Inginerie genetica

Referat

Nastase Remus
XII A

Profesor: Stelica Ene

 Scurt istoric si prezentare generala

Ingineria genetic reprezint un ansamblu de metode de lucru prin care se

manipuleaz materialul genetic la nivel molecular i celular. Astfel se obin
microorganisme, plante i animale reprogramate genetic, n al cror genom sunt incluse
gene strine, utile, exprimabile i transmisibile stabil la descendeni.
Termenul de Inginerie genetic prea, acum ceva timp, ca fiind desprins din domeniul
tiinifico-fantastic. Astzi, a devenit o realitate bine conturat i cu rezultate promitoare
n toate domeniile vieii cotidiene.
Modificand genomul plantelor si animalelor domestice, omul poate sa le confere
acestora anumite caracteristici benefice lui ca rezistenta la boli, rezistenta la diferiti factori
de mediu( temperatura, umiditate, sol,etc.), o anumita dimensiune, un anumit aspect fizic
etc.

Vechimea ingineriei genetice

Dei termenul de inginerie genetic este relativ nou, omul a nceput s modifice
genomul organismelor vii acum multe mii de ani, o dat cu domesticire animalelor. Primele
animale domesticite au fost oile i caprele, acum aproximativ 7000 de ani.

Animalele domesticite de ctre om au nceput s se diferenieze de rudele lor din

natur, ducnd o via diferit de a acestora. Omul a ncruciat diferite rase de animale
ntre ele pentru a obine altele noi, dotate cu calitile ambelor rase din care provin. Astfel
omul a obinut diverse rase de cai, vite, oi sau capre, dotate fiecare cu anumite caliti i
avnd o anumit utilitate economic. S-au obinut astfel vite de lapte sau de carne, psri
pentru carne sau pentru ou, cini ciobneti sau de vntoare.
Nici plantele nu au scpat. Plantele actuale sunt majoritatea hibrizi obinui prin
ncruciarea diverselor soiuri slbatice, acestea au fost hibridizate pentru a se obine soiuri
noi, mai rezistente i cu producie mai mare. De exemplu, grul a fost obinut prin
ncruciarea a trei specii diferite.
Putem vorbi de o anumit, s-o numim aa "antropo-selecie". Aceast selecie seamn
oarecum cu selecia natural, omul selectnd organismele (plante sau animale) cu anumite
caracteristici considerate superioare i nlturndu-le pe cele cu caracteristici, considerate
inferioare. Astfel odat cu trecerea timpului organismele domestice au devenit din ce n ce
mai adaptate cerinelor omului.

Trecerea la ingineria genetic modern

Astzi datorit cunotinelor de genetic dobndite, omul ncepe s nlocuiasc treptat
hibridizarea cu ingineria genetic, pentru a conferi anumite caracteristici organismelor
domestice. Spre deosebire de hibridizare, ingineria genetic modific genomul acionnd
direct asupra acestuia.
Fragmente mici de ADN, care determin caracteristici benefice omului sunt extrase din
genomul anumitor organisme i introdu-se n genomul alor organisme, care astfel vor
cpta caracteristicile dorite.
Bisturiele care realizeaz ndeprtarea unui anumit fragment de ADN sunt enzimele de
restricie, care poart i numele de ligaze. Enzimele care acioneaz asupra ADN-ului
poart numele de ADN-ligaze, iar cele care acioneaz asupra ARN-ului poart numele de
ARN-ligaze.

Structura unei AND-ligaze.

Beneficiile ingineriei genetice

Folosindu-se de ingineria genetic, omenirea ar putea nltura multe din problemele
sale actuale. Plante cu o rezisten i o productivitate mai mare ar putea eradica foamea i
ar putea salva multe din zonele naturale, att de afectate de extinderea terenurilor agricole.
Inserndu-se anumitor plante gene umane, rspunztoare de producerea anumitor
substane precum hormonii sau anticorpii, aceste plante ar putea produce astfel de
substane, att de necesare celor care sufer de anumite afeciuni.
De asemenea, ingineria genetic ar putea:
:: corecta diverse deficiene ale unor persoane, care le pun pe acestea n poziie de
inferioritate fa de alte persoane;
:: ar putea mbunti anumite caliti omeneti, dnd astfel un ascendent unora asupra
altor persoane;
:: s-ar putea "crea" caliti unor persoane care sunt foarte rare la om sau care au o
intensitate mult inferioar celei posibile prin intervenia ingineriei genetice.

