Sunteți pe pagina 1din 46

CUPRINS

Introducere...............................................................................................................3
CAPITOLUL I. CARACTERE GENERALE ASUPRA SPECIEI I
VARIETILOR DE CALENDULA OFFICINALIS L.........................................8
1.1Rspndirea genului Calendula L.................................................................8
1.2 Importana ameliorrii speciilor de Calendula L.........................................8
1.3Diverse genotipuri de C. officinalis L. rspndire n Europa........................10
1.4Descrierea botanic a specieia Calendula officinalis L................................13
1.5Criterii de difereniere morfologic ntre specia Calendula officinalis L. i soiurile
obinute prin hibridri n RM Diana i Natali..................................................13
1.6. Caracterizarea anatomic a speciei C. officinalis L..................................14
1.6.1. Caracterizarea anatomic ale frunzei de C. officinalis L................14
1.6.2. Caracterizarea anatomic ale inflorescenei de C. officinalis L....15
1.6.3. Caracterizarea anatomic a tulpinei de C. officinalis L................16
1.7. Particularitile i cerinele biologice............................................................17
1.8. Produsul vegetal medicinal obinut din specia de Calendula officinalis L.....18
1.9. Date privind compoziia chimic a speciei Calendula officinalis L...............19
1.9.1Compoziia chimic a inflorescenelor soiurile de C. officinalis L..........25
1.9.2. Date privind aciunea farmacologic a speciei.....................................25
1. 10. Produse fitoterapeutice obinute din specia C. officinalis L.......................29
Capitolul II. PARTEA EXPERIMENTAL.....................................................29
2.1. Obinerea produsului vegetal.......................................................................29
2.2. Analiza calitativ prin reacii de identificare................................................30
2.2.1. Identificarea saponozidelor................................................................30
2.2.2. Identificarea alcaloizilor.....................................................................31
2.2.3. Identificarea substanelor tanante.......................................................32
2.2.4. Identificarea flavonozidelor................................................................33
2.2.5. Identificarea flavonozidelor prin cromatografia pe strat subire.........34
2.3. Dozarea totalului de flavonoide.................................................................35
2.4. Dozarea a diheperozidei izoramnetinei...........................................................38

2.5. Construirea curbei de calibrare pe baza absorbantelor corespunztoare unor soluii


de rutozid de concentraii diferite....................................................................40
Concluzii...................................................................................................................41
Bibliografie...............................................................................................................42

INTRODUCERE
Numele calendula officinalis, vine de la vechiul calendar roman. Numele i-a fost
dat pentru c nflorea n fiecare luna a anului, chiar i iarna. Numele de officinalis se
refer la munca unui alchimist, care poate transforma orice metal n aur. Despre
glbenele se credea c, puteau reda frumuseea pielii, transformarea fiind asemanatoare
cu a unui alchimist. Calendula mai era cunoscut i sub numele de solsequium. La fel ca
i floarea soarelui, calendula era o plant care se mica in direcia soarelui.n Evul
Mediu, glbenelele erau prescrise ca remediu pentru afeciunile intestinale i ale
ficatului. n Europa i n America Latin, glbenelele erau folosite n ceremoniile
religioase, de ziua morilor. n aceasta zi, florile erau mpratiate pe mormintele celor
decedai. i n India, aceast floare era considerat cu puteri magice i era folosit n
ceremoniile religioase.
n antichitate, plantele cu proprietai de vindecare erau considerate magice, iar
glbenelele nu faceau exceptie. Lumea era atat de fascinat de aceast plant i de
minunile pe care le fcea pentru piele, ncat credea c avea i alte puteri magice.
Glbenelele erau folosite astfel i n ritualurile vrjitoarelor, care o foloseau n loiunile
destinate celor singuri. olonitii foloseau acest plant i n supe, mancruri i fceau
chiar i vin din glbenele. Se mai credea c glbenelele au puteri magice si pot induce
vise profetice. Glbenelele erau asociate cu bogia. n Europa, glbenelele erau
aeazate sub pat pentru a-l proteja pe cel care doarme de spirite malefice , boli si hoi.
Glbenelele sunt plante care aduc noroc celor din zodia leu. Florile proaspete
de glbenele maresc energia pozitiv din ncapere. Glbenele aezate sub pern, n
timpul somnului, induc clarviziune. Dac faci baie n apa n care ai presrat flori de
glbenele, atragi respectul i succesul n tot ce faci. Florile de glbenele presarate sub
pat aduc un somn sanatos.

Cunoaterea profund a plantelor medicinale, inclusiv a glbenelelor, lrgirea


sferei lor de folosire a luat o amploare destul de mare, ndeosebi n a doua jumtate a
secolului trecut, de cultivarea lor fiind interesai tot mai muli, datorit
calitilor terapeutice excepionale pe care le posed i care au la baz complexul de
substane biologic active. Dioscorides, medic militar i filozof grec, a descris pentru
prima dat glbenelele in tratatul su De materia medica (Despre medicamente,
scris se pare intre anii 60-80 d. Hr.), ca fiind plant cu proprieti terapeutice, folosind
infuzia acestora in tratamentul bolilor de ficat i ca mijloc de eliminare a durerilor
organelor. Lucrarea a constituit o remarcabil sintez a cunotinelor medicale grecoromane i secole intregi a fost consultat de medici europeni (COIFAN, 2003). Pentru
prima dat specia Calendula officinalis L. este introdus n ierarhia taxonomic de Carll
Linn n lucrarea sa ,,Species Plantarum publicat n anul 1753 (Brnzil, 2005). n
momentul de fa Calendula officinalis L. se afl printre primele zece, dintre cele mai
cultivate plante medicinale n Europa (Hoppe, 1997).
Proprietile terapeutice deosebite ale glbenelelor sunt determinate de complexul
de substane biologic active, pe care le conine materia prim: carotenoide (provitamina
A), sterine, triterpenoizi, flavonoizi, glicozizi flavonici, ulei volatil, cumarine, substane
minerale i amare, gumirezine, mucilagii, vitamina C, esteri colesterolici, substane
proteice (Britton, 1996). n rile n care se cultiv aceast specie, se urmrete
obinerea prin lucrrile de ameliorare a unor forme cu antodii mari, involte, de culoare
portocalie (Crciun, 1977).
Dintre cele aproximativ 25 de specii ale genului Calendula, specia cea mai utilizat
in cultur, in medicina uman, veterinar i in diferite ramuri industriale, este C.
officinalis L. (glbenelele). Glbenelele au fost utilizate prima dat ca plante
ornamentale datorit inflorescenelor decorative, i abia mai tarziu ca plante medicinale,
dup descoperirea i aprecierea calitilor lor curative (KEMPER, 1999;Gonceariuc,
2001, 2003). Inc din antichitate, unele popoare, precum egiptenii, grecii, induii i
arabii cultivau aceast plant pentru infrumusearea grdinilor (Verzea i Stoianov,
2001). Pentru decor se folosesc genotipuri cu inflorescene involte, colorate in galben,
4

galben-portocaliu sau portocaliu intens, cu talia inalt i numr mare de flori ligulate
(flori btute: btute nseamn involte!)
(ELARU, 2004). O valoare ornamental deosebit au genotipurile cu florile din
inflorescen diferit colorate i genotipurile cu inflorescene involte, intens colorate.
n practica medical, datorit principiilor active este mult utilizat specia C.
officinalis L., i mai puin utilizat specia C. arvensis L. (HEYN i colab., 1974;
GONCEARIUC, 2003).
Glbenelele au o important valoare economic, cultivarea lor cunoscnd o
cretere continu in ultimii ani, datorit lrgirii considerabile a spectrului de utilizare a
materiei prime (inflorescene, flori, frunze i semine) ca surs de obinere a uleiurilor,
apreciate in mod deosebit pentru compoziia lor (JANISZOWSKA i RIGIER, 1985).
Astfel, n acest scop, in ultimul deceniu, in spaiul Uniunii Europene au fost adoptate
Programe de cercetare i implementare a speciei Calendula officinalis L. (www.nf2001.org.). Conform datelor statistice, dup popularitate i arealul de cultivare,
glbenelele sunt depite doar de mueel, ins se situeaz cu mult inaintea jaleului,
odoleanului, suntoarei i altor specii medicinale cunoscute (HOPPE, 1997). In
medicina popular, plantele se culeg i se utilizeaz pentru flori, tulpin i frunze
(PUN, 1995; MUNTEAN, 2007).
In medicina uman: plantele de Calendula se utilizeaz sub form de ceai, infuzii,
decocturi, tincturi (BLUMENTHAL, 1998), pentru boli gastro-intestinale, de ficat,
crampe, ulcer stomacal, duodenal, icter, hemoroizi, ca vermifug, cicatrizant intern, in
tratamentul de cancer al pielii (GRAF, 2000). Plantele au aciune: emanagog,
coleretic, antispastic, bactericid, anticancerigen, pentru tratarea plgilor, rnilor,
inepturilor de insecte, degerturilor, arsurilor, acneei (KLOUCHEK-POPOVA, 1982).
Alifia se utilizeaz in: tratarea afeciunilor pielii, dermatitelor, ulceraiilor in
flebite,ulcere varicoase, fistule, degerturi, arsuri, micoze. Extractele din flori uscate au
fost menionate i pentru rolul inhibitor asupra replicrii virusului imunodeficienei
umane (HIV-1) (KALVATCHEV i colab., 1997).

