Albastru de bromfenol

Albastru de bromfenol este folosit ca indicator de pH, marker de culoare si colorant.

Poate fi preparat prin adaugarea treptata a bromului in exces intr-o solutie fierbinte de
fenolsulfonftaleina in acid acetic glacial.
Ca indicator acido-bazic, acesta este activ ntre pH de 3.0 i 4.6. acesta se schimb de la
galben la pH de 3.0, la albastru, la pH de 4.6.; aceast reacie este reversibil. Albastrul de
bromfenol este corelat structural cu tofenolftalein (indicator popular).
Albastru de bromfenol este de asemenea folosit ca marker de culoare in monitorizarea
procesului de electroforez n gel de agaroz i electroforez n gel de poliacrilamid. ntruct
albastrul de bromfenol poart o uoar sarcin negativ la pH moderat, acesta va migra n aceeai
direcie cum o fac ADN-ul sau o protein ntr-un gel; rata ntre care acesta migreaz variaz n
funcie de densitatea gelului i de compoziia soluiei tampon, dar ntr-o soluie de 1% gel de
agaroz n 1X TAE soluie tampon sau TBE, albastrul de bromfenol migreaz n aceeai rat ca
i un fragment de ADN care este compus din aproximativ 300 de perechi de baze, n 2% agaroz
ca 150 bp. Xilen cianol i orange G pot fi de asemenea folosii n acest scop.
Albastru de bromfenol este folosit pe post de colorant. La pH neutru, colorantul absoarbe
culoarea roie mult mai puternic i transmite lumina albastr. La pH sczut, colorantul absoarbe
lumina UV i lumina albastr cea mai puternic apare galben n soluie. n soluie la pH de 3.6
obinut prin dizolvare n ap fr alt schimbare de pH, albastru de bromfenol are o culoare
caracteristic de rou-verde, caz n care schimbrile de culoare depind de concentraia i/sau de
lungimea drumului optic prin care soluia este observat. Acest fenomen este numit culoare
dicromatic. Albastru de bromfenol este substana cu cea mai mare valoare a indexului
dicromaticitii a lui Kreft. Acest lucru nseamn ca are cea mai variat schimbare de culoare,
cnd grosimea sau concentraia probei observate crete sau scade.
Mod de lucru
Se prepar dou soluii de albatru de bromfenol i HCl, respectiv albastru de bromfenol i NaOH
i se masoar spectofotometric, la lungimi de und ncepnd de la 400 de nm, pn la 700 nm, cu
25 nm diferen ntre msurtori.
Se folosete apa pe post de blanc i se realizeaz un grafic n care este nregistrat aciunea
albastrului de bromfenol n funcie de mediu (acid,bazic) i lungimea de und.

Albastru de bromfenol n HCl

400 nm
0.285
425 nm
0.408
450 nm
0.397
475 nm
0.260
500 nm
0.112
525 nm
0.014
550 nm
0.010
575 nm
0.009
600 nm
0.005
625 nm
0.013
650 nm
0.012
675 nm
0.010
700 nm
0.008

Albastru de bromfenol n NaOH

700 nm
0.006
675 nm
0.011
650 nm
0.046
625 nm
0.397
600 nm
2.570
575 nm
2.833
550 nm
1.830
525 nm
1.064
500 nm
0.375
475 nm
0.297
450 nm
0.162
425 nm
0.136
400 nm
0.351

Bibliografie
www.wikipedia.com