosebesc ntre ele prin C1 i C2, ceilali atomi din molecul avnd configuraia identic. Exemplu n cazul unei aldohexoze:
3. Stereo izomeriei enantiomorfe sau izomeriei spaiale care este condiionat de ornduirea diferit a atomilor n spaiu. Aa cum tim, izomeria steric poate fi de dou feluri: geometric i optic. Pentru glucide s-a ales ca substan standard n privina activitii optice glicerinaldehida.
Pentru toate monozaharidele care au la C asimetric vecin gruprii alcool primar (CH2OH) aceeai configuraie ca glicogen
63
aldehida dextrogir, s-a convenit s se noteze cu litera D iar cele cu configuraie identic cu glicerinaldehida levogir s se noteze cu L. Literele D i L nu indic sensul rotaiei ci configuraia steric. Sensul rotaiei este indicat cu (+) i (). Monozaharidele naturale aparin, n general configuraiei D (+) sau D (). Izomeria monozaharidelor este ns mai complicat. n realitate ciclurile hexatomice sunt lipsite de tensiune pentru c cei 6 atomi de C nu se gsesc n acelai plan. Din aceast cauz formulele lui Hovarth au fost nlocuite prin formule de configuraie de ctre R. Recveg, R. Ferrier . a. dnd posibilitatea explicrii unor proprieti ce nu se puteau explica pn atunci. De la un ciclu hexanic de tip piranozic, se pot astfel obine mai multe configuraii moleculare i anume, dou n form de scaun i ase n form de baie.
Dintre aceste configuraii, cele mai stabile sunt formele scaun i n special forma C1. n cazul formelor scaun, o parte a atomilor de hidrogen pot avea o poziie aproape plan, n care caz se numesc ecuatoriali; ali atomi de hidrogen pot avea o poziie perpendicular fa de planul moleculei, fiind numii atomi axiali.
64
IV.1.3. Proprietile fizice ale monozaharidelor Sunt substane solubile n ap datorit gruprilor OH multiple, concentrate soluiile lor devin siropoase. Sunt greu solubile n alcooli, insolubile n eter, cloroform. Sunt cristalizabile, au gust dulce. Gustul mai mult sau mai puin dulce este determinat de gradul de solubilitate. Cea mai dulce este fructoza. De la trioze n sus prezint fenomenul de mutarotaie. IV.1.4. Proprietile chimice ale monozaharidelor Sunt determinate de gruprile caracteristice acestor compui: gruparea carbonilic i gruparea hidroxialcoolic, respectiv acetalic i de poziia acestor grupri. Gruprile alcoolice pot s fie esterificate, reacie folosit pentru caracterizarea zaharurilor i pentru blocarea prin esterificare a anumitor hidroxili. Esterii acidului fosforic prezint o deosebit importan pentru biochimie, n procesul de metabolizare se scindeaz aproape numai zaharurile fosforilate. Gruparea carbonilic reacioneaz cu fenilhidrazina H2NN cu formarea oximelor. Reacia este important pentru identificarea zaharurilor. Prin oxidare lent (sub aciunea Ag2O, apa de clor, hipoclorii) gruparea semiacetalic poate fi deshidratat dnd natere lactonei unui acid. Prin oxidare puternic (HNO3 conc.) se oxideaz i gruparea terminal CH2 OH, lund natere un acid dicarbonic. Caracteristic glucidelor sunt cromoreaciile cu fenolii (naftol, antron rezorcin etc.) i cu acizii minerali puternici. Acidul provoac hidroliza cu formare de derivai ai furfurolului, iar o parte se scindeaz mai departe formnd aldehide, acestea se condenseaz cu fenolii sub form de colorani. Toate zaharurile simple dar i numeroase zaharuri, au aciune reductoare, aceeai proprietate ine de gruparea cetol (gruparea carbonilic lng funcia hidroxil). Reacia este important pentru evidenierea i determinarea glucidelor. Menionm reacia Fehling care se bazeaz pe reducerea ionilor de Cu2+ n soluie alcalin. Se formeaz oxid cupros (Cu2O) compus care se depune sub forma unui precipitat rou-crmiziu.
65
IV.2. Metabolismul glucidelor Glucidele se absorb la nivelul intestinului sub forma de oze i trec n snge prin difuziune i osmoz. La absoria glucidelor particip i un proces de fosforilare, ce are loc n prezena hexokinozei i a ATP-ului. Glucidele sunt imediat eliberate din esterii lor fosforici, sub aciunea fosfotazelor i trec n sngele venei porte care le duce la ficat. n ficat o parte din ozele absorbite se transform n glicogen, iar o alt parte trece n circulaia general, prin intermediul creia ozele sunt duse la esuturi i utilizate. n snge se pstreaz o cantitate relativ constant de glucoz (80 120 mg %) numit valoare glicemic. Studiul metabolismului intermediar al glucidelor cuprinde urmtoarele capitole mari: a. Glicogeneza, adic formarea glicogenului din componente glucidice simple; b. Gliconeogeneza, formarea glicogenului din componente neglucidice (aminoacizi, cetoacizi, hidroxiacizi, glicerol etc.). c. Degradarea glicogenului care cuprinde: a) glicoliza, degradarea anaerob a glicogenului i respectiv a glucozei; b) degradarea aerob. Aceste procese sunt cunoscute n special pentru esutul hepatic i muscular. IV.2.1. Glicogeneza Ficatul nmagazineaz ntre 20 150 g glicogen, din care apoi repartizeaz dup necesiti esuturilor sub form de glicogen muscular i glicogen celular. Procesul de formare a glicogenului din monozaharide este un proces endergonic, consumator de energie i aceast energie este adus prin intermediul compusului macroergic ATP, sintetizat n cursul procesului oxidativ al arderii totale a unei mici fraciuni de glucoz (sau acid lactic, unul din produsele sale intermediare de degradare). Energia necesar polimerizrii a 50 g glucoz sub form de glicogen poate fi procurat prin degradarea oxidativ total a 5,3 glucoz, iar prin oxidarea unui mol de acid lactic se obine energia necesar sintezei a 3-6 moli glicogen. Organismul degradeaz pn la produsele finale CO2 i H2O aproximativ 1/10 din zahrul introdus pentru a procura energia necesar sintezei glicogenului din glucoz. Depozitarea glucidelor sub form de glicogen hepatic se face abia
66
dup or de la ingestia de glucide, atingnd un maximum dup 3 ore. n timpul nopii glicogenul hepatic crete. Transformarea diferitelor monozaharide n glicogen hepatic nu se face cu aceeai vitez, fiind probabil n funcie de transformarea lor prealabil n glucoz, monozaharidul din structura glicogenului. Cel mai repede este transformat fructoza, cel mai lent galactoza. Ficatul este singurul organ care poate utiliza galactoza pentru a o transforma n glicogen, respectiv s o transforme nti n glucoz. Celelalte esuturi nu pot utiliza galactoza dect dup trecerea sa prin ficat. Schematic etapele glicogenezei hepatice se prezint astfel: Glucoz +Mg2+ +ATP, Mg2+
(1)
Glucochinaz
Glucozo 6 fosfat
(3)
(2)
Glucozo 1 fosfat GLICOGEN Fosfoglucomutaza transglucozidaza Prima reacie este o transfosforilare, ireversibil a gruprii fosfat de pe ATP pe D glucoz reacie puternic endergonic, energia fiind procurat de desfacerea legturii fosfat macroergice (P) din molecula ATP. Glucozo 6 fosfatul numit i esterul Robinson, spre deosebire de glucoz, nu poate trece prin membrana celular i rmne ca atare n interiorul celulei, unde este supus transformrilor catalizate de enzimele endocelulare. Una din aceste transformri este aceea n ester glucozo 1 fosfat, precursorul direct al glicogenului; transformarea are loc sub aciunea fosfoglucomutazei. Reacia este activat de Mg2+ Mn2 i Cr3+ i de compui sulfhidrilici (glutation); este o reacie reversibil dar orientat spre glucozo 1fosfat n raportul de 94:6. IV.2.2. Gliconeogeneza n cazul unui aport insuficient de glucide alimentare sau dup efort, ficatul poate sintetiza glicogenul din aminoacizii glicoformatori (alanina, acid aspartic, acid glutamic, arginin .a. ce trec prin dezaminare n cetoacizi (acid piruvic, acid alfa-celo-glutaric, acid oxalilacetic). Din 100 g protide se pot sintetiza 58 g glucide. S-a demonstrat posibilitatea formrii glucidelor din glicerol, dioxiacetona, gliceraldehid i din acid lactic.
67
Rolul ficatului este determinant n glicogenez i gliconeogenez prin intervenia sa n: 1. conversiunea glucozei la glicogen i depozitarea acestuia sub form de rezerv glucidic; 2. capacitatea de a transforma n glicogen i alte oze dect glucoza; 3. capacitatea de gliconeogenez din componente neglucidice. n ficat, produsele comune rezultate din catabolismul glucidelor, protidelor i lipidelor constituie un fond metabolic (metabolic pool) ce servete la sinteza glicogenului, respectiv a rezervei de glucide; 4. formarea glucozei sanguine este o atribuie a esutului hepatic. esutul muscular particip totui la formarea glucozei sanguine din glicogen dar indirect prin intervenia esutului hepatic (hexokinoza muscular poate cataliza sinteza, dar nu hidroliza glucozo6fosfatului) pe cnd ficatul beneficiaz de prezena glucozo6fosfatazei care scindeaz hidrolitic glucozo6fosfatul, cu formare de glucoz liber) i anume prin intermediul acidului lactic, care rezult din degradarea anaerob a glicogenului muscular. IV.2.3. Catabolismul glucidelor Catabolismul glucidelor ncepe cu degradarea oxidativ a glicogenului sau a glucozei care se transform n glucozo 6 fosfat. +ATP Glucoz glucozo 6 fosfat + ADP hexokinoaza Glicogen + PO4H3 fosforilaza fosfogluco mutaza glucozo 1 fosfat glucozo 6 fosfat
Glucozo 1 fosfat
Glucozo6fosfat este componenta comun, de la care pornete mai departe degradarea glucidelor. Cile ulterioare de transformare a glucozo 6 fosfatului pot fi diferite i anume: IV.2.3.1. Degradarea anaerob (glicoliza), din care rezult acid lactic. IV.2.3.2. Degradarea aerob (respiraia), din care rezult CO2 i H2O. IV.2.3.3. Calea pentozofosfat, care duce la formarea de pentoze. IV.2.3.4. Calea acizilor uronici necesari biosintezei muco-polizaharidelor i proceselor de detoxificare a organismului.
68
IV.2.3.1. Degradarea anaerob glicoliza Glicoliza a fost studiat n esutul muscular dar ea se petrece la fel n toate celulele, n prezena dar fr participarea oxigenului molecular i duce n final la acid lactic: (C6 H12 O6)n 2 (C3H6O3)n Este numit i calea glicolitic Embden-Mayerhof i cuprinde o secven de 12 etape, oglindite n figura 11. n continuare vom descrie fiecare etap pe rnd: 1) Fosforoliza glicogenului. Prima etap a degradrii glicogenului este depolimerizarea macromoleculei sale, puternic polimerizate, prin scindarea fosforolitic a resturilor de glucoz cu formare de ester glucozo1fosfat (ester Cori). Enzima care catalizeaz aceast reacie este fosforilaza i reacia are loc cu scindarea resturilor de glucoz din molecula glicogenului cu fixarea fragmentelor acidului ortofosforic la moleculele care se scindeaz, formndu-se glucozo1fosfatul. Reacia este reversibil dar orientat n direcia formrii glucozo1fosfatului, n prezena unui exces de fosfat anorganic i n direcia sintezei glicogenului cnd avem un exces de glucozo1fosfat. Scindarea pe cale fosforilitic i nu hidrolitic a moleculei glicogenului reprezint, din punct de vedere energetic o economie, deoarece se obine glucozo 1 fosfatul prin participarea fosfatului anorganic i nu, ca n cazul fosforilrii glucozei, prin participarea i consumul componentei puternic energetic, care este ATP. 2) Transfosforilarea hexozelor const n conversia esterului glucozo1fosfat (esterul Robinson). Reacia este catalizat de o fosfoglucomutaz, glucozo 1,6 difosfatul funcionnd drept coenzim. 3) Izomerizarea esterului glucozo6fosfat. Reacia este catalizat de fosfohexoizomeraza denumit i oxoizomeraza. Reacia stabilete un echilibru ntre glucozo 6 fosfat i fructozo 6 fosfat. Echilibrul se stabilete pentru raportul 70% glucozo6fosfat i 30% fructozo 6 fosfat. 4) Fosforilarea fructozo6fosfatului la fructozo 1,6 difosfat este catalizat de o fosfofructokinaz i necesit prezena ionilor Mn2+ i posibil a ionilor k+, donatorul de fosfat fiind ATP. Reacia este exergonic i practic ireversibil, deoarece pentru introducerea celei de a doua legturi fosfat necesit o legtur fosfat puternic energetic. Exist o fosfataz care pe cale hidrolitic poate regenera fructozo 6 fosfatul cu eliberare de grupare fosfat. Fructozo 1,6 difosfatul este ultimul compus cu 6 atomi de carbon rezultat prin depolarizarea fosforolitic a glicogenului. Reacia urmtoare este o scindare a moleculei cu 6 C la molecule cu 3 C.
69
Fig. 11
70
5) Scindarea fructozo 1,6 difosfatului la triozofosfat i. Aceast scindare nu este de tip hidrolitic, este catalizat de o aldoz i anume fructo 0 1,6 difosfatliaza i duce la formarea a dou molecule de trioze: aldehida fosfoliceric i dioxiaceton fosfatul. 6) Izomerizarea esterilor triozofosforici i stabilirea echilibrului 3fosfogliceraldehidfosfodioxiaceton. Deoarece reaciile ulterioare ale procesului de glicoliz pornesc de la 3fosfogliceraldehid (aldehidafosfogliceric), trebuie ca permanent s existe un echilibru ntre cele dou trioze care am vzut c rezult din scindarea fructozo1,6difosfatului. Reacia de echilibru este meninut prin aciunea catalitic a unei izomeraze, fosfotriozoizomeraza conform reaciei: H2C O P H2 C O P HC OH HC = O fosfotrioza C=O H2C OH
aldehida fosfogliceric izomeraza dioxiaceton fosfatul Aceast reacie asigur o permanen prezen a esterului gliceraldehid 3 fosforic. 7) Fosforilarea oxidativ a 3fosfogliceraldehidei la acid1,3difosfogliceric. Aceast reacie implic modificri energetice importante; este aa-numita etap oxidativ a glicolizei. Reacia este deosebit de important, deoarece energia eliberat n procesul de oxidare este depozitat sub forma unei legturi fosfat macroergice n molecula acidului1,3difosfogliceric, ce conine o legtur macroergic. Reacia este catalizat de enzima 3fosfogliceraldehiddehidrogenaza care conine o grupare tiolic ce aparine glutationului. 8) Transformarea acidului 1,3 difosfogliceric n acid 3 fosfogliceric (esterul Nielsen) este cuplat cu etapa a 7-a prin transferul gruprii fosfat puternic energetice pe ADP. Transferul este catalizat de ctre 3 fosfoglicerilkinaza n prezena ionilor de Mg2*. Reaciile 7 i 8 sunt reacii cuplate i pot fi redate schematic prin reacia total:
3 fosfogliceraldehid + NAD + ADP + PO4H3 + acid 3 fosfogliceric ATP + NADH2 +
9) Transformarea acidului 3fosfogliceric n acid 2fosfogliceric. Reacia este catalizat de fosfogliceromutaza i duce la un echilibru ntre aceti doi izomeri. 10) Formarea acidului fosfoenolpiruvic este cea de a doua etap n cursul procesului glicolitic, n care se genereaz o legtur fosfat macroergic. Formarea acidului fosfoenolpiruvic are loc prin
71
scoaterea unei molecule de ap din acidul 2 fosfogliceric. Reacia este catalizat de o enolaz i necesit prezena ionilor Mg2+. 11) Transformarea acidului fosfoenolpiruvic n acid enolpiruvic are loc prin transferul gruprii fosfat macroergic pe ADP ca acceptor specific. Enzima care catalizeaz reacia este piruvatkinaza; ea necesit prezena Mg2+ i K+ i este reversibil numai n prezena K+. Trecerea de la acidul enolpiruvic la acidul piruvic are loc spontan, acidul piruvic fiind forma stabil. Deci, s subliniem faptul c degradarea pn la acid piruvic cuprinde dou etape eseniale n care sunt generate pentru fiecare mol de glucoz, cte dou legturi fosfat macroergice de fiecare etap i anume: n etapa de trecere de la 3 fosfogliceraldehid la acidul 3 fosfogliceric i n etapa de trecere a acidului 3 fosfogliceric la acid piruvic. 12) Transformarea acidului piruvic n acid lactic este ultima etap a glicolizei anaerobe. n aceast etap are loc reducerea acidului piruvic, respectiv hidrogenarea acestei componente cu formare de acid lactic, donatorul de hidrogen fiind NADH2. Nicotinamidadenindinucleotidul, forma redus (NADH2) necesar acestei reacii c este format ntr-o etap anterioar i anume n etapa de fosforilare oxidativ de trecere de la 3fosfogliceraldehid la acid 1,3difosfogliceric. Etapa reductiv i etapa de fosforilare oxidativ sunt deci cuplate prin sistemul: NAD NADH2, conform relaiilor: acid1,3 difosa) 3fosfogliceraldehida + NAD + H3PO4 fogliceric + NADH2 acid lactic + NAD b) acid piruvic + NADH2 Reacia este catalizat de lacticodenidrogenaza, enzim de structur complex. n timpul glicolizei, pentru fiecare mol de glucoz se elibereaz 57 kcal i se formeaz 2 moli de acid lactic. Energia eliberat n glicoliz este aproximativ mic n comparaie cu energia eliberat prin oxidarea glucozei la CO2 i H2O, de aproximativ 688 kcal/mol. Rolul fiziologic al glicolizei este totui important i din punct de vedere energetic, deoarece asigur o rapid producere de energie, cnd esutul nu are la dispoziie oxigenul necesar. n procesul de glicoliz pentru fiecare mol de glucoz se formeaz 4 moli de ATP i se consum 2 moli ATP, dac glicoliza pornete de la glucoz i numai un mol ATP dac pornete de la glicogen, randamentul net va fi de 2 moli de ATP n primul caz i de 3 moli ATP n al doilea caz. Se poate calcula energia depozitat sub forma legturilor fosfat macroergice n ATP, innd cont c pentru
72
generarea unei molecule ATP din ADP i ortofosfat mineral se consum conform calculelor mai vechi 11.600 cal. iar calculele mai noi indic 6.850 7.800 cal/mol. IV.2.3.2. Degradarea aerob a glucidelor Degradarea aerob a glucidelor (respiraia) se petrece cu participarea oxigenului i reprezint a doua etap a catabolismului glucidic. Reaciile pornesc de la acidul piruvic format n timpul glicolizei anaerobe. n acest caz, acidul piruvic nu mai este transformat n acid lactic, ci n prezena NAD a piruvatkinazei i a coenzimei A se transform n acid acetic activat (acetil COA) conform reaciei.
Pe alt cale, prin carboxilare, acidul piruvic se transform n acid oxalilacetic.
Acetil coenzima A i acidul oxalilacetic sunt componentele de baz de la care ncepe apoi degradarea aerob a glucidelor. Acest proces fiind ciclic este cunoscut sub numele de ciclul lui Krebs sau ciclul acizilor tricarboxilici. Despre acest ciclu vom discuta ntr-un capitol urmtor. IV.2.3.3. Calea pentozofosfat Pornind de la glucoz se poate ajunge la pentoze, riboza sau dezoxiriboza, componente de baz ale nucleoproteinelor, respectiv ale acizilor nucleici. NADP . NADPH Glucozo - 6 fosfat +H+ +H2O acid 6 - fosfogluconic + NADP NADPH2 CO2 ribulozo 6 fosfat ribozo 5 fosfat. Reacia global se petrece astfel:
73
