Mutatii ADN

Mutatii supresoare
Intragenica: in aceeasi gena
Intergenica: acelasi cromozom, alt cz

Cum actioneaza?
Supresia intragenica
- Aditia sau deletia unei pb este rectificata de aditia sau
deletia compensatorie a unei perechi secundare de pb
intr-un situs apropiat
- Lipsa de activitate a unei proteine data de un aa gresit e
restabilita de modificarea unui alt aminoacid
Supresia intergenica
- Modificare mutationala intr-o gena secundara care
elimina fenotipul mutant cauzat de mutatia genei primare
Mutatii dinamice
Ce sunt?
Expansiunea instabila a unui triplet
CAG, CTG, CGG, GAA
Prag critic anomalii expresie gena sau functie proteina
Cum apar?
- Instabilitate meiotica si mitotica
Cum se manifesta?
- Expansiuni f mari: blocheaza transcriptia genei si produc pierderea
functiei genei
- Expansiune moderata: nu modifica transcriptia si translatia dar
altereaza fct proteinei
Caracteristici
- Anticipatie
- Efect parental

De la premutatie la mutatie completa
Alele normale si
stabile
5-50 repetitii

Stare intermediara
(nepatogene dar
instabile)
50-200 repetitii

Premutatie (linga
pragul critic)

Mutatie in
descendenta


Efectul fenotipic al mutatiilor patogene
Efect asupra functiei proteinei
Tipul si functia proteinei
Gradul de exprimare la heterozigoti
Influenta genelor modificatoare
Natura celulelor si proportia de celule modificate
Originea parentala
Efectul mutatiei asupra functiei proteinei
Castig de functie
- cresterea nivelului de expresie al proteinei: CMT
- cresterea capacitatii proteinei de a si efectua functia
normala acondroplazia

Pierderea functiei (albinismul)

Efectul mutatiei asupra functiei proteinei

Dobandirea unor proprietati noi ale proteinei
mutante (siclemia)


Expresie inadecvata : heterocronica (in timp),
ectopica (ca loc)
Boala Marie-Charcot-Tooth
Boala Marie-Charcot-Tooth
Acondroplazia

Cea mai rspandit form de
nanism (1/15000 nn)
Incetarea dezvoltrii oaselor lungi


FGFR 3 (4p16.3)



Proteina FGFR 3




Cartilaj





Parrot: 1879
Munnich: 1994
Nucleotid 1138 = hot spot
Gly380Arg
Paraclinic
Clinic
- statura mic disproporionat,
talie maxim 1,31 m
- anomalii rizomelice ale membrelor
- configuraia n trident a minilor
- anomalii ale trunchiului: cifoza
toracolombar,torace plat,
hipotonie
- anomalii specifice ale extremitii
cefalice: macrocefalie, hipoplazie
a etajului mijlociu al fetei,
malpozitii dentare
- Hiperlaxitate ligamentar
(subluxatia capului radial) +
retracie tendinoas cot
!!!
Compresie cervicomedular
Stenoza rahidian lombar
Transmitere AR
Manifestri clinice. Albinismul reprezint o afeciune
caracterizata prin colorarea anormal a tegumentelor, prului i
ochilor
Patogeneza. Boala este determinat de mutaii ale genei TYR.
Gena TYR este localizat pe cromozomul 11q14-q21 i codific
enzima tirozinaza, enzim localizat n melanocite. Tirozinaza este
responsabil de convertirea tirozinei n melanin.

Albinismul
Albinismul
1) Ocular
2) Oculo-cutanat
Siclemia - drepanocitoza
Tipuri de leziuni ADN
1 - Pierderea unei baze : site apurinic sau apirimidinic
2 Modificarea bazelor:
- Dezaminare - Oxidare
- Alterari cauzate de lumina : dimeri de timina
3 - Erori de replicare : mismatch
adenina / hipoxantina
guanina / xantina
5met C / timina
Tipuri de reparare
1- Reversia directa a leziunii
2 Reparea prin excizia leziunii
- Repararea imperecherii gresite: MMR