Controversele privind ingineria genetic

Dei ingineria genetic poate aduce beneficii att de importante omenirii, aceasta este
respins de muli oameni, care consider c organismele modificate genetic sunt
duntoare pentru organismul uman i pentru mediul nconjurtor. Probabil c aceast
team manifestat fa de ingineria genetic este teama general resimit fa de noile
tehnologii. De asemenea, ca ntotdeauna i politica are un rol important n respingerea
acestei tehnologii.

Ce poate face ingineria genetica?

Celule destepte, care pot detecta stadiul unei tumori si o pot trata. Anumite
tulpini de bacterii sunt deja capabile sa localizeze tumorile. Colectivul condus de
Chris Voigt, de la Universitatea din California, incearca sa modifice bacteria E.
coli astfel incat ea sa poata fi utilizata in tratamentul cancerului.
Detector automat - celule capabile sa identifice anumite molecule, cum ar fi cele
de TNT (explozibil), actionand astfel ca un sistem de alarma foarte precoce. Un
laborator din America a reproiectat deja proteinele naturale din E. coli, astfel
incat acestea reactioneaza la TNT.
Producerea de medicamente. Un colectiv de cercetatori a inserat o retea de
gene provenite de la drojdie si pelin in bacteria E. coli, facand-o astfel capabila sa
produca o substanta de mare importanta terapeutica - precursorul
medicamentului artemisinin, folosit in tratamentul malariei.
Masinarii vii. Celule (in viitor, chiar celule umane) prevazute cu o retea de gene
care detecteaza toxinele sau administreaza medicamente. Un laborator din
Zurich a experimentat inserarea unei retele de gene in celule de hamster, astfel

incat acestea din urma produc niveluri mari, medii sau mici de proteine sintetice
la adminstrarea de antibiotice.
Curatatori. Bacterii care detecteaza si neutralizeaza toxinele din mediu - de la
deseurile nucleare, la agentii biolgici sau la metalele grele. Un grup de cercetatori
din California a creat tulpini de E. coli care acumuleaza metalele grele in peretii
celulari, lasand apa curata.

Tehnici utilizate n ingineria genetic

Ingineria genetic utilizeaz metode de cultur in vitro a celulelor i esuturilor animale i

vegetale i tehnologia ADN-ului recombinat. Pe aceste metode se bazeaz hibridarea
somatic la plante i animale, haploidia prin androgenez i ginogenez experimental,
precum i clonarea.

Hibridarea somatic la plante se realizeaz cu ajutorul protoplatilor, celule n

care s-a distrus peretele celular prin tratamente enzimatice (exemple: celulaza, pectinaza).
Drept urmare, fiecare celul va fi perfect izolat de celelalte, permind efectuarea
experimentelor.

Protoplatii pot fi izolai din orice organ al plantei. Ei manifest totipoten, avnd
capacitatea s regenereze plante ntregi, prin cultivarea pe mediul artificial in
vitro (exemplu mediu solid de agar-agar).
Fiind lipsii de perete celu, protoplatii pot fuzariona spontan sub influena
anumitor substane (nitrat de sodiu, polietilenglicol, ioni de calciu). Dup fuzionarea
celulelor, fuzioneaz nucleii, se reface peretele celular i ncepe diviziunea celular. Dup

circa trei sptmni se formeaz calusuri de culoare verde, care ncep s creasc. Pentru a
regenera plantele, calusurile se transfer n medii speciale de difereniere.
n urma hibridrii somatice rezult hibrizi interspecifici asemntori cu cei obinui
prin hibridarea sexuat.
Avantajul hibridrii este acela c se pot obine hibrizi celulari ntre specii diferite
care n mod normal nu se pot ncrucia sexuat. Un exemplu este cazul amfiploizilor de tutun
(2n = 42 cromozomi) obinui din dou specii de tutun: Nicotiana glauca (2n = 24
cromozomi) i Nicotiana langsdorfii (2n = 18 cromozomi). Hibrizii obinui nglobeaz
numrul de cromozomi ai celor doi prini.

Alte avantaje ale utilizrii protoplatilor sunt: nmulirea vegetativ foarte rapid n urma
creia rezult clone; obinerea unor forme poliploide ce vor fi utilizate n ameliorare;
inducerea de mutante; transferul de gene sau cromozomi n protoplati; transferul de
cloroplaste n protoplati; obinerea unor plante rezistente la viroze, etc.

