1

1. Metode de dezinfecie i sterilizare

1.1. Generaliti
- sterilizarea = distrugerea tuturor microorganismelor de pe o suprafa sau dintr-un mediu lichid / solid
- microorganisme patogene, nepatogene, forme vegetative, spori
- dezinfecia = distrugerea formelor vegetative microbiene (uneori i spori)
- cu ageni fizici sau substane dezinfectate
- asepsia = ansamblul de metode prin care se evit contaminarea mediului cu germeni microbieni
- se menine sterilitatea esuturilor, mediilor de cultur, medicamentelor injectabile
- septic = contaminat cu microbi patogeni / infectat
- aseptic = lipsit de microbi patogeni sau nepatogeni
- antisepsia = distrugerea formelor vegetative microbiene de pe tegumente, mucoase sau plgi
- cu substane antiseptice

1.2. Sterilizarea
- nainte de sterilizare, materialele trebuie:
necontaminate splare, uscare, ambalare
contaminate, refolosibile autoclavare, splare, uscare, ambalare
- eficiena ei poate fi controlat prin indicatori termici (ex: termometru)
chimici (ex: floare de sulf)
biologici (ex: spori de Bacillus stearotermophilus)
1. Sterilizarea prin cldur uscat
- mecanismul: oxidarea / carbonizarea structurilor bacteriene
a) s. prin nclzire la incandescen
- obiectul se introduce i menine n flacra becului Bunsen pn la nroire
- materiale: ansa bacteriologic, spatula
- flambarea = trecerea obiectului prin flacr de cteva ori, nu se atinge temp. de incandescen
- materiale: portansa, gtul eprubetelor, capilarul pipetelor Pasteur
b) s. cu aer cald
- se realizeaz n etuv (pupinel, cuptor Pasteur) la 180, 1 h
- temp. este obinut i meninut cu nite rezistene electrice i un termostat
- uniformizarea temp. este fcut cu un sistem de ventilaie
- materiale: obiecte de sticl, porelan, instrument chirurgical
c) s. prin incinerare
- ardere pn la obinerea de cenu
- materiale: de plastic de unic folosin, reziduuri organice solide, cadavrele animalelor de exp.
2. Sterilizarea prin cldur umed
- cea mai eficient metode de sterilizare
- mecanism: coagularea proteinelor i degradarea enzimelor
a) autoclavarea
- vaporii de ap realizeaz la 0,5 atm o temperatur de 115, 1 atm 120 i 2 atm 135
- autoclavul cazan cu perei metalici, care nchide etan

- n interiorul lui, vaporii sunt comprimai la presiunea necesar pentru sterilizare