In medicina veterinar: materia prim de glbenele este utilizat la prepararea


tincturii i a diferitelor extracte folosite pentru tratarea afeciunilor ce
apar la animale (GRELA i SEMBRATOWICZ, 1998). Prin studii de ultrastructur a
celulelor parenchimatice din ficatul animalelor ce prezint tumoarea Walker s-a
demonstrat ca aceasta poate fi tratat folosind extractele din glbenele (MISCLENCU
i colab., 1997). Tinctura obinut din C. officinalis L. i C. arvensis L. prezint
proprieti homeopatice, antivirale, efect sedativ i hipotensiv. n Cluj-Napoca, au fost
efectuate studii privind efectul benefic al extractului alcoolic de C. officinalis L. asupra
imunitii celulare la ecvine (BOLF, 2010). Sub aspect alimentar, C. officinalis L. este
destul de solicitat in multe ri europene, precum Germania, Anglia, Olanda, Frana.
Planta are o arom dulce, uor rinoas, petalele (rectific: petalele la Calendula sunt
flori ligulate) au gust delicat, aromat i puin amrui, frunzele sunt uor piperate.
Utilizare: sub form de salate, ca ingredient sau condiment alimentar, avand avantajul
unui pre redus in comparaie cu alte condimente orientale (ISMAGILOV i CARJA,
2000). In Europa, glbenelele se folosesc ca inlocuitor al ofranului (in ceea ce privete
culoarea, nu i gustul), iar din florile ligulate se extrage un colorant alimentar, utilizat in
industria margarinei, untului, pastelor finoase etc. (PUN, 1995).
Calendula ofcinalis L. este o specie important de plante medicinale att n
Republica Moldova, ct i n alte ri, cum ar Germania, Marea Britanie, Olanda,
SUA, India, Romnia, Frana, Rusia pentru virtuile toterapeutice ale materiei prime
(Flores Calendulae), nsuirile tehnologice i biologice de a valorica o mare diversitate
de condiii pedoclimatice. Cultura este preuit datorit plasticitii ecologice deosebite
[6].Unul dintre elementele de baz ale produciei la glbenele l constituie masa
antodiului cu ori sau smn, care este determinat de involtitatea i numrul
antodiilor unei plante. Unii cercettori consider c involtitatea poart un caracter
genetic recisiv. Ea este determinat de numrul de ori ligulate (feminine), care se
formeaz n partea exterioar a antodiului i sunt fertile. Ele au o importan mare,
deoarece doar din ele se formeaz semine. Florile tubuloase formate la mijlocul

antodiului sunt sterile [1,5]. Fiind o specie polimorf, plantele de Calendula ofcinalis
L. formeaz n decursul vegetaiei att
antodii involte cu peste 5 rnduri de ori ligulate, ct i antodii semiinvolte, cu 3-5
rnduri de ori ligulate, precum i ori simple cu 1-2 rnduri de ori ligulate (g. 1).
Produsul vegetal a soiulor de C.officinalis Natali, Diana i populaie local au fost
colectate la Institutul de Genetic i Fiziologie a Plantelor, n perioada iunie- iulie 2011.

Fig. 1. Involtitatea antodiilor la Calendula ofcinalis L.a antodii involte cu peste 5


rnduri de ori ligulate i semine omogene; b antodii semiinvolte cu 3-5 rnduri de
ori ligulate i semine cu omogenitea redus; c antodii simple cu 1-2 rnduri de ori
ligulate i semine neomogene.

Scopul lucrrii const n studiul caracterelor chimice al soiurilor noi de galbinele


obinute prin hibridri n Republica Moldova.
Obiectivele lucrrii:
1. Colectarea, uscarea i pstrarea produselor vegetale.
2. Studiul criteriilor de difereniere morfologic a soiurilor de Calendula
officinalis L. din Republica Moldova.
3. Analiza calitativ, prin:
7

reacii de identificare i CSS ale diverselor grupuri de principii biologic


active.
4. Dozarea flavonoidelor prin tehnica spectrofotometric.
5. Dozarea izoramnetinei prin tehnica cromato-spectrofotometric.
6. Analiza comparativ a rezultatelor obinute.

CAPITOLUL

I.

CARACTERE

GENERALE

ASUPRA

SPECIEI

VARIETILOR DE CALENDULA OFFICINALIS L.

1.1. Rspndirea genului Calendula L.


Genul Calendula L. ntrunete cca 25 de specii. Printre acestea: Calendula
officinalis L., C. stellata Cav., C. marocana Ball., C. arvensis L. cu ssp. C. aegiptiaca
Desf., C. persica C.A.Mey, C.gracilis DC, C. macranta Tin & Guss., C. bicolor
Rafin.., C. maritima Guss., C. pachysperma Zoh., C. gracilis DC., C. palaestina Boiss.,
C. tripterocarpa Rupr., C. lazemaire, C. caracalensis Vass., C. suffruticosa Vahl. ssp.
fulgida (Rafin.) Ohle, ssp. tomentosa Murb., C. algeriensis Boiss&Reut, (Brnzil,
2006 cu referin la Meusel et al., 1966; Heyn et al, 1974; Yurtzev et al., 1982;
Gonceariuc, 2000, 2001; Ismagilov, Kostlev, 2000;)
Ca plante medicinale mai des sunt folosite speciile Calendula officinalis L. i
Calendula arvensis L. Ambele specii se ntlnesc i n Republica Moldova (Geideman,
1986; Gonceariuc, 2000, 2001). Calendula officinalis L. se ntlnete numai n cultur
ca plant medicinala, dar i ornamental. n flora spontan crete i Calendula arvensis
L. (Geideman, 1986), care este rspndit n Europa, inclusiv n bazinul mediteranean,
Balcani, Caucaz, precum i n Asia Mic (Balabas et al., 1965, Kemper, 1999). Alte
specii Calendula stellata Cav., Calendula bicolor Rafin., Calendula marocana Ball.
(Gonceariuc, 2001; Gonceariuc, Ganea, 2005) n Moldova nu se ntlnesc nici n
cultur, nici n flora spontan.
8

1.2. Importana ameliorrii speciilor de Calendula L.


Prin lucrrile de ameliorare la Calendula se urmrete crearea unor cultivaruri noi,
valoroase, care s depeasc prin particularitile lor cultivarurile existente, sau s
posede anumite caracteristici datorit crora s fie superioare formelor cultivate sau din
flora spontan. Obinerea de noi genotipuri presupune existena
unor obiective precise i o variabilitate suficient de vast a materialului biologic,
variabilitate care s permit depistarea unor forme noi, corespunztoare scopurilor
vizate de ameliorator (ARDELEAN i colab., 2006).
Obiectivele de ameliorare, la plantele genului Calendula, dar mai ales a speciei
Calendula officinalis L. (glbenelele), sunt impuse de multiplele utilizri ale acesteia.
Aceste obiective pot fi orientate spre urmtoarele direcii:
in scop ornamental, obinea genotipurilor cu talie inalt, inflorescene involte,
aspect decorativ deosebit, meninerea caracteristicilor decorative o perioad cat
mai lung, rezistena la factori de stres, la bolilor i duntorilor, rezistena
plantelor ca flori tiate;
in scop industrial, crearea genotipurilor cu inflorescene involte, cu un coninut al
plantelor i seminelor cat mai bogat in uleiuri i substane utile;
in scop medicinal, obinerea genotipurilor cu flori intens colorate in portocaliu i
portocaliu inchis, cu un coninut ridicat in uleiuri i principii active.
Talia i vigoare plantei la genotipurile utilizate in decorul grdinilor, parcurilor, a
interioarelor acest obiectiv de ameliorare este mai mult decat necesar. Pentru acest scop
sunt de preferat genotipurile cu talia inalt, viguroase, habitus bogat, cu numr cat mai
mare de ramificaii i inflorescene.
Formele taratoare prezint un interes sczut pentru lucrrile de creare a soiurilor
ornamentale, dar pot fi de interes pentru obiective speciale, un exemplu relevant in acest
sens fiind soiul Skyfire, din specia C. alata, folosit ca inlocuitor de gazon.
Rezistena ca i flori tiate - datorit frumuseii lor glbenele sunt apreciate, nu
numai in decorul spaiilor verzi ci i in aranjamentele florale, sau pentru decorul
9

interioarelor ca i flori tiate. Dup elaru (2004), durata de pstrare ca i flori tiate
este de 4-5 zile, dac sunt inute in vase cu ap schimbat zilnic sau o dat la dou zile.
Lucrrile de ameliorare, la speciile genului Calendula, ar putea fi direcionate spre
crearea de noi soiuri cu o rezisten mare ca i flori tiate, indeosebi la specia
Calendulaofficinalis L. (glbenelele).
Tipul florilor (simple i involte): - dintre cele aproximativ 25 de specii ale genului
Calendula flori involte sunt intalnite doar la specia C. officinalis L., la celelalte specii
inflorescenele au doar flori simple. Diametrul inflorescenelor i lungimea petalelor au
valoare decorativ, iar tipul inflorescenei influeneaz producia de materie prim la
hectar. Cercetrile din domeniu confirm faptul c intre tipul inflorescenelor i
producia de materie prim la hectar, exist o corelaie strans, pozitiv (VERZEA i
STOIANOV, 2001; BRANZIL, 2005).
Culoarea inflorescenei: - culorile de baz ale glbenelelor sunt galben i portocaliu,
dar exist i alte nuane ce deriv din culorile de baz: galben inchis, galben-portocaliu,
portocaliu cu diferite striaii de alb, crmiziu, etc. O tem deosebit de interesant ar
putea-o constituii obinerea genotipurilor cu inflorescene colorate in crmiziu, rou,
viiniu inchis sau deschis, precum i crearea genotipurilor cu inflorescene bicolore.
Consider c una dintre cele mai mari realizri in domeniul geneticii i ameliorrii
glbenelelor ar fi obinerea glbenelelor roii.
Productivitatea - insuire biologic complex ce constituitei obiectivul principal al
majoritii programelor de ameliorare (SESTRA, 2004). Capacitatea de producie este
influenat atat de baza ereditar a genotipului cat i de condiiile de mediu. Vigoarea
plantelor este dat de tipul de cretere, inlimea tulpinii, numrul i grosimea
ramificaiilor. Ereditatea caracterului este controlat de poligene i din acest motiv
analiza ereditii este dificil de efectuat la orice specie de plante (SESTRA i colab.,
2009).
Rezistena la boli i duntori plantele ornamentale, sunt susceptibile la atacul
bolilor i duntorilor care le pot deprecia aspectul decorativ. Boli intalnite in cultur:
finarea, ptarea brun, ptarea cenuie, iar dintre duntori: Aphis spp. In materia

10

prima depozitat au fost sesizate insecte de Ptinus fur L. i Atopus pulsatorium L.