IV.2.3.4. Calea acidului glucuronic Aceast cale reprezint modalitatea prin care organismul poate sintetiza acidul glucuronic, necesar proceselor de detoxifiere i a sintezei glucoproteidelor sau acidului ascorbic.
74
V. METABOLISMUL ENERGETIC. CICLUL LUI KREBS. PROCESUL DE FOSFORILARE OXIDATIV
V.1. Ciclul lui Krebs Ciclul acizilor tricarboxilici (TCA), numit i ciclul acidului citric (dup componenta care iniiaz acest ciclu) sau ciclul Krebs (dup numele autorului care a stabilit secvenele mai importante ale acestui ciclu), reprezint o cale oxidativ major de degradare a metabolitelor pn la etapa final CO2 i H2O. Acest ciclu constituie o cale comun de degradare a glucidelor, lipidelor i aminoacizilor (respectiv cetoacizilor corespunztori) i, prin aceasta, stabilete interrelaiile metabolice ale acestor trei grupe de componente fundamentale ale celulei vii. Ciclul lui Krebs este constituit dintr-o succesiune de reacii catalizate de enzime specifice localizate n mitocondrii, reacii de decarboxilri, oxidoreduceri, hidratri n cursul cruia energia eliberat n procesele oxidative este depozitat n ATP sub form de legturi fosfat macroergice, form de energie pe care celula o poate utiliza direct i imediat. Prin numrul mare de molecule de ATP generate n acest ciclu, acesta constituie sursa energetic major pentru organism. Astfel dintr-o molecul de glucoz, prin degradarea sa anaerob la dou molecule de acid lactic, se genereaz 4 legturi fosfat macroergice din care dou se consum pe parcursul degradrii iar dou rmn ca rezerv energetic sub form de doi moli ATP, pe cnd, prin degradarea aerob, pe calea ciclului lui Krebs, dintr-o molecul de acid lactic rezult 18 moli ATP, i respectiv, pentru o molecul de glucoz 36 de legturi fosfat. Ciclul acizilor tricarboxilici, prezentat n figura 14 este iniiat (att pentru glucide, lipide i aminoacizi) prin formarea acidului citric. Acidul citric rezult printr-un proces de condensare ntre restul acetil sub form de acetil-COA i acidul oxalilacetic. Reacia de condensare este catalizat de o enzim specific de condensare i necesit prezena Mg2+. Aa cum am vzut, prin decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic se formeaz radicalul acetil (CH3-CO-) care este activat i rezult acetil-COA, aa numitul acetat activ. Este activat att gruparea carboxil din molecula acidului acetic ct i hidrogenul gruprii metil a aceleiai molecule.
75
Fig. 12 Ciclul acizilor tricarboxilici sau ciclul Krebs
Urmtoarea etap a ciclului Krebs este transformarea acidului citric n acid cisaconitic i acid izocitric. Reacia are loc sub aciunea unei hidrataze aconitaza, care catalizeaz i trecerea acidului cisaconitic la acid izocitric. Acidul izocitric format sufer o reacie de hidrogenare i trece la acid oxalilsuccinic. Reacia este catalizat de izocitric dehidrogenaza n prezena NADP ca acceptor specific de hidrogen.
76
Transformarea acidului oxalilsuccinic n acid cetoglutaric are loc sub aciunea unei decarboxilaze specifice oxalilsuccinicdecarboxilaza i necesit prezena Mn2+. n aceast etap are loc trecerea de la acizii tricarboxilici cu 6C la un diacid catonic cu 5C. Echilibrul este mult deplasat n sensul formrii acidului cetoglutaric, dei reacia este reversibil. Transformarea acidului cetoglutaric n acid succinic are loc printr-o decarboxilare oxidativ analoag ca mecanism cu decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic i la care particip enzima cetoglutarat dehidrogenaza (cetoglutaroxidaza). Transformarea acidului cetoglutaric are loc printr-o succesiune de reacii complexe, care n final duc la acidul succinic. Aceste transformri au loc n prezena mai multor cofactori: tiaminpirofosfatul (TPP), acidul lipoic LSS, coenzima A(HS-COA), nicotinamidadenindinucleotid (NAD), acidul adenozindifosforic (ADP), acidul guanozindifosforic (GDP) i fosfatul mineral (H3PO4). Aceast etap de trecere de la ac. cetoglutaric la acidul succinic, care are loc printr-o serie de faze intermediare, este important i pentru motivul c, n aceast etap, are loc trecerea la acizii dicarboxilici cu 4C. Trecerea de la acidul succinic la acidul fumaric este catalizat de succindehidrogenaza i mai particip citocromul b, citocromul c i a3 (citocromoxidaza). Acest sistem enzimatic este constituit dintr-un complex de enzime arhitectonic organizat care catalizeaz oxidarea succinatului la fumarat pe calea sistemului citocrom i este o reacie cheie a ciclului Krebs. Este de semnalat c, n reacia de dehidrogenare a acidului succinic, nu particip drept coenzime nicotinadenindinucleotidenzimele (NAD i NADP), ci un flavindinucleotid, oxidarea are loc direct printr-un transfer de electroni de pe succinat prin intermediul succindehidrogenazei, respectiv FAD din enzime pe sistemul citocromic, respectiv pe Fe3+ din molecula acestora. Trecerea acidului fumaric la acid malic are loc sub aciunea catalitic a unei hidrataze: fumaraza. Acidul malic trece n acid oxalilacetic sub aciunea malicdehidrogenazei i necesit prezena NAD. n aceast etap se regenereaz componenta de plecare a ciclului acizilor tricarboxilici. Aceast reacie nchide o turaie complet a ciclului i procur o molecul de acid oxalilacetic, care poate accepta un nou rest acetil. n succesiunea de reacii descrise se formeaz dou molecule de bioxid de carbon i 8 atomi de hidrogen. Bioxidul de carbon format n cursul
77
acestor reacii se elimin prin expiraie, iar cei 8 atomi de hidrogen sunt fixai pe acceptorii enzimatici ai catenei de oxidare fosforilant (NAD, NADP, FAD, citocromi) i sunt activai, putnd reaciona cu oxigenul molecular cu formare de H2O, produsul final al arderilor. Deci rezultatul procesului de degradare aerob este oxidarea biologic din care rezult bioxidul de carbon i apa conform reaciei: C6H12O + 6O2 = 6CO2 + 6H2O Rezultatul degradrii aerobe a glucidelor este eliberarea unei cantiti mari de energie (688 kcal) pe mol glucoz i din aceast energie cca 45% se depoziteaz n 38 moli ATP i este utilizat n travaliul muscular i n alte activiti consumatoare de energie, iar restul se pierde sub form de energie caloric. Pentru bilanul energetic al organismului, depozitarea energiei sub form de ATP este mai important dect cldura produs simultan i pentru multe aprecieri este suficient cunoaterea producerii de ATP n moli/mol de acid acetic oxidat (n cursul interaciunii ciclului Krebs cu catena respiratorie). Stadiul intercelular de cuplare a oxidrii metabolitelor (glucide, lipide, protide) pe calea ciclului lui Krebs cu sinteza ATP, este mitocondria. Astfel rezult: - din treptele a 3-a, a 5-a i a 9-a prin oxidarea NAD. H, cte 3, n total 9 ATP - din treapta a 7-a, prin oxidare flavinic 2 ATP - din treapta a 6-a, prin transferul legturii macroergice 1 ATP Total 12 ATP Ciclul lui Krebs nu este numai o cale pentru catabolism, ci i un colector de produi intermediari. El preia fragmentele C2 din metabolismul glucidic, lipidic i proteic, este legat de sinteza glucozei (substana cheie n acest caz este acidul oxalacetic) i furnizeaz materie prim pentru sinteza unor aminoacizi: aspartic i glutamic. Acidul succinic are rol n sinteza inelului porfirinic, respectiv a hemoglobinei. V.2. Oxidri celulare, fosforilarea oxidativ i acumularea de energie Oxidarea biologic const n totalitatea proceselor biochimice prin care celula i obine energia necesar activitii ei vitale. Oxidarea substanelor organice n organism, aa cum am vzut, are loc cu formarea de CO2, H2O i energie, nmagazinat sub form de legturi chimice n compuii macroergici.
78
Karlson schematizeaz procesul de oxidare a substanelor organice n trei etape principale: 1. moleculele organice complexe sunt desfcute n fragmente coninnd 2 atomi de C (aldehid gliceric, acid fosfogliceric, acid piruvic, acetat activ); 2. degradarea fragmentelor cu doi atomi de carbon are loc n ciclul lui Krebs pn la produii finali ai oxidrii biologice 8H i 2CO2. Cei 8H preluai de NAD i FAD sunt activai sub form de protoni n cadrul catenei respiratorii i reacioneaz cu O2- activat de citocromul a3 pentru a forma molecula de ap; 3. energia care rezult n urma acestui proces este datorat reaciei de combinare a hidrogenului cu oxigenul transportat de hemoglobin de la plmn la esuturi. O parte din energia eliberat n urma acestor procese redox cca, 45% este nglobat sub form de legturi macroergice n structura ATP. Legtura macroergic (~) prin hidroliz elibereaz o cantitate de energie de aproximativ 6 Kcal/mol.
Rolul ATP este de stocare a energiei chimice i de transport al energiei. ATP poate difuza spre locuri din celul care necesit energie. Energia chimic din ATP se elibereaz n timpul transferului grupelor fosfat terminale ctre anumite molecule acceptoare, care n acest mod sunt potenate energetic i pot intra astfel n stare reactiv. Hidroliza ATP elibereaz 12,5 Kcal/mol.
Energia chimic mai poate fi stocat n derivai organici care conin legtura macroergic ~ S (acetil COA). Acetil-COA aa cum am subliniat formeaz fondul metabolic comun. Lanul respirator reprezint o succesiune de reacii de oxidoreducere bazate pe potenialele redox ale enzimelor implicate. Procesele de respiraie celular i de fosforilare oxidativ au loc aproape n toate
79
celulele aerobe. Enzimele implicate n lanul respirator i n fosforilarea oxidativ sunt localizate n mitocondrii, sediul oxidrii glucidelor, lipidelor, aminoacizilor n cadrul catenei respiratorii, al ciclului Krebs i a degradrii oxidative a acizilor grai. Mitocondriile sunt particule intracelulare de o form globular cu un diametru de aproximativ 1 ce ocup aproximativ 20% din volumul citoplasmei. Datorit cercetrilor lui Chance, Slater, Lehninger .a., astzi posedm un tablou destul de cuprinztor al componentelor catenei respiratorii. Ea reprezint un sistem multienzimatic care preia atomii de hidrogen din metaboliii ciclului Krebs i ai procesului oxidrii acizilor grai i i transfer spre ultimul acceptor. Acest proces este catalizat de trei clase principale de enzime oxido-reductoare. n catena respiratorie, succesiunea enzimelor este realizat n funcie de potenialele redox ale coenzimelor. Electronii se scurg de la substane relativ electronegative n ordinea cresctoare a potenialului redox spre oxigenul tisular sau celular, furnizat de hemoglobin. Cele trei clase de enzime oxido-reductoare sunt: 1. Piridin-dehidrogenaze avnd drept coeziune NAD sau NADP (catalizeaz mai ales reaciile de sintez); 2. Flavin-dehidrogenaze avnd coenzima FAD sau FMN; 3. Citocromi care conin nucleu porfirinic. Prin intermediul acestui sistem enzimatic potenialele redox devin din ce n ce mai pozitive pe msura trecerii electronilor de la substrat la O2. Potenialului redox cel mai negativ ( 0,32 V) este posedat de sistemul redox NAD+/NADH + H+, din acest motiv se afl situat la captul catenei respiratorii i acioneaz ca un colector de hidrogeni provenii din ciclul lui Krebs. Cel mai oxidat inel al lanului este format de citocromii a + a3 (E = + 0,28 V) care cedeaz electroni oxigenului ionizndu-l. ntre aceste dou uniti se situeaz alte sisteme cu diferite poteniale. Modul de aciune Piridindehidrogenazele NAD transfer 2H de la substrat la forma oxidat a piridinnucleotidei (NAD+).
Piridinnucleotida redus (NADH) cedeaz H flavin enzimelor transformndu-le n forma redus FADH2 sau FMNH2, ea trecnd n
80
forma oxidat NAD+. Unele enzime flavinice reacioneaz direct asupra substratului reducndu-l fr intermediului NAD (exemplu dehidrogenaza succinic catalizeaz trecerea de la succinat la fumarat). Acceptorul de electroni a flavienzimelor reduse este sistemul citocromic. Cercetrile recente arat c este probabil, ca preluarea s se fac prin intermediul feroproteinelor nehemice i prin coenzima Q (ubichinona). Prezena Fe n feroproteine face posibil trecerea de la sistemele transportoare de 2 electroni (transportoare de hidrogen) la cele transportoare de 1 electron (citocromi). Coenzima Q poate funciona ca o molecul solubil n lipidele membranei mitocondriale, face legtura ntre flavine i citocromi. O alt posibilitate este oxidarea direct a flavinenzimelor de ctre sistemul citocromic fr participarea sistemului chinonic (coenzima Q), cazul caracteristic lanului respirator necuplat cu fosforilarea oxidativ. Citocromii sunt enzime hemice care se afl n celulele cu mecanisme de oxidare aerob. Au gruparea prostetic Fe porfirine, activitatea catalitic bazndu-se pe transformarea reversibil
Fe 2+
ox Fe 3+ . Funcia citocromilor este de purttori de electroni. red.
Bazat pe potenialul redox, transferul de electroni n citocromi are urmtoarea succesiune: citocrom b Cc citocrom a + a3 (care reprezint dou stri ale uneia i aceleeai enzime citocromoxidaza sau fermentul respirator Wartburg). Complexul a + a3 reprezint inelul final propriu-zis care reacioneaz cu O2 ionizndu-l. Prin aceast reacie sistemul de citocromi a + a3 este oxidat, reducerea lui este fcut din nou de citocromul C. Produsul final al oxidrii aerobe este apa. V. 3. Fosforilarea oxidativ Fosforilarea oxidativ este procesul de cuplare a reaciilor de oxidare a diferiilor produi ai metabolismului intermediar cu fosforilarea ADP, deci cu sinteza de ATPproces care se traduce n ultim instan prin nglobarea temporal a energiei eliberate n cursul reaciilor de oxido-reducere sub form de legturi chimice n molecula macroergic a ATP-ului. Procesul fosforilrii oxidative poate fi redat schematic prin reaciile:
81
DH2 + A D + AH2 ADP + P ATP DH2 + A + ADP + P D + AH2 + ATP
unde DH2 este un donator de hidrogen, iar A un acceptor de hidrogen. Dup natura acceptatorului de hidrogen se disting dou procese de fosforilare oxidativ: - fosforilarea oxidativ la nivelul substratului (cnd DH2 i A acceptorii de hidrogen nu fac parte din catena respiratorie); - la nivelul catenei respiratorii. V.3.1. Fosforilarea oxidativ la nivelul substratului Acest tip de fosforilare se ntlnete n faza de degradare anaerob a glucidelor (glicoliz), respectiv la reacia de trecere a acidului piruvic n acid lactic, catalizat de lactatdehidrogenaz cuplat cu oxidarea NADH.
V.3.2. Fosforilarea oxidativ la nivelul catenei respiratorii Importana lanului respirator const n eliberarea pentru fiecare treapt de sistem redox a unei energii de oxidare, care este captat sub form de energie chimic i depozitat sub form de ATP fosforilare oxidativ. Odat cu reducerea 1/2 mol de oxigen i deci cu formarea unui mol de ap se sintetizeaz trei moli de ATP. Se definete un raport P/O, cantitatea de ATP format/cantitatea de oxigen consumat, care este egal cu trei n cazul catenei respiratorii complete n care primul acceptor de hidrogen este NAD+; poate fi egal cu doi cnd succinatul este dehidrogenat de flavinenzime sau poate fi egal cu unitatea cnd este oxidat citocromul C. Determinarea valorilor acestui raport d indicaii asupra situsilor de pe catena respiratorie n care se realizeaz cuplarea oxidrii cu procesul de fosforilare. n condiii fiziologice normale catena respiratorie furnizeaz, ntr-un ciclu de reacii redox, energia necesar sintezei a trei molecule de ATP. Reaciile care au loc n fosforilarea oxidativ sunt:
82
DG0 = -52,7 Kcal DG0 = 3 x 7,3 = = + 21,9 Kcal Deci numai 40% din energia eliberat din reaciile oxidative ale catenei respiratorii este transformat n energie chimic i nglobat n structura ATP, restul de 60 % fiind transformat n cldur, energie mecanic i energie osmotic. Prin oxidarea piruvatului n cadrul ciclului Krebs, rezult patru moli de NADH + H i un mol de FADH2, care intr n catena respiratorie suferind reacii oxidative. Prin cuplarea oxidrii cu fosforilarea din cei patru moli de NADH + H+, rezult 4 x 3 moli = 12 moli ATP, iar din 1 mol de FADH2 rezult 1 x 2 = 2 moli ATP. Prin urmare fosforilarea oxidativ la nivelul catenei respiratorii conduce la sinteza a 14 moli de ATP la care se mai adaug un mol de ATP biosintetizat n urma fosforilrii oxidative de la nivelul substratului. Deci fosforilarea oxidativ la nivelul catenei respiratorii conduce la sinteza a 15 moli de ATP. Situsurile fosforilrii oxidative, conform rezultatelor cercetrilor, sunt situate astfel: primul situs de formare a unei molecule de ATP este situat ntre NAD i FAD, al doilea ntre citocromul b i citocromul C1 i al treilea ntre citocromul C i citocromul a. n cadrul catenei respiratorii se stabilete un echilibru dinamic ntre concentraia diferitelor substrate reduse, cantitatea de oxigen furnizat de hemoglobin i viteza proceselor de fosforilare. Factorul determinant pentru echilibrul dinamic al catenei respiratorii este reprezentat de concentraia de ADP la nivelul mitocondriei. Energia eliberat din procesele redox permite sinteza ATP din ADP i P. n cazul concentraiei mari de ADP, o cantitate mai mare de substrat redus este oxidat n aceeai unitate de timp, se consum mai mult oxigen i se realizeaz o sintez de ATP cu o vitez crescut. Creterea concentraiei de ATP induce scderea ADP, substan cheie care limiteaz viteza ntregului proces i tabloul transformrilor metabolice se modific. n celul concentraia de ATP scade deoarece acesta se consum n cadrul reaciilor endergonice sau n travaliul muscular, se elibereaz ADP care reinduce creterea ratei respiraiei celulare. Astfel, respiraia se adapteaz nevoilor energetice ale celulei. Schematic acest mecanism de feed back pozitiv poate fi redat astfel: Respiraia ATP Reacii endergonice ADP + P
83
NADH + H+ + 1/2 O2 NAD+ + H2O 3ADP + 3 P 3ATP + 3H2O