- mai multe tipuri: cu perete simplu sau cu manta de aburi -> verticale, orizontale
- vaporii provin din apa aflat n cazan i ajung n camera de sterilizare de jos n sus
- 2 robinete: pentru aer i vapori, permite legtura dintre cazan i mediul ext.
permite evacuarea apei din cazan
- obiectele sunt aezate pe suport i capacul se nchide etan
- se deschide robinetul pentru evacuarea aerului i vaporilor
- se nchide cnd apare un jet continuu de vapori
- cu manometrul se urmrete presiunii i ajunge la valoarea dorit se regleaz sursa de cldur
- dup 30 min se oprete sursa de cldur i presiunea din int. ncepe s ajung la cea atmosferic
- materiale: sticlrie, substane n soluie, instrument chirurgical, medii de cultur
b) tindalizarea (sterilizarea fracionat)
- temperatura nu este > 100C
- substanele se menin la 50-100C cte 30-60 min, timp de 3-8 zile succesiv
- dup prima nclzire se distrug formele vegetative
- dup prima rcire sporii germineaz
- la a 2-a nclzire se distrug formele vegetative rezultate din germinarea sporilor i se repet
- robinetul de vapori este deschis permanent
- materiale: alimente, medii de cultur
- pasteurizarea = distrugerea formelor vegetative, nu i a sporilor
- poate fi joas, medie sau nalt n funcie de temp.
- folosit pentru conservarea de scurt durat a laptelui, berii
- fierberea =distrugerea bacteriilor n form vegetativ, fungilor i virusurilor, nu i a sporilor
- 30 min din momentul n care apa ncepe s fiarb
- dac se adaug carbonat de Na => eficien > cu 1-2%
- pasteurizarea i fierberea nu sunt metode de sterilizare
3. Sterilizarea prin filtrare
- mecanism: lichidul se trece printr-o substan cu pori, iar acetia rein microorg. din lichid
- clasice porelan, sticl poroas
- actuale membrane filtrante din acetat de celuloz
- pt. sterilizarea aerului HEPA
- materiale: medii de cultur (care nu se pot steriliza prin autoclavare), decontaminarea aerului,
reactivi sensibili la temperaturile din sterilizare
4. Sterilizarea cu radiaii
- mecanism: ruperea legturilor de H sau oxidarea legturilor duble => efect bactericid
- radiaii neionizante (UV) -> suprafeele de lucru
- lmpile UV = lmpi germicide
- radiaii ionizante (X) -> alimente, medicamente, seringi de unic folosin
5. Sterilizarea cu substane chimice
- se utilizeaz rar, la fel ca cea cu radiaii (excepie UV)
- ex: cu etilenoxid

- efect bactericid prin alchilarea acizilor nucleici

- sporii de Bacillus subtilis nu sunt distrui
- poate exploda, are potenial carcinogenetic, efecte la nivelul SN

1.3. Antisepsia i dezinfecia

- antisepticele i dezinfectantele sunt substane cu aciune antimicrobian neselectiv
= altereaz structuri i funcii comune microorganismelor i organismelor superioare
- antiseptice tegumente i mucoase
- dezinfectante suprafee i structuri care nu sunt vii
Clasificare:
- n funcie de mecanismul de aciune
1) substane care denatureaz proteinele
- efect bactericid
- acizii, bazele, alcoolii (ex: alcoolul etilic de 70 pt. antiseptizarea tegumentelor)
2) substane care oxideaz gruprile chimice libere ale enzimelor
- ex: hipermanganat de potasiu, peroxidul de hidrogen, halogenii (Cl2, I2, Br2) i derivaii lor
(hipoclorii, cloramine, soluii iodurate)
3) substane care blocheaz gruprile chimice libere ale enzimelor
- ex: sruri de Hg, Ag, compui cu Ag coloidal
4) substane care lezeaz membranele celulare
- fenolii (ex: clorhexidina), detergenii anionici, neionici, cationici i amfolitici
- ac. fenic are proprieti caustice i este toxic => utilizare limitat
- este etalon pentru activitatea antimicrobian = indicele fenolic
5) substane care altereaz acizii nucleici
- coloranii bazici (ex: violet de genian, albastru de metilen) i derivaii de acridin (rivanolul)
Hipocloriii:
- soluiile se prepar periodic se inactiveaz dup 24h
- efect dezinfectant pt. bacterii n form veg., spori, fungi i virusuri
- efect diminuat n prezena subst. organice, maselor plastice, detergenilor
Derivaii fenolici:
- fenolii sunt toxici, corozivi i au potenial carcinogenetic => se folosesc sub forma derivailor
- soluiile se prepar periodic
- efect dezinfectat pt. bacterii n form veg., fungi i virusuri (inclusiv HIV)
- efect diminuat pe suprafee de cauciuc, lemn sau material plastic
Glutaraldehida:
- utilizat cel mai frecvent la pH alcalin
- efect dezinfectat pt. bacterii n form veg., fungi i virusuri
- nu corodeaz metalele => pt. dezinfectarea suprafeelor metalice
Iodoforii:
- efect dezinfectant pt. bacterii n form veg., unii spori, fungi i virusuri
- inactivai de substane organice, mase plastice i detergeni