Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Ameliorarea Plantelor Curs Libre
Ameliorarea Plantelor Curs Libre
Centrul 3 situat n nord vestul Indiei, Asia mijlocie: Vicia faba, Spinacia
oleracea, Phaseolus aureus, Allium cepa, Prunus armeniaca.
- Centrul 4 situat n Asia mic, Iran: Petroselinum hortense, Cerasus avium,
Cerasus vulgaris.
- Centrul 5 situat n Bazinul mediteranean: Petroselinum sativum, Prunus
domestica, Vitis vinifera, Allium cepa, Asparagus officinalis.
- Centrul 6 situat n Absinia, Somalia, Etiopia: Pisum sativum, Lens esculenta.
- Centrul 7 situat n America central, Mexic: Phaseolus vulgaris, Phaseolus
multiflorus, Lycopersicum cerasiforme, Capsicum anuum, Capsicum
pubescens.
- Centrul 8 situat n Peru, Ecuador, Bolivia: Phaseolus vulgaris, Phaseolus
lunatus, Lycopersicum esculentum.
- Centrul 9 situat n Canada, Nordul Americii.
- Centrul 10 situat n Australia.
- Centrul 11 situat n Europa central.
- Centrul 12 situat n Sudan, Nigeria, Africa de sud.
Etapa ameliorrii tiinifice a nceput odat cu secolul 19 i a fost marcat de crearea
n mod deliberat prin metode tiinifice unele forme noi cu capacitate mare de
producie. n cadrul acestor forme s-a procedat la o selecie riguroas dar o dat cu
dezvoltarea geneticii, variabilitatea existent n cadrul materialului nu a mai fost
suficient i din acest motiv a trebuit s se mreasc aceast variabilitate.
Odat cu dezvoltarea tiinelor biologice s-au gsit metode pentru mbuntirea
variabilitii i anume hibridarea, cosangvinizarea, poliploidizarea, toate urmate de
selecie n cadrul materialului. n rile dezvoltate acolo unde speciile cultivate gseau
condiii optime de cretere i dezvoltare, s-au creat aa numitele coli de ameriorare
pentru speciile respective.
n viticultur, perioada ameliorrii tiinifice ncepe dup apariia filoxerei prin
cutarea i gsirea metodelor de rezolvare a rezistenei la acest duntor, astfel s-au
fcut hibridri ntre viele europene i cele americane, s-au creat soiuri de portaltoi
care prezint rezisten la filoxer.
n domeniul pomiculturii, ameliorarea tiinific ncepe n secolul 18 prin obinerea
primelor soiuri de mr n Rusia prin hibridare liber.
n secolul 19 ncepe aplicarea hibridrilor dirijate pentru mr, pr, cire obinndu-se
soiuri care i n acest moment exist n colecii.
n Romnia ameliorarea plantelor a nregistrat aceleai etape ca i n celelalte ri,
etapa empiric ajungnd pn n anul 1900 iar etapa tiinific fiind marcat de
activitatea lui Vlad Crnu Munteanu, primul profesor de ameliorare la coala central
de agricultur Herstru.
nceputurile ameliorrii tiinifice s-au lovit de cteva probleme deosebite dintre care
menionm imposibilitatea folosirii tuturor formelor de germoplasm care dei erau
bogate nu au fost evaluate. Variabilitatea existent n cadrul germoplasmei inea mai
mult de adaptabilitatea la condiiile de mediu i mai puin de productivitate i calitate.
Absena surselor de gene din strintate care s condiioneze caractere i nsuiri
importante cum ar fi rezistena la factorii de mediu, rezistena la aciunea agenilor
fitopatogeni, lipsa unor amelioratori consacrai i a informaiei tiinifice adecvate
pentru fiecare specie n parte, controversa ntre coala mendelean, coala vestic i
coala estic dominat de Miciurin care nu acceptau teoriile ereditii, existena
genelor, amd; lipsa unei strategii, lipsa unei idei clare privind crearea de material
biologic nou.
Activitatea de cercetare a nceput s se dezvolte odat cu nfiinarea I.C.A.R. n anul
-
- factorii de influen
Factorii intrinseci sunt reprezentai de elemente de productivitate caracteristice de la
o specie la alta dar i de o serie de procese fiziologice i biochimice.
Factorii de influen sunt reprezentai de apariia unor ageni fitopatogeni i
rezistena plantelor la aciunea acestora, apariia unor perioade foarte reci i rezistena
plantelor la aceste condiii, apariia secetei, rezistena soiului la secet, amd.
Dac factorii de influen nu pot fi controlai pentru capacitatea de producie se
urmrete s se acioneze asupra elementelor de productivitate n sensul creterii
intensitii de exprimare a acestora. Pentru realizarea acestui obiectiv sunt obligatorii
urmtoarele direcii n care trebuie s se acioneze:
- cunoaterea tuturor surselor de germoplasm autohtone i mondiale n
vederea identificrii tuturor surselor de gene care sunt legate ntr-un fel de
controlul elementelor de productivitate
- utilizarea mutagenezei pentru obinerea a noi surse de gene utile n aceast
direcie
- hibridarea unor genotipuri foarte diferite n vederea obinerii unor
recombinri de gene care s conduc la acumularea unor gene valoroase
- creterea plasticitii ecologice pentru mrirea gradului de adaptabilitate a
soiurilor i hibrizilor la cultivarea n diferite condiii climatice
- ruperea corelaiilor negative care exist ntre productivitate i calitate, ntre
productivitate i precocitate sau ntre productivitate i diferite nsuiri
fiziologice care creaz rezisten.
Ameliorarea calitii la fel ca i productivitatea, calitatea este determinat pentru
introducerea n cultur a noilor soiuri create. Valoarea calitativ a unui material
biologic este conferit de coninutul n substane utile, natura chimic a acestor
substane, nsuirile tehnologice i culinare ale produsului principal i cu deosebire
pentru speciile horticole calitatea este dat i de aspectul exterior.
n ceea ce privete substanele utile se are n vedere coninutul de protein la
principalele specii, coninutul de hidrai de carbon, zaharuri, unele substane minerale,
unele vitamine, enzime, amd.
Se pune problema existenei unei corelaii negative ntre capacitatea de producie,
ntre productivitate i nsuirile calitative. Pentru mbuntirea valorilor nutritive a
substanelor utile, trebuie s se cunoasc i s se influeneze natura chimic a acestor
substane astfel proteinele trebuie s aib un coninut ridicat i echilibrat n aminoacizi
eseniali.