(BRANZIL, 2005).
1.3. Diverse genotipuri de C. officinalis L. rspndire n Europa
Tabelul 1.
Varietile de C. officinalis L. [12].

Germania
1.
Humboldt-Universitat zu
C.officinalis
C.officinalis
Berlin,Institut fur
L.D.a
Biologie,10115
2. Botanische Garten der
C.officinalis
Prolifera Nr.215
Universitat Gottingen 37073
3.
Botanische Garten der
C.officinalis
Prolifera Nr.214
Universitat Gottingen 37073
4. Okologisch-Botanischer
C.officinalis
C.officinalis
Garten der Universitat
L.D.c
Bayreuth,95440
5.
Okologisch-Botanischer
C.officinalis
Pacifec-Riesen
Garten der Universitat
Bayreuth,95440
6.
Botanischer Garten der
C.officinalis
C.officinalis
Universitat Ulm,D-89069
L.D.b
7.
Okologisch-Botanischer
C.officinalis
Radio
Garten der Universitat
Bayreuth,95440
8.
Botanisches Institut,
C.officinalis
C.officinalis
J.W.Goethe Universitat
Frankfurt, D-60054
9
Botanischer Garten MartinS.officinalis
S.officinalis L.D.e
Luther Universitat, D-06108
10 Botanischer Garten,
C.officinalis
S.officinalis L. D.f
Grunflachenamt, Chemnitz
11 Botanischer Garten der
C.officinalis
C.officinalis D.g
Christian-AlbrechtsUniversitat zu Kiel
12. Botanischer Garten der
C.officinalis
C.officinalis D.h
Christian-AlbrechtsUniversitat zu Kiel
Ucraina
1. Ukraine Hortus Botanicus
C.officinalis
Bon Bon Mix
Fominianus
2. Ukraine Hortus Botanicus
C.officinalis
C.officinalis UK
11

Fominianus
3.
4.
5.
6.
7.
8.
1.
2.
3.
4.
1.
2.
1.

Natinal Botanical Gardens


Timirjazevska,01014 Kyiv
Natinal Botanical Gardens
Timirjazevska,01014 Kyiv
Natinal Botanical Gardens
Timirjazevska,01014 Kyiv
Natinal Botanical Gardens
Timirjazevska,01014 Kyiv
Natinal Botanical Gardens
Timirjazevska,01014 Kyiv
Natinal Botanical Gardens
Timirjazevska,01014 Kyiv
Jardin des Plantes de Rouen
76100
Jardin des Plantes de Rouen
76100
Les Botaniques de
Chevreloup
Jardin des Botanique de
Nantes, 44094
Unisersity of Copenhagen
Botanical Garden
Unisersity of Copenhagen
Botanical Garden
Faculte universitaire des
sciences agronomiques de
Gembloux

C.officinalis

Prycosnovjenie

C.officinalis

Pacific Beauty

C.officinalis

Gaicha Gril

C.officinalis

Fiesta Hitana

C.officinalis

Zelenoy Serdtse

C.officinalis

Rozovyi Sjurpriz

Frana
C.officinalis

C.officinalis F.a

C.arvensis

C.arvensis F

C.officinalis

C.officinalis L.F.b

C.officinalis

C.officinalis L.F.c

Danemarca
C.officinalis
C.officinalis
Belgia
C.officinalis

1.

Slovenia
Botanical Garden of Ljubljana C.officinalis
Karntneur Bota nikzentrum
C.officinalis
mit dem Lamdesherbar;
Botanischer Garten
Cehia
Univerzita Brno,66243
C.officinalis

Univerzita Brno,66243

1.

1.

National Botanic Garden of


Latvia,Salaspils, LV-2169

C.officinalis
Lituania
C.officinalis

122GE2822-002
123GEHortus
Hudae
C.officinalis L.B

C.officinalis SLO
C.officinalis A

Pacific
Masarykova
Plamen
Masarykova
Bon-Bon Orange
12

Italia
1.

1.
1.

Insituto di Botanica e Orto


Botanico Pierino Scamarel
la,61029
Hortus Farmacognosticus
Academiae Medicinalis

C.officinalis

C.officinalis I

Dublin
C.officinalis

C.officinalis L.PL

Azerbaijan
Central
Botanical Garden, C.officinalis
Badamer Highwai

C.officinalis AZ

1.4. Descrierea botanic a specieia Calendula officinalis L.


Calendula officinalis L. este o plant anual sau bianual, cu rdcin pivotant,
lung de circa 20 cm i groas pn la 1 cm.
Tulpina este erect, nalt de 40 - 80 cm, cu 5 - 25 de ramificaii, foliat pn la
inflorescene, pubescent.
Frunzele sunt alterne, sesile, ntregi, pubescente sau glabre; cele inferioare
oblan-ceolate, lung atenuate, rotunjite la vrf, lungi pn la 16 cm; frunzele mijlocii i
superioare sunt lanceolate, din ce n ce mai nguste i mai mici ctre vrful plantei.
Inflorescenele sunt antodii terminale (20 - 50 pe o tuf), formate din flori ligulate
periferice, de culoare portocalie, i din flori centrale sterile, tubuloase, galbeneportocalii. Involucrul este campanulat, format din foliole ngust lanceolate, acute i
proase.
Fructele sunt achene: cele exterioare mai puin curbate spre interior, lung rostrate,
nearipate; cele interioare inelat curbate spre interior, adesea aripate sau nearipate, dorsal
scurt spinoase, lungi de circa 18 mm.
Planta prezint un miros balsamic puternic [5,6].
1.5. Criterii de difereniere morfologic ntre specia Calendula officinalis L. i
soiurile obinute prin hibridri n RM Diana i Natali.

13

n Republica Moldova au fost create i sunt omologate (incluse n registrul de


Stat) soiurile cu inflorescene involte Natali i Diana. Soiurile sunt distinctive prin
culoarea florilor tubulare. Astfel, soiul Natali are flori tubulare i ligulate de culoare
portocalie, iar la soiul Diana florile tubulare sunt maronii, iar cele ligulate portocalii.
Aceste soiuri se caracterizeaz prin antodii involte cu diametru de 7-9 cm (Gonceariuc,
2008) [5].
Soiurile noi se deosebesc i prin caracterele morfologice ale fructelor (achenelor).
Dup dimensiuni i form acestea se mpart n 3 fracii. Seminele cu cele mai mari
dimensiuni n form de secer aparin fraciei I. Cele mai curbate i mai mrunte sunt
din fracia III. La soiurile noi predomin anume fracia III de achene de dimensiuni
mici i greutate mai mic (Tabelul 2) [15].
Tabelul 2.
Particularitile morfologice ale achenelor la soiurile moldoveneti de C. officinalis
L.
Soiul

Fracia

Fracia,
%

Nr. achene n 1 g

Greutatea a 1000 achene,


g

Natali

I
II
III
I
II
III
I
II
III

18.9
6.2
74.9
17.1
16.1
66.8
91.6
5.3
3.1

78
119
156
85
127
222
81
112
147

12.7
8.4
6.4
11.7
7.9
4.5
12.3
8.9
6.8

Diana

Populaie local,
martor

1.6. Caracterizarea anatomic a speciei C. officinalis L.


1.6.1. Caracterizarea anatomic ale frunzei de C. officinalis L.
Nervura median este pronunat proeminent pe partea inferioara a frunzelor i
moderat proeminent, pe partea superioar (Fig.2A). Mesofilul sub ambele epiderme
este de tip palisadic, dar celulele din partea adaxial sunt mai
nalte ntre cele dou celule palisadice, celulele parenchimului asimilator sunt
izodiametrice (Fig.2.C, D). Fasciculul medial este colateral deschis, avnd ca
centur colenchim la fiecare din cei doi poli (Fig.2 B.).
Toate celelalte fascicule conductoare sunt mici, cele din urm posed doar elemente
ale floemului. Pe epiderma superioar a frunzei se observ stomate de tip anomocitic i
14

peri secretoae. Mai multe stomate apar pe suprafaa lamelei.


n fasciculul medial este colateral deschis, avnd ca centur colenchima la fiecare
din cei doi poli. (Fig.2.B). Toate celelalte fascicule conductoare sunt mici, cele din
urm posed doar elemente ale floemului. Pe epiderma superioar a frunzei se observ
stomate de tip anomocitic i peri secretoare. Mai multe stomatae apar pe suprafa
lamelei. n afar de peri secretoare, se observ peri tectori foarte lungi , cu o celul
terminal filiform [13].

Fig. 2. Seciunea transversal a frunzei de C. officinalisL.: A - seciunea transversal


a nervurii mediane a frunzei, Bfascicul conductor, C- seciune transversal a limbului
frunzei, D-mezofilul frunzei.

B
Fig.3. Frunz de C. officinalis L: A-peri tectori, B - peri glandulari uni- i biseriai.

15

Fig.4. Preparatul superficial al frunzei: A- epiderm superioar, B- epiderm


inferioar.
1.6.2. Caracterizarea anatomic ale inflorescenei de C. officinalis L.
La baza florelor ligulate sunt n abuden peri tectori multecelulae, biseriate (Fig.
5A.) i peri glandulari, biseriate de lungime variabil ( Fig.5B). La baza florilor, pe
lng acestea, exist ali peri tectori multecelulari uneserai, iar unii peri glandulari cu
picior scurt i gland format din mai multe straturi de celule suprapuse ( Fig.5C) [4].

