2.2.

Realizarea
informației genetice
în celulă
•Replicarea ADN
•Codul genetic și proprietățile lui
•Etapele realizării informației ereditare
../../2013
 1.1. Replicarea
Replicarea – reprezintă procesul
molecular de autoreproducere a
moleculei de ADN, în rezultatul
căruia dintr-o moleculă de ADN se
obțin două molecule noi identice.
 1.1. Replicarea asigură:

 Procesul dublării și transmiterii identice

a informației genetice
 Procesul autoreproducerii
 Ereditatea
 Continuitatea dintre generații și
constanța informației genetice în cadrul
diviziunilor celulare
1.1. Realizarea replicării:
 1.1. Principiile replicării

 Sinteză matricială
 Sinteză complementară
 Sinteză antiparalelă
 Sinteză în două direcții
 Sinteză semiconservativă
 Sinteză fără abateri
 Proces complex cu participarea diferitor
proteine și enzime
1.1. Schema replicării ADN
1.1. Replicarea în două direcții
1.1. Direcția replicării
 1.1. Dificultățile procesului de
replicare
 Conformația moleculelor liniare lungi și a celor
circulare mici de ADN
 Tendința catenelor de ADN spre renaturare și
formarea fragmentelor bicatenare
 Specificitatea enzimelor și numărul mare de reacții
specifice
 Replicarea asincronă a sectoarelor de eucromatină și
heterocromatină
 Necesitatea de energie pentru procesele de
denaturare/renaturare
 Necesitatea mecanismelor de neadmitere sau
înlăturare a erorilor de replicare
 1.1. Aparatul replicării
• Catenele ADN în calitate de matriță
• Punctul de inițiere ORI
• Nucleozidtrifosfați liberi (dNTP, NTP)
• Proteine SSB
• Complexul de enzime:
- helicaza
- ADN-polimeraza
- praimaza
- topoizomeraza I și II
- ligaza
 ORI – punctul de inițiere al
replicării
• conține circa 300 perechi de nucleotide
• conține sectoare capabile să fixeze proteine
specifice de inițiere
 ADN-helicaza

 Asigură
despiralizarea și
denaturarea
locală a ADN,
utilizând energia
hidrolizei ATP
 ADN-Polimeraza
• catalizează reacția de polimerizare a
nucleotidelor
 Tipurile de ADN-polimeraza la
eucariote

α β γ σ 
Localizarea nucleu nucleu mitocondrii nucleu nucleu
Replicarea + - + + -

Reparația - + - - +

Activitatea + + + + +
polimerazică
Activitatea - - + + +
exonucleazică

Catena sintetizată întârziată reparată ambele lider reparată

 !!! ADN-polimeraza nu poate de sine stătător să
inițieze sinteza unei catene noi, ea poate doar să
extindă această catenă în prezența unui mordant.

 Praimaza –
asigură sinteza
unui fragment
mic de ARN, care
exercită rolul de
mordant
Topoizomerazele elimină
spiralele datorită restricției
Ligaza – unește fragmentele nou
formate
Proteinele SSB – stabilizează catena
ADN-matriță în formă liniară
 !!! Replicarea se asigură prin
activitatea coordonată a întregului
aparat de replicare
 Replicon – unitate funcțională a
replicării
• este format din 100-300
mii p.n.
• are punct de inițiere
(ori) și punct de
finalizare (terminus)
• conține două furci
replicative
• la procariote -1 replicon,
iar la eucariote - multe
Direcția sintezei în furca
replicativă
Pe catena întârziată sinteza are loc cu
formarea fragmentelor Okazaki
 Controlul replicării este asigurat
de:

 ORI
 Proteinele site-specifice
 Proteinele reglatoare a ciclului celular
 Etapele replicării:
 Inițierea
- adiționarea proteinelor specifice la ORI
- denaturarea locală și formarea ”ochiului” replicativ
- sinteza praimerului
- adiționarea primelor dNTP la praimer
 Elongarea