Unele specii au un coninut mai redus de lizin astfel prin folosirea mutaiilor trebuie
s se identifice genele care condiioneaz acest aminoacid pentru a crete valoarea
acestuia n produsul principal.
Coninutul n triptofan, metionin, trebuie ridicat la unele leguminoase, n aceast idee
toate speciile trebuie analizate n privina tuturor substanelor chimice coninute
pentru a se ncerca o ameliorare a valorilor acestora. La via de vie calitatea
produsului principal pe lng coninutul n diverse substane chimice este dat i de
nsuirile organoleptice, gustative, tehnologice, aspectul exterior, forma i mrimea
strugurilor, culoarea boabelor, prezena sau absena stratului de pruin. Pentru vinuri,
determinarea coninutului de alcool, zaharuri, aciditatea total, extract sec, taninuri,
substane colorante sunt toate pri de calitate a produsului principal la vie.
La fructe calitatea este determinat de coninutul n substane nutritive dar i de
suculena acestora, de fermitatea pulpei, gust, arom, existena altor substane care n
echilibru pot asigura un gust plcut.
Ameliorarea rezistenei la boli i duntori cu toate progresele realizate n
sistem radicular foarte profund i pot absorbi apa de la adncimi mai mari.
Seceta atmosferic este la fel de duntoare ca i cea pedologic i poate fi combtuta
prin utilizarea de genotipuri care au anumite mecanisme de rezisten la nivelul
epidermei.
Pentru mbuntirea rezistenei plantelor la secet se poate apela la identificarea n
cadrul germoplasmei de baz a unor forme cu asemenea nsuiri i transferul prin
metode specifice la alte forme valoroase.
Ameliorarea reaciei la intensivizare (crearea de soiuri/hibrizi pentru culturi
intensive) - acest obiectiv presupune crearea de soiuri cu potenial de producie foarte
ridicat care s fie apte de a valorifica la maximum oportunitile oferite de aplicarea
irigaiilor, a ngrmintelor, a tratamentelor fitosanitare.
Germoplasma utilizat n ameliorarea plantelor
Germoplasma sau materialul iniial n ameliorare reprezint totalitatea formelor
biologice cultivate sau spontane care sunt utilizate n procesul de ameliorare pentru
crearea de soiuri sau hibrizi superiori celor deja existeni sau pentru mbuntirea
celor deja create.
n funcie de originea variabilitii germoplasma se clasific n:
- germoplasm de baz sau cu variabilitate msurat
- germoplasm nou creat sau cu variabilitate artificial
n funcie de origine germoplasma se clasifica n:
- din flora spontan
- din forme cultivate
n cadrul germoplasmei de baz se ntlnesc 3 tipuri de germoplasm:
- forme din flora spontan nrudite cu specia care se amelioreaz
- soiuri i populaii locale
- soiuri ameliorate
Din cadrul germoplasmei nou create fac parte:
- populaiile hibride n curs de segregare
- liniile cosangvinizate
- formele mutante
- formele poliploide
Prin exploatarea resurselor genetice existente s-a ajuns la epuizarea surselor de gene
pentru caractere i nsuiri noi, astfel nct s-a impus gsirea de metode pentru
creterea variabilitii la plantele cultivate.
Formele din flora spontan sunt utilizate n ameliorare datorit unor nsuiri precum
plasticitatea ecologic ridicat i rusticitatea. Direcia lor de utilizare const ndeosebi
n transferul acestor nsuiri ctre soiuri deja ameliorate valoroase.
Soiurile i populaiile locale se remarc prin nsuiri deosebite de rezisten la factori
climatici nefavorabili sau la unii ageni fitopatogeni. Uneori prin lucrri de selecie
artificial din aceste forme s-a putut ajunge la soiuri noi omologate ns cel mai
frecvent sunt utilizate ca i prima categorie.
Soiurile ameliorate reprezint cea mai valoroas surs de germoplasm deoarece au
deja imprimate nsuiri superioare privind productivitatea, calitatea, rezistena la boli
i duntori, etc. Aceste soiuri pot fi doar mbuntite prin lucrri de selecie iar
pentru a se ajunge la crearea unui nou cultivar se impune i folosirea altor metode
precum hibridarea, mutageneza, etc.
Populaiile hibride n curs de segregare reprezint cea mai valoroas surs de
material iniial la speciile autogame. Pentru crearea de soiuri noi, intereseaz plantele
din generaiile segregante F... 2Fn cnd pot fi identificate caractere i nsuiri noi
diferite de ale prinilor. Pot s apar forme transgresive - diferite de formele
parentale.
Liniile cosangvinizate cea mai valoroas surs de germoplasm la speciile alogame
(plante heterozigote) care prin autopolenizare forat de-a lungul a mai multor
generaii se poate ajunge la izolarea unor biotipuri homozigote. Prin ncruciarea unor
astfel de linii se pot obine hibrizi de la care se exploateaz n practic efectul
heterozis.
Formele mutante i poliploide pot fi utilizate pentru crearea de soiuri noi dar cel mai
frecvent se folosesc pentru transferarea noului caracter la un soi deja ameliorat.
Colectarea formelor de material iniial cercettorii care se ocup cu studiul
germoplasmei de ameliorare, apreciaz c n lumea vegetal exist ntre 300000 i
500000 de specii din care circa 250000 au fost identificate i descrise, din acestea
aproape 70000 de specii ar putea fi folosite de om n diverse scopuri dar doar 7000 au
fost colectate i cultivate pn n prezent.
n ceea ce privete hrana, 30 de culturi asigur necesarul pentru omenire i care
reprezint 95% din necesarul de hran. Alte surse menioneaz 150 de specii folosite
direct n alimentaie, 12 specii asigur peste 70% din hran iar 4 dintre ele: orezul,
grul, porumbul, cartoful acoper peste 50%.
n ceea ce privete raportul energetic, cele mai importante culturi rmn: orezul,
grul, sfecla, trestia de zahr, porumbul i soia. Se acord o importan deosebit
surselor de germoplasm n vederea colectrii i studierii acestora, motiv pentru care
n majoritatea rilor din lume s-au creat instituii speciale care s se ocupe de o
anumit categorie de germoplasm. Aceste instituii s-au nfiinat n arealele unde o
anumit specie ntlnete cele mai favorabile condiii de cultur i unde exist cea mai
mare ncrctur de gene pentru specia respectiv.
