Monografie Medic

Prefa
Monografia se adreseaz studenilor n medicin,

rezidenilor i specialitilor n medicin de laborator.
Progresul microbiologiei se explic prin noutile
oferite de cercetarea interdisciplinar n biologie,
biochimie, fizic, genetic, biologie celular i
molecular. La nivelul studiilor universitare medicale se
observ tendina de integrare a dou discipline conexe:
Microbiologia i Imunologia. Prima prezint principalii
ageni infecioi care agreseaz macroorganismul iar a
doua disciplin prezint mecanismele de rspuns
imunitar, normal i patologic. Se studiaz permanent
interrelaia microorganism-macroorganism, cu aspectele
clinico-patogenetice i de diagnostic de laborator direct
i indirect, clasic i modern.
Autoarea
ABREVIERI
aa
- aminoiacid
AB
- antibiotic
AC
- anticorp
ADCC - citotoxicitate anticorpo-dependent
AG
- antigen
AMC
- anticorp monoclonal
BF
- bacteriofag
C
- gen imunoglobulinic ce codific poriunea constant
C`
- sistem complement
CB
- corpuscul bazal
CD
- cluster de difereniere (antigen de difereniere)
CIC
- complexe imune circulante
CIE
- complex imun elementar
CMH
- complex major de histocompatibilitate
CPA
- celul prezentatoare de antigen
CS
- component secretor (al IgAs)
Cx
- fraciune activat a sistemului complement
D
- gen imunoglobulinic de diversitate
Dg
- diagnostic
ELISA - reacie imunoenzimatic
Fab
- fragment de legare al antigenului
Fc
- fragment imunoglobulinic cristalizabil
GM
- greutate molecular
GM
- greutate molecular
H
- lan greu imunoglobulinic
HT
- hipersensibilitate
HTT
- hipersensibilitate de tip tardiv
HTT
- hipersensibilitate de tip tardiv
i.d.r.
- intradermic
i.m.
- intramuscular
i.v.
- intravenos
IDR
- intradermoreacie
IF
- imunoflorescena
If
- limit floculant
Ig
- imunoglobulin
IgAs
- imunoglobulin A secretoare
IL
- interleukin
Im
- intramuscular
IMC
- imunitate mediat celular
INF
- interferon
IOC
- indice opsono-citofagic
IU
- imunitate umoral
j
- gen de legtur imunoglobulinic
J
- pies de legtur a IgAs
K
- celul killer
K
- kilodaltoni
L
- lan imunoglobulinic uor
LES
- lupus eritematos sistemic
Lf TC
- limfocit T citotoxic
Lf TDH - limfocit de hipersensibilitate tardiv
Lf TH
- limfocit T helpet
Lf TS
- limfocit T supresor
Lf
- limfocit
LP
- lipoprotein
LPZ
- lipopolizaharid
MAF
- factor de activare al macrofagului
MC
- membran citoplasmatic
MF
- macrofag
mf
- metabolit focal
MIF
- factor de inhibare al migrrii macrofagului
Mo
- monocit
MPO
- mieloperoxidaza
NK
- celul uciga natral (natural killer)
PC
- perete celular
PCR
- reacia n lan a polimerazei
PG
- peptidoglican
PMN
- polimorfonucleare
PZ
- polizaharid
RA
- risc absolut
RFC
- reacie cu fixare de complement
RIA
- reacie radioimunologic
RR
- risc relativ
SFM
- sistem fagocitar mononuclear
SHM
- untul hexozo-monofosfat
SIM
- sistem imun al mucoaselor
SIS
- sistem imun sistemic
TCR
- receptorul pt. antigen al limfocitului T
TNF
- factor necrozant tumoral
TTSA - antigen tumoral de transplantare
UA
- unitate antitoxic
V
- gen de variabilitate (imunoglobulinic)
CUPRINS
Partea I MICROBIOLOGIE GENERAL
CAPITOLUL 1
LUMEA MICROBIAN.............................................................................................19
CAPITOLUL 2
MORFOLOGIA BACTERIAN................................................................................21
Celula bacterian - celul procariot............................................................................23
Formaiuni celulare obligatorii....................................................................................23
Formaiuni celulare facultative....................................................................................23
Mecanismul coloraiilor Gram i Ziehl - Nielsen.........................................................37
CAPITOLUL 3
METABOLISMUL BACTERIAN..............................................................................38
Particulariti ale metabolismului bacterian:................................................................38
Biosinteza materialului celular....................................................................................45
Creterea i multiplicarea bacteriilor...........................................................................46
Culturi continue..........................................................................................................49
CAPITOLUL 4
GENETICA BACTERIAN.......................................................................................50
Elemente genetice la bacterii.......................................................................................52
Repliconi....................................................................................................................52
Elemente genetice transpozabile.................................................................................54
Mutaia.......................................................................................................................55
Transferul intercelular de material genetic...................................................................57
Reglarea genetic a metabolismului bacterian.............................................................63
Sisteme de reglare posttranscripional a operonilor....................................................64
Tehnologia ADN recombinant....................................................................................67
CAPITOLUL 5
CHIMIOTERAPIE ANTIBACTERIAN.................................................................69
Noiunea de spectru de aciune....................................................................................70
Familii de chimioterapice...........................................................................................70
Mecanisme moleculare de aciune ale antibiotcelor.....................................................73
Mecanismele biochimice de dobndire a rezistenei la antibiotice................................78
Reguli de administrare ale chimioterapicelor antibacteriene.........................................79
Principalele reacii adverse ale chimioterapicelor........................................................80
CAPITOLUL 6
INFECIE I IMUNITATE........................................................................................81
Relaii ecologice ale microorganismelor......................................................................81
Infecia.......................................................................................................................85
Patogenitate bacterian...............................................................................................88
Ereditate cromozomial i extracromozomial n determinismul factorilor de
patogenitate bacterieni................................................................................................94
Partea a II-a MICROBIOLOGIE SPECIAL

CAPITOLUL 7
GENUL STAPHYLOCOCUS.....................................................................................99
Caractere generale, reprezentani................................................................................99
Factori de patogenitate..............................................................................................100
Infecii stafilococice..................................................................................................102
Diagnostic de laborator.............................................................................................104
Profilaxia..................................................................................................................106
CAPITOLUL 8
GENUL STREPTOCOCCUS....................................................................................107
Caractere generale, reprezentani...............................................................................107
Boli streptococice - Streptococcus pyogenes.............................................................109
Boli poststreptococice - Streptococcus pyogenes.......................................................109
Diagnostic de laborator Streptococcus pyogenes.....................................................110
Streptococi hemolitici, grup B (Streptococcus agalactiae).......................................111
Diagnosticul de laborator (particulariti)..................................................................111
Streptococi de grup D...............................................................................................112
Streptococii de grup C, G..........................................................................................112
Streptococi hemolitici..........................................................................................112
Grupul Viridans, infecii produse...............................................................................112
Streptococcus Pneumoniae, infecii produse..............................................................113
Patogenez...............................................................................................................113
Profilaxie..................................................................................................................114
Coci gram pozitivi anaerobi, reprezentani.................................................................114
Infecii produse.........................................................................................................114
CAPITOLUL 9
GENUL NEISSERIA.................................................................................................115
Caractere generale, reprezentani, infecii produse.....................................................115
Neisseria mengitidis..................................................................................................115
Aspecte clinico-patogenetice.....................................................................................115
Neisseria gonorheae..................................................................................................117
Patogenez...............................................................................................................117
CAPITOLUL 10.........................................................................................................119
GENUL HAEMOPHYLUS.......................................................................................119
Haemophylus influenzae...........................................................................................119
Aspecte clinice i patogenetice..................................................................................119
Haemophylus parainfluenzae....................................................................................121
Haemophylus aegyptius............................................................................................122
Haemophylus ducreyi...............................................................................................122
Tratament, msuri profilactice...................................................................................122
CAPITOLUL 11
GENUL BORDETELLA...........................................................................................123
Diagnostic de laborator direct...................................................................................124
Profilaxia..................................................................................................................125
CAPITOLUL 12
GENUL BRUCELLA.................................................................................................126
Patogenez, aspecte clinice.......................................................................................126
Profilaxia..................................................................................................................128
CAPITOLUL 13
GENUL RICKETTSIA..............................................................................................129
Profilaxia..................................................................................................................132
Diagnosticul de laborator n febra Q..........................................................................133
CAPITOLUL 14
GENUL CHLAMYDIA.............................................................................................134
Infecii produse de ctre Chlamydia trachomatis.......................................................135
Infecii produse de ctre Chlamydia psittaci..............................................................136
Infecii produse de ctre Chlamydia pneumoniae.......................................................136
Profilaxie..................................................................................................................138
CAPITOLUL 15
GENUL MYCOPLASMA.........................................................................................139
Profilaxie i control..................................................................................................142
CAPITOLUL 16.........................................................................................................143
FAMILIA ENTEROBACTERIACEE......................................................................143
CAPITOLUL 17.........................................................................................................145
GENUL SALMONELLA..........................................................................................145
Profilaxia..................................................................................................................149
CAPITOLUL 18
GENUL SHIGELLA..................................................................................................150
Profilaxia..................................................................................................................152
CAPITOLUL 19
GENUL ESCHERICHIA. ESCHERICHIA COLI..................................................153
Profilaxia..................................................................................................................156
CAPITOLUL 20
GENUL KLEBSIELLA............................................................................................157
Profilaxia..................................................................................................................158
CAPITOLUL 21
GENUL PROTEUS....................................................................................................159
Aspecte clinico - patogenetice...................................................................................159
CAPITOLUL 22
GENUL PSEUDOMONAS........................................................................................161
Pseudomonas aeruginosa. Aspecte clinico-patogenetice.............................................162
Profilaxia..................................................................................................................166
CAPITOLUL 23
GENUL VIBRIO........................................................................................................167
Vibrio Cholerae........................................................................................................167
Profilaxia..................................................................................................................170
CAPITOLUL 24.........................................................................................................171
GENUL CAMPYLOBACTER..................................................................................171
Helicobacter pylori...................................................................................................172
Tratament.................................................................................................................173
CAPITOLUL 25
GENUL CORYNEBACTERIUM.............................................................................174
Chorynebacterium diphteriae....................................................................................174
Aspecte clinice i patogenice....................................................................................174
Profilaxie..................................................................................................................178
CAPITOLUL 26
GENUL LYSTERIA...................................................................................................179
Aspecte clinoco-patogenetice....................................................................................179
10
Profilaxie..................................................................................................................181
CAPITOLUL 27
GENUL BACILLUS..................................................................................................182
Diagnostic de laborator n antrax...............................................................................183
Profilaxie..................................................................................................................185
CAPITOLUL 28
ANAEROBI SPORULAI
GENUL CLOSTRIDIUM..........................................................................................187
Clostridium perfringens i germenii gangrenei gazoase.............................................187
Diagnostic de laborator - Clostridium perfringens i germenii gangrenei gazoase.......189
Profilaxia..................................................................................................................191
Clostridium tetani.....................................................................................................192
Aspecte clinico - patogenetice...................................................................................192
Profilaxia..................................................................................................................193
Clostridium botulinum..............................................................................................193
Aspecte clinico-patogenice.......................................................................................193
Profilaxia..................................................................................................................195
Clostridium difficile..................................................................................................195
Diagnosticul de laborator..........................................................................................196
CAPITOLUL 29
ANAEROBI NESPORULAI...................................................................................197
Bacili gram negativi..................................................................................................198
Bacili gram + nesporulai..........................................................................................199
Coci gram + anaerobi...............................................................................................199
Coci gram ..............................................................................................................200
CAPITOLUL 30.........................................................................................................201
GENUL MYCOBACTERIUM..................................................................................201
Infecia tuberculoas - aspecte patogenice i clinice..................................................202
Profilaxia..................................................................................................................205
CAPITOLUL 31.........................................................................................................206
GENUL TREPONEMA.............................................................................................206
Reprezentani...........................................................................................................206
Treponema Pallidum.................................................................................................206
Terapia i controlul afeciunii....................................................................................209
Treponema pertenue.................................................................................................210
Treponema carateum................................................................................................210
11
CAPITOLUL 32
GENUL LEPTOSPIRA..............................................................................................211
Profilaxie..................................................................................................................214
CAPITOLUL 33
GENUL BORRELIA.................................................................................................215
Patogeneza infeciilor la om......................................................................................215
Diagnostic de laborator n febra recurent.................................................................216
Profilaxia..................................................................................................................217
Borrelia burgdorferi..................................................................................................217
CAPITOLUL 34
ALTE ETIOLOGII BACTERIENE.........................................................................218
GENUL LEGIONELLA............................................................................................218
Profilaxie, control.....................................................................................................220
CALYMMATO BACTERIUM.................................................................................220
Caractere generale....................................................................................................220
Profilaxia..................................................................................................................221
ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIAE................................................................222
Caractere generale....................................................................................................222
Tratament.................................................................................................................222
GENUL BARTONELLA...........................................................................................223
Profilaxia..................................................................................................................224
CAPITOLUL 35
INFECII NOZOCOMIALE ...................................................................................223
Definiie, noiuni generale.........................................................................................223
Epidemiologia infeciilor nozocomiale......................................................................223
Forme clinice de infecii nozocomiale.....................................................................227
Etiologia infeciilor nozocomiale .............................................................................228
Diagnosticul infeciilor nozocomiale.........................................................................229
Profilaxia infeciilor nozocomiale.............................................................................229
Partea a III-a MICROBIOLOGIE STOMATOLOGIC
CAPITOLUL 36
PLACA BACTERIAN, CARIA DENTAR .........................................................237
Modul de populare a cavitii bucale cu microorganisme...........................................237
Placa dentar............................................................................................................242
Particularitile ecosistemului bucal........................................................................244
12
Contribuia florei microbiene la producerea cariei dentare ........................................246

Dezinfecia cavitii bucale.......................................................................................253
CAPITOLUL 37
BOALA PARODONTAL .......................................................................................255
Etiologia bolii parodontale........................................................................................255
Epidemiologia bolii parodontale...............................................................................255
Factorii favorizani ai bolii parodontale...................................................................256
Aspecte clinice ale bolii parodontale ........................................................................256
Forme clinice ale bolii..............................................................................................256
Gingivita simpl.......................................................................................................257
Gingivita acut necrozant........................................................................................258
Parodontite..............................................................................................................258
Factorii de patogenitate ai bacteriilor implicate n boala parodontal..........................260
Imunitatea n boala parodontal................................................................................263
Tratamentul n boala parodontal............................................................................264
Profilaxia .................................................................................................................265
CAPITOLUL 38
UTILIZAREA PROFILACTIC I CURATIV A ANTIBIOTICELOR N
STOMATOLOGIE.....................................................................................................266
Prevenirea infeciilor endodontice.............................................................................266
Antibioticoterapia curativ de utilizare local............................................................268
Antibioticoterapia de utilizare pe cale general.......................................................268
Utilizarea antibioticelor n scop profilactic................................................................268
Prevenirea cariilor dentare cu antibiotice...................................................................269
Partea a IV-a IMUNOLOGIE

INTRODUCERE........................................................................................................273
CAPITOLUL 39
REZISTENA NATURAL.....................................................................................274
Factorii rezistenei naturale.......................................................................................274
Sistemul fagocitar mononuclear i fagocitoza............................................................277
Inflamaia.................................................................................................................283
CAPITOLUL 40
SISTEM IMUN. ORGANE LIMFOIDE..................................................................285
Organele limfoide.....................................................................................................286
Celule limfoide.........................................................................................................286
CAPITOLUL 41
ANTIGENE I IMUNOGENE.................................................................................295
Factori care condiioneaz imunogenicitatea.............................................................295
Modaliti de clasificare ale antigenelor....................................................................302
Factori care influeneaz specificitatea antigenic.....................................................304
Complexul imun elementar.......................................................................................305
CAPITOLUL 42
IMUNOGLOBULINE...............................................................................................307
Structur i funcii....................................................................................................307
Heterogenitatea imunoglobulinelor...........................................................................314
Sistemul imun al mucoaselor ...................................................................................324
13
Controlul genetic al sintezei imunoglobulinelor.........................................................326

Anticorpii monoclonali.............................................................................................331
CAPITOLUL 43
SISTEMUL COMPLEMENT...................................................................................334
Activarea sistemului complement pe cale clasic.......................................................335
Calea alternativ (properdinic)................................................................................337
Funcii biologice ale componentelor sistemului C....................................................339
CAPITOLUL 44
BAZELE GENETICE ALE RSPUNSULUI IMUN..............................................341
Organizarea genetic a CMH....................................................................................341
Antigenele HLA.......................................................................................................344
Relaia: antigene HLA - predispoziie la boal...........................................................348
CAPITOLUL 45
ROLUL LIMFOCITELOR N RSPUNSUL IMUN.............................................352
Rolul limfocitelor B n rspunsul imun......................................................................352
Participarea limfocitului T n rspunsul imun............................................................355
CAPITOLUL 46
TIPURI DE IMUNITATE.........................................................................................357
Clasificare dup celula efectoare...............................................................................357
Clasificare dup modalitatea de ctigare a imunitii................................................357
Clasificarea dup efectul biologic al imunitii..........................................................358
CAPITOLUL 47
DIAGNOSTIC IMUNOLOGIC................................................................................359
Reacii antigen - anticorp..........................................................................................359
Teste care evideniaz imunitatea mediat celular......................................................362
CAPITOLUL 48
MEDIATORI BIOCHIMICI AI RSPUNSULUI IMUN.......................................365
Principalele citokine.................................................................................................366
Interferonii...............................................................................................................373
Factorii necrozani tumorali......................................................................................375
Ali mediatori...........................................................................................................377
CAPITOLUL 49
MODULAREA RSPUNSULUI IMUN PRIN COOPERRI CELULARE........378
Celule prezentatoare de antigen.................................................................................378
Teoria recunoaterii asociate.....................................................................................379
Modelul interaciunii a dou celule imunologice.......................................................380
Modelul interaciunii a trei celule imunologice..........................................................383
CAPITOLUL 50
MODULAREA RSPUNSULUI IMUN PRIN ANTIGEN....................................384
Mecanismele toleranei imunologice.........................................................................384
Rspunsul imun n funcie de doza de antigen..........................................................385
CAPITOLUL 51
DINAMICA RSPUNSULUI IMUN UMORAL.....................................................388
Rspunsul imun primar.............................................................................................388
Rspunsul imun secundar.........................................................................................389
CAPITOLUL 52
IMUNOPROFILAXIA I SEROTERAPIA............................................................391
Vaccinuri clasice i moderne.....................................................................................391
Vaccinuri antibacteriene i antivirale.........................................................................394
14
Seroterapia...............................................................................................................397
CAPITOLUL 53
MECANISMELE CITOTOXICITII...................................................................399
Mecanisme moleculare.............................................................................................399
Clasificare funcie de celula efectoare.......................................................................401
Imunitatea antitumoral............................................................................................404
CAPITOLUL 54
IMUNITATE
ANTIBACTERIAN,
ANTIVIRAL,
ANTIMICOTIC,
ANTIPARAZITAR..................................................................................................407
Imunitatea antibacterian..........................................................................................407
Imunitatea n viroze..................................................................................................408
Imunitatea n micoze................................................................................................409
Imunitatea n parazitoze............................................................................................409
CAPITOLUL 55.........................................................................................................411
IMUNOPATOLOGIE................................................................................................411
Reacii de hipersensibilitate.......................................................................................411
Imunodeficiene........................................................................................................417
Autoimunitatea.........................................................................................................420
BIBLIOGRAFIE SELECTIV................................................................................425
15
17
CAPITOLUL 1
LUMEA MICROBIAN
Microbiologia - cuprinde totalitatea tiinelor biologice care au ca
obiect de studiu microorganismele (mikros n limba greac = mic, bios
= via).
Microorganismele fac parte din regnul Protista, cel de-al treilea regn,
alturi de cel animal i vegetal.
Microorganismele (regn Protista) sunt organisme unicelulare, iar
atunci cnd sunt pluricelulare, nu formeaz esuturi difereniate.
Regnul Protista poate fi subdivizat n:
1. Protiste superioare - constituite din celule de tip eucariot i
cuprind:
- algele
(Algologia)
- protozoarele
(Protozologia)
- mucegaiurile, fungii
(Micologia)
2. Protiste inferioare - cuprind organisme unicelulare de tip
procariot, n care sunt cuprinse:
- algele verzi-albastre
(Algologia)
- bacteriile
(Bacteriologia)
Pentru practica medical este necesar cunoaterea agenilor
etiologici ai unui proces infecios.
Disciplina va lua n considerare i agenii infecioi fr structura
celular, virusurile, viroizii i prionii, ageni infecioi care constituie
obiectul de studiu al Virusologiei.
n strns dependen cu procesul infecios s-a dezvoltat i tiina ce
investigheaz mijloacele de aprare ale macroorganismului (nespecifice i
specifice) fa de agenii infecioi - noua disciplin fiind denumit
Imunologie.
Bacteriologia
Protozologia
Imunologia:
Micologia
Algologia
Virusologia
(aprare macroorganism) (agresiune microorganism).
Taxonomie bacterian
Pentru scopuri strict medicale este suficient s se opereze cu noiunile
de familie, gen, specie.
Familia cuprinde unul sau mai multe genuri bacteriene; genul
bacterian cuprinde una sau mai multe specii.
Exemplu: Familia: Micrococaceae
Genul : Staphylococcus
Specia : Staphylococcus aureus
20
CAPITOLUL 2
MORFOLOGIA BACTERIAN
Morfologia bacterian studiaz forma, dimensiunile i aezarea
celulelor n urma diviziunii.
Se disting 3 forme fundamentale bacteriene:
forma sferic (coci);
forma cu aspect de bastona (bacili);
forma spiralat.
Fig. 1 Principalele forme bacteriene
Cocii
Au dimensiuni de un micrometru
Uneori exist i excepii de la forma sferic. Ex.:
- pneumococul: aspect de flacr de lumnare;
- gonococul i meningococul: aspect reniform.
Cocii pot avea aezri absolut caracteristice, putnd fi uor
recunoscui n frotiu (lucrri practice). Ex.:
- Stafilococii - se dispun sub forma de grmezi, care imit ciorchinii
de struguri
- Streptococii - se dispun n lanuri
- pneumococii
--|
- meningococii
--| se dispun n perechi
- gonococii
--| (in diplo- se mai numesc i diplococi)
21
Fig. 2- Plan general de organizare al celulei bacteriene (51)
Bacilii
Au form de bastona, cu dimensiuni cuprinse ntre 2-11 m
lungime i 0,2-1,1 m lime. Exist i excepii de la forma cilindric. Ex.:
- bacilul difteric - are forma de haltera, datorit corpusculilor
metacromatici
- bacilul tetanic - are form de ac cu gmlie datorit sporului
- Fusobacterium - are forma de fus
i bacilii pot avea aezri absolut caracteristice. Ex.:
- bacilul crbunos - se dispune sub forma de lanuri (streptobacili);
- bacilul tuberculos - se dispune n grmezi care imit litere majuscule
(M,Y,N,W)
- bacilul difteric - se dispune n grmezi care imit literele chinezeti
Cocobacilii
Sunt forme de trecere ntre coci i bacili, cu diametrul longitudinal
foarte apropiat ca dimensiune cu cel transversal (L:0,4-0,8 m i l: 0,2-0,4
m). Exemple: genurile Brucella, Bordetella, Yersinia.
Forma spiralat
Celula este nvrtit n spire. Exemple:
- vibrion - celul cu o singur spir (aspect de virgul - ex.:
vibrionul holeric)
- spirili - celul cu mai multe spire, cu perete celular rigid - ex.:
genul Campylobacter
- spirochete - celula cu mai multe spire, cu perete celular flexibil - ex.:
genurile Treponema, Leptospira
22
Forme pleiomorfe
n cazul n care bacteriile sunt lipsite de perete celular (Mollicutes)
sau formele L bacteriene (obinute n laborator sau sub aciunea
chimioterapicelor), morfologia celulei poate fi: filamentoas, cocoidal, n
form de par etc.
Celula bacterian - celul procariot

Planul general de organizare al celulei bacteriene
Metodele de studiu ale celulei bacteriene includ tehnici de:
microscopie optic
microscopie electronic
dezintegrare ale celulei bacteriene prin:
- centrifugri fracionate;
- majorare cu ultrasunete;
- tehnici crioscopice;
- marcare ADN cu izotopi radioactivi.
Celula procariot este alctuit din 2 categorii de structuri
subcelulare:
Obligatorii: nucleoid, citoplasma, membrana citoplasmatic,
peretele celular.
Facultative: capsula, cili, pili, endospori.
Formaiunile facultative nu sunt implicate n supravieuirea celulei.
Fig. 3 Structura general a unei celule bacteriene (64)
23
Tabelul nr.1 - Caracteristicile comparative ale celulei procariote i

eucariote:
Structura
Nucleul
Celula eucariot
Nucleu cu nucleol
Nucleu cu membran proprie
Sunt prezeni cromozomii
Citoplasma
Este compartimentat, cu
organite celulare:
mitocondrii, reticul
endoplasmatic, aparat Golgi
80 S (cu 2 subuniti 60 S i 70 S (cu 2 subuniti de 30
40 S)
S i 50 S)
Ribozomii
Perete celular Fr
Diviziunea
celular
24
Prin mitoz
Celula procariot
Are un echivalent nuclear
(nucleoidul) fr nucleol,
fr membrana proprie,
fr cromozomi propriuzii.
Este o molecul de ADN
nchis circular covalent
Este necompartimentat,
fr organite celulare
Cu perete celular cu
structur proprie:
peptidoglicanul
Prin sciziparitate
Nucleoidul
Formaiune compact cu diametrul de 0,5m)
Ocup zona central din celul (fr ribozomi)
Conine: 1 molecul ADN, cu L 1000 m, cu GM de 2,8x10 9
daltoni.
- molecula de ADN este nchis circular covalent, cu structur
hiperhelicoidal. La microscopie electronic apar anse cu incizuri.
- molecula de ARN - n curs de sintez, legat de molecula de ADN
prin enzima ARN polimeraz.
- proteine bazice (histon-like), ataate de molecula de ADN, dau
imagine de tip cromatin la celulele eucariote (formaiuni nucleozomilike: domenii ale moleculei de ADN); pot da reacii imunitare ncruciate.
Exemple: Bacil Coli - Bacil Subtillis
- enzime - topoizomeraze i giraze - menin structura hiperhelicoidal
a moleculei de ADN i mobilitatea acesteia.
Nucleoidul este ataat de membrana celular printr-un mezozom.
Prin aceast legare se asigur separarea celor 2 molecule de ADN, n urma
replicrii. Culturile cu diviziune rapid conin celule care par s aib 2-4
nuclei (e o desincronizare ntre replicarea moleculei de ADN i diviziunea
celular). Nucleoidul - confer ereditatea cromozomial.
Plasmidele
Se gsesc uneori n citoplasm. Sunt molecule de ADN nchise
circular covalent, de mrimi diferite, dar mult mai mici dect nucleoidul.
Rspund de ereditatea extracromozomial.
Citoplasma
- fin granular sau omogen
- necompartimentat (nu are plastide celulare)
- bazofilie intens (cantitate de ARN crescut n citoplasma)
Conine:
- ARN - mesager, ribozomal, transport
- incluzii - acumuleaz material de rezerva pentru sursa de carbon
- formate din polimeri de: acid hidroxi-butiric,
glicogen, amidon, volutin (corpusculi, Babe-Ernst la
bacilul difteric).
- vacuolele - substrat nutritiv - solubil sau gazos, nvelit ntr-un
strat de molecul proteic.
- ap, acizi nucleici - asigur starea de gel
25
- ribozomi - alctuii din - r-ARN (ARN ribozomal) - 2/3 i

proteine - 1/3
- sunt formaiuni sferice cu diametrul 20 m
- cu subuniti - S (small) de 30 S i - L (large) de 50 S
- reprezint sediul sintezei proteice.
- cele 2 subuniti S i L se asambleaz pe o molecul
de m-ARN, formnd polisomi.
- dup sintetizarea lanului polipeptidic, cele 2
subuniti se separ.
Membrana citoplasmatic
Conine mezozomi. Sunt invaginaii sub forma de saci sau lamele
ale MC
Metode de studiu ale membranei celulare
a). MC se evideniaz prin inerea ei n medii cu osmolaritate
crescut (coninutul celulei se elimin n mediu).
b). MC se evideniaz prin obinerea de - protoplati sau
- sferoplati
la bacteriile gram +: prin tratare cu lizozim => protoplati,
prin hidroliza total a peretelui celular
la bacteriile gram -: prin tratare cu lizozim + EDTA =>
sferoplati (cu resturi de perete celular)
MC are puncte de jonciune cu peretele celular (PC)
c). Sedimentarea MC prin centrifugare, dup obinerea MC n medii
hipertone.
d). Examinarea MC la microscopul electronic.
Structura membranei celulare
Este o unitate de membran, constituit din glicolipide, glicoproteine
Modele:
Danielli-Dawson (n sandwich):
- 1 strat lipidic ntre 2 straturi proteice
- nefolosit, nedemonstrat
Singer-Nicholson - modelul n mozaic (acceptat azi).
Modelul Singer-Nicholson:
MC este un dublu strat fosfolipidic fluid n care sunt implantate
molecule proteice, aflate n dinamism continuu.
Fig. 4. Structura membranei celulare bacteriene (80)
26
Funciile membranei celulare

Barier osmotic
Transport endocelular
Metabolic
Secretorie
Biosintetic
De int pentru diferite substane
27
Bariera osmotic
- de permeabilitate selectiv (nu permite golirea celulei).
- asigur creterea concentraiei endocelulare de nutrieni din mediul
ambiant.
Transport endocelular
- difuzie facilitat
- transport activ cu consum de energie prin permeaze.
- transport prin fosforilare la substrat (metabolism vectorial prin
fosfotransferaze).
Funcia metabolic
- MC la procariote preia funcia mitocondriei (mitocondria e o celul
procariot endocitat i transformat evolutiv).
- la bacterii aerobe, n MC e structurat lanul respirator (eliberarea
energiei prin transfer de electroni).
- stocarea energiei prin procese de sintez a ATP-ului
Funcia secretorie
- de hidrolaze - macromoleculele din mediu sunt degradate n
compui simpli.
- la gram pozitivi, ele se excret n mediul extracelular.
- la gram negativi, enzimele se sintetizeaz n spaiul periplasmic.
Funcia biosintetic
- Enzime ale MC care formeaz PC
- Enzime ale MC care sintetizeaz fosfolipide
- Enzime ale MC care intervin n replicarea ADN
- Iniierea septului de separare ntre cele 2 celule fiice
- Intervin n sporulare
Funcia de int
- MC reprezint inta pentru unele: - chimioterapice (ex.: Polimixina)
- dezinfectante
- substane folosite ca detergeni
Anvelopa celulei bacteriene

Constituit din:
- membrana citoplasmatic
- peretele celular
- capsula
- strat S (cristalin de suprafa) aprare fa de BF (bacteriofagi) i
enzime.
28
Capsula
- suprapus peste peretele celular
- evideniat la microscopul optic, prin coloraii speciale (rou de
rutenin, Burri)
- de natur polizaharidic: - Streptococcus Pneumoniae
- Haemophylus
- Klebsiella
- Clostridium perfringens
- de natur polipeptidic - Bacillus anthracis (polimer acid D
glutamic)
- de acid hialuronic
- Streptococ hemolitic
Rolurile capsulei:
Protejarea celulei fa de deshidratare
Polizaharidul capsular e un antigen ce se folosete la identificare
serologic
Ex.: 80 tipuri pneumococice (dup polizaharid capsular).
Identificare bacterian - diplococi ntr-o capsul comun, aspect
patognomonic pentru pneumococ.
Funcie antifagocitar (factor de patogenitate).
Glicocalixul
- masa de filamente Pz ntretiate (psl)
- cel mai exterior strat (numai la unele bacterii exemplu: Streptococcus mutans).
- nu se poate evidenia la bacteriile cultivate pe medii
- realizeaz ataarea pe celulele umane, pe obiecte i formeaz
microcolonii bacteriene care au un glicocalix comun
Ex.: Streptococcus mutans - produce caria prin reacii biochimice:
Glucozil
Lactoz Transferaza > Fructoz + Glucoz

Glucoz
> Glican (insolubil n ap)
Polimerizare
Lactoz
> Glucoz + Fructoz
Fructozil
Fructoz Transferaza > Levan (insolubil n ap)
Levan + Polimerizare Glican ------> ader pe smalul dentar prin
glicocalix (se formeaz placa dentar i apoi
caria).
29
Peretele celular (PC)

Formaiune celular rigid ce asigur meninerea formei celulei
bacteriene, n condiiile unei diferene de presiune osmotic ntre interiorul
celulei i mediul exterior (5-20 atm.). Cu structur aparte pentru gram + i
gram -. Alctuit din peptidoglican (mureina): Nacetilglucozamina, acidul
Nacetil muramic i 5 resturi de aminoacizi.
Exemplu:
Nacetilglucozamina -----> acid Nacetil muramic
|
1. L-Ala
|
2. D-Glu
|
3. Di-aa -gram + : lyzina, ornitina, prolina, etc.
| -gram - : acidul L-mezo-diaminopimelic
4. D-Ala
|
5. D-Ala
Legturile interpeptidice dintre catenele liniare se formeaz prin

legtura dintre: diaminoacidul din poziia 3 de pe o caten (I) i D-Ala din
poziia 4 de pe alta caten (II).
Observaii:
- la bacterii gram + pot aprea peptide intermediare (exemplu: la
Stafilococ -5 resturi de glicin);
- la bacterii gram - legtura ntre L mezodiaminopimelic dintr-o
caten cu D-Ala din alt caten se face fr peptide intermediare.
Glicanul d rigiditatea moleculei (PC)
Fig. 5 Structura peretelui celular la bacterii gram pozitive (80)
30
Peretele celular la bacterii gram poztive

- mai gros dect la gram negative.
- 40 de straturi suprapuse de peptidoglican (50% din greutate este
murein)
- exist Pz n cantitate mare, legate covalent de acidul Nacetil
muramic
Polizaharidele sunt: - acizii teichoici
- acizii teichuronici
- acizii lipoteihoici
- Acizii teichoici - (teichos = perete - n limba greac)
- polimeri de glicerol fosfat sau ribitol fosfat de
care se leag resturi de monozaharuri i D-Ala
- sunt principalele antigene de suprafa ale
bacteriilor gram pozitive.
- Acizii teichuronici - sunt polimeri de acid - manozuronic i glucozuronic
- numai la unele specii bacteriene
- Acizii lipoteihoici - se leag de membrana citoplasmatic i strbat
toat grosimea PC (consolidare)
Peretele celular la bacterii gram negative

- subire i cu o structur complex
- proporie sczut de murein (5-10% din greutatea uscat)
- proporie sczut de polizaharide, dar crescut n proteine i lipide.
Structura peretelui celular
- peptidoglicanul (PG) - cu 1-2 straturi moleculare (perete subire)
- molecule de lipoprotein (LP)
- partea proteic se leag de peptidoglican
- partea lipidic ptrunde n membrana extern a PC (rol de
ancorare)
- membrana extern (ME) a PC
- dublu strat fosfolipidic cu proteine - minore
- majore
- proteinele majore ale ME a PC:
- se asociaz n triplete cu trei molecule de LP (lipoproteine) i
formeaz canale de difuziune pentru substane nutritive cu greutate
molecular mic.
Exemple de proteine la E. coli:
- OmP A - receptor pentru pilul F
31
- ancoreaz ME de PG (peptidoglican)
- proteina Lamb B - receptor pentru bacteriofagul (BF)
- trece maltodextranii prin pori
- proteina TSx - receptor pentru BF.T6
- trece nucleozidele prin pori
- proteine OmP C, OmP D, OmP F, etc.
- Proteine minore ale ME a PC
- transport specific pentru : - complexe de Fe
- vitamina B12, nucleotide
- receptori pentru pili sexuali, colicine, BF
- implicate n replicarea ADN i diviziunea celular
- Spaiul periplasmic - ntre PG i ME. n acest spaiu se
concentreaz enzimele hidrolazice.
- LPZ - Lipopolizaharidul
- specific doar bacteriilor gram negative - similar cu antigenul O
(endotoxina)
- lipidul A
- intr n ME a PC
- confer toxicitatea.
- polizaharidele - proemin pe suprafaa ME
- formeaz uniti repetitive
- componenta polizaharidic confer specificitatea antigenic a
bacteriilor gram -.
- smbure proteic, care confer imunogenicitate
Funciile peretelui celular
Asigur meninerea formei celulei + rigiditate
Bariera osmotic
- sita molecular pentru bacterii gram +
- sisteme de transport activ la bacterii gram - porine (canale)
- proteine carrier
- aciunea hidrolazelor
Primer (matria)
- sinteza proprie
- autolizine ale PC - degradarea unor zone limitate de PC, cu
refacerea ulterioara a acestor zone.
inta de aciune a antibioticelor : exemplu lactaminele
Posed antigene de suprafa celular
- antigenul O: la gram - carbohidrat C la streptococ, cu rol n identificarea serologic.
32
Cilii (flagelii)
Structuri helicoidale subiri i lungi, flexibile
- Confer mobilitate celulei (organe de locomoie)
- Formaiuni neobligatorii
- Cocii nu au cili
- Subuniti proteice de flagelin, polimerizate (cilindru gol) cu GM
35 000 daltoni.
Structura:
- corpuscul bazal (15 proteine distincte)
- 2 discuri perechi - LP - L - n LPZ din ME a PC
- P - n peptidoglican PC
- SM - S - la suprafaa MC
- M - implantat n MC
Cele dou perechi de discuri sunt legate printr-un cilindru proteic
- crligul - unghi de 90 (manon proteic)
- filamentul axial - cilul propriu-zis (flagelina polimerizat)
Fig. 6 Ultrastructura cilului (64)
Rolurile cililor:
- mobilitate dirijat, prin transducie senzorial, spre diferite
substane.
- chemiotaxie - spre substane nutritive.
- aerotaxie - spre zone de concentraie mare de O2.
- fototaxie - spre surs de lumin.
33
- electronotransfertaxia - spre substane ce funcioneaz ca acceptori

de electroni (ex.: nitrat).
- identificare bacterian microscopic - coloraia Leifson.
- identificare imunologic - posed AG. H ciliar.
Mobilitatea bacterian
Transducia senzorial = coordonarea micrilor bacteriei printr-un
sistem de metilare/demetilare ale unor proteine:
- metilarea - asigur micarea bacteriei n sens anti-orar (nainte)
- demetilarea - asigur micarea bacteriei n sens orar (napoi)
Energia necesar micrilor ciliare este preluat din energia
rezultat din lanul respirator al MC (stare de MC energizat)
- discul M (din MC) acioneaz ca un motor
Procesele de metilare/demetilare
- sunt dependente de c GMP
- sunt evideniate prin experimentul Adler (evideniaz chemiotaxia)
Mobilitatea la Spirochete
- aparatul locomotor al Treponemei pallidum e situat ntre
peptidoglican i ME a PC- are o form n spiral.
Fig. 7 Spirochete cu aparat locomotor pericelular (64)
Examinarea mobilitii bacteriene n laborator:

n preparatul nativ
Pe mediul MIU (mobilitate - indol-uree) - mediu opalescent:
mobilitate pozitiv
Examinarea cililor la microscop optic (coloraia Leifson sau
impregnare argentic)
34
Ciliatura n microscopie electronic (dispoziia cililor pe o celul

bacterian).
35
Ciliatura:
celula atriche
- fr cili
celula monotriche - celula cu un cil la un capt al celulei
bacteriene.
celula amfitriche - celula cu cili la ambele capete ale celulei
bacteriene.
celula lofotriche
- mnunchi de cili la un capt al celulei
bacteriene.
celula peritriche - cili repartizai uniform pe ntreaga suprafa
bacterian.
Fig. 8 Cili peritrichi bacterie flagelat Proteus Sp. (60)
Pilii sau fimbriile

- Sunt formaiuni filamentoase rigide, scurte
- Nu sunt organe locomotorii
- Pot fi comuni sau sexuali
Pilii comuni
- aproximativ 100 pe o celul bacterian.
- sunt polimeri de pilein - ce reprezint un antigen piliar
- scuri L = 2 m
- aspect de cilindri goi n interior
- rol n aderarea pe suprafee netede ca de ex.: mucoase, hematii
(evideniat prin reacia de hemaglutinare (HA)
- pili cu HA manozosensibil - aparin bacteriilor nepatogene
- pili cu HA manozorezistent - aparin bacteriilor patogene
36
- exemple de bacterii cu pili: E. Coli

Pilii sexuali
- realizeaz transferul intercelular de material genetic (conjugarea
bacterian).
- 1-4 pili pe o celul (max. 4)
- lungime 20 m, cu extremitate n buton
- sunt denumii pili F (codificai de ctre plasmida F de fertilitate)
- pot constitui receptori pentru BF (bacteriofagi). (BF folosete
pilul sexual pentru introducerea materialului su genetic n celula
bacterian infectat)
Fig. 9 Pili i flageli bacterieni imagine electronomicroscopic (E. Coli) (81)
Sporul
Forma de rezisten n mediu neprielnic ce apare n interiorul unor
anumite celule bacteriene; exemple:
genul Bacillus - bacili sporulai aerobi
- cu spor care nu deformeaz celula (diametrul spor < diam. celulei)
genul Clostridium
- bacili sporulai anaerobi
- cu spor care deformeaz celula (diametrul spor mai mare ca
diametrul celulei)
- Spor localizat terminal: aspect n ac de gmlie ca la bacilul tetanic
- Spor localizat subterminal: aspect n rachet de tenis ca la Clostridium botulinum
37
- Spor localizat central (brcu), la Clostridium sporogenes.

Structura sporului n microscopia electronic:
protoplast sporal = acid nucleic + citoplasm
perete sporal
cortexul sporal
nveliuri sporale multistratificate cu legturi disulfidice
Compoziia chimic:
- posed cantiti mari de calciu dipicolinat (5-15)
- coninut redus n ap liber (=> termorezistena sporului)
- bogia legturilor disulfhidrice din nveliuri confer
impermeabilitatea sporului, mpreun cu cele 2 uniti de membran.
- activitate metabolic foarte sczut (celul dormant care persist
zeci de ani).
Fig. 10 Sporul bacterian (85)
Sporularea
- controlat genetic (30 operoni formai din 250 gene)
- exist factori sigma specifici sporulrii
- are loc n condiii de mediu nefavorabile.
Stadiile procesului de sporulare:
Separarea acidului nucleic sporal (ADN)
Formarea unui buzunar de membran i citoplasm n jurul
acidului nucleic sporal
Adugarea succesiv a straturilor sporale
Germinarea, iniiat de - hidratarea sporului
38
- eliminarea calciului
- temperaturi > 20-30 C
39
Importana studierii sporului n:

Identificarea bacterian (coloraii speciale)
Stabilirea regulilor de sterilizare (pe baza termorezistenei)
Studierea proceselor de difereniere celular.
Mecanismul coloraiilor Gram i Ziehl - Nielsen
Proprietatea de Gram ine de integritatea i structura PC.
De exemplu, protoplatii, sferoplatii, formele L se coloreaz gramnegativ deoarece nu au perete celular.
- Structura particular a PC la genul Mycobacterium confer acidoalcoolo-rezisten bacilului tuberculos (BK):
- PC la BK e foarte bogat n lipide (20-40 din greutatea uscat)
- PC conine acid micolic (confer acido-alcoolo-rezisten)
- PC este pluristratificat (reele lipopolizaharidice).
40
CAPITOLUL 3
METABOLISMUL BACTERIAN
Particulariti ale metabolismului bacterian:
Unicelular - se desfoar ntr-o singur celul

Necompartimentat - prin lipsa organitelor celulare
Teleonomic- n evoluie au fost selectate cile metabolice cu
eficiena maxim
Flexibil - adaptare rapid la condiiile de mediu
Intens, accelerat - multiplicare bacterian foarte rapid (timp de
generaie 20')
Supus restriciei genetice - 3 x 109 molecule proteice, dintre care
doar 2000 de molecule sunt enzime.
Tabelul nr. 2 - Diversitatea metabolic a bacteriilor n raport cu factorii
de mediu
Parametrul
1. Temperatura
2. PH-ul
3. Osmolaritatea
Bacterii:
criofile (psihrofile)-->
Dezvoltare optim la:
10-15 (ind. alimentar)

25-45 (la om)
mezofile -->
60-80 (Archaebacterii)
termofile -->
bacterii neutrofile pH=7 -ex.: bacterii ce paraziteaz omul
- ex.: Thiobacillus, Lactobacillus
acidofile pH < 7
- ex.: Vibrion holeric: pH 9,2
alcalofile pH > 7
- se dezvolt la presiunea osmoti
osmotolerante
halofile
halotolerante
c a organismului uman
- se dezvolt la concentraia n
NaCl> 10g%
- ex.: Vibrio parahaemolyticus
- se dezvolt la concentraia n
NaCl pn la 10g%
- ex.: Stafilococcus aureus
41
4. Necesitile nutritive
Clasificarea n funcie de sursa de:
a) Carbon bacterii autotrofe: folosesc CO2
mixotrofe: folosesc CO2 i substane organice
heterotrofe: folosesc substane organice
b) Energie - bacterii fototrofe: utilizeaz radiaia luminoas
chimiotrofe: utilizeaz substane chimice:
substane
anorganice:
bacterii
*chimiolitrotrofe
substane
organice:
bacterii
*chimioorganotrofe
c) Azot - bacterii ce fixeaz N2 atmosferic - prin nitrogenaze
- bacterii ce folosesc NH4+
- bacterii ce folosesc azot aminic (NH-) - din aminoacizi
(marea majoritate).
Cile metabolice prin care se utilizeaz azotul la bacterii:
- Sistemul glutamat/glutamin
- Sistemul glutamin/glutamat
- Sistemul aspartat/asparagin
Acidul aspartic marcat cu N15 e folosit preferenial n dezvoltarea
bacteriilor, comparativ cu acidul glutamic. (experiena prof. dr. Ivanof
Antipa)
d) Factori de cretere
- Substane necesare unor anumite bacterii, pe care acestea nu le pot
sintetiza.
Exemple:
vitamine din complexul B
baze purinice i pirimidinice
hematina, NAD, NADP
- Se adaug n mediu n cantitate de 50 g/ml.
Variaia prototrof-auxotrof :
Bacterii prototrofe - nu necesit factori de cretere
- se dezvolt pe medii minimale
- sunt de obicei tulpini slbatice
Bacterii auxotrofe - necesit factori de cretere
Variaia prototrof - auxotrof: din bacteriile prototrofe se pot obine
mutante auxotrofe, care reprezint markeri genetici.
Bacterii paratrofe - cu parazitism celular obligatoriu
- ex.: genul Ricketsia, Chlamydia
42
Mediul de cultur minimal

- Este un mediu sintetic care asigur necesitile nutritive minimale
(mediul de baz)
- La acest mediu se adaug componeni nutritivi specifici pentru
fiecare tip de bacterie ce se izoleaz (ex.: Haemophylus - se adaug snge i
factori de cretere X i V).
- Mediul de baz Glucoz (surs de Carbon i energie)
Sulfat de amoniu (surs de Azot)
Fosfai (necesari pentru sinteza ATP)
Minerale: Mg, Fe, Na, K, etc.
- fierul intr n structura citocromilor i
peroxidazelor
- potasiul intra n structura ribozomilor
Scopurile cultivrii bacteriilor
Cultivarea bacteriilor const n izolarea bacteriilor pe medii sintetice,
naturale sau semisintetice, cu urmtoarele scopuri:
- diagnosticarea bolilor infecioase
- controlul puritii apei i alimentelor
- testarea sensibilitii bacteriene faa de antibiotice
- procese industriale: industria lactatelor, a berii etc.
- biomasa: vaccinuri, hormoni, etc.
Bacteriile ce paraziteaz organismul uman sunt:
- mezofile : (25- 45)
- neutrofile : pH = 7
- osmotolerante: tolereaz presiunea osmotic a organismului uman
- heterotrofe: substane organice ca surs de carbon
- chimioorganotrofe : substane organice ca sursa de energie
- utilizeaz azot aminic : aminoacizi ca sursa de azot.
Metabolism energetic. Eliberarea i conservarea energiei la
bacterii.
La microorganisme se produc reacii biochimice:
- catabolice: de obinere a energiei n urma degradrii substanelor
nutritive
- anabolice: cu scopul sintezei structurilor celulare
- amfibolice: ci metabolice implicate n catabolism dar care
furnizeaz i compui C2 - C6 pentru procesele de biosintez
43
- anaplerotice: duc la fixarea CO2 cu obinerea compuilor C3, C4,

necesari anabolismului
Metabolism bioenergetic:
- reacii catabolice - cu eliberare de energie
- prin ci metabolice universale n lumea vie.
Exemplu:
- glicoliza
- ciclul acizilor tricarboxilici (CAT)
- oxidarea acizilor grai, etc.
- reacii anabolice - cu consum de energie (reacii endergonice)
- prin ci metabolice specifice bacteriilor
La bacterii, energia rezultat prin degradarea substanelor nutritive se
elibereaz prin procese redox:
donare de hidrogen ---> acceptare de hidrogen
(e- i H+)
|
(e- i H+)
transportorii de e|
|
legai de M.C
liberi - NAD
n lanul respirator
- NADP
bacterian
Principalele tipuri de eliberare a energiei la bacterii
Se realizeaz prin:
- respiraie oxibiotic
- respiraie anaerob
- fermentaie
donor de H
acceptor de H
Respiraie oxibiotic: Substana organic ----------------------------------> O2
transport e- prin
lanul respirator
Respiraie anaeroba: Substana organic -------------------------> Subst. anorganic
transport e(nitrat, sulfat, etc.)
prin lanul respirator
Fermentaie: Substana organic ------------------------------------> Subst. organic
glicoliza
Embden Meyerhoff
44
(rearanjri moleculare
ale substratului)
Clasificarea bacteriilor n funcie de tipurile de eliberare a energiei

Strict aerobe
Strict anaerobe
Aerob - anaerob facultative
Anaerob - aerotolerante
Aerotolerante
Tabelul nr.3 Clasificarea bacteriilor funcie de eliberarea energiei
Grupa
Strict aerobe
Eliberarea energiei Prez.O2 n mediu

Exemple
Respiraie oxibiotic Obligatoriu
Genurile:
Mycobacterium,
Bacillus,
Pseudomonas
Strict anaerobe Fermentaie
Fr (este toxic) Genurile:
Clostridium
Bacteroides
Fusobacterium
Veillonella
Peptococcus
Peptostreptoccocus
Aerob Respiraie i / sau
Prezent
Genurile
anaerob
fermentaie
Facultativ
Staphylococcus
facultative
Haemophylus i
Enterobacteriile
Anaerob
Fermentaie
Cu sau fr
Streptococcus
aerotolerante
Microaerofile Respiraie sau
Foarte sczut CO2 Streptococcus,
fermentaie
Neisseria, Brucella
5-20
Campylobacter
45
Reacii necesare pentru conservarea energiei

Energia se pierde:
- sub forma de cldur
- pentru transportul activ al substanei nutritive
- n timpul micrilor ciliare
Pentru viaa celulei, energia trebuie s fie conservat. Aceasta se face
prin :
- nmagazinarea energiei n legturi macroergice (care elibereaz
la hidroliz > -7 kcal/mol). ATP-ul furnizeaz 7,3 kcal/mol.
Sinteza ATP:
Are loc prin 2 mecanisme
a) Fosforilarea prin transport de eb) Fosforilarea la substrat
46
a) Fosforilarea prin transport de electroni

transp. (e-+H+)
Substrat supus oxidrii -----------------------------> O2

prin lan respir.
Particulariti ale lanului respirator bacterian

Structurat n membrana citoplasmatic (mitocondria lipsete)
Este ramificat (bucle ale lanului)
Bacteriile au citocromi hibrizi, care nu apar la alte organisme
Transferul de e- i sinteza ATP se pot realiza i pe lan respirator
incomplet.
Lanul respirator poate funciona i n respiraia anaerob,
acceptorul de e- fiind o substan anorganic (aici e corect
termenul fosforilare prin transport de e- i nu fosforilare
oxidativ)
Fig. 11 Lanul respirator bacterian (80)
Sinteza ATP are loc n 3 poziii din lanul respirator:

ntre NAD i flavoprotein
ntre citocromul b i citocromul c
ntre citocromul a i oxigen
Fore proton motrice
47
Transferul separat al e- i H+ prin buclele lanului respirator realizeaz

concentrarea diferit a acestora pe cele dou fee ale MC i rezult o
diferen de potenial electric i un gradient de pH (gradientul confer starea
de membran energizat).
b) Fosforilarea la substrat
ATP-ul e sintetizat direct prin reacii enzimatice, de exemplu:
CAT - ciclul acizilor tricarboxilici
De la cetoglutarat --> la succinat
Fermentarea glucozei
- principalul proces energetic al anaerobiozei
- prin glicoliz sau calea Embden-Meyerhoff
- produsul final al glicolizei este piruvatul i NAD
- pornind de la piruvat, prin fermentaie se ajunge la o gam larg
de produi finali, produi care caracterizeaz principalele tipuri
de fermentaie
Tabelul nr. 4 - Clasificarea bacteriilor n funcie de tipul de fermentaie
Importana
Tipul de Produs final obinut

Microorganisme
fermentaie
Alcoolic
etanol + CO2
Zimmomonas,
Sacharomyces cerevisiae
Industria
alimentar Lactic
Ac. lactic
Lactobacillus,
Streptococii lactici
Propionic Acid propionic
Chorynebacterium
diphteriae, Clostridium
propionicum,
Genul Neisseria,
Genul Veillonella
Acid
mixt
Acid
succinic
Toate enterobacteriile, cu
Diagnostic
Acid formic
excepia genurilor Klebsie(identificare
Acid acetic
lla, Enterobacter., Serratia
bacterian)
toate: pH < 5
evideniat prin testul rou-metil
Acetoinic Acetoina
Klebsiella, Serratia,
Enterobacter
evideniat prin testul Voges-Proskauer
48
Reacia fosforoclastic
- Reacie de fosforilare la substrat ntlnit la anaerobi
- n aceast reacie, acceptorii de hidrogen sunt feredoxinele
(proteine cu Fe neheminic)
49
Bilanul energetic pentru respiraie i fermentaie

Pentru respiraie: Dintr-un mol glucoz prin activitatea
coordonat a:
- glicolizei
|
- CAT
| => 38 moli ATP
- lanului respirator | (bacterii strict aerobe)
Pentru fermentaie: Dintr-un mol glucoz prin calea Embden
Meyerhoff rezult 2 moli ATP (bacterii strict anaerobe). Deci fermentaia
este un proces primitiv i neeficient de eliberare a energiei la bacterii.
Biosinteza materialului celular

Ci metabolice
Aminoacizi
Glucoza
Proteine
nucleoid
Amoniu
mf
Nucleotide
poliAcizi nucl.
structuri
citoplasma
(N2 aminic) --------> Monozaharide -------------> Polizaharide ---------------> ribozomi
Sruri mineGlicerol
merizare Lipide
celulare*) MC
rale (Fe, Mg,K)
Acizi grai
cu
PC
cu
cu
100-1000
capsula
25 atomi/molec
60 atomi/molec
atomi/molec
spori
cili, pili
*) Sinteza pe matria ADN pentru proteine i acizi nucleici
*) Polimerizare pentru polizaharide i lipide
mf = metabolii focali - produi intermediari ntre catabolism i anabolism;
Tabelul nr.5 - Metabolii focali

Metabolii focali
Glucozo-1-fosfat
Glucozo-6-fosfat
Ribozo-5-fosfat
Eritrozo-5-fosfat
Piruvat
Acid 3-fosfogliceric
Dihidroxiacetonfosfat
Acetil CoA
50
Originea catabolic
Rol n biosintez
Degradarea PZ, galactoza Nucleozide cuplate cu
monozaharide
Glicoliza
Pentoza, polizaharide
Calea pentozofosfatica
Nucleotide
Calea pentozofosfatica
Aminoacizi aromatici
Glicoliza
Aminoacizi
Glicoliza
Glicerol, lipide, fosfolipide
oxidarea acizilor grai, Acizi grai, Steroli

degradarea pirimidinei
Deci, metaboliii focali provin din:

- ci catabolice
- ci metabolice anabolice
- ci anaplerotice
- ci amfibolice (pe unele secvene anabolice pe alte secvene
catabolice)
Reglarea metabolismului bacterian
Reglarea ptrunderii substanelor nutritive n celul
- prin funcia selectiv a MC i PC
- prin transport activ i facilitat
Controlul genetic al biosintezei enzimelor
- prin control pozitiv sau
- control negativ
Controlul alosteric al activitii enzimelor (retro-inhibiie.)
(Genetica bacterian)
Creterea i multiplicarea bacteriilor

Cultura microbian este o populaie celular omogen cu celule
similare, rezultate dintr-o singur celul, bacteria iniial.
Creterea celulelor este continu, pn cnd toi constituenii ajung n
cantitate dubl, dup care are loc diviziunea celular.
Multiplicarea bacteriilor - prin diviziune celular => 2 celule identice
Fig. 12 Celula bacterian n diviziune (82)
51
Diviziunea celular se produce cu o strangulare a MC iniial, apoi a

PC n final, pn la separarea celor 2 celule fiice. Este coordonat prin
replicarea moleculei de ADN i prin legtura acidului nucleic cu mezozomul.
Ciclul celular cuprinde toate evenimentele metabolice dintre 2 diviziuni
Determinarea numrului de celule dintr-o cultur bacterian:
Determinarea nr. de celule bacteriene pe unitatea de volum prin:
- numrare direct n camera de numrare sau pe lame speciale (ex.:
lame ca pentru hematii)
- numrarea celulelor viabile prin nsmnarea unei cantiti anume
de produs patologic pe un mediu de cultur - dup formula:
N = n x 1/Diluie x 1/Vol.nsmnat
N = nr. total de celule bacteriene de pe o plac
n = nr. de colonii bacteriene
(1 colonie bacterian = o clon de celule identice care provin dintr-o
singur celul, n urma diviziunilor).
exemplu: n = 40
diluia = 10-6 volumul = 0,1 ml
=> N = 40 x 1/10-6 x 1/10-1 = 40 x 106 x 10 = 4 x 108 bacterii vii / ml cultur
Msurarea densitii celulare
- Calcularea greutii uscate a bacteriilor, cunoscnd concentraia
azotului din celulele dintr-un volum dat.
- Stabilirea densitii optice cu ajutorul fotometrelor, prin absorbia
luminii la o anumit lungime de und.
Msurnd la diferite intervale de timp nr. de celule dintr-un mediu
lichid, numr proporional cu log de densitate optica (d. o.) - Se obine o
curb de tipul:
log d.o.
D E
F
C
Fig. 13 -Curba de dezvoltare a unei
culturi bacteriene
AB
52
Timp
Legenda:
A - faza de laten (lag) (to lag = a ntrzia)
B - faza de accelerare a multiplicrilor bacteriene
C - faza de multiplicare exponenial (logaritmic)
D - faza de ncetinire a multiplicrii
E - faza staionar
F - faza de declin
Fazele eseniale sunt: A, C, E, F
Fazele intermediare sunt: B, D
Analiza etapelor din curba de dezvoltare a culturii bacteriene:
Faza A - faza de programare metabolic a celulelor, n vederea
folosirii substanelor nutritive din mediul de cultur.
- S-a demonstrat aceast ipotez prin fenomenul de diauxie a lui
Monod.
Experiment: Se cultiv E. Coli pe un mediu cu glucoz n cantiti
foarte sczute i lactoz n cantiti mari. Curba de dezvoltare are 2 perioade
de lag :
- lag 1 foarte scurt, corespunde utilizrii glucozei din mediul de
cultur
- lag 2 lung, corespunde utilizrii lactozei din mediu, dup epuizarea
glucozei (prin reprogramarea metabolismului bacterian)
Faza de lag - difer n funcie de: specia bacterian i condiiile de
cultivare
- poate s dispar dac se inoculeaz bacteriile din faza exponenial
pe acelai mediu de cultur (principiul chemostatelor ce produc culturi
continue, doar cu faz exponenial).
Faza de lag dureaz cam 2-6 ore.
Faza B - accelerare a multiplicrilor bacteriene.
Faza C (exponenial)
- Faza n care se produc diviziunile (2N germeni)
- Timp de generaie = Intervalul mediu dintre dou diviziuni
- variaz n funcie de specia bacterian:
timpul de generaie - E. Coli = 20 minute; B. Koch = 1000 minute
Caracteristicile celulelor din faza logaritmic:
celule tinere cu muli ribozomi
celule cu activitate crescut de sintez a proteinelor
53
aceste celule au cea mai mare sensibilitate la antibiotice i

chimioterapice
54
Faza D - de ncetinire a multiplicrii

- se produce prin: - epuizarea unuia sau a mai multor metabolii
necesari dezvoltrii
- scderea concentraiei n O2 n mediul de cultur
Faza E - staionar
- cu un numr mai mic de diviziuni, dar constant
(nr. celule vii = nr. celule care mor)
Faza F - de declin
- moartea celulelor n progresie geometric
- celulele sunt: - mbtrnite, cu PC gros, cu sintez proteic
foarte redus
- rezistente la factorii fizici, chimici i
chimioterapice
Culturi continue
- Sunt culturi meninute ntr-o perioad exponeniala permanent
- Vasul de cultur este - adaptat ca pH, aerat i aprovizionat
permanent cu mediu de cultur proaspt.
- Cantitatea de mediu proaspt adugat este identic cu cea de
cultura eliminat.
- Se utilizeaz pentru - studii de metabolism, genetic bacterian;
- biotehnologie (obinerea de vaccinuri,
hormoni, enzime cu ajutorul bacteriilor).
Aparatele se numesc chemostate sau biogene.
55
CAPITOLUL 4
GENETICA BACTERIAN
Genetica studiaz fenomenele fundamentale:
Ereditatea - transmiterea la descendeni a acelorai caractere
(asigur stabilitatea speciei).
Variabilitatea - variaiile caracteristicilor bacteriene.
ADN
Gena
Genomul
Genotipul
Fenotipul
= Suportul material al ereditii (inclusiv la bacterii)

= Un segment al moleculei de ADN care codific
sinteza unui polipeptid distinct. Exist gene structurale
i funcionale.
= este alctuit din totalitatea genelor unui organism.
= Reprezint totalitatea informaiei genetice a unui
organism.
= Caracterele observabile specifice unui organism,
determinate de genotip (n interaciune cu mediul
ambiant).
Deci variabilitatea caracterelor bacteriene poate fi divizat n 2

categorii:
a) - fenotipice:
ex.: bacilul difteric are forma cocoid pe medii
cu telurit i forma baciliar n absena teluritului.
b) - genotipice:
ex.: ctigarea rezistentei la antibiotice.
Structura ADN
- 4 perechi de baze azotate
- A, G purine
A adenina
G guanina
- C, T pirimidine
T - timina
C - citozina
complementare: A T, G C, legate pe un schelet ribozofosfatic.
- Are o structur dublu catenar antiparalel.
- Fiecare aminoacid e codificat de ctre un triplet din 3 baze azotate
denumit codon.
- Replicarea ADN se face pe propria matri, prin intermediul ADN
polimerazelor I, II, III (mai ales III).
56
Fig. 14 Replicarea ADN-ului bacterian (80)
Transcrierea informaiei genetice

- Informaia genetic se concretizeaz n sinteza proteinelor i
enzimelor necesare funcionrii microorganismului;
- m ARN - preia informaia genetic i o transmite la ribozomi
- este ntotdeauna monocatenar
- se sintetizeaz folosind ca matri o singur caten de
ADN
- transcrierea mesajului se face dup primirea unui semnal
de iniiere, denumit promoter
- transcrierea e controlat de ARN polimeraz ADN
dependent.
Traducerea mesajului genetic
Se face prin intermediul ARN de transfer, cu specificitate de
aminoacid.
Promoter - N formil metionina - t ARN specific ---> este complexul
de iniiere al sintezei proteice la bacterii.
Sinteza proteic
- ncepe cu legarea m-ARN de ribozomi
- apoi se formeaz polizomii, cu obinerea
ulterioara a unui lan polipeptidic.
Modelul bacterian - timp de generaie foarte scurt (E. Coli 20)
- nr. haploid de cromozomi (1 N)
- necesitile nutritive sunt markeri genetici (studiul facilitat).
57
Elemente genetice la bacterii

Ereditate bacterian:
cromozomial - asigurat de cromozomul bacterian
extracromozomial - prin: plasmide, bacteriofagi, etc.
Repliconii bacterieni (cromozomul, plasmidele, bacteriofagii) au
capacitatea de a se autoreplica (de a se transmite n copii identice la celulele
fiice).
Repliconul
Repliconul este o molecul dublu catenar circular covalent cu 2
locusuri de reglare a replicrii: - locus iniiator
- locus replicator.
Repliconul este ataat prin locusul ORI la un situs mezozomal, pentru
a se coordona replicarea repliconului cu diviziunea celular.
Locusul ORI reprezint originea replicrii.
Cromozomul bacterian
- Structur nchis circular covalent, structura hiperhelicoidal GM
N x 109 daltoni, conine informaia genetic pentru sinteza a 5000 molecule
proteice diferite.
- Conine un numr haploid de cromozomi (1 N)
- Structur foarte dinamic (prezint formaiuni lobulare i anse, cu
dinamism asigurat de ctre 2 enzime) :
- topoizomeraza - crete ncrctura negativ a structurii hiperhelicoidale
- giraza - scade ncrctura negativ a structurii hiperhelicoidale.
- Genele sunt plasate linear n cromozom
Plasmidele
- Repliconi (elemente genetice extracromozomiale) purttoare ale
unor informaii ereditare neeseniale pentru supravieuirea bacteriilor.
- Sunt molecule de ADN dublu catenar, nchise circular covalent, care
pot exista:
- n stare liber n celula bacterian sau
- integrate n cromozomul bacterian
Acest comportament se numete comportament epizomal.
Plasmidele se pot denumi i epizomi.
58
Clasificarea plasmidelor
Dup mrime:
- plasmide mici (neconjugante)
- conin pn la 10 gene
- nu se autotransfer (sunt neconjugante)
- au 30 - 100 copii ntr-o celul bacterian
- au replicare relaxat (independent de replicarea
cromozomului bacterian)
- plasmide mari (conjugante)
- sunt mari (au peste 100 gene)
- sunt autotransferabile prin conjugare bacterian (de tip : F, R,
Col.)
- au operonul TRA (de transfer). Operonul este un complex de
gene necesare pentru autotransferul plasmidei
- au o replicare stringent (dependent de replicarea
cromozomului bacterian)
Dup informaia genetic coninut, plasmidele pot fi:
- plasmide F - de fertilitate
- plasmide R - de rezisten la antibiotice i chimioterapice
- plasmide Col - de sinteza a colicinelor, piocinelor etc.
- plasmide de rezisten la metale grele (folosite ca dezinfectante).
Exemplu: plasmida 01258 - la Staphylococcus aureus
- plasmide ce imprim noi proprieti metabolice. Exemplu: fixare
de azot la enterobacterii.
- plasmide ce codific factori de patogenitate:
exemple: - plasmida Ent-la E. Coli (i alte enterobacterii)
- plasmide de aderen la smalul dentar, la
Streptococcus mutans.
- plasmide productoare de hemolizin, la Shigella
dysenteriae.
Genele plasmidice pot fi:
- gene de integrare n cromozom, pentru plasmidele epizomale
- gene de transfer ale plasmidei (operon TRA)
- gene ce confer proprietile amintite anterior (metabolice,
rezistena la antibiotice)
- gene de excludere a ptrunderii n celul a unei plasmide nrudite,
aflate n aceeai grup de incompatibilitate; exemplu: 15 grupe de
incompatibilitate la E. Coli (se creeaz diviziuni taxonomice mai restrnse)
59
Genomul fagic - bacteriofagii:

- Sunt virusuri care paraziteaz bacteriile
- Sunt structuri de tip cap - coad:
Capul: - Capsida proteic ce nvelete acidul nucleic (ADN sau
ARN)
Coada: - o protein contractil - ce reprezint un canal de injectare
al materialului genetic al BF n celula gazd
- prezint o plac cu microfilamente cu rol de ataare pe
celula bacterian.
- Infecia celulei bacteriene poate evolua ca:
ciclul litic
- genomul fagic se nmulete vegetativ n celula bacterian
- virionii rezultai se elibereaz prin liza celulei gazda
- astfel de BF sunt fagii viruleni de la E. Coli exemplu: BF T1 - T7.
ciclul lizogen
- ADN-ul fagic se inser n cromozom ca regiune genetic distinct
(sub forma de profag). Celula rezultat este o celul lizogenizat de ctre
bacteriofagul respectiv. Celula dobndete noi proprieti toxice sau
metabolice n urma acestui proces.
- exemplu : BF de la E. Coli
- astfel de BF sunt fagii temperai
BF temperai pot realiza:
- conversia lizogen
- transfer de material genetic (transducia).
Exemple de toxine bacteriene produse prin conversie lizogen:
toxina bacilului difteric - prin BF tox
fibrinolizina stafilococic
eritrotoxina Dick-streptococic
toxinele Clostridiilor, etc.
Elemente genetice transpozabile

Secvene de inserie (IS)
- Secvenele genetice care se pot mobiliza pe aceeai molecul de
ADN sau ntre moleculele de ADN diferite.
- Au 102 - 103 perechi baze
- se gsesc n mai multe exemplare n aceeai celul, n numr diferit
de la o tulpin bacterian la alta.
- Inseria unei IS n interiorul unei gene i ntrerupe continuitatea sau
i schimb funcia.
60
Transpozonii (TN)
- Sunt secvene mai mari de ADN (2-3 gene), flancate de ctre
secvene de inserie: IS - TN - IS (ex.: determinanii de rezisten la
antibiotice ai plasmidelor R).
- Rearanjeaz molecula de ADN n care apar i produc: duplicare
genic, mutaii, blocarea unui promoter
Secvene invertibile
- Sunt secvene care pot fi inserate n acelai locus genetic, dar n
ordine invers, modificnd proprietile genetice ale ntregii zone de
nucleotide.
Exemplu: Fagul Mu infecteaz E. Coli sau Serratia n funcie de
orientarea segmentului invertibil G.
Unitile repetative
- Flancheaz gene sau segmente funcionale.
- Au proprieti asemntoare elementelor transpozabile, intervenind
n rearanjarea moleculelor de ADN (produc mutaii, duplicri genice)
Variaia genotipic
- Modificare brusc, transmisibil ereditar.
- Mecanismele variaiei:
Mutaia
Transferul intercelular de material genetic:
- Transformarea
- Transducia - localizat
- generalizat
- abortiv
- Conjugarea
Mutaia
Reprezint o modificare spontan n secvena de nucleotide a unei
gene. Rata mutaiei (frecvena de apariie) este =10-9.
Apare doar atunci cnd sunt depite sistemele reparatorii
(mecanismele de aprare anti-mutaie).
Mecanisme:
Substituia unei perechi de baze, cu formarea altui codon, specific
altui aa.
Inserii de perechi de baze azotate
Deleii de perechi de baze azotate
Inversii n succesiunea perechilor de baze azotate
61
Tranziii - nlocuirea unei purine sau pirimidine cu alt purin sau

pirimidin
Transversii - nlocuirea unei purine cu o pirimidin sau invers
Modificri de forme tautomere ale bazelor azotate
Intervenia elementelor transpozabile, ce produc rearanjri genice
Alchilarea, dezaminarea bazelor azotate
mperecheri greite ntre bazele azotate prin:
- radicali activi ai O2
- existena n mediu a unui nucleotid n cantitate mai mare
Scindri greite ale moleculei de ADN (ruperea scheletului
fosforic al moleculei)
Condiii de mediu
- factori fizici: radiaii ultraviolete - realizeaz legturi covalente
ntre 2 timine.
- factori chimici : - acidul nitros dezamineaz bazele azotate
- coloranii acridinici se intercaleaz ntre cele 2
catene ADN
Tipuri de mutaii
1. Mutaie n acelai sens
- Modificarea n gena respectiv da natere la un codon nou, dar care
specific acelai aminoacid (exista aminoacizi codificai de ctre mai muli
codoni).
2. Mutaie nonsens
- Obinerea de lanuri polipeptidice incomplete, dac se formeaz
unul dintre cei 3 codoni terminali: UAG, UGA, UAA.
3. Mutaie cu schimbare de program
- prin inserii sau deleii, care produc decalaje de citire ale mesajului
genetic.
4. Mutaie silenioas
- nensoit de modificri fenotipice.
5. Mutaie nainte
- Ctigarea unei funcii; exemplu: E. Coli H2S - devine H2S +
6. Mutaii secundare
- Mutaie napoi (revers mutatia)
Restabilirea fenotipului slbatic iniial ( 10-16)
- Mutaii supresoare (cu efect compensator primei mutaii)
- intragenice - cu restabilirea funciei genei, prin mutaii n alt
codon, al aceleai gene
62
- intergenice - mutaii n gene diferite, pentru restabilirea

funciei genei afectate.
7. Mutaii condiionat letale:
- Sunt induse n condiii fixate de experimentator.
Exemplu: folosirea tulpinilor atenuate pt. prepararea vaccinurilor.
Exemple de mutante bacteriene
Mutaia poate afecta orice caracter bacterian:
mutaie
Morfologic: bacterii ciliate
---------> bacterii aciliate
variaia colonii S
---------> colonii R
Biochimic: lactoz negativ
---------> lactoz pozitiv
Patogenitate: absena toxinei
---------> prezena toxinei
Rezistena la antibiotice
Rezistena la bacteriofagi
Transferul intercelular de material genetic

Transformarea
- Este un proces de transfer intercelular de material genetic, transfer n
care celula receptor primete tot ADN-ul liber al celulei donator. Celula
receptor trebuie s se gseasc n aa numita stare de competen, ce se
realizeaz in vitro prin oc termic i calciu.
- Acest proces se produce mai uor la bacteriile gram pozitive i n
condiii speciale la bacteriile gram negative.
- Transformarea a fost descoperit n anul 1928, cnd Griffith a
efectuat un experiment asupra virulenei pneumococului. Tulpinile
bacteriene folosite n experiment au fost:
A. Tulpina SI (cu colonii S pe medii de cultur) - cu capsul,
virulent.
B. Tulpina RIII (cu colonii R pe medii de cultur) - fr capsul,
avirulent.
C. Tulpina SI (distrus prin cldura - la 70o C) - avirulent
- n experimentul iniial, Griffith a inoculat tulpina la un oarece i
animalul a murit.
- n experimentul urmtor, Griffith a inoculat tulpina RIII la alt oarece
i animalul a supravieuit (tulpina RIII era avirulent).
- Apoi, Griffith a inoculat la un oarece tulpina C i animalul
respectiv a supravieuit.
63
- n experimentul final, a inoculat la alt oarece dou tulpini de

pneumococ avirulente (RIII i SI omort prin cldur) i era de ateptat ca
animalul respectiv s supravieuiasc; acest lucru nu s-a ntmplat, oarecele
respectiv a murit i n hemocultur i s-a izolat tulpina S I de pneumococ.
Explicaia este urmtoarea: ADN-ul tulpinii SI a determinat sinteza capsulei
ca i factor de patogenitate la tulpina RIII, prin transfer intercelular de
material genetic. Acest proces - transformarea - i gsete azi aplicaia
pentru introducerea n celula bacterian a unui ADN hibrid, pentru clonarea
molecular (folosind tulpini de E. Coli).
Transducia
- Prin acest fenomen, fragmente din cromozomul bacterian al celulei
donator sunt ncorporate n genomul fagic i transferate n genomul celulei
receptor.
- Clasificare: transducia - generalizat
- localizat
- abortiv
Transducia generalizat
- Prile de cromozom de la celula donator au mrimea concatemerilor fagici i sunt transferate n celula receptor.
- Materialul genetic preluat de ctre fag se integreaz n cromozomul
celulei receptor, celul ce va da natere unei clone celulare cu markeri
cromozomiali transdui.
- Transducia a fost descoperit de ctre Zinder i Lederberg la
Salmonella thyphymurium.
- n cazul transduciei generalizate, fagul se poate insera n oricare loc
de pe cromozom (de exemplu: bacteriofagul P22 sau P1 la E. Coli).
Transducia localizat (situs specific)
- Se realizeaz prin bacteriofagi (BF) care au un singur locus de
ataare n cromozomul bacterian - de exemplu - BF . n acest caz vor fi
transferate doar genele aflate n apropiere, gal sau bio (gena gal
codificnd sinteza galactozei - iar gene bio codificnd sinteza biotinei).
Transducia abortiv
- Este transducia prin care fragmentul de cromozom preluat de la
celula donator nu se mai integreaz n cromozomul celulei receptor, ci
rmne independent n citoplasm i se circularizeaz. Prin acest procedeu
pot fi transduse chiar i plasmide mici n ntregime.
64
Conversia lizogen
- Const n apariia unei proprieti noi bacteriene, o dat cu
lizogenizarea cu un anumit bacteriofag temperat (n urma transduciei).
- exemple de toxine bacteriene produse prin conversie lizogen:
toxina bacilului difteric - prin BF Btox
fibrinolizina stafilococic
eritrotoxina Dick-streptococic
toxinele Clostridiilor, etc.
Conjugarea
A fost descoperit de ctre Lederberg i Tatum n 1946.
- n conjugare, transferul intercelular de material genetic are loc ntre
dou celule aflate n contact, printr-o punte de legtur (pil sexual) - de la o
celul donator masculin fertil (cu factor de sex) la o celul receptor
feminin (fr factor de sex).
- Primul factor descoperit a fost plasmida F, apoi plasmidele R Col.
- Conjugarea este un proces mai ntlnit la bacteriile gram negative
(enterobacterii, Pseudomonas etc.)
- Conjugarea poate apare extrem de rar la streptococi, la ntlnirea
ntmpltoare a dou celule F+ i F- (sau R+ i R-) procesul avnd loc sub
influena unor hormoni, denumii feromoni.
Fig. 15 Fenomenul conjugrii bacteriene (115)
Conjugarea la bacilii gram negativi

Plasmidele F
- Pilii sexuali ai celulei bacteriene de tip masculin sunt codificai de
ctre genele operonului TRA (de transfer) din plasmidele mari,
conjugante.
65
- Apropierea ntmpltoare a doua celule F+ i F- determin formarea

unor puni intercitoplasmatice, reprezentate de ctre pilii sexuali. Se
formeaz aa-numitele perechi eficiente.
- Concomitent, ncepe replicarea conjugativ a moleculei de ADN
dup modelul rolling circle i transferul copiei plasmidice prin canalul de
legtur.
- ntr-o or, aproximativ 50 din celulele unei populaii F- devin
celule F+.
Plasmidele R
- Conin informaii privind rezistena la unul sau mai multe
chimioterapice.
- Operonul de transfer al rezistenei - se numete operonul RTF i are
o structur similar operonului TRA.
- Operonii RTF pot avea i proprieti de tip transpozon (TN),
realiznd mobilizarea de pe cromozomul bacterian pe plasmide sau invers.
- Prin plasmide R, rezistena la chimioterapice se transmite n mod
epidemic.
Plasmidele Col
- Sunt plasmide mari, conjugante, ce conin informaii privitoare la
sinteza bacteriocinelor.
- Bacteriocinele sunt produse de ctre unele bacterii, cu cert efect
antibacterian.
Mecanismele antibacteriene ale bacteriocinelor sunt:
- Mecanisme enzimatice
- unele bacteriocine sunt nucleaze, enzime care realizeaz degradarea
ADN-ului celeilalte celule.
- alte bacteriocine sunt ATP-aze, mpiedicnd sinteza ADN la nivelul
celeilalte celule bacteriene.
- Mecanisme anti membrana citoplasmatic
- bacteriocine ce formeaz microcanale membranare n MC, cu eflux
de ioni i substane nutritive.
- Exemple de bacteriocine: colicine (E. Coli), piocine (Pseudomonas aeruginosa), pesticine (Yersinia pestis).
Conjugarea HFR - High frequency of recombination
- Cu o frecven de 10-5/generaie bacterian, plasmida F (de
fertilitate) - se poate integra n cromozomul bacterian n circa 8-10 situsuri
posibile.
66
- Punnd n contact celule HFR (cu plasmida F integrata n

cromozom), cu celule F- - se formeaz perechi eficiente n vederea
transferului genetic.
- De la o celul donator HFR se transfer la celula receptor - material
cromozomial i plasmid. Plasmida trece ca ultim element. Celula F - devine
i ea celula HFR.
- Transferul ntregului cromozom bacterian necesit 120 la
temperatura de 37 C.
- ntreruperea mecanic a conjugrii bacteriene (prin agitarea
suspensiei la anumite intervale de timp), a permis descifrarea hrilor
genetice bacteriene; s-a stabilit ordinea de aranjare a genelor n cromozom,
folosind tulpini HFR cu diferite situsuri de integrare n cromozom la care
procesul de conjugare a fost ntrerupt n mod dirijat. n anul 1984, la E.
Coli au fost stabilite 1027 locusuri genetice.
Plasmidele F - like (F')
- Sunt plasmide F integrabile n cromozomul bacterian, capabile s
transfere altei tulpini (prin conjugare HFR) doar o parte din cromozomul
celulei donatoare, mpreun cu materialul genetic propriu plasmidic.
- Prin plasmidele F -like (F') se poate realiza transferul intercelular de
material genetic i ntre specii foarte ndeprtate din punct de vedere
filogenetic (ex.: plasmida F'68-45).
Caracteristici comune ale proceselor de transfer intercelular de
material genetic:
- Transferul se face unidirecional: donator -> receptor
- Fragmentul de cromozom strin (exogenot) rmne ctva timp
alturi de ADN al receptorului (endogenot), realiznd o diploidie parial, un
merozigot.
- Exogenotul se stabilizeaz n receptor fie n urma recombinrii cu
endogenotul, fie ca replicon autonom.
67
Tabelul nr.6 - Principalele proteine care interacioneaz cu ADN

ACTIVITATE
EXEMPLE
Proteine de Semnale n funcionarea - Represor lac; proteina CAP
reglare
unor pri din molecul - Factorii i ai ARNpolimerazei.
- Iniiatorul de replicare
ADN-polimeraza
- ADN-polimeraza III-replicare ADN
- ADN-polimeraza I-reparare leziuni
Enzime de:
u.v.
Polimerizar ARN- polimeraza
- ARN-polimeraza - n transcr.
e
(ARNt, ARNr, ARNm) i sinteza
primerului ARN n repl. ARN
ADN- ligaza
- Leag capete5-fosfat cu 3 hidroxil;
Modificare
n replicare, sinteza reparatorie,
recombinare.
ADN- metilaza
- Eco RI- metilarea nucleoidelor
subliniate n secvenele:
5- G A A T T C -3
3- C T T A A G -5
Endonucleaz de
- Eco RI- endonucleaza la locurile
restricie
indicate cu n:
5- G A A T T C -3
3- C T T A A G -5
Endonucleaz
care
- ADN-giraza - despiralarea
- Nucleaze
cresteaz i nchide
ADN-ului n replicare
Endonucleaza de
- Endonucleaza u.v.r. A,B- excizia
reparare u.v.
dimerilor de timin
Ribonucleaza H
- ndeprtarea ARN primer aprut n
timpul replicrii ADN-ului.
Recombinarea
- Poate urma transferului intercelular de material genetic.
- Reprezint o interaciune ntre dou secvene diferite de ADN, cu
cteva mecanisme moleculare:
Recombinarea omoloag - se petrece ntre regiuni care au n cea mai
mare parte aceleai secvene de nucleotide, prin asimilarea de catene, sub
controlul genei REC (de recombinare).
Recombinarea neomoloag - se petrece ntre secvene care nu au
omologie de nucleotide, prin rupere i reunire ulterioar de catene.
- recombinarea situs specific - prin bacteriofagi.
- recombinarea nelegitim - prin secvene de inserie (IS).
68
Relaii ntre repliconi

Relaii cromozom-plasmide
- Comportamentul epizomal plasmidic
- Replicarea - stringent - la plasmidele mari
- relaxat - la plasmidele mici
Relaii cromozom-material genetic fagic
- Comportamentul epizomal al genomului fagic (stare liber sau
stare integrat n cromozom)
Relaii ntre plasmide
- Relaii de indiferen
- Relaii de excludere de suprafa, conferite de ctre unele gene ale
operonului TRA (de transfer).
- Relaii de incompatibilitate: o plasmid conjugant dintr-o celul
bacterian se poate opune ptrunderii n celul a altei plasmide omoloage.
Din acest tip de relaii rezult subgrupe de incompatibilitate, subgrupe ce
pot aduce un criteriu de clasificare suplimentar (exemplu: la E. Coli exist 15
subgrupe de incompatibilitate).
Relaii transpozoni-repliconi bacterieni
- Transpozonii reprezint elemente genetice mobilizabile pe
repliconi, motiv pentru care se terg diferenele dintre ereditatea
cromozomial i cea extracromozomial (dat fiind transferul lor n dublu
sens).
transpozoni
Material genetic
Material genetic
cromozomial
extracromozomial
Reglarea genetic a metabolismului bacterian

Modelul operonului
n 1961, Jakob i Monod descriu acest model pentru operonul care
codific sinteza lactozei (operonul LAC).
Cercettorii pornesc de la ipoteza c acest operon este alctuit din 2
categorii de gene: gene structurale, necesare pentru sinteza protein-enzimelor
i gene funcionale: operator, promoter, represor.
Reglajul genetic este de tip:
- inductibil - intervine n sinteza enzimelor implicate n catabolism
- represibil - intervine n sinteza enzimelor implicate n anabolism
69
Sistemul inductibil
n acest sistem, substratul, substana de catabolizat, interacioneaz
cu represorul activ i l inactiveaz (deci substratul lactoza - este un
inductor).
Represorul inactivat nu mai acioneaz asupra operonului i genele
structurale S1, S2, S3 vor produce enzimele de degradare ale substratului lactoza.
Sistemul represibil
- Substana sintetizat (produsul final al cii anabolice - activeaz
represorul. Substana sintetizat este un corepresor).
- Represorul activat se leag de operator, cu blocarea consecutiv a
genelor structurale i cu sistarea sintezei substanei respective.
Controlul genetic prin reele de operoni
Reglonul
Reprezint o reea de operoni care au un reglator comun, fie
stimulator, fie inhibitor.
Stimulonul
Reprezint un complex de gene poziionate separat pe cromozom, dar
care rspund coordonat fa de anumii stimuli din mediul extern.
Exemplu: controlul factorilor de patogenitate la Shigella dysenteriae
(negativ la 30C, pozitiv la 37C).
Controlul genetic la nivelul operonilor prin structura promoterului
Structura promoterului i permite acestuia s lege n mod diferit mARN polimeraza, n funcie de secvenele de nucleotide ale promoterului.
Apariia mutaiilor n promoter - i modific acestuia capacitatea de
legare a m ARN polimerazei.
Controlul genetic al operonilor prin structura m-ARN
polimerazei
m - ARN polimeraza - este un complex de molecular 2 'n
- fiecare factor confer o capacitate diferit de legare a m-ARN
polimerazei de promoter.
Sisteme de reglare posttranscripional a operonilor

Controlul metabolismului bacterian prin retroinhibiie (feed-back) (pentru enzime alosterice)
Este o reglare prin produs final. Prezena produsului final n cantiti
mari, determin inhibiia enzimelor alosterice, prin modificri
conformaionale ale centrului activ al enzimelor.
70
Ex.: - Calea metabolic de la treonin la izoleucin necesit 4

enzime.
- Izoleucina (n cantitate mare) se leag de enzimele alosterice,
modificndu-le conformaia. n final, calea metabolic este blocat de ctre
izoleucina n exces.
Ci metabolice ramificate
n metabolismul teleonomic bacterian se face o reglare secvenial
pentru fiecare ramur metabolic n parte.
D ---> F
A --> B --> C
E ---> G
(-)
G inhib (-) E, dar F nu inhib D (F se sintetizeaz)
Reglarea prin spoturi fierbini (hot spots)
Hot spots - sunt molecule de 3,5 diguaninfosfat, care intervin n:
- reglarea sintezei t ARN (acionnd asupra aminoacil t-ARN sintetazei).
- pentru cele 60 de molecule de t ARN diferite exist mecanisme
proprii.
Procesul de atenuare
ntlnit la operonii implicai n sinteza de aminoacizi.
A fost studiat operonul triptofanului.
Traducerea mesajului genetic ar fi reglat (n acest operon) de ctre
structuri conformaionale particulare ale moleculei de m-ARN polimeraza.
Sisteme de reparare ale moleculei ADN afectate
Sunt sisteme care:
Previn sau corecteaz mutaiile.
mpiedic persistena n celul a unui ADN strin.
Sisteme ce corecteaz sau previn mutaiile:
1. Repararea prin excizie
2. Fotoreactivarea
3. Sistemul SOS
1. Repararea prin excizie
Este un mecanism enzimatic, care se realizeaz prin:
a. endonucleaze - recunosc situsul erorii i cliveaz molecula de
ADN.
b. exonucleaze - excizeaz nucleotidele modificate
71
c. ADN polimeraza 1 - resintetizeaz segmentul excizat, utiliznd

ca matri catena complementar
d. ADN ligaza - reface continuitatea catenei reparate
2. Fotoreactivarea
Mecanism prin care se corecteaz mutaiile produse de ctre radiaiile
ultraviolete.
Procesul este enzimatic.
Enzima este Helicaza 2, produsul genei UVR 2, ce stimuleaz
aciunea unor endonucleaze, care ndeprteaz secvene modificate de
aproximativ 12 nucleotide (ndeprteaz dimerii de timin).
Ulterior intervin: ADN polimeraza 1 i ADN ligaza.
3. Sistemul SOS
Singurul sistem care intervine chiar n timpul replicrii (dac furca de
replicare este blocat).
- Sistemele 1., 2., intervin naintea replicrii.
Sistemul SOS e constituit din produii a 17 gene, care sunt represate
n mod normal prin gena lex A.
- Amorsarea sistemului SOS se face prin proteina REC-A (produsul
genei rec-A). Proteina REC-A are o funcie proteazic, degradnd produsul
genei lex A cu efect inhibitor (proteina. lex A este degradat).
- Proteina REC-A iniiaz recombinri genetice cu rol de
reparare.
mpiedicarea persistenei n celul a unui ADN strin
1. Modificare i restricie
- Sunt sisteme enzimatice cu specificitate de gazd.
- Sistemul asigur degradarea moleculelor de ADN strine ptrunse n
celula gazd:
- ADN plasmidic
- ADN fagic
- ADN al transpozonilor sau IS
- ADN cromozomial al altei celule
Modificarea
- Const n metilarea bazelor azotate ale ADN-ului self, n poziii
specifice de pe anumite secvene (secvene palindrom cu simetrie n oglind).
Restricia
- Este un proces de degradare controlat a unui ADN, prin
endonucleazele de restricie.
- Aceste enzime recunosc anumite secvene palindrom.
72
3'... G A A T T C... 5'

3'... G A A T T C... 5'
5'... C T T A A G... 3'
5'... C T T A A G... 3'
*
Legenda:
- Locul aciunii endonucleazelor de restricie pe secvenele
palindrom.
* - Bazele metilate, asupra crora nu mai acioneaz endonucleazele
de restricie.
Dup clivare, rezulta capete adezive, care se pot lega covalent (se
pot reinela sau se pot ataa de alte fragmente de ADN - vezi ingineria
genetic).
Tehnologia ADN recombinant

Bacteriile, prin multiplicarea lor rapid i economic sunt
instrumente cu randament impresionant pentru biosinteza unor produse ale
celulelor eucariote (hormoni, interferoni, antigene virale etc.) dac aparatului
bacterian de biosintez i se transmite mesajul necesar acestor sinteze.
Genetica bacterian a oferit posibilitile tehnice pentru clonarea in
vitro a ADN-ului strin n vectori adecvai / molecule de ADN cu caractere
de replicon, cum ar fi plasmidele sau fagii temperai - cosmidele. Cu ADN
hibrid astfel obinut, o tulpin bacterian (de obicei E. Coli) poate fi
transformat. Acesta este principiul ingineriei genetice.
Tehnologia de clonare molecular a ADN poate fi rezumat:
- Vectorul i molecula de ADN sunt supuse aciunii unei
endonucleaze de restricie capabil de a realiza o clivare decalat a catenelor
de ADN, care genereaz capete adezive (care se pot lega covalent). Dac se
utilizeaz aceeai enzim de restricie (de exemplu HIN D III), pe ambele
molecule ADN vor apare aceleai capete adezive.
- Fragmentele de ADN strin i vector, amestecate, se circularizeaz
i n prezena unei ADN ligaze, se leag covalent. Rezult molecule hibride
n care fragmente de ADN strin cu diferite lungimi - sunt inserate covalent
n vectori.
- Cu amestecul de ADN se transform o tulpina de E. Coli K 12 i
utiliznd tehnici de selecie adecvate, se pot izola transformani care exprim
determinantul strin clonat.
- Un vector plasmidic poate transporta 5-10 kp baze de ADN strin,
iar o cosmid poate conine pn la 50 kp baze de ADN strin (kp baze=
kiloperechi de baze azotate).
Avantajele biotehnologiei sunt imense:
- Obinerea pe scar industriala a interferonilor, vaccinurilor,
hormonilor, enzimelor
73
- Diagnosticarea unor boli genetice nc din perioada intrauterin.