Substanele care inhib formarea ATP fr a afecta viteza cu care au loc reaciile din catena respiratorie poart numele de ageni decuplani ai fosforilrii oxidative (2,4 dinitrofenolul, dicumarolul .a.). Posibilitatea cuplrii i decuplrii celor dou procese are semnificaie fiziologic major, organismul putnd dirija prin cuplare acumularea de ATP sau prin decuplare producerea de cldur. Dei fosforilarea oxidativ este studiat de aproximativ 40 de ani, nu se cunoate n amnunt mecanismul cuplrii proceselor de fosforilare cu oxido-reducerile din catena respiratorie. n legtur cu mecanismul acestui proces au fost emise mai multe teorii, dintre care se pare c cea mai plauzibil este teoria chimic elaborat de Slater. V.4. Metabolismul energetic Corelaii ntre tipurile de efort fizic i tipul metabolic asociat n timpul metabolismului intermediar se elibereaz energia cuprins n principiile alimentare. Degajarea de energie n organism nu are loc n mod brusc, ci treptat, prin lanuri lungi de reacii proprii materiei vii i nlesnite de ctre biocatalizatori. Aceste reacii se petrec n cursul degradrii aerobe i anaerobe a glucidelor, a dezaminrii aminoacizilor i a beta-oxidrii acizilor grai. Cheltuielile energetice ale organismului pot fi msurate, permind instituirea unei raii alimentare corespunztoare necesitilor organismului att n stare de repaus, ct i n cursul activitii. Consumul de energie al organismului poate fi msurat prin: metoda direct sau calorimetric i metoda indirect sau de msurarea intensitii schimbului gazos. Prin metoda calorimetric se msoar cantitatea de cldur degajat n 24 de ore cu ajutorul calorimetrului Benedict. Dac principiile alimentare sunt oxidate n bomba calorimetric, n mediul de oxigen, se obin urmtoarele rezultate: 1g de glucide elibereaz 4,1 Kcal; 1 g de lipide 9,3 Kcal; 1 g protide 4,2 Kcal. Prin metoda indirect se msoar consumul de O2 n unitatea de timp. Pentru calcularea exact a cantitii de energie produs de organism este nevoie s cunoatem i valoarea coeficientului respirator. Coeficientul respirator este raportul dintre CO2 eliminat i O2 consumat. El se noteaz cu CR sau QR:
QR = CO 2 O2
84
Coeficientul respirator are valoare diferit dup natura substanelor oxidate. Pentru glucide este egal cu 1. Aceasta rezult din reacia de oxidare a glucozei:
C6H12O6 + 6O2 = 6CO2 + 6H2O deci 6 = 1
6
Coeficientul respirator pentru lipide este egal cu 0,7 iar pentru protide este de 0,8. Deosebirea rezult din coninutul diferit al acestor substane n C, O i H i n consecin de consumul diferit de oxigen. n regimul alimentar normal coeficientul respirator este de 0,9. Coeficientul respirator are o valoare crescut n hiperventilaia determinat de efortul muscular, eliminndu-se o cantitate sporit de CO2. Coeficientul respirator mai crete atunci cnd are loc transformarea glucidelor n lipide. n acest caz n esuturi rmne un surplus de oxigen care este utilizat n arderi, deci cantitatea de oxigen consumat scade, iar aceea de bioxid de carbon crete. Coeficientul respirator scade atunci cnd se transform lipidele n glucide, deoarece se consum mai mult oxigen. Cheltuielile energetice ale organismului sunt de dou feluri: fixe i variabile. Cheltuielile energetice fixe corespund unui consum energetic minim necesar meninerii vieii, care reprezint metabolismul bazal. Cheltuielile variabile depind de activitatea muscular. n cea mai mare parte cldura degajat n organism provine din activitatea muscular. n timpul ei ajunge la 95%. n cursul unei activiti fizice moderate consumul energetic crete cu cca 1000 Kcal. Consumul energetic normal la persoanele sedentare este de 2600-3000 kcal. Sportivii au un consum energetic mult mai mare. n cursul antrenamentului, nevoile lor energetice ajung la 5000-6000 kcal, iar n efortul prelungit, de exemplu, ntr-o curs de ciclism, consumul energetic poate ajunge la 11.000 kcal. n probele de sprijin sau cursele de maraton consumul energetic este foarte ridicat. Adaptarea consumului energetic la efort se face treptat. Consumul energetic ncepe s creasc chiar naintea desfurrii efortului, datorit unui mecanism reflex care contribuie la pregtirea organismului pentru efortul ce urmeaz. Consumul energetic crete apoi proporional cu efortul depus cu ct efortul este mai intens i necesitile de oxigen cresc (de la 10 i chiar 20 de ori) fa de valorile de repaus. Exist ns o limit maxim a posibilitilor de absorbie a oxigenului care, la sportivii bine antrenai, se afl ntre 6-7 1/min. n cursul competiiilor apar situaii n care efortul este foarte intens i necesitile de oxigen ajung la 30-40 1/min. n aceste condiii, orict s-ar intensifica ventilaia pulmonar, nu se poate asigura un consum de oxigen att de ridicat i, ca urmare, efortul se desfoar n condiii anaerobe. Oxidarea substanelor de uzur rezultate
85
se face dup terminarea efortului, deoarece organismul lucreaz cu datorie de oxigen. Achitarea datoriei de oxigen se face n perioada de refacere dup terminarea efortului. n cadrul probelor de schi, ciclism, alpinism, curse de mare fond (probe de rezisten) are loc o eliberare lent de energie. n probele de sprint i srituri se produce o eliberare brusc de energie, iar n jocurile sportive energia se elibereaz alternativ brusc i lent. Un consum mare de energie se nregistreaz n proba de 400 m (vitez prelungit). Aceasta se explic prin durata scurt a probei (50 s) i prin parcurgerea ei n acelai ritm ca proba de 100 m. n tabelul nr. 4 este prezentat consumul energetic n cadrul diferitelor probe. Consumul de oxigen n cursul efortului fizic nu se face paralel cu eliberarea de CO2. Cnd efortul se intensific, ctul respirator crete peste valoarea de 0,8 i poate depi chiar 1. Aceasta indic un consum excesiv de glucide din care rezult mult acid lactic. Prezena sa scade CO2 din snge i antreneaz eliminarea lui pe cale pulmonar. n cadrul aceluiai efort valoarea coeficientului respirator variaz la indivizii antrenai fa de cei neantrenai n cadrul aceluiai efort. La persoanele antrenate ctul respirator este mai mare din cauza producerii accentuate de acid lactic. n consecin ctul respirator ne poate orienta asupra gradului de antrenament.
Tabelul nr. 4 Consumul energetic n cadrul diferitelor probe i ramuri de sport Felul sportului Viteza Consumul energetic Ciclism 15 km/or 7 kcal/min Ciclism 21 km/or 11,1 kcal/min not bras 0,45 m/s 7,5 kcal/min not bras 0,60 m/s 10 kcal/min not liber 0,68 m/s 11,5 kcal/min Schi fond 9 km/or 9 kcal/min Schi fond 12 km/or 10,3 kcal/min Canoe 7,5 km/or 8 ml kcal/kg/or Patinaj 21 km/or 10 kcal/kg/or Alergare 15 km/or 12,1 kcal/kg/or Alergare 100 m 100 kcal/prob Alergare 200 m 100 kcal Alergare 400 m 115 kcal Alergare 800 m 140 kcal Alergare 1500 m 360 kcal Alergare 5000 m 720 kcal 86
Importana cunoaterii coeficientului respirator este foarte mare. El ne ajut la stabilirea bilanului energetic n cadrul diferitelor ramuri de sport, n funcie de etapele n care se desfoar efortul. Ca urmare se poate stabili randamentul activitii musculare i se pot institui raii alimentare corespunztoare. Exist o corelaie ntre tipurile de efort fizic i tipul metabolic asociat prezentat mai jos:
Tipul de metabolism Metabolism anaerob alactacid Metabolism anaerob lactacid Sursa de energie ATP, FC Tipul de efort 10-20 sec alergri 100-200 m srituri, aruncri haltere 3 min alergri 400-800 m not 100 m patinaj vitez semifond 1500 m not 400 m box, lupte, jocuri efort prelungit 5000-10000 m maraton ciclism fond not fond schi fond
glucide (glicoliz)
Metabolism anaerob alactacid + aerob (mixt) Metabolism aerob
ATP, FC, glucide (Krebs)
glucide (ciclul Krebs) lipide
87
VI. METABOLISMUL MINERAL. METABOLISMUL APEI I AL IONILOR MINERALI
Apa i substanele minerale sunt ingerate odat cu hrana. Ele sunt metabolizate n decursul activitii vitale a organismului i eliminate pe cale renal, intestinal i prin transpiraie. Metabolismul srurilor minerale este strns legat de metabolismul apei i se modific n cursul efortului fizic. Spre deosebire de celelalte substane, mineralele nu pot fi sintetizate i nici consumate n organism. Ele sunt doar ingerate, utilizate i eliminate. Anumii ioni minerali sunt depozitai temporar n anumite esuturi, de unde pot fi utilizai, atunci cnd aportul exogene este insuficient (de exemplu calciu din oase). Concentraia ionilor minerali n lichidele organismului se menine relativ constat prin reglarea corespunztoare a excreiei apei i srurilor minerale. Mineralele au rol fundamental i multiplu: 1. rol structural (de exemplu constituie substana osoas); 2. rol n reglarea presiunii osmotice i a echilibrului acidobazic; 3. rol n meninerea strii fizico-chimice normale a substanelor coloidale din organism; 4. sunt componente ale moleculei unor piocatalizatori (hormoni, vitamine, enzime); de exemplu cobaltul intr n structura vitaminei B12, iodul n structura hormonului tiroidian, fierul n structura multor enzime respiratorii etc.; 5. au rol esenial n activitatea enzimelor. n acest caz, elementele minerale pot funciona ca o component structural, fie numai ca un activator sau inhibitor al acestei activiti. n toate aceste sisteme, concentraia mineralelor este extrem de mic, constituind aa-numitele oligoelemente.
88
VI.1. Metabolismul apei Printre componentele minerale din organism apa are rol primordial; intr n constituia tuturor celulelor i esuturilor i reprezint mediul n care se petrec toate fenomenele chimice i fizico-chimice corelate cu viaa. Apa formeaz aproximativ 60% din greutatea corporal, din care 2/3 rmne n interiorul celulei i 1/3 n afar, cantitatea variind cu vrsta i sexul. Diversele organe i esuturi au un coninut diferit de ap. Aproximativ 50% din apa din organism este n musculatur, 6-11% n piele. Necesitile n ap ale organismului uman sunt de 35-40 g/kg corp n 24 de ore. Aceasta reprezint 2,5 l, dar depinde de temperatura mediului ambiant i de efortul depus. n acest caz necesitile pot depi 1 l/24 de ore. Meninerea nivelului constant al cantitii de ap se realizeaz prin compensarea ingerrii i a formrii apei n organism, cu o eliminare corespunztoare a ei prin rinichi, plmni i piele. Prin rinichi se elimin 1,4 l ap i 30-40 g substane minerale solvate. Prin plmni se elimin 0,5 l ap sub form de vapori. O alt cantitate de ap se elimin prin transpiraie, ea depinznd ns de temperatur i de efort. Micarea apei n interiorul organismului este dependent de activitatea inimii, de presiunea osmotic, de fenomenele de difuziune. De asemenea este influenat i de efortul fizic. Aproximativ 50% din apa total este schimbat n interval de aproximativ 10 zile. VI.1.1. Originea apei din organism a. Originea exogen. Aportul exterior de ap prin alimentaie este indispensabil i necesitatea zilnic se traduce fiziologic prin senzaia de sete, provocat la rndul ei de creterea presiunii osmotice a mediului interior. b. Originea endogen a apei din oxidarea compuilor cu hidrogen, glucide, lipide, protide. Acesta este ns un aport minim; 2500 calorii rezultate din oxidarea compuilor dintr-o alimentaie mixt produc 300 g ap. Grsimile produc cea mai mare cantitate (107 g ap/100 g grsimi), urmeaz glucidele (55,5 g/100 g amidon) i n sfrit, proteinele (41,3 g/100 g proteine). Aa cum am specificat, cele mai importante rezerve de ap din organism sunt muchiul i pielea. VI.1.2. Reglarea echilibrului hidric se realizeaz prin senzaia de sete i prin activitatea rinichilor. Ea este controlat de hormonul antidiuretic (adiuretina). n cazul n care se elimin prin transpiraie i
89
expiraie o mare cantitate de lichid, setea stabilete echilibrul hidric al organismului. Meninerea echilibrului hidric este strns legat de coninutul n electrolii al organismului de afinitatea coloizilor tisulari pentru ap. Prezena electroliilor modific presiunea osmotic i favorizeaz meninerea apei. Ionii de Na i de Mg sunt inhibitori ai diurezei, iar ionii de K i de Ca provoac o eliminare excesiv de ap, ceea ce duce la deshidratare. Cnd deshidratarea organismului este mare, i ajunge la 15% din totalul apei coninute n corp, apar tulburri grave ce se resimt mai ales asupra funciei creierului i a rinichilor. VI.1.3. Influena efortului fizic asupra meninerii echilibrului hidric n cursul efortului fizic echilibrul hidric este ameninat datorit transpiraiei excesive ce constituie n aceste condiii i forma predominant a excreiei. Odat cu apa eliminat, se elimin i o serie de produi toxici acumulai n cursul efortului fizic. n efortul de scurt durat crete excreia urinar datorit strii de excitaie puternic a sistemului nervos. Dup efortul de lung durat excreia de urin scade din cauza pierderilor masive de ap, prin piele, i sub form de vapori de ap, n cursul expiraiei. Ca un efect imediat, n cursul efortului se produce o important deshidratare a organismului ce duce la scderea greutii corporale, aceasta depinznd n final de efortul depus i de condiiile atmosferice. Scderea greutii corporale depinde nu numai de intensitatea efortului, ci i de tipul exerciiilor fizice, de gradul de pregtire a sportivului i de temperatura ambiant. n tabelele nr. 5 i 6 este ilustrat scderea greutii corporale n funcie de intensitatea efortului i de temperatur.
Tabelul nr. 5 Scderea greutii corporale n funcie de distana parcurs Distana parcurs n km Pierderea n greutate n kg 10 0,900 15 1,700 20 2,240 35 2,700 90
Tabelul nr. 6 Scderea greutii corporale n funcie de temperatura ambiant, not 400 m (dup Lecan) 450 g 260 240 470 g 180 150 g 170 160 g 120 550 g 90 850 g
VI.2. Echilibrul acido-bazic (EAB) Aproximativ 60% din masa organismului adult se afl sub form de lichid biologic din care 1/3 formeaz lichidul extracelular. Sub aciunea factorilor externi se produc modificri de concentraii ale diferitelor substane din compoziia lichidelor extracelulare. Organismul uman dispune de mecanisme automate capabile s menin constant concentraia mediului intern. Aceast proprietate a organismului se numete homeostazie (W. Canon). n sportul de mare performan, efectul antrenamentului l exercit numai acele solicitri capabile s schimbe stabilitatea mediului intern. Cele mai importante perturbri sunt suficiente sub aciunea unui efort fizic, de echilibru acido-bazic (EAB, care este implicat n meninerea constant a concentraiei ionilor de hidrogen (H+). Fa de creterea brusc a concentraiei ionilor de hidrogen (H+), organismul posed mai multe mecanisme de restabilire a acestuia dintre care unele chimice, prin sistemele tampon, iar altele fiziologice, realizate prin funcia respiratorie i renal. VI.2.1. Sistemele tampon (ST) Sistemele tampon reprezint un amestec de acid slab i o sare a acestui acid cu un cation reactiv. Procesul de tamponare se realizeaz prin nlocuirea unui acid puternic (acid care n soluii disociaz intens, exemplu HCl este un acid mai puternic dect H2CO3), cu un acid slab, consecina fiind pstrarea ct mai aproape de normal a concentraiei ionilor de hidrogen (H+).
91
n lichidul extracelular, anionii cu capacitate de tamponare se grupeaz n anioni bicarbonat, cu o capacitate de tamponare de 53%, i n anioni nebicarbonat (Buf ) a cror putere de tamponare este de 47%. Cel mai tipic sistem tampon este cel bicarbonat, compus dintr-un amestec de acid carbonic (H2CO3) i bicarbonat de sodiu (NaHCO3) n soluie. Formarea sa n organism este posibil datorit existenei unui sistem deschis alctuit din aer alveolar, snge i esuturi. Marea afinitate pentru protoni a anionului bicarbonat (HCO3) explic rolul su n cazul prezenei unui exces de ioni de hidrogen (H+) n organism. VI.2.2. pH-ul sanguin pH a fost definit de Srensen ca logaritmul zecimal cu semn schimbat al concentraiei ionilor de hidrogen dintr-o soluie. pH = log H+ Valorile fiziologice la om sunt cuprinse ntre 7,35 7,45 (7,38 7,42); pstrarea acestei valori uor alcaline a sngelui este esenial pentru ansamblul proceselor vitale din organism. Valorile foarte mici de pH au ca efect deprimarea contractilitii musculare, blocarea sintezei ATP pe ci aerobe i anaerobe, reprezentnd un factor limitativ al performanei sportive. Cu ct intensitatea efortului va fi mai mare, cu att valorile pH-ului sanguin vor fi mai joase, se instaleaz acidoza metabolic (de ex. dup 400 sau 800 m n atletism, valorile pot ajunge pn la 6,9 6,8 sau chiar mai puin); n alergrile de durat, scderea pH este moderat (7,15 7,25). Scderile severe sub 7 pot explica limitarea performanei n sporturile aerobe. Variaiile pH-ului sanguin coreleaz semnificativ cu modificrile lactatului sanguin i a excesului de baze (BE), att n timpul efortului ct i n perioada de revenire; aceasta nseamn c cu ct timpul este mai rapid n restabilirea pH sanguin dup efort, cu att se apreciaz o mai bun refacere metabolic i oboseala rezidual mai joas. VI.2.3. Parametri metabolici ai echilibrului acido-bazic (EAB)
) reprezint coninutul real de Bicarbonatul actual (HC O 3 bicarbonat n snge, dar nu poate fi considerat un criteriu de apreciere
92
a componentei metabolice a EAB, deoarece concentraia sa depinde de componenta respiratorie a echilibrului acido-bazic, respectiv presiunea bioxidului de carbon (pCO2). Valorile fiziologice de repaus sunt cuprinse ntre 22-27 mmoli/1. Biocarbonatul standard (SBC) a fost propus de P. Astrup ca msur a componentei metabolice a echilibrului acido-bazic. SBC reprezint coninutul n ion biocarbonat (HCO3) n plasma obinut la pCO2 = 40 mmHg i la o T = 380C, dintr-un snge complet saturat cu oxigen. Valoarea biocarbonatului standard indic ci mmoli de biocarbonai (de sodiu i potasiu s-ar afla ntr-un litru de snge dac nu ar exista nici o modificare a pCO2. Scderea bicarbonatului standard se datoreaz participrii bicarbonailor la temperatura excesului de ioni de hidrogen (H+). Aa cum am apreciat 53% din capacitatea de tamponare a sngelui este dat de bicarbonai, din care 35% revine bicarbonatului plasmatic i 18% din hematii: ) se datoreaz att rolului Scderea bicarbonatului actual (HC O 3 tampon ct i reaciilor compensatorii ale aparatului respirator ntr-o acidoz metabolic. n condiii normale concentraiile celor dou feluri de bicarbonai trebuie s fie egale. Din acest motiv indicarea raportului (R) are semnificaie n cazul unei acidoze de origine SBC/HC O 3 respiratorie (cauzat de creterea primar a pCO2) cnd R < 1. ntr-o acidoz metabolic compensat R > 1. Excesul de baze (BE) este parametrul metabolic cel mai important al echilibrului acido-bazic. A fost introdus de Andersen pentru a arta ce cantitate de acizi sau de baze puternice, n mmoli/1 trebuie adugat n snge pentru a aduce pH la valoarea de 7,40 cnd pCO2 = 40 mmHg i T = 380C. n efort, BE are o valoare corespunztoare acumulrii create de acizi n snge. Este un parametru independent de variaia pCO2 dar dependent de concentraia hemoglobinei (Hb). Corelaia nalt a excesului de baze (BE) cu lactatul sanguin (r = 0,98) n timpul efortului i n perioada de refacere susine ideea privind valoarea acestui parametru n estimarea biochimic a capacitii de efort fizic, prin metoda micro-Astrup. Kenl J. a emis o formul de conversie ntre lactat i BE, astfel: 0,54 BE / 1,25.