Instituiile sunt nfiinate n centrele genice acolo unde exist cea mai mare diversitate
de forme i cea mai mare variabilitate genetic pentru o anumit specie. n cadrul
FAO s-a nfiinat un organism special numit Comisia de Resurse Genetice, organism
interguvernamental cu rolul de a gestiona toate activitile legate de sursele de
germoplasm. n 2002 s-a semnat Tratatul Internaional privind resursele genetice,
instrument care stabilete termenii utilizai internaional, drepturile i obligaiile celor
care lucreaz cu sursele de germoplasm.
Toate aceste instrumente, instituii, tratate s-au nfiinat datorit faptului c fie prin
selecie natural fie prin activitatea oamenilor s-au constatat numeroase pierderi ale
unor forme de plante sau chiar specii ntregi. Pentru colectarea materialului iniial
S-au iniiat expediii tiinifice, s-au nfiinat colecii de germoplasm, parcuri
tiinifice, rezervaii naturale, bnci de gene. n prezent exist colecii de plante care la
cerere livreaz material biologic pentru ameliorarea speciilor respective, cele mai
importante colecii n momentul de fa fiind la Sankt Petersburg i la Beltsville n
S.U.A. de asemenea colecii cunoscute care cuprind portaltoi sau hibrizi pentru via de
vie, se ntlnesc numeroase colecii n Italia, Frana, Spania care de asemenea
colaboreaz cu amelioratorii pentru asigurarea materialului biologic.
Expediiile tiinifice au nceput n secolul trecut, prima mare expediie s-a realizat n
1923-1933 de ctre Vavilov, cercettor rus care n aceti 10 ani a colectat peste
150000 de forme de plante, ulterior s-au organizat expediii i de ali cercettori:
Hansen a fcut o expediie n Rusia i a colectat toate formele de mr rezistente la
temperaturi sczute; Bukassov a fcut o expediie n America Central i de Nord de
unde a colectat toate formele de cartof. n fiecare ar unde exist program de
ameliorare, cercettorii au ncercat s colecteze toate formele de germoplasm din
cultur sau din flora spontan pentru o specie pe care urmau s o amelioreze.
n ceea ce privete colectarea germoplasmei exist o regul de baz indiferent de
10
11
12
x 2
2
( )
n 1
; x valorile
populaii statistice de indivizi i este dat de relaia: s =
individuale ale caracterului analizat, n numrul de indivizi analizai.
2
Abaterea standard (s) este s
s *100
Coeficientul de variabilitate (s%): s%= x ; x - media aritmetic
Coeficientul de heritabilitate (h2) reprezint mrimea variabilitii genotipice din
s2g
2
variabilitatea fenotipic total, se calculeaz: h2= s f ; s2g variabilitatea
genotipic; s2f variabilitatea fenotipic.
S2f=s2g + s2Mediu
La speciile autogame: s2g=0 => s2f=s2m
Aceast relaie se regsete efectiv n practic, respectiv lucrrile de selecie la
autogame sunt indeficiente sau sunt suficiente un singur an.
La speciile alogame la care n procesul de polenizare se contopesc gameii diferii din
punct de vedere genetic, rezult indivizi cu constituie genetic diferit de a prinilor,
acest proces fiind amplificat i de fenomenul de recombinare, ca urmare o populaie
dintr-o specie alogam va fi din punct de vedere genetic heterozigot i n dinamic
de la o generaie la alta, ca atare influena condiiilor de mediu va fi mai mic n
manifestarea variabilitii fenotipice totale (s2f) * s2f=s2g+s2m.
Pentru determinarea varietilor genotipice i a coeficientului de heritabilitate se
procedeaz la cultivarea timp de 2 ani la rnd, n aceleai condiii de mediu i
tehnologice a 2 generaii hibride: F1 i F2
13
Pentru F1: s2f (F1) =s2g (F1) + s2m (F1) =>s2F (F1) =s2M (F1)
F2: s 2(F)(F2) =s2G (F2)+s2M (F2) =>s2G (F2) =s2F (F2) s2F (F1) =>h2F (F2) =
s 2 F ( F2 ) s 2 F ( F 1)
s 2 F ( F2 )
Valorile rezultate pentru h2 pot fi exprimate zecimal, fiind cuprinse ntre 0 i 1 sau
procentual cuprinse ntre 1 i 100%. Cu ct aceste valori sunt mai apropiate de 100 cu
att ansele lucrrilor de selecie sunt mai mari.
Metode de ameliorare iniierea unui proces de ameliorare presupune stabilirea unei
planificri care s in cont de materialul iniial existent, de posibilitile tehnologice
i de obiectivele urmrite.
n funcie de aceste elemente se va alege i complexul de metode pentru ameliorare:
selecia, hibridarea, cosangvinizarea, mutageneza, poliploidia, hibridarea somatic,
mutaiile n vitro, androgeneza.
Selecia reprezint procesul natural sau artificial care permite supravieuirea i
nmulirea indivizilor cel mai bine nzestrai. Pentru ameliorare intereseaz selecia
artificial n urma creia amelioratorul alege, reine i nmulete plantele care
corespund obiectivelor de ameliorare. Metoda n sine a stat la baza apariiei plantelor
cultivate i actualmente completeaz toate celelalte metode de ameliorare.
Dac se practic n germoplasma de baz se poate spune c un soi este creat doar prin
selecie iar dac vine n completarea acestor metode se va specifica faptul c soiul
respectiv este obinut prin hibridare + selecie, mutageneza + selecie, etc.
Selecia natural favorizeaz n supravieuirea i nmulirea organismelor care se
adapteaz cel mai bine la condiiile de mediu i elimin indivizii mai slabi. Aceasta
acioneaz n cadrul unor populaii vaste. Selecia artificial vizeaz reinerea i
nmulirea indivizilor care corespund obiectivelor de ameliorare i adesea direcia de
aciune este n sens invers seleciei naturale.
Bazele teoretice i efectele seleciei eficiena lucrrilor de selecie depinde de un
complex de factori care se refer la: variabilitatea materialului biologic n ceea ce
privete caracterele i nsuirile urmrite, modul de polenizare al plantelor, modul de
reproducere, de heritabilitatea caracterelor i nsuirilor.
Ca atare lucrrile de selecie se vor aplica n variante diferite inndu-se cont n
prezentarea lor n primul rnd de modul de reproducere i polenizare al plantelor i de
tipul de material biologic n care se practic selecia.
