Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Curs 1
MICROBIOLOGIA CLINICĂ
• protista
• procariotae
• vira
Regnul Procariotae
• cuprinde microorganisme cu celule primitive, de tip
procariot, lipsite de nucleu adevărat (au un cromozom
haploid format dintr-o moleculă circulară de ADN) şi de
organite celulare nespecifice (cu excepţia ribozomilor),
dar cu un înveliş suplimentar (perete celular rigid).
• Eubacteriile cuprind un număr mare de bacterii, cele de
interes medical fiind:
– bacteriile clasice - cu forme variate şi cu perete celular;
– chlamydiile – bacterii cu parazitism obligatoriu intracelular;
– rickettsiile – bacterii cu habitat intracelular, dar cu diviziune
directă;
– mycoplasmele – bacterii lipsite de perete celular.
Structura bacteriilor
• Structuri obligatorii: material nuclear, citoplasma, membrana citoplasmatică,
perete celular
Informaţia geneticǎ se aflǎ în interiorul unei molecule dublu-catenare lungi de ADN circular.
Nu existǎ membranǎ nuclearǎ, iar citoplasma nu conţine alte organite celulare, cu excepţia
ribozomilor (70 S).
Pe baza structurii peretelui celular, bacteriile sunt clasificate în bacterii Gram pozitive şi Gram
negative.Peretele celular al bacteriilor acido-alcoolo rezistente (bacilul tuberculos şi bacilul leprei)
se aseamănă cu cel al bacteriilor gram-pozitive. Peretele celular dǎ forma finalǎ a bacteriei, care
are rol important în identificare. În general, bacteriile sunt sferice (cocii), alungite (bacilii) sau
spiralate. Structurile speciale conţin o varietate de lipide complexe (acizi micolici) care conferă
acestor bacterii caractere tinctoriale deosebite şi rezistenţǎ crescutǎ la uscǎciune şi decolorarea
cu alcool şi acid motiv pentru care se colorează Ziehl-Nielsen.
• Structuri neobligatorii: capsula, pilii, flagelii, sporul bacterian
Capsula poate fi de natură polizaharidică (Streptococcus pneumoniae, Klebsiella sp.) sau de
natură polipeptidică (bacilul cărbunos). Aceasta are rol în rezistenţa bacteriilor faţă de fagocitoză,
fiind un factor de virulenţă.
Pilii (fimbrii) se împart în pili sexuali (codificaţi de plasmide cu rol în transferul de material genetic
între bacterii) şi pili comuni (codificaţi cromozomial, fiind un important factor de virulenţă). Ambele
categorii de pili prezintă antigene specifice şi pot fi receptori pentru bacteriofagi.
Sporogeneza se întâlneşte la 3 genuri de bacterii gram-pozitive, Clostridium, Bacillus şi
Sporosarcina.
Flagelii sunt filamente helicoidale care asigură mobilitatea bacteriei. Aceştia pot fi unici, situaţi la
un pol al celulei (monotriche), în mǎnunchiuri (lofotriche) sau dispuşi pe întreaga suprafaţǎ
celularǎ (peritrichi). Flagelii sunt constituiţi din componente proteice (flageline), cu proprietăţi
antigenice. Aceste antigene flagelare (H) sunt importante în identificarea bacteriilor.
MORFOLOGIA şi aşezarea
BACTERIILOR
Dimensiunea bacteriilor se exprimă în micrometrii (1µ=10-3 mm), fiind
cuprinsă între 1-10 µ.
Clasificare:
• Bacteriile gram pozitive aerobe şi facultative anaerobe:
– COCI cu dispoziţie în grămezi (Staphylococcus sp.), lanţuri (streptococi), in diplo şi lanţuri
(Streptococcus pneumoniae, Enterococcus sp.);
– BACILI cu dispoziţie în lanţuri (Bacillus sp.), litere chinezeşti sau majuscule (Corynebacterium
sp., Listeria sp.);
• Bacteriile gram negative aerobe şi facultative anaerobe:
– COCI: Moraxella catarrhalis, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitides (dispuşi ca două
boabe de cafea care se privesc faţă în faţă), Haemophilus influenzae;
– BACILI: familia Enterobacteriaceae (Escherichia coli, Enterobacter sp., Citrobacter sp., Klebsiella
sp., Proteus sp., Serratia sp., Salmonella sp., Shigella sp., Yersinia sp.); bacili Gram negativi
non-fermentativi: Pseudomonas sp., Acinetobacter sp., Helicobacter sp.);
• Germeni anaerobi:
– deasupra diafragmului: Peptococcus sp., Peptostreptococcus sp., Prevotella sp., Veillonella sp.,
Actinomyces sp.;
– sub diafragm: Clostridium perfringens, Cl. tetani, Cl. difficile, Bacteroides sp., Fusobacterium sp.;
• Alte bacterii:
- cocobacili (forme intermediare între coci şi bacilli): Yersinia pestis,
Bordetella pertussis, Haemophilus influenzae;
- bacterii atipice: Legionella pneumophila, Mycoplasma pneumonia, M.