93
Valorile fiziologice normale: + 2,3 pn la 2,3 mmoli/1. La sportivii de valoare, antrenai, aceste valori sunt uor mai ridicate (+1 +3 mmoli/1). Valoarea sa va fi negativ n acidoz, fiind vorba de fapt de un deficit de baze. Excesul de baze poate servi drept criteriu pentru zonarea efortului, de exemplu n canotaj n funcie de tipul de metabolism implicat n sinteza ATP. Astfel Eremenks distinge: zona aerob BE = 3 9 mmoli/1 zona mixt BE = 10 16 mmoli/1 zona anaerob BE 16 mmoli/1 Deficitul de baze crete pe msura creterii capacitii de efort anaerob a musculaturii active. BE are valabilitate doar n spaiul sanguin i nu poate fi aplicat ntregului mediu intern deoarece lichidul interstiial este mai puin bine tamponat ntruct concentraia substanelor proteice este doar de 2% i nu conine hemoglobin. Excesul de baze standard (SBE) reprezint excesul de baze a ntregului lichid extracelular calculat n funcie de echilibru dintre compartimentele acestuia. Valoarea SBE se calculeaz considernd o capacitate tampon a fluidului extracelular egal cu cea a unei probe de snge coninnd 6 g de Hg la 100 ml de snge, considernd faza extracelular egal cu 20 % din greutatea corporal, masa sanguin = 7g, iar Hg = 15g%. n general pentru determinarea parametrilor biochimici ai echilibrului acido-bazic se utilizeaz metoda micro-Astrup. Prin aceast metod mai putem determina pH sanguin, pCO2, HCO3, BE, pO2, Hg, SBE etc. VI.2.4. Presiunea gazelor n snge VI.2.4.1. Presiunea parial a bioxidului de carbon (pCO2) Bioxidul de carbon este unul din elementele sistemului tampon al biocarbonailor, modificarea presiunii sale pariale va determina modificri de pH. La nivelul esuturilor unde pCO2 = 46 mmHg, reacia se deplaseaz spre formare de H2CO3, iar la nivelul plmnilor unde pCO2 = 40 mmHg spre eliberarea CO2. Din acest considerent sistemul tampon al biocarbonailor este cel mai important sistem tampon al organismului. Cu toate c puterea sa de tamponare este redus, iar concentraia nu este mare, CO2 i HCO3 pot fi reglate de ctre sistemul respirator i respectiv, rinichi. Orice
94
modificare a pH-ului cauzat de modificarea primar a pCO2 este de origine respiratorie, orice modificare primar a HCO3 este considerat de origine metabolic sau nonrespiratorie. Acidoza metabolic poate fi acidoz compensat, att timp ct pH plasmatic se menine n limita valorilor fiziologice i poate fi acidoz decompensat cnd pH-ul plasmatic ncepe s scad. Meninerea pH n limita valorilor fiziologice ntr-o acidoz compensat este posibil numai cnd, odat cu scderea concentraiei ionilor bicarbonat (HCO3), scade i cantitatea de acid nedisociat (H2CO3). Acesta este de fapt fenomenul care se petrece n organism, sistemul respirator acionnd ca sistem regulator, reducnd presiunea bioxidului de carbon (pCO2); prin hiperventilaie, CO2 este eliminat mai rapid i presiunea sa parial meninut la valori joase. Scderea pCO2 n efort i n revenire este deci efectul aciunii mecanismului compensator care vizeaz restabilirea concentraiei de hidrogen n acidoz metabolic. n reglarea echilibrului acido-bazic (EAB), un rol important revine i rinichiului, care poate contrabalansa o cretere a acizilor plasmatici prin mrirea excretrii lor n urin. VI.2.4.2. Presiunea parial a oxigenului (pO2) Valorile fiziologice normale sunt cuprinse ntre 80-100 mmHg. Rolul jucat de pO2 n homeostazia acido-bazic este determinat de faptul c legarea oxigenului de hemoglobin la nivelul hemului i modific acestuia capacitatea de tamponare. n efortul muscular intens, celulele utilizeaz oxigenul cu o rat mare, provocnd o scdere pO2 n lichidul interstiial pn la 15 mmHg i disocierea oxihemoglobinei (HgO2). Hemoglobina trece n forma dezoxi care se comport ca o baz. Scderea pO2 de origine metabolic, respiratorie sau circulatorie determin scderea pH-ului, pstrnd caracterul unei acidoze metabolice. VI.2.5. Acidul lactic Acidul lactic reprezint produsul final al glicolizei musculare, fiind utilizat pentru msurarea biochimic a capacitii de efort fizic, att anaerob (mai ales), ct i aerob. Concentraia sanguin a lactatului depinde direct de intensitatea efortului i exprim adaptarea metabolic la efort. Nivelul nalt al lactatului sanguin poate reprezenta un factor limitativ al performanei. Valorile fiziologice sunt cuprinse ntre 10 25 mg%.
95
Urmrirea dinamic a lactatului sanguin i a balanei acido-bazice n timpul antrenamentului sportiv i competiiilor ne permite s estimm economia metabolic de repaus, de efort i de revenire i n acelai timp ne permit s apreciem capacitatea anaerob, rezistena la hipoxie i eficiena medicaiei folosite de sportivi (att ergotrop ct i trofotrop). VI.3. Metabolismul ionilor minerali Ionii minerali au un rol important n activitatea organismului. Particip la reglarea echilibrului acido-bazic; intervin n contracia muscular, n activitatea enzimelor, influeneaz excitabilitatea neuromuscular i permeabilitatea. VI.3.1. Metabolismul sodiului (Na) Coninutul total n sodiu al organismului este de 56-57 g. Necesitatea zilnic de sodiu este de 0,7- 4 g. n snge are o concentraie de 300-355 mg/100 ml plasma (132-144 mEq/1). n eritrocite se gsete n concentraie extrem de mic. Sodiul predomin n lichidele extracelulare (plasma sanguin, lichidele interstiiale), spre deosebire de potasiu care predomin n lichidele intercelulare. Este introdus n organism cu alimentaia, n special sub form de NaCl. El se absorb la nivelul intestinului subire i se elimin prin rinichi i transpiraie. n efort, cantitatea de sodiu eliminat este mare, provocnd uneori crampe musculare. De aceea, la cursele de mare efort, se recomand consumarea soluiilor de clorur de sodiu pe parcursul cursei. Din totalul sodiului din organism, 45% se acumuleaz n oase. Sodiul are rol important n repartiia apei n organism, rol dominant n reglarea presiunii osmotice i a echilibrului acidobazic. Metabolismul sodiului este reglat pe cale hormonal de hormonii mineralocorticoizi, n spe aldosteronul. Rinichiul are un rol important n reglarea nivelului sodiului plasmatic. S-a dovedit c concentraia intercelular a Na variaz invers cu concentraia, extracelular a ionilor de hidrogen. Sodiul extracelular crete, cnd crete pH extracelular. VI.3.2. Metabolismul potasiului (K) Potasiul se afl mai mult n lichidele intercelulare i are rol important n meninerea excitabilitii neuromusculare, n reglarea osmozei intracelulare i n declanarea secreiei de adrenalin. Potasiul se ia din alimente i se distribuie celulelor foarte rapid, apoi se elimin
96
pe cale renal. n efort eliminarea de potasiu crete datorit consumului mare n timpul concentraiei musculare. Deficitul de potasiu a fost semnalat n cazul sporturilor care presupun eforturi prelungite i este mai frecvent n lunile de var. n aceste situaii se recomand administrarea profilactic de sruri de potasiu sub form de sucuri de fructe i legume sau preparate medicamentoase coninnd sruri de potasiu anorganice sau organice glutamat aspartat. VI.3.3. Metabolismul calciului (Ca) Calciul este un element constitutiv al tuturor lichidelor i al esuturilor solide. El reprezint 2% din greutatea corpului. Din cantitatea total, 90% se afl n oase, restul n muchi, snge i lichidele organismului. Calciul sanguin se afl n mare parte legat de proteine. Calciul se ia din alimente sub form de compui organici, sursa cea mai valoroas fiind laptele. Absorbia calciului are loc n poriunea superioar a intestinului subire i depinde de muli factori i anume: - forma calciului din alimentaie; formele solubile de calciu (CaCl2 i lactatul de calciu) strbat mucoasa intestinal; - raportul Ca/P din alimentaie. Cu ct acest raport are o valoare mai mare, cu att absorbia calciului este mai eficace. - vitaminele D favorizeaz absorbia Ca; - prezena acidului citric stimuleaz absorbia Ca i acest efect se manifest prin aciunea sa antirahitic; - srurile biliare i lipazele influeneaz absorbia calciului indirect prin rolul pe care l au n absorbia acizilor grai i a grsimilor; - inhibitor ai absorbiei calciului ar fi ionii K+, Al3+, Sr2+, Mg2+. Excreia calciului are loc pe cale intestinal i o mic parte pe cale renal. Reglarea metabolismului calciului are loc prin intermediul parathormonului i al calcitoninei tiroidiene, parathormonul contribuie la ridicarea calcemiei, iar calcitonina la scderea ei. Calciul are rol important n coagularea sngelui, formarea oaselor, meninerea ritmicitii inimii, rol deosebit n excitabilitatea neuromuscular, n producerea laptelui i n permeabilitatea membrelor.
97
VI.3.4. Metabolismul fosforului (P) Cantitatea total de fosfor din organism este de 600-800 g din care peste 80% se gsete n oase, sub form de fosfat de calciu i magneziu. Fosforul se absoarbe sub form de compui organici i anorganici n intestinul subire. Se elimin pe cale renal eliminarea fiind reglat de parathormon i se mai elimin prin fecale. Bilanul fosforic este de obicei pozitiv, aportul depind consumul. Fosforul ndeplinete urmtoarele roluri: - plastic particip la formarea scheletului i intr n structura membrelor celulare (fosfolipide); - funcional sub forma esterilor fosforici; - catalitic prin participarea la structura unor vitamine i enzime; - energetic sub forma de ATP, ADP, CP, cu formarea legturilor macroergice, particip la metabolizarea glucidelor, lipidelor i a nucleoproteidelor. VI.3.5. Metabolismul magneziului Magneziul este un element indispensabil n alimentaie. Cantitatea cea mai mare se gsete n oase i n esutul muscular. n eritrocite se gsete n concentraie de 5,5 7,9 mg % iar n plasm 1,8-2,2 mg% (1,5-1,83 mEq). Se gsete n proporie de 80% sub form difuzabil, restul nedifuzabil legate de proteine. Metabolismul Mg este legat de metabolismul calciului. Absorbia Mg este supus acelorai condiii ca i a calciului, dar parathormonul i vitamina D nu par a avea o aciune analoag. ntr-o serie de fenomene, ca Mg are o aciune antagonist ca i a vitaminei K. Rolul Mg este important ca activator al unor sisteme enzimatice. Este activator al fosfatazelor i al unor sisteme enzimatice care intervin n metabolismul glucidelor (fosfoglucomutaze, fosfofructokinaze, enolaze, cocarboxilaze). Are rol n permeabilitatea celular. VI.3.6. Metabolismul fierului Organismul uman conine 4-5 g de fier, din care 75% sub form de hemoglobin, mioglobin i citocromi. Dup absorbie, fierul se transform n fier feros (Fe++) apoi trece n ficat, n mduva osoas i la organe prin intermediul plasmei sanguine.
98
n organism fierul se depoziteaz sub form de: feritin, care este o protein ce poate ncorpora pn la 23% metal i hemosiderin care conine 35% fier, sub forma unui gel de hidroxid feric. Ambele forme de depozitare se ntlnesc n primul rnd n splin i ficat iar feritina i n mucoasa intestinal. Fierul sanguin este transportat de siderofilin (transferin) o beta glubulin molecular, care leag complex doi atomi de Fe3+, fierul astfel fixat intr rapid n procesele metabolice, servind n special sintezei hemoglobinei la nivelul eritrocitelor pe cale de maturizare. Rolul principal al Fe este de transportor al oxigenului la esuturi i intervine n activitatea enzimatic. Metabolismul fierului este foarte activ, dinamic i se rennoiete o dat la 15-20 de zile. Fierul rezultat din distrugerea hematiilor nu este eliminat, ci este pstrat i reutilizat n formarea globulelor noi. Metabolismul sulfului. Sulful se gsete sub form de sulfai organici, sulf proteic (cisteina i insulin) sau sulf care intr n componena mucopolizaharidelor. Sulful se absoarbe sub form de aminoacizi sulfurai, rezultai din proteinele alimentare. Se elimin n proporie de 80-90% sub form de sulf anorganic, pe cale renal i o important parte prin piele prin descuamarea stratului cornos, cderea prului i a unghiilor. Sulful are rol plastic, participnd la structura scleroproteidelor (Keratina i colagenul) i rol catalitic, fiind component al coenzimei A, al tioaminoacizilor i al heparinei. VI.3.7. Metabolismul clorului Clorul se afl n lichidele extracelulare alturi de sodiu. Absorbia clorului se face prin pereii intestinali, iar eliminarea sub forma de cloruri pe cale renal, prin transpiraie i mai puin prin fecale. Clorul are rol n reglarea presiunii sngelui, a pH-ului i n producerea acidului clorhidric din sucul gastric. La reglarea metabolismului clorului particip hormonii corticoizi. VI.3.8. Metabolismul iodului n ntregul organism se afl cca 20-30 mg iod. Este rspndit n toate organele, dar cea mai mare parte se gsete n glanda tiroid. Iodul se absoarbe sub form anorganic n intestin i este eliminat prin rinichi, piele i prin intermediul salivei. Iodul are rol important n sinteza hormonului tiroidian.
99
VI.3.9. Oligoelementele Rolul indispensabil al oligoelementelor se datoreaz aciunii lor catalitice n diferitele procese metabolice, probabil corelat cu cel al enzimelor, fie ca activatori, fie ca inhibitori ai acestora sau chiar n calitate de componente structurale. Stroniul se gsete n cantiti mici alturi de calciu i favorizeaz depunerea de Ca n oase i dini. Manganul este o component important a multor sisteme enzimatice: arginaza, fosfataza, colinesteraza, fosfoglucomutaza, B-cetodecarboxilazele oxidative . a. Organele mai bogate n mangan sunt: timusul, rinichiul, suprarenalele i inima. Cuprul este un microelement indispensabil din alimentaie; necesitatea zilnic: 2 mg. Are rol esenial n sinteza hemoglobinei. Zincul este indispensabil organismului. Se gsete n cantitate mare n pancreas, ficat i prostat. Zincul este o component important a unor enzime, cum ar fi dehidrogenazele (alcool dehidrogenaza, glutamatdehidrogenaza, lactat dehidrogenaza). Cobaltul este component structural a vitaminei B12. Activator al unor enzime (arginaza). Molibdenul este o component a unor flavinenzime. Este depozitat n special n glandele cu secreie intern: tiroid, pancreas, suprarenal, hipofiz. Seleniul cu rol biologic protector fa de peroxidare, n susinerea unui efort de lung durat, caracterizat prin procese aerobe i consum de lipide i care determin un exces de peroxidare, ce depete mecanismele protectoare fiziologice. Se administreaz n preparate alturi de vitamina E, cisteina, acid ascorbic, aspirina . a. VI.4. Structura i importana unor substane azotate neproteice n funcionalitatea organismului supus efortului, VI.4.1. Creatina (acidul metilguanidinacetic) are urmtoarea formul chimic:
100
Creatina se sintetizeaz n organism din glicocool i arginin, factorul de metilare fiind metionina activat. Se gsete n snge n concentraie de 3 mg%. Creatina din muchi cu ATP, sub aciunea creatinkinazei care este o enzim de transfer a gruprii fosfat macroergice de pe ATP pe creatinin, formeaz creatinfostaful. Creatinfosfatul reprezint n esutul muscular rezerva de grupri fosfat macroergice necesare proceselor consumatoare de energie, de unde i denumirea de fosfagen.
Creatina sub aciunea creatinazei este scindat hidrolitic n uree i sarcozina. VI.4.2. Creatinina este anhidrida intern a creatinei. Creatinina nu se acumuleaz n esutul muscular i este excretat de rinichi. Creatinuria la organismele tinere este un fenomen normal deoarece ritmul sintezei creatinei ntrece capacitatea de fixare de ctre esutul muscular. La aduli creatinuria este un fenomen patologic. Creatinina seric are valori normale ntre 0,7-1,5 mg% pentru brbai i 0,5-1,3 mg% pentru femei. Creatinina seric reprezint un factor important pentru msurarea biochimic a efortului. Ea crete uor dup eforturi grele. La 12-24 ore dup eforturi de lung durat excreia urinar de creatinin este nc crescut n concordan cu efectele induse de efort asupra esutului muscular (n special cu masa muscular), nct trebuie s se ia n considerare acest fapt atunci cnd, se estimeaz creatinina urinar pe 24 ore. VI.4.3. Metabolismul amoniacului Amoniacul rezultat din dezaminarea aminoacizilor, precum i din ali compui coninnd gruparea amino (-NH2) (purine, pirimidine, amine, uree), dac nu este imediat folosit pentru procese biosintetice, trebuie s fie eliminat din organism, sau transformat ntr-o form
101
netoxic, deoarece ca amoniac liber este toxic. Amoniacul este toxic n special pentru esutul nervos. Metabolizarea amoniacului are loc n ficat, proces n urma cruia rezult uree i glutamin. Transformarea amoniacului ntr-o form netoxic, dar cu pstrarea sa n organism, se face prin transformarea sa n glutamin. Formarea glutaminei are loc din acidul glutamic prin fixarea amoniacului sub forma gruprii amidice. Reacia are loc tot n ficat dar i n alte organe i esuturi. Glutamina reprezint o form important de transport i depozitare a amoniacului n organism, din care aceast component poate fi scoas pe msura necesitilor imediate i poate fi folosit n diverse procese metabolice importante. Transformarea amoniacului n uree ca o cale de detoxificare a amoniacului, are loc printr-o succesiune complex de reacii, cunoscute sub numele de ciclul ureogenetic al lui Krebs-Henseleit. Formarea ureei sau ureogeneza include urmtoarele etape: 1. Transformarea ornitinei n citrulin prin fixarea de amoniac liber i CO2. 2. Transformarea citrulinei n arginin prin fixarea unei noi molecule de amoniac. 3. Transformarea argininei n uree i ornitin. Primele dou etape sinteza citrulinei i sinteza argininei necesit aport energetic care este adus sub form de ATP, etapa a 3-a, a desfacerii argininei cu formare de uree i regenerarea ornitinei, are loc fr consum de energie. Primele dou etape mari sunt constituite dintr-o succesiune de reacii: 1. Transformarea ornitinei n citrulin implic dou reacii. Prima const n ncorporarea unei molecule de amoniac liber i a unei molecule de CO2. Reacia necesit prezena ATP i Mg2+ i a acidului N-acetilglutamic i are loc ca rezultat formarea carbamilfosfatului, compus cu legtur fosfat macroergic. n a doua reacie se transfer restul carbamil de pe carbamil fosfat pe ornitin cu formare de citrulin. 2. Transformarea citrulinei n arginin are loc prin ncorporarea unei a doua molecule de amoniac dar nu sub forma sa liber ci sub forma gruprii aminice din molecula acidului aspartic. Mg2+ acid argininosuccinic + citrulina + acid aspartic + ATP + AMP + PP