- Obinerea hrilor genetice, identificarea diverselor elemente
genetice: plasmide, transpozoni, secvene de inserie.
- Diagnostic de laborator n bolile cu germeni greu cultivabili sau n
boli virale. De exemplu, tehnica PCR (polimerase chain reaction - reacia
n lan a polimerazei - poate identifica chiar i fragmente de acid nucleic
bacterian sau viral. Pornind de la civa primeri de polimerizare, o
polimeraz poate amplifica de cteva milioane de ori un fragment de acid
nucleic, astfel nct acesta s poat fi detectat).
- Precizarea determinismului genetic al factorilor de patogenitate
bacterieni.
- Sinteza anticorpilor monoclonali cu specificitate de epitop.
Variaia genetic este premisa adaptrii la mediu dar i un mod
continuu de perfecionare a factorilor de patogenitate bacterieni.
74
CAPITOLUL 5
CHIMIOTERAPIE ANTIBACTERIAN
Descoperirea i producerea pe cale industrial a chimioterapicelor
antibacteriene i utilizarea lor n practica medical a constituit un mare
succes n reducerea mortalitii prin bolile infecioase.
Chimioterapicul - Este o substan cu aciune antibacterian, care
mpiedic dezvoltarea bacteriilor n organism, n doze mici, printr-o aciune
selectiv la nivelul unor ci metabolice bacteriene.
Terapia antiinfecioas s-a dezvoltat pe dou ci distincte:
Prin obinerea antibioticelor - care sunt substane obinute prin
purificarea unor produi de metabolism bacterian. Exemplul Penicilinei
notatum (1929 Fleming) este ilustrativ n acest sens.
Prin obinerea de chimioterapice propriu-zise, substane de sintez
chimic.
n prezent aceast clasificare nu i mai are rostul, deoarece i
produsele de metabolism bacterian pot fi sintetizate chimic; multe din
produsele folosite azi sunt substane de semisintez. Din acest punct de
vedere, pare mai corect noiunea de chimioterapic.
Scurt istoric
1929 - Fleming - descoper Penicilina, ca produs natural de
metabolism al mucegaiului Penicillium notatum.
1940 - Florey i Chain purific Penicilina i o introduc n activitatea
medical.
Paul Erlich - este ntemeietorul chimioterapiei antibacteriene;
- a testat aprox. 600 de substane privind aciunea
antibacterian
- a descoperit principiul aciunii selective a
chimioterapicelor.
1935 - Domagk - a descoperit prima Sulfamida (Prontozilul) cu
aciune antibacterian cu spectru larg.
Efectul chimioterapicelor
Efect bacteriostatic - diminueaz rata de multiplicare bacterian.
- este mai puin eficient.
Efect bactericid
- chimioterapicul lizeaz celula bacterian.
- efect de realizat n tratament.
75
Noiunea de chimioterapic ideal:

- S aib toxicitate selectiv (s nu fie toxic pentru macroorganism).
- S aib un spectru antimicrobian suficient de larg.
- S fie bactericid.
- S difuzeze n focarul de infecie.
- S persiste timp suficient n organism.
- S nu determine reacii adverse.
- S acioneze n perioada de multiplicare bacterian exponenial.
- Bacteria respectiv s nu dezvolte rezisten la chimioterapic.
Noiunea de spectru de aciune

Spectrul antimicrobian al unui antibiotic este suma speciilor care au
toate sau aproape toate tulpinile sensibile la antibioticul respectiv.
Spectrul natural se refer la specia bacterian.
Spectrul actual se refer la tulpini sau grupuri de tulpini bacteriene
i este mai restrns dect cel natural.
Spectrul real este spectrul de sensibilitate la chimioterapice al unei
singure tulpini bacteriene i este determinat prin antibiogram.
Chimioterapicul de rezerv
Este un chimioterapic cu utilizare n mod deliberat restrns, sub
controlul riguros al oportunitii administrrii sale - n intervalul pn la
determinarea spectrului real de sensibilitate al tulpinii bacteriene infectante
sau/i cnd aceasta este rezistent la chimioterapicele uzuale.
Utilizarea chimioterapicelor de rezerv ar trebui restrns la tratarea
infeciilor bacteriene care amenin viaa bolnavilor.
Familii de chimioterapice:
Chimioterapicele se grupeaz n familii, dup criterii variate:
- origine i structur chimic
- spectru de aciune
- mecanism de aciune
- efect asupra bacteriilor (bacteriostatic sau bactericid).
innd cont de spectrul de aciune, chimioterapicele antibacteriene
pot fi clasificate astfel:
Familii de chimioterapice cu spectru de aciune larg:
Aminoglicozide:
- Kanamicina
- Gentamicina
- Amikacina, Tobramicina .a.m.d.
76
Tetracicline:
- Tetraciclina, Oxitetraciclina,
- Rolitetraciclina,
- Doxiciclina, Clortetraciclina .a.m.d.
Cloramfenicoli:
- Cloramfenicol, Thiamfenicol
Sulfamide:
- Sulfatiazol, Sulfafurazol, Biseptol,
Ftalilsulfatiazol.
Nitrofurani:
- Furazolidon, Nitrofurantoin
Familii de chimioterapice cu spectru de aciune restrns:
Macrolidele:
- Eritromicina
- Spiramicina
- Oleandomicina .a.m.d.
Polipeptidele ciclice:
- Polimixine
Tuberculostatice:
- Hidrazida acidului izonicotinic (HIN)
- Acidul para-aminosalicilic
- Etambutol
Anti-anaerobi:
- Metronidazol
- Clindamicina
Quinolone:
- Norfluoxacin
- Acid nalidixic, etc.
Familii de chimioterapice cu poziie particular (cu spectrul iniial
restrns i apoi lrgit prin noi sinteze)
Beta-lactamine:
- Penicilinele
- Ephitard
- Moldamin
Chimioterapice:
- anti Pseudomonas: Carbenicilina
(Pyopen)
Ticarcilina
Ureidopenicilina
- anti Stafilococ: Oxacilina
- cu spectru larg: Ampicilina,
Amoxicilina
Cefalosporinele
- reprezentani generaia I: Cefalotin
generaia II: Cefoxitin
generaia III: Moxalactam
Oligozaharidele:
- Streptomicina
Lincomocinele
Peptolidele:
- Pristinamicina
- Virginamicina
Alte chimioterapice (CT):
77
CT antifungice :
Polienele:
CT. antiprotozoarice:
derivaii de Imidazol:
CT. antihelmintice:
- Amfotericina B
- Nistatin
- Tinidazol
- Metronidazol
- Levamisol (Decaris)
- Vermox
Clasificarea chimioterapicelor dup mecanismul de aciune:

Antibiotice cu aciune pe peretele celular:
lactamine
Cicloserina
Bacitracina
Vancomicina
HIN (Hidrazida acidului izonicotinic)
Chimioterapice cu aciune pe membrana citoplasmatic:
Polimixine
Gramicidina
Tirocidina
Polienele
Imidazolii
Chimioterapice care inhib sinteza proteinelor la nivelul ribozomal
Cu aciune pe subunitatea ribozomal:
30 S: Aminoglicozidele
Tetraciclinele
50 S: Cloramfenicolul
Macrolidele
Chimioterapice care inhib direct sinteza acizilor nucleici
Sulfamidele
PAS
Trimetoprim, Biseptol
Quinolone
Rifamicine
Celula are receptori pentru chimioterapic.
Chimioterapicul interacioneaz cu celula printr-un ligand
(interaciune ligand - receptor).
78
Mecanisme moleculare de aciune ale chimioterapicelor

Chimioterapice cu aciune pe peretele celular
Penicilinele
Mecanisme de aciune:
- Blocheaz sinteza peptidoglicanului, prin blocarea formrii
legturilor interpeptidice.
- Inactiveaz inhibitorii autolizinelor proprii PC bacterian (PC se
distruge masiv). De aici rezulta un efect bactericid.
- Nu sunt toxice pt. organismul uman, deoarece celulele eucariote nu
au PC (au toxicitate selectiv).
- Se pot administra n doze mari att la gravide ct i la nou nscui.
Mecanism de rezisten:
- Producerea de lactamaze, exemplu: stafilococul.
- Ca o particularitate, sunt totdeauna sensibile la penicilina G (fr
dezvoltarea rezistenei): Streptococul hemolitic grup A, Treponema
pallidum.
Cefalosporinele:
- Sunt lactamine de semisintez, neatacate de lactamaze.
- Au spectru mai larg dect cel penicilinic.
- Mecanism de aciune pe peretele celular.
Cicloserina:
Mecanism de aciune:
- Blocheaz sinteza unitii repetative din peptidoglican, prin blocarea
enzimelor D-Alanin sintetaza i Alanin racemaza
- Foarte toxic, utilizare restrnsa din acest motiv.
Vancomicina
Mecanism: Blocarea legturilor interpeptidice din peptidoglican.
Bacitracina
Mecanism de aciune:
- mpiedic transportul de precursori pentru PC (interfer cu lipidele
carrier).
- Decuplarea fosforilrii prin transfer de electroni, cu aciune comun
pe PC i MC.
- Foarte toxic, se folosete rar.
Hidrazida acidului izonicotinic
Mecanism de aciune:
- Inhibiia sintezei acidului micolic din PC.
- Este bacteriostatic (regenerarea bacteriei prin refacerea PC).
79
Fig. 16 Ex. de sctructura chimic chimioterapice
80
Chimioterapice cu aciune pe membrana citoplasmatic

Polimixinele:
Mecanism:
- Acioneaz asupra membranei citoplasmatice, distorsionndu-i
structura, ntocmai ca i detergenii cationici; astfel, celula pierde diferite
substane.
Efect: - bactericid, restrns numai la bacterii gram negative.
- Sunt mai active pe cale parenteral.
- Utilizri terapeutice au Polimixina B i E.
Polienele:
Mecanism:
- Se leag de sterolii din MC a fungilor (bacteriile nu au steroli n MC
- deci sunt inactive pe bacterii).
- Produc perturbarea funciei de membran osmotic.
Efect: - fungicide
Reacii adverse: toxice.
Imidazolii:
Mecanism: - Blocheaz sinteza lipidelor membranare.
Efect: - anti-protozoare i anti-bacterii anaerobe.
CT ce acioneaz pe ribozomi - inhibarea sintezei proteice
Cu aciune pe subunitatea 30 S.
Aminoglicozidele
Mecanism de aciune:
- Se fixeaz pe proteina S12 a subunitii ribozomale 30 S i:
- Blocheaz formarea complexului de iniiere al sintezei proteice.
- Blocheaz formarea polizomilor (stabilizeaz monozomii).
Efect: bactericid puternic; parenteral sunt foarte eficiente.
Reacii adverse:
- ototoxicitate (afectarea perechii a VIII-a a nervilor cranieni.
- nefrotoxicitate
- sensibilizri - n administrri prelungite.
Tetraciclinele
Mecanism de aciune:
- Se fixeaz pe subunitatea 30 S
- Inhib sinteza proteic prin blocarea fixrii aminoacil - t-ARN la mARN (se blocheaz elongarea lanului polipeptidic).
Efect: - bacteriostatic.
Reacii adverse: - Nu se administreaz n timpul sarcinii (produce
malformaii).
81
Cu aciune pe subunitatea ribozomal 50 S :

Cloramfenicolul
Mecanism: - Inhib peptidil-transferaza, blocheaz elongarea lanului
polipeptidic.
Efect: - Bacteriostatic
Reacii adverse: - distrugerea celulelor stem medulare, cu anemie
aplastic letal
- rezistena apare la bacteriile care produc
acetiltransferaz.
Macrolidele (Eritromicina)
Mecanism: - Se fixeaz pe r-ARN 23 S al subunitii 50 S
- Blocheaz translocarea ribozomului pe m-ARN
(mpiedicarea elongrii lanului polipeptidic)
Lincomicina - posed exact acelai mecanism.
Clindamicina
Efect: - ultimele 3 chimioterapice sunt bacteriostatice
- rezistena la acestea poate s apar dup modificarea intei
moleculare, prin metilarea r-ARN.
Inhibarea sintezei acizilor nucleici

Sulfamidele
Mecanism: - Sunt analogi structurali ai acidului paraaminobenzoic
(PABA), metabolit necesar pentru sinteza acidului folic.
- nlocuiesc PABA din calea metabolica, prin similitudine structural
i blocheaz astfel sinteza acidului folic.
Reacii adverse: - Reacii de sensibilizare la unii pacieni
Nu pot aciona asupra bacilului tuberculos.
Trimetoprimul
Mecanism: - Blocheaz sinteza acidului folic prin inhibarea
dihidrofolat reductazei.
- Acioneaz sinergic cu sulfamidele, se asociaz (ex.: Biseptolul, ca
preparat retard).
Rifampicina
Mecanism: - Se fixeaz pe ARN polimeraza ADN dependent i
blocheaz transcrierea mesajului genetic.
Efect: - Bactericid
Acidul nalidixic
Mecanism: - Blocheaz giraza ADN i apoi replicarea ADN
Efect: - Bactericid
82
Acelai mecanism pentru Novobiocina

Acidul para-aminosalicilic (PAS)
Mecanism: - Determin sinteza unui acid folic nefuncional.
Efect: - Bacteriostatic, slab antituberculos.
Ctigarea rezistenei la chimioterapice
Se realizeaz prin:
- mecanisme genetice
- mecanisme biochimice
Mecanisme genetice
Rezistena cromozomial - Este o eventualitate rar, iar selecia o
realizeaz numai chimioterapicul corespunztor variantei rezistente.
Rezistena extracromozomial
Rezistena plasmidic - Are cea mai mare importan n ctigarea
rezistenei, deoarece plasmidele R se pot rspndi epidemic ntr-o populaie
bacterian, n urma fenomenului de conjugare.
Plasmidele R conjugante pot s asigure i mobilizarea unor plasmide
R mici, neconjugative, prin fenomenul de cointegrare a unei plasmide
neconjugante ntr-o plasmid conjugant.
Transducia i transformarea completeaz posibilitile transferului
genetic al plasmidelor mici.
Transpoziia - Are un rol aparte n evoluia plasmidelor R
(conjugante sau nu); exist evidene c transpozonii de rezisten se pot
nscrie pe scheletul unor plasmide, conferindu-le permanent noi
determinani de rezisten. n acest mod, se poate transmite rezistena n bloc
pentru un set de chimioterapice. nscrierea pe acelai schelet plasmidic a
multiple copii ale unui transpozon (TN) de rezisten, asigur adaptarea la
concentraii crescute de chimioterapic.
- Aa ne explicm de ce ntre 60 i 90 din rezistena la
chimioterapice a bacteriilor patogene este mediat plasmidic; bacteriile
patogene care i-au pstrat sensibilitatea natural faa de antibioticele de
elecie sunt extrem de puine: aa sunt Streptococcus pyo-genes, Treponema
pallidium i leptospirele, care au rmas nc sensibile la Penicilina G.
83
Mecanismele biochimice de dobndire a rezistenei la

antibiotice:
1. Inactivarea enzimatic a chimioterapicului.
2. Lipsa sau modificarea intei moleculare a chimioterapicului.
3. untarea reaciilor metabolice blocate de ctre chimioterapic.
4. Lipsa permeabilitii pt. chimioterapie a nveliurilor celulare
bacteriene.
1. Inactivarea enzimatic a CT
Ex.: Rezistena bacterian la lactamine apare prin producerea
enzimelor denumite lactamaze. De exemplu, stafilococul aureo hemolitic
este secretor de penicilinaze.
De aceea, Cefalosporinele (de semisintez) au fost concepute ca s nu
fie inactivate de lactamaze.
2. Lipsa sau modificarea intei moleculare a chimioterapicului
Ex.: Rezistena bacterian la aminoglicozide apare prin modificarea
proteinelor ribozomale care leag antibioticele (modificarea proteinelor
receptor).
Rezistena la macrolide apare prin metilarea r-ARN sau alterarea
proteinei ribozomale L4 - acelai mecanism de alterare al receptorilor.
3. untarea reaciilor metabolice blocate de ctre chimioterapic
Spre exemplu, populaiile bacteriene rezistente la Sulfamide, folosesc
acid folic preformat din mediu (acid folic produs de ctre macroorganismul
infectat), astfel nct bacteria nu mai are nevoie s-i foloseasc propria cale
metabolica de sintez a acidului folic. Astfel, rezistena bacterian la
sulfamide poate apare relativ uor.
4. Lipsa permeabilitii nveliurilor celulare pentru un anumit
chimioterapic
Spre exemplu, tetraciclinele acioneaz numai dup obinerea unei
anumite concentraii de chimioterapic n celula bacterian.
Tulpinele de streptococ sunt impermeabile n mod natural la
tetracicline, fapt care explic mecanismul de rezisten.
Ca observaie final, putem preciza faptul c marea majoritate a
bacteriilor au mai multe mecanisme biochimice de rezisten, care acioneaz
n paralel cu mecanismele genetice de dobndire a rezistenei la
chimioterapice.
84
Reguli de administrare ale chimioterapicelor antibacteriene

Tratamentul antibiotic sau chimioterapic se administreaz
ntotdeauna n urma unui diagnostic de laborator de infecie bine precizat,
administrnd chimioterapicul antibacterian, antimicotic, antiparazitar
corespunztor.
Instituirea tratamentului cu chimioterapice are loc ntotdeauna dup
ce s-au recoltat toate produsele patologice.
n infeciile virale au eficien doar cteva preparate specifice
antivirale. CT prezentate anterior nu au nici un efect n infeciile virale.
CT se administreaz ntotdeauna dup indicaiile antibiogramei,
care precizeaz spectrul actual al fiecrei tulpini n parte.
Este de preferat monoterapia intit, folosind indicaiile
antibiogramei (se alege CT cu diametrul zonei de inhibiie ct mai mare,
bactericid).
Asocierile de chimioterapice se prefer n: tratamente de lung
durat, asocieri clinice plurietiologie, n cazuri clinice grave (septicemii)
Exemplu de asociere (se asociaz CT cu efect sinergic):
CT: lactamina + Aminoglicozid + Metronidazol
Spectru: (coci gram +) (coci gram (anaerobi

bacili gram -)
protozoare)
n supuraii colectate superficiale sau profunde, tratamentul CT
devine eficient dup evacuarea pe cale chirurgical a secreiilor purulente.
Profilaxia prin CT: se face numai n cazuri justificate, la anumite
persoane din anturajul celui bolnav.
Nu se aleg CT cu reacii adverse severe i mai ales nu se
administreaz la bolnavii care au i alte afeciuni care le contraindic. Spre
exemplu, aminoglicozidele se administreaz cu mare pruden la bolnavi
renali, n funcie de o anumit valoare a Cleareance-lui la creatinin. De
asemenea, aminoglicozidele nu se administreaz la hipoacuzici.
CT se administreaz strict:
- n infecii localizate se administreaz numai CT difuzibile n focar.
- CT nu se subdozeaz.
- se respect cu strictee intervalul dintre administrri, precum i
durata minim a tratamentului chimioterapic.
- nu se schimba antibioticul prea frecvent.
- nu se menine n tratament un CT care in vivo nu d rezultatele
scontate.
85
- nu se continu tratamentul cu CT respectiv dac au aprut reaciile

adverse.
Principalele reacii adverse ale chimioterapicelor

Aproape toate chimioterapicele pot produce sensibilizri i reacii
alergice.
Penicilinele pot produce boala serului sau ocul anafilactic la
anumii subieci. Ampicilina poate produce reacii eritematoase intense,
punnd probleme de diagnostic diferenial cu alte afeciuni cutanate.
Aminoglicozidele pot produce nefrotoxicitate i ototoxicitate, prin
afectarea perechii a VIII-a a nervilor cranieni.
Cloramfenicolul - prin toxicitatea medular - produce sindroame
anemice grave.
Toate chimioterapicele, prin folosire intempestiv - pot genera
dismicrobisme; se distrug bacteriile comensale din microbiocenoze i este
favorizat dezvoltarea excesiv a Candidei albicans; la sfritul
tratamentului chimioterapic pot apare stomatite, esofagite, vaginite
micotice. Chimioterapicele care inhib sinteza acizilor nucleici i sinteza
proteic, produc malformaii grave la nivelul produsului de concepie.
Antibioticele respective se folosesc cu mult pruden la gravide, luze i
nou nscui.
86
CAPITOLUL 6
INFECIE I IMUNITATE
Relaii ecologice ale microorganismelor
Microorganismele sunt o component a biosferei.
Microbiocenozele sunt amestecuri de populaii bacteriene, ntre care
se stabilesc anumite relaii ecologice:
Relaii ecologice ntre microorganisme
Relaii de neutralitate
Relaii de sinergism
Relaii de antagonism
Neutralitate : microbiocenozele organismului uman.
Sinergism: Spre exemplu fenomenul de satelitism al speciei
Haemophilus influenzae, bacterie ce se dezvolt mai bine n jurul coloniilor
de Stafilococcus aureus (stafilococul produce factorii de cretere necesari
Haemophylus-ului).
Antagonism: Unele populaii bacteriene inhib dezvoltarea altora
prin:
- bacteriocine
- competiia pentru substane nutritive
- modificri de pH etc.
exemplu: ecosistemul bacterie - bacteriofag.
Relaii ecologice microorganisme - factori de mediu
- Microorganismele contamineaz - aerul, apa i solul.
Relaii ecologice microorganisme - macroorganisme
n relaia cu omul exist:
microorganisme
- saprofite - folosesc materia moart sau materii anorganice
- parazite - stricte - folosesc ca substrat organismele vii
- facultative - folosesc materie vie sau moart.
87
Microorganismele parazite stricte, funcie de capacitatea de a produce

infecii sunt:
microorganisme patogene de ordinul I:
microorganisme cu patogenitate cert
- produc ntotdeauna mbolnviri
microorganisme - patogene de ordinul II
- sunt patogeni oportuniti, produc infecie la organismele tarate
imunologic.
Comensalismul
- Tip particular de relaii micro - macroorganism, din care nu rezult
efecte nocive asupra macroorganismului (flor bacterian normal).
- Limitele colonizrii sunt dependente de barierele antimicrobiene ale
fiecrui teritoriu n parte.
La om exist:
Zone practic sterile
- ntregul mediu intern (snge, lichid cefalorahidian etc.)
- cavitile seroase (pleurale, articulare etc.)
- esuturile
Zone contaminate dar necolonizate

- bariera acid gastric
|
- enzimele digestive
| scad drastic numrul
- bila
| bacteriilor (local)
Zone normal colonizate ale organismului

- cu bacterii comensale. Organismul uman posed:
- 1013 celule proprii
- 1014 celule bacteriene
De aici rezult principalele microbiocenoze ale organismului:

- ale tegumentului i conjunctivelor
- ale cavitilor - nazal, bucal, faringian.
- ale ileonului inferior i ale colonului
- ale uretrei
- ale vaginului
88
Exemple de microbiocenoze
1. Microbiocenoza tegumentului:
- Stafilococ epidermidis, aureus
- Propionibacterium acnes
- Chorynebacterii nepatogene
- Streptococi - diferite specii
2. Microbiocenoza nazal
- Stafilococ epidermidis
- Stafilococ aureus
- Chorynebacterii comensale
- Neiserii comensale
- Haemophilus influenzae
3. Microbiocenoza bucal i a faringelui
- Coci gram pozitivi: Streptococi - viridans
- grup A
- non grup A
- pneumoniae
Stafilococi coagulazo negativ sau pozitiv
- Anaerobi nesporulati gram negativi: Veillonella
Fusobacterium
Bacteroides
- Anaerobi gram pozitivi:
Peptococcus,
Peptostreptococus
Actynomices
- Cocobacili:
Haemophilus (influenzae i
parainfluenzae)
- Bacili gram negativi:
Enterobacterii (n cantiti reduse)
- Fungi:
Candida albicans
- Virusuri:
Herpes simplex
4. Microbiocenoza intestinal (colon)
- Anaerobi gram negativi:
Bacteroides; Fusobacterium
- Anaerobi gram pozitivi:
Clostridium
Peptococcus
Peptostreptococcus
Bifido bacterium
- Enterobacteriacee gram -:
Coli, Klebsiella
Enterobacter, Proteus
89
- Fungi:
Candida albicans
- Virusuri:
Adenovirusuri (la copii mai ales)
Microbiocenoza colon de tip adult: predomin anaerobii gram
negativi.
Microbiocenoza colon de tip sugar: predomin anaerobii gram
pozitivi.
Majoritatea bacteriilor din colon sunt anaerobe. 20 din greutatea
fecalelor e reprezentat de bacterii.
5. Microbiocenoza vaginal
- Bacili gram pozitivi i negativi anaerobi
- Coci anaerobi: Peptococcus, Veillonella
- Lactobacillus (abundent la un pH vaginal acid)
- Haemophilus vaginalis
- Ureaplasma urealiticum
- Fungi: Candida albicans
Disbioza
nseamn o colonizare microbian anormal, face trecerea de la
comensalism la parazitism.
Cauze perturbatoare ale colonizrii bacteriene:
1. Lipsa sau insuficiena unor bariere antimicrobiene:
Exemplu: pacienii cu aclorhidrie gastric au bacili Coli n numr mai
mare de 1016 germeni/ml.
2. Modificri cantitative i calitative ale substratului oferit pentru
dezvoltare:
Exemplu: tenul seboreic stimuleaz colonizarea cu stafilococ.
3. Perturbarea echilibrului bacterian dup un tratament intempestiv cu
antibiotice:
Exemplu: apariia infeciilor cu Candida albicans dup acest
tratament.
4. Suprapunerea unor tulpini bacteriene de spital mai virulente
dect cele obinuite.
Rolul bacteriilor comensale (funciile microbiotei indigene)
Au fost studiate pe animale axenice (germ free), puiul de animal
fiind extras prin operaie cezarian i ferit de germeni, pentru a preveni
colonizarea bacterian.
90
Funcii nutritive
- microbiocenoza intestinal furnizeaz gazdei vitamine: complex B,
E, K.
- microorganismele pot digera
(metabolizeaz lipide sau compui azotai).
parial
anumite
alimente
Funcii de protecie
- microorganismele comensale se opun colonizrii zonei cu
microorganisme patogene prin: - bacteriocine
- competiia pentru substane nutritive.
Aprare imunologic
- microorganismele comensale au rol n maturarea morfofuncional a
sistemului imun limfoid (stimuleaz activitatea centrilor germinativi din
ganglionii limfatici).
Dezvoltarea intestinului
- la animale axenice, musculatura intestinal e foarte slab dezvoltat,
iar cecul are un volum de 6 ori mai mare dect cel normal i un coninut
enorm de mucus. De aici se deduce implicarea bacteriilor comensale n
dezvoltarea intestinului.
Infecia
Infecia reprezint perturbarea homeostaziei, n urma conflictului
dintre microorganism i macroorganism.
Microorganismul acioneaz prin factorii si de patogenitate.
Macroorganismul acioneaz prin rspuns imun.
Specificitatea etiologic a infeciei:
Un anumit agent etiologic determin un anumit tip de rspuns imun i
o anumit boal infecioas.
Postulatele lui Koch
Cuprind condiiile pe care trebuie s le ndeplineasc un
microorganism, pentru a putea fi considerat patogen:
1. Microorganismul patogen trebuie s fie prezent n toate cazurile de
boal.
2. El trebuie izolat i meninut n cultur pur.
3. Cultura inoculat la animalul de laborator produce infecia
caracteristic.
4. Trecerea prin infecie duce la instalarea imunitii specifice.
91
n lumina cunotinelor actuale, aceste postulate ar trebui

reinterpretate, deoarece ele au anumite limite, de exemplu:
n cazul postulatului 1, microorganismul patogen poate fi izolat i de
la:
- purttori sntoi
- cazuri clinice asimptomatice, inaparente.
n cazul postulatului 2, exist bacterii ce nu pot fi cultivate pe medii;
exemplu bacilul leprei.
n cazul postulatului 3, acest postulat nu ine cont de rezistena fa
de infecie imprimat de specie (exista boli tipice pentru animal sau specifice
numai pentru om).
n unele cazuri, restructurrile imunologice nu se produc (exemplu
gonoreea).
Alteori, nrudirile antigenice dintre bacterii (ex.: Proteus OX19 i
Ricketsia prowazecki) dau reacii imunologice ncruciate.
Patogenitatea
Reprezint capacitatea unui microorganism de a produce infecia.
Este o proprietate de specie, care poate fi mbuntit prin
ereditatea extracromozomial. Se msoar prin virulen.
Virulena - se exprim n DML (doz minim letal)
1 DML - cantitatea cea mai mic de germeni care omoar 100 din
animalele de experien.
DL 50 - doza letal pentru 50 din animalele de experien.
DL 50 are mai puine erori dect DML.
Caracteristicile principale ale infeciei
Evoluia stadial
a. perioada de incubaie
- timpul scurs de la ptrunderea agentului etiologic n organism pn
la apariia primelor semne de boal.
- este caracteristic fiecrei infecii.
b. perioada de debut
- apar primele semne caracteristice ale infeciei.
c. perioada de stare
- tabloul clinic caracteristic pentru o anumita infecie.
d. perioada de terminare
- convalescena
92
Febra - Simptom comun tuturor infeciilor.

Modificrile sanguine
- n infecii bacteriene: neutrofilie, crete proteina C reactiv
- n infecii virale:
limfocitoz sau monocitoz, leucopenie
- n infecii parazitare: eozinofilie.
Mecanismele de transmitere
a. poarta de intrare:
- specific pentru fiecare infecie - microorganismul poate rmne
cantonat la poarta de intrare, sau poate difuza n snge (bacteriemie).
b. calea de eliminare:
- poate fi uneori aceeai cu poarta de intrare
c. calea de transmitere a infeciei de la individ la individ
- calea aerian (picturi Pflge)
- calea digestiv
- calea veneric
- vectori (mute, nari, purici etc.)
Clasificarea infeciilor
Poarta de intrare reprezint principalul mecanism de clasificare:
- infecii - respiratorii
- digestive
- cutanate etc.
Prognostic
Infecii acute - rspunsul imun e eficient i
- sunt urmate de vindecare dup zile - sptmni.
Infecii cronice (persistente)
- agentul etiologic rmne cantonat n organism i simptomele pot
persista luni - ani.
- rspunsul imunologic e perturbat.
Condiii de ndeplinit pentru ca un microorganism s fie patogen:
- S ptrund n organism i s adere de celule
- S se multiplice n esuturi
- S produc perturbri n homeostazie
- S anihileze factorii de aprare ai organismului gazd.
Aceste condiii sunt ndeplinite prin diveri factori de patogenitate
bacterian.
93
Patogenitate bacterian
Clasificarea factorilor de patogenitate bacterieni n funcie de
mecanismul lor de aciune n
- adezine
- invazine
- agresine
Adezinele
- factori care favorizeaz ataarea bacteriei pe suprafaa celulei care
va fi infectat.
- ptrunderea bacteriei n celul se face prin endocitoza bacterian
indus.
Exemple de adezine:
Pilii de la E. Coli
- aderare de glicoproteinele de pe suprafaa epiteliului intestinal.
- pilii CFA (factor antigenic de colonizare) codificai de ctre
plasmida Ent.
Pilii de la gonococ
- exista 4 tipuri antigenice piliare de gonococ.
- pilii S, proteina P2: rol de ataare pe receptorii de acid sialic ai
celulelor epiteliale.
- pilii au determinism cromozomial.
Proteina M piliar a streptococului hemolitic grup A
- cu rol de ataare pe receptorii de fibronectin ai mucoasei
faringiene.
- cu rol antifagocitar.
Pilii Bordetellei pertussis
- sunt factori de ataare ai Bordetellei pertusis de cilii cilor
respiratorii superioare.
- Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae - se ataeaz
prin piraterie, folosind aceste structuri ale Bordetellei.
Diverse proteine din membrana extern funcioneaz ca adezine:
Antigene de suprafa ale genului Chlamydia:
- ataare de celul prin receptori glicoproteici.
- formarea veziculelor de chlatrin, ce protejeaz bacteriile la
interiorul lor.
Antigene de suprafa ale genului Shigella:
- are un antigen de suprafa codificat plasmidic (gena VIR-F) ce
codific ataarea i penetrarea n celula epitelial a colonului => vacuole.
- hemolizina de contact lizeaz vacuolele, favoriznd rspndirea
Shigelelor nspre alte celule.
- reglarea genei VIR-F: prin stimulon.
94
Invazine
- reprezint produi toxici sau netoxici, secretai de ctre celulele
bacteriene, cu rol n difuzarea infeciei.
- toxinele sunt - exotoxine - secretate de ctre bacterii gram + i gram- endotoxine - eliberate prin liza corpului bacterian al
bacteriilor gram- produi extracelulari netoxici sunt produi enzimatici: colagenaze,
hialuronidaze, coagulaze, hemolizine, catalaza etc.
Tabelul nr.7 - Produi extracelulari toxici
EXOTOXINE
ENDOTOXINE
- Excretate de ctre bacterii n mediul n care se - Se elibereaz prin liza corpului
multiplic; sunt difuzibile
bacterian al bacteriilor gram - ;
nedifuzibile
- Natura proteic (polipeptide)
- Complexe lipopolizaharidice Lipidul A
are rol toxic.
- Termolabile (se inactiveaz la 60C)
- Termostabile - (rezist i la 100C).
- Puternic imunogene (induc formarea de - Nu induc formare de anticorpi
anticorpi neutralizani). Stimuleaz rspunsul neutralizani. Stimuleaz rspunsul imun
imun umoral.
celular.
- Cu formol se obin anatoxine (toxine cu - Nu se transform n anatoxine (nu se
capacitate imunogen pstrat i toxicitate pot prepara vaccinuri)
sczut)
- Anatoxinele sunt folosite ca vaccinuri ex.: anatoxina difteric, tetanic
- Majoritatea exotoxinelor sunt produse prin - Proprietate cromozomial dependent.
conversie lizogen sau prin plasmide
(determinism extracromozomial).
- Fiecare exotoxin are un mecanism de - Mai puin toxice.
aciune specific.
- Toate endotoxinele au tropism vascular
- Sunt foarte toxice
i produc oc endotoxic cu:
- Aciunea exotoxinelor este ireversibil i extravazarea plasmei
apare dup perioade variabile de laten.
hipotensiune arterial, edeme
leucopenie, pete hemoragice
- Fiecare exotoxin poate fi neutralizat numai - Aciunea endotoxinelor apare imediat,
att timp ct este circulant.
fr perioad de laten
- Clasificarea exotoxinelor dup mecanismul - ocul endotoxinic apare n urma
de aciune:
distruciei masive a bacteriilor gram
Exotoxine
- cu molecul bimodal
negative
(probabil
tratament
- Citotoxine,
intempestiv).
- Neurotoxine
- Endotoxinele produc avort la animale
- Enterotoxine
de experien gestante.
- Inocularea repetat a unor cantiti mici
de endotoxin realizeaz o imunizare
fa de efectele acesteia (experiene pe
animale).
95
96
Principalele mecanisme de aciune ale exotoxinelor

Exotoxine cu molecul bimodal
Toxina difteric
- fragmentul B cu rol de ataare pe celul (endocitoza receptor indus).
- fragmentul A - rol toxic - ADP riboziltransferaza - ribozileaz
factorul de elongare EF2 i inhib sinteza proteic).
Toxina este produs prin conversie lizogen (bacteriofagul tox).
Toxina piocianic
- cu mecanism asemntor celei difterice.
Toxina E. Coli
- tulpinile enteroinvazive produc 2 toxine Shiga-like: STL1, STL2 prin
conversie lizogen cu 2 bacteriofagi temperai diferii.
- fragmentul A blocheaz factorul de elongare EF1 al sintezei proteice.
Toxina Shigellei dysenteriae
- fragmentul B - ataare pe celula susceptibil
A - blocheaz factorul EF1 de elongare al sintezei
proteice
- toxina Shiga are efect - neurotoxic
- enterotoxic
- citotoxic (efect citocid)
Este una dintre cele mai puternice toxine cunoscute.
Toxina Bordetellei pertusis
- fragmentul B - ataare pe celul
- fragmentul A - ADP ribozilarea proteinei N 1 din sistemul de control
al adenilat ciclazei, cu creterea semnificativ a cAMP
- adenilat ciclaza calmodulin-dependent are efectele toxice (edem,
necroze).
Toxina Bacillus anthracis
- toxina are 3 componente antigen protector / fragment B
factor de edem |
fragment A
factor letal
|
- factorul de edem are toxicitate prin adenilat ciclaza calmodulin
dependent.
- factorul letal nu are mecanism de aciune cunoscut.
Toxina holeric
97
- enterotoxin bimodal.
- fragmentul B are rol n ataare pe receptorii GM 1 ai mucoasei
intestinale.
- fragmentul A realizeaz inactivarea proteinei G1 din sistemul de
control al adenilat ciclazei => crete cAMP - celula epitelial e comutat din
celula absorbant de ap i electrolii - n celul secretoare de ap i
electrolii.
- testul ansei ileale ligaturate este pozitiv.
- determinismul toxinei holerice este cromozomial.
Enterotoxinele
Toxina holeric - bimodal (discutat anterior).
E. Coli enterotoxigen (tulpini ETEC)
- ETEC - TL - termolabile
- TS - termostabile
- crete cGMP intracelular i transform celula n secretoare de ap i
electrolii.
- codificat plasmidic prin plasmida Ent.
- Plasmida Ent se poate transmite prin conjugare altor populaii
bacteriene, care produc mai rar un sindrom diareic:
Citrobacter
Campylobacter
Klebsiella
Bacillus cereus
Enterobacter
Pseudomonas aeruinosa, etc.
Stafilococul aureu
- secret 7 tipuri antigenice diferite de enterotoxine (A - F)
- cu codificare cromozomial i plasmidic.
- toxina stimuleaz terminaiile nervoase din intestin i centrul vomei,
cu apariia micrilor antiperistaltice i vrsturilor.
Neurotoxinele
Toxina tetanic
- receptorii pentru toxin sunt reprezentai de ctre glicoproteinele
neuronale.
- inactiveaz sinapsele inhibitorii din SNC i produce convulsii.
Toxina botulinic
- scade sinteza i eliberarea acetilcolinei la nivelul sistemului nervos,
cu apariia paraliziilor.
- receptorii pentru toxina botulinic sunt glicoproteine:
- GD1B, GT1B de pe suprafaa neuronal
Toxina Shiga
98
- are efect toxic citocid pe celulele epiteliale ale vaselor care hrnesc
sistemul nervos, cu apariia unui sindrom ischemic.
Citotoxinele
- Pe celule epiteliale:
Toxina stafilococic
- determin distrugerea desmozonilor din derm, cu apariia
sindromului de piele oprit.
Toxina streptococic
- eritrotoxina Dick (cu 3 tipuri antigenice), produs prin conversie
lizogen.
- eritrotoxinele acioneaz prin vasodilataia capilarelor cutanate.
- Pe hematii (hemolizinele)
Exemple: - Stafilococul aureus - hemolizina
- Clostidium perfringens - i toxin
- Streptolizina O - O2 labil; Streptolizina S - O2 stabil
Produi extracelulari netoxici (enzime)
Hialuronidaza
- realizeaz hidroliza acidului hialuronic din esutul conjunctiv.
- favorizeaz diseminarea infeciei la: streptococ, stafilococ,
pneumococ, clostridii
Colagenaza
- invazia prin degradarea colagenului.
- Clostridium perfringens, Clostridium hystoliticum.
Fibrinolizina
- degradarea coagulului de fibrin din focarul inflamator, realiznd
invazia esuturilor.
- la Streptococ, Stafilococ.
Leucocidine
- sunt enzime care mpiedica degradarea intraleucocitar bacterian.
- la Streptococ, Stafilococ.
Coagulaza
- produce coagularea plasmei; realizeaz protejarea bacteriilor fa de
factorii antibacterieni (printr-o mantie de fibrin pericelul bacterian).
Catalaza
99
- protejeaz fa de efectul bactericid al radicalilor de oxigen din

fagocite.
Agresine
Realizeaz evadarea de sub controlul aprrii antiinfecioase.
Majoritatea sunt determinani de suprafa celular.
1. Cu aciune antifagocitar (capsul, proteine de suprafa)
2. Cu aciune anticomplementar (aciune enzimatic)
3. Scindarea Ig As la poarta de intrare (enzime)
4. Variaia antigenic a factorilor de patogenitate.
Se clasific n funcie de mecanismul de aciune:
Aciune antifagocitar
- La bacteriile care au capsul (Klebsiella, Streptococcus pneumoniae,
Clostridium perfringens, .a.m.d.).
- Proteina A stafilococic - mpiedic opsonizarea.
- Coagulaza stafilococic - realizeaz o mantie de fibrin n jurul
bacteriilor, cu rol antifagocitar.
- Cord-factorul bacilului tuberculos inhib migrarea macrofagelor iar
sulfolipidele aceluiai bacil se opun formrii fagolizozomilor.
Cu aciune mpotriva sistemului complement (C')
- La bacteriile gram negative exist structuri care blocheaz receptorii
pentru componenii sistemului C'.
- La bacteriile gram + exist o enzim care scindeaz factorul C 5a al
sistemului C'.
Scindarea imunoglobulinelor A secretorii la poarta de intrare
- Aceasta scindare se produce sub aciunea unei enzime, la nivelul
regiunii balama a imunoglobulinei.
- fenomen caracteristic genurilor bacteriene: Haemophylus, Neisseria,
Bacteroides.
Variaia antigenic
- Acest mecanism are baze genetice i reprezint o metod foarte
eficient de evadare de sub controlul rspunsului imunologic al
organismului.
- De exemplu, genul Salmonella poate sintetiza dou tipuri antigenice
diferite de flagelin (H1 i H2) - fenomenul variaiei de faz fiind controlat
de ctre doi operoni diferii, sub controlul proteinei HIN.
100
- La genul Neisseria exist fenomenul de duplicaie genic, fapt care

determin cteva tipuri antigenice piliare diferite, cu patogenitate diferit. De
asemenea, exist 7 proteine distincte care codific fenomenele de aderare ale
bacteriilor din genul Neisseria.
- La genul Borellia exist variaia antigenic a proteinelor de
suprafa cu rol de adezine, din cauza plasmidelor lineare. Prin acest
fenomen de variaie antigenic se pot explica cele 6-9 recderi febrile din
febra recurent.
Ereditate cromozomial i extracromozomial

determinismul factorilor de patogenitate bacterieni
Cu determinism cromozomial putem meniona urmtorii factori de

patogenitate:
- endotoxina bacteriilor gram negative
- endotoxina vibrionului holeric
- variaia: colonii S colonii R - prin mutaie, cu schimbarea
fenotipului virulent.
Cu determinism extracromozomial - numrul exemplelor crete mult
mai semnificativ; aici menionm doar cteva:
- toxinele streptococice, difterice, ale Clostridiilor - produse prin
conversie lizogen.
- toxinele ce produc sindrom diareic la E. Coli, Citrobacter,
Enterobacter - cu determinism plasmidic (plasmida ENT).
Un determinism dublu, cromozomial i extracromozomial l au
enterotoxinele sau toxinele exfoliative ale Stafilococului aureu hemolitic.
- Acelai factor de patogenitate (spre exemplu o enterotoxin) la unele
specii are determinism cromozomial (vibrion holeric) i la altele are
determinism plasmidic (Escherichia Coli). Tabloul clinic produs de ctre
enterotoxinele respective - este cu toate acestea - acelai.
- Pentru a demonstra determinismul genetic al factorilor de
patogenitate - s-a efectuat un experiment foarte interesant: bacteriofagul
temperat al speciei Clostridium botulinum s-a introdus la Clostridium novy,
care a sintetizat n mod paradoxal - toxina botulinic. Experimentul s-a
efectuat i n sens invers, Clostridium botulinum sintetiznd toxina
Clostridium novy, sub aciunea bacteriofagului Cl. novy.
101
- Prin alte experimente s-a demonstrat faptul c reglajul genetic al

factorilor de patogenitate se face prin stimulon (vezi cap. Genetic). Spre
exemplu, toi factorii de patogenitate ai Shigellei sunt inhibai la temperatura
de 30C, dar stimulai la temperatura de 37C, temperatura corpului uman.
Sau - gena VIR - de la vibrionul holeric controleaz n funcie de factorii de
mediu - o reea de operoni ce codific sinteza factorilor de patogenitate.
- n cazul n care exist bacterii virtual nepatogene, din cauza unui
echipament de patogenitate incomplet, acestea se asociaz cu bacterii
patogene, determinnd infecii mixte. n cadrul acestei asociaii, arsenalul
factorilor de patogenitate este folosit n comun.
102
CAPITOLUL 7
GENUL STAPHYLOCOCUS
Caractere generale
Genul aparine familiei Micrococaceae; sunt coci gram pozitivi
aezai n grmezi, catalazo-pozitivi, anaerobi facultativi.
Sunt germeni patogeni i condiionat patogeni care produc 80% din
infeciile piogene umane (potenial invaziv crescut).
Reprezentani
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus
Tabel nr. 8 - Clasificare i caracteristici difereniale
Prezena
coagulazei
Fermentarea
manitolului
oxidativ i
fermentativ
Fermentarea
glucozei
Hemoliza
Sensibilitate la
Novobiocin
Producerea de
pigmeni
(n aerobioz)
Patogenitatea
Habitat
Factori de risc
pentru infecii
St. aureus
+
St. epidermidis
-
St. saprophyticus
-
(oxidativ)
( arareori)
+
S
-,+
S
+ , (-)
R
alb
galben (arareori)
gri
auriu
citrin
portocaliu
rar - fr pigment
Patogen
Condiionat
Condiionat patogen
patogen
Cavitatea nazofaMicrobiocenoza
Microbiocenoza
ringian (purttori 40% nazal i cutanat
tractului urinar
ambulator 80% n
(produce cistite)
mediul spitalicesc)
tegumente, intestin
perineu
Pacieni spitalizai
Vrste extreme
Idem
Idem
Factori de patogenitate
Condiioneaz
stafilococice.
polimorfismul
extraordinar
al
infeciilor
Antigene somatice
Puni pentapeptidice de glicin (particularitate a peretelui celular
stafilococic);
Nucleoproteina P - ntlnit la toi stafilococii, patogeni sau
nepatogeni;
Acidul ribitol-teihoic - antigen specific de specie pentru
Staphylococcus aureus (polizaharidul A);
Proteina A (aglutinogenul A):
protein de suprafa ntlnit la St. aureus;
cu rol de adezin i rol antifagocitar;
poate fixa fragmentul FC al imunoglobulinelor G;
este imunogen i declaneaz formarea anticorpilor specifici.
Coagulaza legat - formeaz o manta de fibrin n jurul bacteriei,
cu rol antifagocitar;
Capsula - ntlnit in vivo la anumite tulpini de S. aureus, cu rol
antifagocitar;
- induce formarea anticorpilor neutralizani;
Acidul glicerol-teihoic - este un antigen specific speciei S.
epidermidis (polizaharidul B).
Antigene extracelulare (invazine)
Enzime
Coagulaza
liber i legat; coagulaza legat are rol antifagocitar;
cea liber transform fibrinogenul n fibrin n prezena unui
activator plasmidic; particip la aglomerarea bacteriilor sub forma unor
coaguli mici endovenoi, cu rol n invazivitate;
Testul coagulazei rmne cel mai important test de diagnostic
de laborator al S. aureus.
Fibrinolizina Stafilococic (Staphylokinaza):
lizeaz fibrina, favorizeaz diseminarea bacteriilor din
microembolii supurai.
Hialuronidaza
favorizeaz invazivitatea bacterian, prin hidroliza acidului
hialuronic din esutul conjunctiv.
106
Dezoxiribonucleaza, Ribonucleaza:
distrug acizii nucleici i contribuie la formarea leziunilor;
Endonucleazele S. aureus sunt termorezistente, iar cele ale S.
epidermidis sunt termosensibile.
Lipaze, esteraze, fosfolipaze:
favorizeaz colonizarea esutului subcutanat i a glandelor
sebacee.
Toxine
Se pot clasifica n funcie de efect:
citolitice (hemolitice, leucocidale, dermonecrotice, letale);
exfoliative;
enterale (enterotoxine).
Toxinele citolitice
Hemolizinele - altereaz membrana hematiilor i produc hemoliz
complet;
hemolizina ( toxina)
efect hemolitic (produce hemoliza pe medii cu snge de
oaie sau iepure);
efect dermonecrotic i letal (efect hemolitic redus pe hematii
umane);
mai frecvent detectat la Staf. aureus; GM este de 28.000 ;
poate fi transformat n anatoxin.
hemolizina
produce hemoliz de tip cald-rece pe medii cu snge (ncepe
la 37C i devine complet la 4C);
caracteristic tulpinilor de Stafilococ patogene pentru animale.
hemolizina
lezeaz hematiile umane;
nu se poate vizualiza pe geloz snge.
hemolizina
efect citotoxic pe hematii, neutrofile, macrofage, limfocite.
Leucocidina Panton - Valentine
cu efect distructiv asupra PMN i macrofagelor;
cu efect nehemolitic i antifagocitar (distruge lizozomii
celulari).
Toxina sindromului de oc toxic (TSS)
produs de cteva biotipuri de Staf. aureus, care exist n
microbiocenoza cutanat la unele persoane;
107
efect letal dup o stare de oc, cu fenomene digestive

(vrsturi); descris iniial ca enterotoxina F.
Toxina exfoliativ
distruge forele de adeziune dintre celulele granulare din
derm, producnd epidermoliz - exfoliere cutanat;
este secretat de stafilococi ai tipului fagic II i produce aazisul sindrom al pielii oprite, care include:
boala Ritter
Sindromul Lyell al copilului, necroza toxic epidermal)
impetigo bulos
rash scarlatiniform
GM a toxinei este de 24.000
se evideniaz prin inoculare la oricel nou-nscut, care
prezint exfoliere cutanat la locul inoculrii.
Enterotoxinele
produse de tulpini de Stafilococ coagulazo-pozitive i
coagulazo-negative;
produc toxiinfecii alimentare, cu predominena vrsturilor;
enterotoxinele sunt antigenic distincte (notate de la A la E) i
acioneaz asupra terminaiilor nervoase intestinale determinnd micri
antiperistaltice.
enterotoxinele sunt termostabile (rezist la fierbere 1 or) i
nu pot fi degradate n timpul preparrii alimentelor; de asemenea,
enterotoxinele rezist la enzimele proteolitice: tripsina, papaina,
chemotripsina etc.
enterotoxinele A i D sunt cel mai frecvent ntlnite n
patologia discutat; enterotoxina tip B produce enterocolit
postantibiotice;
mecanismul de aciune al enterotoxinei a fost evideniat prin
testul Dolmann.
Infecii stafilococice
Infeciile tipic stafilococice sunt piogenice, invazive i toxigene.
Infecii piogene
Piodermita stafilococic
produs de S. aureus i ocazional de S. epidermidis;
este mai frecvent ntlnit la copiii care triesc n climat cald
i umed.
Foliculita
afecteaz foliculul pilos superficial.
108
Furunculul
afectarea foliculului pilos i a esutului celular subcutanat
(reacie inflamatorie puternic).
Carbunculul
asemntor ca tip de leziune cu furunculul, ns prezint
focare multiple (folicul pilos, glande sebacee, esutul subcutanat).
Panariiul
afectarea zonei periunghiale.
Hidrosadenita
infecia piogen a glandelor sudoripare;
Impetigo
leziuni cutanate superficiale, de tip vezicular;
Leziuni septice (abcese metastatice), secundare bacteriemiei sau
septicemiei:
stafilococia pleuro-pulmonar (complicaie dup infecii
virale);
pneumonia primar a copilului mic;
sinuzite, otite supurate, mastoidite;
cistite, cistopielite (implicat i S. saprophyticus);
mastite (la femei care alpteaz), endometrite;
meningite, pleurezii, peritonite, pericardite;
endocardita acut - cu S. aureus, la subieci protezai valvular;
endocardita subacut - cu S. epidermidis (poate complica o
intervenie chirurgical toracic);
osteomielita - reprezint cea mai frecvent complicaie
septic, dup genera-lizarea infeciei pe cale hematogen; afecteaz mai
ales copiii sub 12 ani sau persoane care au suferit intervenii chirurgicale
ortopedice;
infecia plgii chirurgicale (infecie nosocomial tipic);
stafilococia malign a feei.
Boli stafilococice toxigene
Toxiinfeciile alimentare
sindroame produse de ctre tulpinile bacteriene secretoare de
enterotoxine (grup fagic III);
au incubaie scurt (2-6 ore), debut brusc, predomin
vrsturile, dar cu vindecare rapid dup eliminarea toxinei din organism
(24-48 ore).
Enterocolitele postantibiotice
- apar la persoanele spitalizate, tratate cu antibiotice cu spectru larg.
109
Sindroamele de exfoliere cutanat (Sindromul pielii oprite

produs de ctre toxina exfoliativ stafilococic):
- boala Ritter
- sindromul Lyell
- impetigo bulos
- rash scarlatiniform
Primele trei sindroame pot evolua epidemic n seciile de nounscui; Rash-ul scarlatiniform apare la copilul mai mare.
Sindromul de oc toxic - sindrom produs de ctre anumite tulpini de
S. aureus, productoare de toxin TSS (iniial denumit enterotoxin F).
Aspecte epidemiologice
Rezervorul de infecie:
purttorii nazali
purttorii perineali
alimente i buturi contaminate
mediul spitalicesc (tulpini multiplu rezistente la
chimioterapice)
Factori predispozani:
persoane imunodeprimate (vrste extreme, cancere, diabet
zaharat, intervenii chirurgicale, tratament cu corticosteroizi, infecii virale
anterioare).
factori
de
patogenitate
bacterieni
cu
codificare
extracromozomial: adezine, invazine, toxine.
Cu transmitere aerogen, prin contact direct (mn), prin
transmitere digestiv.
Diagnostic de laborator
Recoltarea prelevatelor biologice
secreii purulente;
exudat nazal i faringian, sputa n infecii respiratorii;
urina n infecii urinare;
snge pentru hemocultur etc.;
lichid cefalorahidian.
Examenul microscopic direct
Cocii Gram + dispui n grmezi care imit ciorchinii de strugure,
pe un fond roz-rou reprezentat de detritusuri celulare i fibrin.
Izolarea pe medii
Stafilococii cresc pe medii cu snge i pe medii hiperclorurate (cu
7,5 g% NaCl).
110
Identificarea se realizeaz examinnd:

Proprietile morfotinctoriale: coci gram pozitivi, aezai n
grmezi
Proprietile de cultur:
Medii lichide:
pe ap peptonat i bulion tulbur uniform mediul de cultur;
mediul de mbogire este mediul lichid hiperclorurat
Chapmann;
pe bulion+manitol+indicator de pH, pentru depistarea
Staphylococcus aureus.
Medii solide:
geloza snge: Colonii S (2-3 mm) cu zon de hemoliz
complet la S. aureus (i arareori hemoliz la S. epidermidis). n
aerobioz, coloniile S. aureus pot fi pigmentate n auriu, citrin, portocaliu,
alb; S. epidermidis prezint pigment alb. S. saprophyticus prezint
pigment gri sau glbui. Pigmentarea coloniilor poate fi urmrit mai bine
pe mediul cu monoacetat de glicerol.
din prelevatele biologice contaminate cu flor de asociaie se
face izolarea pe medii selective (hiperclorurate cu manitol). Pe mediul
Chapmann, coloniile S. aureus sunt manitol + (vireaz culoarea mediului),
n timp ce coloniile stafilococilor saprofii sunt manitol negative (nu l
fermenteaz).
Proprieti biochimice:
Testul catalazei: - este pozitiv la stafilococi (face diagnostic
diferenial cu genul Streptococcus);
Degradarea manitolului - servete la identificarea speciilor genului
Staphylococcus: S. aureus degradeaz manitolul oxidativ i fermentativ;
S. epidermidis degradeaz manitolul inconstant,

exclusiv oxidativ.
Testul fosfatazei - S. aureus este fosfataz +, restul speciilor sunt
fosfataze -.
Caractere de patogenitate:
Investigate prin teste in vitro i in vivo.
Teste de patogenitate in vitro
Testul coagulazei - este cel mai important test de diagnostic de
laborator care precizeaz patogenitatea. Stafilococul patogen este
coagulazo pozitiv.
111
testul coagulazei n tub - evideniaz coagulaza liber;

testul coagulazei pe lam - evideniaz coagulaza legat.
Testul fibrinolizinei - evideniaz degradarea fibrinei de pe medii
care conin aceast substan;
Testul dezoxiribonucleazei - evideniaz endonucleazele S. aureus
termorezistente);
Enterotoxina - evideniabil prin reacia de dubl precipitare n gel.
Teste de patogenitate in vivo
Exotoxina exfoliativ - produce exfolierea cutanat a oriceilor nounscui.
Activitatea dermonecrotic - inocularea unui filtrat de cultur de
stafilococ patogen la un iepure i provoac acestuia o escar uscat
(detaabil) dup 24 de ore.
Enterotoxinele - termostabile (rezist la fierbere); evideniabile prin
testul Dolmann (inocularea intraperitoneal a filtratului de cultur unor
pisoi tineri le provoac acestora vrsturi n jet i sialoree).
Recapitulnd, o tulpin de stafilococ patogen prezint urmtoarele
proprieti: hemoliza, pigmentarea, coagulaza +, fermentarea manitolului
+, prezena endonucleazelor termorezistente, activitatea dermonecrotic (
activitate toxigen: enterotoxin, exotoxin exfoliativ, toxina sindromului
de oc toxic etc.).
Antibiograma
Este obligatorie; rezistena la chimioterapice a stafilococilor este n
cretere, n special prin producia de lactamaze (codificate plasmidic). Se
semnaleaz tot mai frecvent rezistena la Meticilin, Oxacilin, Cloxacilin
(n special la tulpinile de stafilococ patogen izolate din mediul spitalicesc).
Lizotipia
Se realizeaz tipizarea tulpinilor, cu ajutorul bacteriofagilor
specifici, grupai n 4 categorii fagice:
Grupa I: 29, 52, 52A, 79, 80, 81;
Grupa II: 3A, 3B, 3C, 55, 71;
Grupa III: 6, 7, 42E, 47, 53, 54, 55, 77;
Grupa IV: 42D.
Infeciile stafilococice cu potenial epidemic sunt infeciile
nozocomiale i toxiinfeciile alimentare. Utilizarea lizotipiei bacteriofagice
permite stabilirea sursei infeciei.
Profilaxia
112
n infeciile stafilococice recidivante, rezultate bune se obin cu

terapia cu anatoxin, combinat cu autovaccin, preparat din tulpina
bacterian proprie bolnavului. Explicaia const n mbuntirea,
stimularea mecanismelor imunitii mediate celular.
De asemenea, se respect normele de igien personale i n mediul
spitalicesc.
113
CAPITOLUL 8
GENUL STREPTOCOCCUS
Caractere generale
Genul aparine familiei Streptococaceae; sunt coci gram pozitivi
aezai n lanuri, catalazo-negativi.
Sunt germeni ubiquitari, frecvent ntlnii n microbiocenoze:
tegumente, mucoase, cavitate bucal, intestin.
Reprezentani
Sunt comensali, condiionat patogeni sau patogeni. Urmtoarele
specii au mare importan n patologia uman:
Streptococcus pyogenes (grup A);
Streptococcus agalactiae (grup B);
Streptococcus pneumoniae;
Streptococii viridans (Str. mutans, Str. mitis, Str. sanguis etc.);
Streptococi grup D (enterococi: Str. faecalis, Str. faecium etc.);
Peptostreptococcus.
Clasificare
Dup tipul hemolizei;
Dup tipul antigenic;
Dup habitat;
Dup proprieti metabolice:
Dup tipul hemolizei:
- - incomplet, cu nuan verzuie - ex.: Str. pneumoniae, Str.
viridans, unii enterococi;
- complet, clar, transparent - ex.: Str. hemolitic uman
grup A, B, C, G;
' - liz incomplet lng colonie, urmat de hemoliz clar ex.: anumite specii ale grupurilor antigenice B, D;
- fr hemoliz pe geloz snge - ex.: specii din grupurile
antigenice streptococice D, F, H.
Dup grupul antigenic:

Clasificare iniiat de ctre Rebecca Lancefield, pe baza
carbohidratului C al peretelui celular; clasificarea nu se aplic Str. viridans
i Str. pneumoniae.
Grupurile antigenice streptococice sunt notate de la A la U i se pot
identifica prin teste speciale.
114
Streptococii din grupul antigenic A au cea mai mare importan n

patologia uman, de aceea un criteriu de clasificare l constituie ncadrarea
n acest grup (grup antigenic A sau Streptococ non-grup A). Apartenena la
grupul A se identific prin testul la bacitracin.
Principalele antigene streptococice somatice sunt:
Antigene capsulare (acid hialuronic);
Pilii (80 de tipuri antigenice de protein M; acid lipoteihoic);
Peretele celular (carbohidratul C, peptidoglicanul, proteine T,
R);
Membrana citoplasmatic (antigene comune cu membrana
bazal glomerular i cu fibra muscular cardiac).
Dup habitat: streptococi piogeni, viridans (cavitatea bucal),
lactici, enterococi (tub digestiv) etc.
Dup anumite proprieti metabolice:
Cocii sunt catalazo-negativi.
Majoritatea speciilor genului sunt aerobe - facultativ anaerobe dar
exist i specii microaerofile (Str. pneumoniae) sau strict anaerobe (gen
Peptostreptococcus).
Grup A, streptococi hemolitici (Streptococcus pyogenes)
Antigene somatice
Carbohidratul C al peretelui celular (clasificare de grup);
Proteinele T, R ale peretelui celular;
Proteinele M piliare (determin aproximativ 80 de tipuri antigenice
diferite de streptococi grup A); cu rol antifagocitar, realizeaz aderena
bacterian pe suprafaa celulelor epiteliale.
Antigenele solubile (toxine i enzime, ca factori de

patogenitate)
Toxina eritrogen (toxina pirogen streptococic):
este sintetizat prin fenomenul de conversie lizogen;
determin exantemul i enantemul caracteristic n scarlatin;
efect pirogen;
produs i de streptococii din grupele antigenice A, C, G;
3 tipuri antigenice diferite de eritrotoxine.
Streptolizina O:
protein O2 labil, responsabil de hemoliza a grupurilor
antigenice A, C, G;
inhibat de steroli.
Streptolizina S:
115
protein Oxigen stabil, hemolitic;

este inactivat prin fosfolipide;
sintetizat i de ctre alte grupuri antigenice de streptococi.
Streptokinaza:
protein produs de ctre streptococii grupei A,C;
activeaz sistemul fibrinolitic;
utilizat n tratamentul trombilor intravasculari.
Factori de difuziune a infeciei:
hialuronidaze - lizeaz acidul hialuronic;
dezoxiribonucleaze - distrug ADN;
ribonucleaze - lizeaz ARN;
proteinaze diverse, cu aciune cardiotoxic, hepatotoxic,
nefrotoxic.
Marea varietate a factorilor de patogenitate cauzeaz polimorfismul
manifestrilor clinice.
Boli streptococice - Streptococcus pyogenes

Faringite, tonsilite - mai frecvente la copii cu vrste cuprinse ntre 5
i 15 ani (zona temperat);
Pneumonii;
Piodermite - mai frecvente la copii cu vrste ntre 2 i 5 ani (n
anotimpul cald);
Scarlatina - boal generalizat, produs printr-un streptococ
lizogenizat, productor de toxin eritrogen (grup A, dar i C, G);
Celulite, limfangite;
Erizipel;
Flegmoane - posttraumatic sau postintervenie chirurgical;
Meningite, abcese cerebrale, abcese n alte organe;
Endometrite.
Boli poststreptococice - Streptococcus pyogenes (complicaii

imunopatolo-gice nesupurative, care apar la 2 - 6 sptmni dup o infecie
cu Streptococ gr. A)
Reumatismul articular acut, miocardita reumatismal, coreea
minor;
Glomerulonefrita difuz acut;
Artrite migratorii;
Eritemul nodos.
116
Streptococii de grup A prezint antigene comune cu membranele

sinoviale, sarcolema cardiac i esutul conjunctiv. Anticorpii
antistreptococici (antistreptolizin O, antistreptokinaz, etc), se fixeaz pe
antigenele proprii i determin un rspuns autoimun, dup activarea
sistemului complement.
Glomerulonefrita se datoreaz depunerii complexelor antigen anticorp n exces n capilarele glomerulare, cu producerea de leziuni prin
activarea complementului. Tipurile streptococice nefritogene sunt notate:
4, 12, 49, 55, 57, n timp ce tipurile streptococice reumatogene sunt mai
numeroase. Titruri ASLO mari denot hipersensibilizarea.
Diagnostic de laborator Streptococcus pyogenes

n funcie de localizarea infeciei
ex.: n faringit - se recolteaz exudat faringian, secreii purulente
din plgi, etc.
Diagnostic microscopic direct, proprieti morfotinctoriale
Coci gram pozitivi aezai n lanuri.
Izolare pe medii, proprieti de cultur
Pe medii lichide - se dezvolt granular la baza eprubetei;
Pe medii solide - pe geloz snge - coloniile sunt S, netede,
punctiforme, nconjurate de hemoliz.
Proprieti biochimice
catalaza negativ;
oxidaza negativ.
Proprieti antigenice
ncadrarea n grupul antigenic A se realizeaz prin:
testul la bacitracin (uzual);
reacia de coaglutinare cu o tulpin de Stafilococ cu protein
A;
imunofluorescen;
reacii de aglutinare cu trusa Streptex.
serotiparea M, T, SOF prin reacii de precipitare, dup ncadrarea n
grupul A.
Diagnostic indirect serologic
117
Reacia ASLO evideniaz titrul anticorpilor antistreptolizin O din

serul de bolnav. Un titru mai mare dect 250 uniti ASLO denot infecie
streptococic sau o complicaie imunologic. Reacia ASLO stabilete
diagnosticul, prognosticul i eficiena tratamentului. Scderea titrului
ASLO este urmat de vindecare. Reacia ASLO nu poate diagnostica
infeciile de tip piodermit.
118
Testul streptozyme - are valori crescute n infecii faringiene i

piodermite.
Testul anti DN- aze B - are acuratee crescut n diagnosticarea
infeciilor.
Determinarea titrului anticorpilor antihialuronidaz, antistreptokinaz.
Diagnostic indirect biologic
Prin teste cutanate (reacia Dick i reacia Schultz-Carlton) se
investigheaz capacitatea anticorpilor specifici de a neutraliza efectul
toxinei eritrogene.
Reacia Dick pozitiv denot susceptibilitatea subiectului la infecia
scarlatinoas, pus n eviden prin lipsa anticorpilor specifici protectori.
Reacia Schultz-Carlton pozitiv confirm infecia scarlatinoas.
(Serul de convalescent de scarlatin, inoculat unui pacient cu eritem cu
diagnostic neprecizat, va face s dispar doar eritemul scarlatinos).
Antibiograma
Streptococii de grup A sunt sensibili la lactamine i de aceea nu
necesit efectuarea antibiogramei, care este ns obligatorie pentru
streptococii non grup A.
Streptococi hemolitici, grup B (Streptococcus agalactiae)

Habitat
Streptococii grupului B se izoleaz frecvent din nazofaringele
persoanelor sntoase. La 30% din populaia general streptococul B se
ntlnete uzual n flora gastrointestinal. Aproximativ 20% dintre gravide
sunt purttoare vaginale de streptococ de grup B, ceea ce explic
intervenia bacteriei n patologia materno-infantil.
Infeciile tipice
pneumonia i meningita neo-natal;

La femei, streptococul de grup B produce endometrita i mastita
postpartum, precum i infecii urogenitale;
suprainfecia plgilor chirurgicale se poate complica cu fasceit
necrozant i septicemii;
Diagnosticul de laborator (particulariti)

Hemoliz pe medii cu snge;
ncadrarea n grup prin: - testul CAMP;
- hidroliza hipuratului de sodiu.
119
Antibiograma este obligatorie.
Streptococi de grup D
Pot fi , sau hemolitici (hemoliza este frecvent).
Streptococcus faecalis, faecium, durans (enterococi):
aparin microbiocenozei intestinale i sunt germeni
condiionat patogeni;
produc infecii urinare recidivante, infecii intraabdominale,
genitale, septicemii, endocardit bacterian.
Enterococii se dezvolt pe medii cu bil - esculin cu 6,5 g % NaCl,
la temperaturi cuprinse ntre 10 - 45C.
Non-enterococii (gr. D) nu se dezvolt pe medii cu adaus de 6,5 g
% NaCl i prezint hemoliz sau .
Streptococii de grup C, G
Includ specii variate:
Streptococcus equisimilis;
Streptococcus zooepidemicus;
Streptococcus dysgalactiae.
Produc streptolizin O i eritrotoxin;
Se ntlnesc frecvent n flora nazofaringian a unor subieci aparent
sntoi.
Streptococi hemolitici
Grupul Viridans
Cele mai comune specii, care aparin florei buco-faringiene
normale, sunt:
Streptococcus mutans;
Streptococcus sanguis;
Streptococcus mitis;
Streptococcus salivarius.
Infeciile produse:
caria dentar (Streptococcus mutans produce dextran insolubil din
fructoz i glucoz; astfel formeaz placa dentar);
endocarditele bacteriene subacute: tulpinile de Str. viridans, ajunse
n circulaie dup intervenii stomatologice, se pot fixa pe valve cardiace
cu leziuni.
120
Nu conin carbohidratul C - nu pot fi inclui n clasificarea

Lancefield.
Diagnosticul diferenial se face cu ali streptococi hemolitici, cu
Str. pneumoniae. Str. viridans sunt rezisteni la optochin i nu sunt lizai pe
medii cu bil.
Streptococcus Pneumoniae
Infecii produse
pneumonia franc lobar;

meningita bacterian a adultului, cu o rat de mortalitate de cca.
40%;
este cea mai frecvent cauz de otit medie a copilului, cu
complicaii: surditate;
sinuzite, ostomastoidite;
septicemii, endocardite.
Patogenez
Pneumococii intr n compoziia microbiocenozei nazofaringiene i
constituie rezervorul infeciilor pneumococice, care apar preferenial la
subieci cu status imunitar alterat.
Virulena pneumococului este dat de un polizaharid capsular, care
caracterizeaz 82 de tipuri antigenice diferite; are rol cert antifagocitar.
Polizaharidul capsular solubilizat neutralizeaz anticorpii circulani
(fenomen de paralizie imunologic); neuraminidaza pneumococic
confer neurotoxicitatea meningitelor pneumococice; pneumolizina este
toxina cu activitate hemolitic in vivo (experimente pe animale).
n funcie de localizarea infeciei.
Diagnostic microscopic
Coci gram pozitivi lanceolai, nconjurai de o capsul comun,
aezai in diplo.
Izolarea pe medii; proprieti de cultur, studiate n vederea
identificrii
121
Pe geloz snge ciocolatie se dezvolt sub forma unor colonii S

mucoide, nconjurate de o zon de hemoliz. Necesit incubare n
atmosfer de dioxid de carbon (10%);
Sensibil la Optochin;
Lizat pe medii cu bil (fenomen de biloliz Neufeld pozitiv).
Fermenteaz inulina, lactoza, sucroza, trehaloza;
Catalaz negativ;
Microaerofil.
82 tipuri antigenice funcie de un
polizaharid capsular,
identificabil prin reacia de umflare a capsulei Neufeld (reacie antigen anticorp);
primele 8 tipuri antigenice produc marea majoritate a infeciilor
umane cu aceast etiologie.
Proprieti de patogenitate
oarecele inoculat cu o cultur de pneumococ virulent face o
septicemie mortal; apoi se realizeaz o amprent de splin i se
vizualizeaz cocii gram pozitivi n diplo, nconjurai de o capsul comun,
vizibil ca un halou clar pe fondul roz al celulelor splenice.
Antibiograma
Este obligatorie.
Profilaxie
Vaccin polivalent (preparat din 23 de polizaharide capsulare
purificate).
Coci gram pozitivi anaerobi

Reprezentani
Peptococcus sp. - gram pozitivi la limit;
Peptostreptococcus sp. - coci mari alungii;
Sarcina ventriculis - (coci mari aezai cte opt, la vrfurile unui
cub).
Aparin microbiocenozei gastrointestinale, bucofaringiene, tractului
urogenital i pielii.
Infecii produse
infecii cerebrale, hepatice, mamare;
122
empieme subdurale i extradurale;

osteomielite, endometrite;
meningite, septicemii.
Infeciile apar mai ales dup manopere medico - chirurgicale la
subieci imunodeprimai.
123
CAPITOLUL 9
GENUL NEISSERIA
Caractere generale
Genul Neisseria aparine familiei Neisseriaceae. Cuprinde coci
gram negativi, dispui n diplo, catalazo-pozitivi, oxidazo-pozitivi.
Reprezentani, infecii produse:

Patogeni:
Neisseria meningitidis:
meningita cerebrospinal epidemic;
meningococemia fulminant (Sindromul
Friedriechsen);
rinofaringite, artrite.
Neisseria gonorheae:
gonoreea;
boli inflamatorii pelviene;
oftalmia gonococic a noului nscut;
artrite, meningite, septicemie.
Nepatogeni (comensali ai florei bucofaringiene):
Neisseria sicca, Neisseria flavescens;
Neisseria perflava, Neisseria mucosa;
Neisseria lactamica.
Waterhouse-
Neisseria mengitidis
Epidemiologie
Rezervorul natural bacterian este reprezentat de ctre nazofaringe,
portajul fiind de 3% - 30%; n timpul epidemiilor, portajul nazofaringian
poate atinge 95%, dar mai puin de 1% dintre purttori fac boala sistemic.
Grupul A al N. mengitidis este mai frecvent implicat n etiologia
bolii copilului sub 5 ani, grupul antigenic B afectnd copiii peste 5 ani.
Sezonul rece este factor favorizant.
Formele epidemice sunt provocate de ctre tipul antigenic A, n
timp ce tipurile B i C produc forme de boal sporadice.
Aspecte clinico-patogenetice
Efectele toxice meningococice sunt atribuite lipopolizaharidului
bacterian, care produce i peteiile hemoragice n fazele bacteriemice ale
bolii. Substana induce formare de anticorpi.
124
In vivo, celulele bacteriene sunt protejate de o microcapsul

polizaharidic, ce imprim variantele antigenice (serogrupurile A, B, C, X,
Y, Z, 29 E, W 135). Polizaharidele capsulare sunt puternic imunogene, cu
excepia grupului B, care nu induce anticorpi suficient protectori. Variaia
antigenic piliar i secreia proteazelor IgA sunt factori suplimentari de
patogenitate.
Este o urgen medical.
Se recolteaz:
lichid cefalorahidian n meningit;
snge n meningococemie;
secreie rinofaringian - pentru depistarea purttorilor.
Diagnostic microscopic, proprieti morfotinctoriale
Frotiu Gram - coci gram negativi reniformi, aezai n diplo intra i
extra PMN.
Frotiu Giemsa - pentru examenul citologic.
Frotiu Ziehl - Nielsen - pentru excluderea meningitei TBC.
Medii lichide: - tulburate foarte slab;
Medii solide:
mediul Mueller Hinton mbogit, mediul Tayer Martin
modificat;
colonii S transparente, n pictur de rou.
Coloniile se autolizeaz (conin fermeni autocatalitici).
Neisseriile sunt germeni stenotermi (nu rezist la variaii mari de
temperatur; mediile se prenclzesc la termostat i se incubeaz n
atmosfer microaerofil).
oxidaza + (test aplicat coloniilor suspecte);
fermenteaz glucoza i maltoza, nu ns lactoza i fructoza.
Caractere antigenice
Lipopolizaharidul microcapsular mparte meningococii n
serogrupuri notate: A, B, C, X, Y, Z, 29 E, W 135 (identificate prin reacii
AG-AC, ex: reacia de precipitare Vincent Bellot). Structura antigenic
imprim virulena.
125
Antibiograma
Este necesar.
Profilaxie
Vaccinurile sunt preparate din polizaharidele capsulare ale
grupurilor antigenice A i C; grupul B este slab imunogen.
Neisseria gonorheae
Epidemiologie
Reprezint agentul etiologic al gonoreei, cea mai rspndit boal
veneric.
Habitat - exclusiv omul, mucoasa vaginal i uretral, rect.
Calea de transmitere este sexual, cu excepia oftalmiei gonococice
a noului nscut. Este o important cauz de sterilitate secundar.
Cronicizarea bolii este foarte frecvent, aspect explicat prin:
imunitatea strict localizat (PMN), variaia antigenelor piliare i rezistena
n continu cretere a tulpinilor de gonococ la diferite chimioterapice
(rezistena la lactamine apare la 90% dintre tulpini, prin lactamaze).
Rezultate bune se observ la Spectinomycin i Ceftriaxone.
Patogenez
Bacteria elaboreaz o IgA proteaz, care cliveaz IgA secretoare de
la nivelul mucoaselor. Exist 4 tipuri de colonii corespunztoare celor 4
tipuri antigenice, notate T1 - T4, funcie de proteinele piliare. Variantele T1
i T2 sunt cele mai virulente. Proteinele membranei externe sunt adezine.
n anumite condiii ambientale, gonococii posed o microcapsul,
cu rol antifagocitar. Uneori este posibil multiplicarea bacterian intra
PMN.
Multiplicarea la poarta de intrare este masiv, dar invazivitatea
bacterian este redus (rspunsul imun generalizat este aproape absent;
boala nu d imunitate decelabil).
Proteinele membranei externe definesc 16 serotipuri gonococice,
care nu se identific n mod uzual.
Secreie uretral - de la brbat;
Secreie de la nivelul colului vaginal i de la nivelul orificiului
uretral;
126
Secreie ocular (de la nou nscut cu oftalmie gonococic).

Diagnostic microscopic direct; proprieti morfotinctoriale
Se ntind frotiuri din secreiile respective i se coloreaz Gram:
Se observ coci reniformi gram negativi, aezai n diplo, n
preajma PMN sau intra PMN;
Se evideniaz i celule epiteliale i germeni din flora bucal.
IF direct din produsul patologic.
Izolarea pe medii, proprieti de cultur:
- izolare imediat dup recoltare, pe medii prenclzite;
- geloza snge ciocolatie sau mediul Mueller Hinton mbogit cu
proteine native i antibiotice (Vancomicin, Colistin, Nistatin, Trimetoprim etc.);
- se incubeaz 48 ore la 37C n atmosfer microaerofil (10%-20%
CO2);
- coloniile sunt S, bombate, uor cenuii i transparente; exist 4
tipuri de colonii, notate T1-T4. Tipurile T1, T2 sunt cele mai patogene.
Identificarea se realizeaz pe baza aspectelor microscopice, a
proprietilor de cultur, biochimice i antigenice.
Caractere biochimice:
oxidaza +;
fermenteaz glucoza;
nu fermenteaz maltoza.
Se manifest fenomenul de variaie antigenic a tulpinilor piliate.
Tipurile antigenice T1, T2 sunt foarte virulente.
Singura gazd este omul; gonococul nu este patogen pentru
animale.
Antibiograma
Este necesar pentru a realiza tratamentul corect (tratamentul
cuplului). Peste 90% dintre tulpinile de gonococ produc lactamaze.
127
CAPITOLUL 10
GENUL HAEMOPHYLUS
Caractere generale
Bacterii ce se dezvolt numai pe medii cu snge (sunt necesari
factorii de cretere X i V, identici cu hemina i NAD, NADP).
Cocobacili gram negativi aerobi - anaerobi facultativi, imobili.
Formele virulente sunt capsulate (ex.: H. influenzae tip antigenic
b). Speciile genului sunt prezente n rinofaringe, mucoasa conjunctival
(H. aegiptius) sau genital (H. ducrey).
Reprezentani, infecii produse

Haemophylus influenzae:
pneumonii i bronhopneumonii postgripale, infecii cronice
ale tractului respirator inferior, bacteriemii.
(tipul b - meningite, otite, laringo-traheite la copii;
- endocardita, artrite supurative, osteomielite).
Haemophylus parainfluenzae:
comensal, produce rar endocardite.
Haemophylus aprophilus:
endocardite, pneumonii, caria dentar.
Haemophylus haemolyticus:
rinofaringite.
Haemophylus aegiptyus:
conjunctivita.
Haemophylus ducrey:
ancrul moale (cu transmitere sexual).
Haemophylus influenzae
Aspecte clinice i patogenetice
A fost considerat ca agent etiologic al gripei pn n anul 1890.
Produce afeciuni postgripale.
Patogenitatea se explic prin multiplicare excesiv i invazie.
Adezinele de suprafa favorizeaz ataarea bacteriei pe suprafaa
celulelor. Conine endotoxina.
Rolul esenial n patogenitate l deine capsula, tipul antigenic cu
virulena maxim fiind tipul b.
128
Incidena meningitelor produse de H. influenzae tip b este maxim

la copiii cu vrste cuprinse ntre 3 luni i 6 ani. Portajul tulpinilor
necapsulate nevirulente atinge aprox. 30% pn la 50% din populaia
infantil.
H. influenzae reprezint un important agent etiologic al infeciilor
respiratorii i meningeale la copil. Epiglotita acut edematoas produce
insuficiena respiratorie. Sechelele meningitelor sunt foarte grave:
retardare mintal, hidrocefalie sau chiar orbire.
Funcie de patogenia infeciei:
l.c.r.;
snge pentru hemocultur; sput; secreie otic, etc.
Examenul
direct
din
lichidele
biologice,
caractere
morfotinctoriale
Frotiu Gram: cocobacili gram negativi imobili, capsulai,
nesporulai cu tendin la polimorfism i colorabilitate bipolar.
Reacia de umflare a capsulei - utilizm ser antiHaemophylus
influenzae capsulat.
Imunofluorescena - din produsul patologic, cu ser anti
Haemophylus influenzae tip antigenic b.
Latex-aglutinarea - evideniaz agentul etiologic n l.c.r. (Pastorex,
Wellcome).
Metoda EIA - pentru detectarea Haemophylus influenzae tip b.
Izolarea pe medii, proprieti de cultur
Bacteriile se dezvolt pe medii cu snge i factori de cretere.
Clasificarea speciilor genului se realizeaz funcie de necesitile n
factorii de cretere X (hemina) i V (identic cu NAD i NADP). Necesit
incubare n atmosfer umed i 5-10% CO2.
Tabel nr. 9 - Clasificarea speciilor genului
Reprezentani
Necesiti n factori
X
V
H. influenzae
+
+
H. parainfluenzae +
H. aprophylus
+
H. aegiptyus
+
+
H. ducreyi
+
-
Hemoliza
+
129
Geloza snge ciocolatie: colonii S transparente, minuscule.

Geloza Levinthal: colonii S transparente.
Fenomenul de satelitism al coloniilor de Haemophylus n jurul
coloniilor de Stafilococ nsmnat simultan (Stafilococul elaboreaz
factorul V).
Caractere biochimice
Sunt germeni aerobi facultativi anaerobi.
Testul catalazei +.
Testul indol (+ n 70% dintre cazuri), ornitindecarboxilaza etc.
S-au stabilit ase biotipuri ale speciei H. influenzae.
Principalele antigene sunt reprezentate de:
Polizaharidul capsular al Haemophylus influenzae tip b
(fosforibozilribitolfosfat-PRP) cu efect antifagocitar;
Lipopolizaharidul - lipidul A cu rol toxic;
Proteaza Ig A - scindeaz Ig A secretoare;
Antigenele bacteriene se pot pune n eviden prin IF, EIA, CIEF,
latex aglutinare.
Caractere de patogenitate
Inocularea bacteriei intraperitoneal la oarece, cobai sau iepure
determin moartea animalului prin toxemie acut.
Tratament
Ampicilina n asociere cu Cloramfenicolul sau Cefalosporine de
generaia a treia pot fi utilizate ca terapie iniial la pacienii cu afeciuni
cauzate de Haemophylus influenzae sau ca terapie alternativ n cazul
instalarii rezistenei bacteriene la Amoxicilin.
Profilaxia
Vaccinarea anti Haemophylus influenzae la copii mai mari de 18
luni, cu vaccinuri preparate din PRP+/- peptide imunogene ale toxoidului
difteric. Vaccinul nu afecteaz portajul.
Chimioprofilaxia cu Rifampicina se recomand pentru neutralizarea
strii de purttor sau la contacii unui copil bolnav de meningit bacterian
cu aceast etiologie.
Haemophylus parainfluenzae
130
Cu virulen considerabil diminuat comparativ cu H.influenzae,

produce pneumonii sau rare endocardite. Nu necesit factorul X ca factor
de cretere.
Haemophylus aegyptius
Agent etiologic cert patogen al conjunctivitei purulente acute sau
subacute din zonele subtropicale.
Proprietile microscopice sau de cultur sunt asemntoare
Haemophylus influenzae. Diagnosticul diferenial se realizeaz prin
proprietile biochimice: lipsa fermentrii xilozei, testul indol, proprieti
hemaglutinante.
Haemophylus ducreyi
Reprezint agentul etiologic al ancrului moale, boal
dermatovenerian caracterizat prin ulceraii la nivelul organelor genitale,
nsoite de limfadenopatii supurate.
Secreia din zona central a ancrului.
Secreie purulent ganglionar.
Cocobacili gram negativi, dispui n perechi sau n lanuri.
Fermenteaz glucoza, maltoza sau zaharoza.
Este un germen cu patogenitate cert. Tulpinile prezint endotoxina.
Inocularea culturii prin scarificarea pleoapei de maimu determin
apariia unui ancru tipic.
Intradermoreacia Ito-Reensterna.
Se inoculeaz intradermic 0,1ml de cultur omort prin cldur.
Reacia este pozitiv prin apariia unei papule i a unui eritem; reacia are
valoare retrospectiv.
Tratament, msuri profilactice

Germenul prezint sensibilitate la macrolide sau sulfamide. Nu
exist imunitate fa de reinfecie. Profilaxia bolii se suprapune cu
msurile generale ale unei boli venerice.
131
CAPITOLUL 11
GENUL BORDETELLA
Caractere generale
Bordetella pertussis a fost izolat pentru prima oar n 1906, de
ctre Bordet i Gengou. Genul cuprinde cocobacili gram negativi, strict
aerobi, speciile virulente fiind capsulate n cultura tnr.

Bordetella pertussis:
tuse convulsiv, bronite, pneumonii, sechele pulmonare sau
neurologice (encefalopatii).
Bordetella parapertussis:
tuse convulsiv.
Bordetella bronchiseptica:
infecii respiratorii la animale i la om.
Bordetella avium, Bordetella hinzii:
infecii respiratorii la psri.
Bordetella pertussis
Factorii de patogenitate variai contureaz manifestrile clinice:
Toxina pertusis (TP) este o exotoxin cu structur bimodal;
fragmentul A-ADP ribozileaz proteina G1, care n mod normal inhib
adenilat-ciclaza. n urma ribozilrii, crete nivelul acestei enzime cu
urmtoarele efecte:
- hipersensibilitate la histamin i serotonin;
- limfocitoz;
- alterarea membranei celulelor T;
- blocarea fenomenelor exploziei respiratorii intrafagocitare.
Toxina adenilat ciclaz-like determin creterea cAMP intracelular,
efect antifagocitar.
Citotoxina traheal dermonecrotic - provoac tusea spastic drept
rspuns la efectul citocid.
Hemaglutinina proteic cu structura filamentoas (FHA),
(localizat la nivelul fimbriilor) reprezint cea mai important adezin
bacterian.
Adezine de suprafa capsulare - 14 antigene K, notate:
AGG1
AGG14.
132
Alte adezine membranare, care pot fi i antigene protectoare:

proteinele OMP15, OMP18, OMP69, 91 etc.
Endotoxina - lipopolizaharidul bacterian (microorganism gram
negativ).
Hemolizine.
Boala debuteaz printr-o etap cataral (7-14 zile), urmat de
perioada de stare - tusea paroxistic (convulsiv) i reacie limfocitar,
care pot dura 3-6 sptmni. Convalescena este nsoit de o perioad de
anergie.
Mortalitatea bolii este crescut la copilul sub un an, fapt care
impune vaccinarea.
Diagnostic de laborator direct

Metoda plcii tuite- nsmnare direct n timpul accesului de
tuse.
Recoltarea aspiratului traheo-bronic sau a lichidului de spltur
nazofaringian n perioada de acalmie; snge pentru serodiagnostic, din
sptmna 2-3.
Examenul microscopic direct, proprieti morfotinctoriale
Coloraia Gram - cocobacili gram negativi, dispui puin
caracteristic.
Imunofluorescena direct - d rezultate mai bune, prin examinarea
exudatului nazofaringian n imunofluorescen.
Mediul Bordet Gengou (cu factori de cretere i snge): colonii S
translucide, cu irizaii argintii n lumin oblic, cu o discret zon de
hemoliz n jur (aspect de perl tiat).
Prin pasaje repetate pe medii cu snge, culturile sufer mutaii i
apar colonii R, avirulente (colonii S - faza I, fazele II i III sunt
intermediare, coloniile R - faza IV).
Incubarea se realizeaz 3-5 zile n atmosfer umed.
Alte medii de cultur: Regan-Lowe, Stainer-Scholte (mbogite).
Strict aerobi.
Degradeaz unii aminoacizi.
133
Inocularea intranazal la oarece produce bronhopneumonie cu
exudate masive.
Inocularea intradermic la iepure produce dermonecroze.
Inocularea bacteriei la maimu i provoac tusea spastic.
Diagnostic de laborator indirect
Reacia de aglutinare n tuburi- anticorpii apar tardiv, n sptmna
3-8 a bolii; reacie folosit pentru controlul eficienei vaccinrii.
Reacia EIA - utilizeaz anticorpi IgA antiBordetella care cresc
dup infecia pe cale natural, nu dup vaccinare pe cale parenteral.
Sensibilitatea reaciei este de 90%, spre deosebire de reacia de aglutinare
sau RFC, cu o sensibilitate de 30-50%.
Hemoleucograma: leucocitoz cu limfocitoz absolut.
Indicele opsono-citofagic - crete n primele zile de boal
(diagnostic precoce).
Tratamentul
Eritromicina, Rifampicina sau Tetracicline. Eritromicina este
considerat antibioticul de elecie pentru c mpiedic multiplicarea
bacterian i produce eliminarea B. pertussis din orofaringe. Administrarea
preparatului are eficien n faza cataral, atenund contagiozitatea.
Profilaxia
Depistarea adulilor cu boal atipic.
Izolarea bolnavilor n faza cataral (Bordetella se elimin prin
picturile de saliv expulzate n timpul tusei) i chimioprofilaxia cu
Eritromicin.
Vaccinarea DTP (realizat la scar naional) reprezint cel mai
important mijloc de prevenie.
Vaccinul pertussis celular conine germeni n faza I, omori cu
formol sau prin cldur. Se administreaz ca trivaccin DTP, astfel: la 2
luni, la 4 luni, la 6 luni, la 1 an i n anul 3 de via. Vaccinul clasic induce
reacii adverse neurologice.
Vaccinul acelular - vaccin introdus recent n Japonia (1981) conine toxina pertusiss inactivat i hemaglutinina filamentoas i are
avantajul de a induce i imunitate celular (DTP induce doar imunitate
umoral). Un alt avantaj al acestui ultim vaccin const n raritatea
reaciilor adverse.
134
CAPITOLUL 12
GENUL BRUCELLA
Caractere generale
Genul cuprinde cocobacili gram negativi, imobili, nesporulai, cu
activitate metabolic redus; speciile genului infecteaz animalele, boala
survenind n mod accidental la om (antropozoonoz). Boala a fost
denumit febra ondulant.
Reprezentani:
Brucella melitensis;
Brucella suis;
Brucella abortus bovis;
Brucella canis.
Patogenez, aspecte clinice

Poarta de intrare pentru bacterii este reprezentat prin tractul
gastrointestinal (consumul alimentelor provenite de la animalele infectate)
sau prin leziunile cutanate (risc la zootehniti).
Bacteria prezint parazitism celular, localizndu-se preferenial n
sistemul reticuloendotelial. Poate produce microabcese cu zone de
necroz. Cronicizarea bolii depinde de capacitatea de multiplicare
bacterian la nivelul celulelor imunologice (blocarea mecanismelor
exploziei respiratorii n cadrul fagocitozei).
Nu s-au detectat exotoxine specifice. Endotoxina reprezint un
important factor de patogenitate.
Tulpinile capsulate prezint antigene K.
Antigenele de suprafa: A, M, sau L (similar antigenului de
virulen Vi). Proporia antigenelor A\M caracterizeaz speciile studiate.
Boala debuteaz dup o perioad de incubaie de 1-2 sptmni.
Simptomatologia polimorf (febr, transpiraii, dureri musculare) persist
cteva sptmni. Sindromul febril ondulant dureaz cteva luni. Sechelele
bolii sunt variate: artrita, meningita, uveita i orhita. Rata de mortalitate
este de 5-10%.
Snge pentru hemocultur.
Lichid cefalo-rahidian.
135
Urin.
Aspirat de mduv osoas sau puncie hepatic.
Puncie ganglionar etc.
Diagnostic microscopic din produsul patologic
Cocobacili gram negativi imobili, capsulai, n cultur tnr,
aezai preponderent intracelular.
Izolarea pe medii de cultur
Brucella-Bouillon;
Brucella-Agar;
Castaneda.
Identificare
Proprieti morfotinctoriale:
Cocobacili gram negativi, aspect neconcludent la examenul
microscopic.
Proprieti de cultur
Bacteriile prezint necesiti nutritive complexe (bulion F, geloza cu
extract de ficat de viel).
Specia Brucella abortus bovis necesit incubare n atmosfer cu 510% CO2.
Pe medii lichide tulbur uniform mediul.
Pe medii solide formeaz colonii mici, transparente, S, cu cretere
lent - (3-4 sptmni).
Pentru hemoculturi se utilizeaz procedeul Castaneda (mediu
difazic).
Se pot cultiva i pe medii celulare (ovocultura).
Cultivarea n atmosfer de CO2 - pozitiv la Brucella abortus bovis.
Producerea de hidrogen sulfurat - pozitiv la Brucella suis i
Brucella abortus.
Testul ureazei - rapid la Brucella suis.
Testul catalazei - pozitiv.
Identificarea speciilor pe baza comportamentului diferit n testele
bacteriostatice cu colorani (fuxina, tionina, verde malachit).
136
Identificarea speciilor cu seruri monospecifice A, M, prin reacii de

aglutinare pe lam i n tuburi.
Inocularea unui filtrat de cultur intraperitoneal la cobai conduce la
septicemie, cu microabcese n organele parenchimatoase.
Reacia Huddleson
Reprezint o aglutinare pe lam, care pune un diagnostic rapid de
boal. Diagnosticul se continu cu reacia de aglutinare n tuburi (Wright).
Reacia Wright
Pozitiv la un titru > de 1/100.
Dac reacia este negativ, dei semnele clinice de boal sunt
evidente, se pune problema existenei n serul de cercetat a anticorpilor
blocani. Detectarea acestora se realizeaz prin testul Coombs i Blocking.
Detecteaz rapid i sensibil Ig M antiBrucella.
RFC cu antigen Wright.
Determinarea indicelui opsono-citofagic (IOC crete n cursul
infeciei).
Diagnosticul indirect biologic
Se efectueaz intradermoreacia la brucelin, care atest starea de
hipersensibilitate de tip tardiv instalat n urma bolii.
Tratament
Tetraciclina reprezint antibioticul de elecie. Asocierea
Tetraciclinei cu Streptomicina scade incidena sechelelor bolii.
Tratamentul este puin eficient datorit localizrii intracelulare a
bacteriei.
Profilaxia
Pasteurizarea laptelui.
Eradicarea bolii la animale (utiliznd un vaccin specific).
Msuri de protecie a personalului din sectorul zootehnic.
137
CAPITOLUL 13
GENUL RICKETTSIA
Caractere generale
Familia Rickettsiaceae cuprinde genurile Ricketsia, Coxiella i
Ehrlichia.
Bacteriile genului Rickettsia sunt cocobacili mici (0,3-0,5mm), cu
peretele celular gram negativ-like. Conin n peretele celular peptidoglican
i lipopolizaharid. Prezint parazitism celular obligatoriu, elemente
precum NAD, ATP, acetyl-CoA fiind furnizate de ctre celula infectat (nu
cresc pe medii sintetice). Rezervorul bacterian este animal, bolile fiind
transmise la om prin insecte (artropode).