16

Fig. 5. Caractere anatomice a floarei: A - seciune longitudinal a floarelor ligulate


cu abudena la baz de peri tectori biseriai i glandulari biseriae; B peri

16

glandulari biseriae ale floarei; C-peri tectori biseriate, unaseriate i glandulari


biseriate la baza florilor tubulare.
1.6.3. Caracterizarea anatomic a tulpinei de C. officinalis L.
Analiza efectuat cu tiofenat metil de 0.1% - a seciunii transversale prezint nervuri de
dimensiuni diferite, n timp ce celelulele colenchimatice au pereii mai groi (Fig.1.).
Celulele epidermice, cu perei ziduri groase externe, sunt acoperite de o cuticul groas.
Spre deosebire de cele de referin, fasciculele sunt mai numeroase i mai mari ce sunt
prezentate de: 18 cele mai

mari i cele intermediare 8 mici, avnd o structur

primar (Fig.1, 2); n mai multe fascicule , care


conduc (6-7), posed exclusiv elementele liberiene (Fig.2, 4.). Cambiul este mai
activ, fiind format din mai multe straturi (3-4). Multe dintre navele xilemului apar n
procesul de formare

(Fig. 3.).Coaja prezint

2-3 fascicule mici, circulare fiecare cu

un bru subire de fibre sclerenchimatice (fig. 4.). Unele sunt fascicule de tip, structural
similare cu cele de la cilindrul central, altele (observate n principal la
tulpin),reprezentnd de fapt o form de tranziie circular hidrocentric vascular,
nconjurat la periferie, parial sau n n totalitate de liber.
Aceste fascicule anormale, rezultate din activitatea de stimulare indus de tiofenat
Metil, au fost observate n diferite poziii la acest nivel de tulpin: n scoara, n
apropiere sau n grosime de centuri de fibre peri floemice i chiar n interiorul liberului
din fascicule efectuarea de cilindrul central (Fig.6 F.) [15.23].

17

Fig.6. Caractere anatomice a tulpinei: A-seciunea transversal a tulpinei; Bfascicul conductor; C- cambium intrafascicular; D, E - fascicle
conductoareing colaterale; F-fascicul conductor n scoara tulpinei.

1.7. Particularitile i cerinele biologice


Temperatura
Glbenelele au cerine moderate fa de temperatur. Seminele ncep s
germineze la temperatura solului de peste 6-80 C i temperatura aerului 10-150 C.
Germineaz seminele foarte bine la temperaturi ale aerului mai ridicate 20-300 C.
Plantele sunt rezistente la brume, ngheuri de 2... 40 C (Pun i colab., 1986).
Apa
Specia este rezistent la secet. Cu toate acestea, n anii secetoi se micoreaz
numrul de flori ligulate n antodii. n cazul unei secete ndelungate cu temperaturi
nalte critice (36-380 C), cum au fost atestate n Moldova n 2007, unele plante
rmn n faza rozetei de frznze i nu formeaz tulpini, respectiv, ramificaii,
inflorescene. Din aceste considerente pe soluri uoare n perioadele de secet i
ari pentru obinerea unei producii mai ridicate sunt necesare irigaii.
Lumina
Plantele sunt iubitoare de lumin. n condiii de umbr, insuficien a luminii
se micoreaz talia plantei, numrul de ramificaii ale tulpinii, precum i numrul
de inflorescene, diametrul acestora.
Solul
18

Glbenelele nu sunt pretenioase fa de sol i pot crete pe tpoate tipurile de


sol (Pun i colab., 1986), dar se dezvolt mai bine i formeaz producii ridicate
de inflorescene pe soluri uoare, fertile, afnate cu umiditate suficient [3,18].
1.8. Produsul vegetal medicinal obinut din specia de Calendula officinalis L.
Produsul vegetal medicinal folosit sunt florile marginale (ligulate)
Clendulae flores.
Farmacopeea European ed. 6 ( 2008)
Farmacopeea Rus ed. 10 pagina 189
Farmacopeea Roman ed. 10 [34]
Prelucrarea materiei prime
Uscarea
Inflorescenele i florile ligulate proaspat recoltate nu se patreaz n grmezi,
deoarece se ncing i si pierd culoarea. Dup cel mult 3-4 h de la recoltare, florile
ligulate i antodiile se usuc la umbra, n ncaperi curate i uscate, pe rame, site,
hartie, n straturi subiri care se ntorc des.
Uscarea se poate realiza i n uscatorii cu aer cald, la temperaturi de 40-50 C, dup
ce, n prealabil, florile au fost uscate la umbr 2-3 zile. Florile ligulate se pot usca
i la soare, doarece ele nu se decoloreaz n 4-5 h, ct ine timpul de uscare.
nflorescenele isi pierd nsa culoarea portocalie, se albesc n timpul uscrii pentru
c au nevoie de 1-2 zile pn la uscarea complet. Florile uscate n condi ii bune
trebuie sa-i menina culoarea natural. Randamentul de uscare este de 8-10 : 1
pentru florile lingulate, 7-8 : 1 pentru inflorescene i 5 : 1 pentru herba.
Ambalarea, pstrarea
Imediat dup uscare, florile ligulate uscate i inflorescenele se ambaleaz n lzi,
cptuite cu hartie, pentru a se evita decolorarea lor. Pstrarea pna n momentul
livrarii
19

1.9. Date privind compoziia chimic a speciei C. officinalis L.


Studiile fitochimice au demonstrat prezena a mai multor clase
de compui chimici n flori de C. officinalis L., cei mai importani sunt
terpenozide, flavonozide, cumarine, chinone, ulei volatil,carotenoide i aminoacizi.
Proprietile terapeutice ale glbenelelor sunt determinate de complexul de
substane biologic active, pe care acestea le conin.

Terpenoide
Saponine substane naturale vegetale, favorizeaz solubilizarea i
absorbia unor produi. n florile de Calendula se gsesc saponozidele A, B, C, D,
F, coninutul total fiind de aproximativ 6,25% (Vidal i Elias, 1989).
Alcooli triterpenici pot aprea n plantele de Calendula att sub form liber ct
i esterificai (Pintea, 2001).
Diferite terpenoide (Tabelul 2) au fost raportate n extractul de eter de
petrol din flori de C. officinalis. Acestea includ sitosteroli, stigmatoteroli,
diesterilor diolilor, 3-monoesteri de taraxasterol, taraxasterol, lupeol, eritrodiol,
ursadiol [15], faradiol-3-O-palmitat, faradiol-3-O- miristat, faradiol-3-O-laurat
[16], arnidiol-3-O-palmitat, arnidiol-3-Omiristat, arnidiol-3-O-laurat,calenduladiol
-3-O-palmitat,calenduladiol-3-O-miristat [17,18], acid oleanolic, saponine:
calendulosid AH[19-22], glycosid oleanan triterpen: calendulaglicosid A,
calendulaglicosid A6_-O-n-methyl ester, calendulaglicosid A6-O-n-butyl ester,
calendulaglicosid B, calendulaglicosid B 6_-O-n-butyl ester,calendulaglycosid C,
calendulaglycosid C6_-O-n-methyl ester, calendulaglycosid C 6_-O-n-butyl ester,
calendulosid F6_-O-n-butylester, calndulosidG6_-O-n-metil ester[18], glucosid
acidului oleanolic [7].

20

Calendulaglicosid A: R1=Glc, R2=Gal, R3=H, R4=Glc;


Calendulaglicosid A6-O-methyl ester: R1=Glc, R2=Gal, R3=Me, R4=Glc;
Calendulaglicosid A6-O-n-butyl ester:

R1=Glc, R2= Gal, R3=n-Bu, R4=Glc;

Calendulaglicosid B: R1=Glc, R2=Gal, R3= H, R4= H;


Calendulaglicosid B6-O-n-butyl ester: R1=Glc, R2=Gal, R3=n-Bu, R4=H;
Calendulaglicosid C: R1=H, R2=Gal, R3=H, R4=Glc; Calendulaglicosid C6O-methyl ester: R1= H,R2=Gal, R3=Me, R4=Glc;
Calendulaglicosid C6-O-n-butyl ester:

R1=H, R2=Gal, R3=n-Bu, R4=Glc;

Calendulaglicosid F6-O-n-butyl ester: R1=H,R2=Gal, R3=Me, R4=H


Fig.1. Structuri de saponine triterpenici din Calendulae flores;

R1 = R2 = R3 = H : U r s a n
R1 = OH; R2 = R3 = H: -Amyrin
R1 = R2 = OH; R3 = H : B r e i n
R1 = R2 = R3 = OH: Ursatriol

R1 = R2 = R3 = H: -Taraxen
R1 = OH; R2 = R3 = H -Taraxasterol
R1 = R2 = OH; R3 = H: Faradiol
R1 = R2 = R3 = OH: Heliantriol B0

21

R1 = R2 = R3 = H : L u p a n
R1 = R2 = R3 = H: Taraxen
R1 = OH; R2 = R3 = H : L u p e o l
R1 = OH; R2 = R3 = H: Taraxasterol
R1 = R2 = OH; R3 = H: Calenduladiol R1 = R2 = OH; R3 = H: Arnidiol
R1 = R2 = R3 = OH: Heliantriol B2
R1 = R2 = R3 = OH: Heliantriol B1

R1 = OH; R2 = R3 = H: -Amirin
R1 = R2 = OH; R3 = H: Maniladiol
R1 = R2 = R3 = OH: Longispinogenin
R1 = R2 = R3 = H: Oleanane
Fig.2. Saponozide triterpenici din flori de C. officinalis.

Flavonozide
Coninutul flavonozidelor din flori

sunt

variate de la0.3 - 0.8%.

Flavonozidele izolate cu alcool etilic, acestea sunt: quercetin, izoramnetin,


izoquercetin, izoramnetin-3-O-glicozid, calendoflazid, rutin, calendoflavonozid
izoramnetin-3-O-2-

izoramnozil rutinozid, izoramnetin-3-Orutinoid,quercetin-

3-O-glucozida i quercetin-3-O-rutinoside [11].