102
n a doua reacie are loc scindarea acidului argininosuccinic cu formare de argin i acid fumaric, conform ecuaiei: acid argininosuccinic arginin + acid fumaric Trebuie semnalat c etapa ornitin citrulin are loc exclusiv n ficat, pe cnd etapa citrulin arginin are loc n ficat i n rinichi. 3. Formarea ureei din argintin are loc sub aciunea arginazei, enzim ce catalizeaz scindarea argininei la uree i ornitin, nchiznd astfel ciclul cu regenerarea ornitinei, care devine astfel accesibil unei noi fixri de amoniac liber. Arginaza necesit prezena Mn2+, CO2+ sau Ni2+. Ureogeneza este prezentat n figura nr. 13.
Fig. 13. Ureogeneza
n timpul efortului fizic valorile ureei sanguine cresc de la 0,35 0,40 g la 0,80 1,00 g. Determinarea ureei sanguine a doua zi dup efort, n condiii bazale sau dup o competiie poate fi apreciat ca un criteriu important
103
n estimarea oboselii metabolice (proteice). Msurtorile periodice ale ureei serice sau/i urinare pot ajuta n dirijarea antrenamentului, n special n ceea ce privete volumul. n timpul aclimatizrii, la altitudine medie, ncepnd cu a II-a a III-a zi, ureea seric i urinar cresc pn la valori de 60 70 mg% n ser, 30-40 mg% n urin (catabolism proteic exacerbat), revenind la valorile iniiale cam n 14 zile. De aceea, ureea este folosit ca un indicator de apreciere a aclimatizrii la altitudine medie.
104
VII. BIOCHIMIA CONTRACIEI MUSCULARE
esutul muscular constituie aproximativ 40% din greutatea corporal. Din punct de vedere histologic i funcional se mparte n: 1) muchiul striat (voluntar) al sistemului scheletic 2) muchiul neted (involuntar) al sistemului visceral 3) muchiul cardiac VII.1. Structura funcional a muchiului striat Unitatea morfologic a esutului muscular o constituie fibra muscular. Fibra muscular striat are lungimea ntre 1-30 cm i diametrul 10-200 microni. Forma ei este aproape cilindric iar la capete este rotunjit. Fibra muscular este constituit la rndul ei din fibrile (miofibrile), care sunt nglobate ntr-o mas nedifereniat, de structura unui gel, sarcoplasma (corespunztoare citoplasmei din celule). Miofibrilele sunt unitatea morfologic ultim a fibrei musculare i constituie elementul contractil al esutului muscular striat. Miofibrilele formeaz citoplasma contractil sau ionoplasma, care reprezint 60-80% din fibra muscular. O miofibril are lungimea egal cu a fibrei musculare, iar diametrul de 1 micron. Striurile sunt datorate alternanei unor benzi de material, avnd indice de refracie diferit: benzi A anizotrope, care apar n lumina polarizat luminoase i n lumina natural ntunecate i benzi I izotrope, ntunecate n lumin polarizat i luminoase n lumina natural. n seciune longitudinal, miofibrilele se prezint la microscopul electronic ca fiind constituite din filamente fine de proteine, miofilamente care merg paralel cu axa, filamente A n benzile A i I n benzile I. Fotografia la microscopul electronic a seciunilor transversale indic alternant zone dense A ntunecate, separate printr-o
105
zon mai clar H (striurile Hansen) i zonele mai luminoase I strbtute de o linie ntunecat Z, aa-numitul disc intermediar. Huxley a artat c fiecare miofibril este alctuit din miofilamente de miozin i actin. Miozina predomin n benzile A, pe cnd actina n benzile I i ptrunde i ntre benzile A. Poziia relativ a acestor dou tipuri de benzi este diferit la muchiul n repaus i la muchiul contractat, ceea ce a fcut pe Huxley s elaboreze o concepie nou asupra modificrilor care au loc n structura miofibrilelor n cursul procesului de contracie. Granulele interstiiale sau sarcozomi, sunt granule respiratorii ale muchiului, care corespund mitocondriei de la nivelul altor esuturi. Sarcozomii sunt foarte strns legai de miofibrile. Funcia lor n celula muscular este de a suplini ATP-ul la nivelul miofibrilei. Sarcoplasma este o substan vscoas de culoare roie, datorit pigmentului rou-mioglobina, pe care-l conine. n unele fibre musculare mioglobina este abundent i, de aceea, se numesc fibre musculare roii (lente), iar n altele este n cantitate mai mic i acestea se numesc fibre musculare albe. La om nu exist muchi roii i muchi albi, dar n formarea unor muchi particip fibre musculare mai srace n sarcoplasm (de exemplu muchii flexori) iar n alii fibre mai bogate n sarcoplasm (muchii extensori). Fibrele musculare roii, fiind bogate n sarcoplasm, asigur condiii favorabile contraciilor musculare prelungite, deoarece conin n cantiti mai mari att substane energetice ct i mioglobin, au un metabolism preponderent aerob. Prin practicarea exerciiilor fizice, eforturile statice dezvolt fibrele musculare cu sarcoplasm mult (roii), care produc o contracie lent de lung durat i obosesc greu. n schimb, eforturile dinamice dezvolt fibrele cu sarcoplasm puin (albe) care produc contracii rapide, dar obosesc repede, cu metabolism anaerob axat pe glicoliz. De reinut c n compoziia sarcoplasmei intr glicogen, lipide i ntreaga trus enzimatic a metabolismului energetic muscular, substane care sunt prezentate i n sarcozomi. VII.2. Compoziia chimic a muchiului striat esutul muscular conine 70 89% ap la 100g de esut proaspt. Substane minerale Coninutul n substane minerale a muchiului este redat n tabelul nr. 7.
106
Tabelul nr. 7 Coninutul n minerale al esutului muscular (mg%) K+ 320 400 Cl 70 2+ urme 8 Ca SO 2 4 Na+ 15 80 HCO 3 Mg2+ 21
PO 3 4
Potasiul este coninut n cantitatea cea mai mare i este ionul cel mai important de care depinde funcia de excitabilitate a muchiului. Calciul i magneziul au rol de activatori ai enzimelor musculare. Substanele organice 20 26 g la 100 g esut proaspt. Dintre substanele organice menionm: - glicogenul (0,3 3%), care este substratul glicolizei i al oxidrii tisulare; - lipide (1 3%) sub form de grsimi neutre, colesterol, fosfolipide. Compuii azotai neproteici: creatina, creatinina, fosfocreatina, acid uric, nucleotide: ADP, ATP (o,2 o,4%) care prin scindarea hidrolitic pune n libertate energia necesar contraciei; aminoacizi liberi: sarcozina; dipeptide caracteristice muchiului: apserina i carnosina; un tripeptid: glutationul; carnitin care este un factor itamino-similar necesar pentru oxidarea exergonic a acizilor grai. O alt funcie foarte important a carnitinei este aceea de economisire a coenzimei A (COA). Carnitina este coninut n muchii striai dar singurele organe capabile s o sintetizeze sunt ficatul sau rinichiul. De asemenea sunt prezente ureea i amoniacul. Proteinele din esutul muscular Dup Rapaport, clasificarea proteinelor musculare este urmtoarea:
SARCOPLASMA
Fracia solubil
Fracie insolubil (miofibrilele)
MIOGEN
GLOBULINA
MIOGLOBULINA
ACTINA MIOZINA TROPOMIOZINA
107
Din fraciunea solubil, grupa miogenului este preponderent, deine 30% din albuminele sarcoplasmei. Grupul miogenului conine enzimele glicolizei n proporie mare. Proteinele miofribrilei sunt denumite i proteinele structurale ale muchiului i sunt responsabile de organizarea filamentoas a muchiului i particip direct n contracie. Cea mai mare proporie din proteinele miofibrilare 50% o deine grupa miozinei i actinei. Grupul Miozinei are greutatea molecular de 850.000, fiind formate dintr-un numr de aproximativ 17 aminoacizi (predomin aminoacizii dicarboxilici acidul glutamic 22,10% i acidul aspartic 12,40 %). Aceasta explic ncrcarea lanurilor polipeptidice ale miozinei, cu un numr mare de grupri polare, ceea ce confer moleculei un mare grad de hidratare i o mare afinitate fa de ionii Ca2+ i Mg2+. Miozina prezint activitate enzimatic: ATP-azic dezaminazic i acetil-colinesterazic. Miozina se comport ca o adenozin trifosfataz (ATP-az). MiozinATPaza este activat de ionii de Ca2+, dar nu de Mg2+, care, n anumite condiii, funcioneaz ca inhibitori. Pentru activitatea ATP-azic a miozinei este necesar ca gruprile - SH din molecul s fie libere. miozin ADP + acid fosforic ATP + H2O O molecul de miozin leag dou molecule de ATP. Actina este singura protein a muchiului, care n prezena srurilor se polimerizeaz i se disociaz apoi n monomeri n absena lor. Soluia apoas de actin are forma globular G actina, iar n prezena srurilor ia aspectul fibros F actina. Legarea ntre ele a particulelor izolate de actin o face ATP i Ca2+. G actina conine ATP n raport echimolecular. n soluie fiziologic G actina se transform ntr-un gel vscos i concomitent ATP se scindeaz n ADP + P. S-ar putea deci considera formarea a dou complexe: complex G actina ATP; complex F actina ADP. Actomiozina se formeaz prin unirea actinei cu miozina. Este o protein care prezint asimetrie molecular, dnd soluii de o intens vscozitate. Aceast proprietate confer actomiozinei rolul de element contractil al muchiului. Pentru ndeplinirea acestui rol, raportul optim ntre actin i miozin este de 1 g actin la 4-5 g miozin. Actomiozina posed activitate ATP-azic i chiar mai intens dect a miozinei.
108
Actomiozina ATP-aza are pH optim n zona neutr, pe cnd miozinATP-aza n zona alcalin. Ionii de Ca2+ care activeaz miozin ATP-aza inhib actomizoni-ATP-aza, iar ionii Mg2+ invers . Tropomiozina este o protein fibroas a miofibrilei. Reprezint aproximativ 2,5 % din proteinele totale. Nu se cunoate cu precizie rolul ei n procesul de contracie, astfel cum se cunoate pentru actin i miozin. Nu are activitate ATP-azic. VII.3. Biochimismul contraciei musculare Muchiul transform energia dinamic a substanelor nutritive n lucru mecanic. VII.3.1. Procesele biochimice Metabolismul muscular posed urmtoarele particulariti: 1) posed tot echipamentul enzimatic necesar ciclului Krebs n cantitate mai mare fa de alte esuturi; 2) perioada de repaus alterneaz cu perioada de activitate intens, cnd este nevoie de mobilizarea unei cantiti mari de energie; 3) pentru acoperirea cerinelor energetice n esutul muscular s-au dezvoltat: depozitele de oxigen, degradarea anaerob a glicogenului i glucozei i depozitele de fosfai macroergici. Mioglobina se combin reversibil cu oxigenul, la presiune sczut (cnd hemolobina i pierde oxigenul) i n acest mod ia parte la transferul oxigenului de la snge la enzimele respiratorii din sarcosomi. Procesele biochimice care au loc n timpul contraciei musculare sunt extrem de complexe. Contracia muscular ia natere n urma aciunii influxului nervos, se produc o serie de modificri chimice, generatoare de energie i determinant ale procesului intim al contraciei musculare. Pe baza unor experiene s-a demonstrat c sursa imediat de energie care declaneaz contracia muscular este ATP. ATP sub aciunea enzimatic a miozinei (aciune adenozintrifosfatazic ATP-azic), aciune care produce scindarea legturii fosfat macroergice dnd natere la energie chimic care este transformat n lucru mecanic, manifestat prin contracia fibrelor de actomiozin. ATP se desface astfel n ADP i H3PO4 i energie. Activarea ATP-azei se face sub influena ionilor de Ca i Na, n momentul ptrunderii lor n interiorul fibrei musculare. Degradarea ATP necesit regenerarea sa imediat, care are loc sub aciunea fosfocreatinei (fosfogenului) printr-o reacie pe care o
109
poate transfera pe ADP sub aciunea enzimei ATPcreatin fosfotransferaza conform reaciei: ATP Creatinfosfotransferaza ATP + creatin Fosfocreatina + ADP Reacia este reversibil; o cretere a ATP-ului n urma glicolizei sau oxidrii glucozei, orienteaz reacia n sensul refacerii CP. Scderea ATP-ului prin consumarea lui n timpul contraciei, orienteaz reacia n sensul refacerii sale. Creatinfosfatul este pentru muchi acumulatorul de energie care se ncarc i descarc prin intermediul ATP-ului. Glicogenul din muchi, se descompune i el n aceast faz a contraciei, prin procesul cunoscut de glicoliz pn la acid lactic, cu eliberarea unei cantiti foarte mari de energie. Aceast energie este folosit la resinteza CP din creatin i fosfor. La sfritul unui astfel de ciclu, primele dou substane, ATP i CP, se gsesc la fel ca nainte de contracie. Numai glicogenul este modificat, gsindu-se sub form de acid lactic. Acest ciclu de transformri produse fr intervenia oxigenului alctuiesc faza anaerob a contraciei musculare sau faza lactacid. Dac n procesul de glicoliz are loc o inhibare a etapei de transformare a aldehidei3fosfoglicerice n acid, 1,3difosfogliceric, muchiul pstreaz totui pentru un anumit interval capacitatea de a se contracta. Este aa-numita contracie alactacid, cu aspectul contraciei normale, dar numai c este de scurt durat i urmat de rigiditate muscular. Datele experimentale care au dovedit c declanarea contraciei nu are loc absolut concomitent cu apariia de acid lactic i c formarea de acid lactic se continu nc timp de 30 de secunde dup sfritul unei serii de contracii, au atras atenia asupra existenei altor reacii dect cea a formrii de acid lactic din glicogen i, mai exact, au pus n eviden rolul ATP i CP despre care am vorbit. Se consider c degradarea glicogenului la acid lactic, precum i degradarea oxidativ a glicogenului la CO2 i H2O nu au alt rol n procesul contraciei musculare dect de a procura molecule de ATP, care este motorul energetic al concentraiei, iar creatinfosfatul are rolul de a menine o rezerv permanent a gruprii fosfat macroergice pentru refacerea ATP degradat n cursul procesului de contracie. Concluzionnd, rezervele musculare de energie de origine anaerob sunt ATP, CP i glicogenul. Aceste trei surse de energie anaerob se gsesc n raportul de mrime de:
110
ATP : CP : glicogen 1 : 4 : 50 Activitatea muscular bazat numai pe descompunerea ATP i creatinfosfatului poate fi efectuat numai timp de 10-20 s. mpreun cu glicogenul, activitatea anaerob se prelungete cu nc 30s. Deci, organismul poate lucra cca. 60s., fr participarea oxigenului, n anaerobioz. n timpul efortului maxim de scurt durat, cele trei surse se consum n raport de: ATP : CP : glicogen 1 : 15 : 75 n organism ns, muchiul este aprovizionat n permanen cu snge, deci cu oxigen. Oxigenul acioneaz asupra acidului lactic i d natere la o nou faz, la un alt ciclu al contraciei musculare: 1/5 din acidul lactic se metabolizeaz n prezena oxigenului pn la CO2 i H2O, cu eliberarea unei cantiti foarte mari de energie. Aceast energie este folosit pentru ca restul de 4/5 de acid lactic s se resintetizeze n glicogen. Acest ciclu se numete faza aerob a contraciei musculare i se caracterizeaz prin aceea c la sfritul ei nu se mai acumuleaz produse toxice, deoarece trebuie menionat c acidul lactic este o substan nefavorabil activitii musculare i, n cantitate foarte mare, este toxic pentru ntreg organismul. Calea aerob este mult mai eficace dect cea anaerob, deoarece pe calea degradrii anaerobe energia eliberat este de 57.000 cal/mol glucoz, rezult 4 moli ATP, din care 2 moli ATP pot fi folosii ca rezerv energetic. Energia eliberat n cursul degradrii aerobe este de 688.000 cal/mol glucoz, se procur 38 moli de ATP. Dei neeconomic, calea anaerob i are importana sa, deoarece procur molecule de ATP energetic importante n contracia muscular, chiar n condiiile unei lipse de oxigen, situaie care se creeaz n esutul muscular n urma unui efort excesiv. Durata activitii musculare, cnd exist oxigen n cantitate suficient, este extrem de lung. Se consum numai glucoz (numit benzina vieii) care poate fi uor remprosptat. Deci limitarea unui efort se face numai pe seama glucozei i a condiiilor de mediu. Prin antrenament, cantitatea de glicogen din ficat i muchi crete. n probele de durat mic i mijlocie, nevoia de glicogen este asigurat de rezervele organismului. n probele de semifond, rezervele de glicogen ale organismului nu sunt suficiente de aceea se face o suplimentare n alimentaie, iar pe parcursul cursei se d un amestec
111
de glucoz, zaharoas, suc de fructe i fulgi de ovz (amidon) de exemplu, la cicliti, schiori i maratoniti. n figura nr. 14 sunt prezentate principalele surse de energie utilizate n efortul sportiv.
Fig. 14 Sursele de energie utilizate n efortul sportiv
Procesul de glicoliz are loc n sarcoplasm, iar ciclul lui Krebs are loc n sarcozomi. VII.4. Influena efortului asupra musculaturii striate Un antrenament bine dozat, la o intensitate i un volum optim asigur dezvoltarea musculaturii ntregului corp. n urma practicrii exerciiilor fizice n cadrul antrenamentului timp ndelungat, are loc o hipertrofie a fibrelor musculare i deci o mrire n volum a muchilor. Odat cu aceasta crete i fora muscular. Reeaua capilar se dezvolt simultan cu dezvoltarea fibrelor musculare. Substanele metabolice rezultate din contracia muscular produc o vasoconstricie local de durat, nsoit de creterea permeabilitii pereilor vasculari (de ex. CO2). Ca rezultat, are loc producerea unor ischemii n muchi i miocard, iar acestea duc la micronecroze i microinfarcte.
112
n timpul unui efort muscular intens, sistemul cardiovascular i aparatul respirator nu pot furniza cantitatea necesar de oxigen pentru ndeprtarea acidului lactic produs n cantiti mari la nivelul muchiului. De aceea, n eforturile musculare intense, muchii lucreaz n condiii de anaerobioz i organismul contracteaz o datorie de oxigen pe care o pltete n perioada de relaxare sau dup terminarea efortului. Aceast datorie maxim de oxigen n timpul eforturilor musculare intense, poate ajunge pn la 18 litri. Achitarea datoriei de oxigen, n acest caz se face n timp foarte lung, numit timp de revenire ( 1 1 ore).
113
VIII. ENZIME I VITAMINE