Genul Rickettsia
Grupul tifos
Ricketsia prowazecki:
tifos exantematic (vector - pduchele);
tifos de recdere (boala Brill).
Ricketsia moserii:
tifos endemic murin (vector - puricele).
Grupul febrelor ptate
Ricketsia ricketsii:
febr ptat a Munilor Stncoi (vector - cpua).
Ricketsia conorii:
febr butonoas (vector - cpua).
Ricketsia sibirica:
rickettsioza siberian (vector - cpua).
Ricketsia australis:
rickettsioza australian (idem).
Ricketsia tsutsugamushi :
febra oriental (larve de acarieni).
Genul Coxiella
Coxiella burnetti:
febra Q (vector - cpu sau transmis prin contact
interuman).
Genul Ehrlichia
Erhlichia chaffensis:
ehrlichioz (cpua).
138

Rickettsiozele sunt zoonoze (rezervorul animal este reprezentat
preponderent de roztoare, animale domestice). Tifosul exantematic are
rezervor uman. Vectorii sunt diverse artropode (purece, cpu, acarieni,
pduche). Rickettsiozele sunt febre exantematice, adic boli febrile nsoite
de erupii cutanate i tulburri nervoase (somnolen, apatie, delir).
Rickettsiile ptrund n organism prin artropodele vectoare i se multiplic
n celulele endoteliale ale vaselor mici, cu diferite consecine nefavorabile:
erupie, tromboze vasculare, necroze cutanate i la nivelul diverselor
organe: cord, ficat, creier, rinichi. Moartea poate surveni prin CID sau
insuficien cardiac.
Parazitismul intracelular obligatoriu se explic prin
permeabilitatea excesiv a membranei citoplasmatice, care nu poate reine
unii metabolii eseniali (ATP, NAD, acetil-CoA). Prin sinteza unei
fosfolipaze, bacteria distruge fagozomii i se multiplic abundent n
citoplasma celulei gazd (apar incluzii); Rickettsiile inhib opsonizarea i
procesul de activare al macrofagelor: adenopatia reflect de fapt
ineficiena reaciei inflamatorii. Vasculita se caracterizeaz prin abundente
infiltrate celulare cu mononucleare. ocul endotoxic poate s apar prin
aciunea endotoxinei.
Pentru zona noastr geografic prezint importan ricketsiozele din
grupul tifos, febra butonoas i febra Q.
Febra Q, produs de Coxiella burnetti se caracterizeaz prin febr i
un sindrom pseudogripal. Cazurile grave prezint infiltrate
bronhopneumonice. Complicaiile bolii sunt rare: hepatit, endocardit,
meningoencefalit. Nu apar erupii cutanate n aceast boal.
Erlichioza (E. chaffeensis) prezint un tropism special pentru
monocite. Sindromul febril este nsoit de leucopenie, trombocitopenie,
eventual hepatit. Erupia i vasculita sunt semne rare. Rezervorul
bacterian l constituie cerbul, iar vectorul este cpua. Boala este
rspndit n America de Nord, Japonia i Malaezia. Diagnosticul de
laborator se realizeaz prin reacia n lan a polimerazei.
Snge n primele zile de boal; Dou probe de ser sunt recoltate la
interval de 15 zile pentru diagnostic serologic dinamic;
Triturat de coagul sanguin dup ziua a 7-a de boal, pentru a
elimina aciunea anticorpilor;
Probe bioptice din piele, pentru diagnosticul febrelor ptate.
139
Transportul sngelui i a probelor bioptice se realizeaz n stare

congelat.
Diagnosticul direct bacteriologic
Examenul microscopic
Nu d relaii foarte valoroase. Se realizeaz dup izolarea bacteriei
pe sisteme celulare:
Prin colorare Giemsa, Giemenez sau Machiavello (dup cultivare
n ou embrionat). n coloraia gram se coloreaz dificil. Bacteriile au forme
cocobacilare, cu aezare necaracteristic.
Identificarea bacteriei direct n celula infectat, prin
imunofluorescen.
Izolarea
Se realizeaz numai pe sisteme vii (celulare).
Inocularea n ou embrionat de 5 - 7 zile, n sacul vitelin. Se obin
culturi abundente. Se pot prepara antigene folosite pentru reacii
serologice.
Inocularea la cobai de sex masculin, intraperitoneal.
Cobaiul face o reacie febril, care poate evolua spre vindecare sau
spre moartea animalului. Tegumentul regiunii scrotale rmne nemodificat
n cazul R. prowazecki, spre deosebire de reaciile eritematoase care apar
n cazul febrelor ptate.
Inocularea n culturi de esuturi
Se utilizeaz pe linii celulare Verro sau pe culturi de limfocite.
Unele rickettsii se multiplic n citoplasm, altele n nucleu i citoplasm.
Evidenierea bacteriilor n celule infectate se realizeaz prin coloraia
Giemsa sau prin imunofluorescen.
Diagnosticul indirect serologic
Reaciile serologice pot fii nespecifice i specifice.
Reaciile nespecifice utilizeaz antigene nrudite, precum tulpina
Proteus OX19 pentru Rickettsia prowazecki.
Reacia Kudicke-Steuer este o reacie de aglutinare pe lam
(nespecific), utilizat ca metod de triaj n focarele de tifos exantematic.
Reacia Weil-Felix reprezint o reacie la aglutinare n tuburi,
cantitativ. Pentru diagnostic titrul semnificativ va fi mai mare dect 1/200.
Pentru diagnosticarea altor rickettsii, antigenele nespecifice sunt preparate
din tulpini Proteus OX2 i OXk.
140
Reacii specifice - utilizeaz antigene specifice speciei de

identificat. Se execut:
RFC Ida Bengston pe probe perechi de seruri;
Reacii de aglutinare pe lam sau n tuburi;
Reacii de hemaglutinare pasiv;
Imunofluorescena indirect - detecteaz anticorpi Ig M sau Ig G
specifici speciei. Reprezint metoda diagnostic de referin;
Imunofluorescena direct evideniaz R. rickettsii n biopsia din
leziunile cuta-nate (febra ptat a Munilor Stncoi - America de Nord).
Pentru diagnosticul febrelor ptate se utilizeaz i latex aglutinarea;
Radioimunotestarea (RIA);
Metoda imunoenzimatic (ELISA);
PCR (reacia n lan a polimerazei ).
Diagnosticul diferenial ntre tifosul exantematic clasic i cel de
recdere
n tifosul de primoinfecie, reacia Weil-Felix i RFC se pozitiveaz
dup prima sptmn de boal, anticorpii specifici fiind preponderent Ig
M.
n tifosul de recdere (la fotii bolnavi), RFC este pozitiv (Ig G la
titruri mari, fixe), n timp ce reacia Weil-Felix rmne negativ.
Intradermoreacia cu o suspensie inactivat de Ricketsia prowazecki
pune n eviden starea de hipersensibilitate de tip tardiv (eritem, edem)
care apare dup trecerea prin boal. Reacia poate pune i diagnosticul
retrospectiv al mbolnvirii.
Tratamentul
Antibioticele de elecie sunt Tetraciclinele i Cloramfenicolul.
Tratamentul trebuie administrat precoce, din cauza ratei de mortalitate de
3%-8%; boala este anergizant, riscul recderilor la supravieuitorii tratai
incorect fiind cuantificat la 15% la circa 2-3 sptmni de la episodul
iniial, din cauza persistenei bacteriei n macrofage. Pentru a diminua
riscul recderilor, antibioticul se administreaz nc 4-6 zile de la dispariia
sindromului febril.
Profilaxia
Profilaxia recderilor prin tratament corect.
Distrugerea vectorilor (deparazitare).
141
Profilaxia la contaci, cu doze sptmnale de Doxiciclin, timp de

6 sptmni de la contactul infectant. Vaccinul este ineficient (preparat din
bacterii omorte); stimuleaz puin rspunsul imun T dependent.
Diagnosticul de laborator n febra Q

Coxiella burnetti are proprieti distincte comparativ cu celelalte
rickettsii:
Posed dimensiuni mai mici i endospor.
Nu prezint nrudiri antigenice cu tulpinile de Proteus.
Infecia se manifest ca o pneumonie interstiial i se transmite pe
cale aerogen sau prin consumul alimentelor infectate.
Diagnosticul direct bacteriologic
sput, snge, l.c.r., lapte i fragmente de placent animal.
Izolarea
n sisteme celulare: cobai, ou embrionat sau culturi de celule.
Diagnosticul serologic
Este specific i utilizeaz: RFC, reacii
imunofluorescena indirect.
Test de patogenitate
Infecia produce avort la cobie gestante.
de
aglutinare,
Profilaxia
Se adreseaz persoanelor care lucreaz n mediul veterinar.
Vaccin antifebr Q (omort) - puin utilizat.
142
CAPITOLUL 14
GENUL CHLAMYDIA
Caractere generale
Genul cuprinde bacterii cu perete celular gram negativ-like, cu
parazitism celular obligatoriu (incapabile s sintetizeze ATP). Se pot
cultiva prin inoculare n sisteme vii: animale de laborator, ou embrionat,
culturi de celule. Ciclul de multiplicare are loc n citoplasma celulei,
rezultnd incluzii caracteristice: corpusculi elementari i corpusculi
reticulai.
Produc infecii la om, animale i psri.
Reprezentani, afeciuni produse

Chlamydia trachomatis:
trahom (tipurile antigenice A, B, Ba, C);
infecii pulmonare
tipurile
antigenice
infecii oculare (conjunctivita cu incluzii)
D, F, G, H, I, J,
K;
infecii urogenitale (uretrita negonococic)
limfogranulomatoza venerian (tipurile antigenice L1, L2, L3).
Chlamydia psittaci:
psitacoza (pneumonie atipic);
infecii la animale: pneumonie, enterit, avort, encefalit.
Chlamydia pneumoniae:
infecii respiratorii (pneumonie atipic).

Metabolismul bacterian nu produce ATP, energia fiind furnizat de
ctre celula gazd. Parazitismul celular este obligatoriu; ciclul de
dezvoltare bacterian dureaz 48 de ore. Corpusculii elementari reprezint
forma infecioas extracelular (0,3 m diametru). Ptrund n celul prin
endocitoz receptor indus, acumuleaz material celular i se transform
ntr-o particul mai mare, cu 1m n diametru, denumit corpuscul
reticulat sau corpuscul iniial (element metabolic activ, bogat n ARN),
care sufer procese de diviziune binar; apar incluzii intracitoplasmatice.
Corpusculii iniiali formeaz dup aproximativ 20 de ore corpusculi
elementari care vor fi eliberai prin liza celulei, astfel nct apar noi cicluri
de multiplicare bacterian, dependente de ATP-ul celular.
143
Se atinge un oarecare echilibru ntre gazd i parazit, infeciile

subclinice, latente fiind mai frecvent ntlnite dect cele clinic manifeste.
Rspunsul imun umoral este slab i nu previne reinfecia.
Este o antropozoonoz, boala transmindu-se i de la animal la om.
Spre exemplu, Chlamydia psittaci produce pneumonie aviar (la
papagal) i uman. Chlamydia trachomatis se transmite prin contact direct
interuman.
Chlamydia posed antigene de suprafa (proteina MOMP - 62 kD)
i hemaglutinine care favorizeaz ataarea pe suprafaa celulelor.
Persistena intracelular se explic prin mecanisme de inhibare a formrii
fagolizozomilor. Rspunsul imun celular este responsabil pentru
distruciile tisulare n procesul inflamator, cu att mai mult cu ct bacteria
posed o toxin endotoxin-like.
Toxina termolabil este produs de ctre toate speciile Chlamydiei;
produce un efect letal la animalul de experien (oarecele), dup inoculare
intravenoas.
Infecii produse de ctre Chlamydia trachomatis

Oculare
Trachomul - reprezint o infecie cronic ocular (cu aspect
folicular), rspndit n Africa i Asia, cu evoluie inevitabil spre orbire.
Se estimeaz c 400 de milioane de oameni au aceast boal i circa 20 de
milioane dintre acetia sunt orbi.
Conjunctivita cu incluzii - apare att la adult (la care coexist
afeciunea genital), ct i la nou-nscui (conjunctivit purulent aprut
n urma trecerii ftului prin tractul genital matern infectat).
Genitale
Limfogranulomatoza venerian (LGV) - cu transmitere sexual.
Uretritele negonococice (UNG) - cu tablou clinic asemntor
gonoreei.
Uretritele postgonococice - sunt frecvent ntlnite.
Epididimita acut - apare mai ales la vrste sub 35 de ani, nsoind
3% din cazurile de uretrite negonococice.
Infecii ale tractului genital feminin: uretrite purulente, cervicite,
salpingite - ntlnite frecvent la femei cu parteneri sexuali multipli. Nounscuii provenii din mame infectate prezint conjunctivita cu incluzii sau
chiar pneumonie. Rolul Chlamydiei trachomatis n avort i n infertilitate
nu este cunoscut suficient. Probabil infecia respectiv poate interfera cu
implantarea oului.
144
Sindromul Reiter cuprinde triada: artrit, conjunctivit i leziuni

mucocutante, aprute la 1-4 sptmni dup debutul uretritei.
145
Infecii produse de ctre Chlamydia psittaci

Psitacoza, ornitoza-pneumonic interstiial atipic cu febr, tuse,
mialgii; uneori cu evoluie subclinic. Sechelele posibile sunt miocardita,
encefalita, meningita, hepatita.
Riscul major pentru boal l au cresctorii de psri.
Tetraciclina i Eritromicina sunt ageni terapeutici valoroi;
lactaminele sunt ineficiente.
Infecii produse de ctre Chlamydia pneumoniae

Pneumonie - cu evoluie bifazic: ncepe cu o afeciune de tract
respirator superior care se continu cu o bronhopneumonie. Rezervorul
bacterian este strict uman. 50% dintre infecii sunt subclinice. Diagnosticul
serologic nu este diagnostic de rutin.
Tetraciclina este eficient.
Recoltarea secreiilor (cervicale, uretrale, oculare, din ancrul
genital, nazofaringiene i din tractul respirator), se realizeaz cu
minimum 3 tampoane pentru fiecare tip de secreie. Transportul probelor
se realizeaz n medii speciale, n condiii de refrigerare.
Recoltarea sngelui - pentru diagnostic serologic.
Diagnosticul microscopic direct
Se evideniaz incluziile intracitoplasmatice tipice pe frotiuri
colorate Giemsa, Giemenez sau Machiavello i n imunofluorescen cu
anticorpi monoclonali. Chlamydia trachomatis - prezint incluzii
compacte cu matrice de glicogen (Iod+), cu densitate redus de corpi
elementari. Chlamydia psittaci - prezint incluzii difuze, fr matrice de
glicogen (Iod ) i cu densitate crescut de CE.
Microscopia direct este mai eficient n infeciile cu Chlamydia
psittaci.
Evidenierea antigenelor chlamydiene solubilizate, prin tehnica EIA
n faz lichid (Chlamydiazime) sau n faz solid (Test Pack Chlamydia).
Evidenierea acizilor nucleici chlamydieni prin: PCR, Sothern Blot.
Izolarea
Prin inoculare pe culturi de celule
Se folosesc liniile celulare HeLa sau McCoy, dup iradierea sau
tratarea culturii cu IUDR (metabolism lent).
146
Dup 2-3 zile de la incubaie se detecteaz incluziile specifice prin

coloraia Giemsa sau prin imunofluorescen.
Prin inoculare n sacul vitelin al oului embrionat de 6-7 zile.
Metoda este utilizat pentru prepararea antigenelor pentru reacii
serologice.
Izolarea pe animale de laborator
Inocularea intracerebral la oarece pentru Chlamydia trachomatis.
Caracteristici metabolice
Elibereaz CO2 pornind de la glucoz, piruvat i glutamat;
Conin dehidrogenaze;
Sunt incapabile s sintetizeze ATP (parazitism obligatoriu
intracelular).
Structura antigenic
Antigenele de grup - lipopolizaharidice
- comune tuturor speciilor Chlamydiene;
- indentificabile prin RFC i IF.
Antigenele de specie - proteine membranare externe
- Chlamydia trachomatis prezint 15 serotipuri: A, B, Ba, C, DK,
L1, L2, L3
- identificabile prin imunofluorescen.
Reacia cu fixare de complement - tehnica Ida Bengston.
Imunofluorescena - detecteaz anticorpii specifici (IF - detectarea
Ig M pentru diagnosticarea pneumoniei la nou-nscut (Chlamydia pneumoniae)).
Serotestarea
incluziei integrale - anticorpii anti incluzii
chlamydiene sunt evideniai prin IF sau ELISA.
Intradermoreacia FREI - evideniaz starea de hipersensibilitate de
tip tardiv care apare n timpul infeciei, n special n limfogranulomatoza
venerian. Reacia poate pune diagnosticul retrospectiv al bolii.
Tratament
De elecie sunt Tetraciclina, Eritromicina.
147
Chlamydia trachomatis prezint sensibilitate la Sulfadiazin i

Cicloserin, spre deosebire de Chlamydia psittaci (criteriu de diagnostic
diferenial).
Profilaxie
Stabilirea precoce a diagnosticului i aplicarea tratamentului.
Imunizarea animalelor cu vaccinuri anti Chlamydia.
Imunizarea omului nu se practic.
148
CAPITOLUL 15
GENUL MYCOPLASMA
Caractere generale
Genul Mycoplasma aparine familiei Mycoplasmataceae, alturi de
Ureaplasma i genul Acholeplasma. Bacteriile genului au dimensiuni
reduse (0,2-0,3 m), nu posed perete celular (motiv pentru care nu se pot
colora n coloraiile convenionale); membrana citoplasmatic este bogat
n colesterol i n molecule lipopolizaharidice fixate. Se dezvolt greu pe
medii acelulare (necesit steroli ca factori de cretere, pe care i nglobeaz
n membrana citoplasmatic). Se dezvolt i pe sisteme celulare
(parazitism celular facul-tativ). Au afinitate pentru membrana celulelor
eucariote. Lipsa peretelui celular determin un polimorfism accentuat
(forme de par, forme cocoide sau cocobacilare). Genul cuprinde
aproximativ 26 de specii care produc infecii la om i la animale.
Mycoplasma a fost izolat n 1898, de la bovine cu
pleuropneumonie. n 1937 a fost izolat de la om, dintr-un abces pulmonar
i a fost denumit pleuropneumonia-like organism (PPLO).

Mycoplasma pneumoniae:
pneumonie atipic primar;
faringite, otite buloase, bronite;
anemie hemolitic, artrite;
meningoencefalite;
eritemul multiform (sindromul Stevens-Johnson).
Mycoplasma hominis:
salpingite, abcese pelviene, febr puerperal, pielonefrit.
Mycoplasma salivarium; Mycoplasma orale;
Mycoplasma
buccale:
infecii respiratorii.
Mycoplasma fermentans; Mycoplasma arthridis:
artrite.
Ureoplasma urealyticum:
uretrite.
Mycoplasma genitalium:
endometrite post partum, post abortum.
149
Mycoplasmele pot coloniza aparatul respirator, cavitatea bucal,
tractul genito-urinar. Specia Mycoplasma pneumoniae este patogen, restul
speciilor fiind condiionat patogene. Exist specificitate de gazd (specie
patogen la om sau la animal). Parazitismul bacterian este celular.
Bacteriile nu posed exotoxine sau endotoxine. Efectul citolitic este
enzimatic, prin catalaze i peroxidaze; asupra hematiilor acioneaz prin
hemolizine (se explic anemia hemolitic n unele infecii cu Mycoplasma
pneumoniae). Bacteriile elaboreaz o prelungire celular denumit vrf
pufos (aspectul de par), vrf cu care neap celula infectat i i preia
substanele nutritive. Genomul mic i lipsa peretelui celular permit
contactul strns cu celula gazd, fapt care determin apariia unor
autoanticorpi, mai ales n infecia cu Mycoplasma pneumoniae: anticorpi
anti celul pulmonar, anti limfocite, anti celul muscular neted, etc. Se
produc complexe imune n exces, care sunt rspunztoare de
simptomatologie extrapulmonar: leziuni ale sistemului nervos, artrite,
eritem multiform.
Pneumonia atipic primar este ntlnit n mod special la adulii
tineri din colectiviti. Copiii sub 5 ani fac forme clinice inaparente. 20%
dintre pneumonii au ca agent etiologic Mycoplasma pneumoniae, care
determin totui o pneumonie atipic: stare ge-neral alterat, tuse
neproductiv, n contrast cu semnele radiologice cu localizare
preponderent hilar i interstiial. Anemia hemolitic, sindromul StevensJohnson, meningoencefalitele i artritele reprezint consecinele
fenomenelor autoimune ale infeciei cu Mycoplasma pneumoniae (rspuns
imun umoral semnificativ). Bolnavul rmne contagios nc 14 sptmni
dup ameliorarea bolii.
Infeciile tractului urogenital sunt produse de ctre Mycoplasma
hominis, Ureaplasma urealyticum. Mycoplasma hominis produce
endometrit post partum sau post abortum (complicat cu septicemii n
10% din cazuri) i boli inflamatorii pelviene.
Ureaplasma urealyticum difer de restul speciilor prezentate prin
abilitatea producerii ureazei. Bacteria se gsete n tractul urogenital al
adulilor cu via sexual activ, ndeosebi la persoanele cu parteneri
sexuali multipli. Ureaplasma produce 50% dintre uretritele negonococice
ale sexului masculin.
exudat faringian;
150
sput;
exudate inflamatorii;
secreii uretrale, secreii vaginale;
snge pentru examinri serologice.

Imunofluorescena poate evidenia Mycoplasma pneumoniae n
macrofagele din sput.
Coloraiile speciale (Giemsa) evideniaz polimorfismul bacterian
(form de par, cocoidal, cocobacilar), datorat absenei peretului celular.
Izolarea, proprieti de cultur
Pe medii acelulare complexe, cu factori de cretere (colesterin,
lecitin, extract de drojdie, extracte proteice existente n ser sau lichid
ascitic). Se incubeaz la 37C timp de 3-7 zile (bulion Difco, agar Difco).
Coloniile M. pneumoniae sunt mici (10-100 m), implantate n mediu, cu
centrul nfundat i periferia clar (aspect tipic de ou ochiuri). Pe medii
cu snge produce hemoliz. Coloniile U. urealitycum sunt minuscule,
granulare. Cultivarea n mediu lichid determin apariia unor filamente.
Pe medii celulare - M. pneumoniae se cultiv n oul embrionat pe
membrana corioalantoidian sau n culturi de celule.
M. pneumoniae necesit atmosfer aerob : celelalte specii sunt
facultativ.
Mycoplasmele degradeaz glucoza, reduc srurile de tetrazoliu n
mediu.
Ureaplasmele hidrolizeaz ureea (ureazo pozitive).
Speciile bacteriene se difereniaz prin antigene glicolipidice,
(evideniabile prin RFC) i proteice (evideniabile prin testul ELISA).
Metodele de diagnostic sunt nespecifice i specifice.
Metode nespecifice
151
Criohemaglutinarea - evideniaz anticorpi (aglutinine la rece), care

produc aglutinarea hematiilor proprii bolnavilor (autoaglutinarea) i a
hematiilor de grup 0 (izoaglutinarea), la temperatura de 4C. Reacia este
pozitiv n 80% din cazurile de pneumonie atipic primar i n 10% din
pneumoniile atipice cu alt etiologie. Titrul maxim se observ n
sptmna 3 - 4 de boal.
RFC cu antigene preparate din Bacillus antitratus.
Reacii de aglutinare cu antigene nrudite streptococice.
Metode specifice
RFC cu antigene lipidice purificate mycoplasmatice.
Imunofluorescena indirect.
Reacii de hemaglutinare pasiv cu antigene mycoplasmatice
adsorbite pe hematii tanate. Diagnosticul serologic se realizeaz pe probe
duble de ser, recoltate la interval de 10-14 zile. Creterea titrului de
anticorpi n proba 2 este revelatoare pentru diagnostic.
ELISA, RIA
Tratament
Sunt utile Tetraciclinele (ex: Doxyciclina) i Macrolidele (ex.:
Azithromycin): a-ceste antibiotice sunt preferate deoarece sunt eficiente i
mpotriva Chlamydiei, implicat n etiologia uretritelor negonococice sau a
unor infecii respiratorii atipice, greu de diagnosticat. Fluoroquinolonele
sunt eficiente pentru microorganismele rezistente la Peniciline,
Cefalosporine.
Profilaxie i control
Izolarea eptelului infectat cu pleuropneumonie i agalactie.
Nu exist vaccin disponibil.
Tratamentul antibiotic corect al subiecilor cu pneumonie atipic
primar.
152
CAPITOLUL 16
FAMILIA ENTEROBACTERIACEE
Caractere generale
Cuprinde bacterii larg implicate n patologia infecioas, care
produc afeciuni digestive, dar i infecii localizate extraintestinal: infecii
urinare, respiratorii, meningeale, cutanate etc.
Sunt bacili gram negativi, mobili sau imobili, patogeni sau
condiionat patogeni, cu sediul n intestinul uman sau animal. Bacteriile
prezint un metabolism extrem de activ i cultiv cu uurin pe medii de
cultur. Sunt aerob/anaerob facultative.
Reprezentani
Tabel nr. 10
genuri)
Familia Enterobacteriacee (clasificare n triburi,
TRIBUL
Escherichiae
Edwardsiellae
Klebsiellae
Proteae
Salmonellae
Yersiniae
Erwiniae
Neclasificate
GENUL
Escherichia
Shigella
Edwardsiella
Klebsiella
Enterobacter
Serratia
Hafnia
Proteus
Providencia
Morganella
Salmonella
Arizona
Citrobacter
Yersinia
Erwinia
Pectobacterium
Cedecea
Kluyvera
Tatumella
Ewingella etc.
153
Clasificarea corect din punct de vedere tiinific i se atribuie lui P.

R. Edwards, W. H. Ewing (teste biochimice) i F. Kauffman (structur
antigenic).
Patologia produs este extrem de divers, aspect rezultat din
varietatea factorilor de patogenitate bacterieni:
Endotoxina - lipozaharidul este compus din smburele
polizaharidic, antigenul O somatic i lipidul A cu rol toxic.
Exotoxinele sunt prezente la unele specii bacteriene, produse prin
mecanisme genetice extracromozomiale (spre exemplu E. Coli prezint
toxine Shiga-like, enteroinvazive dar i toxine enterotoxigene).
Adezinele bacteriene (factori de colonizare) realizeaz ataarea
bacteriilor pe suprafaa celulelor susceptibile. Acest rol l au pilii sau
fimbriile (antigene K, F sau P) i recent numiii pili CFA (factori
antigenici de colonizare ai intestinului). Pilii P sunt proteine fimbriare ale
unor tulpini de E. Coli generatoare de pielonefrit. Pilii F au rol n
fenomenul de conjugare bacterian (pilii sexuali).
Antigenul K de virulen (de la cuvntul german Kapsel) sunt
asociate cu polizaharidele capsulare cu rol antifagocitar.
Pentru serotipare se utilizeaz prezena antigenelor O (somatice), H
(flagelare) i K (de virulen).
Importana enterobacteriilor poate fi apreciat din mai multe puncte
de vedere: participare n patologia uman - produc infecii digestive,
urinare, toxiinfecii alimentare, enterite, infecii piogene, endometrite,
otite, sinuzite, pneumonii, septicemii (majoritatea infeciilor produse de
ctre bacteriile comensale fiind infecii intraspitaliceti).
Pe plan igienico-sanitar - prezena E. Coli i a coliformilor n
mediu reprezint indicatori ai contaminrii fecale (caracterizarea igienicosanitar a apei i a alimentelor).
Pe plan biologic - aduc importante informaii n biologia
molecular, n studiul geneticii i metabolismului bacterian.
Diferenierea enterobacteriilor fa de ali bacili gram negativi se
realizeaz prin:
degradarea oxidativ i fermentativ a glucozei;
reducerea nitrailor la nitrii;
testul citocromoxidazei negativ.
Alte teste realizeaz ncadrarea n trib i gen. Pentru precizarea
speciei se utili-zeaz att proprieti biochimice, ct i structura antigenic
O, H, K.
154
Genurile cu patogenitate cert sunt Salmonella i Shigella, restul

genurilor cuprinznd bacterii condiionat patogene i comensale.
155
CAPITOLUL 17
GENUL SALMONELLA
Caractere generale
Cuprinde bacili gram negativi, mobili, care reprezint
caracteristicile definitorii ale enterobacteriaceelor din tribul Salmonelleae:
lactoza nu este fermentat;
fermenteaz glucoza cu producere de gaz;
produce H2S din tiosulfat;
utilizeaz citratul ca unic surs de atomi de C;
decarboxileaz lizina, arginina i ornitina.

I. Salmoneloze majore:
Salmonella tiphy:
febra tifoid
Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B:
febre paratifoide.
II. Salmoneloze minore:
S. tiphimurium, S. choleraesuis, S. anatum, S. panama etc.:
toxiinfecii alimentare, enterite.
S. choleraesuis, alte specii grup C:
stri septicopiemice.
Toate serotipurile Salmonellei sunt patogene pentru om. Toate
speciile bacteriene conin endotoxina (antigenul O). Invazinele sunt
proteine care realizeaz aderena i penetrarea n celulele epiteliale
intestinale. Salmonella are un parazitism facultativ intracelular, conferit
prin 40 de proteine diferite i prin antigenele Vi, blocnd fenomenele
fagocitozei: catalaza, superoxid dismutaza neutralizeaz radicalii activi ai
oxigenului; factorii implicai n rezistena la pH acid contribuie la
supravieuirea bacteriilor n fagolizozom.
156
Principalele infecii produse de ctre Salmonella se clasific n

Salmoneloze minore i majore.
Enterocolitele,
gastroenteritele,
toxiinfeciile alimentare apar dup ingestia a 105 - 108 bacterii. Dup
ingestie are loc ataarea bacterian la nivelul celulelor epiteliale ale
intestinului subire, apoi penetrarea n celule i migrarea n lamina propria,
n regiunea ileocecal. Are loc multiplicarea n foliculii limfoizi anexai
intestinului. Local se acumuleaz PMN i rezult o reacie inflamatorie cu
eliberare de prostaglandine, care duc la stimularea adenilat ciclazei (cu
apariia unui sindrom diareic nesanguinolent). Simpto-mele tipice
enterocolitei Salmonelozice (diaree, febr, dureri abdominale, cefalee)
apar dup 24 de ore de la inoculare i evolueaz autolimitat 2-5 zile.
Complicaiile de temut sunt dezechilibrele hidroelectrolitice, care apar mai
uor la pacieni cu vrste extreme.
Salmonelozele majore (febra tifoid i febra paratifoid) apar dup
ingerarea a 103 bacterii. Dup multiplicarea iniial la nivelul celulelor
ansei ileocecale i n macrofagele din formaiunile limfoide intestinale are loc bacteriemia iniial, urmat de invadarea unor organe i formaiuni
limfatice. Multiplicarea crescut n ficat i splin este urmat de o a doua
bacteriemie masiv i de eliminarea prin bil i prin urin. Dup prima
sptmn de boal, Salmonella se elimin prin materiile fecale, excreia
prelungindu-se nc mult timp la purttorii cronici.
n febra tifoid starea general este alterat: febr, bradicardie, stare
de oc, apatie sau delir. Simptomatologia general este determinat n
principal de endotoxin, care stimuleaz fenomenele inflamatorii.
Complicaiile sunt de temut: perforaii intestinale, tromboflebite,
colecistite, angiocolite, coagulare intravascular diseminat, microabcese.
Sursa de contaminare o constituie cei cu infecii subclinice i
purttorii. Pentru alte salmoneloze, sursa de infecie o reprezint apa i
alimentele (lapte, ou, mezeluri).
n ultimii ani, n Romnia, a crescut numrul de cazuri de
Salmoneloze minore (incidena 5 o/oooo) i a sczut numrul cazurilor de
febr tifoid (incidena sub 0,07 o/oooo).
n febrele enterice: snge n prima sptmn de boal i materii
fecale n sptmna a doua i a treia, urin n sptmna a treia i a patra
de boal; snge pentru examinri serologice n sptmna a doua, a treia i
a patra.
157
n septicemii salmonelozice: snge.

La purttori: materii fecale, bil, snge (examinri serologice).
n gastroenteritele Salmonelozice: materii fecale, lichid de
vrstur, alimentul.
Examenul direct microscopic
al produsului patologic nu d informaii utile diagnosticului.
Izolarea germenului:
Hemocultura - aprox 10 ml de snge se recolteaz i se
nsmneaz n bulion nutritiv sau pe bil de bou steril. Se incubeaz la
termostat 7 zile; dup 24-48 ore se fac pasaje pe medii pentru intestinali,
geloz snge, medii care se incubeaz n aerobioz i anaerobioz.
Coloniile lactozo negative se izoleaz n cultur pur pe geloz nclinat.
Coprocultura - se nsmneaz materii fecale din scaunul emis
spontan. Pentru depistarea purttorilor, recoltarea se face din scaun de
purgaie. Se utilizeaz mediul de conservare Cary Blair. Mediul de
mbogire este obligatoriu (cu selenit acid de sodiu). Din acest mediu se
fac treceri pe cel puin dou medii selective pentru intestinali, urmate de
izolare n cultur pur.
Urocultura - urina se centrifugheaz i sedimentul se nsmneaz
pe Wilson Blair, pe selenit acid de sodiu i pe mediile selective pentru
germeni intestinali.
Bilicultura - se centrifugheaz bila B i sedimentul este nsmnat
ca i n cazul coproculturii.
Identificarea
Se realizez prin cercetarea:
Proprietilor morfotinctoriale: - bacili gram negativi mobili cu
cili peritrichi.
Proprietilor de cultur:
Pe ADCL: colonii S lactozo-negative semitransparente, cu punct
negru central.
Pe Mc Conkey, Istrate-Meitert: colonii S lactozo-negative.
Tulbur uniform mediile lichide.
Coloniile lactozo - negative sunt repicate pe mediile multitest:
TSI+MIU sau TSI+MILF.
158
Salmonella prezint caractere biochimice comune cu ale

enterobacteriaceelor dar i teste caracteristice:
Fermenteaz glucoza cu producere de acid i gaz (S. tiphy nu
produce gaz).
Utilizeaz citratul ca unic surs de atomi de carbon.
Nu fermenteaz lactoza sau zaharoza.
Nu produc indol, ureaz, acetil - metil - carbinol.
Produc hidrogen sulfurat (TSI) i lizindecarboxilaz.
Structura antigenic variat O, H, K definete cele 1200 de specii
ale genului (schema de identificare Kauffmann-White).
Antigenul O conine 65 de antigene diferite, denumite factori de
specificitate. Grupurile O sunt notate cu litere mari A, B, C, D, . n
fiecare grup, un factor de specificitate este caracteristic, fiind prezent la
toate serotipurile.
Antigenele H sufer fenomenul variaiei de faz (faz 1 - 2),
aspect al variaiei antigenice.
Antigenul K de virulen (Vi) confer bacteriilor O
inaglutinabilitate, proprietate care dispare prin fierberea suspensiei
celulare.
Tabel nr. 11 Salmonella Structura antigenic
Grupul de Salmonelle
A - S. paratiphy A
Antigenul
O, K
1, 2, 12 -
Antigen H
Faza 1
Faza 2
a
-
B - S. paratiphy B
1, 4, 5, 12 -
1, 2
C - S. paratiphy C
6, 7, Vi
1, 5
D - S. tiphy
9, 12, Vi
159
Precizarea structurii antigenice O, H, K se realizeaz prin reacii de

aglutinare cu seruri anti O polivalent, seruri antiSalmonella de grup AO,
BO, CO, DO etc. i antiflagelare (anti faz 1, anti faz 2). Formula astfel
obinut se compar cu cele existente n tabelul Kauffmann-White.
Serodiagnosticul Widdal se practic numai n cazul Salmonelozelor
majore. Reacia evideniaz prezena anticorpilor fa de Salmonella tiphy,
S. paratiphy A i S. paratiphy B, separat pentru antigenele O i H. Testul
este dinamic i urmrete creterea titrului de anticorpi pe msura
desfurrii bolii (titrul maxim se nregistreaz n sptmna 3-4 a
afeciunii).
La bolnavii fr antecedente vaccinale, un titru O de 1/250 este
considerat semnificativ, cu att mai mult cu ct titrul se dubleaz n 5-7
zile.
160
La subiecii cu antecedente vaccinale recente, titrurile O de 1/250 i

H de 1/500 apar frecvent; dublarea titrului dup 7 zile confer titrurilor o
valoare diagnostic.
Lizotipia
Este util n scopuri epidemiologice, preciznd filiaiunea cazurilor
n epidemii de toxiinfecii alimentare i infecii intraspitaliceti, deoarece o
tulpin de Salmonella i pstreaz aceleai caractere de lizotipie att n
timpul bolii, n covalescen ct i la purttor cronic.
Tratamentul
Tratamentul clasic n febra tifoid se realizeaz cu Cloramfenicol
sau cu asociere de Ampicilin-Sulfamid. Studii recente recomand
Quinolonele, att pentru bolnavi, ct i pentru purttori.
Profilaxia
Igiena personal, respectarea regulilor igienice n industria
alimentar.
Vaccinuri antiSalmonella tiphy, care se administreaz persoanelor
cu risc (ex: vaccinul cu tulpina atenuat Ty21a sau vaccin preparat din
imunogenul Vi).
Depistarea i tratarea purttorilor cronici de Salmonella.
161
CAPITOLUL 18
GENUL SHIGELLA
Caractere generale
Genul cuprinde bacili gram negativi imobili, lactozo-negativi, cu
caracteristici comune enterobacteriaceelor, cu patogenitate cert.
Reprezentani
Sunt clasificai n grupuri antigenice, (funcie de structura
antigenului O somatic) i produc dizenteria bacilar.
Grup A - Shigella dysenteriae - tip 1- Shigella dysenteriae shigae
- tip 2 - Shigella dysenteriae schmitzi
- tipurile 3-10 - tipuri Large-Sachs
Grup B - Shigella flexneri
- tipurile 1-6
Grup C - Shigella boydi
- tipurile 1-15
Grup D - Shigella sonnei
- variantele S i R
Shigella este patogen prin invazivitate. Etapa primordial a
procesului patogenic const n ptrunderea intracelular i multiplicarea n
celula epitelial a intestinului gros a Shigellei virulente (capacitatea
invaziv are codificare plasmidic - genele "invasion" - inv). Odat
internalizate, bacteriile se nconjoar de o membran asemntoare
fagozomilor, aspect care confer rezistena la fagocitoz. Procesul de
penetraie intraeritrocitar duce la sensibilizarea imunocitelor din lamina
propria, cu elaborare de mediatori imunitari i transformare blastic
limfocitar. Imunoglobulinele A secretoare au un rol major n aprarea
antibacterian. Invazia bacteriilor n celulele nvecinate are loc dup
eliberarea acestora din vezicula de chlatrin (prin aciunea hemolizinei de
contact) i prin intermediul unor proteine specifice de difuziune, care
utilizeaz citoscheletul celulei ca mijloc de propulsie a microorganismelor
n zona adiacent.
Mucoasa intestinal i vasele mici sufer leziuni citotoxice, prin
eliberarea de endotoxin i produi de metabolism bacterian. Astfel se
explic apariia n scaun a mucusului, PMN i sngelui (sindrom diareic
de tip inflamator).
Testul de patogenitate utilizat pentru fenomenul penetrrii
intraepiteliale este testul keratoconjunctivitei la cobai (testul Sereny), care
precizeaz tulpinile virulente KC+.
162
Shigella dysenteriae shigae produce cele mai grave forme de boal

datorit unei exotoxine neurotrope, toxina Shiga, cu efect enterotoxic,
neurotoxic i citotoxic.
Mecanismul molecular de aciune al acestei exotoxine vizeaz
inhibarea sintezei proteice: fragmentul B leag toxina pe receptorii
glicoproteici intestinali, iar fragmentul A realizeaz ADP - ribozilarea
factorului EF1 de elongare al lanului polipeptidic. In vitro, aceast sintez
scade brusc n 30, n timp ce in vivo efectul citopat citocid apare dup
aproximativ 24 de ore.
n 1950, la noi n ar s-au descris ultimele cazuri de mbolnviri cu
Shigella shigae. n prezent dizenteria este produs de Shigella flexneri i
Shigella sonnei, care produc forme clinice mai uoare de boal, uneori
etichetate ca enterit. Dizenteria evolueaz epidemic n colectiviti cu
condiii igienico-sanitare deficitare; transmiterea este fecal-oral, hidric.
Exist riscuri de cronicizare a bolii la cazurile incorect tratate.
Se recolteaz scaune mucosanguinolente de emisie spontan sau
materii fecale prelevate cu sonda Nelaton sau tampon rectal (la copii mici
sau n situaia depistrii purttorilor). Mediul de transport Cary Blair este
foarte indicat.
Examenul microscopic direct al produsului patologic
Este orientativ - evideniaz bacili gram negativi i hematii.
Izolarea
Se nsmneaz materiile fecale pe medii selective pentru germeni
intestinali: Istrate Meitert, AABTL, ADCL etc.
Coloniile lactozo negative se repic.
Identificarea
Se face pe baza:
Proprietilor morfotinctoriale:
bacili gram negativi imobili, fr aezare caracteristic;
Caracterelor de cultur: coloniile sunt S, minuscule, lactozo
negative. Pe mediile lichide tulbur uniform mediul (voal mtsos).
163
Carateristici biochimice
Shigella fermenteaz glucoza cu producere de acid, fr gaz
(excepie Shigella flexneri tip 6).
Shigella dysenteriae (grup A) nu fermenteaz manita, n timp ce
Shigellele aparinnd grupurilor antigenice B, C, D o scindeaz.
Shigella nu fermenteaz lactoza, cu excepia Shigellei dysenteriae
tip 1 i Shigellei sonnei tip 1, care o fermenteaz tardiv.
Nu produc H2 S, nu posed ureaz, nu produc acetil metil carbinol.
Prezint testele biochimice comune Enterobacteriaceelor.
Identificarea tulpinilor patogene se realizeaz prin teste de
aglutinare pe lam sau n tuburi: Shigella dysenteriae prezint 10 tipuri
distincte antigenic O, Shigella flexneri- 6 tipuri, Shigella boydii- 15 tipuri
i Shigella sonnei- 1 tip antigenic, care prezint variaia S-R. Serotipurile
se grupeaz n 4 grupuri antigenice, notate A, B, C, D (vezi paragraful
Reprezentani).
Teste de patogenitate
Tulpinile
enteroinvazive
sunt
evideniate
prin
testul
keratoconjunctivitei (testul Sereny). Inocularea culturii sub pleoapa unui
cobai i va produce acestuia conjunctivit mucopurulent.
Exotoxina Shigella dysenteriae shigae se testeaz pe oarecele alb.
Antibiograma
Este obligatorie.
Tratamentul
Impune
reechilibrare
hidroelectrolitic
i
administrarea
chimioterapicelor antibacteriene, conform antibiogramei: Amoxicilin,
Sulfamide, Tetraciclin, etc.
Se studiaz anticorpii antitoxin Shiga (seroterapia nu este nc
introdus n tratament).
Profilaxia
Respectarea regulilor de igien: controlul sanitar al apei, dezinfecia
obiectelor contaminate, tratamentul corect al bolnavilor i depistarea
purttorilor (persoane care lucreaz n sectorul alimentar sau sanitar).
Istrati i colaboratorii au pus la punct vaccinul Vadizen, preparat
dintr-o tulpin atenuat de Shigella flexneri 2a, nedependent T32 (1961),
care se administreaz per oral, cu o reducere a morbiditii cu 80% n
colectivitile vaccinate. Acest preparat poate preveni dizenteria cronic.
164
CAPITOLUL 19
GENUL ESCHERICHIA. ESCHERICHIA COLI
Caractere generale
Genul cuprinde bacili gram negativi mobili, larg rspndii n natur
(n microbiocenoza intestinal uman i animal), n alimente, ap sau pe
sol. Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi, lactozo pozitivi. Escherichia
Coli prezint nrudiri cu bacteriile genurilor Klebsiella, Enterobacter,
Citrobacter, formnd un grup aparte, cu denumirea de "coliformi".
Prezena acestor bacterii n apa potabil constituie un indicator al aa-zisei
contaminri fecale (indicatori ai polurii apei).
Reprezentani
Escherichia Coli reprezint cea mai important specie a genului,
implicat n infecii variate (infecii digestive, urinare, meningeale,
piogene, infecii generalizate, infecii nozocomiale).
Dei Escherichia Coli este un germen comensal (ntlnit
preponderent n microbiocenoza de tip intestinal), el poate deveni patogen
n urma unor fenomene genetice extracromozomiale, realizate prin
intervenia unor plasmide sau bacteriofagi.
Adezinele bacteriene - au rol n ataarea bacteriilor pe suprafaa
celulelor epiteliale intestinale (ex.: pilii CFA- factori antigenici de
colonizare, codificai prin plasmida ENT) i pilii P, cu rol n ataarea pe
celulele tractului urinar (tot cu codificare plasmidic).
Capsula, cu rol antifagocitar - apare la tulpinile Escherichiei Coli
K1, care produc 84% din totalul meningitelor nou nscutului (tulpina K 1
prezint similitudini antigenice cu anumite glicoproteine umane - N-CAM,
fapt care explic lipsa de reactivitate imunologic fa de Escherichia Coli
K1).
Tulpinile care prezint antigenul de suprafa B sunt implicate n
apariia unui sindrom toxico-septic al nou-nscutului.
Endotoxina produce leziunile caracteristice.
Exotoxinele
sintetizate
prin
mecanisme
genetice
extracromozomiale sunt variate:
Enterotoxinele termolabile LT1 i LT2 sunt toxine cholerae-like,
produc sindrom diareic apos prin stimularea guanilat-ciclazei.
165
Enterotoxina termostabil ST acioneaz prin creterea nivelului cGMP, cu alterarea transporturilor ionice celulare.
Exotoxina enterohemoragic (enteroinvaziv sau verrotoxin,
tulpini EHEC, VTEC). Tulpinile secretoare - fenotipurile uropatogene produc hemolizine cu efecte citotoxice.
Afeciunile gastrointestinale sunt produse prin trei tipuri de tulpini
virulente:
Tulpinile ETEC provoac un sindrom diareic apos (toxigen),
holeriform, prin hipersecreia de ap i electrolii determinat prin
enterotoxina ST, LT sau ambele.
Serotipurile EHEC produc sindrom diareic, sindrom hemolitic
uremic i colite hemoragice. Serotipul O157 H7 produce forme grave de
boal printr-o toxin Shiga-like, denumit i verrotoxin pentru c este
citotoxic fa de celulele culturii Verro.
Tulpinile EPEC de Escherichia Coli produc sindrom diareic apos
sau mucos, mai ales la copii cu vrste sub 2 ani. Factorul de patogenitate
este reprezentat printr-o adezin cu codificare plasmidic, distrugtoare de
microvili.
Serotipurile EIEC produc un sindrom diareic de tip dizenteriform,
cu efect citotoxic pronunat. Testul keratoconjunctivitei la cobai este
pozitiv.
Tulpinile enteroagregative de Escherichia Coli (EAgEC) posed
fimbrii care distrug celulele marginii n perie a intestinului. Sindromul
diareic este de tip apos; se poate croniciza.
Infeciile tractului urinar
Escherichia Coli reprezint etiologia cea mai frecvent a acestor
infecii la sexul feminin (serotipuri O1, O21, O41, O5, O6, O7, etc.).
Meningitele neo-natale
La nou nscui, tulpinile de Escherichia Coli K 1 produc meningite i
septicemii.
Infecii intraspitaliceti (infecii de plag chirurgical, urinare,
septicemii).
Sindroamele clinice prezentate se pot transmite fecal-oral, prin
alimente contaminate sau din surs endogen (mai ales infeciile tractului
urinar). Infeciile intraspitaliceti apar ca o consecin a nerespectrii
igienei actului medico-chirurgical.
Recoltarea prelevatelor biologice:
166
Materii fecale, urin, secreii purulente, snge, lichid cefalorahidan,

secreii biliare, alimente, esuturi recoltate de la cadavru.
Este nerevelator.
Izolarea
Se realizeaz pe medii selective pentru germeni intestinali: ADCL,
Istrate - Meitert, AABTL, GEAM, Brolacin. Pentru izolarea E. Coli din
urin se folosete tehnica Uricult sau Urinat. Urocultura cantitativ
stabilete diagnosticul de infecie urinar la 105 germeni ml urin. Pe
medii selective apar colonii S lactozo pozitive care se replic pe mediul
AABTL.
Identificarea
Se realizeaz pe baza proprietilor:
morfotinctoriale: n coloraie gram se vizualizez bacili gram
negativi fr aezare caracteristic. Germenul este ciliat.
de cultur:
n bulion tulbur uniform mediul (voal mtsos);
Pe ADCL: colonii S lactozo pozitive (roii);
Pe AABBTL, Istrate - Meitert, Brolacin: colonii S lactozo
pozitive (galbene);
Pe mediul GEAM (Levine) apar colonii S negre, cu luciu
metalic pe geloz snge unele tulpini de E. Coli produc hemoliz.
Prezint caracterele biochimice comune ale enterobacteriaceelor.
Testul rou metil este pozitiv;
Testul Voges Proskauer este negativ;
Fermenteaz glucoza i lactoza cu producere de acid i gaz;
Utilizeaz acetatul ca unic surs de atomi de carbon;
Produce indol, nu produce ureaz i H2S.
Tulpinile enteropatogene se identific prin reacii de aglutinare pe
lam cu ser polivalent i apoi cu seruri de tip (anti O 26, anti O55, antiO111,
etc.) i chiar prin imunofluorescen.
167
Tulpinile enteroinvazive se identific tot prin reacii de aglutinare

pe lam cu seruri specifice antiA (anti O 26, anti O28, antiO112, etc.) i antiB
(anti O136 , anti O142, etc.).
Tulpinile
enteroinvazive
se
evideniaz
prin
testul
keratoconjunctivitei la cobai.
Tulpinile enterotoxigene se evideniaz prin testul ansei ligaturate la
iepuri.
Citotoxicitatea tulpinilor EHEC i EPEC se evideniaz n culturi de
celule.
Tratamentul
Se realizeaz conform indicaiilor antibiogramei (sensibilitate la
Polimixine, Quinolone, Aminoglicozide, Cefalosporine).
Profilaxia
Respectarea normelor sanitare n colectiviti de copii, spitale,
sectorul alimentaiei publice.
168
CAPITOLUL 20
GENUL KLEBSIELLA
Caractere generale
Sunt bacili gram negativi (enterobacterii capsulate, imobile), cu
activitate metabolic intens (hidrolizeaz variai hidrai de carbon cu
producere de acid i gaz). Germenul este larg rspndit n natur (n
intestinul omului i animalelor, n ap, pe sol, n mediul spitalicesc).

Klebsiella pneumoniae:
pneumonii, infecii piogene, urinare, digestive, infecii
spitaliceti.
Klebsiella ozenae:
ozen, infecii cronice ale aparatului respirator.
Klebsiella rinoscleromatis:
rinosclerom.
Klebsiella oxytoca:
enterite, infecii nozocomiale.
Klebsiella pneumoniae este un germen condiionat patogen,
implicat n patologia uman prin multiplicare i invazivitate.
Capsula conine antigene polizaharidice K (de virulen), care
imprim rezistena la fagocitoz i precizeaz serotipul (80 de tipuri
diferite). Primele dou variante antigenice produc o pneumonie sever,
primar sau secundar, la pacienii imunodebilitai.
Antigenele de nveli confer un spor de virulen.
Endotoxina bacterian produce leziuni caracteristice (Klebsiella
este un germen gram-negativ).
Unele specii ale genului pot produce o enterotoxin termostabil
(similar celei sintetizate de E. Coli), codificat prin plasmida Ent.
Klebsiella pneumoniae produce infecii ale tractului respirator
(pneumonie, bronite, broniectazii, abcese pulmonare), infecii urinare,
infecii piogene cu localizri variate, septicemii (ca infecii nozocomiale),
infecii digestive (sindrom diareic enterotoxigen) la adult i copil.
Klebsiella ozenae produce ozen, Klebsiella rinoscleromatis rinosclerom iar Klebsiella oxytoca d enterite.
169
Materii fecale urin, secreii purulente, snge, lichid cefalorahidian;
Alimente.
Izolarea
Se realizeaz pe:
Geloz simpl, geloz snge;
ADCL, Istrate Meitert, AABTL;
Bulion.
Identificarea
Se realizez pe baza proprietilor:
Morfotinctoriale: bacili gram negativi ncapsulai, imobili;
De cultur: colonii S, mucoide, mari, lactozo pozitive cu fenomen
de cameleonaj pe Istrate Meitert i AABTL.
Posed proprietile comune enterobacteriaceelor.
Testul rou metil este negativ.
Testul Voges Proskauer este pozitiv.
Utilizeaz citratul i malonatul ca unic surs de atomi de carbon.
Degradeaz diverse zaharuri (lactaza este pozitiv).
Structura antigenic
Antigenele O sunt antigene de grup, n timp ce antigenele K
definesc tipurile (identificabile prin reacia de umflare a capsulei).
Klebsiella pneumoniae inoculat intraperitoneal produce septicemii
letale pentru animalele de experien.
Lizotipia i tipizarea bacteriocinic este accesibil laboratoarelor de
specialitate.
Antibiograma
Este obligatorie pentru un tratament antibiotic corect.
Profilaxia
Respectarea normelor de igien personal i igien spitaliceasc.
170
CAPITOLUL 21
GENUL PROTEUS
Caractere generale
Cuprinde bacili gram negativi foarte mobili (flagelai), lactozo
negativi, ureazo +, FAD+. Bacilii se gsesc n microbiocenoza intestinal,
n alimente, n natur.
Reprezentani:
Proteus vulgaris;
Proteus mirabilis;
Proteus morgagnii;
Proteus rettgeri.
Aspecte clinico - patogenetice

Germen condiionat patogen, produce infecii variate la
imunodebilitai: enterite, toxiinfecii alimentare, infecii urinare, infecii
nozocomiale, septicemii.
Proteus este patogen n special prin invazivitate: mobilitatea
extraordinar i permite invadarea tractului urinar i a torentului circulator.
Produce ureaza, care alcalinizeaz urina i favorizeaz formarea calculilor.
Elibereaz endotoxina dup distrucia peretelui celular.
materii fecale, urin, lichid cefalorahidian, snge;
secreii purulente, etc.
Evideniaz bacili gram negativi polimorfi (forme filamentoase,
bacilare, cocobacilare). Flagelii se pot evidenia n coloraii speciale.
Izolarea pe medii
Se dezvolt pe:
medii lichide;
geloz simpl;
geloz snge;
medii pentru germeni intestinali.
171
Identificarea
Se realizeaz prin studierea proprietilor morfotinctoriale i mai
ales pe baza proprietilor de cultur:
- pe geloz simpl sau geloz snge prezint fenomenul de
invazie (dezvoltarea culturii sub forma unor valuri concentrice, datorit
mobilitii). Fenomenul Dienes este pozitiv - linie de demarcaie aprut
ntre 2 tulpini de Proteus invazive.
- pe medii lichide tulbur uniform i abundent mediul, degajnd un
miros de putrefacie.
- pe geloz nclinat prezint fenomenul de crare pe toat
suprafaa mediului, chiar dac inoculul se depune la baza mediului, n apa
de condensie.
- pe ADCL i Istrate Meitert - germenii dezvolt colonii S lactozo
negative, cu centru negru (aspect tipic n ochi de pisic).
Diagnosticul diferenial se realizeaz cu genurile Morganella i
Providencia.
- Prezint proprietile biochimice comune enterobacteriaceelor.
Este glucozo +, lactozo -, H2S+, ureazo +, FAD +.
- Mobil (mediul MIU).
Structura antigenic
Identificarea serotipurilor O i H se realizeaz prin reacii de
aglutinare pe lam.
Tulpinile OX2, OX19, OXK prezint nrudiri antigenice cu unele
specii ale genului Ricketsia.
Determinarea patogenitii
Inocularea tulpinilor virulente la animalele de experien le
provoac acestora un abces la locul inoculrii sau chiar o reacie
septicemic letal.
Antibiograma, tratament
Rezistena germenilor la antibiotice i chimioterapice este
remarcabil.
172
CAPITOLUL 22
GENUL PSEUDOMONAS
Caractere generale
Familia Pseudomonadaceae are 4 genuri, speciile importante din
punct de vedere medical fiind ncadrate n genul Pseudomonas. Genul
cuprinde bacili aerobi i facultativ anaerobi, gram-, mobili, datorit
flagelilor polari. Microorganismele respective sunt rspndite n natur
(agent de putrefacie al materiei organice). Prefer zonele umede.

Pseudomonas aeruginosa:
determin un spectru larg de mbolnviri, n special la pacieni
cu imunitate sczut: infecii ale tractului urinar, respirator,
gastrointestinal,
infecii
oculare,
otite,
infecii
nozocomiale
(suprainfecteaz arsuri i plgi chirurgicale), fibroz chistic, septicemii,
endometrite, endocardite, etc.
Pseudomonas cepacia (acum Burkholderia cepacia):
produce aceleai infecii ca i Pseudomonas aeruginosa
(septicemii, endocardite, infecii urinare, respiratorii, abcese, conjunctivite
etc.).
Pseudomonas mallei:
produce morva, antropozoonoz (ulceraii, abcese,
septicemie). Boala este rar.
Pseudomonas pseudomallei:
Meloidoza - antropozoonoz (forma pulmonar sau
septicemic).
Pseudomonas
maltophilia
(actualmente
Xanthomonas
maltophilia):
produce infecii nozocomiale grave (endocardit, pneumonii,
meningite, mastoidite, abcese, conjunctivite, infecii urinare etc.).
Pseudomonas stulzeri:
Pseudomonas thomasii:
Pseudomonas pseudoalcaligenes: -infecii nozocomiale variate.
Pseudomonas paucimobilis:
Pseudomonas putrefaciens:
Pseudomonas picketti:
-infecii nozocomiale i
Pseudomonas fluorescens:
toxii fecii alimentare
Pseudomonas putida:
173
Pseudomonas aeruginosa. Aspecte clinico-patogenetice.

Bacteria conine un bogat echipament n factori de patogenitate.
Adezinele piliare contribuie la ataarea pe celulele epiteliale (pe
receptorii glicosfingolipidici GM1 i GM2 i pe receptori proteici). Pilii au
capacitatea de a se contracta i de a se extinde, ceea ce faciliteaz
adeziunea. Genele codificante ale pililor specific i o peptidaz, (care
controleaz exportul de fosfataz alcalin), fosfolipaza C, elastaza,
exotoxina A, factori cu rol important n patogenicitate.
Adezinele nepiliare sunt considerate exoenzima S, proteinele
flagelare i exopolizaharidul capsular (ultimul avnd i rol antifagocitar).
Polizaharidul respectiv conine alginat (fenotip mucoid +), implicat n
producerea fibrozei chistice i n producerea unui glicocalix bacterian.
Colonizarea esuturilor cu Pseudomonas aeruginosa are loc n mod
preferenial pe esuturi lezate anterior.
Enzimele extracelulare sunt factori de invazivitate; majoritatea
tulpinilor produc mai multe tipuri de proteine proteolitice, care pot degrada
elastina, colagenul, cazeina, fibrina, etc. Majoritatea tulpinilor
Pseudomonas aeruginosa elibereaz lipaze, esteraze, lecitinaze,
ceramidaze, care agraveaz leziunile tisulare. Fosfolipaza C hidroli-zeaz
fosfatidil colina din membranele celulare, avnd rol n patogeneza
infeciilor severe. Exist i o fosfolipaz C hemolitic, rspunztoare de hemoliza observat pe medii cu snge. Fosfolipaza C inoculat intradermic
produce eritem i edem. Enzimele extracelulare au un rol major n
formarea leziunilor tisulare (de remarcat ectima gangrenosum, lezuni
necrotice focale aprute n cursul septicemiilor cu Pseudomonas
aeruginosa).
Toxinele speciei Pseudomonas aeruginosa sunt variate:
Exotoxina A - de natur polipeptidic - inhib sinteza proteinelor in
vivo i in vitro, printr-un mecanism asemntor toxinei difterice
(blocheaz factorul de elongare EF2, blocnd sinteza proteic prin
fragmentul A). Are efect letal mai puternic dect endotoxina. Vaccinul
preparat doar prin anatoxina A este slab protector n infeciile piocianice
experimentale.
Exotoxina S - este termostabil i apare ca un agregat necovalent
ntre dou peptide ExoS i Exo T, codificate de cte dou gene separate.
Producerea de ExoS a fost corelat cu capacitatea bacteriei de a
disemina din zonele de colonizare epitelial, cauznd septicemii letale.
ExoS inoculat n culturi de celule HeLa are un efect citotoxic puternic i
efect antifagocitar.
174
Pentru unele izolate clinice care lezeaz epiteliul pulmonar in vivo

s-a observat prezena ExoT i absena ExoS. Ulterior, pe lng ExoS i
ExoT s-a descoperit o protein de 70 kda (ExoU), tot cu rol citotoxic. Se
remarc asocierea ExoS i producerea de fosfolipaz C la fenotipurile
foarte virulente. Bruno i colab. (1998), apreciaz faptul c ExoS este
implicat n creterea morbiditii i mortalitii la subiecii cu fibroz
chistic.
Endotoxina (LPS) induce la om i animal efecte generale: febr,
modificri vasculare, leucopenie, uneori oc endotoxic cu efect letal. LPS
imprim relativa impermeabilitate a peretelui celular pentru antibiotice
(factor suplimentar al rezistenei).
Enterotoxina caracterizeaz unele tulpini de Pseudomonas
aeruginosa care produc enterite acute. Enterotoxina are codificare
plasmidic i d testul ansei ligaturate pozitiv.
Citotoxina acid - este o protein tip leucocidin care acioneaz
asupra membranei citoplasmatice a granulocitelor i limfocitelor, dar nu i
asupra hematiilor. Sunt eliberate astfel enzime lizozomale cu efect
proinflamator.
Ali factori de patogenitate: pigmeni, siderofori, molecule semnal
sau care imprim serorezistena.
Pigmenii (8) contribuie la virulen prin stimularea formrii de
anion superoxid i de ap oxigenat, cu efecte nocive asupra celulelor i
chiar cu efect de tip bacteriocinic.
Exemple: piocianina (pigment verde albastru caracteristic
Pseudomonas aeruginosa), fluoresceina (pigment galben-verzui
fluorescent), piorubina (pigment rou), piomelanina (pigment brun),
clororafina, oxiclororafina. Toi pigmenii prezint activitate
bacteriocinic. Pigmentogeneza este favorizat de aerobioz.
Piocinele sunt bacteriocinele elaborate de ctre Pseudomonas
aeruginosa. Sunt utilizate pentru tipizare n scopuri epidemiologice
(piocinotipia).
Sideroforii de tipul piochelinei leag fierul prezent n serul uman i
contribuie la virulen prin stimularea metabolismului bacterian.
Pseudomonas aeruginosa elaboreaz molecule semnal ca N-acyl
homoserin lactona (AHL), cu rol n reglarea determinanilor de virulen ai
acestor bacterii.
mbolnviri cauzate de Pseudomonas aeruginosa
175
Sunt favorizate de statusul imunodeprimant al pacientului i de

manoperele medi-co-chirurgicale invazive. Infeciile cutanate supurative
sunt nsoite de secreii purulente cu nuan verzuie; se suprainfecteaz
plgile postoperatorii, arsurile, escarele de decubit, leziunile traumatice,
ulcerele de gamb etc.
Infeciile respiratorii - apar ca o consecin a intubaiilor,
bronhoscopiilor; se manifest ca pneumonii, bronhopneumonii, bronite,
pleurezii. Infeciile cronice cu Pseudomonas aeruginosa sunt prezente la
90% dintre pacienii cu fibroz chistic. Tulpinile bacteriene patogene
izolate prezint mari cantiti de alginat (slime - polizaharid mucoid).
Alginatul are un rol antifagocitar; exprimarea receptorilor F c pe neutrofile
este inhibat de ctre alginat.
Infeciile urinare sunt infecii nozocomiale i sunt recidivante.
Infeciile oculare apar pe fondul unor traumatisme anterioare sau
postoperator (conjunctivite, keratite, ulcere corneene).
Infeciile digestive apar prin aciunea tulpinilor secretante de
enterotoxin care produc enterite acute holeriforme.
Alte infecii (otite, otomastoidite, sinuzite) apar la copii i la cei cu
leziuni trauma-tice preexistente. Meningitele pot apare ca i o complicaie
a otitelor.
Dup operaii pe cord apar complicaii precum endocardite,
pericardite, arterite.
Septicemiile sunt generate de infecii profunde sau superficiale i au
o gravitate cu totul deosebit (mortalitate 50%, reprezentnd 10% din
septicemiile cu bacili gram- ).
Rspunsul imun antiinfecios este preponderent umoral, manifestat
la titruri nesemnificative i eficacitate sczut.
Se recolteaz: secreii purulente, leziuni necrotice suprainfectate,
secreii de la nivelul arsurilor, materii fecale, urin, lichid cefalorahidian,
snge, sput etc.
Pentru depistarea infeciilor nozocomiale se recolteaz probe din
instalaii sanitare,
produse medicamentoase, alimente i ap.
Examen microscopic direct, proprieti morfotinctoriale:
Evideniaz bacili mobili, colorabili gram negativ.
176
Izolare pe medii i proprieti de cultur:

Se dezvolt bine pe medii uzuale, elibernd pigmenii caracteristici:
- Pe ap peptonat (sau bulion) - se dezvolt uniform, cu pelicul de
suprafa sub care se acumuleaz un pigment albastru-verzui; se degaj un
miros aromatic de salcm.
- Pe geloz simpl - apar colonii S, fluorescente cu eliminarea n
mediu a unui pigment galben-verzui (miros aromatic).
- Pe geloz snge - colonii S cenuii, lucioase care produc hemoliz, citocrom-oxidazo+.
- Pe mediile AABTL, ADCL, Istrate Meitert apar colonii S mici,
lactozo negative (verzi-albstrui), aderente de mediu (miros aromatic).
- Pe mediu selectiv GSP - se izoleaz bacilul din alimente, ap;
coloniile S sunt albastre-violet, nconjurate de o zon roie-violet.
- Pe mediul Loeffler - se observ bine eliminarea de pigment i
proteoliza.
Pigmentogeneza este pronunat n aerobioz; exist ns i tulpini
acromogene, care sunt ncadrate n gen pe baza proprietilor biochimice.
Piocianina este un pigment solubil n cloroform, absolut
caracteristic genului iar fluoresceina este solubil n ap (pigment
necaracteristic, fiind produs i de ctre alte specii bacteriene).
degradeaz glucoza oxidativ;
este aerob, oxidazo+, catalazo-;
este lactozo-, indol-, H2S-;
testul rou - metil i Voges - Proskauer sunt negative;
reduce nitraii la nitrii;
ureaza i lizindecarboxilaza lipsesc, arginindehidrolaza e +;
posed o intens activitate proteolitic (lichefiaz gelatina) i
lipolitic;
secret hemolizin termostabil i factori de patogenitate toxici i
enzimatici;
pigmentogeneza +;
elibereaz mai multe tipuri de piocine.
Structura antigenic
- Conin antigenul O somatic, termostabil, lipopolizaharidic.
- Antigenele H flagelare, proteice, termolabile.
- Antigenele R - extrase din colonii S de Pseudomonas aeruginosa
sunt diferite de antigenele O; sunt slab imunogene i slab aglutinogene;
determin reacii ncruciate ntre diferite grupuri serologice O.
177
- Mucusul ( slime layer ) - este de natur polizaharidic, antigenic

i foarte toxic pentru animale de experien. Substana mucoid (alginat) extras din colonii mucoase, frecvent ntlnit n infeciile cronice ale
aparatului respirator.
Lizotipia:
Pentru scopuri epidemiologice, se practic tipizarea prin piocine
(piocinotipia) sau prin bacteriofagi (lizotipia) - 13BF.
Serotipia:
realizeaz tipizarea pe baza antigenelor O termostabile, prin reacii
de aglutinare (22 grupuri serologice).
Inocularea cobaiului sau oarecelui pe cale intraperitoneal cu o
tulpin virulent
produce peritonit acut, septicemie i moarte.
Inocularea subcutanat determin edem local, hiperemie i necroz.
Inocularea pe cornee produce ulceraii i reacii inflamatorii.
Enterotoxina poate fi testat prin testul ansei ligaturate (la iepure)
sau prin efectul citotoxic n culturi de celule.
Tratament, antibiograma
Antibiograma este obligatorie deoarece genul este multiplu rezistent
la diferite antibiotice. Se remarc sensibilitatea la Polimixine, la lactamine anti Pseudomonas (Carbenicilina, Sulbenicilina, Ticarcilina,
Ureidopenicilina, Mecilinam, Piomecilinam, Piperacilina, Furazlocilina,
Nocardicin A).
Eficiente sunt i Cefalosporinele (Cefsulodin, Ceftazidime) i
aminoglicozidele (Gentamicina, Tobramicina, Amikacina, Sisomicina).
Profilaxia
Vizeaz n special prevenirea infeciilor nozocomiale (dezinfecia
saloanelor, a slilor de baie, aplicarea msurilor de asepsie i antisepsie n
orice manoper medico-chirurgical).
Imunoprofilaxia.
178
CAPITOLUL 23
GENUL VIBRIO
Caractere generale
Aparine familiei Vibrionaceae; cuprinde bacili gram negativi
incurbai (aspect de virgul), flagelai - flagelul polar (frecvent) sau
flageli laterali; Facultativ anaerobi i oxidazo +.
Au ca habitat mediile acvatice bogate n sruri minerale; exist
specii patogene pentru om, dar i pentru fauna local (peti, molute etc.).
Reprezentani
Vibrio cholerae (serotip O1: Inaba, Ogawa, Hikojima), biotip El Tor
sau non grup O1 - NAG (neaglutinogeni cu serul anti O1).
Vibrio metschnikowii.
Vibrio parahaemoliticus.
Vibrio alginoliticus, fluvialiss, vulnificus etc.
Vibrio Cholerae
Cauzeaz holera, o gastroenterocolit acut febril, cu un important
sindrom de deshidratare (15 l/24 ore), care pune n pericol viaa
bolnavului. Vibrionul este lipsit de capacitate invaziv (nu ptrunde n
epiteliul intestinal) dar enterotoxina bimodal produce modificrile
fiziopatologice caracteristice, prin transformarea celulei intestinale - din
celul absorbant de ap i electrolii, n celul secretoare de ap i
electrolii (prin stimularea adenilat ciclazei).
Vibrio cholerae autentic (clasic) aparine serotipului O1 i produce
formele grave de boal. Biotipul El Tor (O1) produce forme clinice mai
uoare, cu letalitate sczut.
Tabelul nr. 12 - Diferenierea biotipurilor Vibrio cholerae i El Tor
(dup Ivanov)
Testul
Aglutinarea hematiilor de gin
Producerea de hemolizin solubil
Sensibilitatea la Polimixin
Sensibilitatea la BF de grup IV
Biotipul
V. CHOLERAE V. EL TOR
+
+
+
+
-
179
Holera evolueaz epidemic sau chiar pandemic. Exist un numr

semnificativ de purttori, mai ales pentru biotipul El Tor, care constituie
principala surs de infecie; la aceasta se adaug persistena vibrionilor n
mediul acvatic.
- materii fecale (au aspect riziform - zeam de orez);
- lichid de vrstur;
- la purttori se recolteaz scaun de purgaie salin;
- probe de ap potabil, alimente, ap de canal etc.
Diagnostic microscopic direct, proprieti morfotinctoriale
- vibrioni gram negativi cu dispoziie necaracteristic;
- vibrionii sunt mobili n preparat nativ.
Cresc pe medii simple, dar au nevoie de un pH alcalin;
- Pe ap peptonat alcalin (pH 9,21) - prezint o turbiditate slab,
cu formarea unui vl de suprafa;
- Pe mediul BSA (agar cu sruri biliare) - colonii S transparente,
uguiate.
Identificarea
- se realizeaz pe baza proprietilor morfotinctoriale, de cultur,
biochimice, antigenice etc.
- Testul indofenoloxidazei este + (se aplic testul cu reactiv asupra
unei colonii suspecte; dac testul se pozitiveaz se realizeaz apoi
aglutinarea cu ser anti O1);
- Testul indol +;
- Testul nitratreductazei +;
- Testul fermentrii carbohidrailor difereniaz 6 tipuri biochimice.
Tipul I Heiberg este caracteristic vibrionilor holerici.
180
Tabelul nr. 13 - Schema Heiberg

ZAHARURI
GRUPA DE FERMENTARE (HEIBERG)

II
III
IV
V
VI
+
+
+
-
zaharoz
I
+
manoz
arabinoz
181
Testul striului + (String test) - cultura de studiat se emulsioneaz

pe lam n soluie de dezoxicolat de sodiu i soluie salin fiziologic. Prin
ridicarea ansei de pe lam apare (n maxim 60 secunde) un filament
mucos.
Vibrionii holerici posed antigene O i H;
Antigenele H flagelare sunt comune;
Antigenele O prezint subfraciuni (A, B, C, ..., M) care determin 6
grupuri serologice; O1, O2, ..., O6. Vibrionii holerigeni aparin serotipului
O1 (aglutineaz cu ser O1);
Grupul O1 are subtipuri serologice, funcie de combinarea
fraciunilor A+B+C :
tipul I: Ogawa (A+B);
tipul II: Inaba (A+C);
tipul III: Hikojima (A+B+C);
tipul IV: fr nume (A).
Sunt date de capacitatea de multiplicare local i toxinogenez, care
poate fi investigat prin testul ansei ileale ligaturate la iepure.
Bacteria prezint un factor antigenic de colonizare (cu rol n
aderena de glicoproteinele intestinale), dar i endotoxin (specific
bacteriilor gram negative).
Lizotipia
- evideniaz 6 lizotipuri.
Antibiograma, tratament
Vibrionii holerici sunt sensibili la Tetracicline, Cloramfenicol,
Nitrofurani, Sulfamide. Reechilibrarea hidroelectrolitic prezint obiectul
terapeutic primordial.
Profilaxia
n anul 1913, I. Cantacuzino a realizat i utilizat vaccinul
antiholeric, coninnd tulpini bacteriene inactive, cu eficacitate de 30 50%. Actualmente se utilizeaz vaccinul antifragment B al toxinei holerice
(mai eficient).
182
CAPITOLUL 24
GENUL CAMPYLOBACTER
Caractere generale
Genul cuprinde bacterii gram negative n form de S sau spiralate,
mobile datorit flagelului polar. Este ncadrat n familia Spirillaceae.
Majoritatea speciilor genului produc infecii la animale. Infeciile
umane apar accidental, dup ingerarea apei sau alimentelor contaminate.
Reprezentani
Campylobacter foetus - subspecia jejuni/coli i subspecia
intestinalis;
sunt principalii ageni etiologici ai infeciilor la om;
Campylobacter sputorum - subspeciile: bubulus, mucosalis,
concisus;
Campylobacter fecalis;
Campylobacter foetus - subspeciile foetus i venerealis.
Not: Ultimii trei reprezentani produc infecii la animale.

Gastroenterita este cel mai frecvent tip de infecie uman, n special
la copii. Evolueaz asemntor dizenteriei (mecanism enteroinvaziv).
Enterotoxina termolabil a speciei Campylobacter foetus nu este nc pe
deplin caracterizat; toate speciile conin endotoxin.
Bacteriile genului pot produce meningite, artrite, septicemii, avort
spontan i ocazional infecii de tract urinar, la subiecii cu status imunitar
sczut (n special Campylobacter foetus).
Rezervorul bacterian l reprezint psrile i animalele domestice,
dar i omul bolnav, convalescent sau purttor sntos. Factorii favorizani
i constituie vrsta (0-2 ani), sezonul cald, profesiunea (zootehniti).
Recoltare
Materii fecale.
Examen microscopic
Preparat nativ, pe fond ntunecat sau frotiu colorat Gram, Giemsa.
183
Izolarea
Pe medii mbogite (bulion Oxoid), selective (Campy I. C.
suplimentat cu snge de berbec 7-10% i amestec de antibiotice etc.). Se
incubeaz n atmosfer microaerofil. Temperatura optim de incubare este
de 42 - 43C pentru Campylobacter jejuni/coli i 25C pentru
Campylobacter foetus.
Campylobacter jejuni/coli este catalazo + i oxidazo +;
Hidroliza hipuratului este pozitiv (+) la Campylobacter jejuni i
negativ (-) la Campylobacter foetus.
Diagnostic serologic
RFC.
ELISA.
Reacii de aglutinare.
Tratament
Cu
aminoglicozide,
hidroelectrolitic.
macrolide;
se
face
rehidratarea
Helicobacter pylori
Cu denumire anterioar Campylobacter pylori; este un spiril gram
negativ, ureazo pozitiv. Este prezent la nivelul mucoasei gastrice la 20%
dintre persoanele cu vrsta sub 30 ani i la 40 - 60% dintre subiecii cu
vrste peste 60 ani. Prevalena infeciei este mai mare n rile n curs de
dezvoltare (80%), la clasele sociale defavorizate i la sexul masculin.
Infecia cu Helicobacter pylori este una dintre cele mai frecvente infecii
cronice umane. Helicobacter pylori produce gastrite, ulcer gastroduodenal i este de asemenea asociat cu dezvoltarea cancerului gastric.
Studii recente au demonstrat c 8 hidroxideoxiguanozina (observat i n
carcinogeneza hepatic i renal), prezint nivele crescute la pacienii
infectai cu Helicobacter pylori. Enzima constituie un marker pentru ADNul lizat.
Factorii de patogenitate bacterieni: citotoxine, hemaglutinine,
hemolizine, fosfolipaze, proteaze i ureaza contribuie la realizarea
leziunilor tipice gastro-duodenale, leziuni n piedestal, de fapt eroziuni
ale mucoasei.
184
Efectuat n coloraii speciale (Giemsa, impregnare argentic,
coloraii cu verde de metil) evideniaz forme bacteriene spiralate.
Examenul microscopic al fragmentului biopsic gastro-duodenal poate
evidenia prezena leziunilor n piedestal i prezena bacteriilor. Acurateea
examenului histologic este crescut, dar metoda este invaziv.
Izolare pe medii
Dificil de realizat, pe medii mbogite (agar Columbia cu 18
aminoacizi, snge i vitamine n atmosfer microaerofil).
Testul ureazei intens +.
Posed antigenele O i H.
Evidenierea IgM sau IgG anti Helicobacter pylori (testele sunt noninvazive).
Alte teste:
- Crete nivelul lactoferinei n sucul gastric;
- Crete nivelul IL8 i al oxidului nitric la persoane cu gastrit
Helicobacter pylori+, spre deosebire de pacienii cu gastrite de alt
etiologie.
Tratament
Scheme terapeutice care includ asocieri ntre Amoxicilin,
Clarithromycin, Tetraciclin i Metronidazol, scheme care completeaz
tratamentul ulcerului gastro-duodenal.
185
CAPITOLUL 25
GENUL CORYNEBACTERIUM
Caractere generale
Speciile genului fac parte din microbiocenozele pielii, cavitii nazo
i orofarin-giene, tractului urogenital i intestinal, fiind denumite cu
termenul de bacili difteromorfi (comensali i condiionat patogeni). Specia
patogen pentru om este Chorynebacterium diphteriae.
Bacteriile genului sunt bacili gram pozitivi la limit, cu extremiti
bombate (n mciuc) prin prezena corpusculului metacromatic, cu
aezare caracteristic sub forma literelor chinezeti sau n palisade.
Reprezentani:
Chorynebacterium diphteriae (gravis, mitis, intermedius);
Chorynebacterium hofmanii;
Chorynebacterium xerosis;
Chorynebacterium cutis;
Chorynebacterium ulcerans;
Chorynebacterium pseudodiphtericus.
Chorynebacterium diphteriae
Aspecte clinice i patogenice
Difteria este o angin cu false membrane, produs de ctre speciile
toxigene. Toxina difteric este produs numai n urma conversiei lizogene
cu bacteriofagul tox, care conine n genomul su gena necesar pentru
sinteza toxinei. Strauss i Pappenheimer jr. au demonstrat faptul c
exotoxina difteric are o structur bimodal:
- fragmentul B cu GM 38.000 are rol n ataarea i ptrunderea n
celul prin intermediul receptorilor specifici;
- fragmentul A cu GM 24.000 deine rolul toxic propriu-zis, prin
blocarea sintezei proteice n celula infectat (ribozileaz i inactiveaz
factorul de elongare EF2 al sintezei proteice).
186
Poarta de intrare bacterian este cea respiratorie. Bacteriile ptrund

n celulele epiteliale, se multiplic, elibereaz exotoxine, care produc un
efect citocid. Angina febril este nsoit de false membrane aderente,
sngernde, care pot produce insuficien respiratorie. De la poarta de
intrare, exotoxina difteric difuzeaz n organism, producnd lezarea
sever a mai multor organe: cord (miocardita), ficat, rinichi, glande
suprarenale, sistem nervos (paralizii, polinevrite), care de asemenea pun n
pericol viaa bolnavului. Din aceast cauz, tratamentul difteriei este cel cu
ser imun antitoxin difteric (imunoglobulinele antifragment B mpiedic
ptrunderea toxinei n celul).
Difteria cutanat apare prin colonizarea tegumentului cu bacili
difterici toxigeni i/sau nontoxigeni. Aceast form clinic de boal
(ulceraii cutanate) apare mai ales n zonele umede i calde ale globului,
dup nepturi de insecte. Chorynebacterium diphteriae rmne cantonat
n leziuni i nu disemineaz hematogen. Eventual, exotoxina sa poate
produce efecte necrotice locale, prin absorbia n esuturi.
Bacilii difterici se pot cantona i pe mucoase, spre exemplu
mucoasa ocular sau vulvar. Ulceraii cutanate produc i bacilii
difteromorfi (Chorynebacterium ulcerans, Chorynebacterium xerosis,
Chorynebac-terium cuttis), mai ales la persoane imunodeficiente.
Chorynebacterium minutissima este agentul etiologic al eritrasmei,
cu apariia unor plci cutanate solzoase.
Chorynebacterium vaginalis produce uretrite i vulvovaginite.
Chorynebacterium parvum, fr patogenitate, este folosit n
componena preparatelor imunostimulante (utilizate n terapia antitumoral
i antiviral).
Se face n funcie de forma clinic de boal sau stadiul acesteia.
exudat nazal i faringian la purttori;
exudat nazofaringian, fragmente de fals membran;
secreie nazal, vulvar, otic sau secreie de la nivelul leziunii
cutanate.
Diagnosticul microscopic, proprieti morfotinctoriale
Chorynebacterium diphteriae:
Bacili (2 - 5 m lungime) gram + la limit, cu extremiti bombate
(forma de halter sau de picot) din cauza corpusculului metacromatic
Babe - Ernst, aezai sub forma literelor chinezeti.
187
Corpusculul metacromatic reprezint o rezerv nutritiv i se poate

evidenia cu ajutorul unor coloraii speciale: ex. Neisser. n aceast
coloraie, corpusculii metacromatici apar albastru - nchis, n timp ce
corpul bacterian apare n galben - brun, cu aceeai dispoziie caracteristic
bacterian.
Bacilii pseudodifterici - bacili ascuii sau mciucai, cu aspect
tigrat, fr corpusculi, aezai n palisade.
Mediul OCST - este mediul de mbogire (lichid);
Mediul Tinsdale - este mediul selectiv pentru bacilii difterici, care
se dezvolt (de la nceput) sub forma coloniilor R (floare de margaret);
- Coloniile bacililor difterici sunt R, negre, cu halou brun;
- Coloniile difteromorfilor sunt amestecuri de colonii R i S, negre,
fr halou brun.
Mediul Loeffler - este electiv i permite dezvoltarea rapid a
bacilului difteric (12-18 ore). Pe acest mediu se repic coloniile suspecte,
pentru a realiza cultura stock din care se realizeaz ulterior identificarea.
Mediul Gndel-Tietz - difereniaz coloniile de Chorynebacterium
diphteriae gravis (margarete friabile), mitis (colonii convexe, cremoase),
intermedius (colonii plate, semicremoase). Chorynebacterium diphteriae
gravis produce cele mai grave forme de boal.
Geloza snge - mediul este utilizat pentru tulpini eventual inhibate
de telurit i pentru izolarea streptococului hemolitic cu care poate
coexista.
Identificarea se realizeaz pe baza proprietilor morfotinctoriale,
de cultur i biochimice, antigenice i de patogenitate.
Bacteriile sunt aerobe i microaerofile.
Bacilii difterici prezint:
testul H2S +;
testul ureazei -.
Bacilii difteromorfi au:
testul H2S -;
testul ureazei +.
Chorynebacterium ulcerans:
testul H2S +;
testul ureazei +.
Diferenierea speciilor bacteriene n cadrul genului se face prin teste
de degradare a zaharurilor.
Chorynebacterium diphteriae:
188
fermentarea glucozei +;
fermentarea zaharozei -;
fermentarea dextrinei +.
Bacili difteromorfi:
fermentarea glucozei +;
fermentarea zaharozei +;
fermentarea dextrinei -.
Investigheaz capacitatea de toxinogenez prin teste de patogenitate
in vitro, vivo.
Teste in vivo
Dermonecroza la iepure (testul Frazer) - bacilul difteric toxigen
provoac animalului o escar umed.
Inocularea la cobai
Neprotejat prin ser specific: animalul moare n 24 - 96 de ore cu
leziuni caracteristice:
edem gelatinos la locul inoculrii;
revrsate sanguinolente n seroase;
hipertrofia i hiperemia suprarenalelor.
(1 DLM = 1 doz letal minim - reprezint unitatea de msur
pentru toxina difteric in vivo). 1 DLM = Cantitatea de toxin care omoar
un cobai de 250 g n 4 zile, cu leziunile caracteristice;
Cobaiul protejat cu ser antitoxic supravieuiete.
Teste in vitro
Testul ELEK - Determin elaborarea de exotoxin printr-o reacie de
precipitare n gel, care este pozitiv doar la tulpinile toxigene.
Reacia de floculare RAMON - Msoar concentraia toxinei
difterice, cunoscnd valoarea antitoxic a unui ser antidifteric sau invers.
1 lf = o limit floculant - reprezint unitatea de msur a
exotoxinei difterice in vitro; 1 lf precipit (reacia AG - AC +) n prezena
1 UA (o unitate antitoxic de ser); 1 UA - reprezint cantitatea de ser
antidifteric care neutralizeaz 100 DLM.
Diagnostic indirect
Serologic:
Hemaglutinarea pasiv - reacia testeaz starea imunitii
antidifterice n colectiviti;
Reacia de seroneutralizare - se execut cu acelai scop.
189
Biologic:
Intradermoreacia Shick - este o reacie de neutralizare toxinantitoxin, care investigheaz starea imunitii antidifterice in vivo.
Reacia Shick pozitiv - (eritem cu > 10 mm) la nivelul antebraului
inoculat i.d.r. cu 0,2 ml de toxin (coninnd 1/50 DLM) - arat faptul c
persoana respectiv nu are anticorpi specifici neutralizani (AC sub titrul
minim protector de 0,03 UA/ml ser). Persoanele cu reacia Shick pozitiv
trebuie revaccinate antidifteric. Reacia Shick negativ - subiectul nu este
susceptibil la infecia difteric (toxina este neutralizat prin AC protectori).
Tratament
Tratamentul difteriei toxigene se face obligatoriu cu ser antitoxic
(care conine anticorpi specifici).
Profilaxie
Vaccinarea antidifteric este obligatorie, cu vaccinuri monovalente
(ADPA) sau multivalente (DT, DTP). Anatoxina difteric este purificat i
adsorbit pe suport mineral (fosfat de aluminiu). Chimioprofilaxia la
contaci cu Eritromicin la contaci.
190
CAPITOLUL 26
GENUL LYSTERIA
Caractere generale
Lysteria monocytogenes este larg rspndit n natur, n
rezervoare animale: mamifere (ovine, bovine), psri, reptile, peti.
Boala este o antropozoonoz. Omul se contamineaz n mod accidental, n
special prin consumul alimentelor contaminate: lapte, brnzeturi.
Listerioza nou-nscutului apare dup contaminarea transplacentar sau n
timpul naterii. Formele clinic manifeste apar preponderent la persoane cu
status imun diminuat sau la vrstele extreme (ex.: nou-nscut). Rata de
mortalitate la aceste persoane este de 30% pn la 60%, la adult i 54 90% la nou-nscut.
Bacteriile sunt bacili mici gram pozitivi, polimorfi, mobili, catalazo
pozitivi, microaerofili, cu parazitism facultativ intracelular, n celule
fagocitare i endoteliale.

Lysteria monocytogenes:
patogen pentru om i animale;
listerioza neonatal (meningita);
listerioza
adultului
(meningoencefalita,
endocardita).
Lysteria innocua:
nepatogen.
Muraya grayi:
nepatogen.
bacteriemia
Aspecte clinoco-patogenetice
Microorganismul este patogen prin multiplicare, invazivitate i
producere de factori de patogenitate. Parazitismul este celular facultativ.
Intervalina este o protein bacterian membranoas care
favorizeaz penetrarea intracelular. Internalizat, bacteria se multiplic n
citoplasm, dup distrucia membranei fagolizozomului de ctre
listeriolizina O (toxin cu proprieti hemolitice, considerat factorul
major al virulenei acestei specii). Fosfolipazele bacteriene realizeaz
distrucia membranei citoplasmatice a celulei infectate, favoriznd
rspndirea bacteriei nspre celulele indemne. Mecanismul de infectare
din aproape n aproape reprezint un sistem de evadare al bacteriei de
sub aciunea anticorpilor specifici.
191
Rspunsul imun antiinfecios este preponderent celular viznd

mecanismele citotoxicitii. Microscopic se observ leziuni necrotice
perivasculare i infiltrate celulare mononucleare i polinucleare.
Meningita nou-nscutului apare n primele 3 sptmni de via
(contaminare transplacentar sau vaginal) i evolueaz fulminant.
Listerioza gravidei determin avort spontan. Listerioza adultului se
manifest ca: meningit n 55% dintre cazuri (la canceroi sau transplantai
renal), bacteriemie (la aproximativ 25% dintre pacieni) i endocardit la
7% dintre pacieni. Gravitatea sindromului clinic este proporional cu
gravitatea imunosupresiei.
Funcie de localizarea infeciei: snge, lichid cefalorahidian etc.;
Alimente contaminate.
Evideniaz forme cocoide sau cocobacilare gram pozitive
(pleiomorfe), mobile datorit flagelilor peritrichi.
Pe medii cu snge, n atmosfer microaerofil, dup incubare la
temperaturi de 20-30C. Coloniile sunt S, minuscule (pictur de rou),
nconjurate de o zon de hemoliz. Culturile prezint un miros
caracteristic de lapte acidulat.
Pe mediul MIU prezint mobilitate exprimat (dezvoltare cu aspect
de umbrel ntoars).
Pe medii celulare cultivarea se realizeaz pe ou embrionat i n
cultur de macrofage infectate.
Dificultile de izolare ale bacteriilor din esuturile infectate pun n
eviden prezena formelor L (fr perete celular).
Diagnostic biochimic
Catalaza.
Microaerofilia.
Nu lichefiaz gelatina.
Nu produce indol.
Nu reduce nitraii.
Prezint aciune fermentativ asupra unor carbohidrai.
192
Lysteria prezint antigene i flagelare (14-15 tipuri).
Serotipul I este mai frecvent ntlnit n Europa de Est.
Serotipul IV este mai rspndit n Europa de Vest i SUA.
Animalele de experien (oarecii), inoculate internazal fac
meningit i hepatit necrozant cu moartea a 20% dintre animale n 14
zile. Inocularea animalelor pe cale parenteral le omoar n 3-7 zile n
proporie de 90% cu apariia leziunilor granulo-matoase i necrotice n
diverse organe.
Introducerea filtratului de cultur n sacul conjunctival al iepurelui
i provoac acestuia o conjunctivit purulent. De asemenea, cobaii sunt
receptivi la infectarea pe cale conjunctival.
Ofer informaii relative, prin compararea a dou sau trei probe de
ser, la intervale de 15 zile. Se efectueaz:
Reacia de aglutinare (titrul > 1/160 este suspect);
RFC;
Hemaglutinarea indirect;
ELISA.
Serologia negativ nu exclude un eventual diagnostic pozitiv.
Anticorpii anti Lysteria nu sunt protectori.
Tratament
Cu lactamine, Eritromicin i Cloramfenicol.
Profilaxie
Msuri de ordin epidemiologic (pasteurizarea laptelui, brnzeturilor
etc.).
193
CAPITOLUL 27
GENUL BACILLUS
Caractere generale
Genul cuprinde 48 de specii, dintre care Bacillus anthracis extrem
de patogen (agentul etiologic al antraxului). Bacteriile genului sunt bacili
gram pozitivi, cu spor localizat central, imobili, aerobi (cteva specii sunt
facultativ anaerobe). Bacillus anthracis este i capsulat, cu aezare
caracteristic (dispunere n lanuri).
Reprezentani, infecii produse:

Bacillus anthracis
anthrax (antropozoonoz); 25 000-100 000 cazuri noi anual pe
glob;
Bacillus cereus
toxiinfecii alimentare, bacteriemii, pneumonii;
Bacillus subtilis
toxiinfecii alimentare, meningite, iridociclite, panoftalmii,
sinuzite cronice.
Sinteza bacteriocinelor:
Bacillus licheniformis - productor de bacitracin;
Bacillus polymyxa - sintez polimixine;
Bacillus brevis - sinteza gramicidinei i tirocidinei, etc.
Bacillus antracis - deine importani factori de virulen:
Capsula - este de natur polipeptidic, (polimer de acid Dglutamic), reprezentnd antigenul K (un singur tip antigenic). Are rol
antifagocitar i este codificat plasmidic (pXO2).
Antigenul somatic - reprezint un polizaharid din peretele celular,
alctuit din D-galactoz i N-acetilglucozamin. Produce reacii
imunologice ncruciate cu 14 tipuri antigenice de polizaharid capsular
pneumococic.
Exotoxina este complex, bimodal, determinat plasmidic (pXO1),
antigenul protector (capabil s induc producerea de anticorpi specifici) se
leag de membrana celulei int, facilitnd aciunea celorlalte componente:
factorul de edem i factorul letal. Factorul de edem produce edem local i
inhibarea funciilor PMN, n timp ce factorul letal produce moartea celulei
afectate. Acumularea toxinei n esuturi produce anoxia.
194
Principalele forme clinice ale antraxului sunt: antraxul cutanat,

pulmonar, gastrointestinal sau generalizat (dup bacteriemie).
Antraxul cutanat este forma cea mai frecvent ntlnit, aprnd la
nivelul unui traumatism cutanat (fa, gt, membre), prin care ptrund
sporii. Papula se acoper cu o crust neagr, edematoas (pustula
malign, crbunele cutanat).
Antraxul pulmonar apare prin inhalarea sporilor bacterieni.
Pneumonia se complic cu insuficien respiratorie acut.
Antraxul gastrointestinal se manifest ca o toxiinfecie alimentar.
Complicaia de temut o reprezint septicemia i meningita
secundar. Rata de mortalitate este foarte mare.
Anticorpii protectori sunt anticapsulari i antitoxici.
Boala este o antropozoonoz, afectnd preponderent persoanele
care lucreaz n sectorul zootehnic.
Bacillus cereus - produce o toxiinfecie alimentar asemntoare
toxiinfeciei alimentare stafilococice (incubaie scurt, vrsturi) sau
clostridiene (crampe, sindrom diareic). Enterotoxina bacterian se
elibereaz n aliment (de natur cerealier). Fosfolipaza C hidrolizeaz
lecitina din alimente, producnd fosforilcolin intestinal activ. Este un
germen necapsulat i produce hemolizine active ( hemoliza).
Complicaiile bolii de baz sunt septicemiile cu localizri ulterioare
pulmonare i meningeale, care apar preponderent la imunodeprimai.
Tratamentul
eficient
vizeaz
Clindamicina,
Aminoglicozidele,
Macrolidele.
Bacillus subtilis - produce toxiinfecie alimentar sau septicemie
(la consumatori de droguri inoculate pe cale intravenoas). Penicilina
reprezint tratamentul de elecie. Alte specii sporulate sunt implicate n
contaminarea materialelor sterile i de laborator - n spitale.
Diagnostic de laborator n antrax

exudat vezicular sau lichid de edem n crbunele cutanat;
sputa n antraxul pulmonar;
materii fecale - n antraxul gastrointestinal;
snge n bacteriemii;
fragmente de organe pentru diagnosticul retrospectiv.
195
Frotiu din produs patologic, colorat Gram: bacili mari, gram

pozitivi, imobili, cu capete tiate drept, aezai n lanuri (streptobacili).
Coloraiile speciale evideniaz capsula sau sporul central, care nu
deformeaz celula bacterian. Pot aprea i spori liberi.
Pe medii lichide - pentru izolarea Bacillus anthracis din prelevat
biologic contaminat cu flora de asociaie: se inoculeaz n bulion, se
incubeaz 24 de ore la 37C, se adaug fenol 1-3% timp de 30 (pentru
inhibarea florei respective) i se nsmneaz pe geloz simpl sau pe
geloz snge. Pe medii lichide se dezvolt sub form de flocoane. Pe
medii solide - colonii mari, rugoase (R) cu aspect tipic de coam de leu
sau cap de meduz.
Prin cultivarea Bacillus anthracis la 42,5 C se obin colonii S
avirulente, care se utilizeaz la prepararea vaccinului anticrbunos
(tulpinile Pasteur I, II).
Pe geloz dreapt se dezvolt sub forma unui brad inversat.
Este dificil de realizat un diagnostic diferenial ntre Bacillus cereus
i Bacillus anthracis privind caracterele morfotinctoriale i de cultur. n
acest scop cercetm sensibilitatea germenilor fa de Penicilin i fa de
bacteriofagul specific (gamma): Bacillus anthracis este sensibil att la
Penicilin, ct i la bacteriofag.
Pe mediul selectiv PLET (polimixin, tiamin, lizozim, EDTA)
bacilul crbunos crete, iar Bacillus cereus nu se dezvolt.
Identificarea se realizeaz pe baza proprietilor morfotinctoriale,
de cultur, biochimice, antigenice.
Indol negativ;
Reduce nitraii;
Zaharolitic, slab proteolitic;
Lichefiaz gelatina, hidrolizeaz cazeina;
Produce acetil metil carbinol (Bacillus anthracis).
Antigen capsular (K);
Antigen proteic i polizaharidic de perete celular.
Reacia de precipitare inelar Ascoli - evideneaz antigenele
crbunoase utiliznd ser anti Bacillus anthracis. Recia este folosit n
diagnosticul retrospectiv al animalelor moarte prin crbune.
196
oarecele sau cobaiul inoculat cu filtrat de cultur fac o septicemie
cu sfrit letal n una-trei zile. Autopsia evideneaz un edem gelatinos la
locul inoculrii i congestia organelor interne.
Se fac amprente de splin de oarece - care se coloreaz Gram i
astfel se evideniaz bacilii mari, capsulai. Infecia experimental la
oarece este obligatorie pentru diagnostic.
Patogeneza infeciei la animale
Anthraxul apare mai frecvent la ierbivorele domestice, care se
infecteaz prin consumul furajelor contaminate cu spori bacterieni.
Animalele bolnave recontamineaz apa i solul prin fecale, urin, cadavre.
Sporii rezist 20-30 de ani pe sol (cmpiile morii). Astfel se retransmite
infecia la ierbivore.
Anticorpii specifici se detecteaz prin: imunodifuzia n gel, reacia
cu fixare de complement, reacii de hemaglutinare.
Intradermoreacia Blteanu-Toma pune n eviden starea de
sensibilizare a organismului fa de antigenele bacilului crbunos.
Tratament
Bacillus anthracis este foarte sensibil la Peniciline. n caz de alergie
la aceste substane se administreaz Tetracicline sau Macrolide, chiar i
Sulfamide. n cazuri grave se administreaz serul antitoxic anticrbunos.
Bacillus cereus reacioneaz la Clindamicin, Aminoglicozide,
Macrolide.
Bacillus subtilis este sensibil la diferite lactamine.
Profilaxie
Msuri de ordin epidemiologic pentru prevenirea contaminrii
persoanelor din sectorul veterinar.
Resturile animalelor moarte de anthrax trebuie arse sau ngropate n
containere speciale, pentru prevenirea contaminrii solului.
Imunizarea activ mpotriva vaccinului crbunos - vaccinul Pasteur
(obinut prin cultivarea Bacillus anthracis la 42 - 43C), conine tulpini
netoxigene capsulate (au anihilat efectul plasmidei pOX 1); astfel de tulpini
nu induc totui imunitatea protectoare.
197
Sterne (1937) i Isopescu (1949) au elaborat un vaccin din tulpini

necapsulate, edematogene (toxigene), utilizat pentru vaccinarea eptelului.
Vaccinurile moderne conin tulpini nevirulente (necapsulate,
netoxigene) prin anihilarea efectelor ambelor plasmide (pOX 1 i pOX2).
Alt tip de vaccin este preparat din spori, din tulpini necapsulate sau
chiar din componentul protector al toxinei crbunoase (component care
poate induce rspuns imun protector).
Vaccinoprofilaxia la om nu este obligatorie. Se aplic doar
experimental la persoane expuse infeciei (ngrijitori de animale, medici
veterinari, muncitori din industria pielriei).
198
CAPITOLUL 28
ANAEROBI SPORULAI
GENUL CLOSTRIDIUM
Caractere generale
Genul cuprinde peste 60 de specii, bacili gram + sporulai, anaerobi,
mobili (cu excepia Clostridium perfringens care e capsulat). Majoritatea
speciilor sunt comensale (n intestinul omului i animalelor). Pot
contamina solul prin spori.