22

Isorhamnetin 3-O-neohesperidoside

Isoramnetin

Fig. 3. Structuri de flavonozide.


Ulei volatil
Florile de Calendula officinalis conin maximal ulei volatil 0,97% n faza de
inflorire deplin i minimal n n faza de prenflorire (0,13%). Deasemenea n
diferite etape al ciclului fenologic au fost determinate monoterpene, sesquiterpine.
Uleiuri volatile - confer miros caracteristic i difer n materia prim proaspt i
cea uscat: florile proaspete conin ntre 0,1-0,2%, iar florile uscate 0,03% (Flora
dItalia, 1994) [12].
Tabelul 3.
Componena
-Tuien
-Pinen
Sabinen
- Pinen
Limonen
1,8 - Cineol
-Cimen
Trans--ocimen
-Terpinen
-3-Carinen
Nonanal
Terpinen-4-ol
3-Ciclohexinen-1-ol
-Felandrinen
-Terpeneol
Geraniol
Carvacrol
Bornilacetat

KI
908
928
960
969
1020
1022
1026
1033
1049
1050
1099
1174
1175
1176
1205
1257
1272
1283

Coninutul, %
0.10
2.00
0.80
0.90
1.60
15.40
0.20
1.20
0.10
0.30
1.30
1.20
0.30
0.10
0.40
19.80
0.10
0.10
23

Sabinilacetat
-Cubenin
-Copenin
-Cuborbonin
-Cubenin
-Gurunen
Aromadendrin
-Cariofilen
-Langenin
-Humulen
Germacrenin D
Aloramandrenin
-Selinen
Calaren
Murolen
-Cadinen
Cadina 1,4-dien
-Cadinen
Nerolidol
Palustron
Endoburbonen
Oplonon
-Cadinol
T-murolol
Epi-bicloSesquifelandren
Randamentul
uleiului (%)

1288
1347
1376
1385
1389
1409
1410
1420
1450
1454
1481
1486
1486
1494
1498
1522
1531
1537
1559
1569
1575
1609
1655
1659
1663

0.00
0.30
0.00
0.10
0.10
0.40
0.60
0.10
0.30
1.30
1.90
0.10
0.30
2.70
1.70
7.40
1.40
5.30
1.10
0.50
0.10
0.00
10.50
17.60
0.30
0.59

Carotenoizi
Carotenoide - asigur culoarea galben, portocalie, roie sau albastr esuturilor
n care sunt localizate. Florile de Calendula fac parte din categoria plantelor care
sintetizeaz cantiti nsemnate de carotenoide (BACO, 2002).
Carotenoizi cu luteina si zeaxantina fiind principali compui (88-92%), au fost
identificate n flori. La speciile cu flori portacalii licopenul este responsabil pentru
culoare, n timp ce n specii xantofile cu flori galbene sunt dominante. n flori
tubulare de culoare oranj coninutul de carotenoizi este egal cu 1.5g/100g [12,34].
Cumarine

24

Extractul etanolic din inflorescenile de C. officinalis L. conine cumarine:


coumarin -scopoletin (7-hidroxi-6-metox cumarin), umbelliferone (7hidroxicumarin), i esculetin( 6, 7-hidroxcumarin) [7,17].
Chinone
n C. officinalis L. au fost nregistrate urmtoarele chinone: n cloroplasteplastochinon, filochinon, -tocoferol; n mitocondrii ubichinon, filochinon, tocoferol, n frunze filochinon [7,9].
Aminoacizi
n extractul etanolic din flori de C. officinalis sunt prizeni 15 aminoacizi:
alanin, arginin, acid aspartic, aspargin, valin, histidin, acid glutamic, leucin, lisin,
prolin, serin, tirosin, treonin, metionin, fenilalanin. n frunze aproximativ se conin
5 % de aminoacizi, n tulpini-3,5%, n flori- 4,5 % [17,28].
Polizaharide
n extractul etanolic din nflorescene de C. officinalis L., s-a demonstrat
prezena polizaharidelor, PS-I, - II, -III (13) --D- galactoza, -arabinoza, -Lrhamnoza [35].
Acizi grai.
Din totalul acizilor grai ai uleiului de calendula 50-60% sunt reprezentai de
acidul calendic, un acid gras polinesaturat lipsit de toxicitate, cu proprieti
antiinflamatoare in vivo i care acioneaz ca inhibitor (in vitro) (DELLA i
colab., 1991). Unele cercetri au scos n eviden un coninut mai mic de acid
calendic n seminele verzi (aprox. 8,62%), coninut ce crete la 26,6% la seminele
imature i ajunge la 53,0% la cele mature (FRITSCHE i HORNUNG, 1999), sau
chiar la 60,0% (Mclean i Clark, 1956).
Alte substane
Hidrocarburile saturate reprezint cca. 0,015% din greutatea florilor de
glbenele. Vitamina C unul dintre nutrienii indispensabili pentru buna
funcionare a tuturor organismelor vii, se gsete n cantiti cuprinse ntre 0,133%
25

i 0,310%. Substane minerale: K, Ca, Mg, Fe, Mn, Cu, Zn, Mo, Cr, Se, Ni, I, Al,
Sr, Pb; coninutul lor n cenu este de cca. 8,01% (Isaac, 1992).
1.9.1Compoziia chimic a inflorescenelor soiurile de C. officinalis L.
Tabelul 4.
Coninutul de flavone i polifenoli n antodiile soiurilor moldoveneti de
Calendula officinalis L.[6]. (Gonceariuc, 2003, 2008)
Soiul
Natali
Diana
Populaie
martor

local,

Coninutul de flavone,
exprimat n rutin, g/%
2002 2003 2004
X
0.874 0.871 0.875 0.873
0.608 0.605 0.658 0.624
0.384 0.391 0.388 0.387

Coninutul de polifenoli
exprimat n cinarin, g/%
2002 2003 2004
X
0.979 0.989 0.995 0.988
1.043 1.010 1.062 1.038
0.458 0.471 0.461 0.463

1.9.2 Date privind aciunea farmacologic a speciei C. officinalis L.


Actiune farmacodinamica: imunostimulatoare (datorita prezentei
poliholozidelor omogene); antiinflamatorie, decongestiv, antiseptic;
antimicrobian (inhiba dezvoltarea E. colli, Stafilococul aureu, Candida albicans,
Trichomonas); cicatrizanta (saponozide, carotenoide, flavone), grabeste vindecarea
si regenerarea esuturilor, regleaz ciclurile menstruale, carminativ; regleaz
funcia biliar prin principiile amare; hipolipemianta (saponozide); coleretic
(esteri cafeilchinici); spermicid (saponozide); oestrogenic (steroli).
Aciunea antibacterian
Plantele continu s fie un ajutor terapeutic important pentru atenuarea afectiuniale
omenirii. Datorit
plantelor

cercetarelor

de Calendula

ale diferitor parti (rdcin, frunze iflori) ale

officinalis s-a

demonstrat activitatea

mpotriva potenialului unor bacterii importante, i

anume

antibacterian
de Salmonella
26

typhi, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes, Escherichia

coli

ale extractelor apoase, alcoolice, cu cloroform i eter petroleic, folosind metoda


de disc de difuzie n agar. Dei toate prile plantei au demonstrat o activitate
semnificativ anti-micrbian,dar cea mai mare activitate antibacterian a fost
observat n extractul cu eter petroleic din frunze uscate mpotriva Klebsiella
pneumoniae.

Tabelul 5.
Activitatea antibacterian a produselor vegetale proaspete de C. officinalis L.
Zona de inhibiie (mm)
Partea
Extracte
analizat a
plantei

E.coli

Salmonella
typhi

Klebsiella
pneumoniae

Enterobacter
aerogenes

Agrobacteriu
m

Rdcina

4
6
6
7
8
6
4
14
3
6
8
10

4
3
5
6
6
9
9
8
6
9

3
4
3
7
8
8
6

3
11
11
12
4
3
6
9
2
7
8
10

5
5
6
8

Frunz

Floare

Apoase
Alcoolice
Cloroform
Eter
Apoase
Alcoolice
Cloroform
Eter
Apoase
Alcoolice
Cloroform
Eter

3
6
6

Tabelul 6.
Activitatea antibacterian a produselor vegetale de C. officinalis L.
Partea
analizat a
plantei
Rdcina

Frunz

Extracte

Apoase
Alcoolice
Cloroform
Eter
Apoase

Zona de inhibiie (mm)


E.coli
Salmonella Klebsiella
typhi
pneumoniae
5
5
8
8

2
4
8
9
9

6
5
9
15

Enterobacter
aerogenes
9
4
19
18
7

Agrobacterium

5
8
27

Floare

Alcoolice
Cloroform
Eter
Apoase
Alcoolice
Cloroform
Eter

11
7
10
9
9
8
19

7
12
14
15
10
10
16

6
10
20
8
8
14
15

9
11
13
5
5
10
12

4
4
6
5

Aciunea antioxidant
n extractul de metanol de 70% a fost extras succesiv cu eter cloroform,acetat de
etil
i n-butanol lasndu-se un rezidiu. Extractul apos fost analizat pentru
activitatea sa antioxidant, de lipide lipozomal Fe2 + induse de peroxidare i
acid ascorbic.n eter, butanol i extracte de ap, care conin flavonoide,antioxidani
i-au artat activitatea sa. Extractele de propilenglicoli au fost analizate pentru
activitatea antioxidant prin peroxidarea lipidelor,ce au fost indicate din petale,
care sunt mai puternice dect florile pe baza analizei de plasm i urin
malondialdehida (MDA) i urin inventration izoprostan.
Acest rezultat arat c Calendula officinalis are un profund efect pe sistemul de
aprare antioxidant n vitro i n vivo.
Aciunea anticancerogen
Fracia solubil a extractului metanolic din flori de C. officinalis a
demonstrat n vitro activitatea citotoxic. Calendulozid F6' O -n butil ester
activ mpotriva leichemiei, cancer la colon, melanomei. Calendulozid G6 Ometil esteractiv mpotriva cancerului ovarian, cancerului renal.
Activitatea hepotoprotectoare
Extractul hidroalcoolic din florile de C. officinalis, avnd n vedere intoxicaia
cu CCl4 obolanilor albinoi, Wistar, la o doz de 10 ml / kg, a dus la o
reducere a hepatocitolisei cu 28,5%, datorit reducerii n glutamo-oxalat detransaminazei (GOT) i glutamo- piruvat-transaminazei (GPT). Cu toate acestea,
histo enzimologia artat reducerea de lactat
dehidrogenazei (LDH), succinat dehidrogenazei (SDH), citochromoxidasei
28