VIII.1. Enzime Enzimele sau fermenii sunt compui chimici care catalizeaz reaciile de sintez i degradare din organism. Enzimele sunt astfel biocatalizatori care joac un rol fundamental n reglarea proceselor metabolice precum i n toate procesele de cretere i regenerare tisular. VIII.1.1. Mecanismul de aciune al enzimelor este acela al tuturor catalizatorilor. Sunt active n concentraii extrem de mici, ntre concentraie i intensitatea lor de aciune exist o disproporie. Enzimele nu se consum n timpul aciunii lor, nu modific starea final de echilibru a reaciei catalizate, ci modific numai viteza cu care se atinge acest echilibru. Accelerarea vitezei unei reacii sub influena unui catalizator, i n cazul nostru special sub aciunea enzimelor, se explic prin activarea moleculelor care particip la o anumit reacie. Prin aceast activare, nivelul energetic minim care condiioneaz reacia este cobort, ceea ce permite moleculelor s reacioneze cu o vitez apreciabil n condiii n care n absena enzimei nu ar reaciona dect cu o vitez extrem de lent. Enzima care activeaz o reacie de transformare a unui substrat dat are capacitatea de a cobor nivelul minim de energie necesar acestei reacii; are ceea ce se numete o aciune de labilizare a substratului. Conform teoriei lui Michaelis i Menton, ntr-o reacie enzimic ce duce la transformarea unui substrat S ntr-un compus s, sub aciunea catalitic a unei enzime E, au loc urmtoarele etape: E+S ES E+s unde ES este complexul intermediar enzim-substrat. Viteza de formare i de desfacere a complexului ES este extrem de mare i se pune problema dac legtura dintre substrat i enzim este datorat unui fenomen de absorbie sau unei combinaii chimice.
114
VIII.1.2. Proprietile generale ale enzimelor Enzimele au, n primul rnd, caracterele generale ale catalizatorilor i anume: a) modific viteza unei reacii fr ca ele nsele s se consume; b) cantiti minime de enzime pot produce transformarea unor cantiti foarte mari de substrat; c) aciunea enzimelor este reversibil, conform legii aciunii maselor, care se aplic reaciilor reversibile catalizate de enzime, catalizatorul nu poate modifica echilibrul, ci numai viteza cu care se atinge acest echilibru. Aciunea enzimei trebuie deci s se exercite, att asupra reaciei de descompunere, ct i asupra aceleia de sintez. Enzimele n soluie apoas i n general n mediul lor de dispersie se gsesc sub form coloidal, aceasta datorit greutii lor moleculare mari (de ordinul 35.000 sau un multiplu). Enzimele, n afar de proprietile care decurg din analogia cu catalizatorii obinuii, mai au o serie de proprieti specifice, ce deriv din structura lor coloidal: a) au o foarte mare specificitate; b) au o mare sensibilitate fa de variaiile de pH; c) au o mare sensibilitate fa de variaiile de temperatur; d) sunt foarte sensibile la electrolii n general. Se nelege prin specificitatea unei enzime proprietatea acesteia de a aciona catalitic asupra unui singur substrat sau cel mult asupra unei grupe de substane cu proprieti chimice comune, i de a cataliza anumite reacii. Enzimele sunt termolabile, nclzite peste o anumit temperatur, i pierd ireversibil activitatea lor enzimatic. n general, toate enzimele sunt inactivate printr-o nclzire peste 800C. Temperaturile coborte nu distrug activitatea enzimatic, dimpotriv o conserv; aciunea frigului realizeaz numai o oprire reversibil a activitii enzimatice. Activitatea enzimelor este funcie de pH-ul mediului n care i exercit activitatea. Pentru fiecare enzim exist o zon de pH, cu dou valori limit n care i exercit activitatea catalitic. Valoarea pH-ului pentru care activitatea enzimei este maxim se numete pH optim de activitate. Diveri ioni pot avea aciune de stimulare a activitii enzimatice. De ex: fosfatazele sunt activate de ionii de Mg2+, lipsa de ionii de Ca2+.
115
Ionii metalelor grele Ag, Hg inhib aciunea catalitic a enzimelor. Inhibitori electrolitici puternici sunt fluorurile, cianurile i sulfurile. VIII.1.3. Structura enzimelor Enzimele au caracter coloidal, proteinic, molecula enzimei fiind format din dou componente i anume: un suport coloidal i o grupare pur chimic, activ. Componenta coloidal se numete apoenzim i componenta activ coenzim, iar ntregul complex poart denumirea de holoenzim. holoenzima = apoenzima + coenzima Rolul celor dou componente din molecula enzimei este urmtorul: - apoenzima stabilete legtura enzimei cu substratul corespunztor i i confer specificitatea sa n raport cu substratul respectiv, deci caracterul de specificitate al enzimei; - coenzima determin activitatea catalitic propriu-zis a enzimei i, n acelai timp, determin i mecanismul chimic al acestei activiti. Coenzima orienteaz sensul reaciei de transformare pe care o sufer substratul, combinat n prealabil cu apoenzima. VIII.1.4. Clasificarea enzimelor Clasificarea enzimelor nu se poate face dup criteriul structurii lor chimice, deoarece structura lor este insuficient cunoscut. Singurul criteriu valabil n stadiul actual al cunotinelor l reprezint acela al reaciei chimice catalizate de o enzim dat i substratul asupra cruia acioneaz aceast enzim. Aceast clasificare cuprinde urmtoarele grupe principale: 1. Hidrolazele aceste enzime catalizeaz reacii de scindare a moleculei substratului, cu participarea componentelor apei la fragmentele care se scindeaz. Hidrolazele catalizeaz scindarea hidrolitic conform reaciei generale: R-R' + HOH R-H + R' OH 2. Transferazele grupa trasnferazelor cuprinde enzime care catalizeaz reaciile de transfer ale unui rest molecular de pe un substrat pe alt substrat. Reacia general catalizat de aceste enzime este: RA + R' B RB + R' A 3. Oxidoreductazele cuprind clasa enzimelor care catalizeaz oxidoreducerile, respectiv, transferul de hidrogen i transferul de electroni. Tot n aceast grup sunt cuprinse peroxidazele i catalazele.
116
4. Liazele i sintetazele cuprind clasa enzimelor de sintez fr hidroliz i fr oxidoreducere. 5. Izomerazele i racemazele cuprind clasa enzimelor care catalizeaz reacii de izomerizare i recemizare. Aceste grupe principale cuprind grupe i subgrupe stabilite dup criteriul specificitii de reacie i specificitii de substrat. VIII.1.5. Coenzimele Coenzimele au o importan deosebit n cadrul metabolismului, mai ales la sportivi n timpul efortului fizic intens, tocmai prin faptul c ele fac legtura ntre diverse enzime implicate n mecanismul furnizrii energiei necesare efortului. n aceast ordine de idei, enzimele constituie articulaiile prin intermediul crora devine posibil schimbul de materie hidrogen, acid fosforic sau grupe organice care de cele mai multe ori sunt preluate de coenzimele sub forma unor legturi macroergice. Din acest motiv Bcher utilizeaz pentru coenzime termenul att de sugestiv de metabolii de transport. Karlson propune clasificarea coenzimelor pe baza reaciei chimice la care particip coenzimele, urmnd deci clasificarea enzimelor. Astfel putem meniona: 1. Coenzimele oxidoreductazelor care catalizeaz procesele de oxidoreducere din celul pe baza transferului de electroni sau de hidrogen de la un donator reductorul, la un acceptor oxidantul. Din aceast grup fac parte citocromii (transfer de electroni), nicotinamidnucleotidele (care transfer hidrogen) respectiv NAD i FMN. 2. Transferazele enzimele din aceast grup catalizeaz transportul unei grupri de pe o molecul pe alta. Aceste reacii de transfer se realizeaz de obicei cu formarea unui complex intermediar i n formarea acestui complex rolul de coenzim revine n general diferitelor vitamine sau derivai vitaminici. De ex. ac. folic (vit. Bc), biotina, coenzima A (CoA), care catalizeaz transferul gruprii amino de la un amino acid la un alfa cetoacid . a. 3. Hidrolazele, care scindeaz moleculele organice n componentele lor, cu ajutorul apei, acioneaz de obicei fr coenzime dar necesit prezena ionilor metalici. VIII.2. Vitamine Vitaminele se clasific n dou mari grupe; a) vitamine hidrosolubile C, P, B; b) vitaminele liposolubile A, E, K, F, D.
117
VIII.2.1. Vitaminele hidrosolubile 1. Vitamina C (acid ascorbic) intervine n sistemele oxido-reductoare, are rol n respiraia celulelor, fiind un donator de hidrogen. Vitamina C intervine n metabolismul hormonilor steroizi, favoriznd oxidarea tirozinei, fenialaninei. Are rol n metabolismul acidului folic. Particip la dezaminarea oxidativ a aminoacizilor, fiind un activator al arginazei. La nivelul ficatului, ia parte la procesul de glicogenez i gliconeogenez, mrind cantitatea de glicogen din ficat. Are aciune antitoxic i bactericid. Influeneaz favorabil tonusul general, rezistena la oboseal, aclimatizarea la altitudine i frig. Necesitatea de vitamin C crete n eforturile care determin oboseal intens cu solicitare mare a suprarenalelor. 2. Vitamina B1 (tiamina) este coenzima reaciilor de decarbaxilare a alfa-cetoacizilor. Tiamina particip la procesele generale de oxido-reducere i regleaz schimburile gazoase, intervine n metabolismul lipidic, favoriznd absorbia lor, iar prin aciunea ei lipotrop mpiedic suprancrcarea gras a ficatului, intervine n metabolismul protidic i n dezaminarea acizilor aminai. Tiamina joac rol important n producerea de stimuli n nervii periferici i n refacerea fibrei nervoase post stimulativ. Deficitul de tiamin genereaz slbirea musculaturii, a inimii i duce la tulburri n funcionarea sistemului nervos. 3. Vitamina B2 (riboflavina) formeaz grupul prostetic al flavoproteinelor cu rol n procesul fosforilrii oxidative, intervine n transformarea acidului folic n coenzimele lui, n formarea hematiilor, n producerea corticosteroizilor, n sinteza glicogenului i catabolismul acizilor grai. Riboflavina joac un rol important n crearea energiei n procesele aerobe din celule. Regleaz metabolismul bazal, acioneaz sinergic cu cantiti mici de hormon tiroidian i inhib aciunea n excesul acestui hormon. 4. Vitamina D2 i vitamina D3 intervin n metabolismul fosfocalcic prin: creterea reabsorbiei intestinale de calciu, favorizarea reabsorbiei tubulare renale a fosfailor, stimularea reabsorbiei mineralelor din oase. Este de asemenea, stimulat activitatea fosfatazelor alcaline. Intervine n metabolismul glucidic, determinnd creterea glicogenului din ficat i din muchi. Crete raportul dintre glucide i acid lactic. 5. Vitamina E ( tocoferolul) regleaz metabolismul acizilor nucleici, intervenind n procesele de oxidare celular a citocromilor.
118
Particip la formarea hormonului glicogenotrop din hipofiza anterioar, intervenind, astfel n metabolismul glucidic i mrind cantitatea de glicogen hepatic i muscular, prin mecanism de oxidoreducere. De asemenea, intervine n procesul de asimilare a calciului i a fosforului. Deficitul de vitamin E duce la creterea consumului de O2 i scderea n creatin a muchiului striat. Exist argumente biochimice n favoarea folosirii pentru susinerea efortului i favorizarea refacerii avnd funcie trofic pentru muchi. 6. Vitamina B3 (niacina sau vitamina PP) intervine sub form de coenzim piridinic n procesele oxidative. Vitamina PP intervine n glicoliza aerob i anaerob, sinteza legturilor fosfat macroergice, metabolismul lipidic, sinteza steroizilor suprarenali i secundar, n procesul de transaminare a acidului glutamic n acid - cetoglutaric, care este puntea de legtur dintre metabolismul proteic i cel glucidic. Lipsa acestei vitamine provoac slbirea musculaturii i o stare de oboseal marcat. 7. Vitamina B6 (piridoxina) intervine n metabolismul aminoacizilor i producerea de anticorpi. Crete sinteza i metabolismul colesterolului. Vitamina B6 influeneaz tonusul muscular i coordonarea motric. 8. Vitamina B12 este coezim o cu aciune anabolic n metabolismul proteic, favoriznd integrarea aminoacizilor n proteinele tisulare. Are aciune hematoformatoare. VIII.2.2. Vitaminele liposolubile Vitamina A (retinol) intervine n cretere prin stimularea apetitului. Menine integritatea celulelor epiteliale, particip la meninerea integritii membranei celulare i a particulelor subcelulare i are rol de coenzim n sinteza hormonilor din colesterol. Necesiti crescute de vitamina A apar n sporturile de iarn unde se pierd cantiti mari de cldur; la cicliti i canotori se administreaz doze mai mari pentru a preveni furunculoza tegumentar. Vitamina F s reamintim c sunt acizii grai polinesaturai, care nu pot fi sintetizai de organism. Vitaminele joac un rol important n susinerea efortului sportiv intens, att n cadrul perioadei de pregtire, ct i n competiii. n mod obinuit se recomand asociaii polivitaminice coninnd doze mici, echilibrate de diferite vitamine.
119
IX. HORMONII I SUSINTOARE DE EFORT
IX.1. Hormonii Hormonii sunt substane chimice specifice, elaborate de esuturi glandulare specializate i organizate, eliminate n snge i vehiculate de acesta ctre diferite organe i esuturi asupra crora i exercit aciunea lor specific n concentraie foarte mic. esuturile glandulare specializate se clasific dup cum urmeaz: a. glande exocrine care elimin secreia la nivelul suprafeelor externe i interne ale organismului printr-un sistem de canale; b. glande endocrine care elimin secreia direct n mediul intern al organismului snge, limf . a. Transportul hormonilor cu ajutorul sistemului circulator i nervos constituie pentru om dou ci majore prin care se asigur transmiterea informaiei de la un organ la altul, integrarea proceselor metabolice i biochimice care asigur o bun funcionare a ntregului organism. Hormonii influeneaz viteza transformrii biochimice la nivel celular dar nu pot iniia reacii biochimice. Toi hormonii au o aciune fiziologic rapid, dup care sunt imediat inactivai. Sistemul endocrin este alctuit din glandele endocrine n ansamblul lor i este influenat de starea fiziologic a hipotalamusului. Activitatea glandelor endocrine este controlat de hipofiza anterioar prin intermediul hormonilor tropi elaborai de aceasta. La rndul ei, hipofiza se afl sub controlul hipotalamusului care secret factorii de eliberare ce declaneaz sinteza tropilor n hipofiz. Se constituie astfel axa hipotalamo-hipofizar alctuit dintr-o adevrat reea de reglare n cascad. Mecanismul de aciune al glandelor endocrine este prezentat n schema din figura 15. Factorul hipotalmatic acioneaz asupra hipofizei, care elaboreaz un hormon ce stimuleaz la rndul lui hormonogeneza ntr-o gland endocrin ter. Hormonul secretat de glanda endocrin ter care se afl sub controlul hipofizei are aciune periferic i exercit i o reglare invers de tip feed back asupra hipotalamusului i adenohipofizei, efectului aciunii sale este o diminuare a elaborrii hormonului hipofizar care stimuleaz activitatea glandei endocrine respective.
120
Fig. 15 Mecanismul de aciune al glandelor endocrine
Factorii de eliberare (reglare) secretai de hipotalamus, ptrund n snge prin circulaia portal-hipofizar i acioneaz asupra hipofizei. Secreia lor depinde de nivelul hormonilor hipofizari n snge i anume, concentraia sczut de hormoni hipofizari determin o cretere a activitii secretorii a hipotalamusului, pe cnd concentraiile crescute ale aceluiai hormon n snge duce la reducerea activitii secretorii a hipotalamusului. Unii autori propun pentru factorii de eliberare denumirea de releasing-hormon (RH). Acetia se caracterizeaz prin: - selectivitatea de aciune, declannd eliberarea (sau inhibiia) din glanda hipofiz n circulaia sanguin a unui singur hormon hipofizar. Mrirea concentraiei de potasiu n spaiul extracelular este de natur s stimuleze eliberarea hormonilor respectivi;
121
- reacia organismului la introducerea acestor hormoni este extrem de rapid (cteva secunde); - majoritatea hormonilor de eliberare (RH) secretai de hipotalamus se caracterizeaz prin faptul c au gruparea COOH de la carbonul terminal ntotdeauna blocat sub form de amid; - acioneaz asupra eliberrii hormonilor tropi de ctre hipofiz i realizeaz transportul acestora din esutul glandular n snge dar nu influeneaz biosinteza lor. Dup natura lor chimic hormonii se clasific n dou mari grupe: a. hormoni de natur peptidic i proteic i hormoni derivai de la aminoacizi (tirodieni, calcitonina, insulina, parathormonul, adrenalina, noradrenalina . a.); b. hormonii steroizi (estrogeni, testosteronul, corticosuprarenali . a.). Dup modul n care hormonii influeneaz procesul de catabolism sau de anabolism, se mpart n hormonii catabolici (tiroidieni i glucocorticoizi) i hormoni anabolici (insulina, hormoni androgeni i hormonul de cretere). IX.1.1. Mecanismul de aciune al hormonilor de natur peptidic i proteic Hormonul mesagerul primar transmite mesajul su ctre organul sau esutul int i trebuie s fie recunoscut de un receptor hormonal specific situat pe membrana celular. Receptorul celular este adenilat ciclaza. Activarea enzimei adenilat ciclaza are ca rezultat sinteza CAMP (acid adenozin 3', 5' monofosforic ciclic). CAMP este inactivat de enzima AMP fosfodiesteraza. CAMP este mesagerul secundar care poate aciona asupra enzimelor existente n celul pe dou ci: - fie prin activarea enzimelor; - fie mrete viteza de reacie a enzimelor activate. Mesagerul secundar are influen asupra: - proceselor de osmoz; - proceselor de permeabilitate celular; - transmiterii influxului nervos. Hormonul, dup ce a interacionat cu adenilat-ciclaza, circul n snge sub form de hormon inactiv i apoi este excretat.
122
IX.1.2. Mecanismul de aciune al hormonilor steroizi Mecanismul de aciune al hormonilor androgeni. n funcie de intensitatea rspunsului fa de aciunea hormonilor androgeni, esuturile pot fi mprite n dou mari categorii: esuturi-int care reacioneaz puternic la tratamentul cu androgeni, de exemplu, organele masculine sexuale secundare i parial sistemul nervos central (creierul, n special hipotalamusul) i esuturile-int care reacioneaz puin sau foarte slab, de exemplu, esutul osos, rinichiul, glandele salivare, muchii, pielea etc. Hormonii androgeni acioneaz n interiorul celulelor organelor int la nivelul genetic al acestora n trei etape (fig. nr. 16).
Fig. 16 Mecanismul de aciune al androgenilor la nivelul celulelor int 123