Clostridium perfringens:
gangren gazoas (n asociere cu alte specii Clostridiale);
toxiinfecii alimentare (tip antigenic A i C);
enterita necrozant (tip antigenic C);
septicemii, endometrite post partum, postabortum;
celulite localizate, infecii de plag chirurgical, abcese
cerebrale, abdominale.
Clostridium tetani:
tetanos.
Clostridium botulinum:
botulism.
Clostridium difficile:
enterocolit pseudomebranoas (necrozant, letal).
Clostridium histolyticum
Clostridium septicum
Clostridium sporogenes
- gangrena gazoas
Clostridium novyi
- stare septic
Clostridium bifermentans
Clostridium sordelli, etc.

Clostridium perfringens i germenii gangrenei gazoase
Cel mai virulent factor de patogenitate l constituie toxina, o
lecitinaz cu efect dermonecrotic, hemolitic i letal. Tipul antigenic A
produce cele mai mari cantiti de toxin.
toxina produce necroze i este letal pentru cobai; nu produce
hemoliza. Este produs preponderent de tipurile B i C.
199
toxina este hemolitic pentru eritrocitele unor specii animale, este

letal pentru animalele de laborator; produs preponderent de tipurile B i
C.
toxina (teta toxina) produce o hemolizin (oxigen labil) pentru
eritrocite provenite de la animale de experien i este produs
preponderent de tipul C. Tipurile antigenice A, B, D, E produc cantiti
mici de teta toxin.
(epsilon) toxina produce dermonecroz dup inocularea la cobai este produs preponderent de ctre tipurile B i D.
k (kappa) toxina este o colagenaz i o gelatinaz letal i
necrotizant, produs de ctre tipurile patogenice A, C, E.
(lambda) toxina este o enzim proteolitic cu un spectru larg de
activitate: distruge gelatina, hemoglobina (tipurile B, E i unele tulpini ale
tipului D).
(gamma) toxina este letal pentru animalele de laborator.
Dezoxiribonucleaza
Hialuronidaza, neuraminidaza reprezint factori de difuziune ai infeciei
Fibrinolizina
Enterotoxina rspunztoare pentru producerea toxiinfeciilor
alimentare este termolabil i produs de ctre tipurile antigenice A i C.
Se sintetizeaz n intestinul gros i este eliberat n timpul sporulrii C.
perfringens. Toxina are efect emetic i chiar letal, producnd eriteme la
animalele de experien.
Gangrena gazoas - rezult n urma contaminrii plgilor profunde
cu spori ai Clostridium perfringens, Clostridium oedematiens (novyi),
Clostridium septicum, Clostridium hystoliticum, Clostridium sporogenes.
Local apar edeme dure, crepitante (cu apariia unor mari cantiti de gaze,
elaborate n urma fermentrii zaharurilor) i gangren (necroz). Toxinele
i enzimele favorizeaz diseminarea infeciei, cu apariia septicemiei cu
efect letal. Clostridium hystoliticum provoac liza esuturilor, prin
intermediul unei colagenaze, fibrinaze, proteaze, lipaze, exopeptidaze,
decarboxilaze. Efectul toxic apare prin , , si toxine. Clostridium
septicum produce , , toxine. Clostridium sporogenes poteneaz
virulena Clostridium perfringens i Clostridium septicum n culturi (prin
proteoliz).
Toxinfecia alimentar - este caracterizat prin dureri abdominale i
diaree aprute la 8-24 de ore dup consumul alimentului contaminat cu
Clostridium perfringens tip A. Efectul letal apare la pacieni vrstnici i
subnutrii.
200
Enterita necrozant - produs de Clostridium perfringens tip C,

sintetizator de toxin, reprezint o form grav de toxiinfecie
alimentar, cu sfrit letal.
Diagnostic de laborator - Clostridium perfringens i

germenii gangrenei gazoase.
Se recolteaz: exudate din plgi, fragmente musculare, snge,
coninutul flictenelor, materii fecale, catgut etc.
Diagnosticul microscopic
Bacili mari gram + sporulai, cu spor cu diametrul mai mare dect
diametrul celulei, situat central sau subterminal.
Clostridium perfringens este capsulat, restul florei anaerobe ai
gangrenei gazoase prezint cili peritrichi. Apar numeroi spori liberi. Poate
fi prezent flor de asociaie.
Transportul i nsmnarea prelevatelor biologice trebuie realizat n
anaerobioz.
Anaerobioza se realizeaz prin metode:
fizice - nclzirea mediilor pn la fierbere i apoi rcire brusc.
plasarea plcilor n anaerostate.
chimice
- utilizarea pliculeelor cu amestecuri de substane reductoare
(pirogalol, carbonat de potasiu) - tehnica Ott.
ncorporarea n mediul de cultur a acidului tioglicolic,
cisteinei, resazurin.
- sisteme moderne, generatoare de gaze necesare cultivrii
anaerobilor: Anaerocult Merch, Anaerobic Plus System Oxoid etc.
utilizarea germenilor avizi de O2 ce favorizeaz obinerea
atmosferei anaerobe.
introducere n medii lichide a fragmentelor de organe, a
laptelui sau albuului.
- protecia anaerobiozei se realizeaz prin adugarea uleiului de
parafin la suprafaa mediului sau prin reducerea suprafeei de contact cu
aerul (tuburi nalte Weinberg, dopuri de parafin etc).
Mediile utilizate sunt mbogite i realizeaz anaerobioza.
Exemple: geloza Veillon n tuburi Weinberg, lapte turnesolat, bulion
VF cu acid tioglicolic i albastru de metilen, mediul Nagler, Willis Hobbs, geloza-snge - tehnic Ott, mediul Brewer.
201
Clostridium perfringens reprezint singura specie anaerob care:

produce cheag alveolar n laptele turnesolat;
produce lecitinaz pe mediul Nagler;
crete (n cteva ore) la 45, formnd colonii S sau R;
pe geloz snge produce hemoliz de tip cald-rece;
elaboreaz miros specific - butiric;
pe mediul Veillon n tuburi Weinberg prezint colonii
lenticulare biconvexe.
Clostridium septicum, hystoliticum, novyi, sporogenes:
- pe mediul Veillon n tuburi Weinberg prezint colonii profunde,
arborescente (aspect de grenad n explozie).
Clostridium septicum:
elaboreaz mari cantiti de gaz;
produce cheag alveolar n laptele turnesolat;
nu produce lecitinaz pe mediul Nagler;
produce hemoliza intens pe geloz snge.
Clostridium novyi (sau Clostridium Oedematiens):
produce lecitinaz pe mediul Nagler (colonii R);
produce hemoliz pe geloz snge;
nu produce cheag alveolar n laptele turnesolat.
Clostridium hystoliticum:
colonii mici, hemolitice pe geloz snge;
nelecitinazic pe mediul Nagler;
produce proteoliza n mediile cu lapte.
Clostridium sporogenes:
colonii R stelate, cu miros putrid; hemoliz pe geloz snge;
prezint activitate lecitinazic redus pe mediul Nagler;
produce proteoliza laptelui.
Clostridium perfringens:
zaharolitic (fermenteaz toate zaharurile, cu excepia manitei);
lecitinazo +.
Clostridium septicum:
intens zaharolitic (zaharozo -, lactozo +).
Clostridium novyi:
zaharolitic, dar lactozo -;
lecitinazo +, gelatinazo +.
Clostridium hystoliticum:
proteolitic (produce cele mai mari cantiti de colagenaz);
absena fermentrii zaharurilor.
202
Clostridium sporogenes:
proteolitic;
lecitinazo pozitiv.
Testele biochimice pentru identificarea anaerobilor prin diagnostic
rapid: trusa API20, Minitek Anaerobic II, API ZYN.
Identificarea prin gaz cromatografie, pe baza acizilor grai specifici.
Prezint antigene O i H (C. perfringens nu prezint antigene H, dar
prezint antigene K de capsul).
Identificarea speciilor gangrenei gazoase se realizeaz prin reacii
succesive de aglutinare pe lam, utiliznd seruri monovalente specifice.
Clostridium perfringens prezint 5 tipuri antigenice (A - E) care
secret 12 toxine distincte din punct de vedere antigenic. Tipul A conine
mari cantiti de toxin.
Cobaiul este animalul cel mai sensibil, care prezint la locul
inoculrii cu C. perfringens flegmon gazos cu crepitaii, mioliz i rupturi
vasculare; n cazul inoculrii cu C. septicum apare doar edem crepitant; C.
novyi produce edem lemnos, iar C. hystoliticum produce edem moale cu
histoliza i lichefierea esuturilor afectate. Totdeauna gangrena gazoas
este multimicrobian, C. perfringens (welchii) constituind principalul
agent etiologic.
Fiecare specie bacterian produce toxine specifice care ns nu sunt
diagnosticate n mod uzual.
Tratament
Antibiograma se execut n condiii speciale de anaerobioz
(tehnica difuzimetric n dublu strat de agar).
Penicilinele reprezint antibioticele de elecie pentru infeciile cu C.
perfringens. Metronidazolul i Clindamicina sunt eficiente.
n tratamentul gangrenei gazoase se administreaz i ser antitoxic
polivalent specific, care completeaz tratamentul chirurgical i cu oxigen
hiperbar.
Tratamentul toxiinfeciilor alimentare vizeaz i msuri de
rehidratare.
Profilaxia
203
Se realizeaz prin tratamentul corect al plgilor contaminate cu

pmnt; se res-pect msurile igienice pentru prevenirea toxiinfeciilor
alimentare.
Vaccinurile (anatoxine) sunt n studiu.
Clostridium tetani
Sunt germeni anaerobi, gram +, sporulai (cu spor situat terminal aspect de ac cu gmlie sau b de toboar), mobili.
Sunt germeni telurici, patogeni prin exotoxine neurotrope. (n stare
vegetativ se gsesc n intestinul omului i animalelor).
Aspecte clinico - patogenetice

Principalii factori de patogenitate ai bacteriei sunt de natur toxic
i enzimatic (tetanolizina i tetanospasmina).
Tetanolizina produce liza hematiilor unor specii animale.
Tetanospasmina inhib eliberarea acetilcolinei la nivelul sinapsei
neuromusculare i blocheaz eliberarea unor mediatori postsinaptici,
producnd spasme musculare gene-ralizate, convulsii i hiperreflexie
(acidul aminobutiric i glicina inhib neuronii motori spinali n mod
normal).
La cteva zile (maximum 3 sptmni) de la contaminarea plgii cu
spori telurici apare trismus i facies de tip rizus sardonicus, apoi
paralizie spastic. Moartea apare prin asfixie (mortalitatea este de 50%) i
aritmii cardiace.
Enzimele (gelatinaze, lipaze, proteaze) favorizeaz extinderea
infeciei.
Tetanosul local se caracterizeaz prin spasm la locul inoculrii
(forma clinic uoar).
Tetanosul cefalic este asociat cu disfuncii prin afectarea nervilor
cranieni, n special perechea a VII-a.
Tetanosul generalizat descris n paragraful precedent, prezint risc
mare de mortalitate. n fiecare an, n SUA se raporteaz 50-150 cazuri noi
de boal; n rile lumii a treia, riscul este mai mare.
Recoltarea prelevatelor biologice: secreii i esut din plag, catgut,
pansamente.
Bacilii gram + sporulai, cu spor situat terminal (ac cu gmalie, b
de toboar), cu aezare necaracteristic.
204
Diagnosticul diferenial se face cu bacilii tetanomorfi.

Izolarea
Se realizeaz pe medii speciale pentru germeni anaerobi.
Bulionul este tulburat slab, cu limpezire datorit sedimentrii
sporilor. Degaj un miros de corn ars.
Pe mediul Veillon se dezvolt la baza mediului sub forma unor
colonii pufoase (bacilii sunt mobili prin cilii peritrichi).
Coloana mediului este dislocat de gaze.
Pe geloza snge prezint hemoliza. Coloniile sunt granulare, ru
delimitate.
Slab proteolitic;
Nezaharolitic;
Lichefiaz gelatina;
H2S .
Toate tipurile antigenice produc un singur tip de toxin.
Se inoculeaz animalul de experien cu filtrat de cultur, subcutan
sau intramuscular. Apare o paralizie spastic la nivelul membrului afectat
i apoi boala se generali-zeaz. Animalele protejate cu ser antitetanic nu
fac boala. Testul de patogenitate are mare valore diagnostic.
Tratament
Se realizeaz toaleta chirurgical a plgii, se utilizeaz apa
oxigenat, se face rapel ATPA (anatoxina tetanic purificat i adsorbit) i
se administreaz ser antitetanic i.m. (250-500 U.I.) n alt zon dect cea
n care s-a efectuat vaccinarea;
Se administreaz Penicilin (Eritromicin) aproximativ 10 zile.
Cazurile grave necesit i respiraie asistat.
Profilaxia
- se realizeaz prin vaccinare DTP (diftero-tetano-pertusis);
- se fac eventuale rapeluri ATPA n cazul unor plgi tetanigene.
Clostridium botulinum
205
Sunt bacili strict anaerobi sporulai, care secret exotoxine

neurotrope. Formele vegetative se gsesc n intestin; sporii apar n mediul
extern pe sol.
Aspecte clinico-patogenice
Botulismul este o toxiinfecie alimentar foarte grav, care apare n
urma consumului alimentelor contaminate n care s-a elaborat exotoxin i
este caracterizat prin fenomene gastrointestinale i nervoase (constipaie
rebel, diplopie, retenie urinar, disfagie, aritmii i paralizia muchilor
respiratori, care poate produce asfixie).
Toxina botulinic este bimodal; fragmentul B se ataeaz la nivelul
plcilor neuromotorii i fragmentul A mpiedic eliberarea de acetilcolin,
determinnd o paralizie flasc. Paralizia este descendent: paralizia
globilor oculari, paralizie bulbar, paralizia muchilor respiratori.
Mortalitatea este considerabil (doza letal 1g).
Botulismul plgilor apare prin contaminarea acestora cu sporii
germenului res-pectiv. Botulismul infantil (la copii cu vrste de una pn
la 3 luni) este consecina sintezei toxinei botulinice prin germinarea
sporilor migrai la nivel intestinal. Manifestrile clinice sunt similare bolii
clasice, cu toxina preformat n aliment.
Cele 8 toxine sintetizate de Clostridium botulinum sunt distincte din
punct de vedere antigenic; sunt notate A, B, Ca; Cb; D; E; F; G. Tulpinile
A, B, E i F sunt mai frecvent implicate n infeciile umane, restul fiind
patogene pentru animale. Tipul G nu produce mbolnviri.
Date epidemiologice arat c n SUA apar 20-30 de cazuri noi de
botulism infantil (incidena 0,050/0000). Incidena bolii n Romnia este de
0,06-0,2050/0000.
Se bazeaz n principal pe detectarea i tipizarea toxinei
(toxinotipie).
Lichid de spltur gastric, lichid de vrstur, coninut intestinal,
aliment din conserv de carne sau vegetale, ser sanguin, organe de
necropsie.
Nu are importan practic. Bacili sporulai, gram +, necapsulai.
Pe medii pentru germeni anaerobi, la temperatura optim de 25C.
206
Bulionul conine un depozit granular, format din spori i prezint un

miros caracteristic (rnced).
Pe mediul Veillon n tuburi Weinberg - coloniile sunt profunde,
arborescente, cu centru opac. Coloana mediului este fragmentat din cauza
produciei de gaze.
Pe geloz snge produce colonii minuscule hemolitice, cu margini
filamentoase.
Pe mediul Nagler produce opalescen i strat perlat.
Diagnostic biochimic:
zaharolitic, dar lactozo -, slab proteolitic, H 2S +,
Hemolitic.
gelatinaza +,
Exist 8 tipuri antigenice ale toxinei, care nu dau imunitate
ncruciat. Determinarea tipului antigenic corespunztor este esenial
pentru salvarea vieii bolnavului, cruia i se administreaz de urgen ser
antitoxic, specific de tip antigenic.
Determinarea tipului respectiv se realizeaz prin reacia de
neutralizare in vivo (toxinotipie). Se inoculeaz la oareci intraperitoneal
produsul patologic tratat ca atare, apoi tratat termic (15 la 100C), apoi n
amestec cu ser antibotulinic (anti A, anti tip B etc.). oarecii protejai prin
antitoxina specific de tip supravieuiesc, ca i cei tratai cu toxina
inactivat.
Pisica este animalul cel mai sensibil. Inocularea filtratului de
cultur i produce paralizia muchilor acomodrii i diaree.
La oarece, toxina produce o paralizie flasc a membrelor
posterioare i la cobai paralizia muchilor abdominali.
Tratament
Se administreaz de urgen ser antibotulinic monovalent specific
de tip; se poate administra i.v. ser trivalent A, B, E, cu precauiile
seroterapiei.
Profilaxia
Se refer la: prelucrarea termic adecvat a alimentelor care au fost
conservate (conserve de fructe, legume, pete), sterilizarea corect a
instrumentarului medical pentru prevenirea botulismului de plag.
207
Clostridium difficile
Bacteria produce colita pseudomembranoas postantibioticoterapie
i prezint mare rezisten la antibioticele uzuale cu spectru larg.
208
Tulpinile non-invazive ale Clostridium difficile produc citotoxine A
i B care distrug celulele epiteliului intestinal, realiznd denudarea
mucoasei intestinale i apariia exudatelor fibrino-mucoase.
Colita pseudomembranos este o consecin a tratamentului
antibiotic intempestiv, care perturb echilibrul florei microbiocenozei
intestinale. Sindromul diareic se nsoete de febr, crampe abdominale,
prezena sngelui sau a leucocitelor n scaun.
Colita poate evolua i ca infecie nozocomial, n special n seciile
de terapie intensiv, la pacieni cu vrste mai mari de 50 de ani. La
pacienii imunodeprimai afeciunea poate evolua cu o enterocolit
necrozant la nivelul colonului, cu risc mare de mortalitate.
Diagnosticul de laborator
Se recolteaz probe fecale.
Relev bacili mobili (cu cili peritrichi), cu spori centrali sau
subterminali, gram pozitivi.
Pe mediile specifice germenilor anaerobi.
Pe geloz snge nu produce hemoliza; coloniile sunt circulare,
albicioase.
Toxina produce enterocolit la hamster i produce efect citopatogen
asupra culturii de celule de amnios uman.
Tratament
Vancomicina reprezint tratamentul antibiotic de elecie pentru
tulpinile toxigene, la care se adaug serul antitoxic specific pentru cazurile
grave.
Germenul este sensibil i la Metronidazol, Penicilin i
Cefalosporine.
209
CAPITOLUL 29
ANAEROBI NESPORULAI
Caractere generale
Aceti germeni reprezint microflora fundamental a cavitilor
naturale. n cazul scderii capacitii de rspuns imun a organismului
(diabetici, caectici, intervenii chirurgicale etc.) bacteriile devin patogene,
putnd invada esuturile nvecinate. Astfel, apar abcese cu diverse
localizri: abcese cerebrale, enterice, hepatice, dentare dar i peritonite,
meningite, infecii de plag chirurgical i septicemii.
Reprezentani
Bacili gram negativi:
Bacteroides fragilis, Bacteroides melaninogenicus, Bacteroides
corrodens;
Fusobacterium nucleatum;
Fusobacterium necrophorum.
Bacili gram pozitivi:
Eubacterium lentum;
Propionibacterium acnes, Propionibacterium granulosum;
Lactobacillus catenaforme;
Actinomyces israelli, Actinomyces naeslundii;
Arachnia propionica;
Bifidocterium eriksonii.
Coci gram pozitivi:
Peptostreptococcus anaerobius;
Peptococcus magnus, Peptococcus prevotti;
Streptococcus intermedius.
Coci gram negativi:
Veilonella parvula;
Acidaminococcus fermentans.
Secreii purulente din abcese cu diferite localizri, snge, lichid
cefalorahidian (n majoritatea cazurilor exist i flora de asociaie aerob).
210

Dup caz, bacili gram + sau gram -, coci gram + sau coci gram
negativi.
Bacterioscopia direct este de mic importan.
Examinarea n imunofluorescen este valoroas pentru diagnostic.
Gaz-cromotografia direct din produsul patologic.
nsmnrile se realizeaz n paralel n atmosfera aerob i
anaerob. Dup 24 28 de ore de incubare se compar culturile i se
repic coloniile suspecte de pe plcile cultivate n anaerobioz.
Mediile utilizate: mbogite cu snge, glucoz, hemin, cistein sau
antibiotice.
Identificarea germenilor
Se face pe baza proprietilor morfotinctoriale, de cultur,
biochimice.
Bacili gram negativi

Bacteroides fragilis se ntlnete n toate microbiocenozele
organismului dar populeaz n special cavitatea intestinal. Produce

malabsorbie, diaree, steatoree, angiocolit, abces subfrenic, septicemie.
Sunt bacili scuri, colorabili bipolar, gram negativi.
- Dezvoltarea bacteriei este favorizat prin adaos de 20% bil.
- Bacteroides fragilis este rezistent la antibiotice, care pot fi folosite
ca ageni selectivi n medii de cultur: mediu cu geloz snge-glucozbil-Kanamicin, Streptomicin, Neomicin. Pe acest mediu nu crete nici
un alt germen anaerob sau aerob.
- Bacteroides fragilis este intens zaharolitic (glucoz+, fructoz +,
maltoz +).
- Nu descompune treonina.
- Bacteria este slab patogen pentru animale de laborator. Este
rezistent la lactamine.
Fusobacterium necrophorum
Habitatul l reprezint cavitatea bucal i cile respiratorii
superioare.
- Infeciile produse sunt foarte grave, cu tendin septicemic.
- Bacteriile au forme filamentoase, sferice sau de fus; coloraia
granular (gram -).
- Bila inhib dezvoltarea bacterian.
211
- Fusobacterium nu se dezvolt pe medii cu antibiotice, dar crete

pe medii cu snge.
- Produce lecitinaz pe mediul Nagler.
- Este slab zaharolitic (glucoz +, fructoz +, maltoz).
- Descompunerea treoninei este pozitiv.
- Patogen pentru animale de laborator (exotoxina cu efect
necrozant).
- Tratamentul vizeaz evacuarea coninutului leziunii i doze mari
de lactamine.
Fusobacterium nucleatum, mpreun cu Fusobacterium necrophorum i cteva specii de spirochete produc faringite ulceronecrotice
(angina - fusospirilar Plaut-Vincent).
Identificare
Tehnici ADN, gaz cromatografie.
Bacili gram + nesporulai

Propionibacterium acnes
- Face parte din microflora tegumentului i a mucoaselor.

- Produce afeciuni variate cu caracter local, care se pot generaliza
(endocardite, pleurezii, abcese cerebrale, dacriocistita).
- Sunt bacili mici, gram +, ncurbai, colorabili granular, aezai n
grmezi sau n palisade.
- Se dezvolt abundent n bulion, produc hemoliza pe geloz snge.
Coloniile prezint un pigment roz.
- Este zaharolitic, gelatinazo +, H2S-.
- Este singura specie anaerob rezistent la Metronidazol.
- Tratament - Cloramfenicol, Macrolide.
Actinomyces israeli - face parte din microbiocenoza bucofaringian; produce abcese dentare, infecii ale tractului respirator, sinuzite. n
esuturi formeaz microabcese (granule de sulf).
Lactobacillus, Bifidobacterium - sunt specii comensale.
Coci gram + anaerobi

Aparin tractului intestinal, respirator, genital. Produc infecii
dentare, amigdaliene, sinuzite, endometrite postpartum i postabortum,
infecii de plag chirurgical, septicemii.
Cocii gram + sunt aezai n grmezi, n diplo, n tetrade.
Se dezvolt pe bulion i pe geloz snge (colonii S).
Germenii sunt sensibili la lactamine, Macrolide, Cloramfeniol.
212
Coci gram
Veillonella i Acidaminococcus sunt comensali ai cavitii
bucofaringiene i ai tractului intestinal.
Produc infecii dentare i pulmonare dar prezint o patogenitate
sczut comparativ cu ali anaerobi nesporulai. Cocii gram negativi au
dimensiuni reduse i sunt aezai izolat, n perechi sau n grmezi. Se
dezvolt puin abundent n medii de cultur. Sunt sensibili la
Cefalosporine, Clindamicin, Cloramfenicol.
213
CAPITOLUL 30
GENUL MYCOBACTERIUM
Caractere generale
Genul Mycobacterium aparine familiei Mycobacteriaceae.
Genul cuprinde bacili acido-alcoolorezisteni, aerobi, imobili, cu o
structur aparte a peretelui celular (bogat n lipide, acidul micolic are rol
esenial n acido-rezisten).

Specii patogene:
Mycobacterium tuberculosis uman:
tuberculoza la om (bacil descoperit n 1882 de ctre R. Koch).
Mycobacterium tuberculosis bovis:
tuberculoza la bovine i la om.
Mycobacterium leprae:
lepra.
Mycobacterium ulcerans:
ulceraii cutanate.
Mycobacterium atipice:
grupele I-IV Runyon (conin i specii condiionat patogene
sau saprofite).
Tabelul nr. 14 - Mycobacterii atipice
Grupa
Reprezentani
I Fotocromogeni M. kansasii
M. marinum
M. simiae
M. asiaticum
II Scotocromogeni M. scrofulaceum
M. szulgi
M. xenopi
III Necromogeni Complexul avium
intracellulare
M. haemophilum
IV Cu cretere M. fortuitum-chelonei
rapid
M. smegmatis
M. phlei
Patogene pt.
M. lepraemurium
Animale
M. paratuberculosis
M. microti
214
Pigmentarea
coloniilor
Pigmentarea la
lumin (galben)
Intervenia n
patologie
Leziuni tip TBC
Leziuni cutanate
Pigmentare i la
ntuneric
M. Scrofulaceum adenita cervical

la copii
Localizri tip M.
tuberculosis
Fr pigmentare
Coloniile se dezvolt Majoritatea

dup 1-7 zile de la
speciilor
incubare
nepatogene
Mycobacteriile sunt germeni cu parazitism facultativ intracelular;

rspunsul imun este mediat celular.
Imunitatea antiinfecioas este condiionat genetic i de factorii de
mediu (alimentaie, stres, condiii igienice precare).
Infecia tuberculoas - aspecte patogenice i clinice

Factori de patogenitate bacterieni
M. tuberculosis nu produce exotoxine sau endotoxine.
Componentele peretelui celular bacterian dein rolul toxic.
Proteine -11 antigene majore identificate prin electroforez la
tulpina H37Rv, sunt imunogene i determin apariia limfocitelor T
sensibilizate;
Cord factor - ester de trehaloz; inhib migrarea PMN in vitro;
este letal pentru animalele de experien;
determin agregarea bacililor sub form de uvie;
Ceara D - reprezentat printr-un complex de glicopeptide ale
peretelui celular care stimuleaz mecanismele IMC;
Sulfolipide - determin virulen;
Fosfatide - produc necroz cazeoas.
Aspecte imunopatologice
Primoinfecia este inaparent; poarta de intrare este respiratorie,
bacteriile se multiplic n esutul pulmonar; multiplicarea la nivel hilar
ganglionar determin - afectul primar tuberculos.
Leziunile anatomopatologice produse sunt de dou tipuri: exudative
i proliferative.
Leziunile exudative - constau ntr-o reacie inflamatorie obinuit,
cu predominena PMN; se pot resorbi sau pot evolua productiv.
Leziunile proliferative - foliculii tuberculoi - apar ca o reacie
inflamatorie de tip granulomatos. Zona central folicular este o necroz
cazeoas cu bacili, n jurul creia exist un bogat infiltrat celular:
limfocite, monocite, fibroblaste, celule gigante Langhans. esutul necrozat
se poate elimina pe cale respiratorie (sput) sau pe cale sanguin (TBC
generalizat: osoas, renal, meningeal, digestiv, ganglionar etc.).
Macrofagul desfoar o activitate mai eficient n urma activitii
sale prin limfokinele produse de ctre limfocitele T activate. Vaccinul
BCG administrat imediat dup natere are rolul de a stimula apariia
limfocitelor T sensibilizate i a macrofagelor activate.
215
Persistena bacililor n organism determin apariia strii de

hipersensibilitate de tip tardiv la antigenele bacilului tuberculos i
imunitate fa de reinfecie, denumit premuniie.
IDR la PPD pozitiv semnific prezena strii de hipersensibilitate
de tip tardiv.
Modelul experimental este cobaiul (fenomenul Koch), modelul care
explic manifestrile imunopatologice tipice bolii (vezi ,,Proprieti de
patogenitate).
Diagnostic direct
Sputa prin expectoraie spontan;
Sucul gastric obinut prin tubaj, la copiii care i nghit sputa;
Aspirat bronic (obinut prin bronhoscopie), urin;
Lichid cefalorahidian, exudat pleural, peritoneal, articular, secreii
purulente, materii fecale etc.
Diagnostic microscopic direct
Frotiu efectuat din prelevat biologic, colorat Ziehl-Nielsen
Bacilii sunt acido-alcoolorezisteni, fini, aezai n grmezi
care imit literele majuscule M, Y, W, N, V etc.
Se examineaz 100 cmpuri microscopice i rezultatele se
exprim cantitativ (se obin informaii despre stadiul bolii i gradul de
contagiozitate al bolnavului).
- Negativ....................................0
- Dubios .............1-3
- Slab pozitiv (+)................4-9
bacili/100 cmpuri
- Moderat pozitiv (++)...10-100
- Intens pozitiv (+++)............>100
Coloraia fluorescent cu auramin - rodamin.
Pe medii lichide (bulion glicerinat, mediul Dubos) - formeaz o
pelicul la suprafaa mediului (sunt aerobi i hidrofobi);
Pe medii solide (mediul Lwenstein-Jensen), coloniile se dezvolt
dup 2-6 sptmni:
M. tuberculosis uman - colonii R conopidiforme (stimulate de
prezena glicerinei n mediu - eugonice), nepigmentate;
216
M. tuberculosis bovis - colonii R disgonice, inhibate de

glicerina din mediu, nepigmentate, cu dezvoltare tardiv;
Micobacteriile atipice - colonii R i S, pigmentate sau nu, n
funcie de expunerea la lumin i ntuneric. Micobacteriile grupei IV
Runyon se dezvolt i pe medii mai simple n 1-7 zile.
Sunt germeni aerobi. Prezint o catalaz termorezistent;
Testul niacinei - pozitiv pentru M. tuberculosis;
- negativ pentru M. bovis i M. atipice;
Reducerea nitrailor, teluritului - pentru identificri de specie.
Antigenele bacteriene somatice sunt proteice, polizaharidice i
lipidice. Prin tehnici ADN recombinant s-au identificat complexe de
substane imunogene, care vor constitui baza viitorului vaccin anti TBC:
Complexul antigenelor 85A + 85B + 85C;
proteinele de 6 kilodaltoni i 36-38 kilodaltoni;
proteinele de oc termic (heat shock protein - hsp 65, 70).
Fenomenul Koch - se inoculeaz unui cobai, subcutan n regiunea
inghinal, o tulpin virulent; dup 10-14 zile apare local un nodul care
exulcereaz i fistulizeaz. Animalul moare dup dou luni cu leziuni
anatomo-patologice generalizate.
Dac dup apariia primei leziuni se inoculeaz produs patologic n
cealalt regiune inghinal, al doilea nodul apare dup 48-72 de ore i
infecia nu se generalizeaz. Fenomenul este interpretat prin apariia strii
de hipersensibilitate de tip tardiv la antigenele bacilului tuberculos.
Aceast reacie inflamatorie poate fi provocat i prin inocularea iniial a
unor bacili omori sau cu virulen atenuat (principiul vaccinrii BCG).
Rspunsul IMC este negativ fa de infecia primar i pozitiv
pentru reinfecie (apare macrofagul activat i limfocitul T sensibilizat la
antigenele BK).
Antibiograma
Se realizeaz n tuburi Lwenstein-Jensen cu tuberculostatice
incorporate (fiecare chimioterapic n dou concentraii diferite i mediu
martor).
Antibiograma se repet n timpul tratamentului.
217
Mycobacteriile atipice sunt rezistente la tuberculostatice. Hidrazida

acidului izonicotinic, Etambutol, PAS (acid paraaminosalicilic).
Diagnostic indirect
Diagnosticul biologic - Intradermoreacia la tuberculin (PPD):
- Evideniaz starea de hipersensibilitate de tip tardiv fa de
antigenele bacilului tuberculos, prezent la infectai inaparent, bolnavi de
TBC, vaccinai BCG;
- Tuberculina este un filtrat dintr-o cultur n bulion glicerinat,
veche de 6 sptmni, autoclavat, filtrat i concentrat 1/10;
- Azi se utilizeaz PPD - derivatul proteic purificat;
- Intradermoreacia se realizeaz conform tehnicii Mantoux: pe faa
anterioar a antebraului stng se inoculeaz i.d.r. 0,1 ml coninnd 2u
P.P.D;
- Dup 72 de ore se msoar (n mm) diametrul transversal al
papulei dermice palpabile (nu i eritemul nconjurtor);
- Interpretare: 0-9 mm = reacie negativ (absena strii de HTT,
boli anergizante, neinfectai). Este
necesar vaccinarea BCG;
> 10 mm = reac ie pozitiv (stare de HTT cu MF
activat prezent, subiect infectat sau
vaccinat).
- Viraj tuberculinic - apariia unei reacii pozitive la un subiect cu
i.d.r. negativ anterior surprinde momentul primoinfeciei naturale.
Profilaxia
Nespecific
depistarea, izolarea i tratarea sursei de infecie i creterea
rezistenei nespecifice.
Specific
vaccinarea cu vaccinul BCG (Bacil Calmette Guerin), cu
bacili Mycobacterium bovis atenuai prin pasaje succesive pe medii, timp
de 13 ani. IDR negativ - impune revaccinarea cu BCG.
Vaccinul viitorului, ADN recombinant, preparat din
complexul imunogenic (85A + 85B + 85C) este n curs de experimentare;
stimuleaz macrofagele i limfocitele T citotoxice.
218
De remarcat creterea incidenei tuberculozei n ultimii ani, prin

asocierea cu SIDA (virusul HIV distruge IMC). Orice boal
mycobacterian la adult recomand testarea HIV/SIDA.
219
CAPITOLUL 31
GENUL TREPONEMA
Familia Spirochetaceae cuprinde 3 genuri, cu specii variate
implicate n patologia uman:
Genul Treponema;
Genul Leptospira;
Genul Borellia.
Familia Spirochetaceae cuprinde bacterii spiralate, cu un perete
celular elastic, extrem de mobile datorit unui aparat locomotor
intracelular, rsucit n jurul corpului bacterian. Bacteriile au o lungime
medie de 10-15 m, o grosime de 0,4-0,6 m i aproximativ 10-15 spire;
pot executa micri complexe: flexie, rotaie, translaie, rsuciri n jurul
propriului ax (se explic astfel potenialul invaziv).
Reprezentani
Treponema pallidum (tulpina Nichols, reprezentativ ca tulpin
patogen)
Sifilisul;
Treponema pertenue
Pianul;
Treponema carateum
Pinta;
Treponema vincenti, microdentium, mucosum (n cavitatea
bucal);
Treponema calligyrum i Treponema genitalis (pe mucoasa
genital);
Treponema reiter (tulpin de laborator pentru diagnostic,
nepatogen);
Treponema cuniculi (tulpin patogen pentru iepure).
Treponema Pallidum
Sifilisul este o boal venerian specific uman; evolueaz clinic n
trei etape:
primar: - caracterizat prin apariia ancrului dur genital,
nsoit de adenopatie satelit; apare la 1-12 sptmni de la infectare.
secundar: - rozeole cutanate i plci mucoase (septicemia);
- apare la 2-3 luni de la contactul infectant i dispare
repede (2 sptmni). 50 % dintre pacienii cu sifilis secundar evolueaz
nspre etapa teriar.
220
teriar: - sifilisul visceral (gome sifilitice cu localizri diverse);
- apare dup 5-40 ani de la inoculare.

Consecinele sifilisului teriar sunt foarte grave: ruperea cordului,
ruperea vaselor, afectarea SNC cu tabes, paralizie general progresiv.
Sursa bolii este bolnavul n faza primar sau secundar.
Calea de transmitere este: sexual - 95 % i transplacentar i
parenteral - 5 %.
Treponema acioneaz ca germen patogen prin invazivitate. Nu a
fost demonstrat prezena vreunei toxine. Se multiplic celular.
Sifilisul congenital are simptomatologie distinct:
- erupie maculo-papuloas;
- modificri osoase; hepatice;
- afeciuni neurologice;
- surditate; orbire.
Boala apare n urma pasajului transplacentar bacterian.
Serozitate de la nivelul ancrului dur;
Serozitate de la nivelul rozeolelor cutanate i plcilor mucoase
(dup scarificare);
Snge;
Material bioptic din gome.
Preparatul nativ examinat la microscopul cu fond ntunecat:
treponeme refringente cu 10-12 spire animate de micri de
flexie, rotaie, translaie, rsucire n ax.
Imunofluorescena indirect:
tratarea prelevatelor biologice cu ser specific anti Treponema
pallidum marcat fluorescent.
Coloraia Burri:
Treponeme albe pe fondul negru al preparatului.
Coloraia Giemsa:
Treponeme colorate n brun-violaceu.
Coloraia Fontana Tribondeau:
Treponeme colorate n negru pe fondul galben al preparatului.
Tehnica Levaditi Manuelian:
reprezint o coloraie Fontana Tribondeau aplicat seciunilor
din organele prelevate necroptic (seciuni prin gomele sifilitice).
221
Examenul microscopic se pozitiveaz n perioada primar sau

secundar.
Izolarea treponemelor
Foarte greu de cultivat;
Se pot menine viabile 72 ore n mediul Nelson-Mayer;
Inocularea la iepure (intratesticular) - animalul prezint o orhit
sifilitic cu adenopatie; prin aceast metod se obin tulpini patogene
(Nichols, Triffi, Gand) care reprezint o surs de antigene pentru
diagnostic;
Tulpina Reiter e o tulpin saprofit folosit pentru diagnostic.
Se utilizeaz obligatoriu n controlul screening de depistare al
sifilisului, pentru decelarea infeciilor latente sau inaparente clinic. Este
posibil ncepnd cu sfritul perioadei primare.
Se utilizeaz n diagnostic antigene netreponemice (nespecifice) i
antigene treponemice (specifice).
Treponema pallidum prezint antigene lipoidice, cu structur
asemntoare cardiolipinei miocardice. Detectarea anticorpilor sifilitici
antilipoidici (reagine luetice) se realizeaz uzual prin reacii nespecifice,
care utilizeaz antigene lipoidice din cord de bou (cardiolipina).
Reacii serologice nespecifice
Reacii de floculare: Citochol, Meinicke, Kahn;
RFC Bordet - Wasserman cu antigen Bordet Ruelens;
Testul VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) este o reacie
de aglutinare pasiv. Ca test de triaj se utilizeaz microreacia VDRL. O
reacie pozitiv se completeaz cu tehnica n tuburi. Testul VDRL permite
i determinri cantitative ale AC.
n cazul testului pozitiv se realizeaz testele de confirmare
(specifice):
Imunfluorescena indirect: FTA - ABS (The fluorescent treponemal
antibody absorbed serum). Antigenele sunt extrase din Treponema Reiter.
Este cel mai utilizat test serologic n statele dezvoltate din punct de vedere
economic;
Reacia de hemaglutinare pasiv (antigen Treponema pallidum);
RFC (tehnica Kolmer la rece).
Reaciile nespecifice au avantajul c nu pun n pericol sntatea
persoanelor din laborator dar prezint dezavantajul reaciilor fals pozitive
(n asociere cu boli autoimune, administrare de vaccinuri sau anestezice).
222
Reacii serologice specifice

Folosite pentru confirmarea diagnosticului;
Testul de imobilizare al Treponemelor (T I T):
Treponemele sunt imobilizate n prezena anticorpilor specifici i a
sistemului complement. La microscopul cu fond ntunecat se numr
microorganismele imobilizate dup 15 ore de inoculare i rezultatele se
exprim procentual;
Reacia de imunoaderen:
Treponemele ader la suprafee netede (hematii, trombocite sau
particule inerte) n prezena anticorpilor i a sistemului complement;
Testul de hemaglutinare (cu extracte de Treponema Nichols sau
pallidum). Este mai puin sensibil dect testul FTA - ABS;
Imunofluorescena indirect FTA - ABS;
ELISA (cu antigene extrase din tulpina Nichols);
Testul de imunodispariie intraperitoneal (TPID);
Testul RFC - antigene ale Treponemei Reiter;
Contraimunelectroforez - cu acelai tip de antigene.
Ultimele 3 reacii menionate au o specificitate mai sczut.
n campaniile de depistare serologic a sifilisului se vor executa
dou reacii di-ferite: VDRL i RFC cu antigen cardiolipinic sau extras din
Treponema Reiter. Pentru confirmarea diagnosticului pozitiv se recomand
efectuarea imunfluorescenei indirecte (FTA-ABS), metod de mare
sensibilitate i specificitate.
Reaciile serologice cantitative verific eficiena tratamentului
(titrul anticorpilor specifici scade, n timp ce n reaciile fals pozitive titrul
rmne nemodificat). Reacii fals negative pot aprea la unii bolnavi de
sifilis, prin exces de anticorpi care determin un fenomen de prozon.

Rspunsul imun anti Treponema este predominent celular
(spirochetele se multiplic intracelular). Rspunsul imun umoral
elaboreaz AC antilipidici i AC antispecie.
Se poate investiga rspunsul imun IMC prin IDR, cu antigene
extrase din treponeme (luetina). Reacia pozitiv denot prezena infeciei.
Terapia i controlul afeciunii

Treponemele sunt sensibile la Peniciline i Cefalosporine. Nu s-a
semnalat rezistena microbian la aceste preparate. Sifilisul teriar nu poate
fi vindecat.
Sifilisul congenital poate fi prevenit prin administrarea terapiei
specifice precoce (pn n luna a patra de sarcin).
223
Obinerea vaccinului specific este foarte dificil, din cauza

dificultilor de cultivare pe medii de cultur ale treponemelor.
Profilaxia nespecific se refer la depistarea, tratarea sursei i la
educaia sexual.
Treponema pertenue
Produce pianul (framboesia), boal tropical ce se manifest prin
leziuni cutanate i mucoase. Boala afecteaz mai ales copiii i evolueaz
tot n trei etape, ca i sifilisul. Boala se transmite nesexual.
leziunile primare - sunt ulcerative, care apar la 3-4 sptmni de la
infectare;
leziunile secundare - sunt tot ulcerative, apar la cteva luni sau ani
de la infectare;
leziunile teriare - sunt tardive i afecteaz osul i pielea.
Complicaiile viscerale sunt grave. Nu se semnaleaz infecii
congenitale. Se trateaz cu Penicilin.
Treponema carateum
Reprezint agentul etiologic al pintei, care se transmite prin contact
direct, nesexual. Boala este endemic n America Central i de Sud.
Leziunile primare sunt papule neulceroase. Se descriu complicaii
cardiovasculare i nervoase.
Diagnosticul de laborator i tratamentul sunt analoge sifilisului.
224
CAPITOLUL 32
GENUL LEPTOSPIRA
Caractere generale
Spirochetele genului sunt larg rspndite n natur, fiind saprofite i
patogene (n special pentru animale).
Se deosebesc de celelalte spirochete prin fineea lor (12 m
lungime i 0,06 m diametru), de aceea pot ptrunde prin tegumentele
intacte. Corpul bacterian are 10-12 spire nedeformabile, cu extremitile
rsucite. Aparatul locomotor este alctuit dintr-o singur fibril dispus
ntre membran i peretele celular foarte elastic.
Reprezentani
I. Grupul Leptospira biflexa - care reprezint tulpinile saprofite,
nepatogene;
II. Grupul Leptospira interrogans - cuprinde tulpini patogene, de
exemplu:
Leptospira icterrohemoragiae (boala Weill)
leptospiroza icterohemoragic;
Leptospira grypo-tiphosa
febra de nmol;
Leptospira pomona
boala porcarilor;
Leptospira canicola
tifos canin;
Leptospira hebdomadis
febra de apte zile.
Rezervorul de infecie l constituie animalele slbatice sau
domestice (obolan, oarece, cine, porci etc.). Leptospirele paraziteaz
corticala renal dup bacteriemie i apoi sunt eliminate prin urin n
mediul nconjurtor. Leptospirele patogene persist n ap i sol umed.
Omul se contamineaz n mod accidental.
Leptospirozele (sunt antropozoonoze) i au simptomatologie
nespecific:
- sindrom febril persistent;
- mialgii;
- astenie;
225
- fotofobie;
- migrene.
Leptospiroza icterohemoragic evolueaz cu sindrom febril, icteric,
hepatic, renal i hemoragic, care pun n pericol viaa subiectului. Febra
Fort Bragg evolueaz i cu erupii cutanate. Uneori boala se manifest ca
meningit leptospirotic. Bolile produse prin Serotipurile L.
icterrohemoragiae i L. canicola au letalitate crescut.
snge i lichid cefalorahidian n prima sptmn de boal;
urin alcalinizat n prealabil (mediul acid distruge leptospirele) din sptmna a doua pn n luna a doua de boal.
Examenul la microscopul cu fond ntunecat - din prelevat biologic
proaspt, plasat ntre lam i lamel. Spirochetele sunt extrem de mobile.
Imunofluorescena.
Frotiu colorat Giemsa.
Coloraia Burri.
Impregnarea argentic Fontana Tribondeau.
Vizualizarea leptospirelor n organe dup tehnica Levaditi
Manuelian.
Izolarea
nsmnarea se face pe medii cu ser de iepure: Uhlenhut sau
Korthof. Mediile se incubeaz la 28-30C i se controleaz prezena
leptospirelor sptmnal timp de 60 zile la microscopul cu fond ntunecat;
dac examenul microscopic este pozitiv, se fac subculturi pe medii
proaspete. Leptospirele patogene nu modific turbiditatea mediului;
inocularea se poate face i intraperitoneal sau subcutan la cobai.
Leptospirele dispun de un bogat echipament enzimatic:
- hialuronidaze;
- fosfolipaze;
- oxidaze;
- catalaze;
- hemolizine.
226
Leptospirele patogene au o slab activitate ureazic i au nevoie n

mediile de cultur de acizi grai nesaturai (ex: serul de iepure).
Vitaminele B1, B12 reprezint factori de cretere.
Antigenicitate
Antigenul proteic de nveli (P) codific serotipul; are rol de
antigen protector i este indispensabil ntr-un vaccin (bacterina). Poate
interaciona cu anticorpii specifici dintr-un ser. Peretele celular conine
antigenul somatic (S), fixator de complement.
Antigenele F4 i TM de natur polizaharidic, cu rol n aglutinare.
Endotoxina este izolat din peretele celular al leptospirelor
patogene.
Patogenitatea i invazivitatea leptospirelor se explic prin
endotoxin, intervenia enzimelor i mobilitatea bacterian crescut.
Infecia experimental se realizeaz la cobai, hamsteri, iepuri nounscui. Animalele se inoculeaz intraperitoneal i subcutan i fac
septicemie. Leptospirele pot fi izolate prin nsmnarea pe medii
adecvate.
Anticorpii se detecteaz dup prima sptmn de boal i ating
titrul maxim dup 3-4 sptmni.
RFC Ida Bengston.
Antigenul se prepar din Leptospira biflexa patoc, care conine
antigenul de grup, comun tuturor speciilor patogene.
Reacia de aglutinare liz:
Permite diagnosticarea speciei de leptospire care a produs
infecia.
Antigenul (lichid) este preparat din tulpini cunoscute de
Leptospira.
Serul de bolnav sufer diluii crescnde. Din fiecare diluie de
ser se fac aglutinri pe lam cu fiecare tulpin de leptospira.
Lamele se examineaz la microscopul cu fond ntunecat.
Aglutinarea se manifest prin aglomerarea leptospirelor n gheme
stelate, urmat apoi de liz.
Tipul de leptospir patogen este indicat prin titrul cel mai
ridicat al reaciilor. Se determin astfel agentul etiologic specific.
227
Tratamentul
Peniciline, Tetracicline administrate din primele zile de boal;
Tratamentul ocului toxiinfecios (dac este cazul).
Profilaxie
Vaccinarea se realizeaz pentru profilaxia bolii la animale.
Profilaxia specific nu se aplic la om.
228
CAPITOLUL 33
GENUL BORRELIA
Caractere generale
Cuprinde spirochete cu spire largi i neregulate, saprofite i
patogene, colorabile cu colorani de anilin.
Clasificarea speciilor se realizeaz dup gazda infectat.
Reprezentani
Borrelia recurentis
specie strict specific omului (febra recurent) transmis prin
pduche;
Borrelia hispanica, duttoni, burgdorferi (boala Lyme)
transmise la om prin cpu;
Borrelia bucalis, vincenti
pe mucoase (cavitatea bucal);
Borrelia anserina
la psri;
Borrelia brasiliensis
la artropode;
Borrelia harveyi
la primate;
Borrelia crocidurae
la roztoare; etc.
Patogeneza infeciilor la om
Borreliile sunt patogene prin multiplicare i invazivitate;
borreliozele sunt boli generalizate. Borrelia recurentis produce febra
recurent, n urma nepturii pduchelui infectat. Sindromul febril
prezint 6 - 9 recderi, marcate de perioade de acalmie. Explicaia const
n fenomenul de variaie antigenic, ce reprezint metode de eludare a
aprrii imune. Explicaia fenomenului const n apariia a unor noi
antigene de suprafa, codificate prin plasmide lineare (anticorpii produi
devin inutili pentru puseul febril ulterior). Variaia antigenic face
dificil clasificarea genului pe grupuri i tipuri antigenice.
Rspunsul imun este preponderent umoral. Imunitatea este de scurt
durat, strict specific de variant antigenic. Reinfecia este posibil dup
2 - 3 ani.
Spirochete condiionat patogene din cavitatea bucal:
229
Borrelia vincenti - reprezint agentul patologic al anginei Plaut Vincent, n combinaie cu Bacteroides melaninogenicus. De asemenea,
poate produce gingivita acut ulceronecrozant;
Borrelia bucalis i vincenti, n asociere cu Fusobacterium fusiforme
produce stomatite, glosite, angine i gingivite.
Diagnostic de laborator n febra recurent

Se recolteaz snge n plin puseu febril.
Spirochetele cu lungimea de 20 - 30 m, cu de 1 m, cu 10 - 30
spire neregulate i deformabile n timpul micrilor, cu capete drepte.
Aparatul locomotor este alctuit din 30 de fibrile dispuse ntre membran
i peretele celular.
Se coloreaz gram (sunt gram negative); se coloreaz i prin
impregnare argentic (Fontana - Tribendeau) i cu colorani cu anilin.
Izolare pe medii de cultur
Pe mediile Noguchi, Kelly sau Dodge (medii mbogite);
Inoculare pe ou embrionat de gin, intraalantoidian;
Inocularea oarecelui intracerebral;
Inocularea pduchilor (Weigl) pentru obinerea culturilor pure, cu
virulen nemodificat.
Sunt bacterii microaerofile;
Fermenteaz glucoza.
Variaia antigenic a imunogenelor de suprafa face dificil
ncadrarea n serogrupuri i serotipuri.
Borrelia recurentis este patogen pentru maimu;
Borrelia duttoni este patogen pentru oarecele alb.
RFC cantitativ, efectuat pe probe perechi de seruri. Creterea
titrului de cel puin 4 ori semnific o boal n evoluie;
230
Reacii de aglutinare - liz.
Tratament
Tetracicline, - lactamine.
Profilaxia
Nespecific - distrugerea vectorului.
Borrelia burgdorferi
Reprezint agentul etiologic al bolii Lyme, transmis la om prin
neptura unei cpue (Ixodes ricinus).
Boala evolueaz n trei stadii:
I. Dup o incubaie de 3 - 32 de zile apar leziuni cutanate (eritem
cronic migrator) la 80% dintre subieci;
II. Se caracterizeaz prin leziuni cutanate multiple, artrite i
afectarea sistemului nervos central i periferic;
III. Se manifest prin meningoencefalite (15%) i tulburri de ritm
cardiac (8% dintre pacieni). Tratamentul se realizeaz cu Tetracicline,
Cefalosporine, Vancomicin.
Distribuia geografic include SUA (coasta Atlanticului), Australia,
Asia i Euro-pa. Sezonalitatea bolii: mai - iunie.
231
CAPITOLUL 34
ALTE ETIOLOGII BACTERIENE
GENUL LEGIONELLA
Caractere generale
Legioneloza sau boala legionarilor este o pneumonie aprut la o
aniversare a Legiunii Americane din Philadelphia (1976). Agentul
etiologic este Legionella pneumophila, transmis prin intermediul
sistemului de aer condiionat.
Genul Legionella cuprinde 39 de specii (bacili fini gram negativi
fr aezare caracteristic). Prezint parazitism celular facultativ. Speciile
genului sunt larg rspndite n natur, n special n medii umede (izvoare,
ap cald, fntni publice etc.).

Legionella pneumophila:
legioneloza, febra Pontiac.
Legionella micdadei:
pneumonie tip infecie nozocomial, asemntoare clinic
legionelozei.
Legionella bozemanii, gormanii, dumoffii:
descoperite n mediu, neasociate unor infecii umane:
Legionella pneumophila este o bacterie cu parazitism facultativ
intracelular i prezint afinitate pentru monocite i macrofage, n interiorul
crora supravieuiesc i se multiplic, pn la distrugerea acestora.
Exudatul inflamator pulmonar conine preponderent macrofage i
neutrofile; bacteriile determin apariia unor focare fibrinopurulente la
nivelul alveolelor pulmonare. Formele manifeste clinic sunt ntlnite
preponderent la imunodeprimai. Letalitatea depete 20% la cazurile
incorect tratate. n cazurile foarte grave pot apare manifestri
extrapulmonare: digestive, renale, psihice, hepatice.
Febra Pontiac este un sindrom gripal like, fr implicarea
plmnului.
232
Efectul patogen bacterian se datoreaz adezinelor de suprafa,

ctorva toxine (hemolizine, citotoxine, endotoxine), o toxin peptidic i o
catalaz blocheaz fenomenele exploziei respiratorii sau formarea
fagolizozomilor; astfel se explic persistena bacterian intracelular i
ineficiena fagocitozei, aspect cu att mai grav cu ct i rspunsul imun
celular este inhibat.
Secreii ale tractului respirator inferior, biopsie pulmonar.
Probe de ap contaminat (sedimente din rezervoare de ap, din
fntni i din pulverizatorul duurilor).
Examenul microscopic, proprieti morfotinctoriale
Legionella pneumophila - bacili gram negativi, pleiomorfi, flagelai
(polar, subpolar sau lateral), cu incluzii intracelulare (nu formeaz spori).
Impregnaiile argentice se utilizeaz pentru preparate histologice
Imunofluorescena cu anticorpi monoclonali specifici MAC 2
marcai cu fluorescein - evideniaz bacteriile direct din produsul
patologic
Nu reprezint un diagnostic de rutin. Mediile de cultur trebuie s
conin cistein, fier pirofosfat. Sputa nu se inoculeaz direct, se
nsmneaz esuturi infectate.
Coloniile au un aspect sticlos, apar dup 3 - 5 zile de incubare n
atmosfera umed, aerob, la pH 6,9 i T = 35C.
Mediul lichid trebuie s conin ap, macrofage alveolare, alge i
bacterii fotosintetice (diagnostic neuzual).
Caracteristici biochimice
Catalaza +, Oxidaza +, lactamaze +;
Gelatinaza +;
Hidroliza hipuratului +;
Fluorescena coloniilor.
233
Exist 39 de specii de Legionella i 60 de tipuri antigenice distincte.

Legionella pneumophila prezint 14 serogrupuri. Serogrupul 1 cauzeaz
80% din mbolnvirile umane. Exist un kit RIA care detecteaz antigenul
serogrupului 1 al Legionellei pneumophila n urina pacienilor.
Serotiparea se realizeaz prin imunofluorescen, utiliznd
antiseruri specifice.
Detectarea antigenelor sau acizilor nucleici se realizeaz prin
tehnici ADN (laboratoare specializate) sau cu anticorpi monoclonali
(MAb2).
Util n investigaii epidemiologice, n formele clinice
extrapulmonare i n caz de examen bacteriologic negativ. Dezavantajul
diagnosticului serologic const n posibilele reacii ncruciate fa de alte
Legionelle.
RIF indirect -cea mai sensibil metod (diagnostic pozitiv n 90%
dintre cazuri)
ELISA
Contraimunelectroforeza
Se lucreaz pe probe perechi de seruri pentru depistarea
seroconversiei; titrul anticorpilor specifici trebuie s fie mai mare de 1/128.
Nivelul maxim al anticorpilor se observ n sptmna 3 6 de boal.
Tratament
n unele cazuri diagnosticul serologic poate fi retrospectiv.
Terapia standard const n administrarea unor macrolide, quinolone
sau sulfamide de ultim generaie. -lactaminele sunt inhibate de ctre lactamazele bacteriene.
Profilaxie, control
Aproximativ 25% din populaia adult prezint anticorpi specifici
anti Legionella (majoritatea infeciilor sunt asimptomatice).
Controlarea prezenei bacteriei n mediile acvatice (ap potabil,
industrial, menajer) sau aer condiionat.
Nu s-a putut evidenia transmiterea interuman. Indivizii
imunodeprimai (diabet, cancer, dializai, SIDA, etc.) pot beneficia de
chimioprofilaxie (macrolidele asociate sau nu cu Rifampicina prezint
eficiena maxim).
CALYMMATO BACTERIUM
234
Caractere generale
Descoperit de Donovan n 1903.
Cuprinde specia C. granulomatis, patogen pentru om; (reprezint
agentul etiologic al donovanozei, boal sexual transmisibil, caracterizat
prin apariia unor ulceraii i granuloame inghino genitale). Boala este
rspndit n zonele cu climat cald i umed.
235
Secreia recoltat cu tamponul de la nivelul ulceraiei.
Raclaj din regiunea granulomatoas.
Bacili gram negativi colorabil bipolar, nesporulai, cu aezare
necaracteristic, evideniabili n sacul vitelin al embrionului inoculat sau
intramacrofag.
Izolare
Prelevatele biologice se inoculeaz n sacul vitelin al embrionului
de gin.
Inoculare pe glbenu de ou coagulat n plac Petri.
Posed antigene care determin sinteza anticorpilor specifici, care
nu au rol protectiv.
Germen aerob, facultativ anaerob.
Germenul nu este patogen pentru animalele de laborator.
RFC.
I.D.R. care evideniaz starea de hipersensibilitate de tip tardiv dup
boal.
Tratament
Ampicilin i Tetraciclin.
Profilaxia
Respectarea normelor de igien individual.
236
ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIAE
Caractere generale
Bacili gram pozitivi, morfologic i antigenic nrudii cu speciile
Lysteriei, ntlnii n rezervoare animale (suine) sau materie organic
divers. Boala este o antropozoonoz (erizipeloid Rosenbach) survenind
accidental la lucrtorii din sectorul veterinar (dup apariia unei soluii de
continuitate la nivelul tegumentului).
Secreii de la nivelul leziunii (eritematoas i chiar buloas).
Bacili gram+ imobili, necapsulai, aezai tip difteroid (n culturi
vechi).
Izolare pe medii de cultur
Pe medii lichide produce o turbiditate uoar.
Pe medii solide se dezvolt sub forma coloniilor S mici,
transparente, dup 48 de ore de incubare la 37C, cu hemoliz pe medii
cu snge.
Mediile de cultur trebuie mbofire cu ser de cal, snge de oaie,
triptofan, riboflavin, acid oleic.
Testul indol i reducerea nitrailor sunt negative.
Nu hidrolizeaz esculina i hipuratul de sodiu.
Produc H2 S pe mediul TSI i fermentarea unor zaharuri.
Produc hialuronidaz (factor de patogenitate).
Catalaza negativ.
Antigenele termolabile - specifice de tip.
Exist 2 tipuri antigenice, A i B, tipul A fiind mai virulent.
oarecele i porumbelul sunt sensibile la infectarea cu E.
rhusiopathiae i sunt utilizate n laborator pentru testarea virulenei. Boala
la animal se numete rujet.
Tratament
Cu lactamine, Tetracicline sau Streptomicina.
237
GENUL BARTONELLA
Caractere generale
Iniial speciile acestui gen au fost clasificate cu genul Ricketsia, din
cauza unor omologii genetice.
Speciile genului Bartonella determin sindroame febrile la pacieni
imunodeficieni. Sunt bacili scuri gram negativi; Se dezvolt pe medii
celulare i acelulare.
Reprezentai, infecii produse

Bartonella baciliformis:
Febra Oroya, Verruga peruana, boala Carrion
Rezervorul este uman, vectorul este flebotomul (America de
sud)
Bartonella quintana (Rochalimaea quintana):
Sindrom febril, Angiomatoza bacilar, Hepatita, Endocardit,
Rezervorul bacterian este uman, vectorul - insecte (America
de Nord, Europa, Asia, Africa)
Bartonella henseleae (Rochalimaea henselae):
Boala zgrieturii de pisic, boala transmis prin vectori (?) sau
prin traumatism (zgrietura). Rezervor este pisica. Rspndirea bolii
ntreg globul.

Febra Oroya este un sindrom febril asociat cu anemie hemolitic
(infectarea eritrocitelor), majoritatea cazurilor fiind diagnosticate n
America de Sud. 15% dintre per-soanele arealului endemic care au
supravieuit infeciei cu Bartonella baciliformis devin purttori
asimptomatici, constituind rezervorul infeciei. Infecia se poate croniciza
dar este puin evident din punct de vedere clinic.
Angiomatoza bacilar se caracterizeaz printr-un sindrom febril
nsoit de erupii cutanate papulare violacee, hepatosplenomegalie i
adenopatii. Acest sindrom clinic survine preponderent la imunodeficieni.
Boala zgrieturii de pisic este o infecie relativ benign,
caracterizat prin febr i adenopatii, astenie i anorexie. La
imunodeficieni, tabloul clinic este mai grav: exantem, adenopatii
generalizate, artralgii i tulburri ale SNC.
Examen microscopic
238
Coloraia Gram
bacili gram negativi.
B. baciliformis posed un flagel unipolar.
Coloraia Warthin-Starry
coloraie special pentru seciuni histologice.
Izolarea
Bacteriile necesit Hb sau hemina ca factor de cretere obinut din
lizat de hematii, agar cu extracte de cord i 5% snge, n atmosfer
microaerofil. (5-10% CO2). Culturile se pozitiveaz la 10 zile de incubare
la 28C.
Cultivarea se poate realiza i n culturi de celule, care pot fi
transpuse apoi pe mediile speciale.
Alte teste cu rol diagnostic:
Gaz cromatografia: prezena C18 este folosit pentru a realiza
diagnosticul diferen-ial ntre Bartonella quintana (18%) i Bartonella
henseleae (22%).
Imunofluorescena indirect. Metod sensibil, realizeaz
diagnostic de specie.
Metode imunoenzimatice. Detecteaz anticorpii specifici atunci
cnd culturile rmn negative
Reacia n lan a polimerazei (PCR)
Diagnostic histopatologic
Reaciile inflamatorii se caracterizeaz prin infiltraii nodulare de
limfocite, histiocite i neutrofile, cu zone de necroz central. Acest tip de
reacie denot instalarea strii de hipersensibilitate de tip tardiv.
Tratamentul
Sunt eficiente Doxiciclina, Rifampicina sau Ciprofloxacina.
Eritromicina este mai util n cazuri de angiomatoz baciliar. La subiecii
imunodeficieni (ex.: SIDA) durata tratamentului antibiotic este de 8 12
sptmni.
Rifampicina asociat cu aminoglicozidele are efecte benefice n
boala zgrieturii de pisic.
Profilaxia
Cuprinde msuri care vizeaz ntreruperea lanului epidemiologic,
controlul donatorilor de snge i distrugerea vectorilor. Rata mortalitii
prin febra Oroya poate atinge 40%. Chimioprofilaxia cu antibiotice poate
fi eficient.
239
CAPITOLUL 35
INFECII NOZOCOMIALE
Definiie, noiuni generale

Infeciile nozocomiale reprezint infeciile contactate n timpul
spitalizrii, altele dect cele pentru care s-a realizat internarea. Pe lng
infeciile care apar n unitile cu paturi trebuie menionate i izbucnirile
epidemice care pot surveni i n alte instituii sanitare (instituii pentru
copii, azile de btrni, etc.). Infeciile intraspitaliceti mai sunt denumite
infecii interioare, infecii ncruciate (cross infections) sau hospitalism
infecios.
Acestea au o rspndire semnificativ, constituind o adevrat
problem de sntate public. Se presupune c i n condiiile n care sunt
asigurate toate condiiile igienice ale actului medico-chirurgical, incidena
acestora poate atinge ntre 3% i 15%, cu o medie de aproximativ 6%.
Prezena infeciilor interioare poate fi asemnat cu un aisberg, fiind
evidente i tratate doar cele manifeste clinic, n timp ce formele subclinice
i latente sau cele care se manifest dup externarea pacientului sunt cele
mai numeroase. Din acest motiv, incidena real i numrul deceselor din
aceste cauze este foarte greu de cuantificat.
Epidemiologia infeciilor nosocomiale

n general, sejurul n spital produce aproape la fiecare pacient o
colonizare cu germeni de spital la nivelul tegumentelor i mucoaselor.
Spitalele moderne reprezint o ambian microbian care asigur pe
de o parte condiii pentru selecionarea unor microorganisme
multirezistente la antibiotice, dar i condiii care favorizeaz
implementarea acestora pe organisme deficitare imunologic, pe de alt
parte.
Dezvoltarea ulterioar colonizrii a infeciei subclinice sau clinice,
depinde de numeroi factori legai att de microorganismul patogen, ct i
de gazd.
Verigile lanului epidemiologic la nivelul comunitii spitaliceti,
prezint particulariti care in de arealul geografic i dezvoltarea
economico-social, de profilul i calitatea serviciilor de sntate.
240
a) Sursa de infecie
Este reprezentat de bolnavul nsi, de flora proprie pacientului
modificat n cursul perioadei de spitalizare. Colonizarea cu flora
microbian de spital crete riscul declanrii i evoluiei unei infecii cu
germeni proprii pacientului.
Omul ca surs de infecie poate fi bolnav cu forme clinice de boal
sau purttor eliminator de germeni.
bolnavul - surs de infecie, poate fi:
- cu boal infecioas cu etiologie cunoscut, pentru care este
spitalizat n vederea izolrii i tratamentului
- bolnavul internat pentru diverse infeciuni care la internare
nu prezenta sindrom infecios, dar se afla n perioada de
incubaie
- bolnavul internat pentru o afeciune oarecare, dar care
prezint o infecie acut sau cronic, indiferent de etiologie,
gravitate sau form de manifestare
- bolnavul cu o boal infecioas spitalizat ntr-o secie
necorespunztoare, prin erori de diagnostic la internare
- bolnavul care n cursul spitalizrii, pe lng afeciunea de
baz contracteaz o infecie supraadugat, indiferent c ea
se manifest clinic, sau este numai un portaj de germeni
- bolnavul care prezint la internare boli cu etiologie
infecioas sau neinfecioas i care n acelai timp este
purttor i de ali germeni
purttorul eliminator de germeni poate fi:
- fost bolnav cu o afeciune infecioas, care dup vindecarea
clinic, poate gzdui i elimina pe diverse ci agentul
patogen, intermitent sau continuu pe o perioad variabil de
timp
- purttor aparent sntos (precoce) n perioada de incubaie
a unei boli infecioase, care elimin agentul patogen nainte
de apariia manifestrilor clinice ale bolii
- purttor sntos propriu-zis, care gzduiete i elimin
agenii patogeni pe diferite ci, perioade variabile de timp.
Formele de manifestare a procesului epidemiologic n infeciile
nosocomiale sunt n funcie de precocitatea depistrii i neutralizrii lor, pe
de o parte, de caracterele i varietatea germenilor pe de alt parte. Totodat
o serie de factori precum:
localizarea procesului infecios calea de transmitere i
produsul patologic prin care este eliminat agentul patogen
cantitatea i modul de eliminare a agentului patogen
241
numrul de surse din unitatea spitaliceasc

activitatea, mobilitatea, modul, frecvena i durata de
contact pe care o realizeaz sursele de infecie din spital cu
alte persoane
comportamentul i nivelul igienico-sanitar al surselor de
infecie
profilul unitii spitaliceti
receptivitatea general a organismului
contribuie i ei la determinarea formelor de manifestare a
infeciilor nosocomiale n spital.
b) Cile de transmitere
Transmisia asigur contactul dintre agenii microbieni i gazd. n
mediul spitalicesc, transmiterea germenilor se face prin:
Contact direct - minile infectate ale personalului medical
- de la un pacient la altul
Contact indirect - aparatur medical contaminat (de ventilaie
asistat, dializ)
- lenjerie, instrumentar, catetere vezicale, tuburi
de dren, endoscoape, stetoscoape, manete de tensiometre, garoul, soluii
perfuzabile, medicamente
Aerian - particule de praf, microorganisme aerobe
- transmiterea aerian constituie una dintre cele mai
dificile probleme de igien a spitalelor
d) Organismul receptiv
Reprezentat de pacieni i personalul de ngrijire, care dup
colonizare, dezvolt infecia, devin la rndul lor surse, deschiznd un nou
ciclu al procesului epidemiologic.
Factorii care pot altera aprarea organismului fa de agresiunea
infeciilor sunt:
afeciunea de baz i bolile asociate
starea de nutriie, sexul, vrsta
afeciunile intercurente
tratamentele medicamentoase (imunodepresive,citostatice)
actele medicale invazive (endoscopia, bronhoscopia,catetere
intravenoase, etc.)
tratamentele chirurgicale
242
e). Factori epidemiologici secundari

infrastructura spitalului
- pereii construciei n care pot fi cantonate levuri
(Aspergillus)
- sistem de ap necorespunztor expus contaminrii cu
germeni gram negativi (Pseudomonas)
- un umidificator de aer poate deveni surs de infecie dac
apa este contaminat
arhitectonica spitalelor care nu respect circuitele funcionale
corecte separate curat-murdar, aseptic-septic, steril-nesteril
- saloane supradimensionate, suprapopulate (n saloane cu 12 paturi, incidena I.N. este de 1% n timp ce n saloane cu
8-10 paturi incidena crete la peste 10%). (40)
- neglijarea msurilor de igien
- dotri necorespunztoare
- deficiene cantitative i calitative de personal
spitalizarea ndelungat influeneaz nefavorabil evoluia
postoperatorie a pacienilor (dup 7 zile de la internare 50% dintre bolnavi
sunt colonizai cu flor de spital, pentru ca n perioada imediat
postoperatorie colonizarea s creasc pn la 75%.
Factori de risc implicai n geneza infeciilor nozocomiale

Unitatea spitaliceasc ntrunete cele trei condiii pentru apariia
infeciilor nozocomiale: terenul receptiv prin vrst i boal, agentul
microbian (patogen sau condiionat patogen, endogen sau exogen,
ntotdeauna multiplu rezistent la chimioterapice antibacteriene), agentul
infecios micotic, viral sau parazitar dar i ambiana poluat a mediului
respectiv (neglijarea manoperelor de dezinfecie i sterilizare,
suprapopularea saloanelor, etc.).
Vrstele extreme atrag un deficit imunitar fiziologic,
roentgenterapia sau terapia cu citostatice sau imunosupresoare, bolile
asociate (diabet zaharat, neoplasme, boli virale anergizante, strile de oc)
constituie factori de risc majori pentru apariia infeciilor respective, la
care se adaug riscul manoperelor medico-chirurgicale invazive (perfuzii
intravenoase, intubaii oro-traheale, interveniile chirurgicale propriu-zise).
Ali factori favorizani se refer la arhitectonica spitalului, circuite
necorespunztoare, spitalizri ndelungate nejustificate, abundena
vizitatorilor sau prezena studenilor.
243
Utilizarea abuziv a antibioticelor selecteaz tulpini rezistente fa

de marea majoritate a chimioterapicelor. Prin plasmidele R de rezisten
(prin operonii RTF) se poate transfera n bloc chimiorezistena la
aproximativ 90% dintre tulpinile existente n spital.
Flora microbian local provine de la pacieni, de la purttorii
sntoi (fr afeciuni clinic manifeste sau personal medical), din mediul
spitalicesc sau extraspitalicesc (aparintori). De cele mai multe ori aceti
factori de risc se nsumeaz, ceea ce contribuie la agravarea cazuisticii
respective. Totui, n lumina celor prezentate se presupune c o durat a
spitalizrii prelungit (peste apte zile), dubleaz practic riscul apariiei
unei infecii interioare.
Forme clinice de infecii nozocomiale

Infecia de plag chirurgical superficial sau profund
reprezint cea mai frecvent complicaie a actului chirurgical

Infecia tractului urinar este de asemenea foarte frecvent, att
n sectorul medical, ct i n cel chirurgical (ex.: infecia asimptomatic,
bacteriuria simptomatic, cistite, pielonefrite, etc.).
Infeciile aparatului respirator: de tract respirator superior i
inferior (ex.: rinofaringite, bronita, traheobronita, pneumonia,
bronhopneumonia etc.).
Infeciile ochilor, nasului, faringelui i cavitii bucale (ex.:
conjunctivite, otite externe, medii i interne, mastoidita, faringita, laringita,
epiglotita, sinuzita etc.).
Infeciile aparatului digestiv (ex.: gastroenterocolita,
enterocolita ulceronecrozant, duodenite, infecii intraabdominale diverse,
peritonita).
Infeciile aparatului cardiovascular (ex.: endocardite,
pericardite, arterite, flebite).
Infeciile sistemului nervos central (ex.: infecia intracranian,
meningita, ventriculita, abces spinal).
Infeciile aparatului osteoarticular (ex.: osteomielita, artrita,
bursita).
Infeciile aparatului de reproducere (ex.: endometrite, anexite,
vulvovaginite, infecia epiziotomiei).
Infeciile pielii i a esutului moale (ex.: escare de decubit,
escare suprainfectate, mastita, omfalita, pustuloze, intertrigo).
Infecia sanguin (ex.: bacteriemii tranzitorii, septicemii).
Alte boli infecioase (hepatite cu transmitere parenteral i
enteral, sindromul de imunodeficien dobndit, rujeol, rubeol,
parotidit epidemic, grip), afeciuni micotice i parazitare.
244
Etiologia infeciilor nozocomiale

Etiologia bacterian este reprezentat prin stafilococi coagulazo
pozitivi, coagulazo negativi, Streptococcus pyogenes, Streptococcus
agalactie, Streptococcus viridans, Streptococus pneumoniae, Enterococcus,
Salmonella sp, Shigella, Escherichia Coli (tulpini EPEC, ETEC, EIEC,
EHEC, EAAgEC), Proteus sp., Serratia sp., Klebsiella sp., Enterobacter
sp., Moraxella, Pseudomonas sp., Acinetobacter sp., Xantomonas
maltophilia, Chorynebacterium amycolatum, Chorynebacterium jeikeium,
Branhamella, Yersinia enterocolitica, Clostridium sp., etc.
n funcie de ponderea etiologic trebuie s menionm n particular
intervenia semnificativ a Staphylococcus aureus, Escherichia Coli,
Enterobacter, Pseudomonas, Streptococcus sp.
Etiologia viral este foarte bine reprezentat dar n ara noastr este
insuficient diagnosticat. Virusurile hepatitelor ocup un loc aparte n
ponderea etiologic a infeciilor interioare , att cele cu transmitere
parenteral, ct i cele enterale. Agentul etiologic cel mai frecvent
incriminat n etiologia hepatitelor posttransfuzionale este virusul hepatitic
C.
Virusul imunodeficienei umane ctigate este incriminat mult prea
frecvent n etiologia infeciilor nozocomiale; contactul cu sngele infectat
reprezint cel mai mare risc; n unele state se practic teste de rutin pentru
toi pacienii.
O alt etiologie important o constituie Herpeto-viridaele (virusul
Epstein Barr, virusul citomegalic, varicelo-zoosterian) care produc infecii
generalizate la subiecii imunocompromii. La sugari i copii intervin n
geneza infeciilor interioare Rotavirusurile, Reovirusuri, Parvovirus B19,
virusurile Coxsackie A i B, Enterovirusurile 60, 69, 70, 71 etc.
n sezonul rece, virusurile gripale i paragripale, Rhinovirusurile,
Coronavirusurile, se remarc printr-o morbiditate deosebit.
Etiologia fungic i parazitar
Candidozele localizate i generalizate sunt complicaii inerente ale
tratamentului intempestiv cu antibiotice, care genereaz dismicrobisme
severe.
Ali ageni fungici ntlnii la persoanele imunodeficiene se refer
la Aspergillus sp., Torulolepsis glabrata, Trichosporon cutaneum.
Pneumocistozele i giardiozele nozocomiale sunt ntlnite frecvent
n colectivitile de copii.
245
Apariia infeciilor interioare este strns corelat de gradul de

contaminare al mediului din spitale. Prin aciuni cu caracter preventiv,
supravegherea prin laboratorul de Microbiologie Virusologie Parazitologie
precizeaz sursele de infecie, poluarea mediului, tulpinile implicate n
etiologie, circulaia acestora, precum i rezistena lor la chimioterapice.
Diagnosticul infeciilor nozocomiale

Pentru ca o infecie s fie demonstrat ca nosocomial, nu trebuie s
existe dovada c era manifest, sau n incubaie, la internarea n spital.
Diagnosticul cazului de infecie nosocomial se face pe baza:
a) datelor clinice - simptome clinice manifeste
b) datelor de laborator - culturi bacteriene
- teste de detectare a anticorpilor antigenelor
- metode de vizualizare microscopic
- alte teste paraclinice (CT, radiografii, etc.)
c) datelor epidemiologice - factori favorizani (manopere invazive)
- factori predispozani (afeciuni asociate)
Profilaxia infeciilor nosocomiale

Recunoscnd faptul c orice unitate spitaliceasc prezint riscul
apariiei infeciilor nosocomiale, este necesar existena unor politici de
control a acestora la nivelul fiecrui spital, care s asigure o supraveghere
epidemiologic adecvat, precum i controlul aplicrii msurilor
preventive i de combatere a infeciilor nosocomiale.
Un studiu efectuat n SUA, a artat posibilitatea scderii ratei
infeciilor nosocomiale cu 30-50% (n medie 32%) prin aplicarea unui
program de prevenire, care cuprinde 5 obiective:
urmrirea i informarea continu a clinicienilor privind cele mai
frecvente infecii nosocomiale,
adoptarea de ctre personalul medical a msurilor specifice de
prevenire a infeciilor produse prin dispozitivele medicale invazive (sonde
urinare, cateterisme, etc.),
formarea continu a personalului n clinici,
asigurarea resurselor necesare pentru derularea programului,
246
prezena unui personal specializat: o asistent specialist de

epidemiologie, un medic epidemiolog la 250 paturi, care s asigure
activitile de urmrire i formare.
Un alt studiu, efectuat n Germania, a relevat o scdere a incidenei
infeciilor nosocomiale cu 17% pe an prin aplicarea unui program
comparabil cu programul american.
Pentru a veni n sprijinul personalului medico-sanitar din unitile
clinice din ara noastr, n scopul identificrii, prevenirii i combaterii
infeciilor nosocomiale, Ministerul Sntii a elaborat i publicat n 1994
Ordinul 984 Normele privind organizarea supravegherii, prevenirii i
controlul infeciilor nosocomiale. Acest ordin, a fost conceput n 5
seciuni:
1. Criteriile de definire a infeciilor nosocomiale, clasificare pe
aparate
2. Atribuiile personalului sanitar n prevenirea i controlul
infeciilor nosocomiale
3. nfiinarea seciei de prevenire i control a infeciilor
nosocomiale (SPCIN)- structur i atribuii
4. Supravegherea epidemiologic a infeciilor nosocomiale
5. Precauiunile universale
COORDONATELE IGIENEI SPITALICETI
Corectarea i constatarea cauzelor care duc la apariia infeciilor
nosocomiale
Evidenierea potenialului infecios din seciile cu risc
Corelarea acestor poteniale cu situaia epidemiological existent
Implicarea n activitatea de depistare, prevenire i combatere a
infeciilor nosocomiale, precum i a altor probleme de igien spitaliceasc
a ntregului personal
Supravegherea continu a circuitelor funcionale
Urmrirea asigurrii proteciei personalului medical i auxiliar
Instruirea i perfecionarea continu a sistemului informaional din
domeniul igienei spitaliceti
Standardizarea protocoalelor de curenie, dezinfecie, sterilizare a
aparaturii medicale
OBIECTIVELE activitii de supraveghere igienico-sanitar,
vizeaz cunoaterea statusului igienic din fiecare secie:
cunoaterea topografiei i organizarea seciei
specialitile medicale din subordine
247
factorii de conducere
sectoarele cu risc
existena unui plan de dezinfecie, dezinsecie, deratizare
ce materiale de curenie i dezinfecie avem la dispoziie protocoale de utilizare a acestora
cunoaterea tehnicilor unitare i specifice
condiii de colectare, depozitare a deeurilor
dac exist izolator
evidena controlului periodic al personalului
instruirea periodic a personalului medical i auxiliar privind
comportamentul igienic
evidena infeciilor nosocomiale i urmrirea lor n dinamic i
cunoaterea deficienelor igienico sanitare existente,
Stabilirea programului cadru de supraveghere mpreun cu efii
de secie
Scopul msurilor de supraveghere este acela de a izola infecia, nu
pacientul, i de a reduce costul asociat msurilor care nu sunt necesare n
scopul izolrii.
Profilaxia infeciilor nosocomiale include un ansamblu de msuri
orientate spre ntreruperea lanului infecios. Fiecare etap a lanului
epidemiologic depinde de realizarea etapei precedente. Dac se reuete
ruperea acestui lan, infecia nu se mai rspndete.
Din practica igienei spitaliceti, s-a constatat c cele mai eficiente
msuri de prevenire i combatere a infeciilor nosocomiale sunt cele
ndreptate asupra cilor de transmitere a agenilor etiologici. Astfel, toate
unitile medicale au obligaia de a asigura:
autorizarea funcionalitii instituiei cu respectarea circuitelor
funcionale corecte - curat-murdar
- aseptic - septic
- steril - nesteril
efectuarea dezinfeciei, dezinseciei, deratizrii profilactice
curente
respectarea riguroas a tehnicilor aseptice
nivelul educaional i comportamentul igienic corespunztor
ntregului personal
asigurarea condiiilor optime de munc
n cazul evoluiei unor focare de infecii nosocomiale, se vor lua de
urgen urmtoarele msuri:
depistarea i tratarea corect a tuturor cazurilor de infecii
nosocomiale, cu emiterea diagnosticului complet, n baza datelor clinice,
epidemiologice i de laborator
248
izolarea i tratarea corect a cazurilor confirmate sau suspecte

supravegherea corect a contacilor
declararea i nregistrarea tuturor cazurilor aprute
intensificarea controlului msurilor de prevenire a transmiterii i a
dezinfeciilor terminale
ancheta epidemiologic a fiecrui caz nregistrat
investigaii de laborator competente
msuri de ordin organizatoric i administrative
Dac n gsirea soluiilor eficiente de prevenire a infeciilor
nosocomiale rolul hotrtor l are epidemiologul n aplicarea acestora rolul
decisiv l are personalul de ngrijire.
Personalul medico-sanitar i auxiliar din spital, n funcie de
pregtirea profesional, experien i disciplin poate avea o contribuie
pozitiv n prevenirea apariiei infeciilor nosocomiale, dimpotriv, prin
deficiene, pot favoriza sporirea numrului acestora, sau izbucniri
epidemice.
Pentru reuita aplicrii msurilor de prevenire i control a infeciilor
nosocomiale, trebuie s existe o strns colaborare ntre serviciul de
prevenire i control a infeciilor nosocomiale i celelalte sectoare de
activitate din structura unitii spitaliceti.
n concluzie, indiferent de agentul etiologic implicat n infeciile
nosocomiale, msurile de prevenire i combatere vor urmri:
supravegherea clinico-epidemiologic i de laborator a unitilor
medicale cu paturi
asigurarea posibilitilor de izolare adecvate
amenajarea unor circuite funcionale corespunztoare
asigurarea dezinfeciei, dezinseciei, deratizrii curente
evitarea supraaglomerrii spaiilor de spitalizare
respectarea de ctre personalul medical a normelor de igien,
ncepnd cu splarea corect a minilor i folosirea adecvat a
echipamentului de protecie.
Respectarea msurilor profilactice e nsoit de scderea incidenei
infeciilor nozocomiale.
249
CAPITOLUL 36
PLACA BACTERIAN. CARIA DENTAR
Modul de populare al cavitii bucale cu microorganisme
Retenia unei bacterii n cavitatea bucal poate fi de dou feluri:
adeziv
neadeziv (mecanic)
Reteniile adezive apar prin:
- Sinteza de polimeri extracelulari, realizat de ctre unele bacterii.

- Ataarea unei bacterii (nesintetizante de polimeri) pe polimerii
sintetizai de ctre altele (fenomen de piraterie).
- Ataarea prin nveliul fibrilar propriu bacterian (glicocalix).
- Ataarea unor bacterii prin intermediul altora.
- Simpla depunere a bacteriilor pe suprafeele dentare este temporar;
reteniile adezive ns tind spre stabilizare.
Depunerea bacteriilor pe suprafeele dentare este favorizat de:
- mrimea celulei bacteriene (celulele mari se depun mai uor dect
cele mici).
- forma celulei - bacilii, formele spirilare - se depun mult mai uor
dect formele sferice (cocii).
- factorii de patogenitate bacterieni (ex.: cord-factorul
micobacteriilor ce favorizeaz depunerea bacteriilor n grmezi uvie - pe
diferite suprafee).
- suprafaa rugoas a peretelui celular bacterian, a dinilor.
Numeroasele depuneri-aderri sunt n marea majoritate a cazurilor
reversibile. Interaciunile adezive sunt n general ireversibile i produc
colonizarea bacterian.
Colonizarea bacterian reprezint o interaciune ntre trei factori:
- bacterie
- suprafaa de aderare
- ecosistemul cavitii bucale.
Aderarea bacteriilor pe suprafaa dinilor este o preferin de specie
bacterian.
Exemple:
Streptococcus Salivarius - se fixeaz pe dosul limbii
Streptococcus mitis - se fixeaz pe mucoasa obrajilor
Streptococcus mutans - se fixeaz pe dini
Streptococcus sanguis - se fixeaz pe dini i ntre acetia

Streptococcus salivarius - colonizeaz doar suprafeele netede
Streptococcus mutans - colonizeaz doar suprafeele rugoase.
Colonizarea - presupune o dezvoltare numeric abundent a speciilor

patogene, n detrimentul celor comensale. Pentru a fi realizat, doza infectat
cu specia patogen trebuie s fie mai mare de 108 bacterii/ml saliv.
- se poate realiza i la doze infectante mai mici, mai ales la speciile cu
patogenitate crescut. Spre exemplu:
Streptococcus sanguins - necesit 104 bact/ml saliv
Streptococcus mutans - necesit 105 bact/ml saliv
(deci colonizarea este un atribut al speciei bacteriene).
- trebuie s nving mecanismele rezistenei naturale locale, anume:
splarea permanent a suprafeelor dentare i a limbii prin saliv i
ndeprtarea permanent a bacteriilor prin deglutiie.
Mecanisme adezive
Aderarea prin producere de polimeri extracelulari
Streptococcus mutans
- Produce din sucroz un polimer de dextran extracelular, cu care

ader i se menine pe orice suprafa, att in vivo ct i in vitro.
Fitzgerald (1969) a reuit s previn formarea plcii dentare folosind
dextranaz, enzim care degradeaz dextranul.
n alt experiment, se demonstreaz faptul c streptococul mutans
poate fi aglutinat n prezena dextranului, pe cnd alte bacterii nu pot aglutina
n prezena acestuia.
- Proprietatea adeziv a dextranului favorizeaz aderena altor specii
bacteriene (n mod nespecific), prin simplul fenomen fizic al vscozitii.
- n lipsa sucrozei, colonizarea cavitii bucale cu Streptococcus
mutans nu se produce (sucroza este i substratul nutritiv pentru
Streptococcus mutans).
Actynomices neslundii
- Ader la dini prin acidul hialuronic pe care l secret.
- Aderarea sa este nlturat prin hialuronidaz.
Alte specii de Actynomices
- Secret levani sau polizaharide.
254
Aderarea prin polimeri salivari

- n saliv exista glicoproteine diverse care dau caracterul vscos al
salivei.
- Aceste glicoproteine se pot fixa pe dini n mod permanent i pot
reine bacterii din saliv pe suprafaa dinilor.
- Cu ct greutatea molecular a glicoproteinei este mai mare, cu att
vscozitatea sa crete i aderarea bacterian este facilitat.
- Polimerii salivari constituie matricea de la baza plcii dentare pe
care se face aglomerarea diverselor celule bacteriene.
- Diferitele tipuri de polimeri salivari aglomereaz n mod selectiv
anumite specii bacteriene din cavitatea bucal.
Experimentul lui Hilmann (1970) demonstreaz c Streptococcus
salivarius i Streptococcus sanguis ader n mod egal pe smalul dintelui n
lipsa salivei, iar Streptococus salivarius este de 100 de ori mai aderent dect
Streptococcus sanguis n prezena salivei.
- Diferitele glicopeptide din secreiile bronice au rol n aderarea
bacteriilor pe suprafeele dentare.
Ataarea prin nveli fibrilar
- nveliul fibrilar (glicocalixul) este de natur polizaharidic sau
proteic, microfilamentele avnd rol n aderarea bacteriilor pe diferite
suprafee (ex.: streptococii patogeni). Aceste filamente sunt mai fine i mai
scurte dect pilii bacterieni.
- Pilii bacililor constituie factori de aderare.
Ataarea prin intermediul altor bacterii
A fost postulat de ctre Gibson i Nygaard care constat prezena
reaciilor de aglutinare ntre specii bacteriene diferite, cauzele fiind:
- nrudirile antigenice
- structurile de patogenitate de suprafa
n plcile dentare formate de ctre bacteriile cu mare capacitate de
aderare, cum ar fi Streptococcus mutans, Actynomices naeslundii i
Actynomices viscosis, se fixeaz bacterii care au putere de aderare mai mic,
ca de exemplu genul Veillonella, care se fixeaz n placa dentar a
Actynomices viscosus.
255
Retenii mecanice
- Prin adsorbirea bacteriilor pe substratul moale al resturilor
alimentare ce stagneaz, n caz de igien bucal deficitar.
- Prin ptrunderea accidental a bacteriilor n fisurile dinilor sau n
anul gingival, odat cu saliva.
n ambele cazuri, bacteriile se nmulesc exagerat, deoarece exist
substrat nutritiv iar n zonele respective aciunea mecanic de splare a
salivei este foarte redus.
Aceste mecanisme sunt caracteristice speciilor bacteriene cu aderen
foarte slab:
- Lactobacillus
- Bacteroides melaninogenicus
- Fusobacterium
Cu ct o dantur este mai rugoas sau mai fisurat (sau mai
protezat), cu att periajul de ntreinere ndeprteaz bacteriile mai greu.
Prin formele filamentoase, bacteriile sunt mai uor retenionate.
Exemple: Bacillus megaterium
Treponeme saprofite
Actynomices
Micelii de levuri
Aceste microorganisme au tendina s formeze ghemuri, n
ochiurile crora stagneaz alte bacterii.
Dezvoltarea microorganismelor din cavitatea bucal

Cavitatea bucal ofer un loc ideal pentru dezvoltarea
microorganismelor, prin urmtorii factori:
- pH-ul bazic i umiditate optime
- prezena O2, CO2 - pentru bacteriile care au nevoie de acestea
- potenial redox sczut, prin plasarea bacteriilor n anul gingival sau
ntre pliurile mucoaselor
- aportul nutritiv care este permanent, alimentele rmnnd ntre
cutele mucoaselor, n anul gingival, chiar dup splarea dinilor
- saliva conine 18 aminoacizi, acid hialuronic, condroitin sulfat,
celule epiteliale descuamate, care pot servi ca substrat nutritiv
- saliva conine de asemenea 0,03 - 0,13 proteine, iar saliva din
anul gingival conine de 30 de ori mai multe proteine.
Deci i n condiiile unei igiene bucale mai mult dect riguroase,
substratul nutritiv pentru bacterii este furnizat de ctre saliv.
256
Diferitele specii bacteriene i ofer una alteia substanele de care au

nevoie:
Exemplu: Treponema microdentium se dezvolt n prezena
izobutiratului furnizat de ctre difteroizii i fusobacteriile din cavitatea
bucal. Speciile aerobe consum n mod permanent oxigenul, favoriznd
dezvoltarea speciilor anaerobe n anul gingival sau n plcile dentare.
Prezena florei comensale se opune colonizrii cu flora patogen - prin
competiia pentru substanele nutritive.
Dezvoltarea preferenial a unei specii bacteriene este favorizat
uneori prin dieta alimentar a gazdei. Spre exemplu, pentru dezvoltarea
Streptococului mutans, este absolut necesar prezena sucrozei (existena n
dulciurile rafinate).
Lipsa sucrozei din alimentaie scade incidena Streptococului mutans,
dar n mod reactiv crete incidena Streptococului sanguis.
Cantitatea prea mare de proteine din alimentaie determin
nmulirea accentuat a bacteriilor gram negative i a bacililor pleimorfi (care
favorizeaz formarea tartrului).
Dieta bogat n zaharuri favorizeaz apariia bacteriilor gram
pozitive (coci).
Dieta compus din alimente moi d un procent mai mare de plci
dentare i gingivite. Alimentele moi au o vscozitate mai mare i favorizeaz
aderarea bacteriilor. Laptele formeaz o adevrat pelicul adeziv.
Regimul alimentar consistent are rol de ndeprtare mecanic a florei
bacteriene. Alimentele dure nu sunt retenionate n anurile gingivale.
Inflamaiile gingivale, prin exudatul proteic local - favorizeaz
elemente nutritive. Experimental, n gingivitele cronice - plcile dentare
cresc n volum.
Pungile paradontale (prin necrozarea esuturilor locale) favorizeaz
dezvoltarea bacteriilor anaerobe i a bacteriilor proteolitice. Acest tip de
bacterii stimuleaz apariia necrozelor locale, cu ntreinerea unui cerc vicios.
Exemplu: Lactobacillus arabinosus i procur factorul su de cretere
(acidul nicotinic) - din dentina dintelui pe care l paraziteaz, bacteria
invadnd canaliculele dentinale.
Repartizarea i numrul bacteriilor din cavitatea bucal

Speciile bacteriene nu sunt distribuite n mod uniform n cavitatea
bucal - ele au preferin pentru dezvoltarea pe anumite arii (suprafee),
denumite nie ecologice.
Saliva, n momentul secretrii ei, nu conine bacterii dar se ncarc
repede pn la 109 bacterii/ml.
257
Concentraia cea mai mare de bacterii n saliv se gsete n timpul

masticaiei, prin mobilizarea bacteriilor i n timpul dimineii, deoarece
cantitatea de saliv noaptea e mai mic.
n saliv exist cel puin 35 de specii bacteriene, menionate n
ordinea descresc-toare a frecvenei lor:
Streptococi, Veillonella
Bacili anaerobi i facultativ anaerobi
Stafilococ alb i aureus, Micrococi
Spirili, Spirochete - Treponema macrodentium, Treponema oralae
Haemophilus
(aprophilus,
paraprophilus,
influenzae,
parainfluenzae)
Rothia
Placa dentar
Reprezint un conglomerat de bacterii pe un anumit spaiu dentar
habitat) i care conine 1011 microorganisme / gram de plac.
Coninutul bacterian al plcii dentare:
Streptococii - reprezint 1/4 din bacteriile din placa dentar i mai
puin de 1/4 din bacteriile din anul gingival.