hominis, Chlamydia pneumoniae, C. psittaci, C. trachomatis,
Rickettsia sp.;
- vibrioni - bacterii încurbate, în formă de virgulă (Vibrio cholerae);
- spirochete: bacterii spiralate, cu corpul flexibil şi 12-20 de spire
(Treponema pallidum), foarte multe spire strânse (Leptospira sp.)
sau 2-3 spire (Borrelia sp.);
- spirili - bacterii spiralate cu 1-2 spire rigide (Spirillum volutans);
- fuzobacterii: bacterii fuzospirilare (Fusobacterium sp., Treponema
vincenti);
- actinomycete - bacterii foarte asemănătoare fungilor, au hife lungi şi
ramificate care se rup, rezultând forme bacilare (Actinomyces sp.).
Regnul Vira
• cuprinde entităţi infecţioase de natură
subcelulară (acelulară): virusurile şi viroizii.
– Virusurile sunt entităţi infecţioase acelulare, cu
parazitism obligatoriu intracelular, au un singur acid
nucleic (ADN sau ARN), sunt inerte în afara celulei
gazdă şi parazitează celula la nivel genetic (deviază
metabolismul acesteia în scopul propriei replicări).
– Viroizii au o structură şi mai simplă, fiind alcătuiţi doar
dintr-un acid nucleic cu greutate moleculară mică.
Unii dintre ei produc boli transmisibile la plante.
– Prionii sunt entităţi infecţioase de dimensiuni foarte
mici (5 nm), de natură proteică, lipsite de acid nucleic
Caractere diferenţiale între virusuri
şi bacterii
Caracter Bacterii Virusuri
Dimensiuni 1–10 μ MO 20–30 nm ME
NUTRIŢIA BACTERIILOR
Sursa de energie
• fotosintetizante - energia luminoasă
• chimiosintetizante - reacţii de oxido-reducere a unor substanţe
– lithotrofe - oxidează substanţele anorganice
– chemoorganotrofe - oxidează subst.organice
Sursa de carbon
• autotrofe - substanţe anorganice, CO2
• mixotrofe - substanţe organice cât şi CO2
• heterotrofe - substanţe organice
Sursa de azot
• aminoacizii, săruri de amoniu (Escherichia coli, Salmonella etc.).
RESPIRAŢIA BACTERIILOR
Bacterii strict aerobe, care se dezvoltă numai în prezenţa oxigenului atmosferic,(Pseudomonas
aeruginosa, Corynebacterium diphteriae, Mycobacterium tuberculosis etc.)
Bacterii strict anaerobe folosesc fermentaţia (Clostridium, Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium
etc.)
Bcaterii facultativ anaerobe utilizează respirația aerobă, fermentația sau respirația anerobă
(majoritatea speciilor de interes medical – exemplu enterobacteriile)
Bacteriile anaerobe aerotolerante folosesc fermentaţia în prezenţa aerului atmosferic fără
participarea oxigenului (Streptococcus
Bacterii microaerofile folosesc fermentaţia şi respiraţia dar în prezenţa unei concentraţii crescute
de CO2
Infecţii produse de bacterii
• Infecţiile exogene rezultă în urma contactului cu
bacterii din mediul înconjurător. Bacteriile pot
contamina organismul pe cale: alimentară,
respiratorie, contact sexual, manevre medicale,
promiscuitatea cu animalele, muşcăturile de
insecte etc.
• Infecţiile endogene rezultă în urma contaminării cu
bacterii de pe suprafaţa mucoaselor şi a pielii.
Aceste microorgansime produc infecţii dacă
traversează barierele anatomice şi pătrund în
ţesuturi (ex. bacilul coli face parte din flora normală
a intestinului, dar dacă pătrunde în căile urinare, va
determina apariţia unei infecţii la acest nivel,
str. viridans, stafilococi coagulazo-negativi, etc.).
Diagnosticul de laborator în
Bacteriologie
• Dg. BACTERIOLOGIC- Izolarea şi identificarea bacteriilor din
produsele patologice
- recoltarea şi transportul la laborator al produselor patologice
- izolarea bacteriilor pe medii de cultură
- identificarea bacteriilor pe baza caracterelor:
- morfologice şi tinctoriale
- culturale
- biochimice
- antigenice (IF, aglutinare, precipitare)
- toxinogenezei
- testarea sensibilităţii la antibiotice – ANTIBIOGRAMA /
ANTIFUNGIGRAMA
• Dg. SEROLOGIC – detectarea şi titrarea Ac în serul de
cercetat
- reacţii antigen-anticorp (IF, RFC, aglutinare, precipitare,
ELIZA, RIA)
VIRUSURI: structura de bază,
obligatorie, a virionului o reprezintă
Nucleocapsida constituită din:
- miez (core) de acid nucleic care este, de fapt, genomul
viral, protejat de un înveliş proteic numit capsidă
Virusurile formate numai din nucleocapsidă se numesc
virusuri neanvelopate.