Prima etap are loc la nivelul citoplasmei celulare, unde testosterolul interacioneaz cu un receptor hormonal citoplasmatic aflat n citosolul celular cu care formeaz un complex hormon receptor, care reprezint primul rspuns al celulei la aciunea hormonului. A doua etap complexul hormon-receptor sufer o modificare conformaional, respectiv testosteronul trece n 5dehidro-testosteron, form activ a hormonului i care reprezint o amplificare a rspunsului iniial a celulei. Aceast activare are loc sub aciunea enzimei 5 reductaz. n cea de a treia etap forma activ a hormonului, ptrunde n interiorul nucleului celular, unde se combin cu cromatina celular, modificnd procesul de transcripie i activnd un set determinat de gene, care accelereaz sinteza ARN i favorizeaz sinteza proteic. IX.2. Susintoare de efort Cum este i normal, n obinerea formei sportive, rolul cel mai important i revine antrenamentului sportiv. Antrenamentul are din punct de vedere anatomo-fiziologic drept scop s creeze o rezisten i o capacitate de efort mai mare a organismului. n urma efecturii antrenamentului, n organism se produc o serie de fenomene de adaptare, care se manifest mai ales din punct de vedere morfologic i structural n aparatul locomotor, n sistemul cardiovascular, apar modificri biochimice ale sngelui precum i n activarea reglatoare a SNC i a celui neuro-vegetativ, aceste sisteme cunoscnd o mrire a capacitii de funcionare n ceea ce privete coordonarea anumitor sisteme i organe. n antrenamentul de performan contemporan, o mare importan o are redresarea ct mai rapid a capacitii de efort nainte de efectuarea efortului urmtor. Pentru aceasta se utilizeaz mai multe metode care au drept scop scurtarea duratei proceselor de repaus din organism i eliminarea rapid a urmrilor efortului, ba chiar ridicarea, n msura posibilitilor, a potenialului de efort iniial. Acestea permit creterea frecvenei, volumului i calitii efecturii exerciiilor, fapt datorit cruia crete eficiena antrenamentului. Dintre metodele utilizate n creterea eficienei antrenamentului, un rol important l au mijloacele farmacologice, a cror sarcin principal este reglementarea dirijat a desfurrii proceselor metabolice, care se modific cel mai mult n perioada eforturilor maxime.
124
Farmacologia poate ajuta pregtirea sportivilor n limite fiziologice, dar nu duce la obinerea performanei sportive n mod direct. Acest lucru se poate realiza pe dou ci: a. susinerea biologic a marilor eforturi; b. accelerarea refacerii dup efort, prin efecte de compensare. O problem dificil o constituie delimitarea i clasificarea categoriilor de substane care trebuie considerate ageni sau substane stimulatoare de efort i de favorizare a refacerii, mai ales datorit numrului mare de produse farmaceutice care apar mereu pe pia. Modul de aciune al acestor substane se refer la efectele favorabile asupra oboselii generale sau locale induse de efort, unele avnd efecte antitoxice i anabolice post-efort, altele psiho- i mio-relaxante. Susintoarele de efort i de favorizare a refacerii se clasific n dou mari categorii: A. produse farmacologice care au n compoziia lor substane asemntoare constituenilor biochimici naturali ai organismului; B. produse chimico-farmaceutice strine de constituenii biochimici naturali ai organismului i care sunt utilizate de sportivi n scopul creterii artificiale a performanei. Acestea au fost denumite produse dopante. Din prima grup enumerm: glucidele, proteinele, aminoacizii liberi, srurile minerale i vitaminele despre al cror rol am vorbit la capitolele respective.
125
X. LISTA CLASELOR DE SUBSTANE I METODE INTERZISE
Organismele responsabile din sport, att la nivel naional ct i internaional, i alctuiau propriile liste de substane interzise (liste doping), ceea ce conducea la situaii confuze. De aceea, la 13 ianuarie 1994, Comitetul Olimpic Internaional, federaiile internaionale i comitetele olimpice naionale au convenit, la Lausanne, s-i pun de acord diversele liste doping i definiiile respective. Aceast list conine clasele de substane interzise i substanele nrudite (medicamente apropiate ca aciune farmacologic i/sau structur chimic), precum i informaii generale despre fiecare dintre diversele clase de substane i metode interzise. n cele ce urmeaz prezentm ultima list doping, adoptat de comun acord de ctre Comisia Medical a Comitetului Olimpic Internaional, Agenia Mondial Antidoping i Grupul de Monitorizare al Conveniei Antidoping din cadrul Consiliului Europei care s-a ntrunit la Strasbourg n 14 august 2001. Aceast list este valabil pentru perioada 1.09.2001 31.12.2002. De la bun nceput, trebuie fcut precizarea c aceast list nu este o list static, ea a cunoscut o permanent evoluie n timp datorit acelora care au recurs la noi i noi substane i/sau metode de dopaj pentru ameliorarea artificial a performanelor. X.1. Clasele de substane interzise A. Stimulente Substanele interzise aparinnd acestei clase includ urmtoarele exemple: amineptine, amifenazol, amfetamine, bromantan, cafein*, carfedon, cocain, efedrine**, fencamfamine, formoterol***, mesocarb, pentetrazol, salbutamol***, salmeterol***, terbutalin***, i substane nrudite.
126
* Proba este pozitiv pentru cafein cnd concentraia sa n urin este mai mare de 12 micrograme/ml. ** Proba este pozitiv pentru catin cnd concentraia sa n urin este mai mare de 5 micrograme/ml. Pentru efedrin i metilefedrin, o prob este pozitiv la o concentraie n urin mai mare de 10 micrograme/ml, iar pentru fenolpropanolamin i pseudoefedrin, la o concentraie n urin mai mare de 25 micrograme/ml. *** Permise numai sub form de inhalaii pentru prevenirea i/sau tratarea astmului, cu obligaia notificrii n scris de ctre medicul echipei. La Jocurile Olimpice, sportivii care cer permisiunea s inhaleze beta-agoniti vor fi asistai de ctre un medic independent. n cazul salbutamolului, un test este pozitiv n cadrul categoriei I.A (Stimulente) dac concentraia sa n urin depete 100 nanograme/ml. NOT. Toate preparatele pe baz de imidazol sunt permise pentru uz local. Vasoconstrictorii pot fi administrai numai mpreun cu ageni anestezici locali. Preparatele locale (ex. nazal, oftalmologic, rectal) cu adrenalin i fenilefedrin sunt permise. B. Narcotice Substanele incluse n aceast clas sunt urmtoarele: buprenorfin, dextromopramid, diamorfin (heroin), metadon, morfin, pentazocin, petidin, i substane nrudite. NOT: codein, dextrometorfan, dextropropoxifen, dihidrocodein, difenoxilat, etilmorfin, folcodin, propoxifen i tramadol sunt permise. C. Ageni anabolici Substanele interzise incluse n aceast clas sunt urmtoarele: 1. Steroizi anabolici androgeni a. clostebol, fluoximesteron, metandienon, metenolon, nandrolon, 19-norandrostendiol, 19-norandrostendion, oxandrolon, stanozolol, i substane nrudite. b. androstendiol, androstendion, dehidroepiandrosteron (DHEA), dihidrotestosteron, testosteron*, i substane nrudite. Determinri obinute din profilele metabolice i/sau msurtori ale raportului izotopic pot fi utilizate pentru a trasa concluzii definitive. n cazul unui raport testosteron (T)/epitestosteron (Epit) mai mare dect 6, pentru a declara o prob pozitiv este necesar un raport care s conin teste i rezultate ale unor investigaii endocrinologice longitudinale. n cazul n care aceste teste nu sunt concludente,
127
sportivul va fi testat inopinat cel puin o dat pe lun, timp de trei luni. Numai dup studiul acestor investigaii, o prob poate fi declarat pozitiv pentru testosteron. n cazul n care sportivul refuz colaborarea pentru buna desfurare a investigaiilor, proba va fi declarat pozitiv. 2. Beta-2 agoniti: bambuterol, clenbuterol, fenoterol, formoterol*, reproterol, salbutamol*, salmeterol*, terbutalin*, i substane nrudite. *Sunt permise numai sub form de inhalaii. O prob este considerat pozitiv pentru salbutamol ca i agent anabolic, pentru o concentraie mai mare de 1000 nanograme/ml. D. Diuretice Substanele interzise ale acestei clase sunt urmtoarele: acetazolamid, bumetanid, clortalidon, acid etacrinic, furosemid, hidroclortiazid, manitol*, spironolacton, triamteren, i substane nrudite. *Interzis sub form de injecii intravenoase. E. Hormoni peptidici, mimetici i analogi Substanele interzise aparinnd acestei clase sunt urmtoarele: Gonadotropina corionic uman (hCG) interzis numai la brbai; Hormonul luteinizant (LH); Hormonul adrenocorticotrop (ACTH, tetracosactide); Hormonul de cretere (hGH); Factori de cretere insulinostimulatori (IGF-1); i toi factorii de stimulare respectivi i analogii lor; Eritropoietina (EPO); Insulina permis numai pentru acei sportivi care prezint o notificare prin care atest c sufer de diabet i sunt dependeni de insulin, notificare care trebuie obinut de la endocrinolog sau medicul echipei. Prezena unei concentraii anormale a unui hormon endogen din clasa (E) sau a markerilor pentru diagnosticul acestora n urina unui sportiv constituie o ofens n afar de cazul n care se dovedete a se datora unei anumite stri fiziologice sau patologice. X.2. Metodele interzise Sunt interzise urmtoarele procedee: A. Dopingul cu snge: mijloace de administrare de snge, celule roii i/sau alte produse din snge la sportivi, care pot fi
128
precedate de prelevarea de snge de la sportiv, care se antreneaz ntro stare de epuizare. B. Administrarea artificial de produi mbogii n plasm i oxigen. C. Manipulri farmacologice, chimice i fizice. X.3. Clasele de substane cu restricii A. Alcoolul La cererea anumitor federaii se vor efectua teste pentru etanol. B. Canabinoide La cererea anumitor federaii se vor efectua teste pentru canabinoide (ex. Marijuana, Hashish). La Jocurile Olimpice se efectueaz teste pentru canabinoide. Constituie doping, concentraiile n urin mai mari de 15 nanograme/ml pentru acidul 11-nor-delta 9-tetrahidrocanabinol-9-carboxilic (THC). C. Anestezice locale Injeciile locale cu anestezice sunt permise n urmtoarele condiii: a) bupivacaina, lidocaina, mepivacaina, procaina, i substane nrudite, pot fi utilizate, dar nu cocaina. Ageni vasoconstrictori pot fi utilizai n combinaie cu anestezice locale; b) pot fi administrate numai injecii locale i intra-auriculare; c) numai cu notificare din partea medicului echipei. Este necesar notificarea asupra administrrii, acolo unde regulamentul autoritilor medicale responsabile o cere. D. Glucocorticosteroizi Utilizarea sistematic a glucocorticoizilor este interzis att prin administrare oral, rectal, ct i sub form injectabil, intravenoas sau intramuscular. Cnd exist justificare medical, sunt permise injeciile locale i intra-auriculare a glucocorticoizilor. Este necesar notificarea scris asupra administrrii, acolo unde regulamentul autoritilor medicale responsabile o cere. E. Beta-blocante Substanele incluse in aceast clas sunt urmtoarele: acebutolol, alprenolol, atenolol, labetalol, metoprolol, nadolol, oxprenolol, propranolol, sotalol,i substane nrudite. Se vor efectua teste pentru beta-blocante, acolo unde regulamentul autoritilor medicale responsabile o cere.
129
X.4. Lista subtanelor interzise pentru care laboratoarele trebuie s raporteze rezultate cantitative Cafein Carboxy-THC Catin Efedrin Epitestosteron Metilefedrin Morfin 19-norandrosteron 19-norandrosteron Fenilpropanolamin Pseudoefedrin Salbutamol (ca stimulent) (ca agent anabolic) T/Epit > 12 micrograme/ml > 15 nanograme /ml > 5 micrograme/ml > 10 micrograme/ml > 200 nanograme/ml > 10 micrograme/ml > 1 microgram/ml >2 nanograme/ml la brbai > 5 nanograme/ml la femei > 25 micrograme/ml > 25 micrograme/ml > 100 nanograme/ml > 1000 nanograme/ml >6
I. Clasele de substane dopante A. Stimulente Din aceast grup fac parte urmtoarele substane medicamentoase care, din punct de vedere farmacologic, pot fi clasificate n: A.1. Stimulente psiho-motorii; A.2. Amine simpatomimetice; A.3. Stimulente ale sistemului nervos central. A.1. Stimulente psiho-motorii (amfetamine, cocaina, etilamfetamine, metilfenidat, fenmetrazina, fentermin, cofeina).
Efectele lor farmacologice constau n diminuarea senzaiei de oboseal cu instalarea unei sri de euforie, manifestat prin intensificarea activitii senzative i psihomotorii; dup faza de excitaie nervoas central, n care funciile discriminatorii sunt perturbate, aceste droguri induc o faz depresiv, de decompensare, cu simptome accentuate de oboseal, expresie a epuizrii neurohormonale i enzimatice. Epuizarea nervoas, cu suprasolicitare cardiovascular i suprarenal pot produce uneori accidente. n cazul cofeinei o prob va fi considerat pozitiv cnd concentraia n urin va depi 12 micrograme/ml.
130
A.2. Amine simpatomimetice (efedrina, metilefedrina, izoprenalina, fenilefrina, nafazolina).
Acestea sunt substane care acioneaz asupra receptorilor adrenergici de la nivelul muchilor netezi, muchiul cardiac i glandelor secretorii, reproducnd efectele stimulrii fibrelor simpatice corespunztoare. Asupra SNC au aciune stimulatoare. Produc creterea tensiunii arteriale, stimuleaz frecvena i fora contraciei cardiace, iar n anumite condiii, pot avea efect bradicardizant. Simpatomimeticele stimuleaz muchiul striat, scznd oboseala, ameliornd conducerea la nivelul jonciunii neuro-musculare, produc hiperglicemie i diminueaz creatinuria. Aceast grup de medicamente, folosite fr indicaii medicale, pot provoca diferite tulburri cardiovasculare neurologice, tulburri de vedere, digestive i urinare. Dei aceste substane (de exemplu efedrina) sunt utilizate n tratamentul astmei i dificultilor respiratorii, ele sunt interzise. Este permis numai utilizarea a beta-2-antagoniste sub forma de aerosoli (salbutamol, bitolterol, rimiterol .a.). A.3. Stimulente ale SNC (amifenazol, bemegrid, niketamid, stricnin, etamivan, picrotoxin). Stimulentele bulbare, numite i analeptice bulbare sau cardiorespiratorii, acioneaz predominant asupra centrilor bulbari, mai evident cnd acetia sunt deprimai, producnd creterea amplitudinii micrilor respiratorii, tahicardie, hipertensiune arterial. Nu acioneaz direct asupra miocardului, coronarelor i vaselor sanguine. Stimulentele medulare produc hiperreflectivitate medular. Iniial excitani slabi, produc efecte motorii intense, iar ulterior, convulsii tetanice. Acioneaz prin blocarea transmiterii influxului inhibitor de la celula Renshaw la motoneuroni. Stimulentele medulare produc creterea tonusului centrilor bulbari (respirator, vasomotor), stimuleaz cortextul senzitiv. Ca efecte secundare enumerm strile de hiperexcitabilitate, anxietate, fenomenele tonice prin excitarea nucleilor subcorticali. B. Narcotice (morfina, heroina, metadona, codeina, hidrocodona, petidina). Sunt compui naturali semisintetici sau sintetici care acioneaz la nivelul talamusului i scoarei cerebrale, diminu sau suprim senzaia de durere, dar influeneaz i fenomenele psihice care o nsoesc, ceea ce
131
duce la apariia euforiei i la nevoia de a repeta administrarea, consecutiv instalndu-se tolerana i apoi toxicomania. Efectele adverse ale acestei grupe de medicamente sunt importante mai ales la nivelul SNC (tremurturi, insomnie, delir, convulsii) i la nivelul tubului digestiv (greuri, vrsturi, constipaie). Supradozajul duce la intoxicaie acut manifestat prin deprimarea respiraiei, cianoza extremitilor, mioz accentuat, transpiraii reci tegumentare, hipotonie muscular, inhibiie intens a SNC, pn la com. C. Ageni anabolici (metandionona, metiltestosteron, nandro-lon, stanozolol). Sunt compui cu structur chimic puin diferit de cea a hormonilor androgeni naturali, reprezentai printr-o gam de derivai sintetici ai testosteronului i nortestosteronului, avnd aciuni predominant anabolizante, important virilizante i slab psihotone. Aceste substane sunt folosite de sportivi n scopul creterii masei musculare i prin aceasta, a performanei.
Latura folositoare a medicaiei cu steroizi anabolizani este cunoscut datorit efectelor specifice i nespecifice manifestate n tratarea osteoporozei, distrofiei musculare, n anemia hiporegenerativ cu scopul de a mri nivelul hemoglobinei sanguine.
132
Efectele benefice ale medicaiei anabolizante sunt, deci, consecina aciunii de stimulare a biosintezei proteinelor i mbuntirii bilanului mineral (n special al potasiului, calciului, fosforului, magneziului i fierului). Nu trebuie neglijate efectele adverse ale acestei grupe de medicamente, care, n urma utilizrii n doze crescute i timp ndelungat, produc reacii de hipersensibilizare hepatic, modificri fiziologice, afecteaz sub diferite forme sistemul nervos central, modific meta-bolismul lipidic i al hidrailor de carbon. La brbai administrarea ndelungat a steroizilor anabolizani are efecte inhibitoare asupra secreiei de hormoni gonadotropi hipofizari, iar la femei produc efecte virilizante evidente. La sportivi, concomitent cu creterea masei musculare i a capacitii de lucru a muchilor are loc o rmnere n urm a tendoanelor i ligamentelor, ceea ce conduce la creterea frecvenei traumatismelor. D. Diuretice (acetazolamid, benzthiazid, bumetanid, canrenone, dichlorfenamida, furosemid, spironolacton, trianterene .a.). Diureticele pot fi clasificate dup diferite criterii: structura chimic, tipuri de diurez, aplicaii terapeutice. Dup mecanismul de aciune, substanele care pot influena debitul urinar se clasific n urmtoarele grupe: I. Substane care cresc filtrarea sodiului, clorului sau ambilor ioni; II. Substane care mpiedic reabsorbia sodiului, clorului sau ambilor ioni. Substanele diuretice sunt utilizate de ctre sportivi, uneori abuziv, din dou considerente principale: obinerea unei reduceri rapide de greutate n sporturile unde categoriile de greutate sunt bine stabilite, reducerea concentraiei de substane medicamentoase n urin prin producerea unei excreii mai rapide a urinei n scopul reducerii posibilitii de detectare a substanelor dopante. Nu exist nici o justificare medical pentru scderea rapid n greutate la sportivi. Folosirea diureticelor, prin efectele secundare serioase pe care le produc, reprezint un mare factor de risc pentru sntatea sportivilor. Pe de alt parte, este evident c aceste tentative contravin eticii sportive, raiune pentru care Comisia Medical a CIO a decis includerea diureticelor pe lista substanelor insterzise. E. Hormoni peptidici i analogi Gonadotropina corionic (HCG gonadotropina corionic uman). Administrarea HCG i a compuilor nrudii este considerat
133
echivalent cu utilizarea testosteronului exogen, deoarece conduce la stimularea secreiei de hormoni androgeni naturali. Corticotrophine (ACTH) administrarea sa este apreciat echivalent cu administrarea oral, intramuscular sau intravenoas a corticosteroizilor. Hormonul de cretere (HGH somatotrophine) datorit efectelor secundare diverse cum sunt reaciile alergice, efectele diabetice i acromegalia, n cazul utilizrii unor doze crescute, utilizarea HGH de ctre sportivi este considerat duntoare i interzis. De asemenea, este interzis utilizarea de ctre sportivi a tuturor factorilor de eliberare a hormonilor sus menionai. Eritropoietina (EPO) este un hormon glicoproteinic produs de rinichiul uman, hormon ce regleaz prin retro-aciune viteza de sintez a erythrocitelor. II. Metode de dopaj A. Dopaj sanguin Transfuzia sanguin este administrarea pe cale intravenoas a globulelor roii sau a compuilor sanguini coninnd globule roii. Aceste produse pot fi obinute pornind de la sngele extras de la acelai individ (auto-transfuzie) sau de la indivizi diferii (hetero-transfuzie). Se indic n pierderile importante de snge sau n anemii grave. Dopajul sanguin este administrarea de snge sau de produi asemntori coninnd globule roii unui atlet din alte raiuni dect ale unui tratament medical. Aceste practici contravin att eticii sportive ct i deontologiei medicale. Riscurile acestor practici sunt: - reacii alergice (erupii cutanate, febr etc.); - reacii hemolitice acute cu dereglri renale n cazul utilizrii unui tip de snge incorect; - reacii trzii ale transfuziei ca febr sau icter; - transmiterea maladiilor infecioase (hepatite virale, SIDA); - dereglarea sistemului circulator i un oc metabolic. n consecin, practicarea dopajului sanguin n sport este interzis de ctre Comisia Medical a CIO. Comisia Medical CIO interzice folosirea eritropoietinei ca metod de dopaj. B. Manipulri farmacologice, chimice i fizice Comisia medical a CIO interzice utilizarea de substane i metode care modific integritatea i validitatea eantioanelor de urin utilizate n
134
controalele doping. Printre metodele prohibite, citm substituirea sau alterarea urinelor i inhibiia excreiei renale, prin probenecid i compui nrudii. III. Clase de substane supuse unor restricii A. Alcoolul Alcoolul nu este interzis. Cu toate acestea, la cererea unor Federaii Internaionale (tir, scrim) este controlat nivelul alcoolului n respiraie sau snge. B. Marihuana De asemenea, nu este interzis, dar poate fi controlat la cererea unor Federaii Internaionale. C. Anestezice locale Injectarea anestezicelor locale este autorizat n urmtoarele condiii: a) utilizarea procainei, xilocainei etc., dar nu a cocainei; b) nu se practic dect injecii locale sau intra-musculare; c) numai cnd aplicarea este justificat medical. Detaliile incluznd diagnosticul, doza i metoda de administrare trebuiesc imediat aduse n scris la cunotina Comisiei Medicale CIO. D. Glucocorticosteroizi Corticosteroizii naturali sau de sintez sunt utilizai ca substane anti-inflamatori, care alin durerea. Utilizarea lor influeneaz concentraiile de corticosteroizi circulani n corp. n 1975 Comisia Medical CIO a fost nevoit s restrng utilizarea lor n timpul Jocurilor Olimpice. Este evident c cortico-steroizii sunt utilizai n scop neterapeutic n unele sporturi, pe cale oral, intramuscular sau pe cale intravenoas. Utilizarea corticosteroizilor este interzis, cu excepia utilizrilor n aplicaii locale (cale articular, oftalmologic sau dermatologic), n inhalaii (astm, rinite alergice) precum i n injecii locale sau intraarticulare. Toi medicii de echip care doresc s administreze corticosteroizi unui concurent pe cale intra-articular sau n aplicaie local, au obligaia s informeze n scris Comisia Medical CIO. E. Beta-blocante (acebutalol, alprenolol, atenolol, metoprolol, oxprenolol, propranolol, pindolol, timolol). Substanele beta-adrenolitice blocheaz reversibil i neselectiv cele dou categorii de receptori beta-adrenergici: beta1 de la nivelul inimii i beta2 de la nivelul vaselor i bronhiilor. Cteva blocheaz cu
135
oarecare selectivitate receptorii beta1, dozele terapeutice avnd predominant efecte asupra inimii. Aceste blocante beta1 selective sunt acebutalolul, atenololul i metoprololul. n afara efectului antihipertensiv, beta-blocantele au proprieti antiaginoase i antiaritmice, datorate protejrii inimii de influenele beta-adrenergice stimulatoare. n timpul exerciiului fizic, beta-blocantele cresc diferena de oxigen arteriovenoas (cu 12%) i scad saturarea de oxigen a sngelui din arterele pulmonare. n doz mare, beta-blocantele dau cefalee, insomnie, greuri, astenie, diaree, tulburri vizuale, halucinaii, erupii cutanate. Datorit continurii abuzului de beta-blocante, n cteva sporturi unde efortul fizic este mai puin important, Comisia Medical CIO i-a rezervat dreptul s testeze aceste sporturi (n special tirul). Nu fac parte disciplinele sportive care reclam rezisten, necesitnd perioade prelungite ale debitului cardiac crescut i depozite mari de substrate metabolice, n care betablocantele diminueaz sensibil capacitatea de performan.
136
BIBLIOGRAFIE
Ambu I.; Ionescu M. Angelescu E.; Cernea F. Demeter A. Drgan I. Drgan I. Dumitru I.F. Dumitru I.F. Ionescu Mircea Iordchescu D.; Dumitru I.F. Karlsen P. Lehninger A.L. Manta I. Nu G.H.; Buneag C. Padieu P.
Manual de biochimie medico-sanitar, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti,1970. Probleme teoretice de chimie organic, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1969. Fiziologia i biochimia educaiei fizice i sportului, Editura Sportturism, 1979. Medicina sportiv, Editura Sport-turism, 1982. Practica medicinei sportive, Editura Medical, Bucureti, 1989. Hormonii corpului omenesc, organismelor animale i vegetale, Bucureti, 1989. Biochimie, Editura Didactic i Pedagogic, 1980. Biochimia vegetal, Editura Ceres, Bucureti, 1978. Biochimie practic, vol. I i II, Bucureti 1982. Manual de biochimie, Editura Medical, 1976. Biochimie, Editura Tehnic, Bucureti, 1987. Biochimie medical, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1985. Investigaii biochimice, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1977. Biosynthse des protines musculaires et section du nerf moteur. Bull. Soc. Chim. Biol., 1959, vol. XLI.
137
Muscular Contraction, in Comparative Biochemistry. A Comprehensive Treatise. Ed. Marcel Florkin and Howard S. Mason, vol. II, Academic Press Inc., New York, 1961. Soru E. Biochimie medical, vol. I i II, Editura Medical, 1959. Vjial Graziela; Cercetri privind biotransformarea i Lamor Mia; excreia unor compui anabolizani de Potzaichin G. provenien indigen, Bucureti, 1986, 1987 i 1988. Vjial Graziela; Influena susintoarelor de efort asupra Ionescu C.; Lamor Mia; organismului sportivului, Consftuirea de Potzaichin G. medicin sportiv, 1988. Vjial Graziela; DopingAntidoping, Editura Fest, Bucureti, Lamor Mia 2002 Weber H.H. Chemical Reaction during Contraction and Relaxation, in Molecular Biology, Processes of Nerve Conduction and Muscle Contraction. Ed. D.Nachnansen Academic Press Inc., New York, 1960. Rolul actinei din esutul muscular i cteva Zaslisvili M.M. probleme ale teoriei contraciei musculare. Biochima, 1959, nr. 4, p. 612. Metode curente pentru analize de * * * laborator clinic, Editura Medical, 1982.
Perry S.V.
138
CUPRINS
I. NOIUNI INTRODUCTIVE DE CHIMIE I BIOCHIMIE I.1. Structura atomului . I.2. Noiunea de structur chimic ... I.3. Legturi chimice n compuii organici .. I.4. Gruprile funcionale . I.5. Izomeria compuilor organici I.6. Noiuni introductive de biochimie . II. PROTIDE II.1. Clasificarea protidelor .. II.2. Aminoacizi (monoprotide) ....... II.3. Peptide-Polipeptide ... II.4. Proteine III. LIPIDE III.1. Lipide simple .. III.2. Lipide complexe . III.3. Metabolismul lipidelor III.4. Rolul lipidelor n organism . IV. GLUCIDE (ZAHARIDE) IV.1. Monoglucide (OZE) ... IV.2. Metabolismul glucidelor . V. METABOLISMUL ENERGETIC. CICLUL LUI KREBS PROCESUL DE FOSFORILARE OXIDATIV V.1. Ciclul lui Krebs V.2. Oxidri celulare, fosforilarea oxidativ i acumularea de energie ..
5 12 14 17 22 28
31 32 38 40
47 49 49 55
57 66
75 78 139
V.3. Fosforilarea oxidativ .. V.4. Metabolismul energetic. Corelaii ntre tipurile de efort fizic i tipul metabolic asociat . VI. METABOLISMUL MINERAL. METABOLISMUL APEI I AL IONILOR MINERALI VI.1. Metabolismul apei .. VI.2. Echilibrul acido-bazic (EAB) . VI.3. Metabolismul ionilor minerali VI.4. Structura i importana unor substane azotate neproteice n funcionalitatea organismului supus efortului .. VII. BIOCHIMIA CONTRACIEI MUSCULARE VII.1. Structura funcional a muchiului striat ... VII.2. Compoziia chimic a muchiului striat VII.3. Biochimismul contraciei musculare . VII.4. Influena efortului asupra musculaturii striate ... VIII. ENZIME I VITAMINE VIII.1. Enzime . VIII.2. Vitamine ... IX. HORMONII I SUSINTOARE DE EFORT IX.1. Hormonii . IX.2. Susintoare de efort ... X. LISTA CLASELOR DE SUBSTANE I METODE INTERZISE X.1. Clasele de substane interzise ... X.2. Metodele interzise X.3. Clasele de substane cu restricii .. X.4. Lista substanelor interzise pentru care laboratoarele trebuie s raporteze rezultatele cantitative ... BIBLIOGRAFIE ..
81 84
89 91 96 100
105 106 109 112
114 117
120 124
126 128 129 130 137
140