La speciile cu reproducere sexuat, n funcie de modul de polenizare se regsesc
specii autogame i alogame.
La autogame (polenizarea cu polen propriu) datorit faptului c prinii i respectiv
gameii sunt identici din punct de vedere genetic, indivizii sunt de asemenea identici
genetic fiind practic homozigoi. Ca atare posibilele variaii manifestate fenotipic se
datoreaz condiiilor de mediu. Coeficientul de heritabilitate este foarte redus iar
eficiena lucrrilor de selecie ntr-o populaie autogam este nul.
La speciile alogame (se polenizeaz cu polen strin) i la care nu se cunoate dect
forma mam, zigotul se formeaz prin contopirea a 2 gamei diferii din punct de
vedere genetic i ca atare rezult indivizi cu o constituie genetic diferit de a
prinilor i n acelai timp datorit recombinrilor pot s apar indivizi cu o
constituie genetic absolut nou. Aceti indivizi sunt heterozigoi, ca atare populaiile
alogame sunt din punct de vedere genetic ntr-o continu schimbare iar ponderea
varietii genotipice din variabilitatea fenotipic total este comparativ cu autogamele
mai mare, rezult c i eficiena lucrrilor de selecie este mai mare.
La speciile intermediare (Bobul) la care se pot ntlni n procente relativ egale att
14
15
mare, selecia n mas este cea mai veche metod de selecie utilizat la nceput
empiric i st la baza existenei actualelor soiuri i populaii locale. Prezint avantajul
c se poate aplica uor i este rapid, dar n acelai timp are i cteva dezavantaje: nu
se ine cont de variabilitatea genotipic i de heritabilitatea caracterelor i nsuirilor
valoroase i ca atare elitele valoroase se pot pierde n masa de material sau elitele
nevaloroase genotipic, dar cu un aspect fenotipic corespunztor pot deine o pondere
mai mare n amestecul respectiv i ca rezultat n timp poate avea loc o depreciere a
ntregului material. Selecia n mas se poate practica n 2 variante: selecia n mas
negativ sau selecia n mas pozitiv.
Selecia n mas negativ const n alegerea, reinerea i nmulirea a unui numr
foarte mare de plante elit nainte de nflorire iar restul materialului este eliminat. n
procesul propriu zis de ameliorare, metoda este mai puin folosit, n general ntlnit
atunci cnd se urmrete mbuntirea unor caractere cantitative: talia plantelor,
numrul su greutatea fructelor, cel mai frecvent, metoda se folosete n procesul de
producere de smn, fiind cunoscut sub denumirea de purificare biologic.
Selecia n mas pozitiv presupune alegerea unui numr mai redus de plante elit,
respectiv circa 5-10% din numrul total de plante, descendenele acestora fiind
urmrite n amestec. Metoda se practic n mai multe variante, n funcie de numrul
de ani, de alegeri de plant elit: cu o singur alegere (simpl); cu mai multe alegeri
(repetat); pe grupe de plante.
Selecia n mas pozitiv simpl const n alegerea de plante elit ntr-un singur an
urmat de nmulirea n amestec a descendenilor i compararea acestora cu materialul
iniial din care au provenit pentru ca n final s poat fi trecute n producie. Poate da
rezultate la speciile autogame, formate dintr-un material cu un oarecare grad de
heterogenitate.
Selecia n mas pozitiv repetat fa de prima variant const n alegerea,
reinerea i nmulirea timp de mai muli ani a plantelor elit. Metoda este practicat
cu preponderen la speciile alogame, alegerea de plante elit se face din al 2-lea an
din cmpurile de nmulire.
Selecia n mas pozitiv pe grupe de plante const n alegerea de plante elit i
gruparea acestora pe mai multe grupe n funcie de anumite nsuiri, n cadrul fiecrei
grupe, descendenele sunt urmrite n mas.
Selecia individual se folosete n toate situaiile indiferent dac sunt specii
autogame sau alogame, este superioar seleciei n mas deoarece urmrete aspectul
fenotipic al plantelor dup care valoarea biologic a fiecrei descendene rezultat
prin nmulirea elitelor. n funcie de materialul urmrit i anume speciile autogame,
speciile alogame, populaii hibride n curs de segregare, linii cosangvinizate, forme
mutante, specii cu nmulire sexuat, specii cu nmulire vegetativ.
Selecia individual se practic n 3 variante:
- selecia individual simpl
- selecia individual repetat anual
- selecia clonal
Datorit nenumratelor procese de exploatare a variabilitii materialului natural,
surselor de germoplasm, s-a ajuns acum ca variabilitatea s fie foarte redus i
practic s se reduc posibilitatea da a mai alege elite fr a interveni cu metode de
creare a variabilitii. Aceste motive au dus la identificarea posibilitilor de mrire a
variabilitii n cadrul materialului iniial, acestea fiind: hibridarea, urmat de
segregarea caracterelor, cosangvinizarea care determin desfacerea populaiilor n
biotipurile constituiente, mutaiile, poliploidia i ingineria genetic.
Selecia n cadrul soiurilor locale i ameliorare la speciile autogame soiurile
16
locale sunt alctuite dintr-un oarecare numr de biotipuri, motiv pentru care
variabilitatea este mai pronunat comparativ cu soiurile ameliorate i deci ar exista o
oarecare posibilitate de selecie.
n cadrul soiurilor ameliorate la speciile autogame dac nu intervin unii factori
perturbatori, structura genetic a acestor soiuri rmne aceeai de-a lungul
generaiilor. Aceste soiuri sunt alctuite din organisme practic homozigote care au
luat natere prin contopirea a 2 gamei identici din punct de vedere genetic, din acest
motiv dac datorit unui factor perturbator apar unele diferenieri ntre indivizii unui
soi, separarea acestora ntr-un singur an, o singur dat contribuie la epuizarea
complet a variabilitii i ca urmare continuarea seleciei mai mult de un an este
ineficient.