Neisserii comensale
|
Veillonella
| reprezint 3...5
Lactobacillus
|
Stafilococii epidermidis
Spirochete
Actinomicete
Neisseria, Veillonella, Lactobacillus sunt ntr-o cantitate
considerabil la pacienii cu carii dentare i paradontoze.
Candida albicans este prezent la 50 dintre persoanele adulte n
placa dentar.
Protozoarele sunt prezente n cantitatea bucal la cei cu igiena foarte
precar.
E. Coli este prezent tranzitoriu n cavitatea bucal ntr-o proporie
de 1 la aduli i 5 la copii.
Streptococii hemolitici apar ocazional la purttori i atunci ocup
12 - 30 din flora bacterian.
Bacteroides melaninogenicus apare n infeciile parodontale.
258
Localizarea bacteriilor n cavitatea bucal

Streptococcus salivarius i Veillonella
- cu localizare pe dosul limbii - se instaleaz aici la cteva zile dup

natere.
- suprafaa respectiv este bogat n bacterii ntocmai ca i placa
dentar.
Lactobacillus este prezent n caria dentar, fisurile ocluzale i
pliurile mucoaselor.
Streptococcus mutans este localizat pe suprafee dure (dini) i
colonizeaz cavitatea bucal numai dup apariia primilor dini la copii.
Streptococcus sanguis colonizeaz cavitatea bucal dup apariia
dinilor (dar apare naintea Streptococcus mutans).
Streptococcus mitis ader numai pe prile moi, pe suprafaa
epitelial a obrajilor.
Bacteriile strict anaerobe sunt prezente n anul gingival, deoarece
potenialul redox este aici foarte sczut. De exemplu, Bacteroides fragilis,
Bacteroides melaninogenicus, Fusobacterium.
Aceste specii apar dup erupia dentar. La edentai anaerobii lipsesc.
Ecosistemul cavitii bucale

n cadrul acestui sistem, exist dou tipuri de relaii:
a) relaii ntre microorganisme
b) relaii ntre microorganisme i macroorganism (cavitate bucal
care ofer bacteriilor spaiu i condiiile de dezvoltare).
Relaii ntre microorganisme:
Relaii tip simbioz - sunt relaii de beneficiu bilateral ntre
microorganisme. Spre exemplu, Stafilococul ofer factori de cretere (x i v)
pentru genul Haemophylus.
Stafilococul poate fi o surs de vitamina A pentru Bacteroides
melaninogenicus.
Relaii de inhibiie
- unilateral
- bilateral, reciproc
Exemple: Lactobacillus - prin scderea pH-ului, produce un mediu
nefavorabil pentru alte specii (Pseudomonas, Proteus, Bacteroides);
- Bacteriile ce produc bacteriocine inhib alte specii de bacterii;
- Streptococcus viridans elaboreaz peroxid de hidrogen ce duneaz
bacteriilor care nu au catalaz;
259
- Lipsa bacteriilor aerobe duneaz speciilor anaerobe, prin lipsa

consumului de oxigen, care e toxic pentru anaerobi.
Din cauza acestor relaii, populaiile bacteriene sunt ntr-o dinamic
permanent (compoziia florei bacteriene e variabil pe un anumit habitat).
Factori care contribuie la limitarea dezvoltrii bacteriene

1. Lizozimul - cu aciune bactericid pe bacteriile gram pozitive
2. Sistemul lacto - peroxidaz - tiocianat - ap oxigenat
3. Acizi grai volatili
4. Protozoare i bacteriofagi care distrug bacteriile
5. Saliva (1-1,5 l/24 ore) spal permanent suprafeele moi i dure i
transport bacteriile spre aciditatea stomacului (cu rol bactericid)
6. Descuamarea continu a celulelor epiteliului bucal are rol n
ndeprtarea microorganismelor.
Particularitile ecosistemului bucal

- Este stabil, cu un echilibru relativ ntre specii, la acelai individ - n
timp i n condiii obinuite;
- Controleaz rezidena bacteriilor nou intrate n ecosistem;
- Controleaz virulena bacteriilor din ecosistem;
Spre exemplu, Streptococcus viridans, integrat n ecosistem este
comensal, dar scpat n torentul circulator, dup intervenii sngernde,
produce endocardita bacterian subacut.
n ecosistemul cavitii bucale predomin n mod evident streptococii.
Printr-o anumit structur a florei comensale, acest tip de flor se
opune implantrii speciilor de bacterii patogene. De exemplu, administrarea
de penicilin distruge cocii gram pozitivi i favorizeaz dezvoltarea
necontrolat a bacililor gram negativi.
Descrierea aciunii factorilor de aprare

1. Lizozimul
- este prezent n saliv, mucusul nazal, lacrimi, leucocite.
- crete cantitativ n gingivite i boala parodontal
- acioneaz pe peretele celular, distrugndu-l (la bacteriile gram
pozitive se obine un protoplast)
- n combinaie cu Sistemul C' produce i liza bacteriilor gram
negative
- nu se epuizeaz n timpul activitii sale (are rol de catalizator).
260
2. Sistem lactoperoxidaz - tiocianat - ap oxigenat

- este component de secreie al glandei parotide i submaxilare; nu se
gsete n serul sanguin
- apare la nou nscui i acioneaz pn la 10 ani
- efectul sistemului este bacteriostatic iar spectrul su include
Lactobacillus i Streptococi din grupul antigenic N
- la persoanele cu carii dentare, sistemul este n cantitate foarte mic.
3. Factorul Green
- este prezent n saliva persoanelor fr carii
- are efect antibacterian, mai ales pe Lactobacillus, Streptococcus
salivarius i Streptococcus mitis
- are rol de catalizator, nu se consum n reacie, ntocmai ca i
lizozimul
- se asociaz gamaglobulinelor i la electroforez precipit odat cu
ele
- este de fapt un anticorp natural.
4. lizinele din serul sanguin
- acioneaz pe bacterii gram pozitive
- au ca i cofactori - ionii de calciu i de carbonat
- efectele lor sunt extrem de rapide.
5. Anticorpii salivari locali
Imunoglobulina A - este prezent la nivelul mucoaselor i n saliv.
Rolurile imunoglobulinei A:
- inhib aderena i colonizarea speciilor bacteriene pe suprafaa
dinilor
- nu are nevoie de aciunea complementului pentru a realiza rolul su
antibacterian
- s-a conturat ideea unui vaccin anticarie (anti Strepto-coccus
mutans).
Imunoglobulina G - predomin n fluidul anului gingival.
6. Glicoproteinele salivare aglomereaz
bacteriile
i le
ndeprteaz prin deglutiie.
7. Fagocitoza - fagocitele sunt prezente n cavitatea bucal n lichidul
din anul gingival i pe mucoasa gingival
- leucocitele PMN neutrofile predomin, mai ales n inflamaiile
gingivale i ale paradontiului
- enzimele lizozomale eliberate din PMN au efect bactericid, care se
261
sumeaz lizozimului.
8. Anticorpii serici specifici
- ajung n saliv prin glandele salivare i prin fluidele de la nivelul
anului gingival
- sunt imunoglobuline de tip G i ajung pasiv n cavitatea bucal,
peste un anumit titru.
9. Bacteriofagi - cu rol litic asupra unor bacterii.
Contribuia florei microbiene la producerea cariei dentare

Miller (1890) presupune etiologia infecioas a cariei dentare astfel:
- bacteriile produc acizi organici ca rezultat al metabolismului
(demineralizare);
- bacteriile produc dezorganizarea structurii proteinelor dentare.
Cele dou procese ar decurge n etape succesive.
Acidifierea pH-ului bucal
1. Streptococii viridans
- prin fermentaia zaharurilor scade pH sub 5,5 (nivelul critic de la
care ncepe demineralizarea smalului)
- Streptococcus viridans produce o cantitate mai mare de acid dect
celelalte bacterii acidogene (de ex. Lactobacillus)
- Streptococcus viridans ajunge n caviatea pulpar prin canaliculele
dentinale (aa se explic i progresia unei carii).
2. Lactobacillus
- pe locul doi n producerea de acid n cavitatea bucal;
- lipsa igienei bucale ntreine dezvoltarea exagerat a acestora, dei
n mod normal cantitatea lor este mai redus;
- acetia au fost gsii mereu pe suprafaa cariei, niciodat n cariile
profunde, deoarece au un slab caracter invadant, din cauza echipamentului
enzimatic srac.
3. Actinomicetele, Levurile, Stafilococii, Micrococii
- produc acizi diveri din zaharurile concentrate
- acizii contribuie la demineralizarea rapid a dintelui.
Rapiditatea coborrii pH-ului i repetarea acestui proces n
aceeai zon
- este un element esenial n producerea unei carii dentare
262
- capacitatea de a scdea intens pH-ul i rapiditatea coborrii pH n

aceeai zon, sunt elemente eseniale pentru demineralizarea smalului.
263
Tullar a adugat zaharoz sau sucroz pe sedimente salivare extrase

din cavitatea bucal i a observat cum scade pH-ul brusc (pH 4,3 i mai
puin) n decurs de 1 pn la 6 minute maximum).
Stephan a presupus urmtoarele: dac se admite ca pH-ul critic pentru
hidroxiapatit este 5,5, atunci speciile acidogene cele mai importante sunt:
- Lactobacillus - casei
- plantarum
- Streptococcus - mutans
- sanguis, mitis
- salivarium
- Stafilococus
- Micrococus
Hidroxiapatitul din structura smalului dentar ar fi protejat (chiar n
condiiile unui pH foarte sczut), prin prezena ionilor de calciu i fosfor din
structura salivei normale.
Acizii ce se produc prin fermentarea bacterian sunt splai de la locul
producerii lor, prin micrile musculare i adui n contact permanent cu
ionii de calciu i fosfor care i neutralizeaz. Fr aceste sisteme tampon,
incidena cariilor ar fi enorm, de la cele mai fragede vrste.
Acizii produi ntr-o anumit zon - n mod repetat - ajung s fie
neutralizai prin substanele minerale ale hidroxiapatitului smalului, care
devine astfel solubil. De aici se declaneaz demineralizarea.
Demineralizarea dintelui
Permite o cale larg de acces bacteriilor i enzimelor spre interior.

Se produce cu att mai repede, cu ct:
- vechimea plcii este mai mare
- este meninut timp mai ndelungat pH-ul acid
- exist un adaos de sucroz n mod repetat, mai ales ntre mese.
Fazele anatomopatologice ale cariei dentare
1. demineralizarea
2. decolorarea
3. dezorganizarea structurii smalului
4. adncirea leziunii n smal
5. atacarea dentinei
Demineralizarea
- apare sub aciunea acizilor bacterieni, imediat sub placa dentar,
dac nu funcioneaz sistemele tampon salivare;
264
- pH-ul de 5,5 este critic pentru demineralizare;

- la acest pH se distruge structura smalului i proteinele din structura
acestuia devin solubile n acizi;
- la pH acid se solubilizeaz fosfatul de calciu.
Stephan a demonstrat ntr-un expriment pe 192 de subieci - faptul c
pH-ul la nivelul leziunilor carioase este de 5,5. Acest pH este favorabil
lactobacililor, care abund n cariile de suprafa i n jurul lor.
- se produc fisuri dup demineralizare, fisuri n care stagneaz
bacteriile. Bacteriile proteolitice degradeaz matricea proteic a dintelui, prin
enzimele lor.
- sub influena enzimelor bacteriene, esuturile dure ale dintelui devin
esuturi moi. Degradarea esuturilor evolueaz mai rapid dect invazia
celular microbian propriu-zis.
Miller - a identificat aproximativ 20 de specii bacteriene care posed
enzime care distrug dentina. Aceasta observaie a servit ca model etiologic
pentru cariile observate la persoane care au n permanen un pH alcalin al
cavitii bucale.
Compuii proteici rezultai din metabolismul bacterian se pot lega de
anionul de cal-ciu provenit din structura smalului i pot forma chelai de
calciu, att la pH neutru ct i la pH bazic.
Din aceasta teorie, se deduce faptul c procesul de demineralizare i
cel de proteoliz se produc simultan, i nu separat. Formarea de chelai de
calciu cu aminoacizii conduce la o scdere a pH-ului foarte important.
Neumann - a subliniat faptul c solubilitatea hidroxiapatitului este
maxim sub pH 5 i o scdere a lui cu 0,1 uniti este suficient s-i creasc
solubilitatea de 10 ori.
Arhens i Ranke - au gsit n saliva omului, mici cantiti de produi
de metabolism bacterian fosforilai, toi capabili s formeze compui cu
calciul.
n favoarea teoriei proteolizei prin chelatizare s-a observat c
administrarea in vivo a agenilor chelatizani (EDTA) grbesc procesul de
dizolvare al smalului, att la bolnavi ct i la animalele de experien.
Concluzii
- n etiologia cariei, un rol important l are pH-ul acid, pe care l
produc n gur microbii zaharolitici n perioada imediat urmtoare meselor.
- Proteoliza cu formarea chelailor de calciu ar surveni mai tardiv, n
perioada dintre mese, cnd pH-ul a redevenit neutru sau alcalin. Proteoliza ar
fi procesul prin care se extind leziunile carioase.
Deci n ambele ipoteze, rolul bacteriilor este esenial, n aa fel nct
caria dentar poate fi considerat o boal infecioas.
265
Contribuia microorganismelor la formarea i evoluia

plcii dentare
Placa dentar rezult dintr-un mecanism de localizare i stagnare
cantitativ a microorganismelor din cavitatea bucal, pe suprafaa smalului.
Depunerile din cavitatea bucal sunt de dou tipuri: moi i dure.
Depunerile moi sunt depozitri de resturi alimentare la care se
adaug: celule epiteliale descuamate, leucocite, microorganisme.
Acestea sunt consecina unei igiene bucale defectuoase.
Placa dentar este o depunere cu o duritate mare, cu aderen
puternic la nivelul coletului. Culoarea sa variaz de la galben la negru i
evolueaz n doua direcii: spre calcifiere (spre formarea tartrului) sau nspre
iniierea cariei. Formarea ei presupune apariia matricei i suprapunerea
bacterian.
Formarea matricei plcii dentare
- Mucoidul salivar natural este compus dintr-un complex
mucopolizaharidic. n stare de soluie servete ca agent lubrifiant i ca agent
protector.
- Mucoizii salivari ncep s precipite de la pH 5. Dei saliva conine
mucinaz, enzim care solubilizeaz precipitatele, totui enzima este inhibat
la pH acid.
- Bacteriile degradeaz mucoproteinele salivare, desfcnd
componenta proteic de cea glucidic.
- Componenta proteic precipit pe suprafaa dinilor, formnd
matricea.
- Matricea se formeaz cam n 24 de ore i grosimea ei este de 1-5
microni.
Suprapunerea bacterian
- Pe matrice se depun treptat colonii microbiene, deoarece exist o
mare adezivitate la nivelul plcii.
- Unele bacterii, odat depuse, sintetizeaz polimeri extracelulari, cu
care se ataeaz mai bine de matrice. Spre exemplu, Streptococcus mutans,
sanguis sau salivarius.
- n diferite experimente pe animale, s-a constatat faptul c
Streptococcus mutans are potenial cariogen n regim alimentar bogat n
sucroz.
Sucroz ----------------------------------> Dextran + Fructoz

Dextransucraze
266
Sucroz ----------------------------------> Levan + Glucoz

Levansucraze
Dextranul - produce agregarea bacteriilor pe suprafaa dinilor

- formeaz matricea stabil a plcii dentare.
Fructoza - folosit ca surs de carbon i energie pentru streptococi poate fi metabolizat n compui acizi care produc caria dentar.
n placa dentar predomin Streptococcus mutans i Streptococcus
sanguis. Nu exist Streptococcus mitis, deoarece acesta nu sintetizeaz
polimeri.
Ali polimeri produi de ctre Streptococcus mutans: glicani, mutani,
fructani, dextrani, levani.
Aceti polimeri prezint o mare instabilitate. Glicanii sunt mai
importani dect levanii n fenomenul de aderare, avnd rol esenial n
cariogenez.
Streptococcus sanguis - produce glican insolubil, n aceeai
cantitate ca i Streptococcus mutans, dar i glican solubil, care servete ca
surs nutritiv pentru bacteriile din placa dentar.
Produce de asemenea fructan insolubil, n cantitate de 4 ori mai mare
dect Streptococcus mutans.
Streptococcus salivarius - se gsete n cantiti mai mari n saliv
i pe dosul limbii. Sintetizeaz abundent fructan solubil, ca surs acidogen
n producerea cariei.
Streptococcus mitis - nu produce polimeri.
ntr-un experiment s-a nlocuit sucroza din alimentaia unor pacieni,
cu glucoz; s-a pstrat un lot martor care a consumat numai sucroz.
S-a constatat faptul c grupul care a consumat glucoz nu a fcut
plci dentare sau carii. Deci sucroza este o surs de polimeri solubili i
insolubili, absolut necesar pentru formarea matricei plcii dentare.
i alte specii produc polimeri extracelulari:
Actinomyces naeslundii - produce polimeri de acid hialuronic i
levan.
Actinomyces viscosis - poate forma caria dentar i singur, fr
aportul altor specii bacteriene. Cu ajutorul acestei specii s-a indus
experimental boala la hamsteri.
S-a demonstrat pe obolan faptul c Actinomyces naeslundii i
A.viscosis pot induce boala paradontal n absena sucrozei.
S-a demonstrat de asemenea, faptul c fosfolipidele din peretele
celular al actinomycetelor i N-acetil-glucozamina, pot aciona ca polimeri
extracelulari cu rol adeziv.
Aceti polimeri interacioneaz cu glicoproteinele salivare i cresc
frecvena de apariie a plcii dentare i de aceea, speciile de Actinomyces au
267
fost denumite microorganisme formatoare primare de plac dentar.

Depunerile microbiene din matrice au un caracter inegal. Invazia
bacterian ncepe la 2-4 zile i e complet la 9 zile. Colonizarea iniial a
matricei se face cu bacterii aerobe, mai ales coci gram pozitivi. Bacteriile
gram negative, mai ales bacilii, se gsesc la suprafaa plcii dentare.
Spirochetele i vibrionii lipsesc n aceast faz iniial.
n stadiul final apar bacteriile anaerobe. Formele bacilare se ataeaz
perpendicular pe suprafaa dintelui, corpul bacilar constituind textura plcii
dentare. Microcoloniile de coci apar sub forma unor grupuri compacte ntre
fibrele texturii.
Dinamica plcii dentare

Ritz - a studiat speciile bacteriene care se depun n placa dentar, din
prima zi pn ntr-a noua. n toate zilele, streptococii predomin (30-40),
ajungnd la proporia de 70 n ziua a treia.
Neisseria i Nocardia sunt abundente n primele zile i descresc
treptat numeric.
Fusobacterium, Veillonella i Actinomyces cresc de la 3 n ziua
nti pn la 23 n ziua a noua. Pe msur ce placa se nvechete, cocii
gram pozitivi sunt nlocuii de ctre bacili gram negativi.
n placa de pn n ziua a noua predomin cocii, n proporie de 64.
n placa de 24 de zile, bacilii gram negativi ajung la 70 ca
proporie.
Compoziia plcii dentare este unic n acel loc i n acelai timp, la
un anumit individ. ndeprtarea unei plci dentare poate fi urmat de
formarea unei noi plci, cu o alt compoziie calitativ i cantitativ.
Aderena bacterian este o condiie primordial pentru formarea
plcilor, chiar i n lipsa speciilor bacteriene cariogene.
Numrul bacteriilor viabile din caria dentar este variabil, dup
diferii autori:
- Klinger : 5 x 107 bacterii/mg de plac
- Stralfors : 4 x 108 bacterii/mg de plac
Placa bacterian conine aproximativ 30 de specii bacteriene.
Apa reprezint 80 din greutatea plcii dentare.
Componenta solid a plcii dentare reprezint 20 i este compus
din: materii organice i anorganice, bacterii, oligoelemente, leucocite
degradate, resturi alimentare, celule epiteliale descuamate.
Evoluia plcii dentare

268
1. Placa dentar poate rmne ca atare un timp nedefinit. Ea poate

rmne neobservat, de aceea pentru punerea ei n eviden se pot folosi
diferii colorani (eozina, fuxina sau permanganatul de potasiu).
2. Placa evolueaz prin calcifiere, spre formarea tartrului dentar.
3. Placa dentar evolueaz spre boala parodontal.
4. Placa evolueaz spre caria dentar, prin activarea bacteriilor
acidogene: perioada precarie este de 96 de sptmni iar perioada de apariie
a cariei propriu-zise este de 117 sptmni.
5. Acumulrile de plci dentare duc la gingivite (nocivitate pentru
esuturi).
Din punct de vedere morfopatologic apar:
- torsiuni ale vaselor
- edeme
- peteii hemoragice.
Aceste manifestri morfopatologice au fost obinute prin inocularea
coninutului microbian al plcilor dentare la animalele de experien.
Efectele hemoragice apar prin aciunea toxinelor bacteriene i a enzimelor
lor.
Un alt experiment pe animale arat c: cu ct se injecteaz unui
animal o suspensie mai concentrat, din mai multe plci dentare (chiar numai
de 2 zile vechime), cu att reaciile inflamatorii sunt mai grave.
Adams i Cowly - au pus plac dentar triturat pe patru feluri de
culturi de celule; acetia au observat o inhibiie n dezvoltarea celor 4 tipuri
de celule. S-a concluzionat c placa dentar irit epiteliul de la baza anului
gingival.
Mc. Donald - a inoculat subcutanat la animale - suspensii de plci
dentare i a obinut abcese. S-au obinut astfel distrucii la nivel vascular; de
aici s-a evideniat rolul toxinelor n geneza inflamaiei i a distruciei tisulare,
ce are loc n boala parodontal.
269
Efectul chemiotactic al plcilor dentare

Plcile dentare au funcie chemotactic pentru leucocitele neutrofile,
att in vitro ct i in vivo. Cu ct suspensia de plci dentare este mai
concentrat, cu att funcia lor chemotactic este mai intens.
Factorul C5a al sistemului complement, precum i endotoxinele
bacteriilor gram negative - sunt principalii factori chemotactici.
Leucocitele PMN atrase, elibereaz enzime lizozonale cu rol
necrotizant asupra esuturilor.
Aciunea distructiv asupra colagenului datorit plcii dentare:
Loesche i Paunio au evideniat prezena n plcile dentare a
bacteriilor: Bacteroides melaninogenicus, Clostridium hystoliticum i
Bacillus cereus, bacili care au activitate colagenazic intens prin enzime.
Dezinfecia Cavitii Bucale

Problema dezinfectanilor cavitii bucale se pune:
- dup extracii dentare
- dup operaii efectuate la nivelul cavitii bucale
- n boala parodontal
- naintea efecturii manoperelor sngernde stomatologice
- pentru prevenirea plcilor dentare
- pentru tratarea afeciunilor bucale stomatologice i nestomatologice
(amigdalite, faringite, stomatite).
Periajul dinilor
Un periaj dentar dup fiecare mas este un lucru esenial, dar cu toate
mijloacele utilizate, cavitatea bucal nu va fi niciodat sterilizat, deoarece:
- aportul bacterian este asigurat permanent, mpreun cu alimentele
- rapiditatea nmulirii bacteriene prin sciziparitate este n jur de 20'
(timp de gene-raie foarte scurt)
- afectiunile gingivale i cariile - constituie focare ce asigur
nmulirea permanent a bacteriilor.
Condiii pentru un dezinfectant bucal ideal:

- s nu fie toxic
- s nu fie caustic pentru mucoase
- s fie eficient ntr-o cantitate ct mai mic
- s fie bactericid
- s nu coloreze sau s decoloreze dinii
- s nu aib reacii adverse pe cale general.
270
Aceste substane sunt puine; fluorurile ar ndeplini acest tip de

condiii.
Mecanismele de aciune ale fluorurilor: (Cimasoni - 1972)
- producerea unui smal dentar mai rezistent la contactul cu soluiile
acide;
- se pare c inhib producerea de acid a microorganismelor, prin
inhibarea enzimelor glicolitice;
- scad sinteza de polizaharide streptococice.
Fluorul:
- se gsete n smalul dentar sub forma de fluoropatit i pe suprafaa
dintelui, sub forma de fluorur de calciu
- n saliv se gsete n concentraie extrem de mic (10-13 grame); de
aceea, nu poate inhiba formarea de acizi n saliv.
- Din compararea curbei de cretere i cea a producerii de acid n
cavitatea bucal, reiese faptul c fluorul i face efectul numai cnd numrul
celulelor a atins un maxim de dezvoltare;
- Ionii de ortofosfat i calciu, inhib aciunea fluorului;
- Ionii de magneziu, mangan i zinc mresc aciunea fluorului;
- n saliva obinuit se gsete o cantitate de calciu i ortofosfat,
suficient de mare, pentru ca ea s se opun aciunii fluorului; de aici se
deduce necesitatea administrrii fluorului, dar nu oricum;
- Pastele de dini cu concentraii mari n fluor (>0,2), au efecte
negative atunci cnd esuturile sunt inflamate. Aceste paste produc n
gingivite disfuncii vasculare foarte importante.
Anders i colaboratorii (1974) - arat c:
- Proprietile antibacteriene ale fluorurii de staniu sunt mai bune
dect cele ale fluorurii de sodiu; aminele fluorurate inhib placa dentar la
concentraii mai mici dect fluorurile anorganice. Aceste amine scad
incidena cariilor, cu 25 fa de un lot martor.
Gluconatul de clorhexidin
- este o biguanin alcalin, cu efect bactericid. Aplicat local, de dou
ori pe zi, n concentraie de 0,2 - este foarte eficient, dar: efectul
bactericid este temporar i asupra inflamaiilor gingivale nu are nici un efect.
Aceast substan se administreaz numai sub control medical.
Apa oxigenat, permanganatul de potasiu i compuii clorurai
- sunt substane oxidante folosite n prevenirea afeciunilor
gingivale i sunt foarte toxice, n special pentru anaerobi.
- Permanganatul de potasiu are avantajul c pune n eviden i plcile
dentare, colorndu-le n roz.
271
CAPITOLUL 37
BOALA PARODONTAL
Boala parodontal reprezint un ansamblu de entiti clinice care
afecteaz structurile de susinere ale dinilor (gingia, ligamentele
parodontale)
Istoricul problemei
1728 Pierre Fouchard
- denumete parodontita marginal

gingival
cronic drept scorbut
1991 - Sokranski
- lanseaz ideea etiologiei bacteriene specifice a plcii dentare;

- consider c aproximativ 300-400 specii bacteriene se gsesc
constant n placa subgingival uman, dintre care 10-20 specii
particip la procesele distructive din boala parodontal.
Etiologia bolii parodontale

Porphyromonas gingivalis (fost Bacteroides gin-givalis)
- este principalul agent etiologic al bolii parodontale a adultului
Actinobacillus actinomycetemcomitans
- principalul agent etiologic al parodontitelor juvenile
Treponema denticola
Capnocytophaga (ochracea, sputigena, gingivalis)
Fusobacterium (nucleatum, nucleophorus)
Peptostreptococcus micros
Eubacterium (timidum, brachy, nadatum), etc.
Epidemiologia bolii parodontale

Boala are caracter endemic, este o problem de sntate public.
15% dintre subiecii cu vrste sub 30 de ani prezint forme uoare
ale bolii parodontale (gingivite).

50% dintre subiecii cu vrste peste 50 de ani prezint forme
avansate ale bolii.
Tinerii prezint gingivite sau tartru.
Dup 40 de ani apar pungile parodontale superficiale.
Dup 50 de ani apar pungile parodontale profunde (la aproximativ
22% dintre subieci).
272
Boala parodontal nu apare n primii 5-7 ani de via.

Creterea numrului de cazuri este direct proporional cu:
- vrsta;
- starea igienei cavitii bucale;
- nu exist nici o corelaie cu sexul subiectului.
Factorii favorizani ai bolii parodontale

Deficiena n vit. A modificri ale epiteliului, esutului
conjunctiv;
Deficiena n vit. C edem, hemoragii, ulceraii;
Deficiena n proteine (alimentaie);
Alimente moi aderente;
Factori hormonali: pubertatea, menstruaia, graviditatea,
corticosteroizii;
Traume ale cavitii bucale:
- periaj dentar foarte intens
- consum excesiv de tutun, alcool
- iritaii chimice: Pb, Hg
- reacii alergice;
Factori genetici: - asocierea bolii parodontale cu boli genetice de
tipul:
- acatalazemia
- hipofosfatasia
- neutropenia idiopatic
Boli asociate: - diabetul zaharat;
Igiena bucal defectuoas;
naintarea n vrst.
Aspecte clinice ale bolii parodontale

Calcificarea plcii dentare duce la apariia tartrului;
Inflamaia gingiei (gingivita);
Degenerarea structurilor de susinere ale dinilor;
Migrarea apical a epiteliului gingival, cu formarea pungilor
parodontale (superficiale i apoi profunde), n care se acumuleaz bacterii;

Rezorbia osului alveolar, cu distrugerea fibrelor de colagen, cu
rol de inserie a dinilor (pierderea dinilor).
273
Forme clinice ale bolii

Gingivite
Parodontita
simple
acute
cronice
ulceronecrozante (ANUG)
uoar
de tip ADULT
moderat
(PA)
avansat
refractar
(rapid progresiv)
de tip JUVENIL
prepubertar
generalizat (PJG)
localizat (PJL)
Evoluia etiologic bacterian de la:

Bacterii aerobe gram+
(coci)
AGRAVARE
bacterii anaerobe gram negative

(bacili)
GINGIVITA SIMPL
Reprezint inflamaia esutului gingival, fr implicarea
ligamentelor parodontale sau ale osului alveolar,
prezena plcii dentare subgingivale,
tumefierea mucoasei gingivale,
tendina marcat la sngerare a acestei mucoase.
Dup Miller (1990) n gingivite apar de 10-20 ori mai multe
microorganisme dect la nivelul gingiei sntoase, spre exemplu:
Streptococcus mitis i sanguis;
Actynomices viscosus;
Bacteroides intermedius;
Fusobacterium nucleatum.
Gingivite experimentale
Experimentul su Gingivita apare dup o igien defectuoas timp de 7-8
zile; la ndeprtarea plcii subgingivale, semnele de boal diminu sau
dispar.
1977 Sokransky consider c genul Actynomices reprezint un
microorganism semnal al gingivitelor.
Actynomices viscosus i naesludi produc boala parodontal la
animale, prin: alterarea funciilor fibroblaste i eliberarea enzimelor
proteolitice.
Gingivita experimental are 3 faze bacteriologice (dup Newmann
274
i Nisengarden):
faza I: - n ziua 1-3
- flora: coci gram+
faza II: - n ziua 3-5
- flora: bacili i forme filamentoase
faza III: - n ziua 5-9
- flora: spirochete i vibrioni (n plus).
GINGIVITA ACUT NECROZANT

Este o infecie acut gingival care se complic cu ulceraia i
necroza gingiei interdentare.
Etiologia bacterian
Spirochete (Treponema vincenti, Treponema denticola)
Asociaia fusospirilar (Fusobacterium)
Bacteroides (melaningogenicus, intermedius)
- Genul Bacteroides determin un rspuns imun umoral

generalizat (IgM, IgG).
Alte gingivite care predispun la boala parodontal:
- gingivostomatite herpetice;
- gingivite asociate bolilor metabolice (diabet zaharat);
- gingivite descuamative, toxice.
PARODONTITE
Boli care afecteaz structurile de susinere ale dinilor cu rezultat
final pierderea acestora.
Etiologia bacterian
Bacteroides gingivalis (dar i forshytus, intermedius acum
redenumit Porphyromonas gingivalis), agent etiologic al parodontitelor
adultului;
Actinobacillus actinomycetemcomitans (Capnocito-phaga), agent
etiologic al parodontitelor juvenile.
PAROTIDITA CRONIC A ADULTULUI

Clinic
inflamaia
gingiei;
pierderea esutului conjunctiv ataat dintelui;
apariia pungilor parodontale (spaiul rezultat ntre dinte i gingie);
275
Etiologie bacterian:
Pungile parodontale conin urmtoarele bacterii:
Bacteroides gingivalis (Porphyromonas gingivalis)
Bacteroides melaninogenicus;
Fusobacterium nucleatum;
Actinomyces viscous, naeslundi;
Capnocitophaga;
Spirochete.
PARODONTITA AGRESIV
Clinic:
boala debuteaz la vrste mai tinere (30 de ani), cu semne de
inflamaie acut, sngerri masive i sever pierdere osoas.
Tratament:
detartraj
chiuretaj
radicular
antibiotice (Metronidazol sau Clindamicin cu Tetra-ciclin,
Eritromicin sau Augumentin).
PARODONTITA JUVENIL LOCALIZAT

Clinic
apare la adolesceni;
form rar, rapid progresiv;
semnele de inflamaie general sau local sunt rare;
flora bacterian - Actinobacillus actinomycetemcomi-tans (2 tipuri
antigenice A i B)
- Capnocitophaga
cu fond genetic pe linie feminin (cu posibil transmitere
epidemic intrafamilial).
Tratament
Tetraciclin
(eficien 6-8 luni);

Chirurgical pentru eliberarea pungilor parodontale.
PARODONTITA JUVENIL GENERALIZAT

- cu pierderi osoase generalizate;
- cu mecanism imunologic (defect chemotactic al PMN - urilor);
- flora bacterian:
276
Bacteroides;
Actinobacillus;
Capnocitophaga;
Eikenella corrodens.
PARODONTITA PREPUBERTAR
Clinic:
apare n timpul erupiei dentare primare;
cu component genetic;
asociat cu infecii cutanate, respiratorii, otice.
PARODONTITE REFRACTARE
Clinic
nu reacioneaz la nici un tratament;
formele active (cu pierderi dentare) au ca etiologie bacteriile
anaerobe;
formele inactive (fr pierderi dentare) au ca etiologie bacteriile
aerobe.
FACTORII DE PATOGENITATE AI BACTERIILOR

IMPLICATE N BOALA PARODONTAL
Porphyromonas Gingivalis
Factorii de patogenitate sunt enzimatici:
hialuronidaze;
heparinaze;
nucleaze;
colagenaze;
IgA proteaze;
enzime tripsin-like;
lipopolizaharide.
Enzimele menionate (i n special enzimele tripsin-like) au efect
distructiv asupra: esuturilor parodontale (Yoshimura i colab., 1984),
fibroblastelor i a celulelor epiteliale cu mpiedicarea regenerrii
esuturilor respective.
Lipopolizaharidele P. gingivalis i producia crescut de IL1, produc
fenomene inflamatorii i distructive.
Diagnostic de laborator:
Enzimele tripsin-like (Yoshimura) se pot investiga printr-un test
277
diagnostic, denumit BANA: o enzim tripsin-like poate hidroliza

peptidul N-Benzoyl-DL-Argini 2 naphtilamida.
Acest test reprezint un indicator de activitate al bolii parodontale.
Teste ELISA detecteaz anticorpi IgG anti Porphyromonasgingivalis la circa 2/3 din pacienii cu periodontit.
Experimentele pe animale (cu periodontite experimentale cu
Porphyromonas gingivalis demonstreaz acelai rspuns imun (umoral)
generalizat.
Produce distrucii osoase prin urmtorii factori de patogenitate:
Leucotoxina
Factorul stabil termic
Factori care inhib activitatea: neutrofilelor, fibroblas-telor,
celuleor epiteliale, sinteza acizilor nucleici i a pro-teinelor.
Leucotoxina
Reprezint principalul factor de patogenitate al Actinobacillus
actynomycetemcomitans;
Produce distrucia monocitelor i a neutrofilelor, prin modificri
membranare;
Prin distrucia PMN, se elibereaz produi lizozomali n mediul
extern, cu agravarea fenomenelor distructive;
Leucotoxina induce AC specifici antileucotoxin A, detectabili n
serul pacienilor.
Factorul stabil termic
Inhib producerea de anticorpi;
Inhib producerea de limfokine;
Stimuleaz limfocitul TS cu efecte imunosupresoare;
Substana care inhib factorii chemiotactici pentru PMN.
Factori care stimuleaz colonizarea bacterian cu
Actinobacillus actynomycetemcomitans are capacitate invaziv,
coloniznd esuturile moi n fazele timpurii ale bolii. O supraproducie de
anticorpi genereaz complexe imune n exces, cu activarea secundar a
sistemului C, cu rol litic.
Fusobacterium nucleatum (sau vincenti, polimorphum)

Prezint o mare capacitate adeziv, fixndu-se pe celule epiteliale,
fibroblaste gingivale, leucocite, esuturi necrozate;

278
Tulpinile respective apar n special la pacienii cu o igien
deficitar a cavitii bucale;

Complicaiile de tip necrotic sunt frecvente.
Capnocytophaga sputigena
Se ntlnete n parotidite avansate, cu distrucii tisulare;
Conine enzime: - care degradeaz: IgA, IgG, inhib fibroblastele,
PMN;
- de tip: fosfataz acid, colagenaz;
- enzime tripsin-like.
Wolinella recta
Eikenella corrodens
Conin factori de patogenitate enzimatici;
La pacienii cu parodontite, aceste specii reprezint un procent de 80%
din totalul florei bacteriene, spre deosebire de 20%, procent ntlnit la

persoane sntoase n flora buco-dentar (Lipka, 1990).
Treponema denticola (oralis)

Ating nivele nalte n boala parodontal de tip adult;
Prezena acestei bacterii n placa dentar constituie un semn
prognostic nefavorabil;
Unii autori consider c tratamentul antibiotic (Tetraciclina +
Metronidazol) realizeaz o scdere drastic a numrului i a patogenitii
acestor bacterii;
Factori de patogenitate ai spirochetelor:
- capacitatea invaziv prin mobilitate exagerat;
- enzimele proteolitice distrug componentele esutului conjunctiv;
- Treponema oralae leag fibronectina pe suprafaa ei exterioar,
mpiedicnd fagocitoza;
- Treponema denticola posed un echipament enzimatic compus
din:
aminopeptidaze
endopeptidaze
colagenaze
enzime tripsin-like (BANA)
- inhib fagocitoza prin inhibarea formrii fagolizozomilor.
279
Observaii: - Testul BANA se pozitiveaz pentru urmtoarele

specii bacteriene:
Porpyromonas gingivalis
Treponema denticola
Capnocytophaga
Eubacterium (timidum, brachy, nadatum)

Sunt bacili gram pozitivi anaerobi;
Declaneaz un rspuns imun foarte slab, foarte greu sau
imposibil de detectat;
Diagnosticul de laborator se poate face exclusiv prin teste ADN;
Factori de patogenitate enzimatici.
Peptostreptococcus micros
Coci gram pozitivi anaerobi;
Intervin n leziunile parodontale profunde active, la pacieni de
toate vrstele;
Declaneaz rspuns imun umoral n esutul gingival i n serul
bolnavilor cu parodontopatii generalizate;
Factori de patogenitate:
hialuronidaze
enzime proteolitice
inhibarea activitii fibroblastelor i a celulelor epiteliale
degradeaz imunoglobulina A secretoare
degradeaz C3 a sistemului complement.
Bacteria respectiv este foarte greu de ndeprtat din esuturile

parodontale (exist o oarecare sensibilitate a acestei specii bacteriene la
Penicilin i Clindamicin); (Ramus i colab. 1992).
Lacroix (1989), Ramus (1992) consider boala parodontal ca o
infecie mixt, cu predominena bacililor gram negativi anaerobi i a
bacililor gram pozitivi anaerobi.
IMUNITATEA N BOALA PARODONTAL

1991 Raney Bacteriile bolii parodontale reprezint un stimul
antigenic puternic (antigenele lor, n urma proceselor distructive ptrund n

esutul conjunctiv subiacent i determin un rspuns imun local i general).
280
Imunitatea local
Experimental s-a demonstrat faptul c esuturile gingivale
inflamate conin imunoglobuline: IgA, IgG-IgG 1 i IgG2, IgM, urme de

IgE (predomin cantitativ IgG-IgG1);
Prin imunofluorescen (IF) se detecteaz n gingia inflamat
complexe antigen-anticorp;
Distruciile tisulare locale se explic i prin mecanis-me de tip
imunopatologic:
- prin enzimele lizozomale eliberate n exces din PMN din focarul
inflamator;
- prin aciunea distructiv a sistemului complement asupra
esuturilor;
- C5a (rol chemotactic pentru celulele imunologice n focarul
inflamator);
- sngerri gingivale i exfolierea dinilor se observ la subiecii cu
agranulocitoz i neutropenii;
Actinobacillus actinomycetemcomitans produce leucotoxine care
altereaz funciile neutrofilelor sau le distrug;
IL1 produce demineralizarea osului (pierderi dentare);
- acioneaz sinergic cu rezorbia osoas produs de ctre TNF i
limfotoxine;
- are efect proinflamator, agravnd boala;
- se ntlnete n pungile parodontale a 100% dintre pacienii cu
parodontopatii.
IL2 crete n boala parodontal (produs de ctre limfocitul T
activat);
OAF factorul de activare al osteoclastelor, produce distrucii
osoase;
Limfotoxina secretat de ctre limfocitul T citotoxic
- cu rol n procese citocide;
Mecanismele IMC au rol major n procesele de distrucie
tisular, spre exemplu la: Porphyromonas gingivalis, Treponema
denticola, Actinobacillus actinomycetemcomitans.
Limfocitele T4/8 1 la pacieni cu parodontopatii avansate exist
imunosupresie; 9% dintre pacienii cu AIDS prezint diverse forme de
parodontopatii progresive.
C3, C4 n fluidul gingival, n comparaie cu aceiai factori din ser.
Aceast scdere () arat o activare a sistemului complement pe ambele
281
ci (clasic i alternativ).
- C3 este clivat n fluidul gingival n leziunile parodontale severe
(activarea C);
- Factorul B este clivat (n fraciunea Bb, fraciunea activ), att n
parodontitele adultului, ct i n cele juvenile; activarea sistemului
complement agraveaz leziunile inflamatorii din boala parodontal.
Nivele antigenice microbiene nalte determin rspunsul imun
generalizat, predominent umoral;
Rspunsul umoral apare la 2-4 luni dup tratament i descrete
gradat, astfel nct la 8-12 luni ajunge la nivele anterioare tratamentului;
Rspunsul n AC serici (IgM, IgG detectabili imunoenzimatic)
apare fa de genurile: Porphyromona, Actinobacillus, Capnocytophaga,
Eikenella;
Rspunsul imun IgG are rol protector n boala parodontal.
Tratamentul n boala parodontal

Detartraj
Chiuretaj radicular
Tratament antibiotic pentru aerobi i anaerobi
Tratament chirurgical pentru suprimarea pungilor parodontale
Tratament imunologic local cu anticorpi monoclonali anti
Porphyromonas gingivalis.
Profilaxia
Antibioterapie profilactic:
- nainte de intervenia chirurgical;

- n timpul interveniei chirurgicale.
Pasta de dini antitartru antiparodontoz, Salviagen , Aronal
dimineaa, Elmex seara;
Tratament imunologic:
- Imudon preparat din bacterii ale microbiocenozei cavitii
bucale, cu rolul de a stimula imunitatea local;
Folosirea substanelor cu rol dezinfectant pentru cavitatea
bucal;
Vaccinul anti Porphyromonas gingivalis (n studiu);
Supravegherea pacienilor cu semne minime ale bolii parodontale,
folosind testele:
- BANA detectarea enzimelor tripsin like;
-ELISA IgM, IgG anti Porphyromonas gingivalis,
Actinobacillus actinomycetemcomitans;
- senzorii pentru gingivite
282
CAPITOLUL 38
UTILIZAREA PROFILACTIC I CURATIV A
ANTIBIOTICELOR N STOMATOLOGIE
Prevenirea infeciilor endodontice
Infeciile pulpare i periapicale au ca ageni etiologici o flor
bogat, endogen i exogen, aerob, facultativ anaerob i strict anaerob.
Tabel nr. 15 - Ageni etiologici bacterieni ai infeciilor endodontice.
Clasificare bacterian
dup tipul respiraiei
Bacterii anaerobe
Clasificare
microscopic
Bacili
gram
negativi
Coci gram negativi
Bacili gram pozitivi
Coci gram pozitivi

Bacterii anaerob
facultative
Coci gram negativi

Coci gram pozitivi
Bacterii aerobe
Coci gram pozitivi

Spirochete
Spirili
Bacterii mobile
Exemple
Bacteroides
melaninogenicus,
oralis, fragilis
Veillonella
Enbacterium
Lactobacillus anaer.
Propionbacterium
Peptococcus,
Peptostreptococcus.
Neisseria sp.
Lactobacillus an. fac.
Streptococi viridans
Streptococi , ,
hemolitici
Enterococcus
Staphylococcus sp.
Chorynebacterium sp.
Treponema sp.
Leptospira sp.
Campylobacter
Wollinella
283
Tehnicile sofisticate ale diagnosticului bacteriologic arat un

procentaj semnificativ crescut al anaerobilor n etiologia infeciilor
endontotice, care sunt favorizate de trei mari categorii de factori de risc:
bacteriologic (elemente de patogenitate), condiii de gazd (starea
organismului teren imunodeprimat sau boli asociate), natura
manoperelor medico-chirurgicale stomatologice.
Factori de risc microbiologic
Abundena florei bacteriene din cavitatea bucal reprezint un risc
endogen permanent, mai ales dac individul prezint o igien defectuoas
a cavitii orale. Majoritatea speciilor bacteriene locale prezint enzime
tripsin-like, capabile s declaneze leziuni proteolitice, care agraveaz
procesul infecios prin substratul nutritiv oferit bacteriilor.
Condiii de gazd (teren receptiv)
Subiecii cu diverse tipuri de imuno-deficiene primare sau
secundare (SIDA, transplant, tratament cu corticosteroizi, hepatopatie
portal, insuficien renal cronic, diabet zaharat, etc.) prezint un risc de
infecie evident mai mare dect subiecii cu rspuns imunitar eficient
(vrste cuprinse ntre 20 i 40 de ani, fr boli asociate).
Indivizii cu leziuni valvulare preexistente reprezint o categorie
aparte de subieci supui riscului unei endocardite bacteriene subacute,
produs de ctre streptococii viridans (ajuni n torentul circulator dup
diferite
manopere
stomatologice
sngernde).
Apariia
unei
simptomatologii de tipul puseu febril, astenie marcat, dureri la nivelul
extremitilor degetelor (false panariii Osler), erupii cutanate, artralgii i
hematurie, atrage atenia asupra declanrii unei endocardite streptococice.
n studiul lui Bender I. s-a demonstrat faptul c 92% din endocarditele
luate n studiu aveau n antecedente manopere de tip endodontic.
Tabel. nr 16 Factori de risc cardiovasculari implicai n geneza unei
endocardite streptococice
284
Factori care necesit

protocolul antibiotic special
Proteze valvulare sau arteriale
Antecedente de RAA cu suflu
cardiac restant
Antecedente de endocardit
infecioas
Maladii
care
tratament parenteral
necesit
Factori de risc care impun protocolul

standard
Insuficien aortic
Bicuspidie aortic
Insuficien mitral
Tetralogie Fallot
Comunicri interventriculare
Sindrom Marfan
Canal arterial
Fistule arteriovenoase
Miocardita reumatic
Aortita sifilitic
Pace-maker endocardic
Cardiomiopatie obstructiv
285
Riscul infecios al manoperei stomatologice executate

Utilizarea pieselor stomatologice rotative contamineaz zona
endodontic att cu bacterii endogene ale cavitii, ct i cu
microorganisme ale mediului nconjurtor (suprafee, aeromicroflor). Pot
s apar infecii cu potenial epidemic, de tip infecie nozocomial, cu
ageni etiologici precum Streptococi hemolitici, mutans, mitis, salivarius,
Stafilococi (epidermidis, aureus), Bacteroides melaninogenicus,
Propionibacterium, Acinetobacter, Actinomyces i aa mai departe. Un alt
factor de risc l reprezint manoperele endodontice i lezarea gingival.
Antibioticoterapia curativ de utilizare local

Utilizarea antibioticelor local (intracanalicular) vizeaz paste
antibiotice: STREPTOMIXINE FORTE este o combinaie de Neomicin i
Polimixin B iar LEDERMIX conine Dimetilclortetraciclina sau
Demeclocilina n combinaie cu un corticosteriod topic, cu efect
antiinflamator.
Administrarea local a acestor antibiotice este fundamentat prin
studii clinice de specialitate, care afirm c 37% dintre pacieni prezint
bacteriemie la cinci minute dup o extracie, din cauza capilarelor
traumatizate care permit accesul agenilor infecioi. Utilizarea local
imediat a unor antiseptice (Clorhexidina) ar fi cel puin la fel de eficient
ca i antibioticoterapia.
Antibioticoterapia de utilizare pe cale general

Acest tip de tratament se indic n situaiile urmtoare: infecii
periapicale care nu pot fi drenate eficient, infecii endodontice cronice
acutizate, bacteriemie dup manopere sngernde, pacieni cu boli
generale preexistente.
Penicilina G este antibioticul de referin i de prim elecie n
tratamentul infeciilor periapicale acute sau a celulitelor. inta sa de
aciune este Streptococul. Eritromicina este recomandat n cazurile de
alergie la Penicilin, chiar dac acest antibiotic nu este eficient n cazul
bacteriilor strict anaerobe. Muli autori recomand Amoxicilina n
combinaie cu Acidul Clavulanic n locul Penicilinei G, din cauza
spectrului mai larg i a aciunii prelungite.
Metronidazolul i Clindamicina cu efect antiflor anaerob
completeaz tratamentul cu lactamine. Preparatul mixt RODOGYL
(Spiramicina i Metronidazol) prezint rezultate bune, n special n
tratamentul infeciilor endodontice.
286
Utilizarea antibioticelor n scop profilactic

Se recomand n special pacienilor cu risc i celor care au suferit
traumatisme la nivelul cavitii bucale; de asemenea, exist indicaia
profilaxiei naintea tuturor manoperelor sngernde la nivelul endodontic.
Sunt utilizate antibiotice pe cale parenteral pentru a obine ct mai rapid
concentraiile bactericide la nivelul osului alveolar. Tratamentul trebuie
meninut dou sptmni, pn la cicatrizarea complet. De cele mai multe
ori, monoterapia intit nu este suficient i se recomand scheme
terapeutice cu asocieri de antibiotice.
Tabel nr. 17 Protocol antibiotic profilactic general
Subiect fr alergie la lactamine
Subiect alergic la lactamine
Tratament iniial
Tratament iniial
(Penicilin G + Gentamicin +(Eritromicin + Gentamicin +
Metronidazol) intravenos
Metronidazol) intravenos
Tratament de ntreinere
Tratament de ntreinere
Augumentin 2 sptmni, per os. Metronidazol + Eritromicin per os
2 sptmni
Profilaxia endocarditei bacteriene

American Heart Association (AHA) recomand pacienilor cu risc
cardiac protocolul antibiotic pentru manopere stomatologice sngernde.
Tab. nr. 18 Protocol antibiotic pentru risc cardiac
Protocol standard
Amoxicilina 3g per os naintea interveniei cu o or
1,5g la 6 ore dup doza iniial
Pacieni alergici la lactamine
Eritromicina 1g per os 2 ore nainte interveniei, apoi
- 0,5g la 6 ore dup doza iniial
sau
Clindamicina 300 mg per os cu o or naintea interveniei apoi
- 150 mg la 6 ore dup doza iniial
Protocol special
Pacieni cu risc particular
287
Protocol standard
Ampicilina, Gentamicina 2g de Ampicilin sau Gentamicin
i.m. sau i. v. cu 30 de minute naintea interveniei; apoi 1,5g de
Amoxicilin per os la 6 ore dup doza iniial. Protocolul
parenteral se poate repeta dup 8 ore.
Pacieni cu risc particular cu teren alergic
Vancomicina 1g n perfuzie lent cu o or naintea interveniei
n concluzie, succesul tratamentului endodontic depinde att de

acurateea
manoperei,
ct
i
de
posibilitatea
ndeprtrii
microorganismelor prin antibioticoprofilaxie i terapie.
Prevenirea cariilor dentare cu antibiotice

Antibioticele au fost testate n prevenirea plcii dentare.
Modul de administrare a fost diferit:
- pe cale sistemic
- prin pensulri ale arcadelor
- prin paste de dini
- prin cltiri periodice ale cavitii bucale cu soluii antibiotice
Rezultatele experimentului Parsons sunt:
Penicilina scade incidena cariei dentare cu 50;
Penicilina i Bacitracina - mai eficient este combinaia lor;
Vancomicina i Spiramicina - au efecte foarte bune.
Reacii adverse ale antibioticelor:
- Penicilina produce sensibilizri
- Dezechilibre ntre speciile microbiene, cu apariia candidozelor
- Reacii adverse digestive: diaree, vom
- Selecia unor tulpini rezistente la chimioterapice
288
INTRODUCERE
IMUNOLOGIA - este tiina care se ocup cu studiul
mecanismelor aprrii antiinfecioase, mecanisme prin care organismul
reuete s discrimineze structurile proprii, fa de cele strine, non-self.
(P. Kourilsky - Discriminarea ntre self i non-self este inima
imunologiei).
Mecanismele supravegherii imunologice sunt asigurate de ctre
sistemul imun, care cuprinde organe, celule i mediatori chimici variai.
APRAREA ANTIINFECIOAS cuprinde dou categorii de
mecanisme biologice:
REZISTENA NATURAL
- cu mecanisme nespecifice,
nnscute, de aprare imunologic, determinate genetic i cu
specificitate de specie, asigurate prin:
bariere fizice de organ, bariere cutanate i mucoase
factori celulari;
factori umorali.
IMUNITATEA DOBNDIT - cu mecanisme specifice, dobndite,
de aprare mpotriva unui anumit agent infecios (cu determinism
genetic), prin intermediul:
imunitii mediate celular (IMC);
imunitii umorale (IU).
Astfel se realizeaz i se pstreaz memoria imunologic fa de
respectivul agent infecios.
CAPITOLUL 39
REZISTENA NATURAL
Mecanismele de aprare respective sunt prezente la toi indivizii
unei anumite specii i reprezint prima linie de aprare la contactul cu
orice agent infecios (lipsa specificitii).
FACTORII REZISTENEI NATURALE
BARIERE ANATOMICE
Tegumentele
integritatea lor structural constituie o barier mecanic (excepii:
genurile Leptospira, Treponema care pot ptrunde prin tegument
intact);
filmul lipidic superficial al pielii are un pH acid, care confer un
efect bactericid.
Mucoasa respiratorie:
barier mecanic;
mucusul nglobeaz microorganismele care sunt expulzate prin tuse;
mucusul conine lizozim cu efect antibacterian.
Mucoasa conjunctival:
lacrimile ndeprteaz bacteriile, att prin intermediul lizozimului,
ct i prin splare mecanic.
Mucoasa digestiv:
microorganismele sunt permanent ndeprtate prin intermediul
peristaltismului intestinal;
aciditatea gastric i secreiile pancreatico - biliare au un efect
bactericid.
Mucoasa urogenital:
jetul urinar ndeprteaz permanent microorganismele;
flora comensal local i pH-ul vaginal acid realizeaz un efect
bactericid;
spermina din lichidul seminal determin efectul bactericid.
FACTORI UMORALI
Lizozimul:
efect bactericid asupra bacteriilor gram pozitive.
Sistemul complement:
292
rol virocid pentru virusurile mari, nvelite;

rol imunomodulator;
rol opsonizant;
efect bactericid asupra bacteriilor gram negative.
Sistemul properdinic:
activarea fagocitozei;
activarea complementului;
rol bactericid.
FACTORI TISULARI I CELULARI

Polipeptide bazice (de tipul protaminei i histonei);
acizi grai din esuturi - cu efect bactericid;
Interferonii - cu aciune antiviral;
Enzime ale fagocitelor - cu efect bactericid.
MICROBIOCENOZE
Populaiile bacteriene comensale, specifice unor anumite teritorii ale
organismului, mpiedic suprapunerea bacteriilor patogene prin:
competiia pentru substane nutritive; bacteriocine.
FEBRA
reprezint un mecanism nespecific al aprrii imunologice, prezent
n majoritatea infeciilor;
stimuleaz mecanismele cooperrii ntre diverse celule imunologice;
limiteaz multiplicarea agenilor infecioi, prin alterarea
temperaturii optime de dezvoltare a acestora.
293
FAGOCITOZA I INFLAMAIA
reprezint mecanismul major al ndeprtrii microorganismelor,
mecanism n care factorii celulari au un rol esenial.
Din sistemul fagocitar mononuclear fac parte:
celula su angajat (celula de origine a elementelor celulare
hematopoetice)
monoblastul
promonocitul
monocitul (din snge periferic, monocitul circulant)
macrofagul (din esuturi, spre exemplu macrofagele difereniate):
din ficat;
din plmn (macrofagul alveolar);
din seroase (macrofagul pleural sau peritoneal);
din sistemul nervos (microglia);
din esutul osos (osteoclaste);
din esutul conjunctiv (histiocit);
din mduva osoas;
din splin i ganglioni limfatici.
macrofagele din diferite exudate;
celulele Langerhans multinucleate;
celule de corp strin, toate acestea fiind prezente n orice esut
inflamat.
Durata tranzitului celular n fiecare compartiment (la om) este de:
2 - 3 zile n mduva osoas;
3 - 4 zile n snge;
1 - 5 sptmni n esuturi.
Acest flux dublu de celule snge esuturi reprezint aproximativ
13,5 milioane de celule/kg/zi. Numrul total al macrofagelor este de
ordinul miliardelor (aproximativ 2,5 miliarde / kg corp).
Macrofagele tisulare prezint o mare heterogenitate structural i
funcional n funcie de esutul n care apar i n funcie de starea
macroorganismului (sntate sau boal).
receptorii celulari de suprafa ai macrofagelor
Aceti receptori sunt foarte diveri (aproximativ 30 tipuri), implicai
n fagocitoz sau rspuns imun.
receptorii pentru fragmentul cristalizabil (Fc) al imunoglobulinelor
294
a)
sensibili la proteinaze - leag selectiv subclasele de IgG 1 i
IgG3 monomere (aa - numiii anticorpi citofili, cu afinitate
celular).
b)
rezisteni la proteinaze - mediaz legarea eficient a
complexelor antigen - anticorp sau a agregatelor de
imunoglobuline, favoriznd fagocitarea lor (la om leag n special
IgG2 i IgG4).
Receptorii pentru FC ai imunoglobulinelor A sunt implicai n
aprarea imunologic la nivelul sistemului imun al mucoaselor.
receptori pentru complement
a)
receptori pentru componentul C3 al sistemului complement
(n special pentru C3b)
b)
receptori pentru componentul C5 al sistemului complement
(C5a)
Prezena fraciunii C3b reprezint un element necesar pentru
promovarea fenomenelor fagocitozei.
diveri receptori pentru interleukine (IL2) n special pentru
interleukinele implicate n activarea macrofagului i n proliferarea
acestuia.
receptorii pentru fibronectin
Favorizeaz adeziunea macrofagelor de resturi celulare sau fibrin,
contribuind la ndeprtarea lor din organism.
receptori pentru glicoproteine i lipoproteine normale i alterate
2 macroglobulin proteinaze.
receptori pentru molecule HLA cu rol n determinismul proceselor de
cooperare celular.
SISTEMUL
FAGOCITOZA
FAGOCITAR
MONONUCLEAR
FAGOCITOZA / PINOCITOZA
Macrofagele au capacitatea de a internaliza (de a ENDOCITA)
foarte activ substane lichide (pinocitoza de la grecescul pinein =
a bea) sau substane solide (fagocitoza de la fagein = a mnca)
Fagocitoza poate fi de natur:
imun - mediat prin receptorii Fc i ai sistemului complement
macrofagele reprezint a doua linie celular de celule fagocitante
(dup PMN) i nu distrug complet microorganismele.
295
legarea particulelor este posibil i la temperaturi sczute (la 4C),

dar ingestia acestora este condiionat de temperaturi mai mari de
20C. Prin acest mecanism s-ar putea explica frecvena mai mare a
infeciilor respiratorii n sezonul rece.
neimun - mediat prin alt tip de receptori
se realizeaz curirea unui teritoriu de resturi celulare, spre
exemplu n repararea plgilor, fiind totui discutabil intervenia
macrofagelor n embriogenez.
FUNCIA SECRETORIE
Macrofagul secret aproximativ 100 produi de secreie, cu diverse
structuri i efecte biologice, de exemplu:
produi enzimatici: - enzime lizozomale, colagenaze, elastaze,
lipoproteinlipaze, fosfataze, fosfolipaze, etc.
produi cu rol antiinfecios:
interleukina 1 (IL1), lizozim
interferoni,
compui ai sistemului complement
citokine - factorul necrozant tumoral, factorul de stimulare al
coloniilor de granulocito - macrofage, factori limfostimulatori.
Interleukina 1 este o glicoprotein cu greutate molecular de
aproximativ 15.000 , secretat de ctre macrofag, cu roluri importante:
acioneaz asupra limfocitelor THelper;
stimuleaz producia de interleukin 2 (IL2);
stimuleaz proliferarea limfocitelor B (i indirect a anticorpilor);
amplific efectele reaciilor inflamatorii i imunitare.
Tabelul nr. 19 - Principalii produi de secreie ai macrofagelor
(dup Zarnea)
296
ENZIME:
Lizozim
Arginaz
Lipoprotein lipaz
Angiotensina
Convertaz
PROTEAZE NEUTRE:
Activatorul plasminogenului
Colagenazele de tip I, II, III, IV, V
Proteinazele citolitice
Elastazele
HIDROLAZE ACIDE:
Proteinaze
Peptidaze
Glicozidaze
RNA-aze
DNA-aze
Lipaze
Fosfataze
Sulfataze
METABOLII AI
OXIGENULUI:
H2O2
Anionul superoxid
Radicalul hidroxil
Singlet oxigen
COMPONENI AI
COMPLEMENTULUI:
C1, C2, C3, C4, C5
Factorii B, F, D
Properdin
LIPIDE BIOACTIVE:
Prostaglandina E2
Tromboxan B2
Leucotriena C
PROTEINE PLASMATICE:
Fibronectin
Factorul I (inactivatorul C3b)
Factorul H (inactivator-accelerator al
C3b)
Proteine de coagulare
Factorii V, VII, IX, X
Tromboblastin celular
Transcobalamina II
Apolipoproteina E
METABOLII AI
NUCLEOTIDELOR:
cAMP
Timidin
Uracil
Acid uric
FACTORI DE REGLARE
FUNCIONAL:
Interferoni
Interleukina 1
Factori chemotactici pentru neutrofile
FACTORI STIMULATORI AI
PROLIFERRII PENTRU:
Fibroblati
Endotelii
Celule B
Celule T
Factorul stimulator al coloniilor
Precursori ai eritrocitelor
297
FUNCIA DE COOPERARE CU SISTEMUL IMUN

macrofagul este principala celul prezentatoare de antigen (CPA),
celul care realizeaz o degradare menajat a antigenului, pentru
developarea epitopilor semnificativi din punct de vedere imunologic.
Macrofagul particip la cooperrile celulare n vederea realizrii
rspunsului imun (cu limfocitul B, T - diverse subclase, etc.)
FAGOCITOZA
Fenomenul a fost descris n 1884 de ctre Metschnikov.
Fagocitoza reprezint proprietatea unor celule de a ngloba i digera
particule strine; cuprinde procese de endocitoz (pinocitoz, fagocitoz).
Fagocitoza se realizeaz prin intermediul fagocitelor profesioniste:
Polimorfonucleare neutrofile (microfage)
Macrofagele sistemului fagocitar mononuclear (macrofage)
Tabelul nr. 20. Principalele caracteristici de difereniere ntre
microfage i macrofage.
Microfage (PMN)
Macrofage
celule cu via scurt (ore, zile) celule cu via mai ndelungat
sunt primele celule care
celule mai puin mobile
fagociteaz (primele care ajung
a doua linie celular care
la locul infeciei)
fagociteaz
diger total bacteriile fagocitate diger parial bacteriile fagocitate
prin enzimele lizozomale
numrul de lizozomi crete n
mieloperoxidaz prezent n
macrofagul activat
lizozomi
nu au mieloperoxidaz
neutrofilele sunt foarte active
intervin n special asupra bacteriilor
eozinofilele fagociteaz
care au un parazitism celular
complexe antigen - anticorp i
reprezint principala celul
au rol antiparazitar
prezentatoare de antigen (CPA),
au pe suprafa receptori pentru
realiznd degradarea menajat a
C3 i pentru FC al IgG
antigenului
celul citotoxic
au pe suprafa receptori pentru C3
i pentru FC al IgG
298
Fig. nr. 17. Migrarea PMN n focarul inflamator (dup Galin, 1980)
celul
endotelial
PMN
N
ETAPELE FAGOCITOZEI
Chemotaxia - reprezint migrarea dirijat a fagocitelor nspre
stimuli care reprezint un gradient de concentraie.
Opsonizarea - etapa de pregtire a fagocitozei (opsonein = a
pregti pentru mncare), cu recunoaterea particulei strine i ataarea sa
pe suprafaa fagocitului.
nglobarea - penetrarea substanei strine n fagocit
Omorrea i digerarea microorganismelor, prin mecanisme
oxidative i neoxidative.
Chemotaxia
Factorii chemotactici pot fi de origine bacterian sau pot fi
componente ale organismului gazd.
Factorul C5a este cel mai important factor chemotactic al
organismului gazd.
Ali factori chemotactici ai gazdei:
componente ale sistemului complement
histamina, kalikreina, derivai arahidonici
limfokine sau factori eliberai de ctre neutrofile.
Aceti factori determin mobilizarea fagocitelor n focarul
inflamator.
Opsonizarea
Este condiionat n principal de prezena pe macrofage a
receptorilor celulari cu afinitate mare pentru IgG i C3 al sistemului
complement. Fenomenul poate fi specific sau nespecific.
299
Opsonizarea specific
Majoritatea bacteriilor trebuie acoperite cu anticorpi i/sau
complement, pentru a putea fi fagocitate.
Receptorul pentru fragmentul FC al imunoglobulinelor de pe
suprafaa fagocitelor acioneaz ca i liganzi, atand bacteriile pe
suprafaa fagocitelor (imunoglobulinele formeaz o punte de legtur ntre
fagocit i bacterie).
Opsoninele specifice, active n absena complementului sunt

imunoglobulinele IgG1 i IgG3.
Opsoninele specifice, active n prezena complementului sunt

imunoglobulinele IgG2, IgG4,IgM, care duc la eliberarea
fragmentului C3b, care se ataeaz pe suprafaa bacteriei.
Opsonizarea nespecific
Se realizeaz n prezena fibronectinei, care mrete aderena
celulelor de substraturi, de suprafeele rugoase sau de suprafaa diferitelor
componente ale peretelui celular bacterian.
nglobarea
Fagocitul emite prelungiri ale membranei celulare (pseudopode),
acoper bacteria pentru a forma o vezicul fagocitar. Formarea
fagozomului (vezicula fagocitar) este consecina unui proces progresiv de
nglobare, care implic apoziia continu de liganzi i receptori, pn cnd
particula va fi complet nchis. Griffin (1976) a denumit acest proces
mecanism de fermoar .
Fig. nr. 18. Formarea fagozomului (dup Zarnea)
300
Omorrea i distrugerea microorganismelor fagocitate

Fagozomii fuzioneaz cu lizozomii i formeaz fagolizozomi
Majoritatea microorganismelor fagocitate sunt distruse n
fagolizozomi n cteva minute sau aproximativ dou ore. Mecanismele
distrugerii microorganismelor sunt mecanisme:
oxidative
neoxidative.
Mecanismele oxidative - prin aa-zisa explozie respiratorie
genereaz O2-, H2O2, HO- i acid hipocloros i hipohalogeni sub aciunea
mieloperoxidazei. inta mecanismelor oxidative o reprezint lipidele
nesaturate membranare, enzimele sau acizii nucleici. Aceste evenimente
biochimice au loc n fagolizozomi (n special oxidarea glucozei prin untul
hexozo - monofosfat).
Fig. nr. 19. Mecanismele oxidative care contribuie la efectul
bactericid al PMN (dup Ivanof i colaboratorii)
-
Mecanismele neoxidative - polipeptidele bazice, lizozimul,

lactoferina, pH - ul acid (n special la nivelul fagolizozomului) exercit un
rol bactericid. Unele bacterii, dei sunt nglobate n macrofage - nu pot fi
distruse (ex.: Mycobacterium tuberculosis); astfel, acestea sunt ferite de
aciunea celulelor sistemului imunitar sau a chimioterapicelor.
Pentru a crete eficiena de fagocitare a macrofagului, prin
intermediul interleukinelor elaborate de ctre limfocitul T, se obine aa numitul macrofag activat (cu o cantitate crescut de enzime lizozomale).
301
Macrofagele particip la eliminarea celulelor infectate cu virusuri

(fie direct, fie indirect - prin intermediul interferonului produs, care
stimuleaz mecanismele citotoxicitii).
INFLAMAIA
Reprezint o succesiune de reacii vasculare, umorale sau celulare
fa de ageni infecioi sau fizico - chimici.
Reaciile inflamatorii sunt locale i se caracterizeaz prin:
- eritem (rubor)
- edem (tumor)
- creterea temperaturii locale (calor)
- durere (dolor)
- tulburri funcionale (functio lesa)
Factorii vasculari
Leziunea determin - vasodilataie
- creterea permeabilitii capilare
- modificri ale celulelor epiteliale vasculare, care favorizeaz
diapedeza.
Factorii celulari
Spre locul infeciei, se deplaseaz prin diapedez, n urma
stimulilor chemotactici: polimorfonucleare (sunt primele celule care ajung
n focarul inflamator), monocite, limfocite.
Fagocitele nglobeaz i diger microorganismele din focarul
inflamator. Celulele imunologice vor coopera, n vederea realizrii
rspunsului imun.
Factorii umorali
fibrinogen (care se transform n fibrin, cu rol de localizare a
focarului)
lizine - lizozim (cu rol bactericid)
sistem complement (mediator al inflamaiei), activat pe cale clasic
sau alternativ
ali mediatori: histamina, serotonina, catecolamine, kinine, factor
Hagemann, leucokinine, limfokine, sistem prostaglandinetromboxan, substana lent reactiv anafilactic (SRS - A)
302
Activitatea mediatorilor inflamaiei se face ca urmare a

modificrilor din focarul inflamator. Totui, cel mai important mediator l
reprezint sistemul complement, care promoveaz:
vasodilataia capilar
creterea permeabilitii vasculare
eliberarea enzimelor lizozomale (n fagocitoz)
lezarea membranelor celulare.
Unii mediatori ptrund n circulaia general i determin
sindromul de faz acut al inflamaiei concretizat prin:
creterea proteinei C reactive (foarte semnificativ - n infeciile
bacteriene i n mod discret n infeciile virale)
creterea vitezei de sedimentare a hematiilor
creterea numrului de polimorfonucleare neutrofile
creterea fibrinogenului i a cantitii haptoglobinelor
creterea titrului sistemului complement
303
CAPITOLUL 40
SISTEM IMUN. ORGANE LIMFOIDE
Rspunsul imun reprezint rspunsul organismului agresat prin
intermediul agenilor infecioi (bacterii, parazii, virusuri, etc.). Rspunsul
imun este realizat prin intermediul unui sistem specializat n acest sens,
denumit sistem imun. Componentele acestui sistem (organe, celule i
molecule) se gsesc n tot organismul i constituie aproximativ 1% din
greutatea corpului.
Tabelul nr. 21 - Componentele sistemului imun (dup Olinescu) :
Timus
PRIMARE
Mduva osoas
Echivalentele bursei lui Fabricius
Ganglioni limfatici
ORGANE
Splina
LIMFOIDE
Apendicele
SECUNDARE
Plcile Peyer
Foliculi limfatici din mucoase i
submucoase
Neutrofile
GRANULOCITE Eozinofile
Bazofile
Macrofage
MONOCITE
Celule dendritice
CELULELE
De tip T (cu subpopulaii)
De tip B
Celule NK (natural killer)
LIMFOCITE
Celule K (killer)
Celule LAK (celule ucigae activate
prin limfokine)
IMUNOGLOBULI IgG, IgA, IgM, IgE, IgD
NE
Molecula HLA
MOLECUL
Diveri receptori imunitari (ex.:
E
ALTELE
TCR)
Sistem complement
Citokine (monokine, limfokine)
304
ORGANELE LIMFOIDE
Organele limfoide prezint o structur fin reticular, structur n
ochiurile creia se dispun celule cu rol imun. Organele limfoide sunt
delimitate la exterior de o capsul conjunctiv, din care pornesc spre
interior travee, ce realizeaz compartimente interioare.
Clasificarea organelor limfoide
Se realizeaz dup dou criterii :
1. Modul de apariie n embriogenez:
Organele limfoide primare apar iniial n evoluia filogenetic i
n embriogenez. Se denumesc i organe limfoide centrale, pe baza
importanei n producerea i diferenierea celor dou tipuri de limfocite
(timusul - pentru limfocitele T i echivalentele bursei lui Fabricius - pentru
limfocitele B).
2. Aspecte funcionale:
Organele limfoide primare educ precursorii celulari pentru
realizarea funciilor lor (ctigarea imunocompetenei).
Organele limfoide secundare sau periferice, (enumerate anterior)
reprezint sediul n care celulele maturate i desfoar activitatea.
Organele limfoide secundare sunt foarte bine vascularizate, ceea ce
favorizeaz :
ntlnirea limfocitelor cu diverse antigene
recircularea celulelor sistemului imunitar i rentoarcerea acestor
celule n teritoriile specifice (zone timus dependente, populate de
ctre limfocitele T i zonele timus independente populate de ctre
limfocitele B).
CELULE LIMFOIDE
Tabelul nr. 22. Distribuia limfocitelor T i B n diferite organe
limfoide i n sngele periferic (Olinescu)
Celule prezente %
Organul limfoid
T
B
Timus
100
0
Mduva osoas
0
100
Canal toracic
80-90
4-10
Ganglioni limfatici
60-80
20-35
Splin
30-50
50-60
Plci Peyer
30-35
60-70
Snge periferic
60-80
5-25
305
Cantonarea celulelor n teritorii specifice se numete fenomen de

stabilire a domiciliului (englez - homing) i se realizeaz prin
intermediul unor receptori specifici de natur polipeptidic, respectiv
antigenul CDW44 de pe suprafaa limfocitelor i a celulelor neuronale, cu o
greutate molecular de 85 - 95 k. Acest receptor pentru ecotaxie
conine trei duble legturi disulfidice intralan, cu diverse locuri de fixare a
oligozaharidelor. Acest receptor recunoate (n prezena calciului)
polizaharidele bogate n G-6-P sau M-6-P de la nivelul ariilor limfoide.
Sistemul de homing asigur posibilitatea de maturare n
continuare a limfocitelor (sub aciunea stimulilor antigenici) i
transformarea lor n celule efectoare sau cu memorie imunologic.
Teoria seleciei clonale Burnet
n ontogenez se difereniaz limfocite capete de clon, aa numite
clone interzise, care nu declaneaz rspuns imun fa de antigenele
self, proprii organismului (astfel se previn fenomene autoimune).
n perioada extrauterin, antigenele funcioneaz ca i presori
selectivi, acionnd asupra celulelor capete de clon capabile s
discrimineze structurile non-self (strine organismului). Limfocitele sunt
principalii ageni de discriminare self-non self, att n perioada
intrauterin, ct i n perioada extrauterin.
Diferenierea limfocitelor i ctigarea imunocompetenei este un
proces care se desfoar n numeroase etape, cu modificri gradate ale
antigenelor de suprafa celular (consecutive unor procese de reasortare
genetic).
Din punct de vedere funcional, limfocitele T (i cele B) se pot afla
n urmtoarele stadii de maturare :
Precursori celulari - care nu exprim pe suprafaa lor nici un fel de
receptori (n afar de cei pentru homing); sunt celule tinere, fr
funcii, n curs de maturare.
Celule naive - i-au dobndit imunocompetena (pot recunoate
antigene specifice), dar nc nu au avut ocazia s i exercite funciile.
Celulele efectoare - celule imunocompetente care au venit n contact cu
anumite antigene i care devin celule cu memorie imunologic (pot
recunoate un antigen pe care l-au mai ntlnit).
Dezvoltarea ontogenetic a limfocitelor
306
Celula surs apare n viaa fetal n sacul vitelin, apoi n ficat i n

timus, unde se difereniaz. Cu puin timp nainte de natere i apoi pentru
tot restul vieii, mduva hematogen preia funcia de furnizare a celulei
surs limfoide.
Din celula surs limfoid se difereniaz :
limfocitele T
- migreaz n timus n sptmna a opta a vieii
intrauterine
- se difereniaz sub influena timozinei, timopoetinei i a factorului
umoral timic, n subpopulaiile caracteristice (etapa timic);
- diferenierea lor continu i dup migrarea acestora n organele
limfoide secundare, n zonele timodependente (etapa posttimic).
Fig. nr. 20. Maturarea limfocitelor T (dup Haeney, 1984)
limfocitele B
- se difereniaz din celula surs, n sptmna a 8-a a
vieii intrauterine
- se ajunge la celula pre-B, caracterizat prin prezena n
citoplasm a IgM. Diferenierea continu cu apariia unui limfocit B
imatur imunologic (cu receptori de suprafa - IgM monomerice).
Dup sptmna a 13-a de via se difereniaz limfocitul B
imunocompetent, cu receptori membranari - IgM i IgD
monomerice.
307
Fig. nr. 21. Dezvoltarea limfocitului B (dup Ivanof i colab.,

1982)
- Angajarea imunologic a limfocitului B imunocompetent se

realizeaz dup natere, sub influena stimulilor antigenici, care
determin apariia plasmocitului secretor de imunoglobuline. (Etapa
dependent de antigen).
limfocitele nule - nu au markerii caracteristici limfocitelor B sau T.
- n proporie de 10 % din totalul celulelor limfoide.
- populaie foarte heterogen de celule, cu diferite roluri imunologice :
Celulele NK - ucigae naturale (natural killer)
Celulele K - ucigae (killer) - produc citotoxicitate dependent
de anticorpi
Celulele LAK - ucigae activate prin limfokine; produc
citotoxicitate stimulat prin iL2 i INF.
Celulele B sau T - precursori, care nu au nc markerii
imunologici caracteristici.
Extraordinara heterogenitate a limfocitelor poate fi exprimat i pe
baza unor criterii :
Morfologice - limfocit mic / limfocit mare
- limfocit neted / limfocit cu viloziti
Durat de via - limfocite cu durat de via scurt sau lung
(memoria imunologic)
Proprieti fizice - densitate, mobilitate, ncrcare electric
Funcionale - n funcie de rolul bine stabilit n declanarea rspunsului
imun
308
Limfocitele T - reprezint efectorii imunitii mediate celular

(IMC). Cuprind subpopulaii celulare, care ndeplinesc anumite funcii
imunologice:
Limfocitele TH
helper, ajuttoare (65% din totalul celulelor T)
marker de difereniere : CD4
ajut proliferarea i diferenierea celulelor imunitare
stimuleaz maturarea limfocitului B, apariia plasmocitelor i producia
de imunoglobuline
stimuleaz limfocitele citotoxice s distrug celulele int
ajut exercitarea funciilor supresoare de ctre limfocitul T supresor
stimuleaz activitatea celulelor ucigae naturale,
poteneaz activitatea macrofagelor
stimuleaz producerea mediatorilor specifici de tipul interleukinelor.
Enumernd aceste roluri, se deduce faptul c lfTH deine rolul
central n evoluia rspunsului imun i deine rolul dirijorului orchestrei
de celule imunologice.
Limfocitele TA (Amplifying T cell) realizeaz amplificarea
proliferrii i diferenierii celulelor T killer. Ca i limfocitele TH i
limfocitele TA sunt supuse restriciei complexului major de
histocompatibilitate (CMH)
Limfocitele TS
supresoare au rol esenial n modularea rspunsului imun, limitnd,
pondernd - att rspunsul imun mediat celular, ct i cel mediat
umoral.
Markerul de difereniere este CD 8 (CD - cluster of differentiation =
antigen de difereniere)
Activitatea lor este supus restriciei complexului major de
histocompatibilitate
Limfocitele T contrasupresoare (TCS) contracareaz activitatea lfTS,
acionnd sinergic cu lftH
Limfocitele TC
citotoxice, efectoare
posed structura de difereniere CD8 (lfT8+)
celulele acioneaz direct i specific (sub restricia CMH) asupra
celulelor allogene cu complex CMH diferit de cel propriu, uciderea
realizndu-se n absena anticorpilor i sistemului complement
Efectul citocid se realizeaz (dup activarea specific) asupra:
celulelor infectate cu virusuri
309
celulelor tumorale
celulelor grefelor incompatibile.
Limfocitele TDH
- particip n reaciile de hipersensibilitate de
tip tardiv i au capacitatea de a recruta macrofagele i de a delimita situsul
de infecie (acioneaz sub restricia CMH).
Dup rol, subpopulaiile limfocitelor T le putem clasifica drept
reglatoare : lfTH, lfTA, lfTS, lfTDH sau efectoare : lfTC.
n ansamblu, limfocitele T mature au caracteristicile :
Sunt principalii ageni de discriminare self - non self
produc mediatori solubili (aa numitele limfokine )
prezint subpopulaii celulare cu rol reglator sau efector
produc efecte importante n aprarea organismului :
activitate citotoxic mediat celular
aciune antiviral, antitumoral, antifungic, antiparazitar, antigref
incompatibil
particip la procese de cooperare celular foarte complexe, eseniale
pentru evoluia unui rspuns imun eficient
i pot autoregla propriile funcii, rspunznd la propriile citokine
interacioneaz n special cu antigene de natur proteic i le leag prin
intermediul unor receptori specializai, receptorii celulei T (T cell
receptor = TCR)
nu prezint imunoglobuline de suprafa (ancorate) aa cum prezint
limfocitele B, dar prezint pe suprafa structuri de difereniere CD 4
(lfTH) sau CD8 (lfTS, lfTC).
Limfocitele T posed receptori pentru hematii de oaie, cu
posibilitatea aglutinrii acestora n absena anticorpilor i/sau a sistemului
complement (rozete neimune).
Limfocitele T se transform blastic i n prezena unor mitogeni
nespecifici, spre exemplu fitohemaglutinina i concavalina A.
exist limfocite T cu memorie imunologic.
Limfocitele B
Reprezint mpreun cu descendenii lor difereniai (limfoblastele i
plasmocitele) - efectorii imunitii umorale, fiind singurele celule
capabile s sintetizeze imunoglobulinele cu rol de anticorpi.
Deriv (la mamifere) din celule educate, instruite de la nivelul
mduvei osoase.
Nu posed subpopulaii celulare i recunosc antigene libere sau legate.
Se transform blastic n prezena antigenelor.
310
Posed pe suprafaa lor un numr impresionant de receptori, n special

de natur imunoglobulinic (imunoglobulinele M i D - monomer, cu
rol de receptori pentru antigen).
Receptori de suprafa ai limfocitelor B
Imunoglobulinele M i D monomerice:
Au o structur diferit comparativ cu cele secretate, deoarece
prezint o secven hidrofob transmembranar suplimentar, care
le ancoreaz n membrana celular.
Celulele care evolueaz spre plasmocit prin intervenia stimulului
antigenic i pierd receptorii membranari i i dezvolt
mecanismele moleculare necesare sintezei proteic 1311
Bnoglobulinele);
Un plasmocit sintetizeaz o singur clas de imunoglobuline; restul
populaiilor de limfocite B din organele limfoide vor sintetiza alte
clase de anticorpi;
Experimental s-a demonstrat distribuia difuz a acestor receptori
imunoglobulinici pe suprafaa limfocitelor B i redistribuirea lor
pentru a forma grupri polare de tipul bonetelor (fenomen de
capping) n cazul n care se produce stimularea antigenic.
Redistribuirea imunoglobulinelor de suprafa este urmat de
internalizarea lor, mpreun cu antigenul, prin endocitoz. Acesta
reprezint semnalul necesar pentru transformarea blastic a
limfocitelor B.
Markeri fenotipici neimunoglobulinici
Pe lng imunoglobulinele de suprafa, celulele B prezint o serie
de antigene i receptori care pot fi identificai cu ajutorul AMC.
Semnificaia acestor markeri nu este nc complet cunoscut.
Marea majoritate a markerilor respectivi sunt implicai n
interaciunile limfocitelor B cu celelalte celule. Astfel de structuri sunt :
antigene 1311 B (codificate de ctre CMH), care servesc ca un
dicionar de recunoatere a structurilor strine
receptorii pentru fragmentul FC al imunoglobulinelor G
receptorii pentru interleukine
receptorii pentru fragmentul C3 al sistemului complement
Limfocitele B formeaz rozete imune cu eritrocitele heterologe, n
prezena anticorpilor (de natur IgM) i a sistemului complement (aa zise
rozete EAC = eritrocite - anticorpi - complement).
311
receptori pentru mitogeni: limfocitele B sunt insensibile la aciunea

fitohemaglutininei i a concavalinei A (care sunt foarte active asupra
limfocitelor T) dar sunt activate de mitogeni lipopolizaharidici.
Limfocitele B sunt celule mai mici i dense i ader puternic de
suprafee de sticl sau nylon, comparativ cu limfocitele T.
Plasmocitele - reprezint ultimul stadiu de difereniere al
limfocitelor B. ntre limfocitul B activat (limfoblast B) i plasmocit exist
stadiul de plasmoblast.
sunt rar prezente n circulaie; apar n medulara ganglionilor limfatici,
pulpa roie splenic, lamina proprie a esutului limfoid respirator
(BALT), gastrointestinal (GALT) i mduv.
nu posed receptorii limfocitelor B pe suprafa, n schimb
imunoglobulinele secretate acoper ntreaga suprafa celular.
Plasmocitele pot secreta aproximativ 2000 - 10.000 molecule de
imunoglobuline pe secund. Anticorpii produi au aceeai specificitate
ca i moleculele imunoglobulinelor membranare ale clonei de celule B
din care provin plasmocitele.
Limfocitele B cu memorie - provin din celulele B mature, care
dup stimularea antigenic nu sufer diferenierea spre plasmocit, ci revin
la stadiul de limfocit mic, cu via lung (luni sau ani). Aceste limfocite cu
memorie imunologic nu posed receptori pentru F C, C3 sau IgD monomer.
Pot s fie mai uor stimulate dect celulele naive i mpreun cu
limfocitele T cu memorie - determin rspuns imun secundar.
Celulele NK (Natural Killer)
Celulele ucigae naturale distrug fr restricia CMH celule
tumorale, celule infectate viral sau bacterian sau celule proprii, modificate
antigenic.
Aceste celule au rol important n aprarea organismului, avnd rol
reglator asupra celulelor hematopoetice i n special asupra limfocitelor B
(regleaz anticorpogeneza).
Celulele NK au o durat redus de via, nu sunt aderente i nu sunt
fagocitare.
Aparin unei subpopulaii limfocitare distincte, numit LGL (large
granular lymphocites - limfocite granulare mari), a cror caracteristic
morfologic
principal
este
existena
granulelor
azurofile
intracitoplasmatice.
312
Celulele NK posed receptori pentru F C dar nu au receptori pentru

complement i nici imunoglobuline de suprafa. Prezena pe suprafaa lor
a markerilor de difereniere CD2, CD4 i producia de interleukin 2 face
plauzibil ipoteza derivrii celulelor NK din linia limfocitar T.
Celulele NK recunosc i leag spontan celulele int, pe care le
distrug foarte rapid (cteva ore). Existena i funciile celulelor NK sunt
influenate de ctre urmtorii factori :
vrsta subiectului (la vrstnici, activitatea i producia acestor celule
scade, fapt care explic o inciden mai mare a tumorilor n preajma
vrstei a treia)
factori genetici (exist indivizi cu un numr crescut de celule NK, n
timp ce alii prezint puine celule NK i o marcat predispoziie spre
tumori).
radiaiile, hormonii corticosteroizi, histamina, teofilina, stressul - scad
producia celulelor NK.
interleukina 2, interferonii, BCG, activeaz funciile lor citotoxice
nespecifice.
Celulele K (Killer)
Acest tip de celule realizeaz citotoxicitatea dependent de anticorpi
(ADCC = antibody dependent cellular cytotoxicity).
n acest tip de citotoxicitate, celula efectoare distruge nespecific orice
int care a fost recunoscut specific de ctre moleculele de anticorpi.
Pentru o singur celul int (Ex.: hematii, limfocite deviate neoplazic,
fibroblaste, etc.) sunt necesare aproximativ 100 molecule de IgG,
excesul de anticorpi inhibnd activitatea litic.
Interferonii nu activeaz ADCC.
Citostaticele inhib acest tip de citotoxicitate.
Celulele LAK
sunt celule ucigae activate prin intermediul limfokinelor (IL2 sau
INF).
efectul antitumoral al celulelor LAK este evident n sinergism cu
efectul celulelor NK
313
CAPITOLUL 41
ANTIGENE I IMUNOGENE
Antigenul (imunogenul) - este reprezentat de ctre orice substan
strin care poate induce declanarea unor reacii imunologice i care
poate interaciona specific cu efectorii imunitari.
Imunogenicitatea - capacitatea unei substane de a induce un
rspuns imun; de aceea, termenul mai corect pentru antigen este sinonim
cu imunogen.
Specificitatea antigenic - se refer la un anumit tip de rspuns
imun indus (caracteristic unui anumit antigen, unui anumit epitop)
1 epitop reprezint situsul de pe un antigen care
interacioneaz cu o molecul de anticorp i care imprim specificitatea
imunologic prin structura sa (proteic sau polizaharidic).
1 epitop este alctuit din civa aminoacizi sau
cteva polizaharide i reprezint imunogenul la scar molecular.
Proprietile fundamentale ale antigenului (imunogenului) sunt:
Imunogenicitatea
Specificitatea
FACTORI CARE CONDIIONEAZ

IMUNOGENICITATEA:
Condiii filogenetice
anumit substan este cu att mai imunogen, cu ct aceasta
este mai ndeprtat din punct de vedere filogenetic. Astfel, antigenele
bacteriene, virale, parazitare etc., ndeplinesc aceast condiie.
Constituenii proprii organismului pot deveni strini (nonself) dac sufer modificri induse viral, bacterian, tumoral, toxic, etc.
Uneori, nu sunt recunoscute ca self aa - numitele antigene
sechestrate anatomic, (din cristalin, testicul, etc.) - n momentul n
care acestea trec n mod accidental n circulaie (n urma
traumatismelor). Din cauza poziiei anatomice particulare, aceste
antigene cantonate n cristalin, gonade, creier nu sunt recunoscute ca
self de ctre sistemul limfoid n perioada embriofetal.
314
Caracterul de non-self nu este dat de prezena unor molecule unice,

originale pentru un organism, ci adesea este dat de ctre modificri
minime, care se traduc prin prezena unui aminoacid sau monozaharid
diferit.
Reaciile care apar n grefele de esuturi i organe (exogene) au
atras atenia asupra existenei pe suprafaa celulelor respective a unor
antigene care induc rspuns imun din partea receptorului, urmate de
respingerea grefei respective. Aceste antigene difer de la individ la
individ, exprimarea lor pe suprafaa celulelor fiind codificat de ctre
genele complexului major de histocompatibilitate uman, aflat pe
cromozomul 6. CMH posed 3 regiuni genetice: CMH clasa I, a II - a i a
III - a ce codific antigenele HLA corespunztoare (human leucocytar
antigens)si componente ale complementului (vezi cap. Baza genetic a
rspunsului imun).
Antigenele HLA clasa I - Sunt prezente pe suprafaa tuturor
celulelor nucleate din organism i reprezint adevrate carnete de
identitate biochimic i genetic pentru fiecare individ n parte. Pentru ca
un anume antigen s fie recunoscut de ctre un limfocit T citotoxic (CD 8) este necesar restricia HLA, restricia CMH. Aceste molecule fac
diferenierea self-non-self i devin inta sistemului imunitar n trei
situaii:
pentru respingerea de esuturi i organe incompatibile (non-self)
cnd suprafaa celulelor proprii e modificat prin antigene virale
tumorale etc.
cnd moleculele HLA sufer procese de uzur sau mutaii, ele devin
autointe care vor fi eliminate.
Antigenele HLA clasa a II-a au o distribuie celular mai limitat,
n special pe suprafaa celulelor imunocompetente (limfocit T, limfocit B,
macrofag) i au un rol esenial n declanarea reaciilor imunitare, prin
interaciuni i cooperri celulare, funcionnd ca un dicionar de
recunoatere a structurilor strine organismului.
Receptorii TCR de pe suprafaa limfocitelor T (receptori pentru
antigen) posed specificitate dubl: att pentru antigene, ct i pentru o
molecul HLA de pe suprafaa celulelor cu care interacioneaz.
315
n concluzie, antigenele HLA clasa I intervin n prezentarea

antigenelor endogene ctre limfocitele T citotoxice, n timp ce antigenele
HLA clasa a II-a se asociaz cu antigene exogene prelucrate, pe care le
prezint limfocitul T helper (CD4). Recunoaterea asociat a antigenului i
a produilor CMH, funcioneaz ca un sistem de siguran cu dou chei,
care pe de o parte limiteaz potenialul distructiv al limfocitelor i pe de
alt parte asigur eficiena rspunsului imun.
Astfel, se demonstreaz faptul c sistemul imunitar a evoluat n aa
fel nct ambele tipuri de molecule HLA servesc ca i indicatoare rutiere
pentru celulele T, ghidndu-le spre antigen.
Fig. nr. 22 - Receptorul pentru antigen al limfocitului T (dup Klein)
Domeniu variabil
Domeniu
constant
Membrana
citoplasmatic
Condiii fizico-chimice. Greutatea molecular.