(Cyox) i Mg2 +-dependente adenozin triphosphatasei (ATP-aza). Extractul apos


de C. officinalis este efectiv mpotriva celulelor canceroase n ficatul uman
HepG2/C3A, SK-HEP-1,HA22T/VGH, Hep3B i PLC/PRF/5 -, cu un
efect inhibitor de 25 pn la 26% la o doz de 2000 micrograme / ml.
Activitate imunostimulatoare
Fraciunea de polizaharide din extractul florilor de C. officinalis a artat
efectul imunostimulator, bazndu-se pe testul de
granulocitare in vitro.
Polizaharide III au artat cel mai mare procent de fagocitoz (54 - 100%), la o
concentraie de 10-5 - 10-6 mg / ml, n timp ce PS I i PS-II au demonstrat 40
57mg/ml i respectiv 20 - 30% de fagocitoz.

Aciune antiinflamatoare i antiedematoas

Fracia solubil de etil acetat a extractului metanolic din flori de C. officinalis a


demonstrat inhibarea cea mai puternic (84%) a 12-o-tetradecanol-forbol-13acetat(TPA) inflamaie indus (1mg/ureche) la oareci cu ID 50 valoare de 0.05-0.20
mg/ureche fa de indometacin-medicament de referin. O dz de 1200
mg/ureche a extractului hidro alcoolic a demonstrat inhibarea de 20 % AU
provocat oaricului cu ulei din croton. Activitatea a fost atribuit triterpenoidelor,
cei mai activi compui fiind: faradiol-3-miristic acid, faradiol-3-palmitic acid i 4taraxasterol .
1.10. Produse fitoterapeutice obinute din specia C. officinalis L.
Extractul de Calendula se folosete n industria cosmetic, sub form de
past de dini,ampoane, loiuni, creme , cu efecte remarcabile asupra tenului i
cavitii bucale. Florile pot fi utilizate n calitate de repeleni, deoarece
semnate lng trandafiri reduc atacul de afide [34].
Tincturile i infuziile de glbenele pot fi utilizate cu succes pentru
anihilarea aciuniifluturilor, narilor [34,35].
Din semine se extrage uleiul calendic, utilizat industrial i n arta picturii,
iar roturile desemine bogate n proteine se folosesc n furajarea
29

animalelor. Ca plante melifere, glbenelele sunt intens vizitate de albine, atrase de


culoarea iconinutul n polen al inflorescenelor [28,30].

Produse nregistrate n Republica Moldova [31,33]


1.Unguent din Calendula off. 50,0 gr Dr. Thheiss( Rusia)
2.Crem cu Glbenele 50,0 ml- Rombalsam (Romania)
3.Tinctur de Glbenele 50,0 ml Depafarm (Moldova)
4.Flori de Calendul 50,0 gr (Moldova) [34]
CAPITOLUU II. PARTEA EXPERIMENTAL

2.1. Obinerea produsului vegetal


Perioada de recoltare la glbenele ncepe n luna iunie. Recoltatul, de regul,
se face dup ora 9 dimineaa, cnd s-au deschis primele rnduri de flori ligulate n
inflorescene. Se recolteaz pe timp nsorit pn seara. Sunt recoltate antodiile
ntregi, sau numai florile ligulate de la antodiile deschise. Nu se recolteaz pe timp
de ploae sau dac nc nu s-a ridicat roua. Nu se admite presarea inflorescenelor
recoltate n recipientele de recoltare. Pentru fabricarea alifiei de glbenele se
recoltez mecanizat plantele ntregi la nlimea tulpininii unde sunt formate
inflorescene.
Materia prim recoltat nu se pstreaz n grmezi pentru a evita ncingerea
i pierderea culorii. Uscarea se face n ncperi bine aerisite, curate, la umbr, pe
rame, hrtie n straturi subiri. Se pot usca i n usctorii la temperaturi de 40-45 0C.
Uscarea se poate efectua i n instalaii cu microunde sub flux continuu.
Randamentul de uscare este 6-8:1 n dependen de gradul de invoaltare a
antodiilor pentru florile cu receptacul (inflorescene) i 8-10:1 pentru florile
ligulate. Productivitatea culturii depinde de soi, condiii de cultivare i de numrul
de recoltri. Plantaiile recoltate de 3 ori pe sptmn n care nu au rmas
inflorescene ce au format semine sunt mai productive. De pe 1 ha se obin 1,3 t/ha
inflorescene uscate.
30

Dup uscare materia prim de culoare portocalie cu miros specific se


pstreaz n cutii, lzi cptuite cu hrtie. ncperile unde se depoziteaz lzile,
cutiile vor fi curate, bine aerisite, uscate i ntunecoase pentru a evita decolorarea
florilor.

Fig.3. Produse vegetale (Flores) de: A- C. officinalis L. populaie local, B C. officinalis L. soi Diana, C - C. officinalis L. soi Natali.

2.2. Analiza calitativ prin reacii de identificare.


2.2.1. Identificarea saponozidelor.
1. Reacia de formare a spumei: bazic se formeaz spum de cteva ori mai
mult dup volum i mai stabil. Se iau dou eprubete , n una se toarn 5 ml de
HCl 0,1 n ,iar n alta 5 ml NaOH 0,1 n. Pe urm n ambele eprubete se adaug
cte 2-3 picaturi de extract sau soluie a saponozidelor i se agit energic. La
prezena n produsul vegetal a saponozidelor triterpenice n ambele eprubete se
formeaz spum egal dup volum i stabilitate [9,13].

Tabelul 7.

Reactive

1. 0,1 . NaOH

Reacia de identificare a saponozidelor.


Rezultatele reaciilor
C. officinalis L.
C. officinalis L.
(populaie local)
(soi Diana)
+
+

C. officinalis L
(soi Natali)
+
31

0,1 . HCl

Legenda: << >> absena efectului analitic;


<< + >> prezena efectului analitic.
Cocluzie: Analiza rezultatelor denot, c saponozidele sunt prezente
probele analizate.

n toate

2.2.2. Identificarea alcaloizilor


1. Reactivul Bouchardat: Cu majoritatea alcaloizilor n soluiile slab acide aceste

reactive formeaz precipitat brun.


2. Reactivul Draghendorff: Muli alcaloizi n soluii acide formeaz precipitat de
culoare roie portocalie sau roie crmizie.
3. Soluia de tanin: n soluiile de acid alcaloizii formeaz cu taninul un precipitat
amorf albui sau glbui.
4. Soluia acidului fosfomolibdenic: Acesta e unul dintre cele mai sensibile
reactive. Cu alcaloizii el formeaz precipitat glbui, ce capt peste un timp o
nuana albastr sau verde, n urma reducerii acidului molibdenic.
5. Soluia acidului fosfowolframic: Acidul fosfowolframic cu muli alcaloizi
formeaz precipitat albui.
6. Soluia acidului picric: Acidul picric formeaz cu o serie de alcaloizi precipitat
(picrat) de culoare galben. Unii alcaloizi nu reacioneaz cu acidul picric (cafeina,
morfina, aconitina ) [36].
Tabelul 8.
Reacia de identificare al alcaloizelor.

Reactive

Reactivul
1.
Draghendorff
Reactivul
Bouchardat
3. Soluie de tanin
2.

Rezultatele
reaciilor
dup metod
Precipitat de
culoare roiecaramezie
Precipitat
brun
Precipitat

Rezultate obinute
C. officinalis,
populaie
local

C. officinalis,
soi Diana

C. officinalis,
soi Natali

32

amorf alb sau


glbui
Soluia acidului Precipitat
4.
fosfomolibdenic glbui
Soluia acidului
5.
Precipitat alb
fosfowolframic
Soluia acidului Precipitat
6.
galben
picric

Legenda: << >> absena efectului analitic;

<< + >> prezena efectului

analitic.

Concluzie: Analiza reacilor efectuate denot , c nici una din speciile de C.


studiate nu conin alcaloizi.

2.2.3. Identificarea substanelor tanante.


1.La 2-3 ml de extract se adaug 4-5 picturi de soluie de alaun de fier i amoniu.
n cazul substanelor tanante hidrolizabile apare culoare sau precipitat negru
albastru iar n cazul celor condesate precipitat negru verde.
2.La 2-3 ml de extract se adaug 3-4 picaturi de acid acetic de 10% i acetat de
plumb de 10%. na cazul substanelor tanante condensate apare o colora ie negru
verde iar n zull celor hidrolizabile precipitat de culoare neagr.
3. La 2-3 ml de extract se adaug 4-5 picturi de nitrat de sodiu i acid clorhidric
de 0,1 n. n prezena substanelor tanante hidrolizabile apare o coloraie cafenie.
Reacia de identificare al substanelor tanante.
Tabelul 9.
Rezultatele reaciilor

C. officinalis
Reactive
dup metod
L. (control)
culoare sau precipitat
negru-albastru

Soluie de alauni
1.
(t. hidrolizabile)
de fier i amoniu
precipitat negru-verde
+
(t.condensate)
precipitat
Acid acetic 10%

(t. hidrolizabile)
2. i acetat de
coloraia negru-verde
+
plumb 10%
(t.condensate)

Rezultate obinute
C. officinalis L. C.officinalis L.
(soi Diana)
(soi natali)

+
+

33

3.