Acest fapt a fost studiat pentru prima dat n anul 1903 de ctre Johansen care a
studiat soiul de fasole (autogam) Princessa pe o perioad de 6 ani ncercnd s
observe efectele seleciei la aceast specie, astfel din cmpul de colecie a ales 19
plante care se difereniau prin mrimea boabelor i deci prin greutatea a 1000 de
boabe. A semnat smna fiecrei plante separat pe cte un rnd, a recoltat smna
de la fiecare descenden separat i apoi a ales din smna fiecrei descendene
boabele cele mai mari i cele mai mici pe care le-a semnat pe cte un rnd. A
continuat s fac aceast separare timp de 6 ani consecutiv, la sfritul experimentului
a constatat c masa a 1000 de boabe pentru fiecare elit cu care a pornit, att pentru
plantele care proveneau din seminele mici ct i pentru plantele care proveneau din
seminele mari era aceeai. A concluzionat i a publicat n 1903 faptul c la speciile
autogame nu are rost s se continuie selecia mai mult de un an deoarece prin
autopolenizare prin unirea gameilor identici genetic, descendenele vor rmne
aceleai, cu alte cuvinte selecia este eficient numai pn la obinerea liniilor pure,
astfel pentru speciile autogame cea mai potrivit metod de selecie este selecia
individual simpl sau selecia cu o singur alegere, aceasta se desfoar dup
urmtoarea schema: n cmpul de alegere se face un studiu al materialului pe
ntreaga perioad de vegetaie, dar obligatoriu nainte de nflorit i nainte de
recoltare i se extrag elitele. Acestea etichetate se aduc n laborator pentru analiza
unde se determin din nou valorile elementelor de productivitate i se clasific n
funcie de unele limite stabilite prin obiectivele de ameliorare. Dup studiul n
laborator se rein pentru a fi semnate n anul urmtor acele exemplare care se
situeaz n limitele stabilite pentru cele mai multe dintre caracterele urmrite dar ntre
care trebuie s se ncadreze obligatoriu greutatea produsului principal. n anul urmtor
smna obinut de la fiecare plant n parte se seamn n cmpul de selecie.
n cmpul de selecie fiecare elit se seamn pe cte un rnd la distane mai mari
ntre plante pe rnd dect n cultura obinuit i la fel n distane mai mari ntre
rnduri pentru a se asigura un potenial mai mare de nmulire prin spaiul nutritiv pe
care l vor avea plantele la dispoziie, n vederea obinerii unei cantiti mai mari de
semine de la fiecare plant. n timpul perioadei de vegetaie se observ cmpul de
selecie n totalitatea sa i se fac observaii la fiecare plant din cadrul fiecrei
descendene. Ca urmare a acestor observaii se vor elimina descendenele care nu
corespund din punct de vedere al obiectivelor urmrite (vigoare, capacitatea de
producie) iar dac n cadrul unor descendene care chiar i manifest superioritatea
fa de altele, dac exist o singur plant atacat de o boal se elimin ntreaga
descenden. La recoltare smna fiecrei descendene se pstreaz separat i va fi
semnat n anul urmtor n cmpul de control i n acest cmp distanele ntre rnduri
i plante pe rnd vor fi mai mari dect n cultura obinuit. Se vor face aceleai
observaii n timpul perioadei de vegetaie, se vor elimina descendenele
17
18
19
20
21
22
pentru obinerea unui hibrid simplu, iar n al 2-lea ncruciarea hibrid simplu cu o a
treia linie cosangvinizat, alta dect cele 2 folosite iniial.
Hibridarea dubl presupune ncruciarea n primul an a 2 linii cosangvinizate pe de
o parte pentru obinerea unui hibrid simplu n acelai an a altor linii tot pentru
obinerea unui hibrid simplu iar n anul 2 se ncrucieaz cei 2 hibrizi simpli i se
obine un hibrid dublu.
n hibridul dublu trebuie s existe 4 linii cosangvinizate diferite sau 4 soiuri diferite,
utilizarea hibrizilor triliniari i a hibrizilor dubli se practic n producie pentru c
chiar dac efectul heterozis este ceva mai mic dect la hibrizii simpli, totui costurile
de producere a seminei hibride n generaia F0 sunt mult mai mici n comparaie cu
hibrizii simpli. La hibrizii simpli triliniari, dubli, smna n generaia F0 trebuie s fie
obinut n fiecare an.
Hibridarea sintetic aceasta presupune ncruciarea liber ntre mai multe linii
cosangvinizate semnate n amestec iar din smna obinut rezult aa-numitele
soiuri sintetice. Toate categoriile de hibridare menionate pn acum cu excepia
hibridrii de tip back-cross (sau recurent, regresiv) fac parte din categoria
hibridrilor apropiate, adic ncrucirile dintre forme din cadrul aceleiai specii. Se
mai cunoate hibridarea intraspecific sau hibridarea apropiat.
n funcie de gradul de nrudire a genitorilor, exist i hibridarea ndeprtat adic
ntre forme aparinnd la 2 specii diferite, 4 hibrizi interspecifici; 2 genuri diferite
hibridare intergeneric care se poate practica att la speciile autogame ct i la
speciile alogame. De regul hibrizii ndeprtai se folosesc pentru transferul unor gene
de rezisten de la unele specii din flora spontan la soiurile ameliorate existente n
cultur care sunt deficitare din acest punct de vedere.
Datorit diferenierilor de tip morfologic sau de tip genetic ntre cele 2 forme care
particip la hibridare, realizarea hibrizilor este suficient de dificil din cauza unor
probleme care apar n aceste situaii.
Probleme speciale aprute n lucrrile de hibridare hibrizii rezultai n urma
ncrucirii interspecifice se caracterizeaz printr-o variabilitate foarte pronunat la
care se aduga o plasticitate ecologic, o adaptabilitate la condiiile de mediu mai
bun dect a hibrizilor obinuii. Problemele care apar n cazul hibridrilor ndeprtate
sunt datorate intersterilitii formelor parentale i sterilitii hibrizilor n prima
generaie.
Intersterilitatea formelor parentale este dat de unele deosebiri morfologice,
fiziologice, biochimice sau genetice ntre cei 2 genitori folosii, astfel se ntlnesc
situaii cnd polenul genitorului mascul nu germineaz pe stigmatul genitorului femel,
se ntlnesc cazuri cnd germineaz dar tubul polenic nu poate strbate toat lungimea
stilului pentru a fecunda ovulul.
Exist cazuri cnd nu se poate forma zigotul, se ntlnesc situaii cnd smna hibrid
obinut nu poate germina sau plantele care s-au format nu ajung la maturitate.
n privina deosebirilor de ordin morfologic s-au constatat diferene ntre lungimea
stilului la cei 2 genitori fapt care determin alegerea corect a genitorului femel i
mascul n sensul c ntotdeauna genitorul femel trebuie s aib stilul mai scurt dect a
celui mascul.
n privina deosebirilor de ordin fiziologic este posibil ca perioadele de vegetaie ale
celor 2 genitori s fie diferite i astfel nu se asigur coinciden la nflorire. n privina
deosebirilor genetice acestea sunt date fie de numrul cromozomilor, fie de gradul de
omologie a acestora, fie de calitatea materialului genetic.