Vajaiala Biochimia Efortului

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Vajaiala Biochimia Efortului

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

GRAZIELA ELENA VJIAL

BIOCHIMIA EFORTULUI (ediie revzut i adugit)

Universitatea SPIRU HARET

Editura Fundaiei Romnia de Mine, 2002 ISBN: 973-582-559-7

Universitatea SPIRU HARET

UNIVERSITATEA SPIRU HARET

EDITURA FUNDAIEI ROMNIA DE MINE Bucureti, 2002

I. NOIUNI INTRODUCTIVE DE CHIMIE I BIOCHIMIE

- regiunea exterioar, numit nveliul electronic al atomului (fig. 1).

Un orbital ocupat cu doi electroni cuplai se reprezint convenional astfel:

Un orbital n care se gsete un singur electron ( necuplat) se indic astfel:

STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL STRATUL

Fig. 4 Graficul variaiei energiei Tabelul 1 Observaii

Numrul electronilor pe straturi K L M 1 2 2 2 12 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 2 3 4 5 6 7 8 8 8 8 8 8 8 8 8 1 2 3 4 5 6 7 8

Strile electronice ale atomului de carbon sunt reprezentate n fig. 6.

Derivaii alcoolilor cu acizii organici i cu acidul fosforic poart numele de esteri.

Eterii iau natere ca produs al hidrolizei ntre dou molecule de alcool

Acizi i sruri importante

- cis-trans - sin-anti - erito-treo (de configuraie) - cu C asimetric - fr C asimetric

- alenic - spiranic - atropic

Universitatea SPIRU HARET

COOH COOH acidul izocitric CH3 CH CH3 OH alcool n-propilic (2 propanol)

OH alcool izopropilic (1 propanol)

Fig. 7. Acidul ciclobutan-dicarboxilic 24

n fig. nr. 10 snt redate aceste ci diferite de catabolism ale glucidelor.

Fig. 10 Cile de catabolism ale glucidelor

O reacie important este dezaminarea aminoacizilor n reacie cu acidul azotos:

Protein + H2O aminoacizi

III.1.2. Trigliceride Aa cum am menionat sunt triesteri ai glicerinei cu acizii grai.

S-ar putea ca activarea s aib loc cu formarea intermediar a adenil acetatului

IV. GLUCIDE (ZAHARIDE)

Pe alt cale, prin carboxilare, acidul piruvic se transform n acid oxalilacetic.

V. METABOLISMUL ENERGETIC. CICLUL LUI KREBS. PROCESUL DE FOSFORILARE OXIDATIV

Fig. 12 Ciclul acizilor tricarboxilici sau ciclul Krebs

ox Fe 3+ . Funcia citocromilor este de purttori de electroni. red.

DH2 + A D + AH2 ADP + P ATP DH2 + A + ADP + P D + AH2 + ATP

NADH + H+ + 1/2 O2 NAD+ + H2O 3ADP + 3 P 3ATP + 3H2O

Metabolism anaerob alactacid + aerob (mixt) Metabolism aerob

ATP, FC, glucide (Krebs)

glucide (ciclul Krebs) lipide

VI. METABOLISMUL MINERAL. METABOLISMUL APEI I AL IONILOR MINERALI

Fig. 13. Ureogeneza

VII. BIOCHIMIA CONTRACIEI MUSCULARE

Fracie insolubil (miofibrilele)

ACTINA MIOZINA TROPOMIOZINA

Fig. 14 Sursele de energie utilizate n efortul sportiv

VIII. ENZIME I VITAMINE

IX. HORMONII I SUSINTOARE DE EFORT

Fig. 15 Mecanismul de aciune al glandelor endocrine

Fig. 16 Mecanismul de aciune al androgenilor la nivelul celulelor int 123

X. LISTA CLASELOR DE SUBSTANE I METODE INTERZISE

A.2. Amine simpatomimetice (efedrina, metilefedrina, izoprenalina, fenilefrina, nafazolina).

Universitatea SPIRU HARET

105 106 109 112

126 128 129 130 137

S-ar putea să vă placă și