UMF Carol Davila

Facultatea de Medicina Generala

Catedra de Genetica

Asist. Univ. Dr. Florina Raicu

MUTATIILE SI
PROCESUL
REPARATOR AL
ADN

Copyright Florina Raicu 2009

Mutatii. Generalitati.
MUTATII PATOLOGICE
o mutatii aparute la nivelul ADN nuclear

VARIANTE
ALE
SECVENTEI
ADN
Hemofilia A

o Genomice: altereaza numarul de cromozomi

din celula (anuploidii, poliploidii)
o Cromozomale: altereaza structura
individuala a cromozomilor
o Genice: altereaza structura genelor
o mutatii aparute la nivelul ADN mitocondrial
Diabet tip I
POLIMORFISME ADN
Repetitii in tandem
o SNPs
o VNTR: microsateliti (STR) si minisateliti
Repetitii inalt repetitive dispersate
o Repetitii SINE si LINE
o Elemente genetice mobile -retrotranspozoni

MUTATIILE
Definitie:
Mutatia reprezinta o alterare sau modificare aparuta la nivelul materialului genetic.
Mutatia apare in:
celulele liniei germinale - se poate transmite ereditar
celulele somatice - nu transmite ereditar.
Mutatiile apar in:
regiuni codificatoare ale genelor
regiuni necodificatoare: regiuni reglatorii si situsuri de splicing conservate
Efectele mutatiilor asupra
structurii ADN :

Efecte ale mutatiilor la nivel

proteic:

o Substitutii

o Sinonime (silentioase / neutre):

nu produc alterari

tranzitii
transversii

o Non-sinonime:

o Deletii
o Insertii

expansiuni de
triplete
duplicatii

missense
non-sense
frameshift

TIPURI DE MUTATII
Substitutii:

tranzitii
transversii

Missense
Mutatia missense

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid

Inlocuirea unei singure

nucleotide

Secventa de aminoacizi incorecta care poate produce o

proteina nefunctionala

Nonsens
Mutatia nonsense

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid

Inlocuirea unei singure

nucleotide

Codonul STOP care poate produce o proteina

truncata

Frameshift
Mutatia frameshift

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid

Modificarea cadrului de citire cu o singura baza azotata poate

produce o secventa anormala de aminoacizi

Deletii
Mutatia cauzata de o deletie
ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi
Baze
azotate

Amino acid
Deletia unei singure nucleotide

Secventa de aminoacizi incorecta care poate produce o

proteina nefunctionala

Insertii
Mutatia cauzata de insertie
ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi
Baze
azotate

Amino acid

Insertia unei singure

nucleotide

Secventa de aminoacizi incorecta care poate produce o

proteina nefunctionala

Mutatia dinamica
Mutatia cauzata de expansiunea de triplete MUTATIA DINAMICA

ADN original codifica pentru o secventa de aminoacizi

Baze
azotate

Amino acid

Trinucleotide repetate
(CAG)

Secventa de aminoacizi incorect extinsa

introduce in proteina glutamina

Slippage ADN polimeraza

Replicare normala

Alunecare spre inapoi

cauzeaza insertie

Alunecare spre inainte

cauzeaza deletie

Boala Charcot
Marie Tooth

Duplicatia

Cromozom

Un fragment
din ADN este
duplicat

CAUZELE MUTATIILOR. FACTORI CU EFECT

MUTAGEN

FACTORI EXOGENI
Radiatii ionizante
Raze UV
Agenti chimici
Agenti alkilanti
Agenti intercalanti

SPECTRUL RADIATIILOR ELECTROMAGNETICE

Creste lungimea de unda

Scade lungimea de unda

neionizanta

ionizanta

lungimea de unda

TIPUL DE
RADIATIE

Surse

Frecventa
extrem de
scazuta

Radio

infrarosu
microunde

ultraviolet

Raze gamma
Raze X

CAUZELE MUTATIILOR. FACTORI CU EFECT

MUTAGEN

FACTORI ENDOGENI
Depurinarea
Deaminarea
Erori in replicarea ADN
Erori in recombinarea ADN
Esecul procesului reparator

Raspunsul celulelor la alterarea

ADN
1. Repararea ADN

Repararea erorilor de imperechere

(Mismatch)
Repararea directa
Repararea prin excizia bazelor azotate
(BER)
Repararea prin excizia nucleotidelor
(NER)
Repararea post replicatorie (prin
recombinare)

2. Controlul ciclului celular

3. Apoptoza
4. Tolerarea leziunilor

Ataxia telangiectazia
Anemia Fanconi

PROCES REPARATOR ADN

Inainte

Foton UV

Dupa

I. SISTEMUL DE REPARARE AL ERORILOR DE IMPERECHERE

(Mismatch Repair System)
Sistemul de la
organismul model

Escherichia coli

Cancer de colon
Mutatii in genele omoloage
MSH si MLH

II. REPARARE DIRECTA

Fotoreactivarea ADN fotoliaza
Indepartarea gruparilor metil din G - enzima MTMG

DIMERUL DE TIMINA
Radiatie UV
Inel ciclobutanic

III. REPARARE PRIN

EXCIZIA BAZELOR (BER)

Sunt excizate
bazele modificate
chimic

IV. REPARARE PRIN

EXCIZIA NUCLEOTIDELOR

. . . .Exista si
Reparare cuplata cu
transcriptia

Xeroderma
pigmentosum
La om exista 25 de proteine din
care 7 XPA, XPB, XPCXPG responsabile de Xeroderma
pigmentosum

Sistemul de la organismul model

Escherichia coli

implica doar 4 proteine

V. REPARAREA
RUPTURILOR
BICATENARE
Double strand break
(DSB)
Repararea prin
recombinare
omoloaga se
bazeaza pe
informatia aflata pe
cromozomul omolog
Repararea prin
rupere realipire
(Non-homologous End
Joining)
Sinteza
transleziunilor

Patologie moleculara - mecanisme

Avem o alela mutanta si o alela normala:
de ce se manifesta/ de ce nu se manifesta alela
mutanta?
Cel mai important aspect al mutatiilor este legat de efectul lor asupra
organismului :
LOSS OF FUNCTION produsul genic prezinta
o functie redusa sau absenta
GAIN OF FUNCTION produsul are un efect pozitiv anormal

LOSS OF FUNCTION (LOF)

Caracterizeaza fenotipul recesiv

Haploinsuficienta

Mutatia reduce la jumatate cantitatea de produs normal al copiei

de alele iar acesta cantitate nu este suficienta pentru
functionalitatea normala

Efect dominant negativ

Alela mutata produce o proteina ce interfera cu actiunea celei

normale
Boala Hungtington

GAIN OF FUNCTION (GOF)

Caracterizeaza fenotipul dominant
Mutatia prin castig de functie conduce la formarea unei noi proteine cu
functie patologica

NOMENCLATURA UTILIZATA IN DESCRIEREA EFECTULUI UNEI

GENE:
alela nula / amorfa - alela mutanta nu produce niciun produs;
hipomorfa alela produce o cantitate redusa din produsul genic sau
are o activitate redusa;
hipermorfa - alela produce o cantitate crescuta din produsul genic
sau are o activitate crescuta;
neomorfa - alela are o noua activitate;
antimorfa - alela a carei activitate antagonizeaza cu produsul
normal al alelei normale;