Problemele date din cauza intersterilitatii formelor parentale se rezolv prin cteva
metode dup caz i anume: hibridarea reciproc, tratarea organelor sexuale ale florilor
23
24
25
recoltat de la genitorul mascul fie cu polen conservat dac nu este posibil asigurarea
coincidentei la nflorire.
n ceea ce privete viabilitatea stigmatului aceasta este diferit de la o specie la alta i
poate fi posibil fecundarea de la 1-2 ore pn la 2-3 zile. Viabilitatea polenului tot
este diferit dar acest aspect poate fi compensat prin conservarea polenului la unele
specii pstrarea acestuia putnd ajunge mai muli ani la rnd.
Polenizarea propriu-zis se poate face cu trecerea polenului cu un tampon de vat de
la genitorul mascul pe stigmatul genitorului femel, uneori adugarea pe stigmat a unor
substane care rein polenul mai multe ore (zile) dup care se izoleaz rapid pentru a
nu se produce polenizare strin. La cteva zile se face controlul fecundrii, dac
stigmatul este ofilit rezult c fecundarea a avut loc dac nu se poate face o repetare a
polenizrii inflorescenelor izolndu-se din nou dup care se fac lucrrile tipice de
ngrijire pn la recoltarea fructelor hibride.
Selecia n populaiile hibride la speciile autogame la aceast categorie de plante
metoda de selecie este selecia individual repetat anual cu cele 2 variante ale sale:
selecia genealogic i selecia tardiv.
Selecia genealogic const n alegerea elitelor ncepnd cu generaia F2 cnd are loc
segregarea caracterelor i apoi urmrirea separat a descendenelor fiecrei elite.
Dac descendena unei elite este reprezentat de plante uniforme din punct de vedere
morfologic nseamn c exist i homozigoie total a genelor i n acest caz
descendena respectiv va intra n cmpul de control i apoi va parcurge drumul prin
toate verigile caracteristice seleciei individuale simple adic: cmp de control, cmp
de culturi comparative de orientare. Cmpuri de cultur orientate de concurs n
staiuni de ameliorare i din nou cmpuri comparative de concurs n reeaua de
omologare.
Dac descendena unei elite prezint exemplare neuniforme morfologic nseamn c
plantele sunt heterozigote pentru caracterele i nsuirile pe care le urmrim i trebuie
repetat alegerea elitelor. Se aleg n acest caz plantele viguroase, sntoase, care
manifest valori ale elementelor de productivitate care corespund obiectivelor noastre.
Aceste elite vor fi urmrite n continuare separat i dup aceeai logic, dac vor da
descendene uniforme vor parcurge celelalte verigi ale procesului iar dac
descendenele nu sunt uniforme se va proceda la o nou alegere a elitelor. Acest
proces va dura pn prin F... 5F7 cnd este posibil s se ajung la homozigotarea
majoritii caracterelor i nsuirilor.
Selecia tardiv presupune nceperea alegerii elitelor mult mai trziu, dup 5-7
generaii, lsnd mai nti plantele s se homozigoteze i apoi s se aleag elite
homozigote.
Cosangvinizarea importana cosangvinizrii reprezint metoda de baz pentru
crearea de noi surse de germoplasm prin creterea variabilitii la speciile alogame.
Metoda const n autofecundarea forat a speciilor monoice sau hermafrodite i prin
ncruciarea ntre indivizii nrudii provenii de la aceeai plant la speciile dioice.
La speciile autogame, autofecundarea este un fenomen firesc i nu afecteaz n nici un
fel plantele respective, dimpotriv la speciile alogame la care fenomenul de autogamie
este de doar 3-4%, efectele autofecundrii sunt foarte evidente. n urma
cosangvinizarilor repetate se obin liniile cosangvinizate care prin ncruciarea ntre
ele dup o prealabil verificare a nsuirilor acestora formeaz hibrizii la care se
manifest efectul heterozis.
Principala direcie de utilizare a liniilor cosangvinizate o constituie obinerea
hibrizilor n vederea exploatrii: efectul heterozis. n conformitate cu legea
uniformitii caracterelor n prima generaie hibrid este posibil s ntlnim 5 situaii
26
i anume:
- hibridul obinut s se situeze prin caracterele i nsuirile sale ntre cele 2
forme parentale (cea mai frecvent situaie)
- s se apropie mai mult de genitorul matern
- s se apropie mai mult de genitorul patern
- s fie peste nivelul genitorului mai bun
- s fie sub nivelul genitorului mai slab.
Ultimele 2 situaii poart numele de transgresiuni genetice i se urmrete
identificarea acestora n vederea extragerii elitelor care depesc genitorul cel mai
bun. De la nceputul secolului 20 s-au intensificat cercetrile privind exploatarea
efectului heterozis sub cele 2 aspecte ale sale: heterozisul somatic i heterozisul
generativ (reproductiv).
Aceste cercetri au condus la identificarea metodelor pentru gsirea celor mai bune
combinaii hibride n cadrul liniilor cosangvinizate. Simbolurile care se folosesc
pentru diferite generaii de cosangvinizare sunt: C0 smna cu care se pornete
operaia de cosangvinizare; C1 prima generaie, C2 a doua, etc, pn la C9, C10
cunoscut fiind ca dup 9-10 generaii de autofecundare se ajunge la homozigotarea
total pentru toate caracterele.
Efectele cosangvinizrii n urma autopolenizrii forate la speciile alogame se
manifest n fenotip unele efecte: reducerea vitalitii, scderea variabilitii sau
creterea uniformitii, desfacerea populaiilor n biotipurile constituiente.
Reducerea vitalitii se manifest chiar din prima generaie de cosangvinizare i
afecteaz principalele caractere i nsuiri ale plantei. Fenomenul este cunoscut sub
numele de presiune de cosangvinizare i se manifest prin reducerea taliei plantelor,
reducerea fertilitii, reducerea productivitii.