- Repararea prin excizia bazelor: BER

- Repararea prin excizia nucleotidelor: NER

3 Repararea rupturii dublu-catenare
Tipuri de reparare

1 - Reversia directa a leziunii
- Dimeri de pirimidina : actiunea fotoligazei
- Demetilarea guaninelor : actiunea unor enzime specifice
Tipuri de reparare
1- Reversia directa a leziunii
2 Reparare prin excizia leziunii
Sistemul de reparare prin excizia nucleotidelor = NER
Sistemul de reparare prin excizia bazelor modificate = BER
Sistemul de reparare prin excizia bazelor imperecheate gresit = MMR

3 Repararea rupturii dublu-catenare
Principiu: ADN dublu catenar: cele doua catene contin aceeasi
informatie catena lezata este inlaturata si inlocuita folosind
catena integra ca si matrita
Mecanisme de repare:
repara bazele gresite
repara imperecherea gresita a bazelor

Proces etapizat:
detectarea modificarii ADN
inalturarea fragmentului de ADN eronat
resinteza ADN normal
Etapele repararii
Mecanismele BER, NER i chiar a MMR sunt variante ale unui mecanism
general de reparare prin excizie-resintez, ce difer prin inta lor, modul de
recunoatere a leziunii i moleculele efectoare. Acest mecanism se
realizeaz n mai multe etape

recunoaterea situsului lezat (baz sau nucleotid), prin aciunea unor enzime
specifice;

desfacerea dublului helix, de ctre o helicaz;

excizia fragmentului de ADN alterat i a unui segment nvecinat leziunii, prin
intervenia unor endonucleaze;

ndeprtarea i degradarea fragmnetului, de ctre exonucleaze;

resinteza componentelor breei/lacunei (folosind ca matri catena de ADN
complementar) prin aciunea unor ADN polimeraze;

realizarea, de ctre o ADN ligaz, a legturii fosfodiester ntre fragmentul de
ADN neosintetizat i capetele libere ale catenei de ADN.
Etape:

Recunoasterea bazei modificata chimic
ADN glicozilaza: indepartarea bazei modificate -> situs abazic
Endonucleaza APE1: clivarea catenei ADN
Polimeraza : indepartarea reziduului 5 dezoxiribozo-fosfat,
sinteza fragmentului corespunzator situsului abazic
Continuitatea catenei ADN-ligaza
Reparare prin excizia bazelor
Etape:

Recunoasterea leziunii XPC-hHR23B
Separarea catenelor ADN doua helicaze: XPB 5
XPD 3
Incizia catenei ce contine leziunea XPF 5
XPG 3
Excizia si degradarea fragmentului
Resinteza ADN polimeraza delta sau epsilon
Continuitatea catenei ADN ligaza

Etape:
Recunoasterea erorii de imperechere MSH2,
MSH6
Incizia fragmentului ce contine eroarea
Indepartarea fragmentului ce contine eroarea
Refacerea secventei normale
Refacerea legaturii fosfo-diesterice
Repararea imperecherii gresite: MMR

- Mut S recunoaste imperecherea
eronata
- Fixarea Mut L pt stabilizare
- Mut H repereaza un site metilat
in apropierea mutatiei

- Excizie si reparare
La E - COLI
E. coli

S. cerevisiae

Human

Functions of eukaryotic proteins

MutS

MSH1

?

DNA repair in mitochondria

"

MSH2

MSH2

Single mismatch and small loop repair (with MSH6
to form MutSalpha); loop repair (with MSH3 to form
MutSbeta)

"

MSH3

MSH3

Loop repair (with MSH2 to form MutSbeta)

"

MSH4

MSH4

Meiosis (with MLH1)

"

MSH5

MSH5

Meiosis (with MLH1)

"

MSH6

MSH6

Single mismatch and small loop repair (with MSH2
to form MutSalpha)
MutL

MLH1

MLH1

Mismatch repair

"

PMS1

PMS2

Mismatch repair (with MLH1 to form MutLalpha)

"

MLH2

PMS1

Not involved in mismatch repair (yeast); evidence
ambiguous (humans). Interacts with MLH1 to form
MutLbeta.

"

MLH3

MLH3

Probably involved in loop repair (with MLH1)

MutH

?

?

?

uvrD

?

?

?

?

Exonuclease 1

Exonuclease
1

Mismatch repair (5' to 3' polarity)

?

RAD27

DNase IV
FEN-1

Mismatch repair (Flap endonuclease)