Haploidia prin androgenez i ginogenez experimental este o alt metod de

cultur in vitro.
Androgeneza const n reprogramarea inormaiei genetice a microsporilor (grunciorilor
de polen), n culturi in vitro. Ulterior, prin diviziuni repetate, rezult plante haploide
(conin doar jumtate din numrul de cromozomi ai speciei).
Exist dou tipuri de androgenez:

direct, care se realizeaz prin embriogenez (din microspori se obin embrioizi, care
prin diviziuni repetate formeaz plante haploide);

indirect, care se realizeaz prin organogenez (din calus, prin difereniere, se

formeaz esuturi i organe, i ulterior, plante haploide).

Factorii cu o importan deosebit n reuita androgenezei experimentale sunt: vrsta

anterelor, mediul de cultur, hormonii, temperatura i lumina.
Plantele haploide obinute prin androgenez prezint urmtoarele avantaje: sunt pure
genetic, sunt folosite pentru obinerea liniilor izogene (sunt homozigote pentru toate
genele), sunt utilizate pentru producerea de soiuri noi i de hibrizi ce manifest
fenomenul heterozis; ajut la identificarea rapid a mutaiilor recesive i la inducerea unor
mutaii artificiale.
Ginogeneza const n reprogramarea informaiei genetice a macrosporilor (sacilor
embrionari) n culturi in vitro. Astfel, dintr-un nucleu haploid, prin diviziuni repetate, se
vor forma plante haploide.
Deoarece plantele haploide astfel obinute sunt sterile, ele sunt diploidizate (prin
tratamente cu colchicin) i apoi utilizate n diverse experimente.

Hibridarea somatic la animale

Primele ncercri au fost fcute n anul 1960 de ctre Georges Berski i colaboratorii
si, care au folosit celule de oarece, aparinnd la dou linii diferite, cultivate n amestec; ei
au descoperit c acestea pot fuziona i forma celule hibride. Aceste celule prezint
caracteristici morfologice, fiziologice i biochimice diferite de cele ale celulelor fuzionate,
dar nglobeaz numrul total de cromozomi ai genitorilor. Hibridarea celular, la animale,
reuete dac sunt rezolvate dou impedimente:

gsirea unui agent inductor care s grbeasc fuzionarea celulelor; este utilizat
virusul Sendai inactivant;

selectarea celulelor hibride din cultur.

S-au gsit medii de cultur selective n care celulele hibride se multiplic, iar celulele
genitorilor sunt eliminate.
O dat ndeplinite aceste condiii, are lor fuzionarea celulelor somatice diferite i
formarea heterocarionului.
Ulterior, are loc fuzionarea nucleilor, urmat de diviziuni mitotice succesive. n final, se
formeaz celulele hibride somatice. Aceste celule nu pot regenera organisme animale
hibride. Ele formeaz clone celulare hibride, la care sunt eliminai preferenial cromozomii
uneia dintre speciile genitoare. Astfel, n culturile celulare hibride om-oarece, se elimin o
parte din cromozomii umani. Drept urmare, n descendena hibrid exist o variaie
semnificativ a numrului de cromozomi.

Importana practic a acestui fenomen const n faptul c pot fi realizate hri

cromozomale umane, care permit o identificare precis a genelor normale i mutante pe
cromozomi.
Celulele hibride care conin restructurri cromozomale sunt testate ulterior, pentru
prezena sau absena enzimelor specifice. Astfel, sunt identificate cu precizie genele ce
determin apariia maladiilor ereditare umane.
n prezent, se produc cibrizi, hibrizi celulare rezultai din formarea enucleate cu o celul
nucleat.

Clonarea organismelor reprezint un ansamblu de procedee prin care se cultiv o

singur celul i se obine o colonie de celule identice. n urma clonrii
rezult clone (celule i organisme pure, identice, ce provin dintr-un singur printe).
La plante (care prezint fenomenul de totipoten), clonarea se realizeaz prin
androgenez i ginogenez. La animale, se realizeaz transplantul de nuclei strini n ovule
la care s-au ndeprtat nuclei.
Metoda clonrii prezint avantajul c, de la un singur organism adult, se pot obine copii
perfect identice, din punct de vedere genetic, ale organismului donator.

Surse:
http://ro.wikipedia.org/wiki/Inginerie_genetic%C4%83
http://www.scientia.ro/biologie/74-genetica/2702-ingineria-genetica-introducere11.html