Pentru ca o substan s fie imunogen, GM minim trebuie s fie
de aproximativ 10000 . Cu ct o substan posed o GM mai mare, cu
att imunogenicitatea acesteia crete, prin creterea numrului de epitopi.
Epitopii sunt situsuri antigenice specifice, capabile s interacioneze cu
molecule de anticorpi. Numrul de epitopi al unui antigen constituie
valena unui antigen. Imunogenicitatea antigenului este direct
proporional cu valena sa.
316
Fig. nr. 23 - Structura unui antigen (imunogen)
1-epitop cu specificitate x
2-epitop cu specificitate y
3-epitop cu specificitate z
3
1
3
2
2
Conformaia spaial a antigenului
Sela (1969) demonstreaz faptul c, din punct de vedere fizicochimic exist dou categorii de epitopi:
epitopi secveniali (lineari) - a cror imunogenicitate poate
fi modificat prin schimbarea secvenei monomerilor.
epitopi conformaionali - structuri stereo-spaiale
particulare, cu modificarea imunogenicitii prin modificarea
configuraiei spaiale (de obicei a proteinelor globulare.
Fig. nr. 24 - Structura unui imunogen conformaional
1
2
5
4
317
n majoritatea situaiilor, anticorpii produi de proteinele naturale

recunosc mult mai bine epitopii conformaionali, dect pe cei secveniali.
n aceste situaii, legturile antigen - anticorp sunt de tip lact cheie, pe baza potrivirilor de conformaie steric. Epitopii
conformaionali au o imunogenicitate crescut i o gam larg de
specificitate.
Accesibilitatea epitopilor
Zonele imunogene (epitopii) trebuie s fie dispuse la suprafaa
celulelor, pentru a fi accesibile efectorilor sistemului imunitar. Antigenele
corpusculare sunt fragmentate n macrofag i epitopii vor fi ulterior dispui
pe suprafaa acestuia (din aceast cauz, macrofagul reprezint principala
celul prezentatoare de antigen (CPA) care poate expune i zone
imunologice aa - zise ascunse).
Natura chimic a antigenului
Imunogenele sunt substane organice macromoleculare:
Proteinele
- n special cele cu greutate molecular mare sunt foarte bune
imunogene, mult mai eficiente dect celelalte.
Polizaharidele
- sunt mai puin imunogene dect proteinele.
Lipidele, acizii nucleici
- sunt slabe imunogene, dar imunogenicitatea acestora crete n
substane complexe (lipoproteine, nucleoproteine, etc.)
Complexitatea structural a moleculei de antigen
Cu ct heterogenitatea moleculei de antigen crete, cu att
imunogenicitatea este mai exprimat. Astfel, antigenele nucleoproteice,
glicoproteice, lipoproteice sunt mai bune imunogene dect antigenele
simple.
Izomerismul optic
Influeneaz imunogenicitatea, moleculele cu reziduuri de
aminoacizi levogiri (L) fiind mai imunogene dect cele cu aminoacizi
dextrogiri (D). (Explicaia este c moleculele L pot fi mai uor degradate
enzimatic n fagolizozomii celulelor fagocitare).
Rigiditatea moleculei de antigen
318
O molecul stabil, rigid este mai bun imunogen dect o

molecul flexibil. Spre exemplu, gelatina dei are o greutate molecular
mare este lipsit de rigiditate. Dac acestei substane i se mrete
coninutul n Tyr sau n Trp, molecula devine stabil i antigenic.
Persistena moleculei de antigen n organism
Persistena epitopilor n organism influeneaz imunogenicitatea
substanei respective. Polimorfonuclearele neutrofile distrug epitopii n
totalitate i funciile imune nu pot fi stimulate. Dac antigenul persist
nedegradat n fagocit, scade imunogenicitatea substanei respective, pn
la anularea ei. Se demonstreaz astfel nc o dat - importana degradrii
menajate a antigenului, cu expunerea epitopilor specifici.
Cantitatea de antigen
Dozele mici de antigene induc formarea unor cantiti mici
de anticorpi, cu mare afinitate i specificitate pentru antigenele
respective.
Dozele foarte mici de antigen stimuleaz n mod preferenial
limfocitele T, inducnd imunitatea mediat celular i chiar memorie
imunologic.
Administrarea unei doze foarte mari de antigen poate fi
urmat de fenomenul de paralizie imunologic, ce se caracterizeaz
prin lipsa rspunsului imun.
Modalitatea de administrare a antigenului:
Administrarea antigenelor n doze fracionate, la diferite
intervale - asigur un rspuns imun mult mai bun dect doza de
antigen unic.
n funcie de natura antigenelor i cantitatea acestora,
asocierea antigenelor poate produce un efect sinergic n cursul
imunizrii
Administrarea antigenelor mpreun cu anumii adjuvani
asigur o imunogenicitate superioar.
Antigenele solubile, macromoleculare sunt mai imunogene
cnd sunt inoculate intradermic, dect pe cale intravenoas.
Administrarea parenteral a antigenului ofer avantajele
contactului rapid cu celulele imunocompetente (protejeaz antigenul
de degradarea enzimatic posibil prin enzime digestive).
Toate aceste constatri experimentale stau la baza regulilor de
administrare ale vaccinurilor.
319
Rolul factorilor genetici

A fost demonstrat experimental pe linii genetic pure de oareci (linii
inbread). Astfel de experimente au dovedit faptul c markerii HLA pun
amprenta unicitii individuale a rspunsului imun. Spre exemplu, David
C. i Mac Devitt demonstreaz faptul c anumii oareci, incapabili de
rspuns imun la un antigen dat, pot produce, prin ncruciarea cu un
oarece hibrid (care rspunde la acel antigen) - un rspuns imun normal la
antigenul incriminat. Genele care controleaz reactivitatea imun au fost
denumite gene Ir (immune response, adic genele rspunsului imun
individualizat).
David C., analiznd semnificaia regiunii genetice I (a complexului
H2 de la oarece), afirm faptul c genele Ir au 6 categorii funcionale:
gene Ir care confer susceptibilitatea individului la boli infecioase
gene Ir care intervin n procese de cooperare celular
gene Ir care confer susceptibilitate crescut la boli autoimune i
alergice
gene implicate n sinteza unor mediatori imunologici
gene ce intervin n diferenierea celulelor imunocompetente
gene care codific respingerea de gref incompatibil
Factorii genetici influeneaz att mecanismele rezistenei naturale,
ct i mecanismele imunitii dobndite.
Vrsta organismului
Rspunsul imunologic al vrstelor extreme este mai slab (n mod
fiziologic) dect la maturitate.
La copii putem lua n discuie imaturitatea sistemului limfoid, n
timp ce la vrstnici putem constata declinul funciilor acestui sistem.
Alterarea rspunsului imunitar la subiectul vrstnic:
Diminuarea mecanismelor rezistenei naturale
Involuia timusului i alterarea funciilor diverselor subclase ale
limfocitelor T
Alterarea rspunsului imun umoral, calitativ i cantitativ
Cooperri celulare defectuoase: limfocit T - limfocit B
Diminuarea reactivitii limfocitelor
Consecinele patologice ale supravegherii imunitare la subiectul
vrstnic se produc prin fragilitate la aciunea agenilor etiologici infecioi
i prin frecvena crescut a maladiilor autoimune i a bolii canceroase.
320
Nicolleti C. i colaboratorii au studiat modalitile de alterare a

rspunsului imun umoral la vrstnici, pornind de la experimente pe
animale. Studiul demonstreaz faptul c anticorpii antifosforilcolinici
(antipneumococ) - produi de ctre oareci vrstnici (BALB C: 18 - 22 luni)
sunt diferii din punct de vedere structural i funcional, comparativ cu
anticorpii produi de ctre oarecii tineri (3-4 luni). Anticorpii produi de
ctre oarecii vrstnici au un coninut idiotipic mai srac i o capacitate de
legare a antigenului mai sczut.
MODALITI DE CLASIFICARE ALE

ANTIGENELOR
(dup OLINESCU)
1.
2.
3.
4.
-
Dup natura antigenelor:

Naturale (existente n natur)
Sintetice (obinute artificial)
Dup sursa lor:
Exoantigene (antigene exterioare organismului)
Endoantigene (antigene proprii organismului,
modificate prin tumori, infecii virale, mbtrnire, etc.)
Dup gradul de nrudire genetic:
Autohton (autolog) antigene proprii unui individ
Singen (izolog) - antigenele provin de la indivizi
ai aceleai specii, dar identici din punct de vedere genetic (ex.:
gemenii monozigoi sau linii de animale inbread).
Alogen (omolog) - provin de la subiecii aceleai
specii, diferii din punct de vedere genetic (ex.: sistemul ABO i
sistemul Rh)
Xenogen (heterolog) - antigenele provin de la
specii diferite.
Dup necesitatea prezenei limfocitelor T, antigenele pot fi:
Timodependente - pentru a declana reacii imune
au nevoie de prezena limfocitelor T (marea majoritate a antigenelor
naturale).
321
Timoindependente - nu necesit prezena

limfocitelor T, realiznd stimularea direct a limfocitelor B. De
exemplu: flagelina, endotoxinele, polivinilpirolidona, etc., cu epitopi
care se succed n mod repetativ.
5.
n funcie de necesitatea de prelucrare a antigenului, la nivelul
celulei prezentatoare de antigen - CPA.
Tipul I - nu necesit prelucrarea. Ex.: fibrinogenul,
proteinele Listeriei monocitogenes.
Tipul II - necesit doar desfurarea moleculei
de antigen, cu evidenierea epitopilor si. Ex.: lizozim, mioglobin,
ribonucleaz.
Tipul III - necesit degradarea moleculei
(ovalbumin, citocromul C)
6.
Natura antigenelor agenilor infecioi.
Antigene bacteriene (somatice i difuzibile):
Somatice
- ale peretelui celular: polizaharidul C, endotoxinele bacililor
gram- capsulare: polizaharidele pnemnococice
- ribozomale: antigen P al bacteriilor patogene
- flagelare: antigenul H al Salmonellei
- piliare: proteina M piliar streptococic
- Antigene parazitare, micotice, virale (somatice)
Difuzibile
- toxine: ex.: toxina difteric
- enzime extracelulare: ex.: hialuronidaza stafilococic.
7. Dup natura antigenelor organismului:
Antigene HLA clasa I
- exprimate pe suprafaa tuturor
celulelor nucleate ale organismului, confer noiunea de self
Antigenele HLA clasa II - exprimate pe suprafaa celulelor
care intervin n cooperri imunologice
Antigene eritrocitare:
- antigenele sistemului ABO, Rh,
MN (stabilesc regulile transfuzionale)
8. Dup modalitatea de utilizare a antigenelor:
n scop diagnostic: folosind antigene cunoscute, se pot
detecta prin reacii serologice - anticorpii specifici din serul de
bolnav.
n scop profilactic: pentru prepararea vaccinurilor:
corpusculare (ex.: bacterii cu virulen atenuat sau bacterii
omorte)
difuzibile (ex.: anatoxine, preparate din exotoxine)
322
9. Dup capacitatea de declanare a rspunsului imun:

Antigene incomplete - haptene
Haptena este o substan cu greutate molecular mic, incapabil
s produc singur un rspuns imun, dar care poate deveni
imunogen (poate induce sinteza anticorpilor) - prin cuplare cu o
molecul carrier (purttor)
Haptena - este de obicei de natur polizaharidic i confer n
mare parte specificitatea antigenului respectiv (are o GM sub
10.000 i aproximativ 1 - 10 epitopi)
induce preponderent rspuns imun umoral
Carrier- purttorul haptenei este de natur proteic
prin cuplare cu haptena determin apariia unui antigen
complet, imunogen
rspunsul imun indus este puternic, n special de tip mediat
celular
Haptenele autocuplante sunt substane cu greutate molecular
mic (ex.: sruri de diazoniu), care se pot cupla spontan cu
proteinele organismului, determinnd apariia unor afeciuni
dermatologice imunoalergice. Prin aceste haptene autocuplante sar putea explica i mecanismul alergiei la Peniciline.
Antigenul complet - substan capabil s produc singur rspuns
imun (ex.: polipeptidele, substane complexe chimic)
FACTORI CARE INFLUENEAZ SPECIFICITATEA

ANTIGENIC
Specificitatea antigenic este asigurat prin anumite pri ale
moleculei de antigen, denumite epitopi.
Un epitop este alctuit din civa aminoacizi sau cteva
polizaharide, dintre care unul este imunodominant i asigur
specificitatea antigenic. Specificitatea este influenat nu numai de
compoziia chimic a moleculei respective, ci i de conformaia ei steric
(epitopi conformaionali).
Orice modificare n structura chimic sau conformaional a unui
antigen duce la schimbri de specificitate.
S-au obinut informaii privind specificitatea antigenic, prin studii
experimentale asupra lipopolizaharidului Salmonellei (antigenul O).
Fig. nr. 25 Lipopolizaharidul genului Salmonella.
323
Lipidul A
Smburele polizaharidului
UR
UR
UR
uniti repetitive compuse

din 3-6 monozaharide
Specificitatea antigenic a Salmonellelor se datoreaz:

ordinii n care sunt dispuse aceste monozaharide
tipului de legtur chimic ( sau glicozidic)
ramificrii oligozaharidului.
Astfel, se explic specificitatea antigenic diferit a celor 1500 de
specii ale genului Salmonella.
Specificitatea epitopilor proteici depinde de:
secvena aminoacizilor n cazul proteinelor fibrilare
conformaia stereospaial a proteinelor globulare.
Valena antigenului este dat de numrul de epitopi al antigenului
i este direct proporional cu acest numr.
Structura unitii repetitive ale diverselor grupuri antigenice ale
genului Salmonella este:
Salmonella paratiphi A - formula epitopilor este 1,2,12.
Epitopul imunodominant 2, cu structura polizaharidic de tipul:
manoza paratoza
rhamnoza
galactoza
Salmonella paratiphi B - formula epitopilor 1,4,5,12

Epitopul imunodominant 5, cu structura:
manoza abequoza
rhamnoza
galactoza
COMPLEXUL IMUN ELEMENTAR (CIE)

CIE este complexul AG - AC format la nivel molecular, ntre epitop
(aparinnd antigenului) i paratop (aparinnd anticorpului).
324
Fig. nr. 26 Complexul imun elementar (dup Klein, 1991)
Imunoglobulina
Epitopi
Imunoglobulina
Legturile epitop - paratop sunt realizate prin fore fizice, (sunt

reversibile), structurile implicate fiind complementare steric (modelul
minilor care se strng)
Conceptul de imunon
Un antigen ideal trebuie s declaneze rspunsul imun primar i va
avea urmtoarele proprieti:
greutatea molecular s fie ideal (> 10.000 )
molecula s aib o structur linear, s fie flexibil, hidrofil i
capabil s interacioneze liber cu receptori de suprafa
rspunsul imun s necesite cooperri celulare minime
numrul minim de epitopi coninut s fie aproximativ 10. (Concept
elaborat de ctre Dintzis i colaboratorii - 1976)
325
CAPITOLUL 42
IMUNOGLOBULINE
STRUCTUR I FUNCII
Imunoglobulinele sunt glicoproteine (82 - 96% polipeptide i 4 18% carbohidrat) a cror sintez este indus prin prezena n organism a
unor substane strine (antigene). Dein rolul esenial n reaciile de
imunitate umoral.
Imunoglobulinele sunt secretate de ctre plasmocit, sub influena
stimulului antigenic specific; ele migreaz electroforetic - n marea lor
majoritate - n zona gamaglobulinelor i mai puin n cea a globulinelor.
Imunoglobulinele se gsesc n:
plasm
lichide extravasculare
saliv, lacrimi, lapte, etc. (anticorpi circulani)
esuturi (sistemul imun al mucoaselor)
fixai
citofil
pe
membrana
limfocitelor,
macrofagelor,
polimorfonuclearelor, mastocitelor, prin intermediul fragmentului lor
cristalizabil FC.
Observaie: Anticorpii nu pot strbate bariera hematoencefalic sau
filtrul renal (n condiii normale, fiziologice - deci nu apar n lichidul
cefalorahidian sau urin).
Imunoglobulinele reprezint aproximativ 20% din proteinele
plasmatice totale.
Funciile imunologice ale Ig sunt variate:

neutralizarea toxinelor bacteriene
neutralizarea efectului citopat indus de virusuri
formarea complexelor antigen - anticorp, cu activarea sistemului
complement n vederea aciunii bactericide
realizarea reaciilor citotrope
aprarea antibacterian i antiviral la nivelul porii de intrare a agenilor
etiologici, prin IgA secretorii
promovarea fagocitozei (opsonizarea specific)
realizarea citotoxicitii dependente de anticorpi
realizarea unor efecte nocive n unele situaii, precum reaciile de
hipersensibilitate i agresionarea structurilor self n bolile autoimune
rolul diagnostic, folosind diverse reacii antigen - anticorp
326
rolul terapeutic: ex. - folosind anticorpi monoclonali.

Studiul structurii imunoglobulinelor a fost iniiat de ctre R. Porter
i G. Edelman, care au scindat molecula imunoglobulinic n lanuri i
fragmente care au fost studiate ulterior, din punct de vedere biochimic i
funcional.
R. Porter (1959) - prin prelucrarea enzimatic a Ig cu papain,
obine trei fragmente, din care dou puteau fixa antigenul; (din aceast
cauz le-a denumit Fab = fragment antigen binding = fragment
capabil s lege antigenul) i unul care cristaliza, pe care l-a denumit F C fragment cristalizabil.
Fragmentul Fab leag antigenul monovalent, cu care nu formeaz
complexe vizibile (GM Fab: 45 k).
Fragmentul FC (GM: 55 k) fixeaz complementul i se poate lega
citofil la receptorii FC de pe membrana diverselor celule imunologice.
Fig. nr. 27, 28 - Structura unui monomer imunoglobulinic
Regiunea
balama
Fragment pentru
legarea
antigenului
Fragment cristalizabil
327
Prin scindarea cu pepsin, se obine un fragment bivalent, cu cele

dou fragmente Fab unite ntre ele, care particip la reacii de aglutinare i
precipitare.
G. Edelman - reducnd cu 2 mercaptoetanol legturile disulfidice
ale moleculei, a izolat 4 lanuri polipeptidice: dou lanuri mai grele, cu
greutate molecular de 50 k (lanuri H = heavy) i dou lanuri uoare, cu
greutate molecular de 20 - 25 k (lanuri L = light).
Lanurile Ig sunt unite ntre ele prin legturi disulfidice - S - S -.
Aceste legturi sunt eseniale pentru asigurarea structurii tridimensionale a
moleculei i formarea unor domenii, cu diferite funcii imunologice.
Lanurile L
sunt dou tipuri, distincte din punct de vedere
antigenic: k (kappa) i (lambda)
ntr-o molecul de imunoglobulin, lanurile uoare
sunt ambele fie , fie k
frecvena lanurilor Lk este mai mare (se ntlnesc
la aproximativ 60% din totalul populaiei)
sunt comune pentru toate clasele de imunoglobuline
i reprezint aproximativ 1/2 dintr-un lan greu H (216 aminoacizi)
Lanurile H
conin epitopi variai care confer caracterul de
clas al imunoglobulinelor:
lanurile H - aparin IgM
lanurile H - aparin IgG
lanurile H - aparin IgA
lanurile H - aprin IgE
lanurile H - aprain IgD
conin aproximativ 446 de resturi de aminoacizi,
dintre care 108-125 corespund regiunii variabile i 321-325 corespund
regiunii constante.
diferitele clase de catene H se asociaz cu funcii
efectoare diferite:
IgG - prezint cele mai multe particulariti funcionale ale AC
determin imunitatea pasiv la ft
sunt principale imunoglobuline de rspuns imun secundar
IgM - asigur rspunsul imun primar
e important n liza bacteriilor
328
monomerul constituie un receptor pentru antigen de pe

suprafaa limfocitelor B
IgA - asigur rezistena imunitar la nivelul mucoaselor
are o activitate important antiviral, la nivelul porii de
intrare
IgD - constituie un receptor pe suprafaa limfocitelor B, n fazele
timpurii ale diferenierii lor
IgE - are un rol de reagin, cu rol de mediator n reaciile alergice.
Studierea secvenelor lanurilor L sau H au artat faptul c n fiecare
lan polipeptidic exist zone variabile (notate V) situate spre captul amino
terminal i zone constante (notate cu C), situate spre poriunea carboxi
terminal a imunoglobulinei.
Zonele variabile ocup 1/2 din lungimea lanului L i respectiv 1/4
din regiunea lanului H.
Zonele VL + VH formeaz domeniul variabil al imunoglobulinei, ce
reprezint situsul de combinare al imunoglobulinei (denumit paratop) cu
epitopii. Complexul imun epitop - paratop este complexul imun elementar,
complexul imun la nivel molecular. O molecul monomer de Ig posed 2
paratopi. Suprafaa paratopului este de 100 2.
La nivelul paratopilor (situai la extremitatea distal a fragmentului
Fab) exist zone imunologice hipervariabile, ntre:
aminoacizii 24 - 34, 50 - 55, 87 - 89 pentru VL
aminoacizii 30 - 36, 50 - 56, 86 - 91, 95 - 100
pentru VH
Aceste
regiuni
hipervariabile
realizeaz
antigenicitatea
(imunogenicitatea) anticorpilor, fiecare paratop putnd s constituie la
rndul su un epitop pentru un alt anticorp (reeaua idiotip - antiidiotip
Jerne, cu rol probabil n ponderarea rspunsului imun).
Paratopii imunoglobulinelor conin i regiuni cu variabilitate mai
puin exprimat, aa - numitele regiuni cadru, care realizeaz
arhitectura spaial a situsului de combinare cu epitopii. Regiunile cadru reprezint aproximativ 85 % din lungimea domeniilor variabile.
Poriunile constante ale lanurilor L i H ale imunoglobulinelor
reprezint 1/2 din lanul L i 3/4 din lanul greu H. Legturile disulfidice
contribuie la realizarea domeniilor constante CL, CH1, CH2, CH3.
Domeniile variabile le putem denumi similar, VL, VH.
n concluzie, lanul L posed 1 domeniu variabil (VL) i un domeniu
constant (CL), pe cnd lanul H (greu) - conine un domeniu variabil (VH) i
3 comenii constante (CH1, CH2, CH3).
329
Domeniile CH2 i CH3 aparin fragmentului cristalizabil al

imunoglobulinei (FC), n timp ce domeniile VL, VH, CL, CH1 - aparin
fragmentului Fab.
Un domeniu conine aproximativ 100-110 aminoacizi; analiza
cristalografic cu raze X a artat faptul c domeniile imunoglobulinice
sunt formaiuni globulare compacte, rotunjite sub form de bucl,
lanurile polipeptidice fiind pliate la interior. Regiunile pliate compact sunt
mai protejate fa de proteoliz, comparativ cu zonele extinse, care sunt
foarte uor accesibile.
Fiecare domeniu imunoglobulinic este stabilizat printr-o legtur
- S - S -, situat central. Lanurile imunoglobulinice sunt orientate n
direcii opuse i stabilizate prin legturi de hidrogen intercatenare, astfel
nct iau o form tridimensional, denumit structur .
Fig. nr. 29 - Reprezentarea schematic a domeniilor din structura
imunoglobulinei (Klein)
Domeniu
imunoglobulinic
variabil
Domeniu
imunoglobulinic
constant
ntre domeniile adiacente se stabilesc dou tipuri de interaciuni:

interaciuni de tip cis - pe vertical, ntre dou domenii nvecinate
Interaciuni de tip trans - pe orizontal, ntre domenii situate pe
lanuri diferite
Diametrul unui domeniu este de aproximativ 3,5 nm.
n realizarea funciei de anticorp, o mare importan o are
regiunea balama, care confer flexibilitatea Fab pe FC, prin realizarea
unor unghiuri cu deschidere variabil cuprinse ntre 0 i 180. De aici
rezult forma monomerului imunoglobulinic - respectiv Y sau T.
- Regiunea balama are 15 aminoacizi. Are o structur primar unic,
poriunea ei central constnd din dou legturi disulfidice, legate la un
helix de prolin, care confer rigiditatea lanului polipeptidic,
restrngndu-i rotaia.
- Regiunea balama asigur transducia semnalelor de la Fab la F C i
este situat la jumtatea lanurilor grele H.
330
- Regiunea balama conine un situs care interacioneaz cu

fragmentul C1q al sistemului complement i poate interaciona cu
receptorul pentru FC de pe membrana limfocitelor B, PMN - lor sau
macrofagelor.
- Regiunea balama conine glicin, prolin, cistein n cantiti mari
i realizeaz o asociere ntre Fab i fragmentul FC.
331
Tabelul nr. 23. - Diverse funcii ale unor domenii ale moleculei de
imunoglobulin - IgG (dup Olinescu)
Fragmentul sau
Funcia
domeniul
VH+VL = Paratop sau
Leag antigenul (epitopii)

situs combinativ
Legturi asigurate ntre sistemul

combinativ i fragmentul cristalizabil
CH1+CL
Leag fraciunea C4,6 a sistemului

complement
Conine legturi disulfidice ntre

lanurile H (grele)
Unete fragmentul Fab i FC
Realizeaz transducia semnalelor de

Fab la FC, dup legarea epitopilor
Regiunea balama
Permite poziionarea n spaiu a Fab i

asigur
mobilitatea
moleculei
de
imunoglobulin
Leag
fragmentul
C1q
al
complementului
Leag C1q
CH2
Controleaz rata de catabolizare a

imunoglobulinei
Leag molecula la receptorul FC de pe

CH3
monocite i macrofage
Domeniu suplimentar la IgE (fixare pe

CH4
mastocite i bazofile); apare i la IgM
332
Fragmentul imunoglobulinic cristalizabil FC conine domeniile CH2

i CH3 ( CH4 la IgE i IgM) i posed urmtoarele funcii:
Interacioneaz cu proteinele sistemului complement (exist dou
situsuri de legare cu C1q, cte unul pentru fiecare monomer) i care
funcioneaz independent. Interaciunea cu factorul reumatoid se
realizeaz la nivelul domeniului CH2, molecula IgG de la reumatici fiind
diferit conformaional, comparativ cu cea a indivizilor sntoi.
Transportul transplacentar al imunoglobulinelor este posibil datorit
legturii moleculei prin FC, la membrana celulelor placentei.
Fragmentul FC conine determinani antigenici de clas: (IgG),
(IgM), (IgE), (IgA), (IgD) i de subclas: 1,2,3,4 (IgG1, G2,
G3, G4); 1,2(IgM1, M2); 1, 2 (IgA1, A2).
Fig. nr. 30. - Structura celor 4 subclase de IgG (Klein, 1991)
Confer proprietatea de citofilie; FC asigur interaciunea moleculei de

imunoglobulin cu receptorii FC de pe membrana macrofagelor,
limfocitelor, celulelor killer, celulelor NK etc., mai ales prin domeniul
CH3. La IgE, interaciunea cu mastocitele i bazofilele are loc prin
domeniul suplimentar CH4.
Reglarea catabolismului moleculei de imunoglobulin, domeniul CH 2
controlnd timpul de njumtire pentru diferitele clase i subclase de
Ig.
333
Fragmentul FC conine receptori pentru proteina A (SpA) stafilococic,

att la nivelul CH2, ct i la nivelul CH3. Interaciunea proteinei A
stafilococice cu IgG liber i - a gsit o aplicare practic: obinerea de
anticorpi hibrizi legai prin SpA, folosirea SpA n plasmaferez ca
mijloc de epurare a moleculelor de IgG care au legat antigene tumorale,
etc.
Fragmentul cristalizabil FC conine componenta carbohidratic a
imunoglobulinei, sub forma a dou catene laterale, cu structur simpl
sau complex. Componenta carbohidratic mpiedic interaciunile prea
puternice protein - protein (ntre domenii, ntre diverse molecule de Ig
sau ntre Ig i celule).
Coninutul n glucide (glucoz, galactozamin, manoz, fucoz,
acid sialic) variaz ntre 3% (IgG) i 13% din masa molecular a
diferitelor imunoglobuline.
Pe lng reglarea interaciunilor imunoglobulinice, glucidele
structurale ar putea avea i alte funcii:
Realizarea i/sau meninerea unei conformaii eseniale pentru sinteza
imunoglobulinelor
Creterea solubilitii imunoglobulinelor
Rol de spaiator ntre domenii i lanuri
Rol n reglarea catabolismului prin protecie fa de degradarea
proteolitic.
Experimental s-a demonstrat c regiunile F C ale Ig - lor pot fi
clivate proteolitic, cu producerea unor fragmente biologic active, cu rol de
reglare a rspunsului imun. Exemple de peptide imunoreglatoare, obinute
prin scindarea FC:
Rigina - este tetrapeptid: Gly - Gln - Pro - Arg, derivat din
domeniul CH3 al IgG1. Are rolul de stimulator al fagocitozei.
Tuftsina - este tetrapeptid: Thr - Lys - Pro - Arg, prezent n poziiile
289- 292 n domeniul CH2, la toate subclasele IgG umane. Are rolul de
stimulator al fagocitozei.
Peptidul biologic activ - deriv din scindarea CH3 la IgG1 umane;
are capacitatea de augmentare a secreiei de anticorpi.
HETEROGENITATEA IMUNOGLOBULINELOR
n definirea heterogenitii imunoglobulinelor se utilizeaz criterii:
greutatea molecular
constanta de sedimentare
coninutul de carbohidrai
334
rata de catabolizare (timp de njumtire)

ncrctura electric
sensibilitatea la substane reductoare
caracterizarea antigenic:
epitopii de clas i subclas (lanuri H)
natura antigenic a lanurilor L - , K (tipul
imunoglobulinei)
epitopi de allotip (lanuri L i H)
epitopi de idiotip (fragment Fab)
Astfel, heterogenitatea Ig - lor poate fi:
Heterogenitatea de izotip - de clas, de subclas, de tip
Heterogenitate de allotip
Heterogenitate de idiotip
Izotipul imunoglobulinelor
Heterogenitatea de clas, subclas i tip caracterizeaz toi indivizii
unei anumite specii.
Clasa imunoglobulinelor este dat de ctre epitopi caracteristici,
situai pe lanul H:
IgG - epitop caracteristic:
IgA - epitop caracteristic:
IgM - epitop caracteristic:
IgE - epitop caracteristic:
IgD - epitrop caracteristic:
Subclasa imunoglobulinelor este asigurat prin epitopi situai tot
pe lanurile H:
IgG - conin 4 epitopi de subclas:
1: IgG1 (66% din totalul moculelor IgG)
2: IgG2 (23% din total IgG)
3: IgG3 (7%)
4: IgG4 (4%)
IgA - are 2 epitopi de subclas:
1: IgA1
2: IgA2
IgM - epitopii 1 i respectiv 2 definesc subclasele IgM1
i IgM2.
Tipuri de Ig
335
epitopii lanurilor L caracterizeaz dou tipuri LK i L. ntro molecul de Ig cele 2 lanuri sunt identice (fie , fie K). Astfel fiecare
izotip are dou forme, sau K.
Allotipul imunoglobulinelor
Caracterizeaz anumite grupuri de indivizi ale aceleai specii i e
asigurat prin epitopi caracteristici situai la nivelul regiunilor constante ale
lanurilor L i H.
Spre exemplu, sistemul Gm - situat pe lanurile H ale IgG are 25 de
factori allotipici (Gm1,..., Gm25; Gm= gamma marker)
sistemul Am
- situat pe lanurile H2 ale IgA2 are 2 factori
allotipici, notai Am1, Am2.
factorii Km (Inv) - pe lanurile LK. (Kapa marker are 3 factori
allotipici: Km1, Km2, Km3).
Detectarea particularitilor allotipice ale imunoglobulinelor are
aplicaii n:
Studiul sintezei in vivo i a evoluiei Ig
aprecierea reuitei grefelor de esut hematopoetic
stabilirea sau excluderea paternitii
antropologie
genetica populaiilor.
Idiotipul imunoglobulinelor
Fiecare imunoglobulin are specificitate pentru un epitop, conferind
imunoglobulinelor heterogenitate de specificitate, dat de natura situsului
de combinare (paratopului).
Idiotipurile (idios = individual) au fost descoperite de ctre Oudin
(1974), care a demonstrat faptul c anticorpii anti Salmonella tiphi produi
pe iepure, injectai unui alt iepure cu acelasi allotip ca i donatorul, induc
formarea de anticorpi care reacioneaz specific cu anticorpii produi de
ctre primul animal. Se demonstreaz astfel c datorit unicitii lor
structurale, anticorpii la rndul lor pot deveni antigene.
Specificitatea idiotipic este legat de prezena regiunilor
hipervariabile ale lanurilor L i H, datorit prezenei unor epitopi
individuali, denumite idiotopi (epitopi). Colecia de idiotopi din structura
unei molecule de Ig formeaz idiotipul ei.
Fiecare Ig are un idiotip unic sau particular (idiotip privat); au
fost descrise i idiotipuri comune, (idiotip public), prezente pe
imunoglobuline diferite, care reacioneaz ncruciat. Exprimarea unui
anumit idiotip ar fi legat de genele care aparin familiei supergenice a
imunoglobulinelor.
336
Anticorpii specifici pentru idiotopi ar aciona ca elemente reglatoare

n activitatea sistemului imunitar (reeaua idiotip - antiidiotip Jerne) care
intervine probabil n ponderarea rspunsului imun.
Funcii biologice efectoare ale imunoglobulinelor
Imunoglobulina M
Apare sub dou forme: monomer (legat de membrane) i
polimer (liber n ser - pentameric).
IgM monomer
Constituie un receptor pentru antigen pe suprafaa
limfocitelor B.
Formele monomer se gsesc n ser n concentraii extrem de
reduse, n afeciuni imunologice precum: lupusul eritematos
sistemic, ataxia - teleangiectazia sau macroglobulinemia
Waldenstrm.
IgM pentameric
Cu o greutate molecular de aproximativ 950.000 i
formula (L2H2)5, lan caracteristic .
Fiecare pentamer conine un lan peptidic J (lan de legtur
- joining chain), care are rol n polimerizarea subunitilor
imunoglobulinice. Greutatea molecular a lanului J este de
aproximativ 20.000 . Datorit piesei de legtur, cele 5 uniti
monomerice sunt aezate radiar (n stea) cu 5 brae (vezi fig.
nr.31).
IgM pentamerice reprezint 5% pn la 10% din totalul
imunoglobulinelor din organism.
IgM constituie anticorpii de rspuns imun primar, care apar
dup primul contact cu antigenul. Exist pe Fab - urile
imunoglobulinei aproximativ 10 situsuri de legare cu antigenul
(valena - 10), dar efective ar fi doar 5 situsuri, pentru c restul ar
putea fi mascate.
Din cauza dimensiunilor mari, imunoglobulinele M nu pot
traversa bariera placentar (prezena lor la un nou nscut pune
diagnosticul infeciilor contactate n perioada intrauterin: infecia
rubeoloas, citomegalic, toxoplasmoza, etc.)
337
Imunoglobulinele M pentamere sunt principalele

imunoglobuline aglutinante, pot realiza i reacii de precipitare i
prezint o mare capacitate de activare a sistemului complement,
capacitate de aproximativ 100 de ori mai mare dect cea a
imunoglobulinelor G. Activarea sistemului complement prin
intermediul IgG se poate realiza numai cu condiia existenei a
dou molecule foarte apropiate, care s lege prin fragmentele FC
componenta C1q, condiie obligatorie pentru declanarea reaciilor
enzimatice activatoare. Este suficient o molecul IgM
pentameric pentru activare, deoarece se realizeaz condiia
obligatorie de legare a C1q ntre dou fragmente FC. Situsul
pentru C1q este situat la nivelul domeniilor C3 - C4 i devine
accesibil n urma schimbrilor de conformaie ale moleculei dup
fixarea antigenului. Lanul J (Joing) nu are nici un rol n fixarea
componentelor sistemului complement.
n dezvoltarea ontogenetic apare prima dat - clasa
imunoglobulinelor M; de asemenea IgM apar precoce i n
rspunsul imun.
Aceast clas de Ig confer i activitatea bactericid a
serului.
Imunoglobulinele M secretorii dimerice apar ca o consecin
a unui deficit n IgA secretorii.
Sinteza imunoglobulinelor M este cel mai puin influenat
de aciunea unor factori imunodepresori.
IgM reprezint forma sub care se gsesc anticorpii naturali
ai grupelor sanguine.
Concentraia IgM n ser este cuprins ntre 0,5 - 1,9 mg/ml,
iar concentraia lor extravascular este de aproximativ 20%.
Sinteza IgM se face ntr-un ritm de 6 - 8 mg / kg corp / zi iar
timpul lor de njumtire este cuprins ntre 5 i 7 zile.
Fig. nr. 31. Structura IgM pentamer (Klein, 1991)
338
Imunoglobulina G
Reprezint 75-80% din totalul imunoglobulinelor din serul
uman normal. Greutatea lor molecular este de circa 150 k.
Sunt imunoglobuline monomerice, apar dup stimulul
antigenic secundar. Moleculele IgG care apar n cursul stimulului
secundar sau prin comutare dup stimulul primar, inhib sinteza
anticorpilor IgM printr-un proces feed-back, intrnd n competiie cu
antigenele.
Concentraia n ser a IgG este cuprins ntre 8 i 12 mg/ml,
cu o durat de njumtire de aproximativ 23 zile. Sinteza IgG se
realizeaz ntr-un ritm de 30 mg/ml, cu o durat de njumtire de
aproximativ 23 de zile. Sinteza IgG se realizeaz ntr-un ritm de 30
mg/kg corp/zi. Lanul caracteristic este , cu 4 subclase 1, 2, 3, 4 corespunztoare IgG1, IgG2, IgG3, IgG4.
Sinteza moleculelor IgG aparinnd diverselor subclase este
condiionat de natura stimulului antigenic. Spre exemplu, antigenele
Rh activeaz sinteza anticorpilor IgG1 i IgG3, polenul activeaz
sinteza anticorpilor IgG4 iar dextranul induce sinteza IgG2.
Astfel, dozarea cantitativ a IgG totale ar putea fi uneori
irelevant, deoarece n unele afeciuni exist doar modificri la
nivelul subclaselor IgG, fr influenarea IgG totale. Spre exemplu,
n infecii severe ale aparatului respirator cresc mult IgG 2 i IgG4 n
dauna celorlalte subclase IgG.
Subclasele IgG difer ntre ele privind natura legturilor
disulfidice ntre lanurile grele, prin determinani de subclas i prin
proprieti biologice.
Tabelul nr. 24 - Proprieti ale subclaselor IgG. (Olinescu)
Proprietatea
Procent din totalul moleculelor IgG
Lan greu, epitopi specifici
Timp de njumtire specific
Fixarea complementului
Transfer transplacentar
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4

66%
23%
7%
14%
1
2
3
4
23 zile 23 zile 8 zile 23 zile
+
+
+
+
+
+
+
339
Imunoglobulinele G trec transplacentar i asigur aprarea

imun a nou-nscutului
Moleculele IgG activeaz complementul pe cale clasic,
excepia fiind subclasa IgG4.
Moleculele IgG au un rol esenial n neutralizarea toxinelor,
virusurilor, bacteriilor; intervin n reacii de citotoxicitate anticorpo dependent (ADCC).
Moleculele IgG promoveaz fagocitoza, fiind opsonine
specifice.
Moleculele IgG se pot fixa la piele, cu excepia IgG2.
Tabelul nr. 25 - Proprietile biologice ale diverselor clase de
imunoglobuline umane (dup Olinescu A).
340
Proprietatea
Clasa de imunoglobine
Lanul greu este de tip
IgG
Concentraia n ser (mg/ml)
8-12
Greutatea molecular (k)
150160
IgD
0,031,4-4,0 0,5-1,9
0,4
170 n
ser, 400
900
185
n
secreii
IgE
60
60
20
25
50
7
53
3
2-5
4
7;9;11
56
3
8-10
2
7
69
3
12-15
-
8
72
4
11-12
-
Nr. situsurilor combinative
2;4;6
Prezena lanurilor de unire J

Rezistena la 56C
Rezistena la 2-mercaptoetanol
Determinante izotipice
(subclase)
Sinteza (mg/kg/zi)
Catabolism (%/zi)
+
+
19
65
4
10-12
2 sau
10
+
+
++
++
8-27
12
6-8
14
0,4
?
?
2,5
5,1
2,8
2,3
++
Concentraia extravascular
(%)
Coeficient de sedimentare S
Greutatea lanului H (k)
Nr. domeniilor lanului H
Hidrai de carbon (%)
Numrul subclaselor
IgA
1;2;3;4 1;2
30
3
21 (la
Perioada de njumtire (zile)
IgG3=7)
Capacitatea de fixare a
+ (IgG4
complementului (cale clasic) nu)
IgM
0,0001
190
341
Imunoglobulina A
Clasa IgA este alctuit din IgA serice i IgA secretorii, cu
particulariti distincte.
Clasa IgA are o tendin evident de a produce polimeri cu
constante de sedimentare 10S, 13S, 15S, 18S, care corespund unor
imunoglobuline di-, tri-, tetra- sau pentamere.
Subclasele IgA au fost stabilite pe baza unor diferene
multiple i au fost notate IgA1 i IgA2.
Subclasa IgA1 - se gsete n proporie de 80% n ser i are lanul
mai scurt cu aproximativ 40 de resturi de aminoacizi. Epitopul caracteristic
de subclas este 1. Nu prezint markeri genetici allotipici pe FC. Viteza ei
de sintez este de aproximativ 24 mg/kg corp/zi, iar timpul su de
njumtire n ser este de aproximativ 6 zile.
Subclasa IgA2
- reprezint 20% din IgA serice, cu epitop
caracteristic de subclas 2. Pe catena H prezint doi markeri A2m(1)
corespunznd tipului caucazian i A2m(2) corespunznd raselor mongoloid negroide. Viteza de sintez a IgA 2 este 21,3 mg/kg corp/zi iar timpul de
njumtire n ser este de aproximativ 4, 5 zile.
Dup Schiff (1986), diferenele ntre subclasele IgA 1 i IgA2 in i
de structura regiunii balama (coninut n aminoacizi, rezisten la
proteoliz).
Imunoglobulinele A serice sunt prezente n special sub form
monomer (greutate molecular aproximativ 162 kilo); la om, formele
polimere sunt ntlnite mai frecvent n mieloamele cu IgA, cu grad de
polimerizare individualizat.
Funciile imunoglobulinelor A serice sunt foarte puin cunoscute:
Au activitate de anticorp extrem de slab
Ig serice au un efect opsonizant foarte slab, dei fagocitele
prezint receptori pe suprafaa lor pentru fragmentul cristalizabil
IgA serice nu pot fixa complementul i nici nu l pot activa
singure
La om, rolul IgA serice ar putea fi asociat cu ndeprtarea
unor cantiti mici de antigene provenite din alimente sau ar putea
lega antigene din snge pe care le-ar putea transporta la nivelul
mucoaselor (la nivelul sistemului imun al mucoaselor)
IgA serice pot participa, deci, la reacii de neutralizare i
precipitare.
Imunoglobulinele A secretoare (IgAs) sunt prezente n secreiile
de la nivelul mucoaselor. Apar sub form dimeric (60 - 80%), restul sub
form polimeric.
342
IgA secretorie este principala imunoglobulin existent n secreiile

salivare, nazale, gastrointestinale i mamare, fiind secretat de ctre
plasmocitele laminei propria.
IgA secretorii prezint o greutate molecular de aproximativ 400
k, formate din doi monomeri unii printr-o pies de legtur J (Joing).
Dimerul conine o protein suplimentar, denumit component secretor
sau piesa CS care este sintetizat de ctre celulele endoteliale. Piesa S
ajut la traversarea celulelor epiteliale de ctre dimer i confer rezisten
fa de aciunea proteazelor de la nivelul mucoaselor.
Aceast tanscitoz epitelial este favorizat de ctre un receptor
imunoglobulinic polimeric care are n componena sa i piesa secretorie.
Componentul secretor este o globulin nenrudit cu
imunoglobulinele i foarte bogat n glucide. Este format din 737
aminoacizi, cu secven cunoscut.
Dup modelul Heremans (1974), componentul secretor s-ar
nfura n jurul fragmentelor cristalizabile ale monomerilor IgAs,
extinzndu - se de la o regiune balama la alta, fapt care mrete stabilitatea
moleculei i, de asemenea rezistena la proteoliz prin intermediul
enzimelor existente n secreiile mucoaselor.
n diferite secreii ale organismului uman. IgAs se gsete n
concentraii diferite. Astfel, cantitile de IgAs sunt: n saliv: 28mg%; n
colostru: 151mg%; n secreii oculare: 7 mg%; n secreii bronice: 10 - 70
mg%; n intestinul subire: 75mg%; n vezicula biliar: 50 mg%; n
prostat: 25 mg%; n secreiile vaginale: 6 mg%.
343
Fig. nr. 32 - Structura IgA secretoare (Klein, 1991)
Componentul
secretor
Pies de legtur
Monomer IgA
344
Funciile efectoare ale IgAs se caracterizeaz prin:

aprare local antiviral (la poarta de intrare), suprimnd ataarea
virusurilor pe receptorii specifici
activitate bactericid crescut la poarta de intrare
rol de reglare a componenei florei microbiene de la nivelul
mucoaselor. Indivizii cu deficit n IgA sunt susceptibili la boli
autoimune, la infecii ale cilor respiratorii. Deficitul genetic n
IgAs se poate compensa prin IgM secretorii.
Protecia fa de infecii respiratorii i digestive ale nou nscutului,
prin prezena IgA secretorii n laptele matern. Sinteza proprie a
IgAs ncepe aproximativ la 30 zile dup natere. Sugarii alimentai
natural sunt mai protejai fa de infecii dect cei alimentai
artificial.
Mrirea aviditii fa de antigene i capacitatea IgAs de a
interconecta mai multe particule strine.
minimalizarea efectului toxinei holerice, probabil prin mpiedicarea

atarii subunitii B pe celulele epiteliului intestinal. Capacitatea
IgAs de a participa direct la distrugerea microorganismelor cu
proprieti invazive - este foarte controversat.
IgAs pot participa i n reaciile de citotoxicitate mediate celular dependente de anticorpi.
Anticorpii IgAs nu pot aglutina, precipita antigene corpusculare, dar
pot activa complementul pe cale alternativ (nu pe cale clasic).
Rolul opsonizant al IgAs este foarte slab (aproape absent).
Concentraia IgA serice este de 1,4 - 4 mg/ml cu timp de 1/2 de 7 zile.
Imunoglobulina E
IgE are o structur monomer, cu epitop caracteristic de clas .
Lanurile prezint 5 domenii i au o concentraie mare n hidrai
de carbon (11%). Greutatea molecular a IgE este de aproximativ
190 k.
IgE sunt prezente n snge n concentraii reduse (aproximativ 250
ng/ml de ser) sau 0,004% din totalul Ig.
Celulele care sintetizeaz IgE au fost evideniate preferenial n
mucoasele respiratorii gastrointestinale i n ganglionii regionali.
Timpul de njumtire al IgE circulante este de aproximativ 4 zile,
iar a celor fixate pe celule (mastocite, bazofile) este de 7 - 14 zile.
Anticorpii IgE nu activeaz sistemul complement, se leag prin
intermediul FC (domeniul CH4) pe membrana mastocitelor,
bazofilelor, inducnd degranularea acestora i eliminarea aminelor
vasoactive (histamina, serotonina, leucotriene, substana SRS - A,
factorul chemiotactic pentru eozinofile). De aceea, aceti anticorpi
sunt denumii anticorpi reaginici, hemocitotropi, fiind implicai
n procese de hipersensibilitate de tip I anafilactic i n aprarea
antiparazitar.
Rspunsul n IgE este precoce, imediat dup rspunsul IgM i
nainte de rspunsul IgG, nivelul seric IgE fiind influenat genetic
iar limfocitele T supresoare au un rol important n reglarea sintezei
lor.
Concentraia IgE n ser crete n alergii i parazitoze pn la 25.000 30.000 ng/ml.
IgE contribuie la ndeprtarea unor helmini din intestin, prin
intermediul unor factori chemiotactici pentru eozinofile i prin
expulzarea paraziilor din organele care conin muchi netezi care
se contract prelungit.
345
Efectul IgE n reaciile de Hipersensibilitate de tip I este

predominant nefavorabil.
Imunoglobulina D
Descoperit n anul 1965 de ctre D. S. Rowe i F.L.Fahey n serul
unui bolnav cu mielom.
Concentraia seric a IgD este foarte sczut - 40 mg/ml,
reprezentnd 0,2%- 1% din imunoglobulinele totale.
Greutatea molecular a IgD este de aproximativ 180 k i constanta
de sedimentare 7S.
Epitopul caracteristic de clas este . Lanul are 3 domenii
constante i o regiune balama foarte lung, cu o mare
susceptibilitate la proteoliza enzimatic. Molecula IgD este
monomeric, bivalent, cu un timp de njumtire foarte scurt
(aproximativ 3 zile).
Funciile biologice ale IgD sunt urmtoarele:
Receptor pentru antigen pe suprafaa limfocitelor B mature (B +
B) - IgD fixate.
IgD serice nu fixeaz i nu activeaz complementul, nu traverseaz
placenta, nu produc reacii citotrope (nu se fixeaz pe monocite,
limfocite, mastocite).
IgD fixate ar putea constitui receptori necesari n diferenierea
celular i n instalarea memoriei celulare
Concentraia IgD serice crete progresiv de la natere pn la vrsta
de 15 ani, dup care nivelul su rmne constant toat viaa.
IgD are o slab activitate de anticorp fa de antigene tiroidiene,
nucleare, insulin, proteine din lapte (efect nefavorabil - posibil
fenomene autoimune)
IgD are aciuni limitate n timp, prin marea susceptibilitate la
degradarea termic i enzimatic.
SISTEMUL IMUN AL MUCOASELOR (SIM)

Sistemul imun al mucoaselor este reprezentat prin esutul limfoid
asociat mucoaselor tractului respirator, digestiv, urogenital. SIM se
ntreptrunde cu sistemul imunitar sistemic dar ntre cele 2 sisteme exist
diferene:
346
Celulele SIM sunt distribuite n structurile limfoide ale laminei propria

a mucoaselor. Celulele SIM acioneaz preferenial asupra anumitor
antigene care pot adera la epitelii.
Celulele limfocitare B produc n mod preferenial IgA secretorii,
rezistente la degradarea proteolitic, spre deosebire de sistemul imun
sistemic, care determin formarea predominant de IgM i IgG.
Iniierea rspunsului imun este determinat de ptrunderea
antigenelor ingerate sau inhalate, pe calea celulelor epiteliale specializate
ale mucoaselor. n intestinul subire, epiteliul asociat foliculilor limfoizi
conine celule M (membranare) subiri, care transport antigenul spre
interior, printr-un sistem tubular. Celulele similare, care capteaz
antigenele au fost evideniate i n epiteliul bronhic, al criptelor
amigdaliene i n apendice.
Sistemul imun asociat cu intestinul este denumit GALT (gut
associated lymphoid system) iar cel asociat cilor respiratorii - BALT
(Bronchus associated lymphoid tract). Prezentarea antigenelor determin
migrarea limfocitelor T i B sensibilizate n ganglioni limfatici i de aici,
pe calea canalului toracic - n circulaia sanguin.
Dup ce au circulat prin limf i n sngele periferic, limfocitele se
rentorc la nivelul mucoaselor, datorit unor receptori imunologici de
stabilire a domiciliului (fenomenul de homing). Rentoarcerea
celulelor nu se face numai la situsul iniial de plecare, ci prin diseminare n
toate insulele limfoide ale submucoaselor. Aceast diseminare de limfocite
T i B sensibilizate amplific rspunsul imunitar prin antrenarea ntregului
sistem de aprare al mucoaselor. Astfel, sistemul imunologic comun al
mucoaselor Common mucosal immunological system ar explica
interrelaiile GALT i BALT (vezi fig. 33). Producia IgA secretoare este n
legtur cu sistemul imun al mucoaselor, n timp ce producia IgA serice
aparine sistemului imun sistemic. Aceast diferen este meninut i de
lipsa de corelaie dintre activitile SIM i SIS.
Pe lng IgAs, diferitele secreii ale mucoaselor conin i
imunoglobuline aparinnd altor clase; n mucoasa duodeno-jejunal exist
plasmocite productoare preponderent de IgM, n timp ce n mucoasa
gastric i nazal 3% - 5% dintre plasmocite secret IgG. Plasmocitele
productoare de IgA sunt ntlnite la nivelul tractului aeroalimentar
superior i n glanda lacrimal.
Aprarea imunitar la nivelul mucoaselor este rezultatul unor
mecanisme imunologice complexe (care includ Ig i celule NK)
mecanisme care se adaug funciei de barier natural pentru antigene
variate.
347
CONTROLUL GENETIC AL SINTEZEI

IMUNOGLOBULINELOR
Heterogenitatea extraordinar a imunoglobulinelor (aproximativ
10 anticorpi diferii - dup Urbain, 1987) se poate explica exclusiv prin
mecanisme genetice, n timpul dezvoltrii ontogenetice a limfocitului B
(Tonegawa, Premiul Nobel 1976).
Mecanismele genetice care asigur variabilitatea anticorpilor ar
putea fi explicate prin :
existena unor gene de variabilitate (V) care n timpul dezvoltrii
ontogenetice a limfocitului B sufer diverse mutaii (teoria mutaiei
somatice).
existena unui numr mare de gene separate care codific zonele
variabile VL i VH (teoria liniei germinative)
90
348
Fig. nr. 33 - Reprezentarea interrelaiilor GALT i BALT (dup Zarnea)
existena unui numr mare de gene de legtur J (Joing) care

favorizeaz recombinrile genetice ntre genele care asigur
variabilitatea (ipoteza recombinrilor somatice).
Sinteza imunoglobulinelor urmeaz etapele obligatorii :
c)
sinteza lanurilor polipeptidice H
d)
sinteza lanurilor uoare L
e)
asamblarea lanurilor L i H
f)
adugarea componentelor glucidice ale imunoglobulinei
g)
eliminarea moleculelor imunoglobulinice din plasmocit,
dup realizarea polimerizrii
h)
comutarea sintezei Ig
La om, genele care codific sinteza lanurilor :
LK - sunt localizate pe cromozomul 2
L - sunt localizate pe cromozomul 22
H - sunt situate pe cromozomul 14
349
Organizarea genelor codificante ale catenei H

Aparatul genetic este alctuit din exoni (zone codificante) i introni
(zone necodificante, care favorizeaz procesele recombinrilor genetice).
Prin splicing (rupere i nndire) - se elimin anumii exoni i se
obbin structuri foarte variate ale lanurilor imunoglobulinice.
Exonii codificani ai zonelor variabile H sunt :
V - de variabilitate (VH1 VH200)
D - de diversitate (DH1 - DH20)
J - de legtur (JH1 - JH4)
Exonii C codific zonele constante, cu specificitate de clas i
subclas. Succesiunea exonilor C este urmtoarea, dinspre captul 5 spre
3:
C, C, C, C, C
5 3
Fig. nr. 34 - Reprezentarea schematic a rearanjrilor genetice produse n

limfocitele B n cursul sintezei de IgM (Rougeon, 1985)
350
Trecerea de la o clas de imunoglobuline la alt clas de imunoglobuline,

prin procese de reasortare genetic, se numete comutarea de izotip.
Comutarea de izotip are loc numai n limfocitele B, mature din punct de
vedere imunologic.
Recombinarea exonilor unui lan H ncepe cu:
1 exon D(x) cu 1 Exon J(y), cu formarea structurii D(x)J(y).
Exemplu : D15 cu J4 D15J4
D1 cu J1 D1J1
1 exon V(z) cu complexul D(x)J(y)
Exemplu : V(11)D15J4, V(180)D20J3 etc.
Complexul VzDxJy codific zonele variabile H.
n final, VzDxJy sufer o recombinare cu un exon C :
VzDxJy + C IgM (de rspuns imun primar)
VzDxJy + C IgG (de rspuns imun secundar)
Fig. nr. 35 - Comutarea izotipic (Klein, 1991)
351
Fiecare gen CH are o secven Switch (de comutare) nspre

captul 5, secven ce favorizeaz comutarea izotipic.
Fiecare segment V sau D prezint nspre gena J aa - zise secvene
semnal de recunoatere. Aceste structuri, mpreun cu intronii (secvene spaiator), favorizeaz procesele recombinrii genetice prin formarea unui
sistem trunchi i bucl (stem and loop), de fapt o structur
tridimensional care aduce aproape ntocmai exonii care vor suferi
recombinri genetice, Dx - Jy, cu deleia enzimatic a segmentului ADN
dintre cele 2 regiuni implicate.
Procesul de legare combinatorial amplific diversitatea
anticorpilor, datorit variabilitii diferitelor puncte legare. Variaiile
joncionale sunt legate de o anumit imprecizie a situsurilor de
recombinare, care modific secvena ADN la nivelul jonciunilor VH - DH,
DH
JH
(VL -JL) limitate ca amploare n cazul catenelor L, reprezint o surs
crescut de diversitate n cazul catenelor H, datorit posibilitii de citire a
informaiei genetice D (de diversitate) n trei cadre de citire diferite, apar
modificri semnificative n secvena de aminoacizi.
Gradul de variabilitate (aproximativ) al lanurilor H este asigurat
prin asortarea aleatorie a:
200 gene V x 20 gene D x 4 gene J = 16.000 catene H
Numrul de variaii produse prin flexibilitate joncional este de
cte 2,5 pentru fiecare pereche VH - DH i DH JH. Diversitatea conferit de
genele DH i JH este apreciat cu factorul 5. n concluzie,
16.000 catene H x 2,5 x 2,5 x 5 = 500.000 catene H
La aceast cifr, se poate realiza diversitatea suplimentar (printr-un
factor N), diversitate produs probabil prin mutaii somatice sau prin
recombinri ntre segmente genetice ale laturilor L i H, care ofer un
repertoriu potenial de imunoglobuline - de miliarde de anticorpi diferii.
Organizarea genelor codificante ale lanurilor L
Sinteza lanurilor LK este codificat astfel pentru zonele variabile,
aproximativ
300-600 exoni Vk
5 exoni J, de legtur (4 activi)
Sinteza lanurilor L este codificat prin cteva gene V i 5 exoni J,
dintre care activi sunt doar 3. Zonele constante ale lanurilor uoare sunt
codificate prin 6 pn la 9 exoni C, cu specificitate de lan sau K.
Lanurile L au o diversitate genetic sczut.
352
Recombinrile genice se realizeaz ncepnd cu exonii V(x) J(y),

recombinri ce sunt amplificate prin prezena intronilor i a secvenelor
semnal de recunoatere. Numrul mare de gene Vk ofer o variabilitate
nalt a lanurilor uoare LK (600VK x 4J = 2400), aspect necesar pentru
realizarea variabilitii situsurilor combinative ale imunoglobulinelor.
n final, complexului V(x) J(y) i se ataeaz un segment constant C (z).
Ansamblul V(x) J(y)C(z) este transcris ntr-un ARN premesager, apoi
secvenele ARN care corespund intronilor i secvenelor genetice mute
sunt excizate, obinndu-se un mARN funcional care este codificat la
nivel ribozomal n lan L.
Posibilitile de variabilitate ale lanurilor L sunt sporite i prin
mutaii somatice punctiforme, cu referire special la genele V i J inclusiv
prin realizarea unei variabiliti la locul de recombinare. Prin asociere
combinatorial, o anumit caten H dat (indiferent de clasa sau subclasa
creia i aparine) este teoretic capabil s se asocieze cu oricare dintre
catenele LK sau L, produse de ctre celul. Aceast reunire este necesar,
pentru a realiza configuraia i specificitatea paratopilor.
Dei repertoriul potenial (teoretic) de anticorpi diferii atinge
cteva miliarde, repertoriul disponibil (practic) este de ordinul a cteva
milioane de paratopi diferii, prezeni la un moment dat n sistemul
imunitar al organismului respectiv. Numrul paratopilor disponibili,
efectivi, reali, este cu mult mai mare dect numrul antigenelor cu care
organismul respectiv interacioneaz pe parcursul vieii.
Genele care asigur diversitatea genetic a imunoglobulinelor fac
parte dintr-o familie supergenic V,D,J (familia supergenic a Ig) care
asigur i controlul genetic al variabilitii receptorilor pentru antigen de la
nivelul limfocitelor T (TCR) i a CD-urilor de difereniere dup
mecanisme similare celor prezentate anterior : recombinri ale unor gene
V, D, J, C; flexibilitatea joncional; unirea imprecis a segmentelor de
gene; asocierea combinatorial, mutaii somatice, etc.
Toate aceste evenimente genetice apar n cursul ontogeniei
limfocitelor B i T.
ANTICORPII MONOCLONALI
Anticorpii monoclonali (AMC) sunt anticorpi cu specificitate
restrns, care interacioneaz cu un singur epitop.
Producerea AMC a fost impulsionat datorit numeroaselor i
avantajoaselor aplicaii ale acestora:
353
APICAIILE AMC
Studiul receptorilor de suprafa celular, prin marcarea AMC cu
substane fluorescente sau radioactive. Astfel, prin AMC se pot
evidenia i antigene de difereniere limfocitar, care fac corelaia ntre
fenotipul limfocitului i funcia sa. Prin AMC se poate urmri
ontogeneza limfocitelor B i T, prin studierea grupelor de difereniere
CD (cluster of differentiation).
Spre exemplu, structura CD4 evideniaz un limfocit T helper, iar
structura CD8 caracterizeaz limfocitele T citotoxice i limfocitele T
supresoare.
Utilizarea AMC n scop diagnostic:
n boli infecioase cu etiologie bacterian, viral, micotic,
parazitar
n boli genetice (trisomia 21)
n sarcin (utiliznd AMC antigonadotrofin corionic)
n testarea compatibilitii HLA a grefelor
n identificarea diverselor tipuri de celule maligne n
organism
determinarea diferenelor antigenice ntre virusuri
studiul structurii i variabilitii genetice a anticorpilor
Utilizarea AMC n scop terapeutic:
Utilizarea AMC cu scopul neutralizrii infeciozitii virale
(inhibarea atarii virusului pe suprafaa celulelor susceptibile)
Utilizarea AMC ca factori imunosupresori n transplantele
de organe, n bolile autoimune i alergice (ex.: AMC anti-CD 3, CD4,
LFA-1)
Utilizarea AMC n terapia specific antitumoral
Utilizarea AMC pentru purificarea interferonilor n scop
terapeutic
Conjugarea medicamente - AMC, pentru vehicularea unor
citostatice
Cuplarea AMC cu imunotoxine, cu scopul potenrii
reaciilor de citotoxicitate. Metoda este util pentru distrugerea
celulelor int care poart pe suprafaa lor un numr redus de
antigene (cu imunogenicitate redus)
Imunolipozomii - realizarea unor conjugate lipozomi AMC,
cu scopul ghidrii lipozomilor spre anumite celule int
Tehnologia obinerii anticorpilor monoclonali
354
AMC se obin prin tehnologia hibridomului i sunt de fapt o

variant in vitro a proteinelor mielomatoase, deoarece se selecteaz o
singur clon de limfocite care sintetizeaz anticorpi cu specificitatea
dorit (pentru un singur epitop).
Utilizarea limfocitelor B normale este o metod care nu ofer
rezultate mulumitoare, deoarece plasmocitele nu supravieuiesc n culturi
de celule. Pentru a compensa acest neajuns, se realizeaz fuzionarea
celulelor B cu celule tumorale, care sunt imortale (au o capacitate de
supravieuire nelimitat n culturi de celule).
Celulele tumorale folosite sunt celule de mielom multiplu
(plasmocitom), care prolifereaz necontrolat, producnd cantiti mari din
aceeai imunoglobulin monoclonal.
Dup fuzionarea limfocitului B (care precizeaz tipul
imunoglobulinei monoclonale) cu celula mielomatoas, se adaug n
mediul de cultur hipoxantin, aminopterin i timin (mediul HAT). n
mediul HAT vor supravieui i se vor multiplica nedefinit numai celulele
de hibridom, care produc hipoxantin guanin - ribozil transferaza. Celulele
nefuzionate mor.
Celulele de hibridom (fuzionate) sunt distribuite n plci cu godeuri,
respectiv o celul hibrid / godeu.
Se selecteaz astfel clona dorit care se multiplic n vitro, dup
care se va inocula intraperitoneal la un oarece consangvin, care va
produce ulterior cantiti mari de imunoglobuline monoclonale (20 mg de
protein la 1 ml de lichid ascitic, zilnic recoltndu-se aproximativ 2 - 10
ml de lichid).
Dei randamentul metodei de obinere a AMC este bun, inocularea
repetat a AMC de origine murin la om - va stimula puternic rspunsul
imun al gazdei fa de proteina exogen; exist chiar riscul inactivrii
anticorpului inoculat.
Pentru ndeprtarea acestor neajunsuri, s-au obinut anticorpi
himerici, alctuii n zona variabil VL i VH ntocmai ca AMC murini, dar
cuplai cu CL, CH1, CH2, CH3 umane. i aceti anticorpi himerici sunt
imunogeni, singura speran n diminuarea imunogeneticitii lor fiind
obinerea AMC prin tehnologia ADN - ului recombinant, cu specificitate
izotipic uman.
355
Fig. nr. 36 - Schema producerii

(Zarnea, 1990)
356
anticorpilor monoclonali
CAPITOLUL 43
SISTEMUL COMPLEMENT
Sistemul complement (C) reprezint un sistem biologic de
amplificare a rspunsului imun, constituit din 9 fraciuni (C 1 - C9) i 11
proteine globulare distincte (C1 - alctuit din subfraciunile C1q, C1r, C1s).
Funciile biologice ale sistemului complement sunt variate:
Bacterioliza (liza bacteriilor, mai ales a bacteriilor gram negative)
Liza virusurilor mari nvelite sau liza celulelor infectate cu virus
Promovarea fagocitozei (componentul C3 constituie o opsonin
specific)
Activarea degranulrii mastocitelor i bazofilelor
Reacii de citotoxicitate (liza celulelor strine sau liza celulelor proprii,
realizat n boli autoimune, hemoliz imun)
Rol n inflamaie (anafilotoxin, chemotactism, creterea
permeabilitii vasculare i contracia muchilor netezi, etc.)
Factorii sistemului complement se gsesc n ser n stare inactiv,
dar pot fi activai enzimatic, pe calea clasic i pe calea alternativ
(properdinic).
Activarea componentelor sistemului complement se realizeaz prin
clivare proteolitic, n urma acestui fenomen rezultnd dou fragmente
diferite a sau b:
Un fragment activ n clivarea componentului urmtor n secven
Un fragment ce se fixeaz pe membrana celular.
Activarea componentelor se realizeaz n sistemul de cascad
enzimatic. Etapa esenial a activrii este obinerea fraciunii C 3, placa
turnant ntre activarea C pe cale clasic i cea pe cale alternativ.
Activarea pe cale clasic ncepe de la C 1, e iniiat de prezena
complexului AG-AC i are o evoluie rapid i eficient. Proteinele
specifice cii sunt C1, C2 i C4.
Activarea pe cale alternativ ncepe de la C 3 i este mai lent. Calea
properdinic este declanat prin intermediul endotoxinelor bacteriene,
proteazelor lizozomale sau agregatelor imunoglobulinice (IgA, IgE).
Calea de activare altern prezint proteine specifice: factorii D, B, I, H
i Properdina (P).
357
ACTIVAREA SISTEMULUI COMPLEMENT PE CALE

CLASIC
Calea clasic este activat prin sisteme antigen anticorp situate pe
suprafaa unor membrane celulare.
Componentul C1 este unitatea de recunoatere a sistemului
complement i este alctuit din trei subuniti C 1q, C1r, C1s meninute
asociate n prezena ionilor de calciu.
C1q are o greutate molecular de 400 k i este alctuit din 6
subuniti, reunite n Y, aspectul conferit fiind acela de buchet de lalele.
Fiecare extremitate are aspectul globular i reprezint situsuri de legare pe
domeniul CH2 al IgG i probabil CH3 al IgM. Interaciunea cu antigenele
determin o modificare conformaional a imunoglobulinelor, care
descoper situsul de legare de pe F C pentru C1q. n cazul IgM, legarea
i activarea C1 poate fi efectuat de ctre o singur molecul, n timp ce n
cazul IgG sunt necesare dou molecule de imunoglobulin G, situate foarte
aproape una alta, pe suprafaa celulei. Diferitele subclase de IgG au o
capacitate de legare a C inegal: IgG 3>IgG1>IgG2. IgG4, IgA, IgD, IgE nu
prezint receptori pentru sistemul complement.
Activarea unei fraciuni se noteaz C x . C 1q se fixeaz pe situsul
S1 al membranei celulare. C1q activeaz C1r i C1s. C1q,1r,1s se leag prin
legturi necovalente n prezena calciului, realiznd factorul C 1 .
C 1 scindeaz C2 i C4 n fragmentele C2a, C2b i C4a, C4b.
Fragmentul C4b se ataeaz de membrana celular n poziia S 2, apoi se
leag C2a n acelai situs, n prezena ionilor de magneziu.
Enzima C2aC4b reprezint C3 convertaza clasic, ce cliveaz
fragmentul C3 n dou fragmente: C3a i C3b. Fragmentul C3b se ataeaz pe
membrana celular n situsul S2, alturi de C4b2a. Fragmentul C3a trece n
faz lichid, ndeplinind diverse roluri imunologice.
Complexul C4b2a3b are rolul C5 convertaz, care scindeaz factorul C5
n fragmentul C5a, care trece n faz lichid i C5b care ataeaz n situsul
S3. Reaciile enzimatice se ncheie la C 5, dup care urmeaz simple reacii
de adsorbie. C5b leag C6 i C7, rezultnd C5b67, la care se ataeaz apoi C 8
(tot n situsul S3), rezultnd complexul C5b678. Complexul rezultat prezint
ase poziii de legtur pentru C9, rezultnd un complex decamolecular
activat C5b6789.
Din punct de vedere funcional, moleculele complementului
C5b,C6,C7,C8,C9 reprezint complexul de atac al membranei, care va realiza
funciile citolitice, prin crearea unor microcanale membranare prin care se
pierde coninutul celular.
358
Fig. 37 - Reprezentarea fazelor de activare ale sistemului complement

(Zarnea)
359
Tabelul nr. 26 - Principalele proprieti ale proteinelor sistemului

complement (Zarnea, 1990)
Greutatea
Concentraia
Mobilitatea
Componentul
electroforetic
molecular ()
seric (g/l)
C1
900.000
200-300
C1q
410.000
150-180
C1r
C1s
85.000
85.000
50
100
C2
110.000
30
C3
C4
205.000
210.000
C5a 11.000
C5b 195.000
128.000
121.000
155.000
79.000
93.000
25.000
220.000
109.000
80
400-450
80
75
53
80
200
200
1,5
10-25
180
C5
C6
C7
C8
C9
B
D
P
C1INH
360
CALEA ALTERNATIV (PROPERDINIC)

Factorii de activare ai acestei ci sunt reprezentai prin factori
variai (endotoxine, Ig polimerizate, properdina). Principalul factor de
iniiere al cii se numete Fi (factorul de iniiere), cu GM de 170 , care este
o pseudoglobulin format din dou lanuri peptidice.
Factorul de iniiere activeaz factorul B (1 glicoproteina cu
greutate molecular 93 ) i l cliveaz n fragmentul B b (ce se unete cu
C3b, rezultnd C3bBb) i fragmentul Ba ce trece n faz lichid (reacii
catalizate prin proteina H i Mg2+).
Complexul C3bBb reprezint convertaza solubil C3, care va activa
componentul C5, cu formarea ulterioar a complexului de atac al
membranei celulare (C5b6789).
Factorul B este supus clivrii n cele 2 fragmente B b i Ba sub
aciunea factorului D ( globulin cu GM 24 ). Fragmentele Ba trec n
faz lichid, n timp ce fragmentele B b se vor ataa la alte molecule C 3b,
complexele C3bBb fiind stabilizate sub influena properdinei P (cu GM 223
, protein tetrameric). Se formeaz convertaza properdin dependent, cu
formarea complexului de atac al membranei.
361
Fig. 38 - Calea alternativ de activare a sistemului complement

(Haeney, 1984)
Mecanisme de control ale activitii sistemului C

Pentru a preveni eventuale boli autoimune, cu agresionarea
structurilor proprii exist sisteme complexe de reglare ale activitii
sistemului C. Cele mai cunoscute sunt urmtoarele:
Factorul C1 inhibitor (C1INH)
Recunoate factorii C1r i C1s i le inhib activitatea. Factorul C1INH
este o glicoprotein cu o GM de 105 k, care nu influeneaz concentraia
de C1 nativ, inactiv.
362
Factorul I
Inactiveaz factorii C2, C4 i activitatea cii alternative.
Factorul I (cofactor H) cliveaz i distruge C3b (inhibiia
preferenial a cii alternative se realizeaz prin intervenia competitiv a
factorului H, care va forma complexul inactiv C3bH, complex ce
nlocuiete fragmentul Bb din convertaza C3bBb).
Degradarea enzimatic a factorului Bb diminueaz activitatea cii
alternative.
Factorul C4BP (n corelaie cu factorul I) sunt responsabile pentru
reglarea activitii C4b.
Vitronectina (proteina S) previne legarea complexului C5b67 pe
suprafaa membranelor biologice (inhib activitatea complexului de
atac al membranei).
Factorii XI i XII ai coagulrii controleaz activitatea C1 fa de C2 i
C4 n calea clasic.
FUNCII BIOLOGICE ALE COMPONENTELOR

SISTEMULUI C
Cele mai importante proprieti biologice ale sistemului
complement se refer la intervenia n procesele inflamatorii i aprarea
antiinfecioas. Realiznd sinteza acestor proprieti s-a confirmat
experimental faptul c:
C1 are rol n neutralizarea viral.
C1q, C1r, C1s iniiaz liza virusurilor i precipitarea complexelor imune.
C2 crete permeabilitatea vascular i stimuleaz contracia muchilor
netezi.
C3a i C5a
- au rol de anafilotoxine i au rol chemiotactic (factorul C 5a este cel mai
important factor chemiotactic al gazdei)
- produc contracia muchilor netezi
- cresc permeabilitatea vascular, prin aciunea lor combinat asupra
mastocitelor, bazofilelor i determin aflux leucocitar n esuturile
infectate
- rol n eliminarea unor complexe imune
363
- C5a activeaz enzimele lizozomale i stimuleaz fagocitoza prin PMN.

C3b - realizeaz imunoaderena (reprezint o opsonin specific i
promoveaz fagocitoza).
- asigur deplasarea complexelor imune n zonele n care rspunsul
imun este mai intens
- favorizeaz mecanismele citotoxicitii dependente de anticorpi
(ADCC).
C4b - realizeaz imunoaderenden
- rol important n neutralizarea viral
C5b - iniiaz liza celular.
C6,7,8,9 - complex de atac al membranei (realizeaz liza celular).
Reglarea sintezei componentelor sistemului complement

Reglarea genetic a componentelor sistemului complement este
asigurat prin genele CMH clasa a III a. Genele codificante ale C 2, C4 i
ale factorului B sunt localizate la nivelul braului scurt al cromozomului 6
uman.
Reglarea biochimic
Sinteza proteinelor sistemului complement este reglat i prin
citokine (spre exemplu, INF stimuleaz sinteza C2, IL1 i IL6 stimuleaz
sinteza C3) sau histamine (receptorul pentru histamin H 1R stimuleaz
sinteza componentelor C, spre deosebire de H 2R care poate uneori inhiba
sinteza).
Mecanismele de reglare i control cantitativ i calitativ (funcional)
ale componentelor sistemului C sunt extrem de complexe, la nivel genetic,
celular i molecular.
364
CAPITOLUL 44
BAZELE GENETICE ALE RSPUNSULUI IMUN
Baza genetic a rspunsului imun este asigurat de ctre un
complex de gene strns asociate, cu rol esenial n compatibilitatea
esuturilor, recunoaterea antigenelor strine, reglarea rspunsului imun,
individualitatea i specificitatea rspunsului imun denumit complex
major de histocompatibilitate (CMH).
La om, informaia genetic pentru CMH este localizat pe braul
scurt al cromozomului 6, cu locusurile genetice (A,B,C) ale CMH clasa I,
cu locusurile (D/DR, DQ, DP, DN) ale CMH clasa a II a. Locusurile
genetice C2,C4S,C4F, Bf codific sinteza unor componente ale sistemului
complement.
Ansamblul genelor CMH codific sistemul HLA (Human
Leucocyte Antigens), descoperit de ctre Dausset, prin studii fcute asupra
aglutinabilitii leucocitelor.
ORGANIZAREA GENETIC A CMH

Organizarea genetic a CMH clasa I
Locusurile genetice A,B,C codific antigenele HLA clasa I, care
sunt prezente pe suprafaa tuturor celulelor nucleate din organism i
asigur individualitatea genetic i biochimic a fiecrui individ n parte.
Gena B ocup o poziie central pe harta regiunii, fiind situat la o
distan aproximativ egal de gena A i gena D/DR (aproximativ 0,85 cM).
Polimorfismul sistemului HLA se explic prin existena mai multor
alele pentru fiecare locus genetic n parte. Pentru exemplificare, exist cel
puin 24 de alele distincte pentru locusul A i cel puin 50 de alele distincte
pentru locusul B.
Organizarea genetic a CMH clasa a II-a

Regiunea genetic HLA-D conine 5 subregiuni distincte: DR, DQ,
DP, DN, DO, iar regiunea HLA-I conine genele Ir, de rspuns imun
individualizat.
Genele CMH clasa a II-a ce codific lanuri sunt desemnate prin
litera A, n timp ce genele CMH clasa a II-a ce codific lanurile ale
moleculelor HLA - sunt desemnate prin litera B.
365
Spre exemplu, subregiunea genetic HLA-DR cuprinde locusurile

genetice HLA-DR A1, HLA-DR A2, HLA-DR B1, HLA-DR B2,
etc., cifra asociat indicnd o anumit specificitate a antigenului.
Moleculele DR-B1 codific specificitile DR de la DR1 la DRW18,
moleculele DR-B3 codific specificitatea DRW52, iar DR-B4 codific
DRW53.
Subregiunea HLA-DQ conine dou seturi de gene HLA-DQ A1 i
HLA-DQ B1, respectiv HLA-DQ A2 i HLA-DQ B2, ultimele dou fiind
pseudogene. Lanurile DQ- i DQ- sunt extrem de polimorfe.
Moleculele DQ- codific specificitile DQW1 - DQW9. Deoarece
fiecare n parte are 2 subregiuni DQ, cte una pe fiecare din cei doi
cromozomi (matern i patern), nseamn c exist dou gene diferite DQA1 i dou gene DQ-B1, care se altur tip cis-trans. mperecherea de
tip cis se refer la asocierea lanurilor sau codificate de ctre genele
aceluiai cromozom, pe cnd recombinarea trans se refer la
mperecherea genelor de pe cromozomi opui. Moleculele codificate prin
recombinarea trans a genelor se numesc molecule hibrid i sunt cauze
importante de asociere a sistemului HLA cu diferite boli.
Subregiunea HLA-DP conine, de asemenea, dou seturi de gene
(HLA-DP A1, HLA-DP B1 i HLA-DP A2 cu HLA-DP B2), ultimele dou
fiind de fapt pseudogene. Moleculele DP codific specificitatea pentru
antigenele DPW1-DPW6. Exist la heterozigoi 4 gene distincte DP, care se
pot recombina cis i trans n anumite condiii.
Subregiunile DN i DO
Subregiunea DN conine o singur gen HLA-DN A, iar
subregiunea DO conine gena DO-B, gene care n mod normal nu se
exprim in vivo dar pot fi puse n eviden prin reacii in vitro. n prezent
nu se cunoate funcia acestor gene.
Regiunea genetic I - codific rezistena individual la infecie
Fig. nr. 39 - Organizarea genetic a CMH uman [1]
366
Hrile genetice clasice plaseaz genele Ir (de rspuns imun

individualizat) n cadrul CMH clasa a II-a.
Organizarea genetic a CMH clasa a III-a

Structura sa este polimorf. Exist 4 alele care determin patru
forme alternative ale factorului properdinic (BF), care pot fi evideniate
prin separare electroforetic:
o form cu migrare rapid (fast form BF sau BF-F);
o form cu migrare lent (slow form BF sau BF-S);
o form rar cu migrare rapid (BF-F1);
o form rar cu migrare lent (BF-S1).
Exist 2 alele pentru codificarea factorului C2 (S.C) (C2C i C2A)
- prezente n mod constant i o alel C2QO prezent foarte rar.
Exist 7 alele codificante pentru locusul C4A i 3 alele codificante
pentru locusul C4B (10 alele codificante pentru factorul C4 al sist. C).
Antigenele HLA codificate de ctre CMH clasa I i II au structuri
imunoglobulin - like (sunt glicoproteine membranare integrate) i au un rol
extrem de important n procesele de recunoatere imunologic
Bazele genetice ale heterogenitii imunoglobulinelor
Sistemul imunitar uman posed o capacitate virtual nelimitat de a
produce anticorpi diferii. Diversitatea genetic a superfamiliei genice a
imunoglobulinelor este asigurat prin recombinri variate ale
segmentelor genice V (de variabilitate), D (de diversitate), J (de legtur),
C (constante), procese genetice care asigur att variabilitatea
imunoglobulinelor dar i a moleculelor imunoglobulin-like, cu rol n
interaciunile celulare (molecule HLA clasa I, clasa a II-a, receptorul
celulei T, receptorii CD2, CD4, CD8).
Alturi de procesele de recombinare ale segmentelor V, D, J, C,
pentru asigurarea diversitii lanurilor L sau H exist i alte surse de
diversitate genetic a imunoglobulinelor:
Mutaiile somatice
Acest tip de mutaii apar att n regiunile V, corespunztoare
situsului de legare al antigenului, ct i n zonele adiacente, denumite
regiuni cadru. AC de tip mutant apar n fazele tardive ale rspunsului
imun.
Flexibilitatea de legare
367
Alt i Honjo au semnalat posibilitatea adugrii unor nucleotide

inexistente n ADN-ul din celula embrionar la jonciunea DH-JH. Ele
formeaz o regiune nou, N, introdus n structura ADN de ctre o
polimeraz ADN, prezent n celulele B imature. Ea poate aduga la
ntmplare nucleotide la extremitile 3 ale unei catene ADN, nainte de a
lega situsurile de jonciune.
Asocierea combinatorial
Este procesul prin care o caten H dat, indiferent de clasa sau
subclasa creia i aparine, este teoretic capabil s se asocieze cu oricare
dintre catenele LK sau L produse de ctre celul.
Posibilitatea comutrii clasei de imunoglobuline
Analiza genetic a locusului CH a demonstrat faptul c genele
respective sunt precedate de ctre secvene de comutare (switch), cu
rol de situs activ n schimbarea clasei lanurilor H. Aceste recombinri sunt
nsoite de deleia regiunii C i a altor regiuni din genom intercalate. Se
presupune c intervin n acest mecanism, dou proteine cu rol n comutare,
care recunosc i leag dou regiuni switch, ce preced gene diferite. Astfel
se poate realiza comutarea chiar la gene ndeprtate, cum ar fi C C.
Demonstrnd potenialul uria de amplificare a informaiei genetice
prin reasortarea genelor, familia supergenic a imunoglobulinelor codific
i majoritatea receptorilor sistemului imunitar.
ANTIGENELE HLA
Structura antigenelor HLA clasa I
Antigenele de histocompatibilitate sunt glicoproteine membranare
integrate. Sunt alctuite dintr-o caten grea (similar imunoglobulinelor),
cu 3 domenii extracelulare (de cte 90 aminoacizi fiecare), un domeniu
transmembranar i un domeniu transcitoplasmatic. Catena are un
domeniu situat aminoterminal (2) n care exist situsurile recunoscute de
ctre celulele sistemului imunitar. Restul moleculei aparine unor regiuni
ct.
368
Catena este asociat necovalent cu o caten uoar, 2

microglobulina. Aceasta are dou molecule asociate, Qa i Tla, care fac
parte, de asemenea, din familia supergenic a imunoglobulinelor. Funciile
moleculelor Qa i Tla sunt mai puin cunoscute i se pare c acioneaz n
domeniul recunoaterii antigenului. Nu se cunoate de ce exist acest
sistem doar pentru moleculele CMH clasa a I i pentru moleculele CMH
clasa a II-a - nu. (v. Fig. nr. 40).
369
Fig. nr. 40 - Structura moleculelor HLA I i HLA II [1]
Structura antigenelor HLA clasa a II-a
Moleculele HLA clasa a II-a sunt dimeri, respectiv catena este

catena grea (GM: 35 k) i are domeniile A, E; catena este catena
uoar (GM: 28 k) (structur Ig - like) i are domeniile A, E. Fiecare
dintre aceste domenii posed cte 90 aminoacizi. Pe domeniile 1, 1, 2 se
structureaz situsurile n care vor ptrunde antigenele pentru care exist
specificitate. Polimorfismul extraordinar al antigenelor HLA - este asigurat
prin reasortri genetice ale genelor de variabilitate (V), diversitate (D), de
legtur joining (J), constante ( C) (v. Fig. nr. 24).
Rolurile imunologice ale antigenelor HLA clasa I

Aceste molecule sunt prezente pe suprafaa tuturor celulelor
nucleate din organism. Reprezint adevrate carnete de identitate
biochimic i genetic pentru fiecare individ n parte. Pentru ca un anume
antigen s fie recunoscut de ctre un limfocit T citotoxic CD8 - este
necesar restricia HLA.
370
Aceste molecule fac diferenierea self - non-self i devin inta

sistemului imunitar n 3 situaii:
pentru respingerea de transplante de esuturi i organe incompatibile
(non-self);
cnd suprafaa celulelor e modificat prin antigene virale, tumorale sau
substane chimice.
cnd moleculele HLA sufer modificri prin mutaie, devin autointe
care vor fi eliminate.
Rolurile imunologice ale antigenelor HLA clasa a II-a

Aceste molecule au o distribuie celular mai limitat, n special pe
suprafaa celulelor imunocompetente (limfocit B, limfocit T, macrofag,
etc.). Uneori, celulele care n mod normal nu exprim pe suprafaa lor
molecule HLA clasa a II-a (spre exemplu - celulele endoteliale sau
tiroidiene), le pot exprima n condiii necunoscute. Exprimarea anormal a
acestor antigene a constituit un element important pentru explicarea
asocierilor sistemului HLA cu diferite boli (v. Tabelul nr. 10).
Moleculele HLA clasa a II-a au un rol esenial n declanarea
reaciilor imunitare, prin interaciuni i cooperri celulare, funcionnd ca
un dicionar de recunoatere ale structurilor strine organismului.
Interaciunile eficiente ntre limfocitele TH (CD4) i macrofagele care
prezint antigenele, ca i cooperarea celular dintre limfocitul T i B, au
loc numai dac celulele respective posed antigene Ia, care funcioneaz ca
i elemente de restricie CMH.
Dup Buss este probabil c genele care codific antigenele Ia sunt
gene Ir, dar nu toate genele Ir codific antigene Ia. Antigenele Ia
(immunity associated) au un rol important n generarea unei decizii a
organismului (dac declaneaz sau nu un rspuns imun).
Limfocitele T posed receptori cu specificitate dubl (TCR=T cell
receptor), att pentru antigene, ct i pentru o molecul CMH de pe
suprafaa celulelor cu care interacioneaz. Pentru a activa limfocitele T,
macrofagul prezint pe suprafaa sa att antigenul, ct i o molecul HLA
clasa a II-a (o molecul Ia). Celula T activat trimite semnale stimulatoare
(helper) unei celule B. Limfocitele T supuse restriciei CMH sunt
denumite limfocite T-CMH. Exist ns i limfocite TH-Ig, care
funcioneaz i fr restricie CMH.
371
Tabelul nr. 27 - Specificitile HLA cunoscute n prezent
n concluzie antigenele HLA clasa I intervin n prezentarea

antigenelor endogene ctre limfocitele T citotoxice, n timp ce antigenele
HLA clasa a II-a se asociaz cu antigene exogene prelucrate, pe care le
prezint limfocitului TCD4. Recunoaterea asociat a antigenului i a
produilor CMH, funcioneaz ca un sistem de siguran cu dou chei,
care, pe de o parte limiteaz potenialul distructiv al limfocitelor i pe de
alt parte asigur eficiena rspunsului imun.
Astfel, se demonstreaz faptul c sistemul imunitar a evoluat n aa
fel nct ambele tipuri de molecule HLA, codificate de ctre genele CMH,
servesc ca i indicatoare rutiere pentru celulele T, ghidndu-le spre
antigen.
372
RELAIA: ANTIGENE HLA - PREDISPOZIIE LA

BOAL
Ipoteze ale acestei asocieri
Au fost propuse 5 ipoteze pentru a explica asocierile sistemului
HLA cu diferite boli. Acestea sunt urmtoarele:
Moleculele HLA reprezint receptori pentru agenii etiologici
Anumite molecule HLA pot constitui receptori pentru virusuri,
toxine, alte substane strine. Spre exemplu, antigenul HLA B27 este un
receptor posibil pentru un virus insuficient definit, care ar cauza spondilita
anchilozant.
Ca suport a acestei ipoteze este observaia conform creia i alte
molecule de pe suprafaa celulelor imunologice pot constitui receptori
pentru virusuri (de exemplu, structura CD4 a limfocitului T constituie un
receptor pentru virusul imunodeficienei umane.)
Moleculele HLA sunt selective pentru anumite peptide.
Este posibil ca o anumit secven de aminoacizi din structura
moleculei HLA - s poat lega (n mod anormal), un fragment antigenic
peptidic, rezultnd un complex imun nerecunoscut ca self, complex care
va fi atacat de ctre un limfocit CD8 (citotoxic). Prin aciunea
limfocitului, se declaneaz boala.
Receptorul pentru antigen al celulei T (TCR) confer predispoziia
la boal
Recunoaterea antigenului de ctre celula T este sub restricia
moleculei HLA, codificat de CMH. Spre exemplu, presupunnd c
indivizii cu HLA B27 prezent (cu risc pentru spondilita anchilozant) pot
s formeze un complex imun ntre molecula B27 i virusul cauzal,
complex recunoscut n mod corespunztor de ctre un TCR, atunci toi
indivizii cu acelai tip de TCR - vor face boala manifest.
Agenii etiologici care mimeaz structura antigenelor HLA
373
Din cauza similaritii structurale a antigenului cu molecula HLA,

rspunsul imun va fi deturnat mpotriva antigenului HLA respectiv,
acesta fiind rspunsul autoimun. Aceast teorie a ctigat cea mai mare
credibilitate din cauza unei observaii experimentale: antigenul HLA B27
este asociat cu sindromul Reiter n aceeai msur ca i cu spondilita
anchilozant. Sindromul Reiter la indivizi cu antigenul HLA B27 pozitiv,
se declaneaz adeseori dup mbolnviri de dizenterie provocate de
Shigella flexneri. S-a constatat faptul c tulpinile bacteriene amintite
posed o plasmid, care codific o protein cu 5 aminoacizi din lanul
proteic, identici cu 5 aminoacizi din structura antigenului HLA B27.
Deoarece anumii indivizi au aceast similaritate de structur HLA cu
agentul etiologic, ei sunt predispui la boal, n lumina teoriei expuse.
Exprimarea moleculelor HLA clasa a II-a pe suprafaa celulelor este
aberant
Aceast ipotez se refer doar la bolile asociate cu sistemul HLA
clasa a II-a. Moleculele de pe suprafeele celulare sufer un proces de
uzur continu. Degradarea moleculelor HLA clasa a II-a de pe
suprafaa celulelor poate fi similar unui proces de prelucrare a
antigenului. Un fragment peptidic al unei astfel de molecule prelucrate
poate s fie asociat n situsul de legare al unei molecule HLA clasa a II-a,
pentru a forma un complex imun i pentru a declana un rspuns
imunologic mpotriva acestei molecule specifice.
Modele de calcul statistic privind asocierile sistemului HLA

cu anumite stri patologice
Cercettori americani au cuantificat asocierea anumitor stri patologice cu
un anumit antigen HLA predispozant, prin calcularea riscului relativ (RR)
pentru o anumit afeciune :
RR
p c
p c
p+ = numrul pacienilor care au un anumit antigen HLA particular;

p- = pacienii care nu au acel antigen HLA;
c+ = numrul indivizilor din lotul de control care posed antigenul HLA
c- = indivizii din lotul de control care nu au acel antigen HLA particular.
Se observ faptul c riscul relativ este cu att mai mare, cu ct
antigenul HLA predispozant pentru o anumit boal este mai ntlnit la
pacieni.
374
Riscul absolut (RA) reprezint ansa ca un individ care posed

antigenul HLA predispozant s i contacteze afeciunea respectiv. RA se
calculeaz dup formula:
p
RA P
c
P = prevalena bolii n populaia general;

p+, c+ = au semnificaia de mai sus.
Deoarece exist diferene semnificative n frecvena unui antigen
HLA ntre diferitele grupuri rasiale, este necesar s comparm grupul
populaional studiat cu indivizi din lotul de control din aceeai ras.
Strile patologice cunoscute pentru care prezena unor

anumite haplotipuri HLA constituie un risc relativ
Din cele prezentate, se deduce faptul c toate variaiile individuale
ale rspunsului imun sunt corelate cu antigenele codificate de ctre
complexul major de histocompatibilitate.
Pornind de la identitatea genetic a frailor gemeni monozigoi i
diversitatea genetic a celorlali frai (dizigoi i frai obinuii), se pot
aduce noi informaii privind controlul genetic al rspunsului imun i al
evoluiei unei infecii. Sunt puine date din literatur privind rezultatele
experimentelor efectuate pe gemeni; studiile respective au constituit un
model de cercetare.
n ncheiere, se vor prezenta strile patologice cunoscute (v. Tabelul
nr. 10). pentru care prezena unor anumite haplotipuri HLA constituie un
risc relativ:
375
Tabelul nr. 28 - Strile patologice asociate sistemului HLA (Abba Terr)
BOALA
Boala Hodgkin
Hemocromatoza idiopatic
Boala Behcet
Hiperplazia
suprarenal
congenital
Spondilita anchilozant
Rectocolita ulcerohemoragic
Sindromul Reiter
Uveita anterioar acut
Tiroidita subacut
Psoriazis vulgar
Dermatita herpetiform
Enteropatia glutenic
Sindromul Sicca
Boala Addison idiopatic
Boala Graves
Diabetul insulino-dependent
Miastenia gravis
Lupus eritematos sistemic
Scleroza multipl
Nevrita optic
Sindromul Goodpasture
Artrita reumatoid
Pemfigus
Nefropatia cu IgA
Tiroidita Hashimoto
Anemia pernicioas
376
HLA
A1
A3
B14
B5
B47
RISC
RELATIV:
1,4
8,2
4,7
6,3
15,4
B27
B27
B27
B27
B35
CW6
DR3
DR3
DR3
DR3
DR3
DQW7
DR2
DR3
DR4
DR3
DR3
DR2
DR2
DR2
DR1
DR4
DRW8
DR4
DR4
DR5
DR5
87,4
14
37
10,4
13,7
13,3
15,4
10,8
9,7
6,3
3,7
9
3,3
6,4
2
2,5
5,8
4,1
2,4
15,9
9,6
4,2
3,6
14,4
4
3,2
5,4
CAPITOLUL 45
ROLUL LIMFOCITELOR N RSPUNSUL IMUN
Participarea limfocitelor n rspunsul imun este iniiat prin
interaciunea cu un antigen specific.
Celulele imunologice prezint receptori, structuri specifice care
recepioneaz semnale din mediul ambiant, semnale pe care ulterior le
traduc n limbaj biochimic spre constituenii celulari.
Receptorii sunt proteine sau glicoproteine membranare integrate n
membrana celular i conin zone distincte pentru:
recunoatere
transducia semnalului
iniierea rspunsului imun.
Prezena receptorilor de pe suprafaa celulelor imunologice poate fi
identificat cu ajutorul:
serurilor antireceptor
prin tratare cu anticorpi marcai fluorescent
izotopilor radioactivi.
ROLUL LIMFOCITELOR B N RSPUNSUL IMUN