Acest efect depinde de la o specie la alta i se manifest timp de cteva generaii pn
cnd se ajunge la un minimum de cosangvinizare. Depresiunea este cu att mai
puternic cu ct procentul de autogamie la specia respectiv este mai mic.
n funcie de specie, la speciile multianuale efectul este mai redus, la speciile anuale,
bienale efectul este mai puternic (la cucurbitaceae efectele sunt aproape
nesemnificative pe cnd la varz sunt deosebit de puternice).
ncercnd s explice acest efect, cercettorii l-au pus pe seama homozigotrii genelor
recesive cu implicaii majore asupra productivitii. Reducerea vitalitii este nsoit
i de alte efecte cum ar fi unele de deficiene clorofiliene, apariie de plante albinotice,
apariia de sectoare internervurale lipsite de clorofil, anomalii florale, sterilitate,
sensibilitate la diferite boli.
Scderea variabilitii sau creterea uniformitii aceasta se manifest prin
uniformizarea materialului dup cteva generaii de cosangvinizare uniform
determinat de gradul ridicat de homozigotare, astfel cu fiecare generaie de
autopolenizare, gradul de homozigotare crete cu 50% fa de anul anterior i astfel se
ajunge ca plantele s fie perfect uniforme i aici fenomenul se manifest diferit de la o
specie la alta astfel: la ceap uniformitate perfect se ntlnete dup 3 generaii, la
sfecla pentru mas abia la a 8-a generaie.
Desfacerea populaiei n biotipurile constituiente cosangvinizarea duce la apariia
prin segregri i recombinri a unor noi biotipuri stabile care pot fi identificate,
izolate, nmulite i folosite pentru folosirea hibrizilor. Numrul maxim de linii
homozigote care pot fi izolate dintr-o plant alogam este determinat de numrul
genelor prezente n stare heterozigot, astfel dac planta iniial este heterozigot
pentru 15 gene, prin cosangvinizare vor rezulta 215 linii homozigote diferite, adic
32768 linii.
27
28
29
30
31
vie coarde 7-8, mr 5-7 la mugurii dorminzi, pr 1,5-5, viin 0,5-3, prunul 2-5, laleaua
0,6, gladiola 15, garoafele 15-20 la semine.
Variaiile de temperatur produc mutaii dac acioneaz asupra zigotului n primele
sale faze de dezvoltare i aceste ocuri constau n expunerea plantelor timp de 24 de
ore la temperatura de 40-450C.
Ultracentrifugarea are efect atunci cnd acioneaz asupra celulelor n diviziune
mpiedicnd migrarea cromozomilor spre polii celulei.
Agenii mutageni chimici sunt reprezentai de acele substane care acioneaz asupra
acizilor nucleici n stare de repaos sau n timpul repicrii acestora. ntre substanele
mutagene a cror aciune este cunoscut, exemplificam: azoserina, cofeina, timidina,
formaldehida, fenolul, etilmetansulfuratul, dietilsulfatul, hidroxilamina,
nitrozoetilureea, nitrozometilureea.
Introducerea agenilor chimici ca factori mutageni prezint unele avantaje printre
care:
- efectele tratamentului nu necesit instalaii speciale care s prezinte pericol
de iradiere
- interaciunea ntre mutagen i substana ereditar este mult mai eficient fr
s se ajung la restructurri cromozomice care conduc la moartea plantei
- frecventa mutaiilor utile este mult mai mare dect n cazul radiaiilor la fel i
frecvena exemplarelor care supravieuiesc.
Indiferent de agentul mutagen utilizat pentru a se reui un numr mare de mutaii
trebuie s se respecte regulile: tratarea unui numr ct mai mare de plante sau organe
ale acestora, utilizarea mai multor ageni mutageni care pot produce mutaii diferite,
utilizarea unei plaje largi de doze n cadrul fiecrui agent mutagen, repetarea
tratamentului mai multe generaii mutante.
Selecia formelor mutante perioada ntre aciunea agentului mutagen i manifestarea
fenotipic a mutaiei poart numele de lag mutaional, aceast perioad depinde de
natura mutaiei, de locul unde se manifest, de faptul dac acioneaz asupra unei
gene sau grup de gene.
Se apreciaz c cel puin 20% dintre mutaiile genice nu vor fi observate pentru c
acioneaz doar asupra unor baze care nu se nscriu n codul genetic. Manifestarea
unor mutaii este diminuat i datorit prezenei unor gene numite gene reglatoare sau
represoare.
Pentru a putea identifica mai uor formele mutante se practic o serie de metode
printre care cosangvinizarea, retroncruciarea, ncruciarea succesiv.
Cosangvinizarea conduce la homozigotarea genelor recesive care au fost afectate de
mutaii i astfel se manifest n fenotip. n vederea seleciei se practic notarea
convenional n felul urmtor: planta, organul sau smna tratat se consider n
generaia M0. rezultatul obinut dintr-o plant la care s-a acionat cu un agent mutagen
se consider n generaia M1 i apoi generaiile M2 M3 M4 amd i dac se folosesc
radiaii ionizante sau neionizante se noteaz cu X0, X1, X2, X3 amd.
n generaia M1 plantele sunt heterozigote n privina mutaiilor provocate i din acest
motiv nu pot fi identificate formele mutante. Se observ totui unele malformaii n
cazul agenilor chimici sau unele radiomorfoze n cazul radiaiilor dar care nu au
valoare ameliorativ.
n aceast generaie se aleg elitele numai dup caracterele morfologice la speciile
alogame pentru a prentmpina polenizarea cu polen strin se izoleaz inflorescenele,
se face autopolenizarea forat, seminele se recolteaz separat de la fiecare plant i
se urmresc n descenden. n generaia M2 sau X2 pot s apar unele forme mutante
i abia din aceast generaie ncepe procesul efectiv de selecie astfel seminele
32
33
34
speciei demonstrnd c o mare parte din speciile cultivate sunt poliploizi naturali,
prezint importan pentru ameliorare n sensul c la aceste exemplare crete
potenialul productiv i astfel se nregistreaz substaniale sporuri de producie.
Poliploidia influeneaz i unele procese fiziologice astfel: cantitatea de hidrai de
carbon, de grsimi, proteine, vitamine, sruri minerale este ntotdeauna mai mare la
formele poliploide comparativ cu cele diploide.
Clasificarea formelor poliploide n funcie de numrul de garnituri cromozomice
existente exist 2 categorii de forme i anume:
- forme euploide clasificate la rndul lor n: haploide i poliploide;
- forme aneuploide caracterizate prin mrirea sau micorarea numrului de
cromozomi din celulele somatice cu unul sau mai muli cromozomi.