NaNO3 i 0,1 n. coloraie cafenie


l
(t. hidrolizabile)

Legenda: << >> absena efectului analitic;

<< + >> prezena efectului

analitic.
Cocluzie: Analiza rezultatelor denot, c n toate speciile analizate se conin
substane tanante condensate.

2.2.4. Identificarea flavonozidelor


1. Proba cianidinic (proba Chinoda). 2 ml d extract se adaug 5-7 picturi de
HCl concentrat i 10-15 mg Zn metalic, peste 3-5 min se observ o coloraie roie,
portocalie, roz. Pentru accelerarea reaciei i identificarea culorii se recomand a
nclzi amestecul de reacie (2-3 min) la baia de ap fierbinte.
2. Reacia cu soluie de acetat de plumb bazic. La 1 ml de extract se adaug 35 picturi soluie de 2% de acetat de plumb bazic. Apariia coloraiei galbeneportocalii denot prezena flavonoidelor.

Fig. 1. . Proba cianidinic cu extract din


flori de C. officinalis: 1- populaie local,
2 - soi Diana, 3 - soi Natali.

Concluzie: Efectund proba cianidic


am constatat c n C. officinalis L.

populaie local, sunt prezente


aurone i calcone iar n restul
probelor sunt flavone i flavonoli.

34

Fig. 2. Reacia cu soluie de acetat de


plumb bazic cu extract din flori de C.
officinalis: 1 - populaie local, 2 - soi
Diana, 3 - soi Natali.

Concluzie: : Reacia cu soluia de


acett de plumb bazic denot prezena
flavonoidelor n toate probele
analizate.

Concluzie: Efectund analiza calitativ prin reacii de identificare am constatat c


n toate probele analizate sunt prezente substane tanante condensate, lipsesc
alcaloizi, sunt prezente saponozide i flavonozide, efectund proba cianidicinc
am observat coloraia roz la C.officinalis ceea ce denot prezena auronelor i
calconelor, iar in celelalte dou probe prezena flavonelor i flavonolilor.
2.2.5. Identificarea flavonozidelor prin cromatografia pe strat subire
Tehnica de analiz.
Soluie test s-a obinut din 1g de pulbere (flori de galbenele mrunite) care
se amestec cu 30ml de alcool etilic 70% l i se menine pe baie de ap timp de 15
min apoi se filtreaz.
Soluia de referin:

soluie de 0,1% de rutozid, hiperozid,

izoquercitrozid, quercitrozid, quercitol, acid clorogenic, acid cafeic n metanol.


Faza staionar: plci de silicagel GF 254 (Merk).
Faza mobil : acetat de etil : ap : ac. formic : ac. acetic (72:14:7:7 V/V/V)
Aplicare:

10 ml din soluiile test i 5L din soluiile de referin sub form de

benzi de 10 mm. Migrare: 10 cm. Uscarea plcilor: 100-105 C timp de 10 min.


Detecie: - se pulverizeaz placa cu o soluie de 10g/l de reactiv NEU (esterul
acidului difenilboric cu aminoetanol) n metanol i apoi cu o soluie de 50g/l de
polietilenglicol 4000 n metanol. Dup 30min se examineaz placa n lumin UV
la 365nm

35

Fig.1. CSS extractelor hidro alcoolice la lumina UV 366 nm din


flori de C. officinalis: 1 populaie
local, 2 soi Diana, 3 soi Natali.,
4- rutozida. Martori: 5
hiperozida, 6 -izoquercitrozida, 7
quercitozida, 8-quercitolul, 9 acid
cafeic, 10- acid clorogenic.

Prin cromatografie pe strat subire (CSS) s-a demonstrat prezena flavonoidelor n


nfloriscenele analizate. n urma examinrii cromatogramei se observ prezena
rutozidei (Rf=0.52), hiperozidei (Rf =0,74), quercetolului ( Rf =0,98). Se observ
c culoarea spoturilor la lumina zilei este oranj. La lumina UV spoturile,
corespunztoare flavonelor, fluoresceaz galben-portocaliu. S-a demonstrat
prezena acizii fenolici: acidului cafeic (Rf = 0,97) i acidului clorogenic (Rf =
0,61). Spoturile corespunztoare acidului clorogenic i acidului cafeic n lumina
UV sunt de culoare albastr.
Cocluzie: Prin metoda spectrofotometric am identificat prezena unor
flavonozide i fenoli n UV la o lungime de und de 366 nm.

2.3. Dozarea totalului de flavonoide


Dozarea totalului de flavonoide n inflorescene de C. oficinalis populaii
local (martor), C. officinalis soi ,,Diana, C. officinalis soi ,,Natali s-a efectuat
prin tehnica spectrofotomertric elaborat de Kurkin et. al. (2009). Analiza
contitativ

flavonoidei

izoramnetinei,

s-a

efectuat

prin

tehnica

cromatospectrofotomertric elaborat de V. N. Abdullabecova et al.(2001).


Metoda de dozare a totalului de flavonozide
36

Dozarea totalului de flavonozide n inflorescene de Calendula oficinalis


populaii local (martor), Calendula officinalis soi ,,Diana, Calendula officinalis
soi ,,Natali s-a efectuat prin tehnica spectrofotomertric.
1g produs vegetal (prob exact) mrunit, trecut prin sita cu orificiile de 1
mm, se plaseaz n balon cu dop rodat de 100 ml, se adaug 50 ml de alcool etilic
70%. Balonul se cntrete, apoi se nclzete la fierbere, n baia de ap, la reflux,
timp de 90 min. Dup aceasta balonul se cntrete i se adaug alcool etilic pn la
masa iniial. Extactul se filtreaz i se rcorete timp de 30 min (soluie
extractiv).
Prepararea soluiei de analizat: 1 ml de soluie extactiv se transfer ntrun
balon cotat de 50 ml, se adaug 2 ml soluie alcoolic de AlCl 3 3%

i se

completeaz cu alcool etilic 95% (soluia de analizat A). Soluia de referin se


pregtete n felul urmtor: 1 ml de soluie extactiv se transfer ntrun balon cotat
de 50 ml, se adaug 2-3 picturi de soluie de acid acetic i se completeaz cu
alcool etilic 95% pn la cot ( soluia de referin A).
n paralel se determin absorbanta unei soluii etalon de rutozid. 0,025 g
(prob exact) de rutozid se transfer ntr - un balon cotat de 50 ml i se dizolv
n 30 ml de alcool etilic 70 % la fierbere n baia de ap. Apoi se rcorete i se
aduce pn la cot cu etanol de 70% (soluia A de rutozid). 1 ml soluie A de
rutozid se transfer ntr-un balon cotat de 25 ml, se adaug 1ml de soluie
alcoolica de AlCl3 3% i se aduce pn la cot cu alcool etilic de 95% (soluia de
analizat a rutozidei B). Soluia de referin a rutozidei: 1ml soluia A de rutozid se
transfer ntr - un balon cotat de 25 ml, se adaug 1 pictur de soluie de acid
acetic i se aduce pn la cot cu alcool etilic de 95% ( soluia de referin a
rutozidei B) [19,23].
Absorbana soluiilor analizate s msoar la lungimea de und 412 nm, peste
40 min dup prepararea soluiilor [10]. S-a efectuat cu spectrofotometru Agilent
8453.
X

D m0 30 1 25 100 100
D0 m 1 25 (100 W )

37

Unde: D densitatea optic a soluiei de analizat;


m masa produsului vegetal;
W pierderea n mas la uscare.

Fig.2. Spectre de absorbie n UV a extractelor hidro alcoolice de:


1- rutin, 2- C. officinalis, populaie local, 3- C. officinalis, soi Diana,
4 - C. officinalis, soi Natali.

Fig.3. Totalul de flavonoide (%), n recalcul la rutozid.

38

Concluzie: Din literatur cunoatem c aciunea antioxidant se datoreaz


flavonozidei- izoramnetinei care am dozat-o prin tehnica spctrofotometric i am
obinut urmatoarele rezultate: coninutul maximal de flavonoide n recalcul la
rutozid se conine n C. officinalis soi Natali- 2.48 % i coninutul minim de
flavonide n C. officinalis L.-1.9 %.

2.4 Dozarea a diheperozidei izoramnetinei


Metoda de dozare a diheperozidei izoramnetinei
5g produs vegetal (prob exact) mrunit, se plaseaz n balon cu dop rodat
de 100 ml, se adaug 40 ml de alcool etilic 70%. Balonul se nclzete la fierbere,
n baia de ap, la reflux, timp de 40 min. Dup aceasta extractul se rcorete la
temperatura camerei, se filtreaz ntrun balon cotat de 100 ml. Apoi n balon cu
produs se mai adaug 40ml de alcool etilic 70% i se continue nclzirea n baia de
ap, la reflux, timp de 30 min. Dup rcire extractul alcoolic se filtreaz n balon
cotat, iar produsul se prelucreaz cu 10 ml alcool etilic 70%, dupa care se filtreaza
in aceealai balon. Volumul balonului pin la cot se aduce cu alcool etilic 70%,
apoi se agit. Pe linia de start a plcii de ,,Silufol 15 x 15 cm cu micropipeta de
0,1 ml se aplic 0,05 ml de extract hidro-alcoolic i 0,02 ml solutie standart de
rutin n form de benzi de 2 cm . Cromatografia se petrece in sistemul butanol
acid acetic-apa (4:1:5). Dupa ce frontul solventului trece 10 cm, placa se scoate
din camer i se usuc la aer 30 de minute. Placa se analizeaz la lumina UV cu
lungimea de unda 254 nm. Zonele marcate cu rutin i zona probei martor
cantitativ se trec n balon, se elueaz cu 10 ml alcool etilic 40%, agitnd 30 de
minute Soluia se trece prin filtru de hrtie. Densitatea optic se masoar la
spectrofotometru cu lungimea de und 355 i 360 nm (rutina) n cuv cu grosimea
stratului de 10 mm.Soluia de referin- se ia eluatul plcii cromatografice de
aceeai marime ca i spotul de rutin.Pregatirea solutiei rutin-standart.0,1 g
(prob exact) de rutin-standart, uscat pn la greutate constant la 130 0C, se

39

dizolv n alcool etilic de 95% n balon cotat de 25 ml i se adduce pn la cot cu


alcool etilicde de 9 5%. Spectrofotometru Metertech UV/VIS SP 8001.
X

D1 A0 V 1 V 2 100 100
D0 A V 0 V 3 (100 W )

Unde: A0- masa rutozidei-standard, g; A- masa produsului vegetal, g; V2 volumul


soluiei de analizat, aplicat pe cromatogram, ml;

V3 volumul extractolui

etanolic, ml; V1- volumul soluiei de rutozid-standart, aplicat pe cromatogram,


ml; V0 volumul soluiei de rutozid-standard, ml; D0, D1 densitatea optic
a soluilor analizate [27,28].