Receptorii pot fi distribuii uniform pe ntreaga suprafa a celulei
(difuz) sau pot fi distribuii discontinuu, la un pol al celulei (ex.:
fenomenul de beretare). Exist o mare mobilitate a Ig - receptor, fapt
care explic beretarea la nivelul suprafeei limfocitului B, dup
contactul cu antigenul.
Evenimentele descrise mai sus se refer la o aglomerare a
complexelor AG receptor imunoglobulinic al limfocitului B, (iniial
pete fluorescente) pn la formarea unui conglomerat AG receptori
imunoglobulinici, dispui la un pol al celulei (bereta).
Complexele AG-AC formate vor fi endocitate, transducia
semnalelor declannd modificri biochimice complexe, care se
concretizeaz n:
mrirea permeabilitii membranei celulare
activarea ATP azei
creterea nivelului celular de cAMP i cGMP.
377
sintez crescut de acizi nucleici i fosfolipide.
378
Fig. 41 - Reprezentarea schematic a fenomenului de beretare

(Gotze i Brger, 1986)
n urma acestor evenimente biochimice se produce transformarea

blastic a limfocitului B angajat i limfoblastul rezultat se difereniaz apoi
n plasmocit, care prezint o sintez accelerat de glicoproteine
(imunoglobuline). Plasmocitul este principala celul productoare de
imunoglobuline (2000 molecule/secund), respectndu-se succesiunea
urmtoarelor evenimente:
Sinteza lanurilor polipeptidice (separat pentru lanurile H - sinteza
unui lan H durnd 60 secunde i separat lanurile L cu o durat de
sintez de 30 de secunde)
379
Asamblarea moleculei de imunoglobulin ine cont de clas i

subclas, n modaliti variate:
H + H H2 ; H2 + L H2L ; H2L + L H2L2
H + H H2 ; L + L L2 ; H2 + L2 H2L2
H + L HL ; H + L HL ; HL + HL H2L2
Apoi moleculele de imunoglobulin H2L2 ajung n max. 20 minute
prin cisternele ergastoplasmice n aparatul Golgi, de unde sunt transportate
prin vezicule de membran i secretate.
Ataarea componentei glucidice se realizeaz n timpul transportului
intracelular
Etapa final se refer la secreia imunoglobulinelor, expuse iniial pe
suprafaa plasmocitului i apoi clivate enzimatic i eliminate n
circulaie.
Imunoglobulinele polimerice sunt secretate de ctre celul n forma
final (spre ex.: IgM- pentamer), chiar dac n plasmocit Ig se gsesc
numai sub form de monomeri.
Imunoglobulina A secretoare este secretat de plasmocit sub forma
unui dimer cu o pies J, care la trecerea prin celula epitelial a mucoasei
primete componentul secretor sintetizat de ctre celula respectiv.
La un moment dat, un plasmocit (sau oricare celul din seria lfB
limfoblast proplasmocit) produce un set de imunoglobuline care aparin
aceleai clase, subclase, tip, allotip, idiotip, cu aceeai specificitate i
aviditate pentru antigen. Prin mecanisme genetice se poate realiza
comutarea de izotip a Ig - lor.
Angajarea limfocitului B este nsoit i de un rspuns proliferativ
puternic, nu numai de o diversificare n morfologia i funciile celulei
(nainte de imunizare predomin limfocitele B mici, dup imunizare
predomin limfoblastele i plasmocitele).
n cursul diviziunilor blastice ale limfocitului B activat, unele
limfoblaste (prin diviziune asimetric) revin la aspectul de limfocit B mic,
cu memorie imunologic i cu o durat prelungit de via.
Pentru antigenele timodependente, rspunsul imun generat de
limfocitul B are nevoie i de cooperarea limfocitelor TH.
Pentru antigenele timoindependente (flagelina polimerizat,
polizaharide bacteriene) angajarea limfocitului B se face fr intervenia
limfocitului T.
380
PARTICIPAREA LIMFOCITULUI T N RSPUNSUL

IMUN
Limfocitele T sufer fenomenul de transformare blastic (prin
fenomene biochimice precum cele discutate anterior la limfocitul B), fr
etap de beretare, deoarece limfocitele T nu posed receptori
imunoglobulinici pentru antigen.
Angajarea limfocitelor T n rspunsul imun se realizeaz sub
aciunea unui antigen specific, (avnd ca rezultat o expansiune clonal) sau
sub aciunea unor mitogeni nespecifici (precum fitohemaglutinina i
concavalina A), ce determin o activare policlonal.
Dup Reinhery i colaboratorii (1986), activarea i proliferarea
limfocitelor T este determinat n principal de ctre interleukina 2 (IL 2).
Celulele T n repaus posed puini receptori pentru IL 2, dar dup activare
numrul acestor receptori crete semnificativ.
Creterea progresiv a numrului de receptori pentru IL 2 este
urmat de o faz de sintez i secreie accentuat de IL 2, care se leag pe
receptorii celulelor care au produs-o.
Legarea unei cantiti suficiente de IL2 amorseaz diviziunea
celular i creterea sintezei acizilor nucleici.
n absena stimulilor caracteristici pentru limfocitul T, reapar n
numr mare receptorii pentru antigen (TCR) i reducerea numeric a
receptorilor pentru IL2. Exprimarea tranzitorie a receptorilor pentru IL2
funcioneaz ca un sistem de siguran, care elimin riscul proliferrilor
necontrolate prin IL2. Aa se explic de ce proliferarea celulelor T poate fi
stimulat prin IL2 provenit din surse exogene. IL2 induce sinteza altor
citokine i stimuleaz i activitatea limfocitelor T citotoxice.
Tabelul nr. 29 Principalii mitogeni limfocitari utilizai n Imunologie
(dup Zarnea)
Denumirea
Sursa
Greutatea
molecular
Fitohemaglutinina (PHA)
Phaseolus vulgaris
140.000
Concavalina (ConA)
Canavalia ensiformis
51.000
Lectina de soia
Glycine max
120.000
Lectina din germeni de gru
Triticum vulgare
36.000
Lectina din ricin (RCA)
Ricinus comunis
120.000
381
Dup cum rezult din tabelul precedent, mitogenii nespecifici sunt

polizaharide extrase din plante, care produc expansiunea clonal doar a
limfocitelor T.
Rolul limfocitelor T n imunitatea celular este major n:
Aprarea fa de infecii bacteriene, n special mpotriva acelor ageni
etiologici care prezint parazitism celular: Mycobacterium, Brucella,
Ricketsia, Treponema,
Aprarea antiviral (limfocitele T citotoxice distrug celulele infectate
cu virusuri)
Aprarea antiparazitar (ex.: Toxoplasma, Plasmodium, Trypanosoma,
Leishmania)
Aprarea antimicotic (ex.: Candida, Cryptococcus, Histoplasma,
Supravegherea imun fa de celule strine, mutante, mbtrnite sau
modificate tumoral
Respingerea transplantelor i grefelor incompatibile
Hipersensibilitatea de tip tardiv (HTT) aspect imunopatologic (reacie
de hipersensibilitate de tip IV, produs mai probabil prin intervenia
limfocitelor T specializate TDH (T delayed hipersensitivity) i a
macrofagului activat. HTT reprezint un aspect al IMC.
Memoria imunologic prin angajarea sa n rspunsul imun, limfocitul
T transformat blastic revine la aspectul de limfocit T mic, devenind
principala celul recirculant cu memorie imunologic (iniiaz
rspunsul imun secundar)
Reglarea imunologic limfocitul T helper reprezint dirijorul
orchestrei celulelor imunologice implicate n rspunsul imun. Pe de
alt parte, limfocitele T secret o diversitate de citokine cu rol n
amorsarea reaciilor imune (activarea macrofagelor, limfocitelor, etc.) i
n procesele inflamatorii.
382
CAPITOLUL 46
TIPURI DE IMUNITATE
CLASIFICARE DUP CELULA EFECTOARE
Imunitate umoral (IU) efectorii: limfocitul B i plasmocitul
Imunitatea mediat celular (IMC)- limfocitul T cu subpopulaiile
sale i macrofagul activat
CLASIFICARE DUP MODALITATEA DE

CTIGARE A IMUNITII
Imunitate activ
- amorsarea mecanismelor imunologice, cu apariia limfocitelor cu
memorie imunologic
- sunt implicate ambele forme de imunitate (IU+IMC)
- este de lung durat
- singurul dezavantaj faptul c imunitatea activ are nevoie de un
interval de laten pentru a se instala.
- Natural se obine dup trecerea printr-o infecie sau la un contact
cu un antigen
- Artificial se obine n urma vaccinrilor
Imunitate pasiv
- se realizeaz numai pentru imunitatea umoral
- este util n terapia bolilor infecioase, deoarece rspunsul imun este
foarte prompt, cu dezavantajul c protecia imunologic este de
scurt durat
- Natural: - se refer la trecerea IgG transplacentar de la mam la ft
sau trecerea IgA secretorii (prin laptele matern)
- Artificial: - se refer la administrarea serurilor imune (seroterapie)
- transferul IMC este imposibil de realizat practic; n mod
teoretic, IMC s-ar putea transfera printr-o limfokin
(factor de transfer) i limfocite T obinute de la un
subiect imun, care n final ar determina imunitate activ.
383
CLASIFICAREA DUP EFECTUL BIOLOGIC AL

IMUNITII
Efect biologic favorabil - supraveghere imunologic i corect aprare
antiinfecioas i antitumoral
Efect biologic nefavorabil - manifestri imunologice aprute prin
alterri calitative sau cantitative ale rspunsului imun (constituie
obiectul de studiu al Imunopatologiei)
384
CAPITOLUL 47
DIAGNOSTIC IMUNOLOGIC
REACII ANTIGEN - ANTICORP
Asocierea unui anticorp cu antigenul su specific depinde de
interaciunea necovalent dintre epitop i paratop; definirea reaciilor AG AC se bazeaz pe consecinele formrii complexului imun elementar.
Bazele moleculare ale interaciunii AG - AC:

Reaciile AG - AC se bazeaz pe complementaritatea structural dintre
epitop (aparinnd AG) i paratop (aparinnd AC). Complexul imun
elementar este complexul AG - AC la nivel molecular, descris precum
modelul ,,cheie - broasc sau modelul ,,minilor care se strng.
Complementaritatea stereospaial epitop - paratop genereaz noi fore
fizice de atracie, precum forele electrostatice, legturi de hidrogen,
fore van der Waals.
Din cauza legturilor fizice dintre reactani, reaciile AG - AC sunt
ntotdeauna reversibile; AC nu altereaz AG. Reversibilitatea
(disocierea complexelor AG - AC) poate fi considerat o reacie
unimolecular n care viteza de reacie este dependent de concentraia
complexului imun. Dup studii n care reactanii au fost marcai
radioactiv, timpul de njumtire al reaciilor antigen - anticorp a fost
estimat ca durat minim de trei ore, pn la T1/2 maxim de 8 zile.
Interaciunile AG - AC depind de concentraiile reactanilor, complexele
imune formndu-se cu probabilitate maxim la concentraii
echimoleculare ale AG i AC.
n reaciile imunologice, specificitatea, afinitatea i aviditatea
anticorpilor au un rol extrem de important.
Specificitatea - reprezint capacitatea unui anticorp de a deosebi
antigenul fa de care a fost produs, fa de alte antigene cu structur
asemntoare. Serurile imune incomplet purificate pot determina reacii
imunologice ncruciate.
Afinitatea msoar fora de legare dintre un epitop i un paratop,
respectiv suma forelor de atracie i de repulsie dintre cele dou
componente ale sistemului imun elementar.
385
Constanta de afinitate (Ka) sau de ,,echilibru se poate calcula dup

formula:
Ka = Kas / Kdis = [AG - AC] / [AG] x [AC] , unde:
Ka = constanta ratei de asociere
Kdis = constanta ratei de disociere
[AG] = concentraia epitopilor
[AG - AC] = concentraia complexului imun
[AC] = concentraia situsurilor de legare liber a AC
[,,X] = concentraia molar
Constanta K va fi mare pentru complexele imune cu afinitate
crescut.
Aviditatea caracterizeaz energia medie a interaciunii de legare a unui
antigen cu epitopi multipli i diferii, cu anticorpii specifici indui de
ctre acetia. Spre deosebire de afinitate, care furnizeaz date despre
natura fizico-chimic a interaciunilor AG-AC, aviditatea este
semnificativ pentru antigenele naturale, care sunt multivalente n
realitate. Avantajul multivalenei este faptul c aceasta crete energia de
legare de 103 ori n cazul IgG (bivalente) i de 107 ori n cazul IgM
(multivalente).
Afinitatea i aviditatea crescut a anticorpilor specifici determin
reacii imunologice favorabile organismului: protecie antibacterian,
antiviral, antimicotic, antiparazitar, antitumoral, neutralizarea
efectului citopat viral etc. Complexele imune cu afinitate sczut persist
n circulaie sau se depun n unele esuturi (spre exemplu, glomerulul
renal) i determin variate consecine imunopatologice.
La temperatura corpului, crete viteza de asociere a AG cu AC
specifici, de aceea majoritatea reaciilor imunologice cu scop diagnostic
(aglutinare, precipitare, etc.) se incubeaz la 37 oC. Pentru evidenierea
crioaglutininelor, incubarea reaciei se face la temperaturi sczute (4 oC).
Tipul de reacie imunologic observat depinde de starea fizic a
antigenelor, precum i de condiiile experimentale (ex.: temperatura
optim sau pH-ul optim al reaciei, cuprins ntre 6,5 i 8,5). Spre exemplu,
antigenele particulate genereaz reacii de aglutinare, antigenele solubile
produc reacii de precipitare.
Sensibilitatea reaciilor AG - AC cu rol diagnostic poate fi cuantificat
prin numrul efectiv de particule necesare pentru a produce o reacie
vizibil; spre exemplu, 107 celule bacteriene produc o reacie de
aglutinare evident, spre deosebire de 6 x 10 12 molecule de antigen
solubil care produc o reacie de precipitare detectabil.
386
Teoria ipotezei unitare a anticorpilor postuleaz faptul c fiecare

molecul de anticorp poate desfura mai multe tipuri de reacii
imunologice, corespunztor specificitii respective (,,anticorpi
multipoteni).
Reaciile AG - AC cu scop diagnostic sunt foarte variate; toate
reaciile serologice i propun evidenierea anticorpilor specifici i titrarea
lor. Creterea progresiv a titrului anticorpilor semnific infecii n
evoluie.
Principalele reacii imunologice cu rol diagnostic pot fi
clasificate:
Reacii de agregare
Reacii de aglutinare- pe lam
- n tuburi
- pe suport (ex.: latex aglutinare,
hemaglutinare pasiv)
Reacii de precipitare
- precipitarea inelar
- reacia de floculare
- precipitare n gel
- difuzie simpl - Metoda Oudin
- Imunodifuzia radial Mancini
- difuzie dubl - Metoda Outcherlony
- Imunelectroforeza
- Contraimunelectroforeza
Reacii AG - AC cu participarea complementului
Bacterioliza, Virionoliza virusurilor nvelite (Imunocitoliza)
Imunhemoliza
Imunocitoaderena (ex: rozete EAC) i opsonizarea
Imunoaderena, imunocitotoxicitatea
Reacia cu fixarea sistemului complement (RFC, cu variantele
tehnice: Ida Bengston, Kolmer, Bradstrecet Taylor etc.)
Reacii cu anticorpi monoclonali (AMC) specifici
Reacii AG - AC cu complexe imune vizualizate prin artificii
tehnice
Imunofluorescena (IF) - metoda direct i indirect
Radioimunotestarea (RIA) - metoda direct i indirect
Teste imunoenzimatice (ELISA) - metoda direct i indirect
Reacii de seroneutralizare (RSN) - pentru diagnosticul infeciilor
virale
387
Principiul reaciilor, tehnica de lucru i interpretarea acestora sunt

descrise la lucrrile practice. Alegerea uneia sau alteia dintre reacii, pentru
diagnosticul unei boli infecioase - se bazeaz pe mai multe criterii: natura
agentului etiologic, sensibilitatea reaciei, clasa imunoglobulinelor de
identificat (ex.: titruri nalte de IgM semnific infecie acut) i nu n
ultimul rnd, la noi n ar, n funcie de posibilitile materiale ale
laboratorului respectiv.
TESTE CARE EVIDENIAZ IMUNITATEA MEDIAT

CELULAR
Imunitatea mediat celular are ca efector specific limfocitul T, iar ca
celul asociat, macrofagul.
Prin testele de imunitate celular se poate aprecia funcionarea
normal a IMC; diminuarea rspunsului imun celular se poate observa n
afeciuni congenitale, infecii virale, bacteriene, fungice, parazitare,
cancere, hepatite cronice, etc.
Testele IMC pun n eviden i existena unui rspuns imun celular
specific fa de un anumit antigen (ex.: i.d.r. la tuberculin, brucelin etc.)
Testele IMC pot fi efectuate in vivo i in vitro. Clasificarea reaciilor este
urmtoarea:
Teste in vivo
Intradermoreacia, care evideniaz starea de hipersensibilitate de tip
tardiv (prototip - i.d.r. la tuberculin). Reacia investigheaz IMC
global i prezena macrofagului activat prin limfokinele
limfocitului TH.
Teste in vitro
Testele sunt foarte complexe, nefiind introduse n activitatea de
rutin. Mai frecvent utilizate sunt:
Numrarea limfocitelor T
Evaluarea raportului dintre limfocitele TCD4 i TCD8.
(Raportul lfTCD4 / lfTCD8 >1 semnific valori normale, valoarea
subunitar fiind expresia imunosupresiei).
Capacitatea de proliferare (ca rspuns imun) la un stimul mitogen.
Se evideniaz prin:
Transformarea blastic a limfocitelor
Cultura limfocitar mixt (MLC).
Capacitatea productiv de citokine se investigheaz prin:
388
Evidenierea MIF i LIF (factori de inhibare ai migrrii

macrofagelor i respectiv ai leucocitelor polimorfonucleare)
Evidenierea factorilor mitogeni limfocitari (FML) i ai
limfotoxinelor
Evidenierea interferonului sau a factorilor chemiotactici.
Manifestarea citotoxicitii (lfTCD8) fa de celula int:
Teste de limfocitotoxicitate - evideniaz mecanismele distrugerii
celulei int, care are izotopi radioactivi ncorporai. Eliberarea n
supernatant a izotopului se detecteaz cu ajutorul unor contoare
speciale. Testele au aplicabilitate n determinarea i tipizarea
antigenelor HLA, n imunitatea antitumoral i antiviral.
Flow-citometria
Reprezint o metod modern de diagnostic, care realizeaz
identificarea i sortarea celulelor aflate ntr-un flux lichid, pe baza unui
parametru fizic sau chimic care le caracterizeaz. Flow-citometrele
utilizeaz diverse tipuri de lasere, numrtoare electronice de celule i
programe computerizate de sortare celular (500 - 7000 celule/secund, cu
puritatea sortrii de 97%). Pentru detectarea antigenelor de suprafa
celular se utilizeaz anticorpi monoclonali specifici, fluorocromi (IF),
fluorocitokine. Fluorokinele sunt interleukine cuplate cu o substan
fluorescent, pentru detectarea unor subpopulaii celulare cu rspuns imun
diferit la variai mesageri chimici imunologici (IL 1, IL2, IL6, LiF etc). Se
deschid noi perspective de cercetare i diagnostic n imunologie, prin
avantajele oferite de flow-citometrie, metod care poate preciza:
Coninutul celular n acizi nucleici
Numrul reticulocitelor
Proporia: limfocite, monocite, granulocite n sngele periferic (inclusiv
transpunere grafic)
Raportul dintre limfocitele TCD4 i TCD8
Histocompatibilitatea, n vederea realizrii unui transplant (prin
determinarea unor antigene HLA)
Rezistena celulelor tumorale la terapia citostatic
Nivelul proliferrilor celulare (prin detectarea markerului CD69 prin
testul Fastimmune)
Nivelul citotoxicitii anumitor celule
Eficiena fagocitozei (Phago-test)
Producia radicalilor liberi n fagocitoz
Starea metabolismului oricrei celule (influx de Ca2+, K+, pH intern)
Noiuni de citogenetic
389
Prezena unor autoanticorpi fixai pe suprafaa sau n interiorul unor

celule (anticorpi antimuchi neted, AC antinucleari)
Existena unor molecule de suprafa celular pentru care nc nu exist
anticorpi monoclonali specifici, prin utilizarea fluorokinelor
Diverse antigene de suprafa celular (CD 4, CD8, CD19, CD20, CD69
etc.,
antigene
HLA,
receptori
diveri),
realizndu-se
,,imunofenotipizarea celular, cu ajutorul anticorpilor monoclonali
specifici marcai fluorescent. Imunofenotipizarea celular este cea mai
utilizat metod flow-citometric. Firma Becton - Dickinson a lansat o
gam
larg
de
kit-uri de diagnostic:
Kitul
Simul
Set
IMK
Plus,
Kitul
LeuKaemia
Immunophenotyping - depisteaz hemopatii maligne ,,border-line. Kitul
Tri-Test permite determinarea numrului absolut de celule CD4, CD8,
CD19; kitul Fastimmune evideniaz proliferarea celular (CD69).
Aparatele cele mai moderne produse de ctre firma respectiv sunt: FACS
Vantage i FACS Calibur care pot realiza o gam larg de operaiuni.
Cele mai recente flow-citometre sunt uor manevrabile (,,user friendly),
precum FACScan sau EPICS, dar n aceste situaii aplicaiile diagnostice
sunt foarte specifice.
Fig. nr. 42 - Imagini flow-citometrice ale unor subpopulaii celulare
din sngele periferic, cu AC monoclonali ai trusei Simul Set (Virgil
Punescu i colab)
390
391
CAPITOLUL 48
MEDIATORI BIOCHIMICI AI RSPUNSULUI IMUN
Citokinele reprezint semnalele absolut necesare (transmise de
ctre celulele imunologice), pentru a regla interaciunile cooperante cu rol
n declanarea unui rspuns imun eficient.
Interleukinele sau citokinele au fost denumite iniial limfokine
(substane secretate de ctre limfocite) sau monokine (substane secretate
de ctre monocite, macrofage).
Interleukinele (IL) sunt substane de natur proteic ce transmit
celulelor imuno-competente semnalele necesare pentru activarea,
proliferarea i diferenierea lor. Interleukinele sunt considerate a fi
imunohormoni care amplific mecanismele aprrii imunologice.
Identificarea interleukineleor este foarte dificil, din cauza prezenei
lor n organism n doze extrem de sczute (10-10 - 10-12 M). Semnalul
reprezentat de ctre interleukin este prelucrat numai de ctre celule care
exprim receptori specifici pentru legarea lor; aceste celule imunologice
trebuie s fie activate n prealabil. Pentru purificarea i izolarea
interleukinelor s-au utilizat tehnici ADN recombinant.
Caracterele generale ale interleukinelor sunt urmtoarele:

greutate molecular foarte mic (sub 80 k )
moleculele IL sunt glicozilate
acioneaz autocrin sau paracrin
interacioneaz cu receptori celulari specifici
majoritatea IL regleaz proliferarea i diferenierea limfocitelor B
nu sunt numeroase (13 specii moleculare diferite, dintre care bine
cunoscute sunt 8)
intervin n cooperrile celulare din rspunsul imun i n procese de tip
inflamator
concentraiile lor sunt minuscule (10-12 M)
Principala clasificare a activitilor atribuite interleukinelor

IL cu rol reglator a activitii celulare imunologice; ex.:
IL2, IL3
interferonii i
factorul inhibitor al migrrii macrofagelor (MIF)
factorul inhibitor al migrrii leucocitelor (LIF)
392
factorul chemiotactic (CF)

factorul activator al macrofagelor (MAF)
Reglarea activitii altor esuturi:
factorul stimulator al coloniilor de granulocite-macrofage (CSF-GM)
factorul activator al osteoclastelor (OAF)
Distrugerea celulelor int:
limfotoxinele (perforin i granzim, elaborate de ctre
limfocitele T citoxice)
PRINCIPALELE CITOKINE
Interleukina 1 (IL1)
produs de ctre monocite i macrofage (monokin)
prima sa denumire a fost factorul de activare al limfocitelor (LAF) n
1972
urmtoarea denumire (1974) a fost factorul de activare al limfocitelor
B (BAF); a fost evideniat datorit capacitii sale de a stimula
producia de anticorpi n absena limfocitelor T
substana conine 270 aminoacizi, greutatea ei molecular este de
31000
prezint dou forme moleculare ( i )
producia sa poate fi stimulat prin aciunea limfocitelor T helper
activate sau a mitogenilor nespecifici. Dup Dinarello (1984), IL 1 se
elibereaz n cantiti mari din macrofage activate (ca urmare a
infeciei) i o parte a IL1 ar exista ca parte integrant a membranei
macrofagului (probabil aceast etap reprezint etapa eliberrii iniiale
din celul)
rolurile sale imunologice sunt extrem de diverse
IL1 determin proliferarea i diferenierea limfocitelor B, stimulnd
anticorpogeneza fie direct, fie prin intermediul limfocitelor T helper
induce apariia receptorilor pentru IL2 i crete sinteza de IL2 i de
factori stimulatori ai coloniilor (poteneaz hematopoeza)
prin creterea sintezei de IL2 acioneaz indirect asupra funciilor
limfocitelor T citotoxice i a celulelor ucigae naturale (NK)
IL1 este principalul pirogen endogen (sindrom febril declanat).
Hipertermia are efect antiinfecios.
393
IL1 determin multiplicarea fibroblastelor i a celulelor endoteliale

IL1 induce migrarea polimorfonuclearelor neutrofile din mduv,
mobilizarea lor chemotactic, eliberarea lizozimului.
IL1 regleaz rspunsul antiinflamator sistemic prin producerea
proteinelor de faz acut
IL1 stimuleaz producia de colagenaze i protoglandine (PGF2 crescut
explic proteoliza i casexia din infeciile cronice)
IL1 provoac somnul de und lent
IL1 are rol protector mpotriva radiaiilor
IL1 deprim activitatea plasminogenului
IL1 scade presiunea venoas i pH-ul sanguin
IL1 deprim sinteza lipoproteinelor i a acizilor grai liberi, deprim
sinteza albuminei
Nivelul IL1 crete n:
Septicemii
Glomerulonefrite
Ciroz hepatic
Sclerodermie sistemic
Diabet insulino-dependent etc.
Nivelul IL1 scade n:
Cancere
Malnutriie
Progresiv cu vrsta
Psoriazis i lupus eritematos sistemic
Interleukina 2 (IL2)
A fost denumit i :
TCGF (T cell growth factor) - factorul de cretere al celulelor T
TSF (Thymocyte stimulating factor) - factorul stimulator al timocitelor
IL2 este produs de ctre limfocitele T activate i a putut fi obinut
experimental din supernatantele unor culturi de limfocite stimulate cu
mitogeni (fitohemaglutinin).
394
IL2 este de natur glicoproteic, cu GM aprox. 17000 , alctuit

din 133 de aminoacizi. Precursorul IL2 are 153 de aminoacizi din care, n
urma proteolizei unei secvene de 20 aminoacizi, rezult molecula matur.
Timpul de njumtire a IL2 plasmatice este de aprox. 2-3. Activitatea
de sintez a IL2 ncepe la 4 ore de la stimularea antigenic i atinge un
maxim dup 3-5 zile.
Producia IL2 este stimulat de IL1, INF, PHA.
Exist similitudini structurale ntre IL2 i INF. Ambele molecule
sunt formate din sase helixuri i nu conin catene; helixurile 2, 3, 4, 6 ale
IL2 sunt organizate ntr-un buchet, aceast dispoziie fiind extrem de
important pentru legarea receptorului.
Capacitatea limfocitelor de a rspunde la IL2 este condiionat de
prezena receptorilor pentru IL2, care se gsesc pe suprafaa celulelor B i
T, monocitelor i pe suprafaa precursorilor mieloizi.
Limfocitele n repaus posed un numr sczut de receptori pentru
IL2 dar n urma stimulrii antigenice, dup aprox. 48 de ore, 50% dintre
celulele respective vor poseda aceti receptori (aprox. 10000
receptori/celul). Cantitatea receptorilor pentru IL2 va regla intensitatea
rspunsului imun, controlnd de fapt viteza de diviziune a limfocitelor.
Roluri imunologice
Interleukina 2 stimuleaz proliferarea i diferenierea limfocitelor T,
a unor celule B normale sau leucemice i a celulelor NK. IL2 stimuleaz
diferenierea limfocitelor T helper 1 (Th1) de tip inflamator i T helper 2
(Th2) de tip ajuttor stimulator, poteneaz aciunea limfocitelor T
citotoxice i producia de anticorpi. La nivel intracelular, IL2 activeaz
sinteza receptorilor pentru transferin i n cazul monocitelor stimuleaz
producia de INF i TNF. Pornind de la acest aspect s-a ncercat terapia
antitumoral cu IL2, dar rezultatele obinute au fost umbrite de efecte
adverse precum insuficiena respiratorie, tulburri psihice sau
gastrointestinale.
Deficitul de IL2 se poate ntlni in AIDS, boala Hoodgkin, lupus
eritematos sistemic; administrarea de IL2 exogen (cu riscurile
sus-menionate) ar putea ameliora aceste afeciuni.
Interleukina 3
IL3 prezint o activitate multifuncional, cu rol stimulativ asupra
liniilor celulare hematopoetice majore (hemopoetin panspecific-PSH).
A mai fost denumit i :
multicolony stimulating factor
Histamine-producing cell stimulating factor
395
PSH-hemopoetin panspecific
IL3 este o glicoprotein cu greutate molecular de aprox. 30 k, cu
134 de aminoacizi, fiind produs de ctre limfocitele T activate.
Reziduurile Pro i Leu din secvena moleculei au un rol critic n modularea
funciilor biologice ale acestei limfocite.
Aciunea IL3 asupra celulelor int este condiionat de legarea pe
receptorul specific (aprox. 1000 de receptori/celul). Receptorul pentru
IL3 are un domeniu extracelular cu 417 resturi de aminoacizi legai printrun domeniu transmembranar.
Legarea IL3 de receptorul specific determin un efect local (n
situsul n care s-a produs activarea) dup stimuli imunologici puternici
(infestri parazitare sau rejet de gref).
Cele mai multe experimente arat c IL3 nu acioneaz asupra
limfocitelor T i nici n producerea normal (echilibrat) de celule
hematopoetice.
IL3 intervine direct asupra creterii precursorilor multipli
hematopoetici ai granulocitelor, bazofilelor, enzinofilelor, macrofagelor
sau mastocitelor. Excepie fac celulele din seria eritroid i
megacariocitar asupra crora IL3 acioneaz n prezena eritropoetinei i
trombopoetinei. Stimularea hematopoezei de ctre IL3 este amplificat sub
aciunea IL1, IL6, GM-CSF, etc.
IL3 poate potena rspunsul inflamator indus de ctre endotoxinele
bacililor gram negativi. Dereglarea activitii IL3 n ceea ce privete
hematopoeza este unul dintre principalele mecanisme generatoare de
leucemii, cu proliferarea celular anarhic.
Unii cercettori indic utilizarea IL3 sintetic n terapie, pentru
proliferare celular specific dup grefele de mduv.
Interleukina 4
A fost denumit i:
Factorul inductor al IgG1-Lindquist (1984)
Factorul stimulator nr.1 al celulelor B (Norma, 1984)
IL4 poate fi sintetizat de ctre limfocite T, celule de tip hibridom
sau limfom.
IL4 are o greutate molecular de 20 k; este sensibil la degradarea
proteolitic i este inactivat la pH 10.
Activarea IL4 este complex:
IL4 stimuleaz sinteza ADN (prin activarea limfoblatilor T normali)
396
IL4 stimuleaz biosinteza anticorpilor din subclasa IgG 1 i supreseaz

rspunsul n IgG3 i IgG2b.
Acioneaz sinergic n asociere cu PHA (fitohemaglutinina), cu
proprieti similare IL1.
IL4 reprezint un factor de cretere pentru mastocite.
IL4 regleaz producerea de citokine de ctre celulele T, B, NK,
macrofage i fibroblaste. Prin acest rol imunomodulator acioneaz ca
agent antitumoral i antiinflamator.
IL4 inhib sinteza TNF; la rndul ei, IL4 este inhibat de ctre INF.
Receptorii pentru IL4 (aprox. 100-1000 receptori pe o celul T sau
B n repaus sau n activitate), au o structur de tip monomer
imunoglobulinic, cu GM de 130 k.
Interleukina 5
A fost denumit iniial factorul nlocuitor al celulelor T.
Denumirea de IL5 a fost propus de Kinashi, Azuma n 1986.
IL5 este o glicoprotein cu GM cuprins ntre 32 i 60 k.
Receptorul pentru IL5 (GM aprox 48 k) este exprimat n exclusivitate pe
limfocitele B activate i pe eozinofile.
IL5 acioneaz n principal ca factor de difereniere al eozinofilelor
(efect antiparazitar).
IL5 acioneaz sinergic cu IL1 pentru inducerea sintezei de IgM i cu
IL4 pentru sinteza IgG1.
IL5 poteneaz exprimarea receptorilor pentru IL2 la nivelul limfocitelor
T, stimulnd cooperrile celulare necesare rspunsului imun.
IL5 stimuleaz funcia citotoxic anticorpodependent.
Interleukina 6
Cu denumiri anterioare:
Factorul 2 stimulator al celulelor B (BSF-2)
Interferon 2 sau factorul stimulator al hepatocitelor
Este o glicoprotein cu greutate molecular de 21 k, cu 184 de
aa.
Este produs de ctre monocite, macrofage, limfocite B i T
activate, mastocite, fibroblaste, astrocite, celule endotoliale, epiteliale i
neoplazice.
397
Acioneaz asupra unui numr mare de esuturi i celule, i anume

n:
inducerea diferenierii i activrii limfocitelor B

inducerea proteinelor de faz acut n inflamaii
proliferarea i diferenierea lf T, cu exprimarea receptorilor pentru IL2
activarea maturrii megacariocitelor
promovarea fagocitozei
proliferarea celulelor mielomatoase, a keratinocitelor
Receptorul pentru IL6 se ntlnete pe suprafaa limfocitelor T n
repaus, a limfocitelor B fr receptor imunoglobulinic IgG membranar, pe
suprafaa celulelor mielomatoase. Receptorul pentru IL6 este de tip
imunoglobulinic cu GM de 80 k.
Nivelul seric al IL6 crete n boli autoimune, ciroz hepatic,
glomerulonefrite, psoriazis sau neoplazii. Sinteza IL6 poate fi inhibat de
IL4, IL10 i TGF .
Interleukina 7
Denumit iniial limfopoetina 1, din cauza aciunii ca factor de
cretere a limfocitelor B i T.
IL7 este o glicoprotein cu GM de 14.9 k cu 154 de aminoacizi.
IL7 intervine n proliferarea limfocitelor B imature, pn cnd
limfocitul B exprim pe suprafaa sa IgM monomer i intervine n
proliferarea limfocitelor T imature (CD4-, CD8-, CD3+), pn cnd celula
T devine imunocompetent i faciliteaz exprimarea receptorilor pentru
IL2.
IL7 activeaz sinteza IL1, IL8 i TNF.
Interleukina 8
Este secretat de ctre limfocitele T sau monocitele activate, de
ctre fibroblaste sau celulele endoteliale.
Este proteina activatoare a neutrofilelor.
IL8 stimuleaz chemotactismul pentru PMN i poteneaz funciile
fagocitare ale acestora.
IL8 crete permeabilitatea vascular i protejeaz celulele endoteliale
mpotriva efectului distructiv al PMN (IL8 poteneaz fenomenele
inflamatorii, n general)
Interleukina 9
398
Glicoproteina cu GM 30-40 k ( cu 144 de aminoacizi) este

sintetizat de ctre limfocitele T i monocite.
IL9 este un factor ce stimuleaz creterea i proliferarea
limfocitelor T, a mastocitelor, a megacariocitelor i a precursorilor
eritrocitari.
Interleukina 10
Glicoproteina cu GM de 30-40 k, este sintetizat de ctre
limfocitele Th2 (nu ns i de limfocitele Th1), sub influena stimulilor
antigenici i mitogenici.
IL10 stimuleaz timocitele
IL10 induce exprimarea antigenelor CMH clasa a II-a pe suprafaa
membranar a limfocitelor B.
IL10 inhib producia de IL1, IL6, IL8 i TNF.
Interleukina 11
Molecula are o GM de 22 k i aproximativ 199 resturi de
aminoacizi. Este sintetizat de ctre celulele stromale i are activiti
variate, asemntoare cu cele ale IL6.
IL11 determin sinteza proteinelor de faz acut n inflamaii
IL11 stimuleaz producerea de imunoglobuline la nivelul plasmocitoamelor (aciune sinergic cu IL3)
IL11 acioneaz asupra precursorilor hematopoetici
Interleukina 12
Cu denumiri anterioare :
Factor de cretere al celulelor stem
Factor de cretere al mastocitelor
Factor de stimulare al celulelor NK
IL12 este un dimer cu GM de 20 k i 248 de aminoacizi. Este
produs de ctre fibroblaste, celule stromale, celule ale carcinoamelor
hepatocelulare.
IL12 induce sinteza INF de ctre celulele NK.
IL12 reprezint un factor de cretere al mastocitelor, precursorilor
hematopoetici i al celulelor ucigae naturale.
399
Sinteza IL12 este stimulat de ctre INF i blocat de IL4 i IL10.
Interleukina 13
Citokina este produs la om prin limfocitele Th i limfocitele CD 8+.
Molecula conine 132 de aminoacizi. IL 13 acioneaz asupra limfocitelor B,
macrofagelor, celulelor NK i asupra unor celule canceroase. Pentru
limfocitele B rspunsul este proproliferativ, n timp ce limfocitele T nu
sunt afectate.
IL13 stimuleaz preferenial sinteza de IgE, cu intervenie n procesele
alergice
IL13 posed aciuni antiinflamatorii, inhibnd sinteza unor citokine
proinflamatorii precum IL1, IL6, IL8, TNF.
IL13 scade fagocitoza i citotoxicitatea dependent de anticorpi
IL13 ar avea efect anti-HIV, inhibnd replicarea HIV n monocite, prin
inhibarea reverstranscriptazei virale i scderea concentraiei
antigenului p24 viral.
IL13 prezint similitudini structurale cu IL4 i aciuni parial
asemntoare.
Interleukina 14
Identificat n 1991, are o greutate molecular mare (468 de
aminoacizi). Este produs de ctre limfocitele T i stimuleaz celulele B .
Interleukina 15
Descoperit n 1994, este produs de ctre placent i celule
musculare striate. Greutatea molecular 15 k (cu aproximativ 162 de
aminoacizi). Rolul su imunologic este nc necunoscut, dar ar putea
suplini funcia IL2.
INTERFERONII
Sunt substane de natur glicoproteic, produse sub influena unor
stimuli inductori variai, cu efect antiviral, antitumoral i imunomodulator.
S-au descoperit urmtoarele categorii antigenice de interferoni
umani, clasificate dup principala celul productoare :
INF
- LEUCOCITAR
- 14 subtipuri diferite din punct de vedere biochimic
- codificat de ctre 14 gene diferite (cromozomul 9)
400
- rezistent la pH acid (i la temperatura de 56C)

INF
- FIBROBLASTIC (produs de ctre fibroblaste)
- dou subtipuri diferite din punct de vedere biochimic
- codificat de ctre 2 gene diferite (cromozomul 9)
INF - LIMFOCITAR, sau IMUN, produs de limfocitele T
sensibilizate
- un singur tip biochimic, codificat de o singur gen (cromozomul 12)
- cu cel mai important efect n viroze i neoplazii
INF - produs de ctre celule mononucleare umane stimulate cu
fitohemaglutinin, asemntor cu INF (n studiu).
Principalele proprieti ale interferonilor

Au aciune antiviral, antitumoral, imunoreglatoare.
Au specificitate de specie un tip de INF produs de ctre
celulele unei specii, acioneaz numai asupra speciei respective. De
aceea, tipul de interferon luat n studiu trebuie menionat, utiliznd un
acronim pentru specia productoare : Hu-INF (human interferon interferon uman), Mu-INF (murin interferon - interferon al
oarecelui), etc.
Au greuti moleculare cuprinse ntre 17 k (INF) i 20 k
(INF,INF)
Nu au specificitate de virus (un interferon indus de ctre un
anumit virus are aciune asupra oricrui alt virus, n cadrul speciei
respective)
Sunt glicoproteine cu inductori foarte variai ai sintezei, cum ar

fi:
ARN dublu catenar natural sau sintetic (poliriboinozinat
poliribocitidilat ) reprezint cel mai bun inductor de interferon. n
mod normal, n timpul replicrii virusurilor cu genom ARN apare
ARN dublu catenar. Este activ n doze mici (g/ml).
Extracte microbiene ale microorganismelor cu parazitism
intracelular: Ricketsia, Bordetella, Brucella, Listeria, sau
endotoxinele bacteriilor gram negative reprezint inductori slabi
de INF, la doze de ordinul mg.
Aciunea interferonilor este rapid i puternic .
401
Sistemul INF este cel mai precoce sistem de aprare antiviral al

gazdei: apare la cteva ore dup stimularea antigenic, efectul este
maxim la 24-48 ore de la infectare i persist de la dou la ase
sptmni. Aciunea este puternic, aproximativ 1-10 molecule de
INF protejeaz antiviral o celul infectat, dup urmtoarea
schem:
INF fibroblastic acioneaz iniial la poarta de intrare a
virusului, realiznd alterri ale receptorilor celulari. Dac totui,
virusul depete poarta de intrare, se secret INF leucocitar.
INF sensibilizeaz limfocitele T. Aceste celule activate
produc INF imun, care poteneaz toate mecanismele de
aprare ale gazdei, n special mecanismele citotoxice, prin
celulele killer, celule natural-killer, limfocite Tc, macrofage.
Aprarea imunologic antitumoral se explic prin potenarea
efectelor citotoxice.
Efectul principal antiviral al INF se manifest n etapele de
decapsidare viral, replicare sau transcriere a genomului.
Interferonii nu pot aciona asupra adsorbiei virale sau a
viropexiei; efectul protector este maxim asupra celulelor
adiacente i diminuat proporional fa de celulele ndeprtate.
Mecanismele moleculare antivirale ale aciunii interferonilor au
fost studiate n vitro. Toi interferonii induc sinteza enzimelor:
oligonucleotid polimeraz, activ n prezena ARN dublu
catenar i a ATP i proteinkinaza, cu rol inhibitor n sinteza
proteinelor virionale.
Alte activiti ale INF n imunitate :
creterea numrului de macrofage i intensificarea fagocitozei,
prin exprimarea receptorilor pentru Fc a IgG.
intensificarea activitii microbicide i tumoricide prin existenta
factorului MAF (factorul de stimulare al macrofagelor).
creterea numrului de molecule CMH de clasa a II-a pe macrofag
i pe celulele imunocompetente.
INF amplific activitatea celulelor NK, concomitent cu inhibarea
exprimrii genelor oncogene onc n aprarea antitumoral.
INF amplific mecanismele inflamatorii.
INF stimuleaz maturarea limfocitelor spre plasmocite.
INF inhib sinteza prostaglandinelor produse de IL 1 i proliferarea
keratinocitelor.
Concluzionnd, interferonii posed efect antiviral, antitumoral,
proliferativ asupra limfocitelor B i macrofagelor.
402
FACTORII NECROZANI TUMORALI

Sunt citokine cu aciune antitumoral, cu dou subpopulaii
moleculare diferite :
TNF (casectina) 1985 este secretat de ctre monocite,
macrofage, limfocite, celule NK, celule endoteliale. Casexia este
rezultatul aciunii TNF, care inhib lipoproteinlipaza prezent n
adipocite
prezint trei subuniti helix, cu greuti moleculare de 17 k, cu
157 de resturi de aminoacizi
gena codificant este situat pe cromozomul 6, n cadrul CMH
TNF (limfotoxina) este sintetizat doar de ctre limfocite, stimulate
de INF sau lipopolizaharidele bacteriene
are o structur asemntoare TNF, trimer cu greutate molecular
de 25 k, cu 171 resturi de aminoacizi
gena codificant este situat pe cromozomul 6.
Receptorii pentru TNF sunt de dou tipuri, cu distribuie celular
variat: TNF-R (75 k) i TNF-R(55 k), care pot fixa fiecare att
TNF, ct i TNF. Se pare c exist i receptori solubili pentru TNF
(STNF-R), identificai n urina i serul tuturor indivizilor, n concentraii
specifice persoanei respective. Receptorii solubili pentru TNF rezult prin
clivarea proteolitic a TNF-R sau i pstreaz n continuare capacitatea
de legare a TNF. Receptorii solubili pentru TNF ar putea avea rolul de a
bloca aciunea TNF la concentraii prea mari. Prezena unor concentraii
mari de TNF solubil n preajma celulelor tumorale, ar putea explica
rezistena formaiunii la TNF-ul administrat exogen. TNF-ul solubil ar
putea explica i efecte paraneoplazice precum anorexia i casexia.
Factorii inductori ai sintezei TNF sunt:
- componente bacteriene
- lectine (fitohemaglutinina, concavalina A, etc.)
- citokine (IL1, IL2, INF, GM-CSF, )
- zimozanul, etc.
Factorii inhibitori ai sintezei TNF sunt multipli :
- glucocorticoizi
- prostaglandinele
- IL4, IL6, IL10
- alfaglobulinele
- histamina, serotonina
403
Aciunile TNF
Aciune citotoxic tumoral, prin distrugerea vaselor tumorale i
declanarea coagulrii locale (tumorile mari sunt mai sensibile la
aciunea TNF). Activitatea antitumoral a TNF nu are specificitate de
specie. Un alt posibil mecanism de aciune ar putea fi activarea
enzimelor lizozomale ale celulelor cu potenial citotoxic i chiar
fragmentarea ADN-ului celulei int, prin activarea endonucleazelor
endogene.
Rol antiviral tip INF.
Moduleaz producia de citokine (IL1, IL2, IL6, IL8) i de factori
chemotactici i stimuleaz producia proteinelor de faz acut.
Activeaz funciile citotoxice (moduleaz eliberarea radicalilor activi ai
oxigenului).
Stimuleaz exprimarea antigenelor HLA clasa I .
Crete aderarea mononuclearelor pe suprafaa endoteliului vascular.
Inhib angiogeneza.
Produce casexie, hipotensiune arterial, modificri de ritm cardiac.
TNF produce fenomene de necroz vascular n ocul septic.
IL1, INF i TNF reprezint ageni ai ocului endotoxic (rspuns imun
n exces, din cauza concentraiei mari de LPZ bacteriene).
Utilizarea TNF n terapie este nsoit de efecte adverse
(mielosupresie, febr, casexie). Administrarea TNF n asociere cu INF i
IL2 sau asocierea TNF cu anticorpi monoclonali dau efecte pozitive
minime.
ALI MEDIATORI
Factorul de transformare al creterii (TGF)
Citokin existent n trombocite, rinichi i mduva osoas, produsa sub
aciunea celulelor transformate tumoral sau viral
Exist dou peptide TGF diferite, TGF i TGF, cu greutate
molecular de 25 k, cu structur dimeric (TGF1, 2 i TGF1, 2).
TGF este implicat n embriogenez, aprare antiinfecioas i
antitumoral.
TGF acioneaz ca stimulator al proliferrii fibroblastelor i a celulelor
endoteliale (stimuleaz procesele de refacere ale esutului conjunctiv)
404
Acioneaz i ca imunosupresor scade capacitatea de sintez a IgM i

IgG, capacitatea citotoxic a celulelor NK i n mod paradoxal, crete
sinteza de IgAs la nivelul mucoaselor.
Aplicaiile terapeutice ale TGF1 se refer la administrarea
substanei respective nainte de interveniile chirurgicale, cu rol n
cicatrizarea plgilor.
Factorul de stimularea al coloniilor de granulocitemacrofage (GM-CSF)

Exist o glicoprotein de 22 k, cu 127 de aminoacizi, care
stimuleaz proliferarea i diferenierea precursorilor hematopoetici i
poteneaz funcia macrofagelor i a granulocitelor.
Citokina are funcie tumoricid i favorizeaz exprimarea
antigenelor HL-A clasa I pe suprafaa celulelor.
Factorul de stimulare al coloniilor granulocitare (G-CSF)

Foarte asemntor structural cu IL6, cu dou forme moleculare
G-CSF i G-CSF. Este produs de ctre monocite, macrofage, celule
endoteliale i fibroblaste stimulate imunologic.
Principala aciune se refer la diferenierea granulocitelor PMN i
acioneaz asupra celulelor multipotente.
Factorul de stimulare al coloniilor de macrofage

(M-CSF)
Este sintetizat de ctre monocite, fibroblaste, celule endoteliale.
Glicoproteina are o greutate molecular de 45-90 k i induce formarea de
colonii de precursori ai macrofagelor i mbuntete mecanismele
oxidative la nivelul macrofagelor adulte.
Factorul de activare al trombocitelor (PAF)

PAF este produs de ctre granulocite, cu funcii stimulatorii pentru
trombocite; stimuleaz agregarea trombocitelor la locul inflamaiei, induce
bronhoconstricia i activeaz sinteza IL1.
CAPITOLUL 49
MODULAREA RSPUNSULUI IMUN PRIN
COOPERRI CELULARE
Reaciile imune declanate de ctre un anumit antigen implic
proliferarea clonelor de limfocite cu funciile lor specifice, pentru
realizarea rspunsului imun mediat celular sau mediat umoral.
405
Activarea celulelor imunologice se realizeaz prin mai multe

categorii de stimuli :
mesageri primari reprezentai de ctre antigenele care se fixeaz pe
receptorii celulari specifici
mesageri secundari sunt produi biochimici rezultai prin activarea
unor complexe enzimatice
mesageri teriari sunt factori implicai n sinteza de citokine
Pentru declanarea rspunsului complex limfocitar este obligatorie
etapa de recunoatere a antigenului strin, dup captarea, prelucrarea i
prezentarea lui fracionat (epitopi) altor celule imunologice.
Recunoaterea i prelucrarea antigenului este realizat prin intermediul
celulelor prezentatoare de antigen, care pot s dein sau nu funcii
fagocitare. Principalele celule cu funcii fagocitare sunt monocitele
sanguine i macrofagele tisulare, eventual astrocitele cerebrale. Celule
prezentatoare de antigen nefagocitare sunt celulele Langerhans din piele,
celulele dendritice i limfocitele B (din esuturile limfoide).
CELULE PREZENTATOARE DE ANTIGEN

Macrofagele
Aceste celule realizeaz fagocitoza (pentru antigenele corpusculare)
i pinocitoza (pentru antigenele solubile). Substanele endocitate sunt
degradate pn la nivel peptidic, apoi asociate cu antigenele CMH clasa a
II-a i ulterior prezentate limfocitelor. Epitopii obinui sunt peptide cu
10-15 resturi de aminoacizi. Legarea peptidelor la moleculele CMH n
vederea complexului de prezentare se realizeaz la nivelul situsului
molecular de legare (10-25), care se individualizeaz la nivelul
domeniilor globulare 1, 2 pentru moleculele HLA clasa I i la nivelul
domeniilor 1 i 1 ale moleculelor HLA clasa a II-a.
Recunoaterea imunologic asociat de numete restricie CMH.
Antigenele endogene (spre exemplu o celul proprie organismului
infectat viral) se asociaz la celulele HLA clasa I, stimulnd limfocite
TCD8 (citotoxice). Moleculele HLA clasa I au un situs de legare pentru
antigen care este n permanen ocupat de ctre peptidele proprii, la
concuren cu ocuparea acestor situsuri de ctre peptidele exogene.
Antigenele exogene sunt endocitate i degradate i interacioneaz cu
antigenele HLA clasa a II-a, complexul fiind prezentat limfocitelor TCD 4
(helper). Dup recunoaterea antigenului de ctre celula T, limfocitul
primete semnale imunologice activatoare.
406
Limfocitele B
Aceste celule prezint receptori specifici pentru antigen, de natur
imunoglobulinic (IgMm i IgD) i pot prezenta epitopi semnificativi din
punct de vedere imunologic limfocitelor T (se pot constitui n celule
CPA, prezentatoare de antigen). Nu exist date suficiente dac
limfocitele B prelucreaz antigenele precum macrofagele. Prezentarea
antigenului se face tot sub restricie CMH.
Celulele dendritice
Aceste celule prezint antigenele, att sub restricia CMH, ct i n
absena acesteia (celulele dendritice foliculare nu utilizeaz restricia
CMH, n timp ce celulele dendritice din medulara timusului utilizeaz
aceast restricie).
Informaiile despre antigen ar fi furnizate de ctre celulele
dendritice foliculare, care ar putea reine complexele antigen-anticorp i lear prezenta limfocitelor B cu memorie. Celulele dendritice limfonodulare
coopereaz att cu limfocitele, ct i cu macrofagele.
TEORIA RECUNOATERII ASOCIATE

Cooperrile celulare necesare elaborrii rspunsului imun sunt
supuse urmtoarelor principii :
Limfocitele TCD8+ recunosc epitopii, n asociere cu produii genelor
CMH clasa I-a, prezeni pe suprafaa tuturor celulelor nucleate din
organism.
Limfocitele TCD4+ interacioneaz cu antigenele strine, n prezena
moleculelor HLA clasa a II-a, aflate pe suprafaa celulelor
imunocompetente (limfocite B, limfocite T, macrofage.).
Limfocitele T posed receptorii TCR cu specificitate dubl, att pentru
antigen, ct i pentru molecula CMH corespunztoare interaciunii
respective, respectndu-se regulile sus-menionate.
Mecanismele cooperrilor celulare sunt prezentate simplu (n scop
didactic) i anume modele de cooperare a dou celule imunologice i
respectiv a trei celule imunologice. Bineneles c in vivo, mecanismele
cooperrilor celulare sunt foarte complexe.
407
MODELUL INTERACIUNII A DOU CELULE

IMUNOLOGICE
Interaciunea celul prezentatoare de antigen limfocit T
Celula prezentatoare de antigen developeaz epitopii
semnificativi din punct de vedere imunologic i i expune pe suprafaa sa,
pentru a putea fi prezentai limfocitului TH. (Macrofagele sunt principalele
celule prezentatoare de antigen, dup degradarea menajat a acestuia).
Macrofagul secret interleukina 1 i stimuleaz proliferarea i
activarea limfocitelor T CD4 (aceste limfocite activate secret IL2 dar i
factorul de activare al macrofagului MAF, care augmenteaz procesele
fagocitare). Interaciunile celulare se bazeaz pe restricia CMH.
Cooperarea celular limfocit TCD4-limfocit B

Cooperarea celular limfocit TH limfocit B se realizeaz sub
restricia antigenelor HLA clasa a II-a. Limfocitul T helper activat
transmite semnale stimulatoare i proliferative limfocitelor B prin citokine,
n special prin IL2. Se produce diferenierea limfocitelor B nspre
plasmocit i secreia de imunoglobuline.
Unele antigene (flagelina polimerizat, polizaharidele bacteriene)
stimuleaz limfocitele B, fr intervenia limfocitelor T (acestea sunt
antigenele timoindependente). Aceste antigene prezint molecule cu
greutate molecular mare, cu uniti repetitive, greu degradabile in vitro i
foarte persistente n organism.
Antigenele timoindependente stimuleaz sinteza de IgM, nu ns i
sinteza de IgG. Mecanismul respectiv este greu de explicat: efectul
antigenelor timoindependente ar putea fi mitogenic i s-ar putea exercita
asupra anumitor populaii de limfocite B.
Antigenele timoindependente reprezint marea majoritate a
antigenelor, rspunsul imun umoral fiind condiionat n acest caz de
cooperarea dintre limfocitele B i T.
Fig. nr. 42 - Cooperarea imunologic dintre celula CPA i limfocitul Th
(Klein)
408
Fig. nr. 44 - Interaciunea limfocit Th - limfocit B (Zarnea, 1990)
409
Cooperarea celular limfocit T citotoxic celul int

Celulele Tcitotoxice (CD8+) se leag de celulele int prin intermediul
antigenului i a moleculelor HLA clasa I de pe suprafaa celular. Efectul
citotoxic al limfocitului TCD8+ se realizeaz prin intermediul
limfotoxinelor: perforina i granzima, care realizeaz microcanalicule
membranare n celula de distrus. Celulele distruse pot fi celule self
mbtrnite (cu antigene HLA expuse unui proces de uzur), celule
infectate viral sau celule modificate tumoral.
Alte modele de cooperare celular dual ar putea fi : cooperarea
limfocit TH limfocit TC, limfocit TS i limfocit B, limfocit TH limfocit
TS. Raportul dintre numrul limfocitelor TH i numrul limfocitelor TS
trebuie s fie supraunitar pentru un rspuns imun normal. Valoarea
subunitar a raportului limfocite TH / limfocite TS indic imunosupresia
(spre exemplu, n AIDS).
Fig. nr. 45 - Citotoxicitatea prin intermediul limfocitului Tc (Klein,

1991)
410
MODELUL INTERACIUNII A TREI CELULE

IMUNOLOGICE
Interaciunea MF limfocite TH limfocite TB
Modelul se bazeaz pe interaciunea dintre celula prezentatoare de
antigen (cel mai adesea macrofag) cu celule B i T.
Procesul este complex: macrofagul fragmenteaz antigenul, expune
epitopii semnificativi imunologic i secret IL1, cu rol stimulator i
proliferativ asupra limfocitului T helper. Limfocitul TH activat secret IL2,
cu rol n proliferarea i diferenierea limfocitului B spre plasmocit secretor
de imunoglobuline.
Interaciunea MF limfocit Tcitotoxic celul int

Este un alt model posibil de cooperare celular, care are la baz
teoria dublei recunoateri prin intermediul receptorului pentru antigen al
celulei T. Intervenia macrofagului faciliteaz prezentarea antigenului.
Macrofagul ar putea realiza chiar fagocitoza resturilor celulare ale celulei
int.
Modelele prezentate demonstreaz restricia CMH la nivelul
cooperrilor celulare. Unii cercettori, afirm faptul c exist o categorie
de celule TH nesupus restriciei CMH, numite TH-Ig. Aceste limfocite TH
pot stimula numai celule B mature care exprim anumite izotipuri de
imunoglobuline. De asemenea, celulele ucigae naturale i exercit efectul
citotoxic n absena restriciei CMH.
n concluzie, parametrii implicai n procesul cooperrilor
imunologice declanate de prezena antigenului sunt :
diverse celule (variate celule prezentatoare de antigen, limfocite B i T,
celule int, etc.)
antigenele HLA clasa I i clasa a II-a de pe suprafaa celular (restricia
CMH)
diverse citokine
Aceste procese foarte complexe sunt necesare pentru elaborarea
rspunsului imun adecvat i specific.
411
CAPITOLUL 50
MODULAREA RSPUNSULUI IMUN
PRIN ANTIGEN
Rspunsul imun este influenat cantitativ i calitativ prin
proprietile antigenului i prin proprietile de prezentare ale acestuia celulelor sistemului limfoid.
Potenialul reglator al antigenului depinde mai ales de doz, de
imunogenicitatea epitopilor i de accesibilitatea acestora. Nerespectarea
unor minime condiii n privina acestor parametri va conduce la toleran
imunitar.
MECANISMELE TOLERANEI IMUNOLOGICE

Tolerana imunitar funcie de proprietile fizico-chimice
ale antigenului
Scderea greutii moleculare a unui antigen (sub 10.000 ) fr
modificarea specificitii acestuia, determin scderea rspunsului
imun.
Scderea numrului de epitopi de pe suprafaa antigenului va determina
creterea tolerogenitii.
Antigenele neprelucrate la nivelul celulelor prezentatoare de antigen i
cele neaccesibile celulelor sistemului imunitar vor induce rapid
tolerana imun.
Fraciunea solubil sau nemetabolizat a unui antigen induce tolerana
imun mai repede dect o fraciune particulat.
Agregatele moleculare (spre exemplu agregatele imunoglobulinice)
sunt bune imunogene. Dispersia acestor agregate ar putea induce starea
de toleran imunologic.
Tolerana imunitar funcie de modul de administrare al

antigenului
412
Asocierea unui antigen cu un adjuvant particulat i poteneaz acestuia

imunogenicitatea. Principiul se aplic n fabricarea vaccinurilor.
Adjuvantele clasice se prepar din substane uleioase (spre exemplu
adjuvantul Freud se prepar cu lanolin, parafin i celule moarte de
Mycobacterium tuberculosis) sau substane
minerale (fosfat de
aluminiu, hidroxid de aluminiu, alginat de calciu). Adjuvantele moderne
sunt lipozomi cationici sau lipidul A monofosforilat sau chiar
imunomodulatoare antitumorale, cum este UBENIMEX-ul (folosit n
compoziia vaccinurilor antiHIV moderne).
Administrarea unei doze unice de antigen este mai tolerogen dect
administrarea unor antigene asociate. Dac sunt asociate minimum dou
antigene diferite, capacitatea de rspuns imun crete. Principiul este
folosit n vaccinri, spre exemplu bivaccinul DT (diftero-tetano) sau
trivaccinul DTP (diftero-tetano-pertusis).
Administrarea antigenului pe cale oral sau inocularea intravenoas
(fr adjuvani) poate genera toleran imunitar. La administrarea
intramuscular, subcutanat sau intradermic, rspunsul imun apare mai
tardiv, dar dureaz mai mult. Administrarea intradermic a antigenului
stimuleaz preferenial imunitatea mediat celular. Administrarea
antigenului n zone diferite (sau pe ci diferite) ale corpului este mai
eficient dect administrarea unic.
n cazul inoculrilor succesive ale anumitor antigene se poate instala
competiia antigenic, n care primul antigen blocheaz rspunsul imun
pentru antigenul inoculat ulterior. Acest gen de reglare are importan
practic n aplicarea anumitor scheme de vaccinare.
Inocularea pentru prima oar a antigenului determin rspunsul imun
primar. (Spre exemplu prima doz de vaccin induce acest tip de
rspuns, n timp ce imunizrile rapel induc rspunsul imun secundar.)
RSPUNSUL IMUN N FUNCIE DE

DOZA DE ANTIGEN
413
Fig. nr. 46 - Influena dozei de antigen asupra rspunsului imun

(Ivanof i colab., 1982)
Exist o relaie strns ntre doza de antigen i rspunsul imun.

Astfel, exist o toleran imunitar real ; nu se instaleaz rspunsul imun
la doze de ordinul picogramelor (10-12g), urmat de posibilitatea instalrii
unei tolerane imunitare de doz joas, la cantiti de antigen de ordinul
nanogramelor (10-9g). Pe msura creterii cantitii de antigen la doze de
ordinul microgramelor (10-6g), rspunsul imun crete progresiv, pn la o
doz optim de antigen de ordinul miligramelor (10 -3g) pn la ordinul
gramelor. La doze mai mari de antigen dect doza optim apare tolerana
imunitar de doz nalt, prin suprancrcare antigenic i epuizarea
capacitii de rspuns imun.
Fracionarea unei doze antigenice i inocularea repetat n timp vor
declana un rspuns imun mai amplu dect administrarea ntregii cantiti
n doz unic. Repetarea stimulului antigenic duce la o amplificare a
rspunsului imun, dac repetarea se face la anumite intervale de timp intervale optime. Stabilindu-se pentru fiecare imunogen intervalele optime
dintre inoculri, Zdrodowski a fundamentat legea intervalelor, utilizat
n programele de imunizare (imunizare de baz, imunizare rapel).
Tolerana imunitar n funcie de maturitatea imunologic

a gazdei
414
Animalele de experien nou-nscute posed o stare de toleran

imunitar fiziologic, deoarece limfocitul B imatur induce fenomenul de
beretare mult mai greu. Tolerana imunitar a limfocitului B se poate
induce mai lent dect tolerana imunitar pentru limfocitul T. La nounscut exist i imaturitate a limfocitului TH. n concluzie, cu ct nivelul de
imunocompeten i maturitate imunologic este mai sczut, cu att
tolerana imunitar este mai uor indus. Bineneles c persoanele cu
deficit imunitar au risc crescut n instalarea toleranei imunologice,
comparativ cu persoanele normale.
Rolul influenelor genetice nu este foarte bine stabilit, dar se ia n
considerare influena genelor de rspuns imun individualizat (Ir), gene
care aparin complexului major de histocompatibilitate clasa a II-a.
Inducia toleranei imunitare s-ar putea realiza indirect, prin stimularea
aciunii limfocitelor T supresoare.
Tolerana imunitar indus prin limfocitele Ts

n procesele imunosupresoare intervin trei tipuri de celule TS:
Celule TS inductoare
Celule TS reglatoare sau transductoare
Celule TS efectoare
Supresia imun se realizeaz prin feed-back. Celula T S efectoare
inhib funcia limfocitelor TH i a limfocitelor TS inductoare proprii
circuitului respectiv.
Alt activitate a limfocitelor TS se realizeaz n cadrul reelei
idiotipice a sistemului imunitar. Teoria se bazeaz pe ideea c structurile
idiotipice de pe suprafaa celulelor T reglatoare ar putea funciona ca
elemente de ghidare ntr-un circuit supresor. Idiotipul receptorului T va fi
recunoscut de ctre alt celul, care posed un antiidiotip, procesul
desfurndu-se n lan.
Celulele TS au rolul esenial n meninerea toleranei la self i n
controlul negativ al amplitudinii rspunsului imun. Tolerana imunitar
natural, activitatea sczut a limfocitelor TS favorizeaz boli autoimune
i boli alergice. Activitatea excesiv a lf TS determin boli cu deficit imun.
Tolerana imunitar indus artificial

Cu scopul tratrii unor boli autoimune sau cu scopul meninerii unei
grefe sau a unui transplant, se apeleaz la factori imunosupresori, cum ar fi
drogurile citotoxice (Ciclofosfamida, Ametopterina, Azatioprina), serul
antilimfocitar sau iradierea limfoid total.
415
CAPITOLUL 51
DINAMICA RSPUNSULUI IMUN UMORAL
ndeprtarea antigenului (imunogenului) din organism se realizeaz
prin celule imunologice (imunitate mediat celular) i prin imunoglobuline
cu funcie de anticorpi (imunitate mediat umoral). Nu se poate face o
delimitare strict ntre IMC i IU, deoarece nu exist sintez de anticorpi
fr cooperare celular ntre celulele imunologice i de asemenea, celulele
imunologice i pot desfura efectul citotoxic n prezena anticorpilor
(citotoxicitate anticorpo-dependent).
Numeroase observaii experimentale arat c exist unele variaii n
cinetica rspunsului imun, n special n cazul imunitii umorale: rspuns
imun primar i secundar. Particularitile de rspuns imun apar n patru
faze distincte:
faza de laten a rspunsului imun
faza de cretere exponenial a concentraiei Ig-lor
faza de platou
faza de declin
Fig. nr. 47 - Dinamica rspunsului imun umoral
(Ivanof i colab., 1982)
RSPUNSUL IMUN PRIMAR

Faza de laten
416
Aceast etap are o durat variabil n funcie de mai muli

parametri: cale de inoculare, doza i natura antigenului, sensibilitatea
tehnicilor de detectare. Pentru antigene proteice solubile, faza poate dura
5-7 zile, iar pentru bacterii aproximativ 14 zile. n acest rstimp, antigenul
este fagocitat, prelucrat i prezentat prin celulele prezentatoare de antigen limfocitelor TH i B. n acest rstimp se activeaz toate procesele de
cooperare celular, cu transformarea limfocitelor B n plasmocite
secretoare de anticorpi.
Faza de cretere exponenial a concentraiei Ig
Faza de sintez activ sau de cretere logaritmic dureaz 4-6 zile,
n medie. n rspunsul imun primar, titrul IgM este maxim. IgM polimer
este foarte avid i foarte eficient. Producia de IgG ar ncepe dup doutrei zile, dar la valori mai mici dect titrul IgM. Creterea evident a IgG,
dup 5-6 zile ar putea fi legat i de declinul uor al sintezei IgM, care
dup cteva sptmni dispar prin circulaie.
Faza de platou
Rspunsul imun primar, instalat dup un stimul antigenic unic are o
durat variabil (12-16 zile) i corespunde unei concentraii constante i
crescute de imunoglobuline.
Faza de declin
Se caracterizeaz printr-o scdere a titrului de Ig, iniial lent i apoi
rapid i constant. Apare n zilele 21-28, iar durata fazei depinde de titrul
maxim atins i de viteza de catabolism. Procentul anticorpilor catabolizai
zilnic este de 18% pentru IgM , 7% pentru IgG i 25% pentru IgA. Cel mai
lent scade titrul IgG, titru care se menine timpul cel mai ndelungat.
Rspunsul imun primar fa de antigenele T independente are ca
particularitate predominana sintezei de IgM n toate fazele.
RSPUNSUL IMUN SECUNDAR

Acest tip de rspuns este indus dup al doilea contact al
organismului cu acelai antigen i prezint anumite particulariti:
poate fi iniiat cu o doz mai mic de antigen
perioada de laten este foarte scurt
Anticorpii apar mai rapid, ating concentraii mari n ser, aparin clasei
IgG (cu afinitate mare i aviditate sczut pentru imunogenul
declanator)
Sinteza IgG se menine timp ndelungat n rspunsul imun secundar
(faza de platou poate dura luni de zile).
417
Rspunsul imun secundar poate fi repetat de mai multe ori. Cu

fiecare repetare a stimulului, rspunsul imun apare mai rapid i cu o
intensitate mai mare. Fenomenul are aplicaie n imunizri. Aceste
fenomene sunt posibile prin creterea brusc a celulelor imunologice cu
memorie (o celul precursoare poate produce aproximativ 1000 celule cu
memorie). Diferenierea limfocitelor B nspre plasmocit este mult mai
rapid, deoarece procesele de cooperare celular evolueaz mai eficient.
n cazul antigenelor timoindependente, readministrarea unui
antigen de acest tip nu produce un rspuns de tip secundar, ci unul
asemntor cu rspunsul imun primar, cu hiperproducie de IgM. Aceste
antigene nu induc apariia celulelor cu memorie imunologic.
n rspunsul imun umoral secundar timodependent exist i sintez
de IgM, dar la titruri considerabil sczute, comparativ cu IgG. Dublarea
titrului IgG are loc la fiecare 8 ore n faza exponenial, cu atingerea
titrului maxim n aproximativ 14 zile (aproximativ de 100 ori mai mare
dect titrul maxim IgG din rspunsul imun primar).
Anticorpii produi n rspunsul imun secundar timodependent au o
afinitate mai mare dect cei produi n rspunsul imun primar (maturare a
afinitii). Nivelul afinitii depinde i de doza de antigen administrat.
Dozele mici de imunogen favorizeaz creterea afinitii, iar cele mari o
inhib. n cazul dozelor prea mari, celulele cu afinitate mare sunt
saturate, excesul de antigen devenind accesibil i celor cu afinitate mic,
astfel c anticorpii secretai vor avea afinitate diferit.
n general, n cursul rspunsului imun secundar toate reaciile
imune specifice au cea mai ampl exprimare: producerea rapid de
anticorpi cu efecte protectoare, fie reacii de hipersensibilitate imediat
(mai rar).
Studiind mecanismele rspunsului imun primar i secundar, s-a
fundamentat legea intervalelor, absolut necesar n stabilirea unor
scheme de imunizare.
418
CAPITOLUL 52
IMUNOPROFILAXIA I SEROTERAPIA
n anul 1798, Jenner introduce vaccinarea antivariolic, chiar
nainte de a cunoate agentul etiologic al variolei. Jenner a observat faptul
c mulgtorii fac aceast boal foarte rar. Pornind de la aceast constatare,
inoculeaz produs patologic la om, din leziunile prezente pe ugerele
vacilor. Metoda a fost denumit vaccinare (n limba latin,
vacca=vac).
Ulterior (1880), Pasteur a stabilit principiul atenurii virulenei
agenilor patogeni, care a marcat producerea primului vaccin fundamentat
imunologic (preparat dintr-o tulpin de Baccilus anthracis atenuat prin
cldur).
Vaccinul este un preparat realizat din ageni etiologici infecioi
(bacterii, virusuri, fungi, parazii), care administrat la om induce
imunitatea specific, fr reacii adverse.
VACCINURI CLASICE I MODERNE

Primele vaccinuri folosite utilizau microorganisme vii, neatenuate,
nlocuite apoi cu germeni atenuai sau omori prin diverse proceduri
fizico-chimice. n afar de vaccinurile cu antigene corpusculare (exemplu:
celule bacteriene) sunt folosite i vaccinuri subunitare, fracionate
(exemplu: vaccinuri preparate din ribozomi bacterieni vaccinul din
ribozomi ai Mycobacterium tuberculosis, obinut de soii Youmans).
Acestea sunt primele vaccinuri, denumite vaccinuri clasice sau
convenionale. Totui, pe lng valoarea lor profilactic indiscutabil,
uneori pot genera accidente postvaccinale, precum redutabile reacii
alergice sau chiar infecie, n cazul atenurii inadecvate a tulpinii
respective.
Pentru evitarea acestor reacii adverse a fost necesar obinerea
vaccinurilor convenionale ameliorate, ce utilizeaz antigene nalt
purificate, cunoscute din punct de vedere al virulenei i al epitopilor
semnificativi din punct de vedere imunologic.
Progresele biologiei moleculare a fcut posibil obinerea
vaccinurilor preparate prin tehnologia ADN recombinant, aa zise
vaccinuri de generaia a treia. Spre exemplu: Engerix B, Recombivax HB
utilizate mpotriva hepatitei cu virus B.
419
Vaccinurile preparate din polipeptide sintetice reprezint o mare

realizare a biochimiei. Se sintetizeaz doar peptidele cu semnificaie
imunologic (epitopi). Acest fragmente pot deveni imunogene prin
cuplarea lor cu molecule carrier = purttor. Adjuvanii reprezint
substane care cresc imunogenicitatea vaccinurilor purificate, nalt
selective. Dei aceste substane sunt foarte variate, pot stimula limfocitele
T helper, procesele de cooperare celular i producia de citokine.
Adjuvani convenionali sunt reprezentai de gelurile de oxid
(hidroxid sau fosfat de aluminiu). Astfel, anatoxina difteric (ADPA) este
purificat i absorbit pe fosfat de aluminiu.
Adjuvanii moderni sunt de natur proteic sau lipidic. Spre
exemplu, vaccinul viitorului va fi reprezentat de un carrier (probabil
proteic), pe care se vor fixa epitopii (sintetici) cu semnificaia imunologic
pentru mai multe boli infecioase. Se realizeaz astfel o poliimunizare.
Pentru prepararea vaccinurilor antivirale se folosesc adjuvani de tip
protein micelar, formele sterice ale acestor proteine fiind similare
celor din nveliul extern viral. Aceste vaccinuri antivirale sunt foarte
imunogene.
Virosomii (imunosomii) sunt structuri purttor artificiale
echivalente lipozomilor i reprezint vezicule fosfolipidice n care sunt
inclui spiculi glicoproteici virali. i virosomii reconstituie nveliul extern
viral dorit.
Iscomii sunt complexe imunostimulatoare, realizate prin legarea
spiculilor glicoproteici virali de substana Quil-A (o saponin care induce
spontan formarea de micele). Imunogenicitatea iscomilor este mai mare
dect cea a virosomilor.
Lipozomii sunt vezicule fosfolipidice utilizate ca i purttor, n
special pentru vaccinurile antivirale i antiparazitare.
Fig. 48 - Lipozomi multilaminari (Klein, 1991)
420
Proteosomii utilizeaz proteine de membran extern din peretele

celular meningococic. Proteosomii sunt structuri hidrofobe, care formeaz
spontan vezicule membranare, avnd o aciune asemntoare lipozomilor.
Proteosomii, recent descoperii, nu au reacii adverse i reprezint
carrier-ul ideal pentru o gam larg de vaccinuri, mai ales multivalente.
Vaccinurile moderne antiPlasmodium prezint ca adjuvani proteosomi i o
eficacitate crescut.
Vaccinurile antiHIV moderne, n curs de experimentare pe animale
(aproximativ 20 de tipuri diferite) sunt multivalente, cu epitopi preparai
din glicoproteinele de nveli (n special din glicoproteina 120 zona
variabil V3), cu adjuvani de tipul liposomilor, iscomilor, proteosomilor,
imunomodulatori antitumorali (Ubenimex). Administrarea intranazal a
acestor vaccinuri, crete rspunsul n imunoglobuline A secretoare la
nivelul mucoaselor; administrarea acestor vaccinuri pe cale parenteral
stimuleaz rspunsul imun general (umoral i mediat celular). Dei aceste
vaccinuri moderne par a fi foarte eficiente, costul lor extrem de ridicat face
momentan imposibil profilaxia n mas antiHIV.
Vaccinurile de generaia a cincea vaccinurile antiidiotip servesc
ca nlocuitori ai antigenelor i au fost propuse ca o alternativ la
vaccinurile convenionale, ADN recombinante sau chiar celor cu
polipeptide sintetice. Vaccinarea are la baz teoria lui Jerne 1974,
(privind reeaua idiotip-antiidiotip, cu rol n reglarea rspunsului imun) i
teoria hibridomului, pentru producerea anticorpilor monoclonali.
Vaccinurile antiidiotip se bazeaz pe fenomenul de mimare
molecular, prin care anticorpul care poart imaginea intern a
antigenului strin n structura sa, se comport similar antigenului nsui,
inducnd sinteza aceluiai tip de anticorpi protectori. Se realizeaz astfel
un proces de vaccinare fr antigen (!), antigenele fiind nlocuite de
anticorpi antiidiotip exogeni.
Tehnica respectiv obine o prim categorie de anticorpi (Ac1),
dup imunizarea cu antigenul incriminat. Anticorpii Ac1 sunt folosii
pentru imunizarea altor indivizi, obinndu-se anticorpi Ac2 antiidiotip
specifici, cu imaginea intern (complementar) a antigenului pentru care
se realizeaz imunizarea.
Vaccinurile antiidiotip sunt indicate pentru antigene ale agenilor
infecioi greu de obinut prin tehnologia ADN recombinant sau sinteze
biochimice. Sunt n curs de experimentare vaccinuri antiherpetice,
antipoliomielit. Specificitatea nalt riguroas a acestor vaccinuri nu
declaneaz reacii adverse i produce un rspuns imun mediat celular
destul de puternic.
421
Vaccinurile antiadezive mpiedic ataarea bacteriilor pe suprafaa

mucoaselor i stimuleaz fagocitoza nainte de colonizarea organismului.
La om au fost experimentate vaccinuri preparate din fimbriile Neisseria
gonorheae sau ale E. Coli. S-a observat faptul c administrarea acestor
vaccinuri determin titruri ridicate de anticorpi serici, fr ns a mpiedica
o colonizare a mucoaselor de ctre bacterii. Va fi necesar ameliorarea
tehnicii de preparare a acestor vaccinuri, pentru a obine titruri crescute de
anticorpi antifimbrii bacteriene, la nivelul mucoaselor.
Programul Naional de Vaccinoprevenie se bazeaz pe datele
calendarului de vaccinri:
Se stabilesc grupele populaionale i colectivitile de risc supuse
vaccinrii.
Se respect schemele de imunizare stabilite prin consens internaional,
pentru fiecare vaccin n parte.
Se asigur condiiile impuse de respectarea lanului de frig n scopul
transportului i depozitrii vaccinurilor.
Se constituie echipe de specialiti: epidemologi, infecioniti, pediatri,
care s coordoneze programele de imunizare de la nivelul dispensarelor.
Structura programului de vaccinare n anumite ri ine i de
posibilitile economice i de incidena bolilor transmisibile din zona
respectiv.
Programul Naional de Vaccinoprevenie din Romnia prevede
vaccinarea antituberculoas, antidifteric, antitetanic, antituse convulsiv,
antipoliomielit, antirujeol, antihepatit viral B.
VACCINURI ANTIBACTERIENE I ANTIVIRALE

Vaccinurile antibacteriene obligatorii folosite la noi n ar sunt:
Vaccinul BCG (Bacil Calmette Guerin), preparat dintr-o tulpin de
bacil tuberculos bovin, atenuat prin pasaje succesive pe cartof glicerinat
i biliat, timp de 13 ani. Tulpina respectiv induce IMC, respectiv
hipersensibilitate de tip tardiv la antigenele bacilului tuberculos.
Vaccinul DTP (Diftero-Tetano-Pertusis) conine anatoxin difteric,
anatoxin tetanic i celule bacteriene omorte ale Bordetelei pertussis.
Vaccinurile antibacteriene neobligatorii (folosite n situaii de risc
epidemiologic) sunt:
Vaccinul antiholeric preparat din celule bacteriene omorte, utilizat
n epidemia de holer.
422
Vaccinurile anti Pseudomonas preparat tot din celule bacteriene

omorte, este administrat profilactic marilor ari sau n infecii urinare
recidivante de aceast etiologie.
Vaccinul antitifoidic preparat din celule bacteriene omorte, se
administreaz n zone unde febra tifoid este epidemic.
Vaccinul antistafilococic administrat n infecii stafilococice cronice
Vaccinurile antivirale obligatorii folosite la noi n ar sunt
vaccinuri convenionale, atenuate sau inactive:
Vaccinul antipolio de tip Sabine preparat din mutante fr
neurotropism ale celor trei tipuri antigenice de virus polio (atenuat).
Vaccinul antipolio de tip Salck este un vaccin obligatoriu n rile
dezvoltate, preparat din virioni omori.
Vaccinul antirujeol preparat din tulpina supraatenuat EdmonstonSchwartz.
Vaccinul Engerix B vaccin obligatoriu antihepatit viral B (preparat
prin tehnologia ADN recombinant) administrat nou-nscuilor sau
grupelor de risc (ex.: personal medico-sanitar).
Vaccinurile antivirale neobligatorii sunt:
Vaccinul antigripal mixtur antigenic a tipurilor antigenice A,B, i
C cu virulen diminuat sau vaccinuri preparate din mixturi de
hemaglutinin i neuraminidaz. Se administreaz anumitor grupuri de
risc.
Vaccinul antirubeolos tulpina Cendhill, vaccin neobligatoriu la noi,
dar obligatoriu n Occident, administrat sexului feminin la vrsta
fertilitii, cu scopul prevenirii malformaiilor congenitale produse de
virus.
Vaccin antirabic preparat din virioni omori (vaccin Fermi).
Vaccinul antirabic preparat din tulpina atenuat Floury, administrat
dup muctur de animal.
Vaccinul antiamaril (antifebr galben) este administrat este
administrat doar persoanelor care circul n zone endemice.
ntr-un program de vaccinare trebuie cunoscute avantajele i
dezavantajele vaccinurilor antivirale atenuate sau virioni omori.
Vaccinuri antivirale cu virulen diminuat

Avantaje:
423
Puine doze impun un rspuns imun eficace, simulnd trecerea

pacientului prin boala respectiv
Determin rspuns imun mixt IU+IMC
Sunt ieftine (accesibile rilor slab dezvoltate economic)
Se administreaz pe cile naturale de ptrundere ale virusului (vaccinul
antipolio de tip Sabine se administreaz per os)
Exist posibilitatea eliminrii din circulaie a virusurilor slbatice
Dezavantaje:
Revers mutaia cu apariia fenotipului slbatic iniial
Efectul vaccinului poate fi perturbat prin fenomenul de interferen
Vaccinurile antivirale cu virioni omori
Avantaje:
Au o stabilitate genetic foarte mare
Pot fi administrate i la persoane imuno-deficiente
Controlul inoculrii este uor de efectuat
Dezavantaje:
Necesit cantiti mari de Ag n doze multiple.Ex.: vaccin antipolio
Salck
Contraindicaiile vaccinrilor
Temporare:
Strile febrile ca urmare a unor infecii benigne nu contraindic
vaccinarea, ci doar o amn
Administrarea imunoglobulinelor contraindic vaccinarea pe o
perioad de 4-6 sptmni
Tratamentele cu medicamente imunosupresoare contraindic
vaccinarea 1 pn la 3 luni
Sarcina contraindic vaccinarea cu ageni atenuai, vii. Riscul teratogen
este foarte mare n primele trei luni de sarcin
Tuberculoza pulmonar activ este o contraindicaie
Definitive:
n afeciuni neurologice grave nu se administreaz vaccinuri cu
neurotropism (ex.: virusul polio, virusul parotiditei)
Afeciuni organice grave, decompensate (insuficiena cardiac,
infarctul miocardic, nefropatiile cronice) contraindic vaccinarea
Complicaiile alergice (alergii majore la proteinele aviare) reprezint o
interdicie pentru vaccinare
424
425
Principalele reacii adverse ale vaccinurilor

Episoade febrile precoce: ADPA, ATPA, DT, vaccin antigripal,
antihepatitic B
Convulsii (la copil mic): DTP, vaccin antirujeolic
Leziuni supurate, adenopatii: vaccinul BCG, vaccin antirubeolic, anti
hepatit B
Paralizie: 1 caz la 3,2 milioane de doze vaccin antipolio Sabine
oc vaccinal: 1 caz la 100 000 de administrri; asemntor ocului
anafilactic apare la vaccinuri preparate din endotoxine
Evaluarea eficienei vaccinopreveniei

Se folosesc indicatori epidemiologici, urmnd frecvena unei anumite
boli infecioase n lotul persoanelor vaccinate, comparativ cu lotul
persoanelor nevaccinate
Se folosesc tehnici imunologice care evideniaz prezena
seroconversiei n anticorpi specifici (ex. Trusa Difterotest reacie de
hemaglutinare pasiv pentru demonstrarea eficienei vaccinrii
antidifterice). Trebuie stabilit, de asemenea, dac nivelul anticorpilor
obinut este protectiv.
Procedeele de imunizare sunt benefice pentru indivizi i reprezint
o bun metod de pstrare a sntii populaiei, prin metodele preveniei.
Eradicarea variolei va fi urmat curnd de eradicarea rujeolei i
poliomielitei, conform programelor OMS.
SEROTERAPIA
Serurile imune induc imunitatea pasiv i conin anticorpi specifici
mpotriva unui anumit agent infecios. Aceste seruri se folosesc n terapia
i profilaxia anumitor boli infecioase.
n anul 1890, Behring i Kitasato au demonstrat faptul c serul
animalelor imunizate cu toxina difteric neutralizeaz toxina. Din anul
1891, serul animalelor imunizate a fost folosit n terapia difteriei.
n anul 1889, V. Babe a utilizat serul antirabic i vaccinul n
prevenirea rabiei; de aceea l putem considera ntemeietorul seroterapiei i
seroprofilaxiei.
Serurile obinute prin hiperimunizarea animalelor de experien se
numesc seruri heterologe. Dei anticorpii se obin n cantiti mari,
dezavantajul principal l constituie boala serului sau ocul anafilactic.
426
Serul uman de la convalesceni nu se mai utilizeaz datorit

pericolului transmiterii hepatitelor virale i a virusului imunodeficienei
ctigate. Prin amestecul serurilor obinute de la aprox. 1000 de subieci se
obin concentrate de imunoglobuline numite gamaglobuline. Administrarea
acestora nu transmite bolile infecioase sus-menionate, dar pot produce
fenomene de hipersensibilizare prin administrri repetate. Administrarea
corect a agregatelor de imunoglobulin antiRh pot preveni accidentele
prin izoimunizare Rh. Gamaglobulinele hiperimune se obin din serul unor
subieci imunizai specific prin vaccinare (ex. Gamaglobulin hiperimun
antidifteric, antirabic, antirujeoloas, antiherpetic, antimalaric, etc.)
O alt clasificare a serurilor se poate face dup natura anticorpilor:
Seruri antibacteriene
Seruri antitoxice conin anticorpi antiexotoxin bacterian (ser
antidiferic, antitetanic, antibotulinic)
Seruri cu anticorpi anticelul bacterian - (ser anti Pseudomonas)
Seruri mixte anticorpi anti celul bacterian i antiexotoxin (ser
anti Clostridium perfringens, ser anticrbunos)
Seruri antivirale
exemplu: serul antirabic

n cazul utilizrii serurilor imune, se instaleaz imediat dup
administrare o imunitate pasiv, care persist un timp scurt. La noi se
folosesc serurile: antidifteric, antitetanic, antibotulinic, antigangrenos
polivalent i antirabic. Serurile trebuie pstrate la temperaturi sczute (4
C) i la ntuneric. nainte de administrare, fiolele se verific privind
termenul de valabilitate i lipsa impuritilor.
427
CAPITOLUL 53
MECANISMELE CITOTOXICITII
Mecanismele citotoxice sunt mecanismele de distrugere ale celulei
int, realizate prin:
limfocitele T citotoxice - CD8, sub restricia CMH.
citotoxicitate mediat celular anticorpo-dependent (ADCC), produs
prin celulele K (Killer) n prezena anticorpilor specifici.
citotoxicitate prin aciunea anticorpilor specifici i a sistemului
complement (prin complexe imune).
citotoxicitate mediat prin celulele NK (natural Killer), fr restricie
CMH.
citotoxicitate mediat prin enzime lizozomale, eliberate de la nivelul
PMN i macrofagelor.
MECANISME MOLECULARE
n urma contactului dintre celula citotoxic i celula int, sunt
eliberate substane denumite citotoxine, molecule care realizeaz
microcanalicule membranare n membrana intei i fragmentarea nucleului
acesteia. Leziunile membranare sunt tubulare, cu dimensiuni de 5-20 nm.
Substanele citotoxice sunt serinesteraze i se numesc perforine i
granzime. Pentru formarea unui por membranar, sunt necesare 3-4
molecule de perforine. Polimerizarea monomerilor perforinei se realizeaz
n prezena Ca2+; apoi perforinele sufer modificri conformaionale care
duc la polimerizarea lor n dublul fluid fosfolipidic membranar, cu
formarea unor canalicule, prin distorsionarea structurii membranei.
Sistemul C realizeaz distrucia celulei int prin formare de pori
membranari, dup formarea complexului de atac membranar (proteine
polimerizate). Perforinele (citolizinele) sunt foarte asemntoare
componentei C9 a C.
Celula uciga (citotoxic) este protejat de efectul distrugtor al
perforinelor, prin intermediul protectinelor, care inactiveaz perforinele
active, fcnd imposibil ptrunderea acestora n straturile fosfolipidice.
Perforinele deschid calea granzimelor, care i exercit efectul
distructiv n celulele int, prin porii formai.
428
Liza celulei int genereaz apoptoza (apo = separare, ptosis =

cdere), cu contracia celulei int, dilatarea reticulului endoplasmatic i
modificri nucleare (agregate cromatiniene). Din fragmentarea celular
rezult corpi apoptotici care vor suferi un fenomen distructiv secundar,
cu moartea celulei. Ulterior, corpii apoptotici sunt fagocitai de ctre MF.
Alte ipoteze afirm rolul redus al citotoxinelor i rolul considerabil
al unui fenomen de autoliz intern. Moartea celular programat
(fiziologic) este controlat genetic i poate include noiunea de moarte
apoptotic (din care lipsesc unele etape - ex.: fragmentarea nucleului).
Expunerea la substane care lizeaz acizii nucleici, privarea de factori de
cretere, infecia cu anumite virusuri, induc moartea celular. Un posibil
mecanism este reprezentat de ctre activarea proteazelor celulare prin
protein - kinaze, sub aciunea Ca2+. Activarea endonucleazelor
fragmenteaz cromatina, favoriznd apoptoza. n 1993 a fost demonstrat
proteoliza intracelular prin convertaza IL1 - i proteazele nrudite. IL1 activeaz prin proteoliz unele enzime precursor, care determin
modificrile morfofuncionale ale morii celulare programate. Al doilea
mecanism de aciune al IL1 - presupune activarea proteolitic a unor
factori de reglare care induc transcripia unor gene cu rol n apoptoz.
Mecanisme apoptotice aberante pot fi activate la pacieni HIV +, cu
inducerea morii limfocitelor TH, mai sensibile la semnale apoptotice.
Clonele self autoreactive se ndeprteaz, probabil, din organism prin
semnale apoptotice. Corpii apoptotici nefagocitai ar putea produce alterri
ale esuturilor n care apar i autoanticorpi (anti - ADN), oferind nc o
ipotez a originii bolilor autoimune.
O alt explicaie a morii celulare programate o constituie
ceramidele derivate din sfingomielina membranar: iniiaz direct moartea
celular, prin stimularea unor mecanisme proapoptotice, fie inhib
mecanismele anti apoptotice existente. Ceramidele inhib transcripia mARN n circa 4-6 ore. Acumularea ceramidelor poate produce inversarea
polaritii membranei, cu exprimarea pe faa extern a acesteia - a
fosfatidil serinei. Este favorizat recunoaterea i procesul de fagocitare al
celulelor apoptotice de ctre MF.
Rolul granzimelor n apoptoz este insuficient elucidat. Granzimele
ptrund n celul prin porii realizai de ctre perforine i acioneaz n
prezena acestor substane. Pentru fragmentarea ADN, concentraiile de
granzime necesare sunt foarte reduse, aproximativ 10 -7 M. Pe lng
funciile citotoxice, granzimelor li s-au atribuit roluri n extravazarea,
migrarea i diferenierea limfocitelor T; granzimele inhib dezvoltarea
tumorilor, prin blocarea aderenei la substrat.
429
Exist mai multe tipuri de granzime, notate A, B, C, D, E, F, G, H,