Ca urmare a modificrilor numrului de garnituri cromozomice la formele euploide
sau a numrului de cromozomi la formele aneuploide se nregistreaz unele perturbri
n echilibrul genetic al organismelor respective. Aceste perturbri sunt mai puin
pronunate la formele euploide deoarece aici se modific numrul de garnituri
cromozomice i practic toi cromozomii sufer aceeai influen ca urmare a acestei
modificri. La formele aneuploide, perturbrile sunt mult mai pronunate i apar
modificri morfologice i fiziologice iar mrimea acestor modificri este cu att mai
mare cu att cromozomii adugai sau pierdui conin alele cu un grad ridicat de
heritabilitate.
Formele haploide au acelai numr de cromozomi n celulele somatice care n mod
normal exist n gamei, din acest motiv se mai numesc i monoploide i dac se obin
din formele din organismele poliploide se mai numesc i polihaploide.
Formele poliploide n funcie de numrul de garnituri cromozomice pot fi: triploide
cu 3x, tetraploide cu 4x, pentaploide cu 5x, amd.
n funcie de originea garniturilor cromozomice care particip la obinerea formelor
poliploide, formele obinute se clasific n 2 categorii i anume:
- autoploide
- aloploide
Formele autoploide rezult prin multiplicarea propriei garnituri cromozomice.
Autoploidizarea este o consecin a unor perturbri aprute n timpul diviziunii
celulelor somatice sau celulelor sexuale. Dac aceste perturbri apar n mitoz se
poate s nu mai migreze cromozomii spre cei 2 poli ai celulei i astfel n loc de 2
celule fiecare cu 2n cromozomi se formeaz o singur celul cu 4n cromozomi, o
celul tetraploid.
Cnd perturbrile intervin n meioz este posibil ca n loc s apar celule haploide cu
n cromozomi n urma diviziunii s se formeze celule sexuale diploide cu 2n
cromozomi. Dac prin unirea acestor 2 celule cu 2n cromozomi se formeaz un zigot
triploid cu3n cromozomi.
Avantajele formrii organismelor poliploide rezult din vigoarea mai mare a acestora,
talia mai mare, flori mai multe, fructe, etc iar printre dezavantaje menionm faptul c
datorit numrului mare de cromozomi omologi, unii rmn nemperecheai, n
meioz se formeaz astfel gamei aneuploizi cu cromozomi n plus sau n minus i
care de regul sunt sterili sau prezint viabilitate redus.
n funcie de numrul par sau impar al garniturii cromozomice, formele poliploide sau
autoploide se mpart n 2 categorii:
- cele cu numr par: 4x, 6x, 8x sunt cunoscute sub numele de arctioploide
- cele cu numr impar: 3x, 5x, 7x, amd sunt cunoscute sub numele de
perisoploide.
Formele arctioploide se caracterizeaz prin faptul c fiecare cromozom are un
35
partener cu care se poate uni i astfel meioza decurge normal i n final gameii
formai vor fi ntotdeauna fertili.
Formele perisoploide cu numr impar se caracterizeaz prin aceea c meioza nu
decurge normal i ca urmare a acestor inconveniente gameii au mai muli sau mai
puini cromozomi, motiv pentru care acetia vor fi sterili.
Ar prezenta un avantaj i aceste forme dac se manifest la speciile cu nmulire
vegetativ i pot fi meninute astfel mai multe generaii.
Formele aloploide iau natere prin multiplicarea numrului de cromozomi ai unui
zigot prin participarea a 2 sau mai multe garnituri cromozomice neasemntoare,
neomoloage, provenite de la specii diferite.
Formele aneuploide se caracterizeaz prin pierderea a unuia sau 2 cromozomi sau
prin adugarea la garnitura cromozomic a unuia sau 2 cromozomi. Atunci cnd se
pierde un cromozom, formele respective poart numele de forme monozomice iar
cnd se pierd 2 cromozomi se numesc nulizomice. Dac se adug un cromozom la o
pereche, formele se numesc trizomice, dac se adaug nc o pereche, forma
respectiv se numete tetrazomic.
Obinerea formelor poliploide exist mai multe metode ns toate se bazeaz pe 2
direcii de aciune i anume:
- blocarea cromozomilor n metafaz prin inhibarea formrii fusului nuclear i
astfel cromozomii nu mai pot migra spre cei 2 pomi;
- mpiedicarea apariiei peretelui despritor celor 2 celule, va rmne o celul
cu 4n cromozomi, celula tetraploid.
Numeroi cercettori centralizeaz cercetrile efectuate n aceast direcie i arat c
din cele 2224 de specii cercetate reprezentnd 90% din genurile care alctuiesc flora
Europei, 421 sunt diploide 36% i 1803 sunt poliploide cu aproape 64%.
La speciile din zona nordic procentul de poliploidie la formele slbatice depete 80
90%. La via de vie, formele tetraploide sunt descrise nc din anul 1929, de
asemenea la pomi, arbuti fructiferi, plante decorative, descrierile sunt din anul 1940
1946.
Primele forme poliploide obinute experimental au fost realizate de Gherasimov prin
tratare cu temperaturi sczute, eter i cloroform a plantelor de Spirogira nc din anul
1890, mai trziu s-au utilizat ocuri de temperatur, centrifugarea celulelor
meristematice n curs de diviziune, tratarea cu acid nitros a plantelor nflorite,
stimularea poliploidizrii prin aciunea unor factori fizici i chimici.
Metoda ocurilor de temperatur const n supunerea plantelor la temperaturi de
45-500C n momentul diviziunii celulare i s-a constatat c aceste ocuri pot s
provoace dublarea numrului de cromozomi.
Metoda centrifugrii se utilizeaz de asemenea la celulele meristematice n
momentul diviziunii ns cea mai sigur i folosit metod pentru a obine forme
poliploide este colchicinizarea adic tratarea cu colchicin n soluii de 0,01 0,5% a
seminelor n curs de germinare, a vrfurilor vegetative, a vrfurilor tulpinilor
ramurilor sau a mugurilor vegetativi. n ceea ce privete dozele i timpul de expunere
s-a constatat c acesta difer de la o specie la alta i prin tatonare s-au determinat
dozele critice dar care se ncadreaz ntre 0,01 i 0,5% iar timpul de expunere ntre 3
ore i 6 zile.
36