- alungirea catenelor noi datorită polimerizării nucleotidelor

- depistarea erorilor și înlăturarea lor
 Terminația

- întâlnirea furcilor replicative vecine

- eliminarea praimerilor
- completarea breșilor
- unirea fragmentelor Okazaki
- renaturarea ADN
 Inițierea replicării
- adiționarea
proteinelor specifice la
ORI
- denaturarea locală și
formarea ”ochiului”
replicativ
- sinteza praimerului
- adiționarea primelor
dNTP la praimer
 Particularitățile replicării la
procariote (tipul Θ)
• Un replicon și un punct ori,
prin care ADN/ul se fixează de
membrana citoplasmatică
• Viteza – 1000 nucleotide/sec
• 3 tipuri de ADN-polimeraza
(I,II,III)
tipul III –de bază , posedă
activitate polimerazică și
exonucleazică,
tipul II – completează breșile și
elimină praimerii.
• două furci replicative
 Particularitățile replicării la
eucariote
 Replicarea este inițiată în mai multe
puncte ori și decurge asinhron
 Viteza de replicare 20-100 nucleot./sec
 5 tipuri de ADN-polimeraza
 Din cauza eliminării ultimului praimer
catena întârziată de fiecare dată este mai
mică
 Regiunile telomerice se replică după un
mecanism special
Replicarea regiunilor telomerice
 Telomerele și
îmbătrânirea

30-ani

26-ani
 1.2. Codul genetic

 Cifrarea informației ereditare despre

succesiunea aminoscizilor în catena
polipeptidică sub formă de succesiune a
tripletelor de nucleotide în molcula de
ADN (mARN)
 Dogma centrală

Transcription
DNA RNA Protein
Translation
Replication
 Codul genetic

G.Gamov, 1960: presupune că codul genetic este

tripletic
S.Brenner, F.Crick, 1961: presupune că citirea
se face succesiv (5ʹ - 3ʹ)
M.Nirenberg, I.Matthaei, 1961: sinteza
polifenilalaninei
S.Ochoa et al., 1982; Bretscher, Grunberg-
Manago, 1962; Nirenberg, Matthaei, Jones,
1962: descifrarea codului genetic
Formarea polinucleotidelor
Obținerea de oligoribonucleotide
copolimer Codonul de Aminoacidul
Succesiunea
recunoaștere codonului

(CU)” CUC|UCU|CUC… Leucine 5’-CUC-3’

Serine UCU
(UG)” UGU|GUG|UGU… Cystine UGU
Valine GUG
(AC)” ACA|CAC|ACA… Threonine ACA
Histidine CAC
(AG)” AGA|GAG|AGA… Arginine AGA
Glutamine GAG
(AUC)” AUC|AUC|AUC… Polyisoleucine 5’-AUC-3’
 Proprietățile
codului genetic
1:
1: Codul
Codul genetic
genetic este
este
tripletic
tripletic
  Fiecare
aminoacid
este
determinat de
trei
nucleotide
 Există 64 de
triplete
(codoane),
dintre care 3
fără sens
(UUA, UAG,
UGA)

Codul genetic  Codonul AUG

- de inițiere
2
2:: Codul
Codul genetic
genetic este
este
degenerat
degenerat
Degenerat – același
aminoacid poate fi codificat
de mai multe tipuri de codoni
3
3:: Codul
Codul genetic
genetic este
este
nesuprapus
nesuprapus
Nesuprapus – codonii se
aranjează unul după altul fără
întrerupere

… AUG/CCA/CAC/ACC/CAA …
4
4:: Codul
Codul genetic
genetic este
este
colenear
colenear
Colenear – succesiunea
aminoacizilor în molecula de
proteină corespunde ordinii
codoanelor respective din
genă
5
5:: Codul
Codul genetic
genetic este
este
specific
specific
Specific – unul și același
codon (triplet de nucleotide)
codifică doar un singur
aminoacid
6
6:: Codul
Codul genetic
genetic este
este
universal
universal
Universal – aceiași codoni
codifică aceiași aminoacizi
indiferent de natura
organismului (virusuri,
bacterii, ciuperci, plante,
animale)
 !!!
!!! 6
6::
Există
Există unele
unele mici
mici abateri
abateri
de
de la
la universalitatea
universalitatea
codului
codului genetic
genetic
Codul genetic din mitocondriile mamiferelor
 1.3. Expresia genelor
Expresia genelor – totalitatea
etapelor realizării informației
genetice de la molecula de ADN
(genă) până la sinteza proteinei

(transcripția, splising-ul, translația)

Va urma …..