Triptaza - 2, Met - aza 1. Acestea produc leziuni la nivelul membranei
nucleare i la nivelul nucleului, clivnd diverse situsuri: Arg/ Lys, Asp/
Glu, Phe/ Leu, Met/ Leu etc. Greutatea molecular a granzimelor este
cuprins ntre 27 - 33 k. Granzima B este unica serin - proteaz al crei
situs de clivare este situat n apropierea unui reziduu acid; activarea IL 1
este dependent de aceast granzim, foarte abundent n granulaiile
citotoxice. Efectul distructiv al granzimei B asupra cromatinei se
realizeaz prin intermediul ADN - azei I i prin kinaza p34 cdc2. Activarea
aberant a kinazei poate induce fenomenul apoptotic.
Proteina antiapoptotic cea mai studiat este proteina Bcl-2, de 26
k, prezent n membrana mitocondrial extern, reticulul endoplasmic
neted i n membrana nuclear. Prin localizarea pe endomembranele
celulare, Bcl-2 inhib peroxidarea membranelor i eliberarea radicalilor
activi ai oxigenului. Proteina Bcl-2 inhib funcia proteinei p53, protein
care poate declana apoptoza (n anumite situaii), nainte de faza S a
ciclului celular. Alte substane antiapoptotice sunt vitronectina i
fibronectina.
Unele virusuri cu ADN posed mecanisme de anihilare ale
granzimelor prin serpine (cu aciune anti serin - proteaz). Alte virusuri
(probabil cu ARN) pot sintetiza proteine Bcl-2 - like sau blocheaz
influxul Ca2+ intracelular.
Modularea efectului substanelor antiapoptotice ar putea avea
aplicaii n transplantul de organe.
CLASIFICARE FUNCIE DE CELULA EFECTOARE

Mecanismele citotoxicitii mediate prin celulele Tc
Dup recunoaterea imunologic a celulei int, are loc aderarea
limfocitelor Tc (CD8), n prezena Mg2+.
Faza de programare pentru liz, denumit i srutul morii
necesit aproximativ 10 minute, prezena Ca2+ i o temperatur optim de
37o C. Apar primele leziuni la nivelul membranei celulei int.
Faza de liz se caracterizeaz prin pierdere de metabolii i
macromolecule, consecutiv leziunilor membranare.
Celulele Tc se desprind apoi de celula lizat i pot relua aceast
lovitur letal de trei sau ase ori. Celulele T c (CD8+) au rol esenial n
aprarea antiviral i n respingerea grefelor incompatibile.
Citotoxicitatea mediat prin macrofage

430
Este mai lent dect cea produs prin limfocite Tc (dup

aproximativ 24 de ore). Celulele atacate preferenial sunt celulele tumorale
i celulele bacteriene cu parazitism intracelular (Mycobacterium, Brucella,
Ricketsia etc.) Citotoxicitatea are specificitate mai restrns, putnd fi
distruse i hematii sau celulele unor esuturi.
Citoliza mediat de granulocite

Granulocitele PMN fagociteaz i distrug n special
microorganisme piogene. Eozinofilele particip la anumite reacii de
hipersensibilitate de tip imediat i realizeaz un efect antiparazitar.
Granulocitele posed receptori pentru Fc -ul imunoglobulinelor i
pentru C3 a sistemului C i pot realiza citotoxicitate Ac dependent.
Celulele NK
Reprezint aprox. 5 % din totalul celulelor mononucleare. Sunt mai
frecvente n splin i mai puin prezente n ganglionii limfatici. Sunt
neaderente, nefagocitare, nu sunt supuse restriciei CMH i nu au memorie
imunologic. Aciunea celulelor NK este potenat prin interferoni. Gradul
de activitate citotoxic a acestor celule este evideniat in vitro prin
capacitatea celulelor NK de a liza celulele marcate cu izotopi radioactivi.
Dup recunoaterea i formarea de contacte cu celula int, are loc
programarea pentru liz i apoi liza propriu-zis. Celulele NK purificate
secret factori solubili citotoxici, care produc o liz mai lent (aprox. 18
ore). Activitatea celulelor NK scade proporional cu vrsta subiectului, fapt
care ar putea explica frecvena crescut a tumorilor la vrstnici.
Activitatea citotoxic este potenat prin interferoni. Aceste
substane mresc numrul celulelor NK legate de celulele int i cresc
capacitatea litic a celor deja legate. Sunt active toate speciile de
interferoni (, i ). De asemenea, citoliza prin celule NK este potenat
prin IL2. Probabil, efectul stimulator al IL 2 se manifest prin creterea
sintezei de INF.
Principala activitate a celulelor NK se refer la controlul apariiei
metastazelor tumorilor (rol antitumoral). Celulele NK au i activitate
antiviral, dar i antifungic i antiparazitar. Au rol n respingerea
grefelor i n reglarea hematopoezei normale. Proprietile lor
imunoreglatoare se refer la reglarea anticorpogenezei, reglarea activitii
celulelor Ts i a imunitii mediate celular.
Citotoxicitatea prin celule killer
431
Celulele K produc citotoxicitate dependent de anticorpi, cu

specificitate imunologic. Acioneaz doar asupra celulelor int
acoperite cu anticorpi specifici i produc citotoxicitate n absena C;
sunt neaderente, nefagocitare, nu produc rozetarea hematiilor.
Liza se realizeaz prin legarea IgG de celula int, fragmentul F c al
IgG fiind fixat pe celula K. Cantitatea de anticorpi specifici implicai n
acest proces este mai mic dect cea necesar fixrii sistemului
complement. n cazul celulelor K, imunoglobulinele servesc ca i o punte
de legtur cu celula int. Mecanismele moleculare ale citotoxicitii sunt
foarte asemntoare limfocitelor Tc.
S-a observat faptul c celulele NK i K au foarte multe caracteristici
comune; ar putea fi un singur tip de celule efectoare, care ar putea aciona
citotoxic direct (NK) i indirect prin IgG (celule K).
Citotoxicitatea natural indus de limfokine

Realizat de ctre celulele LAK- Lymphokine Activated Killers
Cells, produc i liza celulelor int rezistente la activitatea celulelor NK.
Studii ulterioare au artat ns c celulele LAK nu reprezint un grup
aparte de celule efectoare, ci reprezint celule NK cu activitate
imunologic potenat prin IL2.
Fenomenul de citotoxicitate face parte din funcia de
supraveghere imunologic, liznd celule non-self (tumorale, celule
infectate cu diveri ageni etiologici, celule self alterate sau mbtrnite).
Fig. nr. 49 - Mecanisme citotoxice (dup Zarnea, 1991)
432
IMUNITATEA ANTITUMORAL
Rspunsul imun specific are un rol major n controlul difuzibilitii
i proliferrii tumorilor, n special prin mecanismele citotoxicitii (celule
NK, celule K, macrofage, limfocite T citotoxice), aciunea sistemului
complement i prin unele interleukine (factorul necrozant tumoral - TNF,
IL2, interferoni).
Similitudinea mecanismelor de aprare imunologic antiviral i
antitumoral ntresc ideea c majoritatea tumorilor prezint o etiologie
viral. Virusurile oncogene se pot integra ca i provirus n genomul
celulei infectate, constituind primul semnal al oncogenezei. Descoperirea
genelor oncogene a fost demonstrat prin transformarea neoplazic in vitro
a unor celule normale. S-a constatat apoi faptul c i celulele indemne
conin secvene genice omoloage oncogenelor, denumite protooncogene,
care codific sinteza unor proteine implicate n reglarea multiplicrii
celulelor normale. Duplicaia genic (gen protooncogen i gen
oncogen viral) ar putea amorsa o capacitate proliferativ celular
anormal, care s iniieze dezvoltarea tumorii. Conform teoriei
supravegherii imune, se presupune c prin mecanismele imunologice
normale se pot ndeprta aproximativ 103 celule transformate neoplazic, cu
antigene tumorale de suprafa variate: TTSA - antigene tumorale specifice
de transplantare, TSA - antigene tumorale specifice, TATA - antigene
asociate antigenelor TTSA, antigene oncofetale).
Antigenele TTSA induc proliferarea limfocitelor T citotoxice n
mod preferenial. n aproximativ 38% dintre tumorile spontane la om,
infiltrarea lor cu limfocite Tc variaz ntre 18% i 87% (Olinescu).
Experimental limfocitele Tc ar fi mai eficiente n regresia tumorilor induse
viral, care sunt puternic imunogene i ar putea avea un rol redus n
tumorile spontane, care sunt slab imunogene. Rspunsul imun antitumoral
n anticorpi specifici este foarte slab (infiltraia tumorilor cu limfocite B nu
depete 1% conform experimentului discutat anterior). Anticorpii
specifici determin liza celular mediat prin complement, citotoxicitate
ADCC i promoveaz fenomenele fagocitare ca opsonine specifice.
433
Macrofagele activate prezint activitate tumoricid ntr-un raport

optim 1:1 - celul tumoral : macrofag. n afara efectului citotoxic direct,
macrofagele se constituie n celule prezentatoare de antigen i n celule
secretoare de citokine antitumorale.
Rolul major n aprarea antitumoral l dein celulele NK, care
realizeaz citotoxicitate independent de CMH. Celulele LAK prezint un
potenial antitumoral exacerbat, prin intervenia stimulatoare a IL 2 i INF.
Celulele NK scad progresiv cu vrsta subiectului, fapt care explic
frecvena crescut de apariie a diverselor tumori la vrstnici.
TNF are aciune antitumoral similar INF. Activitatea TNF nu are
specificitate de specie i presupune activarea endonucleazelor cu
fragmentarea ADN-ului celulei int i activarea enzimelor lizozomale ale
celulelor efectoare.
Imunoterapia antitumoral
Imunotoxinele sunt molecule imunoglobulinice IgG (anticorpi
monoclonali) cuplai cu diferii ageni citotoxici, foarte selectivi: izotopi
radioactivi, chimioterapice antitumorale, toxine (vezi tabelul nr. 26).
AMC cu specificitate dubl (AMC bifuncionali) se obin prin
metode fizico-chimice i de inginerie genetic, prin asocierea unor
jumti de molecule imunoglobulinice cu specificitate distinct.
Tabelul nr. 30 - Imunotoxine (dup Misfeldt)
434
IMUNOTOXINA
EXEMPLE
Anti-Ig idiotip
Anti-receptor pt. IL2
TUMORA
Limfoame
celule B
AMC
Limfoame
celule T
AMC anti CD5 - Ricin A Limfoame
AMC anti CD22 - Ricin A celule
AMC cuplai cu AMC anti CD19 - Ricin A Limfoame
toxine
celule
Limfoame
celule B
AMC cuplai cu AMC - Chlorambucil
Melanom
citostatice
antimelanom
211 Bismut - anti Th1
Celule
AMC cuplai cu
transformate
izotopi radioactivi
tumoral
AMC anti CD3 i anti Sarcom
TAA
Melanom
AMC cu
AMC anti CD3 i anti
specificitate dubl
hormon
stimulator
melanoci-tar
cu
cu
cu
T
cu
B
cu
Descoperirea AMC bifuncionali constituie baza viitorului tratament

antitumoral, mult mai eficient dect experimentele anterioare: terapia cu
TNF este marcat de efecte adverse precum endocardita necrozant sau
reacii de hipersensibilitate; terapia cu INF este limitat prin toxicitatea
medular a acestuia iar terapia cu celule LAK proprii pacientului este
eficient numai mpotriva tumorilor cu antigene specifice puternic
imunogene.
Imunoprofilaxia antitumoral este n curs de experimentare i
vizeaz tehnici ADN recombinant pentru sinteza antigenelor tumorale
specifice i nu n ultimul rnd - vaccinuri antivirale orientate mpotriva
virusurilor cu potenial oncogen.
435
CAPITOLUL 54
IMUNITATE ANTIBACTERIAN, ANTIVIRAL,
ANTIMICOTIC, ANTIPARAZITAR
IMUNITATEA ANTIBACTERIAN
Aprarea imun se realizeaz att prin mijloace nespecifice, ct i
specifice. Rezistena natural, (prin barierele cutaneo-mucoase i prin
factorii cunoscui) - se opune ptrunderii agenilor patogeni. Cea mai mare
parte a bacteriilor patogene este eliminat de la poarta de intrare prin
mecanisme nespecifice: lizozim, proteina C reactiv, fagocitoza,
inflamaia.
Rspunsul imun umoral specific este declanat de ctre bacterii cu
dezvoltare extracelular i de ctre exotoxinele bacteriene. Bacteriile care
au aderat la nivelul mucoaselor (bronhice i digestive) sunt nlturate prin
IgAs.
Opsonizarea este un proces obligatoriu pentru iniierea rspunsului
imun antibacterian prin sistemul mononuclear macrofagic. IgG i IgM sunt
opsonine specifice, neutraliznd i unii factori antifagocitari ai unor
bacterii (polizaharide capsulare, proteina M, antigenele O etc.). Anticorpii
IgM produc aglutinarea unor bacterii (mpiedicnd penetrarea) sau produc
liza acestora prin activarea sistemului complement.
Neutralizarea toxinelor bacteriene se realizeaz prin anticorpi
neutralizani, protectori (anticorpi antidifterici, antitetanos, antieritrotoxin
streptococic etc.).
Rspunsul imun celular este orientat n special mpotriva bacteriilor
cu multiplicare intracelular (Mycobacterium, Brucella, Lysteria etc.).
Aceste bacterii sunt fagocitate de ctre PMN i macrofage, dar sunt foarte
greu de distrus, din cauza factorilor lor de patogenitate. Macrofagul poate
fi activat n vederea creterii puterii fagocitare, prin intermediul MAF
(Factor de activare al macrofagelor).
Macrofagele infectate sunt distruse prin limfocitele T citotoxice, cu
funcia citocid potenat prin IL2.
436
IMUNITATEA N VIROZE
Imunitatea n viroze acute
Rspunsul imun limiteaz replicarea viral i diseminarea
virusurilor. Anticorpii neutralizeaz diverse structuri virale sau efectul
citopat tisular, n timp ce IMC acioneaz asupra celulei int infectat cu
virus.
n infeciile virale generalizate, intensitatea rspunsului imun este
mare, deoarece antigenele respective ajung mai repede la nivelul organelor
limfoide; se sintetizeaz cantiti mari de anticorpi de tip IgM i IgG, care
neutralizeaz infectivitatea viral.
n infeciile virale localizate la nivelul mucoaselor este indus
sinteza local de anticorpi de tip IgAs. Ac neutralizani fac parte din
clasele IgM, IgG, IgA. Dozele mici de antigene virale induc sintez de
IgM (de durat scurt), iar dozele mari de antigen viral induc sinteze
crescute de IgM i IgG. Virusurile nvelite pot fi distruse prin aciunea
sistemului complement.
Rspunsul antiviral mediat celular se realizeaz prin intermediul
limfocitelor T citotoxice, cu activitate potenat prin limfocitele T helper.
Limfocitele Tc sunt mai eficiente n controlul diseminrii virusurilor, iar
celulele NK i celulele Killer protejeaz organismul fa de reinfecie.
Interferonii au aciune antiviral nespecific; ating titrul cel mai
nalt n organismul infectat la circa 12 - 48 ore dup stimularea antigenic.
Se previne astfel rembolnvirea cu un alt virus timp de dou pn la ase
sptmni. De aici utilitatea interferonului n profilaxie i terapie.
Imunitatea n viroze persistente

Infeciile virale persistente au evoluie ncetinit, att n incubaie,
ct i n cursul bolii clinic manifeste. Aceast incubaie prelungit se poate
explica prin existena strii de provirus (genom viral integrat n genomul
celulei gazd). Persistena infeciei se datoreaz ineficienei mecanismelor
imunologice de aprare specific ale gazdei. Encefalitele spongioase, cu
ageni etiologici precum viroizii sau prionii, nu induc rspuns imun.
Greutatea lor moleculara sub 10.000 le confer o imunogenicitate extrem
de sczut iar reaciile imunologice nu prezint intensitatea necesar
eliminrii virusului.
437
n infeciile persistente este posibil nlocuirea virusurilor virulente

cu particule virale defective, ca fenomen al autointerferenei. n infeciile
latente, virusurile se pot cantona n structuri protejate fa de reacia imun
(ex. v. herpetice la nivel neuronal, v. Epstein Barr la nivelul limfocitelor
B). Alterrile rspunsului imun pot fi considerabile prin distrucia
limfocitelor TCD4, realizat de ctre virusul imunodeficienei umane
(prbuirea imunitii mediate celular). Alteori, reacia IMC este
insuficient prin prezena anticorpilor blocani, care mpiedic limfocitele
T citotoxice s acioneze asupra celulelor infectate cu virus. Multiplicarea
virusului HIV n monocite explic de asemenea o IMC ineficient.
Un tip particular de infecii cronice l constituie cele produse de
Oncornavirinae, cu o evoluie particular a infeciei - oncogeneza viral,
cu origine n fenomenul de supresie imunitar.
IMUNITATEA N MICOZE
Aprarea antifungic se realizeaz prin mecanisme nespecifice i
specifice. Mecanismele IMC reprezint rolul esenial, prin granulocite
neutrofile, macrofage i celule NK.
Polimorfonuclearele neutrofile realizeaz aprarea imunitar fa de
specii precum Candida i Aspergillus. Celulele NK ofer o protecie foarte
eficient mpotriva genului Candida, dar i asupra altor genuri de fungi
(ex.: Criptococcus).
Macrofagele acioneaz antifungic prin mecanisme citotoxice,
efectul lor fiind potenat prin MAF, IL3 i INF.
n micozele localizate superficial (ex.: dermatomicoze), rspunsul
imun este foarte slab i infecia are mare risc de cronicizare.
n micozele profunde, mecanismele imune sunt de tip
hipersensibilitate tardiv, cu leziuni de tip granulomatos nodular.
Deficitele imune celulare favorizeaz diseminarea fungilor n
organism, cu apariia micozelor sistemice. Spre exemplu, Candida albicans
poate activa limfocitele T supresoare CD 8+, care agraveaz imunosupresia.
Micozele apar n mod preferenial la subieci cu deficit imunologic
timodependent.
IMUNITATEA N PARAZITOZE
438
Organismul gazd dezvolt un rspuns imun antiparazitar mixt mediat celular i mediat umoral. n infecii cu parazii localizai
intracelular imunitatea celular confer rezisten fa de infecie. Eficiena
reaciilor imunologice este extrem de divers din cauza antigenelor
parazitare foarte variate, funcie de stadiul de dezvoltare al parazitului i
funcie de localizrile acestuia.
Paraziii se protejeaz mai bine fa de mecanismele imunologice
ale gazdei, prin agresine:
nchistarea parazitului n diverse structuri sau localizarea n sistemul
nervos, blocheaz accesul efectorilor sistemului imunitar.
Variabilitatea antigenic parazitar este foarte mare, fapt care
suprasolicit mecanismele imunitare.
Paraziii elimin factori imunosupresori: substane limfocitotoxice sau
substane cu rol n clivarea imunoglobulinelor; Toxoplasma gondii se
poate multiplica n macrofag.
Anticorpii antiparazitari sunt mai puin protectori, chiar dac se produc
la titruri nalte; majoritatea anticorpilor sunt utili n serodiagnostic.
Mecanismele IMC reduc diseminarea parazitar prin limfocitele T
activate specific i prin macrofagele activate. Limfadenopatiile apar
constant n infeciile parazitare, ca reacie la persistena stimulrii Ag.
Granulocitele eozinofile au efecte majore n infeciile helmintice.
IL5 stimuleaz eozinofilopoeza. Limfocitele T activate stimuleaz
producia de IgE, cu rol antiparazitar. IgE activeaz mastocitele care vor
produce factor chemiotactic pentru eozinofile, histamin, serotonin,
heparin i alte substane vasoactive.
Limfocitele T helper activeaz rspunsul imun al altor clone de
limfocite B, pentru producerea anticorpilor specifici mpotriva unor
antigene parazitare. Aceti anticorpi intervin n cadrul reaciei de
citotoxicitate celular anticorpo-dependent, ADCC. Anticorpii
antiparazitari specifici pot bloca situsurile de ataare ale paraziilor pe
celulele gazdei sau pot avea rol de opsonine specifice, pentru stimularea
fagocitozei. Eficiena acestor anticorpi este foarte sczut n infeciile cu
protozoare patogene care colonizeaz intestinul. Rspunsul imun umoral
este ns foarte puternic atunci cnd agentul parazitar se cantoneaz la
nivelul esuturilor (parazit extracelular). Titrul crescut de anticorpi nu are
specificitate foarte nalt, ci mai degrab imunoglobulinele sunt
policlonale.
Helminii pot declana fenomene de hipersensibilitate imediat i
tardiv. Aceast particularitate imunologic poate fi folosit i n scop
diagnostic. Astfel, se utilizeaz teste cutanate pentru diagnosticul
echinococozei, ascaridiozei, trichinelozei, strongiloidozei etc.
439
Progresele biologiei moleculare au diversificat spectrul vaccinurilor

antiparazitare, totui mai restrns dect cel al vaccinurilor antibacteriene
sau antivirale.
440
CAPITOLUL 55
IMUNOPATOLOGIE
REACII DE HIPERSENSIBILITATE
Reacii imune exacerbate, denumite i alergii (allos - gr.,
nseamn altfel) definesc stri de hipersensibilitate imunologic. Dup
clasificarea cercettorilor P. G. Gell i Coombs, exist patru tipuri de
reacii, primele trei de tip imediat (mediate de anticorpi) i ultima de tip
ntrziat, tardiv- mediat prin limfocit T i macrofag.
Hipersensibilitatea imediat de tip I, anafilactic.
Hipersensibilitatea imediat de tip II, citotoxic.
Hipersensibilitatea de tip III, mediat prin complexe imune.
Hipersensibilitatea de tip IV, tardiv, de tip tuberculinic.
Hipersensibilitatea imediat de tip I

Este o stare de activitate exagerat fa de un antigen (alergen), care
poate s apar la orice membru al unei specii (anafilaxie) sau numai la
anumii indivizi predispui, hiperreactivi (atopie).
Acest tip de reacie este provocat de ctre anticorpii din clasa IgE,
denumii i reagine. Acestea se fixeaz imediat pe mastocite i bazofile,
dup stimulul antigenic. La repetarea acestui stimul se va declana
degranularea mastocitelor i bazofilelor, cu eliminarea aminelor
vasoactive: histamina, bradikinina, factori chemotactici, leucotriene, cu
fenomene clinice locale (urticarie, eczeme, astm bronic, rinit) sau
generale (oc anafilactic). Acest tip de oc se caracterizeaz prin
prbuirea tensiunii arteriale (prin vasodilataie), spasm bronic sau glotic
i moarte.
Subiecii atopici prezint un nivel seric al IgE mai mare dect
normalul i receptori specifici pentru IgE la nivelul mastocitelor i
bazofilelor n cantiti de 5-10 ori mai mari. Dei acest tip de
hipersensibilitate prezint mari dezavantaje, ar prezenta totui un efect
favorabil n infeciile parazitare (IgE prezint un cert rol antiparazitar).
Activarea strii de hipersensibilitate reaginic se realizeaz prin
antigene bivalente sau multivalente care se fixeaz la nivelul IgE. Se
formeaz grmezi de IgE, legate de receptori, la un pol al celulei,
aceasta fiind prima etap a activrii mastocitelor.
441
Alte mecanisme de activare presupun intervenia anticorpilor

antiidiotipici anti-epitopi Fab a IgE sau a lectinelor (fitohemaglutinina,
concavalina A), care se fixeaz de componentele glucidice ale F c ale IgE.
(Se explic alergia la unele fructe).
Alergenele sunt foarte variate, marea majoritate neinfecioase (ex.:
polen, praf de cas, dejecii de acarieni, proteine din lapte, ou, antibiotice,
anestezice, scuame cutanate, veninul viespilor, fragi, cpuni, conservani
alimentari, substane cosmetice).
Detectarea acestui tip de hipersensibilitate se realizeaz prin:
reacia Prausnitz - Knster (la om)
testul de anafilaxie pasiv cutanat (la animale)
testul radioalergosorbent
La subiecii predispui se realizeaz desensibilizri repetate (cu
scop terapeutic, utiliznd doze mici de alergen).
442
Fig. nr. 50 - Sindromul alergic (dup Vaida)

Alergen
Activare celular
- monocite
- limfocit TH
- mastocite
- bazofile
Mediatori vasoactivi
Histamina- Vasodilataie, edem
- Contracia muchilor netezi
(bronhospasm)
- Hipersecreie de mucus
- Sintez de prostaglandine
Adenozina - Vasodilataia coronarelor
- Contracia muchilor netezi
Proteaze
- Inflamaie
- Activarea kininelor
- Sinteza de angiotensine
PAF
- Agregare trombocitar
(eliberare de tromboxan
i serotonin)
- Recrutare eozinofile i PMN
- Edem
- Hipersecreie de mucus
Protaglandine
- Bronhospasm
- Migrare PMN
Leucotriene
- Spasm, edem
- Scderea funciei cardiace
- Activitate chemiotactic etc.
fixare IgE
Factori chemotactici
Infiltraie celular
(Neutrofile, Eozinofile,
Bazofile)
Mediatori ai
inflamaiei
Hipersensibilitatea de tip II, citotoxic

Acest tip de reacie se produce fa de antigene prezente pe
suprafaa unor celule proprii organismului, prin:
liza celular declanat prin sistemul complement activat
opsonizare i fagocitoz
citotoxicitate anticorpodependent
Activarea sistemului complement are loc n urma combinrii
anticorpilor IgG sau IgM cu antigenele de pe suprafaa celulei int.
Complexul de atac membranar C5b6789 va determina citoliza.
443
Datorit formrii complexelor antigen - anticorp, celulele int

opsonizate pot fi fagocitate. n situaia compuilor cu molecul prea mare,
care nu pot fi nglobai, se produce fenomenul fagocitozei frustrate, cu
expulzarea coninutului granulaiilor lizozomale n mediul extern, cu
apariia leziunilor tisulare.
Activarea funciei celulelor ADCC determin liza celulelor int.
Moleculele de IgG realizeaz o punte ntre celula int i celulele
efectoare, prin legarea de antigen prin fragmentul Fab i prin legarea F C de
celula killer.
Sindroamele clinice caracteristice sunt:

hemoliza posttransfuzional (dup transfuzie cu snge incompatibil)
anemia hemolitic autoimun (autoanticorpi antihematii)
sindromul Goodpasture (autoanticorpi antimembran bazal a
rinichiului sau anticelul pulmonar)
boala hemolitic a nou nscutului (prin incompatibilitate de Rh)
trombocitopenii autoimune (autoanticorpi antitrombocitari)
sterilitate prin anticorpi antispermatozoizi
reacii alergice medicamentoase (medicamentele administrate mai ales
parenteral pot forma conjugate de tipul hapten - purttor, care pot
deveni imunogene i pot produce autoanticorpi).
Hipersensibilitatea de tip III, prin complexe imune (sau

Reacia de tip Arthus)
Organismul uman poate fi uneori expus la un exces de antigene
(infecii persistente, contact repetat cu alergeni externi n cantiti mari).
Excesul de complexe imune produs n organism atrage depunerea acestor
complexe n anumite regiuni ale acestuia, cu apariia unor reacii lezionale.
444
Fixarea complexelor imune circulante la nivelul peretelui capilar

sau n anumite esuturi, activeaz trombocitele i bazofilele, care vor
elibera amine vasoactive, care vor provoca accentuarea permeabilitii
vasculare direct proporional cu fixarea de noi complexe imune. Factorii
chemiotactici vor atrage n focar PMN, care prin enzime lizozomale
produc leziuni. Sistemul complement este activat concomitent cu
accentuarea leziunilor respective pn la apariia necrozei. Aceste distrucii
devin evidente la 3-6 ore de la contactul cu antigenul, de unde i
denumirea de hipersensibilitate de tip intermediar. Anticorpii efectori ai
acestui tip de reacie sunt anticorpii IgG sau IgM necitofilici. Acetia sunt
circulani, precipit antigenul. Eliminarea lor din circulaie devine foarte
dificil la titruri imunoglobulinice mari. Depunerea complexului antigen anticorp este apoi inevitabil, cu apariia leziunilor al cror mecanism a
fost precizat. Locurile de elecie pentru depozitarea complexelor imune
sunt rinichii, articulaiile i jonciunile derm-epiderm.
Boala serului apare ca i o complicaie a seroterapiei, cu apariia
unor nefrite sau artrite.
Fenomenul Arthus este un exemplu de patologie local, mediat
prin complexe imune. Fenomenul a fost demonstrat experimental n anul
1903, prin injectri repetate la iepure a unor antigene solubile. S-a observat
faptul c leziunile au aprut la locul de administrare al antigenului, cu
leziuni arteriolare, microtrombi n vasele mici, cu consecine ischemice.
De fapt, afeciunea este o vasculit acut, n prezena unui titru crescut de
anticorpi precipitani IgG. Clinic, un astfel de fenomen se observ la
diabeticii sensibilizai la insulin.
n lupusul eritematos sistemic, producerea de autoanticorpi se poate
declana fa de autoantigene native sau alterate (nucleoproteine, histone,
ADN), cu apariia leziunilor cutanate (purpure buloase sau ulcerative),
sinoviale sau viscerale (hepatita sau nefrita prin complexe imune).
n poliartrita reumatoid, antigenul este o molecul
imunoglobulinic, iar anticorpul este factorul reumatoid (IgM sau IgG anti
Ig proprie). Procesul inflamator are loc la nivelul articulaiilor, ducnd la
deformare i anchilozare.
Lista bolilor produse prin complexe imun este foarte lung, dar
amintim: fibroza chistic, nefropatia malaric, tiroidita Hashimoto,
scleroza multipl, miastenia gravis, sarcoidoza, boala plmnului de
fermier (antigenul este reprezentat de ctre Micropolyspora faeni),
bagasoza (inhalarea prafului de trestie de zahr), reumatismul articular
acut i glomerulonefrita poststreptococic etc.
445
Hipersensibilitatea de tip ntrziat, de tip IV, de tip

tuberculinic
n acest tip de hipersensibilitate fenomenele apar tardiv, dup 24-72
ore sau chiar 10-20 zile de la contactul cu antigenul, fenomenele fiind
locale. Limfocite TDH (DH = delayed hipersensitivity), sensibilizate de
ctre un antigen, la un nou contact cu acesta, vor elabora limfokine, care
vor atrage n focarul inflamator diverse celule mononucleare, mai ales
macrofage. De subliniat faptul c aceast form de hipersensibilitate este
mediat celular. Fenomenul poate fi indus de ctre bacterii cu parazitism
celular: Mycobacterium, Brucella, Listeria, Salmonella, Treponema, de
ctre fungi patogeni sau de ctre parazii: Leishmania, Toxoplasma,
Schistosoma, Plasmodium etc., dar i de antigenele celulare non-self ale
grefelor, tumorilor sau ale virusurilor.
Exist mai multe tipuri de hipersensibilitate de tip tardiv:
Hipersensibilitatea de tip tuberculinic
Const ntr-o reacie inflamatorie la locul de inoculare al
tuberculinei, care apare cu intensitate maxim la 24 - 48 de ore, la un
subiect care are imunitate fa de bacilul tuberculos n urma infeciei sau
dup vaccinarea BCG. Local apare un nodul indurat, provocat prin
infiltraiile cu celule mononucleare. Dup aprox. 72 de ore, reacia
diminu, dar uneori poate persista ca i reacie de tip granulomatos. Prin
intradermoreacia la tuberculin sau PPD, prin tehnica Mantoux, se
depisteaz persoanele bolnave de tuberculoz.
Acest tip de reacii apar i n bruceloz, morv (Maleomyces
malei), schistosomiaz, histoplasmoz etc.
Hipersensibilitatea de tip granulomatos
Apare n urma persistenei agentului infecios n interiorul
macrofagelor, din cauza imposibilitii acestora de a-l distruge. n
granulom, macrofagele sunt situate central, nconjurate de limfocite i
fibroblaste. Macrofagele pot fuziona cu fibroblastele, genernd celule
gigant, multinucleate. Exist o hipersecreie de limfokine, cu rol de
mesageri intracelulari, principala celul secretoare fiind Lf TDH (delayed
hipersensitivity). Exemple din patologie: boala Crohn, granulomul lepros
sau tuberculos.
Tabelul nr. 31 - Limfokine implicate n reacia de HT tip IV.
446
Limfokina
Mecanisme de aciune
MIF
Factorul de inhibare al migrrii macrofagelor (imobilizeaz
macrofagele la locul reaciei respective)
MAF
Factorul de activare al macrofagului - i poteneaz acestuia
capacitatea fagocitar i distructiv, prin creterea secreiei de
enzime lizozomale
MF
Factor mitogenic
Activeaz macrofagul, formarea celulelor gigante
INF
IL2
Stimuleaz proliferarea limfocitelor T
447
Hipersensibilitatea de contact
Acest tip de reacie este provocat de ctre haptene care se combin
cu proteine ale organismului i care sensibilizeaz limfocitele T, prin
intermediul celulelor Langerhans din epiderm. Reacia const ntr-un
infiltrat cu celule mononucleare care apare la 24 - 72 ore de la aplicarea
epidermic a haptenelor. Expresia clinic a acestei reacii const n
dermatita de contact, provocat de metale (nichel, cobalt), cauciuc,
materiale plastice, cosmetice, medicamente.
Hipersensibilitatea cutanat bazofilic (reaciile Jones - Mote)
Apare la 24 de ore de la contactul cu antigenul, infiltratul
predominnd n bazofile, reglarea realiznd-o limfocitele T supresoare.
Aplicaiile practice ale reaciilor de hipersensibilitate de tip IV:
Evaluarea gradului de rezisten al organismului fa de anumite
infecii: tuberculoz, bruceloz, lues etc.
Evaluarea rspunsului imun celular antitumoral.
Precizarea compatibilitii donatorului cu cea a receptorului de
transplant.
Testarea sensibilitii pielii fa de anumite alergene (praf de cas,
polen, compui organici etc.).
IMUNODEFICIENE
Deficitele imune pot fi clasificate n: afeciuni de tip primar
(congenitale, cu determinism genetic) i imunodeficiene secundare
(ctigate). n aceste situaii se remarc o susceptibilitate crescut fa de
infecii, cu ageni etiologici variai.
Imunodeficienele primare pot afecta global imunitatea (IU +
IMC) sau o pot afecta parial IU sau IMC). Aceste deficite imunitare au
fost grupate n 4 categorii:
deficitele imunitii umorale (ale limfocitelor B)
deficitele imunitii celulare (ale limfocitelor T)
deficitele sistemului complement
deficitele sistemului fagocitar
Exist i deficite imune mixte (ale limfocitelor T i B), la nivelul
celulelor precursoare. Astfel de afeciuni nu sunt compatibile cu viaa
(disgenezia reticular, agamaglobulinemia de tip elveian)
Imunodeficienele primare ale limfocitelor B
Hipogamaglobulinemia de tip Bruton
448
boal genetic prezent la sexul masculin

cu nivele sczute de IgG i IgA, cu imunitate celular normal;
clinic - infecii piogene cu etiologii variate
se poate trata cu gamaglobuline
Deficienele imunologice selective
Defecte genetice nelegate de sex
Deficiene selective n IgM, IgG sau IgA
Deficiena n IgG i IgA, cu IgM normal (este
disgamaglobulinemia de tip I)
Deficiena n IgM i IgA, cu IgG normal (tipul II de
disgamaglobulinemie)
Deficiena n IgG i IgM, cu IgA normal.
Deficitele imune n IgG i/sau IgM se asociaz cu infecii grave.
Imunodeficienele n IgA ar putea genera i boli autoimune, cum ar fi
artritele reumatoide, colitele ulcerative, anemia hemolitic autoimun,
astm bronic, alergii grave. La unii indivizi, deficitul selectiv n IgAs se
poate corecta prin dimerizarea IgM, cu ataarea piesei J i a
componentului secretor (rezult IgMs).
Imunodeficienele primare ale limfocitelor T

Principalele sindroame clinice sunt:
Deficite predominante ale IMC
Sindromul Di George
Sindromul Wiscott - Aldrich
Ataxia - teleangiectazia.
Candidozele cronice cutaneo - mucoase.
Deficite imunitare combinate.
Deficitul n expresia moleculelor HLA de clasa a II-a
Deficitele n proteinele de adeziune leucocitar
Deficitul de activare al limfocitelor T
Disgenezia reticular (alimfocitoza i agranulocitoza)
Deficitul n precursorii limfocitelor T
Deficiene ale sistemului complement

Deficienele primare ale sistemului C' pot determina
susceptibilitate crescut la infecii i boli autoimune prin complexe imune
circulante.
Deficitele genetice n C1q, C2, C4, C3, C5, C8, C3b inactivator se
nsoesc de infecii recurente, n special piogenice.
449
Deficitele genetice n C1r, C1s, C5, C7, C8 se pot asocia i cu lupusul

eritematos sistemic sau fenomenul Raynaud.
Deficitul n C1INH (inactivatorul lui C1, factor de reglare al activitii
sistemului complement) cauzeaz edemul angioneurotic ereditar. Aceti
pacieni prezint o activare exagerat a cii clasice a sistemului
complement, cu eliberarea fragmentelor vasoactive, care favorizeaz
vasodilataia i edemul. n localizarea laringeal, moartea apare prin
asfixie. Deficitul n C1INH se asociaz cu deficitele n C2 i C4.
Deficienele n C2 sunt cele mai frecvente, dar aprox. 50% dintre
acestea sunt asimptomatice, restul fiind colagenoze. Deficienele n C 3 i
C5 se asociaz cu infecii bacteriene severe.
Deficitele secundare ale sistemului C'
n majoritatea bolilor infecioase, nivelul sistemului complement
scade, probabil prin consum, prin fixare pe complexe imune sau prin rolul
de mediator al rspunsului inflamator. Complexele imune induc scderea
componentelor C1q, C2, C3, C4. Scderea factorului C3 sub 10% fa de
normal reprezint o cauz favorizant a instalrii infeciilor cu piogeni
(ex.: meningite i pneumonii pneumococice). Factorul nefritic, descris n
1969 de ctre Spizer, poteneaz clivarea fraciunii C 3, n prezena
factorilor B i D ai cii alternative. Acest factor nefritic cauzeaz o
glomerulonefrit acut postinfecioas sau se poate izola de la pacieni cu
lupus eritematos sistemic.
Hipocomplementia a mai fost observat i n endocardite bacteriene
subacute, n mononucleoz infecioas, malarie sau n hepatita B; cauzele
neinfecioase sunt: malnutriia, ciroza, ocul endotoxinic.
Deficiene ale funciei fagocitare
Deficienele fagocitozei intereseaz chemiotaxia, ingestia i
activitatea microbicid.
Deficienele chemiotaxiei se datoresc unor anormaliti celulare,
fiind nsoite de tulburri ale producerii de factori chemiotactici.
Sindroamele clinice se pot clasifica astfel:
Anormaliti celulare primare
Sindromul Chediak Higashi
Deficiene ale glicoproteinelor membranare i ale asamblrii
microtubulilor.
Anormaliti celulare secundare
Scderea chemiotaxiei cu creterea IgE
Anormaliti asociate cu diabetul zaharat
Anormaliti asociate cu alte afeciuni
Deficiene umorale
450
Anormaliti n producerea factorilor chemiotactici

Absena antagonitilor inhibitorilor chemiotactici
Deficienele funcionale ale PMN (boala neutrofilelor lenee) se
caracterizeaz prin mobilitate celular sczut nspre stimulii
chemiotactici.
Defectele funciei fagocitare se traduc prin scderea capacitii de
distrugere a microorganismelor fagocitate. Absena NADH oxidazei din
PMN, duce la incapacitatea acestora de a distruge bacteriile fagocitate.
Funcionarea defectuoas a mecanismelor exploziei respiratorii,
diminueaz efectele bactericide, cu apariia unor inflamaii cronice de tip
granulomatos, care se pot complica prin abcese.
Neutropenia i deficienele funcionale fagocitare se exprim clinic
printr-o susceptibilitate crescut la infecii bacteriene, cu localizri
respiratorii i cutanate.
Imunodeficienele secundare apar ca i o consecin a altor
afeciuni, putnd afecta separat sau mixt, imunitatea umoral i cea
mediat celular.
Malnutriia energo-proteic produce alterri ale imunitii mediate
celular, cu modificri ale populaiilor limfocitare. Carena n proteine
afecteaz sinteza optim de anticorpi (structuri glicoproteice).
Infeciile bacteriene, virale sau parazitare diminueaz capacitatea de
rspuns imun, mai probabil prin suprasolicitare. Spre exemplu, o infecie
viral diminueaz rspunsul imun mediat celular, terenul fiind lsat
descoperit pentru o infecie bacterian ulterioar. Este aa-zisul sinergism
virus - bacterie (spre exemplu, o infecie gripal poate fi urmat de o
infecie pulmonar cu Haemophylus influenzae).
SIDA reprezint un caz particular de imunodeficien viral
dobndit. Distrugerea limfocitelor TCD4 (lf TH) produce o imunosupresie
a IMC, cu apariia infeciilor oportuniste cu bacterii (ex.: Mycobacterium,
Salmonella), virusuri (v. Citomegalic, v. Epstein - Barr, v. herpes simplex),
parazii (Toxoplasma, Cryptosporidium etc.) i fungi (Candida).
Imunodeficienele secundare pot fi provocate i prin terapia
imunosupresiv (corticosteroizi, radiaii), ageni citotoxici i afeciuni cu
pierderi de proteine (sindrom nefrotic, ciroze, enteropatii).
AUTOIMUNITATEA
451
Definete rspunsul imun neadecvat fa de stimulii antigenici self,

prin suprimarea mecanismelor normale de toleran fa de structurile
proprii. Rspunsul imun fa de propriile structuri poate fi umoral (prin
autoanticorpi) sau celular (prin procesele hipersensibilitii de tip tardiv,
prin mecanisme citotoxice). Conflictul imunologic se manifest clinic prin
apariia unor boli autoimune. Pentru definirea acestui tip de boal,
trebuiesc identificate autoantigenele i mecanismele patogenice de
producere, aspecte care trebuie s se confirme i experimental. Spre
exemplu, patologia encefalitei alergice a fost demonstrat prin imunizarea
animalelor cu proteina mielinic de baz (MBP); s-a indus o demielinizare
inflamatorie similar cu cea din scleroza multipl.
Autoantigenele pot deveni imunogene prin:
modificarea antigenelor celulare de suprafa
mimare molecular (reacii ncruciate cu antigene strine)
eliberarea n circulaie a antigenelor self sechestrate (ex.: din cristalin,
testicul, tiroid etc.)
anomalii de imunoreglare la nivelul sistemului limfoid (ex.: clone de
limfocite T interzise i reactive, ineficiena limfocitelor T supresoare,
existena unor clone anormale de limfocite B, hiperreactive).
Infeciile virale provoac formarea de autoanticorpi destul de
frecvent. Antigenele virale i structurile self se pot asocia, dnd natere
unor noi antigene, spre exemplu se pot forma complexe cu antigenele de
histocompatibilitate sau cu actomiozina membranar. Infeciile bacteriene
altereaz mai puin structurile celulare, n schimb lipopolizaharidele
bacteriene stimuleaz puternic producia celulelor B competente. Excesul
de anticorpi determin apariia unui exces de complexe imune circulante,
cu depunerea acestora n esuturi i cu activarea sistemului complement.
Autoimunitatea indus de medicamente recunoate prezena unor
haptene (medicamentul, substana strin) care se leg de structurile self,
cu apariia unor autoantigene.
Exist predispoziie genetic demonstrat pentru boli autoimune.
Prin complexul major de histocompatibilitate clasa a II-a se selecioneaz
epitopii. Activatorii sau represorii transcripionali ai moleculelor CMH
clasa a II-a se afl sub controlul unei familii de gene care se afl sub
influena unor stimuli intracelulari (ex.: virali) sau extracelulari (oc
termic). Aceti stimuli pot produce mutaii n secvenele de control ale
genelor CMH i apariia unor molecule cu potenial autoimunogen. Genele
pentru complement i pentru receptorii acestuia pot fi alterate n unele boli
autoimune, fapt care explic leziunile specifice.
452
Clasificarea bolilor autoimune (B.A.I)
B.A.I organ - specifice: antigenele respective sunt cantonate ntr-un

singur organ, care prezint manifestri inflamatorii cronice specifice.
B.A.I. non organ specifice, sistemice: implic autoantigene situate pe
esuturi variate. Modificrile imunopatologice sunt generalizate.
B.A.I. non - organ specifice, cu leziuni restrnse - leziunile afecteaz
puine organe.
Exemplificri
B.A.I. organ - specifice
Tiroida Hashimoto - distrucia autoimun a acinilor
tiroidieni; apar anticorpi anti tireoglobulin i anticoloid tiroidian.
Tireotoxicoza - Apare o imunoglobulin din clasa G,
cunoscut ca stimulator tiroidian cu aciune prelungit.
Anemii hemolitice autoimune - Sunt produse prin
autoanticorpi orientai mpotriva unor antigene eritrocitare de
suprafa. Autoanticorpii la cald (interacioneaz cu antigenele la
37oC) i aparin clasei IgG, sunt aglutinine. Autoanticorpii la rece
aparin clasei IgM i sunt hemolizine.
Gastritele atrofice autoimune - leziunile sunt provocate
prin autoanticorpi anticelul parietal gastric i prin anticorpi
antifactor intrinsec. Ambele tipuri de anticorpi mpiedic absorbia
intestinal de vitamin B12.
Vitiligo - produs prin autoanticorpi anti melanocite
Pemfigus - leziunile apar prin autoanticorpi anti
antidesmozomi.
Azoospermia - anticorpi anti spermatozoizi.
Insuficiena ovarian - autoanticorpi anti corpus luteum.
B.A.I. non organ specifice, sistemice
Lupusul eritematos sistemic - cu manifestri cutanate,
articulare, seroase, renale, hematopoetice produse prin autoanticorpi
antinucleari (anti ADN, anti ARN - proteine), concomitent cu
creterea secreiei de IL2 cu efect proliferativ asupra celulelor B. Este
foarte important i rolul complementului ca factor lezional, prin
aciunea asupra complexelor antigen - anticorp depuse la nivel
tisular. Probabil etiologia bolii este multifactorial (factori infecioi
virali sau bacterieni: Streptococcus pyogenes, factori de mediu i
factori genetici CMH). Investigaiile imunologice evideniaz:
453
celula lupic (celula LE - PMN cu nucleu alterat)

rozeta lupic (rozet de PMN n jurul celulei LE) cu scopul
realizrii fagocitozei
anticorpi antinucleari
Artritele reumatoide - cu etiologie multifactorial (factori
genetici HLA - DR4, DR32 etc., factori endocrini sau infecioi).
Boala apare cu frecvena maxim la 40 - 50 ani, femeile fiind mai des
afectate dect brbaii.
Factorul reumatoid este o IgM anti IgG uman. Se formeaz
complexe imune n exces. Se activeaz sistemul complement, cu apariia
fenomenelor inflamatorii i apoi necrotice. Reacia inflamatorie este
potenat i prin eliberarea aminelor vasoactive, activarea mediatorilor
plasmatici, infiltrarea local cu PMN, limfocite T CD4 i CD8. esutul
sinovial se hipertrofiaz, se hipervascularizeaz, se asociaz cu cheaguri
de fibrin (aspect morfopatologic tip panus vascular). Procesul
inflamator se cronicizeaz. IL1 are rol important n producerea leziunilor
prin provocarea eliberrii de prostaglandine (PGE 2) i proliferarea
celulelor endoteliale i a osteoclastelor (resorbie osoas).
Complicaiile sunt destul de frecvente: noduli reumatici, vasculite,
afeciuni pulmonare (sindrom Caplan), afeciuni oculare (iridociclita,
scleromalacia perforans), afeciuni neurologice i cardiovasculare,
amiloidoza, rupturi de tendoane.
Diagnosticul de laborator evideniaz prezena factorului reumatoid
(FR) - testul latex i reacia Waaler - Rose, creterea proteinei C reactive i
hipergamaglobulinemie. Anticorpii antinucleari apar n 15 - 50% din
cazuri (AC anti histone).
Sclerodermia - apare prin anticorpi anti topoizomeraz I,
anticolagen I i IV i prin anticorpi antinucleari.
Polimiozita - produs prin autoanticorpi antiaminoacil tARN sintetaza.
B.A.I. non organ - specifice, cu leziuni restrnse
Ciroza biliar primitiv - se caracterizeaz prin colestaz
intrahepatic, prurit, icter, hepato-splenomegalie. Boala apare prin
aciunea autoanticorpilor antimuchi neted, antinucleari i antimitocondriali. Ultimii anticorpi menionai acioneaz i asupra
rinichilor i asupra celulelor parietale ale stomacului.
Hepatita cronic agresiv - se caracterizeaz printr-o
necroz a hepatocitelor prin autoanticorpi antihepatocite,
autoanticorpi antimitocondriali i antinucleari. Mecanismul
citotoxicitii se manifest prin celule ADCC.
454
Terapia bolilor autoimune

Este o terapie imunosupresoare neselectiv (substane
imunosupresoare, corticosteroizi) sau selectiv (cu anticorpi monoclonali
anti CD4, anti CD5, anti CD25, anti receptor T, antimolecule de adeziune,
anti molecule CMH clasa II, anticitokine etc).
Agenii imunosupresori mai frecvent folosii sunt Azatioprina,
Ciclofosfamida, Ciclosporina A, Metothrexat-ul. Ciclofosfamida
acioneaz preferenial asupra limfocitelor B, iar Azatioprina i
Ciclosporina A inhib funcia limfocitelor T. Metotrexatul inhib funcia
ambelor tipuri de limfocite.
Vaccinul T are un efect preventiv. Clonele patogene sunt tratate
chimic pentru ca TCR s devin imunogen pentru a determina un rspuns
imun puternic al limfocitelor TCD8 (citotoxice), care vor distruge
limfocitele T patogene. Acest tip de vaccin este nc experimental,
orientat mpotriva encefalitelor autoimune. La om este extrem de dificil de
izolat clona patogen de limfocite T.
Asociat imunoterapiei supresoare, substanele antiinflamatoare sunt
bine venite. Se pot utiliza n tratament i antagoniti ai receptorilor pentru
IL1 i inhibitori ai factorilor chemiotactici, precum inhibitori de IL 8 i
MCP-1. Reducerea activitii citokinelor respective determin scderea
infiltratului inflamator, mai ales la nivelul articulaiilor.
Patogeneza bolilor autoimune este extrem de complex i
insuficient cunoscut, motiv pentru care i terapia nu este n totalitate
eficient.
455
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. Abba Terr - Basic Human Immunology, First Edition, Daniel P., Stites,
Appleton & Lange, California, 5 - 17, 1991.
2. Adal K.A., Cokerell C. J., Petri W.A.: Cat scratch disease and other
infections due to Rochalimaea, N. Eng. J. Med., 330:1509-1515,
1994.
3. Ajjan N. - La vaccination, 2-nd edition, Ed. Fondation Merieux, Lyon,
vol.I, 121 - 141, 1985;
4. Akira S. J., Okazaki K., Sakano H. - Two pairs of recombination
Signals are sufficient to cause immunoglobulin V(D) J joing, Nature,
214, 33 - 36, 1989;
5. Allison J. P., Lanier L. L. - The T cell receptor gamma gene:
rearrangement and cell lineage, Immunology Today, 1987, 8, 293 296.
6. Alton G., Jones L. M.: Techniques of the brucellosis laboratory, INRA,
Paris, 1988.
7. Andrie L., Olinescu A. - Compendiu de Imunologie Fundamental,
Edit. tiina, Chiinu, 1992.
8. Arnold A. et al. - Immunoglobuline gene rearrangements as unique
clonal markers in human lymphoid neoplasmus, N. Engl. J. Med.,
309, 15 - 19, 1983;
9. Arnon R., Shapira M., Jacob C. - Synthetic vaccines, J. Immunol.
Methods, 61, 261 - 273, 1983.
10. Axellson P., Lindhe J.: On the Prevention of Caries and Periodontal
Disease, J. Clin Periodont., 18, p.182-189, 1991.
11. Azoici Doina, Ivan A. - Vaccinologie, Edit. Polirom, Iai, 1995.
12. Blbie V., Posgi N. - Bacteriologie medical, vol. I i II, Edit.
Medical, Bucureti, 1985.
13. Br Constantin - Imunologie Fundamental, Editura Medical,
Bucureti, 1996.
14. Bableit B. P. et al. - Binding of immunogenic peptides to Ia
histocompatibility molecules, Nature, 317, 355 - 359, 1985;
15. Baehr W., Zhang X. Y: , Joseph T. et al: Mapping antigenic domains
expressed by Chlamydia trachomatis major outer membrane protein
genes. Proc. Natl. Acad. USA 85:4000, 1988.
456
16. Bahkdi S., Tramm - Jensen J: Alpha - toxin of Staphyloccocus aureus.

Microbiol. Rev. 55 - 733, 1991.
17. Balkwill F. - Cytokines - Soluble factors in immune responses, Curr.
Opinion Immunol., 1988, 1, 241 - 249.
18. Balows A., DeHaan R. M., Dowell V.R.: Anaerobic bacteria, C.
Thomas Springfiedd, I. L. 1976.
19. Baron: Medical Microbiology, p.840, 1991.
20. Brzu O. i col.: Curs de biochimie medical, vol. I i II. Litografia
IMF Cluj-Napoca, 1977.
21. Basch R., Stetson SA - Quantitative studies on histocompatibility
antigens of the mouse, Transplantation, 1, 80 - 469, 1983;
22. Bast R. C., Zalutski M. - Monoclonal serotherapy, Cancer Medicine,
3rd Edit., Philadelphia, 1993.
23. Becker Y.: The agent of trachoma. Monogr. Virol. 7,1984.
24. Becker, Darai: Diagnosis of Human Viruses by Polimerase Chain
Reaction Technology; New series - Frontiers of Virology, vol. I,
p.440, 1990.
25. Bellanti J. A., Rocklin R. E. - Immunology III, Philadelphia W. B.
Saunders Company, 1985.
26. Benga Gh.: Curs de biologie celular, Litografia IMF Cluj-Napoca,
1980.
27. Bennet J. V.: Nosocomial Infections due to Pseudomonas, J. Inf. Dis.,
130, 54-57, 1974.
28. Berceanu t., Punescu E. - Biologia i Patologia Sistemului Imun,
Bucureti, 1981.
29. Berg C.M., Berg D.E.: Bacterial Transposons, Ed. Schlessinger, Am.
Soc. For Microbiology, Washington D.C., p.107-146, 1981.
30. Berzofski J. A., Berkover J. - Antigen - Antibody reactions, in
Fundamental Immunology, Raven Press N. Y., p. 595 - 644.
31. Bhakdi S., Jensen J. - Membrane damages by complement, Biochim.
Biophis. Acta., 737, 343, 1983;
32. Bier O. G., Silwa V., Albert E. - Fundamental of Immunology, Berlin,
New York, Springer Verlag, 1981.
33. Bisno A. L. Medical progress: Group A streptococcal infections and
acute rheumatic fever. N. Engl. J. Med. 783 - 793, 1991.
34. Bisthai W. R., Murphy J. R.: Bacteriophage gene products that cause
human disease, In Calendar R (ed): The bacteriophages. Plenum,
New York, 1988.
35. Blbie V., Poszgi N.: Bacteriologie Medical, volumele 1 i 2, Editura
457
36. Black P. H., Kunz L.J., Schwartz M. N.: Salmonelosis a review of

some unusual aspects; N. Engl. J. Med. 262 : 811, 864 - 921, 1980.
37. Black P. H., Kunz L.J., Schwartz M. N.: Salmonelosis a review of
some unusual aspects; N. Engl. J. Med. 262 : 811, 864 - 921, 1980.
38. Blake J. D., Neaver R.E., Hollins D. G.: Disease of humans caused by
vibrions. Ann. Rev. Microbiol., 34:341, 1980.
39. Blaser M. J. , Parsonnet J.: Parasitism by the "How" bacterium
Helicobacter pylori leads to altered gastric homeostasis and
neoplasia, J. Clin, Invest., 94:4-8, 1994.
40. Blatner F. R., Tucker P. W. - The molecular biology of immunoglobulin
D., Nature, 307, 417 - 421, 1984;
41. Bodmer W. F. - HLA - A supergene, Harvey Lectures, 72, 91 - 138,
1976;
42. Body S.P. et al: Klebsiella bacteriemia: a 10 year review in a cancer
institution; Cancer 64:2368, 1989.
43. Bona A. C. - V genes encoding autoantibodies, molecular and
phenotipic caracteristics, Ann. Rev. Immunol., 6, 258 - 327, 1988;
44. Boss E. S., van der Doelen A. A., van Rooy N. - 3,3', 5,5' Tetramethylbenzidine as an ames test negative chromogen for
horseradish peroxidase in enzyme - immunoassay, J. Immunoassay,
2, 187 - 204, 1981;
45. Boyd J. E., James K. - Human monoclonal antibodies, Trends
Biotechnology, 2, 70 - 77, 1984.
46. Braude: Microbiology: Basic Science and Medical Applications, vol. I,
p.415, 1982.
47. Braude: Microbiology: Basic Science and Medical Applications, vol. I,
p.415, 1982.
48. Brooks G. F., Donegan E. A.: Gonococcal Infection. Edward Arnold,
London, 1985.
49. Brown J. H. et al. - A hypothetical model of the foreign antigenbinding
site of class I histocompatibility molecules, Nature, 332, 845 - 860,
1988;
50. Buiuc D., Negu M.: Tratat de Microbiologie Clinic, Editura
51. Buiuc D.: Microbiologia Practic, un ghid n studiul i practica
medicinii, ediia a 7-a, IMF Iai, 1982.
52. Buiuc D.: Microbiologie Medical, Editura Didactic i Pedagogic,
Bucureti, 1998.
53. Buiuc Dumitru - Microbiologie clinic, Editura Didactic i
Pedagogic, Bucureti, 1997.
458
54. Bush M.S., Challacombe S.J.: A Method of Identification of

Streptococcus Mutans in Gingival Margin Plaque by
Immunofluorescence; Caries Res., 24, p.23-29, 1990.
55. Buss S., Setle A., Grey H. M. - The interaction between proteinderived immunogenic peptides and Ia, Immunol. Rev., 98, 116 - 121,
1987;
56. Butterworth C. M., Mc Lelland B., Allansmith M. - Influence of sex on
immunoglobulin levels, Nature, 214, 12 - 24, 1977;
57. Buttler J. C., Breiman R. F., Campbell J. J.: Pneumococal
polysaccharide
vaccine
efficacy: evoluation
of current
recommendations. JAMA, 270, 1826 - 1831, 1993.
58. Carrol M. C. et al. - A molecular map of the human major
histocompatibility complex class III region linking complement
genes, C1, C2 and factor B, Nature, 28, 391 - 395, 1981;
59. Cebra J. J., Komisar J. L., Schweitzer P. A. - CH isotype Switching
during normal B - lymphocyte development, Ann. Rev. Immunol., 1,
493 - 497, 1984;
60. Cernescu C. - Virusologie Medical, Ed. Med. Bucureti, 172 - 186,
1995;
61. Chiu M.J. et al: Spirochetal infections of the Skin, in Atlas of
Infections Disease, Philadelphia, 1994.
62. Ciangio G.S.: Antimicrobials and Antibiotics, Oral Microbiology and
Immunology, Newan and Nisengarden, p.485-496, 1988.
63. Ciufecu E. S. - Compendiu de Virusologie Medical, Ed. Fundaiei
Romnia de mine, 83 - 92, 1995;
64. Clowes R.C.: Molecular Structure of Bacterial Plasmides, Bact. Rev.,
36, p.361-405, 1972.
65. Cohen R. D., Conn D., Illstrup D. M. - Clinical features, prognosis and
responses to treatment in polyartritis, Mayo Clin. Proc.; 55, 146 155, 1980.
66. Collier R.J.: Genetic Approaches to Structure and Activity in ADP Ribosylating Exotoxins, Am. Soc. for Microbiology, Washington
D.C., 1979.
67. Conde - Glez C. J., Morse S., Rice P: Pathobiology and
Immunobiology of Neisseriaceae. Instituto Nacional de Saled
Publico, Guernavaco, 1994.
68. Cook P. J., Honeybourne D: Chlamydia pneumoniae; J. Antimicrobial
Chemoterapy, 34(6), 859, 1994.
69. Cook P. J., Honeybourne D: Chlamydia pneumoniae; J. Antimicrobial
Chemoterapy, 34(6), 859, 1994.
459
70. Corykendall A. J.: Classification and identification of the viridans

streptococci. Clin. Microbiol Rev, 2, 315 - 328, 1989.
71. Cruse M., Julins E., Lewis R. E. - The genetic basis of aberrant
autoimmunoregulation, Concepts in immunopathology, vol. 5, 1 - 20,
1987;
72. Cucuianu M., Rus H. G., Niculescu D., Vonica A. - Biochimie.
Aplicaii clinice, Ed. Dacia, Cluj-Napoca, 85 - 142, 1991;
73. Cumming B.R., Loe H.: Consistency of Plaque Distribution in
Individuals Without Special Home Care Instruction, J. Periodontal.
Res., 8, p.57, 1973.
74. Cumming B.R., Loe H.: Optimal Dosage and Method of Delivering
Clorhexidine Solutions for the Inhibition of Dental Plaque, J.
Periodontal Res., 8, p.57, 1973.
75. Dalton I., Nottebart J.: Interpretative Medical Microbiology, p.100,
1986.
76. David C., Schreffler S. - Lymfocyte antigens controlled by the Ir region
of the mouse H2 complex, Transplantation, 17, 19 - 462, 1974;
77. Davis B.D., Dulbecco R. i col.: Microbiology, Third Edition, Harper
Intern. Edit., 1980.
78. Davis B.D., Dulbecco R., Eisen N.H.: Microbiology, Fourth Edition,
1990.
79. De Voe I. W.: The meningococcus and mechanism of pathogenicity.
Microbiol. Rev. 46 - 162, 1982.
80. Deac Liana Monica: Infeciile nosocomiale, Editura Dacia, ClujNapoca, 1977.
81. Delespesse G., Gausset P. - Alteration de l'immunite humorale au cours
du vieillissement, Ann. Immunol. (Inst. Pasteur), 128, 99 - 104, 1977;
82. Denny F. W., Wannamaker L. W., Brink W. R. et al: Prevention of
rheumatic fever: treatment of the preceding streptococcal infection.
JAMA, 143, 151 153, 1980.
83. Densen P., Mandell G. L.- Phagocyte strategy of microbial tactics. Rev.
Infect. Dis. 2, 817 - 838, 1980.
84. Dillon H.: Post - streptococcal glomerulonephritis following pyoderma.
Rev. Infection Dis, 1, 935 - 943, 1979.
85. Doern G. V., Jones R. N.: Antimicrobial susceptibility testing of
Haemophylus influenzae; Antimicrob. Agents Chemoter 32:1747,
1988.
86. Dolken G., Weitzmann U., Boldt C. - Recent advances in
immunisation, J. immunol. Meth., 67, 225 - 233, 1984;
460
87. Dragomirescu M. i colab. - Contribuii privind structurile HLA n

infecia prelungit cu virusul hepatitic B, Viaa Medical, 29, 3 - 4,
1983;
88. Dragomirescu M. i colab.: Patogenia infeciilor, Editura Facla,
Timioara, 1980.
89. Dragomirescu M., Novac E. - Patogenia infeciilor, Ed. Facla,
Timioara, 1 - 25, 1982;
90. Dreyer W. J., Benett J. C. - The molecular basis of antibody formations,
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 54, 864 - 895, 1965;
91. Duane C.Y., Raymond C.V.: Ferredoxins and Flavodoxins of Bacteria,
Ann. Rev. Microb., 26, p.139-162, 1972.
92. Duca E., Duca M., Furtunescu G.: Microbiologie Medical, Ed.II,
Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1979.
93. Dunlop N. E., Ballinger S. - The importance of G1m and 2 allotypes
for the IgG2 antibody levels and avidity against pneumococal
polysaccharide type 1 within mono and dizygotic twin pairs,
Scandinavian Journal of Immunology, 40, 6 - 251, Aug., 1994;
94. Dytoc M. Sone R et all: Multiple determinants of verrotoxin producing
Escherichia Coli O 157/H7 attachement - effacement. Infect.
Immun. 61:3382, 1993.
95. Dzink J.L., Gibbons J., Childs W.C.: The Predominant Cultivable
Microbiota of Crevicular Epitelial Cells, Oral Microbiolgy
Immunology, 4, p.1-5, 1989.
96. Early P. et al. - Two mARNs can be produced from single
immunoglobulin gene, by alternative ARN processing pathways,
Cell, 20, 313 - 320, 1979;
97. Easman C. S., Adlam C.: Staphylococci and Staphylococal infections.
Vol 1 i 2, Academic Press, London, 1983.
98. Ellen P.R., Grove D.A.: Bacteroides Gingivalis. Vesicles Bind to and
Aggregate Actynomices Viscosus, Inf. and Immunity, p.1618-1620,
may 1989.
99. Ellen P.R., Hoover C.I., Felton J.R.: Association of Proteases of
Bacteroides Gingivalis with its Adhesion to Actynomices Viscosus,
Journal of Dent. Rest., 70(2), p.82-86, febr. 1991.
100. Ellen P.R.: Genns Actynomices and other Filamentous Bacteria, Oral
Microbiology and Immunology, Newman and Nisengarden, p. 173182, 1988.
101. Enquist L.W., Weisberg R.A.: Bacteriophage Lambda Site - Specific
Recombination, Ed. D. Schlessinger, p.50-55, 1981.
102. Evans D.J., Evans D.G.: Colonization factor antigens of humman
pathogens. Current Topics Microbiol. Immunol. 151_129, 1990.
461
103. Farley M. H., Harvey R. C., Stull T.: A population based assessment
of invasive disease due to group A streptococcus in adults. N. Engl. J.
Med., 328, 1807 - 811, 1993.
104. Figueroua F. and Nagy Z. Genetics of the Major Histocompatibility
Complex, The final act, Ann. Rev. Immunol., 1, 119 - 142, 1995;
105. Finegold S. M., George W. L. (eds): Anaerobic Infections in Human
Dissease, Academic Press, San Diego, 1977.
106. Finger H., Wirsing von Koenig C.H.: Serological diagnosis of
whooping cough, Dev. Biol Stand 61:331, 1985.
107. Fischer Lindhal K., Hansman B. Flaherty L. - Polymorphism of a Qa
associated antigen defined by cytotoxic T cell, Ann. J. Immunology,
12, 66 - 159, 1982;
108. Foster W. - A history of Medical Bacteriology and Immunology, W.
Heinemann Medical Books, 320 - 323, 1980;
109. Fraser D. W., Tsai T. R., Orenstein W.: Legionnaire's disease:
description of an epidemic of pneumonia; N. Engl. J. Med. 297;
1189, 1977.
110. Freeman, Burrows Microbyology, Newman and Nisengarden, p.583597, 1990.
111. French D. L., Lascow R. , Scharff M. D. - The role of somatic
hypermutations in the generation of antibody diversity, Science,
244,11 - 52, 1989;
112. Frobisher M.,Hindil R.D., Crabtree K.T., Goodhearts C.R.,
Fundamentals of
Microbiology, Ed.9, Saunders Comp.,
Philadelphia, 1974.
113. Fuerst R.: Frobisher and Fuerst's Microbiology in Health and
Disease, 15th edition, W. B. Saunders Company, 1983.
114. Gay F. P. - Immunology, a medical science developed through animal
experimentation, J. Am. Med. Assoc.,56, 19 - 26, 1978;
115. Gell P. H., Coombs R. RA - Clinical Aspects of Immunology,
Blackwell Scientific Publications, 1962, Oxford.
116. Gerald T. N. - HLA class II variants: Structural Studies and Disease
Associations, Autoimmunity, Experimental and clinical Aspects, vol.
475, New York Academy of Science, 849 - 862, 1987;
117. Gerdhart P, Manual of Metods for General Bacteriology, ASM.
Washington, 1992.
118. Getzoff E. D. et al - Mechanism of antibody binding to a protein,
Science, 235, 1091, 1987.
119. Gianella R. A.: Importance of the intestinal inflammatory reaction in
Salmonella-mediated intestinal secretion; Infect. Immune 23: 140,
1979.
462
120. Gillies: Gillies and Dodd's Bacteriology Ilustrated, Springer Verlag

1984.
121. Glenys Thomson - Investigation of the mode of inheritance of the
HLA associated diseases by the method of antigen genotype
frequencies among diseases individuals Tissue Antigens, 21, 81 104, 1983;
122. Golub S. Edward - Immunology: A synthesis, Sinauer associates Inc.
Publisher, Sunderland, Massachusetts, vol. Immunity and vol.
Immunological Diseases, 1987.
123. Goodman Y.E. et al: ELISA for detection of pertussis IgA in
nasopharingeal secretions as an indicator of recent infection. J. Clin.
Microbiol., 13:286, 1981.
124. Graziano Frank, Lemanske Robert - Clinical Immunology, Edit.
Williams & Wilkins, 1989.
125. Grundbacher F. J. - Heritability Estimate and genetic and
environmental correlation of the human immunoglobulins G., M, A,
Am, J., Hum.Genet.,26, 1 - 12, 1987;
126. Gunther E. - Aspects of Genetic Control of Immune Responsiveness,
Behring Inst. Mitt., 65, 62 - 70, 1980;
127. Haddock B.A., Jones C.W.: Bacterial Respiration, Bact. Rev., 41,
p.47-49, 1987.
128. Haideh Payami, Muhammad A. Kalam - Analysis of Genetics
Interrelationship among HLA - associated Diseases, Am. J. Hum.
Genet.., 41, 331 - 349, 1987;
129. Hale T. L.: Genetic bases of virulence in Shigella species, Micro Rev.
55: 206, 1991.
130. Hamiloff J. Mc Elhanez R. N., Finch L. R., Baseman J. D.:
Mycoplasma, Molecular Biology and Pathogenesis. American
Society for Microbiology, Washington, 1992.
131. Harold F.M.: Conservation and Transformations of Energy by
Bacterial Membranes, Bact. Rev., 36, p.172-230, 1972.
132. Harrison L. H., de Silva G. A., Pittman M. et al: Epidemiology and
Clinical Spectrum of Brazilian purpuric fever; J. Clin. Micobiology
27,599,1989.
133. Haskins K. et. al. - The major histocompatibility complex restricted
antigen receptor on T cells, J. Exp. Med., 157, 1149 - 1160, 1983;
134. Hayes W: The Genetic of Bacteria and their Viruses, Ed.2, Blackwell
Scientific Publications, Oxford and Edinburgh, 1968.
135. Hechemy K. E., Paretsky D.: Rickettsiology : Current Issues and
Perspectives, vol. 590, N. Y. Acad. Sci., New York, 1990.
463
136. High N., Mounier J.: Ipa B. of Shigella flexneri causes entry into
epithelial cells and escape from the phagocytic vacuole, EMBO J.,
11, 1992.
137. Hohnes K. K., Mardh P. A., Sparling P. F.: Sexually Transmitted
Diseases, 2nd Ed. Mc Graw Hill, New York, 1990.
138. Honjo T. , Alt F. W. - Immunoglobulin genes, Academy Press, 27,
11 - 17, 1989;
139. Horan J. C., Culver D. H. et al: Nosocomial infections in surgical
patients in the United States, Infect Control Hosp. Epidemiol. 14-73,
1993.
140. Hunkapillar T., Hood L. - Diversity of Ig gene Superfamily, Adv.
Immunol., 1, 44 - 46, 1989;
141. Ivanof A. , M. Ciupe, C. Sac, D. Vancea :Microbiologie, Editura
Didactic i Pedagogic, Bucureti, 1982.
142. Ivanof A., D. Vancea, C. Sac: Lucrri practice de Microbiologie
pentru uzul studenilor, Litografia IMF Cluj- Napoca, 1983.
143. Ivanof A., Mihalache M.: Microbiologie General, Curs pentru uzul
studenilor, Editura Universitii "Lucian Blaga" Sibiu, 1996.
144. Ivanof A., Sasca C., Vancea D.: Curs de Microbiologie, Partea a IIIa, Litografia IMF Cluj Napoca 1980.
145. Ivanof A.: Curs de Microbiologie, vol.I i vol.II, Litografia IMF Cluj
Napoca, 1977.
146. Ivanovici G., Fuiorea O. - Diagnosticul de laborator n practica
medical, Ed. Militar, Bucureti, 71, 209 - 211, 1990;
147. Javetz E. i colab.: Revue of Medical Microbiology. Ed.13. Lange
Med. Publ. Los Altos, California, 1988.
148. Jawetz Melnick - Medical Microbiology, 19-th Ed. Appleton and
Lange, 434 - 438, 1991;
149. Johnson J.R., Stamm W.E.: Urinary tract infections in women:
diagnosis and treatment. Ann. Intern. Med. 111:906, 1989.
150. Johnson R.C. (ed): The biology of Parasitic Spirochetes, Academic
Press, San Diego 1976.
151. Joklick W.K., Willet H.P.: Zinnser Microbiology, Ed.16. Appleton
Century Crofts, New York, 1976.
152. Joklik W. A. - Zinsser Microbiology, Appleton and Lange, 289 - 388,
1990;
153. Joller-Jemelka H. I. - Contribution du dosage des immunoglobulines
et des sous-classes d IgG au controle chimique, Med. et Hyg., 53,
993 - 1000, 1995;
154. Katsushiro F., Kazuaki S. - Statistical detection of HLA and disease
association; Tissue Antigens, 26, 81 - 86, 1985;
464
155. Kauffman A.E., Weyant R.S.: Leptospiraceae, in Murray P.R.:

Manual of Clinical Microbiology, 6th Ed., American Society for
Microbiology, Washington D.C., 1995.
156. Kay N. E., Douglas S. D. - Antigenic phenotype and morphology of
human blood lymphocytes, Ann. H. Genet., 10, 7 - 21, 1988;
157. Kenny G. E., Kaiser G. G., Cooney M. K. et al: Diagnostics of
Mycoplasma pneumoniae and pneumonia: Sensitivities and
specificities of serology with lipid antigen and isolation of the
organism on soy peptone medium for identification of infections. J.
Clin. Microbiol, 28, 2087, 1990.
158. Keusch G. T. et al: Shigellosis in Evans A. S. (ed) : Bacterial
Infections of Humans, Epidemiology and Control, Plenum, New
York, 1991.
159. Kingsbury David, Wagner Gerald: Microbiology 2nd edition, The
National Medical Series for Independent Study, Harwal Publishing,
USA, 1990.
160. Klebanoff S. J. - The neutrophil: Function and Clinical Disorders,
Amsterdam, New York, Publishing Co, 1978.
161. Klein J., Figueroa F. - Genetics of the Major Histocompatibility
Complex, Rev. Immunol., 1 42 - 119, 1984;
162. Kramer J. M., Gilbert R. J.: Bacillus cereus and other Bacillus
species, Foodborne Bacterial Pathogens, New York, 1989.
163. Kushner I., Gewurtz H., Benson M. A. - C-reactive protein and the
acute phase response, J. Lab. Clin., 97, 739 - 8 4, 1981;
164. Lambert, O'Grady: Antibiotic and Chemoterapy, Appleton & Lange,
California, 1992.
165. Lambert, O'Grady: Antibiotic and Chemoterapy, Appleton & Lange,
California, 1992.
166. Larsen S.A., Steiner B.M., Rudolph A.H.: Value and limitations of
non-treponemal and treponemal tests in the laboratory diagnosis of
syphilis: Clin. Obst. Gynecol. 18:191, 1975.
167. Le Franc M. P., Le Franc G. - Cours d' Immunologie, Inst.
Cantacuzino, Bucharest, Dec. 1992.
168. Leder P. - The genetics of antibody diversity, Sci. Am., 39, 102 - 109,
1982;
169. Lenette H.E., Shadomy H.J.: Manual of Clinical Microbiology,
Fourth Edition, American Society for Microbiology, Washington
D.C., 1995.
170. Leppla S. H.: The anthrax toxin complex, Sourcebook of Bacterial
Proteins , Academic Press, New York, 1990.
465
171. Luderitz O., Staub A.M., Westphal O.: Immunochemistry of "O" and
"R" Antigens of Salmonella and Related Enterobacteriaceae, Bact.
Rev., 30, p.192-256, 1966.
172. Luderitz O., Staub A.M., Westphal O.: Immunochemistry of "O" and
"R" Antigens of Salmonella and Related Enterobacteriaceae, Bact.
Rev., 30, p.192-256, 1966.
173. Lyon B. R., Skurraz R.: Antimicrobial resistance in Staphylococcus
aureus: genetic basis. Microbiol Reviews 51 - 88, 1987.
174. Mller - Eberhard H. J. - The complement system in the Plasma
Proteins, 1975.
175. Mac Devitt H.O. - CMH system and its relation to disease, Hosp.
Pract., 14, 20 - 57, July, 1985;
176. Mandelstam J., Mc Quillen K.: Biochemistry of Bacterial Growth.
Blackwell Scientific Publ., Oxford., 1968.
177. Marak P., Kapler J. - T cell can distinguish between allogenic major
histocompatibility complex products on different cell types, Nature,
332, 840 - 845, 1988;
178. Margineanu C.: Microbiologie Stomatologic, Editura Didactica i
Pedagogic Bucureti 1981.
179. Matinca Doina - Microbiologie pentru studenii facultilor de
Farmacie, Edit. Mediamira, Cluj Napoca, 1995.
180. Max E. et al. - Variation in the crossover of Kappa immunoglobulin
gene V. J. recombination, Cell, 21,793 - 802, 1980;
181. Mc Cacken G.: Emergence of resistant Streptococcus pneumoniae: a
problem in pedriatics. Pedriatic Infect. Dis. J, 14, 424 - 428, 1995.
182. Mc. Dade J. E., Shepard C. C., Redus M. A.: Evidence of Rickettsia
prowazekii infections in the United States, Am. J. Trop. Med. Hyg.
29: 277, 1980.
183. Mc. Michael A. J. et al. - HLA restriction of cell mediated lysis of
influenza virus infected human cell, Nature, 270, 524 - 529, 1977;
184. Meschner M. F. - Surface contact requirements for activation of
cytotoxic T limphocytes, J. Immunology, 149, 2402, 1992.
185. Mesrobeanu I., Berceanu t. - Imunologie, Imunochimie,
Imunopatologie, Edit. Academiei, Bucureti, 1975.
186. Mesrobeanu I., Berceanu t.: Fiziologie bacterian, Editura
Academiei, Bucureti 1960.
187. Miariu Mircea - Probleme de imunologie n stomatologie, Edit.
Tribuna, Sibiu, 1998.
188. Middleton E., Reed C. - Allergy; principles and practice. St. Louis,
vol. I, II, 1983.
466
189. Mihalache M.: Imunologie, Curs pentru uzul studenilor, Editura

Conexiuni, Sibiu, 1999.
190. Mihalache M.: Imunologie, Curs pentru uzul studenilor, Editura
Conexiuni, Sibiu, 1999.
191. Miller H.C.: Microbial Ecology of the Oral Cavity, Oral
Microbiology Infections Disease, Schuster, Third Edition, p.441-446,
1990.
192. Miller H.C.: The Oral Microbial Flora, Oral Microbiology Infections
Disease, Schuster, Third Edition, p.465-478, 1990.
193. Mircea Ioan Popa: Microbiologie general i special - note de curs,
Concept Publishing House, Bucureti 1999.
194. Mishu B., Koehler J.: Outbreak of Salmonella enterididis infections
in the United States, 1985-1991, J. Infect. Dis.: 169-547, 1994.
195. Mobley H.L.T., Chippendale G.R.: Hemaglutinin, urease and
hemolysin production of Proteus mirabilis, J. Infect. Dis. 161:525,
1990.
196. Moellering R. C.: Emergence of Enterococcus, as a significant
pathogen. Clin. Infections Dis. 14, 1173 - 1178, 1992.
197. Moller G. - HLA and disease Susceptibility, Immunol. Rev. Entire
issue, 1, 70 - 74, 1988;
198. Moller G. - Molecular genetics of class I and classII MHC antigens,
Immunol. Rev., 1, 84 - 91, 1985;
199. Moraru I. - Imunologie, Ed. Medicala, Bucureti, 171 - 225, 1984;
200. Moraru I., Punescu E. (sub red.): Dicionar enciclopedic de
Imunologie, Edit. tiinific i Enciclopedic, Bucureti, 1981.
201. Morse S. A., Broome C. V., Cannon J, (et al): Perspectives on
pathogenic Neisseriae. Clin. Microbiol. Rev. 2:S1, 1989.
202. Moss J., Waughn M.: Activation of adenylate cyclaze by choleragen;
Amr. Rev. Bivehem. 48:581, 1979.
203. Moulder J. W. (ed.): Intracellular Parasitism, CRC Press, Boca
Raton, FL, 1989.
204. Munoz J.J., Bergman R.K.: Bordetella pertussis, vol.4. Marcel
Dekker, New York, 1977.
205. Murphy T. F., Apicella M. A.: Nontypable Haemophylus influenzae:
a review of clinical aspects, surface antigens and the human immune
response to infection. Rev. Infect. Dis 9 : 1, 1987.
206. Murray J.J.: The Prevention of Dental Disease, Second Edition,
Oxford University Press, 1989.
207. Murray P., Drew W., Thompson J.: Medical Microbiology, C. V.
Mosby Company, 1989.
467
208. Musker D. M.: Biology of Treponema pallidum, Sexually

Transmitted Disease, 2nd Edit., Mc Saw Hill Book Company, New
York, 1990.
209. Neil Risch - Assessing the role of HLA - linked and unlinked
determinants of disease, Am. J. Human Genet., 40, 1 - 14, 1998;
210. Nelson D. S. - Immunity to infection, allograft immunity and tumour
immunity: Parallels and contrasts. Transplant Revue, 19, 226 - 254,
1984.
211. Newmann M.G., Nisengarden R.: Oral Microbiology and
Immunology, Newman and Nisengarden, p.411-437, 1988.
212. Nicolletti C. - Antibody protection in ageing: influence of idiotypic
repertoire and antibody binding activity to a bacterial antigen,
Experimental and Molecular Pathology, 62 99 - 108, Apr., 1995;
213. Nossal G. J. - The basic components of the immune system, The N.
Engl. J. Med., 316, 1320 1325, 1990.
214. Notkins A. L. et al.- How the immune response to a virus cause
disease, Sci. Amer., 228, 23 3, 1986.
215. Ojcius D. M., Ding J., Young E. - Cell - mediated killing; efector
mechanism; efector mechanism and mediators, Cancer Cells, 1990,
2, 138 - 145.
216. Olinescu A. - Elemente de Imunologie Comparat, Edit. Ceres,
Bucureti, 1988.
217. Olinescu A. - Imunologie, Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti,
1995;
218. Punescu V., Tatu A. Clin, Stnescu I. Diana, Medrea P. Dan Imunologie, Concepte fundamentale i Aplicative, Edit. Helicon,
Timioara, 1996.
219. Page R.C.: Gingivits, J. Clin. Periodontol, 13, p.345, 1986.
220. Pappenheimer J.A.M.: Interaction of Protein Toxins with Mammalian
Cell Membranes, Ed. D. Schlessinger, ASM. Washington D.C., p.
187-192, 1979.
221. Parrish H. J. - A history of immunisation, Ed. Livingstone, 3 - 45,
1985;
222. Penner J. L.: The genus Camphylobacter: a decade of progress. Clin.
Microbiol. Rev 1:157, 1988.
223. Penner J. L.: The genus Camphylobacter: a decade of progress. Clin.
Microbiol. Rev 1:157, 1988.
224. Pestka S., Baron S. - Definition and classification of interferons, Met.
Enym, 78, 3 14, 1992.
468
225. Peter Mihail, Domokos Ludovic, Piros Sanda, Lrinczi Lilla, Toma
Felicia: ndreptar de lucrri practice de microbiologie, Litografia
UMF Trgu-Mure, 1998.
226. Ponvert C., Paupe J., Griscelli C. - Immunologie fondamentale et
immunopathologie, 1991.
227. Powrie F., Coffman R. L. - Cytokine regulation of T cell function:
potential for therapeutic intervention., Immunology Today, 1993,
14(6), 200 - 204.
228. Rappuoli R., Perugini M., Falsen E.: Molecular epidemiology of the
1984 - 1986 outbreak of diphteriae in Sweden. N. Engl. J. Med. 312 321, 1988.
229. Rappuoli R., Perugini M., Falsen E.: Molecular epidemiology of the
1984 - 1986 outbreak of diphteriae in Sweden. N. Engl. J. Med. 312 321, 1988.
230. Razin S. Barile M. F.: The Mycoplasmas, Vol. 4, Mycoplasma
Pathogenicity. Academic Press, Orlando, 1985.
231. Razin S., Jacobs E.: Mycoplasma adhesion. J. Gen. Microbiol. 138 407, 1992.
232. Reichman L. B., Hershfield E. S.: Tuberculosis - A Comprehensive
International Approach. Marcel Dekker, New York 1993.
233. Reinherz E. L., Schlossmann S. F. - Differentiation and function of
human T lymphocites cell, 19, 821 - 827, 1980.
234. Rigsby M. O., Curis A. H.: Pulmonary disease from nontuberculous
Mycobacteria in patients with human immunoficiency virus. Chest
106, 913, 1994.
235. Rogolski M.: Nonenteric Toxins of Staphylococcus Aureus,
Microbiology Rew., 43, p.320-360, 1979.
236. Roitt I., Brostoff M., Mak D. - Immunology Second Edition, Gower
Medical Publishing, London, New York, 1989.
237. Rom W. N., Garay S.: Tuberculosis, Little, Brown and Co, New York
1995.
238. Rose N. L., Friedman H., Fahey J. L. - Manual of clinical laboratory
immunology, American Soc. for Microbiol., Washingon DC, 78 116, 1986;
239. Roth J.: Virulence Mecanisms of Bacterial Pahtogens, American
Society for Microbiology, Washington, D.C., 1988.
240. Rottem S., Kahane I.: Mycoplasma Cell Membranes. Plenum Press,
New York 1993.
241. Sakagawa E.: Study of the role of mucoid strain in chronic airways
infections, Japanese, Kansenshogakn, Zasshi, 72(4), 379 - 394, 1998.
469
242. Salyers A. A., Whitt D. D.: Bacterial pathogenesis: a molecular

approach. American Society for Microbiology, Washington D. C.,
1994.
243. Sasazuki T., Nistimura Y. et al. - Molecular and functional analysis of
HLA class II molecules, Human T Cell Clones, Human Press Inc.,
101, 333 - 352, 1985;
244. Sasc C., Ivanof A. - Lucrri practice de Microbiologie, virusologie
i sindroame infecioase, Litografia U.M.F. Cluj-Napoca, retiprit i
adugit, vol. 1, 226 - 331, 1991;
245. Schachter: Chlamydiae: exotic and ubiquitos; West J. Med. 132 238, 1980.
246. Schahter J., Crossman M.: Chlamydial infections; Ann. Rev. Med. 32
- 45, 1981.
247. Schlievert P. M.: Role of superantigens in human disease. J.
Infections Dis 167 - 997, 1993.
248. Sell G. H., Wright P. F.: Haemophylus influenzae, Epidemiology,
Immunology and Prevention of Disease, Elsevier Biomedical, 4036,
1990.
249. Shaenning o., Lutwick L.: Pseudomonas aeruginosa infections,
Infect. Med., 13, 2, 110 - 113, 1996.
250. Shinnick T.: Tuberculosis, Curr. Top Microbiol Immunol, Springer
Verlag Hardalbery, 1995.
251. Silver J., Gayert S. M. - Epitopes are the functional Units of HLA
Class II Molecules and form the molecular basis for disease
Susceptibility, HLA class II Antigens Rev., Springer Verlag Berlin,
28, 132 - 141, 1990;
252. Singer S.J., Nicholson A.L.: The Fluid Mosaic of Cell Membranes,
Science, p.175;720, 1972.
253. Siskind G. W. - Immunologic tolerance in Fundamental Virology Paul W. E., Raven Press, New York, 537 558, 1998.
254. Smith H.: Biochemical Challenge of Microbiolopathogenity, Bact.
Rew., 32, p.164-184, 1968.
255. Smith H.: Microbial Surface in Relation to Patogenity, Microbiol.
Rew., 41, p.475-500, 1977.
256. Spangler B.D.: Structure and function of cholera toxin and the related
E. Coli heat-labile enterotoxin. Microbiol. Rev 56:622, 1992.
257. Spies T. et al. - Structural organisation of the DR subregion of the
human major histocompatibility complex, Proc. Nat. Acad. Sci. USA,
82, 5165 - 5169, 1985;
258. Stanila L.: Microbiologia bolii parodontale, Litografia IMF ClujNapoca, 1993.
470
259. Sternas L., Luka J., Kallin B., et al. - Elisa technique, J immunol.
Meth., 63, 171 - 185, 1983;
260. Stewens D. J., Tanner M. H., Winship J et al: Severe group A
Streptococcal infections associated with a toxic shock-like syndrome
and scarlet fever toxin A. N. Engl. J. Med, 321, 1 - 8; 1989.
261. Sutter V. L., Citron D. M.: Wadsworth Anaerobic Bacteriology
Manual, 4th Ed. Star Publishing, Belmont, C. A., 1985.
262. Talmage W. D. - A century of progress, Beyond molecular
immunology, Journal of Immunol., 32, 55 - 141, 1988;
263. Tao X., Schiering N, Zeng H - Y: DtxR, iron and the regulation of
diphteria toxin expression. Mol. Microbiol. 14, 191, 1994.
264. Terasaki P. I., Giertson D. - Immunobiology of MHC, Convoc.
Immunol., New York, 270 - 276, 1980;
265. Tesh V. L., O'Brien A. D.: Adherence and colonization mechanism of
enteropatogenic and entherohemorragic E. Coli. Microb.
Pathogenesis, 12:245, 1992.
266. Thomas L. - Protein diagnostic, Behring Institute, 3, 332 - 354, 1982;
267. Tiwali J. L., Terasaki P. I. - HLA and disease associations, Springer
Verlag, 15 - 98, 1985;
268. Toltzis P., Blunier J.L.: Antibiotic resistant gram negative bacteria in
the critical care setting. Pedriatic Clin. North Amer. 42:687, 1955.
269. Tonegawa S. - Somatic generation of antibody diversity, Nature, 302,
575 - 597, 1983;
270. Tonegawa S.- The molecules of immune system, Sci. Amer., 253, 104
113 1976.
271. Tribby I., Frs R., Moulder J. W.: Effect of Chloramphenicol,
Rifamicin and Nalidixic Acid on Chlamidia psittaci growing in L
cells: J. Infection Disease 127 - 155, 1973.
272. Trowsdale J., Campbell R. D. - Physical map of the human HLA
region, Immunol. Today, 9, 34 - 36, 1988;
273. Vaida T., Cristea V. - Elemente de imunologie, Editura Vasile
Goldi Arad, 1996.
274. Victor E., Linda A. Corey, Walter E. Nance - The inheritance of
immunoglobulin levels, Twin Research, Clinical Studies, Allan R.
Liss Inc., 5, 171 - 176, 1978;
275. Virella Gabriel: Microbiology and Infectiouse Disease, National
Medical Series for Independent Study, Williams & Wilkins, USA,
1996.
276. Voiculescu M. - Boli infecioase, Clinica i Epidemiologie, Ediia a
3-a, Ed. Medical, Bucureti, 57 - 125, 1981;
471
277. Voiculescu M. - Boli infecioase, vol. I, vol. II, Ed. Med. Bucureti,
344-425, 1990;
278. Wessels M. R., Kasper D. J.: The changing spectrum of group B
streptococcal disease: N. Engl. J. Med, 328, 1843 - 1844, 1993.
279. Williams A., Barclay A. - Handbook of Experimental Immunology,
Blackwell Scientific Publication, 1985.
280. Wise K. S.: Adaptive surface variation of Mycoplasmas. Trends
Microbiol 1:59, 1993.
281. Woods D. E., Iglewski B. H.: Toxins of Pseudomonas aeruginosa:
new perspectives, Rev. Inf. Dis. 5:715, 1983.
282. Young E.J., Corbel M.J.: Brucellosis: Clinical and Laboratory
aspects, CRC Press, Boca Raton, 1989.
283. Zarnea G. - Tratat de Microbiol. general vol. I (1983), vol. II (1984),
vol. III (1986), vol. IV (1991), Edit. Academiei, Bucureti.
284. Zarnea G.: Microbiologie general, Ed. Didactic i Pedagogic,
Bucureti, 1970.
285. Zola H. - Differentiation and maturation of human B lymphocytes;
Pathology 17, 365-381, 1985.
286. Zola H. - The surface antigens of human B lymphocytes,
Immunology Today, 8, 308 - 313, 1987.
472

Monografie Medic

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Monografie Medic

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Prefa

Monografia se adreseaz studenilor n medicin,

Partea a II-a MICROBIOLOGIE SPECIAL

Contribuia florei microbiene la producerea cariei dentare ........................................246

Partea a IV-a IMUNOLOGIE

Controlul genetic al sintezei imunoglobulinelor.........................................................326

Fig. 2- Plan general de organizare al celulei bacteriene (51)

Celula bacterian - celul procariot

Tabelul nr.1 - Caracteristicile comparative ale celulei procariote i

- ribozomi - alctuii din - r-ARN (ARN ribozomal) - 2/3 i

Funciile membranei celulare

Anvelopa celulei bacteriene

Lactoz Transferaza > Fructoz + Glucoz

Peretele celular (PC)

Legturile interpeptidice dintre catenele liniare se formeaz prin

Peretele celular la bacterii gram poztive

Peretele celular la bacterii gram negative

- electronotransfertaxia - spre substane ce funcioneaz ca acceptori

Examinarea mobilitii bacteriene n laborator:

Ciliatura n microscopie electronic (dispoziia cililor pe o celul

Pilii sau fimbriile

- exemple de bacterii cu pili: E. Coli

- Spor localizat central (brcu), la Clostridium sporogenes.

Fig. 10 Sporul bacterian (85)

Importana studierii sporului n:

Unicelular - se desfoar ntr-o singur celul

Dezvoltare optim la:

10-15 (ind. alimentar)

Mediul de cultur minimal

- anaplerotice: duc la fixarea CO2 cu obinerea compuilor C3, C4,

Clasificarea bacteriilor n funcie de tipurile de eliberare a energiei

Eliberarea energiei Prez.O2 n mediu

Reacii necesare pentru conservarea energiei

a) Fosforilarea prin transport de electroni

Substrat supus oxidrii -----------------------------> O2

Particulariti ale lanului respirator bacterian

Sinteza ATP are loc n 3 poziii din lanul respirator:

Transferul separat al e- i H+ prin buclele lanului respirator realizeaz

Tipul de Produs final obinut

Bilanul energetic pentru respiraie i fermentaie

Biosinteza materialului celular

Tabelul nr.5 - Metabolii focali

Glicerol, lipide, fosfolipide

oxidarea acizilor grai, Acizi grai, Steroli

Deci, metaboliii focali provin din:

Creterea i multiplicarea bacteriilor

Diviziunea celular se produce cu o strangulare a MC iniial, apoi a

aceste celule au cea mai mare sensibilitate la antibiotice i

Faza D - de ncetinire a multiplicrii

= Suportul material al ereditii (inclusiv la bacterii)

Deci variabilitatea caracterelor bacteriene poate fi divizat n 2

Fig. 14 Replicarea ADN-ului bacterian (80)

Transcrierea informaiei genetice

Elemente genetice la bacterii

Genomul fagic - bacteriofagii:

Elemente genetice transpozabile

Tranziii - nlocuirea unei purine sau pirimidine cu alt purin sau

- intergenice - mutaii n gene diferite, pentru restabilirea

Transferul intercelular de material genetic

- n experimentul final, a inoculat la alt oarece dou tulpini de

Conjugarea la bacilii gram negativi

- Apropierea ntmpltoare a doua celule F+ i F- determin formarea

- Punnd n contact celule HFR (cu plasmida F integrata n

Tabelul nr.6 - Principalele proteine care interacioneaz cu ADN