Fig.4. Coninutul izoramnetinei n probele analizate, n recalcul la


rutozid, %.
Concluzie: Am dozat izoramnetina prin tehnica spectrofotometric cu
rezultatele: coninutul maximal al izoramnetinei n probele analizate, n recalcul la
rutozid l are C. officinalis soi Natali- 1.75 i coninutul minim C.officinalis soi
Diana-0.8%.
2.5. Construirea curbei de calibrare pe baza absorbantelor corespunztoare
unor soluii de rutozid de concentraii diferite

40

Se pregateste o serie de solutii standart de rutina. Aproximativ 0,1 g (prob


exact) de rutozid standart se apun ntr-o colb cu capacitatea de 25 ml i se
dizolva n 15 ml de alcool etilic de 95% la baia de apa , se racete i se adduce
pin la cot. Pe linia de start a plcii de ,,Silufol 15 x 15 cm se pune 0,01; 0,02;
0,03; 0,04; 0,05; 0,06; 0,07 ml soluie pregatit. Cromatografia se petrece in
sistemul butanol-acid acetic-apa (4:1:5), se usuc i se elueaz n 10ml de alcool
etilic 40 % n timp de 30 minute ,periodic agitnd , se masoar densitatea optic n
cuve cu grosimea stratului de 10 mmla lungimea de unda de 355 nm [9,34] .

Fig.5.Graficul de etalonare a soluiei standart de rutozid.


Concluzii:
1. S-a demonstrat prezena n toate probele analizate:

flavonoidelor (rutozidei (Rf = 0.52), hiperozidei (Rf = 0.74),quercitolului


(Rf = 0.98),

substanelor tanante;

saponozidelor,

acizilor clorogenic (Rf = 0.61) i cafeic (Rf = 0.97).

2. Studiu comparativ a totalului flavonoidelor a demonstrat c:


41

totalul flavonoidelor n produsele analizate este egal cu: 2.45% C.


officinalis L. soi Diana, 2.48% C. officinalis L. soi Natali, 1.9% specia C.
officinalis L.

3.Coninutul izoramnetinei prin tehnica cromato-spectrofotometric este egal cu:


0.8% la C. officinalis L. soi Diana, 1.78% C. officinalis L. soi Natali.
4. A fost dovedit opurtunitatea studiului chimic a soiurilor noi de C. officinalis L.
obinute n Republica Moldova, ca n viitor s fie folosite nu numai n scop
ornamental dar i medicinal.

Bibliografia.
1. Baciu Adriana-Daniela, Mihalte Lucica, Sestras Adriana F., Sestras Radu E.
Variability of Decorative Traits, Response to the Aphis fabae Attack and
RAPD Diversity in Different Genotypes of Calendula. Notulae Botanicae
Horti Agrobotanici Cluj-Napoca, 38 (3) 2010, p. 265-270.
2. Baciu Adriana-Daniela Cercetri privind mbogirea fondului genetic la
Calendula, Rezumat al tezei de doctoran, Cluj-Napoca 2011, p. 4.
3. Brnzil Ion, Vornicu Zina, Jelezneac Tamara, Rusu Ludmila

, Baranova

Natalia Calitatea materiei prime de glbinele (Calendula offiCinalis L.) n


Funcie de invoaltarea antodiilor. Mediul ambian,3 (27), 2006, p. 6-8.
4. Brnzil Ion Involitatea antodiilor la Calendula officinalis L. Mediul ambiant
Nr. 1 (18) 2005, p. 15-18.
5. Gonceariuc Maria. Contribuii n ameliorarea speciei Calendula officinalis L.
Buletinul Academiei de tiine a Moldovei, t. biolog. chim. agricole, 2003,
nr.2(291), p.101-103, Chiinu.
6. Gonceariuc Maria. Calendula officinalis L./ Plante medicinale i aromatice
cultivate. CE UASM, Chiinu, 2008, p. 60-75.
7. Moscovici Miu, PopaAlina et. al. Curs: Utilizarea plantelor msdicinale n
terapie, Romnia-Bulgaria, 2011, p. 33-35.
42

8. Mustea

G.,

BRNZIL

I.

Plante

medicinale

pentru

sntatea

dumneavoastr. Chiinu: TC. 2002, p. 30.


9. Abajova RL, Aslanov SM, Mamedova ME. Amino acids of calendula
officinalis. Chemistry of Natural Compounds, 1994; 30(15): 641-641.
10.Azzaz N. A., Hassan E. A., Elemarey F.A. Physiological, anatomical, and
biochemical studies on pot marigold (Calendula officinalis L.) plants. African
Crop Science Conference Proceedings Vol. 8. pp.1727-1738.
11.Bissa S., Bohra A. Antibacterial potential of pot marigold. Journal of
Microbiology and Antimicrobials Vol. 3(3), pp. 51-54, March 2011.
12.Bisset N.G. Herbal drugs and phitopharmaceuticals. Stuttgart: MedPharm
CRC Press, p.566.
13. Chakraborthy Guno Sindhu Phytochemical screening of Calendula officinalis
Linn leaf extract by TLC. IJRAP 2010, 1 (1) p. 131-134.
14.Gonceariuc Maria. New gene sources of Calendula officinalis L. Acta
Phytoterapica Romanica, VI, nr.1-2, p.8-10.
15.Gonceariuc Maria, Balmu Zinaida.

Studies of Genetics and Breeding of

Aromatic and Medicinal Plants carried out in the Republic of Moldova. / Plant
genetic stoks the basis of agriculture of today. IPGR, Plovdiv, 2008.
16.Goodwin TW. Studies in carotenogenesis: the carotenoids of the flower petals
of calendula officinalis. Biochem J, 1954; 58: 90-94.
17. Huanu-Bashtawi Luminia, Toma C. A Histo-Anatomical study of the
modifications induced by thiophanate methyl on the Calendula officinalis L.
Strain Analele tiinifice ale Universitii Al. I. Cuza Iai Tomul LIV, fasc. 2,
s.II a. Biologie vegetal, 2008, P. 63-72.
18. Pun E., Mihalea A., Dumitrescu A, Verzea M., Coocariu O. Tratat de plante
medicinale i aromatice. Edit. Academiei Romne, Bucureti, 1986, V.I, p.137144.
19. Treben Maria. Sntatea din farmacia naturii. Hunga-print, Budapesta, 1992,
p. 68

43

20. Lin L. T., Liu L.T., Chiang L.C., Lin C.C. In vitro antihepatoma activity of
fifteen natural medicines from Canada. Phytother Res, 2002; 16: p. 440-444.
21. Muley BP, Khadabadi SS and Banarase NB Phytochemical Constituents and
Pharmacological Activities of Calendula officinalis Linn (Asteraceae). Tropical
Journal of Pharmaceutical Research, October 2009; 8 (5): p. 455-465.
22. Neelesh Kumar, Joni Sharma, Sakshy Sharma Pharmacognostical and
Phytochemical Investigation of Calendula Officinalis. Journal of Advanced
Scientific Research, 2010, 1(1); p. 61-66.
23. Okoh O.O., Sadimenko A.A., Afolayan A.J. The Effects of age on the Yield and
Composition of the essential oils of calendula officinalis. Journal of applied
sciences 7 (23): 2007, p. 3806-3810.
24. Kemper Kathi J. Calindula. The longwood herbal task force and center for
holistic pediatric education and research. 1999 (www.mcp.edu/herbal/default.htm).
25. Preethi K.C., Girija Kuttan, Ramadasan Kuttan Antioxidant Potential of an
Extract of Calendula officinalis Flowers

in Vitro and in Vivo. Journal

Pharmaceutical Biology 2006, Vol. 44, No. 9, pp. 691697.


26. Rasu M. A., Tamas M., Puica C., Roman. I., Sabadas M. The hepatoprotective
action of ten herbal extracts I n CCl4 intoxicated liver. Phytother Res, 2005; 19:
744-749.
27. alamon Ivan, Labun Pavol Cultivation differences between pot maringold
(Calendula officinalis l.) varieties... 4th Conference on Medicinal and Aromatic
Plants of South-East European Countries - Iai, Romnia, 2006, p.49.
28. Toma Liana Doina, Jitreanu Carmen Doina, Nechita Bogdan, Tinc Gabriela
Effect of biofertilization on the inflorescences yield and the content of chlorophyll
and carotenoid pigments in marigold (Calendula officinalis L.). 4th Conference on
Medicinal and Aromatic Plants of South-East European Countries - Iai, Romnia,
2006, p. 51.

44

29. . ., . .
. - .
35, 10. 2001.
30. c P. P., . . . - :. 2000, c.102.
31. ., . ., .., ..

. . 2009, 4 (9), .33-36.
32. . . . , .
,.40, 106, 118.
33.Verzea M., Stoianov R. Tehnologia glbenelelor (Calendula officinalis L.) n
Tehnologii de cultur la plantele medicinale i aromatice. 2001, p.120-126.
34.Ghigul Farmacoterapeutic (2004).
35.Analiza chimic a plantelor medicinale. 1993.

45

46