Virusurile care prezintă pe lângă nucleocapsidă şi un
înveliş extern lipoproteic derivat din sistemul membranar
al celulei gazdă (peplos sau anvelopă), se numesc
virusuri anvelopate.
Genomul viral Capsida virală
Este constituit dintr-un singur tip de acid nucleic: Este un înveliş format din numeroase unităţi
• fie ADN, proteice numite capsomere = proteine de
• fie ARN dimensiuni mici care se autoasamblează
(niciodată ambii), care conţine întreaga informaţie în structuri capsomerice mari, iar în final
genetică necesară replicării virusului şi care se asamblează sub forma capsidei virale.
reprezintă suportul infecţiozităţii acestuia. Există două tipuri de simetrie a capsidelor:
Molecula acidului nucleic poate fi: • helicoidală, cu aspect tubular sunt
• simplu spiralată (ss) sau dublu spiralată (ds), caracteristice ARN virusurilor
• icosaiedrică, cu aspect sferic sunt
• liniară sau circulară, caracteristice ADN virusurilor
• continuă sau segmentată.
Peplosul
1. Spiculi de natură glicoproteică :
-hemaglutinina (HA), cu rol în ataşarea virusului de celula gazdă
-neuraminidaza (N), care facilitează pătrunderea virusului în celulă.
2. Factori de fuziune cu funcţie de iniţiere a infecţiei
3. Proteina M (matrix) care căptuşeşte faţa internă a anvelopei
Producerea infecţiei virale
Replicarea virală parcurge etapele:
1. Recunoaşterea celulei gazdă
2. Adsorbţia (ataşarea) virusului de
celula gazdă
3. Penetrarea virusului în celula gazdă
4. Decapsidarea virusului
5. Sinteza macromoleculară
6. Eliberarea virionilor progeni din celula
gazdă
Căi de transmitere a virusurilor şi
ruta infecţiilor
Bacterii:
Yersinia pestis Pesta (ciuma) Purice
Borrelia recurrentis Febra recurentă Căpuşa
Borrelia burgdorrferi Boala Lyme căpuşa
Protozoare:
Trypanosoma cruzi Tripanosomiaza americanp ...........
Plasmodium sp. Malaria Ţânţar
Leishmania sp. Leishmanioza ........
Viermi:
Wuchereria and Brugia Filarioza limfatică Ţânţari
Onchocera Onchocerciaza Musca Simulium
Diagnosticul de laborator în
Parazitologie
• Examenul coproparazitologic presupune:
- examenul macroscopic;
- examenul microscopic:
- preparat direct în ser fiziologic şi colorat cu lugol;
- preparat în strat gras (metoda Kato-Miura);
- preparat după concentrarea elementelor parazitare;
- preparat permanent colorat (hematoxilină ferică şi Ziehl Neelsen);
- metode speciale (tehnica amprentei anale: N.I.H.);
- metode larvoscopice (Baermann, Harada şi Mori, cultura cu cărbune);
- examinarea microscopică a materiilor fecale în vederea identificării
paraziţilor (chişti de protozoare, ouă de helminţi);
- cultivare: mediul Loeffler, mediul Simici, mediul TTY-SB, TTP-S, NNN, etc.
• Microscopie optică – pentru toate produsele în care se pot vizualiza ouă larve de
paraziţi: spută, LCR, lichid pleural, urină,
• Microscopia electronică.
• Examenul histopatologic - biopsia – cutanată, musculară, cerebrală, intestinală,
medulară, hepatică, splenică, prin coloraţia May-Grünwald-Giemsa.
• Picătura groasă din probe de sânge sau frotiuri colorate Giemsa
din sânge venos (mai multe probe de sânge prelevate din 8 în 8 ore,
timp de 2-3 zile – în malarie).
• Biologia moleculară – utilizarea sondelor ADN prin tehnica
recombinării (PCR).
• Hemograma – leucocitoză cu eozinofilie (în majoritatea bolilor
parazitare).
• Diagnosticul imunologic: decelarea anticorpilor circulanţi (IF
indirectă, latex-aglutinare, RFC, hemaglutinare indirectă,
imunodifuzie, Elisa, RIF, HAP, Western-Blot), teste de
hipersensibilizare (IDR).
• Xenodiagnosticul- hrănirea pe bolnav a glossinelor de crescătorie.
După 3 zile se evidenţiază tripanosomele în intestinul insectelor.
• Explorări imagistice – examen radiologic, ecografie, CT, RMN,
permit localizarea parazitului şi talia acesuia.